CN113318015A - 一种抑制黑色素生成的组合物及其应用 - Google Patents

一种抑制黑色素生成的组合物及其应用 Download PDF

Info

Publication number
CN113318015A
CN113318015A CN202110479554.4A CN202110479554A CN113318015A CN 113318015 A CN113318015 A CN 113318015A CN 202110479554 A CN202110479554 A CN 202110479554A CN 113318015 A CN113318015 A CN 113318015A
Authority
CN
China
Prior art keywords
extract
composition
ascorbic acid
phase
skin
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN202110479554.4A
Other languages
English (en)
Inventor
杨登亮
周雨叶
黄晓园
林盛杰
李传茂
邓慧
张伟杰
曾伟丹
张楚标
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Guangdong Danz Group Co Ltd
Guangzhou Keneng Cosmetic Research Co Ltd
Original Assignee
Guangdong Danz Group Co Ltd
Guangzhou Keneng Cosmetic Research Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Guangdong Danz Group Co Ltd, Guangzhou Keneng Cosmetic Research Co Ltd filed Critical Guangdong Danz Group Co Ltd
Priority to CN202110479554.4A priority Critical patent/CN113318015A/zh
Publication of CN113318015A publication Critical patent/CN113318015A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/96—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution
    • A61K8/97—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution from algae, fungi, lichens or plants; from derivatives thereof
    • A61K8/9783—Angiosperms [Magnoliophyta]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
    • A61K8/67—Vitamins
    • A61K8/676—Ascorbic acid, i.e. vitamin C
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin
    • A61Q19/02—Preparations for care of the skin for chemically bleaching or whitening the skin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2800/00—Properties of cosmetic compositions or active ingredients thereof or formulation aids used therein and process related aspects
    • A61K2800/40—Chemical, physico-chemical or functional or structural properties of particular ingredients
    • A61K2800/59—Mixtures
    • A61K2800/592—Mixtures of compounds complementing their respective functions

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Birds (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Cosmetics (AREA)

Abstract

本申请属于日化领域，具体提供了一种抑制黑色素生成的组合物及其应用。本申请提供的抑制黑色素生成的组合物，包含波尔多树叶提取物和抗坏血酸及其衍生物。本申请的抑制黑色素生成的组合物利用波尔多树叶提取物和抗坏血酸及其衍生物搭配，具有协同增效作用，能够很好的抑制黑色素的生成。应用所述抑制黑色素生成的组合物制备的美白乳液能够减少黑色素的生成、起到美白的作用，还可以增加角质层水分含量，阻挡皮肤深层的水分流失。

Description

一种抑制黑色素生成的组合物及其应用
技术领域
本发明涉及日化领域，具体涉及一种抑制黑色素生成的组合物及其应用。
背景技术
黑色素(Melanin)主要由人体皮肤表皮基底层的黑色素细胞(Melanocyte)产生，它能减小紫外线对皮肤的伤害。黑色素的含量及分布决定了皮肤的颜色。然而，黑色素在基底层的异常蓄积会造成色素沉着过度引起黑斑病、雀斑、老年斑等，影响人们的生活质量。随着对黑色素生物合成研究的不断深入，研究者发现酪氨酸酶在黑色素生物合成中扮演重要角色，它是酪氨酸和多巴向黑色素转变过程中的主要限速酶，它的过量表达是导致色素沉着过度的重要原因。因此，抑制酪氨酸酶的活性可以有效阻断黑色素的生物合成反应链，减少黑色素的生成，实现美白的效果。
针对黑色素生成的途径和影响因素，皮肤美白和皮肤护理的主要途径包括以下几个方面：(1)通过抑制皮肤黑色素细胞增殖，减少黑色素细胞生成的数量；(2)通过抑制皮肤黑色素生成的关键酶-酪氨酸酶的催化活性，降低黑色素的生物合成，达到美白的目的；(3)通过防晒，防止阳光中紫外线对皮肤的伤害(晒黑和晒伤)，减缓皮肤老化；(4)是通过使用抗氧化剂去除皮肤中的氧自由基，减缓黑色素生成和减缓皮肤老化。
现有技术中，为了防止皮肤变黑、斑点、雀斑等，保持皮肤本来的洁白，人们提出了混合有氢醌、曲酸、熊果苷等各种美白剂的美白化妆品。可是，如果大量混合这些物质，有时在使用感和安全性上产生问题。如氢醌对皮肤的刺激性非常大；曲酸易变色且对皮肤也有一定的刺激性；熊果苷作用单一和效果不佳等等。
随着人们对皮肤结构和功能认识的提高，发现有更多的因素影响皮肤黑色素的生成。有研究发现真皮层神经末梢释放的去甲肾上腺素，会参与黑色素细胞增殖和分化的调节，去甲肾上腺素浓度的改变也会导致皮肤色素异常。因此开发具有安全稳定、效果明显，并且具有协同互补功效的高性价比美白组合物，具有非常好的发展前景。
发明内容
一方面，本申请提供了波尔多树叶提取物在制备抑制黑色素生成的护肤品方面的用途。
一方面，本申请提供了一种抑制黑色素生成的组合物，包含
波尔多树叶提取物，和
抗坏血酸或其衍生物，
其中，所述波尔多树叶提取物与抗坏血酸或其衍生物的的质量比为1:1-99。
在一些实施方案中，所述波尔多树叶提取物与所述抗坏血酸及其衍生物的质量比为1:2～20；在一些实施方案中，所述波尔多树叶提取物与所述抗坏血酸及其衍生物的质量比为1:3～15；在一些实施方案中，所述波尔多树叶提取物与所述抗坏血酸及其衍生物的质量比为1:4～10。
波尔多树是一种常绿灌木，能长到6米至8米的高度，主要分布于智利和秘鲁的安第斯山脉广的地区。波尔多树叶富含柠檬烯，香豆素，樟脑和β-pine烯等成分，有利胆功效，常用于医药、食品、化妆品行业。波尔多树叶作为民间常用肝胆治疗药，已经列入智利、瑞士、法国、巴西等国药典。有研究表明，波尔多叶茶中的各种抗氧化剂可以降低体内的慢性和急性炎症。
本发明的发明人发现，波尔多树叶提取物对黑色素细胞肾上腺素受体具有优异的抑制作用，抑制率会随着波尔多树叶提取物的质量浓度的增加而逐渐变大。
抗坏血酸是一种水溶性维生素，是人体不能缺少的重要维生素之一。同时，抗坏血酸是人体皮肤中含量最多的抗氧剂，在细胞中发挥着自由基清道夫的作用。有研究证明，维生素C与其他的抗氧剂在皮肤中共同发挥作用，包括维生素E，泛醇，硫辛酸，谷胱甘肽等，抗坏血酸有助于泛醇和维生素E在氧化之后的再生。除了抗氧剂的功效之外，抗坏血酸还能促进皮肤胶原蛋白的合成，它们对维持皮肤的营养非常重要。研究表明抗坏血酸可以通过增加胶原蛋白的合成和减少降解来改善真皮基质。
但是抗坏血酸的稳定性很差，抗坏血酸遇见光和空气容易氧化，功效会大打折扣，新的抗坏血酸产品也会随着开封活性下降。另外，抗坏血酸是一种亲水性和不稳定的分子，由于角质层的疏水性特性，导致该成分在皮肤中的渗透性不太好。随着科技的进步，人们开发出了一系列更加稳定和容易被皮肤吸收的抗坏血酸衍生物，比如抗坏血酸棕榈酸酯、抗坏血酸葡糖苷、抗坏血酸磷酸酯镁、3-o-乙基抗坏血酸等。
在一些实施方案中，本申请利用波尔多树叶提取物和抗坏血酸及其衍生物搭配，具有协同增效作用，能够很好的抑制皮肤黑色素的生成。
在一些实施方案中，按质量分数计，所述组合物包括1-50％的波尔多树叶提取物和50-99％的抗坏血酸或其衍生物。
在一些实施方案中，所述抗坏血酸的衍生物选自抗坏血酸棕榈酸酯、抗坏血酸葡糖苷、抗坏血酸磷酸酯镁和3-o-乙基抗坏血酸中的至少一种；
在一些实施方案中，所述抗坏血酸的衍生物选自3-o-乙基抗坏血酸。
在一些实施方案中，所述波尔多树叶提取物的制备方法包括以下步骤：
S1：将波尔多树叶原料粉碎；
S2：将粉碎后的波尔多树叶原料加入至提取罐中，利用水和醇进行提取，所述波尔多树叶原料、水以及醇的质量比为1：0.05-5：0.05-5，提取温度为50-80℃，提取1-5次，提取时间为1-5小时，获得波尔多树叶粗提液；
S3：将获得的波尔多树叶粗提液过滤，并经过外循环罐、沉降罐进行浓缩并进行冷冻干燥，溶解于50％丁二醇水溶液获得波尔多树叶提取物。
在一些实施方案中，所述步骤S3中，浓缩制备得到的液体成分进行冷冻干燥，过80-100目筛，溶解于50％丁二醇水溶液获得波尔多树叶提取物。
在一些实施方案中，所述步骤S2中波尔多树叶原料、水以及醇的质量比为1：0.05-5：0.05-5，优选为1：0.1-4：0.1-4，更优选为1：0.2-2：0.2-4。当波尔多树叶原料、水以及醇的比例在1：0.05-5：0.05-5的范围内时，所获得的波尔多树叶提取物的有效成分较高，能够进一步有效抑制黑色素细胞肾上腺素受体。所述醇可以是乙醇、乙二醇、丙醇等。
采用本发明的制备方法，制备获得的波尔多树叶提取物为棕色粉末，以质量计，灰分含量在10％以下，水分含量在5％以下，重金属含量在10ppm以下，铅含量在2ppm以下，砷含量在3ppm以下，细菌总数在1000CFU/g以下；霉菌和酵母菌的总数在100CFU/g以下，无沙氏门菌和大肠杆菌等细菌。
在一些实施方案中，所述提取的温度为50-80℃，优选60-70℃。所述提取的次数为1-5次，优选2-4次。所述提取的时间为1-5小时，优选2-4小时。
一方面，本发明提供了一种美白组合物，包括所述的抑制黑色素生成的组合物及促渗剂，所述的抑制黑色素生成的组合物的加入量为0.01-10％；所述促渗透剂的加入量为0.01-10％，所述促渗透剂为双-二乙氧基二甘醇环己烷1,4-二羧酸酯。
在一些实施方案中，以所述美白组合物的总质量计，所述抑制黑色素生成的组合物的加入量为0.01-10％，例如：所述组合物的加入量可以是1％、2％、3％、4％、5％、6％、7％、9％等。所述组合物的加入量在0.01-10％之间时，使用美白组合物的皮肤弹性增加。当黑色素生成抑制剂组合物的加入量小于0.01％时，皮肤弹性改善效果不明显，不能起到抗衰的作用；当黑色素生成抑制剂组合物的加入量大于10％时，组合物的含量过高，成本过高，且不能进一步增加抗衰的作用。
在一些实施方案中，以所述美白组合物的总质量计，所述促渗透剂的加入量为0.01-10％，例如：0.5％、1％、2％、3％、5％、6％、7％、8％等。当促渗透剂的加入量小于0.01％时，促渗透效果不明显。当促渗透剂的加入量大于10％时，不能进一步起到促渗透的作用。
在一些实施方案中，还包括保湿剂、增稠剂、pH调节剂、乳化剂、油脂、皮肤调理剂、抗氧化剂、防腐剂、舒敏剂及芳香剂中的至少一种。
在一些实施方案中，以所述美白组合物的总质量计，所述保湿剂的加入量为0.01-20％；所述增稠剂的加入量为0.02-1.5％；所述pH调节剂的加入量为0.01-1％；所述乳化剂的加入量为0.01-2％；所述油脂的加入量为1-8％；所述皮肤调理剂的加入量为0.01-10％；所述抗氧化剂的加入量为0.01-1％；所述防腐剂的加入量为0.01-1％；所述舒敏剂的加入量为0.01-5％；所述芳香剂的加入量为0.005-0.5％。
在一些实施方案中，以所述美白组合物的总质量计，所述保湿剂的加入量可以是1-19％，可以是3-18％，可以是5-16％，可以是7-15％，可以是8-14％等。当保湿剂的含量低于0.01％时，保湿作用不明显；当保湿剂的含量高于20％时，会使美白乳液有黏腻感。
在一些实施方案中，以所述美白组合物的总质量计，所述增稠剂的加入量可以是0.05-0.6％，可以是0.1-0.5％等。
在一些实施方案中，以所述美白组合物的总质量计，所述pH调节剂的加入量为0.01-1％。通过添加pH调节剂，使美白乳液的pH值更适宜人体皮肤。作为优选，本发明的pH调节剂的加入量可以是0.03-0.8％，可以是0.06-0.5％，可以是0.1-0.3％等。当pH调节剂的加入量大于1％或者小于0.01％时，均不能获得pH值合适的美白乳液。
在一些实施方案中，以所述美白组合物的总质量计，所述油脂的加入量为5-20％，例如所述油脂的加入量可以是8％、10％、12％、14％、16％、18％等。通过在美白乳液中添加油脂，可以减少皮肤表面水分的蒸发，防止皮肤干裂。另外，通过添加油脂，可以在皮肤表面形成疏水性薄膜，防止外部有害物质的侵入。当油脂的含量小于5％时，不能减少皮肤表面水分的蒸发，且不能有效防止有害物质的侵入；当油脂的含量大于20％时，使美白乳液过于油腻，使用感会有所下降。
在一些实施方案中，以所述美白组合物的总质量计，所述乳化剂的加入量为0.01-5％，例如：可以是0.1-4.5％，可以是1-4％等。本申请的乳化剂用量小于0.01％时，导致乳化不充分使得体系不稳定；乳化剂用量大于5％时，会对产品的稳定性也会造成一定的影响。
在一些实施方案中，本申请的乳化体系是非油包水体系，因此，当使用丙二醇和双-二乙氧基二甘醇环己烷1,4-二羧酸酯作为促渗透剂使用时，即使不同时加入，也不会影响其协同作用的发挥。
在一些实施方案中，以所述美白组合物的总质量计，所述皮肤调理剂的加入量为0.01-5％。所述皮肤调理剂的加入量可以是0.1-4％，可以是0.15-3％，可以是0.2-2％等。当皮肤调理剂的加入量小于0.01％时，无法起到相应的功效；当皮肤调理剂的加入量大于5％时，成本过高。
本发明的美白乳液还可以添加少量舒敏剂。以所述美白乳液的总质量计，所述舒敏剂的加入量为0.01-5％。例如可以是0.5％、1％、2％、3％等。当舒敏剂的加入量小于0.01％时，舒敏效果不明显；当舒敏剂的加入量大于5％时，不能进一步起到舒敏的作用，而且成本过高。
所述舒敏剂包括北美金缕梅花水、红没药醇、胶态燕麦粉、姜根提取物、芦荟提取物中的一种或两种以上的组合。
其中，红没药醇是从菊类植物中提取，有抗炎抑菌的作用，该成分稳定性好，和皮肤有很好的相容性，降低皮肤炎症，减轻皮肤粉刺，防止暗疮产生，提高皮肤的抗刺激能力，修复有炎症受伤的皮肤。红没药醇有明显的抗炎、缓和刺激和抗过敏功能。
在一些实施方案中，以所述美白组合物的总质量计，所述抗氧化剂的加入量为0.01-1％。本发明通过使用抗氧化剂，可以防止化妆品的油脂、蜡、烃类等油性成分接触空气中的氧，发生氧化作用，产生过氧化物、醛、酸等，使化妆品变色、酸败、质量下降等。所述抗氧化剂包括丁羟甲苯、番茄红素、生育酚、生育酚乙酸酯中的一种或两种以上的组合。
另外，本发明的美白乳液中还含有防腐剂和芳香剂。以所述美白乳液的总质量计，本发明的美白乳液中的防腐剂的加入量为0.01-1％，所述芳香剂的加入量为0.01-0.5％。所述防腐剂可以包括苯氧乙醇、羟苯甲酯、羟苯丙酯、苯甲酸及其盐中的一种或两种以上的组合。所述芳香剂可以是香精等。
在一些实施方案中，所述保湿剂选自甘油、双丙甘醇、甘油聚醚-26、透明质酸钠、泛醇、PEG/PPG-17/6共聚物、丁二醇、木糖醇、甜菜碱、甘油聚丙烯酸酯、丙二醇、甘露糖、海藻糖中的至少一种。
在一些实施方案中，所述增稠剂选自卡波姆、黄原胶、小核菌胶、山嵛醇、丙烯酰二甲基牛磺酸铵/VP共聚物、丙烯酸羟乙酯/丙烯酰二甲基牛磺酸钠共聚物、丙烯酸(酯)类/C10-30烷醇丙烯酸酯交联聚合物、丙烯酸羟乙酯/丙烯酰二甲基牛磺酸钠共聚物和异十六烷和聚山梨醇酯-60的复合物中的至少一种。
在一些实施方案中，所述pH调节剂选自氨甲基丙醇、精氨酸、柠檬酸、柠檬酸钠、氢氧化钠中的至少一种。
在一些实施方案中，所述乳化剂选自PEG-20甲基葡糖倍半硬脂酸酯、山梨坦异硬脂酸酯、聚甘油-3甲基葡糖二硬脂酸酯、月桂醇聚醚-7、异硬脂醇聚醚-20中的至少一种。
在一些实施方案中，所述油脂选自环五聚二甲基硅氧烷、环聚二甲基硅氧烷、聚二甲基硅氧烷和聚二甲基硅氧烷醇的复合物、油醇芥酸酯、牛油果树果脂、棕榈酸乙基己酯、氢化聚癸烯、环己硅氧烷、氢化聚异丁烯、C20-24烷基聚二甲基硅氧烷、C13-14异链烷烃、C12-15醇苯甲酸酯中的至少一种。
在一些实施方案中，所述皮肤调理剂选自水解胶原蛋白、燕麦肽、神经酰胺3、墨角藻提取物、小球藻发酵产物、绿藻提取物、褐藻提取物、北美金缕梅水、红没药醇、尿囊素、白果槲寄生叶提取物、白茅根提取物、丝氨酸、巨藻提取物、β-葡聚糖、仙人掌提取物中的至少一种。
在一些实施方案中，所述抗氧化剂选自维生素E、生育酚乙酸酯、丁羟甲苯、番茄红素中的至少一种。
一方面，本申请提供了一种美白乳液，包含以下质量百分比的各物质：
Figure BDA0003048653200000061
在一些实施方案中，本申请还提供了所组美白乳液的制备方法，包括以下步骤：
1)将A相原料加入油相锅，搅拌并加热至75-85℃，完全溶解；乳化前将B相原料加入油相锅，75-85℃保温5-20min；
2)将C相原料加入水相锅，搅拌溶解完全，并加热至75-85℃，保温5-20min；
3)抽真空预热并烘干乳化锅，然后先抽入C相，真空抽入A/B混合相，然后开均质1-10分钟，开搅拌速度1000-1500转/分，75-85℃保温搅拌20-40分钟；
4)降温至55-65℃，加入D相，搅拌速度500-1000转/分钟，搅拌均匀；
5)降温至40-50℃，加入E相搅拌均匀；
6)降温至30-40℃，经检验合格后，出料，静置12-48小时；
7)检验合格，分装、包装，再检验，成品入库。
本发明的有益效果：
本申请的组合物，利用波尔多树叶提取物和抗坏血酸及其衍生物搭配，具有协同增效作用，能够很好的抑制皮肤黑色素的生成。
本申请的美白组合物，包含黑色素生成抑制剂组合物及促渗剂，能够减少黑色素的生成、起到美白的作用，还具有保湿锁水，能够阻挡水分流失，为肌肤营造保湿屏障。同时，本发明的美白乳液对肌肤产生修护作用，活化肌肤的机能。
本申请所提供的美白乳液的制备方法，操作简单，可用于大规模生产。
附图说明
图1为实施例1-6中波尔多树叶提取物的样品浓度-细胞活力关系图，其中样品浓度为波尔多树叶提取物的质量浓度；
图2为实施例7-12中波尔多树叶提取物对黑色素细胞去甲肾上腺素受体抑制的对比图；
图3为本发明实施例13-17的B16细胞黑色素含量变化率的对比图。
图4为本发明应用实施例1-5以及应用对比例1-2的皮肤黑色素含量变化率的对比图。
具体实施方式
下面将结合实施例对本发明的实施方案进行详细描述，但是本领域技术人员将会理解，下列实施例仅用于说明本发明，而不应视为限定本发明的范围。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规产品。
在本发明实施例/对比例中，所应用的波尔多树叶提取物的制备方法为：
将波尔多树叶原料粉碎后，加入到提取罐内，在70℃的温度下加入水和乙醇，其中，波尔多树叶原料、水和乙醇的质量比为1:1:4，煮提取3次，每次2.5小时，获得波尔多树叶提取液。之后将获得的波尔多树叶提取液过滤并存放于储存罐，让储存罐中的滤液缓慢流入外循环罐和沉降罐进行浓缩，获得液体成分和沉淀物，将液体成分进行喷雾干燥，将沉淀物进行烘干后过80-100目筛，获得波尔多树叶提取物，然后对波尔多树叶提取物进行检测，灰分含量为7％，水分含量为4％。
在本发明实施例/对比例中，抗坏血酸及其衍生物购自：上海麦克林生化科技有限公司。
需要说明的是，不同批次的购买的提取物会有相应的误差，一般误差不超过5％。
实施例1-6
将波尔多树叶提取物用磷酸盐缓冲液稀释得到6组不同浓度(终浓度)的测试溶液，使用0.22μm滤头进行过滤。进行细胞活力测试时，波尔多树叶提取物的质量浓度如下表1所示。
细胞活性测试
CCK-8试剂中含有WST–8：化学名为2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐，它在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪硫酸二甲酯的作用下被细胞线粒体中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的黄色甲臜产物，生成的甲臜物的数量与活细胞的数量成正比。用酶联免疫检测仪在450nm波长处测定其光吸收值，可间接反映活细胞数量。该方法已被广泛用于一些生物活性因子的活性检测、大规模的抗肿瘤药物筛选、细胞增殖试验、细胞毒性试验以及药敏试验等。
将角质形成细胞稀释至2.5*103～50*103个/ml，将细胞悬液移至9cm培养皿中，用多道加样器在平底96孔板中间7列的各孔中加入200μl细胞悬液(每板56孔)，从第2列开始到第8列为止。将200μl培养基加至第1列与第9列的8个孔中。第1列用作酶标仪的空白对照，第9列有助于维持第8列的湿度，并将边缘效应减至最小。将培养板放至5％二氧化碳培养箱中，于37℃湿润环境中培养1～3天，等细胞进入指数生长期时，移除培养液，培养板第3列到第8列加入含样品的培养基200μl作为实验组(根据表1的质量浓度，每列8个重复)；培养板第2列只加入培养基200μl作为对照组；培养板第1列只加入培养基200μl作为空白组。
加入样品48小时后，每孔加入20μl CCK-8溶液，并于培养箱放置2小时后450nm波长测定吸光度。
细胞相对活力＝[(OD实验组-OD空白组)/(OD对照组-OD空白组)]×100％
表1
Figure BDA0003048653200000081
Figure BDA0003048653200000091
实施例7-12
将波尔多树叶提取物用磷酸盐缓冲液稀释得到6组不同浓度(终浓度)的测试溶液，使用0.22μm滤头进行过滤。进行细胞活力测试时，波尔多树叶提取物的质量浓度如下表2所示。
黑色素细胞去甲肾上腺素受体抑制测试
当去甲肾上腺素激活黑色素细胞β2-去甲肾上腺素受体时，它通过腺苷酸环化酶(AC)激活产生cAMP。cAMP进而激活PKA，PKA通过CREB的磷酸化激活MITF的基因表达。最后通过与TYR，TRP-1和TRP-2启动区域相互作用，MITF基因转录生成黑色素相关的蛋白。因此，检测细胞内cAMP的浓度可以反应出β2-去甲肾上腺素受体的活化程度。
将黑色素瘤B16细胞稀释至2.5*104个/ml，将细胞悬液移至9cm培养皿中，用多道加样器在平底24孔板各孔中加人1mL细胞悬液。将培养板放至5％二氧化碳培养箱中，于37℃湿润环境中培养2-3天，等细胞铺满孔底至70-80％时，加入波尔多树叶提取物(根据表2的质量浓度)。作用4小时后，加入10*10-9mol/L去甲肾上腺素，并于24小时后使用cAMP试剂盒检测细胞内cAMP浓度，450nm测定吸光度。
cAMP相对含量(％)＝[(OD实验组-OD空白组)/(OD对照组-OD空白组)]×100％
1、实验组加入波尔多树叶提取物+去甲肾上腺素；
2、对照组加入去甲肾上腺素；
3、空白组加入磷酸盐缓冲液。
表2
Figure BDA0003048653200000092
Figure BDA0003048653200000101
实施例13-17
将波尔多树叶提取物、3-o-乙基抗坏血酸用磷酸盐缓冲液稀释得到5组不同浓度(终浓度)的测试溶液。进行测试时，波尔多树叶提取物和3-o-乙基抗坏血酸的质量浓度如下表3所示。
B16细胞黑色素变化率测试
将黑色素瘤B16细胞稀释至2.5*104个/ml，将细胞悬液移至9cm培养皿中，用多道加样器在平底96孔板各孔中加人100μl细胞悬液。将培养板放至5％二氧化碳培养箱中，于37℃湿润环境中培养24小时，加入波尔多树叶提取物和3-o-乙基抗坏血酸(根据表3的质量浓度)。作用4小时后，加入10*10-9mol/L去甲肾上腺素和1*10-6mol/L的α-MSH，并于48小时后吸去培养液，用0.25％胰酶消化，1000rpm离心5分钟弃去上清液。将细胞加入到200μl含10％DMSO的NaOH(1mol/L)溶液，于65摄氏度水浴完全溶解黑色素颗粒，490nm测定吸光度。
黑色素变化率(％)＝[(OD实验组-OD空白组)/(OD对照组-OD空白组)-1]×100％
1、实验组加入波尔多树叶提取物+3-o-乙基抗坏血酸+去甲肾上腺素+α-MSH；
2、对照组加入去甲肾上腺素+α-MSH；
3、空白组加入磷酸盐缓冲液。
表3
Figure BDA0003048653200000102
通过表3的结果，我们可以看到波尔多树叶提取物和3-o-乙基抗坏血酸可以阻断去甲肾上腺素和α-MSH引起的黑色素生成，并且不同比例的组合物呈现出的效果不同。
应用实施例1-5
根据下表3中的应用实施例1-5的乳液配方中各组分的含量(质量百分比)，并按照下述生产工艺步骤制备得到乳液。
表4
Figure BDA0003048653200000111
生产工艺步骤如下：
1、将A相原料加入油相锅，搅拌并加热至82℃，完全溶解；乳化前将B相原料加入油相锅，82℃保温10min；
2、将C相原料加入水相锅，搅拌溶解完全，并加热至82℃，保温10min；
3、抽真空预热并烘干乳化锅，然后先抽入C相，真空抽入A/B混合相，然后开均质5分钟，开搅拌速度1200转/分，82℃保温搅拌30分钟；
4、降温至60℃，加入D相，搅拌速度800转/分钟，搅拌均匀；
5、降温至45℃，加入E相搅拌均匀；
6、降温至36℃，经检验合格后，出料，静置24小时；
7、检验合格，分装、包装，再检验，成品入库。
注：工艺中的A、B、C、D、E相分别为：
A相：聚甘油-3甲基葡糖二硬脂酸酯、甘油硬脂酸酯、棕榈酸乙基己酯、氢化聚癸烯、油醇芥酸酯、牛油果树果脂、聚二甲基硅氧烷、羟苯甲酯、丁羟甲苯、神经酰胺2、红没药醇；
B相：环五聚二甲基硅氧烷和环己硅氧烷的复合物、生育酚乙酸酯；
C相：水、甘油、丙二醇、丁二醇、双丙甘醇、尿囊素、甜菜碱、丙烯酸羟乙酯/丙烯酰二甲基牛磺酸钠共聚物、卡波姆；
D相：甘油聚甲基丙烯酸酯、C12-15醇苯甲酸酯、氨甲基丙醇；
E相：波尔多树叶提取物、3-o-乙基抗坏血酸、β-葡聚糖、苯氧乙醇、香精、双-二乙氧基二甘醇环己烷1,4-二羧酸酯。
其中，聚甘油-3甲基葡糖二硬脂酸酯是乳化剂；
甘油硬脂酸酯、甘油、丁二醇、丙二醇、双丙甘醇、甜菜碱、甘油聚甲基丙烯酸酯是保湿剂；
棕榈酸乙基己酯、氢化聚癸烯、油醇芥酸酯、牛油果树果脂、聚二甲基硅氧烷、环五聚二甲基硅氧烷和环己硅氧烷的复合物、C12-15醇苯甲酸酯是油脂；
苯氧乙醇、羟苯甲酯是防腐剂；丁羟甲苯、生育酚乙酸酯是抗氧化剂；
丙烯酸羟乙酯/丙烯酰二甲基牛磺酸钠共聚物、卡波姆是增稠剂；
氨甲基丙醇是pH调节剂；红没药醇是舒敏剂；
神经酰胺2、尿囊素、β-葡聚糖是皮肤调理剂；香精是芳香剂。
双-二乙氧基二甘醇环己烷1,4-二羧酸酯是促渗透剂；
波尔多树叶提取物和3-o-乙基抗坏血酸是黑色素生成抑制剂组合物。
环五聚二甲基硅氧烷和环己硅氧烷的复合物的生产厂家：牌号：DC345；购自：美国道康宁公司。
应用对比例1-2
根据下表4中的应用对比例1-2的乳液配方中各组分的含量(质量百分比)，并按照与应用实施例1-2相同的方法，制备得到乳液。
表5
Figure BDA0003048653200000121
Figure BDA0003048653200000131
美白功效测试
皮肤黑色素变化率的测试方法：通过测定特定波长的光照在人体皮肤上后的反射量来确定皮肤中黑色素的含量。探头的发射器发出波长分别为568nm、660nm、和880nm三种波长的光照射在皮肤表面，接受器测得皮肤反射的光，并测定被皮肤吸收的光的量，从而可以得出皮肤黑色素的变化率。
皮肤黑色素变化率的测试采用德国CK公司的色素检测仪进行测试，其中，皮肤黑色素的测试探头MX 18由光源发射器和接收器组成，另有弹簧以保持检测时对皮肤的压力恒定。探头的测量范围是0-999，测量数值越高，可以说明皮肤中黑色素的含量越高。
受试者人数为33人，试验周期为4周，试验选取应用实施例1-8的美白亮肤水以及应用对比例1-2的亮肤水，每天早晚涂抹于前臂内侧的不同区域，分别测定实验前(Day1)和使用28天时(Day28)的受试区域的皮肤在特定波长的光照后的反射量以确定皮肤中黑色素的含量，进而表征黑色素的变化率，具体黑色素的变化率的结果如图3所示。
由图3可以看出，本申请的应用实施例1、3、5的黑色素的变化率较大，即黑色素含量降低，因此，使用波尔多树叶提取物和抗坏血酸及其衍生物组合物，能够有效美白皮肤。另外，本申请的应用实施例2和4中，由于波尔多树叶提取物的含量较高，其黑色素含量降低较少。
本申请的应用对比例1-2中，在单一使用波尔多树叶提取物或者单一使用抗坏血酸及其衍生物时，其黑色素含量变化率小，黑色素含量降低少，美白效果较差。
本发明的上述实施例仅仅是为清楚地说明本发明所作的举例，而并非是对本发明的实施方式的限定。对于所属领域的普通技术人员来说，在上述说明的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变动。这里无需也无法对所有的实施方式予以穷举。凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明权利要求的保护范围之内。

Claims (10)

1.波尔多树叶提取物在制备抑制黑色素生成的护肤品方面的用途。
2.一种抑制黑色素生成的组合物，其特征在于，包含
波尔多树叶提取物，和
抗坏血酸或其衍生物，
其中，所述波尔多树叶提取物与抗坏血酸或其衍生物与的质量比为1:1-99。
3.如权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述波尔多树叶提取物与抗坏血酸或其衍生物与的质量比为1:2-20；优选1:3-15；更优选1:4-10；
优选地，按质量分数计，所述组合物包括
波尔多树叶提取物1-50％，和
抗坏血酸或其衍生物50-99％。
4.如权利要求2任一所述的组合物，其特征在于，所述抗坏血酸的衍生物选自抗坏血酸棕榈酸酯、抗坏血酸葡糖苷、抗坏血酸磷酸酯镁和3-o-乙基抗坏血酸中的至少一种；
优选地，所述抗坏血酸的衍生物选自3-o-乙基抗坏血酸。
5.如权利要求1所述的用途或权利要求2所述的组合物，其特征在于，所述波尔多树叶提取物的制备方法包括以下步骤：
S1：将波尔多树叶原料粉碎；
S2：将粉碎后的波尔多树叶原料加入至提取罐中，利用水和醇进行提取，所述波尔多树叶原料、水以及醇的质量比为1：0.05-5：0.05-5，提取温度为50-80℃，提取1-5次，提取时间为1-5小时，获得波尔多树叶粗提液；
S3：将获得的波尔多树叶粗提液过滤，并经过外循环罐、沉降罐进行浓缩并进行冷冻干燥，溶解于50％丁二醇水溶液获得波尔多树叶提取物。
6.一种美白组合物，其特征在于，包括如权利要求2-4任一所述的抑制黑色素生成的组合物及促渗剂，如权利要求2-4任一所述的抑制黑色素生成的组合物的加入量为0.01-10％；所述促渗透剂的加入量为0.01-10％，所述促渗透剂为双-二乙氧基二甘醇环己烷1,4-二羧酸酯。
7.如权利要求6所述的美白组合物，其特征在于，还包括保湿剂、增稠剂、pH调节剂、乳化剂、油脂、皮肤调理剂、抗氧化剂、防腐剂、舒敏剂及芳香剂中的至少一种；
优选地，以所述美白组合物的总质量计，所述保湿剂的加入量为0.01-20％；所述增稠剂的加入量为0.02-1.5％；所述pH调节剂的加入量为0.01-1％；所述乳化剂的加入量为0.01-5％；所述油脂的加入量为5-20％；所述皮肤调理剂的加入量为0.01-10％；所述抗氧化剂的加入量为0.01-1％；所述防腐剂的加入量为0.01-1％；所述舒敏剂的加入量为0.01-5％；所述芳香剂的加入量为0.005-0.5％。
8.如权利要求7所述的美白组合物，其特征在于，所述保湿剂选自甘油、双丙甘醇、甘油聚醚-26、透明质酸钠、泛醇、PEG/PPG-17/6共聚物、丁二醇、木糖醇、甜菜碱、甘油聚丙烯酸酯、丙二醇、甘露糖、海藻糖中的至少一种；
优选地，所述增稠剂选自卡波姆、黄原胶、小核菌胶、山嵛醇、丙烯酰二甲基牛磺酸铵/VP共聚物、丙烯酸羟乙酯/丙烯酰二甲基牛磺酸钠共聚物、丙烯酸(酯)类/C10-30烷醇丙烯酸酯交联聚合物、丙烯酸羟乙酯/丙烯酰二甲基牛磺酸钠共聚物和异十六烷和聚山梨醇酯-60的复合物中的至少一种；
优选地，所述pH调节剂选自氨甲基丙醇、精氨酸、柠檬酸、柠檬酸钠、氢氧化钠中的至少一种；
优选地，所述乳化剂选自PEG-20甲基葡糖倍半硬脂酸酯、山梨坦异硬脂酸酯、聚甘油-3甲基葡糖二硬脂酸酯、月桂醇聚醚-7、异硬脂醇聚醚-20中的至少一种；
优选地，所述油脂选自环五聚二甲基硅氧烷、环聚二甲基硅氧烷、聚二甲基硅氧烷和聚二甲基硅氧烷醇的复合物、油醇芥酸酯、牛油果树果脂、棕榈酸乙基己酯、氢化聚癸烯、环己硅氧烷、氢化聚异丁烯、C20-24烷基聚二甲基硅氧烷、C13-14异链烷烃、C12-15醇苯甲酸酯中的至少一种；
优选地，所述皮肤调理剂选自水解胶原蛋白、燕麦肽、神经酰胺3、墨角藻提取物、小球藻发酵产物、绿藻提取物、褐藻提取物、北美金缕梅水、红没药醇、尿囊素、白果槲寄生叶提取物、白茅根提取物、丝氨酸、巨藻提取物、β-葡聚糖、仙人掌提取物中的至少一种；
优选地，所述抗氧化剂选自维生素E、生育酚乙酸酯、丁羟甲苯、番茄红素中的至少一种。
9.一种美白乳液，其特征在于，包含以下质量百分比的各物质：
Figure FDA0003048653190000031
10.如权利要求9所述的美白乳液的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
1)将A相原料加入油相锅，搅拌并加热至75-85℃，完全溶解；乳化前将B相原料加入油相锅，75-85℃保温5-20min；
2)将C相原料加入水相锅，搅拌溶解完全，并加热至75-85℃，保温5-20min；
3)抽真空预热并烘干乳化锅，然后先抽入C相，真空抽入A/B混合相，然后开均质1-10分钟，开搅拌速度1000-1500转/分，75-85℃保温搅拌20-40分钟；
4)降温至55-65℃，加入D相，搅拌速度500-1000转/分钟，搅拌均匀；
5)降温至40-50℃，加入E相搅拌均匀；
6)降温至30-40℃，经检验合格后，出料，静置12-48小时；
7)检验合格，分装、包装，再检验，成品入库。
CN202110479554.4A 2021-04-30 2021-04-30 一种抑制黑色素生成的组合物及其应用 Pending CN113318015A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202110479554.4A CN113318015A (zh) 2021-04-30 2021-04-30 一种抑制黑色素生成的组合物及其应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202110479554.4A CN113318015A (zh) 2021-04-30 2021-04-30 一种抑制黑色素生成的组合物及其应用

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN113318015A true CN113318015A (zh) 2021-08-31

Family

ID=77414070

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202110479554.4A Pending CN113318015A (zh) 2021-04-30 2021-04-30 一种抑制黑色素生成的组合物及其应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN113318015A (zh)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113827518A (zh) * 2021-09-27 2021-12-24 广州市科能化妆品科研有限公司 抑制黑色素生成组合物、美白组合物、美白乳液及其制备

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2004307352A (ja) * 2003-04-02 2004-11-04 Croda Japan Kk ボルジン誘導体を含有する化粧料または皮膚外用剤
KR20050011458A (ko) * 2003-07-23 2005-01-29 주식회사 코리아나화장품 디아세틸볼딘을 유효 성분으로 포함하는 미백 화장료 조성물
CN109363956A (zh) * 2018-12-29 2019-02-22 广州市科能化妆品科研有限公司 喜来芝提取物的用途和美白水分露及其制备方法
CN111973500A (zh) * 2019-05-24 2020-11-24 西安博鸿生物技术有限公司 一种美白祛斑精华及其制备方法

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2004307352A (ja) * 2003-04-02 2004-11-04 Croda Japan Kk ボルジン誘導体を含有する化粧料または皮膚外用剤
KR20050011458A (ko) * 2003-07-23 2005-01-29 주식회사 코리아나화장품 디아세틸볼딘을 유효 성분으로 포함하는 미백 화장료 조성물
CN109363956A (zh) * 2018-12-29 2019-02-22 广州市科能化妆品科研有限公司 喜来芝提取物的用途和美白水分露及其制备方法
CN111973500A (zh) * 2019-05-24 2020-11-24 西安博鸿生物技术有限公司 一种美白祛斑精华及其制备方法

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
河南尚研生物科技有限公司: "丸碧至美琉光雪肌乳", 《国产非特殊用途化妆品备案网，网址：HTTP://FTBA.NMPA.GOV.CN:8181/FTBAN/ITOWNET/HZP_BA/FW/PZ.JSP?PROCESSID=20200118134623KIHNB&NID=20200118134623KIHNB》 *
赵中振、肖培根: "《"当代药用植物典 3 第2版"，，，，》", 30 September 2018, 世界图书出版公司 *

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113827518A (zh) * 2021-09-27 2021-12-24 广州市科能化妆品科研有限公司 抑制黑色素生成组合物、美白组合物、美白乳液及其制备
CN113827518B (zh) * 2021-09-27 2023-02-03 广州市科能化妆品科研有限公司 抑制黑色素生成组合物、美白组合物、美白乳液及其制备

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US20220218573A1 (en) Cosmetic compositions
US11266594B2 (en) Topical skin care formulations comprising plant extracts
US11684568B2 (en) Topical cosmetic compositions
CA3239245A1 (en) Topical skin care formulations comprising plant extracts
EP2968107A1 (en) Cosmetic compositions and uses thereof
CN113208959A (zh) 一种抑制黑色素生成的组合物、美白精华及其制备方法和应用
CN113318015A (zh) 一种抑制黑色素生成的组合物及其应用
JP6120342B1 (ja) 美容組成物
CN113827518B (zh) 抑制黑色素生成组合物、美白组合物、美白乳液及其制备
CN109363956B (zh) 喜来芝提取物的用途和美白水分露及其制备方法
CN113768816B (zh) 一种美白组合物、美白乳液及其制备方法
CN113230167A (zh) 一种美白组合物、亮肤水及其制备方法
CN113101244A (zh) 保湿乳和胶原酶抑制剂及其制备方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
RJ01 Rejection of invention patent application after publication
RJ01 Rejection of invention patent application after publication

Application publication date: 20210831