CN115011661A - 一种3β-熊去氧胆酸的合成方法 - Google Patents
一种3β-熊去氧胆酸的合成方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN115011661A CN115011661A CN202210868494.XA CN202210868494A CN115011661A CN 115011661 A CN115011661 A CN 115011661A CN 202210868494 A CN202210868494 A CN 202210868494A CN 115011661 A CN115011661 A CN 115011661A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- reaction
- temperature
- beta
- low
- coenzyme
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 229960001661 ursodiol Drugs 0.000 title claims abstract description 19
- 238000010189 synthetic method Methods 0.000 title abstract description 3
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims abstract description 95
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims abstract description 93
- DKGAVHZHDRPRBM-UHFFFAOYSA-N Tert-Butanol Chemical compound CC(C)(C)O DKGAVHZHDRPRBM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 69
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 43
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims abstract description 34
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims abstract description 25
- BAWFJGJZGIEFAR-NNYOXOHSSA-N NAD zwitterion Chemical compound NC(=O)C1=CC=C[N+]([C@H]2[C@@H]([C@H](O)[C@@H](COP([O-])(=O)OP(O)(=O)OC[C@@H]3[C@H]([C@@H](O)[C@@H](O3)N3C4=NC=NC(N)=C4N=C3)O)O2)O)=C1 BAWFJGJZGIEFAR-NNYOXOHSSA-N 0.000 claims abstract description 24
- 229950006238 nadide Drugs 0.000 claims abstract description 24
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 23
- 108010050375 Glucose 1-Dehydrogenase Proteins 0.000 claims abstract description 22
- 101710088194 Dehydrogenase Proteins 0.000 claims abstract description 21
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims abstract description 20
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 19
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 claims abstract description 19
- 239000004380 Cholic acid Substances 0.000 claims abstract description 18
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims abstract description 18
- 229960002471 cholic acid Drugs 0.000 claims abstract description 18
- 239000008103 glucose Substances 0.000 claims abstract description 18
- XJLXINKUBYWONI-NNYOXOHSSA-N NADP zwitterion Chemical compound NC(=O)C1=CC=C[N+]([C@H]2[C@@H]([C@H](O)[C@@H](COP([O-])(=O)OP(O)(=O)OC[C@@H]3[C@H]([C@@H](OP(O)(O)=O)[C@@H](O3)N3C4=NC=NC(N)=C4N=C3)O)O2)O)=C1 XJLXINKUBYWONI-NNYOXOHSSA-N 0.000 claims abstract 4
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 114
- 239000012065 filter cake Substances 0.000 claims description 57
- 238000004537 pulping Methods 0.000 claims description 47
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 38
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims description 27
- 238000002390 rotary evaporation Methods 0.000 claims description 25
- RUDATBOHQWOJDD-DNMBCGTGSA-N isoursodeoxycholic acid Chemical compound C([C@H]1C[C@@H]2O)[C@@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(O)=O)C)[C@@]2(C)CC1 RUDATBOHQWOJDD-DNMBCGTGSA-N 0.000 claims description 19
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 claims description 18
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims description 17
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 claims description 17
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 claims description 16
- RUDATBOHQWOJDD-UZVSRGJWSA-N ursodeoxycholic acid Chemical compound C([C@H]1C[C@@H]2O)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(O)=O)C)[C@@]2(C)CC1 RUDATBOHQWOJDD-UZVSRGJWSA-N 0.000 claims description 7
- RUDATBOHQWOJDD-UHFFFAOYSA-N (3beta,5beta,7alpha)-3,7-Dihydroxycholan-24-oic acid Natural products OC1CC2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(CCC(O)=O)C)C1(C)CC2 RUDATBOHQWOJDD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical group Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 239000005708 Sodium hypochlorite Substances 0.000 claims description 3
- SUKJFIGYRHOWBL-UHFFFAOYSA-N sodium hypochlorite Chemical compound [Na+].Cl[O-] SUKJFIGYRHOWBL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 239000000872 buffer Substances 0.000 claims description 2
- 239000013078 crystal Substances 0.000 claims description 2
- 230000001590 oxidative effect Effects 0.000 claims description 2
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 claims description 2
- 238000010517 secondary reaction Methods 0.000 claims 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 abstract description 7
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract description 6
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 abstract description 3
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 abstract 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 abstract 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 55
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 23
- XJLXINKUBYWONI-NNYOXOHSSA-O NADP(+) Chemical compound NC(=O)C1=CC=C[N+]([C@H]2[C@@H]([C@H](O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OC[C@@H]3[C@H]([C@@H](OP(O)(O)=O)[C@@H](O3)N3C4=NC=NC(N)=C4N=C3)O)O2)O)=C1 XJLXINKUBYWONI-NNYOXOHSSA-O 0.000 description 20
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 8
- MCHZKGNHFPNZDP-UHFFFAOYSA-N 2-aminoethane-1,1,1-triol;hydrochloride Chemical compound Cl.NCC(O)(O)O MCHZKGNHFPNZDP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 6
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 6
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 5
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 5
- 239000000543 intermediate Substances 0.000 description 5
- OKKJLVBELUTLKV-MZCSYVLQSA-N Deuterated methanol Chemical compound [2H]OC([2H])([2H])[2H] OKKJLVBELUTLKV-MZCSYVLQSA-N 0.000 description 4
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 3
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 3
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 3
- 231100000053 low toxicity Toxicity 0.000 description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 3
- 238000001308 synthesis method Methods 0.000 description 3
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 2
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 2
- NTASFODDPBHBAM-UHFFFAOYSA-N 1-hydroxyethylazanium;chloride Chemical compound [Cl-].CC([NH3+])O NTASFODDPBHBAM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000001644 13C nuclear magnetic resonance spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 102000009878 3-Hydroxysteroid Dehydrogenases Human genes 0.000 description 1
- 108010032887 7 beta-hydroxysteroid dehydrogenase Proteins 0.000 description 1
- 206010008635 Cholestasis Diseases 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 208000004930 Fatty Liver Diseases 0.000 description 1
- 206010019708 Hepatic steatosis Diseases 0.000 description 1
- 101000744001 Ruminococcus gnavus (strain ATCC 29149 / VPI C7-9) 3beta-hydroxysteroid dehydrogenase Proteins 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 238000006555 catalytic reaction Methods 0.000 description 1
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 1
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 1
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 208000010706 fatty liver disease Diseases 0.000 description 1
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 1
- 208000001130 gallstones Diseases 0.000 description 1
- 208000006454 hepatitis Diseases 0.000 description 1
- 231100000283 hepatitis Toxicity 0.000 description 1
- 229930027945 nicotinamide-adenine dinucleotide Natural products 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 238000012827 research and development Methods 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 231100000240 steatosis hepatitis Toxicity 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P33/00—Preparation of steroids
- C12P33/06—Hydroxylating
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
- Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
- Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
- Y02P20/55—Design of synthesis routes, e.g. reducing the use of auxiliary or protecting groups
Landscapes
- Organic Chemistry (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
一种3β‑熊去氧胆酸的合成方法，包括以下步骤：1、向反应器中加入叔丁醇或异丙醇、水、缓冲液混合形成体系溶液，再加入葡萄糖和(5β)‑3,7‑二酮‑24‑胆酸，继续加入氢氧化钠水溶液调节pH为6～8，调节反应温度为25～35℃，混匀后，加入3β‑类固醇脱氢酶、葡萄糖脱氢酶、辅酶I和辅酶II，用氢氧化钠水溶液调节pH为6～8，进行第一次反应，生成中间体；2、向体系溶液中加入7β‑类固醇脱氢酶、葡萄糖脱氢酶、葡萄糖、辅酶I和辅酶II，用氢氧化钠水溶液调节pH为6～8，进行第二次反应。本发明操作简单，反应条件温和，试剂毒性小，污染小，生产成本低，可操作性强，专一性强，收率高且无明显副产物。
Description
技术领域
本发明属于用于药物用途的活性成分的合成技术领域，具体涉及到一种3β-熊去氧胆酸的合成方法。
背景技术
3β-熊去氧胆酸，又名异熊去氧胆酸，化学名称是(3β,5β,7β)-3,7-二羟基胆酸((3β,5β,7β)-3,7-Dihydroxycholan-24-oic acid)，结构式见式(I)
熊去氧胆酸是一种广泛应用于治疗胆结石、胆汁淤积性肝病、脂肪肝、各型肝炎的药物。熊去氧胆酸还广泛应用于医药保健品，全球市场需求量大，据统计中国每年以中间体或原料药形式出口国外达500余吨。
原料药的有关物质是评价药品安全性的重要指标，对药品杂质进行充分研究已成为目前药品生产研发必不可少的重要环节。3β-熊去氧胆酸是目前动物源熊去氧胆酸制备过程中必定产生的一个杂质之一，合成这一杂质可用做杂质标准品进行杂质标定。
文献“J.Med.Chem.2014,57,20,8477–8495”，Festa等人，描述了3β-熊去氧胆酸的一种合成路线，其通过以3-甲磺酰熊去氧胆酸甲酯为原料，经醋酸钾，DMF-水体系回流置换反应，再通过氢氧化钠，甲醇-水水解制得，收率为56％。
现有的合成3β-熊去氧胆酸的方法较少，且存在产率较低，过程复杂，使用多种有毒危险试剂，成品纯化困难等问题。
因此，需要设计一种新的3β-熊去氧胆酸的合成方法。
发明内容
本发明的目的是提供一种3β-熊去氧胆酸的合成方法，以解决背景技术中提出的现有的合成3β-熊去氧胆酸的方法较少，且存在产率较低，过程复杂，使用多种有毒危险试剂，成品纯化困难的问题。
本发明的技术方案是，一种3β-熊去氧胆酸的合成方法，包括以下步骤：
步骤1、向反应器中加入叔丁醇或异丙醇、水、缓冲液混合形成体系溶液，再加入葡萄糖和(5β)-3,7-二酮-24-胆酸，向体系溶液中继续加入氢氧化钠水溶液调节pH值为6～8，调节反应温度为25～35℃，待体系溶液充分混匀后，加入3β-类固醇脱氢酶、葡萄糖脱氢酶、辅酶I和辅酶II，并用氢氧化钠水溶液调节pH值为6～8，进行第一次反应，生成中间体；
步骤2、接着向体系溶液中加入7β-类固醇脱氢酶、葡萄糖脱氢酶、葡萄糖、辅酶I和辅酶II，并用氢氧化钠水溶液调节pH值为6～8，进行第二次反应。
在一种具体的实施方式中，所述步骤1中，第一次反应的反应时间为2～24h，且在第一次反应和第二次反应进行一段时间后均通过薄层色谱法观察是否完全反应。
在一种具体的实施方式中，所述步骤1中，用氢氧化钠水溶液调节体系溶液的pH值，将pH值调节至6.5～7.5再进行反应；步骤2中，用氢氧化钠水溶液调节体系溶液的pH值，将pH值调节至6.5～7.5再进行反应。
在一种具体的实施方式中，所述步骤1中的反应温度调节为30～35℃。
在一种具体的实施方式中，所述3β-熊去氧胆酸的合成方法还包括步骤01，步骤01在步骤1之前，
步骤01、向熊去氧胆酸中加入次氯酸钠水溶液，氧化得到(5β)-3,7-二酮-24-胆酸。
在一种具体的实施方式中，所述3β-熊去氧胆酸的合成方法还包括步骤3，
步骤3、对第二次反应完成后的体系溶液，进行第一次负压旋蒸浓缩，用于除去叔丁醇或异丙醇，然后对体系溶液低温低速打浆，使晶体析出，进行第一次过滤，得到的滤饼进行烘干，再加入乙酸乙酯萃取烘干的滤饼，常温打浆后进行第二次过滤，将得到的滤液进行第二次负压旋蒸浓缩，浓缩后加入水置换乙酸乙酯，然后对体系溶液低温低速打浆，进行第三次过滤，得到的滤饼进行烘干。
在一种具体的实施方式中，所述步骤3中，第一次负压旋蒸浓缩的温度为28～52℃，压力为0.05～0.15MPa；第二次负压旋蒸浓缩的温度为28～32℃，压力为0.05～0.15MPa；
低温低速打浆的温度为2～6℃，打浆的转速为50～80转/min，低温低速打浆的时间为30～60min，常温打浆的时间为28～32min；烘干采用48～52℃热风循环烘箱中进行烘干。
在一种具体的实施方式中，所述步骤3中，第一次过滤和第三次过滤的过滤温度为0～5℃，第二次过滤的过滤温度为38～42℃；第一次过滤和第三次过滤过滤结束后均用水进行顶洗，第二次过滤结束后用乙酸乙酯进行顶洗。
在一种具体的实施方式中，所述步骤1中，向反应器中加入的叔丁醇或异丙醇与水的体积比为1：0.67～19。
在一种具体的实施方式中，所述缓冲液为三羟甲基氨基甲烷盐酸盐。
本发明的有益效果包括：
本发明操作简单，反应条件温和，生产过程的试剂均毒性小，污染小，生产成本低，可操作性强，专一性强，收率高且无明显副产物。
实施例的产品的表征数据以及效果数据可看出：
实施例的重量收率明显高出现有技术的重量收率，实施例的重量收率达到了97.0％；实施例的产物纯度较高，因为酶催化反应具有较强的专一性，产物纯度达到了99.0％；实施例中所用化学试剂等均为低毒害试剂且反应条件温和可控，操作安全简便。
本发明提供了一种反应步骤短，条件温和，成品纯度高的3β-熊去氧胆酸的制备方法。
本发明采用叔丁醇和/或异丙醇作为溶剂，能获得较好的收率。
本发明采用3β-类固醇脱氢酶和7β-类固醇脱氢酶催化进行制备目标产物3β-熊去氧胆酸，操作简单，反应条件温和，专一性强，收率高无明显副产物，成品质量与现有技术产品相比具有显著优势。
除了上面所描述的目的、特征和优点之外，本发明还有其它的目的、特征和优点。下面将参照图，对本发明作进一步详细的说明。
附图说明
构成本申请的一部分的附图用来提供对本发明的进一步理解，本发明的示意性实施例及其说明用于解释本发明，并不构成对本发明的不当限定。在附图中：
图1为本发明中的产品3β-熊去氧胆酸的氢谱图；
图2为本发明中的产品3β-熊去氧胆酸的碳谱图。
图3为本发明中的中间体(3β,5β)-3-羟基-7-酮基-24-胆酸的氢谱图；
图4为本发明中的中间体(3β,5β)-3-羟基-7-酮基-24-胆酸的碳谱图。
具体实施方式
以下结合附图对本发明的实施例进行详细说明，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
本发明采用向熊去氧胆酸中加入次氯酸钠水溶液，氧化得到(5β)-3,7-二酮-24-胆酸。
实施例1
在洁净的反应瓶中加入60ml叔丁醇、60ml水、20ml缓冲液，缓冲液为0.5mol/L的pH值为7.5的三羟甲基氨基甲烷盐酸盐即Tris-Hcl，搅拌混匀后加入20.0g(5β)-3,7-二酮-24-胆酸和6.0g葡萄糖，用2mol/L的氢氧化钠水溶液调节pH至6.5-7.5，调节反应温度为30-35℃，待体系充分混匀后，向体系中加入20ml葡萄糖脱氢酶、20ml 3β-类固醇脱氢酶、2.0g辅酶I和2.0g辅酶II。搅拌混匀后，用2mol/L的氢氧化钠水溶液调节pH至6.5-7.5进行反应。反应16h，薄层色谱法检测反应完全后加入20ml葡萄糖脱氢酶、20ml7β-类固醇脱氢酶、6.0g葡萄糖、2.0g辅酶I和2.0g辅酶II。搅拌混匀后继续反应6h，薄层色谱法检测反应完全后停止反应。反应结束后将反应体系调温至40℃，0.1MPa负压旋蒸浓缩，除去其中叔丁醇，体系中产物大量析晶。然后将体系于4℃低温低速打浆30-60min，使产物析晶，过滤，用少量水顶洗，滤饼于50℃热风循环烘箱中干燥，烘干后的滤饼重44.7g。加入100ml乙酸乙酯萃取滤饼，常温打浆30min后趁热过滤，滤饼用少量乙酸乙酯顶洗。将滤液调温至30℃，0.1MPa负压旋蒸浓缩，浓缩到小体积时加入40ml水置换乙酸乙酯，尽可能除去乙酸乙酯后产物析出，将体系4℃低温低速打浆30-60min，使产物尽可能析晶，过滤，用少量水顶洗，滤饼于50℃热风循环烘箱中干燥，烘干后的滤饼重19.4g，重量收率97.0％，液相色谱纯度：99.0％。低速打浆时的转速为50-80转/分钟。
实施例2
在洁净的反应瓶中加入60ml异丙醇、60ml水、20ml缓冲液，缓冲液为0.5mol/L的pH值为7.5的三羟甲基氨基甲烷盐酸盐，搅拌混匀后加入20.0g(5β)-3,7-二酮-24-胆酸和6.0g葡萄糖，用2mol/L的氢氧化钠水溶液调节pH至6.5-7.5，调节反应温度为30-35℃，待体系充分混匀后，向体系中加入20ml葡萄糖脱氢酶、20ml 3β-类固醇脱氢酶、2.0g辅酶I和2.0g辅酶II。搅拌混匀后，用2mol/L的氢氧化钠水溶液调节pH＝6.5-7.5反应。反应16h，薄层色谱法检测反应完全后加入20ml葡萄糖脱氢酶、20ml 7β-类固醇脱氢酶、6.0g葡萄糖、2.0g辅酶I和2.0g辅酶II。搅拌混匀后继续反应6h，薄层色谱法检测反应完全后停止反应。反应结束后将反应体系调温至50℃，0.1MPa负压旋蒸浓缩，除去其中异丙醇，体系中产物大量析晶。然后将体系4℃低温低速打浆30～60min，使产物析晶，过滤，用少量水顶洗，滤饼于50℃热风循环烘箱中干燥，烘干后的滤饼重44.2g。加入100ml乙酸乙酯萃取滤饼，常温打浆30min后趁热过滤，滤饼用少量乙酸乙酯顶洗。将滤液调温至30℃，0.1MPa负压旋蒸浓缩，浓缩到小体积时加入40ml水置换乙酸乙酯，除去乙酸乙酯后产物析出，将体系4℃低温低速打浆30-60min，使产物尽可能析晶，过滤，用少量水顶洗，滤饼于50℃热风循环烘箱中干燥，烘干后的滤饼重19.2g，重量收率96.0％，液相色谱纯度：98.1％。低速打浆时的转速为50-80转/分钟。
实施例3
在洁净的反应瓶中加入60ml叔丁醇、60ml水、20ml缓冲液，缓冲液为0.5mol/L的pH值为7.5的三羟甲基氨基甲烷盐酸盐，搅拌混匀后加入20.0g(5β)-3,7-二酮-24-胆酸和6.0g葡萄糖，用2mol/L的氢氧化钠水溶液调节pH至6.5-7.5，调节反应温度为30-35℃，待体系充分混匀后，向体系中加入20ml葡萄糖脱氢酶、20ml 3β-类固醇脱氢酶、2.0g辅酶I和2.0g辅酶II。搅拌混匀后，用2mol/L的氢氧化钠水溶液调节pH＝6.5-7.5反应。反应16h，薄层色谱法检测反应完全后，将反应体系调温至30℃，0.1MPa负压旋蒸浓缩，除去其中叔丁醇，体系中产物大量析晶。然后将体系4℃低温低速打浆30-60min，使产物析晶，过滤，用少量水顶洗，滤饼于50摄氏度热风循环烘箱中干燥，烘干后的滤饼重32.3g。将滤饼用60ml叔丁醇、60ml水、20ml缓冲液(0.5mol/L的Tris-Hcl，pH7.5)复溶，待体系中无明显颗粒后加入6.0g葡萄糖，用2mol/L的氢氧化钠水溶液调节pH至6.5-7.5，调节反应温度为30～35℃，待体系充分混匀后，向体系中加入20ml葡萄糖脱氢酶、20ml 7β-类固醇脱氢酶、2.0g辅酶I和2.0g辅酶II。搅拌混匀后，用2mol/L的氢氧化钠水溶液调节pH＝6.5-7.5反应。反应8h后，薄层色谱法检测反应完全后停止反应。反应结束后将反应体系调温至30℃，0.1MPa负压旋蒸浓缩，尽可能除去其中叔丁醇，体系中产物大量析晶。然后将体系4℃低温低速打浆30-60min，使产物尽可能析晶，过滤，用少量水顶洗，滤饼于50摄氏度热风循环烘箱中干燥，烘干后的滤饼重42.5g。加入100ml乙酸乙酯萃取滤饼，常温打浆30min后趁热过滤，滤饼用少量乙酸乙酯顶洗。将滤液调温至30℃，0.1MPa负压旋蒸浓缩，浓缩到小体积时加入40ml水置换乙酸乙酯，尽可能除去乙酸乙酯后产物析出，将体系4℃低温低速打浆30-60min，使产物尽可能析晶，过滤，用少量水顶洗，滤饼于50摄氏度热风循环烘箱中干燥，烘干后的滤饼重18.6g，重量收率93.0％，液相色谱纯度：98.3％。低速打浆时的转速为50-80转/分钟。
实施例4
在洁净的反应瓶中加入60ml叔丁醇、60ml水、20ml缓冲液，缓冲液为0.5mol/L的pH值为7.5的三羟甲基氨基甲烷盐酸盐，搅拌混匀后加入20.0g(5β)-3,7-二酮-24-胆酸和6.0g葡萄糖，用2mol/L的氢氧化钠水溶液调节pH至6.5-7.5，调节反应温度为30-35℃，待体系充分混匀后，向体系中加入20ml葡萄糖脱氢酶、20ml 3β-类固醇脱氢酶、20ml 7β-类固醇脱氢酶、4.0g辅酶I和4.0g辅酶II。搅拌混匀后，用2mol/L的氢氧化钠水溶液调节pH＝6.5-7.5反应。反应16h，薄层色谱法检测反应完全后停止反应。反应结束后将反应体系调温至40℃，0.1MPa负压旋蒸浓缩，除去其中叔丁醇，体系中产物大量析晶。然后将体系4℃低温低速打浆30-60min，使产物尽可能析晶，过滤，用少量水顶洗，滤饼于50℃热风循环烘箱中干燥，烘干后的滤饼重44.5g。加入100ml乙酸乙酯萃取滤饼，常温打浆30min后趁热过滤，滤饼用少量乙酸乙酯顶洗。将滤液调温至30℃，0.1MPa负压旋蒸浓缩，浓缩到小体积时加入40ml水置换乙酸乙酯，尽可能除去乙酸乙酯后产物析出，将体系4℃低温低速打浆30-60min，使产物尽可能析晶，过滤，用少量水顶洗，滤饼于50℃热风循环烘箱中干燥，烘干后的滤饼重19.5g，重量收率97.5％，液相色谱纯度：96.8％。低速打浆时的转速为50-80转/分钟。
实施例5
在洁净的反应瓶中加入40ml叔丁醇、80ml水、20ml缓冲液，缓冲液为0.5mol/L的pH值为7.5的三羟甲基氨基甲烷盐酸盐，搅拌混匀后加入20.0g(5β)-3,7-二酮-24-胆酸和6.0g葡萄糖，用2mol/L的氢氧化钠水溶液调节pH至6.5～7.5，调节反应温度为30～35℃，待体系充分混匀后，向体系中加入20ml葡萄糖脱氢酶、20ml 3β-类固醇脱氢酶、2.0g辅酶I和2.0g辅酶II。搅拌混匀后，用2mol/L的氢氧化钠水溶液调节pH＝6.5-7.5反应。反应16h，薄层色谱法检测反应完全后加入20ml葡萄糖脱氢酶、20ml 7β-类固醇脱氢酶、6.0g葡萄糖、2.0g辅酶I和2.0g辅酶II。搅拌混匀后继续反应6h，薄层色谱法检测反应完全后停止反应。反应结束后将反应体系调温至40℃，0.1MPa负压旋蒸浓缩，尽可能除去其中叔丁醇，体系中产物大量析晶。然后将体系4℃低温低速打浆30-60min，使产物尽可能析晶，过滤，用少量水顶洗，滤饼于50℃热风循环烘箱中干燥，烘干后的滤饼重44.9g。加入100ml乙酸乙酯萃取滤饼，常温打浆30min后趁热过滤，滤饼用少量乙酸乙酯顶洗。将滤液调温至30℃，0.1MPa负压旋蒸浓缩，浓缩到小体积时加入40ml水置换乙酸乙酯，除去乙酸乙酯后产物析出，将体系4℃低温低速打浆30-60min，使产物尽可能析晶，过滤，用少量水顶洗，滤饼于50℃热风循环烘箱中干燥，烘干后的滤饼重19.2g，重量收率96.0％，液相色谱纯度：97.4％。低速打浆时的转速为50-80转/分钟。
实施例6
在洁净的反应瓶中加入60ml叔丁醇、60ml水、20ml缓冲液，缓冲液为0.5mol/L的pH值为7.5的三羟甲基氨基甲烷盐酸盐，搅拌混匀后加入20.0g(5β)-3,7-二酮-24-胆酸和6.0g葡萄糖，用2mol/L的氢氧化钠水溶液调节pH至6.5～7.5，调节反应温度为25-30℃，待体系充分混匀后，向体系中加入20ml葡萄糖脱氢酶、20ml 3β-类固醇脱氢酶、2.0g辅酶I和2.0g辅酶II。搅拌混匀后，用2mol/L的氢氧化钠水溶液调节pH＝6.5-7.5反应。反应16h，薄层色谱法检测反应完全后加入20ml葡萄糖脱氢酶、20ml 7β-类固醇脱氢酶、6.0g葡萄糖、2.0g辅酶I和2.0g辅酶II。搅拌混匀后继续反应8h，薄层色谱法检测反应完全后停止反应。反应结束后将反应体系调温至40℃，0.1MPa负压旋蒸浓缩，尽可能除去其中叔丁醇，体系中产物大量析晶。然后将体系4℃低温低速打浆30-60min，使产物尽可能析晶，过滤，用少量水顶洗，滤饼于50℃热风循环烘箱中干燥，烘干后的滤饼重44.4g。加入100ml乙酸乙酯萃取滤饼，常温打浆30min后趁热过滤，滤饼用少量乙酸乙酯顶洗。将滤液调温至30℃，0.1MPa负压旋蒸浓缩，浓缩到小体积时加入40ml水置换乙酸乙酯，尽可能除去乙酸乙酯后产物析出，将体系4℃低温低速打浆30-60min，使产物尽可能析晶，过滤，用少量水顶洗，滤饼于50℃热风循环烘箱中干燥，烘干后的滤饼重19.3g，重量收率96.5％，液相色谱纯度：97.2％。低速打浆时的转速为50-80转/分钟。
实施例7
在洁净的反应瓶中加入60ml叔丁醇、60ml水、20ml缓冲液，缓冲液为0.5mol/L的pH值为7.5的三羟甲基氨基甲烷盐酸盐，搅拌混匀后加入20.0g(5β)-3,7-二酮-24-胆酸和6.0g葡萄糖，用2mol/L的氢氧化钠水溶液调节pH至7.5～8.0，调节反应温度为30～35℃，待体系充分混匀后，向体系中加入20ml葡萄糖脱氢酶、20ml 3β-类固醇脱氢酶、2.0g辅酶I和2.0g辅酶II。搅拌混匀后，用2mol/L的氢氧化钠水溶液调节pH＝7.5-8.0反应。反应16h，薄层色谱法检测反应完全后加入20ml葡萄糖脱氢酶、20ml 7β-类固醇脱氢酶、6.0g葡萄糖、2.0g辅酶I和2.0g辅酶II。搅拌混匀后继续反应6h，薄层色谱法检测反应完全后停止反应。反应结束后将反应体系调温至40℃，0.1MPa负压旋蒸浓缩，尽可能除去其中叔丁醇，体系中产物大量析晶。然后将体系4℃低温低速打浆30-60min，使产物尽可能析晶，过滤，用少量水顶洗，滤饼于50℃热风循环烘箱中干燥，烘干后的滤饼重43.8g。加入100ml乙酸乙酯萃取滤饼，常温打浆30min后趁热过滤，滤饼用少量乙酸乙酯顶洗。将滤液调温至30℃，0.1MPa负压旋蒸浓缩，浓缩到小体积时加入40ml水置换乙酸乙酯，尽可能除去乙酸乙酯后产物析出，将体系4℃低温低速打浆30-60min，使产物尽可能析晶，过滤，用少量水顶洗，滤饼于50℃热风循环烘箱中干燥，烘干后的滤饼重19.1g，重量收率95.5％，液相色谱纯度：96.8％。低速打浆时的转速为50-80转/分钟。
实施例8
在洁净的反应瓶中加入60ml叔丁醇、60ml水、20ml缓冲液，缓冲液为0.5mol/L的pH值为7.5的三羟甲基氨基甲烷盐酸盐，搅拌混匀后加入20.0g(5β)-3,7-二酮-24-胆酸和6.0g葡萄糖，用2mol/L的氢氧化钠水溶液调节pH至6.0-6.5，调节反应温度为30-35℃，待体系充分混匀后，向体系中加入20ml葡萄糖脱氢酶、20ml 3β-类固醇脱氢酶、2.0g辅酶I和2.0g辅酶II。搅拌混匀后，用2mol/L的氢氧化钠水溶液调节pH＝6.0-6.5反应。反应16h，薄层色谱法检测反应完全后加入20ml葡萄糖脱氢酶、20ml 7β-类固醇脱氢酶、6.0g葡萄糖、2.0g辅酶I和2.0g辅酶II。搅拌混匀后继续反应8h，薄层色谱法检测反应完全后停止反应。反应结束后将反应体系调温至40℃，0.1MPa负压旋蒸浓缩，尽可能除去其中叔丁醇，体系中产物大量析晶。然后将体系4℃低温低速打浆30-60min，使产物尽可能析晶，过滤，用少量水顶洗，滤饼于50℃热风循环烘箱中干燥，烘干后的滤饼重44.5g。加入100ml乙酸乙酯萃取滤饼，常温打浆30min后趁热过滤，滤饼用少量乙酸乙酯顶洗。将滤液调温至30℃，0.1MPa负压旋蒸浓缩，浓缩到小体积时加入40ml水置换乙酸乙酯，尽可能除去乙酸乙酯后产物析出，将体系4℃低温低速打浆30-60min，使产物尽可能析晶，过滤，用少量水顶洗，滤饼于50℃热风循环烘箱中干燥，烘干后的滤饼重19.4g，重量收率97.0％，液相色谱纯度：97.5％。低速打浆时的转速为50-80转/分钟。
本发明取样进行后处理后送核磁检测，通过氢谱碳谱鉴别的方式验证了最终产物为目标产品，结构为(3β，5β，7β)-3，7-二羟基-24-胆酸：1H NMR(400MHz,Methanol-d4)δ3.99(d,J＝3.5Hz,1H),3.53-3.36(m,1H),2.33(ddd,J＝15.1,9.8,5.3Hz,1H),2.19(ddd,J＝15.6,9.4,6.8Hz,1H),2.03(dt,J＝12.6,3.1Hz,1H),1.95-1.75(m,6H),1.59-1.37(m,11H),1.37-1.05(m,6H),0.99(s,3H),0.96(d,J＝6.4Hz,3H),0.72(s,3H).13C NMR(101MHz,CD3OD)δ176.77,70.62,66.03,56.12,55.19,43.41,42.97,40.20,38.63,37.19,36.85,35.30,34.28,33.88,31.00,30.65,29.38,28.24,27.03,26.54,23.05,21.32,17.56,11.28.
并鉴别出中间体结构为(3β，5β)-3-羟基-7-酮基-24-胆酸：1H NMR(400MHz,Methanol-d4)δ3.97(t,J＝3.1Hz,1H),3.00(dd,J＝12.6,6.1Hz,1H),2.54(t,J＝11.3Hz,1H),2.40-2.09(m,4H),2.06-2.01(m,1H),1.96-1.87(m,1H),1.85-1.74(m,4H),1.69-1.26(m,14H),1.25(s,3H),1.22-0.99(m,2H),0.96(d,J＝6.5Hz,3H),0.71(s,3H).13C NMR(101MHz,CD3OD)δ214.26,176.66,65.58,54.90,49.37,48.98,44.71,42.47,42.45,41.31,38.96,35.40,35.16,34.15,30.93,30.58,28.74,27.88,26.68,24.41,22.65,21.69,17.47,11.09.
本发明中的，3β-羟基类固醇脱氢酶、7β-羟基类固醇脱氢酶、葡萄糖脱氢酶、辅酶I(NAD+)即氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸、辅酶II(NADP+)即氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸盐，均能通过商购获得。
本发明是一种合适的制备3β-熊去氧胆酸的方法，为快速获得高质量的3β-熊去氧胆酸产品提供了制备方法。同时，本发明的实验条件温和，生产过程的试剂均毒性小，污染小，生产成本低，可操作性强。
以上内容是结合具体的优选实施方式对本发明作的进一步详细说明，不能认定本发明的具体实施只局限于这些说明。对于本发明所属技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干简单推演和替换，都应当视为属于本发明的保护范围。
Claims (10)
1.一种3β-熊去氧胆酸的合成方法，其特征在于，包括以下步骤：
步骤1、向反应器中加入叔丁醇或异丙醇、水、缓冲液混合形成体系溶液，再加入葡萄糖和(5β)-3,7-二酮-24-胆酸，向体系溶液中继续加入氢氧化钠水溶液调节pH值为6～8，调节反应温度为25～35℃，待体系溶液充分混匀后，加入3β-类固醇脱氢酶、葡萄糖脱氢酶、辅酶I和辅酶II，并用氢氧化钠水溶液调节pH值为6～8，进行第一次反应，生成中间体；
步骤2、接着向体系溶液中加入7β-类固醇脱氢酶、葡萄糖脱氢酶、葡萄糖、辅酶I和辅酶II，并用氢氧化钠水溶液调节pH值为6～8，进行第二次反应。
2.根据权利要求1所述的3β-熊去氧胆酸的合成方法，其特征在于，所述步骤1中，第一次反应的反应时间为2～24h，且在第一次反应和第二次反应进行一段时间后均通过薄层色谱法观察是否完全反应。
3.根据权利要求1所述的3β-熊去氧胆酸的合成方法，其特征在于，所述步骤1中，用氢氧化钠水溶液调节体系溶液的pH值，将pH值调节至6.5～7.5再进行反应；步骤2中，用氢氧化钠水溶液调节体系溶液的pH值，将pH值调节至6.5～7.5再进行反应。
4.根据权利要求1所述的3β-熊去氧胆酸的合成方法，其特征在于，所述步骤1中的反应温度调节为30～35℃。
5.根据权利要求1所述的3β-熊去氧胆酸的合成方法，其特征在于，所述3β-熊去氧胆酸的合成方法还包括步骤01，步骤01在步骤1之前，
步骤01、向熊去氧胆酸中加入次氯酸钠水溶液，氧化得到(5β)-3,7-二酮-24-胆酸。
6.根据权利要求1所述的3β-熊去氧胆酸的合成方法，其特征在于，所述3β-熊去氧胆酸的合成方法还包括步骤3，
步骤3、对第二次反应完成后的体系溶液，进行第一次负压旋蒸浓缩，然后对体系溶液低温低速打浆，使晶体析出，进行第一次过滤，得到的滤饼进行烘干，再加入乙酸乙酯萃取烘干的滤饼，常温打浆后进行第二次过滤，将得到的滤液进行第二次负压旋蒸浓缩，浓缩后加入水置换乙酸乙酯，然后对体系溶液低温低速打浆，进行第三次过滤，得到的滤饼进行烘干。
7.根据权利要求6所述的3β-熊去氧胆酸的合成方法，其特征在于，所述步骤3中，第一次负压旋蒸浓缩的温度为28～52℃，压力为0.05～0.15MPa；第二次负压旋蒸浓缩的温度为28～32℃，压力为0.05～0.15MPa；
低温低速打浆的温度为2～6℃，打浆的转速为50～80转/min，低温低速打浆的时间为30～60min，常温打浆的时间为28～32min；烘干采用48～52℃热风循环烘箱中进行烘干。
8.根据权利要求6所述的3β-熊去氧胆酸的合成方法，其特征在于，所述步骤3中，第一次过滤和第三次过滤的过滤温度为0～5℃，第二次过滤的过滤温度为38～42℃；第一次过滤和第三次过滤过滤结束后均用水进行顶洗，第二次过滤结束后用乙酸乙酯进行顶洗。
9.根据权利要求1所述的3β-熊去氧胆酸的合成方法，其特征在于，所述步骤1中，向反应器中加入的叔丁醇或异丙醇与水的体积比为1：0.67～19。
10.根据权利要求1所述的3β-熊去氧胆酸的合成方法，其特征在于，所述缓冲液为三羟甲基氨基甲烷盐酸盐。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202210868494.XA CN115011661A (zh) | 2022-07-22 | 2022-07-22 | 一种3β-熊去氧胆酸的合成方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202210868494.XA CN115011661A (zh) | 2022-07-22 | 2022-07-22 | 一种3β-熊去氧胆酸的合成方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN115011661A true CN115011661A (zh) | 2022-09-06 |
Family
ID=83082437
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202210868494.XA Pending CN115011661A (zh) | 2022-07-22 | 2022-07-22 | 一种3β-熊去氧胆酸的合成方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN115011661A (zh) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN115505622A (zh) * | 2022-10-31 | 2022-12-23 | 湖南科瑞生物制药股份有限公司 | 制3α,7β-二羟基-5α-H的UDCA异构体方法 |
| CN115637281A (zh) * | 2022-10-31 | 2023-01-24 | 湖南科瑞生物制药股份有限公司 | 制3β,7β-二羟基-5α-H的UDCA异构体方法 |
Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2006110172A2 (en) * | 2004-09-29 | 2006-10-19 | Hollis-Eden Pharmaceuticals.Inc. | Steroid analogs and characterization and treatment methods |
| JP2009084275A (ja) * | 2007-09-13 | 2009-04-23 | Mitsubishi Chemicals Corp | ウルソデオキシコール酸の製造方法 |
| CN106687460A (zh) * | 2014-07-29 | 2017-05-17 | 深圳君圣泰生物技术有限公司 | 小檗碱盐、熊去氧胆酸盐、相关复方及其制备方法和应用 |
| CN109912676A (zh) * | 2019-03-07 | 2019-06-21 | 华东师范大学 | 一种3β-熊去氧胆酸的制备方法 |
| CN113061637A (zh) * | 2020-01-02 | 2021-07-02 | 四川百特芳华医药科技有限公司 | 一种熊去氧胆酸的制备方法 |
| CN113968891A (zh) * | 2021-11-15 | 2022-01-25 | 湖南科瑞生物制药股份有限公司 | 一种植物源7-酮基石胆酸的制备方法 |
-
2022
- 2022-07-22 CN CN202210868494.XA patent/CN115011661A/zh active Pending
Patent Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2006110172A2 (en) * | 2004-09-29 | 2006-10-19 | Hollis-Eden Pharmaceuticals.Inc. | Steroid analogs and characterization and treatment methods |
| JP2009084275A (ja) * | 2007-09-13 | 2009-04-23 | Mitsubishi Chemicals Corp | ウルソデオキシコール酸の製造方法 |
| CN106687460A (zh) * | 2014-07-29 | 2017-05-17 | 深圳君圣泰生物技术有限公司 | 小檗碱盐、熊去氧胆酸盐、相关复方及其制备方法和应用 |
| CN109912676A (zh) * | 2019-03-07 | 2019-06-21 | 华东师范大学 | 一种3β-熊去氧胆酸的制备方法 |
| CN113061637A (zh) * | 2020-01-02 | 2021-07-02 | 四川百特芳华医药科技有限公司 | 一种熊去氧胆酸的制备方法 |
| CN113968891A (zh) * | 2021-11-15 | 2022-01-25 | 湖南科瑞生物制药股份有限公司 | 一种植物源7-酮基石胆酸的制备方法 |
Non-Patent Citations (6)
| Title |
|---|
| A K BATTA等: "Selective reduction of oxo bile acids: synthesis of 3β-, 7β-, and 12β-hydroxy bile acids", JOURNAL OF LIPID RESEARCH, vol. 6, no. 32, 30 June 1991 (1991-06-30), pages 977 - 83 * |
| GAO M等: "Molecular Mechanism Study on Stereo-Selectivity of α or β Hydroxysteroid Dehydrogenases", CRYSTALS, vol. 3, no. 11, 25 February 2021 (2021-02-25), pages 224 * |
| ZHI-NENG YOU等: "Switching Cofactor Dependence of 7β-Hydroxysteroid Dehydrogenase for Cost-Effective Production of Ursodeoxycholic Acid", ACS CATALYSIS, vol. 9, no. 1, 6 December 2018 (2018-12-06), pages 466 - 473 * |
| 应安国等: "离子液体在有机合成中的应用研究进展", 有机化学, vol. 12, no. 28, 15 December 2008 (2008-12-15), pages 2081 - 2094 * |
| 郑凡;丘荣茂;向华;: "奥贝胆酸几种合成方法比较", 广东化工, no. 11, 15 June 2018 (2018-06-15), pages 122 - 124 * |
| 黄思: "金钗石斛总生物碱对高脂饮食模型小鼠胆汁酸代谢的影响与机制研究", 中国优秀硕士学位论文全文数据库医药卫生科技辑, vol. 2019, no. 8, 15 August 2019 (2019-08-15), pages 1 - 52 * |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN115505622A (zh) * | 2022-10-31 | 2022-12-23 | 湖南科瑞生物制药股份有限公司 | 制3α,7β-二羟基-5α-H的UDCA异构体方法 |
| CN115637281A (zh) * | 2022-10-31 | 2023-01-24 | 湖南科瑞生物制药股份有限公司 | 制3β,7β-二羟基-5α-H的UDCA异构体方法 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN115011661A (zh) | 一种3β-熊去氧胆酸的合成方法 | |
| CN110791538A (zh) | 一种适用于酶法合成磷酸西格列汀的生产方法 | |
| CN103159816A (zh) | 一种从植物甾醇发酵液中提取4-雄烯二酮的方法 | |
| CN112645912B (zh) | 一种高纯度m2晶型麦考酚钠的制备方法 | |
| CN101941983A (zh) | 一种高纯度头孢西丁钠的制备方法 | |
| WO2021212535A1 (zh) | 一种盐酸苯海索精制方法 | |
| CA2789928C (en) | Process for the preparation of scyllo-inositol | |
| CN115637281A (zh) | 制3β,7β-二羟基-5α-H的UDCA异构体方法 | |
| CN111116692A (zh) | 一种高纯度塞拉菌素的合成方法 | |
| CN115505622A (zh) | 制3α,7β-二羟基-5α-H的UDCA异构体方法 | |
| EP1832593A1 (en) | Direct process for the production of sterile Cefepime dihydrochloride monohydrate | |
| CN107033114B (zh) | 一种二氢杨梅素的分离纯化方法 | |
| CN112010805B (zh) | 一种盐酸法舒地尔的精制方法 | |
| JP4954421B2 (ja) | クラブラン酸塩の精製方法 | |
| CN108586490A (zh) | 头孢噻肟酸的制备方法 | |
| CN109796333B (zh) | 一种从发酵液中提取纯化普伐他汀钠的方法 | |
| CN109678919B (zh) | 一种琥珀酸甲泼尼龙杂质的制备方法 | |
| CN113354526A (zh) | 一种辅酶q10的碱提纯方法 | |
| CN108440521B (zh) | 一种利用黄藤素生产盐析废液制备黄藤素的方法 | |
| CN105503986A (zh) | 一种醋酸泼尼松龙的制备方法 | |
| CN114716335A (zh) | 制备n-乙酰-l-酪氨酸的方法 | |
| CN110862429A (zh) | 一种七叶皂苷钠的制备方法 | |
| CN114702487B (zh) | 一种麦角酸的纯化方法 | |
| CN115838363B (zh) | 一种麦考酚酸的纯化方法 | |
| CN108623598A (zh) | 一种亚胺培南中间体及亚胺培南的制备方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination |