CN114951636B - 银纳米立方@枝杈状纳米金核壳结构及其制备方法和应用 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种银纳米立方@枝杈状纳米金核壳结构及其制备方法和应用，属于光热治疗材料技术领域。本发明提供的银纳米立方@枝杈状纳米金核壳结构，以银纳米立方体为核心，通过氨基酸诱导一层枝杈状的纳米金生长在银纳米立方体上得到。本发明提供的银纳米立方@枝杈状纳米金核壳结构中枝杈状的纳米粒子具有类似黑体的性质，可以捕获所有的光辐射，不区分波长、角度和偏振，并将其转化为热能，在紫外可见近红外光谱上表现为可见光区至近红外光区的宽波段高吸收。此外，金银之间双金属晶格畸变、协同效应和配位效应，既能得到优异特殊的物理化学性能，保持了稳定和高效的光热转化效率，还可有效降低成本。

Description

银纳米立方@枝杈状纳米金核壳结构及其制备方法和应用

技术领域

本发明属于光热治疗材料技术领域，尤其涉及到一种银纳米立方@枝杈状纳米金核壳结构及其制备方法和应用。

背景技术

肿瘤是威胁人类健康最严重的疾病之一。目前临床上治疗肿瘤的常规手段有手术治疗、放疗、化疗等方法，但是普遍都存在高毒性、低效能、高耐药性、易造成免疫功能衰退等缺点，因此寻找具备低毒性，高效能等优点的新型肿瘤治疗手段是目前研究的重点。

光热治疗是一种物理疗法，通过吸收近红外光区的光辐射转化为热能，使局部温度升高，从而依赖热消融有效杀死肿瘤细胞，这种方法具备作用于局部、低毒性、无耐药性等优点。随着纳米材料的发展，已经有许多种类的纳米材料如碳材料、过渡金属硫化物、聚合物颗粒、金纳米颗粒等应用于肿瘤光热治疗，其中金纳米颗粒凭借形态多样、有良好的生物相容性并易于修饰和功能化而受到众多学者的广泛关注。

决定肿瘤光热治疗疗效的关键因素是光热转换效率，其中对光的吸收大小直接决定光热转化效率的高低。现有技术制备的绝大多数金纳米颗粒的形貌为棒状、块状、片状，这些常规形貌的金纳米颗粒的吸收和散射截面在共振频率同时达到最大值时，易导致大量的光从等离子体加热系统中散射出来，从而降低光热转换效率；另外，808nm近红外光是用于肿瘤光热治疗最有效的光源，虽然可以通过调控颗粒大小来调控金纳米颗粒在紫外可见近红外吸收光谱中最大吸收峰的位置，但是常规金纳米颗粒的最大吸收峰往往不处于近红外光区，且吸收峰较窄，致使对808nm近红外光的吸收不够同时导致低的光热转换效率。

发明内容

本发明提供了一种银纳米立方@枝杈状纳米金核壳结构及其制备方法和应用。该核壳结构基于金银之间双金属晶格畸变、协同效应和配位效应，既能得到优异特殊的物理化学性能，保持了稳定和高效的光热转化效率，还可有效降低成本，同时在紫外可见近红外光谱上表现为可见光区至近红外光区的宽波段高吸收。

为了达到上述目的，本发明提供了一种银纳米立方@枝杈状纳米金核壳结构，以银纳米立方体为核心，通过氨基酸诱导枝杈状的纳米金生长在银纳米立方体上得到。

在上述方案中，本发明提供的银纳米立方@枝杈状纳米金核壳结构依赖于双金属之间存在的晶格畸变、协同效应和配位效应，获得了优异的物理化学性质，在减少金用量的同时保持了材料的稳定和高效的光热转化效率，可有效降低成本。此外，枝杈状的纳米粒子具有类似黑体的性质，极小的散射截面可以捕获所有的光辐射，不区分波长、角度和偏振，并将其转化为热能，在紫外可见近红外光谱上表现为可见光区至近红外光区的宽波段高吸收，对光的宽波段高吸收表现为高光热转换效率。

