CN114984103B - 一种橙皮提取物及其制备方法和应用 - Google Patents

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Abstract

本发明属于生物质提取技术领域，具体涉及一种橙皮提取物及其制备方法和应用。本发明提供了一种橙皮提取物的制备方法，包括以下步骤：将橙皮粉用乙酸乙酯浸泡后进行超声提取，得到提取液；将所述提取液去除溶剂、干燥，得到所述橙皮提取物。本发明通过乙酸乙酯超声提取方式制备橙皮提取物，提取物活性好，橙皮提取物中的单体化合物大多数为黄酮类化合物，本发明的橙皮提取物具有很强的抗糖基化作用，且本发明的提取方法简单，具有绿色环保、环境友好、无毒无害的优点，对人体健康无副作用。

Description

一种橙皮提取物及其制备方法和应用
技术领域
本发明属于生物质提取技术领域，具体涉及一种橙皮提取物及其制备方法和应用。
背景技术
赣南脐橙色泽鲜艳、肉质脆嫩、香甜十足、风味极佳，产量高，脐橙的重要组成部分-橙皮的年产量也可达万吨计，但一直未能被充分利用而造成极大的浪费。对果皮资源开发利用一直以来是天然产物科研工作者的研究热点，对脐橙果皮的资源开发利用亦是如此。
晚期糖基化终末产物(advanced glycosylation end products,AGEs)是人体内的还原糖与蛋白质或脂质发生不可逆反应所形成的，是非酶糖基化衰老理论的最终产物。随着人类和动物年龄的增长，体内摄糖量不断累积，伴随着新陈代谢的逐渐放缓，体内摄入的糖分则十分容易堆积，再和蛋白质结合、氧化，最后形成AGEs。近年来的研究表明AGEs的存在不仅与衰老有着紧密的联系，而且AGEs在糖尿病发病过程中扮演着重要角色，其中体内的积聚可以引发糖尿病的各种并发症。
动物实验和临床试验结果证实过多摄入AGEs可能会导致糖尿病发生及其并发症加重，如视网膜病变、白内障产生、以及恶性肿瘤和阿尔兹海默症等其他健康危害。AGEs是一组稳定的交联产物，可以在蛋白质、DNA、RNA和细胞膜上形成，改变蛋白质(如胶原蛋白)、酶和膜的生物学功能，影响与衰老和糖尿病并发症相关的一系列疾病，AGEs也可以在神经组织的结构蛋白上形成，从而导致神经系统的功能异常，降低AGEs的形成可以在一定程度上降低糖尿病和其他相关疾病的负面生理后果。阿司匹林和氨基胍盐酸盐(AG)均可用于减少AGEs产生，但阿司匹林所需用量大，副作用大；而氨基胍盐酸盐虽效果好，但毒副作用很大。
鉴于这些疗效好的化学成分对人体伤害大、毒副作用强，近年来，国内外很多研究者都在寻找天然环保、无毒无害的植物源成分替代。现有研究发现柑橘果皮中含有多种生物活性物质，主要包括精油、黄酮类、果胶及柠檬苦素类等，这些功能活性成分在医疗保健品、美妆护肤、副食产品及生活日用品等领域有着广泛的应用潜能，中国专利CN 109497389A公开了经乙醇浸提和回流提取得到柑橘皮提取物，中国专利CN106108019A公开了微波辅助复合酶提取脐橙皮中总黄酮的方法，但这些方法均存在提取过程复杂，提取物生物活性低等问题。
发明内容
本发明的目的在于针对现有问题，提供一种橙皮提取物及其制备方法和应用。本发明中橙皮提取物的提取方法简单，提取物生物活性高，得到的橙皮提取物有很强的抗糖基化作用。
为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：
本发明提供了一种橙皮提取物的制备方法，包括以下步骤：
将橙皮粉用乙酸乙酯浸泡后进行超声提取，得到提取液；
将所述提取液去除溶剂、干燥，得到所述橙皮提取物。
优选的，所述乙酸乙酯的体积与橙皮粉的质量的比值为(7～8)mL:1g。
优选的，所述浸泡的时间为30～40min。
