CN115175738A - 经历分子内重排的结合物 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及结合物及其可药用盐、试剂、中间体、合成所述结合物的方法、包含所述结合物的药物组合物以及所述结合物的用途。

Description

经历分子内重排的结合物
本发明涉及结合物及其可药用盐、试剂、中间体、合成所述结合物的方法、包含所述结合物的药物组合物以及所述结合物的用途。
为了改善药物的物理化学或药物动力学性质如体内循环半衰期，这类药物可以与载体如聚合物结合。通常，药物递送中的聚合物用于药物和聚合物的非共价复合、药物在聚合物中包埋或通过药物与聚合物部分的共价结合。
然而，非共价方法要求高效的药物包封，以阻止由于药物-聚合物复合物在施用后崩解而导致药物失控的突发型释放。限制未结合的水溶性药物分子的扩散需要强的范德华(van der Waals)接触，经常是通过疏水部分和用于静电结合的带电荷部分所介导。很多构象敏感的药物，例如蛋白质或肽，在复合过程中和/或在非共价结合药物的后续储存过程中出现功能障碍。
或者，药物可以通过由此药物和连接基之间的链接稳定的连接基部分或者通过由此药物和连接基部分之间的链接可逆的连接基部分共价结合到聚合物部分。如果药物通过稳定的链接与连接基部分结合，则这类结合物需要显示出足够的残留活性以具有药学作用，因此结合物始终是活性形式的。
包含经由可逆链接与连接基部分共价结合的药物的结合物的合成通常涉及包含所述连接基部分的试剂与药物部分上的官能团如胺官能团的反应。例如，WO2009/095479A2公开了包含通过酰胺键与药物结合的连接基部分的结合物，其中所述酰胺键例如通过官能团或包含在连接基部分中的其它基团(例如胺和酰胺基团)的相邻基团参与而变得可逆。更具体而言，连接基部分中的亲核胺增强了酰胺或硫代酰胺中所含氮原子的亲核性，进而攻击将药物与连接基部分连接的酰胺基团的羰基部分，导致酰胺键裂解和未修饰形式的药物释放。这类结合物的合成可以是挑战性的，因为例如在包含连接基部分的试剂与药物结合期间，必须使相邻基团参与效应失活以避免包含连接基部分的试剂过早环化和副产物的形成。
一种避免所述过早环化的方法是使相邻基团之一、例如酰胺基团的亲核性失活，例如通过利用酰胺保护基。由于在药物与包含连接基部分的试剂结合后需要除去这类酰胺保护基，因此这类工艺合成可以要求使用应当易于除去(例如在温和条件下)的保护基部分。这类保护基的选择对于熟练从业人员来说是有限的，特别是当药物部分是蛋白质部分时，因为例如所述保护基部分的脱保护必须优选在水性条件下和仅有限使用有机溶剂和试剂来进行，以避免蛋白质失活或破坏。
因此，需要确定一种方案来解决包含药物部分、特别是蛋白质药物部分的结合物的化学合成挑战，所述药物部分经由连接基部分与载体连接，其中药物和连接基之间的链接是可逆的。
因此，本发明的目的是至少部分地克服上述缺点。
该目的通过包含经由至少一个-L1-L2-部分与至少一个Z部分结合的至少一个-D部分的结合物或其可药用盐得以实现，其中-L1-部分与-D部分的伯胺或仲胺的氮结合，和其中-D和-L1-之间的键是可逆的，和其中-L2-部分与Z结合，其中
每个-D独立地是药物D-H的含伯胺或仲胺的部分；
每个-L2-独立地是单键或间隔基部分；
每个Z独立地是聚合物部分或C8-24烷基；
每个-L1-独立地是式(I)的连接基部分:
Figure GDA0003827209340000021
其中
虚线表示与-D的伯胺或仲胺的氮连接；
v选自0或1；
-X1-选自-C(R8)(R8a)-、-N(R9)-和-O-；
＝X2选自＝O和＝N(R10)；
-X3-选自-O-、-S-和-Se-；
每个p独立地选自0或1，条件是至多一个p为0；
-R6、-R6a、-R10独立地选自-H、-C(R11)(R11a)(R11b)和-T；
-R9选自-C(R11)(R11a)(R11b)和-T；
-R1、-R1a、-R2、-R2a、-R3、-R3a、-R4、-R4a、-R5、-R5a、-R7、-R8-R8a、-R11、-R11a和-R11b独立地选自-H、卤素、-CN、-C(O)OR12、-OR12、-C(O)R12、-C(O)N(R12)(R12a)、-S(O)2N(R12)(R12a)、-S(O)N(R12)(R12a)、-S(O)2R12、-S(O)R12、-N(R12)S(O)2N(R12a)(R12b)、-SR12、-NO2、-N(R12)C(O)OR12a、-N(R12)C(O)N(R12a)(R12b)、-OC(O)N(R12)(R12a)、-T、C1-6烷基、C2-6烯基和C2-6炔基；其中C1-6烷基、C2-6烯基和C2-6炔基任选被一个或多个相同或不同的-R13取代；和其中C1-6烷基、C2-6烯基和C2-6炔基任选被一个或多个选自如下的基团所间隔：-T-、-C(O)O-、-O-、-C(O)-、-C(O)N(R14)-、-S(O)2N(R14)-、-S(O)N(R14)-、-S(O)2-、-S(O)-、-N(R14)S(O)2N(R14a)-、-S-、-N(R14)-、-OC(OR14)(R14a)-、-N(R14)C(O)N(R14a)-和-OC(O)N(R14)-；
-R12、-R12a、-R12b独立地选自-H、-T、C1-6烷基、C2-6烯基和C2-6炔基；其中-T、C1-6烷基、C2-6烯基和C2-6炔基任选被一个或多个相同或不同的-R13取代，和其中C1-6烷基、C2-6烯基和C2-6炔基任选被一个或多个选自如下的基团所间隔：-T-、-C(O)O-、-O-、-C(O)-、-C(O)N(R14)-、-S(O)2N(R14)-、-S(O)N(R14)-、-S(O)2-、-S(O)-、-N(R14)S(O)2N(R14a)-、-S-、-N(R14)-、-OC(OR14)(R14a)-、-N(R14)C(O)N(R14a)-和-OC(O)N(R14)-；
其中每个T独立地选自苯基、萘基、茚基、茚满基、四氢萘基、C3-10环烷基、3-至10-元杂环基和8-至11-元杂双环基；其中每个T独立地任选被一个或多个相同或不同的-R13取代；
-R13选自卤素、-CN、氧代基、-C(O)OR15、-OR15、-C(O)R15、-C(O)N(R15)(R15a)、-S(O)2N(R15)(R15a)、-S(O)N(R15)(R15a)、-S(O)2R15、-S(O)R15、-N(R15)S(O)2N(R15a)(R15b)、-SR15、-N(R15)(R15a)、-NO2、-OC(O)R15、-N(R15)C(O)R15a、-N(R15)S(O)2R15a、-N(R15)S(O)R15a、-N(R15)C(O)OR15a、-N(R15)C(O)N(R15a)(R15b)、-OC(O)N(R15)(R15a)和C1-6烷基；其中C1-6烷基任选被一个或多个相同或不同的卤素取代；
其中-R14、-R14a、-R15、-R15a和-R15b独立地选自-H和C1-6烷基；其中C1-6烷基任选被一个或多个相同或不同的卤素取代；
任选地，基团对-R1/-R1a、-R2/-R2a、-R3/-R3a、-R4/-R4a、-R5/-R5a或-R8/-R8a中的一对或多对与它们所连接的原子一起形成C3-10环烷基、3-至10-元杂环基或8-至11-元杂双环基；
任选地，基团对-R1/-R2、-R1/-R8、-R1/-R9、-R2/-R9或-R2/-R10中的一对或多对与它们所连接的原子一起形成环-A-；
其中-A-选自苯基、萘基、茚基、茚满基、四氢萘基、C3-10环烷基、3-至10-元杂环基和8-至11-元杂双环基；
任选地，基团对-R3/-R6、-R4/-R6、-R5/-R6、-R6/-R6a或-R6/-R7中的一对或多对与它们所连接的原子一起形成环-A′-；
其中-A′-选自3-至10-元杂环基和8-至11-元杂双环基；和每个-L1-被至少一个-L2-取代和任选进一步被取代，条件是，式(I)中用星号标记的氢不被取代基代替。
本发明的另一个方面是包含-L*-部分的试剂，其中-L*-与-Q结合，其中-Q是-OH或-LG，其中-LG是离去基部分；
-L*-是式(II)的连接基部分：
Figure GDA0003827209340000041
其中
虚线表示与-Q连接；
v选自0或1；
-X1-选自-C(R8)(R8a)-、-N(R9)-和-O-；
＝X2选自＝O和＝N(R10)；
-X3-选自-O-、-S-和-Se-；
每个p独立地选自0或1，条件是至多一个p为0；
-R6是-PG，且-R6a选自-H、-C(R11)(R11a)(R11b)、-T和-PG；或者-R6和-R6a独
立地选自-C(R11)(R11a)(R11b)和-T；
-RA和-RB独立地选自-H和-PG，条件是-RA或-RB中不多于一个可以是-H；
-PG是胺保护基部分；
-R9选自-C(R11)(R11a)(R11b)和-T；
-R10选自-H、-C(R11)(R11a)(R11b)和-T；
-R1、-R1a、-R2、-R2a、-R3、-R3a、-R4、-R4a、-R5、-R5a、-R7、-R8、-R8a、-R11、-R11a和-R11b独立地选自-H、卤素、-CN、-C(O)OR12、-OR12、-C(O)R12、-C(O)N(R12)(R12a)、-S(O)2N(R12)(R12a)、-S(O)N(R12)(R12a)、-S(O)2R12、-S(O)R12、-N(R12)S(O)2N(R12a)(R12b)、-SR12、-NO2、-N(R12)C(O)OR12a、-N(R12)C(O)N(R12a)(R12b)、-OC(O)N(R12)(R12a)、-T、C1-6烷基、C2-6烯基和C2-6炔基；其中C1-6烷基、C2-6烯基和C2-6炔基任选被一个或多个相同或不同的-R13取代；和其中C1-6烷基、C2-6烯基和C2-6炔基任选被一个或多个选自如下的基团所间隔：-T-、-C(O)O-、-O-、-C(O)-、-C(O)N(R14)-、-S(O)2N(R14)-、-S(O)N(R14)-、-S(O)2-、-S(O)-、-N(R14)S(O)2N(R14a)-、-S-、-N(R14)-、-OC(OR14)(R14a)-、-N(R14)C(O)N(R14a)-和-OC(O)N(R14)-；
-R12、-R12a、-R12b独立地选自-H、-T、C1-6烷基、C2-6烯基和C2-6炔基；其中-T、C1-6烷基、C2-6烯基和C2-6炔基任选被一个或多个相同或不同的-R13取代，和其中C1-6烷基、C2-6烯基和C2-6炔基任选被一个或多个选自如下的基团所间隔：-T-、-C(O)O-、-O-、-C(O)-、-C(O)N(R14)-、-S(O)2N(R14)-、-S(O)N(R14)-、-S(O)2-、-S(O)-、-N(R14)S(O)2N(R14a)-、-S-、-N(R14)-、-OC(OR14)(R14a)-、-N(R14)C(O)N(R14a)-和-OC(O)N(R14)-；
其中每个T独立地选自苯基、萘基、茚基、茚满基、四氢萘基、C3-10环烷基、3-至10-元杂环基和8-至11-元杂双环基；其中每个T独立地任选被一个或多个相同或不同的-R13取代；
-R13选自卤素、-CN、氧代基、-C(O)OR15、-OR15、-C(O)R15、-C(O)N(R15)(R15a)、-S(O)2N(R15)(R15a)、-S(O)N(R15)(R15a)、-S(O)2R15、-S(O)R15、-N(R15)S(O)2N(R15a)(R15b)、-SR15、-N(R15)(R15a)、-NO2、-OC(O)R15、-N(R15)C(O)R15a、-N(R15)S(O)2R15a、-N(R15)S(O)R15a、-N(R15)C(O)OR15a、-N(R15)C(O)N(R15a)(R15b)、-OC(O)N(R15)(R15a)和C1-6烷基；其中C1-6烷基任选被一个或多个相同或不同的卤素取代；
其中-R14、-R14a、-R15、-R15a和-R15b独立地选自-H和C1-6烷基；其中C1-6烷基任选被一个或多个相同或不同的卤素取代；
任选地，基团对-R6/-R6a、-RA/-RB或-R6/-RA中的一对或多对形成-PG部分；任选地，基团对-R1/-R1a、-R2/-R2a、-R3/-R3a、-R4/-R4a、-R5/-R5a或-R8/-R8a中的一对或多对与它们所连接的原子一起形成C3-10环烷基、3-至10-元杂环基或8-至11-元杂双环基；
任选地，基团对-R1/-R2、-R1/-R8、-R1/-R9、-R2/-R9或-R2/-R10中的一对或多对与它们所连接的原子一起形成环-A-；
其中-A-选自苯基、萘基、茚基、茚满基、四氢萘基、C3-10环烷基、3-至10-元杂环基和8-至11-元杂双环基；
任选地，基团对-R3/-R6、-R4/-R6、-R5/-R6、-R6/-R6a或-R6/-R7中的一对或多对与它们所连接的原子一起形成环-A′-；
其中-A′-选自3-至10-元杂环基和8-至11-元杂双环基；
其中-L*-任选被至少一个-L2-Z部分或至少一个-L2-Y部分取代和任选是进一步被取代的；
其中-L2-是单键或间隔基部分；
Z独立地是聚合物部分或C8-24烷基；
和其中-Y是可以任选以其被保护的形式存在的官能团。
在一些实施方案中，式(II)的-L*-被至少一个-L2-Y部分或至少一个-L2-Z部分取代和任选是进一步被取代的。在一些实施方案中，式(II)的-L*-被至少一个-L2-Y部分或至少一个-L2-Z部分取代，条件是，-X3-不是-S-，和任选地式(II)的-L*-是进一步被取代的。
在一些实施方案中，式(II)的-L*-被至少一个-L2-Y部分取代。在一些实施方案中，式(II)的-L*-被一个-L2-Y部分取代。在一些实施方案中，式(II)的-L*-被两个-L2-Y部分取代。在一些实施方案中，式(II)的-L*-被三个-L2-Y部分取代。
在一些实施方案中，式(II)的-L*-被至少一个-L2-Z部分取代。在一些实施方案中，式(II)的-L*-被一个-L2-Z部分取代。在一些实施方案中，式(II)的-L*-被两个-L2-Z部分取代。在一些实施方案中，式(II)的-L*-被三个-L2-Z部分取代。
可以理解，与结构
Figure GDA0003827209340000061
的部分有关的短语“任选地，基团对-R6/-R6a形成-PG部分”指：
-R6和-R6a与它们所连接的氮原子一起形成亚胺官能团，例如
Figure GDA0003827209340000062
其中-Rx和-Ry独立地选自-H、C1-4烷基、苯基和甲氧基苯基；
或者-R6和-R6a与它们所连接的氮一起形成叠氮官能团，例如
Figure GDA0003827209340000063
还可以理解，与结构
Figure GDA0003827209340000071
的部分有关的短语“任选地，基团对-RA/-RB可形成-PG部分”指：
-RA和-RB与它们所连接的氮原子一起形成亚胺官能团，例如
Figure GDA0003827209340000072
其中-Rx和-Ry独立地选自-H、C1-4烷基、苯基和甲氧基苯基；
或者-RA和-RB与它们所连接的氮一起叠氮官能团，例如
Figure GDA0003827209340000073
还可以理解，与结构
Figure GDA0003827209340000074
的部分有关的短语“任选地，基团对-R6/-RA可形成-PG部分”指：
-R6和-RA与它们所连接的氮原子一起形成如下部分：
Figure GDA0003827209340000075
其中-Rt和-Rz独立地选自-H、C1-4烷基、苯基和甲氧基苯基，且变量-R3、-R3a、-R5、-R5a、-R6a、-R7、-RB和p如式(II)中所定义。
本发明的另一方面是中间体(A)，包含上文对本发明的试剂所定义的式(II)的-L*-部分，和其中-L*-部分与至少一个-D部分结合，其中
每个-D独立地是药物D-H的含伯胺或仲胺的部分；
式(II)中的虚线表示与-D的伯胺或仲胺的氮连接；
式(II)的-L*-任选被至少一个-L2-Z部分或至少一个-L2-Y部分取代和任选是进一步被取代的；
-L2-独立地是单键或间隔基部分；
Z独立地是聚合物部分或C8-24烷基；
和其中-Y是可以任选以其被保护的形式存在的官能团。
可以理解，表述“-Y是可以任选以其被保护的形式存在的官能团”指-Y可以可逆地与保护基部分连接。
包含式-L*-的连接基部分的中间体(A)可以通过包含式-L*-的连接基部分的试剂与药物D-H的反应来获得，例如通过-Q的置换。本领域技术人员可以理解，当-Q是-OH时，试剂与药物部分D-H的反应可以在偶联试剂的存在下进行，例如在选自如下的偶联试剂的存在下：(1-氰基-2-乙氧基-2-氧代亚乙基氨基氧基)二甲基氨基-吗啉代-碳正离子六氟磷酸盐，(1-[双(二甲基氨基)亚甲基]-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸盐，N,N,N′,N′-四甲基-O-(1H-苯并三唑-1-基)脲鎓六氟磷酸盐，O-(苯并三唑-1-基)-N,N,N′,N′-四甲基脲鎓六氟磷酸盐，(苯并三唑-1-基氧基)三吡咯烷子基鏻六氟磷酸盐，和N,N,N′,N′-四甲基-O-(N-琥珀酰亚氨基)脲鎓四氟硼酸盐。
本发明的另一方面是合成如上文所定义的结合物或其可药用盐的方法。本发明的结合物或结合物的中间体可以通过已知的方法或按照下文所述的合成方法来制备。
合成本发明的结合物的方法，其中该方法包括如下步骤：
(a)提供包含式(II)的连接基-L*-的试剂；
(b)使步骤(a)的试剂与含伯胺或仲胺的药物结合，获得中间体(A)；
(c)使步骤(b)的中间体(A)接受脱保护条件，获得中间体(C′)或包含式(I)的连接基-L1-的结合物或中间体(B)；
(d)任选地，使由步骤(c)获得的中间体(B)或(C′)接受迁移条件(shiftconditions)；
(e)任选地，使步骤(d)的中间体(B)或(C′)脱保护；和
(f)分离由步骤(c)、(d)或(e)产生的结合物；
其中任选地，在步骤(b)和(c)、(c)和(d)、(d)和(e)或(e)和(f)之间，至少一个Z部分与至少一个中间体(A)、(B)或(C′)结合。
可以理解，步骤(c)的中间体(C′)与至少一个Z部分结合，产生包含式(I)的连接基-L1-的结合物。在一些实施方案中，步骤(c)的中间体(C′)与一个Z部分结合，产生包含式(I)的连接基-L1-的结合物。
另一个方面是合成本发明的结合物的方法，其中该方法包括以下步骤：
(a)提供包含式(II)的连接基-L*-试剂；
(b)使步骤(a)的试剂与含伯胺或仲胺的药物结合，获得中间体(A)；
(c)使步骤(b)的中间体(A)接受脱保护条件，获得包含式(I)的连接基-L1-的结合物或中间体(B)；
(d)任选地，使由步骤(c)获得的中间体(B)接受迁移条件；
(e)任选地，使步骤(d)的中间体(B)脱保护；和
(f)分离由步骤(c)、(d)或(e)产生的结合物；
其中任选地，在步骤(b)和(c)、(c)和(d)、(d)和(e)或(e)和(f)之间，至少一个Z部分与至少一个中间体(A)或(B)结合。
可以理解，如果包含式(II)的连接基-L*-的试剂未被至少一个-L2-Z或-L2-Y部分取代，则至少一个Z部分可以在步骤(d)之后与中间体(B)连接。在一些实施方案中，一个Z部分在步骤(d)之后与中间体(B)连接。
还可以理解，在上述方法中，当步骤(a)中的试剂已经包含式(II)的连接基-L*-、其中-L*-已经被至少一个-L2-Z部分取代时，至少一个Z部分与至少一个中间体(A)或(B)的连接或结合可以是任选的。
对于本领域技术人员还清楚的是，当例如-L*-Y部分中的-Y以其被保护的形式存在时，即，其可逆地与保护基部分连接时，所述部分在与Z结合之前需要接受脱保护条件。
图1显示了在合成本发明的结合物的方法的步骤期间发生的重排的实例，其中所述结合物相应于图1中的结构(C)。步骤(a)涉及提供包含式(II)的连接基-L*-的试剂，所述试剂相应于图1中的结构(R)。步骤(b)涉及包含式(II)的连接基-L*-的试剂、即结构(R)与含伯胺或仲胺的药物、即D-H的结合，通过药物的伯胺或仲胺官能团向直接与-Q部分连接的羰基的亲核攻击而发生。这导致了释放Q-H和形成中间体(A)，后者相应于图1的结构(A)。在步骤(c)中，中间体(A)接受脱保护条件，由此变量-RA和-RB(它们独立地选自-H和-PG，条件是-RA或-RB中不多于一个可以是-H)转化为-H原子，同时标记“#”的氮原子进行与变量-X3-的分子内迁移，产生本发明的结合物，相应于图1中的结构(C)。图1还显示了任选的情况，其中在中间体(A)接受脱保护条件后，变量-RA和-RB转化为-H原子，以提供中间体(B)，相应于图1中的结构(B)。在步骤(d)中，由步骤(c)获得的中间体(B)接受迁移条件，在该条件下标记“#”的氮原子进行与变量-X3-的分子内迁移，产生本发明的结合物，相应于结构(C)。为了简化，没有显示-L2-Z或-L2-Y部分。同样，为了简明，图1没有显示任选的步骤(e)。
可以理解，在图1的结构(R)、(A)和(B)中，变量-R6和-R6a如上文所述的式(II)中所定义，并且如果-R6或-R6a中的至少一个是-PG，则所述变量可以在步骤(c)或(d)的条件下、优选在步骤(e)的条件下转化为-H原子。
在本发明的含义范围内，如下使用术语。
如本文所用的术语“药物”指用于治疗、治愈、预防或诊断疾病或用于以其它方式增强患者的身体或精神健康的物质。如果药物与另一个部分结合，则所得产物的源自该药物的部分称为“药物部分”。
如本文所用的术语“药物D-H的含伯胺或仲胺的部分”指包含至少一个伯胺或仲胺官能团的药物的部分，该药物可以任选地具有一个或多个另外的官能团、包括一个或多个另外的伯胺和/或仲胺官能团。
如本文所用的术语“部分”指分子的一部分，其与相应的试剂相比缺少一个或多个原子。例如，如果式“H-X-H”的试剂与另一种试剂反应并成为反应产物的一部分，则反应产物的相应部分具有结构“H-X-”或“-X-”，其中每个“-”表示与另一个部分连接。因此，药物部分作为药物从可逆的链接释放。
可以理解，如果提供了原子基团的序列或化学结构，所述原子基团与两个部分连接或使部分间隔，则所述序列或化学结构可以以任一方向与两个部分连接，另有明确说明除外。例如，部分“-C(O)N(Rx)-”可以作为“-C(O)N(Rx)-”或作为“-N(Rx)C(O)-”与两个部分连接或使部分间隔。
如本文所用的术语“保护基部分”指可逆地与官能团连接以使得其不能够与例如另一个官能团反应的部分。适宜的醇(-OH)保护基例如有乙酰基、苯甲酰基、苄基、β-甲氧基乙氧基甲基醚、二甲氧基三苯甲基、甲氧基甲基醚、甲氧基三苯甲基、对甲氧基苄基醚、甲基硫基甲基醚、新戊酰、四氢吡喃基、三苯甲基、三甲基硅烷基、叔丁基二甲基硅烷基、三异丙基甲硅烷氧基甲基、三异丙基硅烷基醚、甲基醚和乙氧基乙基醚。适宜的羰基保护基例如有缩醛和缩酮、缩羰酯和二噻烷。适宜的羧酸保护基例如有甲基酯、苄基酯、叔丁基酯、2,6-二甲基苯酚、2,6-二异丙基苯酚、2,6-二叔丁基苯酚、硅烷基酯、原酸酯和噁唑啉。适宜的磷酸保护基例如有2-氰基乙基和甲基。
如本文所用的术语“胺保护基部分”指用于在化学反应过程中可逆地保护胺官能团以使得所述胺不能与例如另一个官能团反应的部分。
如本文所用的术语“离去基部分”指在与另一个官能团的化学反应期间从分子的其余部分、例如从试剂分离的原子或原子基团。
如本文所用的术语“脱保护条件”指中间体的至少一个保护基部分、例如胺保护基部分从官能团、例如从胺基团分离或裂解的条件，例如在可以涉及使用酸、碱、还原剂、氧化剂、氢化或光和任选的清除试剂的条件下。
如本文所用的术语“还原剂”指在氧化还原化学反应中失去或贡献电子给电子接受者如氧化剂的化学化合物或元素。
如本文所用的术语“氧化剂”指能够使其它化学化合物氧化的化学化合物。
如本文所用的术语“清除试剂”指捕获其它反应中间体如反应活性的反应中间体的化学化合物。
如本文所用的术语“迁移条件”指中间体、例如中间体(B)的伯胺可以分子内重排的条件，例如在可以涉及使用缓冲剂或有机溶剂的条件下。
如本文所用的术语“缓冲剂”或“缓冲试剂”指维持pH在预期范围内的化学化合物。生理上耐受的缓冲剂例如有乙酸盐、己二酸盐、丙氨酸、铵盐、精氨酸、抗坏血酸盐、天冬氨酸盐、苯甲酸盐、碳酸氢盐、碳酸盐、柠檬酸盐、二乙醇胺、依地酸盐、乙二胺、富马酸盐、葡糖酸盐、谷氨酸盐、甘氨酸、胍、组氨酸、乳酸盐、赖氨酸、苹果酸盐、偏磷酸盐、三胺五乙酸(pentetate)、磷酸盐、丙酮酸盐、山梨酸盐、琥珀酸盐、酒石酸盐、氨丁三醇和α-酮戊二酸。
如本文所用的术语“极性质子溶剂”指包含在带有不同电负性的原子之间的键的溶剂具有大的偶极矩和至少一个直接与电负性原子如氧、氮或硫原子结合的氢原子。
如本文所用的术语“极性非质子溶剂”指包含在带有不同电负性的原子之间的键的溶剂具有大的偶极矩和不具有直接与电负性原子如氧、氮或硫原子结合的氢原子。
如本文所用的术语“试剂”指包含至少一个官能团用于与其它化学化合物或药物的官能团反应的化学化合物。可以理解，包含官能团的药物也是试剂。
本领域技术人员可以理解，本发明的结合物是前药。如本文所用的术语“前药”指与脂肪酸衍生部分或聚合物部分、例如Z通过至少一个-L1-L2-部分可逆地共价结合的药物部分。前药以其相应的药物D-H的形式释放可逆和共价结合的药物部分-D。换言之，前药是包含药物部分的结合物，其经由至少一个-L1-L2-部分共价地和可逆地结合聚合物部分。这类前药或结合物以游离药物的形式释放以前结合的药物部分。
如本文所用的术语“可逆的链接”或“生物可降解的链接”是在没有酶的存在下在生理条件下(其为水性缓冲液pH 7.4和37℃)可裂解的链接，半衰期为1小时至6个月，例如10小时至4个月，例如1天至3个月、2天至2个月或3天至1个月。但是，可以理解，可逆的链接在其它条件下也是可裂解的，例如在不同pH或在不同温度下，半衰期为1小时至6个月，但是确定可逆性的测试在上述生理条件下(水性缓冲液,pH 7.4,37℃)进行。因此，“稳定链接”是在生理条件下具有多于6个月的半衰期的链接。
如本文所用的与数值一起的术语“约”用于指该数值加上和减去不多于所述数值的10％、在一些实施方案中不多于所述数值的8％、在一些实施方案中不多于所述数值的5％和在一些实施方案中不多于所述数值的2％的范围，包括端值。例如，短语“约200”用于指包括端值的200+/-10％的范围，即包括端值的180至220的范围；在一些实施方案中，指包括端值的200+/-8％的范围，即包括端值的184至216的范围；在一些实施方案中，指包括端值的200+/-5％的范围，即包括端值的190至210的范围；和在一些实施方案中，指包括端值的200+/-2％的范围，即包括端值的196至204的范围。可以理解，作为“约20％”给出的百分比不是指“20％+/-10％”、即包括端值的10至30％的范围，而是“约20％”指包括端值的18至22％的范围，即加上和减去数值20的10％。
如本文所用的单独或组合的术语“C1-4烷基”指具有1至4个碳原子的直链或分支烷基部分。如果存在于分子末端，直链或支链C1-4烷基的实例有甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基和叔丁基。当分子的两个部分通过C1-4烷基连接，则这类C1-4烷基基团的实例有-CH2-、-CH2-CH2-、-CH(CH3)-、-CH2-CH2-CH2-、-CH(C2H5)-、-C(CH3)2-。C1-4烷基碳的每个氢可以任选被如下文定义的取代基替换。任选地，C1-4烷基可以被一个或多个如下文定义的部分所间隔。
如本文所用的单独或组合的术语“C1-6烷基”指具有1至6个碳原子的直链或分支烷基部分。如果存在于分子末端，直链和支链C1-6烷基基团的实例有甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、2-甲基丁基、2,2-二甲基丙基、正己基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、2,2-二甲基丁基、2,3-二甲基丁基和3,3-二甲基丙基。当分子的两个部分通过C1-6烷基基团连接时，则这类C1-6烷基基团的实例有-CH2-、-CH2-CH2-、-CH(CH3)-、-CH2-CH2-CH2-、-CH(C2H5)-和-C(CH3)2-。C1-6碳的每个氢原子可以任选被如下文定义的取代基替换。任选地，C1-6烷基可以被一个或多个如下文定义的部分所间隔。
因此，“C1-10烷基”、“C1-20烷基”、“C8-24烷基”或“C1-50烷基”分别指具有1至10个、1至20个、8至24个或1至50个碳原子的烷基链，其中C1-10、C1-20、C8-24或C1-50碳的每个氢原子可以任选被如下文定义的取代基替换。任选地，C1-10烷基、C1-20烷基、C8-24烷基或C1-50烷基可以被一个或多个如下文定义的部分所间隔。
如本文所用的单独或组合的术语“C2-6烯基”指具有2至6个碳原子的包含至少一条碳-碳双键的直链或支链烃部分。如果存在于分子末端，实例有-CH＝CH2、-CH＝CH-CH3、-CH2-CH＝CH2、-CH＝CHCH2-CH3和-CH＝CH-CH＝CH2。当分子的两个部分通过C2-6烯基基团连接时，则这类C2-6烯基的实例有-CH＝CH-。C2-6烯基部分的每个氢原子可以任选被如下文定义的取代基替换。任选地，C2-6烯基可以被一个或多个如下文定义的部分所间隔。
因此，单独或组合的术语“C2-10烯基”、“C2-20烯基”或“C2-50烯基”分别指具有2至10个、2至20个或2至50个碳原子的包含至少一条碳-碳双键的直链或支链烃部分。C2-10烯基、C2-20烯基或C2-50烯基基团的每个氢原子可以任选被如下文定义的取代基替换。任选地，C2-10烯基、C2-20烯基或C2-50烯基可以被一个或多个如下文定义的部分所间隔。
如本文所用的单独或组合的术语“C2-6炔基”指具有2至6个碳原子的包含至少一条碳-碳三键的直链或支链烃部分。如果存在于分子末端，实例有-C≡CH、-CH2-C≡CH、CH2-CH2-C≡CH和CH2-C≡C-CH3。当分子的两个部分通过炔基基团连接时，则实例有-C≡C-。C2-6炔基基团的每个氢原子可以任选被如下文定义的取代基替换。任选地，可以存在一条或多条双键。任选地，C2-6炔基可以被一个或多个如下文定义的部分所间隔。
因此，如本文所用的单独或组合的术语“C2-10炔基”、“C2-20炔基”和“C2-50炔基”分别指具有2至10个、2至20个或2至50个碳原子的包含至少一条碳-碳三键的直链或支链烃部分。C2-10炔基、C2-20炔基或C2-50炔基基团的每个氢原子可以任选被如下文定义的取代基替换。任选地，可以存在一条或多条双键。任选地，C2-10炔基、C2-20炔基或C2-50炔基可以被一个或多个如下文定义的部分所间隔。
如上所述，C1-4烷基、C1-6烷基、C1-10烷基、C1-20烷基、C1-50烷基、C8-24烷基、C2-6烯基、C2-10烯基、C2-20烯基、C2-50烯基、C2-6炔基、C2-10炔基、C2-20烯基或C2-50炔基可以任选被一个或多个部分所间隔，所述部分在一些实施方案中选自
Figure GDA0003827209340000141
其中
虚线指与部分或试剂的剩余部分连接；
-R和-Ra独立地选自-H、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、2-甲基丁基、2,2-二甲基丙基、正己基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、2,2-二甲基丁基、2,3-二甲基丁基和3,3-二甲基丙基；和所述部分和链接任选进一步被取代。
如本文所用的术语“C3-10环烷基”指具有3至10个碳原子的环状烷基链，其可以是饱和或不饱和，例如环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环己烯基、环庚基、环辛基,环壬基或环癸基。C3-10环烷基碳的每个氢原子可以被如下文所定义的取代基替换。术语“C3-10环烷基”还包括桥连双环，如降冰片烷或降冰片烯。
如本文所用的术语“8-至30-元碳多环基”或“8-至30-元碳多环”指具有8至30环原子的两个或更多个环的环状部分，其中两个相邻环共享至少一个环原子，和可以含有一直到最大数量的双键(芳族或非芳族环，其是完全饱和的、部分饱和的或不饱和的)。在一些实施方案中，8-至30-元碳多环基指两个、三个、四个或五个环的环状部分。在一些实施方案中，8-至30-元碳多环基指两个、三个或四个环的环状部分。
如本文所用的术语“3-至10-元杂环基”或“3-至10-元杂环”指具有3、4、5、6、7、8、9或10个环原子的环，其可以含有一直到最大数量的双键(芳族或非芳族环，其是完全饱和的、部分饱和的或不饱和的)，其中至少一个环原子直至4个环原子被选自硫(包括-S(O)-、-S(O)2-)、氧和氮(包括＝N(O)-)的杂原子替换，和其中所述环经由碳或氮原子与分子的剩余部分连接。3-至10-元杂环的实例包括但不限于氮丙啶、环氧乙烷、硫杂环丙烷、氮杂环丙烯、环氧乙烯、硫杂丙烯环、氮杂环丁烷、氧杂环丁烷、硫杂环丁烷、呋喃、噻吩、吡咯、吡咯啉、咪唑、咪唑啉、吡唑、吡唑啉、噁唑、噁唑啉、异噁唑、异噁唑啉、噻唑、噻唑啉、异噻唑、异噻唑啉、噻二唑、噻二唑啉、四氢呋喃、四氢噻吩、吡咯烷、咪唑烷、吡唑烷、噁唑烷、异噁唑烷、噻唑烷、异噻唑烷、噻二唑烷、环丁砜、吡喃、二氢吡喃、四氢吡喃、咪唑烷、吡啶、哒嗪、吡嗪、嘧啶、哌嗪、哌啶、吗啉、四唑、三唑、三唑烷、四唑烷、二氮杂环庚烷、氮杂
Figure GDA0003827209340000151
和高哌嗪。3-至10-元杂环基或3-至10-元杂环状基团的每个氢原子可以被如下文所定义的取代基替换。
如本文所用的术语“8-至11-元杂双环基”或“8-至11-元杂双环”指具有8至11个环原子的两个环的杂环状部分，其中至少一个环原子被两个环共享，和其可以含有一直到最大数量的双键(芳族或非芳族环，其是完全饱和的、部分饱和的或不饱和的)，其中至少一个环原子直至6个环原子被选自硫(包括-S(O)-、-S(O)2-)、氧和氮(包括＝N(O)-)的杂原子替换，和其中所述环经由碳或氮原子与分子的剩余部分连接。8-至11-元杂双环的实例有吲哚、吲哚啉、苯并呋喃、苯并噻吩、苯并噁唑、苯并异噁唑、苯并噻唑、苯并异噻唑、苯并咪唑、苯并咪唑啉、喹啉、喹唑啉、二氢喹唑啉、喹啉、二氢喹啉、四氢喹啉、十氢喹啉、异喹啉、十氢异喹啉、四氢异喹啉、二氢异喹啉、苯并氮杂
Figure GDA0003827209340000152
嘌呤和蝶啶。术语8-至11-元杂双环还包括两个环的螺环结构如1,4-二氧杂-8-氮杂螺环[4.5]癸烷或桥连杂环如8-氮杂-双环[3.2.1]辛烷。8-至11-元杂双环基或8-至11-元杂双环碳的每个氢原子可以被如下文所定义的取代基替换。
类似地，术语“8-至30-元杂多环基”或“8-至30-元杂多环”指具有8至30个环原子的多于两个环、在一些实施方案中三个、四个或五个环的杂环状部分，其中两个相邻环共享至少一个环原子，和其可以含有一直到最大数量的双键(芳族或非芳族环，其是完全饱和的、部分饱和的或不饱和的)，其中至少一个环原子直至10个环原子被选自硫(包括-S(O)-、-S(O)2-)、氧和氮(包括＝N(O)-)的杂原子替换，和其中所述环是经由碳或氮原子与分子的剩余部分连接。
可以理解，与结构
Figure GDA0003827209340000153
的部分有关的短语“基团对-Rx/-Ry与它们所连接的原子一起形成C3-10环烷基、3-至10-元杂环基或8-至11-元杂双环基”指-Rx和-Ry形成下述结构：
Figure GDA0003827209340000161
其中R是C3-10环烷基、3-至10-元杂环基或8-至11-元杂双环基。
还可以理解，与结构
Figure GDA0003827209340000162
的部分有关的短语“基团对-Rx/-Ry与它们所连接的原子一起形成环-A-”指-Rx和-Ry形成下述结构：
Figure GDA0003827209340000163
如本文所用的术语“赋形剂”指治疗剂如药物或结合物与之一起施用的稀释剂、佐剂或载体。这类药用赋形剂可以是无菌液体，例如水和油，包括石油、动物、植物或合成来源的那些，包括花生油、大豆油、矿物油和芝麻油。当药物组合物口服施用时，水是优选的赋形剂。当药物组合物静脉内施用时，盐水和葡萄糖水溶液是优选的赋形剂。优选采用盐水溶液和葡萄糖水溶液和甘油溶液作为注射溶液的液体赋形剂。适宜的药物赋形剂包括淀粉、葡萄糖、乳糖、蔗糖、甘露醇、海藻糖、明胶、麦芽、大米、面粉、白垩、硅胶、硬脂酸钠、单硬脂酸甘油酯、滑石粉、氯化钠、脱脂奶粉、甘油、丙烯、乙二醇、透明质酸、丙二醇、水和乙醇。如果需要，药物组合物还可以含有少量润湿剂或乳化剂、pH缓冲剂如乙酸盐、琥珀酸盐、tris、碳酸盐、磷酸盐、HEPES(4-(2-羟基乙基)-1-哌嗪乙磺酸)、MES(2-(N-吗啉代)乙磺酸)或可以含有去污剂，如