作为优选，所述氨基酸为半胱氨酸。

本发明还提供了一种根据上述任一项技术方案所述的银纳米立方@枝杈状纳米金核壳结构的制备方法，包括以下步骤：

制备银纳米立方体溶胶；

在40-50℃不高于450rpm的速度搅拌下，在5-6mL去离子水中加入2-3mL十六烷基三甲基溴化铵溶液；

在上述混合溶液中加入20-30μL银纳米立方体溶胶，搅拌1-3分钟后加入300-400μL氯金酸溶液；

随后，在上述混合溶液中加入1-1.2mL抗坏血酸溶液及150-200μL半胱氨酸盐酸盐一水物溶液，得到无色的混合溶液；

反应持续期间混合溶液颜色逐渐从蓝色转变为黑色，待颜色不再变化后反应0.5-1小时后停止，离心去除上清液，得到溶液沉淀；

重复离心三次之后将所得溶液沉淀分散于去离子水中，得到黑色银纳米立方@枝杈状纳米金核壳结构。

在上述方案中，十六烷基三甲基溴化铵作为表面活性剂和保护剂来保证银纳米立方@枝杈状纳米金核壳结构的高度分散性，抗坏血酸作为还原剂来还原氯金酸，L半胱氨酸盐酸盐一水物诱导了枝杈状结构的产生。

作为优选，所述十六烷基三甲基溴化铵溶液浓度为0.1-0.15mol/L，所述氯金酸溶液浓度为0.01-0.015mol/L，所述抗坏血酸溶液浓度为0.1-0.15 mol/L，所述半胱氨酸溶液溶液浓度为0.1-0.15 mol/L。

作为优选，银纳米立方体溶胶的制备方法包括以下步骤：

将同时作为还原剂和溶液的15-20ml乙二醇加入容器中，在150-160℃下以不高于450rpm的速度搅拌，随后向其中加入0.4-0.5mL硫化钠溶液；

充分混合后，在上述混合溶液中依次加入2-4mL HCl溶液和4-5mL保护剂聚乙烯吡咯烷酮溶液；

随后，立即在上述混合溶液中加入1-1.5mL 三氟乙酸银溶液；

反应1.5-2.5小时后停止，待冷却至室温后，将上述混合溶液离心去除上清液，得到溶液沉淀；

重复离心三次之后将所得溶液沉淀分散于25-35mL去离子水中，得到灰绿色的银纳米立方体溶胶。

上述方案中，乙二醇作即作为还原剂来保证三氟乙酸银的还原，又作为保护剂来保证银纳米立方的高度分散性，HCl和硫化钠可以与三氟乙酸银反应优先形成小的晶核，来保证最后银纳米立方的规整度。这种多羟基还原法可以一步得到高度分散且规整的银纳米立方，相比于传统的晶种法节省了反应步骤，缩短了反应时间。

作为优选，所述硫化钠溶液浓度为0.005-0.006mol/L，所述HCl溶液浓度为0.003-0.005mol/L，所述聚乙烯吡咯烷酮溶液浓度为20-30mg/mL，所述三氟乙酸银溶液浓度为0.4-0.5 mol/L。

本发明还提供了一种根据上述任一项技术方案所述的银纳米立方@枝杈状纳米金核壳结构作为光热转换材料在光热治疗领域的应用。

作为优选，所述银纳米立方@枝杈状纳米金核壳结构的光吸收范围为200-900nm，并且在700-900nm的近红外光区表现出宽波段纵向吸收峰。

作为优选，采用808nm近红外激光为光源，以人非小细胞肺癌A549细胞为目标细胞，所述银纳米立方@枝杈状纳米金核壳结构具有优异的生物相容性。

作为优选，所述银纳米立方@枝杈状纳米金核壳结构在不光照条件下没有细胞毒性，具有优异的生物相容性；

在光照条件下，在浓度为20-80μg/mL的范围内，细胞存活率达到≤40%，能有效杀死癌细胞。

与现有技术相比，本发明的优点和积极效果在于：

本发明制备了一种银纳米立方@枝杈状纳米金核壳结构，枝杈状的纳米粒子具有类似黑体的性质，可以捕获所有的光辐射，不区分波长、角度和偏振，并将其转化为热能，在紫外可见近红外光谱上表现为可见光区至近红外光区的宽波段高吸收。

此外，由于枝杈状的的纳米金外壳散射截面极小，光辐射之后无法散射出等离子体加热系统，对光辐射的利用率也很高，高光吸收能力和高光利用率致使了高光热转换效率。不同于单纯的金纳米颗粒，金银之间双金属晶格畸变、协同效应和配位效应，既能得到优异特殊的物理化学性能，保持了稳定和高效的光热转化效率，在紫外可见近红外光谱上表现为可见光区至近红外光区的宽波段高吸收，产率在93％以上，还可有效降低成本。

附图说明

图1为适用于本发明实施例3的银纳米立方@枝杈状纳米金核壳结构制备方法的流程示意图；

图2为本发明实施例3合成的银纳米立方@枝杈状纳米金核壳结构的TEM图；

图3为本发明实施例3合成的银纳米立方@枝杈状纳米金核壳结构的紫外可见近红外光谱图；

图4为本发明实施例3合成的银纳米立方@枝杈状纳米金核壳结构水溶液在808nm激光作用下的升降温曲线；

图5为本发明实施例3合成的银纳米立方@枝杈状纳米金核壳结构非小细胞肺癌细胞A549细胞存活率柱状图。

具体实施方式

下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

实施例1

制备银纳米立方体，包括：

将同时作为还原剂和溶液的 15mL乙二醇加入三口烧瓶中，在150℃下加热回流，搅拌速度不高于450rpm，随后向其中加入0.4mL硫化钠溶液（浓度为0.005mol/L）；

充分混合后，在上述混合溶液中依次加入2mLHCl溶液（浓度为0.003mol/L）和4mL保护剂聚乙烯吡咯烷酮溶液（浓度为20mg/mL）；

随后，立即在上述混合溶液中加入1mL三氟乙酸银溶液（浓度为0.4 mol/L）；

反应持续期间混合溶液颜色逐渐从白色转变为绿色，最终转变为灰绿色之后颜色不再发生明显改变，整个反应持续2小时，待冷却至室温后将所述混合溶液转移至离心管，在8000rpm的离心速度下持续10分钟，去除上清液，得到溶液沉淀；

然后再加入去离子水重复所述离心操作，重复离心三次之后将所得溶液沉淀分散于25mL去离子水中，得到灰绿色的银纳米立方体溶胶；

制备银纳米立方@枝杈状纳米金核壳结构，包括：

在20mL的玻璃瓶中加入5mL去离子水和2mL十六烷基三甲基溴化铵溶液，在40℃以不高于450rpm的速度搅拌，所得十六烷基三甲基溴化铵溶液浓度为0.1mol/L；

在上述混合溶液中加入20μL银纳米立方体溶胶，持续搅拌1分钟后加入300μL 氯金酸溶液（浓度为0.01mol/L）；

随后，在上述混合溶液中加入1mL抗坏血酸溶液（浓度为0.1mol/L）及150μL L-半胱氨酸盐酸盐一水物溶液（浓度为0.1mol/L），得到无色的混合溶液；

反应持续期间混合溶液颜色逐渐从蓝色转变为黑色，待颜色不再变化后反应0.5小时后停止，将所述混合溶液转移至离心管，在6000rpm的离心速度下持续8分钟，去除上清液，得到溶液沉淀；

然后再加入去离子水重复所述离心操作，重复离心三次之后将所得溶液沉淀分散于去离子水中，得到黑色的银纳米立方@枝杈状纳米金核壳结构。

实施例2

制备银纳米立方体，包括：

将同时作为还原剂和溶液的 20mL乙二醇加入三口烧瓶中，在160℃下加热回流，搅拌速度不高于450rpm，随后向其中加入0.5mL 硫化钠溶液（浓度为0.006mol/L）；

充分混合后，在上述混合溶液中加入4mLHCl溶液（浓度为0.005mol/L）；

1分钟后，继续在所述混合溶液中加入5mL保护剂聚乙烯吡咯烷酮溶液，所述聚乙烯吡咯烷酮溶液浓度为30mg/mL；

随后，立即在上述混合溶液中加入1.5mL三氟乙酸银溶液（浓度为0.5 mol/L）；

反应持续期间混合溶液颜色逐渐从白色转变为绿色，最终转变为灰绿色之后颜色不再发生明显改变，整个反应持续2小时，待冷却至室温后将所述混合溶液转移至离心管，在8000rpm的离心速度下持续10分钟，去除上清液，得到溶液沉淀；

然后再加入去离子水重复所述离心操作，重复离心三次之后将所得溶液沉淀分散于35mL去离子水中，得到灰绿色的银纳米立方体溶胶；

制备银纳米立方@枝杈状纳米金核壳结构，包括：

在20mL的玻璃瓶中加入6mL去离子水和3mL十六烷基三甲基溴化铵溶液，在50℃以不高于450rpm的速度搅拌，所得十六烷基三甲基溴化铵溶液浓度为0.15mol/L；

