CN114983875A - 一种舒敏抗炎护肤组合物及其应用 - Google Patents

一种舒敏抗炎护肤组合物及其应用 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种舒敏抗炎护肤组合物及其应用，涉及化妆品技术领域。该舒敏抗炎护肤组合物的组分包括罗勒叶提取物和蓝桉叶油，罗勒叶提取物和蓝桉叶油的重量比为1:0.1‑90。本申请提供的舒敏抗炎功效护肤组合物，其包括罗勒叶提取物与蓝桉叶油，罗勒叶提取物与蓝桉叶油均具对于降低皮肤表皮细胞促炎因子的表达有优异效果，当两者按照特定的比例混合时，能够协同增效，且效果显著由于单一的罗勒叶提取物与蓝桉叶油对降低皮肤表皮细胞促炎因子的表达有优异效果。包含本申请组合物的修复面霜能有效降低表皮细胞炎症水平，减轻皮肤、刺痛和瘙痒等皮肤敏感现象，舒敏抗炎效果优异，且对人体无副作用。

Description

一种舒敏抗炎护肤组合物及其应用
技术领域
本发明涉及化妆品技术领域，具体而言，涉及一种舒敏抗炎护肤组合物及其应用。
背景技术
面部干痒起皮发红，是皮肤角质层变薄、屏障功能受损的表现。屏障功能受损以后皮肤的锁水能力下降，从而导致干燥脱屑、易感性增强，容易出现红斑、瘙痒。近年来，越来越多的消费者开始关注舒敏抗炎型产品。
从机理上来说，常见的皮肤敏感主要分为两种类型：刺激性接触性皮炎和过敏性接触性皮炎。由于角质层变薄、紫外线和气候变化等因素引起的皮肤泛红、瘙痒、刺激的现象，被称为刺激性接触性皮炎。外界环境刺激诱导表皮角质细胞释放炎性相关的因子能，如炎性细胞因子IL-1β(白细胞介素-1β)和TNF-α(肿瘤坏死因子)，趋化细胞因子IL-8(白细胞介素-8)，增长促进细胞因子IL-6(白细胞介素-6)和TGF-α(转化生长因子-α)等。
目前，市面上宣称“敏感肌专用”或“舒敏”“舒缓”的护肤品，往往从保湿性能、气味清新、镇痛等角度出发，起到舒缓的作用。对于皮肤敏感的真正潜在机理和改善方法却极少涉及，导致大部分护肤产品都是“治标不治本”，不能达到“舒敏抗炎”的功效。
鉴于此，特提出本发明。
发明内容
本发明的目的在于提供一种舒敏抗炎护肤组合物及其应用。
本发明是这样实现的：
第一方面，本发明提供一种舒敏抗炎护肤组合物，其组分包括罗勒叶提取物和蓝桉叶油，所述罗勒叶提取物和所述蓝桉叶油的重量比为1:0.1-90。
第二方面，本发明提供了一种表皮细胞促炎因子抑制剂，其包括溶剂以及如前述实施方式任一项所述的舒敏抗炎护肤组合物，所述舒敏抗炎护肤组合物溶解于所述溶剂中，在所述表皮细胞促炎因子抑制剂中，所述罗勒叶提取物的浓度为1-100μg/mL，所述蓝桉叶油的浓度为1-100μg/mL；优选地，所述罗勒叶提取物的浓度为10-100μg/mL，所述蓝桉叶油的浓度为10-100μg/mL；
优选地，所述舒敏抗炎护肤组合物溶解于所述溶剂中包括：先将所述舒敏抗炎护肤组合物采用DMSO进行预溶解，接着采用DMEM培养基稀释。
优选地，皮细胞促炎因子包括TNF-α和IL-6。
第三方面，本发明提供如前述实施方式任一项所述的舒敏抗炎护肤组合物在制备化妆品和/或护肤品中的用途，所述护肤品选自面霜、精华、爽肤水、洗面乳中的至少一种；
优选地，所述护肤品选自面霜。
第四方面，本发明提供一种面霜，其组分包括如前述实施方式任一所述的舒敏抗炎护肤组合物，还包括保湿剂、乳化剂、增稠剂、油脂、抗氧化剂、芳香剂、防腐剂、螯合剂、pH调节剂、皮肤调理剂中的一种或两种以上的组合；
优选地，以所述面霜的总质量计，所述保湿剂的加入量为0.01％-20％；所述增稠剂的加入量为0.2％-1.8％；所述乳化剂的加入量为0.01％-2％；所述油脂的加入量为1％-15％；所述抗氧化剂的加入量为0.01％-1％；所述芳香剂的加入量为0.005％-0.5％；所述防腐剂的加入量为0.01％-1.5％；所述螯合剂的加入量为0.01％-1％；所述pH调节剂加入量为0.01％-1％；所述皮肤调理剂加入量为0.01％-5％。
第五方面，本发明提供一种如前述实施方式任一所述的面霜的制备方法，其包括将所述组合混合均匀。
本发明具有以下有益效果：
本申请提供的舒敏抗炎功效护肤组合物，其包括罗勒叶提取物与蓝桉叶油，罗勒叶提取物与蓝桉叶油均具对于降低皮肤表皮细胞促炎因子的表达有优异效果，当两者按照特定的比例混合时，能够协同增效，且效果显著由于单一的罗勒叶提取物与蓝桉叶油对降低皮肤表皮细胞促炎因子的表达有优异效果。包含本申请组合物的修复面霜能有效降低表皮细胞炎症水平，减轻皮肤、刺痛和瘙痒等皮肤敏感现象，舒敏抗炎效果优异，且对人体无副作用。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，应当理解，以下附图仅示出了本发明的某些实施例，因此不应被看作是对范围的限定，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他相关的附图。
图1为本申请提供的实验例一的细胞存活率结果图；
图2为本申请提供的实验例二的罗勒叶提取物不同处理组的TNF-α浓度；
图3为本申请提供的实验例二的罗勒叶提取物不同处理组的IL-6浓度；
图4为本申请提供的实验例三蓝桉叶油不同处理组的TNF-α浓度；
图5为本申请提供的实验例三蓝桉叶油不同处理组的IL-6浓度；
图6为本申请提供的实验例四中不同处理组的TNF-α浓度；
图7为本申请提供的实验例四中不同处理组的IL-6浓度。
具体实施方式
为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。
本申请提供了一种舒敏抗炎护肤组合物，其组分包括罗勒叶提取物和蓝桉叶油，罗勒叶提取物和蓝桉叶油在组合物中的重量比为1:0.1-90；
优选地，罗勒叶提取物和蓝桉叶油的重量比为1:0.1-1。
其中，罗勒叶提取物的制备方法包括以下步骤：
S1.将罗勒叶洗净烘干，粉碎，过60-80目筛；
S2.将步骤S1制备的粉碎后的罗勒叶加入至提取罐中，利用50-70wt％乙醇进行提取，罗勒叶、乙醇的料液比为1:20-50；提取温度为50-70℃，提取2-4次，提取时间为2-8小时，获得罗勒叶粗提物；
S3.将步骤S2所获得的罗勒叶粗提物过滤，并经过外循环罐、沉降罐进行浓缩并进行喷雾干燥，获得粉末状的罗勒叶提取物。
蓝桉叶油的制备方法包括以下步骤：
1)将蓝桉叶洗净烘干，粉碎；
2)将步骤1)粉碎后的蓝桉叶加入至提取罐中，使用水蒸气蒸馏法进行提取，蓝桉叶原料与水的质量比为1：5-7，提取温度30-70℃，经超声处理，超声功率为150-230W，蒸馏时间为5-7小时。
3)蒸馏结束后收集精油，用无水硫酸钠脱水后，获得蓝桉叶油。
本申请还提供了一种表皮细胞促炎因子抑制剂，其包括溶剂以及舒敏抗炎护肤组合物，舒敏抗炎护肤组合物溶解于溶剂中，在表皮细胞促炎因子抑制剂中，罗勒叶提取物的浓度为1-100μg/mL，蓝桉叶油的浓度为1-100μg/mL；优选地，罗勒叶提取物的浓度为10-100μg/mL，蓝桉叶油的浓度为10-100μg/mL；
优选地，舒敏抗炎护肤组合物溶解于溶剂中包括：先将舒敏抗炎护肤组合物采用DMSO进行预溶解，接着采用DMEM培养基稀释。
优选地，皮细胞促炎因子包括TNF-α和IL-6。
经本申请研究发现，采用上述浓度的罗勒叶提取物和蓝桉叶油不会对细胞活性产生影响，同时对促炎因子TNF-α和IL-6的表达均具有优异的抑制作用。
此外，本申请还提供了上述舒敏抗炎护肤组合物在制备化妆品和/或护肤品中的用途；其中，护肤品选自面霜、精华、爽肤水、洗面乳中的至少一种；优选地，护肤品选自面霜。
在一些实施方案中，舒敏抗炎护肤组合物在化妆品和/或护肤品中的加入量占化妆品和/或护肤品的总质量的0.01％-5％，优选为0.2％-4％。
具体来说，本申请提供了一种具体的应用方案(面霜)，本申请中的面霜包括上述舒敏抗炎护肤组合物，还包括保湿剂、增稠剂、乳化剂、油脂、抗氧化剂、芳香剂、防腐剂、螯合剂、pH调节剂、皮肤调理剂中的一种或两种以上的组合。
在一些实施方案中，以面霜的总质量计，保湿剂的加入量为0.01％-20％；增稠剂的加入量为0.2％-1.8％；乳化剂的加入量为0.01％-2％；油脂的加入量为1％-15％；抗氧化剂的加入量为0.01％-1％；芳香剂的加入量为0.005％-0.5％；防腐剂的加入量为0.01％-1.5％；螯合剂的加入量为0.01％-1％；pH调节剂加入量为0.01％-1％；皮肤调理剂加入量为0.01％-5％。
在一些实施方案中，保湿剂包括但不限于木糖醇、甜菜碱、甘油、吡络烷酮羧酸钠、双丙甘醇、甘油聚醚-26、透明质酸钠、泛醇、PEG/PPG-17/6共聚物、丁二醇、透明质酸钠、神经酰胺中的一种或两种以上的组合。
在一些实施方案中，增稠剂包括但不限于卡波姆、黄原胶、山嵛醇、丙烯酸羟乙酯/丙烯酰二甲基牛磺酸钠共聚物和异十六烷和聚山梨醇酯-60的复合物、丙烯酰二甲基牛磺酸铵/VP共聚物、丙烯酸羟乙酯/丙烯酰二甲基牛磺酸钠共聚物、丙烯酸(酯)类/C10-30烷醇丙烯酸酯交联聚合物、丙烯酸羟乙酯/丙烯酰二甲基牛磺酸钠共聚物和异十六烷和聚山梨醇酯-60的复合物的一种或两种以上的组合。
在一些实施方案中，乳化剂包括但不限于PEG-20甲基葡糖倍半硬脂酸酯、鲸蜡硬脂醇或鲸蜡硬脂醇聚醚-20、山嵛醇聚醚-25、鲸蜡硬脂醇、鲸蜡硬脂醚-30、硬脂醇聚醚-21、硬脂醇聚醚-2、鲸蜡硬脂醇和椰油基葡糖苷、单月桂酸失水山梨醇酯中的一种或两种以上的组合。
在一些实施方案中，油脂包括但不限于角鲨烷、辛酸葵酸三甘油酯、碳酸二辛酯、牛油果树果脂、白油、凡士林、羊毛脂衍生物、硅油、高级脂肪酸脂、天然植物油脂、天然动物油脂、高级脂肪醇中的一种或两种以上的组合。
