CN115039767A - 一种工序整合分体式生物样本冻融袋及使用方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种工序整合分体式生物样本冻融袋及使用方法,包括混匀袋与冻融袋,所述的混匀袋上设置有输入管路与输出管路,所述的混匀袋通过所述的输出管路与所述的冻融袋相连,所述的输入管路的端部连接有细胞输入管路与保护液输入管路,所述的细胞输入管路的端部通过管路连接有若干的接头。本发明所述的一种工序整合分体式生物样本冻融袋避免冷冻保护液对细胞产生毒性,大大增加细胞活率,在多腔室冻存袋中直接使冷冻保护液和细胞混合会导致局部DMSO浓度过高,DMSO浓度过高会毒死细胞,而混匀袋的加入避免了这种结果的出现,提高了细胞的活性。
Description
技术领域
本发明属于生物医药领域,尤其是涉及一种工序整合分体式生物样本冻融袋及使用方法。
背景技术
随着生物学技术的发展,细胞治疗正在全世界范围内快速发展和日益被人们所接受,干细胞和免疫细胞研究以及临床应用又是细胞治疗中的主体。近年来干细胞和免疫细胞移植已逐步应用于根治恶性血液病、再生障碍性贫血、中晚期恶性实体瘤、心脏病、神经系统损伤、组织器官修复、糖尿病、血管疾病等的治疗。干细胞还有很强的保健和预防疾病的功能,可以增强人体免疫力、修复病变或衰老的组织、延长人的寿命等。
干细胞来源广泛,主要存在于脐带血、骨髓、外周血中,免疫细胞从外周血中即可提取。2001年国家卫生部批准建立脐带血造血干细胞库。而细胞的冻存、复苏和防止操作过程中的污染是实现细胞治疗的关键。细胞的体外培养也已经被广泛应用到各种生物学研究领域,在体外细胞培养工作中,怎样避免反复冻融的情况下,实现同一份脐血或细胞可以多次使用,也成为了重要的研究课题。
目前细胞治疗的国家机构多采用单室冻存或从单室再转移到多室冻存,如果采用单室冻存,一份脐血或细胞只能使用一次,如果反复冻融会降低细胞活性还增加了污染的风险,进而大大降低了脐血或细胞所能带来的效益。如果只采用一个多室冻存袋,会导致在冷冻保护液和细胞混合过程中第一个腔室的DMSO浓度过高毒死细胞。如果采用从单室再转移到多室冻存,不仅浪费一个单室冻存袋增加生产成本,还增加了污染的概率,还会增加细胞进入超低温冻存的时间,会影响细胞活性。申请号为CN 202110952282.5的发明专利申请了一种脐带血造血干细胞多室冻存方法。其冻存方法包括如下步骤:一次转移、抽取、预冷、混匀留样、排气、二次转移和留样装存:步骤A.一次转移:将离心得到的脐带血造血干细胞转移到混匀袋结构中,混匀后留样并称重;步骤B.抽取:用注射器按信息终端数字抽取冷冻保护剂,冷冻保护剂是由右旋糖酐和二甲基亚砜1:1配制;然后与混匀袋结构相连;步骤C.预冷:把混匀袋结构与多室冷冻袋通过接口相连,并将其放入4℃预冷装置,整个流程一气呵成,采用多室冻存技术结合脐血造血干细胞扩增技术,使脐血多次利用成为可能。该专利申请的混匀袋与冻存袋是分离的,在冻存袋和混匀袋连接过程中可能会出现污染,并且向混匀袋内输入细胞和从混匀袋内输出细胞用的同一根管路,又大大增加了污染的概率。
发明内容
有鉴于此,本发明旨在克服现有技术中的缺陷,提出一种工序整合分体式生物样本冻融袋及使用方法。
为达到上述目的,本发明的技术方案是这样实现的:
一种工序整合分体式生物样本冻融袋,包括混匀袋与冻融袋,所述的混匀袋上设置有输入管路与输出管路,所述的混匀袋通过所述的输出管路与所述的冻融袋相连,所述的输入管路的端部连接有细胞输入管路与保护液输入管路,所述的细胞输入管路的端部通过管路连接有若干的接头。混匀袋的加入为细胞冻存做了一个预处理,防止直接在分体式冻融袋内混合导致局部DMSO浓度过高毒死细胞,增加了细胞活性。混合袋与分体式冻融袋一体化,不需要通过接口连接混匀袋和冻存袋,大大降低了污染风险。
进一步,所述的输入管路上设置有开关。
进一步,所述的工序整合分体式生物样本冻融袋还包括注射器。
进一步,所述的输出管路通过接口连接有负压管路,所述的负压管路的端部与所述的注射器相连;所述的负压管路上设置有开关;所述的接口为Y型接口;所述的输出管路上设置有2个开关,所述的开关分别位于接口与混匀袋之间、接口与冻融袋之间。开关和注射器的配合便于排净分体式冻融袋内的气体,顺畅的导入细胞混合液。
进一步,所述的冻融袋的一端设置有负压管路,所述的冻融袋通过所述的负压管路与所述的注射器相连;所述的负压管路上设置有开关;所述的输出管路上设置开关。
进一步,所述的输入管路通过接口与所述的细胞输入管路、保护液输入管路相连;所述的接口为Y型接口。
进一步,所述的保护液输入管路的端部设置有保护液注射口。
进一步,所述的细胞输入管路与接头之间均设置有流量调节器;所述的接头为鲁尔接头。
进一步,所述的冻融袋为分体式冻融袋;所述的分体式冻融袋的各腔室之间的底部相连通;所述的腔室上均设置有穿刺端口。每个腔室之间均进行热合密封,每个腔室热合后成为一个独立密封且无菌的空间,每个腔室均配备一个穿刺端,可进行相互独立的复苏、回输,实现了一份脐血可以多次使用,提高了细胞使用效益。
所述的分体式冻融袋的腔室的数量为2个以上。优选的,所述的分体式冻融袋的腔室的数量为3-10个。
所述的工序整合分体式生物样本冻融袋设置有留样管,方便留样质检,分体式冻存袋的输入管在热合后可以作为留样质检管。
所述的工序整合分体式生物样本冻融袋降低生产成本,冻融袋的各腔室均黏贴超低温冷冻使用标签,降低成本,节省存储空间。
所述的工序整合分体式生物样本冻融袋的使用方法,包括如下步骤:
(1)关闭输出管路的开关,打开输入管路的开关与对应的流量调节器,将细胞悬液通过细胞输入管路转移至混匀袋内,将冷冻保护液通过保护液注射口注入至混匀袋内,关闭输入管路的开关;
(2)打开负压管路的开关,通过注射器将冻融袋的内部抽成负压状态,然后关闭负压管路的开关;
(3)打开输出管路的开关,使混匀袋中细胞与冷冻保护液的混合液通过输出管路流入冻融袋中即成。
最后热合密封与冻融袋相接的输出管道与冻融袋的连接处,热合密封与冻融袋相接的输出管道与Y型接口的连接处,并取下开关,热合密封冻融袋的每个腔室底部的连接处。热合密封后在管道上留有热合密封点。
相对于现有技术,本发明具有以下优势:
本发明所述的一种工序整合分体式生物样本冻融袋避免冷冻保护液对细胞产生毒性,大大增加细胞活率,在多腔室冻存袋中直接使冷冻保护液和细胞混合会导致局部DMSO浓度过高,DMSO浓度过高会毒死细胞,而混匀袋的加入避免了这种结果的出现,提高了细胞的活性。
本发明所述的一种工序整合分体式生物样本冻融袋避免污染,混匀袋与冻存袋直接相连,避免了混匀袋与多腔室冻存袋相连接后转移的过程,大大降低了污染的风险,也缩短了转移时间。
附图说明
构成本发明的一部分的附图用来提供对本发明的进一步理解,本发明的示意性实施例及其说明用于解释本发明,并不构成对本发明的不当限定。在附图中:
图1为本发明实施例1所述的工序整合分体式生物样本冻融袋的示意图;
图2为本发明实施例1所述的工序整合分体式生物样本冻融袋的使用方法中加液混合的示意图;
图3为本发明实施例1所述的工序整合分体式生物样本冻融袋的使用方法中抽真空的示意图;
图4为本发明实施例1所述的工序整合分体式生物样本冻融袋的使用方法中转液的示意图;
图5为本发明实施例1所述的工序整合分体式生物样本冻融袋的使用方法中密封保存的示意图;
图6为本发明实施例2所述的工序整合分体式生物样本冻融袋的示意图;
图7为本发明实施例2所述的工序整合分体式生物样本冻融袋的使用方法中加液混合的示意图;
图8为本发明实施例2所述的工序整合分体式生物样本冻融袋的使用方法中抽真空的示意图;
图9为本发明实施例2所述的工序整合分体式生物样本冻融袋的使用方法中转液的示意图;
图10为本发明实施例2所述的工序整合分体式生物样本冻融袋的使用方法密封保存的示意图。
附图标记说明:
1、混匀袋;2、冻融袋;3、输入管路;4、输出管路;5、注射器;6、接口;7、开关;8、接头;9、流量调节器;10、保护液注射口;11、摇床;12、热合密封点;21、穿刺端口;31、细胞输入管路;41、负压管路。
具体实施方式
需要说明的是,在不冲突的情况下,本发明中的实施例及实施例中的特征可以相互组合。
在本发明的描述中,需要理解的是,术语“中心”、“纵向”、“横向”、“上”、“下”、“前”、“后”、“左”、“右”、“竖直”、“水平”、“顶”、“底”、“内”、“外”等指示的方位或位置关系为基于附图所示的方位或位置关系,仅是为了便于描述本发明和简化描述,而不是指示或暗示所指的装置或元件必须具有特定的方位、以特定的方位构造和操作,因此不能理解为对本发明的限制。此外,术语“第一”、“第二”等仅用于描述目的,而不能理解为指示或暗示相对重要性或者隐含指明所指示的技术特征的数量。由此,限定有“第一”、“第二”等的特征可以明示或者隐含地包括一个或者更多个该特征。在本发明的描述中,除非另有说明,“多个”的含义是两个或两个以上。
在本发明的描述中,需要说明的是,除非另有明确的规定和限定,术语“安装”、“相连”、“连接”应做广义理解,例如,可以是固定连接,也可以是可拆卸连接,或一体地连接;可以是机械连接,也可以是电连接;可以是直接相连,也可以通过中间媒介间接相连,可以是两个元件内部的连通。对于本领域的普通技术人员而言,可以通过具体情况理解上述术语在本发明中的具体含义。
下面将参考附图并结合实施例来详细说明本发明。
实施例1
一种工序整合分体式生物样本冻融袋,包括混匀袋与冻融袋,所述的混匀袋上设置有输入管路与输出管路,所述的混匀袋通过所述的输出管路与所述的冻融袋相连,所述的输入管路的端部连接有细胞输入管路与保护液输入管路,所述的细胞输入管路的端部通过管路连接有3个鲁尔接头。所述的输入管路上设置有开关。
所述的工序整合分体式生物样本冻融袋还包括注射器。所述的输出管路通过Y型接口连接有负压管路,所述的负压管路的端部与所述的注射器相连;所述的负压管路上设置有开关;所述的输出管路上设置有2个开关,所述的开关分别位于接口与混匀袋之间、接口与冻融袋之间。
所述的输入管路通过Y型接口与所述的细胞输入管路、保护液输入管路相连;所述的保护液输入管路的端部设置有保护液注射口。所述的细胞输入管路与鲁尔接头之间均设置有流量调节器。
所述的冻融袋为分体式冻融袋;所述的分体式冻融袋的各腔室之间的底部相连通;所述的腔室上均设置有穿刺端口。所述的分体式冻融袋的腔室的数量为5个。
所述的工序整合分体式生物样本冻融袋的使用方法,包括如下步骤:
(1)关闭输出管路的开关,打开输入管路的开关与对应的流量调节器,将预处理得到的细胞悬液通过细胞输入管路转移至混匀袋内,将混匀袋放到4℃小型摇床上预冷,将预冷到4℃的冷冻保护液通过保护液注射口注入至混匀袋内,关闭输入管路的开关;
(2)打开负压管路的开关、接口与冻融袋之间的开关,通过注射器将冻融袋的内部抽成负压状态,然后关闭负压管路的开关;
(3)打开接口与混匀袋之间的开关,使混匀袋中细胞与冷冻保护液的混合液通过输出管路流入冻融袋中,通过注射器与开关的配合调节,使冻融袋充满液体,不含空气和气泡,并且使与冻融袋相接的输出管道充盈;
(4)热合密封与冻融袋相接的输出管道与冻融袋的连接处,热合密封与冻融袋相接的输出管道与Y型接口的连接处,并取下开关,热合密封冻融袋的每个腔室底部的连接处;
(5)将分体式冻融袋放在配适的铝盒内经过程序降温后放入液氮中冻存。
实施例2
一种工序整合分体式生物样本冻融袋,包括混匀袋与冻融袋,所述的混匀袋上设置有输入管路与输出管路,所述的混匀袋通过所述的输出管路与所述的冻融袋相连,所述的输入管路的端部连接有细胞输入管路与保护液输入管路,所述的细胞输入管路的端部通过管路连接有3个鲁尔接头。所述的输入管路上设置有开关。
所述的工序整合分体式生物样本冻融袋还包括注射器。所述的冻融袋的一端设置有负压管路,所述的冻融袋通过所述的负压管路与所述的注射器相连;所述的负压管路上设置有开关;所述的输出管路上设置开关。注射器和开关转移至分体式冻融袋的右下部,使得分体式冻融袋排气更方便,细胞与冷冻保护液的混合液更容易从混匀袋转移至分体式冻融袋。
所述的输入管路通过Y型接口与所述的细胞输入管路、保护液输入管路相连;所述的保护液输入管路的端部设置有保护液注射口。所述的细胞输入管路与鲁尔接头之间均设置有流量调节器。
所述的冻融袋为分体式冻融袋;所述的分体式冻融袋的各腔室之间的底部相连通;所述的腔室上均设置有穿刺端口。所述的分体式冻融袋的腔室的数量为5个。
所述的工序整合分体式生物样本冻融袋的使用方法,包括如下步骤:
(1)关闭输出管路的开关,打开输入管路的开关与对应的流量调节器,将预处理得到的细胞悬液通过细胞输入管路转移至混匀袋内,将混匀袋放到4℃小型摇床上预冷,将预冷到4℃的冷冻保护液通过保护液注射口注入至混匀袋内,关闭输入管路的开关;
(2)打开负压管路的开关,通过注射器将冻融袋的内部抽成负压状态,然后关闭负压管路的开关;
(3)打开输出管路的开关,使混匀袋中细胞与冷冻保护液的混合液通过输出管路流入冻融袋中,通过注射器与开关的配合调节,使冻融袋充满液体,不含空气和气泡,并且使与冻融袋相接的输出管道充盈;
(4)热合密封与冻融袋相接的输出管道与冻融袋的连接处,热合密封负压管路,并取下开关和注射器,热合密封冻融袋的每个腔室底部的连接处;
(5)将分体式冻融袋放在配适的铝盒内经过程序降温后放入液氮中冻存。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已,并不用以限制本发明,凡在本发明的精神和原则之内,所作的任何修改、等同替换、改进等,均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (10)
1.一种工序整合分体式生物样本冻融袋,其特征在于:包括混匀袋与冻融袋,所述的混匀袋上设置有输入管路与输出管路,所述的混匀袋通过所述的输出管路与所述的冻融袋相连,所述的输入管路的端部连接有细胞输入管路与保护液输入管路,所述的细胞输入管路的端部通过管路连接有若干的接头。
2.根据权利要求1所述的工序整合分体式生物样本冻融袋,其特征在于:所述的输入管路上设置有开关。
3.根据权利要求2所述的工序整合分体式生物样本冻融袋,其特征在于:所述的工序整合分体式生物样本冻融袋还包括注射器。
4.根据权利要求3所述的工序整合分体式生物样本冻融袋,其特征在于:所述的输出管路通过接口连接有负压管路,所述的负压管路的端部与所述的注射器相连;所述的负压管路上设置有开关;所述的接口为Y型接口;所述的输出管路上设置有2个开关,所述的开关分别位于接口与混匀袋之间、接口与冻融袋之间。
5.根据权利要求3所述的工序整合分体式生物样本冻融袋,其特征在于:所述的冻融袋的一端设置有负压管路,所述的冻融袋通过所述的负压管路与所述的注射器相连;所述的负压管路上设置有开关;所述的输出管路上设置开关。
6.根据权利要求1所述的工序整合分体式生物样本冻融袋,其特征在于:所述的输入管路通过接口与所述的细胞输入管路、保护液输入管路相连;所述的接口为Y型接口。
7.根据权利要求1所述的工序整合分体式生物样本冻融袋,其特征在于:所述的保护液输入管路的端部设置有保护液注射口。
8.根据权利要求1所述的工序整合分体式生物样本冻融袋,其特征在于:所述的细胞输入管路与接头之间均设置有流量调节器;所述的接头为鲁尔接头。
9.根据权利要求1所述的工序整合分体式生物样本冻融袋,其特征在于:所述的冻融袋为分体式冻融袋;所述的分体式冻融袋的各腔室之间的底部相连通;所述的腔室上均设置有穿刺端口。
10.权利要求1-9中任一项所述的工序整合分体式生物样本冻融袋的使用方法,其特征在于:包括如下步骤:
(1)关闭输出管路的开关,打开输入管路的开关与对应的流量调节器,将细胞悬液通过细胞输入管路转移至混匀袋内,将冷冻保护液通过保护液注射口注入至混匀袋内,关闭输入管路的开关;
(2)打开负压管路的开关,通过注射器将冻融袋的内部抽成负压状态,然后关闭负压管路的开关;
(3)打开输出管路的开关,使混匀袋中细胞与冷冻保护液的混合液通过输出管路流入冻融袋中即成。
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