Figure GDA0003827209340000164
泊洛沙姆、泊洛沙明(poloxamine)、CHAPS、
Figure GDA0003827209340000165
或氨基酸如甘氨酸、赖氨酸或组氨酸。这些药物组合物可以采取溶液、混悬液、乳剂、片剂、丸剂、胶囊剂、粉末剂或缓释制剂的形式。药物组合物可以配制成含有传统的粘合剂和赋形剂如甘油三酯的栓剂。口服制剂可以包括标准赋形剂，例如药用级的甘露醇、乳糖、淀粉、硬脂酸镁、糖精钠、纤维素、碳酸镁等。这类组合物将含有治疗有效量的药物或药物部分以及适宜量的赋形剂以便给患者提供适当施用的形式。制剂应当适合施用模式。
如本文所用的术语药物的“游离形式”指处于其未修饰的药理学活性形式的药物，例如在从结合物中释放出之后。
如本文所用的术语“官能团”指可以与其它原子团反应的原子团。示例性的官能团有羧酸、伯胺、仲胺、叔胺、马来酰亚胺、硫醇、磺酸、碳酸酯、氨甲酸酯、羟基、醛、酮、肼、异氰酸酯、异硫氰酸酯、磷酸、膦酸、卤代乙酰基、卤代烷、丙烯酰基、芳基氟化物、羟胺、二硫化物、磺酰胺、硫酸、乙烯基砜、乙烯基酮、重氮烷、环氧乙烷和氮丙啶。
如本文所用的术语“卤素”指氟、氯、溴或碘。在一些实施方案中，卤素是氟或氯。
如本文所用的术语“间隔”指部分插入在两个碳原子之间或者如果插入是在部分的两头之一的话插入在碳或杂原子和氢原子之间，在一些实施方案中插入在碳和氢原子之间。
当本发明的结合物包含一个或多个酸性或碱性基团时，本发明还包括它们相应的药学或毒理学上可接受的盐，特别是它们的药学上可利用的盐。因此，包含酸性基团的本发明的结合物根据本发明可以作为例如碱金属盐、碱土金属盐或铵盐使用。这类盐的更精确实例包括钠盐、钾盐、钙盐、镁盐或与氨或有机胺的盐，例如乙胺、乙醇胺、三乙醇胺或氨基酸，或季铵，例如四丁基铵和鲸蜡基三甲基铵。包含一个或多个碱性基团、即可以被质子化的基团的本发明的结合物可以以它们与无机酸或有机酸的加成盐的形式存在和可以根据本发明使用。适宜的酸的实例包括氯化氢、溴化氢、磷酸、硫酸、硝酸、甲磺酸、对甲苯磺酸、萘二磺酸、草酸、乙酸、酒石酸、乳酸、水杨酸、苯甲酸、甲酸、丙酸、新戊酸、二乙基乙酸、丙二酸、琥珀酸、庚二酸、富马酸、马来酸、苹果酸、氨基磺酸、苯基丙酸、葡糖酸、抗坏血酸、异烟酸、柠檬酸、己二酸、三氟乙酸和本领域技术人员已知的其它酸。对于本领域技术人员而言，已知用于将碱性基团转化为阳离子的其它方法，例如胺基团的烷基化产生带正电荷的铵基团和盐的适当抗衡离子。如果本发明的结合物同时包含酸性基团和碱性基团，则本发明除了提到的盐形式之外还包括内盐或甜菜碱(两性离子)。各盐可以通过本领域技术人员已知的常规方法获得，例如通过使这些前药与有机或无机酸或碱在溶剂或分散剂中接触，或通过与其它盐阴离子交换或阳离子交换。本发明还包括本发明的结合物的所有盐，这些盐由于低生理相容性不直接适用于药物，但是可以用作例如化学反应的中间体或用于制备可药用盐。
如本文所用的术语“可药用”指当施用于患者时不造成伤害的物质，优选指监管机构如EMA(欧洲)和/或FDA(美国)和/或任何其它国家监管机构批准用于动物、优选用于人的物质。
如本文所用，如本文所用的术语“肽”指经由肽(酰胺)键连接的至少2个到至多且包括50个氨基酸单体部分(其还可以称为“氨基酸残基”)的链。氨基酸单体可以选自蛋白氨基酸和非蛋白氨基酸，并且可以是D-或L-氨基酸。术语“肽”还包括模拟肽，例如类肽、β-肽、环肽和缩肽，并且涵盖具有多达且包括50个单体部分的这类模拟肽链。环肽可以是单环、双环、三环或四环肽。术语“肽”还包括套索肽(lasso peptide)。
如本文所用的术语“蛋白质”指通过肽键连接的超过50个氨基酸单体部分(其还可以称为“氨基酸残基”)的链，其中优选不超过12000个氨基酸单体通过肽键连接，例如不超过10000个氨基酸单体部分、不超过8000个氨基酸单体部分、不超过5000个氨基酸单体部分或不超过2000个氨基酸单体部分。
如本文所用的术语“小分子药物”指这样的药物：分子量小于1000Da、例如小于900Da或小于800Da的有机化合物。可以理解，基于核碱基的药物部分、例如腺嘌呤或鸟嘌呤类似物也可以是小分子药物类型。
如本文所用的术语“中等分子药物”指这样的药物：有机化合物，其不是肽和不是蛋白质，具有1kDa至7.5kDa且包括端点值的分子量范围。
如本文所用的术语“寡核苷酸”指双链或单链RNA和DNA及其任何修饰，优选具有2至1000个核苷酸。修饰包括例如提供其它化学基团的那些修饰，所述化学基团将额外的电荷、可极化性、氢键合、静电相互作用和流动性结合到核酸配体碱基或核酸配体整体上。这类修饰包括例如2’-位糖修饰、5-位嘧啶修饰、8-位嘌呤修饰、外环胺修饰、4-硫脲苷取代、5-溴或5-碘-尿嘧啶取代；骨架修饰、甲基化、不常见的碱基配对组合如异碱基异胞苷和异胍。修饰还可以包括3'和5'修饰，例如加帽和立体化学变化。该术语还包括适体。
如本文所用的术语“肽核酸”指具有肽主链、即其中单体通过肽键相互连接的主链的有机聚合物，核碱基如腺嘌呤、胞嘧啶、鸟嘌呤、胸腺嘧啶和尿嘧啶与之连接。在一些实施方案中，肽主链包括N-(2-氨基乙基)-甘氨酸。
如本文所用的术语“聚合物”指包含通过化学键以线性、环状、分支、交联或树枝状方式或其组合连接的重复结构单元、即单体的分子，其可以是合成或生物来源或两者的组合。单体可以相同(在这种情况下聚合物是均聚物)或者可以不同(在这种情况下聚合物是杂聚物)。杂聚物还可以称为“共聚物”，包括例如交替共聚物，其中不同类型的单体交替；周期共聚物，其中不同单体类型的单体以重复顺序排列；统计共聚物，其中不同类型的单体是无规排列的；嵌段共聚物，其中仅由一种类型的单体组成的不同均聚物的嵌段通过共价键连接；和梯度共聚物，其中不同单体的组成沿聚合物链逐渐变化。可以理解，聚合物还可以包含一种或多种其它部分，例如一种或多种官能团。同样，可以理解，肽或蛋白质也是聚合物，即使个体氨基酸残基的侧链可能不同。可以理解，对于共价交联聚合物如水凝胶，不能提供有意义的分子量范围。
如本文所用的术语“聚合物”或“聚合物部分”指包含一种或多种聚合物或聚合物部分的试剂或部分。聚合物试剂或部分还可以任选地包含一种或多种其它部分，所述部分在一些实施方案中选自：
·C1-50烷基、C2-50烯基、C2-50炔基、C3-10环烷基、3-至10-元杂环基、8-至11-元杂双环基、苯基、萘基、茚基、茚满基和四氢萘基；
·分支点，例如-CR<、>C<或-N<；和
·选自如下的链接：
Figure GDA0003827209340000191
其中
虚线指与部分或试剂的剩余部分连接；
-R和-Ra独立地选自-H、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、2-甲基丁基、2,2-二甲基丙基、正己基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、2,2-二甲基丁基、2,3-二甲基丁基和3,3-二甲基丙基；和所述部分和链接任选进一步被取代。
本领域技术人员理解，由聚合反应得到的聚合产物并非都具有相同的分子量，而是呈现出分子量分布。因此，如本文所用的分子量范围、分子量、聚合物中的单体数量范围和聚合物中的单体数量指单体的数均分子量和数均，即聚合物或聚合物部分的分子量的算术平均值和聚合物或聚合物部分的单体数量的算术平均值。
因此，在包含“x”个单体单元的聚合物部分中，对“x”给出的任意整数因此对应于单体的算术平均数。对“x”给出的任意整数范围提供了单体的算术平均数所处的整数范围。对“x”以“约x”给出的整数指单体的算术平均数处于x+/-10％的整数范围内，在一些实施方案中处于x+/-8％的整数范围内，在一些实施例中处于x+/-5％的整数范围内，在一些实施例中处于x+/-2％的整数范围内。
如本文所用的术语“数均分子量”指个体聚合物的分子量的普通算术平均值。
如本文所用的关于部分或试剂的术语“基于PEG”指所述部分或试剂包含PEG。在一些实施方案中，这类基于PEG的部分或试剂包含至少10％(w/w)PEG，例如至少20％(w/w)PEG，例如至少30％(w/w)PEG，例如至少40％(w/w)PEG，例如至少50％(w/w)，例如至少60％(w/w)PEG，例如至少70％(w/w)PEG，例如至少80％(w/w)PEG，例如至少90％(w/w)PEG，例如至少95％(w/w)PEG。基于PEG的部分或试剂的剩余重量百分比可以是其它部分，例如选自如下的那些：
·C1-50烷基、C2-50烯基、C2-50炔基、C3-10环烷基、3-至10-元杂环基、8-至11-元杂双环基、苯基、萘基、茚基、茚满基和四氢萘基；
·分支点，例如-CR<、>C<或-N<；或
·选自如下的链接：
Figure GDA0003827209340000201
其中
虚线指与部分或试剂的剩余部分连接；
-R和-Ra独立地选自-H、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、2-甲基丁基、2,2-二甲基丙基、正己基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、2,2-二甲基丁基、2,3-二甲基丁基和3,3-二甲基丙基；和所述部分和链接任选进一步被取代。
如本文所用的关于部分或试剂的术语“基于PEG的包含至少X％PEG的”指所述部分或试剂包含至少X％(w/w)乙二醇单元(-CH2CH2O-)，其中乙二醇单元在部分或试剂内可以以一个一个嵌段排列、交替排列或可以随机分布。在一些实施方案中，所述部分或试剂的所有乙二醇单元存在于一个嵌段中；在一些实施方案中，基于PEG的部分或试剂的剩余重量百分比是选自如下的其它部分：
·C1-50烷基、C2-50烯基、C2-50炔基、C3-10环烷基、3-至10-元杂环基、8-至11-元杂双环基、苯基、萘基、茚基、茚满基和四氢萘基；
·分支点，例如-CR<、>C<或-N<；和
·选自如下的链接：
Figure GDA0003827209340000211
其中
虚线指与部分或试剂的剩余部分连接，和其中-R和-Ra独立地选自-H、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、2-甲基丁基、2,2-二甲基丙基、正己基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、2,2-二甲基丁基、2,3-二甲基丁基和3,3-二甲基丙基；和其中所述部分和链接任选进一步被取代。
如本文所用的与部分或试剂有关的术语“基于透明质酸”指所述部分或试剂包含透明质酸。这类基于透明质酸的部分或试剂包含至少10％(w/w)透明质酸，例如至少20％(w/w)透明质酸，例如至少30％(w/w)透明质酸，例如至少40％(w/w)透明质酸，例如至少50％(w/w)透明质酸，例如至少60％(w/w)透明质酸，例如至少70％(w/w))透明质酸，例如至少80％(w/w)透明质酸，例如至少90％(w/w)透明质酸或例如至少95％(w/w)透明质酸。基于透明质酸的部分或试剂的剩余重量百分比可以是其它部分，例如选自如下的那些：
·C1-50烷基、C2-50烯基、C2-50炔基、C3-10环烷基、3-至10-元杂环基、8-至11-元杂双环基、苯基、萘基、茚基、茚满基和四氢萘基；
·分支点，例如-CR<、>C<或-N<；和
·选自如下的链接：
Figure GDA0003827209340000221
其中
虚线指与部分或试剂的剩余部分连接；
-R和-Ra独立地选自-H、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、2-甲基丁基、2,2-二甲基丙基、正己基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、2,2-二甲基丁基、2,3-二甲基丁基和3,3-二甲基丙基；和其中所述部分和链接任选进一步被取代。
如本文所用的术语“水凝胶”指由均聚物或共聚物组成的亲水或两亲聚合物网络，其由于存在疏水相互作用、氢键、离子相互作用和/或共价化学交联而是不溶性的。交联提供了网络结构和物理完整性。
如本文所用的术语“无规卷曲”指肽或蛋白质采取/具有/形成、在一些实施方案中具有如下构象：其基本上缺少确定的二级和三级结构，如通过在水性缓冲液中于环境温度和pH7.4进行的圆二色谱法所测定。在一些实施方案中，环境温度为约20℃，即在18℃至22℃之间，而在一些实施方案中，环境温度为20℃。
如本文所用的术语“间隔基”或“间隔基部分”指适于连接两个部分的部分。适宜的间隔基可以选自C1-50烷基、C2-50烯基和C2-50炔基，所述C1-50烷基、C2-50烯基或C2-50炔基任选被一个或多个选自-NH-、-N(C1-4烷基)-、-O-、-S-、-C(O)-、-C(O)NH-、-C(O)N(C1-4烷基)-、-O-C(O)-、-S(O)-、-S(O)2-、4-至7-元杂环基、苯基和萘基的基团所间隔，并且可以任选是被取代的。
如本文所用的术语“取代”指分子或部分的一个或多个-H原子被称为“取代基”的不同原子或原子团所代替。
如本文所用的术语“取代基”在一些实施方案中指选自如下的部分：卤素、-CN、-C(O)ORx1、-ORx1、-C(O)Rx1、-C(O)N(Rx1)(Rx1a)、-S(O)2N(Rx1)(Rx1a)、-S(O)N(Rx1)(Rx1a)、-S(O)2Rx1、-S(O)Rx1、-N(Rx1)S(O)2N(Rx1a)(Rx1b)、-SRx1、-N(Rx1)(Rx1a)、-NO2、-OC(O)Rx1、-N(Rx1)C(O)Rx1a、-N(Rx1)S(O)2Rx1a、-N(Rx1)S(O)Rx1a、-N(Rx1)C(O)ORx1a、-N(Rx1)C(O)N(Rx1a)(Rx1b)、-OC(O)N(Rx1)(Rx1a)、-T0、C1-50烷基、C2-50烯基和C2-50炔基；其中-T0、C1-50烷基、C2-50烯基和C2-50炔基任选被一个或多个相同或不同的-Rx2取代，和其中C1-50烷基、C2-50烯基和C2-50炔基任选被一个或多个选自如下的基团所间隔：-T0-、-C(O)O-、-O-、-C(O)-、-C(O)N(Rx3)-、-S(O)2N(Rx3)-、-S(O)N(Rx3)-、-S(O)2-、-S(O)-、-N(Rx3)S(O)2N(Rx3a)-、-S-、-N(Rx3)-、-OC(ORx3)(Rx3a)-、-N(Rx3)C(O)N(Rx3a)-和-OC(O)N(Rx3)-；
-Rx1、-Rx1a、-Rx1b独立地选自-H、-T0、C1-50烷基、C2-50烯基和C2-50炔基；其中-T0、C1-50烷基、C2-50烯基和C2-50炔基任选被一个或多个相同或不同的-Rx2取代，和其中C1-50烷基、C2-50烯基和C2-50炔基任选被一个或多个选自如下的基团所间隔：-T0-、-C(O)O-、-O-、-C(O)-、-C(O)N(Rx3)-、-S(O)2N(Rx3)-、-S(O)N(Rx3)-、-S(O)2-、-S(O)-、-N(Rx3)S(O)2N(Rx3a)-、-S-、-N(Rx3)-、-OC(ORx3)(Rx3a)-、-N(Rx3)C(O)N(Rx3a)-和-OC(O)N(Rx3)-；
每个T0独立地选自苯基、萘基、茚基、茚满基、四氢萘基、C3-10环烷基、3-至10-元杂环基和8-至11-元杂双环基；其中每个T0独立地任选被一个或多个相同或不同的-Rx2取代；
每个-Rx2独立地选自卤素、-CN、氧代基(＝O)、-C(O)ORx4、-ORx4、-C(O)Rx4、-C(O)N(Rx4)(Rx4a)、-S(O)2N(Rx4)(Rx4a)、-S(O)N(Rx4)(Rx4a)、-S(O)2Rx4、-S(O)Rx4、-N(Rx4)S(O)2N(Rx4a)(Rx4b)、-SRx4、-N(Rx4)(Rx4a)、-NO2、-OC(O)Rx4、-N(Rx4)C(O)Rx4a、-N(Rx4)S(O)2Rx4a、-N(Rx4)S(O)Rx4a、-N(Rx4)C(O)ORx4a、-N(Rx4)C(O)N(Rx4a)(Rx4b)、-OC(O)N(Rx4)(Rx4a)和C1-6烷基；其中C1-6烷基任选被一个或多个相同或不同的卤素取代；
每个-Rx3、-Rx3a、-Rx4、-Rx4a、-Rx4b独立地选自-H和C1-6烷基；其中C1-6烷基任选被一个或多个相同或不同的卤素取代。
在一些实施方案中，术语“取代基”指选自如下的部分：卤素、-CN、-C(O)ORx1、-ORx1、-C(O)Rx1、-C(O)N(Rx1)(Rx1a)、-S(O)2N(Rx1)(Rx1a)、-S(O)N(Rx1)(Rx1a)、-S(O)2Rx1、-S(O)Rx1、-N(Rx1)S(O)2N(Rx1)(Rx1a)、-SRx1、-N(Rx1)(Rx1a)、-NO2、-OC(O)Rx1、-N(Rx1)C(O)Rx1a、-N(Rx1)S(O)2Rx1a、-N(Rx1)S(O)Rx1a、-N(Rx1)C(O)ORx1a、-N(Rx1)C(O)N(Rx1)(Rx1a)、-OC(O)N(Rx1)(Rx1a)、-T0、C1-10烷基、C2-10烯基和C2-10炔基；其中-T0、C1-10烷基、C2-10烯基和C2-10炔基任选被一个或多个相同或不同的-Rx2取代，和其中C1-10烷基、C2-10烯基和C2-10炔基任选被一个或多个选自如下的基团所间隔：-T0-、-C(O)O-、-O-、-C(O)-、-C(O)N(Rx3)-、-S(O)2N(Rx3)-、-S(O)N(Rx3)-、-S(O)2-、-S(O)-、-N(Rx3)S(O)2N(Rx3a)-、-S-、-N(Rx3)-、-OC(ORx3)(Rx3a)-、-N(Rx3)C(O)N(Rx3a)-和-OC(O)N(Rx3)-；
每个-Rx1、-Rx1a、-Rx1b、-Rx3、-Rx3a独立地选自-H、卤素、C1-6烷基、C2-6烯基和C2-6炔基；
每个T0独立地选自苯基、萘基、茚基、茚满基、四氢萘基、C3-10环烷基、3-至10-元杂环基和8-至11-元杂双环基；其中每个T0独立地任选被一个或多个相同或不同的-Rx2取代；
每个-Rx2独立地选自卤素、-CN、氧代基(＝O)、-C(O)ORx4、-ORx4、-C(O)Rx4、-C(O)N(Rx4)(Rx4a)、-S(O)2N(Rx4)(Rx4a)、-S(O)N(Rx4)(Rx4a)、-S(O)2Rx4、-S(O)Rx4、-N(Rx4)S(O)2N(Rx4a)(Rx4b)、-SRx4、-N(Rx4)(Rx4a)、-NO2、-OC(O)Rx4、-N(Rx4)C(O)Rx4a、-N(Rx4)S(O)2Rx4a、-N(Rx4)S(O)Rx4a、-N(Rx4)C(O)ORx4a、-N(Rx4)C(O)N(Rx4a)(Rx4b)、-OC(O)N(Rx4)(Rx4a)和C1-6烷基；其中C1-6烷基任选被一个或多个相同或不同的卤素取代；
每个-Rx4、-Rx4a、-Rx4b独立地选自-H、卤素、C1-6烷基、C2-6烯基和C2-6炔基。
在一些实施方案中，术语“取代基”指选自如下的部分：卤素、-CN、-C(O)ORx1、-ORx1、-C(O)Rx1、-C(O)N(Rx1)(Rx1a)、-S(O)2N(Rx1)(Rx1a)、-S(O)N(Rx1)(Rx1a)、-S(O)2Rx1、-S(O)Rx1、-N(Rx1)S(O)2N(Rx1a)(Rx1b)、-SRx1、-N(Rx1)(Rx1a)、-NO2、-OC(O)Rx1、-N(Rx1)C(O)Rx1a、-N(Rx1)S(O)2Rx1a、-N(Rx1)S(O)Rx1a、-N(Rx1)C(O)ORx1a、-N(Rx1)C(O)N(Rx1a)(Rx1b)、-OC(O)N(Rx1)(Rx1a)、-T0、C1-6烷基、C2-6烯基和C2-6炔基；其中-T0、C1-6烷基、C2-6烯基和C2-6炔基任选被一个或多个相同或不同的-Rx2取代，和其中C1-6烷基、C2-6烯基和C2-6炔基任选被一个或多个选自如下的基团所间隔：-T0-、-C(O)O-、-O-、-C(O)-、-C(O)N(Rx3)-、-S(O)2N(Rx3)-、-S(O)N(Rx3)-、-S(O)2-、-S(O)-、-N(Rx3)S(O)2N(Rx3a)-、-S-、-N(Rx3)-、-OC(ORx3)(Rx3a)-、-N(Rx3)C(O)N(Rx3a)-和-OC(O)N(Rx3)-；
每个-Rx1、-Rx1a、-Rx1b、-Rx2、-Rx3、-Rx3a独立地选自-H、卤素、C1-6烷基、C2-6烯基和C2-6炔基；
每个T0独立地选自苯基、萘基、茚基、茚满基、四氢萘基、C3-10环烷基、3-至10-元杂环基和8-至11-元杂双环基；其中每个T0独立地任选被一个或多个相同或不同的-Rx2取代。
在一些实施方案中，任选取代的分子的最多6个-H原子独立地被取代基取代，例如5个-H原子独立地被取代基取代，4个-H原子独立地被取代基取代，3个-H原子独立地被取代基取代，2个-H原子独立地被取代基取代，或1个-H原子被取代基取代。
如本文所用的术语“治疗有效量”指足以治愈、减轻或部分阻止指定疾病及其并发症的临床表现的量。用于每种目的的有效量将取决于疾病或损伤的严重程度以及个体的体重和一般状态。
如本文所用的术语“水不溶性”指少于1g的化合物可以溶于1升20℃水中形成均匀溶液。因此，术语“水溶性”指1g或更多的化合物可以溶于1升20℃水中形成均匀溶液。
通常，术语“包括”或“包含”还涵盖“由……组成”。
在一些实施方案中，结合物的所有-D部分是相同的，即具有相同的化学结构。在这种情况下，结合物的所有-D部分均源自相同类型的药物分子。
在一些实施方案中，本发明的结合物包含不同的-D部分，即包含具有不同化学结构的-D部分。这些不同的结构来源于不同类型的药物分子。在一些实施方案中，本发明的结合物包含两种不同类型的-D部分。在一些实施方案中，本发明的结合物包含三种不同类型的-D部分。在一些实施方案中，本发明的结合物包含四种不同类型的-D部分。在一些实施方案中，本发明的结合物包含五种不同类型的-D部分。
如果本发明的结合物包含多于一种类型的-D，则所有-D部分可以与相同类型的-L1-结合或可以与不同类型的-L1-结合，即，第一种类型的-D可以与第一种类型的-L1-结合，第二种类型的-D可以与第二种类型的-L1-结合，以此类推。在一些实施方案中，使用不同类型的-L1-可以允许不同类型-D的不同释放动力学，例如第一种类型的-D的更快释放、第二种类型的-D的中等释放和第三种类型的-D的缓慢释放。因此，在一些实施方案中，本发明的结合物包含一种类型的-L1-。在一些实施方案中，本发明的结合物包含两种类型的-L1-。在一些实施方案中，本发明的结合物包含三种类型的-L1-。在一些实施方案中，本发明的结合物包含四种类型的-L1-。
在一些实施方案中，本发明的结合物包含一种类型的-D和一种类型的-L1-。在一些实施方案中，本发明的结合物包含两种类型的-D和两种类型的-L1-。在一些实施方案中，本发明的结合物包含三种类型的-D和三种类型的-L1-。在一些实施方案中，本发明的结合物包含四种类型的-D和四种类型的-L1-。在一些实施方案中，本发明的结合物包含两种类型的-D和一种类型的-L1-。在一些实施方案中，本发明的结合物包含三种类型的-D和一种类型的-L1-。在一些实施方案中，本发明的结合物包含四种类型的-D和一种类型的-L1-。
在一些实施方案中，结合物的所有-L1-部分具有相同结构。在一些实施方案中，结合物包含两个或更多个不同类型的-L1-部分，例如两个、三个、四个或五个不同类型的-L1-部分。这类两个或更多个不同类型的-L1-部分可以与相同或不同类型的-D结合。采用不同类型的-L1-允许以不同的释放半衰期从本发明的结合物释放相同或不同类型的药物D-H，例如当将具有短的释放半衰期的-L1-部分的第一个基团与具有长的释放半衰期的-L1-部分的第二个基团组合时。
在一些实施方案中，-D选自小分子、中等大小分子、寡核苷酸,肽核酸、肽和蛋白质药物部分。
在一些实施方案中，-D选自小分子、中等大小、肽和蛋白质药物部分。
在一些实施方案中，-D是小分子药物部分。在一些实施方案中，这类小分子药物部分是基于核碱基的药物部分。
在一些实施方案中，-D是中等大小分子药物部分。在一些实施方案中，-D是寡核苷酸药物部分。在一些实施方案中，-D是肽核酸蛋白质药物部分。
可以理解，-D部分包含至少一个伯胺或仲胺基团，例如一个、两个、三个、四个、五个、六个、七个、八个、九个或十个伯胺或仲胺基团，-D部分还可以包含一个或多个伯胺基团和一个或多个仲胺基团。
在一些实施方案中，-D是肽药物部分。
在一些实施方案中，-D是选自如下的肽药物部分：C-型利尿钠肽、甲状旁腺激素、W肽、memno-peptide A和G1肽。
在一些实施方案中，-D是双环肽药物部分。
在一些实施方案中，-D是蛋白质药物部分。在一些实施方案中，这类蛋白质部分是单克隆或多克隆抗体或其片段或融合。
令人惊讶地地发现，本发明的结合物可以通过避免使用例如酰胺或脒保护基、同时提供获得稳定试剂的益处的合成方法获得。特别是，这对蛋白质药物部分是有益的，因为一些蛋白质在酰胺或脒保护基的脱保护条件下比例如小分子、中等大小和肽药物部分更容易降解。
在一些实施方案中，式(I)的-X3-是-O-。在一些实施方案中，式(I)的-X3-是-S-。在一些实施方案中，式(I)的-X3-是-Se-。
在一些实施方案中，式(I)的-R6是-H。在一些实施方案中，式(I)的-R6是-C(R11)(R11a)(R11b)。在一些实施方案中，式(I)的-R6是-T。
在一些实施方案中，式(I)的-R6a是-H。在一些实施方案中，式(I)的-R6a是-C(R11)(R11a)(R11b)。在一些实施方案中，式(I)的-R6a是-T。
在一些实施方案中，式(I)的-R6和-R6a均为-H。
在一些实施方案中，式(II)的-X3-是-O-。在一些实施方案中，式(II)的-X3-是-S-。在一些实施方案中，式(II)的-X3-是-Se-。
在一些实施方案中，式(II)的-R6是-PG且式(II)的-R6a是-H。在一些实施方案中，式(II)的-R6是-PG且式(II)的-R6a是-C(R11)(R11a)(R11b)。在一些实施方案中，式(II)的-R6是-PG且式(II)的-R6a是-T。在一些实施方案中，式(II)的-R6是-PG且式(II)的-R6a是-PG。
在一些实施方案中，式(II)的-R6是-C(R11)(R11a)(R11b)且式(II)的-R6a是-T。在一些实施方案中，式(II)的-R6和-R6a均为-C(R11)(R11a)(R11b)。在一些实施方案中，式(II)的-R6和-R6a均为-T。
在一些实施方案中，式(II)的-RA是-H且式(II)的-RB是-PG。
在一些实施方案中，式(II)的-R6与式(II)的-R6a形成-PG部分。
在一些实施方案中，式(II)的-R6与式(II)的-RA形成-PG部分。
在一些实施方案中，式(II)的-RA与式(II)的-RB形成-PG部分。
在一些实施方案中，式(I)或(II)的v是0。在一些实施方案中，式(I)或(II)的v是1。
在一些实施方案中，式(I)或(II)的-X1-是-C(R8)(R8a)-。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-X1-是-N(R9)-。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-X1-是-O-。
在一些实施方案中，式(I)或(II)的＝X2是＝O。在一些实施方案中，式(I)或(II)的＝X2是＝N(R10)。
在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R9是-C(R11)(R11a)(R11b)。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R9是-T。
在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R10是-H。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R10是-C(R11)(R11a)(R11b)。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R10是-T。
在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R1选自-H、卤素、-CN、-C(O)OR12、-OR12、-C(O)R12、-C(O)N(R12)(R12a)、-S(O)2N(R12)(R12a)、-S(O)N(R12)(R12a)、-S(O)2R12、-S(O)R12、-N(R12)S(O)2N(R12a)(R12b)、-SR12、-NO2、-N(R12)C(O)OR12a、-N(R12)C(O)N(R12a)(R12b)、-OC(O)N(R12)(R12a)、-T、C1-6烷基、C2-6烯基和C2-6炔基。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R1是-H。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R1是卤素。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R1是-T。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R1是C1-6烷基。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R1是C2-6烯基。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R1是C2-6炔基。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R1选自-H、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、异丁基、叔丁基、正戊基、1,1-二甲基丙基、2,2-二甲基丙基、3-甲基丁基、1-甲基丁基和1-乙基丙基。
在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R1a选自-H、卤素、-CN、-C(O)OR12、-OR12、-C(O)R12、-C(O)N(R12)(R12a)、-S(O)2N(R12)(R12a)、-S(O)N(R12)(R12a)、-S(O)2R12、-S(O)R12、-N(R12)S(O)2N(R12a)(R12b)、-SR12、-NO2、-N(R12)C(O)OR12a、-N(R12)C(O)N(R12a)(R12b)、-OC(O)N(R12)(R12a)、-T、C1-6烷基、C2-6烯基和C2-6炔基。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R1a是-H。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R1a是卤素。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R1a是-T。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R1a是C1-6烷基。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R1a是C2-6烯基。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R1a是C2-6炔基。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R1a选自-H、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、异丁基、叔丁基、正戊基、1,1-二甲基丙基、2,2-二甲基丙基、3-甲基丁基、1-甲基丁基和1-乙基丙基。
在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R2选自-H、卤素、-CN、-C(O)OR12、-OR12、-C(O)R12、-C(O)N(R12)(R12a)、-S(O)2N(R12)(R12a)、-S(O)N(R12)(R12a)、-S(O)2R12、-S(O)R12、-N(R12)S(O)2N(R12a)(R12b)、-SR12、-NO2、-N(R12)C(O)OR12a、-N(R12)C(O)N(R12a)(R12b)、-OC(O)N(R12)(R12a)、-T、C1-6烷基、C2-6烯基和C2-6炔基。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R2是-H。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R2是卤素。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R2是-T。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R2是C1-6烷基。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R2是C2-6烯基。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R2是C2-6炔基。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R2选自-H、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、异丁基、叔丁基、正戊基、1,1-二甲基丙基、2,2-二甲基丙基、3-甲基丁基、1-甲基丁基和1-乙基丙基。
在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R2a选自-H、卤素、-CN、-C(O)OR12、-OR12、-C(O)R12、-C(O)N(R12)(R12a)、-S(O)2N(R12)(R12a)、-S(O)N(R12)(R12a)、-S(O)2R12、-S(O)R12、-N(R12)S(O)2N(R12a)(R12b)、-SR12、-NO2、-N(R12)C(O)OR12a、-N(R12)C(O)N(R12a)(R12b)、-OC(O)N(R12)(R12a)、-T、C1-6烷基、C2-6烯基和C2-6炔基。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R2a是-H。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R2a是卤素。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R2a是-T。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R2a是C1-6烷基。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R2a是C2-6烯基。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R2a是C2-6炔基。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R2a选自-H、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、异丁基、叔丁基、正戊基、1,1-二甲基丙基、2,2-二甲基丙基、3-甲基丁基、1-甲基丁基和1-乙基丙基。
在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R3选自-H、卤素、-CN、-C(O)OR12、-OR12、-C(O)R12、-C(O)N(R12)(R12a)、-S(O)2N(R12)(R12a)、-S(O)N(R12)(R12a)、-S(O)2R12、-S(O)R12、-N(R12)S(O)2N(R12a)(R12b)、-SR12、-NO2、-N(R12)C(O)OR12a、-N(R12)C(O)N(R12a)(R12b)、-OC(O)N(R12)(R12a)、-T、C1-6烷基、C2-6烯基和C2-6炔基。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R3是-H。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R3是卤素。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R3是-T。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R3是C1-6烷基。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R3是C2-6烯基。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R3是C2-6炔基。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R3选自-H、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、异丁基、叔丁基、正戊基、1,1-二甲基丙基、2,2-二甲基丙基、3-甲基丁基、1-甲基丁基和1-乙基丙基。
在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R3a选自-H、卤素、-CN、-C(O)OR12、-OR12、-C(O)R12、-C(O)N(R12)(R12a)、-S(O)2N(R12)(R12a)、-S(O)N(R12)(R12a)、-S(O)2R12、-S(O)R12、-N(R12)S(O)2N(R12a)(R12b)、-SR12、-NO2、-N(R12)C(O)OR12a、-N(R12)C(O)N(R12a)(R12b)、-OC(O)N(R12)(R12a)、-T、C1-6烷基、C2-6烯基和C2-6炔基。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R3a是-H。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R3a是卤素。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R3a是-T。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R3a是C1-6烷基。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R3a是C2-6烯基。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R3a是C2-6炔基。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R3a选自-H、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、异丁基、叔丁基、正戊基、1,1-二甲基丙基、2,2-二甲基丙基、3-甲基丁基、1-甲基丁基和1-乙基丙基。
在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R4选自-H、卤素、-CN、-C(O)OR12、-OR12、-C(O)R12、-C(O)N(R12)(R12a)、-S(O)2N(R12)(R12a)、-S(O)N(R12)(R12a)、-S(O)2R12、-S(O)R12、-N(R12)S(O)2N(R12a)(R12b)、-SR12、-NO2、-N(R12)C(O)OR12a、-N(R12)C(O)N(R12a)(R12b)、-OC(O)N(R12)(R12a)、-T、C1-6烷基、C2-6烯基和C2-6炔基。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R4是-H。在一些实施方案中，式(I)的-R4是卤素。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R4是-T。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R4是C1-6烷基。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R4是C2-6烯基。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R4是C2-6炔基。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R4选自-H、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、异丁基、叔丁基、正戊基、1,1-二甲基丙基、2,2-二甲基丙基、3-甲基丁基、1-甲基丁基和1-乙基丙基。
在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R4a选自-H、卤素、-CN、-C(O)OR12、-OR12、-C(O)R12、-C(O)N(R12)(R12a)、-S(O)2N(R12)(R12a)、-S(O)N(R12)(R12a)、-S(O)2R12、-S(O)R12、-N(R12)S(O)2N(R12a)(R12b)、-SR12、-NO2、-N(R12)C(O)OR12a、-N(R12)C(O)N(R12a)(R12b)、-OC(O)N(R12)(R12a)、-T、C1-6烷基、C2-6烯基和C2-6炔基。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R4a是-H。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R4a是卤素。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R4a是-T。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R4a是C1-6烷基。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R4a是C2-6烯基。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R4a是C2-6炔基。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R4a选自-H、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、异丁基、叔丁基、正戊基、1,1-二甲基丙基、2,2-二甲基丙基、3-甲基丁基、1-甲基丁基和1-乙基丙基。
在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R5选自-H、卤素、-CN、-C(O)OR12、-OR12、-C(O)R12、-C(O)N(R12)(R12a)、-S(O)2N(R12)(R12a)、-S(O)N(R12)(R12a)、-S(O)2R12、-S(O)R12、-N(R12)S(O)2N(R12a)(R12b)、-SR12、-NO2、-N(R12)C(O)OR12a、-N(R12)C(O)N(R12a)(R12b)、-OC(O)N(R12)(R12a)、-T、C1-6烷基、C2-6烯基和C2-6炔基。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R5是-H。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R5是卤素。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R5是-T。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R5是C1-6烷基。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R5是C2-6烯基。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R5是C2-6炔基。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R5选自-H、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、异丁基、叔丁基、正戊基、1,1-二甲基丙基、2,2-二甲基丙基、3-甲基丁基、1-甲基丁基和1-乙基丙基。
在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R5a选自-H、卤素、-CN、-C(O)OR12、-OR12、-C(O)R12、-C(O)N(R12)(R12a)、-S(O)2N(R12)(R12a)、-S(O)N(R12)(R12a)、-S(O)2R12、-S(O)R12、-N(R12)S(O)2N(R12a)(R12b)、-SR12、-NO2、-N(R12)C(O)OR12a、-N(R12)C(O)N(R12a)(R12b)、-OC(O)N(R12)(R12a)、-T、C1-6烷基、C2-6烯基和C2-6炔基。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R5a是-H。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R5a是卤素。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R5a是-T。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R5a是C1-6烷基。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R5a是C2-6烯基。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R5a是C2-6炔基。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R5a选自-H、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、异丁基、叔丁基、正戊基、1,1-二甲基丙基、2,2-二甲基丙基、3-甲基丁基、1-甲基丁基和1-乙基丙基。
在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R7选自-H、卤素、-CN、-C(O)OR12、-OR12、-C(O)R12、-C(O)N(R12)(R12a)、-S(O)2N(R12)(R12a)、-S(O)N(R12)(R12a)、-S(O)2R12、-S(O)R12、-N(R12)S(O)2N(R12a)(R12b)、-SR12、-NO2、-N(R12)C(O)OR12a、-N(R12)C(O)N(R12a)(R12b)、-OC(O)N(R12)(R12a)、-T、C1-6烷基、C2-6烯基和C2-6炔基。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R7是-H。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R7是卤素。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R7是-T。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R7是C1-6烷基。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R7是C2-6烯基。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R7是C2-6炔基。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R7选自-H、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、异丁基、叔丁基、正戊基、1,1-二甲基丙基、2,2-二甲基丙基、3-甲基丁基、1-甲基丁基和1-乙基丙基。
在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R8选自-H、卤素、-CN、-C(O)OR12、-OR12、-C(O)R12、-C(O)N(R12)(R12a)、-S(O)2N(R12)(R12a)、-S(O)N(R12)(R12a)、-S(O)2R12、-S(O)R12、-N(R12)S(O)2N(R12a)(R12b)、-SR12、-NO2、-N(R12)C(O)OR12a、-N(R12)C(O)N(R12a)(R12b)、-OC(O)N(R12)(R12a)、-T、C1-6烷基、C2-6烯基和C2-6炔基。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R8是-H。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R8是卤素。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R8是-T。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R8是C1-6烷基。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R8是C2-6烯基。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R8是C2-6炔基。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R8选自-H、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、异丁基、叔丁基、正戊基、1,1-二甲基丙基、2,2-二甲基丙基、3-甲基丁基、1-甲基丁基和1-乙基丙基。
在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R8a选自-H、卤素、-CN、-C(O)OR12、-OR12、-C(O)R12、-C(O)N(R12)(R12a)、-S(O)2N(R12)(R12a)、-S(O)N(R12)(R12a)、-S(O)2R12、-S(O)R12、-N(R12)S(O)2N(R12a)(R12b)、-SR12、-NO2、-N(R12)C(O)OR12a、-N(R12)C(O)N(R12a)(R12b)、-OC(O)N(R12)(R12a)、-T、C1-6烷基、C2-6烯基和C2-6炔基。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R8a是-H。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R8a是卤素。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R8a是-T。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R8a是C1-6烷基。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R8a是C2-6烯基。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R8a是C2-6炔基。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R8a选自-H、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、异丁基、叔丁基、正戊基、1,1-二甲基丙基、2,2-二甲基丙基、3-甲基丁基、1-甲基丁基和1-乙基丙基。
在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R11选自-H、卤素、-CN、-C(O)OR12、-OR12、-C(O)R12、-C(O)N(R12)(R12a)、-S(O)2N(R12)(R12a)、-S(O)N(R12)(R12a)、-S(O)2R12、-S(O)R12、-N(R12)S(O)2N(R12a)(R12b)、-SR12、-NO2、-N(R12)C(O)OR12a、-N(R12)C(O)N(R12a)(R12b)、-OC(O)N(R12)(R12a)、-T、C1-6烷基、C2-6烯基和C2-6炔基。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R11是-H。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R11是卤素。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R11是-T。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R11是C1-6烷基。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R11是C2-6烯基。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R11是C2-6炔基。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R11选自-H、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、异丁基、叔丁基、正戊基、1,1-二甲基丙基、2,2-二甲基丙基、3-甲基丁基、1-甲基丁基和1-乙基丙基。
在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R11a选自-H、卤素、-CN、-C(O)OR12、-OR12、-C(O)R12、-C(O)N(R12)(R12a)、-S(O)2N(R12)(R12a)、-S(O)N(R12)(R12a)、-S(O)2R12、-S(O)R12、-N(R12)S(O)2N(R12a)(R12b)、-SR12、-NO2、-N(R12)C(O)OR12a、-N(R12)C(O)N(R12a)(R12b)、-OC(O)N(R12)(R12a)、-T、C1-6烷基、C2-6烯基和C2-6炔基。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R11a是-H。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R11a是卤素。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R11a是-T。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R11a是C1-6烷基。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R11a是C2-6烯基。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R11a是C2-6炔基。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R11a选自-H、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、异丁基、叔丁基、正戊基、1,1-二甲基丙基、2,2-二甲基丙基、3-甲基丁基、1-甲基丁基和1-乙基丙基。
在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R11b选自-H、卤素、-CN、-C(O)OR12、-OR12、-C(O)R12、-C(O)N(R12)(R12a)、-S(O)2N(R12)(R12a)、-S(O)N(R12)(R12a)、-S(O)2R12、-S(O)R12、-N(R12)S(O)2N(R12a)(R12b)、-SR12、-NO2、-N(R12)C(O)OR12a、-N(R12)C(O)N(R12a)(R12b)、-OC(O)N(R12)(R12a)、-T、C1-6烷基、C2-6烯基和C2-6炔基。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R11b是-H。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R11b是卤素。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R11b是-T。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R11b是C1-6烷基。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R11b是C2-6烯基。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R11b是C2-6炔基。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R11b选自-H、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、异丁基、叔丁基、正戊基、1,1-二甲基丙基、2,2-二甲基丙基、3-甲基丁基、1-甲基丁基和1-乙基丙基。
在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R12选自-H、-T、C1-6烷基、C2-6烯基和C2-6炔基。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R12是-H。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R12是-T。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R12是C1-6烷基。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R12是C2-6烯基。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R12是C2-6炔基。
在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R12a选自-H、-T、C1-6烷基、C2-6烯基和C2-6炔基。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R12a是-H。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R12a是-T。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R12a是C1-6烷基。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R12a是C2-6烯基。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R12a是C2-6炔基。
在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R12b选自-H、-T、C1-6烷基、C2-6烯基和C2-6炔基。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R12b是-H。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R12b是-T。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R12b是C1-6烷基。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R12b是C2-6烯基。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R12b是C2-6炔基。
在一些实施方案中，式(I)或(II)的T选自苯基、萘基、茚基、茚满基、四氢萘基、C3-10环烷基、3-至10-元杂环基和8-至11-元杂双环基。在一些实施方案中，式(I)或(II)的T是苯基。在一些实施方案中，式(I)或(II)的T是萘基。在一些实施方案中，式(I)或(II)的T是茚基。在一些实施方案中，式(I)或(II)的T是茚满基。在一些实施方案中，式(I)或(II)的T是四氢萘基。在一些实施方案中，式(I)或(II)的T是四氢萘基。在一些实施方案中，式(I)或(II)的T是C3-10环烷基。在一些实施方案中，式(I)或(II)的T是3-至10-元杂环基。在一些实施方案中，式(I)或(II)的T是8-至11-元杂双环基。
在一些实施方案中，式(I)或(II)的T被一个或多个相同或不同的式(I)或(II)的-R13取代。
在一些实施方案中，式(I)或(II)的T被一个-式(I)或(II)的R13取代。
在一些实施方案中，式(I)或(II)的T未被-R13取代。
在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R13选自卤素、-CN、氧代基、-C(O)OR15、-OR15、-C(O)R15、-C(O)N(R15)(R15a)、-S(O)2N(R15)(R15a)、-S(O)N(R15)(R15a)、-S(O)2R15、-S(O)R15、-N(R15)S(O)2N(R15a)(R15b)、-SR15、-N(R15)(R15a)、-NO2、-OC(O)R15、-N(R15)C(O)R15a、-N(R15)S(O)2R15a、-N(R15)S(O)R15a、-N(R15)C(O)OR15a、-N(R15)C(O)N(R15a)(R15b)、-OC(O)N(R15)(R15a)和C1-6烷基。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R13是卤素。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R13是-CN。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R13是氧代基。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R13是-C(O)OR15。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R13是-OR15。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R13是-C(O)R15。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R13是-C(O)N(R15)(R15a)。
在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R13是-S(O)2N(R15)(R15a)。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R13是-S(O)N(R15)(R15a)。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R13是-S(O)2R15。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R13是-S(O)R15。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R13是-N(R15)S(O)2N(R15a)(R15b)。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R13是-SR15。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R13是-N(R15)(R15a)。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R13是-NO2。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R13是-OC(O)R15。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R13是-N(R15)C(O)R15a。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R13是-N(R15)S(O)2R15a。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R13是-N(R15)S(O)R15a。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R13是-N(R15)C(O)OR15a。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R13是-N(R15)C(O)N(R15a)(R15b)。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R13是-OC(O)N(R15)(R15a)。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R13是C1-6烷基。
在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R14选自-H和C1-6烷基。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R14是-H。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R14是C1-6烷基。
在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R14a选自-H和C1-6烷基。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R14a是-H。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R14a是C1-6烷基。
在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R15选自-H和C1-6烷基。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R15是-H。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R15是C1-6烷基。
在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R15a选自-H和C1-6烷基。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R15a是-H。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R15a是C1-6烷基。
在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R15b选自-H和C1-6烷基。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R15b是-H。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R15b是C1-6烷基。
在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R1和-R1a与它们所连接的原子一起形成C3-10环烷基。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R1和-R1a与它们所连接的原子一起形成3-至10-元杂环基。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R1和-R1a与它们所连接的原子一起形成8-至11-元杂双环基。
在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R2和-R2a与它们所连接的原子一起形成C3-10环烷基。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R2和-R2a与它们所连接的原子一起形成3-至10-元杂环基。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R2和-R2a与它们所连接的原子一起形成8-至11-元杂双环基。
在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R3和-R3a与它们所连接的原子一起形成C3-10环烷基。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R3和-R3a与它们所连接的原子一起形成3-至10-元杂环基。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R3和-R3a与它们所连接的原子一起形成8-至11-元杂双环基。
在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R4和-R4a与它们所连接的原子一起形成C3-10环烷基。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R4和-R4a与它们所连接的原子一起形成3-至10-元杂环基。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R4和-R4a与它们所连接的原子一起形成8-至11-元杂双环基。
在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R5和-R5a与它们所连接的原子一起形成C3-10环烷基。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R5和-R5a与它们所连接的原子一起形成3-至10-元杂环基。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R5和-R5a与它们所连接的原子一起形成8-至11-元杂双环基。
在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R8和-R8a与它们所连接的原子一起形成C3-10环烷基。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R8和-R8a与它们所连接的原子一起形成3-至10-元杂环基。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R8和-R8a与它们所连接的原子一起形成8-至11-元杂双环基。
