CN115023227B - 用于治疗癌症的PD-1拮抗剂、VEGFR/FGFR/RET酪氨酸激酶抑制剂和CBP/β-联蛋白抑制剂的组合 - Google Patents

用于治疗癌症的PD-1拮抗剂、VEGFR/FGFR/RET酪氨酸激酶抑制剂和CBP/β-联蛋白抑制剂的组合 Download PDF

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Abstract

本公开描述了组合疗法，所述组合疗法包含程序性死亡1受体(PD‑1)的拮抗剂、乐伐替尼或其药学上可接受的盐和(6S,9aS)‑N‑苄基‑8‑({6‑[3‑(4‑乙基哌嗪‑1‑基)氮杂环丁烷‑1‑基]吡啶‑2‑基}甲基)‑6‑(2‑氟‑4‑羟基苄基)‑4,7‑二氧代‑2‑(丙‑2‑烯‑1‑基)六氢‑2H‑吡嗪并[2,1‑c][1,2,4]三嗪‑1(6H)‑甲酰胺(E7386)或其药学上可接受的盐，以及所述组合疗法用于治疗癌症的用途。

Description

用于治疗癌症的PD-1拮抗剂、VEGFR/FGFR/RET酪氨酸激酶抑 制剂和CBP/β-联蛋白抑制剂的组合
序列表的引用
本申请含有序列表，其已经以ASCII格式电子提交，并通过引用以其整体并入本文。在2020年10月27日创建的所述ASCII副本命名为213597_0005_00_ST25，并且大小为31,517个字节。
相关申请的引用
本申请要求2019年10月29日提交的美国临时申请号62/927,334和62/927,576的优先权和权益，其内容通过引用以其整体并入本文。
技术领域
公开了可用于治疗癌症的组合疗法。公开了组合疗法，所述组合疗法包含程序性死亡1 (PD-1)蛋白质的拮抗剂、乐伐替尼(一种多受体酪氨酸激酶(多RTK)抑制剂)或其药学上可接受的盐以及E7386 (一种抑制CBP和β-联蛋白之间的相互作用的CBP/β-联蛋白抑制剂)或其药学上可接受的盐。还公开了肿瘤治疗剂，其含有抗PD-1抗体、乐伐替尼或其药学上可接受的盐和E7386或其药学上可接受的盐的组合。
背景技术
PD-1被认为是免疫调节和维持外周耐受的重要参与者。PD-1在幼稚T细胞、B细胞和自然杀伤T (NKT)细胞上适度表达，并通过T/B-细胞受体信号传导在淋巴细胞、单核细胞和骨髓细胞上上调(1)。
用于PD-1、PD-L1 (B7-H1)和PD-L2 (B7-DC)的两种已知的配体在各种组织中产生的人癌症中表达。在例如卵巢癌、肾癌、结肠直肠癌、胰腺癌、肝癌和黑素瘤的大量样品组中，显示与随后的治疗无关，PD-L1表达与不良预后和总生存期减少相关(2-13)。类似地，发现肿瘤浸润淋巴细胞上的PD-1表达标记乳腺癌和黑素瘤中的功能障碍的T细胞(14-15)并且与肾癌中的不良预后相关(16)。已经提出表达PD-L1的肿瘤细胞与表达PD-1的T细胞相互作用以减弱T细胞激活和逃避免疫监视，从而有助于针对肿瘤的受损的免疫应答。因此，针对PD-1受体或PD-L1配体的抗体可以抑制它们之间的结合，导致对肿瘤细胞的免疫作用增加(23)。
抑制PD-1与其配体PD-L1和PD-L2中的一种或两者之间的相互作用的若干单克隆抗体已被FDA批准使用，并且另外的单克隆抗体处于治疗癌症的临床开发中。已经提出，如果与其它批准的或实验性癌症疗法(例如放射、手术、化疗剂、靶向疗法、抑制肿瘤中失调的其它信号传导途径的药剂和其它免疫增强剂)组合给药，则可以增强这样的抗体的功效。
派姆单抗是抗PD-1抗体，在美国被批准作为单一疗法或与某些其它药剂组合用于治疗许多肿瘤类型，包括黑素瘤、非小细胞肺癌(NSCLC)、小细胞肺癌(SCLC)、头颈鳞状细胞癌(HNSCC)、经典霍奇金淋巴瘤(cHL)、原发性纵隔大B细胞淋巴瘤(PMBCL)、尿道上皮癌、微卫星不稳定性高癌、胃癌、食道癌、宫颈癌、肝细胞癌(HCC)、Merkel细胞瘤(MCC)、肾细胞癌(RCC)和子宫内膜癌。
酪氨酸激酶参与生长因子信号传导的调节，并因此是癌症疗法的重要靶。乐伐替尼是口服受体酪氨酸激酶(RTK)抑制剂，其选择性抑制参与肿瘤增殖的血管内皮生长因子(VEGF)受体(VEGFR1 (FLT1)、VEGFR2 (KDR)和VEGFR3 (FLT4))和成纤维细胞生长因子(FGF)受体FGFR1、2、3和4，以及其它促血管生成和致癌途径相关的RTK (包括血小板衍生的生长因子(PDGF)受体PDGFRα；KIT；和RET原癌基因(RET))的激酶活性。特别是，乐伐替尼具有与VEGFR2的新的结合模式(V型)，如通过X-射线晶体结构分析所证实的，并且根据动力学分析，表现出快速和有效的激酶活性抑制。
乐伐替尼的化学名称为4-[3-氯-4-(环丙基氨基羰基)氨基苯氧基]-7-甲氧基-6-喹啉甲酰胺，具有以下结构：
。
甲磺酸乐伐替尼在美国被批准至少(a)用于治疗患有局部复发性或转移性、进行性、放射性碘难治性分化型甲状腺癌的患者，(b)与依维莫司组合，用于治疗在一种先前的抗血管生成疗法后的晚期肾细胞癌(RCC)患者，(c)用于患有不可切除的肝细胞癌(HCC)的患者的一线治疗，和(d)与派姆单抗组合，用于治疗患有不是微卫星不稳定性-高(MSI-H)或错配修复缺陷(dMMR)的晚期子宫内膜癌的患者，所述患者在先前的全身疗法后具有疾病进展并且不是治愈性手术或放射的候选者。甲磺酸乐伐替尼正在临床研究中，用作单一疗法或与抗PD-1抗体组合疗法用于其它肿瘤类型，包括膀胱癌、黑素瘤、头颈鳞状细胞癌、尿道上皮癌、乳腺癌、胃癌、卵巢癌、结肠直肠癌(CRC)、成胶质细胞瘤和胆道癌。
已经观察到一些癌细胞具有由Wnt信号激活的β-联蛋白。Wnt信号途径的抑制剂已被研究作为抗癌剂；然而，没有一种被投入实际使用。
与具有其它机制的常规Wnt抑制剂相比，作为抗癌剂在临床开发中的CBP/β-联蛋白抑制剂在人体中的毒性较小(J. Clin. Oncol. 31, 2013 (suppl; abstr 2501))。作为其机制，认为在抑制CBP (CREB结合蛋白)和β-联蛋白之间的结合后，与CBP高度相似的P300结合β-联蛋白而不是CBP，并且这样的改变抑制癌症增殖并诱导分化(The EMBO Journal2013, 32: 1977-1989)。
已经显示胆管癌的主要途径可以是通过Wnt-β-联蛋白途径的肿瘤增殖；CBP/β-联蛋白抑制剂ICG-001可以抑制肿瘤增殖(J. Clin. Invest. 2015年3月2日; 125(3):1269-85. doi: 10.1172/JCI76452)。
常规Wnt抑制剂基于抑制Wnt配体生产、阻断受体功能、促进β-联蛋白降解等机制而阻断信号。由于这样的机制，毒性问题出现在临床前研究和临床试验中，并且开发大部分已经被中断。Wnt信号传导途径是高度保守的途径，并且与病症相关并涉及β-联蛋白。Wnt/β-联蛋白途径对于正常发育是重要的。不受理论束缚，CBP/β-联蛋白结合被认为减少Wnt信号传导，而p300/β-联蛋白被认为激活Wnt信号传导。
此外，还已知β-联蛋白通过抑制T细胞的分化来抑制T细胞的激活(J. Immunol.2011; 186:784-790)。因此，CBP/β-联蛋白抑制剂被认为促进T细胞的分化和T细胞的激活。
其化学名称为(6S,9aS)-N-苄基-8-({6-[3-(4-乙基哌嗪-1-基)氮杂环丁烷-1-基]吡啶-2-基}甲基)-6-(2-氟-4-羟基苄基)-4,7-二氧代-2-(丙-2-烯-1-基)六氢-2H-吡嗪并[2,1-c][1,2,4]三嗪-1(6H)-甲酰胺的E7386是具有以下结构的潜在的CBP/β-联蛋白抑制剂：
。
E7386单独(美国专利10,259,817和9,174,998)或与抗PD-1抗体组合疗法(美国专利公开2018/0185395)或与乐伐替尼组合疗法(加拿大专利公开3044658)可以表现出抗肿瘤作用。
通常，肿瘤治疗剂在单独给药时通常不是对所有患者有效。因此，已经尝试通过将这样的治疗剂组合来提高它们的治愈率(22)。
发明内容
如本文所公开的，给予(i)不是阿特珠单抗(atezolizumab)的PD-1拮抗剂、(ii)乐伐替尼(lenvatinib)或其药学上可接受的盐和(iii) E7386或其药学上可接受的盐的组合获得了出乎意料的优异的抗肿瘤作用。
提供了用于治疗个体癌症的方法，其包括给予所述个体组合疗法，所述组合疗法包含不是阿特珠单抗的PD-1拮抗剂、乐伐替尼或其药学上可接受的盐和E7386或其药学可接受的盐。在一些情况下，所述个体是人。所述癌症可以是实体瘤，例如肾细胞癌(RCC)、结肠直肠癌(CRC)、肝细胞癌(HCC)、黑素瘤、膀胱癌、乳腺癌、非小细胞肺癌(NSCLC)、子宫内膜癌、尿道上皮癌和头颈的鳞状细胞癌。所述癌症可以是晚期癌症或转移性癌症。
所述方法的PD-1拮抗剂可以是单克隆抗体或其抗原结合片段。在一些情况下，所述拮抗剂是抗PD-1抗体。所述拮抗剂可以是派姆单抗(pembrolizumab)或纳武单抗(nivolumab)。
在一些情况下，所述方法的PD-1拮抗剂是派姆单抗、西米普利单抗(cemiplimab)或纳武单抗，优选派姆单抗。在一些治疗方案中，派姆单抗的给药可以在乐伐替尼或其药学上可接受的盐和/或E7386或其药学上可接受的盐的给药之后进行。在一些情况下，在派姆单抗和/或E7386或其药学上可接受的盐之后给予乐伐替尼或其药学上可接受的盐。
提供了用于治疗诊断患有癌症的人个体的方法，所述方法包括给予所述个体组合疗法持续至少24周。所述组合疗法包括派姆单抗、乐伐替尼或其药学上可接受的盐和E7386或其药学上可接受的盐。乐伐替尼或其药学上可接受的盐可以以24 mg、20 mg、18 mg、12mg或8 mg的日剂量给药，各自以乐伐替尼计，并且派姆单抗可以以200 mg Q3W或400 mgQ6W的剂量给药。E7386或其药学上可接受的盐可以以约0.01-1000 mg/kg个体体重/天范围的剂量给药。
提供了包含PD-1拮抗剂的药物，其与乐伐替尼或其药学上可接受的盐和E7386或其药学上可接受的盐组合用于治疗癌症。
还提供了包含乐伐替尼或其药学上可接受的盐的药物，其与PD-1拮抗剂和E7386或其药学上可接受的盐组合用于治疗癌症。
还提供了包含E7386或其药学上可接受的盐的药物，其待与PD-1拮抗剂和乐伐替尼或其药学上可接受的盐组合用于治疗癌症。
还提供了治疗组合用于治疗癌症的用途，并且所述治疗组合包括PD-1拮抗剂、乐伐替尼或其药学上可接受的盐和E7386或其药学上可接受的盐。
还提供了PD-1拮抗剂在制造用于当与乐伐替尼或其药学上可接受的盐和E7386或其药学上可接受的盐组合给药时治疗个体癌症的药物中的用途。还提供了乐伐替尼或其药学上可接受的盐在制造当与PD-1拮抗剂和E7386或其药学上可接受的盐组合给药时用于治疗个体癌症的药物中的用途。还提供了E7386或其药学上可接受的盐在制造当与PD-1拮抗剂和乐伐替尼或其药学上可接受的盐组合给药时用于治疗个体癌症的药物中的用途。
还提供了PD-1拮抗剂、乐伐替尼或其药学上可接受的盐和E7386或其药学上可接受的盐在制造用于治疗个体癌症的药物中的用途。所述药物可以包括试剂盒，并且所述试剂盒还可以包含包装插页，该包装插页包含使用PD-1拮抗剂与乐伐替尼或其药学上可接受的盐和E7386或其药学上可接受的盐组合来治疗个体癌症的说明书。
在所有治疗方法、药物和用途中，PD-1拮抗剂抑制PD-L1与PD-1结合，并且还优选制PD-L2与PD-1结合。在上述治疗方法、药物和用途中的一些中，PD-1拮抗剂是单克隆抗体或其抗原结合片段，其特异性结合到PD-1或PD-L1并阻断PD-L1与PD-1的结合。例如，PD-1拮抗剂可以是包含重链和轻链的抗PD-1抗体，并且其中所述重链和轻链包含在图6中所示的氨基酸序列(SEQ ID NO: 21和SEQ ID NO: 22)。还提供了治疗肿瘤的方法，其可以包括组合使用抗PD-1抗体、乐伐替尼或其药学上可接受的盐和E7386或其药学上可接受的盐。
在一些组合疗法、治疗方法、药物和用途中，所述个体是人并且所述癌症是实体瘤，并且在一些情况下，所述实体瘤是肾细胞癌(RCC)、结肠直肠癌(CRC)、肝细胞癌(HCC)、黑素瘤、膀胱癌、尿道上皮癌、乳腺癌、非小细胞肺癌(NSCLC)、子宫内膜癌和头颈的鳞状细胞癌，或本文公开的任何癌症。
另外，如果癌症测试对PD-L1和PD-L2中的一种或两者的表达呈阳性，则可以利用任何组合疗法、治疗方法、药物和用途。在再其它情况下，所述癌症具有升高的PD-L1表达。
在一些组合疗法、治疗方法、药物和用途中，所述个体可以是人，所述癌症测试对人PD-L1呈阳性，并且选自肾细胞癌(RCC)、结肠直肠癌(CRC)、肝细胞癌(HCC)、黑素瘤、膀胱癌、乳腺癌、非小细胞肺癌(NSCLC)、子宫内膜癌和头颈的鳞状细胞癌。在实施方案中，所述膀胱癌是尿道上皮癌。
附图说明
图1显示示例性抗PD-1单克隆抗体的轻链和重链CDR的氨基酸序列(SEQ ID NO:1-6)。
图2显示另一个示例性抗PD-1单克隆抗体的轻链和重链CDR的氨基酸序列(SEQ IDNO: 7-12)。
图3显示示例性抗PD-1单克隆抗体的重链可变区和全长重链的氨基酸序列(SEQID NO: 13和SEQ ID NO: 14)。
图4显示示例性抗PD-1单克隆抗体的替代轻链可变区的氨基酸序列(SEQ ID NO:15-17)。
图5A和5B显示示例性抗PD-1单克隆抗体的替代轻链的氨基酸序列，其中图5A显示K09A-L-11和K09A-L-16轻链的氨基酸序列(分别是SEQ ID NO: 18和19)并且图5B显示K09A-L-17轻链的氨基酸序列(SEQ ID NO: 20)。
图6显示派姆单抗的重链和轻链的氨基酸序列(分别是SEQ ID NO: 21和22)。
图7显示纳武单抗的重链和轻链的氨基酸序列(分别是SEQ ID NO: 23和24)。
图8描述三重药物疗法药物组合中的每一种的单一疗法，两种药物疗法(乐伐替尼+E7386和派姆单抗+乐伐替尼)和三重药物疗法(E7386+乐伐替尼+派姆单抗)在小鼠中的体内疗法数据。描述为平均值±SE。*：P<0.05，****：P<0.0001相对于三重组合，通过使用Log变换值重复测量Dunnet的多重比较。乐伐替尼是甲磺酸乐伐替尼。
图9显示如在图8中所示的每组在第29天的相对肿瘤体积。数据显示为平均值±SE。
图10A至10C总结了在实施例2中所述的研究中采用的小鼠细胞系、培养基、动物品系和条件。
图11描述了在实施例2中所述的研究中获得的数据。LEN=乐伐替尼。PD-1Ab和PD-1=抗PD-1抗体。LEN/PD-1=乐伐替尼和抗PD-1抗体。E78386=(6S,9aS)-N-苄基-8-({6-[3-(4-乙基哌嗪-1-基)氮杂环丁烷-1-基]吡啶-2-基}甲基)-6-(2-氟-4-羟基苄基)-4,7-二氧代-2-(丙-2-烯-1-基)六氢-2H-吡嗪并[2,1-c][1,2,4]三嗪-1(6H)-甲酰胺。E7386/LEN=E7386和乐伐替尼。E7386/LEN/PD-1=E7386、乐伐替尼和抗PD-1抗体。
图12A至12G显示了显示最佳平均应答(%)的瀑布图，其如实施例2中所述定义。图12A描述未治疗数据。图12B描述抗PD-1抗体(Ab)的数据。图12C描述在25 mg/kg下的E7386的数据。图12D描述在10 mg/kg下的乐伐替尼的数据。图12E描述E7386和乐伐替尼的组合的数据。图12F描述乐伐替尼和抗PD-1抗体的组合的数据。图12G描述E7386、乐伐替尼和抗PD-1抗体的组合的数据。在每个图中，对于数据指示了细胞系。水平的黑色虚线指示SD和PR(分别是顶线和底线)。SD=稳定的疾病。PR=部分应答。
具体实施方式
缩写。在整个详细描述和实施例中将使用以下缩写：
BOR 最佳总体应答
BID 每日两次一剂量
CBP CREB结合蛋白
CBR 临床受益率
CDR 互补决定区
CHO 中国仓鼠卵巢
CR 完全应答
CRC 结肠直肠癌
DCR 疾病控制率
DFS 无疾病生存期
DLT 剂量限制毒性
DOR 应答的持续时间
DSDR 持久的稳定的疾病率
FFPE 福尔马林固定的，石蜡包埋的
FR 构架区
HCC 肝细胞癌
IgG 免疫球蛋白G
IHC 免疫组织化学或免疫组织化学的
irRC 免疫相关的应答标准
IV 静脉内
MCC Merkel细胞癌
MTD 最大耐受剂量
NCBI 国家生物技术信息中心
NCI 国家癌症研究所
NKT 自然杀伤T细胞
NSCLC 非小细胞肺癌
ORR 客观应答率
OS 总生存期
PD 进行性疾病
PD-1 程序性细胞死亡1
PD-L1 程序性细胞死亡1配体1，也称为B7-H1
PD-L2 程序性细胞死亡1配体2，也称为B7-DC
PFS 无进展生存期
PR 部分应答
Q2W 每两周一剂量
Q3W 每三周一剂量
QD 每天一剂量
RCC 肾细胞癌
RECIST 实体瘤中的应答评价标准
RTK 受体酪氨酸激酶
SCLC 小细胞肺癌
SD 稳定的疾病
VEGF 血管内皮生长因子
VH 免疫球蛋白重链可变区
VK 免疫球蛋白κ轻链可变区
定义。为了更容易理解所述方法、组合物和用途，下面具体定义了某些技术和科学术语。除非在本文件的其它地方特别定义，否则本文使用的所有其它技术和科学术语具有本领域普通技术人员通常理解的含义。
“约”当用于修饰在数值上定义的参数(例如PD-1拮抗剂、(6S,9aS)-N-苄基-8-({6-[3-(4-乙基哌嗪-1-基)氮杂环丁烷-1-基]吡啶-2-基}甲基)-6-(2-氟-4-羟基苄基)-4,7-二氧代-2-(丙-2-烯-1-基)六氢-2H-吡嗪并[2,1-c][1,2,4]三嗪-1(6H)-甲酰胺(E7386)或其药学上可接受的盐、或乐伐替尼或其药学上可接受的盐的剂量，或本文所述的组合疗法的治疗时间长度)时，是指该参数可以在该参数的所述数值之下或之上变化多达10%。例如，约20 mg的剂量可以在18 mg至22 mg之间变化。
“优选地”是指更理想的选择。例如，当用于修饰在数值上定义的参数时，它指示优选的参数提供相对于该参数的另一个值的改进的结果。“优选地”的这种含义仅适用于美国之外。对于美国，使用“优选地”的任何句子应当被解读为好像该术语不存在。
如本文所用，包括所附权利要求书，词语的单数形式，例如“一”、“一个”和“该”，包括它们相应的复数指代，除非上下文另外明确指出。
“给药”和“治疗”，当应用于动物、人、实验受试者、细胞、组织、器官或生物流体时，是指外源药物、治疗剂、诊断剂或组合物与动物、人、受试者、细胞、组织、器官或生物流体的接触。细胞的治疗包括试剂与细胞的接触，以及试剂与流体的接触，其中流体与细胞接触。“给药”和“治疗”也指例如体外和离体治疗细胞，例如，通过试剂、诊断剂、结合化合物或通过另一种细胞。术语“受试者”包括任何生物体，优选动物，更优选哺乳动物(例如大鼠、小鼠、狗、猫和兔)，并且最优选人。
如本文所用，术语“抗体”是指表现出所需的生物或结合活性的任何形式的抗体。因此，其以最广义使用，并且具体涵盖但不限于单克隆抗体(包括全长单克隆抗体)、多克隆抗体、多特异性抗体(例如双特异性抗体)、人源化抗体、完全人抗体、嵌合抗体和骆驼化单结构域抗体。“亲本抗体”是通过在修饰抗体用于预定用途之前将免疫系统暴露于抗原而获得的抗体，例如用作人治疗剂的抗体的人源化。
通常，基本抗体结构单元包含四聚体。每个四聚体包括两对相同的多肽链，每对具有一条“轻”链(约25 kDa)和一条“重”链(约50-70 kDa)。每条链的氨基末端部分包括约100-110个或更多个氨基酸的可变区，其主要负责抗原识别。重链的羧基末端部分可以限定主要负责效应子功能的恒定区。通常，人轻链分类为κ和λ轻链。此外，人重链通常分类为μ、δ、γ、α或ε，并分别定义抗体的同种型为IgM、IgD、IgG、IgA和IgE。在轻链和重链内，可变区和恒定区通过约12个或更多个氨基酸的“J”区连接，其中重链还包括约10个或更多个氨基酸的“D”区。一般参见Fundamental Immunology Ch. 7 (Paul, W.编辑, 第2版. RavenPress, N.Y. (1989)。
每个轻链/重链对的可变区形成抗体结合位点。因此，通常，完整抗体具有两个结合位点。除了在双功能或双特异性抗体中，两个结合位点通常是相同的。
通常，重链和轻链两者的可变结构域都包含三个高变区，也称为互补决定区(CDR)，它们位于相对保守的构架区(FR)之内。CDR通常通过构架区比对，使得能够结合到特定表位。一般来说，从N末端到C末端，轻链和重链可变结构域两者均包含FR1、CDR1、FR2、CDR2、FR3、CDR3和FR4。氨基酸对每个结构域的分配通常根据Sequences of Proteins ofImmunological Interest, Kabat等人; National Institutes of Health, Bethesda,Md. ; 第5版; NIH Publ. No. 91-3242 (1991); Kabat (1978) Adv. Prot. Chem. 32:1-75; Kabat等人, (1977) J. Biol. Chem. 252: 6609-6616; Chothia等人, (1987) J Mol. Biol. 196: 901-917或Chothia等人, (1989) Nature 342: 878-883的定义。
如本文所用，术语“高变区”是指负责抗原结合的抗体的氨基酸残基。高变区包含来自“互补决定区”或“CDR” (即，轻链可变结构域中的CDRL1、CDRL2和CDRL3，以及重链可变结构域中的CDRH1、CDRH2和CDRH3)的氨基酸残基。参见Kabat等人(1991) Sequences ofProteins of Immunological Interest, 第5版 Public Health Service, NationalInstitutes of Health, Bethesda, Md. (通过序列限定抗体的CDR区)；还参见Chothia和Lesk (1987) J. Mol. Biol. 196: 901-917 (通过结构限定抗体的CDR区)。如本文所用，术语“构架”或“FR”残基是指除了本文定义为CDR残基的高变区残基之外的那些可变结构域残基。
本文所用的“可变区”或“V区”是指IgG链的区段，其在不同抗体之间的序列中是可变的。它延伸至轻链中的Kabat残基109和重链中的113。
除非另有指示，否则本文所用的“抗体片段”或“抗原结合片段”是指抗体的抗原结合片段，即保留了与全长抗体结合的抗原特异性结合的能力的抗体片段，例如保留一个或多个CDR区的片段。抗体结合片段的实例包括但不限于Fab、Fab'、F(ab')2和Fv片段；双抗体；线性抗体；单链抗体分子，例如sc-Fv；由抗体片段形成的多特异性抗体和纳米抗体。
“特异性结合到”指定靶蛋白的抗体是与其它蛋白相比表现出优先结合到该靶的抗体，但该特异性不需要绝对的结合特异性。如果抗体的结合决定样品中靶蛋白的存在，例如不产生不期望的结果(例如假阳性)，则认为抗体对其预期的靶是“特异性的”。抗体或其结合片段将以对于非靶蛋白的亲和力至少两倍、优选至少十倍、更优选至少20倍、并且最优选至少100倍的亲和力结合到靶蛋白。如本文所用，如果抗体结合到包含给定的氨基酸序列(例如成熟的人PD-1或人PD-L1分子的氨基酸序列)的多肽，但不结合到缺乏该序列的蛋白质，则称抗体特异性结合到包含该序列的多肽。
“嵌合抗体”是指这样的抗体，其中重链和/或轻链的一部分与来源于特定物类(例如人)或属于特定抗体类别或亚类的抗体中的相应序列相同或同源，而一条或多条链的其余部分与来源于另一个物类(例如小鼠)或属于另一个抗体类别或亚类的抗体中的相应序列相同或同源，以及这样的抗体的片段，只要它们表现出所需的生物活性。
“人抗体”是指仅包含人免疫球蛋白序列的抗体。如果在小鼠、小鼠细胞或来源于小鼠细胞的杂交瘤中产生，人抗体可以含有鼠糖链。类似地，“小鼠抗体”或“大鼠抗体”分别是指仅包含小鼠或大鼠免疫球蛋白序列的抗体。
“人源化抗体”是指含有来自非人(例如鼠)抗体以及人抗体的序列的抗体形式。这样的抗体含有来源于非人免疫球蛋白的最小序列。一般而言，人源化抗体将包含至少一个(并且通常两个)可变结构域的基本上全部，其中全部或基本上全部的高变环对应于非人免疫球蛋白的高变环，并且全部或基本上全部的FR区是人免疫球蛋白序列的FR区。人源化抗体任选地还将包含免疫球蛋白恒定区(Fc)的至少一部分，通常是人免疫球蛋白的恒定区。当需要区分人源化抗体与亲本啮齿类动物抗体时，将前缀“hum”、“hu”或“h”加入到抗体克隆命名中。啮齿类动物抗体的人源化形式通常包含与亲本啮齿类动物抗体相同的CDR序列，尽管可以包括某些氨基酸取代以增加亲和力、增加人源化抗体的稳定性或出于其它原因。
“分离的抗体”和“分离的抗体片段”是指纯化状态，并且在这样的上下文中意指指定的分子基本上不含其它生物分子，例如核酸、蛋白质、脂质、碳水化合物或其它材料，例如细胞碎片和生长培养基。通常，术语“分离的”不旨在是指完全不存在这样的材料或不存在水、缓冲液或盐，除非它们以实质上干扰如本文所述的结合化合物的实验或治疗用途的量存在。
本文所用的“Kabat”是指Elvin A. Kabat ((1991) Sequences of Proteins ofImmunological Interest, 第5版. Public Health Service, National Institutes ofHealth, Bethesda, Md.)倡导的免疫球蛋白比对和编号系统。
本文所用的“单克隆抗体”或“mAb”或“Mab”是指基本上同源的抗体群，即包含该群的抗体分子除了可以少量存在的可能天然存在的突变外，在氨基酸序列上是相同的。相反，常规(多克隆)抗体制剂通常包括大量不同的抗体，这些抗体在其可变结构域(特别是其CDR)中具有不同的氨基酸序列，其通常对不同的表位具有特异性。修饰语“单克隆”指示抗体的特征是从基本上同源的抗体群获得，并且不应解释为需要通过任何特定方法产生抗体。例如，待根据治疗方法、药物和公开的用途使用的单克隆抗体可以通过首先由Kohler等人(1975) Nature 256: 495描述的杂交瘤方法制备，或者可以通过重组脱氧核糖核酸(DNA)方法制备(例如参见美国专利号4,816,567)。“单克隆抗体”也可以使用例如在Clackson等人(1991) Nature 352: 624-628和Marks等人(1991) J. Mol. Biol. 222:581-597中描述的技术从噬菌体抗体文库中分离。还参见Presta (2005) J. Allergy Clin. Immunol. 116: 731。
除非另有指示，否则本文所用的“CDR”或“CDRs”是指免疫球蛋白可变区中的一个或多个互补决定区，使用Kabat编号系统定义。
“抗肿瘤应答”当提及用治疗方案(例如本文所述的组合疗法)治疗的癌症患者时，是指至少一种积极的治疗作用，例如，减少癌细胞的数量、减小肿瘤尺寸、减少癌细胞浸润到外周器官的速率、减少肿瘤转移或肿瘤生长的速率或无进展存活。可以以多种方式测量在癌症中的积极治疗作用(参见W. A. Weber, J. Null. Med. 50: 1S-10S (2009);Eisenhauer等人, 见上)。在一些情况下，使用RECIST 1.1标准(实体瘤中的应答评价标准)、二维irRC (免疫相关的应答标准)或一维irRC评估对本文所述的组合疗法的抗肿瘤应答。在一些情况下，抗肿瘤应答是SD、PR、CR、PFS或DFS中的任一种。
“二维irRC”是指在Wolchok JD等人“Guidelines for the evaluation ofimmune therapy activity in solid tumors: immune-related response criteria,”Clin Cancer Res. 15(23): 7412–7420 (2009)中描述的一组标准。这些标准利用靶病变的二维肿瘤测量，其通过将每个病变的最长直径和最长垂直直径(cm2)相乘获得。
“生物治疗剂”是指在任何生物途径中阻断配体/受体信号传导的生物分子，例如抗体或融合蛋白，所述生物途径支持肿瘤维持和/或生长或抑制抗肿瘤免疫应答。生物治疗剂的类别包括但不限于针对VEGF、表皮生长因子受体(EGFR)、Her2/neu、其它生长因子受体、CD20、CD40、CD-40L、CTLA-4、OX-40、4-1BB和ICOS的抗体。
术语“癌症”、“癌性”、“肿瘤”或“恶性”是指或描述哺乳动物中通常以不受调节的细胞生长为特征的生理状况。癌症的实例包括但不限于肾细胞癌(RCC)、结肠直肠癌(CRC)、肝细胞癌(HCC)、黑素瘤、膀胱癌(例如尿道上皮癌)、乳腺癌、非小细胞肺癌(NSCLC)、子宫内膜癌和头颈的鳞状细胞癌。癌症的另一个具体实例包括肾细胞癌(RCC)。癌症的另一个具体实例包括透明细胞肾癌。癌症可以是原发性癌症，但更可能在癌症分期中是晚期，包括转移性疾病(例如，淋巴或其它器官累及)。可以根据所公开的治疗方法、药物和所公开的用途治疗的癌症包括特征在于测试的组织样品中PD-L1和PD-L2中的一种或两者的表达升高的那些。
“CBR”或“临床受益率”是指CR+PR+持久的SD。
“化疗剂”是可用于治疗癌症的化合物。可以与本文所述的治疗组合及其方法和用途组合使用的化疗剂的类别包括但不限于：烷基化剂、抗代谢物、激酶抑制剂、纺锤体毒素植物生物碱、细胞毒性/抗肿瘤抗生素、拓扑异构酶抑制剂、光敏剂、抗雌激素和选择性雌激素受体调节剂(SERM)、抗孕酮、雌激素受体下调剂(ERD)、雌激素受体拮抗剂、促黄体激素释放激素激动剂、抗雄激素、芳香酶抑制剂、EGFR (表皮生长因子受体)抑制剂、VEGF (血管内皮生长因子)抑制剂、VEGFR (血管内皮生长因子受体)抑制剂和抑制涉及异常细胞增殖或肿瘤生长的基因的表达的反义寡核苷酸。可用于本文公开的治疗方法的化疗剂包括细胞抑制剂和/或细胞毒剂。
本文所用的“Chothia”是指在Al-Lazikani 等人JMB 273: 927-948 (1997)中所述的抗体编号系统。
“包含(comprising)”或变体例如“包含(comprise)”、“包含(comprises)”或“包含(comprised of)”在整个说明书和权利要求书中以包括性意义使用，即，指定存在所述特征，但不排除可以实质上增强任何公开的治疗方法、药物和公开的用途的操作或效用的其它特征的存在或添加，除非由于明确语言或必要的暗示使得上下文另有要求。
“保守修饰的变体”或“保守取代”是指蛋白质中的氨基酸被具有相似特征(例如电荷、侧链大小、疏水性/亲水性、主链构象和刚性等)的其它氨基酸取代，使得可以频繁地进行改变而不改变蛋白质的生物活性或其它所需性质，例如抗原亲和力和/或特异性。本领域技术人员认识到，通常，多肽非必需区中的单氨基酸取代基本上不改变生物活性(例如参见Watson等人(1987) Molecular Biology of the Gene, The Benjamin/Cummings Pub.Co., 第224页(第4版))。此外，结构或功能相似的氨基酸的取代不太可能破坏生物活性。示例性保守取代在下表1中阐述。
表1. 示例性保守氨基酸取代
原始残基 保守取代
Ala (A) Gly；Ser
Arg (R) Lys；His
Asn (N) Gln；His
Asp (D) Glu；Asn
Cys (C) Ser；Ala
Gln (Q) Asn
Glu (E) Asp；Gln
Gly (G) Ala
His (H) Asn；Gln
Ile (I) Leu；Val
Leu (L) Ile；Val
Lys (K) Arg；His
Met (M) Leu；Ile；Tyr
Phe (F) Tyr；Met；Leu
Pro (P) Ala
Ser (S) Thr
Thr (T) Ser
Trp (W) Tyr；Phe
Tyr (Y) Trp；Phe
Val (V) Ile；Leu
“基本上由……组成(consists essentially of)”和变体例如“基本上由……组成(consist essentially of)”或“基本上由……组成(consisting essentially of)”在整个说明书和权利要求书中用于指示包括任何列举的要素或要素组，和任选包括与列举的要素性质相似或不同的其它要素，它们实质上不改变指定给药方案、方法或组合物的基本或新颖性质。作为非限制性实例，基本上由列举的氨基酸序列组成的PD-1拮抗剂还可以包括一个或多个氨基酸，包括一个或多个氨基酸残基的取代，其实质上不影响结合化合物的性质。
“DCR”或“疾病控制率”是指CR+PR+SD。
“诊断性抗PD-L单克隆抗体”是指与在某些哺乳动物细胞的表面上表达的成熟形式的指定PD-L (PD-L1或PDL2)特异性结合的mAb。成熟的PD-L缺乏预先分泌的前导序列，也称为前导肽。术语“PD-L”和“成熟PD-L”在本文中可互换使用，并且除非另有指示或从上下文中显而易见，否则应理解为是指相同的分子。
如本文所用，诊断性抗人PD-L1 mAb或抗hPD-L1 mAb是指特异性结合到成熟的人PD-L1的单克隆抗体。成熟的人PD-L1分子由以下序列的氨基酸19-290组成：
可用作IHC检测FFPE肿瘤组织切片中PD-L1表达的诊断性mAb的诊断性抗人PD-L1mAb的具体实例是抗体20C3和抗体22C3，其描述于2013年12月18日提交的国际申请PCT/US13/075932并于2014年6月26日作为WO2014/100079公开。已被报道可用于FFPE组织切片中PD-L1表达的IHC检测的另一种抗人PD-L1 mAb(Chen, B.J.等人, Clin. Cancer Res.19: 3462-3473 (2013))是可从Sino Biological, Inc. (中华人民共和国北京；目录号10084-R015)公开获得的兔抗人PD-L1 mAb。
“DSDR”或“持久稳定的疾病率”是指SD≥23周。
本文所用的“构架区”或“FR”是指除CDR区之外的免疫球蛋白可变区。
“同源性”是指当两个多肽序列最佳比对时它们之间的序列相似性。当两个比较序列中的位置被相同的氨基酸单体亚基占据时，例如，如果两个不同Ab的轻链CDR中的位置被丙氨酸占据，则两个Ab在该位置同源。同源性百分比是两个序列共享的同源位置数除以比较的位置总数×100。例如，如果当两个序列最佳比对时，两个序列中10个位置中的8个是匹配或同源的，则两个序列是80%同源的。通常，当两个序列比对以给出最大百分比同源性时进行比较。例如，可以通过基础局部比对搜索工具(BLAST®)算法(其是美国国立医学图书馆的注册标志)进行比较，其中选择算法的参数以在相应的参考序列的整个长度上给出相应的序列之间的最大匹配。
以下代表性参考文献涉及通常用于序列分析的BLAST®算法：BLAST ALGORITHMS:Altschul, S.F.等人, (1990) J. Mol. Biol. 215: 403-410; Gish, W.等人, (1993)Nature Genet. 3: 266-272; Madden, T.L.等人, (1996) Meth. Enzymol. 266: 131-141; Altschul, S.F.等人, (1997) Nucleic Acids Res. 25:3389-3402; Zhang, J.等人, (1997) Genome Res. 7: 649-656; Wootton, J.C.等人, (1993) Comput. Chem.17: 149-163; Hancock, J.M.等人, (1994) Comput. Appl. Biosci. 10: 67-70;ALIGNMENT SCORING SYSTEMS: Dayhoff, M.O.等人, "A model of evolutionary changein proteins." in Atlas of Protein Sequence and Structure, (1978) 第5卷, 增刊3. M.O. Dayhoff (编辑), 第345-352页, Natl. Biomed. Res. Found., Washington,DC; Schwartz, R.M.等人, "Matrices for detecting distant relationships." inAtlas of Protein Sequence and Structure, (1978) 第5卷, 增刊3." M.O. Dayhoff(编辑), 第353-358页, Natl. Biomed. Res. Found., Washington, DC; Altschul,S.F., (1991) J. Mol. Biol. 219: 555-565; States, D.J.等人, (1991) Methods 3:66-70; Henikoff, S.等人, (1992) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 89: 10915-10919;Altschul, S.F.等人, (1993) J. Mol. E第36卷: 290-300; ALIGNMENT STATISTICS:Karlin, S.等人, (1990) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 87: 2264-2268; Karlin, S.等人, (1993) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90: 5873-5877; Dembo, A.等人, (1994)Ann. Prob. 22: 2022-2039; 和Altschul, S.F. "Evaluating the statisticalsignificance of multiple distinct local alignments." in Theoretical andComputational Methods in Genome Research (S. Suhai编辑), (1997) 第1-14页,Plenum, New York。
当提及对用本文所述组合疗法的治疗的特异性抗肿瘤应答时，“无应答患者”是指患者不表现出抗肿瘤应答。
“ORR”或“客观应答率”在一些情况下是指CR+PR，并且ORR(第24周)是指在用甲磺酸乐伐替尼与派姆单抗组合治疗24周后，在队列中的每个患者中使用irRECIST测量的CR和PR。
“患者”或“受试者”或“个体”是指需要疗法或参与临床试验、流行病学研究或用作对照的任何单个受试者，包括人和哺乳动物兽医患者，例如牛、马、狗和猫。
PD-1拮抗剂。抗PD1拮抗剂包括以下。“PD-1拮抗剂”是指阻断在癌细胞上表达的PD-L1与在免疫细胞(T细胞、B细胞或NKT细胞)上表达的PD-1结合，并优选还阻断在癌细胞上表达的PD-L2与免疫细胞表达的PD-1结合的任何化合物或生物分子。PD-1及其配体的替代名称或同义词包括：对于PD-1，PDCD1、PD1、CD279和SLEB2；对于PD-L1，PDCD1L1、PDL1、B7H1、B7-4、CD274和B7-H；和对于PD-L2，PDCD1L2、PDL2、B7-DC、Btdc和CD273。在其中治疗人个体的任何治疗方法、药物和公开的用途中，PD-1拮抗剂阻断人PD-L1与人PD-1的结合，并优选阻断人PD-L1和PD-L2两者与人PD-1的结合。可以在NCBI Locus No.: NP_005009中发现人PD-1氨基酸序列。可以分别在NCBI Locus No.: NP_054862和NP_079515中发现人PD-L1和PD-L2氨基酸序列。PD-1拮抗剂不是抗PD-L1单克隆抗体阿特珠单抗。
可用于任何治疗方法、药物和公开的用途的PD-1拮抗剂包括单克隆抗体(mAb)或其抗原结合片段，其特异性结合到PD-1或PD-L1，并优选特异性结合到人PD-1或人PD-L1。mAb可以是人抗体、人源化抗体或嵌合抗体，并且可以包括人恒定区。人恒定区选自IgG1、IgG2、IgG3和IgG4恒定区，并优选人恒定区是IgG1或IgG4恒定区。在一些情况下，抗原结合片段选自Fab、Fab'-SH、F(ab')2、scFv和Fv片段。
可以使用结合到PD-1多肽、PD-1多肽10片段、PD-1肽或PD-1表位并阻断PD-1与其配体PD-L1或PD-L2之间的相互作用的任何单克隆抗体。在一些实施方案中，抗人PD-1单克隆抗体结合到PD-1多肽、PD-1多肽片段、PD-1肽或PD-1表位并阻断PD-1和PD-L1之间的相互作用。在其它实施方案中，抗人PD-1单克隆抗体结合到PD-1多肽、PD-1多肽片段、PD-1肽或PD-1表位并阻断PD-1和PD-L2之间的相互作用。在又其它实施方案中，抗人PD-1单克隆抗体结合到PD-1多肽、PD-1多肽片段、PD-1肽或PD-1表位并阻断PD-1和PD-L1之间的相互作用以及PD-1和PD-L2之间的相互作用。
还可以使用结合到PD-L1多肽、PD-L1 20多肽片段、PD-L1肽或PD-L1表位并阻断PD-L1和PD-1之间的相互作用的任何单克隆抗体。
在某些实施方案中，抗人PD-1单克隆抗体选自派姆单抗、纳武单抗、西米普利单抗、pidilizumab (美国专利号7,332,582)、AMP-514 (MedImmune LLC, Gaithersburg,MD)、PDR001 (美国专利号25 9,683,048)、BGB-A317 (美国专利号8,735,553)和MGA012(MacroGenics, Rockville, MD)。
在一个实施方案中，抗人PD-1单克隆抗体是派姆单抗。在另一个实施方案中，抗人PD-1单克隆抗体是纳武单抗。在另一个实施方案中，抗人PD-1单克隆抗体是西米普利单抗。在又另一个实施方案中，抗人PD-1单克隆抗体是pidilizumab。在一个实施方案中，抗人PD-1单克隆抗体是AMP-514。在另一个实施方案中，抗人PD-1单克隆抗体是PDR001。在又另一个实施方案中，抗人PD-1单克隆抗体是BGB-A317。在再另一个实施方案中，抗人PD-1单克隆抗体是MGA012。
结合到人PD-1并且可用于治疗方法、药物和公开的用途的mAb的实例描述于美国专利号7488802、7521051、8008449、8354509和8168757；国际专利公开WO2004/004771、WO2004/072286和WO2004/056875；和美国公开号2011/0271358。在治疗方法、药物和公开的用途中可用作PD-1拮抗剂的特异性抗人PD-1 mAb包括：派姆单抗(也称为MK-3475)、具有在WHO Drug Information, 第27卷, 第2期, 第161-162页(2013)中描述的结构并且包含在图6中所示的重链和轻链氨基酸序列的人源化IgG4 mAb、纳武单抗(BMS-936558)、具有在WHO Drug Information, 第27卷, 第1期, 第68-69页(2013)中描述的结构并且包含在图7中所示的重链和轻链氨基酸序列的人IgG4 mAb、pidilizumab、人源化单克隆抗体、AMP-224和AMP-514；描述于WO2008/156712的人源化抗体h409A11、h409A16和h409A17；以及由MedImmune正在开发的AMP-514。
结合到人PD-L1并且可用于治疗方法、药物和公开的用途的mAb的实例描述于WO2013/019906、WO2010/077634 A1和美国专利号8383796。在治疗方法、药物和公开的用途中可用作PD-1拮抗剂的特异性抗人PD-L1 mAb包括BMS-936559、西米普利单抗、MEDI4736、MSB0010718C和分别包含WO2013/019906的SEQ ID NO: 24和SEQ ID NO: 21的重链和轻链可变区的抗体。
可用于任何治疗方法、药物和公开的用途的其它PD-1拮抗剂包括特异性结合到PD-1或PD-L1(并优选特异性结合到人PD-1或人PD-L1)的免疫粘附素，例如，含有与恒定区(例如免疫球蛋白分子的Fc区)融合的PD-L1或PD-L2的细胞外或PD-1结合部分的融合蛋白。特异性结合到PD-1的免疫粘附素分子的实例描述于WO2010/027827和WO2011/066342。在本文所述的治疗方法、药物和用途中可用作PD-1拮抗剂的特定融合蛋白包括AMP-224 (也称为B7-DCIg)，其是PD-L2-FC融合蛋白并且结合到人PD-1。
治疗方法、药物和公开的用途提供了PD-1拮抗剂作为单克隆抗体或其抗原结合片段，其包含：(a)轻链CDR SEQ ID NO: 1、2和3和重链CDR SEQ ID NO: 4、5和6；或(b)轻链CDR SEQ ID NO: 7、8和9和重链CDR SEQ ID NO: 10、11和12。
治疗方法、药物和公开的用途提供了PD-1拮抗剂作为单克隆抗体或其抗原结合片段，其特异性结合到人PD-1并且包含(a)包含EQ ID NO:13或其变体的重链可变区，和(b)包含选自SEQ ID NO: 15或其变体；SEQ ID NO: 16或其变体；和SEQ ID NO: 17或其变体的氨基酸序列的轻链可变区。重链可变区序列的变体与参考序列相同，除了在构架区(即CDR之外)具有至多17个保守氨基酸取代，并优选在构架区中具有少于十个、九个、八个、七个、六个或五个保守氨基酸取代。轻链可变区序列的变体与参考序列相同，除了在构架区(即CDR之外)具有至多五个保守氨基酸取代，并优选在构架区中具有少于四个、三个或两个保守氨基酸取代。
用于任何治疗方法、药物和公开的用途的PD-1拮抗剂可以是单克隆抗体，其特异性结合到人PD-1并且包含(a)包含EQ ID NO: 14的重链和(b)包含EQ ID NO: 18、SEQ IDNO: 19或SEQ ID NO: 20的轻链。
治疗方法、药物和公开的用途提供了PD-1拮抗剂作为单克隆抗体，其特异性结合到人PD-1并且包含(a)包含EQ ID NO: 14的重链和(b)包含EQ ID NO:18的轻链。
下表2提供用于治疗方法、药物和公开的用途的示例性抗PD-1 mAb的氨基酸序列的列表，并且序列示于图1-5B中。
表2. 示例性抗人PD-1单克隆抗体
本文所用的“PD-L1”或“PD-L2”表达是指在细胞表面上指定PD-L蛋白质或细胞或组织内指定PD-L mRNA的任何可检测水平的表达。PD-L蛋白质表达可以在肿瘤组织切片的IHC测定中用诊断性PD-L抗体检测或通过流式细胞术检测。或者，肿瘤细胞的PD-L蛋白质表达可以通过正电子发射断层扫描(PET)成像，使用特异性结合到所需PD-L靶(例如PD-L1或PD-L2)的结合剂(例如抗体片段、亲和体等)检测。用于检测和测量PD-L mRNA表达的技术包括RT-PCR和实时定量RT-PCR。
已经描述了在肿瘤组织切片的IHC测定中定量PD-L1蛋白质表达的若干方法。例如参见Thompson, R. H.等人, PNAS 101(49): 17174-17179 (2004); Thompson, R. H. 等人, Cancer Res. 66: 3381-3385 (2006); Gadiot, J. 等人, Cancer 117: 2192-2201(2011); Taube, J. M. 等人, Sci Transl Med 4:127-37 (2012); 和Toplian, S. L.等人, New Eng. J Med. 366(26): 2443-2454 (2012)。
一种方法采用对PD-L1表达阳性或阴性的简单二元终点，其中阳性结果根据表现出细胞表面膜染色的组织学证据的肿瘤细胞的百分比定义。当PD-L1表达为总肿瘤细胞的至少1%，并优选5%时，肿瘤组织切片计数为对PD-L1表达阳性。
在另一种方法中，肿瘤组织切片中的PD-L1表达在肿瘤细胞以及浸润免疫细胞中定量，所述浸润免疫细胞主要包含淋巴细胞。将表现出膜染色的肿瘤细胞和浸润免疫细胞的百分比分别定量为<5%，5-9%，并随后以10%增量至100%。对于肿瘤细胞，如果评分<5%评分则PD-L1表达记作阴性，并且如果评分≥5%则记作阳性。免疫浸润物中的PD-L1表达报道为半定量测量，称为调整炎症评分(AIS)，其通过将膜染色细胞的百分比乘以浸润强度来确定，其分级为无(0)、轻微(1分，罕见淋巴细胞)、中度(2分，肿瘤被淋巴组织细胞聚集体病灶浸润)或严重(3分，扩散浸润)。如果AIS≥5，则肿瘤组织切片对于免疫浸润物的PD-L1表达计数为阳性。
PD-L mRNA表达水平可以与一种或多种常用于定量RT-PCR的参考基因(例如泛素C)的mRNA表达水平进行比较。
在一些情况下，基于与适当对照的PD-L1表达(蛋白质和/或mRNA)水平的比较，确定恶性细胞和/或肿瘤内浸润免疫细胞的PD-L1表达(蛋白质和/或mRNA)水平为“过表达”或“升高”。例如，对照PD-L1蛋白质或mRNA表达水平可以是在相同类型的非恶性细胞中或在匹配的正常组织(即非恶性组织)的切片中定量的水平。如果肿瘤样品中的PD-L1蛋白质(和/或PD-L1 mRNA)比对照高至少10%、20%或30%，则优选确定该样品中的PD-L1表达升高。
“派姆单抗生物仿制药”是指由Merck & Co., Inc. d.b.a. Merck Sharp andDohme (MSD)以外的实体制造的生物产品，并且其被任何国家的管理机构批准作为派姆单抗生物仿制药上市。派姆单抗生物仿制药可以包括派姆单抗变体或具有与派姆单抗相同氨基酸序列的抗体作为原料药。
本文所用的“派姆单抗变体”是指包含与派姆单抗相同的重链和轻链序列的单克隆抗体，除了在位于轻链CDR之外的位置上有三个、两个或一个保守氨基酸取代，以及在位于重链CDR之外的六个、五个、四个、三个、两个或一个保守氨基酸取代，例如变体位置位于FR区和/或恒定区。换句话说，派姆单抗和派姆单抗变体包含相同的CDR序列，但由于在其全长轻链和重链序列中的不超过三个或六个其它位置分别具有保守氨基酸取代而彼此不同。派姆单抗变体就以下性质而言与派姆单抗基本上相同：对PD-1的结合亲和力和阻断PD-L1和PD-L2各自与PD-1结合的能力。
患者/癌症/应答定义。本文所用的“RECIST 1.1应答标准”是指在Eisenhauer等人, E.A.等人, Eur. J. Cancer 45: 228-247 (2009)中阐述的定义，其用于靶损伤或非靶损伤，视情况基于其中测量应答的背景。
当提及对用本文所述组合疗法的治疗的特异性抗肿瘤应答时，“应答患者”是指患者表现出抗肿瘤应答。
“持续应答”是指在停止用本文所述的治疗剂或组合疗法治疗后的持续治疗作用。在一些情况下，持续应答具有至少与治疗持续时间相同的持续时间，或为治疗持续时间的至少1.5、2.0、2.5或3倍。
“组织切片”是指组织样品的单个部分或片，例如从正常组织或肿瘤的样品切割的组织的薄片。
本文所用的“治疗(treat)”或“治疗(treating)”癌症是指给予患有癌症或诊断患有癌症的受试者PD-1拮抗剂、乐伐替尼或其药学上可接受的盐和E7386或其药学上可接受的盐的组合疗法，以实现至少一种积极治疗作用，例如减少癌细胞的数量、减小肿瘤尺寸、减少癌细胞浸润到外周器官的速率或减少肿瘤转移或肿瘤生长的速率。癌症中的积极治疗作用可以用许多方式来测量(参见W. A. Weber, J. Nucl. Med. 50:1S-10S (2009))。例如，关于肿瘤生长抑制，根据NCI标准，T/C≤42%是抗肿瘤活性的最小水平。T/C<10%被认为是高抗肿瘤活性水平，其中T/C (%)=治疗的中值肿瘤体积/对照的中值肿瘤体积×100。在一些情况下，使用RECIST 1.1标准或irRC (二维或一维)评估对本文所述的组合疗法的应答，并且通过乐伐替尼或其药学上可接受的盐、(6S,9aS)-N-苄基-8-({6-[3-(4-乙基哌嗪-1-基)氮杂环丁烷-1-基]吡啶-2-基}甲基)-6-(2-氟-4-羟基苄基)-4,7-二氧代-2-(丙-2-烯-1-基)六氢-2H-吡嗪并[2,1-c][1,2,4]三嗪-1(6H)-甲酰胺(E7386)或其药学上可接受的盐和PD-1拮抗剂的组合实现的治疗是PR、CR、OR、PFS、DFS和OS中的任一种。PFS(也称为“肿瘤进展时间”)指示治疗期间和之后癌症不生长的时间长度，并且包括患者经历CR或PR的时间量以及患者经历SD的时间量。DFS是指在治疗期间和之后患者保持无疾病的时间长度。OS是指与未治疗的(naive)或未治疗的(untreated)个体或患者相比，预期寿命延长。在一些情况下，对乐伐替尼或其药学上可接受的盐、(6S,9aS)-N-苄基-8-({6-[3-(4-乙基哌嗪-1-基)氮杂环丁烷-1-基]吡啶-2-基}甲基)-6-(2-氟-4-羟基苄基)-4,7-二氧代-2-(丙-2-烯-1-基)六氢-2H-吡嗪并[2,1-c][1,2,4]三嗪-1(6H)-甲酰胺(E7386)或其药学上可接受的盐和PD-1拮抗剂的组合的应答是PR、CR、PFS、DFS、OR和OS中的任何一个，其使用RECIST1.1应答标准评估。有效治疗癌症患者的所公开的组合的治疗方案可以根据多种因素而变化，例如患者的疾病状态、年龄和体重以及疗法在受试者中引发抗癌应答的能力。治疗方法、药物和公开的用途可能不能在每个受试者中有效实现积极治疗作用，它们应该在统计学上显著数量的受试者中有效实现积极治疗作用，如通过本领域已知的任何统计学检验所确定的，例如Student’s t检验、chi2检验、根据Mann和Whitney的U检验、Kruskal-Wallis检验(H检验)、Jonckheere-Terpstra检验和Wilcoxon检验。
术语“治疗方案”、“给药方案”和“给药方案”可互换使用，是指乐伐替尼或其药学上可接受的盐、(6S,9aS)-N-苄基-8-({6-[3-(4-乙基哌嗪-1-基)氮杂环丁烷-1-基]吡啶-2-基}甲基)-6-(2-氟-4-羟基苄基)-4,7-二氧代-2-(丙-2-烯-1-基)六氢-2H-吡嗪并[2,1-c][1,2,4]三嗪-1(6H)-甲酰胺(E7386)或其药学上可接受的盐和PD-1拮抗剂的组合中每种治疗剂的给药剂量和时机。
“肿瘤”当应用于诊断患有或怀疑患有癌症的受试者时，是指任何尺寸的恶性或潜在恶性瘤或组织块，并且包括原发性肿瘤和继发性瘤。实体瘤是通常不含囊肿或液体区的组织的异常生长或块。不同类型的实体瘤以形成它们的细胞类型来命名。实体瘤的实例是肉瘤、癌和淋巴瘤。
“肿瘤负荷”也称为“肿瘤负载”，是指分布在全身的肿瘤材料的总量。肿瘤负荷是指全身(包括淋巴结和骨髓)癌细胞的总数或一个或多个肿瘤的总尺寸。肿瘤负荷可以通过本领域已知的各种方法来确定，例如通过在从受试者中去除后(例如使用卡尺)测量一个或多个肿瘤的尺寸，或在体内时使用成像技术(例如超声、骨扫描、计算机断层摄影(CT)或磁共振成像(MRI)扫描)来测量一个或多个肿瘤的尺寸。
术语“肿瘤尺寸”是指肿瘤的总尺寸，其可以作为肿瘤的长度和宽度测量。肿瘤尺寸可以通过本领域已知的各种方法来确定，例如通过在从受试者中去除时测量一个或多个肿瘤的尺寸，例如使用卡尺，或在体内时使用成像技术，例如骨扫描、超声、CT或MRI扫描。
“一维irRC”是指在Nishino M, Giobbie-Hurder A, Gargano M, Suda M,Ramaiya NH, Hodi FS. “Developing a Common Language for Tumor Response toImmunotherapy: Immune-related Response Criteria using Unidimensionalmeasurements,” Clin. Cancer Res. 2013, 19(14): 3936–3943)中描述的标准集合。这些标准利用每个损伤的最长直径(cm)。
“多RTK抑制剂”是指抑制至少每种以下RTK的受体酪氨酸激酶(RTK)活性的小分子化合物：(i)VEGFR2，和(ii)至少一种选自FGFR1、2、3和4的FGFR。示例性多RTK抑制剂是乐伐替尼或其药学上可接受的盐。
β-联蛋白作为Wnt信号转导的介体，结合到转录因子Tcf/Lef (T细胞因子/淋巴细胞增强因子)，促进参与Wnt信号转导的各种基因(细胞周期蛋白D1、c-Myc等)的表达，并控制细胞的增殖和分化(He等人, 1998 Science 281: 1509-1512; Kolligs等人, Mol. Cell. Biol. 19: 5696-5706, 1999; Crawford等人, Oncogene 18: 2883-2891, 1999;Shtutman等人, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 11: 5522-5527, 1999; Tetsu和McCormick, 1999 Nature, 398: 422-426)。
CBP (环AMP应答元件结合蛋白(CREB)结合蛋白)直接与β-联蛋白在CREB结合结构域中相互作用，并促进Tcf/Lef的转录激活(Ken-Ichi Takemaru and Randall T. Moon,2000, J. Cell. Biol. 149(2): 249-254)。CBP/β-联蛋白抑制剂没有特别限制，只要它抑制CBP和联蛋白(特别是β-联蛋白)之间的相互作用，并且作为抑制β-联蛋白复合物的基因表达的结果，优选其中抑制β-联蛋白和CBP的结合的实施方案。
CBP/β-联蛋白的抑制可以通过本身已知的结合测定(放射性结合测定等)、报道基因测定方法和其它体外和体内测定等来测量。抑制可以通过用在WO 2009/148192中描述的报道基因测定方法测量Wnt信号转导的基因表达来证实。
本发明的CBP/β-联蛋白抑制剂没有特别限制，只要它如上所定义。优选具有CBP/β-联蛋白抑制活性的α-螺旋模拟化合物，并且其实例包括如在WO 2003/031448、WO 2004/093828、WO 2005/116032、WO 2009/148192、WO 2010/044485、WO 2010/128685、WO 2012/115286等中描述的α-螺旋模拟化合物、其药学上可接受的盐等。示例性CBP/β-联蛋白抑制剂包括(6S,9aS)-N-苄基-8-({6-[3-(4-乙基哌嗪-1-基)氮杂环丁烷-1-基]吡啶-2-基}甲基)-6-(2-氟-4-羟基苄基)-4,7-二氧代-2-(丙-2-烯-1-基)六氢-2H-吡嗪并[2,1-c][1,2,4]三嗪-1(6H)-甲酰胺(E7386)。
本文公开的组合疗法中的PD-1拮抗剂、乐伐替尼和E7386各自可以单独或以药物/制剂(本文也称为药物组合物)给药，根据标准药学实践，所述药物/制剂包含治疗剂和一种或多种药学上可接受的载体、赋形剂和稀释剂。每种治疗剂可以通过配制乐伐替尼或其药学上可接受的盐、抗PD-1抗体和/或E7386或其药学上可接受的盐来制备，可以同时或分开给药。此外，制剂可以放置在单一包装中，以提供所谓的试剂盒制剂。
乐伐替尼或其药学上可接受的盐可以通过在参考文献17中所述的方法生产。药学上可接受的盐的实例包括与无机酸的盐、与有机酸的盐、与无机碱的盐、与有机碱的盐和与酸性或碱性氨基酸的盐。与无机酸的盐的优选实例包括与盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等形成的盐。与有机酸的盐的优选实例包括与乙酸、琥珀酸、富马酸、马来酸、酒石酸、柠檬酸、乳酸、硬脂酸、苯甲酸、甲磺酸、乙磺酸、对甲苯磺酸等形成的盐。与无机碱的盐的优选实例包括碱金属盐，例如钠盐和钾盐；碱土金属盐，例如钙盐和镁盐；铝盐；和铵盐。与有机碱的盐的优选实例包括与二乙胺、二乙醇胺、葡甲胺、N,N-二苄基乙二胺等的盐。与酸性氨基酸的盐的优选实例包括与天冬氨酸、谷氨酸等的盐。与碱性氨基酸的盐的优选实例包括与精氨酸、赖氨酸、鸟氨酸等的盐。更优选的药学上可接受的盐是与有机酸的盐，并且尤其优选的药学上可接受的盐是与甲磺酸的盐。
在本文公开的组合疗法中，PD-1拮抗剂、乐伐替尼或其药学上可接受的盐和E7386或其药学上可接受的盐可以同时(即在同一药物中)、并行(即以任何顺序一个紧接另一个地在分开的药物中给药)或以任何顺序依次给药。当组合疗法中的治疗剂呈不同剂型(一种药剂为片剂或胶囊并且另一种药剂为无菌液体)和/或以不同给药时间表给药时，依次给药特别有用，例如，化疗剂至少每天给药，并且生物治疗剂较不频繁地给药，例如每周一次、每两周一次或每三周一次。
在一些情况下，在给予PD-1拮抗剂和/或CBP/β-联蛋白抑制剂之前给予乐伐替尼或其药学上可接受的盐，而在其它情况下，在给予PD-1拮抗剂和/或E7386或其药学上可接受的盐之后给予多RTK抑制剂。
在一些情况下，组合疗法中的至少一种治疗剂使用相同的剂量方案(剂量、频率和治疗的持续时间)给药，当药剂用作用于治疗相同癌症的单一疗法时通常采用相同的剂量方案。在其它情况下，患者接受组合疗法中至少一种治疗剂的总量比该药剂用作单一疗法时低，例如，剂量较小、给药频率较低和/或治疗持续时间较短。
在本文公开的组合疗法中的每种小分子治疗剂可以以固体制剂的形式口服给药，例如片剂、颗粒、细颗粒、粉末或胶囊，或以液体、胶冻、糖浆等的形式。在本文公开的组合疗法中的每种小分子治疗剂可以胃肠外给药，包括静脉内、肌内、腹膜内、皮下、直肠、局部和经皮给药途径。
本文公开的组合疗法可以在手术之前或之后用于去除肿瘤，并且可以在放射疗法之前、期间或之后使用。
在一些情况下，将本文公开的组合疗法给予先前未用生物治疗剂或化疗剂治疗的患者，即未经治疗的。在其它情况下，将组合疗法给予在用生物治疗剂或化疗剂的在先疗法后未能实现持续应答的患者，即，经历过治疗。
本文公开的组合疗法通常用于治疗足够大以至于通过触诊或通过本领域公知的成像技术(例如磁共振成像(MRI)、超声或计算机化轴向断层扫描(CAT)扫描)发现的肿瘤。
本文公开的组合疗法优选给予患有对PD-L1表达测试阳性的癌症的人患者。优选在IHC测定中，在从患者去除的肿瘤样品的FFPE或冷冻组织切片上，使用诊断性抗人PD-L1抗体或其抗原结合片段检测PD-L1表达。通常，患者的医生将安排诊断测试以确定在用PD-1拮抗剂、E7386或其药学上可接受的盐和乐伐替尼或其药学上可接受的盐开始治疗之前从患者去除的肿瘤组织样品中的PD-L1表达，但设想医生可以在治疗开始后的任何时间安排第一或随后的诊断测试，例如在治疗周期完成后。
选择用于本文公开的组合疗法的剂量方案(本文也称为给药方案)取决于若干因素，包括实体的血清或组织周转率、症状水平、实体的免疫原性和所治疗个体中靶细胞、组织或器官的可接近性。优选地，剂量方案使递送至患者的每种治疗剂的量最大化，与可接受的副作用水平一致。因此，组合中每种生物治疗剂和化疗剂的剂量和给药频率部分取决于具体的治疗剂、所治疗癌症的严重程度和患者特征。选择合适剂量的抗体、细胞因子和小分子的指导是可用的。例如参见Wawrzynczak (1996) Antibody Therapy, Bios ScientificPub. Ltd, Oxfordshire, UK; Kresina (编辑) (1991) Monoclonal Antibodies,Cytokines and Arthritis, Marcel Dekker, New York, NY; Bach (编辑) (1993)Monoclonal Antibodies and Peptide Therapy in Autoimmune Diseases, MarcelDekker, New York, NY; Baert等人(2003) New Engl. J. Med. 348: 601-608; Milgrom等人(1999) New Engl. J. Med. 341: 1966-1973; Slamon等人(2001) New Engl. J. Med. 344: 783-792; Beniaminovitz等人(2000) New Engl. J. Med. 342: 613-619;Ghosh等人(2003) New Engl. J. Med. 348: 24-32; Lipsky等人(2000) New Engl. J. Med. 343: 1594-1602; PHYSICIANs' Desk Reference 2003 (Physicians' DeskReference, 第57版); Medical Economics Company; ISBN: 1563634457; 第57版(2002年11月)。合适的剂量方案的确定可以由临床医生例如使用本领域已知或怀疑影响治疗或预测影响治疗的参数或因素进行，并且将取决于例如患者的临床史(例如，先前的疗法)、待治疗的癌症的类型和阶段以及对组合疗法中一种或多种治疗剂的应答的生物标志物。
本文公开的组合疗法中的生物治疗剂(即PD-1拮抗剂、乐伐替尼或其药学上可接受的盐和E7386或其药学上可接受的盐)可以通过连续输注或以例如每日、每隔一天、每周三次或每周、两周、三周、每月、每两个月一次等的间隔剂量给药。每周总剂量通常为至少0.05 μg/kg、0.2 μg/kg、0.5 μg/kg、1 μg/kg、10 μg/kg、100 μg/kg、0.2 mg/kg、1.0 mg/kg、2.0 mg/kg、10 mg/kg、25 mg/kg、50 mg/kg体重或更多。例如参见Yang等人(2003) New Engl. J. Med. 349: 427-434; Herold等人(2002) New Engl. J. Med. 346: 1692-1698; Liu等人(1999) J.Neurol. Neurosurg. Psych. 67: 451-456; Portielji 等人(2003) Cancer Immunol. Immunother. 52: 133-144。西米普利单抗-rwlc (LIBTAYO®)是另一种PD-1拮抗剂。它可以静脉内给药，其中350 mg在30分钟内给药，每3周一次(Q3W)。
乐伐替尼或其药学上可接受的盐的剂量可以根据症状程度、患者的年龄、性别和体重、敏感性差异、给药途径、时间和给药间隔、药物制剂类型等适当地选择。通常，在对成人(60 kg体重)进行口服给药的情况下，剂量为每天1-600 mg，优选5-400 mg，更优选5-200mg。该剂量可以一次给予或分成更小的剂量每天提供2-3次。
在组合疗法中在采用抗人PD-1 mAb作为PD-1拮抗剂的一些情况下，给药方案将包含在整个疗程中以1、2、3、5或10 mg/kg的剂量，以约14天(±2天)或约21天(±2天)或约30天(±2天)的间隔给予抗人PD-1 mAb。抗PD-1抗体的剂量可以采用与上述相同的方式适当选择。通常，在对成年人(60 kg体重)进行静脉内给药的情况下，剂量可以是2 mg/kg，在6周的周期中每3周一次的时间表(总共2个剂量)。抗体可以以适当的间隔给药1-10个周期。
在组合疗法中在采用抗人PD-1 mAb作为PD-1拮抗剂的其它情况下，给药方案将包含以约0.005 mg/kg至约10 mg/kg的剂量给予抗人PD-1 mAb，伴随患者内剂量递增。剂量之间的间隔可以逐渐缩短，例如，第一和第二剂量之间约30天(±2天)，第二和第三剂量之间约14天(±2天)。在某些实施方案中，对于第二剂量之后的剂量，给药间隔为约14天(±2天)。
在具体情况下，可以给予受试者包含本文所述的任何PD-1拮抗剂的药物的静脉内(IV)输注。
在一些情况下，组合疗法中的PD-1拮抗剂优选为纳武单抗，其以选自以下的剂量静脉内给药：1 mg/kg Q2W、2 mg/kg Q2W、3 mg/kg Q2W、5 mg/kg Q2W、10 mg Q2W、1 mg/kgQ3W、2 mg/kg Q3W、3 mg/kg Q3W、5 mg/kg Q3W和10 mg Q3W。PD-1拮抗剂还可以是以350 mgQ3W的剂量静脉内给药的西米普利单抗-rwlc。
在一些情况下，组合疗法中的PD-1拮抗剂优选为派姆单抗、派姆单抗变体或派姆单抗生物仿制药，其以选自以下的剂量在液体药物中给药：1 mg/kg Q2W、2 mg/kg Q2W、3mg/kg Q2W、5 mg/kg Q2W、10 mg Q2W、1 mg/kg Q3W、2 mg/kg Q3W、3 mg/kg Q3W、5 mg/kgQ3W、10 mg Q3W和这些剂量中任何一个的固定剂量等效物，即例如200 mg Q3W和400 mgQ6W。在一些情况下，提供了派姆单抗作为液体药物，其包含在10 mM组氨酸缓冲液(pH 5.5中)的25 mg/ml派姆单抗、7% (w/v)蔗糖、0.02% (w/v)聚山梨醇酯80。
在一些情况下，所选剂量的派姆单抗通过在25-40分钟之间或约30分钟的时间段内IV输注来给药。
可以通过这些药剂中的一种或两者的剂量递增或剂量递减来鉴定与乐伐替尼或其药学上可接受的盐(例如，甲磺酸乐伐替尼)和CBP/β-联蛋白抑制剂(例如，E7386)组合的派姆单抗的最佳剂量。在一些情况下，组合疗法包含21天的治疗周期，其中派姆单抗以200mg Q3W通过IV (或400 mg Q6W通过IV)给药，CBP/联蛋白抑制剂、甲磺酸乐伐替尼以(a) 24mg/天口服，(b) 20 mg/天口服或(c) 14 mg/天口服给药，各自以乐伐替尼计。
患者可以首先用日剂量的CBP/β-联蛋白抑制剂、200 mg派姆单抗Q3W通过IV (或400 mg Q6W通过IV)和24 mg (以乐伐替尼计)甲磺酸乐伐替尼/天口服治疗，直到观察到至少一个DLT，并随后可以将甲磺酸乐伐替尼的剂量减少到20或14 mg (各自以乐伐替尼计)/天，而派姆单抗剂量可以持续在200 mg 派姆单抗 Q3W (或400 mg Q6W通过IV)，并且CBP/β-联蛋白抑制剂可以持续在相同的日剂量或减少。
作为给药方案的实例，乐伐替尼或其药学上可接受的盐可以与水一起在21天周期中每天约相同的时间口服给药，每天一次，有或没有食物。乐伐替尼或其药学上可接受的盐可以以4 mg和10 mg (各自以乐伐替尼计)胶囊提供。在每个周期的第一天(D1)，可以在完成派姆单抗给药和/或E7386或其药学上可接受的盐给药后约1小时内给予乐伐替尼或其药学上可接受的盐。派姆单抗可以作为无菌的、不含防腐剂的、白色至灰白色的冻干粉末在一次性小瓶中提供。每个小瓶可以重构和稀释用于静脉内输注。每2 mL重构的溶液可以含有约50 mg派姆单抗。在一些情况下，派姆单抗可以作为无菌、无防腐剂、澄清至轻微乳光、无色至轻微黄色溶液提供，其需要稀释用于静脉内输注。每个小瓶可以含有在4 mL溶液中的100 mg派姆单抗。每1 mL溶液可以含有25 mg派姆单抗。派姆单抗可以200 mg的剂量以30分钟静脉内输注Q3W (例如25分钟至40分钟)给药。
在制备口服固体制剂的情况下，可以向主要组分(即式(I)表示的化合物或其药学上可接受的盐、CBP/β-联蛋白抑制剂和/或抗PD-1抗体)中加入药学上可接受的媒介物，以及根据需要加入粘结剂、崩解剂、润滑剂、着色剂、调味剂等，随后根据常规方法制备片剂、颗粒、细颗粒、粉末、胶囊剂等。媒介物的实例包括乳糖、玉米淀粉、白色软糖、葡萄糖、山梨醇、结晶纤维素和二氧化硅。粘结剂的实例包括聚乙烯醇、乙基纤维素、甲基纤维素、阿拉伯胶、羟丙基纤维素和羟丙基甲基纤维素。润滑剂的实例包括硬脂酸镁、滑石和二氧化硅。着色剂的实例包括二氧化钛、三氧化二铁、黄色三氧化二铁、胭脂虫红、胭脂红和核黄素。调味剂的实例包括可可粉、抗坏血酸、酒石酸、薄荷油、冰片和肉桂粉。这些片剂和颗粒剂可以根据需要进行包衣。
在一些情况下，用组合疗法治疗患者持续至少24周，例如八个3周周期。在一些情况下，用组合疗法的治疗持续到患者表现出PD或CR的证据。
在一些情况下，如果患者已经被诊断患有肾细胞癌(RCC)、结肠直肠癌(CRC)、肝细胞癌(HCC)、黑素瘤、膀胱癌、尿道上皮癌、乳腺癌、非小细胞肺癌(NSCLC)、子宫内膜癌或头颈的鳞状细胞癌，则选择该患者用本文公开的组合疗法进行治疗。
用于癌症的“治疗药物”或“组合疗法”包含免疫检查点抑制剂(例如，抗PD-1抗体)、乐伐替尼或其药学上可接受的盐和E7386或其药学上可接受的盐。可以配制药物使得3种药物中的每一种是分开的，并且单独地或以三种药物中的两种的组合给药，或通过适合于期望的给药的方法一起给药，例如，口服、经鼻、粘膜、直肠、阴道、局部、静脉内、腹膜内、皮内、皮下和肌内给药等。
确定给予治疗有效量的癌症组合疗法的剂量以及因此确定其时机是本领域普通技术人员充分了解的，所述组合疗法含有免疫检查点抑制剂、乐伐替尼或其药学上可接受的盐和E7386或其药学上可接受的盐的组合。例如，初始有效量可以从细胞培养或其它体外测定来假定。可以设定剂量以产生循环浓度或组织浓度，例如IC50浓度等，其通过细胞培养测定和/或在动物模型中确定。
根据治疗条件和治疗药物选择给药方法。免疫检查点抑制剂、乐伐替尼或其药学上可接受的盐和E7386或其药学上可接受的盐可以通过各种方法给药。例如，一种或多种组分可以通过任何以下途径给予受试者：皮下、静脉内、腹膜内、肌内和全身给药，并且在一些情况下，直接注射到特定器官或肿瘤等。免疫检查点抑制剂、乐伐替尼或其药学上可接受的盐和E7386或其药学上可接受的盐可以通过单一途径，或如本文所述同时或依次以同时的若干途径给药。
E7386或其药学上可接受的盐可以每天一次、每天两次、每天若干次，或进一步地，每天多次给药，这尤其取决于治疗适应症和处方医师的判断。
免疫检查点抑制剂、乐伐替尼或其药学上可接受的盐和E7386或其药学上可接受的盐的提供治疗作用所必需的量可以根据常规程序针对特定目的凭经验确定。通常，当为了治疗目的而给药时，以药理学有效剂量给予细胞。“药理学有效量”或“药理学有效剂量”是指足以产生所需生理作用或能够实现所需结果(例如减少或去除病症或疾病等的一种或多种症状或适应症以治疗特定病症或疾病状态)的量。
组合疗法可以是免疫检查点抑制剂、乐伐替尼或其药学上可接受的盐和E7386或其药学上可接受的盐的组合，其可以与其它癌症治疗进一步组合，例如手术切除、放射疗法、化学疗法、免疫疗法和支持性疗法(例如，止痛剂、利尿剂、抗利尿剂、抗病毒药物、抗生素、营养补充剂、贫血治疗、凝血治疗、骨治疗以及精神病理学和心理治疗)等。
本文公开的这些和其它方面(包括下面列出的示例性具体治疗方法、药物和用途)将从本文包含的教导中显而易见。
具体治疗方法、药物和用途
[1]. 用于治疗人受试者的癌症的方法，所述方法包括给予所述个体组合疗法，所述组合疗法包含：
(i)程序性死亡1蛋白质(PD-1)的拮抗剂；
(ii)具有以下结构的乐伐替尼：
或其药学上可接受的盐；和
(iii)具有以下结构的(6S,9aS)-N-苄基-8-({6-[3-(4-乙基哌嗪-1-基)氮杂环丁烷-1-基]吡啶-2-基}甲基)-6-(2-氟-4-羟基苄基)-4,7-二氧代-2-(丙-2-烯-1-基)六氢-2H-吡嗪并[2,1-c][1,2,4]三嗪-1(6H)-甲酰胺(E7386)：
或其药学上可接受的盐，
其中所述PD-1拮抗剂不是阿特珠单抗。
[2]. [1]所述的方法，其中所述癌症是实体瘤。
[3]. [1]所述的方法，其中所述癌症选自：肾细胞癌(RCC)、结肠直肠癌(CRC)、肝细胞癌(HCC)、黑素瘤、膀胱癌、乳腺癌和非小细胞肺癌(NSCLC)。
[4]. [1]所述的方法，其中所述癌症是RCC。
[5]. [1]-[4]中任一项所述的方法，其中所述PD-1拮抗剂是单克隆抗体或其抗原结合片段。
[6]. [1]-[5]中任一项所述的方法，其中所述PD-1拮抗剂是抗PD-1抗体。
[7]. [1]-[6]中任一项所述的方法，其中所述PD-1拮抗剂是派姆单抗或纳武单抗。
[8]. [1]-[7]中任一项所述的方法，其中所述PD-1拮抗剂是派姆单抗。
[9]. [1]-8]中任一项所述的方法，其中乐伐替尼或其药学上可接受的盐每天给药；和派姆单抗每三周一次给药。
[10]. [9]所述的方法，其中乐伐替尼或其药学上可接受的盐以24 mg、20 mg、18mg、12 mg或8 mg的日剂量给药；和派姆单抗每三周一次以200 mg的剂量给予成人或以2mg/kg (至多200 mg)的剂量给予小儿。
[11]. [1]-[10]中任一项所述的方法，其中乐伐替尼或其药学上可接受的盐是甲磺酸乐伐替尼；和E7386或其药学上可接受的盐是E7386。
[12]. 用于治疗癌症的药物组合物，所述组合物包含(6S,9aS)-N-苄基-8-({6-[3-(4-乙基哌嗪-1-基)氮杂环丁烷-1-基]吡啶-2-基}甲基)-6-(2-氟-4-羟基苄基)-4,7-二氧代-2-(丙-2-烯-1-基)六氢-2H-吡嗪并[2,1-c][1,2,4]三嗪-1(6H)-甲酰胺(E7386)或其药学上可接受的盐，其中E7386或其药学上可接受的盐与(a)乐伐替尼或其药学上可接受的盐；和(b)抗PD-1抗体组合给药。
[13]. 用于治疗癌症的药物组合物，所述组合物包含抗PD-1抗体，其中所述抗PD-1抗体与(a)乐伐替尼或其药学上可接受的盐；和(b) (6S,9aS)-N-苄基-8-({6-[3-(4-乙基哌嗪-1-基)氮杂环丁烷-1-基]吡啶-2-基}甲基)-6-(2-氟-4-羟基苄基)-4,7-二氧代-2-(丙-2-烯-1-基)六氢-2H-吡嗪并[2,1-c][1,2,4]三嗪-1(6H)-甲酰胺(E7386)或其药学上可接受的盐组合给药。
[14]. 用于治疗癌症的药物组合物，所述组合物包含乐伐替尼或其药学上可接受的盐，其中乐伐替尼或其药学上可接受的盐与(a) (6S,9aS)-N-苄基-8-({6-[3-(4-乙基哌嗪-1-基)氮杂环丁烷-1-基]吡啶-2-基}甲基)-6-(2-氟-4-羟基苄基)-4,7-二氧代-2-(丙-2-烯-1-基)六氢-2H-吡嗪并[2,1-c][1,2,4]三嗪-1(6H)-甲酰胺(E7386)或其药学上可接受的盐；和(b)抗PD-1抗体组合给药。
[15]. [12]-[14]中任一项所述的药物组合物，其中乐伐替尼或其药学上可接受的盐是甲磺酸乐伐替尼；和E7386或其药学上可接受的盐是E7386。
[16]. [12]-[15]中任一项所述的药物组合物，其中所述癌症是实体瘤。
[17]. [12]-[15]中任一项所述的药物组合物，其中所述癌症选自：肾细胞癌(RCC)、结肠直肠癌(CRC)、肝细胞癌(HCC)、黑素瘤、膀胱癌、尿道上皮癌、乳腺癌、非小细胞肺癌(NSCLC)、子宫内膜癌和头颈的鳞状细胞癌。
[18]. [17]所述的药物组合物，其中所述癌症是RCC。
[19]. [12]-[18]中任一项所述的药物组合物，其中所述PD-1拮抗剂是单克隆抗体或其抗原结合片段。
[20]. [12]-[18]中任一项所述的药物组合物，其中所述PD-1拮抗剂是抗PD-1抗体。
[21]. [12]-[20]中任一项所述的药物组合物，其中所述PD-1拮抗剂是派姆单抗或纳武单抗。
[22]. [12]-[21]中任一项所述的药物组合物，其中所述PD-1拮抗剂是派姆单抗。
[23]. [12]-[22]中任一项所述的药物组合物，其中乐伐替尼或其药学上可接受的盐每天给药；和所述PD-1拮抗剂是派姆单抗并且每三周一次给药。
[24]. [23]所述的药物组合物，其中乐伐替尼或其药学上可接受的盐以24 mg、20mg、18 mg、12 mg或8 mg的日剂量给药；和派姆单抗每三周一次以200 mg的剂量给予成人或以2 mg/kg (至多200 mg)的剂量给予小儿。
[25]. [12]-[24]中任一项所述的药物组合物，其中乐伐替尼或其药学上可接受的盐是甲磺酸乐伐替尼；和E7386或其药学上可接受的盐是E7386。
[26]. [12]-[25]中任一项所述的药物组合物在用于制造用于治疗癌症的药物中的用途。
[27]. 用于治疗癌症的[12]-[25]中任一项所述的药物组合物。
一般方法。分子生物学中的标准方法描述于Sambrook, Fritsch和Maniatis(1982 & 1989年第2版, 2001年第3版) Molecular Cloning, A Laboratory Manual,Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY; Sambrook和Russell (2001) Molecular Cloning, 第3版,Cold Spring Harbor Laboratory Press,Cold Spring Harbor, NY; Wu (1993) Recombinant DNA, 第217卷, Academic Press,San Diego, CA)。标准方法还呈现在Ausbel等人(2001) Current Protocols inMolecular Biology, 第1-4卷, John Wiley and Sons, Inc. New York, NY，其描述了细菌细胞中的克隆和DNA诱变(第1卷)、哺乳动物细胞和酵母中的克隆(第2卷)、糖缀合物和蛋白质表达(第3卷)和生物信息学(第4卷)。
描述了用于蛋白质纯化的方法，包括免疫沉淀、色谱法、电泳、离心和结晶(Coligan等人(2000) Current Protocols in Protein Science, 第1卷, John Wileyand Sons, Inc., New York)。描述了化学分析、化学修饰、翻译后修饰、融合蛋白的生产、蛋白质的糖基化(例如参见Coligan等人(2000) Current Protocols in ProteinScience, 第2卷, John Wiley and Sons, Inc., New York; Ausubel等人(2001)Current Protocols in Molecular Biology, 第3卷, John Wiley and Sons, Inc., NY,NY, 第16.0.5-16.22.17页; Sigma-Aldrich, Co. (2001) Products for Life ScienceResearch, St. Louis, MO; 第45-89页; Amersham Pharmacia Biotech (2001)BioDirectory, Piscataway, N.J., 第384-391页)。描述了多克隆和单克隆抗体的生产、纯化和片段化(Coligan等人(2001) Current Protcols in Immunology, 第1卷, JohnWiley and Sons, Inc., New York; Harlow和Lane (1999) Using Antibodies, ColdSpring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY; Harlow和Lane, 见上)。用于表征配体/受体相互作用的标准技术是可用的(例如参见Coligan等人(2001) CurrentProtocols in Immunology, 第4卷, John Wiley, Inc., New York)。
可以制备单克隆、多克隆和人源化抗体(例如参见Sheperd和Dean (编辑) (2000)Monoclonal Antibodies, Oxford Univ. Press, New York, NY; Kontermann和Dubel(编辑) (2001) Antibody Engineering, Springer-Verlag, New York; Harlow和Lane(1988) Antibodies A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press,Cold Spring Harbor, NY, 第139-243页; Carpenter等人(2000) J. Immunol. 165:6205; He等人(1998) J. Immunol. 160:1029; Tang等人(1999) J. Biol. Chem. 274:27371-27378; Baca等人(1997) J. Biol. Chem. 272:10678-10684; Chothia等人(1989)Nature 342:877-883; Foote和Winter (1992) J. Mol. Biol. 224:487-499; 美国专利号6,329,511)。
抗体人源化的替代方法是使用噬菌体上展示的人抗体文库或转基因小鼠中的人抗体文库(Vaughan等人(1996) Nature Biotechnol. 14: 309-314; Barbas (1995)Nature Medicine 1: 837-839; Mendez等人(1997) Nature Genetics 15: 146-156;Hoogenboom和Chames (2000) Immunol. Today 21: 371-377; Barbas等人(2001) Phage Display: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press, ColdSpring Harbor, New York; Kay等人(1996) Phage Display of Peptides and Proteins: A Laboratory Manual, Academic Press, San Diego, CA; de Bruin等人(1999) Nature Biotechnol. 17: 397-399)。
抗原的纯化对于抗体的产生不是必需的。可以用携带感兴趣的抗原的细胞免疫动物。随后可以从免疫的动物中分离脾细胞，并可以将脾细胞与骨髓瘤细胞系融合以产生杂交瘤(例如参见Meyaard等人(1997)Immunity 7: 283-290; Wright等人(2000) Immunity 13: 233-242; Preston等人, 见上; Kaithamana等人(1999) J. Immunol. 163:5157-5164)。
抗体可以与例如小的药物分子、酶、脂质体、聚乙二醇(PEG)缀合。抗体可用于治疗、诊断、试剂盒或其它目的，并且包括偶联至例如染料、放射性同位素、酶或金属(例如胶态金)的抗体(例如参见Le Doussal等人(1991) J. Immunol. 146: 169-175; Gibellini等人(1998) J. Immunol. 160:3891-3898; Hsing和Bishop (1999) J. Immunol. 162:2804-2811; Everts等人(2002) J. Immunol. 168: 883-889)。
用于流式细胞术的方法(包括荧光激活的细胞分选(FACS))是可用的(例如参见Owens等人(1994) Flow Cytometry Principles for Clinical Laboratory Practice,John Wiley and Sons, Hoboken, NJ; Givan (2001) Flow Cytometry, 第2版; Wiley-Liss, Hoboken, NJ; Shapiro (2003) Practical Flow Cytometry, John Wiley andSons, Hoboken, NJ)。适于修饰例如用作诊断试剂的核酸(包括核酸引物和探针、多肽和抗体)的荧光试剂是可用的(Molecular Probesy (2003) Catalogue, Molecular Probes,Inc., Eugene, OR; Sigma-Aldrich (2003) Catalogue, St. Louis, MO)。
描述了免疫系统组织学的标准方法(例如参见Muller-Harmelink (编辑) (1986)Human Thymus: Histopathology and Pathology, Springer Verlag, New York, NY;Hiatt等人(2000) Color Atlas of Histology, Lippincott, Williams, and Wilkins,Phila, PA; Louis等人(2002) Basic Histology: Text and Atlas, McGraw-Hill, NewYork, NY)。
用于确定例如抗原片段、前导序列、蛋白质折叠、功能结构域、糖基化位点和序列比对的软件包和数据库是可用的(例如参见GenBank, Vector NTI® Suite (Informax,Inc, Bethesda, MD); GCG Wisconsin Package (Accelrys, Inc., San Diego, CA);DeCypher® (TimeLogic Corp., Crystal Bay, Nevada); Menne等人(2000)Bioinformatics 16: 741-742; Menne等人(2000) Bioinformatics Applications Note16: 741-742; Wren等人(2002) Comput. Methods Programs Biomed. 68: 177-181; vonHeijne (1983) Eur. J. Biochem. 133: 17-21; von Heijne (1986) Nucleic Acids Res. 14: 4683-4690)。
表3提供了序列表中序列的简要描述。
表3
实施例
实施例1：
E7386、乐伐替尼和抗PD-1抗体的三重组合的抗肿瘤作用
使用含有10%胎牛血清(FBS)和青霉素/链霉素(各100单位/mL)的Eagle’s极限必需培养基(E-MEM)培养小鼠肾细胞癌细胞系RAG (ATCC号：CCL-142)。使用胰蛋白酶-EDTA从烧瓶中收集对数生长的细胞。离心细胞悬浮液以去除上清液。接着，用Hanks’平衡盐溶液(HBSS)制备浓度为2.5×107个细胞/mL的细胞悬浮液。将细胞悬浮液以0.1 mL的剂量皮下移植到7周龄小鼠(BALB/cAnNCrlCrlj，雌性，Charles River Laboratories Japan Inc.)中每只小鼠身体的右侧。移植后八(8)天，使用电子数字卡尺(Digimatic (TM) Caliper;Mitutoyo Corporation)测量感兴趣的肿瘤的短径和长径。使用以下公式计算肿瘤体积TV和RTV。
等式1：肿瘤体积TV (mm3)=长径(mm)×短径(mm)×短径(mm) /2。
等式2：相对肿瘤体积RTV=第n天的TV/第1天的TV。
基于第一天给药时的肿瘤体积，进行分组使得肿瘤体积的平均值几乎相同。使用3mM HCl制备1 mg/ml乐伐替尼溶液，并以0.2 mL/20 g小鼠体重的剂量口服给药，每天一次，持续28天。将已经用PBS稀释的0.2 mL含有1.0 mg/mL抗小鼠-PD-1抗体(Clone：RMP1-14，BioXCell，目录号：BE0146)的给药样品腹膜内给药(以200 μg/小鼠的剂量)，每周两次，共8次(第1天、第4天、第8天、第11天、第15天、第18天、第22天和第25天，其中分组的那天设定为第1天)。使用0.1 M HCl制备2.5 mg/ml E7386溶液，并以0.2 mL/20 g小鼠体重的剂量口服给药，每天一次，持续28天。对照组不进行任何给药。包括8只小鼠的每个组用于进行实验。每周两次(第1天、第4天、第8天、第11天、第15天、第18天、第22天、第25天和第29天)，确定对照组、乐伐替尼给药组，抗小鼠-PD-1抗体给药组、乐伐替尼+抗小鼠-PD-1抗体给药组、E7386+乐伐替尼给药组和三重组合组的相应的肿瘤体积(TV)。通过对肿瘤体积进行对数转换获得的值用于通过重复测量的Dunnet’s多重比较进行统计学分析。E7386是(6S,9aS)-N-苄基-8-({6-[3-(4-乙基哌嗪-1-基)氮杂环丁烷-1-基]吡啶-2-基}甲基)-6-(2-氟-4-羟基苄基)-4,7-二氧代-2-(丙-2-烯-1-基)六氢-2H-吡嗪并[2,1-c][1,2,4]三嗪-1(6H)-甲酰胺。
在皮下(s.c.) RAG移植模型中，E7386、乐伐替尼和抗小鼠PD-1抗体的三重组合表现出比任一种双组合(即，乐伐替尼+抗PD-1抗体组合或乐伐替尼+E7386组合)或每种药剂当作为单一疗法单独给药时显著更高的抗肿瘤作用。例如，在第29天，三重组合组的肿瘤体积为对照组和E7386组的小于1/200。三重组合的肿瘤体积分别为乐伐替尼组和抗PD-1抗体组的小于1/30和1/120。此外，三重组合组的肿瘤体积分别为乐伐替尼+抗PD-1抗体组合组以及E7386+乐伐替尼组合组的小于1/9和1/17。
在CR率方面，用三重组合组(乐伐替尼、派姆单抗和E7386)观察到的比率优于用其它治疗组观察到的比率(CR率：在对照组、乐伐替尼组、抗PD-1抗体组、E7386组、乐伐替尼+抗PD-1抗体组、E7386+乐伐替尼组和三重组合组中，分别是8只小鼠中的0、0、2、1、4、1和7只)。
肿瘤体积的每日变化示于表4中。另外，每组在给药期间的肿瘤体积变化的时程和在第29天的相对肿瘤体积分别示于图8和图9中。
表4
第1天 第4天 第8天 第11天 第15天 第18天 第22天 第25天 第29天
对照组 62 93 152 297 419 618 822 1101 1160
乐伐替尼组 62 82 102 134 152 175 162 166 151
抗PD-1抗体组 62 86 124 165 222 274 347 414 482
E7386组 62 93 148 210 301 408 588 723 923
乐伐替尼+抗PD-1抗体双组合组 62 73 78 92 86 72 58 49 38
E7386+乐伐替尼双组合组 62 70 74 83 84 83 78 71 68
三重组合组 62 70 61 55 31 21 12 7 4
实施例2：
E7386、乐伐替尼和抗PD-1抗体的三重组合的抗肿瘤作用
使用各种培养基来培养小鼠细胞系(参见图10A-10C，A栏)。使用胰蛋白酶-EDTA从烧瓶中收集对数生长的细胞。离心细胞悬浮液以去除上清液。接着，使用Hanks'平衡盐溶液(HBSS)制备具有一定细胞浓度的细胞悬浮液(参见图10A-10C，B栏)。将细胞悬浮液以0.1mL的剂量皮下移植到7周龄的免疫活性小鼠中的每只身体的右侧上(参见图10A-10C，C栏)。
移植后若干天(参见图10A-10C，D栏)，使用使用电子数字卡尺(Digimatic (TM)Caliper; Mitutoyo Corporation)测量动物中肿瘤的短径和长径。使用以下公式计算肿瘤体积TV和RTV。
等式1：肿瘤体积TV (mm3)=长径(mm)×短径(mm)×短径(mm) /2。
等式2：相对肿瘤体积RTV=第n天的TV/第1天的TV。
基于第一天给药时的肿瘤体积，进行分组使得肿瘤体积的平均值几乎相同。使用3mM HCl制备1 mg/ml乐伐替尼溶液，并以0.2 mL/20 g小鼠体重的剂量口服给药，每天一次，持续28天。将已经用PBS稀释的0.2 mL含有1.0 mg/mL抗小鼠-PD-1抗体(Clone：RMP1-14，BioXCell，目录号：BE0146)的给药样品腹膜内给药(以200 μg/小鼠的剂量)，每周两次，持续3或4周(参见图10A-10C，E栏)。使用0.1 M HCl制备2.5 mg/ml E7386溶液，并以0.2 mL/20 g小鼠体重的剂量口服给药，每天一次，持续3或4周(参见图10A-10C，E栏)。对照组不进行任何给药。包括8只小鼠的每个组用于进行实验。每周两次，持续3或4周(参见图10A-10C，E栏)，确定对照组、乐伐替尼给药组、抗小鼠-PD-1抗体给药组、乐伐替尼+抗小鼠-PD-1抗体给药组、E7386+乐伐替尼给药组和三重组合疗法组的相应的肿瘤体积(TV)。通过对肿瘤体积进行对数转换获得的值用于通过重复测量的Dunnet’s多重比较进行统计学分析。E7386是(6S,9aS)-N-苄基-8-({6-[3-(4-乙基哌嗪-1-基)氮杂环丁烷-1-基]吡啶-2-基}甲基)-6-(2-氟-4-羟基苄基)-4,7-二氧代-2-(丙-2-烯-1-基)六氢-2H-吡嗪并[2,1-c][1,2,4]三嗪-1(6H)-甲酰胺。
如在图11和图12A-12G中所示，E7386、乐伐替尼和抗小鼠-PD-1抗体的三重组合疗法表现出比任一种双组合(即，乐伐替尼+抗PD-1抗体组合或乐伐替尼+E7386组合)或每种药剂当作为单一疗法单独给药时更高的抗肿瘤作用。
用下式计算在时间t时的相对肿瘤体积(RTV)：
等式3: RTV=TV t /TV 初始 ×100%。
我们将最佳平均应答(最佳平均应答)定义为t≥8天的平均(RTV-100%)的最小值(等式4)。该度量将应答的速度、强度和耐久性的组合捕获为单个值。应答标准(mRECIST)是从RECIST标准改编而来的，并且定义如下(以这个顺序应用)：mCR，最佳平均应答<-95%；mPR，最佳平均应答<-50%；mSD，最佳平均应答<30%；mPD，未另外分类。
参考文献
1. Sharpe, A.H, Wherry, E.J., Ahmed R.和Freeman G.J. The function ofprogrammed cell death 1 and its ligands in regulating autoimmunity andinfection. Nature Immunology (2007); 8:239-245。
2. Dong H等人Tumor-associated B7-H1 promotes T-cell apoptosis: apotential mechanism of immune evasion. Nat Med. 2002年8月;8(8):793-800。
3. Yang等人PD-1 interaction contributes to the functional suppressionof T-cell responses to human uveal melanoma cells in vitro. Invest Ophthalmol Vis Sci. 2008年6月;49(6 (2008): 49: 2518-2525。
4. Ghebeh等人The B7-H1 (PD-L1) T lymphocyte-inhibitory molecule isexpressed in breast cancer patients with infiltrating ductal carcinoma:correlation with important high-risk prognostic factors. Neoplasia (2006) 8:190-198。
5. Hamanishi J等人Programmed cell death 1 ligand 1 and tumor-infiltrating CD8+ T lymphocytes are prognostic factors of human ovariancancer. Proceeding of the National Academy of Sciences (2007): 104: 3360-3365。
6. Thompson RH等人Significance of B7-H1 overexpression in kidneycancer. Clinical genitourin Cancer (2006): 5: 206-211。
7. Nomi, T. Sho, M., Akahori, T.等人Clinical significance andtherapeutic potential of the programmed death- 1 ligand/programmed death-1pathway in human pancreatic cancer. Clinical Cancer Research (2007);13:2151-2157。
8. Ohigashi Y等人Clinical significance of programmed death-1 ligand-1and programmed death-1 ligand 2 expression in human esophageal cancer. Clin. Cancer Research (2005): 11: 2947-2953。
9. Inman等人PD-L1 (B7-H1) expression by urothelial carcinoma of thebladder and BCG-induced granulomata: associations with localized stageprogression. Cancer (2007): 109: 1499-1505。
10. Shimauchi T等人Augmented expression of programmed death-1 in bothneoplasmatic and nonneoplastic CD4+ T-cells in adult T-cell Leukemia/Lymphoma. Int. J. Cancer (2007): 121:2585-2590。
11. Gao等人Overexpression of PD-L1 significantly associates withtumor aggressiveness and postoperative recurrence in human hepatocellularcarcinoma. Clinical Cancer Research (2009) 15: 971-979。
12. Nakanishi J. Overexpression of B7-H1 (PD-L1) significantlyassociates with tumor grade and postoperative prognosis in human urothelialcancers. Cancer Immunol Immunother. (2007) 56: 1173-1182。
13. Hino等人Tumor cell expression of programmed cell death-1 is aprognostic factor for malignant melanoma. Cancer (2010): 00: 1-9。
14. Ghebeh H. Foxp3+ tregs and B7-H1+/PD-1+ T lymphocytes co-infiltrate the tumor tissues of high-risk breast cancer patients: implicationfor immunotherapy. BMC Cancer. 2008年2月23日; 8: 57。
15. Ahmadzadeh M等人Tumor antigen-specific CD8 T cells infiltratingthe tumor express high levels of PD-1 and are functionally impaired. Blood(2009) 114: 1537-1544。
16. Thompson RH等人PD-1 is expressed by tumor infiltrating cells andis associated with poor outcome for patients with renal carcinoma. Clinical Cancer Research (2007) 15: 1757-1761。
17. 美国专利申请公开号2018-0185395。
18. 加拿大申请号3 044 658。
19. 美国专利9,174,998。
20. 美国专利10,259,817。
21. Keiichi Tamai等人, “Suppressive expression of CD274 increasestumorigenesis and cancer stem cell phenotypes in cholangiocarcinoma,” Cancer Sci. 105(6): 667-674, 2014。
Anthony B. El-Khoueiry等人, “A phase I first-in-human study of PRI-724 in patients (pts) with advanced solid tumors,” J. Clin. Oncol. 31(15_supple(2013年5月20日)): abstr 2501。
22.Renée van Amerongen等人, “Break the loop, escape the cycle”The EMBO Journal 2013, 32: 1977-1989。
本文引用的所有参考文献均通过引用并入本文，其程度如同明确且单独地指示每一个单独的出版物、数据库条目(例如，Genbank序列或GeneID条目)、专利申请或专利通过引用并入本文。申请人根据37 C.F.R.§1.57(b) (1)旨在通过引用并入的这一声明涉及每一个单独的出版物、数据库条目(例如，Genbank序列或GeneID条目)、专利申请或专利，其中的每一个按照37 C.F.R.§1.57(b) (2)被清楚地标识，即使这样的引用不是与通过引用并入的专门声明直接相邻。在说明书中包括任何通过引用并入的专门声明(如果有的话)不以任何方式削弱这种通过引用并入的一般声明。本文引用的参考文献并不旨在承认该参考文献是相关的现有技术，也不构成对这些出版物或文件的内容或日期的任何承认。

Claims (21)

1.(i)抗PD-1抗体；
(ii)具有以下结构的乐伐替尼：
或其药学上可接受的盐；和
(iii)具有以下结构的(6S,9aS)-N-苄基-8-({6-[3-(4-乙基哌嗪-1-基)氮杂环丁烷-1-基]吡啶-2-基}甲基)-6-(2-氟-4-羟基苄基)-4,7-二氧代-2-(丙-2-烯-1-基)六氢-2H-吡嗪并[2,1-c][1,2,4]三嗪-1(6H)-甲酰胺(E7386)：
或其药学上可接受的盐的组合在制备用于治疗人受试者的癌症的药物或试剂盒中的用途，
其中所述抗PD-1抗体是派姆单抗或纳武单抗。
2.权利要求1所述的用途，其中所述癌症是实体瘤。
3.权利要求1所述的用途，其中所述癌症选自：肾细胞癌(RCC)、结肠直肠癌(CRC)、肝细胞癌(HCC)、黑素瘤、膀胱癌、尿道上皮癌、乳腺癌、非小细胞肺癌(NSCLC)、子宫内膜癌和头颈的鳞状细胞癌。
4.权利要求1所述的用途，其中所述癌症是RCC。
5.权利要求1-4中任一项所述的用途，其中所述抗PD-1抗体是派姆单抗。
6.权利要求1-5中任一项所述的用途，其中乐伐替尼或其药学上可接受的盐每天给药；和派姆单抗每三周一次给药。
7.权利要求6所述的用途，其中乐伐替尼或其药学上可接受的盐以24mg、20mg、18mg、12mg或8mg的日剂量给药；和派姆单抗每三周一次以200mg的剂量给予成人受试者或以2mg/kg(至多200mg)的剂量给予小儿受试者。
8.权利要求7所述的用途，其中乐伐替尼或其药学上可接受的盐以20mg的日剂量给药；和派姆单抗每三周一次以200mg的剂量给药。
9.权利要求1-8中任一项所述的用途，其中乐伐替尼或其药学上可接受的盐是甲磺酸乐伐替尼；和E7386或其药学上可接受的盐是E7386。
10.权利要求4所述的用途，其中所述癌症是晚期RCC。
11.权利要求4所述的用途，其中所述癌症是转移性RCC。
12.权利要求1-11中任一项所述的用途，其中所述个体先前未接受过针对转移性RCC的疗法。
13.权利要求1-11中任一项所述的用途，其中所述个体先前未接受过针对转移性RCC的全身疗法。
14.权利要求1-5中任一项所述的用途，其中乐伐替尼或其药学上可接受的盐每天给药；和
所述抗PD-1抗体是派姆单抗并且每六周一次给药。
15.权利要求1至14中任一项所述的用途，其中：
所述抗PD-1抗体是派姆单抗，并且
在乐伐替尼或其药学上可接受的盐单独给药后，所述抗PD-1抗体与乐伐替尼或其药学上可接受的盐联合使用。
16.权利要求15所述的用途，其中：
所述抗PD-1抗体是派姆单抗，并且
在乐伐替尼或其药学上可接受的盐每天一次，持续至少7天的单独给药后，所述抗PD-1抗体与乐伐替尼或其药学上可接受的盐联合使用。
17.权利要求1至14中任一项所述的用途，其中：
所述抗PD-1抗体是派姆单抗，
在派姆单抗单独给药后，所述抗PD-1抗体与乐伐替尼或其药学上可接受的盐联合使用。
18.权利要求1所述的用途，其中所述癌症是子宫内膜癌。
19.权利要求18所述的用途，其中所述癌症是晚期子宫内膜癌。
20.权利要求18或19所述的用途，其中所述个体在用化疗剂进行先前治疗后未能实现持续应答。
21.权利要求20所述的用途，其中所述化疗剂是铂。
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Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP6757959B2 (ja) 2015-06-16 2020-09-23 株式会社 ＰＲＩＳＭ ＢｉｏＬａｂ 抗がん剤
JP7445826B2 (ja) 2021-09-08 2024-03-07 エーザイ・アール・アンド・ディー・マネジメント株式会社 固形腫瘍治療用医薬組成物

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2016141218A1 (en) * 2015-03-04 2016-09-09 Merck Sharp & Dohme Corp. Combination of a pd-1 antagonist and a vegfr/fgfr/ret tyrosine kinase inhibitor for treating cancer
WO2018147275A1 (ja) * 2017-02-08 2018-08-16 エーザイ・アール・アンド・ディー・マネジメント株式会社 腫瘍治療用医薬組成物

Family Cites Families (28)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4816567A (en) 1983-04-08 1989-03-28 Genentech, Inc. Recombinant immunoglobin preparations
EP1135415B1 (en) 1998-12-01 2010-08-11 Facet Biotech Corporation Humanized antibodies to gamma-interferon
EP1444235B1 (en) 2001-10-12 2008-06-11 Choongwae Pharma Corporation Reverse-turn mimetics and method relating thereto
US7576084B2 (en) 2001-10-12 2009-08-18 Choongwae Pharma Corporation Reverse-turn mimetics and method relating thereto
US20040072831A1 (en) 2001-10-12 2004-04-15 Choongwae Pharma Corporation Reverse-turn mimetics and method relating thereto
IL149820A0 (en) 2002-05-23 2002-11-10 Curetech Ltd Humanized immunomodulatory monoclonal antibodies for the treatment of neoplastic disease or immunodeficiency
ES2654064T3 (es) 2002-07-03 2024-03-13 Ono Pharmaceutical Co Composiciones inmunopotenciadoras que comprenden anticuerpos anti-PD-L1
ES2367430T3 (es) 2002-12-23 2011-11-03 Wyeth Llc Anticuerpos contra pd-1 y sus usos.
US7563869B2 (en) 2003-01-23 2009-07-21 Ono Pharmaceutical Co., Ltd. Substance specific to human PD-1
CN101213297B (zh) 2005-05-09 2013-02-13 小野药品工业株式会社 程序性死亡-1(pd-1)的人单克隆抗体及单独使用或与其它免疫治疗剂联合使用抗pd-1抗体来治疗癌症的方法
KR101411165B1 (ko) 2005-07-01 2014-06-25 메다렉스, 엘.엘.시. 예정 사멸 리간드 1 (피디-엘1)에 대한 인간 모노클로날항체
KR101586617B1 (ko) 2007-06-18 2016-01-20 머크 샤프 앤 도메 비.브이. 사람 프로그램된 사멸 수용체 ｐｄ-1에 대한 항체
EP2262837A4 (en) 2008-03-12 2011-04-06 Merck Sharp & Dohme PD-1 BINDING PROTEINS
ES2552239T3 (es) 2008-06-06 2015-11-26 Prism Pharma Co., Ltd. Miméticos de hélice alfa y métodos relacionados con los mismos
CN102203125A (zh) 2008-08-25 2011-09-28 安普利穆尼股份有限公司 Pd-1拮抗剂及其使用方法
MX349463B (es) 2008-09-26 2017-07-31 Univ Emory Anticuerpos anti-pd-1, pd-l1 y pd-l2 humanos y usos de los mismos.
EP2346871A1 (en) 2008-10-14 2011-07-27 PRISM BioLab Corporation Alpha helix mimetics in the treatment of cancer
PE20120341A1 (es) 2008-12-09 2012-04-24 Genentech Inc Anticuerpos anti-pd-l1 y su uso para mejorar la funcion de celulas t
CN102482258B (zh) 2009-05-07 2014-06-25 株式会社棱镜制药 α-螺旋模拟物和与其相关的方法
WO2011066342A2 (en) 2009-11-24 2011-06-03 Amplimmune, Inc. Simultaneous inhibition of pd-l1/pd-l2
JP2014509298A (ja) 2011-02-25 2014-04-17 株式会社ＰＲＩＳＭ Ｐｈａｒｍａ アルファへリックスミメティック及びその関連の方法
EA026924B1 (ru) 2011-08-01 2017-05-31 Дженентек, Инк. Способы лечения рака с использованием антагонистов, связывающихся с осью pd-1, и ингибиторов mek
AR093984A1 (es) 2012-12-21 2015-07-01 Merck Sharp & Dohme Anticuerpos que se unen a ligando 1 de muerte programada (pd-l1) humano
MX2016003292A (es) 2013-09-13 2016-06-24 Beigene Ltd Anticuerpos anti-muerte programada 1 y su uso como terapeuticos y diagnosticos.
US9174998B2 (en) 2013-12-25 2015-11-03 Eisai R&D Management Co., Ltd. (6S,9aS)-N-benzyl-6-[(4-hydroxyphenyl)methyl]-4,7-dioxo-8-({6-[3-(piperazin-1-yl)azetidin-1-yl]pyridin-2-yl}methyl)-2-(prop-2-en-1-yl)-octahydro-1H-pyrazino[2,1-c][1,2,4]triazine-1-carboxamide compound
JOP20200094A1 (ar) 2014-01-24 2017-06-16 Dana Farber Cancer Inst Inc جزيئات جسم مضاد لـ pd-1 واستخداماتها
JP6757959B2 (ja) 2015-06-16 2020-09-23 株式会社 ＰＲＩＳＭ ＢｉｏＬａｂ 抗がん剤
KR102559211B1 (ko) 2015-06-23 2023-07-25 에자이 알앤드디 매니지먼트 가부시키가이샤 (6S,9aS)-N-벤질-8-({6-[3-(4-에틸피페라진-1-일)아제티딘-1-일]피리딘-2-일}메틸)-6-(2-플루오로-4-하이드록시벤질)-4,7-디옥소-2-(프로프-2-엔-1-일)헥사하이드로-2H-피라지노[2,1-c][1,2,4]트리아진-1(6H)-카복사마이드의 결정

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2016141218A1 (en) * 2015-03-04 2016-09-09 Merck Sharp & Dohme Corp. Combination of a pd-1 antagonist and a vegfr/fgfr/ret tyrosine kinase inhibitor for treating cancer
WO2018147275A1 (ja) * 2017-02-08 2018-08-16 エーザイ・アール・アンド・ディー・マネジメント株式会社 腫瘍治療用医薬組成物

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