CN115040552A - 一种灵芝提取物的制备方法及应用 - Google Patents

一种灵芝提取物的制备方法及应用 Download PDF

Info

Publication number
CN115040552A
CN115040552A CN202210143002.0A CN202210143002A CN115040552A CN 115040552 A CN115040552 A CN 115040552A CN 202210143002 A CN202210143002 A CN 202210143002A CN 115040552 A CN115040552 A CN 115040552A
Authority
CN
China
Prior art keywords
vad
ganoderma
ganoderma lucidum
enzyme
preparation
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN202210143002.0A
Other languages
English (en)
Inventor
张艳
王欣妍
薛健飞
杨秀东
金刚
杨艳俊
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Jilin Institute of Chemical Technology
Original Assignee
Jilin Institute of Chemical Technology
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Jilin Institute of Chemical Technology filed Critical Jilin Institute of Chemical Technology
Priority to CN202210143002.0A priority Critical patent/CN115040552A/zh
Publication of CN115040552A publication Critical patent/CN115040552A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/06—Fungi, e.g. yeasts
    • A61K36/07—Basidiomycota, e.g. Cryptococcus
    • A61K36/074—Ganoderma
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
    • A61K2236/10—Preparation or pretreatment of starting material
    • A61K2236/19—Preparation or pretreatment of starting material involving fermentation using yeast, bacteria or both; enzymatic treatment

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Medical Informatics (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Alternative & Traditional Medicine (AREA)
  • Psychiatry (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)

Abstract

本发明提供了一种灵芝提取物的制备方法，包括：将灵芝、酶与水超声混合在加热条件下进行酶解，得到灵芝提取物。与现有技术相比，本发明制备的灵芝提取物的主要成分包括多糖类物质、氨基酸类物质、三萜类物质及少量生物碱，可通过改善神经功能、认知能力，抑制脑内AchE水平、增加抗氧化酶SOD、CAT与GSH‑Px水平从而达到预防和/或延缓和/或治疗血管性痴呆的目的。