在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R1和-R2与它们所连接的原子一起形成式(I)或(II)的环-A-。
在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R1和-R8与它们所连接的原子一起形成式(I)或(II)的环-A-。
在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R1和-R9与它们所连接的原子一起形成式(I)或(II)的环-A-。
在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R2和-R9与它们所连接的原子一起形成式(I)或(II)的环-A-。
在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R2和-R10与它们所连接的原子一起形成式(I)或(II)的环-A-。
在一些实施方案中，式(I)或(II)的-A-是苯基。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-A-是萘基。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-A-是茚基。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-A-是茚满基。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-A-是四氢萘基。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-A-是C3-10环烷基。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-A-是3-至10-元杂环基。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-A-是8-至11-元杂双环基。
在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R1和-R9与它们所连接的原子一起形成式(I)或(II)的环-A′-。
在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R2和-R9与它们所连接的原子一起形成式(I)或(II)的环-A′-。
在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R3和-R6与它们所连接的原子一起形成式(I)或(II)的环-A′-。
在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R4和-R6与它们所连接的原子一起形成式(I)或(II)的环-A′-。
在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R5和-R6与它们所连接的原子一起形成式(I)或(II)的环-A′-。
在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R6和-R6a与它们所连接的原子一起形成式(I)或(II)的环-A′-。
在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R6和-R7与它们所连接的原子一起形成式(I)或(II)的环-A′-。
在一些实施方案中，式(I)或(II)的-A′-是3-至10-元杂环基。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-A′-是8-至11-元杂双环基。
在一些实施方案中，-PG选自：
Figure GDA0003827209340000371
Figure GDA0003827209340000381
Figure GDA0003827209340000391
其中
虚线表示与式(II)的氮原子连接，所述氮原子可以被-PG取代，和-R是C1-6烷基。
在一些实施方案中，-PG是可逆的前药连接基部分，如WO 2005/099768 A2中所述。因此，-PG具有式(b-i)：
Figure GDA0003827209340000392
其中
虚线表示与式(II)的氮原子连接，所述氮原子可以被-PG取代；
n是0、1、2、3或4；
-X-是化学键或间隔基；
＝Y1、＝Y5独立地选自＝O和＝S；
-Y2-、-Y3-独立地选自-O-和-S-；
-Y4-选自-O-、-NR5-和-C(R6R6a)-；
-R2、-R3、-R5、-R6、-R6a相互独立地选自-H、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、2-甲基丁基、2,2-二甲基丙基、正己基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、2,2-二甲基丁基、2,3-二甲基丁基和3,3-二甲基丙基
-R4选自甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、2-甲基丁基、2,2-二甲基丙基、正己基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、2,2-二甲基丁基、2,3-二甲基丁基和3,3-二甲基丙基；
-W-选自任选被一个或多个选自如下的基团所间隔的C1-20烷基：C3-10环烷基、8-至30-元碳多环基、3-至10-元杂环基、-C(O)-、-C(O)N(R7)-、-O-、-S-和-N(R7)-；
-Nu是亲核基团；
-Ar-是多取代的芳族烃或多取代的芳族杂环。
可以理解，式(b-i)中的虚线表示与所述-PG部分可以与之连接的式(II)的氮原子之一连接。
任选地，式(b-i)的-PG是进一步被取代的。
在一些实施方案中，式(b-i)的＝Y5是＝O。
在一些实施方案中，式(b-i)的-Y3-是-O-。
在一些实施方案中，式(b-i)的-R2、-R3和-R4独立地选自-H、C1-6烷基、C2-6烯基或C2-6炔基，其中所述C1-6烷基、C2-6烯基或C2-6炔基任选进一步被取代。
在一些实施方案中，式(b-i)的＝Y1是＝O。
在一些实施方案中，式(b-i)的-Y2-是-O-。
在一些实施方案中，式(b-i)的-Y4-是-NR5。
在一些实施方案中，式(b-i)的-R5是-H或C1-6烷基。
在一些实施方案中，式(b-i)的Ar选自：
Figure GDA0003827209340000401
其中
-Z1-选自-O-、-S-和-N(R7)-，和
-Z2-是-N(R7)-；和
-R7选自-H、C1-6烷基、C2-6烯基和C2-6炔基。
在一些实施方案中，式(b-i)的
Figure GDA0003827209340000411
部分选自：
Figure GDA0003827209340000412
其中
-W-、-R5、-R6、-R6a如上文所定义；
m是2、3、4、5、6、7、8、9或10；
-R9、-R10、-R11和-R12独立地选自H、C1-6烷基、C2-6烯基和C2-6炔基，所述C1-6烷基、C2-6烯基和C2-6炔基任选进一步被取代。
在一些实施方案中，-PG具有式(b-i′)：
Figure GDA0003827209340000413
其中
虚线表示与式(II)的氮原子连接，所述氮原子可以被-PG取代。
在一些实施方案中，-Q是-OH。
在一些实施方案中，-Q是-LG。
在一些实施方案中，-LG选自氯、溴、氟、硝基苯氧基、咪唑基、N-羟基琥珀酰亚氨基、N-羟基苯并三唑基、N-羟基氮杂苯并三唑基、五氟苯氧基、N-羟基硫代琥珀酰亚氨基、diphenylphosphinomethanethiyl(二苯基膦基甲硫醇)、2-二苯基膦基苯氧基、降冰片烯-N-羟基琥珀酰亚氨基、N-羟基苯邻二甲酰亚胺、吡啶氧基、九氟叔丁基氧基和六氟异丙基氧基。
在一些实施方案中，-LG是氯。在一些实施方案中，-LG是溴。在一些实施方案中，-LG是氟。在一些实施方案中，-LG是硝基苯氧基。在一些实施方案中，-LG是咪唑基。在一些实施方案中，-LG是N-羟基琥珀酰亚氨基。在一些实施方案中，-LG是N-羟基苯并三唑基。在一些实施方案中，-LG是五氟苯氧基。在一些实施方案中，-LG是N-羟基硫代琥珀酰亚氨基。在一些实施方案中，-LG是diphenylphosphinomethanethiyl(二苯基膦基甲硫醇)。在一些实施方案中，-LG是2-二苯基膦基苯氧基。在一些实施方案中，-LG是降冰片烯-N-羟基琥珀酰亚氨基。在一些实施方案中，-LG是N-羟基苯邻二甲酰亚胺。在一些实施方案中，-LG是吡啶氧基。在一些实施方案中，-LG是九氟叔丁基氧基。在一些实施方案中，-LG是六氟异丙基氧基。
在一些实施方案中，式(II)的-Y是如WO2016/020373A1中所公开。因此，式(II)的-Y选自硫羟、马来酰亚胺、胺、羟基、羧酸及衍生物、碳酸酯及衍生物、氨甲酸酯及衍生物、异硫氰酸酯、二硫化物、吡啶基二硫化物、甲基硫代磺酰基、乙烯基砜、醛、酮、卤代乙酰基、硒化物、叠氮、-NH-NH2、-O-NH2、末端炔、式(z’i)化合物
Figure GDA0003827209340000421
其中
Y1、Y2独立地是C或N，
Ra、Ra’、Ra1、Ra1’独立地是-H或C1-6烷基，
如果Y2是N，则ax1是0；如果Y2是C，则ax1是1，
任选地，如果Y2是C，则基团对Ra/Ra1形成化学键，
任选地，如果Y2是C，则基团对Ra’/Ra1’与它们所连接的原子一起形成环A’，和
A’是环丙基或苯基；
式(z’ii)化合物
Figure GDA0003827209340000422
其中
Y3是C或N；
式(z’iii)化合物
Figure GDA0003827209340000431
式(z’iv)化合物
Figure GDA0003827209340000432
其中
Ra2、Ra2’、Ra3、Ra3’是-H，
Figure GDA0003827209340000433
表示单键或双键，
任选地，基团对Ra2’/Ra3’与它们所连接的原子一起形成环A1’；和
A1’是5-元杂环基；
式(z’v)化合物
Figure GDA0003827209340000434
其中
Ra4、Ra4’、Ra5、Ra5’是-H，
Figure GDA0003827209340000435
表示单键或双键，
任选地，基团对Ra4/Ra5形成化学键，
任选地，基团对Ra4’/Ra5’与它们所连接的原子一起形成环A2’，且
A2’是5-元杂环基；
式(z’vi)化合物
Figure GDA0003827209340000441
其中
Ra6、Ra6’均为C1-6烷基，或者Ra6、Ra6’之一为-H且另一个选自C1-6烷基、-COORa7、-CONHRa7’和CH2ORa7”，且
Ra7、Ra7’、Ra7”独立地是-H或C1-4烷基；
式(z’vii)化合物
Figure GDA0003827209340000442
式(z’viii)化合物
Figure GDA0003827209340000443
其中
Ra8、Ra8′、Ra8″独立地选自-H和C1-4烷基；
式(z’ix)化合物
Figure GDA0003827209340000444
其中
Ra9是-H或C1-4烷基；
式(z’x)化合物
Figure GDA0003827209340000445
其中
Ra9选自–COORa11、-CONHRa11和
Figure GDA0003827209340000451
其中
Y4是C或N，
Ra12选自-H、-COORa13、-CONRa13Ra13’、-CH2NRa13Ra13’和-NRa13CORa13’，和
Ra13、Ra13’独立地选自-H和C1-4烷基，
Aa3选自-H、甲基、叔丁基、-CF3、-COOR、
Figure GDA0003827209340000452
其中
每个Y5、Y6、Y7、Y8独立地是C或N，条件是，Y5、Y6、Y7、Y8中不多于3个是N，
Y9、Y10、Y11、Y12、Y13各自是C、N、S或O，条件是，Y9、Y10、Y11、Y12、Y13中不多于4个是N、S或O；
式(z’xi)化合物
Figure GDA0003827209340000453
式(z’xii)化合物
Figure GDA0003827209340000454
其中
Ra19、Ra19’独立地选自-H、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-8环烷基、3-至10-元杂环基、8-至11-元杂双环基、苯基、萘基、茚基、茚满基和四氢萘基；式(z’xiii)化合物
Figure GDA0003827209340000461
其中
Ra20选自-H、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-8环烷基、3-至10-元杂环基、8-至11-元杂双环基、苯基、萘基、茚基、茚满基和四氢萘基；
式(z’xiv)化合物
Figure GDA0003827209340000464
其中
Ar选自苯基、萘基、茚基、茚满基和四氢萘基，
Y14是卤素，
Ra22、Ra23、Ra23’独立地选自-H、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-8环烷基、3-至10-元杂环基、8-至11-元杂双环基、苯基、萘基、茚基、茚满基和四氢萘基；式(z’xv)化合物
Figure GDA0003827209340000462
Ar选自苯基、萘基、茚基、茚满基和四氢萘基,，
Ra24、Ra24’、Ra24”、Ra24”’独立地选自-H、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-8环烷基、3-至10-元杂环基、8-至11-元杂双环基、苯基、萘基、茚基、茚满基和四氢萘基；
式(z’xvi)化合物
Figure GDA0003827209340000463
其中
Ra25选自-H、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-8环烷基、3-至10-元杂环基、8-至11-元杂双环基、苯基、萘基、茚基、茚满基和四氢萘基；
式(z’xvii)化合物
Figure GDA0003827209340000471
其中
Ra27、Ra27’独立地是-H或C1-6烷基；
式(z’xviii)化合物
Figure GDA0003827209340000472
式(z’xix)化合物
Figure GDA0003827209340000474
其中
-PPh2表示具有下式的基团：
Figure GDA0003827209340000473
其中虚线表示与式(z’xix)的剩余部分连接，
Ra12选自
Figure GDA0003827209340000481
其中
未标记的虚线表示与式(z’xix)的剩余部分连接，
带星号的虚线表示与-L2-连接，
q是1或2，且
Y16是O或S；
式(z’xx)化合物
Figure GDA0003827209340000482
其中虚线表示与-L2-连接；和
式(z’xxi)化合物
Figure GDA0003827209340000483
其中式(z’i)、(z’ii)、(z’iii)、(z’iv)、(z’v)、(z’vi)、(z’vii)、(z’viii)、(z’ix)、(z’x)、(z’xi)、(z’xii)、(z’xiii)、(z’xiv)、(z’xv)、(z’xvi)、(z’xvii)、(z’xviii)和(z’xxi)的部分被-L2-部分取代和任选进一步被取代。可以理解，当-Y是式(z’i)、(z’ii)、(z’iii)、(z’iv)、(z’v)、(z’vi)、(z’vii)、(z’viii)、(z’ix)、(z’x)、(z’xi)、(z’xii)、(z’xiii)、(z’xiv)、(z’xv)、(z’xvi)、(z’xvii)、(z’xviii)或(z’xxi)化合物时，所述式的任意氢原子可以被-L2-部分取代。
在一些实施方案中，式(z’i)的Y1是C。
在一些实施方案中，式(z’i)的Ra、Ra’、Ra1、Ra1’是-H。
在一些实施方案中，式(z’i)选自：
Figure GDA0003827209340000491
其中虚线表示与-L2-连接，和
Ra、Ra1、Ra1’如式(z’i)中所定义进行使用。
在一些实施方案中，式(z’ii)选自：
Figure GDA0003827209340000492
其中虚线表示与-L2-连接。
在一些实施方案中，式(z’iii)选自：
Figure GDA0003827209340000493
其中虚线表示与-L2-连接。
在一些实施方案中，式(z’iv)选自：
Figure GDA0003827209340000501
其中虚线表示与-L2-连接。
在一些实施方案中，式(z’v)是
Figure GDA0003827209340000502
其中虚线表示与-L2-连接。
在一些实施方案中，式(z’vi)选自：
Figure GDA0003827209340000503
其中虚线表示与-L2-连接。
在一些实施方案中，式(z’vii)是
Figure GDA0003827209340000504
其中虚线表示与-L2-连接。
在一些实施方案中，式(z’viii)选自：
Figure GDA0003827209340000511
其中虚线表示与-L2-连接。
在一些实施方案中，式(z’ix)是
Figure GDA0003827209340000512
其中虚线表示与-L2-连接。
在一些实施方案中，式(z’x)的Aa3选自：
Figure GDA0003827209340000513
其中虚线表示与(z’x)的剩余部分连接。
在一些实施方案中，式(z’x)的
Figure GDA0003827209340000514
部分选自：
Figure GDA0003827209340000515
其中
未标记的虚线表示与(z’x)的剩余部分连接，和
标有星号的虚线表示与-L2-连接。
在一些实施方案中，式(z’xii)选自：
Figure GDA0003827209340000521
其中虚线表示与-L2-连接，和
Ra19′选自H、甲基、乙基、丙基和丁基。
在一些实施方案中，式(z’xiii)是
Figure GDA0003827209340000522
其中虚线表示与-L2-连接。
在一些实施方案中，式(z’xiv)是
Figure GDA0003827209340000523
其中虚线表示与-L2-连接，
Ar选自苯基、萘基、茚基、茚满基和四氢萘基，和Y14是卤素。
在一些实施方案中，式(z’xv)是
Figure GDA0003827209340000524
其中虚线表示与-L2-连接，
Ar选自苯基、萘基、茚基、茚满基和四氢萘基；和Ra24’、Ra24”、Ra24”’独立地选自H、甲基、乙基、丙基和丁基。
在一些实施方案中，式(z’xvi)是
Figure GDA0003827209340000531
其中虚线表示与-L2-连接。
在一些实施方案中，式(z’xvii)是
Figure GDA0003827209340000532
其中虚线表示与-L2-连接。
在一些实施方案中，-Y是如WO 2018/011266 A1中公开的被取代的酰基硼酸酯。因此，在一些实施方案中，-Y是
Figure GDA0003827209340000533
其中虚线表示与-L2-连接。
在一些实施方案中，-Y是如WO 2018/011266 A1中公开的羟基胺。因此，在一些实施方案中，-Y是
Figure GDA0003827209340000534
其中虚线表示与-L2-连接。
在一些实施方案中，式(z’xxi)是
Figure GDA0003827209340000535
其中虚线表示与-L2-连接。
在一些实施方案中，-Y选自：
Figure GDA0003827209340000541
Figure GDA0003827209340000551
其中虚线表示与-L2-连接；
标有星号的虚线表示与式(z’xix)的剩余部分连接；
Ra、Ra1、Ra1’如式(z’i)中所定义进行使用，Ra19′如式(z’xii)中所定义进行使用，Y4如式(z’xiv)中所定义进行使用，和Ra24’、Ra24”、Ra24”’如式(z’xv)中所定义进行使用。
在一些实施方案中，-Y以被保护的形式存在。
在一些实施方案中，-Y是与用于硫羟官能团的可逆保护的部分连接的硫羟。在一些实施方案中，-Y是与选自如下的部分连接的硫羟：
Figure GDA0003827209340000552
其中
虚线表示与-Y连接；
Ar是芳族部分，其任选进一步被取代；和
R01、R03、R04相互独立地是化学键或者是C1-50烷基、C2-50烯基或C2-50炔基，其中C1-50烷基、C2-50烯基和C2-50炔基任选被一个或多个相同或不同的R3取代，和其中C1-50烷基、C2-50烯基和C2-50炔基任选被一个或多个选自如下的基团所间隔：-Q-、-C(O)O-；-O-；-C(O)-；-C(O)N(R4)-；-S(O)2N(R4)-；-S(O)N(R4)-；-S(O)2-；-S(O)-；-N(R4)S(O)2N(R4a)-；-S-；-N(R4)-；-OC(O)R4；-N(R4)C(O)-；-N(R4)S(O)2-；-N(R4)S(O)-；-N(R4)C(O)O-；-N(R4)C(O)N(R4a)-；和-OC(O)N(R4R4a)；
R02是-H；C1-50烷基；C2-50烯基；或C2-50炔基，其中C1-50烷基、C2-50烯基和C2-50炔基任选被一个或多个相同或不同的R3取代，和其中C1-50烷基、C2-50烯基和C2-50炔基任选被一个或多个选自如下的基团所间隔：-Q-；-C(O)O-；-O-；-C(O)-；-C(O)N(R4)-；-S(O)2N(R4)-；-S(O)N(R4)-；-S(O)2-；-S(O)-；-N(R4)S(O)2N(R4a)-；-S-；-N(R4)-；-OC(O)R4；-N(R4)C(O)-；-N(R4)S(O)2-；-N(R4)S(O)-；-N(R4)C(O)O-；-N(R4)C(O)N(R4a)-；和-OC(O)N(R4R4a)；
Q选自苯基；萘基；茚基；茚满基；四氢萘基；C3-10环烷基；4-至7-元杂环基；和8-至11-元杂双环基，其中T任选被一个或多个相同或不同的R3取代；
R3是卤素；-CN；氧代基(＝O)；-COOR5；-OR5；-C(O)R5；-C(O)N(R5R5a)；-S(O)2N(R5R5a)；-S(O)N(R5R5a)；-S(O)2R5；-S(O)R5；-N(R5)S(O)2N(R5aR5b)；-SR5；-N(R5R5a)；-NO2；-OC(O)R5；-N(R5)C(O)R5a；-N(R5)S(O)2R5a；-N(R5)S(O)R5a；-N(R5)C(O)OR5a；-N(R5)C(O)N(R5aR5b)；-OC(O)N(R5R5a)；或C1-6烷基，其中C1-6烷基任选被一个或多个相同或不同的卤素取代；和
R4、R4a、R5、R5a、R5b独立地选自-H；或C1-6烷基，其中C1-6烷基任选被一个或多个相同或不同的卤素取代。
-L1-通过酰胺链接与-D结合。可以理解，该链接本身不是可逆的，但是在本发明中，-L1-中存在的相邻基团、例如酰胺、伯胺、仲胺和叔胺使得这些链接可逆。
在一些实施方案中，本发明的试剂包含式(II′)的连接基-L*-：
Figure GDA0003827209340000571
其中虚线表示与-Q连接；
-R1、-R1a、-R2、-R2a、-R3、-R3a、-R5、-R5a和-PG如式(II)中所定义进行使用；-L*-任选被至少一个-L2-Z部分或至少一个-L2-Y部分取代和任选是进一步被取代的；和
其中-L2-、-Y和Z如式(II)中所定义进行使用。
在一些实施方案中，式(II′)的-L*-被至少一个-L2-Y部分或至少一个-L2-Z部分取代和任选是进一步被取代的。在一些实施方案中，式(II′)的-L*-被至少一个-L2-Y部分或至少一个L2-Z部分取代和任选是进一步被取代的，条件是，-X3-不是-S-。
在一些实施方案中，式(II′)的-L*-被至少一个-L2-Y部分取代。在一些实施方案中，式(II′)的-L*-被一个-L2-Y部分取代。在一些实施方案中，式(II′)的-L*-被两个-L2-Y部分取代。在一些实施方案中，式(II′)的-L*-被三个-L2-Y部分取代。
在一些实施方案中，式(II′)的-L*-被至少一个L2-Z部分取代。在一些实施方案中，式(II′)的-L*-被一个L2-Z部分取代。在一些实施方案中，式(II′)的-L*-被两个L2-Z部分取代。在一些实施方案中，式(II′)的-L*-被三个L2-Z部分取代。
在一些实施方案中，-L1-进一步被一个或多个取代基取代。
在一些实施方案中，-L1-未被进一步取代。
在一些实施方案中，-L*-进一步被一个或多个取代基取代。
在一些实施方案中，-L*-未被进一步取代。
在一些实施方案中，-L1-具有式(I-a)：
Figure GDA0003827209340000581
其中
虚线表示式(I)的与-D的伯胺或仲胺的氮的连接；和
-R1、-R1a、-R2、-R2a、-R5、-R5a、-R6和-R6a如式(I)中所定义进行使用。
在一些实施方案中，式(I-a)的-R1、-R1a、-R2、-R2a、-R5、-R5a、-R6和-R6a彼此独立地选自-H、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、异丁基、叔丁基、正戊基、1,1-二甲基丙基、2,2-二甲基丙基、3-甲基丁基、1-甲基丁基和1-乙基丙基。
在一些实施方案中，-R1、-R1a、-R2是-H且-R2a是-N(R12)C(O)H。
在一些实施方案中，式(I-a)的-R1选自-H、甲基、乙基、正丙基和异丙基。在一些实施方案中，式(I-a)的-R1a选自-H、甲基、乙基、正丙基和异丙基。在一些实施方案中，式(I-a)的-R2选自-H、甲基、乙基、正丙基和异丙基。在一些实施方案中，式(I-a)的-R2a选自-H、甲基、乙基、正丙基和异丙基。在一些实施方案中，式(I-a)的-R5选自-H、甲基、乙基、正丙基和异丙基。在一些实施方案中，式(I-a)的-R5a选自-H、甲基、乙基、正丙基和异丙基。在一些实施方案中，式(I-a)的-R6选自-H、甲基、乙基、正丙基和异丙基。在一些实施方案中，式(Ia)的-R6a选自-H、甲基、乙基、正丙基和异丙基。
在一些实施方案中，式(I-a)的-R1是-H。在一些实施方案中，式(I-a)的-R1a是-H。在一些实施方案中，式(I-a)的-R2是-H。在一些实施方案中，式(I-a)的-R2a是-H。在一些实施方案中，式(I-a)的-R5是-H。在一些实施方案中，式(I-a)的-R5a是-H。在一些实施方案中，式(I-a)的-R6是-H。在一些实施方案中，式(I-a)的-R6a是-H。
在一些实施方案中，式(I-a)的-R1是-H，所述-H被-L2-取代。在一些实施方案中，式(I-a)的-R1a是-H，所述-H被-L2-取代。在一些实施方案中，式(I-a)的-R2是-H，所述-H被-L2-取代。在一些实施方案中，式(I-a)的-R2a是-H，所述-H被-L2-取代。在一些实施方案中，式(I-a)的-R5是-H，所述-H被-L2-取代。在一些实施方案中，式(I-a)的-R5a是-H，所述-H被-L2-取代。在一些实施方案中，式(I-a)的-R6是-H，所述-H被-L2-取代。在一些实施方案中，式(I-a)的-R6a是-H，所述-H被-L2-取代。
在一些实施方案中，-L1-具有式(I-b):
Figure GDA0003827209340000591
其中
虚线表示式(I)的与-D的伯胺或仲胺的氮的连接。
在一些实施方案中，-L1-具有式(I-c)：
Figure GDA0003827209340000592
其中
标有星号的虚线表示式(I)的与-D的伯胺或仲胺的氮的连接，未标记的虚线表示与-L2-连接；和其中-L2-如式(I)中所定义进行使用。
在一些实施方案中，-L1-具有式(I-d)：
Figure GDA0003827209340000593
其中标有星号的虚线表示式(I)的与-D的伯胺或仲胺的氮的连接，未标记的虚线表示与-L2-连接；和其中-L2-和Z如式(I)中所定义进行使用。
在一些实施方案中，式(I)结合物的所有-L2-部分是相同的。在一些实施方案中，式(I)结合物包含多于一种类型的-L2-，例如两个、三个、四个或五个不同的-L2-部分。这种多于一种类型的-L2-可以与仅一种类型的-L1-结合，或者可以与多于一种类型的-L1-结合。
在一些实施方案中，-L2-是化学键。
在一些实施方案中，-L2-是间隔基部分。
在一些实施方案中，-L2-选自-T′-、-C(O)O-、-O-、-C(O)-、-C(O)N(Ry1)-、-S(O)2N(Ry1)-、-S(O)N(Ry1)-、-S(O)2-、-S(O)-、-N(Ry1)S(O)2N(Ry1a)-、-S-、-N(Ry1)-、-OC(ORy1)(Ry1a)-、-N(Ry1)C(O)N(Ry1a)-、-OC(O)N(Ry1)-、C1-50烷基、C2-50烯基和C2-50炔基；其中-T′-、C1-50烷基、C2-50烯基和C2-50炔基任选被一个或多个相同或不同的-Ry2取代，和其中C1-50烷基、C2-50烯基和C2-50炔基任选被一个或多个选自如下的基团所间隔：-T′-、-C(O)O-、-O-、-C(O)-、-C(O)N(Ry3)-、-S(O)2N(Ry3)-、-S(O)N(Ry3)-、-S(O)2-、-S(O)-、-N(Ry3)S(O)2N(Ry3a)-、-S-、-N(Ry3)-、-OC(ORy3)(Ry3a)-、-N(Ry3)C(O)N(Ry3a)-和-OC(O)N(Ry3)-；
-Ry1和-Ry1a独立地选自-H、-T′、C1-50烷基、C2-50烯基和C2-50炔基；其中-T′、C1-50烷基、C2-50烯基和C2-50炔基任选被一个或多个相同或不同的-Ry2取代，和其中C1-50烷基、C2-50烯基和C2-50炔基任选被一个或多个选自如下的基团所间隔：-T′-、-C(O)O-、-O-、-C(O)-、-C(O)N(Ry4)-、-S(O)2N(Ry4)-、-S(O)N(Ry4)-、-S(O)2-、-S(O)-、-N(Ry4)S(O)2N(Ry4a)-、-S-、-N(Ry4)-、-OC(ORy4)(Ry4a)-、-N(Ry4)C(O)N(Ry4a)-和-OC(O)N(Ry4)-；
每个T′独立地选自苯基、萘基、茚基、茚满基、四氢萘基、C3-10环烷基、3-至10-元杂环基、8-至11-元杂双环基、8-至30-元碳多环基和8-至30-元杂多环基；其中每个T′独立地任选被一个或多个相同或不同的-Ry2取代；
每个-Ry2独立地选自卤素、-CN、氧代基(＝O)、-C(O)ORy5、-ORy5、-C(O)Ry5、-C(O)N(Ry5)(Ry5a)、-S(O)2N(Ry5)(Ry5a)、-S(O)N(Ry5)(Ry5a)、-S(O)2Ry5、-S(O)Ry5、-N(Ry5)S(O)2N(Ry5)(Ry5a)、-SRy5、-N(Ry5)(Ry5a)、-NO2、-OC(O)Ry5、-N(Ry5)C(O)Ry5a、-N(Ry5)S(O)2Ry5a、-N(Ry5)S(O)Ry5a、-N(Ry5)C(O)ORy5a、-N(Ry5)C(O)N(Ry5)(Ry5a)、-OC(O)N(Ry5)(Ry5a)和C1-6烷基；其中C1-6烷基任选被一个或多个相同或不同的卤素取代；和
每个-Ry3、-Ry3a、-Ry4、-Ry4a、-Ry5、-Ry5a和-Ry5b独立地选自-H和C1-6烷基；其中C1-6烷基任选被一个或多个相同或不同的卤素取代。
在一些实施方案中，-L2-选自-T′-、-C(O)O-、-O-、-C(O)-、-C(O)N(Ry1)-、-S(O)2N(Ry1)-、-S(O)N(Ry1)-、-S(O)2-、-S(O)-、-N(Ry1)S(O)2N(Ry1a)-、-S-、-N(Ry1)-、-OC(ORy1)(Ry1a)-、-N(Ry1)C(O)N(Ry1a)-、-OC(O)N(Ry1)-、C1-50烷基、C2-50烯基和C2-50炔基；其中-T′-、C1-20烷基、C2-20烯基和C2-20炔基任选被一个或多个相同或不同的-Ry2取代，和其中C1-20烷基、C2-20烯基和C2-20炔基任选被一个或多个选自如下的基团所间隔：-T′-、-C(O)O-、-O-、-C(O)-、-C(O)N(Ry3)-、-S(O)2N(Ry3)-、-S(O)N(Ry3)-、-S(O)2-、-S(O)-、-N(Ry3)S(O)2N(Ry3a)-、-S-、-N(Ry3)-、-OC(ORy3)(Ry3a)-、-N(Ry3)C(O)N(Ry3a)-和-OC(O)N(Ry3)-；
-Ry1和-Ry1a独立地选自-H、-T′、C1-10烷基、C2-10烯基和C2-10炔基；其中-T′、C1-10烷基、C2-10烯基和C2-10炔基任选被一个或多个相同或不同的-Ry2取代，和其中C1-10烷基、C2-10烯基和C2-10炔基任选被一个或多个选自如下的基团所间隔：-T′-、-C(O)O-、-O-、-C(O)-、-C(O)N(Ry4)-、-S(O)2N(Ry4)-、-S(O)N(Ry4)-、-S(O)2-、-S(O)-、-N(Ry4)S(O)2N(Ry4a)-、-S-、-N(Ry4)-、-OC(ORy4)(Ry4a)-、-N(Ry4)C(O)N(Ry4a)-和-OC(O)N(Ry4)-；
每个T′独立地选自苯基、萘基、茚基、茚满基、四氢萘基、C3-10环烷基、3-至10-元杂环基、8-至11-元杂双环基、8-至30-元碳多环基和8-至30-元杂多环基；其中每个T′独立地任选被一个或多个相同或不同的-Ry2取代；
-Ry2选自卤素、-CN、氧代基(＝O)、-C(O)ORy5、-ORy5、-C(O)Ry5、-C(O)N(Ry5)(Ry5a)、-S(O)2N(Ry5)(Ry5a)、-S(O)N(Ry5)(Ry5a)、-S(O)2Ry5、-S(O)Ry5、-N(Ry5)S(O)2N(Ry5a)(Ry5b)、-SRy5、-N(Ry5)(Ry5a)、-NO2、-OC(O)Ry5、-N(Ry5)C(O)Ry5a、-N(Ry5)S(O)2Ry5a、-N(Ry5)S(O)Ry5a、-N(Ry5)C(O)ORy5a、-N(Ry5)C(O)N(Ry5a)(Ry5b)、-OC(O)N(Ry5)(Ry5a)和C1-6烷基；其中C1-6烷基任选被一个或多个相同或不同的卤素取代；和
每个-Ry3、-Ry3a、-Ry4、-Ry4a、-Ry5、-Ry5a和-Ry5b独立地选自-H和C1-6烷基；其中C1-6烷基任选被一个或多个相同或不同的卤素取代。
在一些实施方案中，-L2-选自-T′-、-C(O)O-、-O-、-C(O)-、-C(O)N(Ry1)-、-S(O)2N(Ry1)-、-S(O)N(Ry1)-、-S(O)2-、-S(O)-、-N(Ry1)S(O)2N(Ry1a)-、-S-、-N(Ry1)-、-OC(ORy1)(Ry1a)-、-N(Ry1)C(O)N(Ry1a)-、-OC(O)N(Ry1)-、C1-50烷基、C2-50烯基和C2-50炔基；其中-T′-、C1-50烷基、C2-50烯基和C2-50炔基任选被一个或多个相同或不同的-Ry2取代，和其中C1-50烷基、C2-50烯基和C2-50炔基任选被一个或多个选自如下的基团所间隔：-T′-、-C(O)O-、-O-、-C(O)-、-C(O)N(Ry3)-、-S(O)2N(Ry3)-、-S(O)N(Ry3)-、-S(O)2-、-S(O)-、-N(Ry3)S(O)2N(Ry3a)-、-S-、-N(Ry3)-、-OC(ORy3)(Ry3a)-、-N(Ry3)C(O)N(Ry3a)-和-OC(O)N(Ry3)-；
-Ry1和-Ry1a独立地选自-H、-T′、C1-10烷基、C2-10烯基和C2-10炔基；
每个T′独立地选自苯基、萘基、茚基、茚满基、四氢萘基、C3-10环烷基、3-至10-元杂环基、8-至11-元杂双环基、8-至30-元碳多环基和8-至30-元杂多环基；
每个-Ry2独立地选自卤素和C1-6烷基；和
每个-Ry3、-Ry3a、-Ry4、-Ry4a、-Ry5、-Ry5a和-Ry5b独立地选自-H和C1-6烷基；其中C1-6烷基任选被一个或多个相同或不同的卤素取代。
在一些实施方案中，-L2-是C1-20烷基链，其任选被一个或多个独立地选自如下的基团所间隔：-O-、-T′-和-C(O)N(Ry1)-；和所述C1-20烷基链任选被一个或多个独立地选自如下的基团取代：-OH、-T′和-C(O)N(Ry6Ry6a)；其中-Ry1、-Ry6、-Ry6a独立地选自H和C1-4烷基，和其中T′选自苯基、萘基、茚基、茚满基、四氢萘基、C3-10环烷基、3-至10-元杂环基、8-至11-元杂双环基、8-至30-元碳多环基和8-至30-元杂多环基。
在一些实施方案中，-L2-具有14g/mol至750g/mol的分子量范围。
在一些实施方案中，-L2-包含选自如下的部分：
Figure GDA0003827209340000621
其中虚线指分别与-L1-、-L2-的剩余部分或Z的连接；-R和-Ra独立地选自-H、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、2-甲基丁基、2,2-二甲基丙基、正己基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、2,2-二甲基丁基、2,3-二甲基丁基和3,3-二甲基丙基。
在一些实施方案中，-L2-包含选自如下的部分：
Figure GDA0003827209340000622
在一些实施方案中，-L2-具有1至20个原子的链长。
如本文所用的与-L2-部分有关的术语“链长”指-L1-和-Z之间的最短结合中存在的-L2-的原子数。
通常，-L2-可以在任意位置与-L1-或-L*-连接，其中式(I)或(II)的-R1、-R1a、-R2、-R2a、-R3、-R3a、-R4、-R4a、-R5、-R5a、-R6、-R6a、-R7、-R8、-R8a、-R9、-R10、-R11、-R11a、-R11b、-R12、-R12a、-R13、-R14、-R14a、-R15、-R15a和-R15b的一个氢被-L2-替换。
在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R1的一个氢被-L2-替换。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R1a的一个氢被-L2-替换。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R2的一个氢被-L2-替换。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R2a的一个氢被-L2-替换。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R3的一个氢被-L2-替换。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R3a的一个氢被-L2-替换。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R4的一个氢被-L2-替换。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R4a的一个氢被-L2-替换。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R5的一个氢被-L2-替换。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R5a的一个氢被-L2-替换。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R6的一个氢被-L2-替换。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R6a的一个氢被-L2-替换。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R7的一个氢被-L2-替换。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R8的一个氢被-L2-替换。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R8a的一个氢被-L2-替换。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R9的一个氢被-L2-替换。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R10的一个氢被-L2-替换。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R11的一个氢被-L2-替换。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R11a的一个氢被-L2-替换。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R11b的一个氢被-L2-替换。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R12的一个氢被-L2-替换。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R12a的一个氢被-L2-替换。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R12b的一个氢被-L2-替换。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R13的一个氢被-L2-替换。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R14的一个氢被-L2-替换。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R14a的一个氢被-L2-替换。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R15的一个氢被-L2-替换。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R15a的一个氢被-L2-替换。在一些实施方案中，式(I)或(II)的-R15b的一个氢被-L2-替换。
在一些实施方案中，Z和-L2-之间的连接基是稳定的链接。
在一些实施方案中，Z是C8-24烷基部分。
在一些实施方案中，Z是水溶性的。
在一些实施方案中，Z是水溶性聚合物部分。
如果Z是水溶性聚合物部分，该聚合物部分具有1kDa至1000kDa且包括端值的分子量范围。在一些实施方案中，Z具有5kDa至1000kDa且包括端值的分子量范围。在一些实施方案中，Z具有5kDa至500kDa且包括端值的分子量范围。在一些实施方案中，Z具有10kDa至250kDa且包括端值的分子量范围。在一些实施方案中，Z具有10kDa至150kDa且包括端值的分子量范围。在一些实施方案中，Z具有12kDa至100kDa且包括端值的分子量范围。在一些实施方案中，Z具有15kDa至80kDa且包括端值的分子量范围。在一些实施方案中，Z具有10kDa至80kDa且包括端值的分子量范围。
在一些实施方案中，Z具有的分子量为约80kDa。在一些实施方案中，Z具有的分子量为约70kDa。在一些实施方案中，Z具有的分子量为约60kDa。在一些实施方案中，Z具有的分子量为约50kDa。在一些实施方案中，Z具有的分子量为约40kDa。在一些实施方案中，Z具有的分子量为约30kDa。在一些实施方案中，Z具有的分子量为约20kDa。在一些实施方案中，Z具有的分子量为约10kDa。在一些实施方案中，Z具有的分子量为约5kDa。
在一些实施方案中，Z是包含选自如下的聚合物的水溶性聚合物部分：2-异丁烯酰基-氧基乙基磷酰基胆碱、聚丙烯酸、聚丙烯酸酯、聚丙烯酰胺、聚烷基氧基聚合物、聚酰胺、聚酰胺型胺、聚氨基酸、聚酐、聚天冬酰胺、聚丁酸、聚乙醇酸、聚对苯二甲酸丁二酯、聚己酸内酯、聚碳酸酯、聚氰基丙烯酸酯、聚二甲基丙烯酰胺、聚酯、聚乙烯、聚乙二醇、聚氧化乙烯、聚磷酸乙酯、聚(乙基噁唑啉)、聚乙醇酸、聚(羟基乙基丙烯酸酯)、聚(羟基乙基-噁唑啉)、聚(羟基甲基丙烯酸酯)、聚(羟基丙基甲基丙烯酰胺)、聚(羟基丙基甲基丙烯酸酯)、聚(羟基丙基噁唑啉)、聚(亚胺碳酸酯)、聚乳酸、聚乳酸-乙醇酸共聚物、聚甲基丙烯酰胺、聚甲基丙烯酸酯、聚甲基噁唑啉、聚有机磷腈、聚原酸酯、聚噁唑啉、聚丙二醇、聚硅氧烷、聚氨酯、聚乙烯醇、聚乙烯胺、聚乙烯基甲基醚、聚乙烯吡咯烷酮、硅酮、纤维素、羧甲基纤维素(carbomethyl celluloses)、羟丙基甲基纤维素、壳多糖、壳聚糖、葡聚糖、糊精、明胶、透明质酸和衍生物、官能化透明质酸、甘露聚糖、果胶、鼠李半乳糖醛酸聚糖(rhamnogalacturonans)、淀粉、羟烷基淀粉、羟乙基淀粉及其它基于碳水化合物的聚合物、木聚糖及其共聚物。
在一些实施方案中，Z是包含蛋白质的水溶性聚合物部分，例如选自如下的蛋白质：US 2012/0035101 A1中所述的绒毛膜促性腺激素的羧基端肽，该文献通过引用并入本文；白蛋白；如WO 2011123813 A2中所述的XTEN序列，该文献通过引用并入本文；如WO2011/144756 A1中所述的脯氨酸/丙氨酸无规卷曲序列，该文献通过引用并入本文；如WO2008/155134 A1和WO 2013/024049 A1中所述的脯氨酸/丙氨酸/丝氨酸无规卷曲序列，该文献通过引用并入本文；和Fc-融合蛋白质。
在一些实施方案中，Z是聚肌氨酸。
在一些实施方案中，Z包括聚(N-甲基甘氨酸)。
在一些实施方案中，Z包括无规卷曲蛋白质部分。
在一些实施方案中，这类无规卷曲蛋白质部分包含至少25个氨基酸残基和至多2000个氨基酸。在一些实施方案中，这类无规卷曲蛋白质部分包含至少30个氨基酸残基和至多1500个氨基酸残基。在一些实施方案中，这类无规卷曲蛋白质部分包含至少50个氨基酸残基和至多500个氨基酸残基。
在一些实施方案中，Z包含这样的无规卷曲蛋白质部分：其中形成所述无规卷曲蛋白质部分的氨基酸总数的至少80％、在一些实施方案中至少85％、在一些实施方案中至少90％、在一些实施方案中至少95％、在一些实施方案中至少98％和在一些实施方案中至少99％选自丙氨酸和脯氨酸。在一些实施方案中，这类无规卷曲蛋白质部分的氨基酸残基总数的至少10％、但少于75％、在一些实施方案中少于65％是脯氨酸残基。在一些实施方案中，这类无规卷曲蛋白质部分如WO 2011/144756 A1中所述，该文献通过引用整体并入本文。
在一些实施方案中，Z包含这样的无规卷曲蛋白质部分：其中形成所述无规卷曲蛋白质部分的氨基酸总数的至少80％、在一些实施方案中至少85％、在一些实施方案中至少90％、在一些实施方案中至少95％、在一些实施方案中至少98％和在一些实施方案中至少99％选自丙氨酸、丝氨酸和脯氨酸。在一些实施方案中，这类无规卷曲蛋白质部分的氨基酸残基总数的至少4％、但少于40％为脯氨酸残基。在一些实施方案中，这类无规卷曲蛋白质部分如WO 2008/155134 A1中所述，该文献通过引用整体并入本文。
在一些实施方案中，Z包含这样的无规卷曲蛋白质部分：其中形成所述无规卷曲蛋白质部分的氨基酸总数的至少80％、在一些实施方案中至少85％、在一些实施方案中至少90％、在一些实施方案中至少95％、在一些实施方案中至少98％和在一些实施方案中99％选自丙氨酸、甘氨酸、丝氨酸、苏氨酸、谷氨酸和脯氨酸。在一些实施方案中，这类无规卷曲蛋白质部分如WO 2010/091122 A1中所述，该文献通过引用并入本文。
在一些实施方案中，Z是基于透明质酸的聚合物。
在一些实施方案中，Z是如WO 2013/024047 A1中所述的聚合物部分，该文献通过引用并入本文。
在一些实施方案中，Z是如WO 2013/024048 A1中所述的聚合物部分，该文献通过引用并入本文。
在一些实施方案中，Z是基于PEG的聚合物、例如线性、分支或多臂基于PEG的聚合物。
在一些实施方案中，Z是线性基于PEG的聚合物。
在一些实施方案中，Z是具有一个、两个、三个、四个、五个或六个分支点的分支C8-24烷基。在一些实施方案中，Z是具有一个、两个或三个分支点的分支C8-24烷基。在一些实施方案中，Z是具有一个分支点的分支C8-24烷基。在一些实施方案中，Z是具有两个分支点的分支C8-24烷基。在一些实施方案中，Z是具有三个分支点的分支C8-24烷基。
在一些实施方案中，Z是分支聚合物。在一些实施方案中，Z是具有一个、两个、三个、四个、五个或六个分支点的分支聚合物。在一些实施方案中，Z是具有一个、两个或三个分支点的分支聚合物。在一些实施方案中，Z是具有一个分支点的分支聚合物。在一些实施方案中，Z是具有两个分支点的分支聚合物。在一些实施方案中，Z是具有三个分支点的分支聚合物。
在一些实施方案中，分支点选自-N<、-CH<和>C<。
在一些实施方案中，这类分支Z部分是基于PEG的。
在一些实施方案中，Z是多臂基于PEG的聚合物。
在一些实施方案中，Z是具有至少2个基于PEG的臂、例如2、3、4、5、6、7或8个基于PEG的臂的多臂基于PEG的聚合物。
在一些实施方案中，Z是包含至少10％PEG的分支基于PEG的聚合物，具有一个分支点和两个基于PEG的聚合物臂，和具有约40kDa的分子量。因此，两个基于PEG的聚合物臂各自具有约20kDa的分子量。在一些实施方案中，分支点是-CH<。
在一些实施方案中，Z是包含至少10％PEG的分支基于PEG的聚合物，具有三个分支点和四个基于PEG的聚合物臂，和具有约40kDa的分子量。因此，四个基于PEG的聚合物臂各自具有约10kDa的分子量。在一些实施方案中，三个分支点各自是-CH<。
在一些实施方案中，Z是水不溶性的。
在一些实施方案中，Z是水不溶性聚合物部分。
在一些实施方案中，Z是包含选自如下的聚合物的水不溶性聚合物部分：2-异丁烯酰基-氧基乙基磷酰基胆碱、聚丙烯酸、聚丙烯酸酯、聚丙烯酰胺、聚烷基氧基聚合物、聚酰胺、聚酰胺型胺、聚氨基酸、聚酐、聚天冬酰胺、聚丁酸、聚乙醇酸、聚对苯二甲酸丁二酯、聚己酸内酯、聚碳酸酯、聚氰基丙烯酸酯、聚二甲基丙烯酰胺、聚酯、聚乙烯、聚乙二醇、聚氧化乙烯、聚磷酸乙酯、聚(乙基噁唑啉)、聚乙醇酸、聚(羟基乙基丙烯酸酯)、聚(羟基乙基-噁唑啉)、聚(羟基甲基丙烯酸酯)、聚(羟基丙基甲基丙烯酰胺)、聚(羟基丙基甲基丙烯酸酯)、聚(羟基丙基噁唑啉)、聚(亚胺碳酸酯)、聚乳酸、聚乳酸-乙醇酸共聚物、聚甲基丙烯酰胺、聚甲基丙烯酸酯、聚甲基噁唑啉、聚有机磷腈、聚原酸酯、聚噁唑啉、聚丙二醇、聚硅氧烷、聚氨酯、聚乙烯醇、聚乙烯胺、聚乙烯基甲基醚、聚乙烯吡咯烷酮、硅酮、纤维素、羧甲基纤维素(carbomethyl celluloses)、羟丙基甲基纤维素、壳多糖、壳聚糖、葡聚糖、糊精、明胶、透明质酸和衍生物、官能化透明质酸、甘露聚糖、果胶、鼠李半乳糖醛酸聚糖(rhamnogalacturonans)、淀粉、羟烷基淀粉、羟乙基淀粉及其它基于碳水化合物的聚合物、木聚糖及其共聚物。
在一些实施方案中，Z是水凝胶。
在一些实施方案中，Z是基于PEG的或基于透明质酸的水凝胶。在一些实施方案中，Z是基于PEG的水凝胶。在一些实施方案中，Z是基于透明质酸的水凝胶。
在一些实施方案中，Z是如WO 2006/003014 A2、WO 2011/012715 A1或WO 2014/056926 A1中所述的水凝胶，所述文献通过引用整体并入本文。
在一些实施方案中，Z是如WO 2013/036847 A1中所述的水凝胶。特别地，在一些实施方案中，Z是通过包括如下步骤的方法生产的水凝胶：使至少第一种反应活性聚合物与可裂解交联化合物反应，其中所述可裂解交联化合物包含与第一种反应活性聚合物反应的第一种官能团-Y1和还包含在生理条件下通过消除而裂解的部分，其中所述部分包含与第二种反应活性聚合物反应的第二种官能团-Y2。在一些实施方案中，可裂解交联化合物具有式(PL-1)：
Figure GDA0003827209340000681
其中
m是0或1；
-X包含可在生理条件下消除的能够与反应活性聚合物结合的官能团和所述第二种官能团-Y2；
-R1、-R2和-R5中的至少一个包含能够与聚合物结合的所述第一种官能团-Y1；
-R1和-R2中的一个且仅一个选自-H、烷基、芳基烷基和杂芳基烷基；
任选地，-R1和-R2可以一起形成3-至8-元环；
-R1和-R2中至少一个或两个独立地选自-CN、-NO2、芳基、杂芳基、烯基、炔基、-COR3、-SOR3、-SO2R3和-SR4；
-R3选自-H、烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、-OR9和-NR9 2；
-R4选自烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基和杂芳基烷基；
每个-R5独立地选自-H、烷基、烯基烷基、炔基烷基、(OCH2CH2)pO-烷基且p为1至1000的整数、芳基、芳基烷基、杂芳基和杂芳基烷基；
每个-R9独立地选自-H和烷基，或者两个-R9与它们所连接的氮一起形成杂环；
和其中式(PL-1)的部分是任选进一步被取代的。
以下段落更详细地描述了这类水凝胶。
在一些实施方案中，式(PL-1)的-X选自琥珀酰亚氨基碳酸酯、磺基琥珀酰亚氨基碳酸酯卤化物、硫醚、酯、硝基苯基碳酸酯、氯甲酸酯、氟甲酸酯、任选取代的苯酚和式(PL-2)：
Figure GDA0003827209340000682
其中
虚线表示与式(PL-1)的剩余部分连接；
-T*-选自-O-、-S-和-NR6-；
z是选自1、2、3、4、5和6的整数；
-X’-不存在或选自-OR7-和-SR7-；
-Y2是能够与反应活性聚合物结合的官能团；
-R6选自-H,烷基、芳基、杂芳基、芳基烷基和杂芳基烷基；和
-R7选自亚烷基、亚苯基和(OCH2CH2)p，其中p为1至1000的整数。
在一些实施方案中，式(PL-1)的-X包含活化碳酸酯，例如琥珀酰亚氨基碳酸酯、磺基琥珀酰亚氨基碳酸酯或硝基苯基碳酸酯。在一些实施方案中，式(PL-1)的-X包含羰基卤，例如O(C＝O)Cl或O(C＝O)F。在一些实施方案中，式(PL-1)的-X具有式(PL-2)。在一些实施方案中，式(PL-1)的-X是OR7或SR7，其中R7是任选取代的亚烷基、任选取代的亚苯基或(OCH2CH2)p，其中p是1至1000。
在一些实施方案中，式(PL-2)的p是1至100的整数。在一些实施方案中，式(PL-2)的p是1至10的整数。
在一些实施方案中，式(PL-1)的-Y1和式(PL-2)的-Y2独立地包含N3、NH2、NH-CO2 tBu、SH、StBu、马来酰亚胺、CO2H、CO2 tBu、1,3-二烯、环戊二烯、呋喃、炔、环辛炔、丙烯酸酯或丙烯酰胺，其中tBu是叔丁基，和其中当-Y1或-Y2之一包含N3时，另一个不包含炔或环辛炔；当-Y1或-Y2之一包含SH时，另一个不包含马来酰亚胺、丙烯酸酯或丙烯酰胺；当-Y1或-Y2之一包含NH2时，另一个不包含CO2H；和当-Y1或-Y2之一包含1,3-二烯或环戊二烯时，另一个不包含呋喃。
在一些实施方案中，可裂解交联化合物具有式(PL-3)：
Figure GDA0003827209340000691
其中
m是0或1；
n是选自1至1000的整数；
s是0、1或2；
t选自2、4、8、16和32；
-W-选自-O(C＝O)O-、-O(C＝O)NH-、-O(C＝O)S-、-O(C＝O)NR6CH2O-和-O(C＝O)NR6S-；
-Q是化合价＝t的核心基团；其结合可裂解交联化合物的多个臂；
其中t是选自2、4、8、16和32的整数；和
其中-R1、-R2和-R5如式(PL-1)中所定义。
在一些实施方案中，式(PL-3)的t是2。在一些实施方案中，式(PL-3)的t是4。在一些实施方案中，式(PL-3)的t是8。在一些实施方案中，式(PL-3)的t是16。在一些实施方案中，式(PL-3)的t是32。
在一些实施方案中，式(PL-3)的-Q具有选自如下的结构：
Figure GDA0003827209340000701
其中虚线指与可裂解交联化合物的剩余部分连接。
在一些实施方案中，式(PL-3)的-Q具有结构(PL-3-i)。在一些实施方案中，式(PL-3)的-Q具有结构(PL-3-ii)。在一些实施方案中，式(PL-3)的-Q具有结构(PL-3-iii)。
在一些实施方案中，可裂解交联化合物具有式(PL-3)，其中m是0，n是大约100，s是0，t是4，-W-是-O(C＝O)NH-，-Q具有结构(PL-3i)，-R2是H，一个-R5是-H和另一个-R5是(CH2)5N3，和-R1是(4-氯苯基)SO2、被-SO2取代的苯基、吗啉代-SO2、或-CN。
在一些实施方案中，式(PL-3)的-Y1包含N3、NH2、NH-CO2 tBu、SH、StBu、马来酰亚胺、CO2H、CO2 tBu、1,3-二烯、环戊二烯、呋喃、炔、环辛炔、丙烯酸酯或丙烯酰胺，其中tBu是叔丁基。
在一些实施方案中，式(PL-1)或(PL-3)的每个-Y1和式(PL-2)的-Y2独立地包含N3、NH2、NH-CO2 tBu、SH、StBu、马来酰亚胺、CO2H、CO2 tBu、1,3-二烯、环戊二烯、呋喃、炔、环辛炔、丙烯酸酯或丙烯酰胺。
在一些实施方案中，-Y1和-Y2之一是叠氮，且另一个是选自乙炔、环辛炔和马来酰亚胺的反应活性官能团。在一些实施方案中，-Y1和-Y2之一是硫羟，且另一个是选自马来酰亚胺、丙烯酸酯、丙烯酰胺、乙烯基砜、乙烯基磺酰胺基和卤代羰基的反应活性官能团。在一些实施方案中，-Y1和-Y2之一是胺，且另一个是选自羧酸和活化羧酸的选择性反应活性官能团。在一些实施方案中，-Y1和-Y2之一是马来酰亚胺，且另一个是选自1,3-二烯、环戊二烯和呋喃的选择性反应活性官能团。
在一些实施方案中，第一种和任意第二种聚合物选自均聚或共聚的聚乙二醇、聚丙二醇、聚(N-乙烯基吡咯烷酮)、聚甲基丙烯酸酯、聚磷腈(polyphosphazenes)、聚交酯、聚丙烯酰胺、聚乙醇酸盐(polyglycolates)、聚乙烯亚胺、琼脂糖、葡聚糖、明胶、胶原、聚赖氨酸、壳聚糖、海藻酸盐、透明质烷、果胶和角叉菜胶，它们包含适宜的反应活性官能团或具有式[Y3-(CH2)s(CH2CH2O)n]tQ，其中-Y3是反应活性官能团，s是0、1或2，n是选自10至1000的整数，-Q是具有化合价t的核心基团，且t是选自2、4、8、16和32的整数。
在一些实施方案中，第一种聚合物包含多臂聚合物。在一些实施方案中，第一种聚合物包含至少三个臂。在一些实施方案中，第一种聚合物包含至少四个臂。在一些实施方案中，第一种聚合物包含至少五个臂。在一些实施方案中，第一种聚合物包含至少六个臂。在一些实施方案中，第一种聚合物包含至少七个臂。在一些实施方案中，第一种聚合物包含至少八个臂。
在一些实施方案中，第二种聚合物包含多臂聚合物。在一些实施方案中，第二种聚合物包含至少三个臂。在一些实施方案中，第二种聚合物包含至少四个臂。在一些实施方案中，第二种聚合物包含至少五个臂。在一些实施方案中，第二种聚合物包含至少六个臂。在一些实施方案中，第二种聚合物包含至少七个臂。在一些实施方案中，第二种聚合物包含至少八个臂。
在一些实施方案中，第一种聚合物包含2-臂聚乙二醇聚合物。在一些实施方案中，第一种聚合物包含4-臂聚乙二醇聚合物。在一些实施方案中，第一种聚合物包含8-臂聚乙二醇聚合物。在一些实施方案中，第一种聚合物包含16-臂聚乙二醇聚合物。在一些实施方案中，第一种聚合物包含32-臂聚乙二醇聚合物。
在一些实施方案中，第二种聚合物包含2-臂聚乙二醇聚合物。在一些实施方案中，第二种聚合物包含4-臂聚乙二醇聚合物。在一些实施方案中，第二种聚合物包含8-臂聚乙二醇聚合物。在一些实施方案中，第二种聚合物包含16-臂聚乙二醇聚合物。在一些实施方案中，第二种聚合物包含32-臂聚乙二醇聚合物。
在一些实施方案中，第一种和第二种反应活性聚合物顺序或同时与所述可裂解交联化合物反应。
在一些实施方案中，第一种和第二种官能团是相同的。
仅仅在(PL-1)、(PL-2)和(PL-3)中，所用术语具有以下含义：
术语“能够在生理条件下通过消除而裂解的部分”指包含基团H-C-(CH＝CH)m-C-X’的结构，其中m是0或1，且X’是离去基，其中如上所述除去HX’元素的消除反应可以以使得在pH和温度的生理条件下的反应半衰期为1至10,000小时的速率进行。优选地，在pH和温度的生理条件下的反应半衰期为1至5,000小时、更优选1至1,000小时。pH和温度的生理条件指7至8的pH和30至40摄氏度的温度。
术语“反应活性聚合物和反应活性寡聚物”指这样的聚合物或寡聚物：其包含对其它官能团具有反应活性的官能团，更优选在可与肽、蛋白质和其它生物分子的稳定性要求相容的温和条件下。在反应活性聚合物中发现的适宜的官能团包括马来酰亚胺、硫羟或被保护的硫羟、醇、丙烯酸酯、丙烯酰胺、胺或被保护的胺、羧酸或被保护的羧酸、叠氮、炔且包括环炔、1,3-二烯且包括环戊二烯和呋喃、α-卤代羰基和N-羟基琥珀酰亚氨基、N-羟基磺基琥珀酰亚氨基或硝基苯基酯或碳酸酯。
术语“能够与反应活性聚合物结合的官能团”指与反应活性聚合物的相应官能团反应以形成与聚合物的共价键合的官能团。适宜的能够与反应活性聚合物结合的官能团包括马来酰亚胺、硫羟或被保护的硫羟、丙烯酸酯、丙烯酰胺、胺或被保护的胺、羧酸或被保护的羧酸、叠氮、炔且包括环炔、1,3-二烯且包括环戊二烯和呋喃、α-卤代羰基和N-羟基琥珀酰亚氨基、N-羟基磺基琥珀酰亚氨基、或硝基苯基酯或碳酸酯。
术语“取代的”指烷基、烯基、炔基、芳基或杂芳基基团包含一个或多个取代基代替一个或多个氢原子。取代基通常可以选自：卤素，包括F、CI、Br和I；低级烷基，包括线性、分支和环状；低级卤代烷基，包括氟烷基、氯烷基、溴烷基和碘烷基；OH；低级烷氧基，包括线性、分支和环状；SH；低级烷基硫基，包括线性、分支和环状；氨基、烷基氨基、二烷基氨基、硅烷基且包括烷基硅烷基、烷氧基硅烷基和芳基硅烷基；硝基；氰基；羰基；羧酸、羧酸酯、羧酸酰胺；氨基羰基；氨基酰基；氨甲酸酯；脲；硫代氨甲酸酯；硫脲；酮；磺基；磺酰胺；芳基，包括苯基、萘基和蒽基；杂芳基，包括5-元杂芳基，包括例如吡咯、咪唑、呋喃、噻吩、噁唑、噻唑、异噁唑、异噻唑、噻二唑、三唑、噁二唑和四唑，6-元杂芳基，包括吡啶、嘧啶、吡嗪，和稠合杂芳基，包括苯并呋喃、苯并噻吩、苯并噁唑、苯并咪唑、吲哚、苯并噻唑、苯并异噁唑和苯并异噻唑。
R1和R2的性质可以通过供电子或吸电子取代基的任选加成进行改变。术语“供电子基团”指导致R1R2CH的酸度降低的取代基；供电子基团通常与负性Hammettσ或Taftσ*常数相关，是物理有机化学领域熟知的(Hammett常数指芳基/杂芳基取代基，Taft常数指非芳族部分上的取代基)。适宜的供电子取代基的实例包括低级烷基、低级烷氧基、低级烷基硫基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基和硅烷基。
术语“吸电子基团”指导致R1R2CH的酸度增加的取代基；吸电子基团通常与正性Hammettσ或Taftσ*常数相关，是物理有机化学领域熟知的。适宜的吸电子取代基的实例包括卤素、二氟甲基、三氟甲基、硝基、氰基、C(＝O)-Rx，其中-Rx是H、低级烷基、低级烷氧基或氨基，或S(O)mRY，其中m是1或2且-RY是低级烷基、芳基或杂芳基。如本领域熟知的，取代基的电子影响可取决于取代基的位置。例如，芳基环的邻位或对位上的烷氧基取代基是供电子的，通过负性Hammettσ常数表征，而芳基环的间位上的烷氧基取代基是吸电子的，通过正性Hammettσ常数表征。
术语“烷基”、“烯基”和“炔基”包括1-8个碳或1-6个碳或1-4个碳的线性、分支或环状烃基团，其中烷基是饱和烃，烯基包括一条或多条碳-碳双键，和炔基包括一条或多条碳-碳叁键。除非另有说明，否者这些含有1-6个碳。
术语“芳基”包括6-18个碳、优选6-10个碳的芳族烃基团，包括诸如苯基、萘基和蒽基的基团。术语“杂芳基”包括包含3-15个碳的含有至少一个N、O或S原子的芳族环，优选包含3-7个碳的含有至少一个N、O或S原子，包括诸如吡咯基、吡啶基、嘧啶基、咪唑基、噁唑基、异噁唑基、噻唑基、异噻唑基、喹啉基、吲哚基、茚基等的基团。
术语“卤素”包括氟、氯、溴和碘。
术语“马来酰亚胺”是具有下式的基团：
Figure GDA0003827209340000741
在一些实施方案中，Z是如WO 2020/206358 A1中所述的水凝胶。特别地，在一些实施方案中，Z是通过包括下述步骤的方法产生的水凝胶：
(a)提供包含多臂聚合物-P2的第一种预聚物，其中所述第一种预聚物具有式(PL-4)
Figure GDA0003827209340000742
其中
n是选自0、1、2、3、4、5和6的整数；
r是高于2的整数；
-Y是用于将所述第一种预聚物与第二种预聚物结合的反应活性官能团；
-R1和-R2独立地是吸电子基团、烷基或-H，和其中-R1和-R2是中的至少一个是吸电子基团；
每个-R4独立地是C1-C3烷基，或者两个-R4与它们所连接的碳原子一起形成3-至6-元环；
-W-不存在或者是
Figure GDA0003827209340000751
其中标有星号的虚线表示与-NH-连接，未标记的虚线表示与-P2连接；
x、y和z各自独立地是选自0、1、2、3、4、5和6的整数；
-B’是-NH2、-ONH2、酮、醛、-SH、-OH、-CO2H、氨甲酰基团或包含环辛炔或双环壬炔的基团；和
-C*是氨甲酰、硫醚、硫代琥珀酰亚氨基、三唑或肟；
(b)提供包含多臂聚合物-P1的第二种预聚物，其中每个臂的末端是与步骤(a)的-Y反应的反应活性官能团-Y”；
(c)在其中-Y和-Y”反应形成链接-Y*-的条件下将步骤(a)和(b)的两种预聚物混合；和任选地
(d)分离所得水凝胶。
因此，-Z是可通过上述方法获得的水凝胶。在一些实施方案中，通过前述方法产生的水凝胶是可降解的。
在一些实施方案中，-Y和-Y”在步骤(c)中反应形成包含式(PL-4′)的交联的不溶性水凝胶基质：
Figure GDA0003827209340000752
其中n、r、-P1、-Y*-、-R4、-R1、-R2、-W-和-P2如上文所定义。
在一些实施方案中，式(PL-4)或(PL-4′)的n是选自1、2、3、4、5和6的整数。在一些实施方案中，式(PL-4)或(PL-4′)的n是选自1、2和3的整数。在一些实施方案中，式(PL-4)或(PL-4′)的n是选自0、1、2和3的整数。在一些实施方案中，式(PL-4)或(PL-4′)的n是1。在一些实施方案中，式(PL-4)的n是2。在一些实施方案中，式(PL-4)或(PL-4′)的n是3。
在一些实施方案中，式(PL-4)或(PL-4′)的多臂-P2是r-臂聚合物，其中r是选自2、3、4、5、6、7、8、9、10、11和12的整数。在一些实施方案中，式(PL-4)或(PL-4′)的r是选自2、3、4、5、6、7和8的整数。在一些实施方案中，式(PL-4)或(PL-4′)的r是选自2、4、6和8的整数。在一些实施方案中，式(PL-4)或(PL-4′)的r是2。在一些实施方案中，式(PL-4)或(PL-4′)的r是4。在一些实施方案中，式(PL-4)或(PL-4′)的r是6。在一些实施方案中，式(PL-4)或(PL-4′)的r是8。
在一些实施方案中，式(PL-4)或(PL-4′)的-P2具有至少1kDa的分子量。在一些实施方案中，式(PL-4)或(PL-4′)的-P2具有1至100kDa的分子量。在一些实施方案中，式(PL-4)或(PL-4′)的-P2具有1至80kDa的分子量。在一些实施方案中，式(PL-4)或(PL-4′)的-P2具有1至60kDa的分子量。在一些实施方案中，式(PL-4)或(PL-4′)的-P2具有1至40kDa的分子量。在一些实施方案中，式(PL-4)或(PL-4′)的-P2具有1至20kDa的分子量。在一些实施方案中，式(PL-4)或(PL-4′)的-P2具有1至10kDa的分子量。在一些实施方案中，式(PL-4)或(PL-4′)的-P2具有1至5kDa的分子量。在一些实施方案中，式(PL-4)或(PL-4′)的-P2具有约20kDa的分子量。在一些实施方案中，式(PL-4)或(PL-4′)的-P2具有约40kDa的分子量。在一些实施方案中，式(PL-4)或(PL-4′)的-P2具有约60kDa的分子量。在一些实施方案中，式(PL-4)或(PL-4′)的-P2具有约80kDa的分子量。
在一些实施方案中，步骤(b)的多臂聚合物-P1是r-臂聚合物，其中r是选自2、3、4、5、6、7、8、9、10、11和12的整数。在一些实施方案中，步骤(b)的多臂-P1是r-臂聚合物，其中r是选自2、3、4、5、6、7和8的整数。在一些实施方案中，步骤(b)的多臂-P1是r-臂聚合物，其中r是选自2、4、6和8的整数。在一些实施方案中，步骤(b)的多臂-P1是r-臂聚合物，其中r是2。在一些实施方案中，步骤(b)的多臂-P1是r-臂聚合物，其中r是4。在一些实施方案中，步骤(b)的多臂-P1是r-臂聚合物，其中r是6。在一些实施方案中，步骤(b)的多臂-P1是r-臂聚合物，其中r是8。
在一些实施方案中，步骤(b)的-P1具有至少1kDa的分子量。在一些实施方案中，步骤(b)的多臂聚合物-P1具有1至100kDa的分子量。在一些实施方案中，步骤(b)的多臂聚合物-P1具有1至80kDa的分子量。在一些实施方案中，步骤(b)的多臂聚合物-P1具有1至60kDa的分子量。在一些实施方案中，步骤(b)的多臂聚合物-P1具有1至40kDa的分子量。在一些实施方案中，步骤(b)的多臂聚合物-P1具有1至20kDa的分子量。在一些实施方案中，步骤(b)的多臂聚合物-P1具有1至10kDa的分子量。在一些实施方案中，步骤(b)的多臂聚合物-P1具有1至5kDa的分子量。在一些实施方案中，步骤(b)的多臂聚合物-P1具有约20kDa的分子量。在一些实施方案中，步骤(b)的多臂聚合物-P1具有约40kDa的分子量。在一些实施方案中，步骤(b)的多臂聚合物-P1具有约60kDa的分子量。在一些实施方案中，步骤(b)的多臂聚合物-P1具有约80kDa的分子量。
在一些实施方案中，步骤(b)的-P1和式(PL-4)或(PL-4′)的-P2包含聚乙二醇(PEG)、聚氧化乙烯(PEO)、聚乙烯亚胺(PEI)、葡聚糖、透明质酸或其共聚物。在一些实施方案中，步骤(b)的-P1和式(PL-4)或(PL-4′)的P2是基于PEG的聚合物。在一些实施方案中，步骤(b)的-P1和式(PL-4)或(PL-4′)的-P2是基于透明质酸的聚合物。
在一些实施方案中，式(PL-4)或(PL-4′)的-R1和-R2独立地是吸电子基团、烷基或-H，和其中-R1和-R2中的至少一个是吸电子基团。
在一些实施方案中，式(PL-4)或(PL-4′)的-R1和-R2的吸电子基团是-CN、-NO2、任选取代的芳基、任选取代的杂芳基、任选取代的烯基、任选取代的炔基、-COR3、-SOR3或-SO2R3，其中-R3是-H、任选取代的烷基、任选取代的芳基、任选取代的芳基烷基、任选取代的杂芳基、任选取代的杂芳基烷基、-OR8或-NR8 2，其中每个-R8独立地是-H或任选取代的烷基，或者两个-R8基团与它们所连接的氮一起形成杂环；或-SR9，其中-R9是任选取代的烷基、任选取代的芳基、任选取代的芳基烷基、任选取代的杂芳基或任选取代的杂芳基烷基。
在一些实施方案中，式(PL-4)或(PL-4′)的-R1和-R2的吸电子基团是-CN。在一些实施方案中，式(PL-4)或(PL-4′)的-R1和-R2的吸电子基团是-NO2。在一些实施方案中，式(PL-4)或(PL-4′)的-R1和-R2的吸电子基团是任选取代的含6-10个碳的芳基。在一些实施方案中，式(PL-4)或(PL-4′)的-R1和-R2的吸电子基团是任选取代的苯基、萘基或蒽基。在一些实施方案中，式(PL-4)或(PL-4′)的-R1和-R2的吸电子基团是任选取代的含3-7个碳和含至少一个N、O或S原子的杂芳基。在一些实施方案中，式(PL-4)或(PL-4′)的-R1和-R2的吸电子基团是任选取代的吡咯基、吡啶基、嘧啶基、咪唑基、噁唑基、异噁唑基、噻唑基、异噻唑基、喹啉基、吲哚基或茚基。在一些实施方案中，式(PL-4)或(PL-4′)的-R1和-R2的吸电子基团是任选取代的含2-20个碳原子的烯基。在一些实施方案中，式(PL-4)或(PL-4′)的-R1和-R2的吸电子基团是任选取代的含2-20个碳原子的炔基。在一些实施方案中，式(PL-4)或(PL-4′)的-R1和-R2的吸电子基团是-COR3、-SOR3或-SO2R3，其中R3是-H、任选取代的含1-20个碳原子的烷基、任选取代的芳基、任选取代的芳基烷基、任选取代的杂芳基、任选取代的杂芳基烷基、-OR8或-NR8 2，其中每个-R8独立地是-H或任选取代的含1-20个碳原子的烷基，或者两个-R8基团与它们所连接的氮一起形成杂环。在一些实施方案中，式(PL-4)或(PL-4′)的-R1和-R2的吸电子基团是-SR9，其中-R9是任选取代的含1-20个碳原子的烷基、任选取代的芳基、任选取代的芳基烷基、任选取代的杂芳基或任选取代的杂芳基烷基。在一些实施方案中，-R1和-R2中的至少一个是-CN或-SO2R3。
