CN115136801A - 一种古侧柏全光照喷雾扦插方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及种植领域，具体公开了一种古侧柏全光照喷雾扦插方法，包括如下步骤：采集古侧柏的健壮枝条修剪为插穗，扦插至全光照喷雾插盘上的基质上，扦插后以全光照喷雾插盘喷雾浇水；所述全光照喷雾插盘表面距离地面的高度设为55cm。本发明经过近8年探索，初步攻克了扦插繁殖生根率低的难题，摸索了一套侧柏古树的扦插繁殖体系，建立一种周期短、生根率高、重复性好的侧柏古树扦插体系对保存古树的完整基因具有重要意义。

Description

一种古侧柏全光照喷雾扦插方法
技术领域
本发明涉及生物技术领域，尤其涉及一种提高侧柏古树扦插繁殖生根率、缩短扦插生根时间的方法。
背景技术
古树名木包含的基因资源，是林木遗传改良的最宝贵的种质材料。无性繁殖苗能保存古树的优良种质资源。扦插繁殖是常用的无性繁殖方法，但是采条母树树龄影响插条不定根形成，树龄越高，木质化程度越高，导致枝条的含水量和营养物质含量相对较低，造成古树扦插极难生根。为了减少对古树树体的破坏，精准剪取有效的枝条能显著提高生根率，但对古侧柏的枝条剪取数量化还有没有人研究，尤其是侧柏等针叶古树的枝条含有大量的抑制物质，随树龄增高抑制物增多从而造成古树生根难。由于古树生长素含量低，外源激素能提高古树的生根率，因此寻找更有益与古树扦插生根的生长物质调节势在必行。
全光照喷雾能使树木插条充分地进行光合作用，为插条发根创造有利条件。
但是古树扦插过程中对喷水、通风透气要求较高，全光照喷雾长时间喷水使古树的叶片水垢积累较厚，严重影响叶片光合和呼吸作用，早晨即使生根的幼苗成活率也很低。因此，本研究通过筛选不同树龄侧柏古树的扦插条件，建立一种周期短、生根率高、重复性好的侧柏古树扦插体系对保存古树的完整基因具有重要意义。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是如何进一步提高侧柏古树的扦插成活率。
为解决上述技术问题，本发明提供了一种古侧柏全光照喷雾扦插方法，包括如下步骤：采集古侧柏的健壮枝条修剪为插穗，扦插至全光照喷雾插盘上，扦插后以全光照喷雾插盘喷雾浇水；所述全光照喷雾插盘表面距离地面的高度设为55cm。
本文所述古侧柏为树龄在100年(含)以上的侧柏，具体树龄可为300年(含)以上、1000年(含)以上等。
所述健壮枝条为古侧柏的树冠南部中下部3年生枝条上第一轮分生的健壮枝条。
所述以全光照喷雾插盘喷雾浇水，具体可为高温晴天时每隔2min喷雾1圈，阴天时10-15min喷雾2圈。
上述方法中，所述插穗的基部直径可为2.4±0.5mm。
上述方法中，所述插穗的叶面积可为1290±600mm2。
上述方法中，所述插穗的叶和小枝之间的角度可为47±6°。
上述方法中，所述插穗的总长度可为12±3cm。
上述方法中，所述插穗从基部至第一个分支处的长度可为9±3cm。
上述方法中，所述扦插可包括扦插前进行黑暗处理的步骤。
上述方法中，所述扦插，可包括在扦插前以植物生长调节剂浸泡插穗12h。
所述植物生长调节剂由溶剂和溶质组成，溶剂为水，溶质为ABT1、没食子酸、阿魏酸和Vc，具体1L混合植物生长调节剂中包含1g的ABT1、1g的没食子酸、1g的阿魏酸和1g的Vc。
上述方法中，所述扦插，可包括扦插后刻伤，伤口处以体积百分含量为75％的酒精消毒。
上述方法中，所述扦插，可包括扦插后喷抑制蒸腾剂(国光公司产品，商品编号：10020982169639，稀释800-1000倍整株喷施)和叶面肥。
所述抑制蒸腾剂可选择国光公司的抑制蒸腾剂(商品编号：10020982169639)，喷施时以水稀释800-1000倍后整株喷施。
所述叶面肥可选择德沃公司的叶面肥(商品编号：100008519864)，喷施时以水稀释500倍后喷施叶面。
所述喷抑制蒸腾剂和叶面肥，扦插后第1天喷蒸腾剂，第5天喷叶面肥，第10天喷蒸腾剂，第15天喷叶面肥，第20天喷蒸腾剂后每5天喷一次叶面肥直到成活。
上述方法中，所述扦插，可包括扦插后以白醋清洗叶片，具体可为每周以食用白醋浸泡2h后清水冲洗叶片，共延续处理3个月。
本发明的古侧柏扦插方法，具体可包括如下步骤：
1)进行插穗采集与修剪：采集古侧柏的健壮枝条，先将枝条放于冰箱进行黑暗处理后修剪为插穗，具体选用新生枝条的叶和小枝之间的角度为47±6°的插穗，修剪至插穗基部直径为2.4±0.5mm，插穗总长度为12±3cm，插穗基部至第一个分支处长度为9±3cm，叶面积为1290±600mm2；
