CN115112730B - 一种基于镧系金属配合物发光体的适配体传感器制备方法 - Google Patents
一种基于镧系金属配合物发光体的适配体传感器制备方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN115112730B CN115112730B CN202210823362.5A CN202210823362A CN115112730B CN 115112730 B CN115112730 B CN 115112730B CN 202210823362 A CN202210823362 A CN 202210823362A CN 115112730 B CN115112730 B CN 115112730B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- solution
- concentration
- kanamycin
- electrode
- acac
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 108091023037 Aptamer Proteins 0.000 title claims abstract description 24
- 229910052747 lanthanoid Inorganic materials 0.000 title claims abstract description 15
- -1 lanthanide metal complex Chemical class 0.000 title claims abstract description 10
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 8
- 229930027917 kanamycin Natural products 0.000 claims abstract description 26
- SBUJHOSQTJFQJX-NOAMYHISSA-N kanamycin Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CN)O[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](N)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N SBUJHOSQTJFQJX-NOAMYHISSA-N 0.000 claims abstract description 26
- 229960000318 kanamycin Drugs 0.000 claims abstract description 26
- 229930182823 kanamycin A Natural products 0.000 claims abstract description 26
- CUJRVFIICFDLGR-UHFFFAOYSA-N acetylacetonate Chemical compound CC(=O)[CH-]C(C)=O CUJRVFIICFDLGR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 22
- IEQIEDJGQAUEQZ-UHFFFAOYSA-N phthalocyanine Chemical compound N1C(N=C2C3=CC=CC=C3C(N=C3C4=CC=CC=C4C(=N4)N3)=N2)=C(C=CC=C2)C2=C1N=C1C2=CC=CC=C2C4=N1 IEQIEDJGQAUEQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 7
- YRKCREAYFQTBPV-UHFFFAOYSA-N acetylacetone Chemical compound CC(=O)CC(C)=O YRKCREAYFQTBPV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 6
- 238000004020 luminiscence type Methods 0.000 claims abstract description 4
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims abstract description 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 35
- 229910021397 glassy carbon Inorganic materials 0.000 claims description 25
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 18
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 12
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 9
- 229910021642 ultra pure water Inorganic materials 0.000 claims description 9
- 239000012498 ultrapure water Substances 0.000 claims description 9
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 239000008267 milk Substances 0.000 claims description 6
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 claims description 6
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 claims description 6
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 claims description 6