在一些实施方案中，抗氧化剂包括但不限于维生素E、VE醋酸酯、2,6-二叔丁基-4-甲基苯酚、番茄红素、抗坏血酸乙基醚中的一种或两种以上的组合。
在一些实施方案中，芳香剂选自香精。
在一些实施方案中，防腐剂包括但不限于苯氧乙醇、羟苯甲酯、羟苯丙酯、苯甲酸及其盐中的一种或两种以上的组合；在一些实施方案中，螯合剂选自EDTA-2Na和EDTA-4Na；在一些实施方案中，pH调节剂包括柠檬酸、酒石酸、磷酸、柠檬酸钠、氢氧化钠、氢氧化钾、三乙醇胺中的一种或两种以上的组合；在一些实施方案中，皮肤调理剂包括尿囊素、D-泛醇、水解胶原蛋白、燕麦肽、神经酰胺3、墨角藻提取物、小球藻发酵产物、绿藻提取物、褐藻提取物、北美金缕梅水、红没药醇、尿囊素、白果槲寄生叶提取物、白茅根提取物、丝氨酸、巨藻提取物、β-葡聚糖、仙人掌提取物中的一种或两种以上的组合。
本申请还提供了的面霜的制备方法，其包括将各组合混合的步骤。
以下结合实施例对本发明的特征和性能作进一步的详细描述。
实施例1
本实施例提供了一种舒敏抗炎护肤组合物，其包括质量比为10:1的罗勒叶提取和蓝桉叶油。
其中，罗勒叶提取物的制备方法为：将罗勒叶洗净烘干粉碎后，过60目筛加入到提取罐内，在60度下加入水和乙醇，其中，罗勒叶原料、乙醇的质量比为1:40，煮提取3次，每次2.5小时，获得提取液。之后将获得的提取液过滤并存放于储存罐，让储存罐中的滤液缓慢流入外循环罐和沉降罐进行浓缩，获得液体成分和沉淀物，将液体成分进行喷雾干燥，将沉淀物进行烘干后过筛，获得罗勒叶提取物，然后对罗勒叶提取物进行检测，灰分含量为6％，水分含量为4％。
蓝桉叶油的制备方法为：将蓝桉叶洗净烘干，粉碎，过筛(20目筛下，60目筛上)；使用水蒸气蒸馏法进行提取，所述蓝桉叶原料与水的质量比为1：6，提取温度50℃，经超声处理，超声功率为200w，提取时间为6小时，蒸馏结束后收集精油，用无水硫酸钠脱水后，获得蓝桉叶油。
直接将粉末状的罗勒叶提取物和蓝桉叶油按照上述质量比进行混合。
实施例2
本实施例提供了一种舒敏抗炎护肤组合物，其包括质量比为2:1的罗勒叶提取物和蓝桉叶油。其制备方法与实施例1相同。
实施例3
本实施例提供了一种舒敏抗炎护肤组合物，其包括质量比为1:2的罗勒叶提取物和蓝桉叶油。其制备方法与实施例1相同。
实施例4
本实施例提供了一种舒敏抗炎护肤组合物，其包括质量比为1:10的罗勒叶提取物和蓝桉叶油。其制备方法与实施例1相同。
实施例5
本实施例提供了一种舒敏抗炎护肤组合物，其包括质量比为1:1的罗勒叶提取物和蓝桉叶油。其制备方法与实施例1相同。
实施例6
本实施例提供了一种舒敏抗炎护肤组合物，其包括质量比为1:90的罗勒叶提取物和蓝桉叶油。其制备方法与实施例1相同。
实施例7
本实施例提供了一种舒敏抗炎护肤组合物，其包括质量比为7:1的罗勒叶提取物和蓝桉叶油。其制备方法与实施例1相同。
实施例8
本实施例提供了一种舒敏抗炎护肤组合物，其包括质量比为1:7的罗勒叶提取物和蓝桉叶油。其制备方法与实施例1相同。
实施例9
本实施例提供了一种舒敏抗炎护肤组合物，其与实施例1基本相同，区别仅在于罗勒叶提取物和蓝桉叶油的制备方法不同。
本实施例中的罗勒叶提取物的制备方法为：将罗勒叶洗净烘干粉碎后，过80目筛加入到提取罐内，在50℃下加入乙醇，其中，罗勒叶原料、乙醇的质量比为1:20，煮提取4次，每次2小时，获得提取液。之后将获得的提取液过滤并存放于储存罐，让储存罐中的滤液缓慢流入外循环罐和沉降罐进行浓缩，获得液体成分和沉淀物，将液体成分进行喷雾干燥，将沉淀物进行烘干后过筛，获得罗勒叶提取物，然后对罗勒叶提取物进行检测，灰分含量为4％，水分含量为5％。
蓝桉叶油的制备方法为：将蓝桉叶洗净烘干，粉碎，过筛(20目筛下，60目筛上)；使用水蒸气蒸馏法进行提取，所述蓝桉叶原料与水的质量比为1：5，提取温度30℃，经超声处理，超声功率为150w，提取时间为7小时，蒸馏结束后收集精油，用无水硫酸钠脱水后，获得蓝桉叶油。
实施例10
本实施例提供了一种舒敏抗炎护肤组合物，其与实施例1基本相同，区别仅在于罗勒叶提取物和蓝桉叶油的制备方法不同。
本实施例中的罗勒叶提取物的制备方法为：将罗勒叶洗净烘干粉碎后，过60目筛加入到提取罐内，在70℃下加入乙醇，其中，罗勒叶原料、乙醇的质量比为1:50，煮提取2次，每次6小时，获得提取液。之后将获得的提取液过滤并存放于储存罐，让储存罐中的滤液缓慢流入外循环罐和沉降罐进行浓缩，获得液体成分和沉淀物，将液体成分进行喷雾干燥，将沉淀物进行烘干后过筛，获得罗勒叶提取物，然后对罗勒叶提取物进行检测，灰分含量为8％，水分含量为5％。
蓝桉叶油的制备方法为：将蓝桉叶洗净烘干，粉碎，过筛(20目筛下，60目筛上)；使用水蒸气蒸馏法进行提取，所述蓝桉叶原料与水的质量比为1：7，提取温度70℃，经超声处理，超声功率为230w，提取时间为5小时，蒸馏结束后收集精油，用无水硫酸钠脱水后，获得蓝桉叶油。
对比例1
本实施例提供了一种舒敏抗炎护肤组合物，其包括质量比为1:1的罗勒叶提取物和薰衣草油。
对比例2
本实施例提供了一种舒敏抗炎护肤组合物，其包括质量比为1:1的罗勒叶提取物和香叶天竺葵花油。
对比例3
本实施例提供了一种舒敏抗炎护肤组合物，其包括质量比为1:1的水飞蓟果提取物和蓝桉叶油。
对比例4
本实施例提供了一种舒敏抗炎护肤组合物，其包括质量比为1:1的绿茶提取物和蓝桉叶油g。
对比例5
本实施例提供了一种舒敏抗炎护肤组合物，其仅包括罗勒叶提取物。
对比例6
本实施例提供了一种舒敏抗炎护肤组合物，其仅包括蓝桉叶油。
应用实施例
根据下表1中的应用实施例1-3的抗衰面霜配方中各组分的含量(质量百分比)，并按照下述生产工艺步骤制备得到抗衰面霜。
生产工艺步骤如下：
1、将A相原料加入油相锅，搅拌并加热至82℃，完全溶解后82℃保温10min；
2、将B相原料加入水相锅，搅拌溶解完全，并加热至82℃，保温10min；
3、抽真空预热并烘干乳化锅，然后先抽入A相，开均质后再抽入B相，保持均质5分钟，开搅拌速度1200转/分，82℃保温搅拌30分钟；
4、降温70℃，低速均质条件下，缓慢加入溶解均匀的C相；搅拌均匀；
5、降温至45℃，加入D相搅拌均匀后，最后加入E相；
6、继续搅拌冷却至室温；
7、检验合格后出料，静置24小时；
8、检验合格后，分装、包装，再检验，成品入库。
注：工艺中的A、B、C、D、E相分别表示如下：
A相：鲸蜡硬脂醇和椰油基葡糖苷、硬脂醇聚醚-2、鲸蜡硬脂醇、角鲨烷、辛酸葵酸三甘油酯、碳酸二辛酯、牛油果树果脂、VE醋酸酯、羟苯甲酯、罗勒叶提取物、蓝桉叶油；
B相：水、尿囊素、丁二醇、甘油、氯化钠、EDTA-Na2、木糖醇、甜菜碱、透明质酸钠、D-泛醇、柠檬酸钠；
C相：丙烯酸羟乙酯/丙烯酰二甲基牛磺酸钠共聚物和异十六烷和聚山梨醇酯-60的复合物、水、甘油；
D相：香精、PEG-40氢化蓖麻油；
E相：水、苯氧乙醇、吡咯烷酮羧酸钠。
配方中，鲸蜡硬脂醇、角鲨烷、辛酸葵酸三甘油酯、碳酸二辛酯、牛油果树果脂是油脂；椰油基葡糖苷、硬脂醇聚醚-2是乳化剂；丁二醇、甘油、木糖醇、甜菜碱、透明质酸钠、吡咯烷酮羧酸钠是保湿剂；VE醋酸酯是抗氧化剂；EDTA-Na2是螯合剂；苯氧乙醇、羟苯甲酯是防腐剂；香精是芳香剂；PEG-40氢化蓖麻油为增溶剂。丙烯酸羟乙酯/丙烯酰二甲基牛磺酸钠共聚物和异十六烷和聚山梨醇酯-60的复合物是增稠剂，购自赛比克公司，牌号SimugelFL。尿囊素、D-泛醇是皮肤调理剂；氯化钠在此体系中可以提升乳化性能。
表1面霜组分及其用量
Figure BDA0003716662740000111
Figure BDA0003716662740000121
其中，应用实施例1-4按照添加量为4％进行添加。
应用实施例1中，罗勒叶提取物的添加量为3.5％，蓝桉叶油的添加量为0.5％，此时，罗勒叶提取物和蓝桉叶油的质量比为7:1。
应用实施例2中，罗勒叶提取物的添加量为0.5％，蓝桉叶油的添加量为3.5％，此时，罗勒叶提取物和蓝桉叶油的质量比为1:7。
应用实施例3中，罗勒叶提取物的添加量为2.0％，蓝桉叶油的添加量为2.0％，此时，罗勒叶提取物和蓝桉叶油的质量比为1:1。
应用对比例
其面霜配方与表5相同，区别仅在于：
应用对比例1中省略罗勒叶提取物和蓝桉叶油；
应用对比例2中罗勒叶提取物的添加量为4％，蓝桉叶油的添加量为0％。
应用对比例3中罗勒叶提取物的添加量为0％，蓝桉叶油的添加量为4％。
应用对比例4中罗勒叶提取物的添加量为2.0％，薰衣草油的添加量为2.0％。
应用对比例5中罗勒叶提取物的添加量为2.0％，香叶天竺葵花油的添加量为2.0％。
应用对比例6中水飞蓟果提取物的添加量为2.0％和蓝桉叶油的添加量为2.0％。
应用对比例7中绿茶提取物的添加量为2.0％和蓝桉叶油的添加量为2.0％。
实验例一：罗勒叶提取物和蓝桉叶油对人表皮细胞存活率的影响
考虑到罗勒叶提取物和蓝桉叶油为天然植物的活性提取物，在进行舒敏抗炎功效的细胞水平检测之前，需要先进行细胞活性测试，获得用于细胞测试的安全范围。
CCK-8试剂中含有WST–8：化学名为2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐，它在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪硫酸二甲酯的作用下被细胞线粒体中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的黄色甲臜产物，生成的甲臜物的数量与活细胞的数量成正比。用酶联免疫检测仪在450nm波长处测定其光吸收值，可间接反映活细胞数量。该方法已被广泛用于一些生物活性因子的活性检测、大规模的抗肿瘤药物筛选、细胞增殖试验、细胞毒性试验以及药敏试验等。
实验步骤如下：