2)扦插前以使用植物生长调节剂浸泡接穗，所述植物生长调节剂由溶剂和溶质组成，溶剂为水，溶质为ABT1、没食子酸、阿魏酸和Vc，具体1L混合植物生长调节剂中包含1g的ABT1、1g的没食子酸、1g的阿魏酸和1g的Vc；
5)进行扦插：扦插至全光照喷雾插盘内的基质中，所述全光照喷雾插盘表面距离地面的高度为55.0cm；扦插后刻伤，伤口以愈伤膏消毒；
6)扦插后管理：喷抑制蒸腾剂和叶面肥；以全光照喷雾插盘喷雾浇水；每周以白醋清洗叶片。
本研究充分利用不同年龄的侧柏，通过开展扦插繁殖相关综合技术研究，经过近8年探索，初步攻克了扦插繁殖生根率低的难题，摸索了一套侧柏古树的扦插繁殖体系，建立一种周期短、生根率高、重复性好的侧柏古树扦插体系对保存古树的完整基因具有重要意义。
附图说明
图1为本发明实施例中全光照喷雾插盘平面图。
图2为本发明实施例1中全光照喷雾插盘单面墙高度图。
图3为本发明实施例1中全光照喷雾插盘优化前的照片，地面蒸发严重不透风。
图4为本发明实施例1中全光照喷雾插盘优化后的照片。
具体实施方式
生物材料购于生物公司，均可通过商业渠道获得
下面结合具体实施方式对本发明进行进一步的详细描述，给出的实施例仅为了阐明本发明，而不是为了限制本发明的范围。以下提供的实施例可作为本技术领域普通技术人员进行进一步改进的指南，并不以任何方式构成对本发明的限制。
下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法，按照本领域内的文献所描述的技术或条件或者按照产品说明书进行。下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
古树枝条珍贵，枝条生长与幼树相比有独特性，古树枝条生长缓慢与幼树侧柏的插穗相差很大，以前的研究以幼树为主，对于古树插穗的选择和修剪程度还没有研究，发明人经过8年的侧柏古树扦插，对不同的枝条的生根率进行了量化，对每个扦插的古树枝条提供最大可能的生根条件。侧柏古树扦插需要2-4个月的时间，全光照喷雾在夏季扦插，伤口很容易被感染病菌或者烂根，对扦插条件要求苛刻，在这个过程当中，对扦插的每一步都做到精益求精提高生根率，哪种生长类型古树的枝条、修剪的插穗长度、插穗基部至第个一分支处长度、叶面积等细节修剪等细节容易被忽视，但是在实际扦插过程中却直接影响扦插的生根率和成活率。同时，也会对古树的树势造成直接影响。以下实施例为本发明对侧柏古树扦插条件进行详细筛选，在无特别说明的情况下，以下实施例中扦插方法如下：
(一)插穗采取
采取中国林业科学研究院院内树龄为10年、20年、300年的侧柏，树冠南部中下部3年生枝条上第一轮分生的健壮枝条。
(二)插穗制备与处理
将枝条剪成插穗每20根一捆。以植物生长物质调节剂处理后进行扦插。
(三)基质准备
泥炭：珍珠岩＝2：8，扦插前1d用3‰的高锰酸钾对扦插基质进行消毒，扦插当日清水浇透。
(四)全光照喷雾插床准备
在中国林业科学研究院内的全光照喷雾插盘上进行扦插。全光照喷雾插盘平面图见图1。扦插后高温晴天时每隔2min喷雾1圈，做到勤喷少量，保持空气湿度在90％左右。阴天时，喷雾间隔时间为每10-15min喷雾2圈。
(五)温室培育
9月底室外温度较低，将全光照喷雾的培育的插穗转移至温室内继续培育，将生根的插穗装到基质为泥炭：珍珠岩＝5：1的培育穴继续培育。
(六)数据统计
扦插40天后进行愈伤率统计，愈伤率＝生成愈伤组织插穗的量/扦插插穗的总量；
扦插60天后进行生根率统计，生根率＝生根插穗的量/扦插插穗的总量；
扦插100天后进行成活率统计，成活率＝成活插穗的量/扦插插穗的总量。
实施例1、全光照喷雾插盘高度对不同树龄侧柏扦插的影响
侧柏生根时间长，全光照喷雾插盘太低夏季雨多排水不及时，容易将枝条的泡烂。插盘离地面低的另外一个缺点是地面吸热、蒸腾严重，造成基质底部温度过高而烂根。
2017年在北京，设置3种全光照喷雾插盘高度：0cm、5.0cm、55.0cm(见图2)。
每种树龄的插穗以每种全光照喷雾插盘高度扦插30个，扦插方法见上文的扦插方法，所用植物生长物质调节剂浓度为1000mg/L的IAA:NAA＝1:1的混合水溶液，统计愈伤率和生根率。结果如图表1所示：
表1全光照喷雾插盘高度对不同树龄侧柏扦插的影响
Figure BDA0003751473820000041
Figure BDA0003751473820000051
注：不同小写字母代表处理之间在0.05水平存在显著性差异；数值为平均值±标准差。
10年生、20年和300年生侧柏在地面插盘的愈伤率和生根率都较低，在5cm高的插盘(图3)时300年的侧柏古树愈伤率和生根率显著高于地面插盘，分别为：32.54％和17.71％。插盘高度为55cm时(图4)3个年龄段的愈伤率和生根率显著高于矮的插盘(P<0.05)，尤其300年侧柏古树愈伤率和生根率达到了48.21％和25.93％，说明高的插盘有良好的排水措施，尤其增加了透风措施，减少了烂根提高了成活率。
实施例2、插穗修剪程度对不同树龄侧柏扦插的影响
1、插穗基部直径的筛选
扦插时古树幼嫩的枝条内源生长激素含量高，细胞分裂能力强对生根有利。老化的枝条木质化程度高、组织过硬，根原基少造成生根困难。但是枝条太细时，木质化程度不够，营养物质少也不利于生根，因此插穗选择和剪取对生根率影响较大。
2018年在北京，针对不同树龄古树上采集的插穗，分别以不同基部直径进行修剪，具体如下：
10年生侧柏插穗修剪成基部直径为：2.4mm左右(“左右”为±0.5mm，下同)(本次实测为2.35±0.25mm)、3.2mm左右(本次实测为3.19±0.29mm)、3.6mm左右(本次实测为3.62±0.41mm)；
20年生侧柏插穗修剪成基部直径为：2.2mm左右(本次实测为2.22±0.23mm)、2.8mm左右(本次实测为2.83±0.27mm)、3.0mm左右(本次实测为2.97±0.3mm)；
300年生侧柏插穗修剪成基部直径为：2.3mm左右(本次实测为2.29±0.25mm)、2.4mm左右(本次实测为2.43±0.25mm)、3.7mm左右(本次实测为3.71±0.41mm)。
每种树龄的插穗以其对应的每种插穗基部直径扦插30个，扦插方法见上文的扦插方法，所用植物生长物质调节剂浓度为1000mg/L的IAA:NAA＝1:1的混合水溶液，统计生根率。
结果如表2，10年生、20年生和300年生侧柏插穗基部直径分别为3.2mm左右、2.8mm左右、2.4mm左右愈伤率和生根率较高，分别达到了64.98％、52.64％、23.12％。10年生、20年生侧柏的粗插穗高于细插穗，而300年生侧柏的粗插穗平均生根率最低，说明选择合适的插穗并进行精细的修剪能显著提高侧柏古树的扦插成活率(P<0.05)，针对300年古树插穗基部直径宜控制在2.4mm左右(即2.4±0.5mm)。
表2插穗基部直径对不同树龄侧柏扦插的影响
Figure BDA0003751473820000061
注：不同小写字母代表处理之间在0.05水平存在显著性差异；数值为平均值±标准差。
2、叶面积的筛选
全光照喷雾对叶片的面积要求严格，这主要是因为叶面积过大会使插穗蒸发力度增强，造成失水干枯；叶面积太小时枝条缺乏生根所需的营养。
2018年在北京，针对不同树龄古树上采集的插穗，分别以不同叶面积进行修剪，具体如下：
10年生侧柏插穗修剪的叶面积(即留叶量)标准如下：2050mm2左右(“左右”为±600mm2，下同)(本次实测为2053.04±228.05mm2)、3350mm2左右(本次实测为3346.8±369.39mm2)、4540mm2左右(本次实测为4539.2±543.02mm2)。
20年生侧柏插穗修剪叶面积标准如下：1720mm2左右(本次实测为1719.1±178.58mm2)、1980mm2左右(本次实测为1976.56±188.18mm2)、2890mm2左右(本次实测为2887.52±294.61mm2)；
300年生侧柏插穗修剪成叶面积为：1050mm2左右(本次实测为1048.72±96.35mm2)、1290mm2左右(本次实测为1289.6±144.27mm2)、1600mm2左右(本次实测为1599.72±160.87mm2)。
每种树龄的插穗以其对应的每种叶面积修剪后扦插30个，扦插方法见上文的扦插方法，所用植物生长物质调节剂浓度为1000mg/L的IAA:NAA＝1:1的混合水溶液，统计生根率。
根据叶面积和扦插后的生长状况统计显示(表3)，有利于提高10年生、20年生和300年生侧柏插穗生根能力的最佳叶面积为3350mm2左右、1980mm2左右、1290mm2左右，生根率分别为66.41％、56.56％、22.65％。因此合适的叶面积能制造营养物质和合成生长类激素，从而提高扦插生根率。尤其针对300年古树，合适的叶面积为1290mm2左右(即1290±600mm2)。
表3叶面积对侧柏古树扦插的影响
Figure BDA0003751473820000071
注：不同小写字母代表处理之间在0.05水平存在显著性差异；数值为平均值±标准差。
3、插穗叶和小枝的角度的筛选
侧柏具有独特的生长习性，随着枝龄的老化，叶片和枝条间的角度逐渐增大。根据这特性能有效的判断枝条的生长状况，但是古树和幼树的新生枝条的叶和小枝之间的角度差异很大。
2018年在北京，选择3种新生枝条的叶和小枝之间的角度：36°左右(“左右”为±6°，下同)、41°左右、47°左右。
每种树龄的插穗以每种新生枝条的叶和小枝之间的角度选择插穗30个进行扦插，扦插方法见上文的扦插方法，所用植物生长物质调节剂浓度为1000mg/L的IAA:NAA＝1:1的混合水溶液，统计生根率。
针对不同树龄的侧柏的叶片和枝条的角度进行筛选发现(表4)，10年生、20年生和300年生侧柏叶和小枝的角度分别为41°左右、41°左右、47°左右生根率较高，分别达到了60.68％、49.75％、21.55％。10年生、20年生侧柏的叶和小枝的角度小于300年生侧柏古树，而300年生侧柏的叶和小枝的角度47°左右(即47±6°)的角度比其他角度的生根率分别提高了11.26％、6.61％，提高结果显著(P<0.05)，说明根据叶片和小枝的夹角能提高侧柏古树的扦插成活率。
表4插穗叶和小枝的角度对不同树龄侧柏扦插的影响
Figure BDA0003751473820000072
Figure BDA0003751473820000081
注：不同小写字母代表处理之间在0.05水平存在显著性差异；数值为平均值±标准差。
4、插穗总长度的筛选
扦插时需要本身的枝条储备一定的营养，又能具有长出愈伤组织和生根的潜力。很多实验表明插穗总长度对扦插生根率影响显著，一般长的枝条比短的枝条生根率大，与基质接触的面积大。
2018年在北京，针对不同树龄古树上采集的插穗，分别以不同插穗长度剪出插穗，具体如下：
10年生侧柏插穗总长度标准如下：13cm左右(“左右”为±3cm，下同)(本次实测为13.78±1.53cm)、17cm左右(本次实测为17.92±1.98cm)、20cm左右(本次实测为20.32±2.43cm)；
20年生侧柏插穗总长度为：19cm左右(本次实测为19.52±2.03cm)、18cm左右(本次实测为18.47±1.76cm)、17cm左右(本次实测为17.58±1.79cm)；
300年生侧柏插穗总长度为：11cm左右(本次实测为11.74±1.26cm)、12cm左右(本次实测为12.32±1.28cm)、14cm左右(本次实测为14.76±1.63cm)。
每种树龄的插穗以其对应的每种插穗总长度扦插30个，扦插方法见上文的扦插方法，所用植物生长物质调节剂浓度为1000mg/L的IAA:NAA＝1:1的混合水溶液，统计生根率。
表5插穗总长度对不同树龄侧柏扦插的影响
Figure BDA0003751473820000082
注：不同小写字母代表处理之间在0.05水平存在显著性差异；数值为平均值±标准差。
对不同树龄的侧柏插穗与生根率的关系发现(表5)，10年生、20年生和300年生侧柏插穗总长度分别为17cm左右、17cm左右、12cm左右(即12±3cm)生根率较高，分别达到了59.15％、51.22％、23.01％。10年生、20年生侧柏的插穗总长度相似，而300年生侧柏的插穗总长度显著小于10年生、20年生侧柏(P<0.05)，说明随着树龄的增长古树生长缓慢，每年的侧柏古树的枝条抽枝短。
5、插穗基部至第个一分支处长度的筛选
对于全光照喷雾和配套的基质的特殊性，对插穗的插入基质的长度有一定要求，插穗插入基质过深容易烂枝，插入基质过浅则不能很好的保存水份，夏天太阳把枝条晒干。为了提高侧柏古树的扦插成活率对插穗插入基质进行了筛选。
2018年在北京，针对不同树龄古树上采集的插穗，分别选择插穗基部至第一分支处长度不同的插穗进行扦插，具体如下：
10年生侧柏插穗插穗基部至第个一分支处长度的标准为：9cm左右(“左右”为±3cm，下同)(本次实测为9.66±1.07cm)、12cm左右(本次实测为12.38±1.37cm)、13cm左右(本次实测为13.86±1.66cm)；
20年生侧柏插穗插穗基部至第个一分支处长度的标准为：10cm左右(本次实测为10.14±1.05cm)、11cm左右(本次实测为11.28±1.07cm)、14cm左右(本次实测为14.22±1.45cm)；
300年生侧柏插穗插穗基部至第个一分支处长度的标准为：6cm左右(本次实测为6.34±0.68cm)、8cm左右(本次实测为8.02±0.83cm)、9cm左右(本次实测为9.66±1.06cm)。
每种树龄的插穗以其对应的每种插穗插穗基部至第个一分支处长度扦插30个，扦插方法见上文的扦插方法，所用植物生长物质调节剂浓度为1000mg/L的IAA:NAA＝1:1的混合水溶液，统计生根率。结果见表6：
表6插穗插穗基部至第个一分支处长度对不同树龄侧柏扦插的影响
Figure BDA0003751473820000091
Figure BDA0003751473820000101
注：不同小写字母代表处理之间在0.05水平存在显著性差异；数值为平均值±标准差。
10年生、20年生和300年生侧柏插穗插穗基部至第个一分支处长度分别为12cm左右、11cm左右、9cm左右(即9±3cm)生根率显著高于其他处理(P<0.05)，分别达到了63.48％、52.56％、23.28％。10年生、20年生侧柏的插穗插穗基部至第个一分支处长度显著高于侧柏古树(P<0.05)，分别比300年生侧柏插穗留枝长4cm左右、3cm左右。
实施例3、枝条扦插前处理对不同树龄侧柏扦插的影响
扦插时采取枝条后进行黑暗化处理、喷施赤霉素等方法进行处理。可使枝条中抑制生长物质单宁明显下降，萌芽力增强，插穗扦插后生根快。
2019年在北京，设置4种枝条扦插前处理：
黑暗：冰箱4度中保存24h。
叶面肥：德沃，商品编号：100008519864、1:500比例进行稀释7天喷一次。
CK：不进行枝条扦插前处理。
每种树龄的插穗以每种枝条扦插前处理方法处理后，扦插30个，扦插方法见上文的扦插方法，所用植物生长物质调节剂为浓度为1000mg/L的IAA:NAA＝1:1的混合水溶液，统计愈伤率和生根率。
通过表7可知，古树黑暗处理对10年生、20年生、300年生侧柏的枝条的愈伤率和生根率有显著提高，愈伤率分别为：91.14％、62.08％、43.82％，生根率分别为：64.17％、52.95％、22.55％。尤其是300年古树的愈伤率和生根率提高幅度显著大于其他两个树龄(P<0.05)。说明黑暗处理等能消除或减少侧柏古树插穗的抑制物质含量，从而提高扦插生根率。
表7枝条扦插前处理对不同树龄侧柏扦插的影响
Figure BDA0003751473820000102
Figure BDA0003751473820000111
注：不同小写字母代表处理之间在0.05水平存在显著性差异；数值为平均值±标准差。
实施例4、植物生长调节剂对不同树龄侧柏扦插的影响
1、杀菌消毒物质的筛选
插穗中含有阻碍生根的物质有单宁树脂和氧化酶等，没食子酸和阿魏酸、抗氧化具有抗炎能减轻其有害作用。阿魏酸抗氧化作用显著，对自由基、过氧化硝基等都有良好的清除效果。
2019年在北京，设置5种插穗扦插前植物生长调节剂处理方式：
槲皮黄素：以1000mg/L的槲皮黄素溶液(溶剂为水)浸泡处理插穗1min。
芦丁：以1000mg/L的芦丁溶液(溶剂为水)浸泡处理插穗1min。
没食子酸：以1000mg/L的没食子酸溶液(溶剂为水)浸泡处理插穗1min。
阿魏酸：以1000mg/L的阿魏酸溶液(溶剂为水)浸泡处理插穗1min。
CK：插穗不进行植物生长调节剂处理。
每种树龄的插穗以每种植物生长调节剂处理后，扦插30个。扦插方法见上文的扦插方法，统计愈伤率和生根率。
表8植物生长调节剂对不同树龄侧柏扦插的影响
Figure BDA0003751473820000112
注：不同小写字母代表处理之间在0.05水平存在显著性差异；数值为平均值±标准差。
通过表8可知，使用1000mg/L没食子酸或阿魏酸处理后，4个树龄的扦插愈伤率和生根率明显高于槲皮黄素或芦丁处理。对于10年生、20年生的插穗没食子酸处理稍好于阿魏酸，生根率分别为68.17％、71.08％。但对于300年的古侧柏的生根率好于没食子酸处理，生根率为21.47％。这可能是因为没食子酸和阿魏酸都能起到杀菌消毒的作用。
2、防止插穗褐化物质的筛选
侧柏古树随着年龄的增加而插穗生根能力下降的原因，除了生活力衰退外，生根所必需的物质减少，抑制物质造成枝条底部褐变。活性炭(AC)、抗坏血酸(Vc)和次氯酸钠(NaClO)为褐变抑制剂，0.1％硝酸银和2％酒精能清除抑制物。
2019年在北京，设置6种防止插穗褐化处理：
活性炭(AC)：以质量百分含量0.1％的AC水溶液浸泡处理插穗12h。
抗坏血酸(Vc)：以质量百分含量0.1％的Vc水溶液浸泡处理插穗12h。
CK：插穗不进行防止插穗褐化处理。
每种树龄的插穗以每种防止插穗褐化处理后，扦插30个。扦插方法见上文的扦插方法，统计愈伤率和生根率，见表9。
表9内源生根抑制物清除对不同树龄侧柏扦插的影响
Figure BDA0003751473820000121
注：不同小写字母代表处理之间在0.05水平存在显著性差异；数值为平均值±标准差。
如表9所示，0.1％硝酸银和2％酒精处理对3个年龄段的扦插愈伤率和生根率都有一定的促进作用。而Vc处理300年侧柏古树插穗的愈伤率和生根率分别为：41.94％和18.42％。其中Vc浸泡12h对300年侧柏的促进愈伤率和生根率效果显著，分别是ck的1.91和1.42倍。说明Vc处理能减少侧柏插穗底部褐化而影响愈伤率和生根率。
在上述1和2结果的基础上进行混合植物生长调节剂配方的筛选如下：
3、第一组混合植物生长调节剂处理筛选
2020年在北京，调配如下混合植物生长调节剂：
ABT1+没食子酸：溶剂为水，溶质为ABT1和没食子酸，具体1L混合植物生长调节剂中包含1g的ABT1和1g的没食子酸。
ABT1+没食子酸+阿魏酸：溶剂为水，溶质为ABT1、没食子酸和阿魏酸，具体1L混合植物生长调节剂中包含1g的ABT1、1g的没食子酸和1g的阿魏酸；
ABT1+没食子酸+阿魏酸+Vc：溶剂为水，溶质为ABT1、没食子酸、阿魏酸和Vc，具体1L混合植物生长调节剂中包含1g的ABT1、1g的没食子酸、1g的阿魏酸和1g的Vc。
CK：水。
插穗以每种混合植物生长调节剂处理后，扦插30个。扦插方法见上文的扦插方法，统计愈伤率和生根率，见表10。
表10混合植物生长调节剂处理对不同树龄侧柏扦插的影响
Figure BDA0003751473820000131
由表10可知，用ABT1+没食子酸+阿魏酸+Vc处理10年、20年以及300年侧柏插穗，愈伤率和生根率都能达到较高水平。而300年侧柏古树插穗而言，用ABT1：没食子酸：阿魏酸VC＝1:1:1:1的处理插穗愈伤率和生根率分别比ck提高了6.51％、5.53％。结果显示，不同年龄、不同的抑制物清除方式对侧柏插穗生根影响有较大差异。用ABT1：没食子酸：阿魏酸VC＝1:1:1:1处理插穗，不仅能抑制褐变，又能促使伤口愈合和促进不定根形成的最佳措施。
4、第二组混合植物生长调节剂处理筛选
植物生长调节剂能显著提高扦插的成活率，发明人在前期对筛选出来的植物生长调节剂NAA+IBA和NAA+IBA+木质素酸钠在侧柏古树扦插过程中能取得较好的生根率，现在第一组筛选结果的基础上，2021年在北京设置了第二组混合植物生长调节剂处理对比实验：
ABT1+没食子酸+阿魏酸+Vc：溶剂为水，溶质为ABT1、没食子酸、阿魏酸和Vc，具体1L混合植物生长调节剂中包含1g的ABT1、1g的没食子酸、1g的阿魏酸和1g的Vc。
NAA+IBA：溶剂为水，溶质为NAA和IBA，具体1L混合植物生长调节剂中包含1g的NAA和1g的IBA。
NAA+IBA+木质素酸钠：溶剂为水，溶质为NAA、IBA和木质素酸钠，具体1L混合植物生长调节剂中包含1g的NAA、1g的IBA和1g的木质素酸钠。
每种树龄的插穗以每种混合植物生长调节剂处理后，扦插30个。扦插方法见上文的扦插方法，统计愈伤率和生根率，结果见表11。
表11混合植物生长调节剂处理对不同树龄侧柏扦插的影响
Figure BDA0003751473820000141
通过表11可以看出，10年生侧柏使用ABT1+没食子酸+阿魏酸+Vc处理，愈伤率和生根率分别比NAA+IBA处理和NAA+IBA+木质素酸钠处理提高了8.42％、6.37％和10.62％、6.85％。尤其是在300年侧柏古树上使用ABT1+没食子酸+阿魏酸+Vc处理的愈伤率和生根率43.69％、24.19％，愈伤率和生根率分别比NAA+IBA处理和NAA+IBA+木质素酸钠处理提高了1.19倍、1.24倍和1.41倍、1.18倍。ABT1+没食子酸+阿魏酸+Vc提高生根率显著高于另外两个处理(P<0.05)。
实施例5、刻伤后伤口处理对不同树龄侧柏扦插的影响
刻伤可以使插穗的营养物质和激素向刻伤处运输，并且重新吸收激素，使根原基重新生长而生根。但是刻伤会造成的伤口面积较大，伤口容易腐烂而不生根。因此将刻伤后的插穗伤口及时涂上愈合剂，能促使插穗伤口愈合。
2020年在北京，对嫁接后的侧柏苗进行刻伤(插穗愈伤组织底部0.5cm处刻伤一刀，深达木质部)后可到设置4种不同的伤口消毒处理，以不消毒为对照，研究刻伤后伤口处理对不同树龄侧柏扦插的影响。
愈伤膏(德沃公司产品，商品编号：100012445784)涂抹伤口。
酒精：用毛刷均匀涂刷体积百分含量75％的酒精。
多菌灵：用毛刷均匀涂刷体积百分含量2％的多菌灵(德沃公司产品、商品编号：100012251930、稀释500倍溶液)。
CK：不消毒。
每种树龄的插穗以每种刻伤伤口消毒方法处理后，扦插30个。扦插方法见上文的扦插方法，统计生根率。结果如表12：
表12刻伤后伤口如何处理对不同树龄侧柏扦插的影响
Figure BDA0003751473820000151
刻伤后不处理的生根效果最差，10年和20年生侧柏的插穗的生根率只有54.41％和45.82％，10年和20年生侧柏的插穗扦插后刻伤伤口以愈伤膏处理，生根率显著高于其它处理(P<0.05)，分别达到了80.78％和68.48％，而300年古侧柏的插穗刻伤伤口以酒精处理后生根率显著高于其他处理(P<0.05)，为6.28％。
实施例6、防止叶面失水处理对不同树龄侧柏扦插的影响
扦插时正值高温时期，过量的蒸腾使插穗失水严重，会造成脱水干梢现象，因此需要防止叶面失水处理保水防护。
2020年在北京，设置4种不同的插穗叶片防失水处理，以不处理为对照，研究不同插穗叶片防失水处理对不同树龄的侧柏插穗扦插效果的影响。
抑制蒸腾剂：喷抑制蒸腾剂(国光公司产品，商品编号：10020982169639)，稀释800-1000倍整株喷施，5天喷一次，连喷3次共15天。
叶面肥：喷叶面肥(德沃公司产品，商品编号：100008519864)，1:500比例进行稀释，5天喷一次，持续喷直到成活。
抑制蒸腾剂+叶面肥：喷抑制蒸腾剂和叶面肥，第1天喷蒸腾剂(稀释800-1000倍整株喷施，下同)，第5天喷叶面肥(1:500比例进行稀释，下同)，第10天喷蒸腾剂，第15天喷叶面肥，第20天喷蒸腾剂后每5天喷一次叶面肥直到成活。
CK：不处理。
每种树龄的插穗以每种防失水处理方法处理后，扦插30个。扦插方法见上文的扦插方法，使用ABT1+没食子酸+阿魏酸+Vc，统计愈伤率和生根率，结果见表13。
表13防止叶面失水处理对不同树龄侧柏扦插的影响
Figure BDA0003751473820000161
通过表13可以看出，喷抑制蒸腾剂显著提高3个年龄段的插穗的愈伤率和生根率，抑制蒸腾剂和叶面肥同时使用生根率最高，分别为63.49％、43.98％和25.8％，尤其是古树的愈伤率和生根率达到了显著水平(P<0.05)。
实施例7、清除叶面水垢处理对不同树龄侧柏扦插的影响
古树扦插时间较长，全光照喷雾后的侧柏叶面有很多水垢，水垢影响枝条的呼吸和光合作用，因此除去叶表面的水垢对叶生长很关键，喷白醋和小苏打水对溶解水垢有好处。
2020年在北京，对扦插后的扦插苗设置4种不同的清除叶面水垢处理，研究其对不同树龄的侧柏插穗扦插效果的影响。
清水清洗：每周用清水清洗叶片，共延续处理3个月。
白醋清洗：每周以食用白醋浸泡2h后清水冲洗叶片，共延续处理3个月。
小苏打清洗：每周用体积百分含量1％的小苏打水溶液浸泡2h后清水冲洗叶片，共延续处理3个月。
CK：不处理。
每种树龄的插穗以清除叶面水垢处理处理后，扦插30个。扦插方法见上文的扦插方法，统计成活率，结果见表14。
表14清除叶面水垢处理对对不同树龄侧柏扦插的影响
Figure BDA0003751473820000162
Figure BDA0003751473820000171
统计表明，不同清除叶面水垢处理叶片存在显著差异，10年、20年和300年经过白醋处理后插穗的效果最显著，成活率分别为60.72％、48.12％、7.06％，分别为不处理的1.37、1.29和2.09倍。结果表明喷洒白醋对提高300年的侧柏古树扦插成活率效果显著(P<0.05)，是提高保存率的较好措施。
实施例8、提高侧柏生根率的组合方法
2021年在北京，依据实施例1-7的结果，利用前期10年、20年、300年生侧柏古树所得的扦插优化组合方式(表15)，以10年生侧柏为对照，对300年、1000年生侧柏进行扦插。
表15提高侧柏生根率的组合方法
Figure BDA0003751473820000172
结果如表16所示，优化后的扦插组合方法能显著提高侧柏的扦插成活率，10年侧柏生根率和成活率分别比对照方法提高了26.45％、27.98％，成活时间缩短了15.4天，达到了显著水平(P<0.05)。优化后的扦插组合方法使300年生侧柏的生根率和成活率分别提高了23.22％和14.7％，成活时间缩短了17.4天。优化后的扦插组合方法使1000年生侧柏的生根率和成活率分别提高了7.98％和4.42％，成活时间缩短了22.3天达到了显著水平(P<0.05)。结果说明，优化后的扦插组合方法能显著缩短生根时间、提高侧柏古树的扦插成活率达到了显著水平(P<0.05)。
表16古树生根率及缩短生根时间
Figure BDA0003751473820000181
综上，本发明公开了一种促进侧柏古树扦插生根及成活的方法，该方法旨在解决侧柏古树利用全光照喷雾扦插育苗过程中减少插穗内抑制生根物质与生根难的技术问题。本发明的有益效果主要体现在：包括对扦插时用的全光照喷雾插盘进行优化有效避免根部腐烂；选择粗度合适的枝条；对侧柏古树扦插条进行处理增强细胞分生能力、清除古树插穗的抑制物、优化生长物质调节剂、刻伤、改变环境提高扦插生根率，除去叶片水垢提高生根苗的保存率，达到提高侧柏古树插穗的扦插生根率、促成发达根系、提高成活率的目的，实现古树的快速利用。
以上对本发明进行了详述。对于本领域技术人员来说，在不脱离本发明的宗旨和范围，以及无需进行不必要的实验情况下，可在等同参数、浓度和条件下，在较宽范围内实施本发明。虽然本发明给出了特殊的实施例，应该理解为，可以对本发明作进一步的改进。总之，按本发明的原理，本申请欲包括任何变更、用途或对本发明的改进，包括脱离了本申请中已公开范围，而用本领域已知的常规技术进行的改变。按以下附带的权利要求的范围，可以进行一些基本特征的应用。

Claims (8)

1.一种古侧柏全光照喷雾扦插方法，其特征在于，包括如下步骤：采集古侧柏的健壮枝条修剪为插穗，扦插至全光照喷雾插盘上的基质上，扦插后以全光照喷雾插盘喷雾浇水；所述全光照喷雾插盘表面距离地面的高度设为55cm。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述插穗的基部直径为2.4±0.5mm；所述插穗的叶和小枝之间的角度为47±6°；所述插穗的总长度为12±3cm；所述插穗从基部至第一个分支处的长度为9±3cm；所述插穗的叶面积为1290±600mm2。
3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述扦插包括扦插前进行黑暗处理的步骤。
4.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述扦插包括使用植物生长调节剂，所述植物生长调节剂由溶剂和溶质组成，溶剂为水，溶质为ABT1、没食子酸、阿魏酸和Vc，具体1L混合植物生长调节剂中包含1g的ABT1、1g的没食子酸、1g的阿魏酸和1g的Vc。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述扦插包括扦插后刻伤，伤口处以体积百分含量为75％的酒精消毒。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述扦插包括扦插后喷抑制蒸腾剂和叶面肥。
7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述扦插包括扦插后以白醋清洗叶片。
8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述扦插包括如下步骤：
1)进行插穗采集与修剪：采集古侧柏的健壮枝条，先将枝条放于冰箱进行黑暗处理后修剪为插穗，具体选用新生枝条的叶和小枝之间的角度为47±6°的插穗，修剪至插穗基部直径为2.4±0.5mm，插穗总长度为12±3cm，插穗基部至第一个分支处长度为9±3cm，叶面积为1290±600mm2；
2)扦插前以使用植物生长调节剂浸泡接穗，所述植物生长调节剂由溶剂和溶质组成，溶剂为水，溶质为ABT1、没食子酸、阿魏酸和Vc，具体1L混合植物生长调节剂中包含1g的ABT1、1g的没食子酸、1g的阿魏酸和1g的Vc；
3)进行扦插：扦插至全光照喷雾插盘内的基质中，所述全光照喷雾插盘表面距离地面的高度为55.0cm；扦插后刻伤，伤口以愈伤膏消毒；
4)扦插后管理：喷抑制蒸腾剂和叶面肥；以全光照喷雾插盘喷雾浇水；每周以白醋清洗叶片。
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