CN115010689A - 一种化合物kurarinol A及其制备方法与应用 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种化合物kurarinol A及其制备方法与应用，属于生物医药技术领域。化合物kurarinol A的化学结构式为：
Figure DDA0003746356750000011
上述化合物的制备方法包括：将由苦参根制得的乙酸乙酯萃取物进行硅胶柱层析，得到组分A至组分G；将组分E进行硅胶柱色谱分离，得到流份E1至流份E3；将流份E3过聚酰胺柱，收集具有活性成分的流份，所得的化合物属于薰衣草基黄酮类成分，具有较佳的保肝作用。此外，制备原料包括上述化合物的药物或食品也能够具有一定的保肝作用。

Description

一种化合物kurarinol A及其制备方法与应用
技术领域
本发明涉及生物医药技术领域，具体而言，涉及一种化合物kurarinol A及其制备方法与应用。
背景技术
肝脏是人体中调节各种生理的主要器官之一，中医认为肝主藏血，主疏泄，肝脏对于人体的作用不言而喻。现如今肝病已成为常见的危害人类身心健康的疾病且是全球性高死亡率疾病，而肝损伤是造成肝病的重要因素。肝损伤可大致分为急性肝损伤和慢性肝损伤，肝损伤的形成如不加以控制可进一步恶化成肝纤维化、肝硬化、肝癌等疾病。
中药苦参是豆科槐属植物，于中国的山西、湖北、贵州等省份分布广泛，苦参根入药可清热利湿，抗菌消炎。目前苦参的功效主要是基于抗肿瘤和抗氧化方面，对于苦参根的功效成分以及其它功效还有待进一步研究。
鉴于此，特提出本发明。
发明内容
本发明的目的之一在于提供一种化合物kurarinol A，其来源于苦参根，具有一定的保肝作用。
本发明的目的之二在于提供一种上述化合物kurarinol A的制备方法。
本发明的目的之三在于提供一种上述化合物kurarinol A的应用。
本发明的目的之四在于提供一种制备原料含有上述化合物kurarinol A的药物。
本发明的目的之五在于提供一种制备原料含有上述化合物kurarinol A的食品。
本申请可这样实现：
第一方面，本申请提供一种化合物kurarinol A，其化学结构式为：
Figure BDA0003746356730000021
第二方面，本申请提供如前述实施方式的化合物kurarinol A的制备方法，包括以下步骤：
将由苦参根制得的乙酸乙酯萃取物进行硅胶柱层析，硅胶柱层析的条件包括：以石油醚-乙酸乙酯为洗脱剂，按石油醚与乙酸乙酯的体积比依次为100:0、48-52:1、18-22:1、8-12:1、7.5-8.5:1、5.5-6.5:1、3.5-4.5:1、1.5-2.5:1、0.5-1.5:1以及0:1的比例进行梯度洗脱；每个梯度所用的洗脱剂体积为4-6L，根据TLC及HPLC检测结果，将10个梯度的洗脱液进行合并，得到组分A至组分G；
将组分E进行硅胶柱色谱分离，以石油醚-乙酸乙酯作为洗脱剂，按石油醚与乙酸乙酯的体积比依次为100:0、48-52:1、8-12:1、5.5-6.5:1、3.5-4.5:1、1.5-2.5:1、0.5-1.5:1的比例进行梯度洗脱；每个梯度所用的洗脱剂体积为2-3L，经TLC和HPLC检测结果，将7个梯度的洗脱液合并，得到流份E1至流份E3；
将流份E3过聚酰胺柱，以二氯甲烷-甲醇作为洗脱剂，按二氯甲烷与甲醇的体积比依次为100:0、48-52:1、8-12:1、5.5-6.5:1、3.5-4.5:1、1.5-2.5:1、0.5-1.5:1的比例进行梯度洗脱；每个梯度所用的洗脱剂体积为1.5-2.5L，收集具有活性成分的流份。
在可选的实施方式中，硅胶柱层析过程中，洗脱流速为140-160mL/min；
和/或，硅胶柱色谱分离过程中，洗脱流速为70-90mL/min；
和/或，聚酰胺柱过柱过程中，洗脱流速为60-80mL/min。
在可选的实施方式中，还包括：将收集到的具有活性成分的流份依次进行LH-20凝胶色谱柱纯化和HPLC半制备，得到化合物kurarinol A。
在可选的实施方式中，LH-20凝胶色谱柱纯化过程中，以甲醇作为洗脱剂进行等度洗脱，流速为每4-5s对应1滴洗脱剂，洗脱剂的体积为1.5-2.5L。
在可选的实施方式中，HPLC半制备的条件包括：色谱柱为YMC Pack ODS-Acolumn，色谱柱的规格为10mm×250mm，色谱柱中填料粒径为5μm；洗脱剂为体积比为35-45:65-55的甲醇和水，洗脱形式为等度洗脱，检测波长为254-365nm，流速为1.8-2.2mL/min。
在可选的实施方式中，由苦参根制得的乙酸乙酯萃取物经以下方式得到：将苦参的根进行醇浸泡提取或醇回流提取，将提取后的醇提物进行乙酸乙酯萃取。
第三方面，本申请提供如前述实施方式的化合物kurarinol A或前述实施方式任一项的制备方法中的醇提物或乙酸乙酯萃取物在制备食品和/或具有保肝作用的药物中的应用。
第四方面，本申请提供一种食品，其制备原料中含有前述实施方式的化合物kurarinol A，或含有前述实施方式任一项的制备方法中的醇提物或乙酸乙酯萃取物。
第五方面，本申请提供一种药物，其制备原料中含有前述实施方式的化合物kurarinol A、其药学上可接受的盐、酯、溶剂化物、立体异构体、互变异构体以及前药中的至少一种，或含有前述实施方式任一项的制备方法中的醇提物或乙酸乙酯萃取物。
在可选的实施方式中，药物的制备原料还包括药学上可接受的载体和/或辅料。
在可选的实施方式中，制备原料包括稀释剂、赋形剂、填充剂、粘合剂、湿润剂、崩解剂、吸收促进剂、表面活性剂、吸附载体和润滑剂中的至少一种；
在可选的实施方式中，药物的剂型包括片剂、散剂、丸剂、注射剂、胶囊剂、膜剂、栓剂、膏剂或冲剂。
本申请的有益效果包括：
本申请提供的化合物kurarinol A为首次从苦参根中分离得到的全新薰衣草基黄酮类化合物，拓宽了对苦参根中化学成分的研究。上述化合物kurarinol A的制备方法简单，易操作，能够制备得到较高得率和纯度的化合物。该化合物具有较佳的保护肝损伤的作用，且细胞毒性小，可用于制备食品或具有保肝作用的药物，为抗肝损伤的药物的研发提供了新的思路。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，应当理解，以下附图仅示出了本发明的某些实施例，因此不应被看作是对范围的限定，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他相关的附图。
图1为实施例2中乙酸乙酯萃取物以及组分A至组分G所含成分的HPLC检测结果图；
图2为实施例3中化合物kurarinol A的氢谱图；
图3为实施例3中化合物kurarinol A的碳谱图；
图4为实施例3中化合物kurarinol A的HSQC谱图；
图5为实施例3中化合物kurarinol A的HMBC谱图；
图6为实施例3中化合物kurarinol A的1H-1H COSY谱图；
图7为实施例3中化合物kurarinol A的红外谱图；
图8为实施例3中化合物kurarinol A的紫外谱图；
图9为实施例3中化合物kurarinol A的HRESI质谱谱图；
图10为实施例4中苦参提取物和化合物kurarinol A对四氯化碳造成的HepG2细胞急性损伤的保护活性结果图；
图11为实施例5中苦参提取物对由四氯化碳诱导引起的肝损伤的保护作用结果图；
图12为实施例5中化合物kurarinol A对由四氯化碳诱导引起的肝损伤的保护作用结果图。
具体实施方式
为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。
下面对本申请提供的化合物kurarinol A及其制备方法与应用进行具体说明。
本申请提出一种化合物kurarinol A，其化学结构式为：
Figure BDA0003746356730000051
该化合物kurarinol A属于薰衣草基黄酮类化合物。
上述化合物kurarinol A的制备方法可包括以下步骤：
将由苦参根制得的乙酸乙酯萃取物进行硅胶柱层析。
上述由苦参根制得的乙酸乙酯萃取物可经以下方式得到：将苦参的根进行醇浸泡提取或醇回流提取，将提取后的醇提物进行乙酸乙酯萃取。
其中，醇浸泡示例性但非限定性地可参照以下方式：
将干燥后的苦参根粉碎，按料液比为1:28-32(优选1:30)，于乙醇含量为92-98vt％(优选95vt％)的乙醇-水溶液中浸泡提取6-8天(优选7天)，第一次固液分离(如过滤，下同)后，将固体按料液比为1:28-32(优选1:30)，再于乙醇含量为92-98vt％(优选95vt％)的乙醇-水溶液中浸泡6-8天(优选7天)，第二次固液分离后，将固体按料液比为1:28-32(优选1:30)，再于乙醇含量为72-78vt％(优选75vt％)的乙醇-水溶液中浸泡6-8天(优选7天)，合并每次分离后的浸泡液。
醇回流提取即将上述浸泡方式替换成回流方式即可。回流温度为80-90℃(优选85℃)，每次回流时间为2-3h。也即，将苦参根的干粉在乙醇浓度为95vt％的乙醇-水溶液中回流提取2次，再在乙醇浓度为75vt％的乙醇-水溶液中提取1次，每次2-3小时，合并每次分离后的回流液。
较佳地，硅胶柱层析之前，还包括将合并后的提取液浓缩，得到苦参醇提取物浸膏。接着用蒸馏水分散此浸膏，并用乙酸乙酯萃取3次，浓缩合并滤液，经真空冻干，得到苦参乙酸乙酯提取物粉末，置入干燥器中，备用。
作为参考地，本申请中，硅胶柱层析的条件包括：以石油醚-乙酸乙酯为洗脱剂，按石油醚与乙酸乙酯的体积比依次为100:0、48-52:1、18-22:1、8-12:1、7.5-8.5:1、5.5-6.5:1、3.5-4.5:1、1.5-2.5:1、0.5-1.5:1以及0:1的比例进行梯度洗脱；每个梯度所用的洗脱剂体积为4-6L，根据TLC及HPLC检测结果，将10个梯度的洗脱液进行合并，得到组分A至组分G。
上述过程中，洗脱流速可以为140-160mL/min。
进一步地，将组分E进行硅胶柱色谱分离，以石油醚-乙酸乙酯作为洗脱剂，按石油醚与乙酸乙酯的体积比依次为100:0、48-52:1、8-12:1、5.5-6.5:1、3.5-4.5:1、1.5-2.5:1、0.5-1.5:1的比例进行梯度洗脱；每个梯度所用的洗脱剂体积为2-3L，经TLC和HPLC检测结果，将7个梯度的洗脱液合并，得到流份E1至流份E3。
该过程中，洗脱流速可以为70-90mL/min。
进一步地，将流份E3过聚酰胺柱，以二氯甲烷-甲醇作为洗脱剂，按二氯甲烷与甲醇的体积比依次为100:0、48-52:1、8-12:1、5.5-6.5:1、3.5-4.5:1、1.5-2.5:1、0.5-1.5:1的比例进行梯度洗脱；每个梯度所用的洗脱剂体积为1.5-2.5L，收集具有活性成分的流份。
该过程中，洗脱流速可以为60-80mL/min。
在一些优选的实施方式中，硅胶柱层析中，按石油醚与乙酸乙酯的体积比依次为100:0、50:1、20:1、10:1、8:1、6:1、4:1、2:1、1:1以及0:1的比例进行梯度洗脱；每个梯度所用的洗脱剂体积为5L，洗脱流速为150mL/min。
硅胶柱色谱分离中，按石油醚与乙酸乙酯的体积比依次为100:0、50:1、10:1、6:1、4:1、2:1、1:1的比例进行梯度洗脱；每个梯度所用的洗脱剂体积为2.5L，洗脱流速为80mL/min。
过聚酰胺柱中，二氯甲烷与甲醇的体积比依次为100:0、50:1、10:1、6:1、4:1、2:1、1:1的比例进行梯度洗脱；每个梯度所用的洗脱剂体积为2L，洗脱流速为70mL/min。
进一步地，将收集到的具有活性成分的流份依次进行LH-20凝胶色谱柱纯化和HPLC半制备，得到化合物kurarinol A。
其中，LH-20凝胶色谱柱纯化过程中，以甲醇作为洗脱剂进行等度洗脱，流速为每4-5s对应1滴洗脱剂，洗脱剂的体积为1.5-2.5L。
在一些优选的实施方式中，LH-20凝胶色谱柱纯化过程中的流速为每5s对应1滴洗脱剂，洗脱剂的体积为2L。
作为参考地，上述HPLC半制备的条件例如可包括：色谱柱为YMC Pack ODS-Acolumn(YMC Co.,Ltd.,Kyoto,Japan))，色谱柱的规格为10mm×250mm，色谱柱中填料粒径为5μm；洗脱剂为体积比为35-45:65-55的甲醇和水，洗脱形式为等度洗脱，检测波长为254-365nm，流速为1.8-2.2mL/min。
在一些优选的实施方式中，HPLC半制备的洗脱剂为体积比为40:60的甲醇和水，洗脱形式为等度洗脱，检测波长为270nm，流速为2mL/min。
此外，本申请还提供了上述化合物kurarinol A或前述实施方式任一项的制备方法中的醇提物或乙酸乙酯萃取物在制备食品和/或具有保肝作用的药物中的应用。
具体的，保肝作用包括：用于预防或治疗氧化、炎症所造成的肝细胞损伤和/或肝组织损伤；或者，用于预防或治疗急性或慢性肝损伤。
相应地，本申请还提供了一种食品，其制备原料中含有上述化合物kurarinol A，或含有上述制备方法中的醇提物或乙酸乙酯萃取物。
本申请还提供了一种药物，其制备原料中含有上述化合物kurarinol A、其药学上可接受的盐、酯、溶剂化物、立体异构体、互变异构体以及前药中的至少一种，或含有上述制备方法中的醇提物或乙酸乙酯萃取物。
进一步地，药物的制备原料还可包括药学上可接受的载体和/或辅料。
示例性地，上述载体和/或辅可包括稀释剂、赋形剂、填充剂、粘合剂、湿润剂、崩解剂、吸收促进剂、表面活性剂、吸附载体和润滑剂中的至少一种。
药物的剂型示例性但非限定性地可包括片剂、散剂、丸剂、注射剂、胶囊剂、膜剂、栓剂、膏剂或冲剂。上述各种剂型的药物均可以按照药学领域的常规方法制备。
以下结合实施例对本发明的特征和性能作进一步的详细描述。
实施例1
化合物kurarinol A的制备
将干燥后的苦参根(25kg)粉碎，按料液比为1:30，于乙醇含量为95vt％的乙醇-水溶液中浸泡提取7天；第一次过滤后，将固体按料液比为1:30，再于乙醇含量为95vt％的乙醇-水溶液中浸泡7天；第二次过滤后，将固体按料液比为1:30于乙醇含量为75vt％的乙醇-水溶液中浸泡7天，第三次过滤；合并每次分离后的浸泡液。
将合并后的提取液进行浓缩，得到苦参醇提取物浸膏。接着用蒸馏水分散此浸膏，并用乙酸乙酯萃取3次，浓缩合并滤液，经真空冻干，得到苦参乙酸乙酯提取物粉末(即乙酸乙酯萃取物)，置入干燥器中，备用。
将上述乙酸乙酯萃取物(420g)上硅胶色谱柱，硅胶柱层析的条件包括：以石油醚-乙酸乙酯为洗脱剂，按石油醚与乙酸乙酯的体积比依次为100:0、50:1、20:1、10:1、8:1、6:1、4:1、2:1、1:1以及0:1的比例进行梯度洗脱；每个梯度所用的洗脱剂体积为5L，洗脱流速为150mL/min，根据TLC及HPLC检测结果，将10个梯度的洗脱液进行合并，得到组分A至组分G。
将组分E(120g)进行硅胶柱色谱分离，以石油醚-乙酸乙酯作为洗脱剂，按石油醚与乙酸乙酯的体积比依次为100:0、50:1、10:1、6:1、4:1、2:1、1:1的比例进行梯度洗脱；每个梯度所用的洗脱剂体积为2.5L，洗脱流速为80mL/min，经TLC和HPLC检测结果，将7个梯度的洗脱液合并，得到流份E1至流份E3。
将流份E3(40g)过聚酰胺柱，以二氯甲烷-甲醇作为洗脱剂，按二氯甲烷与甲醇的体积比依次为100:0、50:1、10:1、6:1、4:1、2:1、1:1的比例进行梯度洗脱；每个梯度所用的洗脱剂体积为2L，洗脱流速为70mL/min，收集具有活性成分的流份。
将收集到的具有活性成分的流份依次进行LH-20凝胶色谱柱纯化和HPLC半制备，得到化合物kurarinol A(33mg)。
其中，LH-20凝胶色谱柱纯化过程中，以甲醇作为洗脱剂进行等度洗脱，流速为每5s对应1滴洗脱剂，洗脱剂的体积为2L。
HPLC半制备的条件包括：色谱柱为YMC Pack ODS-A column(YMC Co.,Ltd.,Kyoto,Japan))，色谱柱的规格为10mm×250mm，色谱柱中填料粒径为5μm；洗脱剂为体积比为40:60的甲醇和水，洗脱形式为等度洗脱，检测波长为270nm，流速为2mL/min。
实施例2
乙酸乙酯萃取物以及组分A至组分G所含成分的HPLC检测
称取实施例1中干燥后的苦参乙酸乙酯提取物粉末2mg，溶于1mL甲醇中，用0.22μm微孔滤膜过滤，进样。
色谱条件：
仪器：Agilent1290高效液相色谱仪；
色谱柱：AcquityUPLCHSST3柱(1.8μm,2.1×150mm)，VanGuard预柱(1.8μm,2.1×5mm)(Waters,MA,USA)；
流动相：乙腈(A)-0.1vt％甲酸(B)；
洗脱程序：
0-10min，5-15％A；10-20min，15-35％A；20-25min，35-50％A；25-35min，50-70％A；35-40min，70-100％A；40-55min，100％A；55min停止。
检测波长：254-365nm。
分别取部分洗脱得到的组分A至组分G按上述相同方法进行HPLC检测。
检测图谱如图1所示。
图1中由上至下依次为苦参乙酸乙酯提取物、组分A至组分G的HPLC检测结果图。
实施例3
化合物kurarinol A的鉴定
化合物kurarinol A的氢谱和碳谱如图2和图3所示，其具体数据如表1所示：
表1 NMR data of kurarinol A(1H:600MHz,13C:150MHz,DMSO-d6)
Figure BDA0003746356730000111
其余谱图如图4至图9所示。
通过上述结果确定了该化合物的化学结构式为
Figure BDA0003746356730000112
并发现其为新化合物。
实施例4
苦参提取物及化合物kurarinol A对HepG2肝细胞损伤的保护作用
①、实验材料和方法。
四氯化碳储液配置：DMSO与四氯化碳按1：1(v/v)混合，涡旋得到50％CCl4储备液。向DMEM培养基中加入储备液得到含四氯化碳浓度0.35％的培养基。
HepG2培养于含10％胎牛血清的DMEM培养基中，按1×104/孔种于96孔板中，培养12h后将培养基吸出，分组加入以下液体(100μL/孔，3复孔/组)：
空白组：不含四氯化碳的空白DMEM培养基(加入不含细胞空白孔)；
空白对照组：含与加药组同等浓度的DMSO的空白DMEM培养基；
模型组：含与加药组同等浓度的DMSO的含0.35％四氯化碳的DMEM培养基；
给药组：加入终浓度为10μM的kurarinol A、阳性药水飞蓟宾(silibinin，10μM)及苦参提取物(EtOAc,25μg/mL)并含0.35％四氯化碳的DMEM培养基；
培养6h后，每孔加入10μL MTS溶液，避光孵育2-4h，490nm下测各孔吸光度。
以空白组为0％，对照组为100％，分别计算各组的细胞存活率及SD值，对化合物的保护作用进行评价，由吸光度值计算得到各组孔中细胞存活率。
计算公式如下：根据公式：细胞存活率(％)＝[OD490(样品)/OD490(对照)]×100。
②、实验结果
如图10所示，10μM kurarinol A对0.35％CCl4损伤的HepG2起到显著保作用，可以将四氯化碳损伤后的细胞存活率从26％升高至62％，其效果与阳性药水飞蓟宾相当。
初步说明kurarinol A具有显著保护急性肝损伤活性，可用于制备保护急性肝炎肝损伤药物。
实施例5
苦参提取物及化合物kurarinol A对四氯化碳造成的小鼠急性肝损伤的保护作用
①、实验材料和方法。
4-6周雄性ICR鼠购自贵州医科大学实验动物中心，给予12h光照12h黑暗，恒温，正常饲料及水饲养，于无菌环境中适应4天后进行实验。
动物随机分为7组(n＝6)，1)对照组及2)模型组动物每天按10mL/kg腹腔注射0.3％羧甲基纤维素钠溶液，3)阳性药组每天按10mL/kg腹腔注射10mg/mL的水飞蓟素混悬液(混于0.3％羧甲基纤维素钠溶液)，4)化合物kurarinol A低剂量保护组及5)化合物kurarinol A高剂量保护组每天按10mL/kg分别腹腔注射1mg/mL、5mg/mL的kurarinol A化合物混悬液(给药剂量10mg/kg、5mg/kg)，6)苦参提取物低剂量保护组、7)苦参提取物高剂量保护组每天按10mL/kg分别腹腔注射1mg/mL、0.5mg/mL的苦参提取物混悬液(给药剂量100mg/kg、300mg/kg)。连续给药7天，第7天腹腔注射6h后：1)对照组腹腔注射玉米油(7mL/kg)，2)至9)组腹腔注射CCl4造模(0.2％v/v,7mL/kg,溶于玉米油)，24h后摘眼球取血，心脏灌流后取肝组织。血液样品室温静置2h后4℃、8000g离心15min取血清。
血清样品进行血生化分析，检测ALT、AST指标。肝脏组织经多聚甲醛固定后进行石蜡包埋、切片、HE染色、拍照。
②、实验结果。
实验数据计量资料均以均数±标准差表示，两均数的比较使用SPSS16.0统计软件中的one-wayANOVA分析，*p<0.05，**p<0.01，***p<0.001与模型组比较。
肝细胞受损后会释放谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)，血清中的这些酶浓度反应肝损伤程度。如图11中(A)、图12中(A)所示，血生化结果显示苦参提取物及kurarinolA均有明显的保护效果以及剂量依赖，显著保护了四氯化碳造成的急性肝损伤。
在光学显微镜下，无损伤的小鼠肝组织切片中，可见肝细胞大小、形态均正常，无肝实质性细胞病变，中央静脉及汇管区正常，如图11中(B)、图12中(B)所示。四氯化碳损伤后的模型组，小鼠肝组织中中央静脉周围肝细胞无正常细胞形态，肝细胞肿大，部分细胞呈气球样变性，有炎症细胞浸润现象。经给药苦参提取物或kurarinol A后，肝细胞坏死程度显著减轻，炎症浸润程度降低，低剂量给药组部分细胞仍呈现气球样变性，高剂量给药组几乎无气球样变性。与血生化结果吻合，说明苦参提取物及kurarinol A均有明显保护肝损伤的效果。
综上所述，本申请提供的化合物kurarinol A为首次从苦参根中分离得到的全新薰衣草基黄酮类化合物，拓宽了对苦参根中化学成分的研究。上述化合物kurarinol A的制备方法简单，易操作，能够制备得到较高得率和纯度的化合物。该化合物具有较佳的保护肝损伤的作用，且细胞毒性小，可用于制备食品或具有保肝作用的药物，为抗肝损伤的药物的研发提供了新的思路。
以上仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，对于本领域的技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种化合物kurarinolA，其特征在于，所述化合物kurarinolA的化学结构式为：
Figure FDA0003746356720000011
2.如权利要求1所述的化合物kurarinolA的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
将由苦参根制得的乙酸乙酯萃取物进行硅胶柱层析，硅胶柱层析的条件包括：以石油醚-乙酸乙酯为洗脱剂，按石油醚与乙酸乙酯的体积比依次为100:0、48-52:1、18-22:1、8-12:1、7.5-8.5:1、5.5-6.5:1、3.5-4.5:1、1.5-2.5:1、0.5-1.5:1以及0:1的比例进行梯度洗脱；每个梯度所用的洗脱剂体积为4-6L，根据TLC及HPLC检测结果，将10个梯度的洗脱液进行合并，得到组分A至组分G；
将组分E进行硅胶柱色谱分离，以石油醚-乙酸乙酯作为洗脱剂，按石油醚与乙酸乙酯的体积比依次为100:0、48-52:1、8-12:1、5.5-6.5:1、3.5-4.5:1、1.5-2.5:1、0.5-1.5:1的比例进行梯度洗脱；每个梯度所用的洗脱剂体积为2-3L，经TLC和HPLC检测结果，将7个梯度的洗脱液合并，得到流份E1至流份E3；
将流份E3过聚酰胺柱，以二氯甲烷-甲醇作为洗脱剂，按二氯甲烷与甲醇的体积比依次为100:0、48-52:1、8-12:1、5.5-6.5:1、3.5-4.5:1、1.5-2.5:1、0.5-1.5:1的比例进行梯度洗脱；每个梯度所用的洗脱剂体积为1.5-2.5L，收集具有活性成分的流份。
3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，硅胶柱层析过程中，洗脱流速为140-160mL/min；
和/或，硅胶柱色谱分离过程中，洗脱流速为70-90mL/min；
和/或，聚酰胺柱过柱过程中，洗脱流速为60-80mL/min。
4.根据权利要求2或3所述的制备方法，其特征在于，还包括：将收集到的具有活性成分的流份依次进行LH-20凝胶色谱柱纯化和HPLC半制备，得到化合物kurarinol A。
5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，LH-20凝胶色谱柱纯化过程中，以甲醇作为洗脱剂进行等度洗脱，流速为每4-5s对应1滴洗脱剂，洗脱剂的体积为1.5-2.5L。
6.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，HPLC半制备的条件包括：色谱柱为YMCPack ODS-A column，色谱柱的规格为10mm×250mm，色谱柱中填料粒径为5μm；洗脱剂为体积比为35-45:65-55的甲醇和水，洗脱形式为等度洗脱，检测波长为254-365nm，流速为1.8-2.2mL/min。
7.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，由苦参根制得的乙酸乙酯萃取物经以下方式得到：将苦参的根进行醇浸泡提取或醇回流提取，将提取后的醇提物进行乙酸乙酯萃取。
8.如权利要求1所述的化合物kurarinolA或权利要求2-7任一项所述的制备方法中的醇提物或乙酸乙酯萃取物在制备食品和/或具有保肝作用的药物中的应用。
9.一种食品，其特征在于，所述食品的制备原料中含有权利要求1所述的化合物kurarinol A，或含有权利要求2-7任一项所述的制备方法中的醇提物或乙酸乙酯萃取物。
10.一种药物，其特征在于，所述药物的制备原料中含有权利要求1所述的化合物kurarinol A、其药学上可接受的盐、酯、溶剂化物、立体异构体、互变异构体以及前药中的至少一种，或含有权利要求2-7任一项所述的制备方法中的醇提物或乙酸乙酯萃取物；
优选地，所述药物的制备原料还包括药学上可接受的载体和/或辅料；
优选地，所述制备原料包括稀释剂、赋形剂、填充剂、粘合剂、湿润剂、崩解剂、吸收促进剂、表面活性剂、吸附载体和润滑剂中的至少一种；
优选地，所述药物的剂型包括片剂、散剂、丸剂、注射剂、胶囊剂、膜剂、栓剂、膏剂或冲剂。
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