在一些实施方案中，式(PL-4)或(PL-4′)的-R1和-R2中的至少一个是-CN、-SOR3或-SO2R3。在一些实施方案中，式(PL-4)或(PL-4′)的-R1和-R2中的至少一个是-CN或-SO2R3。在一些实施方案中，式(PL-4)或(PL-4′)的-R1和-R2中的至少一个是-CN或-SO2R3，其中-R3是任选取代的烷基、任选取代的芳基或-NR8 2。在一些实施方案中，式(PL-4)或(PL-4′)的-R1和-R2中的至少一个是-CN、-SO2N(CH3)2、-SO2CH3、被-SO2取代的苯基、被-SO2和-Cl取代的苯基、-SO2N(CH2CH2)2O、-SO2CH(CH3)2、-SO2N(CH3)(CH2CH3)或-SO2N(CH2CH2OCH3)2。
在一些实施方案中，式(PL-4)或(PL-4′)的每个-R4独立地是C1-C3烷基一起可以形成3-至6-元环。在一些实施方案中，式(PL-4)或(PL-4′)的每个-R4独立地是C1-C3烷基。在一些实施方案中，式(PL-4)或(PL-4′)的两个-R4是甲基。
在一些实施方案中，-Y和-Y”独立地选自胺、氨基氧基、酮、醛、马来酰亚氨基、硫羟、醇、叠氮、1,2,4,6-四嗪、反式环辛烯基、双环壬炔基、环辛炔基及其被保护的变体。
在一些实施方案中，Y和Y”可以相互反应，例如以选择性方式。例如，当-Y是胺时，-Y”是羧酸、活性酯或活性碳酸酯以产生残留的结合官能团-Y*-，其为酰胺或氨甲酸酯。作为另一个实例，当-Y是叠氮时，-Y”是炔基、双环壬炔基或环辛炔基以产生残留的结合官能团-Y*-，其为是1,2,3-三唑。作为另一个实例，当-Y是NH2O时，-Y”是酮或醛以产生残留的结合官能团-Y*-，其为肟。作为另一个实例，当-Y是SH时，-Y”是马来酰亚胺或卤代羰基以产生残留的结合官能团-Y*-，其为硫代琥珀酰亚氨基或硫醚。类似地，-Y和-Y”的这些作用可以倒转，以产生相反方向的-Y*-。
在一些实施方案中，-Y*-包含酰胺、肟、1,2,3-三唑、硫醚、硫代琥珀酰亚胺或醚。在一些实施方案中，-Y*-是-L2-。
这些结合反应可以在本领域已知的条件下进行，例如当-Y是叠氮且Y”是环辛炔时，结合可以在其中组分都显示出足够溶解度的任意溶剂中发生，尽管已知水溶液显示出更有利的反应速率。当在适当的溶剂、通常是水性缓冲液(当Y和Y”是叠氮/环辛炔时pH为2至7和当Y和Y”为活化酯和胺时pH为6至9)中混合时，Y和Y”基团反应形成包含式(PL-4′)交联的不溶性水凝胶基质。该过程可以在原料相中进行，或者在混合有机/水系统中在乳化条件下进行以形成适合注射的微粒混悬液如微球。
仅仅在式(PL-4)和(PL-4′)中，所用术语具有如下含义：
术语“烷基”指1-20个、1-12个、1-8个、1-6个或1-4个碳原子的线性、分支或环状饱和烃基团。在一些实施方案中，烷基是线性或分支的。线性或分支烷基基团的实例包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、异丁基、仲丁基、正戊基、正己基、正庚基、正辛基、正壬基和正癸基。在一些实施方案中，烷基是环状的。环状烷基基团的实例包括环丙基、环丁基、环戊基、环戊二烯基和环己基。
术语“烷氧基”指与氧键合的烷基基团，包括甲氧基、乙氧基、异丙氧基、环丙氧基和环丁氧基。
术语“烯基”指具有碳-碳双键和2-20个、2-12个、2-8个、2-6个或2-4个碳原子的非芳族不饱和烃。
术语“炔基”指具有碳-碳叁键和2-20个、2-12个、2-8个、2-6个或2-4个碳原子的非芳族不饱和烃。
术语“芳基”指6-18个碳、优选6-10个碳的芳族烃基团，包括诸如苯基、萘基和蒽基的基团。术语“杂芳基”指包含3-15个碳的包含至少一个N、O或S原子、优选3-7个碳的包含至少一个N、O或S原子的芳族环，包括诸如吡咯基、吡啶基、嘧啶基、咪唑基、噁唑基、异噁唑基、噻唑基、异噻唑基、喹啉基、吲哚基和茚基的基团。
在一些实施方案中，烯基、炔基、芳基或杂芳基部分可以通过烷基链接偶联至分子的剩余部分。在那些情况下，取代基将被称为烯基烷基、炔基烷基、芳基烷基或杂芳基烷基，表示亚烷基部分在烯基、炔基、芳基或杂芳基部分和所述烯基、炔基、芳基或杂芳基偶联的分子之间。
术语“卤素”或“卤代”指溴、氟、氯或碘。
术语“杂环”或“杂环基”指包含至少一个N、O或S原子的3-至15-元芳族或非芳族环。实例包括哌啶基、哌嗪基、四氢吡喃基、吡咯烷和四氢呋喃基以及上文对术语“杂芳基”提供的示例性基团。在一些实施方案中，杂环或杂环基是非芳族的。在一些实施方案中，杂环或杂环基是芳族的。
术语“任选取代”指基团可以是未被取代的或者被一个或多个(例如1、2、3、4或5个)可以相同或不同的取代基取代。取代基的实例包括烷基、烯基、炔基、卤素、-CN、-ORaa、-SRaa、-NRaaRbb、-NO2、-C＝NH(ORaa)、-C(O)Raa、-OC(O)Raa、-C(O)ORaa、-C(O)NRaaRbb、-OC(O)NRaaRbb、-NRaaC(O)Rbb、-NRaaC(O)ORbb、-S(O)Raa、-S(O)2Raa、-NRaaS(O)Rbb、-C(O)NRaaS(O)Rbb、-NRaaS(O)2Rbb、-C(O)NRaaS(O)2Rbb、-S(O)NRaaRbb、-S(O)2NRaaRbb、-P(O)(ORaa)(ORbb)、杂环基、杂芳基或芳基，其中所述烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环基、杂芳基和芳基各自独立地任选被-Rcc取代，其中-Raa和-Rbb各自独立地是-H、烷基、烯基、炔基、杂环基、杂芳基或芳基，或者-Raa和-Rbb与它们所连接的氮原子一起形成杂环基，所述杂环基任选被烷基、烯基、炔基、卤素、羟基、烷氧基或-CN取代，和其中：每个-Rcc独立地是烷基、烯基、炔基、卤素、杂环基、杂芳基、芳基、-CN或-NO2。
在一些实施方案中，Z是通过聚合物链的物理聚集形成的聚合物网络，所述物理聚集优选通过氢键、结晶、螺旋形成或络合引起。在一些实施方案中，这类聚合物网络是热凝胶聚合物(thermogelling polymer)。
在一些实施方案中，Z包含选自如下的部分：
Figure GDA0003827209340000801
Figure GDA0003827209340000811
在一些实施方案中，本发明的结合物或其可药用盐具有式(Ia)、(b)、(c)或(Id)：
Figure GDA0003827209340000812
其中
每个-D、-L2-和Z如上文所定义，和每个-L1-独立地具有式(I)；
x是至少为1的整数；和
y是选自2、3、4和5的整数。
可以理解，尽管一个-D可以结合多个-L1-部分，相应的药物部分出于简化用“-D”表示，药物用“D-H”表示。
在一些实施方案中，结合物具有式(Ia)、(Ic)或(Id)，且Z是水凝胶。在这类情况中，Z包含多个-L2-L1-D部分，并且可以理解，对于x可以不提供上限。
在一些实施方案中，结合物具有式(Ia)。在一些实施方案中，结合物具有式(Ib)。在一些实施方案中，结合物具有式(Ic)。在一些实施方案中，结合物具有式(Id)。在一些实施方案中，结合物具有式(Ia)且x＝1。
在一些实施方案中，结合物具有式(Ia)且Z是水凝胶。
在一些实施方案中，结合物具有式(Ia)、(Ic)或(Id)，Z是水溶性聚合物部分，且x为2至1000、例如2至1500、例如2至1000、例如2至500、例如2至250或例如2至100的范围。在一些实施方案中，结合物具有式(Ia)、(Ic)或(Id)，Z是水溶性聚合物部分，且x是20。
在一些实施方案中，结合物具有式(Ia)、(Ic)或(Id)，Z是水溶性聚合物部分，且x是19。在一些实施方案中，结合物具有式(Ia)、(Ic)或(Id)，Z是水溶性聚合物部分，且x是18。在一些实施方案中，结合物具有式(Ia)、(Ic)或(Id)，Z是水溶性聚合物部分，且x是17。在一些实施方案中，结合物具有式(Ia)、(Ic)或(Id)，Z是水溶性聚合物部分，且x是16。在一些实施方案中，结合物具有式(Ia)、(Ic)或(Id)，Z是水溶性聚合物部分，且x是15。在一些实施方案中，结合物具有式(Ia)、(Ic)或(Id)，Z是水溶性聚合物部分，且x是14。在一些实施方案中，结合物具有式(Ia)、(Ic)或(Id)，Z是水溶性聚合物部分，且x是13。在一些实施方案中，结合物具有式(Ia)、(Ic)或(Id)，Z是水溶性聚合物部分，且x是12。在一些实施方案中，结合物具有式(Ia)、(Ic)或(Id)，Z是水溶性聚合物部分，且x是11。在一些实施方案中，结合物具有式(Ia)、(Ic)或(Id)，Z是水溶性聚合物部分，且x是10。在一些实施方案中，结合物具有式(Ia)、(Ic)或(Id)，Z是水溶性聚合物部分，且x是9。在一些实施方案中，结合物具有式(Ia)、(Ic)或(Id)，Z是水溶性聚合物部分，且x是8。在一些实施方案中，结合物具有式(Ia)、(Ic)或(Id)，Z是水溶性聚合物部分，且x是7。在一些实施方案中，结合物具有式(Ia)、(Ic)或(Id)，Z是水溶性聚合物部分，且x是6。在一些实施方案中，结合物具有式(Ia)、(Ic)或(Id)，Z是水溶性聚合物部分，且x是5。在一些实施方案中，结合物具有式(Ia)、(Ic)或(Id)，Z是水溶性聚合物部分，且x是4。在一些实施方案中，结合物具有式(Ia)、(Ic)或(Id)，Z是水溶性聚合物部分，且x是3。在一些实施方案中，结合物具有式(Ia)、(Ic)或(Id)，Z是水溶性聚合物部分，且x是2。
在一些实施方案中，结合物具有式(Ib)，Z是水溶性聚合物部分，且y是1。在一些实施方案中，结合物具有式(Ib)，Z是水溶性聚合物部分，且y是2。在一些实施方案中，结合物具有式(Ib)，Z是水溶性聚合物部分，且y是3。在一些实施方案中，结合物具有式(Ib)，Z是水溶性聚合物部分，且y是4。在一些实施方案中，结合物具有式(Ib)，Z是水溶性聚合物部分，且y是5。
本发明的结合物历经延长的时间释放一种或多种类型的药物，即，它们是缓释结合物。在一些实施方案中，发生释放，其释放半衰期范围为1天至4个月。在一些实施方案中，发生释放，其释放半衰期范围为2天至2个月。在一些实施方案中，发生释放，其释放半衰期范围为4天至2个月。在一些实施方案中，释放半衰期范围还可以为6天至1个月、7天至40天、4天至15天或3天至7天。
在一些实施方案中，用于合成本发明的结合物的方法的步骤(d)和(e)不是任选的。
在一些实施方案中，至少一个Z部分的结合不是任选的。
在一些实施方案中，至少一个Z部分与至少一个中间体(A)在步骤(b)和(c)之间结合。在一些实施方案中，至少一个Z部分与至少一个中间体(A)在步骤(c)和(d)之间结合。在一些实施方案中，至少一个Z部分与至少一个中间体(A)在步骤(c)和(f)之间结合。在一些实施方案中，步骤(d)和(e)不是任选的，并且至少一个Z部分与至少一个中间体(B)在步骤(d)和(e)之间结合。在一些实施方案中，步骤(e)不是任选的，并且至少一个Z部分与至少一个中间体(B)在步骤(e)和(f)之间结合。
在一些实施方案中，至少一个Z部分在步骤(b)期间结合。在一些实施方案中，至少一个Z部分在步骤(c)期间结合。在一些实施方案中，步骤(d)不是任选的，并且至少一个Z部分在步骤(d)期间结合。在一些实施方案中，步骤(e)不是任选的，并且至少一个Z部分在步骤(e)期间结合。
在一些实施方案中，一个Z部分在步骤(b)期间结合。在一些实施方案中，一个Z部分在步骤(c)期间结合。在一些实施方案中，步骤(d)不是任选的，并且一个Z部分在步骤(d)期间结合。在一些实施方案中，步骤(e)不是任选的，并且一个Z部分在步骤(e)期间结合。
在一些实施方案中，中间体(A)在步骤(c)之前分离。在一些实施方案中，步骤(d)不是任选的，并且中间体(B)在步骤(d)之前分离。在一些实施方案中，步骤(d)和(e)不是任选的，并且中间体(B)在步骤(e)之前分离。
在一些实施方案中，由步骤(c)、(d)或(e)产生的结合物或中间体通过离子交换色谱法纯化。
在一些实施方案中，在方法的步骤(a)中，试剂包含式(II)的连接基-L*-，其中-L*-被一个-L2-Y部分取代，步骤(b)导致形成中间体(A)，所述中间体(A)在接受脱保护条件和Z之前分离出。
在一些实施方案中，在方法的步骤(a)中，试剂包含式(II)的连接基-L*-，其中-L*-被一个-L2-Y部分取代，步骤(b)导致形成中间体(A)，所述中间体(A)与Z结合。
在一些实施方案中，方法的步骤(b)的含伯胺或仲胺的药物是肽或蛋白质。在一些实施方案中，方法的步骤(b)的含伯胺或仲胺的药物是蛋白质。
在一些实施方案中，本发明的方法的步骤(d)不是任选的。在一些实施方案中，本发明的方法的步骤(e)不是任选的。
在一些实施方案中，脱保护条件指包含缓冲剂的溶液。
在一些实施方案中，迁移条件指包含缓冲剂的溶液。
示例性的缓冲剂可以选自组氨酸、1,3-二氨基丙烷、2-(N-吗啉代)乙磺酸(MES)、2-双(2-羟基乙基)氨基-2-(羟基甲基)-1,3-丙烷二醇(BIS-TRIS)、乙酸、己二酸、氨、精氨酸、硼酸、碳酸、柠檬酸、二乙醇胺、乙醇胺、乙二胺、甲酸、葡糖酸、戊二酸、甘氨酸、甘氨酰胺、胍、组胺、咪唑、赖氨酸、苹果酸、N-(2-羟基-1,1-双(羟基甲基)乙基)甘氨酸(TRICINE)、N-(2-羟基乙基)哌嗪-N′-(2-乙磺酸)(HEPES)、N-[三(羟基甲基)甲基]-2-氨基乙磺酸(TES)、磷酸、哌嗪、丙酸、丙酮酸、亚精胺、精胺、琥珀酸、丙醇二酸、三乙醇胺(TEA)、氨丁三醇(TRIS)、酪氨酸及其混合物。
在一些实施方案中，脱保护条件指pH不高于10的包含缓冲剂的溶液。在一些实施方案中，脱保护条件指pH为约3至约9的包含缓冲剂的溶液。在一些实施方案中，脱保护条件指pH为约4至约8的包含缓冲剂的溶液。在一些实施方案中，脱保护条件指pH为约5至约7的包含缓冲剂的溶液。在一些实施方案中，脱保护条件指pH为约6的包含缓冲剂的溶液。在一些实施方案中，脱保护条件指pH为约7的包含缓冲剂的溶液。在一些实施方案中，脱保护条件指pH为约7.4的包含缓冲剂的溶液。在一些实施方案中，脱保护条件指pH为7.4的包含缓冲剂的溶液。
在一些实施方案中，迁移条件指pH为约5至约9的包含缓冲剂的溶液。在一些实施方案中，迁移条件指pH为约6至约8的包含缓冲剂的溶液。在一些实施方案中，迁移条件指pH为约7的包含缓冲剂的溶液。在一些实施方案中，迁移条件指pH为约7.4的包含缓冲剂的溶液。在一些实施方案中，迁移条件指pH为7.4的包含缓冲剂的溶液。
在一些实施方案中，脱保护条件涉及包含缓冲剂和清除剂的溶液。
示例性的清除剂可以选自磷酸铵、乙酰基赖氨酸、间甲酚、二硫苏糖醇、1,2乙二硫醇、肼、羟胺、咪唑、2-巯基吡啶、4-巯基吡啶、2-甲氧基苯酚、4-甲氧基苯酚、吗啉、苯酚、哌嗪、脯氨酸、硫苯胺、茴香硫醚、N,N,N’-三甲基乙二胺、三乙基甲硅烷、三异丙基甲硅烷和三(羟基甲基)甲胺。
在一些实施方案中，脱保护条件指包含缓冲剂和N,N,N’-三甲基乙二胺的溶液。
在一些实施方案中，脱保护条件指包含有机溶剂、例如极性质子溶剂或极性非质子溶剂的溶液。
在一些实施方案中，脱保护条件指包含有机溶剂和酸的溶液。
在一些实施方案中，酸是三氟乙酸。在一些实施方案中，酸是盐酸。
在一些实施方案中，脱保护条件指包含有机溶剂和碱的溶液。
在一些实施方案中，碱是1,8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯(DBU)。在一些实施方案中，碱是哌啶。
在一些实施方案中，脱保护条件指包含极性非质子溶剂的溶液。
示例性的非极性质子溶剂可以选自二甲基亚砜、1,2-二甲氧基醚、1,3-二甲基-2-咪唑烷酮、1,3-二氧戊环、1,4-二噁烷、2,5-二甲基四氢呋喃、2-甲基四氢呋喃、4-乙酰基吗啉、4-丙酰基吗啉、丙酮、乙腈、碳酸二乙基酯、二乙基醚、碳酸二甲基酯、乙酸乙酯、甲酸乙酯、乳酸乙基酯、碳酸亚乙酯、γ-丁内酯、γ-戊内酯、六甲基磷酰胺、乙酸甲酯、碳酸甲基酯、单甲基醚乙酸酯、N,N′-二甲基丙烯脲、N,N-二甲基乙酰胺、N,N-二甲基甲酰胺、N-甲酰基吗啉、N-甲基-2-吡咯烷酮、碳酸丙烯酯、环丁砜、四氢呋喃、四氢吡喃、三吡咯烷磷酸三酰胺及其混合物。
在一些实施方案中，脱保护条件指包含极性质子溶剂的溶液。
示例性的极性质子溶剂可以选自乙醇、1,4-丁二醇、乙酸、环己醇、二甘醇、二甘醇单乙基醚、二甘醇单甲基醚、乙二胺、乙二醇、乙二醇单乙基醚、乙二醇单甲基醚、甲酰胺、甲酸、甘油、异丁醇、异丙醇、甲磺酸、甲醇、正丁醇、正己醇、正戊醇、正丙醇、丙酸、丙二胺、丙二醇、丙二醇单乙基醚、丙二醇单甲基醚、仲丁醇、叔丁醇、三乙二醇单乙基醚、三乙二醇单甲基醚、三乙二醇、三氟乙酸、水及其混合物。
在一些实施方案中，脱保护条件还用于迁移条件。
本发明的另一方面是包含至少一种本发明的结合物或其药用盐的药物组合物。
在一些实施方案中，药物组合物包含至少一种本发明的结合物或其药用盐、例如一种结合物。在一些实施方案中，药物组合物包含两种本发明的结合物。在一些实施方案中，药物组合物包含三种本发明的结合物。
这类药物组合物可以具有pH 3至pH 8、例如pH 4至pH 6或pH 4至pH 5的pH范围。在一些实施方案中，药物组合物的pH是约4。在一些实施方案中，药物组合物的pH是约4.5。在一些实施方案中，药物组合物的pH是约5。在一些实施方案中，药物组合物的pH是约5.5。
在一些实施方案中，药物组合物的pH是4。在一些实施方案中，药物组合物的pH是4.5。在一些实施方案中，药物组合物的pH是5。在一些实施方案中，药物组合物的pH是5.5。
在一些实施方案中，这类药物组合物是混悬剂制剂。
在一些实施方案中，这类药物是干组合物。可以理解，这类干组合物可以通过将混悬剂组合物干燥、例如冷冻干燥来获得。
如果药物组合物是胃肠外组合物，适宜的赋形剂可以分类为例如缓冲剂、等张调节剂、防腐剂、稳定剂、抗吸收剂、氧化保护剂、粘度剂/增粘剂、抗凝聚剂或其它辅料。但是，在一些情况中，一种赋形剂可以具有双重或三重功能。赋形剂可以选自：
(i)缓冲剂：生理耐受的缓冲剂以维持pH在预期范围，例如磷酸钠、碳酸氢盐、琥珀酸盐、组氨酸、柠檬酸盐和乙酸盐、硫酸盐、硝酸盐、氯化物、丙酮酸盐；也可以使用抗酸剂，例如Mg(OH)2或ZnCO3；
(ii)等张调节剂：以使得在注射贮库处由于渗透压差引起的细胞损伤到会的疼痛最轻；实例有甘油和氯化钠；有效浓度可以通过渗透压测定法、使用假定的血清渗透压浓度285-315mOsmol/kg来确定；
(iii)防腐剂和/或抗菌剂：多剂量胃肠外制剂需要添加足以使患者在注射后感染的风险最低的浓度的防腐剂，已经制定了相应的监管要求；典型的防腐剂包括间甲酚、苯酚、尼泊金甲酯、尼泊金乙酯、尼泊金丙酯、尼泊金丁酯、氯丁醇、苯甲醇、硝酸苯汞、硫柳汞(thimerosol)、山梨酸、山梨酸钾、苯甲酸、氯甲酚和苯扎氯铵；
(iv)稳定剂：通过加强蛋白质稳定力、破坏变性状态或通过赋形剂与蛋白质直接结合来实现稳定；稳定剂可以是氨基酸如丙氨酸、精氨酸、天冬氨酸、甘氨酸、组氨酸、赖氨酸、脯氨酸，糖如葡萄糖、蔗糖、海藻糖，多元醇如甘油、甘露醇、山梨醇，盐如磷酸钾、硫酸钠，螯合剂如EDTA、六磷酸盐，配体如二价金属离子(锌、钙等)，其它盐或有机分子如酚衍生物；此外，还可以使用低聚物或聚合物如环糊精、葡聚糖、树枝状聚合物、PEG或PVP或鱼精蛋白或HAS；
(v)抗吸附剂：主要使用离子型或非离子型表面活性剂或其它蛋白质或可溶性聚合物来包覆或竞争吸附到制剂容器的内表面；例如，泊洛沙姆(Pluronic F-68)、PEG十二烷基醚(苄泽35)、聚山梨酯20和80、葡聚糖、聚乙二醇、PEG-聚组氨酸、BSA和HSA以及明胶；选择的赋形剂浓度和类型取决于要避免的作用，但是通常在刚好高于CMC值的界面处形成单层表面活性剂；
(vi)氧化保护剂：抗氧化剂，例如抗坏血酸、依克多因(ectoine)、蛋氨酸、谷胱甘肽、一硫代甘油、桑色素、聚乙烯亚胺(PEI)、没食子酸丙酯和维生素E；也可以使用螯合剂如柠檬酸、EDTA、六磷酸盐和巯基乙酸。
(vii)增粘剂或粘度增加剂：延迟小瓶和注射器中颗粒的沉降，用于促进颗粒的混合和再混悬以及使混悬液更易于注射(即注射器柱塞上的力较小)；适宜的增粘剂或粘度增加剂是例如卡波姆增粘剂如Carbopol 940、Carbopol Ultrez 10、纤维素衍生物如羟丙基甲基纤维素(羟丙甲纤维素、HPMC)或二乙基氨基乙基纤维素(DEAE或DEAE-C)、胶体硅酸镁(Veegum)或硅酸钠、羟基磷灰石凝胶、磷酸三钙凝胶、黄原胶、角叉菜胶如Satia胶UTC30、脂肪族聚羟基酸如聚D,L-或L-乳酸(PLA)和聚乙醇酸(PGA)和它们的共聚物(PLGA)，D,L-丙交酯、乙交酯和己内酯的三元共聚物，泊洛沙姆、亲水性聚氧乙烯嵌段和疏水性聚氧丙烯嵌段以构成聚氧乙烯-聚氧丙烯-聚氧乙烯的三嵌段(例如
Figure GDA0003827209340000881
)、聚醚酯共聚物，例如聚对苯二甲酸乙二醇酯/聚对苯二甲酸丁二醇酯共聚物、乙酸异丁酸蔗糖酯(SAIB)、葡聚糖或其衍生物、葡聚糖和PEG的组合、聚二甲基硅氧烷、胶原蛋白、壳聚糖、聚乙烯醇(PVA)及其衍生物、聚烷基酰亚胺、聚(丙烯酰胺-共-二烯丙基二甲基铵(DADMA))、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、糖胺聚糖(GAGs)如硫酸皮肤素、硫酸软骨素、硫酸角质素、肝素、硫酸乙酰肝素、透明质酸，由疏水性A嵌段如聚丙交酯(PLA)或聚丙交酯-乙交酯(PLGA)和亲水性B嵌段如聚乙二醇(PEG)或聚乙烯吡咯烷酮组成的ABA三嵌段或AB嵌段共聚物，这类嵌段共聚物以及上述泊洛沙姆可表现出逆热凝胶行为(在室温下呈流体状态以促进施用，在注射后体温下高于溶液-凝胶转变温度呈凝胶状态)；
(viii)散布剂或扩散剂：通过细胞间隙中细胞外基质组分的水解来改变结缔组织的通透性，例如透明质酸(一种在结缔组织的细胞间隙中发现的多糖)；扩散剂如透明质酸酶暂时性地降低细胞外基质的粘度和促进注射药物的扩散；
(ix)抗凝聚剂，例如丙二醇；和
(x)其它助剂：例如润湿剂、粘度调节剂、抗生素、透明质酸酶；酸和碱如盐酸和氢氧化钠是制备过程中调节pH值所必需的助剂。
在另一方面，本发明涉及用作药剂的本发明的结合物或者包含本发明的结合物的药物组合物。
在另一方面，本发明涉及本发明的结合物或其可药用盐或者包含本发明的结合物的药物组合物，用于治疗可用D-H或其可药用盐治疗的疾病的方法中。
在另一方面，本发明涉及预防可用D-H治疗的疾病或治疗患有可用D-H治疗的疾病的方法，该方法包括给患者施用有效量的本发明的结合物或其可药用盐或者包含所述结合物的药物组合物。
由于本发明应用于所有包含伯胺或仲胺的药物分子，所以不可能具体说明可以治疗的疾病。但是，哪种疾病可用特定的结合物治疗对于本领域技术人员而言是显而易见的。
实施例
材料和方法
化学品
所有材料购买获得，另有说明除外。
单克隆抗体CTLA-4 mAB(AMO-M6104,CAS No.477202-00-9)从AbMole BioscienceInc.,Houston,Texas,US获得。
Figure GDA0003827209340000891
按惯例制得，来源于外部供应商，其中蛋白质的表达由E.coli按照本领域技术人员已知的标准纯化策略进行。
反应
用从德国曼海姆Sigma-Aldrich Chemie GmbH购买的无水溶剂(CH2Cl2、DMSO、DMF、THF、乙腈)进行反应。通常，将反应物于室温搅拌，通过LCMS监测。
RP-HPLC纯化
用具有2487 Dual Absorbance Detector或Agilent Infinity 1260制备系统的Waters 600控制器、采用Waters XBridge BEH300 Prep C18 10μm,150x30mm柱作为固定相进行了制备型RP-HPLC纯化。于215nm检测产物。使用溶剂系统A(含0.1％TFA v/v的水)和溶剂系统B(含0.1％TFA v/v的乙腈)的线性梯度。
将含产物的HPLC级分汇集并进行冷冻干燥，另有说明除外。
快速色谱法
在来自瑞典Biotage AB的Isolera One系统上采用Biotage KP-Sil硅胶柱进行快速色谱法纯化。于254nm或280nm检测产物。
RP-LPLC纯化
在来自瑞典Biotage AB的Isolera One系统上采用Biotage SNAP C18柱上进行低压RP色谱法纯化。于215nm和280nm检测产物。溶剂系统A(含0.1％TFA v/v的水)和溶剂系统B(含0.1％TFA v/v的乙腈)的线性梯度。将含产物的HPLC级分汇集并进行冷冻干燥，另有说明除外。
UPLC-MS分析
在Waters Acquity系统或Agilent 1290Infinity II上进行分析型超效LC(UPLC)-MS，所述仪器装配有Waters BEH300 C18柱(2.1x50mm,1.7μm粒度或2.1x100mm,1.7μm粒度)；溶剂A：含0.05％TFA(v/v)的水,溶剂B：含0.04％TFA(v/v)的乙腈，偶联至WatersMicromass ZQ或偶联至Agilent Single Quad MS系统。
OPA分析
通过使游离氨基与邻苯二醛(OPA)和N-乙酰基半胱氨酸在碱性条件下反应和对所形成的发色团进行光度定量，确定了胺-HA的胺含量，方法如Molnár-Perl(Ed.)(2015),Journal of Chromatography Library 70:405-444中所述。
水凝胶混悬剂中的干水凝胶含量
通过用水和绝对乙醇连续洗涤具有PE玻璃料的注射式反应器中的代表性混悬液等分式样和随后将固体水凝胶部分真空干燥，确定了水凝胶混悬液的含量。由每个注射器的水凝胶残余物的质量和各自的水凝胶混悬液等分式样体积计算了水凝胶含量。
MTS负载定量
在通过TCEP还原除去MTS基团后，通过Ellman分析对水凝胶上的游离硫羟进行定量，从而确定了适当水凝胶的MTS负载。测定在具有PE玻璃料的注射式反应器中用MTS-水凝胶混悬液的等分式样进行。通过使用混悬液的水凝胶含量，计算了干水凝胶的MTS负载。
Ellman分析
通过使游离化合物硫羟基团与DTNB试剂在中性pH下反应和对释放的5-硫羟基-2-硝基苯甲酸(TNB)进行光度测定，确定了在水性系统中可以是可溶的或不溶的化合物的硫羟含量，方法如G.L.Ellman(1959),Archives of Biochemistry and Biophysics 82:70-77中所述。
逆Ellman分析
通过用过量2-巯基乙醇在中性条件下使马来酰亚胺基团淬灭，确定了在水性系统中可以是可溶的或不溶的化合物的马来酰亚胺含量。通过分析测定了剩余的未反应的硫羟试剂的量。在总硫醇和反应后残余硫醇中加入的2-巯基乙醇的量的差异用于计算化合物的马来酰亚胺含量。
蛋白质浓度测定
在Tecan Infinite M200上采用UV-cuvette micro(neoLAB)和以下条件进行了蛋白质溶液的浓度测定：光程长1cm；吸收波长280nm；吸收波长带宽5nm；参比波长338nm；参比波长带宽25nm；闪烁次数25。HHCMET的消光系数:ε＝2.052mL/(mg*cm)。通过采用HHCMET的消光系数测定含HHCMET的结合物混合物的浓度。CTLA-4 mAB的消光系数:ε＝1.53mL/(mg*cm)。通过采用CTLA-4 mAB的消光系数测定含CTLA-4 mAB的结合物混合物的浓度。
实施例1
被保护的二氨基醇1c的合成
按照以下流程合成了1c：
Figure GDA0003827209340000911
根据WO 2018/175788 A1实施例1A合成了1b，用作TFA盐。
将1b(352mg,0.61mmol)溶于乙腈(2.50mL)中，将溶液在冰浴中冷却。加入DIPEA(242μL,1.39mmol)，将反应物混合。将1,3-二氨基-2-丙醇(25mg,0.28mmol)溶于乙腈(1.00mL)中，加入反应物中。将反应物混合，在冰浴中冷却。
5分钟后的反应对照指示反应完全。
约15分钟后，将TFA(106μL,1.39mmol)加入冰冷的反应物中。将反应物用4ml含0.1％TFA的水稀释。产物1c经RP-HPLC纯化。
产量：204mg(84％,2x TFA盐)
MS:m/z 647.34＝[M+H]+,(计算值＝647.34)。
连接基试剂1i的合成
按照以下流程合成了1i：
Figure GDA0003827209340000921
根据WO 2018/175788 A1实施例1E合成了1d。
将1d(800mg,3.53mmol)、HOSu(610mg,5.30mmol)和EDC(1.02g,5.30mmol)溶于二氯甲烷(9.6ml)中。加入DIPEA(616μl,3.53mmol)。1小时候，反应显示未完全转化为产物，75分钟后向反应中加入HOSu(203mg,1.77mmol)和EDC(339mg,1.77mmol)。135分钟后，将反应物用100ml乙酸乙酯稀释，用130ml 1M盐酸洗涤三次。分离有机相，经MgSO4干燥，过滤和减压浓缩。将所得粗品在高真空下干燥过夜。粗品经RP-HPLC纯化，产生1e。
产量：913mg(80％)
MS:m/z 346.02＝[M+Na]+,(计算值＝346.04)。
将N-Me-Asp(OtBu)-OH(100mg,0.49mmol)混悬于二氯甲烷(0.5ml)中，加入1e(239mg,0.74mmol)在二氯甲烷(0.5ml)中的溶液。加入DIPEA(171μL,0.98mmol)。95分钟后，将反应用171μl乙酸淬灭，在氩气流中除去挥发物。粗品经RP-HPLC纯化，产生1f。
产量：235mg(97％)
MS:m/z 412.07＝[M+H]+,(计算值＝412.15)。
将1c(150mg,171μmol)溶于乙腈(4mL)中。加入1f(85mg,206μmol)和DMAP(42mg,343μmol)并溶解。在搅拌下加入DIC(106μL,686μmol)，反应物搅拌30分钟。反应物用4ml1％TFA水溶液淬灭和过滤。滤液经RP-HPLC纯化，产生1g。
产量：151mg(69％,2x TFA盐)
MS:m/z 520.74＝[M+2H]2+,(计算值＝520.74)。
将1g(90mg,71μmol)溶于二氯甲烷(1mL)中，将溶液在开口烧瓶中剧烈搅拌。以一批加入TFA(1mL)。将反应物搅拌45分钟，在氮气流中除去挥发物。将残余物溶于250μl乙腈中，在10ml二乙醚中沉淀。将反应烧瓶用250μl无水乙腈冲洗，加入醚混悬液中。将混悬液离心，移去上清液。将沉淀物在氮气流中短暂干燥，产生1h(2x TFA盐)。
将1h溶于1ml二氯甲烷和1ml乙腈中。将HOSu(25mg,213μmol)、EDC(41mg,213μmol)和DMAP(0.87mg,7.1μmol)加入反应物中。30分钟后，将反应体积在氮气流中减少至1ml。1小时候，加入HOSu(25mg,213μmol)和EDC(41mg,213μmol)。2小时候，将3ml含0.1％TFA的水加入反应物中。通过添加60μl TFA在乙腈/水1:1中的10％溶液将pH调节至<pH 2。通过RP-HPLC从粗反应混合物中纯化出产物，产生1i。
产量：83mg(90％,2x TFA盐)
MS:m/z 1081.42＝[M+H]+,(计算值＝1081.42)。
实施例2
泛素-连接基-PEG20k结合物2b的合成：
Figure GDA0003827209340000941
将来自牛红细胞的在pH7.4 60mM磷酸钠缓冲液中的泛素(157μl,12.75mg/ml)与1i在DMSO中的溶液(4.86μl,0.1M)混合。将反应物于室温孵育10分钟，通过添加39.3μl pH3琥珀酸钠缓冲液(0.5M)将反应物的pH迁移为约4进行淬灭。为了从蛋白质结合物混合物中除去未结合的连接基，采用装配有GE HiTrap柱的
Figure GDA0003827209340000942
纯系统以2ml/min的流速将缓冲液更换为5mM琥珀酸钠pH 4。收集到1.5ml产物级分，其含有泛素和泛素连接基结合物2a。
将9.3mg mPEG硫羟20kDa(Sunbright ME-200SH)溶于产物级分中，向反应物中加入225μl含200mM TriMED的pH7.8 0.5M磷酸钠缓冲液以促进保护基的裂解和酯2a重排为酰胺2b。将反应物混合，于25℃孵育20小时。
将泛素-连接基-PEG20k单结合物经离子交换色谱法、在连接有
Figure GDA0003827209340000943
pure系统的GE Healthcare source 15S 4.6/100 PE柱上纯化。将反应物用水10倍稀释至20ml的体积，通过添加50μL TFA在水中的10％溶液将pH调节至约4。对于色谱法，使用20mM乙酸钠,10mM蛋氨酸pH 4作为缓冲液A，20mM乙酸钠,10mM蛋氨酸0.5M NaCl pH 4.5用作缓冲液B，梯度为历经13个柱体积0-50％缓冲液B。将总反应体积以4个5ml进样上柱，以单个运行洗脱。在2ml级分中发现了纯的PEG单结合物。采用3个HiTrap柱系列将级分的缓冲液替换为PBS pH7.4。采用Vivaspin Turbo 4 MWCO 5000将所得3ml级分浓缩至0.4ml，于-20℃储存。
实施例3
被保护的二氨基醇3a-c的合成
按照以下流程合成了3a：
Figure GDA0003827209340000951
将在THF(536μL,2M,1.07mmol)和二氯甲烷(5mL)中的二甲基胺溶液于室温搅拌。向反应物中加入DIPEA(204μL,1.17mmol)、Boc-Ser-OH(200mg,0.97mmol)、HOBt(198mg,1.46mmol)和EDC(224mg,1.17mmol)。将反应物搅拌23小时。将反应物用5ml二氯甲烷稀释，用饱和碳酸氢盐、5％柠檬酸、水和盐水(各1x)洗涤。每次洗涤用5ml DCM反萃取。将合并的有机相干燥(MgSO4)，过滤和真空浓缩。所得Boc-Ser-NMe2未经进一步纯化用于下一步骤。
产量：140mg(62％)
MS:m/z 232.96＝[M+H]+,(计算值＝233.15)。
将来自最后步骤的粗品(74mg,0.32mmol)溶于THF(0.4mL)和甲苯(0.2mL)中，在冰浴中在氮气气氛下搅拌。滴加双(2-甲氧基乙氧基)氢化铝钠(70％w/w在甲苯中,445μL,1.6mmol)，有气体产物。4小时候，将反应物用1M NaOH水溶液(0.65mL)淬灭。将反应物于室温搅拌30分钟。将反应物用TFA酸化(pH<2)。过滤出白色沉淀物，用含0.1％TFA的乙腈/水1:1(约1.5ml)洗涤。滤液经RP-HPLC纯化，产生3a。
产量：61mg(57％,TFA盐)
MS:m/z 219.17＝[M+H]+,(计算值＝219.17)。
按照以下流程合成了3b：
Figure GDA0003827209340000961
将在THF(536μL,2M,1.07mmol)和二氯甲烷(5mL)中的二甲基胺溶液于室温搅拌。向反应物中加入DIPEA(204μL,1.17mmol)、(S)-3-((叔丁氧羰基)氨基)-2-羟基丙酸(200mg,0.97mmol)、HOBt(198mg,1.46mmol)和EDC(224mg,1.17mmol)。将反应物搅拌19小时。将反应物用5ml DCM稀释，用饱和碳酸氢盐、5％柠檬酸、水和盐水(各1x 5ml)洗涤。每次洗涤用5ml DCM反萃取。将有机相干燥(MgSO4)，过滤和真空浓缩。所得中间体未经进一步纯化用于下一步骤。
产量：204mg(90％)
MS:m/z 233.15＝[M+H]+,(计算值＝233.15)。
将来自最后步骤的粗品(204mg,0.88mmol)溶于THF(1mL)和甲苯(0.5mL)中，在冰浴中在氮气气氛中搅拌。滴加双(2-甲氧基乙氧基)氢化铝钠(70％w/w在甲苯中,1.22mL,4.39mmol)，有气体产生。3小时候，将反应用1M NaOH水溶液(1.63mL)淬灭。将反应物于室温搅拌30分钟。将水层用5ml二乙醚萃取3x。将醚层用10ml 0.64M HCl水溶液萃取，通过RP-HPLC从酸性水相中分离出产物，产生3b。
产量：173mg(59％,TFA盐)
MS:m/z 219.17＝[M+H]+,(计算值＝219.17)。
按照以下流程合成了3c：
Figure GDA0003827209340000962
将H-Dpr(Boc)-OMe HCl盐(200mg,0.79mmol)溶于MeOH(9.4mL)中，将甲醛水溶液(37％w/w,175μL)加入溶液中。将反应物搅拌10分钟，以一批加入氰基硼氢化钠(148mg,2.36mmol)。将反应物搅拌2.5小时。向反应物中加入甲醛水溶液(88μL)和氰基硼氢化钠(74mg,1.18mmol)。5小时候，将反应物用由5ml饱和碳酸氢盐和5ml水制备的溶液淬灭。将混合物在开口烧瓶中在通风橱中搅拌过夜。水相用DCM(4x20ml)提取。将合并的有机相干燥(MgSO4)，过滤和真空浓缩。所得中间体未经进一步纯化用于下一步骤。
产量：161mg(83％)
MS:m/z 247.17＝[M+H]+,(计算值＝247.17)。
将来自最后步骤的粗品(160mg,0.65mmol)溶于THF(1.5mL)中，将反应物在冰浴中冷却。在搅拌下滴加氢化铝锂溶液(1M在THF中)(1.3mL,1.3mmol)(形成气体)。1小时候，将反应物用5ml二乙醚稀释，滴加50μL水。在气体产生平息后，加入50μL 4M NaOH，然后加入150μL水。将反应物于室温搅拌30分钟。加入MgSO4，将反应物搅拌15分钟。过滤出固体，用5ml二乙醚洗涤。在氮气流中除去挥发物。产物经RP-HPLC纯化，产生3c。
产量：158mg(73％,TFA盐)
MS:m/z 219.17＝[M+H]+,(计算值＝219.17)。
实施例4
Ac-N-Me-Asp(OBzl)-OH的合成
将Fmoc-N-Me-Asp(OBzl)-OH(500mg,1.09mmol)溶于THF(5mL)中。在搅拌下滴加DBU(325μL,2.18mmol)。形成混悬液。20分钟后，将N-乙酰氧基琥珀酰亚胺(342mg,2.18mmol)在THF(5mL)中的溶液加入反应物中。混悬液缓慢转为溶液。50分钟后，将反应溶液用DCM(20ml)稀释，用饱和碳酸氢钠(30ml)提取。将水相用DCM(20ml)洗涤。弃去有机相。将乙酸乙酯(30ml)加入碳酸氢盐相中，将其用浓HCl酸化至<pH 2。
有机相进一步用0.1M HCl(2x 30ml)洗涤。将有机相干燥(MgSO4)，过滤和真空浓缩，产生Ac-N-Me-Asp(OBzl)-OH(4)。
产量：299mg(99％)
MS:m/z 280.12＝[M+H]+,(计算值＝280.12)。
实施例5
连接基试剂5e-h的合成
根据以下流程合成了5e-h：
Figure GDA0003827209340000981
5e的合成：
将Fmoc-N-Me-Asp(OBzl)-OH(138mg,0.30mmol)溶于DCM(1mL)中，在搅拌下加入N,N'-双-Boc-2-羟基-丙二胺(105mg,0.36mmol)和EDC(86mg,0.45mmol)。加入催化量的DMAP。2.5小时候，将反应物用10ml DCM稀释，用柠檬酸洗涤两次，用饱和碳酸氢盐溶液洗涤两次，用盐水洗涤一次(每次10ml)。将有机相干燥(MgSO4)，过滤，真空减少至2ml体积。
在搅拌下加入DBU(90μL,0.60mmol)。15分钟后反应完全，在搅拌下加入乙酸酐(142μL,1.50mmol)。30分钟后，将反应物用100μL乙酸酸化，在氮气流中除去溶剂。中间体5a经RP-HPLC纯化。
产量：107mg(65％)
MS:m/z 552.29＝[M+H]+,(计算值＝552.29)。
将5a(107mg,0.19mmol)溶于THF(2mL)中，加入披钯活性炭10％Pd基础(41mg,0.04mmol)，在氢气气氛下将反应物剧烈搅拌。将反应混合物用THF(8ml)稀释，经0.2μmPTFE注射式滤器过滤。加入TSTU(117mg,0.39mmol)和DIPEA(67μL,0.39mmol)。将混悬液于室温搅拌。16小时后，将混悬液过滤。将滤液真空浓缩。将残余物在乙酸乙酯和pH 7磷酸钠缓冲液(100mM)之间分配。将有机相用pH 7缓冲液洗涤2两次和用盐水洗涤1x。将有机相干燥(MgSO4)，过滤和真空浓缩。将油性残余物溶于DCM中，真空浓缩，产生5e，为白色泡沫。
产量：106mg(98％)
MS:m/z 559.26＝[M+H]+,(计算值＝559.26)。
5b-d的合成：
5b：将4(47mg,167μmol)溶于DCM(1ml)中。将溶液加入3a(61mg 183μmol)中。搅拌反应物，加入EDC(35mg,183μmol)。加入DMAP(2mg,17μmol)。1小时后，加入EDC(35mg,183μmol)和DMAP(2mg,17μmol)。2小时后，在氮气流中除去挥发物。5b经RP-HPLC纯化。
产量：48mg(48％,TFA盐)
MS:m/z 480.27＝[M+H]+,(计算值＝480.27)。
5c：根据5b，采用4(50mg,0.18mmol)和3b(65mg,0.2mmol)合成了5c。以一批加入EDC(76mg,0.39mmol)和DMAP(2mg,0.02mmol)，反应时间18小时。
产量：39mg(37％,TFA盐)
MS:m/z 480.27＝[M+H]+,(计算值＝480.27)。
按照对5c所述的操作和当量，但是使用3c代替3b，合成了5d。
产量：30mg(28％,TFA盐)
MS:m/z 480.27＝[M+H]+,(计算值＝480.27)。
5f-h的合成：
5f：在氮气气氛下将5b(48mg,100μmol)和披钯活性炭10％Pd基础(21mg)混悬于THF(2ml)中。容器中充入氢气，在氢气气氛中保持2.5小时。将反应混合物经0.2μm PTFE注射式过滤器过滤，用THF(4ml)冲洗。向滤液中加入TSTU(60mg,200μmol)和DIPEA(35μL,200μmol)。将混悬液于室温搅拌16小时。除去挥发物，产物经RP-HPLC纯化，产生5f。
产量：36mg(60％,TFA盐)
MS:m/z 487.24＝[M+H]+,(计算值＝487.24)。
5g：根据5f，采用5c(39mg,36μmol)、披钯炭(4mg)、THF(2ml)和1小时反应时间合成了5g。反应物经1μm PTFE注射式过滤器过滤，用DCM(2ml)冲洗。向滤液中加入TSTU(40mg,132μmol)和DIPEA(46μL,265μmol)。将混悬液搅拌1小时。除去挥发物，产物经RP-HPLC纯化，产生5g。
产量：25mg(63％,TFA盐)
MS:m/z 487.24＝[M+H]+,(计算值＝487.24)。
按照对5g所述的操作，但是用5d(30mg,51μmol)代替5c和相应地调节试剂量，合成了5h。
产量：19mg(61％,TFA盐)
MS:m/z 487.24＝[M+H]+,(计算值＝487.24)。
实施例6
由连接基试剂5e-h合成AcAKF-OH连接基结合物6a-d
Figure GDA0003827209340001001
在2-氯三苯甲基氯树脂上采用Fmoc氨基酸、Fmoc-Ala-OH、Fmoc-Lys(ivDDe)-OH、Fmoc-Phe-OH合成了AcAKF三。在树脂上采用乙酸酐/DIPEA将肽的N-端乙酰化，采用肼裂解ivDDE。采用8-9mg肽装载树脂、2eq各连接基和3eq DIPEA在DMF中在树脂上将连接基5e-h偶联至Lys的游离侧链胺。将树脂搅拌30分钟。树脂用DMF洗涤5次和用DCM洗涤5此，然后用HFIP在DCM中的20％溶液从树脂裂解出Boc保护的肽。将Boc保护的肽经RP-HPLC纯化。用TFA/DCM 1:1进行Boc保护基的裂解。除去挥发物；将残余物溶于乙腈中，用醚沉淀后分离出肽连接基结合物，为TFA盐。
6a:产量：3mg(37％,2x TFA盐)MS:m/z 650.30＝[M+H]+,(计算值＝650.35)。
6b产量：2mg(25％,2x TFA盐)MS:m/z 678.40＝[M+H]+,(计算值＝678.38)。
6c产量：2.4mg(34％,2x TFA盐)MS:m/z 678.40＝[M+H]+,(计算值＝678.38)。
6d产量：2.4mg(34％,2x TFA盐)MS:m/z 678.39＝[M+H]+,(计算值＝678.38)。
实施例7
体外释放动力学
Figure GDA0003827209340001011
通过LCMS(UV检测)在pH7.4和37℃在水性缓冲液(pH7.4 60mM磷酸钠)中监测了三肽AcAKF从结合物6a-d裂解的速率。在第一个步骤中，连接基部分的重排在数分钟内发生(上文对结合物6b示例性描绘)，然后测定和通过曲线拟合软件拟合了结合物7b随时间推移的消失，获得了慢释放的半衰期。
Figure GDA0003827209340001012
实施例8
体外释放动力学
通过LCMS(UV检测)在pH7.4和37℃在水性缓冲液(PBS pH 7.4)中监测了可逆键从结合物2b裂解的速率。测定和通过曲线拟合软件拟合了游离泛素随时间增加的峰面积百分比，以获得释放的半衰期。
Figure GDA0003827209340001013
实施例9
连接基试剂9g的合成
Figure GDA0003827209340001021
将9a(1.5g,5.7mmol)溶于THF(37.5mL)中。加入TSTU(2.6g,8.6mmol)和DIPEA(3.97mL,22.8mmol)。搅拌时形成浑浊混悬液。将混合物搅拌22小时，加入TSTU(1.7g5.5mmol)、DIPEA(2mL,11.5mmol)和DMF(13mL)，反应物颜色变为暗棕色。总共26小时后，将反应混合物用350mL乙酸乙酯稀释，用2x200mL 0.1N HCl和1x 100mL盐水洗涤。有机相经Na2SO4干燥和蒸发。将残余物在高真空下干燥过夜。产物采用快速色谱法纯化，产生9b，为无色油。
产量：1.65g(81％)
MS:m/z 361.17＝[M+H]+,(计算值＝361.16)。
将9b(1.65g,4.58mmol)溶于DCM(11.6mL)中，加入N-Me-L-Asp(tBu)-OH(932mg,4.59mmol)和DIPEA(1.6mL,9.2mmol)。将白色混悬液于RT搅拌。混合物随时间推移缓慢变成浅黄色溶液。
1小时后加入乙酸(786μL,13.7mmol)。蒸发溶剂，产物经RP-LPLC纯化，产生9c。
产量：1.77g(86％)
MS:m/z 449.15＝[M+H]+,(计算值＝449.25)。
将9c(1.23g,2.74mmol)和1c(1.99g,2.28mmol)溶于乙腈(53mL)中。在搅拌下加入DMAP(557mg,4.56mmol)，向所得溶液中加入DIC(1.41mL,9.12mmol)。1小时后，加入0.7mlTFA，真空除去溶剂。产物经RP-LPLC纯化，产生9d。
产量：2.33g(78％,2x TFA盐)
MS:m/z 1077.65＝[M+H]+,(计算值＝1077.57)。
将9d(2.33g,1.78mmol)溶于DCM(10mL)中。在搅拌下加入TFA(10mL,131mmol)。45分钟后，蒸发溶剂，将残余物与50mL DCM公证法。将残余物在高真空下干燥过夜，产生2.90g9e，其未经进一步纯化进行使用。将9e溶于乙腈(68mL)中，在搅拌下加入3-马来酰亚氨基丙酸N-羟基琥珀酰亚胺酯(1.19g,4.45mmol)。加入DIPEA(3.1mL,17.8mmol)。80分钟后，通过添加TFA(1.36mL,17.8mmol)淬灭反应。将反应物真空浓缩至40ml的体积，产物经RP-LPLC纯化，产生9f。
产量：1.73g(75％over 2steps,2x TFA盐)
MS:m/z 1072.60＝[M+H]+,(计算值＝1072.49)。
将9f(1.73g,1.33mmol)溶于乙腈(17mL)中，在搅拌下加入EDC(767mg,4mmol)、HOSu(462mg,4mmol)和DMAP(19mg,0.15mmol)。1小时30分钟后，通过添加TFA(100μL,1.3mmol)淬灭反应，将反应物真空浓缩至8.5mL的体积，产物经RP-LPL纯化C，产生9g。
产量：1.36g(73％,2x TFA盐)
MS:m/z 1169.71＝[M+H]+,(计算值＝1169.50)。
实施例10:胺-HAs 10a和10b的制备
在剧烈搅拌下将透明质酸钠盐(90-130kDa,504mg,1.25mmol COOH,1.00eq.)溶于100mM MES 400mM 1,3-二氨基丙烷缓冲液pH 5.5(62.5mL)中。加入HOBt(573mg；3.74mmol,3.00eq.)和EDC(223mg；1.17mmol,0.93eq.)。将混悬液于环境温度搅拌过夜。加入乙酸钠三水合物(8.48g)，此时混悬液转为溶液。通过添加绝对乙醇使粗的胺被修饰的HA沉淀出，用80％(v/v)乙醇和绝对乙醇洗涤，在高真空下干燥1小时。将片状物溶于水(40mL)中形成澄清溶液。加入4M NaOH(13.3mL)，将溶液于环境温度搅拌2小时，然后加入乙酸(3.05mL)。通过添加绝对乙醇沉淀出产物，用80％(v/v)乙醇和绝对乙醇洗涤，在高真空下干燥，得到胺-官能化的HA 10a，为乙酸盐。通过OPA分析测定了物质的胺含量。
产量：432mg(acetate盐,胺-含量:0.253mmol/g,10.4％DS)
类似于上述操作，只是使用不同量的EDC(95.8mg；0.50mmol,0.404eq.)，制备了胺-HA 10b。
产量：449mg(乙酸盐,胺-含量:0.114mmol/g,4.6％DS)
实施例11：由胺-HA 10a制备硫羟-HA 11
将胺-官能化的HA 10a(400mg,0.101mmol胺,1.0eq.)溶于100mM HEPES缓冲液pH8.4(33.25mL)中。在搅拌下将SPDP(318mg,1.02mmol,10.1eq.)在乙腈(18mL)中的新鲜制备的溶液加入混合物中。将混合物于环境温度搅拌120分钟，然后将TCEP(582mg,2.03mmol,20.1eq.)在水(5.13mL)中的新鲜制备的溶液加入反应混合物中。将溶液于环境温度搅拌1小时，然后加入1M乙酸钠缓冲液pH 5.5(56.4mL)。通过添加绝对乙醇和离心收集产物。用80％(v/v)乙醇和绝对乙醇洗涤后，在高真空中干燥5小时，获得粗的硫羟-HA，为白色固体。在氩气气氛下通过剧烈搅拌将粗物质溶于1％乙酸(40mL)中。将1M乙酸钠缓冲液pH5.5(40mL)加入溶液中，所得混合物通过0.22μm PES瓶顶过滤器过滤。通过添加绝对乙醇和离心从滤液中沉淀出产物。用80％(v/v)乙醇和绝对乙醇洗涤后，将物质在高真空中干燥6小时，得到硫羟-HA 11，为灰白色片状物。通过Ellman分析测定了硫羟含量。
产量：366mg(硫羟-含量:0.209mmol/g,)
实施例12:制备马来酰亚胺-HA 12from胺-HA 10b
将胺-官能化的HA 10b(443mg,0.05mmol胺,1.0eq.)溶于100mM HEPES缓冲液pH7.4(44.25mL)中。在搅拌下将3-马来酰亚氨基丙酸NHS酯(134mg,0.49mmol,10.0eq.)在乙腈(9.7mL)中的新鲜制备的溶液加入混合物中。将混合物于环境温度搅拌60分钟，然后加入1M乙酸钠缓冲液pH 5.5(54mL)。通过添加绝对乙醇和离心收集产物。用80％(v/v)乙醇洗涤、然后用绝对乙醇洗涤后，将物质于-20℃储存过夜，在第二天在高真空中干燥2小时，产生粗的马来酰亚胺-HA，为白色固体。将粗物质通过剧烈搅拌溶于1％乙酸(44.25mL)中。将1M乙酸钠缓冲液pH 5.5(54mL)加入溶液中，所得混合物通过0.22μm PES瓶顶过滤器过滤。通过添加绝对乙醇和离心从滤液中分离出产物。用80％(v/v)乙醇和绝对乙醇洗涤后，将物质在高真空中干燥6小时，得到马来酰亚胺-HA 12，为白色片状物。通过逆-Ellman分析测定了马来酰亚胺含量。
产量：376mg(马来酰亚胺-含量:0.109mmol/g)
实施例13：具有游离硫羟的交联HA微粒13的制备
在氩气气氛下通过剧烈振摇将硫羟-HA 11(90.5mg)溶于200mM MES,3mM EDTA缓冲液pH 5.5(3015μL)中，产生化合物在缓冲液中的30mg/mL溶液(溶液A)。通过剧烈振摇将马来酰亚胺-HA 12(70.7mg)溶于200mM MES,3mM EDTA缓冲液pH 5.5(2355μL)中，产生化合物在缓冲液中的30mg/mL溶液(溶液B)。在装配有磁力搅拌棒的2mL Eppendorf试管中，将200mM MES,3mM EDTA缓冲液pH 5.5(94.2μL)与溶液A(717.7μL)和溶液B(688.1μL)在剧烈振摇下混合。对于胶凝，将混合物于室温在氩气气氛下静置过夜。将凝胶转移至5mL Luer-Lock注射器中，其连接有一系列雄性/雌性Luer Lock适配器、2x1 mm PTFE o-ring、144μm不锈钢筛网(3.8mm直径)、2x1mm PTFE o-ring、雄性/雌性Luer Lock适配器、2x1 mm PTFEo-ring/144μm不锈钢筛网(4mm直径)、2x1mm PTFE o-ring和雄性/雌性Luer Lock适配器。将注射器中的凝胶部分通过两个144μm不锈钢筛网进入在15mL Falcon试管中的200mMMES,3mM EDTA缓冲液pH 5.50中。通过振摇、离心和除去上清液，将水凝胶依次用3mM EDTA缓冲液pH 5.5、继之以200mM琥珀酸盐、3mM EDTA缓冲液pH 4.0和200mM琥珀酸盐、3mMEDTA、0.5％吐温20缓冲液pH 4.0洗涤。在最后洗涤步骤后，在15mL Falcon试管中将凝胶混悬液的体积用3mM EDTA,0.5％吐温20缓冲液pH 4.0调节至10mL，产生具有游离硫羟基团的交联HA，为无色和几乎完全透明的混悬液。通过Ellman分析测定了水凝胶混悬液的硫羟含量。
实施例14：CTLA-4mAB-连接基结合物混合物14的制备
在该实施例中使用204.13mL以5.341mg/mL在26mM Tris-HCl、100mM NaCl、55mM甘露醇、0.1mM喷替酸(DTPA)、0.01％吐温80,pH 7.0中的CTLA-4 mAB。将mAB进行缓冲液交换为30mM磷酸钠pH 7.4，浓缩，将蛋白质浓度调节为9.74mg/mL。制备103.14mL mAB溶液。
将3mol eq.(218.6μL)连接基试剂9g(100mM在DMSO中的储备溶液)加入蛋白质溶液中。将反应混合物小心混合，于环境温度孵育5分钟，产生未修饰CTLA-4mAB和被保护的CTLA-4mAB-连接基结合物(例如单结合物、双结合物)的混合物14。
通过添加就mAB溶液的体积(103.1mL)而言0.12vol.eq.(12.4mL)0.5M琥珀酸,pH3.0实现了pH迁移至约pH 4，将溶液小心混合。通过阳离子交换色谱法，采用装配有EshmunoCPX柱(8mm ID x 200mm长,CV＝10mL)的Aekta pure系统，采用20mM琥珀酸,pH 5.5作为流动相和氯化钠(0-60％20mM琥珀酸,1M NaCl,pH 5.5,在15CV中)的线性盐梯度梯度以4.0mL/min的流速纯化了14。以每次～39mL进样体积(～337mg)运行三次，收集到119.27mL14，浓度为7.32mg/mL。
为了测定反应活性马来酰亚胺的含量，将20μL 14用20kDa PEG硫羟进行PEG化，随后进行SE-HPLC分析。在SE色谱图的蜂积分后，测定了14的总马来酰亚胺含量为41％。
在分析和于4℃过夜储存后，将118.38mL 14用就118.38mL的体积而言1/19vol.eq.的20mM琥珀酸、100mM EDTA、0.2％吐温20,pH 5.5(6.2mL)调节至终浓度为5mMEDTA和0.01％吐温20，将溶液小心振摇。使用一个孔径为0.22μm的qpore Plastic真空滤器(PVDF膜)过滤样品。
获得了122.67mL 14，浓度为7.82mg/mL。
实施例15：暂时性CTLA-4mAB-连接基-水凝胶前药15b的合成
通过就测定的41％总马来酰亚胺含量(4μM)而言将混合物14添加至1.5mol水凝胶13，进行了CTLA-4mAB/被保护的CTLA-4mAB-连接基结合物混合物14至硫羟官能化的交联HA水凝胶13的结合。
将7.5mL在20mM琥珀酸,150mM NaCl,3mM EDTA,0.1％吐温20,pH 4.0中的根据实施例13制备的水凝胶混悬液(4.22mg/mL标称凝胶含量,硫羟含量为200.8μM)转移至15mLFalcon试管中。像这样制备总共四个15mL Falcon试管。通过于4000rcf离心1分钟使水凝胶颗粒沉降，通过抽吸移出上清液。通过洗涤步骤的五个循环完成了颗粒的洗涤，其包括添加10mL 20mM琥珀酸,5mM EDTA,0.01％吐温20,pH 5.5缓冲液、于1000rcf离心1分钟和通过小心抽吸移出上清液。在最后洗涤步骤后，将四个Falcon试管各自用上述缓冲液填充至4mL的混悬液标称总体积。由每个Falcon试管转移2.6mL水凝胶混悬液至新的50mL Falcon试管中，得到四个各自含有2.6mL经洗涤水凝胶混悬液的Falcon试管。
将处于pH 5.5的122.62mL 14(c＝7.82mg/mL,958.3mg)分为四个部分，向上述四个含有水凝胶混悬液的50mL Falcon试管的每个试管中加入约33mL。将所得混悬液上下颠倒混合，于环境温度在轻微振摇下孵育过夜，产生被保护的暂时性CTLA-4mAB-连接基水凝胶前药15a。
将水凝胶混悬液于1000rcf离心1分钟，静置3分钟。将水凝胶装载后的上清液通过抽吸转移到250mL Corning瓶中。将水凝胶在一个50mL Falcon试管中合并。
将水凝胶首先用在30mM磷酸钠,50mM TriMED,0.01％吐温20,pH 7.4中的30mL10mM IAA洗涤7次。然后，将在30mM磷酸钠,50mM TriMED,0.01％吐温20,pH 7.4中的30mL10mM IAA加入水凝胶中，于环境温度在温和振摇下孵育1小时。通过10个洗涤循环除去IAA阻断溶液，所述洗涤包括添加30mL 30mM磷酸钠,50mM TriMED,0.01％吐温20,pH 7.4缓冲液、于1000rcf离心1分钟和3分钟静置后通过抽吸小心除去上清液。然后，对于被保护的暂时性CTLA-4mAB-连接基水凝胶前药15a的脱保护，将30mL 30mM磷酸钠,50mM TriMED,0.01％吐温20,pH 7.4缓冲液加入沉积的水凝胶中，将所得混悬液于25℃孵育过夜，产生暂时性CTLA-4mAB-连接基水凝胶前药15b。
通过用20mM琥珀酸,10w％α-α-D-海藻糖,0.01％吐温20,pH 5.5洗涤水凝胶10次，进行了15b的最终配制。
实施例16：15b的体外释放动力学
将25mg 15b(相当于大约0.45mg蛋白质)转移至无菌的1.5mL Eppendorf试管中。总共制备8个试管。向每个试管中加入1mL 60mM磷酸钠,3mM EDTA,0.01％吐温20,pH 7.4，随后上下颠倒混合，在不振摇的情况下孵育5分钟。除去上清液至每个小瓶含0.5mL混悬液的终体积。将混悬液于37℃水浴汇总孵育。在不同时间间隔后，将一个小瓶从37℃移出，离心，通过A280测定和SE-HPLC于215nm分析上清液。记录了就CTLA-4 mAB而言基于上清液的浓度测定的释放的CTLA-4mAB的相对量。
来自15b的释放动力学：
t[d] CTLA-4mAB释放[μg] CTLA-4mAB释放[％]
1.92 25.9 5.5
8.92 83.2 18.5
18.92 149.9 33.0
27.92 189.4 42.9
39.92 226.2 49.2
实施例17
连接基试剂17f的合成
Figure GDA0003827209340001081
Figure GDA0003827209340001091
将17a(880mg,2.68mmol)溶于DCM(4mL)中，加入N-Me-L-Asp(tBu)-OH(519mg,2.55mmol)在DCM(3mL)和DIPEA(892μL,5.10mmol)中的混悬液中。将DCM(2mL)和DMF(1.5mL)加入无色混悬液中，将其温热至40℃，得到无色溶液。
7小时30分钟后加入乙酸(438μL,7.66mmol)。蒸发溶剂，产物经RP-LPLC纯化，产生17b。
产量：480mg(45％)
MS:m/z 417.25＝[M+H]+,(计算值＝417.51)。
将17b(480mg,1.15mmol)和1c(760mg,0.87mmol)溶于乙腈(20mL)中。在搅拌下加入DMAP(212mg,1.74mmol)，向所得溶液中加入DIC(541μL,3.48mmol)。1小时55分钟后，加入TFA(332μL,4.35mmol)，真空除去溶剂。产物经RP-LPLC纯化，产生17c。
产量：810mg(73％,2x TFA盐)
MS:m/z 1045.74＝[M+H]+,(计算值＝1045.57)。
将17c(810mg,0.64mmol)溶于DCM(3.5mL)中。在搅拌下加入TFA(3.5mL,45.7mmol)。2小时15分钟后，蒸发溶剂，将残余物与25mL DCM共蒸发。将残余物在高真空下干燥过夜，产生945mg 17d，将其未经进一步纯化进行使用。将17d(56mg,45.2μmol)溶于乙腈(500μL)中，加入DBCO-C4-NHS酯(20mg,49.7μmol)。加入DIPEA(79μL,0.452mmol)。45分钟后，通过添加TFA(35μL,0.452mmol)淬灭反应。加入水(400μL)，产物经制备型HPLC纯化，产生17e。
产量：54mg(历经两步为84％,2x TFA盐)
MS:m/z 1176.77＝[M+H]+,(计算值＝1176.55)。
将17e(35mg,24.9μmol)溶于乙腈(500μL)中，加入EDC(14mg,74.8μmol)和HOSu(8.6mg,74.8μmol)。4小时15分钟后，通过添加TFA(1.9μL,24.9μmol)淬灭反应。将反应混合物用水(500μL)稀释，产物经制备型HPLC纯化，产生17f。
产量：31.6mg(84％,2x TFA盐)
MS:m/z 1274.86＝[M+H]+,(计算值＝1273.57)。
实施例18：基于PEG的氨基水凝胶的制备
如WO2011/012715A1的实施例3中所述，采用不同交联度以给出不同的胺含量水平，合成了基于PEG的氨基水凝胶。所有交联剂基于3.3kDa PEG和如WO2011/012715A1的实施例2中所述采用壬二酸进行了合成。通过它们的游离氨基含量表征了水凝胶：HG-1:0.191mmol/g,HG-3:0.215mmol/g。
实施例19：具有游离叠氮的基于PEG的氨基水凝胶HG-2的制备
Figure GDA0003827209340001101
将HG-1(50mg,9.55μmol)放置在5mL玻璃料注射器中，在3mL DIPEA在NMP中的1％溶液中溶胀，用DIPEA在NMP中的1％溶液(10x3mL)洗涤。将叠氮基-PEG8-NHS酯(16.2mg,28.7μmol)溶于DIPEA在NMP中的1％溶液中，加入水凝胶中，将注射器于室温振摇过夜。2小时45分钟后，停止振摇，将水凝胶用NMP(10x3mL)洗涤。将HG-2混悬于1.1mL NMP中，转移至Eppendorf试管中，混悬液未经进一步表征进行使用。
实施例20：泛素-连接基结合物混合物20b的制备
Figure GDA0003827209340001111
将来自牛红细胞的泛素(50mg,5.86μmol)溶于pH7.4 60mM磷酸钠缓冲液(3.84mL)中，加入17f在DMSO中的溶液(87.9μL,0.1M,8.79μmol)。将反应物于室温孵育10分钟，将653μL含200mM TriMED的pH7.4 60mM磷酸盐缓冲液加入反应物中以促进保护基的裂解和酯20a至酰胺20b的重排。将反应物混合，于25℃孵育23小时20分钟。经PES膜滤器过滤浑浊的反应混合物。为了从蛋白质结合物混合物中除去未结合的连接基，采用装配有GE HiTrap柱(一行3个)的
Figure GDA0003827209340001112
pure系统以1.5ml/min的流速进行缓冲液交换为PBST pH 7.4。收集到10.5ml产物级分，其含有泛素和泛素连接基结合物20b。采用Amicon Ultra-15离心滤器单元(MWCO:3kDa)将6.5mL产物级分浓缩至4mL。将蛋白质浓度估计为0.89mM的浓缩溶液直接用于装载入水凝胶HG-2中。
实施例21：泛素-连接基-水凝胶结合物21的制备
Figure GDA0003827209340001121
通过将溶液20b添加至水凝胶HG-2中，进行了泛素/泛素-连接基结合物混合物20b与叠氮基官能化的交联PEG水凝胶HG-2的结合。将75μL水凝胶混悬液HG-2转移至5mL玻璃料注射器中，用水(10x2mL)和PBST-缓冲液pH7.4(10x 2mL)洗涤。将水凝胶用4mL蛋白质/蛋白质-连接基结合物溶液20b孵育，于室温振摇18小时30分钟。将水凝胶用PBST-缓冲液pH7.4(10x 2mL)洗涤，转移至1.5mL Eppendorf试管中，产生了在PBST-缓冲液pH7.4中的7.2wt％溶液。
实施例22：21的体外释放动力学
将40μL混悬液21(相当于大约0.74mg泛素)转移至无菌的1.5mL Eppendorf试管。将1mL 60mM磷酸钠,3mM EDTA,pH 7.4缓冲液加入试管中，其随后进行混合和在37℃水浴中孵育。在不同时间间隔后，通过HPLC于215nm分析少量上清液样品，与泛素标准品比较对释放的泛素进行了定量。所得值针对从以前取样时间移出的泛素进行校正。
从21的释放：
t[d] 泛素释放[μg] 泛素释放[％]
1.93 25 3.4
6.01 74 10.0
19.93 214 29.0
26.78 283 38.3
34.82 337 45.5
41.98 370 50.0
48.95 387 52.3
61.93 430 58.2
实施例23：MTS-PEG12-NHS酯16c的合成
Figure GDA0003827209340001131
将6-溴己酸(5.89g,30.2mmol,1.0eq.)和甲硫醇磺酸钠(4.05g,30.2mmol,1.0eq.)在氩气氛下溶于无水DMF(47.1mL)中，于80℃搅拌3小时。冷却至室温后，将混合物用水(116mL)稀释，用乙醚(3x233mL)萃取。合并的有机层用盐水(350mL)洗涤，经MgSO4干燥，过滤并减压浓缩至体积为40mL。将溶液分开并添加到两份冷的正庚烷(2x1150mL)中，将混合物冷却至-18℃过夜。滗析上清溶液，将沉淀物溶解在乙醚(80mL合并)中。将该溶液分开并添加到两份冷的正庚烷(2x1000mL)中，将混合物冷却至-18℃达2小时。通过过滤收集沉淀物，在高真空中干燥过夜，产生中间体16a(5.62g,24.8mmol,82％)。
MS:m/z 249.02＝[M+Na]+,(单同位素质量计算值:[M]＝226.03)
将DIPEA(2.76mL,15.9mmol,3.28eq.)添加到16a(1.15g,5.08mmol,1.05eq.)和PyBOP(2.64g,5.08mmol,1.05eq.)在无水DCM(54.8mL)中的搅拌溶液中。搅拌30分钟后，加入1-氨基-3,6,9,12,15,18,21,24,27,30,33,36-十二氧杂三十九烷-39-酸(2.99g,4.84mmol,1.00eq.)，混合物于室温下搅拌另外30分钟。将冷的MTBE(55mL)加入到淡黄色的反应混合物中，将其冷却至-20℃过夜。没有形成沉淀。真空除去所有挥发物，将残余物溶解在DCM中。添加TFA(1.2mL)后，将溶液浓缩至10mL。将冷的MTBE(55mL)添加到淡黄色溶液中，将其冷却至-20℃过夜。倾析上清液，黄色沉淀用冷MTBE(55mL)洗涤。现在的白色残余物在旋转蒸发仪上干燥。通过制备型RP-HPLC进一步纯化后，得到中间体16b(2.81g,3.40mmol,70％)，为白色固体。
MS:m/z 826.35＝[M+H]+,(单同位素质量计算值:[M]＝825.39)
将16b(2.81g,3.40mmol,1.0eq.)、HOSu(470mg,4.08mmol,1.2eq.)、DMAP(41.6mg,0.34mmol；0.1eq.)和DCC(842mg,4.08mmol,1.2eq.))溶解在无水DCM(32.6mL)中，将混合物于室温搅拌30分钟。过滤除去沉淀，从滤液中蒸发溶剂。残余物通过制备型RP-HPLC纯化，得到纯试剂16c(1.74g；1.88mmol,55％)。
MS:m/z 923.45＝[M+H]+,(单同位素质量计算值:[M]＝922.40)
实施例24：MTS-官能化的水凝胶HG-4的合成
Figure GDA0003827209340001141
将作为在NMP/正丙胺(99:1v/v)混合物中的混悬液存在的PEG-水凝胶HG-3(500mg,胺含量:0.215mmol/g,1.0eq.)以相等的等分式样在五个具有PE玻璃料的20mL注射式反应器之间分配。每个水凝胶部分依次用无水NMP(10x 8mL)、NMP/DIPEA(99:1v/v,6x8mL)洗涤，在完全洗涤后完全排出所有溶剂。向每个水凝胶部分抽吸入5mL 16c(309mg,3.0eq.)在无水NMP(22mL)和NMP/DIPEA(99:1v/v,3mL)中的新鲜制备的溶液。注射式反应器于500rpm搅拌180分钟。将反应混合物从所有注射器中排出，每个水凝胶部分依次用无水NMP(10x8mL)、含0.1％AcOH和0.01％吐温20(10x 8mL)的水和20mM琥珀酸盐0.01％吐温20pH4.0缓冲液(10x 8mL)洗涤。在50mL Falcon试管中将水凝胶等分试样与另外的20mM琥珀酸盐0.01％吐温20pH4.0缓冲液混合。短暂离心后，通过除去足够体积的澄清上清液将混悬液的体积调节至24mL，以产生MTS-水凝胶HG-4在20mM琥珀酸盐0.01％吐温20pH4.0缓冲液中的混悬液，体积为24mL水凝胶含量为23.7mg/mL。干水凝胶的MTS负载确定为0.189mmol/g。
实施例25：HHCMET-连接基结合物混合物31的制备
Figure GDA0003827209340001151
在该实施例中使用154mL HHCMET在PBS,pH 7.4中的5.94mg/mL溶液。采用AmiconUltra 15,MWCO 3kDa(Merck)将HHCMET浓缩，测定蛋白质浓度。制备了28.18mL HHCMET在PBS,pH 7.4中的溶液，浓度为30.3mg/mL。
将相对于HHCMET的量而言1.5mol eq.(508μL)连接基试剂9g(相对于NHS含量校正,在DMSO中的100mM储备液)加入蛋白质溶液中。将反应混合物小心混合，于环境温度孵育5分钟，产生未修饰HHCMET和被保护的HHCMET结合物(例如单结合物,双结合物)31的混合物。
连接基-结合反应后立即将pH迁移至约pH4，进行缓冲液交换以从HHCMET/HHCMET-连接基结合物混合物31中除去过量的连接基物质。通过添加相对于HHCMET溶液的体积(28.18mL)而言0.047vol.eq.(1.324mL)0.4M琥珀酸,pH 3.0实现缓冲液迁移，将溶液小心地上下颠倒混合。使用配备有GE HiPrep柱的
Figure GDA0003827209340001152
purifier 100系统以8.0mL/min的流速将缓冲液更换为20mM琥珀酸pH4.0。运行六次，每次运行进样量为约5mL。
为了确定HHCMET/被保护HHCMET-连接基结合物混合物31中被保护HHCMET-连接基单-、双-和三结合物的含量，用20kDa PEG硫醇进行了PEG化和随后进行了SE-HPLC分析。