在上述混合溶液中加入30μL银纳米立方体溶胶，持续搅拌2分钟后加入4000μL 氯金酸溶液（浓度为0.015mol/L）；

随后，在上述混合溶液中加入1.2mL抗坏血酸溶液（浓度为0.15mol/L）及200μL L-半胱氨酸盐酸盐一水物溶液（浓度为0.15mol/L），得到无色的混合溶液；

反应持续期间混合溶液颜色逐渐从蓝色转变为黑色，待颜色不再变化后反应0.5小时后停止，将所述混合溶液转移至离心管，在6000rpm的离心速度下持续8分钟，去除上清液，得到溶液沉淀；

然后再加入去离子水重复所述离心操作，重复离心三次之后将所得溶液沉淀分散于去离子水中，得到黑色的银纳米立方@枝杈状纳米金核壳结构。

实施例3

制备银纳米立方体，包括：

将同时作为还原剂和溶液的 17.5mL乙二醇加入三口烧瓶中，在160℃下加热回流，搅拌速度不高于450rpm，随后向其中加入0.45mL 硫化钠溶液（浓度为0.0055mol/L）；

充分混合后，在上述混合溶液中加入3 mLHCl溶液（浓度为0.004mol/L）和4.5mL保护剂聚乙烯吡咯烷酮溶液（浓度为25mg/mL）；

随后，立即在上述混合溶液中加入1.25mL三氟乙酸银溶液（浓度为0.45 mol/L）；

反应持续期间混合溶液颜色逐渐从白色转变为绿色，最终转变为灰绿色之后颜色不再发生明显改变，整个反应持续2小时，待冷却至室温后将所述混合溶液转移至离心管，在8000rpm的离心速度下持续10分钟，去除上清液，得到溶液沉淀；

然后再加入去离子水重复所述离心操作，重复离心三次之后将所得溶液沉淀分散于30mL去离子水中，得到灰绿色的银纳米立方体溶胶；

制备银纳米立方@枝杈状纳米金核壳结构，包括：

在20mL的玻璃瓶中加入5.5mL去离子水和2.5mL十六烷基三甲基溴化铵溶液，在45℃以不高于450rpm的速度搅拌，所得十六烷基三甲基溴化铵溶液浓度为0.125mol/L；

在上述混合溶液中加入25μL银纳米立方体溶胶，持续搅拌3分钟后加入350μL 氯金酸溶液（浓度为0.0125mol/L）；

随后，在上述混合溶液中加入1.1mL抗坏血酸溶液（浓度为0.125 mol/L）及175μLL-半胱氨酸盐酸盐一水物溶液（浓度为0.125 mol/L），得到无色的混合溶液；

反应持续期间混合溶液颜色逐渐从蓝色转变为黑色，待颜色不再变化后反应0.5小时后停止，将所述混合溶液转移至离心管，在6000rpm的离心速度下持续8分钟，去除上清液，得到溶液沉淀；

然后再加入去离子水重复所述离心操作，重复离心三次之后将所得溶液沉淀分散于去离子水中，得到黑色的银纳米立方@枝杈状纳米金核壳结构。

上述工艺流程如图1所示，所得银纳米立方@枝杈状纳米金核壳结构的TEM如图2所示。

实施例4

制备银纳米立方体，包括：

将同时作为还原剂和溶液的 20mL乙二醇加入三口烧瓶中，在155℃下加热回流，搅拌速度不高于450rpm，随后向其中加入0.5mL硫化钠溶（浓度为0.006mol/L）；

充分混合后，在上述混合溶液中加入4mLHCl溶液（浓度为0.004mol/L）和4mL保护剂聚乙烯吡咯烷酮溶液（浓度为30mg/mL）；

随后，立即在上述混合溶液中加入1.5mL三氟乙酸银溶液（浓度为0.4 mol/L）；

反应持续期间混合溶液颜色逐渐从白色转变为绿色，最终转变为灰绿色之后颜色不再发生明显改变，整个反应持续2小时，待冷却至室温后将所述混合溶液转移至离心管，在8000rpm的离心速度下持续10分钟，去除上清液，得到溶液沉淀；

然后再加入去离子水重复所述离心操作，重复离心三次之后将所得溶液沉淀分散于30mL去离子水中，得到灰绿色的银纳米立方体溶胶；

制备银纳米立方@枝杈状纳米金核壳结构，包括：

在20mL的玻璃瓶中加入6mL去离子水和3mL十六烷基三甲基溴化铵溶液，在45℃以不高于450rpm的速度搅拌，所得十六烷基三甲基溴化铵溶液浓度为0.1mol/L；