- PNEYBMLMFCGWSK-UHFFFAOYSA-N aluminium oxide Inorganic materials [O-2].[O-2].[O-2].[Al+3].[Al+3] PNEYBMLMFCGWSK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 238000001816 cooling Methods 0.000 claims description 5
- 238000011010 flushing procedure Methods 0.000 claims description 5
- 238000011534 incubation Methods 0.000 claims description 5
- 238000005498 polishing Methods 0.000 claims description 5
- 238000004321 preservation Methods 0.000 claims description 5
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- AMQJEAYHLZJPGS-UHFFFAOYSA-N N-Pentanol Chemical compound CCCCCO AMQJEAYHLZJPGS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 4
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 claims description 4
- 239000002071 nanotube Substances 0.000 claims description 4
- SQGYOTSLMSWVJD-UHFFFAOYSA-N silver(1+) nitrate Chemical compound [Ag+].[O-]N(=O)=O SQGYOTSLMSWVJD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 239000000047 product Substances 0.000 claims description 3
- 229910021607 Silver chloride Inorganic materials 0.000 claims description 2
- DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M Sodium laurylsulphate Chemical compound [Na+].CCCCCCCCCCCCOS([O-])(=O)=O DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 2
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 claims description 2
- 238000002484 cyclic voltammetry Methods 0.000 claims description 2
- 239000003480 eluent Substances 0.000 claims description 2
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 claims description 2
- 239000011259 mixed solution Substances 0.000 claims description 2
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims description 2
- XQZYPMVTSDWCCE-UHFFFAOYSA-N phthalonitrile Chemical compound N#CC1=CC=CC=C1C#N XQZYPMVTSDWCCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N platinum Chemical compound [Pt] BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- HKZLPVFGJNLROG-UHFFFAOYSA-M silver monochloride Chemical compound [Cl-].[Ag+] HKZLPVFGJNLROG-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 2
- 229910001961 silver nitrate Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 239000011734 sodium Substances 0.000 claims description 2
- 229910000033 sodium borohydride Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 239000012279 sodium borohydride Substances 0.000 claims description 2
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 claims description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims description 2
- YUKQRDCYNOVPGJ-UHFFFAOYSA-N thioacetamide Chemical compound CC(N)=S YUKQRDCYNOVPGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- DLFVBJFMPXGRIB-UHFFFAOYSA-N thioacetamide Natural products CC(N)=O DLFVBJFMPXGRIB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- HRXKRNGNAMMEHJ-UHFFFAOYSA-K trisodium citrate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O HRXKRNGNAMMEHJ-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims description 2
- 229940038773 trisodium citrate Drugs 0.000 claims description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229910009111 xH2 O Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 238000000137 annealing Methods 0.000 claims 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims 2
- 229910021617 Indium monochloride Inorganic materials 0.000 claims 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims 1
- APHGZSBLRQFRCA-UHFFFAOYSA-M indium(1+);chloride Chemical compound [In]Cl APHGZSBLRQFRCA-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 claims 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 abstract description 13
- 239000000463 material Substances 0.000 abstract description 6
- 239000003446 ligand Substances 0.000 abstract description 5
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 4
- 239000002135 nanosheet Substances 0.000 abstract description 3
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 abstract description 2
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 abstract description 2
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 abstract 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 abstract 2
- 239000008204 material by function Substances 0.000 abstract 1
- 239000002073 nanorod Substances 0.000 abstract 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 abstract 1
- 150000002602 lanthanoids Chemical class 0.000 description 5
- 229910021645 metal ion Inorganic materials 0.000 description 4
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000001378 electrochemiluminescence detection Methods 0.000 description 3
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 3
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 2
- 238000001000 micrograph Methods 0.000 description 2
- 239000013110 organic ligand Substances 0.000 description 2
- 239000004065 semiconductor Substances 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- AZUYLZMQTIKGSC-UHFFFAOYSA-N 1-[6-[4-(5-chloro-6-methyl-1H-indazol-4-yl)-5-methyl-3-(1-methylindazol-5-yl)pyrazol-1-yl]-2-azaspiro[3.3]heptan-2-yl]prop-2-en-1-one Chemical compound ClC=1C(=C2C=NNC2=CC=1C)C=1C(=NN(C=1C)C1CC2(CN(C2)C(C=C)=O)C1)C=1C=C2C=NN(C2=CC=1)C AZUYLZMQTIKGSC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 150000001251 acridines Chemical class 0.000 description 1
- 230000004888 barrier function Effects 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- 230000003197 catalytic effect Effects 0.000 description 1
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 239000011796 hollow space material Substances 0.000 description 1
- 229940042795 hydrazides for tuberculosis treatment Drugs 0.000 description 1
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 239000002086 nanomaterial Substances 0.000 description 1
- 229910000510 noble metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000009022 nonlinear effect Effects 0.000 description 1