优选的，所述超声提取的温度为33～37℃，所述超声提取的时间每次为28～32min。
优选的，所述超声提取的次数为3次。
优选的，所述去除溶剂的方式包括减压蒸发。
优选的，所述干燥包括冷冻干燥。
优选的，所述冷冻干燥的温度为-87～-80℃，时间为10～12h。
本发明还提供了上述制备方法得到的橙皮提取物，所述橙皮提取物包括以下组分：芸香柚皮苷、橙皮苷、香蜂草苷、异橙黄酮、3,3',4',5,7,8-六甲氧基黄酮、甜橙黄酮、4',5,7,8-四甲氧基黄酮、3,3',4',5,6,7-六甲氧基黄酮、川橙皮素、4',5,6,7-四甲氧基黄酮、3,3',4',5,6,7,8-七甲氧基黄酮、5-羟基-6,7,3',4'-四甲氧基黄酮和桔皮素。
本发明还提供了上述技术方案所述橙皮提取物在制备抗糖基化作用的药物中的应用。
本发明与现有技术相比，具有如下有益效果：
本发明以乙酸乙酯为提取液，结合超声提取方式制备橙皮提取物，提取物生物活性高，橙皮提取物中的单体化合物大多数为黄酮类化合物，本发明的橙皮提取物具有很强的抗糖基化作用。且本发明的提取方法简单，具有绿色环保、环境友好、无毒无害的优点，对人体健康无副作用。
同时，本发明的原材料-橙皮资源丰富，有力实现了脐橙果皮副产物资源的高值化开发利用，促进了脐橙产业链发展提升。
本发明还提供了上述技术方案所述制备方法得到的橙皮提取物及其应用，将橙皮提取物应用于制备抗糖基化作用的药物中。HPLC指纹图谱显示，本发明的橙皮提取物含有多种多甲氧基黄酮化合物，经试验证明本发明的多甲氧基黄酮化合物和橙皮提取物均有很强的抗糖基化作用。
实施例的数据表明，本发明使用乙酸乙酯为提取剂，对橙皮的提取效果好，得到的橙皮提取物抗糖基化半抑制浓度IC50值与阳性药氨基胍盐酸盐(AG)的抗糖基化半抑制浓度IC50值很相近，抑制效果好。本发明制备得到了抗糖基化作用显著的植物源抗糖基化橙皮提取物，为防衰老及治疗或缓解糖尿病提供无毒无害的新型护肤及保健药。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1为实施例1得到的橙皮提取物的HPLC指纹图谱，其中1为芸香柚皮苷，2为橙皮苷，3为香蜂草苷，4为异橙黄酮，5为3,3',4',5,7,8-六甲氧基黄酮，6为甜橙黄酮，7为4',5,7,8-四甲氧基黄酮，8为3,3',4',5,6,7-六甲氧基黄酮，9为川橙皮素，10为4',5,6,7-四甲氧基黄酮，11为3,3',4',5,6,7,8-七甲氧基黄酮，12为5-羟基-6,7,3',4'-四甲氧基黄酮，13为桔皮素；
图2为实施例1得到的橙皮提取物浓度梯度抗糖基化效果图；
图3为实施例1得到的橙皮提取物与阳性药氨基胍盐酸盐(AG)抗糖基化比较图；
图4为橙皮单体化合物抗糖基化IC50值结果图。
具体实施方式
本发明提供了一种橙皮提取物的制备方法，包括以下步骤：
将橙皮粉用乙酸乙酯浸泡后进行超声提取，得到提取液；
将所述提取液去除溶剂、干燥，得到所述橙皮提取物。
在本发明中，若无特殊说明，使用的原料均为本领域市售商品。
本发明将橙皮粉用乙酸乙酯浸泡后进行超声提取，得到提取液。
本发明优选将橙皮依次进行干燥和粉碎，得到所述橙皮粉。在本发明中，所述橙皮优选为新鲜橙皮，所述干燥的温度优选为50～70℃，本发明对所述干燥的设备没有特殊的要求，如采用烘箱。本发明对所述干燥的时间没有特殊的要求，使橙皮干燥至恒重即可。本发明对所述粉碎的方式没有特殊的要求，如用中药打粉机粉碎。
在本发明中，所述乙酸乙酯的体积与橙皮粉的质量的比值优选为(7～8)mL:1g，更优选为7.5mL:1g。
在本发明中，所述浸泡的时间优选为30～40min，更优选为30min。
