CN114984235B - 一种骨靶向纳米材料及其制备方法和应用 - Google Patents

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Abstract

本发明提供一种骨靶向纳米材料及其制备方法，所述骨靶向纳米材料为表面修饰骨靶向基团的钙铝双金属氢氧化物层状纳米片，其中所述钙铝双氢氧化物层状纳米片包括钙元素和铝元素，所述钙元素和铝元素的摩尔比为(1‑10)：(10‑1)。本发明还提供一种如上所述的骨靶向纳米材料在制备治疗骨质疏松症的药物中的应用。本发明提供的骨靶向纳米材料用于治疗骨质疏松症的过程中，不仅能够抑制破骨细胞活性，还能促进已损伤的骨骼修复，降解产物钙、铝离子无药物蓄积风险，该治疗方案具有高效、低毒副作用、疗效持久等多方面优势。

Description

一种骨靶向纳米材料及其制备方法和应用
技术领域
本发明属于无机纳米材料技术领域，具体涉及一种骨靶向纳米材料及其制备方法和在制备治疗骨质疏松症的药物中的应用。
背景技术
随着老龄化进程的加速，骨质疏松(Osteoporosis,OP)俨然成为全球性健康问题，其发病率紧随心血管疾病、糖尿病等，位居慢性疾病的前列。雌激素缺乏及老龄化是导致骨质疏松的重要因素，表现为骨矿物质密度(BMD)降低和骨微结构的改变，导致骨强度降低和骨折风险增加。因此，我国将骨质疏松症作为国家重点攻关的三大老年疾病之一，开展骨质疏松症的治疗研究，具有重要的科学意义和临床价值。传统的骨质疏松症治疗方案仅抑制破骨细胞引起的骨损伤，忽略了免疫微环境的重要影响，治疗效果不佳且易引发肾毒性、下颌骨坏死及中风等。发展新型的基于免疫微环境重塑的骨质疏松症治疗新方法，开发骨质疏松症安全、精准的治疗技术是当前国际科学的前沿和研究热点。
目前，骨质疏松的治疗主要为非药物和药物治疗。非药物治疗，常用于较轻症的骨质疏松，包括健康饮食，预防跌倒和适当的体育锻炼；对于严重的骨质疏松症则需药物干预，但不良反应较多。如激素替代治疗(HRT)以及选择性雌激素受体调节剂(SERMs)的中长期治疗均会增加女性乳腺癌、中风以及静脉血栓栓塞性疾病的发生风险；长期的双膦酸盐类药物治疗，易导致肾毒性及下颌骨坏死(ONJ)等严重副作用。降钙素则会引起偶发的鼻炎和其他并发症诸如头痛、面色潮红、恶心及腹泻等并发症；雷尼酸锶常见的不良反应包括引起恶心、腹泻、一过性的肌酸激酶升高以及过敏反应，并且欧洲药品管理局(EMA) 建议其禁用于血栓的高危人群；而特立帕肽在临床前研究发现，有诱导骨肉瘤的风险，因此，其推荐的最长治疗周期仅为2年，使用过程中还可能出现无症状性高钙血症、偶发恶心、头晕、小腿痛性痉挛。
综上，临床上骨质疏松治疗方案面临的主要技术难点是：1.目前治疗主要针对破骨细胞过度活化引起的骨损伤，而不能促进已损伤的骨骼修复；2.由于骨质疏松的特殊性，治疗的周期较长，无可长期使用药物，疗效欠佳；3.现有药物的非选择性和无反应性所导致的脱靶效应引起非骨部位聚集，引发多种不良反应。因此，亟待研发可长期发挥作用更加安全及更经济的骨质疏松治疗系统。
发明内容
针对现有技术的局限性，本发明旨在提供一种骨靶向纳米材料及其制备方法和在制备治疗骨质疏松症的药物中的应用，构建了具有骨靶向微环境响应的钙铝双金属氢氧化物(CaAl-LDH)层状纳米材料，通过调节免疫微环境以高效抑制破骨、促进成骨，为骨质疏松症的治疗提供可同时实现酸性微环境和免疫微环境调控的独特的纳米治疗方案。
第一个方面，本发明提供一种骨靶向纳米材料，所述骨靶向纳米材料为表面修饰骨靶向基团的钙铝双金属氢氧化物层状纳米片，其中所述钙铝双氢氧化物层状纳米片包括钙元素和铝元素，所述钙元素和铝元素的摩尔比为(1-10)：(10-1)。
较佳地，所述骨靶向基团选自钙黄绿素类、四环素类、双膦酸盐类、酸性寡肽类、大黄蒽醌类和聚丙二酸类中的至少一种，优选为钙黄绿素类；其中，所述钙黄绿素类骨靶向基团选自荧光素络合酮、3,3’-双(甲氨二乙酸)荧光素、钙黄绿素二钠盐、双[N,N-双(羧甲基)氨基甲基]荧光素、荧光素络合剂、荧光素配位剂和奥荧光素中的至少一种，所述四环素类骨靶向基团选自金霉素、土霉素、四环素及半合成衍生物甲烯土霉素、强力霉素和二甲胺基四环素等含并四苯基本骨架化合物中的至少一种，所述双膦酸盐类骨靶向基团选自依替膦酸钠、氯膦酸钠、帕米膦酸钠、替鲁膦酸钠、阿仑膦酸钠、奈立膦酸钠、奥帕膦酸钠、利塞膦酸钠和伊本膦酸钠中的至少一种。
较佳地，所述钙铝双金属氢氧化物层状纳米片的粒径为200-1000nm。
较佳地，所述钙铝双金属氢氧化物层状纳米片的层间阴离子为卤素离子，优选为氯离子。
较佳地，所述骨靶向纳米材料为钙黄绿素(CN)修饰的钙铝双金属氢氧化物纳米片(CaAl-LDH-CN,CALC)。
第二个方面，本发明还提供一种如上所述的骨靶向纳米材料的制备方法，包括如下步骤：
步骤(1)，钙铝双金属氢氧化物层状纳米片的制备：将可溶性钙盐和可溶性铝盐的去离子水混合溶液、无机碱溶液、沉淀剂、氯化盐混合，在惰性气体保护下发生水热反应，离心、收集沉淀，获得钙铝双金属氢氧化物层状纳米片；
步骤(2)，骨靶向基团的修饰：将步骤(1)获得的钙铝双金属氢氧化物层状纳米片与骨靶向基团的水溶液混合，静置反应，然后离心、清洗，获得骨靶向基团修饰的钙铝双金属氢氧化物层状纳米片。
较佳地，所述可溶性钙盐选自硝酸钙、碳酸钙和氯化钙中的至少一种，优选为硝酸钙；所述可溶性铝盐为硝酸铝或氯化铝，优选为硝酸铝；所述无机碱溶液选自氢氧化钠水溶液、氨水或碳酸钠水溶液，优选为氢氧化钠水溶液；所述沉淀剂选自尿素和六亚甲基四胺中的至少一种；所述氯化盐为氯化钠。
较佳地，步骤(1)中，所述惰性气体为氩气，发生水热反应的反应温度为80- 150℃，反应时间为12-72小时；步骤(2)中，静置反应的时间为1-12小时。
第三个方面，本发明还提供一种如上所述的骨靶向纳米材料在制备治疗骨质疏松症的药物中的应用，所述骨靶向纳米材料为表面修饰骨靶向基团的钙铝双金属氢氧化物层状纳米片，具有弱碱性，能中和病灶处的酸性微环境，中和过量H+，抑制骨质疏松症主要效应细胞破骨细胞的活性；同时，酸响应释放的钙离子与内源性磷酸根原位生成磷酸钙纳米颗粒，诱导骨巨噬细胞通过c-Maf转录因子途径向抑炎型M2型分化，分泌IL-10及TGF-β等细胞因子促进骨形成，修复已损伤的骨骼。
较佳地，所述骨靶向纳米材料用于制备治疗多种因素导致的骨质疏松症的药物，所述因素包括：内分泌疾病、结缔组织疾病、慢性肾脏疾病、胃肠疾病和营养性疾病、血液系统疾病、神经肌肉系统疾病、长期制动、器官移植术后、常期使用药物如糖皮质激素、免疫抑制剂、肝素、抗惊厥药、抗癌药、含铝抗酸剂、甲状腺激素、慢性氟中毒、促性腺激素释放激素类似物或肾衰用透析液。
根据本发明，本发明提供的骨靶向纳米材料，通过在钙铝双金属氢氧化物(CaAl-LDH)层状纳米材料上修饰骨靶向基团，提高骨靶向纳米材料体系治疗骨质疏松症的特异性，其中的骨靶向基团可结合骨质疏松症病灶处的羟基磷灰石中的钙元素，实现生物体中骨靶向作用。由于骨质疏松病灶处呈现强酸性(pH～4)，因此弱碱性的CALC到达骨质疏松病灶处，可经由钙铝双金属氢氧化物(CaAl-LDH)的弱碱性实现酸响应降解，因此中和过量H+，抑制破骨细胞活性。同时，CaAl-LDH酸响应释放的钙离子与内源性磷酸根原位生成的磷酸钙纳米颗粒，诱导骨巨噬细胞通过c-Maf转录因子途径向抑炎的M2型极化，分泌 IL-10及TGF-β等细胞因子促进骨形成；由于免疫微环境改变，调节性T细胞活性增加并抑制辅助性T细胞活性，进一步促进成骨并抑制骨吸收。由于抑炎性细胞因子的积累，招募 Treg细胞，导致Th17细胞活性受到抑制，实现对破骨细胞分化层面的抑制，从而调控骨质疏松处的免疫微环境，以达到治疗目的。
本发明的有益效果：
(1)与传统药物和现有的治疗方法相比，本发明提供的骨靶向纳米材料，制备方法简单、易操作，成本低；
(2)本发明提供的骨靶向纳米材料用于治疗骨质疏松症的过程中，降解产物钙、铝离子无药物蓄积风险，该治疗方案具有高效、低毒副作用、疗效持久等多方面优势；
(3)本发明提供的骨靶向纳米材料用于治疗骨质疏松症的过程中，不仅能够抑制破骨细胞活性，还能促进已损伤的骨骼修复；
(4)本发明提供的弱碱性骨靶向钙铝双氢氧化物纳米材料，通过无机材料的生物学效应，发挥微环境调控功能，有望克服现有骨质疏松治疗中药物非骨聚集和毒副作用问题，实现长期且安全的骨质疏松给药治疗。
附图说明
图1示出了本发明涉及的骨靶向纳米材料的结构示意图。
图2示出了根据本发明实施例1所得的CaAl-LDH-CN纳米片(CALC)的TEM照片。
图3示出了根据本发明实施例1所得的CaAl-LDH、钙黄绿素(CN)与CALC的分散性。
图4示出了根据本发明实施例1所测得的CaAl-LDH、CN与CALC的Zeta电位图。
图5示出了根据本发明实施例1所测得的1％HCl酸滴定导致的溶液pH变化曲线。
图6示出了根据本发明实施例1所测得的CALC对破骨细胞活性的抑制作用。
图7示出了根据本发明实施例1所测得的CALC对RAW 264.7巨噬细胞系的M2型诱导作用。
图8示出了根据本发明实施例1所测得的CALC对高龄小鼠模型的治疗效果中的骨体积分数BV/TV(％)指数的变化。
图9示出了根据本发明实施例1所测得的CALC对高龄小鼠模型的治疗效果中的骨小梁分离度Tb.Sp(mm)的变化。
图10示出了根据本发明实施例1所测得的CALC对高龄小鼠模型的治疗效果中的骨小梁分离度骨小梁数目Tb.N(mm-1)的变化。
图11示出了根据本发明实施例1所测得的经CALC治疗后的高龄小鼠模型血清骨碱性磷酸酶(BALP)的含量变化。
图12示出了根据本发明实施例1所测得的经CALC治疗后的高龄小鼠模型血清应用抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)的含量变化。
图13示出了根据本发明实施例1所测得的经CALC治疗后的高龄小鼠模型血清核因子κB受体活化因子配体(RANKL)的含量变化。
具体实施方式
以下结合附图和下述实施方式进一步说明本发明，应理解，附图及下述实施方式仅用于说明本发明，而非限制本发明。
一方面，本发明提供一种骨靶向纳米材料，所述骨靶向纳米材料为表面修饰骨靶向基团的钙铝双金属氢氧化物层状纳米片。
具体地，所述骨靶向基团包括但不限于钙黄绿素类、四环素类、双膦酸盐类、酸性寡肽类、大黄蒽醌类、聚丙二酸类等，在本发明实施例中优选为钙黄绿素(CN)。进一步地，所述钙黄绿素类骨靶向基团包括但不限于荧光素络合酮、3,3’-双(甲氨二乙酸)荧光素、钙黄绿素二钠盐、双[N,N-双(羧甲基)氨基甲基]荧光素、荧光素络合剂、荧光素配位剂、奥荧光素等，所述四环素类骨靶向基团包括但不限于金霉素、土霉素、四环素及半合成衍生物甲烯土霉素、强力霉素和二甲胺基四环素等含并四苯基本骨架化合物，所述双膦酸盐类骨靶向基团包括但不限于依替膦酸钠、氯膦酸钠、帕米膦酸钠、替鲁膦酸钠、阿仑膦酸钠、奈立膦酸钠、奥帕膦酸钠、利塞膦酸钠、伊本膦酸钠等。
本发明采用的层状双金属氢氧化物(Layered Double Hydroxides,LDHs)是一种阴离子型层状材料，其结构主体为带大量正电荷的阳离子层板，层间易于插入阴离子。在本发明中，所述钙铝双金属氢氧化物层状纳米片的层间阴离子为氯离子，钙铝阳离子、阴离子及骨靶向基团的位置如图1所示。如图1所示，两层钙铝双金属氢氧化物层状纳米片之间的层间阴离子为氯离子，两层钙铝双金属氢氧化物层状纳米片的表面修饰骨靶向基团。
根据本发明，所述钙铝双氢氧化物层状纳米片包括钙元素和铝元素，所述钙元素和铝元素的摩尔比为(1-10)：(10-1)，在恰当的比例范围下如nCa:nAl＝2:1，Al3+可稳定插入以Ca2+为中心形成的六方晶格的缺陷，结构相对更加稳定。如超出该摩尔比范围，则会严重影响所得到层状双氢氧化物纳米片的形貌、结晶性与降解性能。
在本发明中，所述骨靶向纳米材料为钙黄绿素(CN)修饰的钙铝双金属氢氧化物纳米片(CaAl-LDH-CN,CALC)，其粒径可以为200–1000nm。
另一方面，本发明还提供一种如上所述的骨靶向纳米材料的制备方法，包括如下步骤：
第一步，采用共沉淀法制备钙铝双金属氢氧化物层状纳米片。具体为：将可溶性钙盐和可溶性铝盐的去离子水混合溶液、无机碱溶液、沉淀剂、氯化盐混合，在氩气惰性气体保护下发生水热反应，离心、收集沉淀，获得钙铝双金属氢氧化物层状纳米片。
在该步骤中，所述可溶性钙盐包括但不限于硝酸钙、碳酸钙、氯化钙等，在本发明中优选为硝酸钙；所述可溶性铝盐包括但不限于硝酸铝、氯化铝等，在本发明中优选为硝酸铝；所述无机碱溶液包括但不限于氢氧化钠水溶液、氨水、碳酸钠水溶液等，在本发明中优选为氢氧化钠水溶液；所述沉淀剂包括但不限于尿素、六亚甲基四胺等；所述氯化盐为氯化钠。
在该步骤中，采用常规水热反应方法进行反应。在本发明中，发生水热反应的反应温度可以为80-150℃(例如油浴加热)，反应时间可以为12-72小时。
第二步，对第一步得到的钙铝双金属氢氧化物层状纳米片进行骨靶向基团的修饰。具体为：将第一步获得的钙铝双金属氢氧化物层状纳米片与骨靶向基团的水溶液混合，静置反应，然后离心、清洗，获得骨靶向基团修饰的钙铝双金属氢氧化物层状纳米片。
在该步骤中，搅拌反应的时间可以为1-12小时，例如2小时。
本发明提供的骨靶向纳米材料为表面修饰骨靶向基团的钙铝双金属氢氧化物层状纳米片，具有弱碱性，能中和病灶处的酸性微环境，中和过量H+，抑制骨质疏松症主要效应细胞破骨细胞的活性；同时，酸响应释放的钙离子与内源性磷酸根原位生成磷酸钙纳米颗粒，诱导骨巨噬细胞通过c-Maf转录因子途径向抑炎型M2型分化，分泌IL-10及TGF-β等细胞因子促进骨形成，修复已损伤的骨骼。因此，本发明提供的如上所述的骨靶向纳米材料可用于制备骨质疏松症的药物，尤其可用于制备治疗多种因素导致的骨质疏松症的药物，所述因素包括：内分泌疾病、结缔组织疾病、慢性肾脏疾病、胃肠疾病和营养性疾病、血液系统疾病、神经肌肉系统疾病、长期制动、器官移植术后、常期使用药物如糖皮质激素、免疫抑制剂、肝素、抗惊厥药、抗癌药、含铝抗酸剂、甲状腺激素、慢性氟中毒、促性腺激素释放激素类似物或肾衰用透析液。
与传统药物和现有的治疗方法相比，本发明提供的骨靶向纳米材料，制备方法简单、易操作，成本低。
本发明提供的骨靶向纳米材料用于治疗骨质疏松症的过程中，降解产物钙、铝离子无药物蓄积风险，该治疗方案具有高效、低毒副作用、疗效持久等多方面优势。
本发明提供的骨靶向纳米材料用于治疗骨质疏松症的过程中，不仅能够抑制破骨细胞活性，还能促进已损伤的骨骼修复，可同时实现酸性微环境及免疫微环境调控。
本发明提供的弱碱性骨靶向钙铝双氢氧化物纳米材料，通过无机材料的生物学效应，发挥微环境调控功能，有望克服现有骨质疏松治疗中药物非骨聚集和毒副作用问题，实现长期且安全的骨质疏松给药治疗。
本发明通过上述骨靶向纳米材料制备的骨质疏松症的药物的施用方式没有特别限制，代表性的施用方式包括(但并不限于)：口服、瘤内、直肠、肠胃外(静脉内、肌肉内或皮下)、和局部给药。
下面进一步例举实施例以详细说明本发明。同样应理解，以下实施例只用于对本发明进一步说明，不能理解为对本发明保护范围的限制，本领域的技术人员根据本发明的上述内容作出的一些非本质的改进和调整均属于本发明的保护范围。下述示例具体的工艺参数等也仅是合适范围中的一个示例，即本领域技术人员可以通过本文的说明做合适的范围内选择，而并不一定要限定与下文示例的具体数值。
实施例1：
将摩尔比例为2:1的水合硝酸钙(Ca(NO3)2·4H2O，0.472g)、水合硝酸铝 (Al(NO3)3·9H2O，0.375g)加入200ml去离子水体系，随后加入50mmol的氢氧化钠与 2mmol的氯化钠，在氩气保护下，150度油浴，3000转磁力搅拌，反应24小时后，终止反应，11000转离心10分钟，去离子水清洗3次，收集沉淀，将获得的纳米片与钙黄绿素水溶液进行混合，并搅拌2小时，随后再进行高速离心与多次去离子水清洗，最后得到钙黄绿素修饰的骨靶向钙铝双氢氧化物纳米片(CaAl-LDH-CN,CALC)。
实施例2：
将Ca(NO3)2·4H2O(0.472g)、Al(NO3)3·9H2O(0.375g)、氯化钠(NaCl，0.085g)和六亚甲基四胺(HMT，0.702g)溶解在200mL去离子水中，在氩气保护下于120℃油浴反应24小时后，11000转离心10分钟，去离子水清洗3次，收集沉淀，分散在90mL去离子水中。将混合物在氩气保护下于78℃油浴恒温搅拌。将100μL(3-氨丙基)三乙氧基硅烷(APTES)溶解于10mL无水乙醇中，随后加入上述溶液中反应4小时，离心收集沉淀，并用去离子水和无水乙醇洗涤3次，得到NH2-CaAl-LDH。将四环素(Tetracycline,TE)(10 mg)分散在20mL去离子水中。然后，分别加入1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二酰亚胺 (EDC，0.153g)和n-羟基丁二酰亚胺(NHS，0.230g)。将反应在室温下保持搅拌15分钟以激活TE上的羧基。接着，将NH2-CaAl-LDH(50mg，在30mL去离子水中)添加到上述混合物中。将反应在室温下进行12小时。最后，TE-CaAl-LDH沉淀用去离子水洗涤并离心收集，得到四环素修饰的骨靶向钙铝双氢氧化物纳米片(TE-CaAl-LDH)。
应用实施例：
选用约200-400nm左右的实施例1制备的CALC作为静脉给药骨质疏松治疗剂，由图2可知，选用的CALC形貌规整，粒径均一，平均粒径为300nm左右。由图3可知，经钙黄绿素修饰后依旧具有良好的分散性与稳定性。通过静电吸附作用将CN负载于CaAl- LDH表面，如图4所示，修饰后CALC的Zeta电位由+50mV转变为-5mV，证明了CN靶向基团成功负载于CaAl-LDH表面。通过酸滴定法，往1M NaHCO3、CALC、PBS、CN以及去离子水中滴定1％HCl，记录pH值的变化，如图5所示，经计算，CALC的酸中和能力约为3.5nmol H+/μg CALC。且与破骨细胞共孵育，可显著降低破骨细胞活性(图6)。同时，与RAW 264.7巨噬细胞系的共培养，CALC可显著诱导RAW细胞向M2型极化(图 7)。
通过选用18月龄雌性高龄C57BL/6小鼠以及3月龄的青年小鼠作为研究模型。用双能X射线及小动物CT验证后，可见到骨小梁数量减少，变窄，并有纽扣样变，骨髓腔扩大。将模型小鼠分组为PBS、CaAl-LDH-CN以及青年小鼠作为对照，给药后，于7、 14、21及28天用小动物双能X射线(DXA)回访骨密度，并每组分别处死2只小鼠，先用仪器对每只小鼠右腿进行断层扫描，进行胫骨的重建及其相关数据分析；成骨/破骨相关指标BALP、TRAP与RANKL检测。与对照组相比，注射了CALC的高龄小鼠的骨健康相关指标如BV/TV(图8)(脊椎20.8±2.5vs 39±4.1，股骨6.2±0.5vs 12.2±0.6，胫骨 7.1±0.4vs 15.1±0.8)、Tb.Sp(图9)(脊椎0.21±0.03mm vs 0.15±0.04mm，股骨0.52± 0.05mm vs 0.31±0.06mm，胫骨0.64±0.04mm vs 0.30±0.08mm)以及Tb.N(图10) (脊椎3.5±0.01mm-1vs 4.1±0.41mm-1，股骨1.7±0.5mm-1vs 2.6±0.06mm-1，胫骨1.4± 0.4mm-1vs 2.6±0.8mm-1)与对照高龄小鼠相比均得到显著改善，接近健康青年小鼠的指标；同时，经治疗的高龄小鼠的血清BALP(图11)、TRAP(图12)、RANKL(图13)含量的检测结果也表明，治疗后的三项指标均发生显著下降，说明本发明的骨靶向纳米材料可显著改善骨质疏松小鼠的骨健康状况。

Claims (6)

1.一种骨靶向纳米材料，其特征在于，所述骨靶向纳米材料为表面修饰骨靶向基团的钙铝双金属氢氧化物层状纳米片，其中所述钙铝双金属氢氧化物层状纳米片包括钙元素和铝元素，所述钙元素和铝元素的摩尔比为（1-10）：（10-1）；所述钙铝双金属氢氧化物层状纳米片的制备方法为将可溶性钙盐和可溶性铝盐的去离子水混合溶液、无机碱溶液、沉淀剂、氯化盐混合，在惰性气体保护下发生水热反应，离心、收集沉淀，获得所述钙铝双金属氢氧化物层状纳米片；
所述骨靶向基团选自钙黄绿素类骨靶向基团和四环素类骨靶向基团，所述钙黄绿素类骨靶向基团选自荧光素络合酮、3,3’-双(甲氨二乙酸)荧光素、钙黄绿素二钠盐、双[N,N-双(羧甲基)氨基甲基]荧光素和奥荧光素中的至少一种，所述四环素类骨靶向基团选自金霉素、土霉素、四环素、半合成衍生物甲烯土霉素、强力霉素和二甲胺基四环素中的至少一种。
2.根据权利要求1所述的骨靶向纳米材料，其特征在于，所述钙铝双金属氢氧化物层状纳米片的粒径为200-1000nm。
3.一种如权利要求1或2所述的骨靶向纳米材料的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
步骤（1），钙铝双金属氢氧化物层状纳米片的制备：将可溶性钙盐和可溶性铝盐的去离子水混合溶液、无机碱溶液、沉淀剂、氯化盐混合，在惰性气体保护下发生水热反应，离心、收集沉淀，获得钙铝双金属氢氧化物层状纳米片；
步骤（2），骨靶向基团的修饰：将步骤（1）获得的钙铝双金属氢氧化物层状纳米片与骨靶向基团的水溶液混合，搅拌反应，然后离心、清洗，获得骨靶向基团修饰的钙铝双金属氢氧化物层状纳米片。
4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述可溶性钙盐选自硝酸钙、碳酸钙和氯化钙中的至少一种；所述可溶性铝盐为硝酸铝或氯化铝；所述无机碱溶液选自氢氧化钠水溶液、氨水或碳酸钠水溶液；所述沉淀剂选自尿素和六亚甲基四胺中的至少一种；所述氯化盐为氯化钠。
5.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤（1）中，所述惰性气体为氩气，发生水热反应的反应温度为80-150°C，反应时间为12-72小时；步骤（2）中，搅拌反应的时间为1-12小时。
6.一种权利要求1或2所述的骨靶向纳米材料在制备治疗骨质疏松症的药物中的应用。
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