- 150000002894 organic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 125000005575 polycyclic aromatic hydrocarbon group Chemical group 0.000 description 1
- 238000010377 protein imaging Methods 0.000 description 1
- 239000002096 quantum dot Substances 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 229910052707 ruthenium Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000011895 specific detection Methods 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 239000010409 thin film Substances 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 230000007704 transition Effects 0.000 description 1
- 238000001291 vacuum drying Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N27/00—Investigating or analysing materials by the use of electric, electrochemical, or magnetic means
- G01N27/26—Investigating or analysing materials by the use of electric, electrochemical, or magnetic means by investigating electrochemical variables; by using electrolysis or electrophoresis
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
- G01N21/75—Systems in which material is subjected to a chemical reaction, the progress or the result of the reaction being investigated
- G01N21/76—Chemiluminescence; Bioluminescence
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N27/00—Investigating or analysing materials by the use of electric, electrochemical, or magnetic means
- G01N27/26—Investigating or analysing materials by the use of electric, electrochemical, or magnetic means by investigating electrochemical variables; by using electrolysis or electrophoresis
- G01N27/27—Association of two or more measuring systems or cells, each measuring a different parameter, where the measurement results may be either used independently, the systems or cells being physically associated, or combined to produce a value for a further parameter
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N27/00—Investigating or analysing materials by the use of electric, electrochemical, or magnetic means
- G01N27/26—Investigating or analysing materials by the use of electric, electrochemical, or magnetic means by investigating electrochemical variables; by using electrolysis or electrophoresis
- G01N27/28—Electrolytic cell components
- G01N27/30—Electrodes, e.g. test electrodes; Half-cells
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Electrochemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Plasma & Fusion (AREA)
- Investigating Or Analysing Materials By The Use Of Chemical Reactions (AREA)
Abstract
本发明涉及一种基于镧系金属配合物发光体的适配体传感器制备方法，属于新型功能材料、电化学发光传感领域。由于共轭大环配体的“天线效应”，Gd与Pc形成的配合物的结合表现出优异的发光特性。此外，In2O3/ZnIn2S4管状异质结构的合理设计和结构加速了光生电荷的分离和传输，复合物形成的花状纳米片提供了更多的活性位点，不仅可以大大增加发光体的固体负载，还能有效缩短离子和共反应物之间的传输距离，这提高了生物传感器的灵敏度。以半三明治结构化合物GdPc(acac)（Pc=酞菁；acac=乙酰丙酮）作为发光材料，三维花状纳米棒In2O3/ZnIn2S4为共反应剂成功构建了适配体传感器，对卡那霉素的线性检测范围为0.01 pg/mL~1000 ng/mL，检测限为0.003 pg/mL。
Description
技术领域
本发明属于涉及一种用于检测卡那霉素的基于镧系半三明治结构配合物发光体的电化学发光适配体传感器；具体说是以GdPc(acac)（Pc=酞菁；acac=乙酰丙酮）配合物为发光材料，以In2O3/ZnIn2S4作为共反应剂促进剂的适配体传感器。
背景技术
凭借高灵敏度、宽泛的检测范围和低背景信号等优点，电化学发光检测技术在免疫分析、薄膜蛋白成像和环境监测等许多领域引起广泛关注；发光物质在ECL检测过程中起着至关重要的作用，到目前为止，许多类型的发光材料，包括无机Ru、Ir配合物、有机化合物（酰肼、吖啶、多环芳烃）和纳米材料（量子点、贵金属纳米团簇）在电化学发光相关领域都有大量报道；由于正三价态的电子跃迁（4f-4f）自旋势垒特性降低了摩尔吸收系数，镧系金属离子不能被有效激发而产生高的发光效率;研究发现，可以通过加入有机配体改善其发光效率。
随着合适的有机配体的引入，配合物的自发光特性可以通过天线效应或分子内能量转移进行调节，极大地提高中心离子的发光效率；酞菁作为一种具有18电子共轭大环结构的配体，在分子材料领域具有许多优越的性能，如优良的光学、热稳定性和强烈的光学非线性效应;由于平面共轭大环配体的“天线效应”，酞菁基发光金属离子的配合物的发光性能可以得到有效提高。
众所周知，电化学发光的信号强度被认为是精细检测的必要前提。作为提高发光效率的一种新方法，共反应促进剂已被成功地引入ECL系统;最近，具有独特结构的中空颗粒在电化学传感研究中显示出应用前景;在中空材料的各种结构中，管状结构可以与壳表面的其他半导体形成分层的异质结构;其中，二维半导体纳米片在管状基底上的生长，有利于减少电荷扩散距离，有效提升催化活性位点的数目。
本发明首次合成了一种新的镧系配合物GdPc(acac)作为发光材料，并通过在In2O3微管外表面生长ZnIn2S4 花状纳米薄片，组装成In2O3/ZnIn2S4共反应促进剂，使电化学发光信号明显有所提升；基于GdPc(acac)和In2O3/ZnIn2S4，我们成功地构建了高灵敏度的电化学发光适配体传感器，并用于卡那霉素的检测。
发明内容
本发明的目的之一是制备一种以GdPc(acac)配合物为发光材料，以In2O3/ZnIn2S4作为共反应剂促进剂的适配体传感器。
本发明的目的之二是将该传感器用于牛奶中卡那霉素的高灵敏、特异性检测。
本发明的技术方案如下；
一种基于镧系金属配合物发光体的适配体传感器制备方法如下；
（1）将直径为4 mm的玻碳电极用氧化铝精细抛光后，用超纯水和乙醇超声冲洗；
（2）取6 μL、浓度为1~6 mg/mL的GdPc(acac)滴在电极表面，置于室温条件下晾干；
（3）滴加6 μL、浓度为2~12 mg/mL的共反应剂促进剂生物结合物Ag@In2O3/ZnIn2S4-Apt溶液于玻碳电极表面，并在4℃冰箱中保存孵育；
（4）滴加8 μL、质量分数为1~2%的BSA溶液阻断非特异性活性位点；
（5）滴加8 μL、浓度为6~12 mg/mL的0.01 pg/mL~1000 ng/mL的一系列浓度梯度的卡那霉素溶液滴涂在玻碳电极上，放置在4ºC冰箱中保存孵育，即制得检测卡那霉素的电化学发光适配体传感器。
本发明的有益效果为。
（1）引入酞菁作为配体，由于平面共轭大环配体的“天线效应”，含有发光金属离子的酞菁配合物可以表现出优良的光学性能，使镧系金属离子能够被有效激发而产生高的发光强度。
（2）首次合成新的镧系配合物GdPc(acac)作为发光物质。
（3）首次将In2O3/ZnIn2S4作为共反应物（S2O8 2-）的共反应剂促进剂，提升了电化学发光的信号强度。
（4）本发明采用GdPc(acac)及In2O3/ZnIn2S4构建的超灵敏电化学发光适配体传感器，可应用于牛奶中卡那霉素的检测，具有操作简单，检测快速，信号线性范围宽（0.01 pg/mL~1000 ng/mL）和检出限低（0.003 pg/mL）的优点。
附图说明
图1电化学发光免疫传感器的构建过程图。
图2本发明所得GdPc(acac)的电镜图（2A）、In2O3/ZnIn2S4电镜图（2B）。
图3为试验标准曲线的建立。
具体实施方式
实施例1一种基于镧系金属配合物发光体的适配体传感器制备方法;
（1）将直径为4 mm的玻璃碳电极用氧化铝精细抛光后，用超纯水和乙醇冲洗；
（2）取6 μL、浓度为1 mg/mL的GdPc(acac)滴在电极表面，置于室温条件下晾干；
（3）滴加6 μL、浓度为2 mg/mL的共反应剂促进剂生物结合物Ag@In2O3/ ZnIn2S4 -Apt溶液于玻碳电极表面，并在4℃冰箱中保存孵育；
（4）滴加8 μL、质量分数为2%的BSA溶液阻断非特异性活性位点；
（5）滴加8 μL、浓度为0.01 pg/mL~1000 ng/mL的一系列浓度梯度的卡那霉素溶液滴涂在玻碳电极上，放置在4ºC冰箱中保存孵育，即制得检测卡那霉素的电化学发光适配体传感器。
实施例2一种基于镧系金属配合物发光体的适配体传感器制备方法；
（1）将直径为4 mm的玻璃碳电极用氧化铝精细抛光后，用超纯水和乙醇冲洗；
（2）取6 μL、浓度为2 mg/mL的GdPc(acac)滴在电极表面，置于室温条件下晾干；
（3）滴加6 μL、浓度为2 mg/mL的共反应剂促进剂生物结合物Ag@In2O3/ZnIn2S4-Apt溶液于玻碳电极表面，并在4℃冰箱中保存孵育；
（4）滴加8 μL、质量分数为2%的BSA溶液阻断非特异性活性位点；
（5）滴加8 μL、浓度为0.01 pg/mL~1000 ng/mL的一系列浓度梯度的卡那霉素溶液滴涂在玻碳电极上，放置在4ºC冰箱中保存孵育，即制得检测卡那霉素的电化学发光适配体传感器。
实施例3一种基于镧系金属配合物发光体的适配体传感器制备方法；
（1）将直径为4 mm的玻璃碳电极用氧化铝精细抛光后，用超纯水和乙醇冲洗；
（2）取6 μL、浓度为2 mg/mL的GdPc(acac)滴在电极表面，置于室温条件下晾干；
（3）滴加6 μL、浓度为1 mg/mL的共反应剂促进剂生物结合物Ag@In2O3/ ZnIn2S4 -Apt溶液于玻碳电极表面，并在4℃冰箱中保存孵育；
（4）滴加8 μL、质量分数为2%的BSA溶液阻断非特异性活性位点；
（5）滴加8 μL、浓度为0.01 pg/mL~1000 ng/mL的一系列浓度梯度的卡那霉素溶液滴涂在玻碳电极上，放置在4ºC冰箱中保存孵育，即制得检测卡那霉素的电化学发光适配体传感器。
实施例4制备GdPc(acac)发光体及Ag@In2O3/ZnIn2S4-Apt生物结合物
将15 mmol邻二氰基苯、45 mmol Gd(acac)3nH2O和3 mmol DBU加入到100毫升的正戊醇溶液中。混合物在氮气保护下加热，在70℃下保持4小时；随后，将溶液冷却至室温后加入300毫升正己烷，静置一夜后收集沉淀物；用氯仿/甲醇（99:1）的混合物作为洗脱剂，通过柱色谱法纯化该产品；蒸发溶剂，用二氯甲烷/正己烷的混合物重新结晶得到的固体，得到深蓝色产品；
将120 mg In(NO3)3-xH2O和120 mg 1,4-苯二甲酸溶解在150毫升的DMF中并搅拌分钟；所需的溶液在120℃下加热3小时；冷却至室温后，所得沉淀物用乙醇洗涤三次，经真空干燥后，在120℃的空气中以5℃/min-1的加热速率退火2小时，然后在500℃的空气中以同样的加热速率进一步退火2~4小时，得到In2O3纳米管；将30 mgIn2O3纳米管和30 mL水在圆底烧瓶中搅拌30分钟；然后加入90 mgZnCl2，130 mgInCl3，90 mg硫代乙酰胺；所得混合物在80℃下搅拌2小时，过滤后用乙醇洗涤三次，并在真空下干燥；
将硝酸银溶液（3 mL，100 mM）和柠檬酸三钠溶液（5 mL，100 mM）依次加入到200mL超纯水中的2 mg In2O3/ZnIn2S4的溶液中，将充分混合的溶液放入冰箱中冰冷（-20℃，15min）；然后，加入10 mL硼氢化钠溶液（100 nM）20分钟，反应后加入10mL十二烷基硫酸钠溶液，用超纯水将沉淀洗三次；最后，加入200 μL适配体（10 μM），并在4℃下连续摇动混合物约8小时。
实施例5 卡那霉素的检测
（1）将Ag/AgCl电极作为参比电极、铂丝电极作为对电极、所制得的电化学发光传感器作为工作电极，连接在化学发光检测仪的暗盒中，将电化学工作站和化学发光检测仪连接在一起；
（2）化学发光检测仪参数设置如下：光电倍增管的高压设置为650 V，扫描速率设置为0.1 V/s；
（3）电化学工作站参数设置如下：循环伏安扫描电位范围为-0.3 V～-2 V，扫描速率设置为0.1 V/s；
（4）使用含0.1 M KCl和70 mM K2S2O8的PBS缓冲溶液，通过电化学发光法检测不同浓度的PSA产生的电化学发光信号强度；所述PBS缓冲溶液，其pH = 9.5，用0.1 M Na2HPO4和0.1 M KH2PO4配制；
（5）测定一系列不同浓度的卡那霉素对应的电发光信号的大小，建立电发光信号与卡那霉素浓度之间的线性关系, 见图3；根据该定量关系即可测定未知牛奶样品中卡那霉素的浓度。
实施例6
应用实施例1、2和3构建的传感器按照实施例5的检测方法对PSA进行了检测，测得传感器的线性检测范围为0.01 pg/mL-1000 ng/mL，检测限为0.003 pg/mL。
Claims (5)
1.一种基于镧系金属配合物发光体的适配体传感器制备方法，其特征在于，包括以下几个步骤：
(1)将直径为4mm的玻碳电极用氧化铝精细抛光后，用超纯水和乙醇超声冲洗；
(2)取6μL、浓度为1～6mg/mL的GdPc(acac)，其中Pc为酞菁、acac为乙酰丙酮，滴在电极表面，置于室温条件下晾干；
(3)滴加6μL、浓度为2～12mg/mL的共反应剂促进剂生物结合物Ag@In2O3/ZnIn2S4-Apt溶液于玻碳电极表面，并在4℃冰箱中保存孵育；
(4)滴加8μL、质量分数为1～2％的BSA溶液阻断非特异性活性位点；
(5)滴加8μL、浓度为0.01pg/mL～1000ng/mL的一系列浓度梯度的卡那霉素溶液滴涂在玻碳电极上，放置在4℃冰箱中保存孵育，即制得检测卡那霉素的电化学发光适配体传感器。
2.根据权利要求1所述的一种基于镧系金属配合物发光体的适配体传感器制备方法，其特征在于，所述GdPc(acac)发光体及Ag@In2O3/ZnIn2S4-Apt生物结合物的制备方法如下：
将10～20mmol邻二氰基苯、40～60mmol Gd(acac)3nH2O和1～5mmol DBU加入到100～300毫升的正戊醇溶液中；
混合物在氮气保护下加热，在70℃下保持4小时；
随后，将溶液冷却至室温后加入300mL正己烷，静置一夜后收集沉淀物；用体积比为99：1的氯仿/甲醇混合物作为洗脱剂，通过柱色谱法纯化得到的GdPc(acac)发光体；蒸发溶剂，用二氯甲烷/正己烷的混合物重新结晶得到的固体，得到深蓝色产品；
将100～200mg In(NO3)3-xH2O和100～200mg 1,4-苯二甲酸溶解在150mL的DMF中并搅拌分钟；
所需的溶液在120℃下加热3小时；冷却至室温后，所得沉淀物用乙醇洗涤三次，经真空干燥后，在120℃的空气中以5℃/min-1的加热速率退火2小时，然后在500℃的空气中以同样的加热速率进一步退火2～4小时，得到In2O3纳米管；将30mg的In2O3纳米管和30mL水在圆底烧瓶中搅拌30分钟；
然后加入80～100mg的ZnCl2，110～150mg的InCl3和90～100mg的硫代乙酰胺；所得混合物在80℃下搅拌2小时，过滤后用乙醇洗涤三次，并在真空下干燥；将2～5mL，100mM的硝酸银溶液和7～12mL，100mM的柠檬酸三钠溶液依次加入到200mL超纯水中的2～5mg In2O3/ZnIn2S4的溶液中，将充分混合的溶液放入-20℃的冰箱中冰冷15min；
然后，20分钟时间内加入10mL，100nM的硼氢化钠溶液，反应后加入10mL十二烷基硫酸钠溶液，用PBS溶液冲洗后用超纯水将沉淀洗三次；最后，加入200μL，10μM适配体，并在4℃下连续摇动混合物8小时。
3.根据权利要求2所述的一种基于镧系金属配合物发光体的适配体传感器制备方法，其特征在于：所述PBS溶液，用0.1M Na2HPO4和0.1M KH2PO4配制组成，用浓度为50～110mMK2S2O8调节其酸碱值，使其处于pH＝7.0～10.0的范围内。
4.根据权利要求1所述制备方法制备的电化学发光适配体传感器的应用方法，其用于牛奶中卡那霉素浓度的检测。
5.根据要求1所述的制备方法制备传感器的检测方法，其用于牛奶中卡那霉素浓度的检测，检测步骤如下：
(A)将Ag/AgCl电极作为参比电极、铂丝电极作为对电极、所制得的电化学发光传感器作为工作电极，连接在化学发光检测仪的暗盒中，将电化学工作站和化学发光检测仪连接在一起；
(B)化学发光检测仪参数设置光电倍增管的高压设置为600V，扫描速率设置为0.1V/s；
(C)电化学工作站参数设置如下：循环伏安扫描电位范围为-0.3V～-2V，扫描速率设置为0.1V/s；
(D)测定权利要求1步骤(5)所述的一系列浓度梯度的卡那霉素溶液对应的电致发光信号强度的大小，建立电致发光信号强度与卡那霉素浓度之间的线性关系；