在本发明中，所述超声提取的温度优选为33～37℃，更优选为35℃；所述超声提取的时间每次优选为28～32min，更优选为30min，所述超声的功率优选为40KHz。
在本发明中，所述超声提取的次数优选为3次。本发明优选将所述超声提取后的液体过滤，得到滤渣，将所述滤渣进行重复超声提取，本发明优选将重复超声提取后的溶液合并，得到所述提取液。
得到提取液后，本发明将所述提取液去除溶剂、干燥，得到所述橙皮提取物。
在本发明中，所述去除溶剂的方式优选包括减压蒸发，所述减压蒸发的压力优选为-0.08～-0.1MPa，本发明对所述减压蒸发的设备没有特殊的要求，如采用旋转蒸发仪，将所述提取液中的乙酸乙酯溶剂去除。
在本发明中，所述干燥优选包括冷冻干燥。
在本发明中，所述冷冻干燥的温度优选为-87～-80℃，时间为10～12h。
本发明还提供了上述技术方案所述制备方法得到的橙皮提取物，所述橙皮提取物优选包括以下组分：芸香柚皮苷、橙皮苷、香蜂草苷、异橙黄酮、3,3',4',5,7,8-六甲氧基黄酮、甜橙黄酮、4',5,7,8-四甲氧基黄酮、3,3',4',5,6,7-六甲氧基黄酮、川橙皮素、4',5,6,7-四甲氧基黄酮、3,3',4',5,6,7,8-七甲氧基黄酮、5-羟基-6,7,3',4'-四甲氧基黄酮和桔皮素。
本发明还提供了上述技术方案所述橙皮提取物在制备抗糖基化作用的药物中的应用。
本发明通过乙酸乙酯超声提取方式制备橙皮提取物，提取方法简单，提取物生物活性高，HPLC指纹图谱显示，本发明的橙皮提取物含有多种多甲氧基黄酮化合物，经试验证明本发明的多甲氧基黄酮化合物和橙皮提取物均有很强的抗糖基化作用。
为了进一步说明本发明，下面结合附图和实施例对本发明提供的橙皮提取物及其制备方法和应用进行详细地描述，但不能将它们理解为对本发明保护范围的限定。
实施例1
将新鲜橙皮置于50℃烘箱中烘至恒重，用中药打粉机打成粉。
取20g橙皮粉于500mL锥形瓶中，加入150mL乙酸乙酯溶剂，浸泡30min，35℃、40KHz超声30min，滤纸过滤得提取液，滤渣再重复提取两次，合并三次提取液。
通过旋转蒸发仪，在-0.1MPa减压条件下，将提取液中乙酸乙酯溶剂去除，样品-80℃下冷冻干燥，得到橙皮提取物。
按照橙皮粉重量计算，平行三次，测得橙皮提取物的得率为2.64％。
测试例1
将实施例1得到的橙皮提取物采用高效液相色谱(HPLC)测定
称取10mg实施例1得到的橙皮提取物，移液枪取1000μL的N,N-二甲基甲酰胺:甲醇(V:V＝5:95)混合溶液于样品瓶中，将橙皮提取物超声溶解后，采用0.22μm有机系滤头过滤至1.5mL进样小瓶中，待用。
按照以下HPLC色谱检测条件测定：
色谱柱：XBridge C18反相柱(4.6x150mm,5μm)；柱压：98.05bar；柱温：30.02℃；液相流速：1mL/min；进样量：20μL。
梯度洗脱程序(洗脱剂为乙腈/水，体积比)：0-15min，乙腈从10％升至25％；15-25min，乙腈从25％升至35％；25-50min，乙腈从35％升至50％；50-60min，乙腈从50％升至90％；60-70min，乙腈保持90％；70-75min，乙腈从90％降至10％；后运行时间为5min。
HPLC指纹图谱如图1所示，可明显看到13个峰，其中1为芸香柚皮苷，2为橙皮苷，3为香蜂草苷，4为异橙黄酮，5为3,3',4',5,7,8-六甲氧基黄酮，6为甜橙黄酮，7为4',5,7,8-四甲氧基黄酮，8为3,3',4',5,6,7-六甲氧基黄酮，9为川橙皮素，10为4',5,6,7-四甲氧基黄酮，11为3,3',4',5,6,7,8-七甲氧基黄酮，12为5-羟基-6,7,3',4'-四甲氧基黄酮，13为桔皮素，各化合物含量如表1所示。
表1实施例1得到的橙皮提取物的HPLC含量结果
注：英文小写字母代表不同的显著性差异程度，同一列中字母相同的为不存在显著性差异；字母不同的代表两者间存在5％以上的显著性差异。
应用例1抗糖基化活性测定
一、试剂准备：
1)准备pH＝7.4的磷酸氢二钠与磷酸二氢钾缓冲液(PBS溶液)；
2)1.5mol/L D-果糖，用pH＝7.4的PBS溶液溶解(现配现用)；
3)30mg/mL的牛血清蛋白(BSA)，用pH＝7.4的PBS溶液溶解(现配现用)；
4)样品抑制剂母液用DMSO溶解：若为乙酸乙酯橙皮提取物，取10～50mg左右样品，用移液枪取二甲基亚砜(DMSO)溶解成浓度为50mg/mL。若为单体化合物，配制母液则称取1～2mg左右样品，用DMSO溶解成浓度为20mg/mL。若为其他溶剂的橙皮提取物，母液用DMSO溶解成浓度为200mg/mL。
二、加样方法：在20mL的小试管中加样，各组分的体积如表2所示，所有样品加完后都需摇匀。
表2对照组和样品组中各组分的体积
加样完成后，用锡箔纸盖住试管口，50℃恒温水浴锅避光加热2d后，再测样，此时若为乙酸乙酯橙皮提取物，浓度为0.25mg/mL；若为单体化合物，浓度为0.1mg/mL；若为其他溶剂的橙皮提取物，浓度为1mg/mL(DMSO浓度控制在0.5％以下)。若抑制率达到50％以上，逐级进行梯度浓度稀释。
乙酸乙酯橙皮提物：初始浓度从0.25mg/mL开始做，再用二倍稀释法，如：在烧杯或小瓶中加入3970μLPBS溶液、30μL样品抑制剂，共4mL，吹打混匀后取2mL到干净试管中；剩余2mL溶液中再加入2000μLPBS溶液，再次吹打混匀。最后，试管中再加0.5mL D-果糖，0.5mLBSA。依次稀释得到样品最终浓度为0.25mg/mL、0.125mg/mL、0.0625mg/mL、0.03125mg/mL。
单体化合物：初始浓度从100μg/mL开始做，再用二倍稀释法，如：在烧杯或小瓶中加入3970μL PBS溶液、30μL样品抑制剂，共4mL，吹打混匀后取2mL到干净试管中；剩余2mL溶液中再加入2000μL PBS溶液，再次吹打混匀。最后，试管中再加0.5mL D-果糖，0.5mL BSA。依次稀释得到样品最终浓度为100μg/mL、50μg/mL、25μg/mL、12.5μg/mL。
其他溶剂橙皮提取物：初始浓度从1mg/mL开始做，再用二倍稀释法，如：在烧杯或小瓶中加入3970μLPBS溶液、30μL样品抑制剂，共4mL，吹打混匀后取2mL到干净试管中；剩余2mL溶液中再加入2000μL PBS溶液，再次吹打混匀。最后，试管中再加0.5mL D-果糖，0.5mLBSA。依次稀释得到样品最终浓度为1mg/mL、0.5mg/mL、0.25mg/mL、0.125mg/mL。
计算公式：抑制率(％)＝[ΔA1-ΔA2]/ΔA1*100
注：ΔA1表示对照组在418nm的荧光值差；ΔA2表示样品组在418nm的荧光值差。
荧光光谱仪检测条件：激发光波长：340nm；发射光检测波段：360-600nm；扫描速率：240nm/min；激发光狭缝：2.5nm；发射光狭缝：2.5nm；光电倍增管电压：700V。
荧光光谱仪预热10～20min后可按上述方法设置，取出样品后，将样品倒入荧光比色皿测定。测定结束后每次用蒸馏水及PBS溶液润洗3～4遍，荧光比色皿倒扣于纸巾上，待其充分吸干水分后测定下一个样品。
根据上述实验方法测试，实施例1乙酸乙酯超声提取得到的橙皮提取物抗糖基化结果如图2和图3所示。牛血清蛋白和D-果糖在一定条件下形成AGEs，而AGEs的可发光部分通过荧光测定，荧光值越大，代表AGEs含量越多；反之，荧光值越小，则AGEs含量越少(取最高点荧光值表示，一般取418nm)。
由图2可以看出，随着样品橙皮提取物浓度的增大，最高点的荧光值减小，在31.25～250μg/mL浓度范围内呈线性相关。由图3可以看出，实施例1得到的橙皮提取物具有较强的抗糖基化活性，其半数抑制浓度(IC50；μg/mL)均值为71.26μg/mL，比阳性药氨基胍盐酸盐(AG)的46.19μg/mL略大，本发明的橙皮提取物的抑制效果较好。本发明的橙皮提取物浓度为250mg/L时，抑制率达到80％～95％。
橙皮单体化合物抗糖基化结果如图4所示，从橙皮中分离得到的单体化合物中大多数为黄酮类化合物，这些化合物均具有很强的抗糖基化效果，并且抗糖化效果与给药剂量测定在3.75～100μg/mL范围内呈正相关。其中橙皮单体化合物异橙黄酮、甜橙黄酮、3,3',4',5,6,7-六甲氧基黄酮、川陈皮素、4',5,6,7-四甲氧基黄酮、3,3',4',5,6,7,8-七甲氧基黄酮、桔皮素的半数抑制浓度(IC50；μg/mL)均值分别为45.76、15.72、20.61、31.52、23.91、28.42、29.37μg/mL。
实施例2
将新鲜橙皮置于50℃烘箱中烘至恒重，用中药打粉机打成粉。
取20g橙皮粉于500mL锥形瓶中，加入150mL乙酸乙酯溶剂，浸泡40min，35℃、40KHz超声30min，滤纸过滤得提取液，滤渣再重复提取两次，合并三次提取液。
通过旋转蒸发仪，在-0.1MPa减压条件下，将提取液中乙酸乙酯溶剂去除，样品-80℃下冷冻干燥，得到橙皮提取物。
按照橙皮粉重量计算，平行三次，测得橙皮提取物的得率为2.53％。
实施例3
将新鲜橙皮置于50℃烘箱中烘至恒重，用中药打粉机打成粉。
取20g橙皮粉于500mL锥形瓶中，加入150mL乙酸乙酯溶剂，浸泡30min，33℃、40KHz超声30min，滤纸过滤得提取液，滤渣再重复提取两次，合并三次提取液。
通过旋转蒸发仪，在-0.1MPa减压条件下，将提取液中乙酸乙酯溶剂去除，样品-80℃下冷冻干燥，得到橙皮提取物。
按照橙皮粉重量计算，平行三次，测得橙皮提取物的得率为2.09％。
实施例4
将新鲜橙皮置于50℃烘箱中烘至恒重，用中药打粉机打成粉。
取20g橙皮粉于500mL锥形瓶中，加入150mL乙酸乙酯溶剂，浸泡30min，37℃、40KHz超声30min，滤纸过滤得提取液，滤渣再重复提取两次，合并三次提取液。
通过旋转蒸发仪，在-0.1MPa减压条件下，将提取液中乙酸乙酯溶剂去除，样品-80℃下冷冻干燥，得到橙皮提取物。
按照橙皮粉重量计算，平行三次，测得橙皮提取物的得率为2.38％。
实施例5
将新鲜橙皮置于50℃烘箱中烘至恒重，用中药打粉机打成粉。
取20g橙皮粉于500mL锥形瓶中，加入140mL乙酸乙酯溶剂，浸泡30min，35℃、40KHz超声30min，滤纸过滤得提取液，滤渣再重复提取两次，合并三次提取液。
通过旋转蒸发仪，在-0.1MPa减压条件下，将提取液中乙酸乙酯溶剂去除，样品-80℃下冷冻干燥，得到橙皮提取物。
按照橙皮粉重量计算，平行三次，测得橙皮提取物的得率为1.75％。
实施例6
将新鲜橙皮置于50℃烘箱中烘至恒重，用中药打粉机打成粉。
取20g橙皮粉于500mL锥形瓶中，加入160mL乙酸乙酯溶剂，浸泡30min，35℃、40KHz超声30min，滤纸过滤得提取液，滤渣再重复提取两次，合并三次提取液。
通过旋转蒸发仪，在-0.1MPa减压条件下，将提取液中乙酸乙酯溶剂去除，样品-80℃下冷冻干燥，得到橙皮提取物。
按照橙皮粉重量计算，平行三次，测得橙皮提取物的得率为2.26％。
实施例1～6得到的橙皮提取物的萃取得率如表3所示。
表3实施例1～6得到的橙皮提取物的萃取得率
注：英文小写字母代表不同的显著性差异程度，同一列中字母相同的为不存在显著性差异；字母不同的代表两者间存在5％以上的显著性差异。
对比例1
将50℃烘干的橙皮置于中药粉碎机中进行粉碎，称取8份20g粉碎的橙皮粉，其中4份分别用甲醇、体积分数70％乙醇、体积分数95％乙醇和乙酸乙酯四种溶剂超声提取：每种溶剂量取150mL，浸泡30min，40KHz超声30min，温度为35℃，过滤，滤渣重复提取两次，合并三次滤液得到提取液。
另4份分别用甲醇、体积分数70％乙醇、体积分数95％乙醇和乙酸乙酯四种溶剂回流提取：每种溶剂量取150mL，浸泡30min，95℃加热回流，每次一个小时，过滤，滤渣重复提取两次，合并三次滤液得到提取液。
分别按实施例1进行溶剂去除和干燥，得到不同提取方式的橙皮提取物。
不同提取方式的橙皮提取物抗糖基化作用结果如表4所示。
表4不同提取方式的橙皮提取物抗糖基化IC50值结果
橙皮提取方式 抗糖基化IC50值，mg/L
95％乙醇加热回流 403.06±13.35c
70％乙醇加热回流 532.36±9.90a
甲醇加热回流 477.45±13.07b
乙酸乙酯加热回流 138.12±9.59e
95％乙醇超声 314.31±14.32d
70％乙醇超声 425.50±12.79c
甲醇超声 414.15±17.56c
乙酸乙酯超声 71.26±8.33f
氨基胍盐酸盐 46.19±1.00g
注：英文小写字母代表不同的显著性差异程度，同一列中字母相同的为不存在显著性差异；字母不同的代表两者间存在5％以上的显著性差异。
由表4可以看出，用乙酸乙酯超声提取得到的橙皮提取物的抗糖基化效果最佳，其抗糖基化半抑制浓度IC50值与阳性药氨基胍盐酸盐(AG)的抗糖基化半抑制浓度IC50值最为相近。
尽管上述实施例对本发明做出了详尽的描述，但它仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部实施例，人们还可以根据本实施例在不经创造性劳动前提下获得其他实施例，这些实施例都属于本发明保护范围。

Claims (3)

1.一种橙皮提取物的制备方法，其特征在于，步骤为：
将橙皮粉用乙酸乙酯浸泡后进行超声提取，过滤得到提取液；
将所述提取液去除溶剂、干燥，得到所述橙皮提取物；
所述乙酸乙酯的体积与橙皮粉的质量的比值为(7~8)mL:1g；
所述浸泡的时间为30~40min；
所述超声提取的温度为33~37℃，所述超声提取的时间每次为28~32min；所述超声提取的次数为3次；
所述去除溶剂的方式为减压蒸发；
所述干燥为冷冻干燥；所述冷冻干燥的温度为-87~-80℃，时间为10~12h；
所述橙皮提取物包括以下组分：芸香柚皮苷、橙皮苷、香蜂草苷、异橙黄酮、3,3',4',5,7,8-六甲氧基黄酮、甜橙黄酮、4',5,7,8-四甲氧基黄酮、3,3',4',5,6,7-六甲氧基黄酮、川橙皮素、4',5,6,7-四甲氧基黄酮、3,3',4',5,6,7,8-七甲氧基黄酮、5-羟基-6,7,3',4'-四甲氧基黄酮和桔皮素。
2.权利要求1所述的制备方法得到的橙皮提取物，其特征在于，所述橙皮提取物包括以下组分：芸香柚皮苷、橙皮苷、香蜂草苷、异橙黄酮、3,3',4',5,7,8-六甲氧基黄酮、甜橙黄酮、4',5,7,8-四甲氧基黄酮、3,3',4',5,6,7-六甲氧基黄酮、川橙皮素、4',5,6,7-四甲氧基黄酮、3,3',4',5,6,7,8-七甲氧基黄酮、5-羟基-6,7,3',4'-四甲氧基黄酮和桔皮素。
3.权利要求2所述的橙皮提取物在制备抗糖基化作用的药物中的应用。
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