通过添加相对于HHCMET溶液的体积(24.4μL)而言0.154vol.eq.(3.8μL)0.5M琥珀酸pH 6.2，将24.4μL未修饰HHCMET/被保护HHCMET-连接基结合物混合物31(c＝10.89mg/mL)调节pH至pH5.5。然后将所得溶液用相对于28.2μL体积而言1/19vol.eq.20mM琥珀酸,100mMEDTA,0.2％吐温20,pH 5.5(1.5μL)补充。通过将15.8μL溶液与20.2μL 20mM琥珀酸,5mMEDTA,0.01％吐温20pH5.5混合，将未修饰HHCMET/被保护HHCMET-连接基结合物混合物31pH5.5的蛋白质浓度调节至4mg/mL。通过添加4μL 15mM PEG20-SH水溶液开始PEG化反应。于环境温度孵育15分钟后，采用与Superdex 200Increase 10/300GL柱的Agilent 1200系统进行SE-HPLC，以PBS-T pH7.4作为流动相。使用结合物的峰面积计算马来酰亚胺含量并乘以所连接PEG试剂的数量。测定了HHCMET/被保护HHCMET-连接基结合物混合物31的总马来酰亚胺含量，为47.7％。
在分析和在于4℃过夜储存后，通过添加0.154vol.eq.(11.08mL)0.5M琥珀酸pH6.2将71.98mL HHCMET/受保护HHCMET-连接基结合物混合物31(c＝10.89mg/mL)的pH调节至pH5.5。将所得溶液补充1/19vol.eq.20mM琥珀酸,100mM EDTA,0.2％吐温20,pH 5.5(4.37mL)，将溶液上下颠倒混合。使用一个孔径为0.22μm的qpore Plastic真空滤器(PVDF膜)过滤样品。
实施例26：暂时性HHCMET-连接基-水凝胶前药32的合成
Figure GDA0003827209340001161
通过将HHCMET/HHCMET-连接基结合物混合物31加入相对于HHCMET/HHCMET-连接基结合物混合物31中测定的47.7％的总马来酰亚胺含量(19.13μmol)而言1.75mol.eq.的水凝胶HG-5中的硫羟基团，将HHCMET/HHCMET-连接基结合物混合物31与还原硫醇官能化水凝胶HG-5结合。
将8.5mL在20mM琥珀酸,0.01％吐温20,pH 4.0中的MTS官能化水凝胶HG-4(标称凝胶含量为23.7mg/mL，硫醇含量为0.183mmol/g)转移到具有玻璃料的20mL注射器中。通过用20mL在PBS-T中的50mM TCEP溶液替换储存液并于环境温度孵育15分钟，使硫醇官能化水凝胶还原。然后，从注射器中取出50mM TCEP溶液，将水凝胶在注射器中用20mL 20mM琥珀酸,5mM EDTA,0.01％吐温20,pH 5.5洗涤10次，重新混悬于～6.7mL 20mM琥珀酸,5mM EDTA,0.01％吐温20,pH 5.5中，产生HG-5。
将3.06mL水凝胶HG-5转移到两个50mL Falcon试管中。然后，将43.2mL pH5.5的HHCMET/被保护HHCMET-连接基结合物混合物31(c＝9.26mg/mL)添加到含有水凝胶HG-5的各Falcon试管中。将所得混悬液充分混合，于环境温度温和旋转孵育过夜，产生被保护的暂时性HHCMET-连接基水凝胶前药。
过夜孵育后，将被保护的暂时性HHCMET-连接基水凝胶前药转移到配有玻璃料的20mL注射器中，在注射器中用20mL 20mM琥珀酸,5mM EDTA,0.01％吐温20,pH 5.5洗涤一次，用20mL在30mM磷酸钠,50mM TriMED,0.01％吐温20,pH 7.4中的10mM碘乙酰胺洗涤两次。将被保护的暂时性HHCMET-连接基水凝胶前药在注射器中于环境温度在30mM磷酸钠,10mM碘乙酰胺,50mM TriMED,0.01％吐温20,pH 7.4缓冲液中温和旋转孵育60分钟。然后，将水凝胶在注射器中用20mL 30mM磷酸钠,200mM TriMED,0.01％吐温20,pH 7.4缓冲液洗涤十次。每次弃去溶剂。
将20mL 30mM磷酸钠,200mM TriMED,0.01％吐温20,pH 7.4缓冲液吸入注射器中，将所得混悬液于25℃温和旋转孵育26小时，产生暂时性HHCMET-连接基水凝胶前药32。通过在注射器中用20mL 20mM琥珀酸,8.5％α-α-D-海藻糖,1％羧甲基纤维素,0.01％吐温20,pH5.0洗涤水凝胶十次，配制了暂时性HHCMET-连接基水凝胶前药32。
实施例27：32的体外释放动力学
将25μL每个混悬液32(相当于大约0.76mg HHCMET)转移至16个无菌1.5mLEppendorf管红。将60mM磷酸钠,3mM EDTA,0.01％吐温-20,pH＝7.40加入试管中(填充至0.5ml或1ml)。将样品依次混合，于37℃在水浴中孵育。在不同时间间隔后，使用两个样品，采用280nm处的吸光度分析上清液的蛋白质浓度。采用曲线拟合软件拟合蛋白质随时间的释放，得到27天的半衰期。
实施例28：在皮下(SC)和肌内(IM)注射暂时性HHCMET-连接基水凝胶前药32后和在静脉内(IV)和皮下(SC)注射游离HHCMET后HHCMET在Wistar大鼠中的血浆药物动力学
进行该研究是为了考察在皮下和肌内施用暂时性HHCMET-连接基水凝胶前药32后或在皮下或静脉内施用游离HHCMET后HHCMET在Wistar大鼠中的血浆药物动力学。动物(每组n＝3)在颈部区域接受单次SC注射或在大腿肌肉组织中接受单次IM注射32的制剂(10mg/kgHHCMET等同物)或在颈部区域接受单次SC注射或在尾静脉IV注射HHCMET制剂(10mg/kgHHCMET)。在选定的时间点，收集200μL血液在肝素锂(Li-Heparin)管中，通过于4℃以3,000g离心10分钟处理成血浆。
大鼠血浆中HHCMET浓度采用内部开发的夹心ELISA装置测定。对于捕获HHCMET，将人CTLA-4(AA Ala37-Ser160)-Fc标签融合蛋白(供应商AcroBiosystem,Newark,DE；USA,目录号CT4-H5255)包被到ELISA板孔，通过与辣根过氧化物酶结合的兔抗骆驼VHH抗体(供应商Genscript，Piscataway，NJ，USA,目录号A01861-200)进行读数。
空白血浆中HHCMET的校准标准如下制备：将解冻的Li-Heparin Wistar大鼠血浆均化。将游离HHCMET制剂以96.0ng/mL至3.00ng/mL之间的浓度加标到空白血浆中，具有更高和更低的锚点。这些溶液用于生成校准曲线。通过4-参数对数拟合和1/Y加权分析了校准曲线。通过单独制备的10、40和80ng/mL质量控制标准品确认了校准曲线。
表3给出了测定的HHCMET血浆浓度。
表3：每个时间点和每组(n＝3)测定的平均HHCMET浓度(ng/mL)。组1：暂时性HHCMET-连接基水凝胶前药32(10mg/kg HHCMET当量–皮下施用)；组2：HHCMET(10mg/kg–皮下施用)；组3:HHCMET(10mg/kg–静脉内施用)；组4:暂时性HHCMET-连接基水凝胶前药32(10mg/kg HHCMET当量–肌内施用)；方法LLOQ,3.00ng/mL；“-”表示未取样。
Figure GDA0003827209340001181
具体而言，组织内(皮下或肌内)注射暂时性HHCMET-连接基水凝胶前药32(10mg/kgHHCMET等同物)后72小时的HHCMET浓度是组织(皮下或肌内)注射暂时性HHCMET-连接基水凝胶前药32(10mg/kg HHCMET等同物)后1小时的HHCMET浓度的至少80％。
缩略语:
A 丙氨酸
Ac 乙酰基
Ala 丙氨酸
aq. 水性的，含水的
Asp 天冬氨酸
Bzl 苄基
Boc 叔丁氧羰基
Cbz 苄氧羰基
DCC N,N’-二环己基碳二亚胺
DBCO 二苯并氮杂环辛炔
DBU 1,8-二氮杂双环(5.4.0)十一碳-7-烯
DCM 二氯甲烷
DIC N,N'-二异丙基碳二亚胺
DIPEA 二异丙基乙胺
DMAP 二甲氨基吡啶
DMF 二甲基甲酰胺
DMSO 二甲亚砜
Dpr 2,3-二氨基丙酸
DS 取代度
DTNB 5,5'-二硫代双-(2-硝基苯甲酸)
eq 当量
EDC 1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐
EDTA 乙二胺四乙酸
F 苯基丙氨酸
Fmoc 芴基甲氧羰基
HA 透明质酸
HG 水凝胶
HEPES 4-(2-羟基乙基)哌嗪-1-乙磺酸
HFIP 1,1,1,3,3,3-六氟异丙醇
HOBt 1-羟基苯并三唑
HOSu N-羟基琥珀酰亚胺
HPLC 高效液相色谱法
IAA 碘乙酰胺
ivDDe 1-(4,4-二甲基-2,6-二氧代亚环己基)-3-甲基丁基
K 赖氨酸
LC 液相色谱法
LCMS 液相色谱法质谱法联用
LLOQ 定量下限
LPLC 低压液相色谱法
Lys 赖氨酸
mAB 单克隆抗体
MeOH 甲醇
Me 甲基
MES 4-吗啉乙磺酸
MTBE 甲基叔丁基醚
MTS 甲烷硫代磺酰基
MWCO 截留分子量
NHS N-羟基琥珀酰亚胺
NMP N-甲基-2-吡咯烷酮
OPA 邻苯二醛
PBS 磷酸盐缓冲盐水pH 7.4
PBST 含吐温20的磷酸盐缓冲盐水pH 7.4
PE 聚乙烯
PEG 聚乙二醇
PES 聚醚砜
Phe 苯基丙氨酸
PTFE 聚四氟乙烯
PVDF 聚偏二氟乙烯(polyvinylidene fluoride)
PyBOP 苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷子基膦鎓六氟磷酸盐
RP 反相
rt/r.t. 室温
sat. 饱和的
SE 尺寸排阻
Ser 丝氨酸
SPDP 3-(2-吡啶基二硫基)丙酸N-琥珀酰亚氨基酯
Su 琥珀酰亚胺
tBu和t-Bu 叔丁基
TCEP 三(2-羧基乙基)膦盐酸盐
TFA 三氟乙酸
THF 四氢呋喃
TriMED N,N,N’-三甲基乙二胺
TSTU O-(N-琥珀酰亚氨基)-N,N,N′,N′-四甲基脲鎓四氟硼酸盐
UPLC 超效液相色谱法
Figure IDA0003827209370000011
Figure IDA0003827209370000021

Claims (34)

1.结合物或其可药用盐，包含经由至少一个-L1-L2-部分与至少一个Z部分结合的至少一个-D部分，其中-L1-部分与-D部分的伯胺或仲胺的氮结合，和其中-D和-L1-之间的链接是可逆的，和其中-L2-部分与Z结合，其中：
每个-D独立地是药物D-H的含伯胺或仲胺的部分；
每个-L2-独立地是单键或间隔基部分；
每个Z独立地是聚合物部分或C8-24烷基；
每个-L1-独立地是式(I)的连接基部分：
Figure FDA0003729124440000011
其中
虚线表示与-D的伯胺或仲胺的氮连接；
v选自0或1；
-X1-选自-C(R8)(R8a)-、-N(R9)-和-O-；
＝X2选自＝O和＝N(R10)；
-X3-选自-O-、-S-和-Se-；
每个p独立地选自0或1，条件是至多一个p为0；
-R6、-R6a、-R10独立地选自-H、-C(R11)(R11a)(R11b)和-T；
-R9选自-C(R11)(R11a)(R11b)和-T；
-R1、-R1a、-R2、-R2a、-R3、-R3a、-R4、-R4a、-R5、-R5a、-R7、-R8、-R8a、-R11、-R11a和-R11b独立地选自-H、卤素、-CN、-C(O)OR12、-OR12、-C(O)R12、-C(O)N(R12)(R12a)、-S(O)2N(R12)(R12a)、-S(O)N(R12)(R12a)、-S(O)2R12、-S(O)R12、-N(R12)S(O)2N(R12a)(R12b)、-SR12、-NO2、-N(R12)C(O)OR12a、-N(R12)C(O)N(R12a)(R12b)、-OC(O)N(R12)(R12a)、-T、C1-6烷基、C2-6烯基和C2-6炔基；其中C1-6烷基、C2-6烯基和C2-6炔基任选被一个或多个相同或不同的-R13取代；和其中C1-6烷基、C2-6烯基和C2-6炔基任选被一个或多个选自如下的基团所间隔：-T-、-C(O)O-、-O-、-C(O)-、-C(O)N(R14)-、-S(O)2N(R14)-、-S(O)N(R14)-、-S(O)2-、-S(O)-、-N(R14)S(O)2N(R14a)-、-S-、-N(R14)-、-OC(OR14)(R14a)-、-N(R14)C(O)N(R14a)-和-OC(O)N(R14)-；
-R12、-R12a、-R12b独立地选自-H、-T、C1-6烷基、C2-6烯基和C2-6炔基；其中-T、C1-6烷基、C2-6烯基和C2-6炔基任选被一个或多个相同或不同的-R13取代，和其中C1-6烷基、C2-6烯基和C2-6炔基任选被一个或多个选自如下的基团所间隔：-T-、-C(O)O-、-O-、-C(O)-、-C(O)N(R14)-、-S(O)2N(R14)-、-S(O)N(R14)-、-S(O)2-、-S(O)-、-N(R14)S(O)2N(R14a)-、-S-、-N(R14)-、-OC(OR14)(R14a)-、-N(R14)C(O)N(R14a)-和-OC(O)N(R14)-；
其中每个T独立地选自苯基、萘基、茚基、茚满基、四氢萘基、C3-10环烷基、3-至10-元杂环基和8-至11-元杂双环基；其中每个T独立地任选被一个或多个相同或不同的-R13取代；
-R13选自卤素、-CN、氧代基、-C(O)OR15、-OR15、-C(O)R15、-C(O)N(R15)(R15a)、-S(O)2N(R15)(R15a)、-S(O)N(R15)(R15a)、-S(O)2R15、-S(O)R15、-N(R15)S(O)2N(R15a)(R15b)、-SR15、-N(R15)(R15a)、-NO2、-OC(O)R15、-N(R15)C(O)R15a、-N(R15)S(O)2R15a、-N(R15)S(O)R15a、-N(R15)C(O)OR15a、-N(R15)C(O)N(R15a)(R15b)、-OC(O)N(R15)(R15a)和C1-6烷基；其中C1-6烷基任选被一个或多个相同或不同的卤素取代；
其中-R14、-R14a、-R15、-R15a和-R15b独立地选自-H和C1-6烷基；
其中C1-6烷基任选被一个或多个相同或不同的卤素取代；
任选地，基团对-R1/-R1a、-R2/-R2a、-R3/-R3a、-R4/-R4a、-R5/-R5a或-R8/-R8a中的一对或多对与它们所连接的原子一起形成C3-10环烷基、3-至10-元杂环基或8-至11-元杂双环基；
任选地，基团对-R1/-R2、-R1/-R8、-R1/-R9、-R2/-R9或-R2/-R10中的一对或多对与它们所连接的原子一起形成环-A-；
其中-A-选自苯基、萘基、茚基、茚满基、四氢萘基、C3-10环烷基、3-至10-元杂环基和8-至11-元杂双环基；
任选地，基团对-R3/-R6、-R4/-R6、-R5/-R6、-R6/-R6a或-R6/-R7中的一对或多对可以与它们所连接的原子一起形成环-A′-；
其中-A′-选自3-至10-元杂环基和8-至11-元杂双环基；且
每个-L1-被至少一个-L2-取代和任选进一步被取代，条件是，式(I)中用星号标记的氢不被取代基代替。
2.权利要求1所述的结合物或其可药用盐，其中-D选自小分子、中等大小分子、寡核苷酸、肽核酸、肽和蛋白质药物部分。
3.权利要求1或2所述的结合物或其可药用盐，其中-D选自小分子、中等大小、肽和蛋白质药物部分。
4.权利要求1-3任一项所述的结合物或其可药用盐，其中-D是蛋白质药物部分。
5.权利要求1-4任一项所述的结合物或其可药用盐，其中v是0。
6.权利要求1-5任一项所述的结合物或其可药用盐，其中＝X2是＝O。
7.权利要求1-6任一项所述的结合物或其可药用盐，其中-X3-是-O-。
8.权利要求1-7任一项所述的结合物或其可药用盐，其中-R3和-R3a均为-H。
9.权利要求1-8任一项所述的结合物或其可药用盐，其中-L1-具有式(I-a)：
Figure FDA0003729124440000031
其中
虚线表示与权利要求1的-D的伯胺或仲胺的氮连接；且
-R1、-R1a、-R2、-R2a、-R5、-R5a、-R6、-R6a、-L2-和Z如权利要求1中定义的那样使用。
10.权利要求1-9任一项所述的结合物或其可药用盐，其中-R6和-R6a均为-H。
11.权利要求1-10任一项所述的结合物或其可药用盐，其中-R1和-R1a均为-H。
12.权利要求1-11任一项所述的结合物或其可药用盐，其中-L1-具有式(I-d)：
Figure FDA0003729124440000041
其中
标有星号的虚线表示与权利要求1的-D的伯胺或仲胺的氮连接，未标记的虚线表示与-L2-连接；和其中-L2-和Z如权利要求1中定义的那样使用。
13.权利要求1-12任一项所述的结合物或其可药用盐，其中Z是聚合物部分。
14.权利要求1-13任一项所述的结合物或其可药用盐，其中Z是水不溶性聚合物部分。
15.权利要求1-14任一项所述的结合物或其可药用盐，其中Z是包含选自如下的聚合物的水不溶性聚合物部分：2-异丁烯酰基-氧基乙基磷酰基胆碱、聚丙烯酸、聚丙烯酸酯、聚丙烯酰胺、聚烷基氧基聚合物、聚酰胺、聚酰胺型胺、聚氨基酸、聚酐、聚天冬酰胺、聚丁酸、聚乙醇酸、聚对苯二甲酸丁二酯、聚己酸内酯、聚碳酸酯、聚氰基丙烯酸酯、聚二甲基丙烯酰胺、聚酯、聚乙烯、聚乙二醇、聚氧化乙烯、聚磷酸乙酯、聚(乙基噁唑啉)、聚乙醇酸、聚(羟基乙基丙烯酸酯)、聚(羟基乙基-噁唑啉)、聚(羟基甲基丙烯酸酯)、聚(羟基丙基甲基丙烯酰胺)、聚(羟基丙基甲基丙烯酸酯)、聚(羟基丙基噁唑啉)、聚(亚胺碳酸酯)、聚乳酸、聚乳酸-乙醇酸共聚物、聚甲基丙烯酰胺、聚甲基丙烯酸酯、聚甲基噁唑啉、聚有机磷腈、聚原酸酯、聚噁唑啉、聚丙二醇、聚硅氧烷、聚氨酯、聚乙烯醇、聚乙烯胺、聚乙烯基甲基醚、聚乙烯吡咯烷酮、硅酮、纤维素、羧甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、壳多糖、壳聚糖、葡聚糖、糊精、明胶、透明质酸和衍生物、官能化透明质酸、甘露聚糖、果胶、鼠李半乳糖醛酸聚糖、淀粉、羟烷基淀粉、羟乙基淀粉及其它基于碳水化合物的聚合物、木聚糖及其共聚物。
16.权利要求1-13任一项所述的结合物或其可药用盐，其中Z是水溶性聚合物部分。
17.权利要求1-16任一项所述的结合物或其可药用盐，其中-L2-是选自如下的间隔基部分：-T′-、-C(O)O-、-O-、-C(O)-、-C(O)N(Ry1)-、-S(O)2N(Ry1)-、-S(O)N(Ry1)-、-S(O)2-、-S(O)-、-N(Ry1)S(O)2N(Ry1a)-、-S-、-N(Ry1)-、-OC(ORy1)(Ry1a)-、-N(Ry1)C(O)N(Ry1a)-、-OC(O)N(Ry1)-、C1-50烷基、C2-50烯基和C2-50炔基；其中-T′-、C1-50烷基、C2-50烯基和C2-50炔基任选被一个或多个相同或不同的-Ry2取代，和其中C1-50烷基、C2-50烯基和C2-50炔基任选被一个或多个选自如下的基团所间隔：-T′-、-C(O)O-、-O-、-C(O)-、-C(O)N(Ry3)-、-S(O)2N(Ry3)-、-S(O)N(Ry3)-、-S(O)2-、-S(O)-、-N(Ry3)S(O)2N(Ry3a)-、-S-、-N(Ry3)-、-OC(ORy3)(Ry3a)-、-N(Ry3)C(O)N(Ry3a)-和-OC(O)N(Ry3)-；
其中-Ry1和-Ry1a独立地选自-H、-T′、C1-50烷基、C2-50烯基和C2-50炔基；
其中-T′、C1-50烷基、C2-50烯基和C2-50炔基任选被一个或多个相同或不同的-Ry2取代，和其中C1-50烷基、C2-50烯基和C2-50炔基任选被一个或多个选自如下的基团所间隔：-T′-、-C(O)O-、-O-、-C(O)-、-C(O)N(Ry4)-、-S(O)2N(Ry4)-、-S(O)N(Ry4)-、-S(O)2-、-S(O)-、-N(Ry4)S(O)2N(Ry4a)-、-S-、-N(Ry4)-、-OC(ORy4)(Ry4a)-、-N(Ry4)C(O)N(Ry4a)-和-OC(O)N(Ry4)-；
每个T′独立地选自苯基、萘基、茚基、茚满基、四氢萘基、C3-10环烷基、3-至10-元杂环基、8-至11-元杂双环基、8-至30-元碳多环基和8-至30-元杂多环基；其中每个T′独立地任选被一个或多个相同或不同的-Ry2取代；
每个-Ry2独立地选自卤素、-CN、氧代基(＝O)、-COORy5、-ORy5、-C(O)Ry5、-C(O)N(Ry5Ry5a)、-S(O)2N(Ry5Ry5a)、-S(O)N(Ry5Ry5a)、-S(O)2Ry5、-S(O)Ry5、-N(Ry5)S(O)2N(Ry5aRy5b)、-SRy5、-N(Ry5Ry5a)、-NO2、-OC(O)Ry5、-N(Ry5)C(O)Ry5a、-N(Ry5)S(O)2Ry5a、-N(Ry5)S(O)Ry5a、-N(Ry5)C(O)ORy5a、-N(Ry5)C(O)N(Ry5aRy5b)、-OC(O)N(Ry5Ry5a)和C1-6烷基；其中C1-6烷基任选被一个或多个相同或不同的卤素取代；且
每个-Ry3、-Ry3a、-Ry4、-Ry4a、-Ry5、-Ry5a和-Ry5b独立地选自-H和C1-6烷基；其中C1-6烷基任选被一个或多个相同或不同的卤素取代。
18.权利要求1-17任一项所述的结合物或其可药用盐，其中-L2-具有14g/mol至750g/mol的分子量范围。
19.包含-L*-部分的试剂，其中-L*-部分与-Q结合，其中
-Q是-OH或-LG，其中-LG是离去基部分；
-L*-是式(II)的连接基部分：
Figure FDA0003729124440000061
其中
虚线表示与-Q连接；
v选自0或1；
-X1-选自-C(R8)(R8a)-、-N(R9)-和-O-；
＝X2选自＝O和＝N(R10)；
-X3-选自-O-、-S-和-Se-；
每个p独立地选自0或1，条件是至多一个p为0；
-R6是-PG，且-R6a选自-H、-C(R11)(R11a)(R11b)、-T和-PG；或者-R6和-R6a独立地选自-C(R11)(R11a)(R11b)和-T；
-RA和-RB独立地选自-H和-PG，条件是-RA或-RB中不多于一个可以是-H；
-PG是胺保护基部分；
-R9选自-C(R11)(R11a)(R11b)和-T；
-R10选自H、-C(R11)(R11a)(R11b)和-T；
-R1、-R1a、-R2、-R2a、-R3、-R3a、-R4、-R4a、-R5、-R5a、-R7、-R8、-R8a、-R11、-R11a和-R11b独立地选自-H、卤素、-CN、-C(O)OR12、-OR12、-C(O)R12、-C(O)N(R12)(R12a)、-S(O)2N(R12)(R12a)、-S(O)N(R12)(R12a)、-S(O)2R12、-S(O)R12、-N(R12)S(O)2N(R12a)(R12b)、-SR12、-NO2、-N(R12)C(O)OR12a、-N(R12)C(O)N(R12a)(R12b)、-OC(O)N(R12)(R12a)、-T、C1-6烷基、C2-6烯基和C2-6炔基；其中C1-6烷基、C2-6烯基和C2-6炔基任选被一个或多个相同或不同的-R13取代；和其中C1-6烷基、C2-6烯基和C2-6炔基任选被一个或多个选自如下的基团所间隔：-T-、-C(O)O-、-O-、-C(O)-、-C(O)N(R14)-、-S(O)2N(R14)-、-S(O)N(R14)-、-S(O)2-、-S(O)-、-N(R14)S(O)2N(R14a)-、-S-、-N(R14)-、-OC(OR14)(R14a)-、-N(R14)C(O)N(R14a)-和-OC(O)N(R14)-；
-R12、-R12a、-R12b独立地选自-H、-T、C1-6烷基、C2-6烯基和C2-6炔基；其中-T、C1-6烷基、C2-6烯基和C2-6炔基任选被一个或多个相同或不同的-R13取代，和其中C1-6烷基、C2-6烯基和C2-6炔基任选被一个或多个选自如下的基团所间隔：-T-、-C(O)O-、-O-、-C(O)-、-C(O)N(R14)-、-S(O)2N(R14)-、-S(O)N(R14)-、-S(O)2-、-S(O)-、-N(R14)S(O)2N(R14a)-、-S-、-N(R14)-、-OC(OR14)(R14a)-、-N(R14)C(O)N(R14a)-和-OC(O)N(R14)-；
其中每个T独立地选自苯基、萘基、茚基、茚满基、四氢萘基、C3-10环烷基、3-至10-元杂环基和8-至11-元杂双环基；其中每个T独立地任选被一个或多个相同或不同的-R13取代；
-R13选自卤素、-CN、氧代基、-C(O)OR15、-OR15、-C(O)R15、-C(O)N(R15)(R15a)、-S(O)2N(R15)(R15a)、-S(O)N(R15)(R15a)、-S(O)2R15、-S(O)R15、-N(R15)S(O)2N(R15a)(R15b)、-SR15、-N(R15)(R15a)、-NO2、-OC(O)R15、-N(R15)C(O)R15a、-N(R15)S(O)2R15a、-N(R15)S(O)R15a、-N(R15)C(O)OR15a、-N(R15)C(O)N(R15a)(R15b)、-OC(O)N(R15)(R15a)和C1-6烷基；其中C1-6烷基任选被一个或多个相同或不同的卤素取代；
其中-R14、-R14a、-R15、-R15a和-R15b独立地选自-H和C1-6烷基；其中C1-6烷基任选被一个或多个相同或不同的卤素取代；
任选地，基团对-R6/-R6a、-RA/-RB或-R6/-RA中的一对或多对可形成-PG部分；任选地，基团对-R1/-R1a、-R2/-R2a、-R3/-R3a、-R4/-R4a、-R5/-R5a或-R8/-R8a中的一对或多对与它们所连接的原子一起形成C3-10环烷基、3-至10-元杂环基或8-至11-元杂双环基；
任选地，基团对-R1/-R2、-R1/-R8、-R1/-R9、-R2/-R9或-R2/-R10中的一对或多对与它们所连接的原子一起形成环-A-；
其中-A-选自苯基、萘基、茚基、茚满基、四氢萘基、C3-10环烷基、3-至10-元杂环基和8-至11-元杂双环基；
任选地，基团对-R3/-R6、-R4/-R6、-R5/-R6、-R6/-R6a或-R6/-R7中的一对或多对可以与它们所连接的原子一起形成环-A′-；
其中-A′-选自3-至10-元杂环基和8-至11-元杂双环基；
其中-L*-任选被至少一个-L2-Z部分或至少一个-L2-Y部分取代和任选是进一步被取代的；
其中-L2-是单键或间隔基部分；
Z独立地是聚合物部分或C8-24烷基；
和其中-Y是可以任选以其被保护的形式存在的官能团。
20.权利要求19的试剂，其中式(II)的-L*-被至少一个-L2-Y部分或至少一个-L2-Z部分取代和任选是进一步被取代的。
21.权利要求19或20的试剂，其中式(II)的-L*-被一个-L2-Y部分取代。
22.根据权利要求19至21任一项的试剂，其中-Y选自硫羟、马来酰亚胺、胺、羟基、羧酸及衍生物、碳酸酯及衍生物、氨甲酸酯及衍生物、异硫氰酸酯、二硫化物、吡啶基二硫化物、甲基硫代磺酰基、乙烯基砜、醛、酮、卤代乙酰基、硒化物、叠氮、-NH-NH2、-O-NH2、末端炔、式(z’i)化合物
Figure FDA0003729124440000081
其中
Y1、Y2独立地是C或N，
Ra、Ra’、Ra1、Ra1’独立地是-H或C1-6烷基，
如果Y2是N，则ax1是0；如果Y2是C，则ax1是1；
任选地，如果Y2是C，则基团对Ra/Ra1形成化学键；
任选地，如果Y2是C，则基团对Ra’/Ra1’与它们所连接的原子一起形成环A’，和
A’是环丙基或苯基；
式(z’ii)化合物
Figure FDA0003729124440000082
其中
Y3是C或N；
式(z’iii)化合物
Figure FDA0003729124440000083
式(z’iv)化合物
Figure FDA0003729124440000091
其中
Ra2、Ra2’、Ra3、Ra3’是-H，
Figure FDA0003729124440000092
表示单键或双键，
任选地，基团对Ra2’/Ra3’与它们所连接的原子一起形成环A1’；和
A1’是5-元杂环基；
式(z’v)化合物
Figure FDA0003729124440000093
其中
Ra4、Ra4’、Ra5、Ra5’是-H，
Figure FDA0003729124440000094
表示单键或双键，
任选地，基团对Ra4/Ra5形成化学键，
任选地，基团对Ra4’/Ra5’与它们所连接的原子一起形成环A2’，且
A2’是5-元杂环基；
式(z’vi)化合物
Figure FDA0003729124440000095
其中
Ra6、Ra6’均为C1-6烷基，或者Ra6、Ra6’之一是-H且另一个选自C1-6烷基、-COORa7、-CONHRa7’和CH2ORa7”，且
Ra7、Ra7’、Ra7”独立地是-H或C1-4烷基；
式(z’vii)化合物
Figure FDA0003729124440000101
式(z’viii)化合物
Figure FDA0003729124440000102
其中
Ra8、Ra8′、Ra8″独立地选自-H和C1-4烷基；
式(z’ix)化合物
Figure FDA0003729124440000103
其中
Ra9是-H或C1-4烷基；
式(z’x)化合物
Figure FDA0003729124440000104
其中
Ra9选自-COORa11、-CONHRa11，和
Figure FDA0003729124440000105
其中
Y4是C或N,
Ra12选自-H、-COORa13、-CONRa13Ra13’、-CH2NRa13Ra13’和-NRa13CORa13’，和
Ra13、Ra13’独立地选自-H和C1-4烷基，
Aa3选自-H、甲基、叔丁基、-CF3、-COOR、
Figure FDA0003729124440000111
其中
每个Y5、Y6、Y7、Y8独立地是C或N，条件是Y5、Y6、Y7、Y8中不多于3个是N，
Y9、Y10、Y11、Y12、Y13各自是C、N、S或O，条件是Y9、Y10、Y11、Y12、Y13中不多于4个是N、S或O；
式(z’xi)化合物
Figure FDA0003729124440000112
式(z’xii)化合物
Figure FDA0003729124440000113
其中
Ra19、Ra19’独立地选自-H、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-8环烷基、3-至10-元杂环基、8-至11-元杂双环基、苯基、萘基、茚基、茚满基和四氢萘基；
式(z’xiii)化合物
Figure FDA0003729124440000114
其中
Ra20选自-H、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-8环烷基、3-至10-元杂环基、8-至11-元杂双环基、苯基、萘基、茚基、茚满基和四氢萘基；
式(z’xiv)化合物
Figure FDA0003729124440000123
其中
Ar选自苯基、萘基、茚基、茚满基和四氢萘基，
Y14是卤素，
Ra22、Ra23、Ra23’独立地选自-H、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-8环烷基、3-至10-元杂环基、8-至11-元杂双环基、苯基、萘基、茚基、茚满基和四氢萘基；
式(z’xv)化合物
Figure FDA0003729124440000121
Ar选自苯基、萘基、茚基、茚满基和四氢萘基，
Ra24、Ra24’、Ra24”、Ra24”’独立地选自-H、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-8环烷基、3-至10-元杂环基、8-至11-元杂双环基、苯基、萘基、茚基、茚满基和四氢萘基；
式(z’xvi)化合物
Figure FDA0003729124440000122
其中
Ra25选自-H、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-8环烷基、3-至10-元杂环基、8-至11-元杂双环基、苯基、萘基、茚基、茚满基和四氢萘基；
式(z’xvii)化合物
Figure FDA0003729124440000131
其中
Ra27、Ra27’独立地是-H或C1-6烷基；
式(z’xviii)化合物
Figure FDA0003729124440000132
式(z’xix)化合物
Figure FDA0003729124440000135
其中
-PPh2表示具有下式的基团
Figure FDA0003729124440000133
其中虚线表示与式(z’xix)部分的其余部分连接，
Ra12选自
Figure FDA0003729124440000134
其中
未标记的虚线表示与式(z’xix)部分的其余部分连接，
带星号的虚线表示与-L2-连接，
q是1或2，且
Y16是O或S；
式(z’xx)化合物
Figure FDA0003729124440000141
其中虚线表示与-L2-连接；且
式(z’xxi)化合物
Figure FDA0003729124440000142
其中式(z’i)、(z’ii)、(z’iii)、(z’iv)、(z’v)、(z’vi)、(z’vii)、(z’viii)、(z’ix)、(z’x)、(z’xi)、(z’xii)、(z’xiii)、(z’xiv)、(z’xv)、(z’xvi)、(z’xvii)、(z’xviii)和(z’xxi)部分被-L2-部分取代和任选是进一步被取代的。
23.根据权利要求19-22任一项的试剂，其中-Q是-LG。
24.根据权利要求19-23任一项的试剂，其中-R6是-PG和-R6a是-H。
25.根据权利要求19-24任一项的试剂，其中-X3-是-O-。
26.根据权利要求19-25任一项的试剂，其中-L*-具有式(II′)：
Figure FDA0003729124440000143
其中虚线表示与-Q连接；
-R1、-R1a、-R2、-R2a、-R3、-R3a、-R5、-R5a和-PG如权利要求12中定义的那样进行使用；
-L*-被至少一个-L2-Z部分或至少一个-L2-Y部分取代和任选是进一步被取代的；且
其中-L2-、-Y和Z如权利要求19中定义的那样进行使用。
27.根据权利要求19-26任一项的试剂，其中-R1、-R1a、-R2、-R2a、-R3、-R3a、-R5和-R5a是-H。
28.中间体(A)，其包含权利要求19-27任一项的式(II)的-L*-部分，其中-L*-与至少一个-D部分结合，其中
每个-D独立地是药物D-H的包含伯胺或仲胺的部分；
式(II)中的虚线表示与-D的伯胺或仲胺的氮连接；
式(II)的-L*-任选被至少一个-L2-Z部分或至少一个-L2-Y部分取代和任选是进一步被取代的；
-L2-独立地是单键或间隔基部分；
Z独立地是聚合物部分或C8-24烷基；
和其中-Y是官能团，所述官能团可以任选地以其被保护的形式存在。
29.权利要求28的中间体，其中式(II)的-L*-被至少一个-L2-Y部分或至少一个-L2-Z部分取代和任选是进一步被取代的。
30.合成权利要求1-18任一项的结合物的方法，其中该方法包括如下步骤：
(a)提供权利要求19-27任一项的包含式(II)的连接基-L*-的试剂；
(b)使步骤(a)的试剂与包含伯胺或仲胺的药物结合，获得中间体(A)；
(c)使步骤(b)的中间体(A)接受脱保护条件，获得中间体(C′)或包含式(I)的连接基-L1-的结合物或中间体(B)；
(d)任选地，使步骤(c)获得的中间体(B)或(C′)接受迁移条件；
(e)任选地，使步骤(d)的中间体(B)或(C′)脱保护；和
(f)分离从步骤(c)、(d)或(e)产生的结合物；
其中任选地，在步骤(b)和(c)之间、(c)和(d)之间、(d)和(e)之间或(e)和(f)之间，至少一个Z部分与至少一个中间体(A)、(B)或(C′)结合。
31.药物组合物，包含权利要求1-18任一项所述的结合物或其可药用盐。
32.权利要求1-18任一项所述的结合物或其可药用盐或权利要求31所述的药物组合物，用作药剂。
33.权利要求1-18任一项所述的结合物或其可药用盐或权利要求31所述的药物组合物，用于可用D-H治疗的疾病的治疗方法中。
34.预防可用D-H预防或治疗的疾病或治疗患有可用D-H预防或治疗的疾病的患者的方法，该方法包括给患者施用有效量的权利要求1-18任一项的结合物或其可药用盐或权利要求31的药物组合物。
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