(E)根据权利要求5步骤(D)中建立的电致发光信号强度与卡那霉素浓度之间的线性关系即可测定未知牛奶样品中卡那霉素的浓度。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202210823362.5A CN115112730B (zh) | 2022-07-14 | 2022-07-14 | 一种基于镧系金属配合物发光体的适配体传感器制备方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202210823362.5A CN115112730B (zh) | 2022-07-14 | 2022-07-14 | 一种基于镧系金属配合物发光体的适配体传感器制备方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN115112730A CN115112730A (zh) | 2022-09-27 |
| CN115112730B true CN115112730B (zh) | 2024-05-24 |
Family
ID=83332157
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202210823362.5A Active CN115112730B (zh) | 2022-07-14 | 2022-07-14 | 一种基于镧系金属配合物发光体的适配体传感器制备方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN115112730B (zh) |
Citations (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2011088744A1 (zh) * | 2010-01-22 | 2011-07-28 | 北京大学 | 光致发光纳米粒子及其制备方法与应用 |
| KR20120023208A (ko) * | 2010-09-01 | 2012-03-13 | 광운대학교 산학협력단 | 나노입자를 이용한 비표지방식의 압타머 바이오센서 |
| WO2013129710A1 (ko) * | 2012-02-27 | 2013-09-06 | 주식회사 아이센스 | 비표지 방식의 압타머 바이오센서 |
| CN110687175A (zh) * | 2019-11-11 | 2020-01-14 | 济南大学 | 一种基于二氧化铈和纳米银双增强苝四羧酸发光的电化学发光传感器的构建方法 |
| CN110927226A (zh) * | 2020-01-07 | 2020-03-27 | 济南大学 | 一种基于二氧化铈和纳米铂双增强鲁米诺发光的电化学发光传感器的构建方法 |
| CN111721826A (zh) * | 2020-05-18 | 2020-09-29 | 济南大学 | 一种基于镧系金属自发光Eu-MOFs的竞争型免疫传感器的制备方法 |
| CN112147191A (zh) * | 2020-08-24 | 2020-12-29 | 济南大学 | 一种金簇修饰铜钴材料检测降钙素原的电化学发光传感器的制备方法 |
| CN112147193A (zh) * | 2020-08-24 | 2020-12-29 | 济南大学 | 一种金簇功能化铜钴材料检测肺癌的电致化学发光传感器的制备方法 |
-
2022
- 2022-07-14 CN CN202210823362.5A patent/CN115112730B/zh active Active
Patent Citations (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2011088744A1 (zh) * | 2010-01-22 | 2011-07-28 | 北京大学 | 光致发光纳米粒子及其制备方法与应用 |
| KR20120023208A (ko) * | 2010-09-01 | 2012-03-13 | 광운대학교 산학협력단 | 나노입자를 이용한 비표지방식의 압타머 바이오센서 |
| WO2013129710A1 (ko) * | 2012-02-27 | 2013-09-06 | 주식회사 아이센스 | 비표지 방식의 압타머 바이오센서 |
| CN110687175A (zh) * | 2019-11-11 | 2020-01-14 | 济南大学 | 一种基于二氧化铈和纳米银双增强苝四羧酸发光的电化学发光传感器的构建方法 |
| CN110927226A (zh) * | 2020-01-07 | 2020-03-27 | 济南大学 | 一种基于二氧化铈和纳米铂双增强鲁米诺发光的电化学发光传感器的构建方法 |
| CN111721826A (zh) * | 2020-05-18 | 2020-09-29 | 济南大学 | 一种基于镧系金属自发光Eu-MOFs的竞争型免疫传感器的制备方法 |
| CN112147191A (zh) * | 2020-08-24 | 2020-12-29 | 济南大学 | 一种金簇修饰铜钴材料检测降钙素原的电化学发光传感器的制备方法 |
| CN112147193A (zh) * | 2020-08-24 | 2020-12-29 | 济南大学 | 一种金簇功能化铜钴材料检测肺癌的电致化学发光传感器的制备方法 |
Non-Patent Citations (5)
| Title |
|---|
| Electrochemiluminescent system based-on novel semi-sandwich Lanthanide metal complex with 3D rod-like nanoflowers In2O3/ZnIn2S4 as co-reaction accelerator for kanamycin detection;Duan, Xiaoyi et al.;Sensors and actuators. B, Chemical;第379卷;133259 * |
| 基于KGdF_4:Dy~(3+)纳米材料检测土霉素的生物传感新方法;吴世嘉;聂雨;张辉;段诺;王周平;;食品与机械(06);全文 * |
| 基于新型无机发光体及信号放大策略电致化学发光传感器研究;王存;中国博士学位论文全文数据库工程科技Ⅰ辑(第1期);B014-236 * |
| 新型血清CYFRA21-1检测电化学生物传感器的研制;王建富;李小平;陈文虎;樊凯;钱苗苗;;检验医学(06);全文 * |
| 食品中氨基糖苷类抗生素快速分析方法研究进展;邵杰;韦达理;曾昆;黄哲;杜道林;;江苏农业科学(08);全文 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN115112730A (zh) | 2022-09-27 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN110220888B (zh) | 一种三联吡啶钌功能化mof的电化学发光传感器的制备方法 | |
| Pyati et al. | ECL—Electrochemical luminescence | |
| Li et al. | Recent advances in new luminescent nanomaterials for electrochemiluminescence sensors | |
| CN106916159B (zh) | 一种开关纳米卟啉荧光传感器可控制备方法 | |
| CN110982521B (zh) | 石墨相氮化碳量子点复合物及其合成方法和生物应用 | |
| Chen et al. | A dual-signals response electrochemiluminescence immunosensor based on PTC-DEPA/KCC-1 NCs for detection of procalcitonin | |
| CN111208178B (zh) | 一种基于钴基金属有机框架物双重放大苝四羧酸信号构建电化学发光传感器的方法 | |
| Zhao et al. | A CeO 2-matrical enhancing ECL sensing platform based on the Bi 2 S 3-labeled inverted quenching mechanism for PSA detection | |
| Luo et al. | Hydrothermal synthesis of bright blue-emitting carbon dots for bioimaging and fluorescent determination of baicalein | |
| Duan et al. | Ultrasensitive electrochemiluminescent aptasensor for trace detection of kanamycin based-on novel semi-sandwich gadolinium phthalocyanine complex and dysprosium metal-organic framework | |
| Li et al. | Ultrasensitive self-enhanced electrochemiluminescence sensor based on novel PAN@ Ru@ PEI@ Nafion nanofiber mat | |
| Jia et al. | Target-triggered and controlled release plasmon-enhanced fluorescent AIE probe for conformational monitoring of insulin fibrillation | |
| Huang et al. | A metal–organic framework nanomaterial as an ideal loading platform for ultrasensitive electrochemiluminescence immunoassays | |
| Liu et al. | Nanovehicles based bioassay labels | |
| Ren et al. | Ternary electrochemiluminescence quenching effects of CuFe2O4@ PDA-MB towards self-enhanced Ru (dcbpy) 32+ functionalized 2D metal-organic layer and application in carcinoembryonic antigen immunosensing | |
| CN115112730B (zh) | 一种基于镧系金属配合物发光体的适配体传感器制备方法 | |
| Richter | Electrochemiluminescence | |
| Ren et al. | Confinement-enhanced electrochemiluminescence by Ru (dcbpy) 32+-functionalized γ-CD-MOF@ COF-LZU1 porous hybrid material as micro-reactor for CYFRA 21-1 detection | |
| CN115032247B (zh) | 一种基于硼氟(bodipy)发光体的电化学发光免疫传感器制备方法 | |
| Li et al. | Potential-Resolved Ratiometric Aptasensor for Sensitive Acetamiprid Analysis Based on Coreactant-free Electrochemiluminescence Luminophores of Gd-MOF and “Light Switch” Molecule of [Ru (bpy) 2dppz] 2+ | |
| Duan et al. | Electrochemiluminescent system based-on novel semi-sandwich Lanthanide metal complex with 3D rod-like nanoflowers In2O3/ZnIn2S4 as co-reaction accelerator for kanamycin detection | |
| CN115290630A (zh) | 一种基于聚多巴胺修饰氧化钴猝灭磷掺杂石墨氮化碳电化学发光的免疫传感器的制备方法 | |
| CN110441372B (zh) | 以多金属氧酸盐为电子供体的羟基氧化铁复合材料光电化学传感器的制备方法及应用 | |
| CN114636743A (zh) | 基于SiO2封装的MAPB QDs分子印迹电化学发光传感器及其制备方法和应用 | |
| CN111766288A (zh) | 一种基于富氧空位NiCo2O4电致化学发光传感器的制备方法及应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant |