CN114989891A - 一种当归精油及其制备方法和应用 - Google Patents

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Abstract

本发明提出了一种当归精油及其制备方法和应用，属于植物精油技术领域。包括以下步骤：S1.将醇类氢键供体、氯化胆碱混合均匀后，加入水，加热搅拌至形成稳定、均匀的透明液体，得到低共熔溶剂；S2.将当归经筛选、清洗、阴干后，粉碎过筛，得到当归粉；S3.将步骤当归粉加入低共熔溶剂中，超声加热提取，离心，上清液中加入乙酸乙酯提取，分离得到乙酸乙酯层，除去溶剂，采用分子蒸馏法精制，得到当归精油。本发明发现了一种绿色制备当归精油的方法，并分析了制得的当归精油的组分，研究了体外抗癌细胞的活性，可以应用于预防及治疗、辅助治疗抗癌症药物的制备，具有广阔的应用前景。

Description

一种当归精油及其制备方法和应用
技术领域
本发明涉及植物精油技术领域，具体涉及一种当归精油及其制备方法和应用。
背景技术
植物精油是一类有气味的挥发性油状液体物质，可从植物的花、叶、枝、根、皮、果实等中获得，具有抗菌、消炎、抗肿瘤、抗病毒、解热镇痛、祛痰止咳等功效。植物精油的提取方法包括水蒸汽蒸馏提取、溶剂提取、分子蒸馏提取、压榨提取、超声波辅助提取、酶辅助提取、超临界CO2提取、微波辅助提取等。
当归(学名：Angelica sinensis，)别名干归、秦哪、西当归、岷当归、金当归、当归身、涵归尾、当归曲、土当归，多年生草本，高0.4-1米。花期6-7月，果期7-9月。中国1957年从欧洲引种欧当归。主产甘肃东南部，以岷县产量多，质量好，其次为云南、四川、陕西、湖北等省，均为栽培。国内有些省区也已引种栽培。其根可入药，是最常用的中药之一。具有补血和血，调经止痛，润燥滑肠、抗癌、抗老防老、免疫之功效。
癌症是世界范围内一个日益严重的健康问题，根据2020年全球癌症统计报告，2020年中国新发癌症457万例，癌症死亡病例300万例，其中肝癌和结肠癌占有较高的比例。从植物中分离出的天然化合物是新型抗癌药物的丰富来源。植物精油作为天然产物的重要组成部分，其抗癌活性受到国内外学者广泛关注。近年来，植物精油的抗癌活性越来越受到研究者们的重视，但其与细胞是如何结合而发挥作用，特别是植物精油的化学成分如何与靶点作用发挥生物学效应的问题一直困扰诸多研究者。此外，天然植物提取物成分复杂，传统试验方法在筛选有效成分方面费时耗力，周期长成本高，利用各种生物信息学方法进行新药研发和靶点预测已经成为热点。因此采用分子对接技术研究植物精油抗癌活性，有助于提高活性成分的筛选效率，揭示植物精油抗癌活性的机制。
发明内容
本发明的目的在于提出一种当归精油及其制备方法和应用，分析了制得的当归精油的组分，研究了体外抗癌细胞的活性，进一步地，通过分子对接技术研究了其主要成分之一手参素与癌细胞关键酶蛋白分子对接方法，得出了该当归精油有很好的抗癌活性，可以应用于预防及治疗、辅助治疗抗癌症药物的制备，具有广阔的应用前景。
本发明的技术方案是这样实现的：
本发明提供一种当归精油的制备方法，采用低共熔溶剂提取法制备当归精油，包括以下步骤：
S1.低共熔溶剂的制备：将醇类氢键供体、氯化胆碱混合均匀后，加入水，加热搅拌至形成稳定、均匀的透明液体，得到低共熔溶剂；
S2.当归的预处理：将当归经筛选、清洗、阴干后，粉碎过筛，得到当归粉；
S3.当归精油的制备方法：将步骤S2制得的当归粉加入步骤S1制得的低共熔溶剂中，微波加热提取，离心，上清液中加入乙酸乙酯提取，分离得到乙酸乙酯层，除去溶剂，采用分子蒸馏法精制，得到当归精油。
作为本发明的进一步改进，所述醇类氢键供体选自乙二醇、丙三醇、1,2-丙二醇、1,3-丙二醇、甲醇中的至少一种。
作为本发明的进一步改进，步骤S1中所述醇类氢键供体、氯化胆碱和水的体积比为4-6：5：1-2。
作为本发明的进一步改进，步骤S2中所述筛网的目数为100-200目。
作为本发明的进一步改进，步骤S3中所述当归粉和低共熔溶剂的质量体积比为1：(3-5)g/mL。
作为本发明的进一步改进，步骤S3中所述微波加热提取中微波功率为700-1200W，加热至温度为50-80℃，提取时间为3-5h。
本发明进一步保护一种上述的制备方法制得的当归精油。
作为本发明的进一步改进，包含以下原料：手参素、反式-β-金合欢烯、Z-亚丁基苯酞、、Β-倍半水芹烯、桉油烯醇、4-乙烯基愈疮木酚、藁本内酯、2,5,6-三甲基-1,3,6-庚三烯和紫荆二烯。
本发明进一步保护如上述当归精油在制备预防及治疗、辅助治疗抗癌症药物中的应用。
作为本发明的进一步改进，所述癌症为肝癌或者结肠癌。
本发明具有如下有益效果：本发明发现了一种绿色制备当归精油的方法，并分析了制得的当归精油的组分，研究了体外抗癌细胞的活性，进一步地，通过分子对接技术研究了其主要成分之一手参素与癌细胞关键酶蛋白分子对接方法，得出了该当归精油有很好的抗癌活性，可以应用于预防及治疗、辅助治疗抗癌症药物的制备，具有广阔的应用前景。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动性的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1为当归精油总离子流图；
图2为手参素与结肠癌、肝癌靶点韦恩图；
图3为受体与配体3D结构图；
图4为手参素与2RBE(左)、2O6L(右)相互作用图；
图5为阴性对照组处理后结肠癌HCT116细胞光镜图；
图6为当归精油处理后结肠癌HCT116细胞光镜图；
图7为阴性对照组肝癌HepG2细胞光镜图；
图8为当归精油处理后肝癌HepG2细胞光镜图。
具体实施方式
下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1
一种当归精油的制备方法，采用低共熔溶剂提取法制备当归精油，包括以下步骤：
S1.低共熔溶剂的制备：将5g尿素、10g氯化胆碱混合均匀后，加入1g水，加热搅拌至形成稳定、均匀的透明液体，得到低共熔溶剂；
S2.当归的预处理：将当归经筛选、清洗、阴干后，粉碎过100目筛，得到当归粉；
S3.当归精油的制备方法：将10g步骤S2制得的当归粉加入20g步骤S1制得的低共熔溶剂中，1000W超声加热至70℃，提取3h，离心，上清液中加入乙酸乙酯提取，分离得到乙酸乙酯层，除去溶剂，采用分子蒸馏法精制，得到当归精油。
实施例2
一种当归精油的制备方法，采用低共熔溶剂提取法制备当归精油，包括以下步骤：
S1.低共熔溶剂的制备：将12g尿素、10g氯化胆碱混合均匀后，加入3g水，加热搅拌至形成稳定、均匀的透明液体，得到低共熔溶剂；
S2.当归的预处理：将当归经筛选、清洗、阴干后，粉碎过200目筛，得到当归粉；
S3.当归精油的制备方法：将10g步骤S2制得的当归粉加入50g步骤S1制得的低共熔溶剂中，1200W超声加热至90℃，提取5h，离心，上清液中加入乙酸乙酯提取，分离得到乙酸乙酯层，除去溶剂，采用分子蒸馏法精制，得到当归精油。
实施例3
一种当归精油的制备方法，采用低共熔溶剂提取法制备当归精油，包括以下步骤：
S1.低共熔溶剂的制备：将9g尿素、10g氯化胆碱混合均匀后，加入2g水，加热搅拌至形成稳定、均匀的透明液体，得到低共熔溶剂；
S2.当归的预处理：将当归经筛选、清洗、阴干后，粉碎过150目筛，得到当归粉；
S3.当归精油的制备方法：将10g步骤S2制得的当归粉加入35g步骤S1制得的低共熔溶剂中，1100W超声加热至80℃，提取4h，离心，上清液中加入乙酸乙酯提取，分离得到乙酸乙酯层，除去溶剂，采用分子蒸馏法精制，得到当归精油。
测试例1
将实施例3制得的当归精油进行GC-MS分析。
GC色谱条件：进样口温度为280℃；进样量为1.0μL；柱流量为1.0mL/min；分流比为30:1；程序升温：初始温度为40℃，保持3min，以2℃/min升温至150℃，保持2min，以10℃/min升温至280℃。
MS质谱条件:电离方式为EI电离源，电子能量70eV；离子源温度230℃，四级杆温度为150℃，质量扫描模式全扫描，扫描范围为m/z40～450u。仪器自带数据库鉴定成分进行成分比对。
GC-MS总离子流图见图1。检测结果见表1，在当归精油中共检测出66个色谱峰，鉴定出30种化合物。当归精油的主要成分种类是单萜烃(17.72％)，倍半萜烃(35.90％)，芳香族化合物(26.37％)。主要化学成分及相对百分含量为：手参素(10.90％)、反式-β-金合欢烯(9.81％)、Z-亚丁基苯酞(9.05％)、6-Butyl-1,4-cycloheptadiene(8.36％)、Β-倍半水芹烯(5.58％)、桉油烯醇(5.06％)、4-乙烯基愈疮木酚(4.35％)、藁本内酯(3.91％)、2,5,6-三甲基-1,3,6-庚三烯(3.74％)和紫荆二烯(3.23％)。
表1当归精油主要化学成分
Figure BDA0003662540210000071
Figure BDA0003662540210000081
Figure BDA0003662540210000091
测试例2手参素与癌细胞关键酶蛋白分子对接
手参素是当归精油中含量最高的成分。
(1)从https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/网站查找枯茗醛(cuminaldehyde)结构信息，获得SMILES式为：CC(C)C1＝CC＝C(C＝C1)C＝O。手参素(4-Methyl-1-(prop-1-en-2-yl)cyclohexene)结构信息，获得SMILES式为：CC1＝CCC(CC1)C(＝C)C。
(2)在http://www.swisstargetprediction.ch/网站中插入枯茗醛结构信息CC(C)C1＝CC＝C(C＝C1)C＝O，点“＝”后得到结构信息，选择“Homo sapiens”，获得手参素预测靶点信息，见表2，共有92个。优先选择“Probability”系数大的靶点，系数为零的可不考虑。
表2手参素、肝癌与结肠癌共有靶点
Figure BDA0003662540210000101
(3)分别在https://www.genecards.org/网站输入关键词：“colon cancer”、输出结肠癌靶点，共有21464个；输入关键词：“Hepatocellular Carcinoma”，获得肝癌的靶点，共有7392个。
(4)采用绘制韦恩图，找出手参素与结肠癌、肝癌的共有靶点21个，见图5。其中两个靶点“Probability”值最大，为0.04，分别是HSD11B1(羟基类固醇11-β脱氢酶1)和UGT2B7(尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶2B7)。见表3。
表3手参素与结肠癌、肝癌靶点表
Figure BDA0003662540210000111
(5)在Uniprot数据库中获取HSD11B1和UGT2B7对应的“Uniprot ID”(HSD11B1对应P28845；UGT2B7对应P16662)。
(6)根据“Uniprot ID”在PDB蛋白质结构数据库找到对应蛋白分子编码(PPARA对应2REW；CNR2对应2KI9)的3D结构作为受体结构(见图3)。使用AutoDock Tools 1.5.6软件自带的RDKit程序对手参素分子进行模型构建，并运用其能量最小化模块，分别优化得到能量最低的构象，作为配体结构。
(7)分子结构预处理：4DIT和4WJ9作为本次对接的受体，枯茗醛作为本次对接的配体。使用AutoDock Tools 1.5.6软件预处理，将4DIT和4WJ9中的所有水分子和配体删除，添加极性氢原子并计算Gasteiger电荷。将枯茗醛添加原子电荷，分配原子类型，所有柔性键均默认可旋转。
(8)分子对接细节：采用AutoDock Vina 1.1.2进行分子对接，并对接结果进行分析处理。配体设置为柔性，受体设置为刚性。4DIT活性中心Gridbox位置设置为center_x＝12.089，center_y＝2.573，center_z＝-12.558；大小设置为size_x＝60，size_y＝60，size_z＝60；spaces＝1。4WJ9的活性中心Gridbox位置设置为center_x＝45.056，center_y＝-1.414，center_z＝19.163；大小设置为size_x＝60，size_y＝60，size_z＝60；spaces＝1。搜寻精度exhaustiveness设为32，num_modes＝5，其他参数默认。
结果如图4，手参素处于2RBE，2O6L的疏水活性口袋中，以疏水相互作用方式结合。手参素被2RBE中的Arg66，Ser43，Lys44，Gly41，His120，Ile121，Ala65氨基酸疏水基团包围，形成疏水相互作用。手参素与2O6L对接研究显示，手参素被Tyr354，Trp356，Asn402，His405，Asp401，Pro289氨基酸疏水基团包围，形成疏水相互作用。根据AutoDock Vina1.1.2软件计算，手参素与2RBE，2O6L的分子结合能分别为，-6.50、-6.75kcal/mol(1kcal＝4.185kJ)。
测试例3体外抗肿瘤活性
样品溶液的配制：分别称取实施例3制得的当归精油适量溶解于0.5g/mL的PEG2000溶液，配制成10mg/mL的精油溶液，再分别稀释为25、50、100、200μg/mL不同浓度的精油供试液。顺铂和紫杉醇则分别溶解于0.5g/mL DMSO中(顺铂和紫杉醇难溶于PEG2000溶液)，并分别稀释为12.5、25、50、100μg/mL，作为阳性对照液。
缓冲盐溶液(PBS)的配制：准确称量NaCl 2.0g、KCl 0.05g、Na2HPO4·12H2O 0.9g、KH2PO40.05 g，于灭菌超纯水中溶解，然后定容至250mL，高压灭菌锅灭菌后保存备用。
癌细胞复苏：将结肠癌HCT116细胞与肝癌HepG2细胞冻存管从液氮储存罐中取出，分别置于37℃水浴锅中，持续轻微摇动冻存管，使其快速解冻，待解冻完成后，在超净工作台中用移液器将细胞打匀，并加入至装有1640培养基2mL的离心管内，在转速为800rpm离心5min，弃掉上层清液，向离心管中加入新鲜1640培养基使细胞悬浮，吸装到培养皿中，补加培养基至8mL。将其转入培养箱中在37℃、5％CO2和饱和湿度条件下进行培养，每24h更换一次培养基，观察贴壁情况，当细胞长满80-90％培养皿时即可进行细胞培养。
癌细胞培养：将生长状态良好的贴壁细胞用PBS缓冲液清洗两次，滴加1mL的0.05％胰蛋白酶进行消化，摇动培养皿，让胰蛋白酶与细胞充分的接触，用移液器吸掉一部分胰蛋白酶，再将其转入37℃恒温培养箱中消化2min后拿出，然后加入4mL的1640培养基终止消化。用移液器轻轻吹打细胞，待细胞吹打均匀后，按照需要吸取适量体积细胞液至新的培养皿中，每个培养皿中补加新鲜的培养基至8mL，将其转入培养箱中在37℃、5％CO2和饱和湿度条件下进行培养，每24h更换新培养基，观察细胞培养情况。
取对数生长期的结肠癌HCT-116细胞或肝癌HepG2细胞，滴加适量的0.05％胰蛋白酶进行充分消化，用1640培养基调整细胞浓度为5×103个/mL的细胞悬浮液。在96孔板中，每孔加入100μL细胞悬浮液进行接种，将96孔板转移至恒温培养箱中在37℃、5％CO2和饱和湿度条件下进行培养，待细胞贴壁后，分别加入不同浓度精油供试溶液100μL，每个浓度设3个平行组。另外以添加了100μL的顺铂、紫杉醇阳性对照液的细胞悬浮液作为阳性对照组，添加了PEG2000溶液100μL的细胞悬浮液作为阴性对照组，各实验组配制情况见表3。将96孔板放置于细胞培养箱中孵育18h后，在倒置荧光显微镜下进行观察。
表3实验组配制情况表
细胞悬浮液μL 精油μL 紫杉醇/顺铂μL PBS溶液μL PEGμL
样品组 100 100
阴性对照组 100 100
阳性对照组 100 100
在倒置显微镜镜下拍照后，继续向96孔板每孔加入MTS试剂10μL，37℃孵育30min，使用酶标仪在490nm处测定吸光值(OD)，计算癌细胞增殖抑制率，计算方法如下：
Figure BDA0003662540210000141
Figure BDA0003662540210000143
空白组吸光值，
Figure BDA0003662540210000144
样品吸光值，ODp为培养基吸光值。
采用MTS法测定了当归精油对结肠癌HCT116细胞体外增殖的抑制率，结果见表4。
表4
浓度μg/mL 抑制率(％)
25 9.00±5.97
50 32.9±0.53
100 36.82±2.54
200 45.42±3.14
表5阳性对照药物抑制结肠癌HCT116细胞体外增殖实验结果(n＝3)
Figure BDA0003662540210000142
Figure BDA0003662540210000151
由上表可知，在精油浓度为200μg/mL条件下，当归精油的抑制率达到了45.42％。因此，可以认为，当归精油具有良好的抑制结肠癌细胞体外增殖的活性。
在倒置显微镜下拍摄HCT-116细胞生长的照片。在同一面积视野下，阴性对照组HCT-116细胞生长旺盛(图5)，细胞形态正常。经过200μg/mL当归精油处理后细胞数量明显减少(图6)，细胞胞体出现不同程度的细胞体破裂，细胞轮廓呈不规则状。这表明当归精油能抑制结肠癌HCT116细胞的增殖，与MTS法实验研究结论吻合。
采用MTS法测定了当归精油对肝癌HepG2细胞体外增殖的抑制率，结果见表6。
表6
浓度μg/mL 抑制率(％)
25 15.21±1.69
50 27.05±5.9
100 31.85±5.71
200 56.2±0.64
表5阳性对照药物抑制肝癌HepG2细胞体外增殖实验结果(n＝3)
Figure BDA0003662540210000161
由上表可知，在精油浓度为200μg/mL条件下，当归精油的抑制率达到了56.2％。因此，可以认为，当归精油具有良好的抑制肝癌细胞体外增殖的活性。
在倒置显微镜下拍摄肝癌HepG2生长的照片。在同一面积视野下，阴性对照组肝癌HepG2生长旺盛(图7)，细胞形态正常。经过200μg/mL当归精油处理后细胞数量明显减少(图8)，细胞胞体出现不同程度的细胞体破裂，细胞轮廓呈不规则状。这表明当归精油能抑制肝癌HepG2细胞的增殖，与MTS法实验研究结论吻合。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种当归精油的制备方法，其特征在于，采用低共熔溶剂提取法制备当归精油，包括以下步骤：
S1.低共熔溶剂的制备：将醇类氢键供体、氯化胆碱混合均匀后，加入水，加热搅拌至形成稳定、均匀的透明液体，得到低共熔溶剂；
S2.当归的预处理：将当归经筛选、清洗、阴干后，粉碎过筛，得到当归粉；
S3.当归精油的制备方法：将步骤S2制得的当归粉加入步骤S1制得的低共熔溶剂中，微波加热提取，离心，上清液中加入乙酸乙酯提取，分离得到乙酸乙酯层，除去溶剂，采用分子蒸馏法精制，得到当归精油。
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述醇类氢键供体选自乙二醇、丙三醇、1,2-丙二醇、1,3-丙二醇、甲醇中的至少一种。
3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤S1中所述醇类氢键供体、氯化胆碱和水的体积比为4-6：5：1-2。
4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤S2中所述筛网目数为100-200目。
5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤S3中所述当归粉和低共熔溶剂的质量体积比为1：(3-5)g/mL。
6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤S3中所述微波加热提取中微波功率为700-1200W，加热至温度为50-80℃，提取时间为3-5h。
7.一种如权利要求1-6任一项所述的制备方法制得的当归精油。
8.根据权利要求7所述的当归精油，其特征在于，包含以下原料：手参素、反式-β-金合欢烯、Z-亚丁基苯酞、、Β-倍半水芹烯、桉油烯醇、4-乙烯基愈疮木酚、藁本内酯、2,5,6-三甲基-1,3,6-庚三烯和紫荆二烯。
9.如权利要求7或8所述当归精油在制备预防及治疗、辅助治疗抗癌症药物中的应用。
10.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述癌症为肝癌或者结肠癌。
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Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20060110469A1 (en) * 2004-10-08 2006-05-25 Buddhist Tzu Chi General Hospital Angelicae sinensis extracts useful for treatment of cancers
CN101176740A (zh) * 2006-11-11 2008-05-14 中国科学院兰州化学物理研究所 一种当归精油的提取方法
CN109609271A (zh) * 2018-11-21 2019-04-12 浙江工业大学 一种提取中药材中精油的方法
CN109876489A (zh) * 2019-03-22 2019-06-14 南京师范大学常州创新发展研究院 低共熔溶剂结合微波萃取植物样品的方法及低共熔溶剂
CN111718798A (zh) * 2020-06-30 2020-09-29 三沙南海美源岛生物科技有限公司 一种低共熔溶剂法微波辅助蒸馏提取胡椒叶精油的方法
CN112725091A (zh) * 2021-01-04 2021-04-30 陕西国际商贸学院 一种微波辅助低共熔溶剂提取艾草精油的方法及其应用
CN114085147A (zh) * 2021-11-02 2022-02-25 湖南朗林生物资源股份有限公司 一种当归提取物的制备方法及应用

Patent Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20060110469A1 (en) * 2004-10-08 2006-05-25 Buddhist Tzu Chi General Hospital Angelicae sinensis extracts useful for treatment of cancers
CN101176740A (zh) * 2006-11-11 2008-05-14 中国科学院兰州化学物理研究所 一种当归精油的提取方法
CN109609271A (zh) * 2018-11-21 2019-04-12 浙江工业大学 一种提取中药材中精油的方法
CN109876489A (zh) * 2019-03-22 2019-06-14 南京师范大学常州创新发展研究院 低共熔溶剂结合微波萃取植物样品的方法及低共熔溶剂
CN111718798A (zh) * 2020-06-30 2020-09-29 三沙南海美源岛生物科技有限公司 一种低共熔溶剂法微波辅助蒸馏提取胡椒叶精油的方法
CN112725091A (zh) * 2021-01-04 2021-04-30 陕西国际商贸学院 一种微波辅助低共熔溶剂提取艾草精油的方法及其应用
CN114085147A (zh) * 2021-11-02 2022-02-25 湖南朗林生物资源股份有限公司 一种当归提取物的制备方法及应用

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
韩涛;胡鹏斌;: "当归提取物抗肿瘤研究进展", 中医临床研究, no. 29, pages 139 - 141 *

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