(1)用DMSO配制罗勒叶提取物和蓝桉叶油至质量浓度100mg/mL，经0.22μm针头式过滤器过滤去除杂质。
(2)取对数生长期的HaCaT细胞，以4×104/孔接种在96孔板，将培养板放置于37℃的CO2培养箱中。
(3)根据实验设计，采用DMEM培养基稀释罗勒叶提取物和蓝桉叶油至1.23μg/mL、3.70μg/mL、11.11μg/mL、33.33μg/mL、100μg/mL。同时，设定正常组。
(4)吸去原培养基后，以100μL/孔加入相应浓度的样品。
(5)给药24h后，每孔加入10μL CCK-8溶液，置于37℃的CO2培养箱。
(6)孵育2h后，在450nm波长下，测定吸光度。
(7)细胞存活率(％)＝模型组或样品组OD/正常组OD×100
所得实验结果如图1和表2所示。
表2
Figure BDA0003716662740000141
根据图1和表2可以看出，将罗勒叶提取物控制在1-100ug/mL，蓝桉叶油浓度控制在1-100ug/mL时，将不会对细胞活性产生影响。
实验例二：罗勒叶提取物抑制表皮细胞炎症模型的促炎因子表达水平
将HaCaT细胞至于37℃及CO2环境下用DMEM细胞培养基培养，48h后更换培养基，直至细胞融合度达到80％以上，然后将其分成以下几组：
(1)空白组(细胞正常培养)；
(2)LPS模型组(即模型损伤组，1μg/mL LPS作用24h，后更换为普通培养基继续培养24h)；
罗勒叶提取物加药组：
(3)1μg/mL LPS作用24h，后更换为溶有罗勒叶提取物的培养基继续培养24h，其中罗勒叶提取物浓度为1μg/mL；
(4)1μg/mL LPS作用24h，后更换为溶有罗勒叶提取物的培养基继续培养24h，其中罗勒叶提取物浓度为3μg/mL；
(5)1μg/mL LPS作用24h，后更换为溶有罗勒叶提取物的培养基继续培养24h，其中罗勒叶提取物浓度为10μg/mL；
(6)1μg/mL LPS作用24h，后更换为溶有罗勒叶提取物的培养基继续培养24h，其中罗勒叶提取物浓度为30μg/mL；
(7)1μg/mL LPS作用24h，后更换为溶有罗勒叶提取物的培养基继续培养24h，其中罗勒叶提取物浓度为100μg/mL；
(8)阳性对照组：1μg/mL LPS作用24h，后更换为10μg/mL地塞米松的培养基继续培养24h。
细胞依次经LPS和药物处理后，取上清液，使用ELISA试剂盒检测上清液中促炎因子的浓度。
本次实验使用的促炎因子TNF-α和IL-6的ELISA试剂盒，购自生工生物工程(上海)股份有限公司。
按照试剂盒方法检测促炎因子TNF-α和IL-6的浓度。主要步骤包括：将细胞上清液稀释至Elisa试剂盒的检测范围，之后加入包被有抗体的96孔板中孵育，之后分别加入目标检测物的抗体和显色液TMB，加入反应停止液后利用酶标仪对其读数进行检测，依据试剂盒提供的标品绘制标准曲线并计算上清液中促炎因子浓度。
表3
Figure BDA0003716662740000151
由表3和图2、图3可以看出，罗勒叶提取物对促炎因子TNF-α和IL-6的表达均具有优异的抑制作用，并且对促炎因子的抑制率会随着罗勒叶提取物的质量浓度的增加而逐渐变大。
实验例三：蓝桉叶油抑制表皮细胞炎症模型的促炎因子表达水平
将HaCaT细胞至于37℃及CO2环境下用DMEM细胞培养基培养，48h后更换培养基，直至细胞融合度达到80％以上，然后将其分成以下几组：
(1)空白组(细胞正常培养)；
(2)LPS模型组(即模型损伤组，1μg/mL LPS作用24h，后更换为普通培养基继续培养24h)；
蓝桉叶油加药组：
(3)1μg/mL LPS作用24h，后更换为溶有蓝桉叶油的培养基继续培养24h，其中蓝桉叶油浓度为1μg/mL；
(4)1μg/mL LPS作用24h，后更换为溶有蓝桉叶油的培养基继续培养24h，其中蓝桉叶油浓度为3μg/mL；
(5)1μg/mL LPS作用24h，后更换为溶有蓝桉叶油的培养基继续培养24h，其中蓝桉叶油浓度为10μg/mL；
(6)1μg/mL LPS作用24h，后更换为溶有蓝桉叶油的培养基继续培养24h，其中蓝桉叶油浓度为30μg/mL；
(7)1μg/mL LPS作用24h，后更换为溶有蓝桉叶油的培养基继续培养24h，其中蓝桉叶油浓度为100μg/mL；
(8)阳性对照组：1μg/mL LPS作用24h，后更换为10μg/mL地塞米松的培养基继续培养24h。
细胞依次经LPS和药物处理后，取上清液，使用ELISA试剂盒检测上清液中促炎因子的浓度。
本次实验使用的促炎因子TNF-α和IL-6的ELISA试剂盒，购自生工生物工程(上海)股份有限公司。
按照试剂盒方法检测促炎因子TNF-α和IL-6的浓度。主要步骤包括：将细胞上清液稀释至Elisa试剂盒的检测范围，之后加入包被有抗体的96孔板中孵育，之后分别加入目标检测物的抗体和显色液TMB，加入反应停止液后利用酶标仪对其读数进行检测，依据试剂盒提供的标品绘制标准曲线并计算上清液中促炎因子浓度。
表4
Figure BDA0003716662740000171
由表4和图4、图5可以看出，蓝桉叶油对促炎因子TNF-α和IL-6的表达均抑制作用，但仅对IL-6的抑制效果较为优异，对TNF-α的抑制效果弱于罗勒叶提取物。同时，蓝桉叶油对促炎因子的抑制率会随着质量浓度的增加而逐渐变大。
实验例四：罗勒叶提取物和蓝桉叶油的复配能够显著增强抑制表皮细胞炎症模型的促炎因子表达水平的效果
将HaCaT细胞至于37℃及CO2环境下用DMEM细胞培养基培养，48h后更换培养基，直至细胞融合度达到80％以上，然后将其分成以下几组：
(1)空白组(细胞正常培养)；
(2)LPS模型组(即模型损伤组，1μg/mL LPS作用24h，后更换为普通培养基继续培养24h)；
罗勒叶提取物和蓝桉叶油复配加药组：
(3)1μg/mL LPS作用24h，后更换为溶有罗勒叶提取物(100μg/mL)+蓝桉叶油(10μg/mL)的培养基(即将实施例1的舒敏抗炎护肤组合物稀释至上述浓度)继续培养24h；
(4)1μg/mL LPS作用24h，后更换为溶有罗勒叶提取物(100μg/mL)+蓝桉叶油(50μg/mL)的培养基(即实施例2的舒敏抗炎护肤组合物稀释至上述浓度)继续培养24h；
(5)1μg/mL LPS作用24h，后更换为溶有罗勒叶提取物(50μg/mL)+蓝桉叶油(100μg/mL)的培养基(即实施例3的舒敏抗炎护肤组合物稀释至上述浓度)继续培养24h；
(6)1μg/mL LPS作用24h，后更换为溶有罗勒叶提取物(10μg/mL)+蓝桉叶油(100μg/mL)的培养基(即实施例4的舒敏抗炎护肤组合物稀释至上述浓度)继续培养24h；
(7)1μg/mL LPS作用24h，后更换为溶有罗勒叶提取物(100μg/mL)+蓝桉叶油(100μg/mL)的培养基(即实施例5的舒敏抗炎护肤组合物稀释至上述浓度)继续培养24h；
(8)1μg/mL LPS作用24h，后更换为溶有罗勒叶提取物(1μg/mL)+蓝桉叶油(90μg/mL)的培养基(即实施例6的舒敏抗炎护肤组合物稀释至上述浓度)继续培养24h；
(9)1μg/mL LPS作用24h，后更换为溶有罗勒叶提取物(10μg/mL)+蓝桉叶油(1μg/mL)的培养基(即实施例1的舒敏抗炎护肤组合物稀释至上述浓度)继续培养24h；
(10)1μg/mL LPS作用24h，后更换为溶有罗勒叶提取物(100μg/mL)+薰衣草油(100μg/mL)的培养基(即对比例1的舒敏抗炎护肤组合物稀释至上述浓度)继续培养24h；
(11)1μg/mL LPS作用24h，后更换为溶有罗勒叶提取物(100μg/mL)+香叶天竺葵花油(100μg/mL)的培养基(即对比例2的舒敏抗炎护肤组合物稀释至上述浓度)继续培养24h；
(12)1μg/mL LPS作用24h，后更换为溶有水飞蓟果提取物(100μg/mL)+蓝桉叶油(100μg/mL)的培养基(即对比例3的舒敏抗炎护肤组合物稀释至上述浓度)继续培养24h；
(13)1μg/mL LPS作用24h，后更换为溶有绿茶提取物(100μg/mL)+蓝桉叶油(100μg/mL)的培养基(即对比例4的舒敏抗炎护肤组合物稀释至上述浓度)继续培养24h。
(14)阳性对照组：1μg/mL LPS作用24h，后更换为10μg/mL地塞米松的培养基继续培养24h。
细胞依次经LPS和药物处理后，取上清液，使用ELISA试剂盒检测上清液中促炎因子的浓度。
数据检测和处理方法同实验例二。
表5
Figure BDA0003716662740000191
Figure BDA0003716662740000201
由表5和图6、图7可以看出，罗勒叶提取物和蓝桉叶油的组合物对促炎因子TNF-α和IL-6的表达均有优异的抑制作用，并且，两者协同作用时，效果强于单独组分的使用。即，罗勒叶提取物和蓝桉叶油的组合物，其抑制促炎因子表达的效果强于单独使用，能够很好地达到协同作用。同时，并且不同比例的组合物呈现出的效果不同。此外，其他提取物与蓝桉叶油进行复配，或者罗勒叶提取物与其他精油进行复配，均无法获得罗勒叶提取物和蓝桉叶油两者的协同增效效果，充分证明本申请的罗勒叶提取物和蓝桉叶油选择的特定性以及复配效果的显著性。
实验例五、舒缓功效测试
将本申请提供的应用实施例1-3和应用对比例1-7制备的面霜进行舒缓功效测试。
舒缓功效测试的原理概述如下：
每一组各征集6-8名受试者，测试周期为28天。在产品使用前、使用后第14天，使用后第28天分别测试。通过测试得到的皮肤经皮失水率、皮肤泛红程度和乳酸刺痛反应程度来测试修复产品的舒缓程度。
其中，皮肤经皮失水率由Tewameter TM300测得，是反映皮肤水分丢失和屏障功能的重要参数，所测得数值越低，表示皮肤的屏障功能越好。
皮肤泛红程度用VISIA-CR进行面部图像采集，然后使用Image-Pro-Plus图像分析软件对Standard2光源下的图片进行皮肤a*值分析，该数值越小，表示皮肤泛红程度越轻。
乳酸测试实验指：使用10％乳酸溶液浸湿皮肤，对皮肤进行接触性刺激，在5分钟内由受试者评估测试部位瘙痒、刺痛、灼痛的不适程度。实验以生理盐水为对照。
乳酸是一种能够引起皮肤刺痛但不会引起过敏反应的物质，即引起的是皮肤刺激性接触性皮炎，并非过敏性接触性皮炎。乳酸刺痛实验构建的模型，能够适用于针对刺激性接触性皮炎而设计的舒敏抗炎效果的产品。
实验结果如下：
表6皮肤经皮失水率的差异性分析
皮肤经皮失水率[g/m2h] D0 D14 D28
应用实施例1 17.22±5.14 15.79±5.14 14.99±5.03
应用实施例2 17.34±3.72 15.56±3.98 14.55±4.75
应用实施例3 17.81±4.14 15.38±4.43 13.97±4.11
应用对比例1 17.72±4.89 17.79±3.97 16.23±4.05
应用对比例2 17.96±4.98 16.56±4.67 15.77±3.94
应用对比例3 17.78±3.13 17.70±4.06 15.27±4.19
应用对比例4 17.98±2.01 16.33±3.19 15.31±2.56
应用对比例5 17.05±2.56 16.70±2.09 15.34±2.99
应用对比例6 17.39±3.07 16.99±2.58 15.98±2.71
应用对比例7 17.25±2.99 16.21±3.05 15.83±2.68
从表6中可以看出，实施例的皮肤经皮失水率较对比例明显降低。
表7皮肤a*值的差异性分析
皮肤a*值 D0 D14 D28
应用实施例1 17.23±2.54 15.28±2.03 13.24±3.12
应用实施例2 17.93±2.27 15.67±3.11 13.11±2.74
应用实施例3 17.82±2.19 15.37±2.53 14.21±2.15
应用对比例1 17.81±2.78 18.24±3.01 17.62±2.34
应用对比例2 17.99±2.27 16.91±2.92 17.55±2.29
应用对比例3 17.31±2.52 16.56±2.77 16.32±2.20
应用对比例4 16.99±1.91 16.35±2.89 16.02±3.25
应用对比例5 17.20±1.24 17.01±2.52 16.89±1.98
应用对比例6 17.39±2.06 16.80±2.52 16.38±3.03
应用对比例7 17.19±2.49 16.81±2.52 16.44±3.25
从表7中可以看出，实施例的皮肤泛红程度相对于对比例明显减轻。
表8乳酸刺痛评分的差异性分析
乳酸刺痛总评分(平均值) D0 D28
应用实施例1 4.45±0.91 3.24±1.55
应用实施例2 4.91±1.34 3.02±1.93
应用实施例3 4.55±1.13 3.56±1.92
应用对比例1 4.97±1.23 4.22±1.47
应用对比例2 4.41±0.93 3.92±1.49
应用对比例3 4.94±1.18 3.88±2.06
应用对比例4 4.67±1.33 3.83±1.17
应用对比例5 4.34±1.05 4.05±1.21
应用对比例6 4.92±1.28 4.18±1.21
应用对比例7 4.59±1.19 3.98±1.12
从表8中可以看出，在乳酸刺痛测试中，使用了实施例产品的受试者的刺痛程度相对于对比例明显降低。
这些结果表明，使用了罗勒叶提取物和蓝桉叶油组合物的修复面霜，能够显著性降低皮肤接触性刺激性皮炎引起的皮肤泛红、刺痛、瘙痒程度，起到较好的舒敏抗炎效果。
综上所述，本申请提供的舒敏抗炎功效护肤组合物，其包括罗勒叶提取物与蓝桉叶油，罗勒叶提取物与蓝桉叶油均具对于降低皮肤表皮细胞促炎因子的表达有优异效果，当两者按照特定的比例混合时，能够协同增效，且效果显著由于单一的罗勒叶提取物与蓝桉叶油对降低皮肤表皮细胞促炎因子的表达有优异效果。包含本申请组合物的修复面霜能有效降低表皮细胞炎症水平，减轻皮肤、刺痛和瘙痒等皮肤敏感现象，舒敏抗炎效果优异，且对人体无副作用。
以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，对于本领域的技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种舒敏抗炎护肤组合物，其特征在于，其组分包括罗勒叶提取物和蓝桉叶油，所述罗勒叶提取物和所述蓝桉叶油的重量比为1:0.1-90。
2.根据权利要求1所述的舒敏抗炎护肤组合物，其特征在于，所述罗勒叶提取物和所述蓝桉叶油的重量比为1:0.1-10。
3.根据权利要求1所述的舒敏抗炎护肤组合物，其特征在于，所述罗勒叶提取物的制备方法包括以下步骤：
将罗勒叶粉末采用50-70wt％的乙醇进行提取，所述罗勒叶粉末、所述乙醇的料液比为1:20-50；提取温度为50-70℃，提取2-4次，提取时间为2-8小时，获得罗勒叶粗提物；将所述罗勒叶粗提物过滤，并经浓缩后喷雾干燥，获得罗勒叶提取物；
优选地，所述罗勒叶粉末的粒径为60-80目。
4.根据权利要求1所述的舒敏抗炎护肤组合物，其特征在于，所述蓝桉叶油的制备方法包括以下步骤：
将蓝桉叶粉末使用水蒸气蒸馏法进行提取，所述蓝桉叶粉末与水的质量比为1：5-7，提取温度30-70℃，经超声处理，超声功率为150-230W，蒸馏时间为5-7小时；蒸馏结束后收集精油，用无水硫酸钠脱水后，获得蓝桉叶油。
5.一种表皮细胞促炎因子抑制剂，其特征在于，其包括溶剂以及如权利要求1-4任一项所述的舒敏抗炎护肤组合物，所述舒敏抗炎护肤组合物溶解于所述溶剂中，在所述表皮细胞促炎因子抑制剂中，所述罗勒叶提取物的浓度为1-100μg/mL，所述蓝桉叶油的浓度为1-100μg/mL；
优选地，所述罗勒叶提取物的浓度为10-100μg/mL，所述蓝桉叶油的浓度为10-100μg/mL；
优选地，所述舒敏抗炎护肤组合物溶解于所述溶剂中包括：先将所述舒敏抗炎护肤组合物采用DMSO进行预溶解，接着采用DMEM培养基稀释；
优选地，皮细胞促炎因子包括TNF-α和IL-6。
6.如权利要求1-4任一项所述的舒敏抗炎护肤组合物在制备化妆品和/或护肤品中的用途，其特征在于，所述护肤品选自面霜、精华、爽肤水、洗面乳中的至少一种；
优选地，所述护肤品选自面霜。
7.根据权利要求6所述的用途，其特征在于，所述舒敏抗炎护肤组合物在化妆品和/或护肤品中的加入量占化妆品和/或护肤品的总质量的0.01％-5％，优选为0.2％-4％。
8.一种面霜，其特征在于，其组分包括如权利要求1-5任一所述的舒敏抗炎护肤组合物，还包括保湿剂、乳化剂、增稠剂、油脂、抗氧化剂、芳香剂、防腐剂、螯合剂、pH调节剂、皮肤调理剂中的一种或两种以上的组合；
优选地，以所述面霜的总质量计，所述保湿剂的加入量为0.01％-20％；所述增稠剂的加入量为0.2％-1.8％；所述乳化剂的加入量为0.01％-2％；所述油脂的加入量为1％-15％；所述抗氧化剂的加入量为0.01％-1％；所述芳香剂的加入量为0.005％-0.5％；所述防腐剂的加入量为0.01％-1.5％；所述螯合剂的加入量为0.01％-1％；所述pH调节剂加入量为0.01％-1％；所述皮肤调理剂加入量为0.01％-5％。
9.根据权利要求8所述的面霜，其特征在于，所述保湿剂包括木糖醇、甜菜碱、甘油、吡络烷酮羧酸钠、双丙甘醇、甘油聚醚-26、透明质酸钠、泛醇、PEG/PPG-17/6共聚物、丁二醇、透明质酸钠、神经酰胺中的一种或两种以上的组合；
优选地，所述增稠剂包括卡波姆、黄原胶、山嵛醇、丙烯酸羟乙酯/丙烯酰二甲基牛磺酸钠共聚物和异十六烷和聚山梨醇酯-60的复合物、丙烯酰二甲基牛磺酸铵/VP共聚物、丙烯酸羟乙酯/丙烯酰二甲基牛磺酸钠共聚物、丙烯酸(酯)类/C10-30烷醇丙烯酸酯交联聚合物、丙烯酸羟乙酯/丙烯酰二甲基牛磺酸钠共聚物和异十六烷和聚山梨醇酯-60的复合物中的一种或两种以上的组合；
优选地，所述乳化剂包括PEG-20甲基葡糖倍半硬脂酸酯、鲸蜡硬脂醇或鲸蜡硬脂醇聚醚-20、山嵛醇聚醚-25、鲸蜡硬脂醇、鲸蜡硬脂醚-30、硬脂醇聚醚-21、硬脂醇聚醚-2、鲸蜡硬脂醇和椰油基葡糖苷、单月桂酸失水山梨醇酯中的一种或两种以上的组合；
优选地，所述油脂包括角鲨烷、辛酸葵酸三甘油酯、牛油果树果脂、碳酸二辛酯、白油、凡士林、羊毛脂衍生物、硅油、高级脂肪酸脂、天然植物油脂、天然动物油脂、高级脂肪醇中的一种或两种以上的组合；
优选地，所述抗氧化剂包括维生素E、VE醋酸酯、2,6-二叔丁基-4-甲基苯酚、番茄红素、抗坏血酸乙基醚中的一种或两种以上的组合；
优选地，所述芳香剂选自香精；
优选地，所述防腐剂选自苯氧乙醇、羟苯甲酯、羟苯丙酯、苯甲酸及其盐中的一种或两种以上的组合；
优选地，所述螯合剂选自EDTA-2Na和EDTA-4Na；
优选地，所述pH调节剂包括柠檬酸、酒石酸、磷酸、柠檬酸钠、氢氧化钠、氢氧化钾、三乙醇胺中的一种或两种以上的组合；
优选地，所述皮肤调理剂包括尿囊素、D-泛醇、水解胶原蛋白、燕麦肽、神经酰胺3、墨角藻提取物、小球藻发酵产物、绿藻提取物、褐藻提取物、北美金缕梅水、红没药醇、尿囊素、白果槲寄生叶提取物、白茅根提取物、丝氨酸、巨藻提取物、β-葡聚糖、仙人掌提取物中的一种或两种以上的组合。
10.一种如权利要求8-9任一所述的面霜的制备方法，其特征在于，其包括将所述组合混合均匀。
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