在上述混合溶液中加入25μL银纳米立方体溶胶，持续搅拌1分钟后加入400μL 氯金酸溶液（浓度为0.015mol/L）；

随后，在上述混合溶液中加入1mL抗坏血酸溶液（浓度为0.15 mol/L）及150μLD-半胱氨酸盐酸盐一水物溶液（浓度为0.15 mol/L），得到无色的混合溶液；

反应持续期间混合溶液颜色逐渐从蓝色转变为黑色，待颜色不再变化后反应0.5小时后停止，将所述混合溶液转移至离心管，在6000rpm的离心速度下持续8分钟，去除上清液，得到溶液沉淀；

然后再加入去离子水重复所述离心操作，重复离心三次之后将所得溶液沉淀分散于去离子水中，得到黑色的银纳米立方@枝杈状纳米金核壳结构。

性能测试

为了进一步验证本发明实施例3中用于肿瘤光热治疗的银纳米立方@枝杈状纳米金核壳结构在紫外-近红外光谱上从可见光区至近红外光区的宽波段高吸收，对其进行光谱分析。

所得银纳米立方@枝杈状纳米金核壳结构的紫外-近红外光谱如图3所示，所述多银纳米立方@枝杈状纳米金核壳结构的光吸收范围在200-900nm之间，并且在700-900nm的近红外光区表现出宽波段纵向吸收峰，证明本发明实例中用于肿瘤光热治疗的银纳米立方@枝杈状纳米金核壳结构宽波段高吸收的特点。

光热转换性能测试

采用808nm的激光器对银纳米立方@枝杈状纳米金核壳结构进行光热转换性能测试。具体方法如下：

将浓度为80μg/mL的银纳米立方@枝杈状纳米金核壳结构放置在波长为808nm的激光光源下，功率2.0W/cm²，开始记录银纳米立方@枝杈状纳米金核壳结构水溶液的温度，每5s记录一次。在照射10分钟后，移去光源，让其自然降温，且每5s记录一次。银纳米立方@枝杈状纳米金核壳结构的升降温曲线如图4所示。

图4中，黑色曲线为光热转换性能测试过程中升降温曲线；而蓝色曲线为根据降温曲线和式（1）得到的曲线，纵坐标为时间，横坐标为，/>通过式(1)计算得到；红色曲线为蓝色曲线的一阶线性拟合得到的曲线。

(1)

式（1）中为降温过程中每5s银纳米立方@枝杈状纳米金核壳结构水溶液温度和室温的温差，/>为银纳米立方@枝杈状纳米金核壳结构水溶液温度和室温的最大温差。

根据降温曲线的一阶线性拟合曲线和式（2）经计算得到银纳米立方@枝杈状纳米金核壳结构的光热转换效率为66.5％。这说明银纳米立方@枝杈状纳米金核壳结构具有优异的光热转换效率，是一种有应用前景的光热材料。

(2)

式（2）中η为光热转换效率，为/>为和图4红色曲线斜率的比值（0.0125），其中为银纳米立方@枝杈状纳米金核壳结构的质量（0.8×10^-7Kg），而/>为水的比热容（4.2×10³J/Kg），/> 为银纳米立方@枝杈状纳米金核壳结构水溶液照射10分钟后的升温 温度（26℃），/> 为水照射10分钟后的升温温度（3℃），/>为激光功率（2W/cm²）和激光光斑面积（0.35cm²）的乘积（0.7W），λ为银纳米立方@枝杈状纳米金核壳结构水溶液在808nm处的紫外-近红外光谱吸收值（0.42）。

光热治疗实验

通过MTT法对银纳米立方@枝杈状纳米金核壳结构进行肿瘤细胞的光热治疗实验检测。具体方法如下：

将A549细胞在96孔板培养基中培养，添加10%胎牛血清，放入37°C, 5% CO₂培养箱中培育24h。

将银纳米立方@枝杈状纳米金核壳结构与完全培养基稀释至浓度为20μg/mL、40μg/mL、60μg/mL、80μg/mL。

用不同浓度的银纳米立方@枝杈状纳米金核壳结构与 A549细胞继续在培养箱中共孵育24 h，其中设置0μg/mL为对照组。

取出光照组96孔板，用808nm激光(功率2W/cm²)照射10min后，加入MTT后放入培育箱继续培育4h。不光照组96孔板无需接受光照处理，直接加入MTT后培放入培育箱继续培育4h。将光照组和不光照组96孔板放入酶标仪中，测定每孔的吸光度，将每组6个孔的吸光度求平均值及标准差，并计算细胞存活率，细胞存活率如式（3）计算得到；MTT测试细胞存活率结果见图5，其中黑色条形图代表银纳米立方@枝杈状纳米金核壳结构与 A549细胞共孵育后的细胞存活率，而灰色条形图代表银纳米立方@枝杈状纳米金核壳结构与 A549细胞共孵育后并激光照射后A549细胞存活率，其中误差棒为吸光度最大值与平均值的差。

(3)

从图5中可知，不同浓度的银纳米立方@枝杈状纳米金核壳结构在不进行光照的条件下， A549细胞存活率均可以维持80%以上。说明银纳米立方@枝杈状纳米金核壳结构在不光照条件下没有细胞毒性，具有优异的生物相容性。而在光照条件下，细胞的存活率与银纳米立方@枝杈状纳米金核壳结构的浓度有关，银纳米立方@枝杈状纳米金核壳结构浓度越大，A549细胞存活率越低。但即使在20μg/mL低浓度光照条件下，A549细胞也有42%的细胞存活率，说明银纳米立方@枝杈状纳米金核壳结构对A549细胞具有优异的光热治疗效果，是一种有应用前景的肿瘤光热治疗材料。

Claims (6)

1.银纳米立方@枝杈状纳米金核壳结构作为光热转换材料在光热治疗领域的应用，其特征在于，通过氨基酸诱导枝杈状的纳米金生长在银纳米立方体上得到；

所述银纳米立方@枝杈状纳米金核壳结构通过以下方法制备得到：

制备银纳米立方体溶胶；

在40-50℃不高于450rpm的速度搅拌下，在5-6mL去离子水中加入2-3mL十六烷基三甲基溴化铵溶液；

在上述混合溶液中加入20-30μL银纳米立方体溶胶，搅拌1-3分钟后加入300-400μL氯金酸溶液；

随后，在上述混合溶液中加入1-1.2mL抗坏血酸溶液及150-200μL半胱氨酸盐酸盐一水物溶液，得到无色的混合溶液；

反应持续期间混合溶液颜色逐渐从蓝色转变为黑色，待颜色不再变化后反应0.5-1小时后停止，离心去除上清液，得到溶液沉淀；

重复离心三次之后将所得溶液沉淀分散于去离子水中，得到黑色银纳米立方@枝杈状纳米金核壳结构；

所述银纳米立方@枝杈状纳米金核壳结构的光吸收范围为200-900nm，并且在700-900nm的近红外光区表现出宽波段纵向吸收峰。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述十六烷基三甲基溴化铵溶液浓度为0.1-0.15mol/L，所述氯金酸溶液浓度为0.01-0.015mol/L，所述抗坏血酸溶液浓度为0.1-0.15 mol/L，所述半胱氨酸盐酸盐一水物溶液浓度为0.1-0.15 mol/L。

3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，银纳米立方体溶胶的制备方法包括以下步骤：

将同时作为还原剂和溶液的15-20ml乙二醇加入容器中，在150-160℃下以不高于450rpm的速度搅拌，随后向其中加入0.4-0.5mL硫化钠溶液；

充分混合后，在上述混合溶液中依次加入2-4mL HCl溶液和4-5mL保护剂聚乙烯吡咯烷酮溶液；

随后，立即在上述混合溶液中加入1-1.5mL 三氟乙酸银溶液；

反应1.5-2.5小时后停止，待冷却至室温后，将上述混合溶液离心去除上清液，得到溶液沉淀；

重复离心三次之后将所得溶液沉淀分散于25-35mL去离子水中，得到灰绿色的银纳米立方体溶胶。

4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述硫化钠溶液浓度为0.005-0.006mol/L，所述HCl溶液浓度为0.003-0.005mol/L，所述聚乙烯吡咯烷酮溶液浓度为20-30mg/mL，所述三氟乙酸银溶液浓度为0.4-0.5 mol/L。

5.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，采用808nm近红外激光为光源，以人非小细胞肺癌A549细胞为目标细胞，所述银纳米立方@枝杈状纳米金核壳结构具有优异的生物相容性。

6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述银纳米立方@枝杈状纳米金核壳结构在不光照条件下没有细胞毒性，具有优异的生物相容性；

在光照条件下，在浓度为20-80μg/mL的范围内，细胞存活率达到≤40%，能有效杀死癌细胞。