CN115124602B - Gip和glp-1的双受体激动剂、药物组合物及用途 - Google Patents

Gip和glp-1的双受体激动剂、药物组合物及用途 Download PDF

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Abstract

本公开属于医药技术领域，涉及GIP和GLP‑1的双受体激动剂、药物组合物及用途。特別地，本公开涉及如式I所示的化合物、包含其的药物组合物及其作为GIP和GLP‑1的双受体激动剂在医药领域中的应用。本公开中的如式I所示的化合物表现出优良的GIPR和GLP‑1R激动活性以及降低血糖、控制体重的药物活性，是一种极具临床应用前景的治疗药物，可用于预防、治疗糖尿病、糖尿病并发症、肥胖症、或肥胖并发症等疾病。

Description

GIP和GLP-1的双受体激动剂、药物组合物及用途
本公开要求如下专利申请的优先权：于2021年03月25日提交中国专利局、申请号为202110321851.6的中国专利申请，于2021年05月20日提交中国专利局、申请号为202110553745.0的中国专利申请；上述专利申请的全部内容通过引用结合在本公开中。
技术领域
本公开属于医药技术领域，具体来说，本公开涉及如式I所示的多肽、GIP和GLP-1的双受体激动剂、药物组合物及其在预防和/或治疗代谢紊乱相关疾病中的用途。
背景技术
肥胖和糖尿病是日益严重的全球健康问题，其与多种其他疾病相关，包括心血管疾病(CVD)、阻塞性主睡眠呼吸暂、中风、外周动脉疾病、微血管并发症和骨关节炎等。因此，针对肥胖、糖尿病及其并发症开发新的疗法和治疗药物，对于改善人类健康具有重要意义。
葡萄糖依赖性促胰岛素肽(glucose-dependent insulinotropic peptide，GIP)是42个氨基酸的胃肠调节肽，其通过在葡萄糖存在下刺激从胰腺β细胞分泌胰岛素以及保护胰腺β细胞，在葡萄糖内稳态中发挥生理作用。胰高血糖素样肽-1(Glucagon-likepeptide-1，GLP-1)是37个氨基酸的肽，其刺激胰岛素分泌、保护胰腺β细胞、并抑制胰高血糖素分泌、胃排空和食物摄入，导致体重减轻。GIP和GLP-1分别由小肠内皮的K细胞和L细胞分泌，被称为肠促胰岛素，肠促胰岛素受体信号传导对葡萄糖内稳态发挥关键的生理相关作用。
GIP和GLP-1都是通过与其特异性受体结合来产生相应的生理作用，其分别与GIP(GIPR)受体和GLP-1受体(GLP-1R)结合。这两种受体都属于G蛋白偶联受体家族。在正常生理学中，GIP和GLP-1在餐后从肠道分泌，这些肠促胰岛素增强对食物的生理反应，包括诱导饱腹感、促进胰岛素分泌、保护胰腺β细胞和营养物质处置，已发现2型糖尿病患者具有受损的肠促胰岛素反应。
尽管GIP和GLP-1具有潜在的抗糖尿病活性，但已发现GLP-1类似物的给药受到副作用(如恶心和呕吐)的限制，因此最常见的是给药不能实现全效血糖控制和体重减轻。单独的GIP在2型糖尿病人中具有非常限的葡萄糖降低能力。天然GIP和GLP-1两者可以被普遍存在的蛋白酶DPP IV快速灭活，因此只能用于短期代谢控制。
一般糖尿病患者会产生对GIP耐受，即使高于生理水平的GIP也降糖效果不大。但GLP-1则不同，多数糖尿病患者保持对GLP-1的敏感性。GIP、GLP-1的这种关系与另外两个重要激素胰岛素、瘦素类似，糖尿病患者对胰岛素敏感、但肥胖患者对瘦素耐受。所以尽管GLP-1领域风生水起成为现在最重要的一类降糖药，但GIP开发非常缓慢。研究表明，如果降糖到一定程度可以恢复对GIP的敏感，这表明共同激动GLP-1R/GIPR可以发挥协同降血糖作用，GIP和GLP-1的双受体激动剂可能产生更加优异的降低血糖作用以及胰岛素分泌刺激。
现有技术文献WO2016111971A1公开了一种GIP/GLP双激动剂LY3298176，LY3298176主要为GIP的氨基酸序列，并在第20位的赖氨酸以GLP-1的药物修饰手段进行修饰。LY3298176目前在一个二期临床的降糖、减肥疗效临床实验中，结果显示在初始剂量较低和随后剂量上升较小的情况下，疗效和耐受性得到改善；仅仅治疗8周后，2型糖尿病患者A1C和体重即表现出显著降低。
研发结构新颖的GIP和GLP-1的双受体激动剂，为肥胖、糖尿病及其并发症提供安全、有效的新的治疗方法，是本领域亟需解决的重要问题。
发明内容
发明要解决的问题
鉴于现有技术中存在的问题，例如，单独施用GIP或GLP-1作为抗糖尿病药物的治疗应用前景存在较多限制。为此，本公开提供了一种结构新颖的如式I所示的化合物，其同时具有GLP-1R和GIPR的激动活性，该化合物作为GLP-1和GIP的双受体激动剂，表现出优异的降血糖效果，具有良好的临床应用前景。
用于解决问题的方案
本公开首先提供了如式I所示的化合物或其药学上可接受的盐、酯、溶剂合物、光学异构体、互变异构体、同位素标记物或前药：
Tyr-Aib-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Ile-Aib-Leu-Asp-Lys-Ile-Ala-Gln-Lys-Ala-Phe-Val-Gln-Trp-Leu-Ile-Ala-Gly-Gly-Pro-Ser-Ser-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser-A40
I；
其中，A40为通过肽键与Ser连接的以下结构：
A40为
R1为-(Z1)m-(Z2)n-C(＝O)-(CH2)o-C(＝O)-Z3；
m为0或1；
若存在，Z1为-C(＝O)-(CH2)r-(Z4)p-NH-，其中p为4-8中的任一整数，每一个Z4各自独立地为-O-CH2-CH2-或-NH-C(＝O)-CH2-，r为1或2；
n为0-2中的任一整数；
若存在，每一个Z2各自独立地为 其中q为2-5中的任一整数；
o为14-18中的任一整数，优选18；
Z3为羟基或
在本公开中，如式I所示的化合物中第1位氨基酸～第39位的氨基酸序列(Tyr-Aib-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Ile-Aib-Leu-Asp-Lys-Ile-Ala-Gln-Lys-Ala-Phe-Val-Gln-Trp-Leu-Ile-Ala-Gly-Gly-Pro-Ser-Ser-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser)如SEQ ID NO:1所示。
在一个实施方式中，本公开所述的化合物或其药学上可接受的盐、酯、溶剂合物、光学异构体、互变异构体、同位素标记物或前药，其中，
R1为-C(＝O)-(CH2)o-C(＝O)-Z3；
o为14-18中的任一整数，优选18；
Z3为羟基或优选羟基。
在一个实施方式中，本公开所述的化合物或其药学上可接受的盐、酯、溶剂合物、光学异构体、互变异构体、同位素标记物或前药，其中，
R1为-Z1-Z2-C(＝O)-(CH2)o-C(＝O)-Z3；
Z1为-C(＝O)-CH2-(Z4)7-NH-，其中每一个Z4各自独立地为-O-CH2-CH2-或-NH-C(＝O)-CH2-，优选-(Z4)7-为-(O-CH2-CH2)3-(NH-C(＝O)-CH2)-(O-CH2-CH2)3-或-(O-CH2-CH2)7-；
Z2为优选其中q为2-5中的任一整数，优选2；
o为14-18中的任一整数；
Z3为羟基或优选羟基。
在一个实施方式中，根据本公开所述的化合物或其药学上可接受的盐、酯、溶剂合物、光学异构体、互变异构体、同位素标记物或前药，其特征在于，A40选自如下任一项所示的结构：
优选如下任一项所示的结构：
本公开进一步提供了如下式I-1～I-14任一项所示的化合物或其药学上可接受的盐、酯、溶剂合物、光学异构体、互变异构体、同位素标记物或前药：
本公开进一步提供了一种GIP和GLP-1的双受体激动剂，所述GIP和GLP-1的双受体激动剂为如下式I-3所示的化合物或其药学上可接受的盐、酯、溶剂合物、光学异构体、互变异构体、同位素标记物或前药：
本公开中肽的脂肪侧链的长短及具体结构并不影响降血糖的效果，主要影响化合物在体内的代谢速度，即药物分子在体内的缓释时间，也即影响药效的总有效时间，也即本公开的化合物I-1、I-2、I-3、I-4、I-5、I-6、I-7、I-8、I-9、I-10、I-11、I-12、I-13、I-14具有相当的降血糖效果，体内代谢速度也存在相似性。现有技术文献WO2016111971A1、WO2006097537A2已经披露了脂肪侧链对GLP激动剂活性剂代谢的影响，上述专利的全部内容通过引用的方式作为本公开的一部分。
本公开进一步提供了一种药物组合物，其包括根据本公开所述的化合物或其药学上可接受的盐、酯、溶剂合物、光学异构体、互变异构体、同位素标记物或前药，或根据本公开所述的GIP和GLP-1的双受体激动剂；
可选地，所述药物组合物还包括一种或多种药学上可接受的载体。
本公开进一步提供了根据本公开所述的化合物或其药学上可接受的盐、酯、溶剂合物、光学异构体、互变异构体、同位素标记物或前药，根据本公开所述的GIP和GLP-1的双受体激动剂，或根据本公开所述的药物组合物在制备用于预防和/或治疗代谢紊乱相关疾病的药物中的用途；
可选地，所述代谢紊乱相关疾病为糖尿病、糖尿病并发症、肥胖症、或肥胖并发症。
在一个实施方式中，根据本公开所述的化合物或其药学上可接受的盐、酯、溶剂合物、光学异构体、互变异构体、同位素标记物或前药，根据本公开所述的GIP和GLP-1的双受体激动剂，或根据本公开所述的药物组合物，其用于预防和/或治疗代谢紊乱相关疾病；
可选地，所述代谢紊乱相关疾病为糖尿病、糖尿病并发症、肥胖症、或肥胖并发症。
本公开进一步提供了一种预防和/或治疗代谢紊乱相关疾病的方法，其包括向受试者施用预防和/或治疗有效量的根据本公开所述的化合物或其药学上可接受的盐、酯、溶剂合物、光学异构体、互变异构体、同位素标记物或前药，根据本公开所述的GIP和GLP-1的双受体激动剂，或根据本公开所述的药物组合物；
可选地，所述代谢紊乱相关疾病为糖尿病、糖尿病并发症、肥胖症、或肥胖并发症。
发明的效果
本公开提供了如式I所示的结构新颖的化合物，其在第40位的赖氨酸残基进行R1基团的修饰，本公开通过实验发现，式I所示的化合物同时具有GIP和GLP-1的多肽活性，是一种GIP和GLP-1的双受体激动剂。与第20位的赖氨酸残基修饰的化合物LY3298176相比，式I所示的化合物表现出相当或降低的EC50值。
侧链连接位置对化合物的降血糖效果具有显著影响，式I所示的化合物作为一种GIP和GLP-1的双受体激动剂，表现出显著的降血糖和减轻二型糖尿病模型(db/db)小鼠体重的效果，为代谢紊乱相关疾病的预防、治疗提供了一种极具临床应用前景的治疗药物，可用于预防、治疗糖尿病、糖尿病并发症、肥胖症、或肥胖并发症等疾病。
在一个实施方式中，本公开提供了如式I-3所示的化合物，本公开在细胞实验中发现，式I-3所示的化合物与GIP和GLP-1的双受体激动剂LY3298176相比，对GIPR和GLP-1R均具有更低的EC50值；与已上市药物索马鲁肽相比，式I-3所示的化合物对GIPR具有显著低的EC50值，说明式I-3所示的化合物对GIPR和GLP-1R均表现出明显好的激活效果，其作为GIP和GLP-1的双受体激动剂的活性优于目前已开发的化合物。并且，式I-3所示的化合物可以有效降低二型糖尿病模型(db/db)小鼠的血糖含量以及糖化血红蛋白的含量，控制小鼠体重的增长，并在影响小鼠胰岛素分泌方面也表现出更优的效果。且式I-3所示的化合物在降低二型糖尿病模型小鼠的血糖以及控制体重方面，效果均优于化合物LY3298176。式I-3所示的化合物在预防、治疗糖尿病或糖尿病并发症，以及肥胖症或肥胖并发症等代谢紊乱相关疾病中表现出重要的临床应用前景。
在一个实施方式中，式I-3所示化合物(BG128)可引起二型糖尿病模型(db/db)小鼠体重和摄食量急性下降，在给药后期维持相对稳定。式I-3所示化合物显著降低db/db小鼠首次给药后非空腹血糖、空腹血糖，降低外周血胰岛素和糖化血红蛋白含量。并且，式I-3所示化合物对小鼠非空腹血糖、血清胰岛素、小鼠体重降低率的作用效果优于等剂量的阳性药物Tirzepatide。
在一个实施方式中，式I-3所示化合物(BG128)对STZ-HFD诱导的C57BL/6糖尿病合并NASH模型小鼠具有明显的治疗作用，BG128各剂量组能够显著地降低模型小鼠空腹血糖、胰岛素和外周血HbA1c％，并对模型小鼠具有一定的保护作用。与此同时，式I-3所示化合物改善肝功能和血脂相关的临床生化指标，降低肝脏NAS评分和纤维化率，显著地延缓NASH进展和纤维化进程。等剂量式I-3所示化合物与等剂量的阳性药物Tirzepatide相比，具有更优的作用效果。
附图说明
图1示出了化合物BG128的质谱图；
图2示出了化合物BGM125的质谱图；
图3示出了db/db小鼠皮下注射BG121(30nmol/kg)、BG128(30nmol/kg)、BG128(10nmol/kg)、溶剂对照(Control)检测小鼠给药后1，3，6，24，48，72h血糖值；**，P<0.01[BG121(30nmol/kg)，BG128(30,10nmol/kg)VS Control]；
图4示出了db/db小鼠每3日皮下注射BG121(30nmol/kg)、BG128(30nmol/kg)、BG128(10nmol/kg)溶剂对照(Control)，检测小鼠首次给药后第7，13，19，25天血糖值；*，P<0.05；***，P<0.001[BG121(30nmol/kg)VS Control]；#，P<0.05[BG128(30nmol/kg)VSControl]；
图5示出了db/db小鼠每3日皮下注射BG121(30nmol/kg)、BG128(30nmol/kg)、BG128(10nmol/kg)溶剂对照(Control)，首次给药后第4、7、10、13、16、19、22天称db/db小鼠体重；
图6示出了db/db小鼠每3日皮下注射BG121(30nmol/kg)、BG128(30nmol/kg)、BG128(10nmol/kg)溶剂对照(Control)，首次给药后第25天测量db/db小鼠血清糖化血红蛋白含量；*，P<0.05；
图7示出了db/db小鼠每3日皮下注射BG121(30nmol/kg)、BG128(30nmol/kg)、BG128(10nmol/kg)溶剂对照(Control)，首次给药后第25天测量db/db小鼠胰岛素含量；***，P<0.001，P＜0.01；
图8示出了db/db-ND组、Tirzepatide-0.15mg/kg组、BG128-0.05mg/kg组、BG128-0.15mg/kg组和BG128-0.5mg/kg组动物在试验期间动物体重变化；
图9示出了db/db-ND组、Tirzepatide-0.15mg/kg组、BG128-0.05mg/kg组、BG128-0.15mg/kg组和BG128-0.5mg/kg组动物体重增长率变化；
图10示出了db/db-ND组、Tirzepatide-0.15mg/kg组、BG128-0.05mg/kg组、BG128-0.15mg/kg组和BG128-0.5mg/kg组动物摄食量变化；
图11示出了db/db-ND组、Tirzepatide-0.15mg/kg组、BG128-0.05mg/kg组、BG128-0.15mg/kg组和BG128-0.5mg/kg组动物非空腹血糖变化；
图12示出了db/db-ND组、Tirzepatide-0.15mg/kg组、BG128-0.05mg/kg组、BG128-0.15mg/kg组和BG128-0.5mg/kg组动物空腹血糖变化；Two-way ANOVA:***p<0.001vs.db/db-ND组；**p<0.01vs.db/db-ND组；*p<0.05vs.db/db-ND组；图12中在0天、7天、13天、19天、25天、31天的各时间点所示柱状图从左向右依次代表b/db-ND组、Tirzepatide-0.15mg/kg组、BG128-0.05mg/kg组、BG128-0.15mg/kg组和BG128-0.5mg/kg组；
图13示出了db/db-ND组、Tirzepatide-0.15mg/kg组、BG128-0.05mg/kg组、BG128-0.15mg/kg组和BG128-0.5mg/kg组动物血清胰岛素浓度变化；T-test:*p<0.05vs.db/db-ND组；
图14示出了db/db-ND组、Tirzepatide-0.15mg/kg组、BG128-0.05mg/kg组、BG128-0.15mg/kg组和BG128-0.5mg/kg组动物抗凝全血中HbA1C百分比；One-way ANOVA:***p<0.001vs.db/db-ND组；#p<0.05vs.Tirzepatide-0.15mg/kg；&p<0.05vs.BG128-0.05mg/kg；$p<0.05vs.BG128-0.15mg/kg；
图15示出了Tirzepatide-0.15mg/kg组、BG128-0.05mg/kg组、BG128-0.15mg/kg组和BG128-0.5mg/kg组动物与模型组相比HbA1C百分比降低结果；One-way ANOVA:***p<0.001vs.db/db-ND组，##p<0.001vs.Tirzepatide-0.15mg/kg；
图16示出了正常组、模型组、Tirzepatide-0.15mg/kg组、BG128-0.05mg/kg组、BG128-0.15mg/kg组、BG128-0.5mg/kg组动物在试验期间动物体重变化；
图17示出了正常组、模型组、Tirzepatide-0.15mg/kg组、BG128-0.05mg/kg组、BG128-0.15mg/kg组、BG128-0.5mg/kg组动物摄食量变化；
图18示出了正常组、模型组、Tirzepatide-0.15mg/kg组、BG128-0.05mg/kg组、BG128-0.15mg/kg组、BG128-0.5mg/kg组动物空腹血糖变化；图18中在HFD前、给药前、1wks、2wks、3wks、4wks、5wks、6wks、7wks、终点的各时间点所示柱状图从左向右依次代表正常组、模型组、Tirzepatide-0.15mg/kg组、BG128-0.05mg/kg组、BG128-0.15mg/kg组、BG128-0.5mg/kg组；
图19示出了模型组、Tirzepatide-0.15mg/kg组、BG128-0.05mg/kg组、BG128-0.15mg/kg组、BG128-0.5mg/kg组动物的胰岛素变化；One-Way ANOVA:**p<0.05vs.模型组；***p<0.001vs.模型组；
图20示出了模型组、Tirzepatide-0.15mg/kg组、BG128-0.05mg/kg组、BG128-0.15mg/kg组、BG128-0.5mg/kg组动物的外周血中％HbA1C的变化百分比；One-Way ANOVA:*p<0.05vs.模型组；
图21示出了正常组、模型组、Tirzepatide-0.15mg/kg组、BG128-0.05mg/kg组、BG128-0.15mg/kg组、BG128-0.5mg/kg组动物血中ALT和AST变化；
图22示出了正常组、模型组、Tirzepatide-0.15mg/kg组、BG128-0.05mg/kg组、BG128-0.15mg/kg组、BG128-0.5mg/kg组动物血中TC和TG变化；
图23示出了正常组、模型组、Tirzepatide-0.15mg/kg组、BG128-0.05mg/kg组、BG128-0.15mg/kg组、BG128-0.5mg/kg组动物血中高、低密度脂蛋白变化；
图24示出了正常组、模型组、Tirzepatide-0.15mg/kg组、BG128-0.05mg/kg组、BG128-0.15mg/kg组、BG128-0.5mg/kg组动物肝脏组织HE染色图片(x400)；A：正常对照组；B：模型组；C：Tirzepatide-0.15mg/kg；D：BG128-0.05mg/kg；E：BG128-0.15mg/kg；F：BG128-0.5mg/kg；
图25示出了正常组、模型组、Tirzepatide-0.15mg/kg组、BG128-0.05mg/kg组、BG128-0.15mg/kg组、BG128-0.5mg/kg组动物炎细胞浸润和脂肪变性改变；
图26示出了正常组、模型组、Tirzepatide-0.15mg/kg组、BG128-0.05mg/kg组、BG128-0.15mg/kg组、BG128-0.5mg/kg组动物NAS评分结果；
图27示出了正常组、模型组、Tirzepatide-0.15mg/kg组、BG128-0.05mg/kg组、BG128-0.15mg/kg组、BG128-0.5mg/kg组动物肝脏组织天狼星红染色图片(x200)；A：正常对照组；B：模型组；C：Tirzepatide-0.15mg/kg；D：BG128-0.05mg/kg；E：BG128-0.15mg/kg；F：BG128-0.5mg/kg；
图28示出了正常组、模型组、Tirzepatide-0.15mg/kg组、BG128-0.05mg/kg组、BG128-0.15mg/kg组、BG128-0.5mg/kg组动物肝脏组织的纤维化百分比。
具体实施方式
定义
除非有相反陈述，否则在本公开中所使用的术语具有下述含义。
在本公开的权利要求和/或说明书中，词语“一(a)”或“一(an)”或“一(the)”可以指“一个”，但也可以指“一个或多个”、“至少一个”以及“一个或多于一个”。
如在权利要求和说明书中所使用的，词语“包含”、“具有”、“包括”或“含有”是指包括在内的或开放式的，并不排除额外的、未引述的元件或方法步骤。与此同时，“包含”、“具有”、“包括”或“含有”也可以表示封闭式的，排除额外的、未引述的元件或方法步骤。
在整个申请文件中，术语“约”表示：一个值包括测定该值所使用的装置或方法的误差的标准偏差。
本公开上下文中使用的术语“激动剂”是指通过所针对的目标受体类型活化信号传号的物质(配体)。示例性的，以GLP-1受体为目标受体，则激动剂具有GLP-1受体的激活活性，例如为GLP-1多肽或其类似物。
本公开上下文中使用的术语“EC50”是指半数有效浓度，本公开中以EC50对化合物的激动剂活性进行评估。示例性的，以GIP受体为靶标，测试化合物对GIP受体的EC50值，用于化合物作对GIP受体的激动活性的评估数据。
本公开上下文中使用的术语“治疗”是指：在罹患疾病之后，使受试者接触(例如给药)本公开的化合物或其药学上可接受的盐、酯、溶剂合物、光学异构体、互变异构体、同位素标记物、前药或含者有其的药物组合物(以下也称为“本公开的药物组合物”)，从而与不接触时相比使该疾病的症状减轻，并不意味着必需完全抑制疾病的症状。罹患疾病是指：身体出现了疾病症状。
本公开上下文中使用的术语“预防”是指：在罹患疾病之前，通过使受试者接触(例如给药)本公开的化合物或其药学上可接受的盐、酯、溶剂合物、光学异构体、互变异构体、同位素标记物、前药或本公开的药物组合物，从而与不接触时相比减轻罹患疾病后的症状，并不意味着必需完全抑制患病。
本公开上下文中使用的术语“个体”、“患者”或“受试者”包括哺乳动物。哺乳动物包括但不限于，家养动物(例如，牛，羊，猫，狗和马)，灵长类动物(例如，人和非人灵长类动物如猴)，兔，以及啮齿类动物(例如，小鼠和大鼠)。
本公开上下文中使用的术语“治疗有效量”指以需要的剂量并持续需要的时间段，有效实现所需治疗结果的量。本公开的化合物或药物组合物的治疗有效量可以根据多种因素如疾病状态、个体的年龄、性别和重量和免疫佐剂或药物组合物在个体中激发所需反应的能力而变动。
本公开上下文中使用的术语“药学上可接受的盐”是指由本公开中的化合物与相对无毒的酸或碱制备得到的盐。当本公开中的化合物含有相对偏酸性的官能团(例如羧基或磺酸基)时，可以通过在纯的溶液或合适的惰性溶剂中用足够量的碱与其游离形式接触的方式获得碱加成盐。药学上可接受的碱加成盐的非限制性实例包括但不限于钠盐、钾盐、铵盐、钙盐、镁盐、有机胺盐或类似的盐。当本公开中的化合物含有相对偏碱性的官能团(例如氨基或胍基)时，可以通过在纯的溶液或合适的惰性溶剂中用足够量的酸与其游离形式接触的方式获得酸加成盐。药学上可接受的酸加成盐的非限制性实例包括但不限于无机酸盐(例如盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、硝酸盐、碳酸盐、碳酸氢盐、磷酸盐、磷酸一氢盐、磷酸二氢盐、亚磷酸盐、硫酸盐、硫酸氢盐等)、有机酸盐(例如乙酸盐、丙酸盐、异丁酸盐、丙二酸盐、琥珀酸盐、辛二酸盐、马来酸盐、富马酸盐、柠檬酸盐、酒石酸盐、乳酸盐、扁桃酸盐、苯甲酸盐、邻苯二甲酸盐、甲磺酸盐、苯磺酸盐、对甲苯磺酸盐、葡糖醛酸等)以及氨基酸盐(例如精氨酸盐等)。药学上可接受的盐的具体形式还可参见Berge et al.,“PharmaceuticalSalts”,Journal of Pharmaceutical Science,1977,66:1-19)。
本公开上下文中使用的术语“药物组合物”是指可供药用的组合物，其包含一种或多种如式I所示的化合物或其药学上可接受的形式(例如盐、水合物、溶剂化物、立体异构体、互变异构体、代谢产物、前药等)，以及其他组分(例如药学上可接受的辅料)。
本公开上下文中使用的术语“药学上可接受的辅料”是指在药物生产领域中广泛采用的辅助物料。使用辅料的主要目的在于提供一种使用安全、性质稳定和/或具有特定功能性的药物组合物，还在于提供一种方法，以便在为受试者施用药物之后，活性成分能够以所期望的速率溶出，或者促进活性成分在接受给药的受试者体内得到有效吸收。药学上可接受的辅料可以是具有惰性的填充剂，也可以是为药用组合物提供某种功能(例如稳定组合物的整体pH值或防止组合物中活性成分的降解)的功效成分。药学上可接受的辅料的非限制性实例包括但不限于粘合剂、助悬剂、乳化剂、稀释剂(或填充剂)、成粒剂、胶粘剂、崩解剂、润滑剂、抗粘着剂、助流剂、润湿剂、胶凝剂、吸收延迟剂、溶解抑制剂、增强剂、吸附剂、缓冲剂、螯合剂、防腐剂、着色剂、矫味剂、甜味剂等。
本公开中的药物组合物可以使用本领域技术人员已知的任何方法来制备。例如，常规混合、溶解、造粒、乳化、磨细、包封、包埋和/或冻干工艺。
在本公开中，使用药物组合物的目的在于促进针对生物体的给药，有利于活性成分的吸收，进而发挥生物活性。本公开的药物组合物可以通过任何形式给药，包括注射(动脉内、静脉内、肌肉内、腹膜内、皮下)、粘膜、口服(口服固体制剂、口服液体制剂)、直肠、吸入、植入、局部(例如眼部)给药等。口服固体制剂的非限制性实例包括但不限于散剂、胶囊剂、锭剂、颗粒剂、片剂等。口服或粘膜给药的液体制剂的非限制性实例包括但不限于混悬剂、酊剂、酏剂、溶液剂等。局部给药制剂的非限制性实例包括但不限于乳剂、凝胶剂、软膏剂、乳膏剂、贴剂、糊剂、泡沫剂、洗剂、滴剂或血清制剂。胃肠外给药制剂的非限制性实例包括但不限于注射用溶液剂、注射用干粉剂、注射用悬浮液、注射用乳剂等。本公开的药物组合物还可以制成控制释放或延迟释放剂型(例如脂质体或微球)。
在本公开中，施用途经能够以任何适用的方式进行变化或调整，以满足药物的性质、患者和医务人员的便利以及其它相关因素的需求。
本公开中上下文中使用的术语“代谢紊乱”可以是糖尿病、糖尿病并发症、肥胖、肥胖并发症等糖代谢紊乱疾病。由于肥胖、糖尿病与血糖代谢之间的关联是公知的，因此这些病症可以但并不必须是分开的或相互排斥的。在一些实施方式中，糖尿病或糖尿病并发症包括胰岛素抵抗、葡萄糖耐受不良、空腹血糖升高、前驱糖尿病、I型糖尿病、II型糖尿病、妊娠期糖尿病高血压、血脂异常或其组合。在一些实施方式中，肥胖并发症包括肥胖关联的炎症、肥胖关联的胆囊疾病或肥胖诱发的睡眠呼吸暂停，或可选自以下相关病症：致动脉粥样硬化性血脂异常、血脂紊乱、血压升高、高血压、血栓前状态和促炎状态或其组合。
本公开的化合物或其药学上可接受的盐、水合物、溶剂化物、立体异构体、互变异构体、代谢产物或前药或者包含其的药物组合物具有优良的GIPR和GLP-1R的双激动剂活性，能够有效降低血糖、控制二型糖尿病模型小鼠的体重增长，用于预防和/或治疗代谢紊乱疾病，具有良好的临床应用和医药用途。
以下将结合具体实施例来阐述本公开的技术方案，下列实施例的提供旨在进一步说明本公开，而非用于限制本公开的范围。对本领域技术人员而言，在不脱离本公开的精神和范围的情况下，针对本公开的具体实施方式进行各种变化和改进将是显而易见的。
本公开的化合物的制备可以通过本领域技术人员所熟知的合成方法来实现，包括但不限于下面列举的具体实施方式、其与其他化学合成方法相结合而形成的实施方式以及本领域技术人员所熟知的等同替换方式，优选的实施方式包括但不限于本公开的实施例。本公开中所使用的已知的起始原料可以提供本领域已知的方法来合成，或者通过常规的商业手段来购买。
本公开的化合物的分离纯化可以通过本领域技术人员所熟知的合成方法来实现，包括但不限于柱色谱法(CC)、高效液相色谱法(HPLC)、超高效液相色谱法(UPLC)等。
本公开中氨基酸及缩写和英文简称如下表所示：
实施例
本公开的其他目的、特征和优点将从以下详细描述中变得明显。但是，应当理解的是，详细描述和具体实施例(虽然表示本公开的具体实施方式)仅为解释性目的而给出，因为在阅读该详细说明后，在本公开的精神和范围内所作出的各种改变和修饰，对于本领域技术人员来说将变得显而易见。
除非有特别说明，否则本公开中采用的所有试剂和原料均可以通过商业渠道购买。
实施例1 Fmoc法固相合成目标化合物BG128
BG128的化合物结构：
合成步骤：
利用Fmoc-Rink MBHA Amide树脂、采用20％的哌啶/DMF脱除Fmoc，偶联试剂采用HOBT/DIC，DMF为反应溶剂，反应监控采用茚三酮检测法。
(1)依次将下列保护氨基酸连接到Rink MBHA Amide树脂上：
Fmoc-Lys(Alloc)-OH、Fmoc-Ser(tBu)-OH、Fmoc-Pro-OH、Fmoc-Pro-OH、Fmoc-Pro-OH、Fmoc-Ala-OH、Fmoc-Gly-OH、Fmoc-Ser(tBu)-OH、Fmoc-Ser(tBu)-OH、Fmoc-Pro-OH、Fmoc-Gly-OH、Fmoc-Gly-OH、Fmoc-Ala-OH、Fmoc-Ile-OH、Fmoc-Leu-OH、Fmoc-Trp(Boc)-OH、Fmoc-Gln(Trt)-OH、Fmoc-Val-OH、Fmoc-Phe-OH、Fmoc-Ala-OH、Fmoc-Lys(Boc)-OH、Fmoc-Gln(Trt)-OH、Fmoc-Ala-OH、Fmoc-Ile-OH、Fmoc-Lys(Boc)-OH、Fmoc-Asp(OtBu)-OH、Fmoc-Leu-OH、Fmoc-Aib-OH、Fmoc-Ile-OH、Fmoc-Ser(tBu)-OH、Fmoc-Tyr(tBu)-OH、Fmoc-Asp(OtBu)OH、Fmoc-Ser(tBu)-OH、Fmoc-Thr(tBu)-OH、Fmoc-Phe-OH、Fmoc-Thr(tBu)-OH、Fmoc-Gly-OH、Fmoc-Glu(OtBu)-OH、Fmoc-Aib-OH、Boc-Tyr(tBu)-OH。
(2)脱去保护基：加入3eq的Pd(PPh3)4的CHCl3:AcOH:NMM(18:1:0.5)的溶液，反应2h，随后用氯仿(6*30ml)洗涤，20％HOAc的DCM溶液(6*30ml)、DCM(6*30ml)和DMF(6*30ml)洗涤，茚三酮监测阳性，然后依次缩合Fmoc-AEEEA-OH、Fmoc-AEEEA-OH、Fmoc-Glu-OtBu、二十烷二酸单叔丁酯，得BG128的全保护树脂。
(3)树脂的裂解：采用95％TFA/2.5％水/2.5TIS进行，随后用冰的MTBE沉淀、洗涤。产物粗品用HPLC纯化，并冷冻干燥得到目标化合物BG128，化合物BG128的MS图谱见图1。
所使用缩写如下：
DMF，N,N-二甲基甲酰胺；Fmoc，9-芴氧羰基；HOBT，N-羟基苯并三氮唑；DIC，N,N-二异丙基碳二亚胺；NMM，N-甲基吗啉；DCM，二氯甲烷；Fmoc-AEEEA-OH，[2-[2-[2-(Fmoc-氨基)乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙酸；MTBE，甲基叔丁基醚；TFA，三氟乙酸；TIS，三异丙基硅烷。
实施例2 Fmoc法固相合成式I-1所示化合物
I-1所示化合物的结构：
合成步骤：
按照实施例1所示的制备方法，其中步骤(2)中在侧链缩合二十烷二酸单叔丁酯，得到式I-1所示化合物，式I-1所示化合物的MS:[M+3]3+为1508.4。
实施例3 Fmoc法固相合成式I-2所示化合物
I-2所示化合物的结构：
合成步骤：
按照实施例1所示的制备方法，其中步骤(2)中在侧链缩合十八烷二酸单叔丁酯，得到式I-2所示化合物，式I-2所示化合物的MS:[M+3]3+为1499.0。
实施例4 Fmoc法固相合成式I-4所示化合物
I-4所示化合物的结构：
合成步骤：
按照实施例1所示的制备方法，其中步骤(2)中在侧链依次缩合Fmoc-AEEEA-OH、Fmoc-AEEEA-OH、3-(N-(20-(叔丁氧基)-20-氧代二十酰基)氨磺酰)丙酸，得到式I-4所示化合物，式I-4所示化合物的MS:[M+3]3+为1679.6。
实施例5 Fmoc法固相合成式I-5所示化合物
I-5所示化合物的结构：
合成步骤：
按照实施例1所示的制备方法，其中步骤(2)中在侧链依次缩合Fmoc-NH-PEG4-PA、Fmoc-Glu-OtBu、十八烷二酸单叔丁酯，得到式I-5所示化合物，式I-5所示化合物的MS:[M+3]3+为1626.5，[M+4]4+为1220.1。
实施例6 Fmoc法固相合成式I-6所示化合物
I-6所示化合物的结构：
合成步骤：
按照实施例1所示的制备方法，其中步骤(2)中在侧链依次缩合Fmoc-NH-PEG8-PA、Fmoc-Glu-OtBu、十八烷二酸单叔丁酯，得到式I-6所示化合物，式I-6所示化合物的MS:[M+3]3+为1683.2，[M+4]4+为1262.7。
实施例7 Fmoc法固相合成式I-7所示化合物
I-7所示化合物的结构：
合成步骤：
按照实施例1所示的制备方法，其中步骤(2)中在侧链依次缩合Fmoc-AEEA-OH、Fmoc-AEEA-OH、Fmoc-Glu-OtBu、十八烷二酸单叔丁酯，得式I-7所示化合物，式I-7所示化合物的MS:[M+3]3+为1638.8，[M+4]4+为1229.4。
实施例8 Fmoc法固相合成式I-8所示化合物
I-8所示化合物的结构：
合成步骤：
按照实施例1所示的制备方法，其中步骤(2)中在侧链依次缩合Fmoc-AEEA-OH、Fmoc-AEEA-OH、4-(N-(18-(叔丁氧基)-18-氧代十八酰基)氨磺酰)丁酸，得式I-8所示化合物，式I-8所示化合物的MS:[M-3]3-为1643.5。
实施例9 Fmoc法固相合成式I-9所示化合物
I-9所示化合物的结构：
合成步骤：
按照实施例1所示的制备方法，其中步骤(2)中在侧链依次缩合Fmoc-AEEA-OH、Fmoc-AEEA-OH、6-(N-(18-(叔丁氧基)-18-氧代十八酰基)氨磺酰)己酸，得式I-9所示化合物，式I-9所示化合物的MS:[M-3]3-为1652.9。
实施例10 Fmoc法固相合成式I-10所示化合物
I-10所示化合物的结构：
合成步骤：
按照实施例1所示的制备方法，其中步骤(2)中在侧链依次缩合Fmoc-AEEA-OH、Fmoc-AEEA-OH、4-((18-(叔丁氧基)-N-(3-(叔丁氧基)-3-氧丙基)-18-氧十八酰胺)甲基)苯甲酸，得式I-10所示化合物，式I-10所示化合物的MS:[M+3]3+为1664.2。
实施例11 Fmoc法固相合成式I-11所示化合物
I-11所示化合物的结构：
合成步骤：
按照实施例1所示的制备方法，其中步骤(2)中在侧链依次缩合Fmoc-AEEA-OH、Fmoc-AEEA-OH、Fmoc-Glu-(Asp(OtBu)-OtBu)-OH、十八烷二酸单叔丁酯，得式I-11所示化合物，式I-11所示化合物的MS:[M+3]3+为1677.2。
实施例12 Fmoc法固相合成式I-12所示化合物
I-12所示化合物的结构：
合成步骤：
按照实施例1所示的制备方法，其中步骤(2)中在侧链依次缩合Fmoc-AEEA-OH、Fmoc-AEEA-OH、Fmoc-Glu-OtBu、Asp[(OtBu)-OtBu]-十八烷二酸，得式I-12所示化合物，式I-12所示化合物的MS:[M+3]3+为1677.2。
实施例13 Fmoc法固相合成式I-13所示化合物
I-13所示化合物的结构：
合成步骤：
按照实施例1所示的制备方法，其中步骤(2)中在侧链依次缩合Fmoc-AEEA-OH、Fmoc-AEEA-OH、Fmoc-Glu-OtBu、二十烷二酸单叔丁酯，得式I-13所示化合物，式I-13所示化合物的MS:[M+3]3+为1648.1。
实施例14 Fmoc法固相合成式I-14所示化合物
I-14所示化合物的结构：
合成步骤：
按照实施例1所示的制备方法，其中步骤(2)中在侧链依次缩合Fmoc-AEEA-OH、Fmoc-AEEA-OH、Fmoc-Glu-OtBu、Fmoc-Glu-OtBu、二十烷二酸单叔丁酯，得式I-14所示化合物，式I-14所示化合物的MS:[M+3]3+为1691.2。
对比例1 Fmoc法固相合成目标化合物BGM125
BGM125的化合物结构：
其中，化合物BGM125中多肽部分的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。
合成步骤：
目标肽的固相肽合成采用Fmoc法固相合成、利用Fmoc-Rink MBHA Amide树脂、采用20％的哌啶/DMF脱除Fmoc，偶联试剂采用HOBT/DIC，DMF为反应溶剂，反应监控采用茚三酮检测法：
(1)依次将下列保护氨基酸连接到Rink MBHA Amide树脂上：
Fmoc-Ser(tBu)-OH、Fmoc-Pro-OH、Fmoc-Pro-OH、Fmoc-Pro-OH、Fmoc-Ala-OH、Fmoc-Gly-OH、Fmoc-Ser(tBu)-OH、Fmoc-Ser(tBu)-OH、Fmoc-Pro-OH、Fmoc-Gly-OH、Fmoc-Gly-OH、Fmoc-Ala-OH、Fmoc-Ile-OH、Fmoc-Leu-OH、Fmoc-Trp(Boc)-OH、Fmoc-Gln(Trt)-OH、Fmoc-Val-OH、Fmoc-Phe-OH、Fmoc-Ala-OH、Fmoc-Lys(Boc)-OH、Fmoc-Gln(Trt)-OH、Fmoc-Ala-OH、Fmoc-Ile-OH、Fmoc-Lys(Alloc)-OH、Fmoc-Asp(OtBu)-OH、Fmoc-Leu-OH、Fmoc-Aib-OH、Fmoc-Ile-OH、Fmoc-Ser(tBu)-OH、Fmoc-Tyr(tBu)-OH、Fmoc-Asp(OtBu)OH、Fmoc-Ser(tBu)-OH、Fmoc-Thr(tBu)-OH、Fmoc-Phe-OH、Fmoc-Thr(tBu)-OH、Fmoc-Gly-OH、Fmoc-Glu(OtBu)-OH、Fmoc-Aib-OH、Boc-Tyr(tBu)-OH。
(2)脱去保护基：加入3eq的Pd(PPh3)4的CHCl3:AcOH:NMM(18:1:0.5)的溶液，反应2h，随后用氯仿(6*30ml)洗涤，20％HOAc的DCM溶液(6*30ml)、DCM(6*30ml)和DMF(6*30ml)洗涤，茚三酮监测阳性，然后依次缩合Fmoc-AEEEA-OH、Fmoc-AEEEA-OH、Fmoc-Glu-OtBu、二十烷二酸单叔丁酯，得BGM125的全保护树脂。
(3)树脂的裂解：采用95％TFA/2.5％水/2.5TIS进行，随后用冰的甲基叔丁基醚(MTBE)沉淀、洗涤。产物粗品用HPLC纯化，并冷冻干燥得到目标化合物BGM125，用MS表征，结果见图2。
实验例1
1、实验材料：
1.1试剂及设备：
cAMP检测试剂盒，Cisbio公司；1M HEPES，Invitrogen公司；1X HBSS，Invitrogen公司；Casein，Sigma公司；IBMX，Sigma公司；GIP(GIP)，Tocris公司；
GLP-1R的宿主细胞：HEK293细胞系，保存于博瑞生物医药(苏州)股份有限公司；
GIP R的宿主细胞：CHO细胞系，保存于博瑞生物医药(苏州)股份有限公司；
OptiPlate-384 plate，PerkinElmer公司；384回声孔板，Labcyte公司；EnVision，PerkinElmer公司；蜂巢式计数器，Beckman公司；
1.2测试化合物：
表1细胞实验的测试化合物
2、实验方法：
a)制备化合物板：
(1)在GIPR靶点上待测化合物BG121，BG128，BGM125，BGM134。每种化合物做10个点4倍稀释，起始浓度为5μM，Bravo完成稀释。参照化合物GIP做10个点4倍稀释，起始浓度为5uM，Bravo完成稀释。
(2)在GLP-1R靶点上待测化合物BG121，BG128，BGM125，BGM134。每种化合物做10个点4倍稀释，起始浓度为0.5μM，Bravo完成稀释。参照化合物GLP-1(7-37)做10个点4倍稀释，起始浓度为2μM，Bravo完成稀释。
b)转移化合物：
(1)使用Echo移液器转移100nL化合物至OptiPlate-384plate。
(2)将OptiPlate-384plate在1000rpm离心5秒。
c)细胞悬液的制备
(1)取GLP-1R细胞和GIPR细胞各一支冻存管迅速置于37℃温水中解冻。
(2)将细胞悬液转移至15mL离心管中，用10ml HBSS轻柔冲洗。
(3)将离心管在1000rpm室温离心1分钟。
(4)弃去上清。
(5)轻柔打散底部细胞并再用10ml HBSS轻柔冲洗，离心沉降细胞，最后用实验缓冲液重悬细胞。
(6)利用Vi-cell测量细胞密度与活度。
(7)用实验缓冲液将GLP-1R细胞浓度稀释至2.0*E5/mL。
(8)在OptiPlate-384 plate中转入100nL稀释好的细胞悬液。
(9)室温孵育30分钟。
d)加入检测试剂：
(1)在OptiPlate-384 plate空孔中加入10μL 800nM梯度稀释好的cAMP标准品。
(2)加入10μLcAMP检测试剂。
(3)用TopSeal-A film覆盖OptiPlate-384 plate，室温孵育60分钟。揭去TopSeal-A，在EnVision读数。
3、实验结果：
表2 GIP受体的cAMP实验结果
No. 样品名 EC50(nM)
1 BG121(LY3298176) 1.794
2 BG128 0.2785
3 BGM125 0.6839
4 BGM134(索马鲁肽) >50
Ref GIP 0.1397
表3 GLP-1受体的cAMP实验结果
No. 样品名 EC50(nM)
1 BG121(LY3298176) 0.2273
2 BG128 0.1097
3 BGM125 0.06922
4 BGM134(索马鲁肽) 0.01347
Ref GLP-1 0.005069
由表2和表3数据可知，本公开中的化合物具有高的GLP-1受体和GIP受体的双受体激动剂活性，且对GIP受体的激动活性优于现有的双受体激动剂LY3298176，以及GLP-1的受体激动剂索马鲁肽，对GLP-1受体的激动活性优于LY3298176。
实验例2
1、实验材料：
1.1溶剂
名称：柠檬酸溶液；
成分：20mM柠檬酸pH 7.0；
储存条件：4℃；
供应商：生工生物工程(上海)股份有限公司。
1.2实验动物
种系：BKS小鼠(db/db小鼠)；来源：江苏集萃药康生物科技股份有限公司；许可证号：SCXK(苏)2018-0008；合格证号：202100117；等级：SPF；数量：32；性别：雄性；年龄：8周(造模开始时)；动物标识：耳标。
饲养条件：温度，22±2℃；湿度，40～70％；光照，人工照明模拟昼夜变化；饮水，自由饮用；饲料，使用小鼠繁殖饲料，空腹测血糖前过夜禁食，其余时间自由进食。
1.3测试化合物
表4动物实验的测试化合物
1.4 4.样品配制方法
BG121(1mg/ml)储备液配置：称取一定量的BG121，加入适量体积的溶剂(20mM柠檬酸，pH7.0)，100μl/管分装，冻存于-80℃备用；
BG128(1mg/ml)储备液配置：称取一定量的BG128，加入适量体积的溶剂(20mM柠檬酸，pH7.0)，100μl/管分装，冻存于-80℃备用；
BG121(0.0144mg/ml，用于30nmol/kg给药)：取1mg/mL母液90uL，加入溶剂810μL于10mLEP充分涡匀后，补加溶剂5333μL充分涡旋混匀，当天使用完毕；
BG128(0.0151mg/ml，用于30nmol/kg给药)：取1mg/mL母液90uL，加入溶剂810μL于10mL EP充分涡匀后，补加溶剂5044μL充分涡旋混匀，当天使用完毕；
BG128(0.0050mg/ml，用于10nmol/kg给药)：取2mL BG128(0.0144mg/ml)加入4mL溶剂充分涡旋混匀，当天使用完毕。
2、实验设计和方法：
2.1实验设计
32只SPF级雄性BKS-DB小鼠(db/db小鼠)，适应性饲养1周。根据小鼠空腹血糖值及体重，随机分为4组：溶剂对照组、BG121(30nmol/kg)组、BG128(30nmol/kg)组、BG128(10nmol/kg)组，给予小鼠繁殖饲料饲养。在实验过程中，实验人员需对实验动物的体征和健康状况进行观察。动物的任何异常表现，例如疼痛、抑郁、活动减少等，需记录在实验原始记录中。如果实验动物的异常表现超过动物福利的相关文件规定，可通报后，对动物实施安乐死。实验设计如下表所示：
表5小鼠分组情况表
组号 组别 数量 化合物 浓度(mg/mL)
1 溶剂对照组 8 柠檬酸 -
2 BG121(30nmol/kg)组 8 BG121 0.0144
3 BG128(30nmol/kg)组 8 BG128 0.0151
4 BG128(10nmol/kg)组 8 BG128 0.0050
2.2实验方法
造模方法：db/db小鼠饲养6周会发生自发性二型糖尿病，小鼠出现肥胖、胰岛素抵抗、高血糖等症状；
给药方式：拟用临床给药途径进行皮下注射，给药体积：10mL/kg，每3日给药1次，连续给药22天；
空腹血糖测定：按照上述动物分组及给药剂量，首次给药前两天空腹测小鼠血糖，测量体重，将8周雄性空腹血糖高于16.8mmol/L的小鼠按血糖值进行随机分组。首次给药后第7，13，19，25天测定空腹血糖值，(空腹血糖测定前更换垫料，断食)禁食；
非空腹血糖测定：首次给药后测定1，3，6，24，48，72h时间点血糖；
体重测定：每周测定2次；
摄食测定：每周测定2次。
2.3血生化检测
给药25天后，通过摘眼球采集血样，分别检测小鼠血清胰岛素、糖化血红蛋白含量。
2.4统计学处理
所有报告的计量数据均使用GraphPad prism8.0软件进行组平均值、标准差计算。
3、实验结果：
3.1 BG121、BG128单次给药后db/db小鼠非空腹血糖变化
分别向db/db小鼠皮下注射BG121(30nmol/kg)、BG128(30nmol/kg)、BG128(10nmol/kg)检测小鼠首次给药后1，3，6，24，48，72h非空腹血糖变化，结果显示BG121(30nmol/kg)给药后各个时间点的血糖值都低于溶剂对照组(Control)；给药BG128(30nmol/kg)、BG128(10nmol/kg)能够降低给药后各个时间点血糖，并且具有剂量依赖性(图3)。
3.2 BG121、BG128给药后db/db小鼠空腹血糖变化
按照实验方法连续向db/db小鼠皮下给药BG121、BG128以及溶剂作为对照，并测定首次给药后第7，13，19，25天的空腹血糖值。结果显示，BG121(30nmol/kg)、BG121(10nmol/kg)在首次给药后第25天空腹血糖较溶剂对照(Control)显著降低，BG128(30nmol/kg)在首次给药后第19，25天能显著降低空腹血糖值，降血糖效果呈现剂量依赖性(图4)。
3.3 BG121、BG128药后db/db小鼠体重变化
按照实验方法向db/db小鼠连续给药BG121、BG128、溶剂对照(Control)并在首次给药后第4、7、10、13、16、19、22天称小鼠体重。结果显示BG128(30nmol/kg)给药组小鼠给药后体重均值在各个时间点较溶剂对照组减少；而BG128(10nmol/kg)给药组、BG121(30nmol/kg)给药组与溶剂对照组体重无显著差异。结果显示BG128(30nmol/kg)给药组的小鼠体重显著低于溶剂对照组和BG121(30nmol/kg)给药组(图5)。
3.4 BG121、BG128对db/db小鼠糖化血红蛋白影响
按照实验方法在给药25天后，测定小鼠血清中糖化血红蛋白含量。结果显示在给药后25天，BG128(30nmol/kg)给药组小鼠血清中糖化血红蛋白含量较溶剂对照组降低，而BG128(10nmol/kg)给药组、BG121(30nmol/kg)给药组与溶剂对照组相比糖化血红蛋白含量无显著差异。结果显示BG128(30nmol/kg)给药组的小鼠糖化血红蛋白含量显著低于、BG121(30nmol/kg)给药组与溶剂对照组(图6)。
3.5 BG121、BG128对db/db小鼠血清胰岛素影响
按照实验方法在给药25天后，测定小鼠血清中胰岛素含量。结果显示在给药后25天，BG128(30nmol/kg)和BG128(10nmol/kg)给药组小鼠血清中胰岛素含量较溶剂对照组明显降低，且呈现剂量依赖性；而BG121(30nmol/kg)给药组与溶剂对照组相比胰岛素含量无显著差异(图7)。该实验一方面证明了本公开的化合物在发挥降血糖的功效时不影响胰岛素的分泌，也证实了BG128与BG121相比，在发挥降血糖时对胰岛素影响力上效果更优。
实验例3：测试BG128对db/db小鼠高血糖的抑制作用
1、实验材料
1.1实验动物
55只SPF级雄性db/db小鼠，6-8周龄，购买自浙江维通利华实验动物技术有限公司。
1.2供试品和参照品信息如下表所示
表6供试品和参照品信息
1.3供试品和参照品配制
根据表7给药方案，称取一定量的Tirzepatide及BG128，加入溶媒(pH＝7.0 20mM柠檬酸钠缓冲液)，配制成相应浓度，7天配制一次，分装2-8℃避光保存。
2、实验方法
2.1试验分组
给药前，根据动物体重和空腹血糖作为依据进行分组，分别是：db/db-ND组、Tirzepatide-0.15mg/kg组、BG128-0.05mg/kg组、BG128-0.15mg/kg组和BG128-0.5mg/kg组，每组11只动物；具体情况见表7。
2.2给药方案
首次给药当天记为d1，以此类推记录时间；Tirzepatide和BG128每三天给药一次，时间点：d1、d4、d7、d10、d13、d16、d19、d22、d25、d28，共计10次给药；具体情况见表7。
表7试验分组和给药方案
2.3检测指标
体重称量：给药前称量动物体重，三天一次，持续到试验终点。
2.3.1动物摄食量
给药分组前三天开始记录动物摄食量，持续到试验终点。每次均于给药前称量剩余量。
2.3.2动物血糖
1)非空腹血糖检测：首次给药0h(pre)，1h，2h，3h，6h，24h，48h，72h；
2)空腹血糖：检测日期分别是d-1(分组前)，d7，d13，d19，d25，d31。动物禁食6h，检测空腹血糖后再给药。
2.3.3血液生化检测
末次给药3天后，动物称重，禁食6h，检测动物空腹血糖；麻醉后，通过眼眶静脉丛采集一份非抗凝全血，室温静置30min，5000rpm离心5min，分离血清，冻存-80℃，用于血清insulin含量检测；采集一份抗凝全血，用于HbA1c含量检测。血清胰岛素采用Elisa方法检测。
2.4数据分析
数据在Excel 2017和Prism6.0中进行整理，数据以Mean±SEM(标准误)表示。利用One-way ANOVA进行分析，分析方法选用Tukey进行组间比较差异显著性检验；两组间进行比较时，用T-test进行两组间双尾检测，当p<0.05时，两组之间具有显著性差异。当组内检测数据有少数差异较大时，可使用GraphPad Prism6.0进行identify outliters数据分析，剔除差异性数值。
3、结果
3.1体重和体重增长率
动物体重和体重增长率变化结果(图8、图9)显示：首次给药期间，各给药组动物体重呈现明显下降的趋势，其中不同剂量BG128给药组体重下降幅度与给药剂量呈正相关性；day 3之后，各给药组动物体重恢复稳定增长。在给药后期，各组动物体重变化没有明显差异(p>0.05)。
由图8和图9可知，相同剂量下，BG128给药组动物体重下降率优于Tirzepatide给药组，即BG128的疗效优于阳性对照Tirzepatide。
3.2摄食量
动物摄食量变化结果(图10)显示：与db/db-ND组相比，各给药组动物摄食量在首次给药后明显下降，其中不同剂量BG128给药组摄食量下降幅度与给药剂量呈正相关性；d4之后，各给药组动物摄食量恢复增长，并在较小范围内上下波动，维持相对稳定。
由图10可知，相同剂量下，BG128给药组的摄食量下降明显大于阳性对照组Tirzepatide。
3.3首次给药后非空腹血糖
动物非空腹血糖监测结果(图11)显示：首次给药后，阳性药Tirzepatide-0.15mg/kg给药组动物的非空腹血糖在首次给药后6h内快速下降，在6-72h内逐渐恢复增长；BG128给药组动物非空腹血糖在首次给药后24h内快速下降，低剂量组(0.05mg/kg)和中剂量组(0.15mg/kg)在给药后24h-72h内逐渐恢复增长，高剂量组(0.5mg/kg)在给药后24h-72h内维持在相对较低范围内；与db/db-ND组相比，Tirzepatide-0.15mg/kg组和各剂量BG128组在首次给药72h内表现明显的抑制血糖的作用，BG128抑制血糖效果呈现剂量依赖性，且优于等剂量阳性药Tirzepatide-0.15mg/kg组。
3.4空腹血糖
动物空腹血糖监测结果(图12，表8)显示，与db/db-ND组相比，Tirzepatide-0.15mg/kg组和各剂量BG128组动物在给药的不同时期空腹血糖显著下降(p<0.05)；在试验终点时，各剂量BG128组空腹血糖与db/db-ND组相比显著下降，具有剂量依赖性趋势。高剂量BG128组抑制血糖的作用优于阳性药Tirzepatide-0.15mg/kg组。
表8：动物空腹血糖变化(mmol/L)(Mean±SD)
a:*p<0.05vs.db/db-ND,by Two way-ANOVA,Tukey’s test
b:**p<0.01vs.db/db-ND,by Two way-ANOVA,Tukey’s test
c:***p<0.001vs.db/db-ND,by Two way-ANOVA,Tukey’s test
3.5血清胰岛素
动物血清胰岛素检测结果(图13，表9)显示：Tirzepatide-0.15mg/kg组和各剂量BG128组动物血清胰岛素浓度均减少，各剂量BG128组血清胰岛素降低与模型组相比具有统计学意义(p＝或<0.05)。
由图13可知，等剂量BG128组血清胰岛素浓度的减少明显大于Tirzepatide-0.15mg/kg组。
表9：血清中胰岛素变化(nIU/mL)(Mean±SD)
a:*p<0.05vs.db/db-ND,by T-test analysis
3.6全血HbA1C百分比(％)
全血HbA1C％(图14，表10)结果显示：与db/db-ND组相比，Tirzepatide-0.15mg/kg组和各剂量BG128组动物抗凝全血HbA1C百分比显著降低(p<0.001)，Tirzepatide-0.15mg/kg组、BG128-0.05mg/kg组、BG128-0.15mg/kg组和BG128-0.5mg/kg组抗凝全血中HbA1C％分别下降了1.88％、1.80％、1.83％和2.54％，具有剂量依赖性趋势。
由图15可知，等剂量组的BG128与Tirzepatide效果相当。高剂量BG128组降低幅度明显大于Tirzepatide-0.15mg/kg组和BG128-0.15mg/kg组(p<0.01)。
表10：糖化血红蛋白变化(Mean±SEM)
a:***p<0.001vs.db/db-ND,by One-way ANOVA,Tukey’s test
b:#p<0.05vs.Tirzepatide-0.15mg/kg,by One-way ANOVA,Tukey’s test
c:##p<0.01vs.Tirzepatide-0.15mg/kg,by One-way ANOVA,Tukey’s test
d:&p<0.05vs.BG128-0.05mg/kg,by One-way ANOVA,Tukey’s test
e:$p<0.05vs.BG128-0.15mg/kg,by One-way ANOVA,Tukey’s test
4、结论
db/db小鼠由C57BL/KsJ近亲交配株常染色体隐性遗传衍化而来，属于II型糖尿病模型动物。本实验条件下，动物分组前血糖大于16.7mmol/L，使用阳性对照Tirzepatide治疗能够显著抑制db/db小鼠高血糖，降低外周血胰岛素和糖化血红蛋白含量，表明该模型稳定可靠。
BG128可引起db/db小鼠体重和摄食量急性下降，在给药后期可维持相对稳定。BG128能够显著降低首次给药后非空腹血糖，药效优于等剂量Tirzepatide，并可显著抑制db/db小鼠空腹血糖，降低外周血胰岛素和糖化血红蛋白含量。
实验例4：测试BG128在STZ-HFD饲料诱导雄性C57BL/6小鼠糖尿病合并NASH模型上 的药效作用
1、试验材料
1.1供试品和参照品信息如下表11所示
表11供试品和参照品信息
1.2供试品和参照品配制
根据给药方案，称取一定量的Tirzepatide及BG128，加入溶媒(pH＝7.0 20mM柠檬酸钠缓冲液)，配制成相应浓度。
1.3试验系统
1.3.1实验动物信息
种属品系：C57BL/6
等级：SPF级别
数量和性别：30只，怀孕母鼠
供应单位：上海吉辉实验动物饲养有限公司
1.3.2动物饲养管理
动物饲养于屏障系统中，动物房环境条件控制为室温20℃～26℃，湿度40％～70％，饲养人员每天上下午各记录一次。自由饮水和正常喂食。
2、试验设计
2.1建模方法
新生雄鼠出生48h内皮下注射STZ(100μg/只)，由母鼠哺育四周后，测量小鼠空腹血糖，以空腹血糖值大于或等于12mmol/L作为标准，挑选65只糖尿病雄鼠作为试验动物，HFD饲料饲养8周，建立STZ+HFD诱导雄性C57BL/6小鼠糖尿病合并NASH模型。
2.2试验分组
挑选10只新生雄鼠，不进行STZ注射，由母鼠哺育四周后，分笼后采用正常维持饲料饲养，作为正常对照组；HFD饲料一周时，检测动物空腹血糖，以空腹血糖和体重作为依据随机分组，分别为：正常对照组，模型组，Tirzepatide-0.15mg/kg组、BG128-0.05mg/kg组、BG128-0.15mg/kg组、BG128-0.5mg/kg组，具体情况见表12。
2.3给药方案
HFD饲料饲养的第2周第一天开始给药，连续给药7周后试验终点，具体给药方案见表12。
表12：实验分组及给药方案
分组 数量 STZ+HFD 化合物 给药方案
Group-1 10 NO 溶媒 皮下给药10mL/kg，三天一次
Group-2 13 Yes 溶媒 皮下给药10mL/kg，三天一次
Group-3 13 Yes Tirzepatide 皮下给药10mL/kg，0.15mg/kg，三天一次
Group-4 13 Yes BG128 皮下给药10mL/kg，0.05mg/kg，三天一次
Group-5 13 Yes BG128 皮下给药10mL/kg，0.15mg/kg，三天一次
Group-6 13 Yes BG128 皮下给药10mL/kg，0.5mg/kg，三天一次
2.4检测指标
2.4.1一般观察
试验启动开始观察，每天一次，持续到试验终点；
观察内容：笼旁观察动物的死亡或濒死、精神状态、行为活动、粪便性状、采食和饮水情况等。
2.4.2动物体重
HFD饲料饲养时开始称量动物体重，三天一次，持续到试验终点。
2.4.3动物摄食量
HFD饲料饲养时开始记录动物摄食量，持续到试验终点。每次均于给药前称量剩余量。
2.4.4动物空腹血糖
在母鼠哺乳4周后(即HFD饲养前)，给药前，给药后1周，2周，3周，4周，5周，6周，7周及试验终点，利用罗氏血糖仪检测空腹血糖。
2.4.5临床生化检测
末次给药3天后，动物称重，禁食6h；腹腔注射戊巴比妥钠麻醉所有实验动物，通过眼眶静脉丛采集非抗凝全血，室温静置30min，5000rpm离心5min，分离血清，-80℃冻存，用于生化检测；通过眼眶静脉丛采集EDTA-K2抗凝的全血，放于湿冰上，用于HbA1c的含量测定。
从-80℃取出血清样本，利用Hitachi(日立)7060全自动生化检测仪检测血清ALT、AST、TG、TC、HDL-c、LDL-c及全血中HbA1c的含量，利用酶联免疫试剂盒测定insulin含量。检测参数如下表13所示：
表13
参数 单位
丙氨酸氨基转移酶(ALT) U/L
天门冬氨酸氨基转移酶(AST) U/L
甘油三酯(TG) mmol/L
总胆固醇(TC) mmol/L
高密度脂蛋白(HDL-c) mmol/L
低密度脂蛋白(LDL-c) mmol/L
糖化血红蛋白(HbA1c) ％
胰岛素(insulin) nIU/ml
2.4.6肝脏NAS分析
按照流程解剖，用预冷生理盐水灌流后，取肝脏，拍照称重，浸泡于10％福尔马林中固定，用于病理HE染色。根据KCI病理学染色标准SOP对所有动物肝脏石蜡切片进行HE染色。染色切片均通过NanoZoomer Digital Pathology(S210，Hamamaci，Japan)扫描仪全景扫描，随后在不同倍率下选择不同视野进行观察，针对切片中的不同肝叶评分，评分标准见表14。
表14：非酒精性脂肪性肝炎NAS评分标准
2.4.7肝脏纤维化分析
按照流程解剖，用预冷生理盐水灌流后，取肝脏，拍照称重，浸泡于10％福尔马林中固定，用于病理天狼星红(SR)染色。根据KCI病理学染色标准SOP对肝脏石蜡切片进行SR染色。染色切片均通过NanoZoomer Digital Pathology(S210,Hamamaci,Japan)扫描仪全景扫描，运用VIS7.0软件对全景扫描的SR染色切片进行肝纤维化面积分析，计算出肝纤维化面积占整个切片面积的百分比。
3、数据分析
数据在Office Excel 2013和GraphPad Prism6.0中进行整理，数据以Mean±SEM表示。利用One-way ANOVA和Two-way ANOVA分析，分析方法选用Tukey或者Dunnett等合适组间比较差异显著性检验方法；两组间比较时，用T-test进行两组间双尾检测，当p<0.05时，即两组之间具有显著性差异。
4、结果
4.1动物数量变化
STZ+HFD诱导建立的NASH模型动物有一定的死亡率。动物死亡前的临床表现为四肢发白，活动量减少，该表现为代谢障碍引起的血液循环降低，为本模型的正常表现，与历史背景数据一致。Tirzepatide-0.15mg/kg、BG128-0.15mg/kg和BG128-0.50mg/kg组动物耐受良好，表明阳性对照Tirzepatide和BG128对模型动物具有一定的保护作用。在试验设计中，各组(正常对照组除外)均增加了3只动物，所有存活至试验终点的动物均纳入数据统计中，具体情况如表15所示。
表15：动物数量情况
备注：-：不适用。
4.2动物体重
动物体重变化结果(图16)显示：首次给药后，各给药组动物体重呈现明显下降的趋势，不同剂量BG128给药组体重下降幅度与给药剂量呈正相关性；day12后，各给药组动物体重恢复稳定增长，但总体均明显低于模型组。在给药后期，各给药组动物体重变化没有明显差异(p>0.05)。
4.3摄食量
动物摄食量变化结果(图17)显示，与正常组相比，各组动物对高脂饲料的摄食量均低于正常组动物对正常饲料的摄食量，在整个试验期间，模型组和各个用药组之间摄食量无统计学差异(p>0.05)。由图17可知，同剂量组的BG128给药动物摄食量低于同剂量组的Trizepatide给药动物。
4.4空腹血糖
动物空腹血糖检测结果显示，与正常组相比模型动物在给予HFD前空腹血糖显著性升高，在给予HFD一周后，模型动物血糖比HFD饲养前显著升高，自给药后开始到试验终点，所有用药组动物空腹血糖与模型组相比显著性降低(p<0.001)(表16，图18)。在试验终点时，各剂量BG128组空腹血糖与db/db-ND组相比显著下降，具有剂量依赖性。同剂量组的BG128与Tirzepatide效果相当。
表16：空腹血糖(mmol/L)(Mean±SEM)
a:***p<0.001vs.模型组,by Two way-ANOVA,Tukey’s test
b：#p<0.05vs.BG128-0.05mg/kg,by Two way-ANOVA,Tukey’s test
c：###p<0.001vs.BG128-0.05mg/kg,by Two way-ANOVA,Tukey’s test
d：$$$p<0.001vs.BG128-0.15mg/kg,by Two way-ANOVA,Tukey’s test
4.5胰岛素
胰岛素变化(图19)结果显示，Tirzepatide-0.15mg/kg组和各剂量BG128组动物血清胰岛素浓度均减少，BG128-0.15mg/kg和BG128-0.5mg/kg组血清胰岛素与db/db-ND组相比具有统计学意义(p<0.05)。同剂量组的BG128效果优于Tirzepatide。
4.6 HbA1C％
外周血中HbA1C％变化结果(表17)显示：给药结束后，模型组HbA1c％与正常对照组相比显著上升，Tirzepatide和BG128各剂量组HbA1c％均有不同程度降低，其中BG128-0.5mg/kg组与模型组相比显著降低(p<0.05)，以模型组的HbA1c％为基准值，Tirzepatide和BG128各剂量组的HbA1c％分别下降了0.83％，0.97％，0.66％和1.04％(图20)。同剂量组的BG128与Tirzepatide效果相当。
表17：糖化血红蛋白变化(Mean±SEM)
a:*p<0.05vs.模型组,by One way-ANOVA,Tukey’s test
4.7肝功能和血脂相关生化指标
肝功能和血脂相关生化指标结果显示(表18、图21-23)。与模型组相比，Tirzepatide-0.15mg/kg和各剂量BG128组的ALT和AST均降低，BG128-0.15mg/kg和0.5mg/kg剂量组下降具有显著性差异(图21)；Tirzepatide-0.15mg/kg和各剂量BG128组总胆固醇和甘油三酯显著降低(图22)；Tirzepatide-0.15mg/kg组和各剂量BG128组低密度脂蛋白均显著降低，高密度脂蛋白无明显变化(图23)。同剂量组的BG128效果优于Tirzepatide。
表18：临床生化检测结果(Mean±SEM)
a：*p<0.05vs.模型组,by One-way ANOVA，Tukey’s test
b：**p<0.01vs.模型组,by One-way ANOVA，Tukey’s test
c：***p<0.001vs.模型组,by One-way ANOVA，Tukey’s test
d:&&p<0.01vs.模型组；e:&&&p<0.01vs.模型组,by T-test
4.8肝脏组织病理学
4.8.1 NAS评价
使用H&E染色评估肝脏病理变化。模型组肝细胞脂肪变性表现为肝细胞空泡样变性，广泛分布于肝叶；小叶间炎症表现为肝小叶内散在的局灶性炎症细胞浸润；未观察到气球样病变(表19，图24)。图24中，A：正常对照组；B：模型组；C：Tirzepatide-0.15mg/kg；D：BG128-0.05mg/kg；E：BG128-0.15mg/kg；F：BG128-0.5mg/kg。A图中可见肝细胞排列整齐，细胞结构完整，B图中可见肝细胞脂肪变性(黄色箭头)和炎细胞浸润(黑色箭头)，C、D、E、F图中可见不同程度的炎细胞浸润以及肝细胞脂肪变性的减轻。
根据表14所列的NAS评分标准，模型组肝细胞脂肪变性、肝小叶间炎症和NAS评分较正常组均有显著的升高(P<0.001)。
与模型组相比，Tirzepatide-0.15mg/kg组和各剂量BG128组肝脏炎细胞浸润和肝细胞脂肪变性评分均显著性降低(图25)。
与模型组相比，Tirzepatide-0.15mg/kg和各剂量BG128量组NAS的总分均显著性降低(p<0.001)(图26)。
表19：组织病理学结果(Mean±SEM)
a：***p<0.001vs.模型组,by One-way ANOVA，Tukey’s test
4.8.2肝纤维化评价
天狼星红染色可见纤维化主要分布在门静脉、中央静脉和细胞间区(图27)。图27中A：正常对照组；B：模型组；C：Tirzepatide-0.15mg/kg；D：BG128-0.05mg/kg；E：BG128-0.15mg/kg；F：BG128-0.5mg/kg。A图中可见肝细胞索之间没有纤维化形成，B、C、D、E、F图中可见在肝细胞索间有红色的纤维形成。
肝纤维化半定量分析显示(表20)，模型组纤维化率为1.32±0.02％，与正常对照组相比显著性升高(p<0.001)。各剂量BG128组与模型组相比纤维化率均显著性降低(表20，图28)。
表20：纤维化百分比(Mean±SEM)
a：*p<0.05vs.模型组,by T-test
b：**p<0.01vs.模型组,by T-test
c：***p<0.001vs.模型组,by T-test
5、结论
本实验采用STZ-HFD饲料诱导雄性C57 BL/6小鼠糖尿病合并NASH模型，模型组空腹血糖和HbA1c％显著上升，肝功能和血脂相关的血清生化指标显著提高，同时引起肝脏组织病理学指标显著变化，包括肝细胞脂肪病变、肝小叶间炎症增多、NAS评分升高和肝纤维化加剧，与人类高血糖和NASH的临床特征类似，也表明该模型稳定可靠。
BG128对STZ-HFD诱导的C57BL/6糖尿病合并NASH模型具有明显的治疗作用，BG128各剂量组能够显著地降低空腹血糖、胰岛素和HbA1c％，并对模型动物具有一定的保护作用，具有剂量依赖性。BG128可显著改善肝功能和血脂相关的临床生化指标，降低肝脏NAS评分和纤维化率，显著地延缓NASH进展和纤维化进程。总体上，BG128的疗效优于与等剂量的对照药物Tirzepatide组。
本说明书公开的所有技术特征都可以任何组合方式进行组合。本说明书公开的每个特征也可以被其它具有相同、相等或相似作用的特征所替换。因此，除非特殊说明，所公开的每一特征仅仅是一系列相等或相似特征的实例。
此外，从上述描述中，本领域技术人员可从本公开中很容易清楚本公开的关键特征，在不脱离本公开的精神及范围的情况下，可对发明进行很多修改以适应各种不同的使用目的及条件，因此这类修改也旨在落入所附权利要求书的范围内。
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<110> 博瑞生物医药（苏州）股份有限公司
博瑞制药（苏州）有限公司
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<151> 2021-05-20
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<170> PatentIn version 3.5
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<211> 39
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> polypeptide sequence
<220>
<221> SITE
<222> (2)..(2)
<223> Xaa是Aib
<220>
<221> SITE
<222> (13)..(13)
<223> Xaa是Aib
<400> 1
Tyr Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Ile Xaa Leu Asp Lys
1 5 10 15
Ile Ala Gln Lys Ala Phe Val Gln Trp Leu Ile Ala Gly Gly Pro Ser
20 25 30
Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser
35

Claims (16)

1.如式I所示的化合物或其药学上可接受的盐：
Tyr-Aib-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Ile-Aib-Leu-Asp-Lys-Ile-Ala-Gln-Lys-Ala-Phe-Val-Gln-Trp-Leu-Ile-Ala-Gly-Gly-Pro-Ser-Ser-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser-A40
I；
其中，
A40为通过肽键与Ser连接的以下结构：
R1为-(Z1)m-(Z2)n-C(＝O)-(CH2)o-C(＝O)-Z3；
m为0或1；
若存在，Z1为-C(＝O)-(CH2)r-(Z4)p-NH-，其中p为4-8中的任一整数，每一个Z4各自独立地为-O-CH2-CH2-或-NH-C(＝O)-CH2-，r为1或2；
n为0-2中的任一整数；
若存在，每一个Z2各自独立地为 其中q为2-5中的任一整数；
o为14-18中的任一整数；
Z3为羟基或
2.根据权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，
R1为-C(＝O)-(CH2)o-C(＝O)-Z3；
o为14-18中的任一整数；
Z3为羟基或
3.根据权利要求2所述的化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，o为18。
4.根据权利要求2所述的化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，Z3为羟基。
5.根据权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，
R1为-Z1-Z2-C(＝O)-(CH2)o-C(＝O)-Z3；
Z1为-C(＝O)-CH2-(Z4)7-NH-，其中每一个Z4各自独立地为-O-CH2-CH2-或-NH-C(＝O)-CH2-；
Z2为其中q为2-5中的任一整数；
o为14-18中的任一整数；
Z3为羟基或
6.根据权利要求5所述的化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，Z1为-C(＝O)-CH2-(Z4)7-NH-，其中-(Z4)7-为-(O-CH2-CH2)3-(NH-C(＝O)-CH2)-(O-CH2-CH2)3-或-(O-CH2-CH2)7-。
7.根据权利要求5所述的化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，Z2为
8.根据权利要求5所述的化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，q为2。
9.根据权利要求5所述的化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，o为18。
10.根据权利要求5所述的化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，Z3为羟基。
11.根据权利要求1-10任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，A40选自如下任一项所示的结构：
12.根据权利要求11所述的化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，A40选自如下任一项所示的结构：
13.如下式I-1～I-14任一项所示的化合物或其药学上可接受的盐：
14.一种GIP和GLP-1的双受体激动剂，其特征在于，所述GIP和GLP-1的双受体激动剂为如下式I-3所示的化合物或其药学上可接受的盐：
15.一种药物组合物，其包括根据权利要求1-13任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，或根据权利要求14所述的GIP和GLP-1的双受体激动剂。
16.根据权利要求15所述的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物还包括一种或多种药学上可接受的载体。
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