Description

一种灵芝提取物的制备方法及应用
技术领域
本发明属于中药提取技术领域，尤其涉及一种灵芝提取物的制备方法及 应用。
背景技术
血管性痴呆(VaD)是由于脑血管病危险因素或脑血管病变引起的认知功 能损害。血管性痴呆的病理改变可能与脑血流量不足导致的脑血管屏障受 损、神经炎性反应、神经元损伤及弥漫性白质改变包括髓鞘丢失、轴突异常 等有关。VaD目前已成为导致痴呆的第二大病因，仅次于阿尔茨海默病。使 用药物有效的预防和延缓VaD的进程有重要的社会效益和医学应用价值。
VaD被认为是由脑血流量减少引起的进行性疾病，涉及许多危险因素， 包括高血压、糖尿病、高脂血症等。缺血所致的VaD会影响认知能力，尤其 是执行能力。海马在人类高级认知活动中担认存储信息及学习记忆的重要作 用。脑组织缺血缺氧后，会出现脑水肿，神经元突触结构会发生破坏，进而 导致突触功能障碍，学习记忆功能及认知功能下降。乙酰胆碱是脑内与记忆 密切相关的神经递质。抑制乙酰胆碱酶(AchE)对乙酰胆碱的水解，恢复乙 酰胆碱的正常水平是改善认知能力的一种途径。VaD引发的缺血缺氧还可引 起脑组织氧化应激反应，损伤大脑神经元导致认知功能下降。
目前，灵芝多糖对VaD的预防、延缓和治疗都未见报道。
发明内容
有鉴于此，本发明要解决的技术问题在于提供一种灵芝提取物的制备方 法及其在预防、延缓和治疗血管性痴呆中的应用。
本发明提供了一种灵芝提取物的制备方法，包括：
将灵芝、酶与水超声混合在加热条件下进行酶解，得到灵芝提取物。
优选的，所述酶选自纤维素酶、蛋白酶与果胶酶中的一种或多种；所述 灵芝与酶的质量比为2：(0.005～0.035)。
优选的，所述酶为纤维素酶；所述灵芝与酶的质量比为2：(0.013～0.018)。
优选的，所述超声混合的功率为200～300W；所述超声混合的时间为4～15 min。
优选的，所述超声混合的功率为220W；所述超声混合的时间为4～6min。
优选的，所述酶解的温度为35℃～75℃；酶解的时间为35～75min。
优选的，所述酶解的温度为39℃～45℃；酶解的时间为48～65min。
本发明还提供了上述制备方法所制备的灵芝提取物。
本发明还提供了上述制备方法所制备的灵芝提取物在制备预防和/或延缓 和/或治疗血管性痴呆的药物中的应用。
优选的，所述灵芝提取物通过抑制脑内AchE水平、增加抗氧化酶SOD、 CAT与GSH-Px水平来预防和/或延缓和/或治疗血管性痴呆。
本发明提供了一种灵芝提取物的制备方法，包括：将灵芝、酶与水超声 混合在加热条件下进行酶解，得到灵芝提取物。与现有技术相比，本发明制 备的灵芝提取物的主要成分包括多糖类物质、氨基酸类物质、三萜类物质及 少量生物碱，可通过改善神经功能、认知能力，抑制脑内AchE水平、增加抗 氧化酶SOD、CAT与GSH-Px水平从而达到预防和/或延缓和/或治疗血管性 痴呆的目的。
附图说明
图1为本发明实施例1中各2因素交互作用对灵芝多糖提取率影响的响 应面及等高线图；
图2为本发明实施例3中大鼠脑海马H-E染色(×400)图。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完 整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部 的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性 劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
本发明提供了一种灵芝提取物的制备方法，包括：将灵芝、酶与水超声 混合在加热条件下进行酶解，得到灵芝提取物。
其中，本发明对所有原料的来源并没有特殊的限制，为市售即可。
在本发明中，所述灵芝为本领域技术人员熟知的灵芝即可，并无特殊的 限制，在本发明提供的实施例中具体以来源于吉林省长白山地区的平盖灵芝 为例。
将灵芝、酶与水超声混合；在本发明中，所述灵芝优选经烘干粉碎后在 与酶及水超声混合；所述粉碎后优选过30～60目筛，更优选过40～50目筛； 所述酶优选为纤维素酶、蛋白酶与果胶酶中的一种或多种；纤维素酶、蛋白 酶与果胶酶均具有良好的提取效果，纤维素酶、果胶酶，以及各种蛋白酶可 以选择性地破坏植物细胞壁，有利于多糖、生物碱、皂苷、黄酮、萜类、挥 发油、蛋白质及有机酸等多种生物活性成分的提取。所述灵芝与酶的质量比 优选为2：(0.005～0.035)，更优选为酶的质量比为2：(0.01～0.02)，再优 选为2：(0.013～0.018)；在本发明提供的实施例中，所述灵芝与酶的质量比 具体为2：0.005、2：0.01、2：0.015、2：0.02或2：0.035；混合体系中的料 液比优选为1:10～50g/mL，更优选为1:20～40g/mL，再优选为1:30g/mL；所 述超声混合的功率优选为200～300W，更优选为200～250W，再优选为220W； 所述超声混合的时间优选为4～15min，更优选为4～10min，再优选为4～8min， 最优选为4～6min；在本发明提供的实施例中，所述超声混合的时间具体为4min、6min、8min、10min或15min。
然后再加热条件下进行酶解，得到灵芝提取物；所述酶解的温度优选为 35℃～75℃，更优选为35℃～65℃，再优选为35℃～55℃，再优选为35℃～45℃， 最优选为39℃～45℃；在本发明提供的实施例中，所述酶解的温度具体为35℃、 45℃、55℃、65℃或75℃；所述酶解的时间优选为35～75min，更优选为45～65 min，再优选为48～65min；在本发明提供的实施例中，所述酶解的时间具体 为35min、45min、55min、65min或75min。
本发明制备的灵芝提取物的主要成分包括多糖类物质、氨基酸类物质、 三萜类物质及少量生物碱，可通过改善神经功能、认知能力，抑制脑内AchE 水平、增加抗氧化酶SOD、CAT与GSH-Px水平从而达到预防和/或延缓和/ 或治疗血管性痴呆的目的。
本发明还提供了一种上述制备方法所制备的灵芝提取物。
本发明还提供了一种上述制备方法所制备的灵芝提取物在制备预防和/或 延缓和/或治疗血管性痴呆的药物中的应用。
本发明制备的灵芝提取物通过抑制脑内AchE水平、增加抗氧化酶SOD、 CAT与GSH-Px水平来预防和/或延缓和/或治疗血管性痴呆。
本发明还提供了一种治疗血管性痴呆的药物，包括上述灵芝提取物。
为了进一步说明本发明，以下结合实施例对本发明提供的一种灵芝提取 物的制备方法及应用进行详细描述。
以下实施例中所用的试剂均为市售。
实施例1：灵芝多糖的提取
1.1实验方法
将灵芝(来源于吉林省长白山地区的平盖灵芝)、纤维素酶(购自上海 蓝季科技发展有限公司)与水(料液比1:30g/mL)超声混合在加热条件下进 行酶解，得到灵芝提取物。
1.1.1标准曲线的制备
取葡萄糖溶液0.1，0.2，0.4，0.6，0.8，1.0ml，分别置于10ml容量瓶 中，补加蒸馏水至2ml，摇匀，加入5％苯酚溶液1ml，摇匀，迅速加入5ml 浓硫酸，迅速摇匀，反应10min，于40℃水浴放置15min后，自然冷却至室 温，在490nm波长处测定吸光度，以葡萄糖溶液浓度为横坐标、吸光度为纵 坐标，绘制标准曲线，得到回归方程：Y＝15.637X-0.0358，R2＝0.9997。实验 表明，葡萄糖质量浓度在5～50μg/ml范围内，与吸光度呈良好的线性关系。
1.1.2样品的测定
将提取液稀释25倍后，取2ml稀释液，加1ml苯酚、5ml浓硫酸，迅 速摇匀，反应10min，40℃恒温水浴15min，自然冷却至室温，在490nm处 测吸光度，计算出质量浓度，最后计算提取率，提取率公式如下：
Figure RE-GDA0003772860500000041
1.2.3单因素实验
考察纤维素酶用量、超声提取时间、酶解温度、酶解时间4个因素对灵 芝多糖提取率的影响，按标准曲线方法计算多糖含量，选择最佳单因素提取 条件。灵芝，烘干粉碎过40目筛备用，预处理为灵芝粉。每次准确称取预处 理的灵芝粉2.0g，分别对纤维素酶用量(0.005，0.010，0.015，0.020和 0.035g)，酶解时间(35，45，55，65和75min)，超声时间(4，6，8，10 和15min)，酶解温度(35，45，55，65和75℃)4个因素进行实验。单因 素实验的工艺条件为：纤维素酶用量0.015g，超声提取时间6min，酶解温 度45℃，酶解时间55min。
1.2.4响应面实验设计
根据Box-benhnken实验设计原理，在单因素实验基础上，确定响应面设 计中每个因素的适宜范围。以酶解温度(X1)、酶解时间(X2)、酶用量(X3)、 超声时间(X4)为考察对象，以多糖提取率为参考值Y，采用Design-Expert 8.0.6进行响应面实验设计，实验因素及水平见表1。
表1灵芝多糖提取工艺的因素与水平
Figure BDA0003507217910000051
1.3结果与分析
1.3.1单因素实验
酶解温度为45℃时，多糖的提取率最大，此后酶解温度升高，提取率减 少，可能由于温度过高，纤维素酶的活性被破坏而失活，影响了多糖类物质 的浸出；酶解时间为65min时，提取率最大，超过65min，提取率下降，可 能由于酶解时间太长会引起糖结构改变，多糖含量降低；多糖提取率随着酶 用量的增大而增加，当酶用量为0.018g时曲线有最高点，故纤维素酶用量选 择0.018g为宜。多糖提取率随着超声时间的增长呈现先增大后减小，超声时 间6min时多糖提取率最大，可能是由于超声提取时间小于6min时，多糖类 物质还未充分溶出；超声提取时间大于6min时，引起糖结构变化甚至是碳 环裂解或一些其他的成分溶出而使多糖类化合物提取率降低。
1.3.2响应面实验
1.3.2.1响应面设计提取多糖的提取率、模型的拟合及效果评价
采用Box-benhnken响应面设计提取灵芝多糖，提取率结果见表2，通过 Design-Expert 8.0.6软件对实验灵芝多糖提取进行分析，模型项P<0.0001， 二次响应面回归模型有高度显著性，回归方程拟合程度良好，模型可靠。一 次项、二次项、均显著，P<0.0001，表明各具体实验因素(X1，X2，X3和X4) 对响应值(Y)的影响不是简单的线性关系。失拟项，P>0.05不显著，表明该 回归模型合适，实验误差小，可用该回归模型代替实验真实点对实验结果进 行分析，决定系数R2＝85.31％，表明方程拟合较好，见表3。
表2灵芝多糖提取工艺优化响应面实验设计及结果
Figure BDA0003507217910000061
Figure BDA0003507217910000071
表3灵芝多糖提取工艺优化数学模型方差分析
Figure BDA0003507217910000072
注：P<0.05，差异显著；P<0.001，差异极显著
1.3.2.2二次响应回归模型的参数估计
由参数估计获得多元二次回归方程:
Y＝12.27+0.047X1-0.12X2-0.097X3-0.034X4+0.11X1X2+0.60X1X3+0.46X1X4 +0.84X2X3+0.54X2X4+1.99X3X4-0.025X1 2+0.37X2 2-1.65X3 2-0.34X4 2，见表3。
1.3.2.3响应面及优化分析
为了考察交互项对灵芝多糖提取效果的影响，在固定2个因素的情况 下，考察另2个因素对多糖的提取效果的影响，得到响应曲面。见图1，图1 为各2因素交互作用对灵芝多糖提取率影响的响应面及等高线图，其中A.酶 解时间和酶解温度；B.酶解温度和酶用量；C.酶解温度和超声时间；D.酶解时 间和酶用量；E.酶解时间和超声时间；F.酶用量和超声时间(固定水平：X1酶解温度45℃；X2酶解时间55min；X3酶用量0.015g；X4超声时间6min)。由图1可知，交互项对灵芝多糖提取效果的影响不显著，与方差分析结果一 致。
1.3.2.4典型分析
综合回归模型的数学分析可知，得到最大响应值Y时，X1＝-0.56，X2＝-0.62，X3＝-0.33，X4＝-0.67，在所选条件下，灵芝多糖超声加酶提取的最 优工艺为：酶解温度为39.4℃，酶解时间为48.8min，酶用量为0.01335g， 超声时间为4.66min。在此条件下，灵芝总多糖的最大提取率预测值为 13.334％。
1.3.3反应条件的优化与模型验证
根据Box-benhnken响应面设计所得的最佳工艺条件，选取酶解温度为 39.4℃、酶解时间为48.8min、酶用量0.01335g、超声时间4.66min，进行3 次平行实验，实际测得的3次提取率分别为13.41％，13.32％和13.28％平均提 取率为28.71％，实验值与理论值的相对误差RSD％为1.000％，证明应用 Box-benhnken响应面设计优化灵芝多糖的提取工艺是可行的。
1.4结论
利用Design-Expert 8.0.6软件进行Box-benhnken设计，以超声波辅助纤 维素酶的提取方法，研究酶解温度、酶解时间、酶用量、超声时间对灵芝多 糖提取率的影响，采用超声波辅助纤维素酶的提取方法，一方面通过酶水解 细胞壁，加速多糖的溶出，另一方面通过超声振动，改变细胞壁的通透性， 加速多糖的扩散释放，提高多糖的提取率。建立灵芝多糖提取工艺条件的二 次多项式数学模型，分析了各因素对响应值的影响。结果表明，模型拟合程 度高，实验误差小，最佳的提取工艺条件为：酶解温度为39.4℃，酶解时间 为48.8min，酶用量0.01335g，超声时间4.66min，此工艺条件下多糖的提 取率为13.334％。
实施例2灵芝多糖对VaD大鼠神经功能和认知能力的改善作用
2.1实验方法
2.1.1大鼠VaD模型的建立及分组给药
采用双侧颈总动脉夹闭再灌注联合高血脂方法建立VaD模型。
Wistar大鼠30只，按体重随机分为假手术组、VaD组和VaD+灵芝多糖 组。手术前12h禁食，4h禁水。腹腔注射10％水合氯醛麻醉，仰卧位固定在 手术台上，除去颈部毛，消毒后于正中切口，钝性分离两侧颈总动脉，穿 线。VaD组和VaD+灵芝多糖组通过无创动脉夹夹住双侧颈总动脉，阻断颈 总动脉血流10min，松开动脉夹使血流灌注10min，再阻断颈总动脉血流10 min，血流再灌注后撤线，间断缝合伤口。假手术组只穿线30min。手术结 束待大鼠清醒后，放回笼中，VaD组和VaD+灵芝多糖(纤维素酶用量0.015 g，超声提取时间6min，酶解温度45℃，酶解时间55min)组采用高脂饲料 喂养。高脂饲料配比：2％胆固醇，0.2％丙硫氧嘧啶，0.3％胆酸钠，7.5％猪 油，90％饲料粉。VaD+灵芝多糖组灌胃给予纤维素酶用量0.015g，超声提 取时间6min，酶解温度45℃，酶解时间55min的灵芝多糖水溶液，400 mg/kg。假手术组和VaD组给予水。三组Wistar大鼠分别饲养30天。
2.1.2神经功能评分
造模后，VaD模型制备后，采用Longa评分法对大鼠的神经功能进行评 价。分数越高，表明大鼠的神经功能缺损越严重。
2.1.3跳台实验
末次给药后，用大鼠跳台实验评价VaD大鼠的认知能力。实验时首先将 大鼠放在SDT-8跳台实验视频分析系统铜栅上适应5min，然后通以36V电 流，以大鼠双足同时接触铜栅为触电，视为错误反应，记录大鼠的初次错误 次数作为学习成绩，训练5min。24h后，重新再次进行实验，将大鼠置于塑 料跳台上适应5min，然后通以36V电流，记录第1次跳下平台的潜伏期和5 min内的跳下平台的错误次数，若大鼠停留在平台上超过5min，其潜伏期以300s计。
2.2统计方法
采用SPSS 10.0统计软件进行数据处理。实验结果以均值±标准差表示，Student’s t-test进行组间比较.差异为P＜0.05具有统计学意义。
2.3实验结果
2.3.1神经功能评分
神经功能评分结果显示，假手术组评分都为0分。与假手术组比较， VaD组的大鼠神经功能评分显著上升(P<0.01)，表明VaD组大鼠的神经 受到损伤。与VaD组比较，VaD+灵芝多糖组神经功能评分显著下降 (P<0.05)，说明灵芝多糖能够保护VaD大鼠神经功能。数据见表4。
表4灵芝多糖对VaD大鼠神经功能的评价
Figure BDA0003507217910000101
注：与假手术组比较，##P<0.01，与VaD组比较，*P<0.05。
2.3.2跳台实验结果
与假手术组比较，VaD组大鼠初次错误次数和24h错误次数均明显增 加，错误潜伏期缩短(P<0.01或P<0.05)。与VaD组比较，VaD+灵芝多 糖组大鼠初次错误次数和24h错误次数明显减少，错误潜伏期明显延长(P< 0.05)；表明灵芝多糖可以改善VaD大鼠的认知能力。数据见表5。
表5灵芝多糖对VaD大鼠认知能力的影响
Figure BDA0003507217910000102
注：与假手术组比较，#P<0.05，##P<0.01；与VaD组比较，*P<0.05.
2.4结论
灵芝多糖能够保护VaD大鼠神经功能，改善VaD大鼠的认知能力。
实施例3灵芝多糖对VaD大鼠病理损伤的保护作用
3.1实验方法
实验造模、分组及给药方法同2.1.1。
处死大鼠，取脑，然后称重脑湿重和脑干重，计算脑含水量。制备脑组 匀浆，按试剂盒方法，测定AchE酶活力。将脑组织置于4％多聚甲醛中固 定，然后进行石蜡包埋、切片(4μm)，行常规H-E染色，在光学显微镜下 观察脑海马的病变。
3.2实验结果
3.2.1脑含水量测定
如表6所示，与假手术组比较，VaD组的脑含水量均有明显升高(P< 0.01)，与VaD组比较，VaD+灵芝多糖组含水量降低(P<0.05)，说明灵 芝对VaD引起的脑水肿有一定的缓解作用。
表6灵芝多糖对VaD大鼠脑含水量的影响
Figure BDA0003507217910000111
注：与假手术组比较，##P<0.01；与VaD组比较，*P<0.05.
3.2.2对脑内AchE水平的影响
与假手术组比较，VaD组大鼠的脑内AchE水平明显增加(P<0.01)； 与VaD组比较，VaD+灵芝多糖组脑内AchE水平明显降低(P<0.05)，表 明灵芝能抑制脑内AchE水平，见表7。
表7灵芝多糖对AD大鼠脑内乙酰胆碱酯酶的影响
Figure BDA0003507217910000112
注：与假手术组比较，##P<0.01；与VaD组比较，*P<0.05.
3.2.3 H-E染色
假手术组脑海马区未见异常。VaD组海马区神经元发生变性，细胞核质 疏松，神经元排列松散。VaD+灵芝多糖组神经元排列较VaD组紧密，神经 元变性数量少，表明灵芝多糖能改善VaD大鼠病理损伤。结果见如图2，图2 为大鼠脑海马H-E染色(×400)图。
3.3结论
灵芝多糖可以降低VaD大鼠脑含水量，抑制VaD大鼠脑内AchE水平， 对VaD大鼠组织病理学损伤具有保护作用。
实施例4灵芝多糖对VaD大鼠的抗氧化能力
4.1实验方法
实验造模、分组及给药方法同2.1.1。
实验结束后，处死大鼠，腹主动脉取血，分离血清，取脑。利用试剂盒 方法，分别测定脑组织和血液中的SOD、CAT、GSH-Px和MDA水平。
4.2实验结果
与假手术组比较，VaD组的血、脑中MDA水平明显增加(P<0.01或P <0.05)，而SOD，CAT和GSH-Px水平均有所降低(P<0.01或P<0.05)； 与VaD组比较，VaD+灵芝多糖组的血、脑中MDA水平明显降低(P<0.01 或P<0.05)，而SOD，CAT和GSH-Px水平均有所增加(P<0.01或P<0.05)，表明灵芝多糖能通过增加抗氧化酶SOD，CAT和GSH-Px水平，清 除VaD大鼠的自由基，改善VaD大鼠的氧化应激状态，见表8。
表8各组大鼠抗氧化酶和自由基水平
Figure BDA0003507217910000121
注：与假手术组比较，##P<0.01，#P<0.05；与VaD组比较，**P <0.01，*P<0.05.
4.3结论
表明灵芝多糖能通过增加抗氧化酶SOD，CAT和GSH-Px水平，清除 VaD大鼠的自由基，改善VaD大鼠的氧化应激状态。

Claims (10)

1.一种灵芝提取物的制备方法，其特征在于，包括：
将灵芝、酶与水超声混合在加热条件下进行酶解，得到灵芝提取物。
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述酶选自纤维素酶、蛋白酶与果胶酶中的一种或多种；所述灵芝与酶的质量比为2：(0.005～0.035)。
3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述酶为纤维素酶；所述灵芝与酶的质量比为2：(0.013～0.018)。
4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述超声混合的功率为200～300W；所述超声混合的时间为4～15min。
5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述超声混合的功率为220W；所述超声混合的时间为4～6min。
6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述酶解的温度为35℃～75℃；酶解的时间为35～75min。
7.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述酶解的温度为39℃～45℃；酶解的时间为48～65min。
8.权利要求1～7任意一项制备方法所制备的灵芝提取物。
9.权利要求1～7任意一项制备方法所制备的灵芝提取物在制备预防和/或延缓和/或治疗血管性痴呆的药物中的应用。
10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述灵芝提取物通过抑制脑内AchE水平、增加抗氧化酶SOD、CAT与GSH-Px水平来预防和/或延缓和/或治疗血管性痴呆。
CN202210143002.0A 2022-02-16 2022-02-16 一种灵芝提取物的制备方法及应用 Pending CN115040552A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202210143002.0A CN115040552A (zh) 2022-02-16 2022-02-16 一种灵芝提取物的制备方法及应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202210143002.0A CN115040552A (zh) 2022-02-16 2022-02-16 一种灵芝提取物的制备方法及应用

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN115040552A true CN115040552A (zh) 2022-09-13

Family

ID=83156911

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202210143002.0A Pending CN115040552A (zh) 2022-02-16 2022-02-16 一种灵芝提取物的制备方法及应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN115040552A (zh)

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1788722A (zh) * 2001-05-23 2006-06-21 钱吉子 预防和治疗痴呆的组合物
CN104524188A (zh) * 2014-12-25 2015-04-22 平阴县中医医院 一种治疗血管性痴呆的药物及其制备方法
CN105995966A (zh) * 2016-06-20 2016-10-12 张勇 一种酶解灵芝粉的制备方法

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1788722A (zh) * 2001-05-23 2006-06-21 钱吉子 预防和治疗痴呆的组合物
CN104524188A (zh) * 2014-12-25 2015-04-22 平阴县中医医院 一种治疗血管性痴呆的药物及其制备方法
CN105995966A (zh) * 2016-06-20 2016-10-12 张勇 一种酶解灵芝粉的制备方法

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
于淑娟等: "超声波酶法提取灵芝多糖的机理研究", 《华南理工大学学报（自然科学版）》, vol. 26, no. 2, pages 123 - 127 *

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Alfei et al. Ellagic acid a multi-target bioactive compound for drug discovery in CNS? A narrative review
CN102525853B (zh) 具有祛斑功能的复方天然植物提取物及其制备方法与应用
RU2662953C1 (ru) Способ получения экстрактов из рода panax, включая дикий женьшень или женьшень, либо камбиальных меристематических клеток, происходящих из рода panax, или их экстрактов, содержащих редкие гинсенозиды в большом количестве
US20200368306A1 (en) Method for regulating expression of pdgfc, fgf2, igf1r, ptgis, nos3, edn1, plat, proc, vwf, f3, serpine1, il-8, icam1, vcam1, and casp8 genes
CN105920476B (zh) 防治阿尔茨海默病中药组合物及其制备方法
KR20050117793A (ko) 집중력 및 기억력 저하의 예방 또는 개선을 위한 인삼조성물
CN115040552A (zh) 一种灵芝提取物的制备方法及应用
CN1879697A (zh) 治疗老年痴呆症的药物组合物
US9901608B2 (en) Composition and method for enhancing alcohol metabolism
CN110833187A (zh) 一种酵素原液及其制备方法
CN113072650B (zh) 一种野菠萝多糖的制备方法
Yang et al. Anti‐obesity effect of Auricularia heimuer fruiting body alcohol extraction on obese mice and crucial metabolite pathway analysis by liquid chromatography‐tandem mass spectrometry
KR100697111B1 (ko) 숙취해소용 차 및 그 제조방법
CN110624091B (zh) 具有降脂溶栓效果的银杏叶复合多酚胶囊及其制备方法
CH651063A5 (de) Verfahren zur gewinnung anaboler, atmungsfoerdernder, niedermolekularer wirkstoffe fuer prophylaktische, therapeutische, zell- und gewebekulturtechnische zwecke.
KR102107304B1 (ko) 천연 리포좀, 그 제조방법 및 이를 포함하는 식품 조성물
CN109266477A (zh) 一种青钱柳红酒及其制备方法和应用
Demir et al. Effects of excess vitamin B6 intake on cerebral cortex neurons in rat: an ultrastructural study
CN109485744A (zh) 一种泥鳅多糖提取方法及其应用
WO2023115294A1 (zh) 脑心通制剂在制备治疗非酒精性脂肪肝药物中的应用
Sivaraman et al. Brain free radical quenching capacity of Ipomoea aquatica by rejuvenating vital anti-oxidant enzymes on beta-amyloid induced stress in swiss albino mice
KR102614780B1 (ko) 인삼열매 추출물, 건조효모 및 밀크씨슬 추출물을 포함하는 숙취해소 및 간기능개선용 조성물
KR20130017640A (ko) 생더덕과 찐더덕의 추출물 및 분획물을 포함하는 치매 예방 또는 치료 및 인지능 개선용 약학적 조성물 또는 기능성 식품 조성물
CN115645445B (zh) 一种具有防治阿尔茨海默症的新型熟三七的炮制工艺及其相关产品
KR101278706B1 (ko) 송악 추출물을 포함하는 당뇨합병증의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 및 건강기능식품

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination