CN114933649A - 抗水痘-带状疱疹病毒的抗体及其用途 - Google Patents

抗水痘-带状疱疹病毒的抗体及其用途 Download PDF

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Abstract

本申请公开了针对水痘‑带状疱疹病毒的抗体，编码所述抗体的核酸分子、包含所述核酸分子的表达载体、包含所述核酸分子或载体的宿主细胞、制备和纯化该抗体的方法及所述抗体的应用。

Description

抗水痘-带状疱疹病毒的抗体及其用途
技术领域
本申请大体涉及基因工程和抗体药物领域；具体而言，涉及抗水痘-带状疱疹病毒抗体领域及其用途。本申请开发了新的抗水痘-带状疱疹病毒抗体，并提供了该抗体在预防或治疗水痘和带状疱疹中的用途。
背景技术
水痘-带状疱疹病毒(Varicella zoster virus，VZV)属疱疹病毒属α亚科，是有被膜的DNA病毒。VZV是最小的人疱疹病毒，基因组全长约125,000bp，包括70多种开放读码框，编码多种蛋白质(Davison,A.J.,and J.E.Scott.1986)。VZV至少有6种表面糖蛋白，如gB(gp II)、gC(gp IV)、gE(gp I)、gH(gp III)、gI和gL，在受感染的细胞膜上，糖蛋白gE、gB和gH极为丰富，它们诱生的抗体均能中和病毒(Davison,A.J.,C.M.Edson.1986)。糖蛋白gE在VZV感染细胞中表达丰度最高，与gI蛋白非共价连接，结合免疫球蛋白IgG的Fc段。gB蛋白是中和抗体的靶点，在病毒侵入宿主细胞的过程中发挥作用，gB的氨基酸序列在VZV和单纯疱疹病毒-1(HSV-1)中高度保守(Kapsenberk,J.G.1964)。gH蛋白介导病毒被膜与细胞膜以及细胞膜之间的融合，利于病毒在细胞间的扩散，gH与gL共表达才能糖基化并转运到细胞表面(Forghani,B.,L.Ni,and C.Grose.1994)。
VZV感染人二倍体细胞和黑色素瘤细胞，也能在VERO细胞和原代非洲绿猴肾细胞中复制。VZV通过吸附细胞表面的硫酸肝素蛋白聚糖，进而与低亲和力的第二受体结合进入细胞，在感染细胞内表达病毒蛋白，形成多核巨细胞(Zhu,Z.,M.D.Gershon.1995)。多数病毒颗粒保留在细胞质液泡中，很少向胞外释放游离的病毒。
VZV只有一个血清型，遗传多样性有限，且这种遗传多样性不影响其感染性和毒力。VZV感染具有高度的种属特异性，没有动物储存宿主，虽然能感染一些非人灵长类动物以及豚鼠(Chen,J.2003)和大鼠(Sadzot-Delvaux.1990)等小动物，但不会引起这些动物发病。人是唯一已知自然宿主，皮肤是病毒的主要靶器官。VZV可经飞沫和(或)接触传播，儿童初次感染主要引起水痘。水痘在温带地区流行，一般在冬春季发病。感染水痘后产生终身免疫，二次感染的病例很罕见(Gershon,A.A.1984)。感染者体内残余的VZV可沿感觉神经轴突逆行，或经感染的T细胞与神经元细胞的融合，转移到脊髓后根神经节或颅神经节内并潜伏，当机体免疫力降低时，VZV特异性细胞免疫下降，潜伏的病毒被激活并大量复制，通过感觉神经轴突转移到皮肤，引起带状疱疹。带状疱疹源于潜伏病毒的重新激活，因此只有发生过原发感染的患者才会患带状疱疹，而且发病没有季节性。带状疱疹主要在45岁以上人群中发病，发病率随着年龄的增高而增加，普通人群带状疱疹的发病率为(3-5)人/1000人/年，并逐年递增2.5％-5.0％，75岁以上人群可以达到10人/1000人/年，儿童带状疱疹发病率极低(Guess,H.A.1985)。带状疱疹在接受免疫抑制剂治疗的患者以及感染HIV的患者中较常见。带状疱疹除皮损外伴随剧烈疼痛，常见并发症为带状疱疹后神经痛(PostHerpetic Neuralgia，PHN)，可持续数月至数年。
VZV感染产生IgG、IgM和IgA抗体，这些抗体结合包括糖蛋白、调节蛋白、结构蛋白和酶在内的病毒蛋白(Bogger-Goren.1984)，中和抗体介导感染细胞的裂解。结合gE和gI蛋白的中和抗体发挥中和作用需要补体，而结合gB、gH/gL蛋白的抗体则不需要补体。初次感染水痘后体内IgG抗体长期存在，保护机体免受二次感染，尤其是糖蛋白抗体。新生儿、未免疫妊娠者或者免疫功能低下者暴露VZV后72小时内注射VZV免疫球蛋白可以抑制感染和体内病毒复制(Zaia,J.A.,1983)，减轻水痘的严重程度，降低水痘性肺炎的风险，但是急性水痘患儿注射免疫球蛋白在临床上不能改善疾病病程。抗病毒药物能有效降低水痘和带状疱疹的严重程度，缩短病程，降低带状疱疹后神经痛的发病率。带状疱疹的治疗目前主要是非特异性抗病毒治疗，无特异性抗病毒药物。
因此，基于临床需求，探索和研发抗水痘-带状疱疹的抗体具有重要的生物学和医学意义。
发明概述
第一方面，本申请提供了针对水痘-带状疱疹病毒的抗体，其包含含HCDR1、HCDR2和HCDR3氨基酸序列的重链可变区以及含LCDR1、LCDR2和LCDR3氨基酸序列的轻链可变区，其中
所述HCDR1氨基酸序列为SGNYWN，所述HCDR2氨基酸序列为YISYDGSTYYNPSLKN，所述HCDR3氨基酸序列为GYYGYWFAY，所述LCDR1氨基酸序列为RASSSVSYMH，所述LCDR2氨基酸序列为ATSNLAS，所述LCDR3氨基酸序列为QQWSSNPFT；或者
所述HCDR1氨基酸序列为SGYYWN，所述HCDR2氨基酸序列为YISYDGSNNYNTSLKN，所述HCDR3氨基酸序列为EDVNYPPYALDY，所述LCDR1氨基酸序列为RSSQSLVHSNGNTYLH，所述LCDR2氨基酸序列为KVSNRFS，所述LCDR3氨基酸序列为SQSTHVPWT；或者
所述HCDR1氨基酸序列为SYTMS，所述HCDR2氨基酸序列为FISNGGDNNYYADTVKG，所述HCDR3氨基酸序列为HNGNWGFAY，所述LCDR1氨基酸序列为SASSSISSNYLH，所述LCDR2氨基酸序列为RTSNLAS，所述LCDR3氨基酸序列为QQGSSIPLT；或者
所述HCDR1氨基酸序列为TYAMH，所述HCDR2氨基酸序列为VISYGGGNRYYAASVKG，所述HCDR3氨基酸序列为ARDNHYFFGMDV，所述LCDR1氨基酸序列为RASQGISSWLA，所述LCDR2氨基酸序列为AASSLQS，所述LCDR3氨基酸序列为QQANSFPLT、QEGFYFPIN、QQATYFPIN或QQSSYFPIA；
其中HCDR和LCDR氨基酸序列根据Kabat定义。
在第一方面的一些实施方案中，所述抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQ IDNO:1、3、5或者7所示。
在第一方面的一些实施方案中，所述抗体的轻链可变区的氨基酸序列如SEQ IDNO:2、4、6、8、9、10或者28所示。
在第一方面的一些实施方案中，所述抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQ IDNO:1所示，所述抗体的轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示；或者
所述抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示，所述抗体的轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:4所示；或者
所述抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:5所示，所述抗体的轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:6所示；
所述抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:7所示，所述抗体的轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:8所示；或者
所述抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:7所示，所述抗体的轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:9所示；或者
所述抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:7所示，所述抗体的轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:10所示；或者
所述抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:7所示，所述抗体的轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:28所示。
第二方面，本申请提供了针对水痘-带状疱疹病毒的抗体，其中所述抗体的重链可变区的氨基酸序列与SEQ ID NO:1、3、5和7中任何一项具有至少90％的一致性，并且所述抗体的轻链可变区的氨基酸序列与SEQ ID NO:2、4、6、8、9、10和28中任何一项具有至少90％的一致性。
在第一方面和第二方面的一些实施方案中，所述抗体为全抗体、Fab片段、F(ab’)2片段或单链Fv片段(scFv)。
在第一方面和第二方面的一些实施方案中，所述抗体为单克隆抗体。
在第一方面和第二方面的一些实施方案中，所述抗体还包含选自IgG1亚型、IgG2亚型或IgG4亚型的重链恒定区。
在第一方面和第二方面的一些实施方案中，所述抗体还包含选自κ亚型或者λ亚型的轻链恒定区。
在第一方面和第二方面的一些实施方案中，所述抗体结合水痘-带状疱疹病毒gH/gL蛋白；和/或所述抗体介导抗体依赖性的细胞介导的细胞毒作用(ADCC)。
第三方面，本申请提供了核酸分子，其编码第一方面或第二方面所述的抗体。
第四方面，本申请提供了药物组合物，其包含第一方面或第二方面所述的抗体以及药学上可接受的赋形剂、稀释剂或载体。
第五方面，本申请提供了第一方面或第二方面所述的抗体、第三方面所述的核酸分子、或第四方面所述的药物组合物在制备用于预防或治疗水痘和带状疱疹的药物中的用途。
第六方面，本申请提供了预防或治疗水痘和带状疱疹的方法，包括向有需要的个体给予第一方面或第二方面所述的抗体、或者第四方面所述的药物组合物。
附图说明
图1显示ELISA分析抗水痘-带状疱疹病毒重组蛋白gH/gL单克隆抗体阻断抗重组蛋白gH/gL纯化噬菌体与重组蛋白gH/gL结合的能力。其中，图A-图C分别为抗水痘-带状疱疹病毒重组蛋白gH/gL单克隆抗体S8E1、S8B8和S7A10的阻断结果。
图2显示ELISA分析抗水痘-带状疱疹病毒重组蛋白gH/gL单克隆抗体H4H8-L1B7阻断抗重组蛋白gH/gL纯化噬菌体与重组蛋白gH/gL结合的能力。
图3显示基于Jurkat-Dual-CD16a报告基因细胞评估抗水痘-带状疱疹病毒单克隆抗体的ADCC活性。
序列说明
SEQ ID NO:1显示单克隆抗体S7A10的重链可变区的氨基酸序列。
SEQ ID NO:2显示单克隆抗体S7A10的轻链可变区的氨基酸序列。
SEQ ID NO:3显示单克隆抗体S8E1的重链可变区的氨基酸序列。
SEQ ID NO:4显示单克隆抗体S8E1的轻链可变区的氨基酸序列。
SEQ ID NO:5显示单克隆抗体S8B8的重链可变区的氨基酸序列。
SEQ ID NO:6显示单克隆抗体S8B8的轻链可变区的氨基酸序列。
SEQ ID NO:7显示单克隆抗体H4H8-L1B7、H4H8-L14H8、H4H8-L13C1和H4H8-L13C7的重链可变区的氨基酸序列。
SEQ ID NO:8显示单克隆抗体H4H8-L13C1的轻链可变区的氨基酸序列。
SEQ ID NO:9显示单克隆抗体H4H8-L13C7的轻链可变区的氨基酸序列。
SEQ ID NO:10显示单克隆抗体H4H8-L14H8的轻链可变区的氨基酸序列。
SEQ ID NO:11显示水痘-带状疱疹病毒(Varicella zoster virus)的gH糖蛋白的氨基酸序列。
SEQ ID NO:12显示水痘-带状疱疹病毒(Varicella zoster virus)的gL糖蛋白的氨基酸序列。
SEQ ID NO:13显示His标签的氨基酸序列。
SEQ ID NO:14显示人(homo sapiens)IgG1亚型重链恒定区的氨基酸序列。
SEQ ID NO:15显示人(homo sapiens)IgG2亚型重链恒定区的氨基酸序列。
SEQ ID NO:16显示人(homo sapiens)IgG4亚型重链恒定区的氨基酸序列。
SEQ ID NO:17显示小鼠(mus musculus)IgG1亚型重链恒定区的氨基酸序列。
SEQ ID NO:18显示小鼠(mus musculus)IgG2a亚型重链恒定区的氨基酸序列。
SEQ ID NO:19显示人(homo sapiens)κ亚型轻链恒定区的氨基酸序列。
SEQ ID NO:20显示人(homo sapiens)λ亚型轻链恒定区的氨基酸序列。
SEQ ID NO:21显示小鼠(mus musculus)κ亚型轻链恒定区的氨基酸序列。
SEQ ID NO:22显示小鼠(mus musculus)λ亚型轻链恒定区的氨基酸序列。
SEQ ID NO:23显示引物PmCGR的核苷酸序列。
SEQ ID NO:24显示引物PmCKR的核苷酸序列。
SEQ ID NO:25显示单链抗体S7A10的氨基酸序列。
SEQ ID NO:26显示单链抗体S8E1的氨基酸序列。
SEQ ID NO:27显示单链抗体S8B8的氨基酸序列。
SEQ ID NO:28显示单克隆抗体H4H8-L1B7的轻链可变区的氨基酸序列。
发明详述
本申请的发明人通过抗体工程技术得到了新的针对水痘-带状疱疹病毒抗体。在本申请的多个方面，提供了新的针对水痘-带状疱疹病毒抗体，编码所述抗体或其抗原结合片段的核酸分子、包含所述核酸分子的载体、包含所述核酸分子或载体的宿主细胞、制备和纯化所述抗体的方法及所述抗体的医学和生物学应用。根据本申请提供的抗体的可变区的氨基酸序列，可构建全长的抗体分子作为药物用于预防或治疗水痘和带状疱疹。
除非另外指明，本申请的实施采用本领域常规的分子生物学、微生物学、细胞生物学、生物化学以及免疫学技术。
除非另外指明，本申请中所用的术语具有本领域技术人员通常所理解的含义。
定义
如本文所用术语“抗体”是指能够经由至少一个位于免疫球蛋白分子的可变区中的抗原识别位点特异性结合到靶标的免疫球蛋白分子。靶标包括但不限于碳水化合物、多聚核苷酸、脂质、多肽等。本文所使用的“抗体”不仅包括完整的(即全长的)抗体，而且还包括其抗原结合片段(例如Fab、Fab'、F(ab')2、Fv)、其变异体、包含抗体部分的融合蛋白、人源化抗体、嵌合抗体、双抗体、线性抗体、单链抗体、多特异性抗体(例如双特异性抗体)及任何其他包含所需特异性的抗原识别位点的免疫球蛋白分子的修改配置，包括抗体的糖基化变体、抗体的氨基酸序列变体及共价修饰的抗体。
通常，完整或全长的抗体包含两个重链和两个轻链。每个重链含有重链可变区(VH)和第一、第二及第三恒定区(CH1、CH2及CH3)。每个轻链含有轻链可变区(VL)和恒定区(CL)。全长的抗体可以是任何种类的抗体，例如IgD、IgE、IgG、IgA或IgM(或上述的子类)，但抗体不需要属于任何特定的类别。根据重链的恒定域的抗体氨基酸序列，可以将免疫球蛋白指定为不同的类别。通常，免疫球蛋白有五种主要的类别：IgA、IgD、IgE、IgG及IgM，而且这些类别中有几个可以再被进一步区分成子类(同型)，例如IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgA1及IgA2。对应于不同免疫球蛋白类别的重链恒定域分别称为α、δ、ε、γ、以及μ。不同类别的免疫球蛋白的子单元结构和三维结构是公知的。
如本文所用术语“抗原结合片段或抗原结合部分”是指负责结合抗原的完整抗体分子的一部分或区域。抗原结合域可以包含重链可变区(VH)、轻链可变区(VL)或上述两者。VH和VL中的每个通常含有三个互补决定区CDR1、CDR2及CDR3。
本领域技术人员公知，互补决定区(CDR，通常有CDR1、CDR2及CDR3)是可变区中对抗体的亲和力和特异性影响最大的区域。VH或VL的CDR氨基酸序列有两种常见的定义方式，即Chothia定义和kabat定义。(参阅例如Kabat,“Sequences of Proteins ofImmunological Interest”，National Institutes of Health,Bethesda，Md.(1991)；A1-Lazikani等人，J.Mol.Biol.273:927-948(1997)；以及Martin等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA86:9268-9272(1989))。对于给定抗体的可变区氨基酸序列，可以根据Chothia定义或者Kabat定义来确定VH和VL氨基酸序列中的CDR氨基酸序列。在本申请的实施方案中，利用Kabat定义CDR氨基酸序列。
对于给定抗体的可变区氨基酸序列，可以通过多种方式分析可变区氨基酸序列的中CDR氨基酸序列，例如可以利用在线软件Abysis确定(http://www.abysis.org/)。
抗原结合片段的实例包括但不限于：(1)Fab片段，其可以是具有VL-CL链和VH-CH1链的单价片段；(2)F(ab')2片段，其可以是具有两个Fab'片段的二价片段，该两个Fab'片段由铰链区的二硫桥(即Fab'的二聚物)连接；(3)具有抗体的单臂的VL和VH域的Fv片段；(4)单链Fv(scFv)，其可以是由VH域和VL域经由胜肽连接符组成的单一多胜肽链；以及(5)(scFv)2，其可以包含两个由胜肽连接符连接的VH域和两个VL域，该两个VL域是经由二硫桥与该两个VH域组合。
如本文所用术语“特异性结合”是指两个分子之间的非随机结合反应，例如抗体至抗原表位的结合。
如本文所用术语“单克隆抗体”指由基本同质的抗体群体获得的抗体，即，除了可能在少量个体中存在自然发生的突变以外，组成群体的各个抗体是相同的。本文所述单克隆抗体特别包括“嵌合”抗体，其中重链和/或轻链的一部分与来源于具体物种或属于具体抗体类或亚类的抗体中的对应氨基酸序列相同或同源，而重链和/或轻链的余下部分与来源于另一物种或属于另一抗体类或亚类的抗体中的对应氨基酸序列相同或同源，并且还包括这样的抗体的片段，只要它们能表现出所期望的生物学活性(美国专利号4,816,567；和Morrison等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 81:6851-6855(1984))。
第一方面，本申请提供了针对水痘-带状疱疹病毒的抗体，其包含含HCDR1、HCDR2和HCDR3氨基酸序列的重链可变区以及含LCDR1、LCDR2和LCDR3氨基酸序列的轻链可变区，其中
所述HCDR1氨基酸序列为SGNYWN，所述HCDR2氨基酸序列为YISYDGSTYYNPSLKN，所述HCDR3氨基酸序列为GYYGYWFAY，所述LCDR1氨基酸序列为RASSSVSYMH，所述LCDR2氨基酸序列为ATSNLAS，所述LCDR3氨基酸序列为QQWSSNPFT；或者
所述HCDR1氨基酸序列为SGYYWN，所述HCDR2氨基酸序列为YISYDGSNNYNTSLKN，所述HCDR3氨基酸序列为EDVNYPPYALDY，所述LCDR1氨基酸序列为RSSQSLVHSNGNTYLH，所述LCDR2氨基酸序列为KVSNRFS，所述LCDR3氨基酸序列为SQSTHVPWT；或者
所述HCDR1氨基酸序列为SYTMS，所述HCDR2氨基酸序列为FISNGGDNNYYADTVKG，所述HCDR3氨基酸序列为HNGNWGFAY，所述LCDR1氨基酸序列为SASSSISSNYLH，所述LCDR2氨基酸序列为RTSNLAS，所述LCDR3氨基酸序列为QQGSSIPLT；或者
所述HCDR1氨基酸序列为TYAMH，所述HCDR2氨基酸序列为VISYGGGNRYYAASVKG，所述HCDR3氨基酸序列为ARDNHYFFGMDV，所述LCDR1氨基酸序列为RASQGISSWLA，所述LCDR2氨基酸序列为AASSLQS，所述LCDR3氨基酸序列为QQANSFPLT、QEGFYFPIN、QQATYFPIN或QQSSYFPIA；
其中HCDR和LCDR氨基酸序列根据Kabat定义。
在第一方面的一些实施方案中，所述抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQ IDNO:1、3、5或者7所示。
在第一方面的一些实施方案中，所述抗体的轻链可变区的氨基酸序列如SEQ IDNO:2、4、6、8、9、10或者28所示。
在第一方面的一些实施方案中，所述抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQ IDNO:1所示，所述抗体的轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示；或者
所述抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示，所述抗体的轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:4所示；或者
所述抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:5所示，所述抗体的轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:6所示；
所述抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:7所示，所述抗体的轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:8所示；或者
所述抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:7所示，所述抗体的轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:9所示；或者
所述抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:7所示，所述抗体的轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:10所示；或者
所述抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:7所示，所述抗体的轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:28所示。
第二方面，本申请提供了针对水痘-带状疱疹病毒的抗体，其中所述抗体的重链可变区的氨基酸序列与SEQ ID NO:1、3、5和7中任何一项具有至少90％的一致性，并且所述抗体的轻链可变区的氨基酸序列与SEQ ID NO:2、4、6、8、9、10和28中任何一项具有至少90％的一致性。
在第二方面的一些实施方案中，所述抗体的重链可变区的氨基酸序列与SEQ IDNO:1、3、5和7中任何一项具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或更高的同源性。
在第二方面的一些实施方案中，所述抗体的轻链可变区的氨基酸序列与SEQ IDNO:2、4、6、8、9、10和28中任何一项具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或更高的同源性。
在第二方面的一些实施方案中，所述抗体的重链可变区的氨基酸序列与SEQ IDNO:1、3、5和7中任何一项所示的氨基酸序列相差约1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个氨基酸的取代、缺失和/或添加。
在第二方面的一些实施方案中，所述抗体的轻链可变区的氨基酸序列与SEQ IDNO:2、4、6、8、9、10和28中任何一项所示的氨基酸序列相差约1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个氨基酸的取代、缺失和/或添加。
在第二方面的一些实施方案中，SEQ ID NO:1、3、5和7中任何一项所示的氨基酸序列的C端或N端区域还可以被截短约1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、20、25或更多个氨基酸，而仍然保持类似的所述抗体的重链可变区的功能。
在第二方面的一些实施方案中，还可以在SEQ ID NO:1、3、5和7中任何一项所示的氨基酸序列的C端或N端区域添加1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、20、25或更多个氨基酸，得到的氨基酸序列仍然保持类似的所述抗体的重链可变区的功能。
在第二方面的一些实施方案中，还可以在SEQ ID NO:1、3、5和7中任何一项所示的氨基酸序列的C端或N端以外的区域添加或缺失1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、20、25或更多个氨基酸，只要改变后的氨基酸序列基本上保持类似的所述抗体的重链可变区的功能。
在第二方面的一些实施方案中，SEQ ID NO:2、4、6、8、9、10和28中任何一项所示的氨基酸序列的C端或N端区域还可以被截短约1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、20、25或更多个氨基酸，而仍然保持类似的所述抗体的轻链可变区的功能。
在第二方面的一些实施方案中，还可以在SEQ ID NO:2、4、6、8、9、10和28中任何一项所示的氨基酸序列的C端或N端区域添加1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、20、25或更多个氨基酸，得到的氨基酸序列仍然保持类似的所述抗体的轻链可变区的功能。
在第二方面的一些实施方案中，还可以在SEQ ID NO:2、4、6、8、9、10和28中任何一项所示的氨基酸序列的C端或N端以外的区域添加或缺失1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、20、25或更多个氨基酸，只要改变后的氨基酸序列基本上保持类似的所述抗体的轻链可变区的功能。
在第一方面和第二方面的一些实施方案中，所述抗体为全抗体、Fab片段、F(ab’)2片段或单链Fv片段(scFv)。
在第一方面和第二方面的一些实施方案中，所述抗体为全人源抗体。
在第一方面和第二方面的一些实施方案中，所述抗体为单克隆抗体。
在第一方面和第二方面的一些实施方案中，所述抗体还包含选自IgG1亚型、IgG2亚型或IgG4亚型的重链恒定区。
在第一方面和第二方面的一些具体实施方案中，所述重链恒定区为IgG1亚型。
在第一方面和第二方面的一些实施方案中，所述抗体还包含选自κ亚型或者λ亚型的轻链恒定区。
在第一方面和第二方面的一些具体实施方案中，所述轻链恒定区为κ亚型。
在第一方面和第二方面的一些实施方案中，所述抗体结合水痘-带状疱疹病毒gH/gL蛋白；和/或所述抗体介导抗体依赖性的细胞介导的细胞毒作用(ADCC)。
第三方面，本申请提供了核酸分子，其编码第一方面或第二方面所述的抗体。
在一些实施方案中，所述核酸分子可操作地连接到调控氨基酸序列，调控氨基酸序列可以被用所述载体转化过的宿主细胞识别。
第四方面，本申请提供了药物组合物，其包含第一方面或第二方面所述的抗体以及药学上可接受的赋形剂、稀释剂或载体。
在一些实施方案中，所述药物组合物用于预防或治疗水痘和带状疱疹。
在一些实施方案中，所述药物组合物还可包含下述中的一种或多种：润滑剂，如滑石粉、硬脂酸镁和矿物油；润湿剂；乳化剂；悬浮剂；防腐剂，如苯甲酸、山梨酸和丙酸钙；增甜剂和/或调味剂等。
在一些实施方案中，可将本申请中的药物组合物配制为片剂、丸剂、粉剂、锭剂、酏剂、悬液、乳剂、溶液、糖浆、栓剂或胶囊等形式。
在一些实施方案中，可以利用任何生理上可接受的给药方式递送本申请的药物组合物，这些给药方式包括但不限于：口服给药、肠胃外给药、经鼻给药、直肠给药、腹膜内给药、血管内注射、皮下给药、经皮给药、吸入给药等。
在一些实施方案中，可以通过混合具有所需纯度的试剂与视情况的药学上可接受的载体、赋形剂等，以冻干制剂或水溶液的形式配制用于治疗用途的药物组合物用于存储。
第五方面，本申请提供了第一方面或第二方面所述的抗体、第三方面所述的核酸分子、或第四方面所述的药物组合物在制备用于预防或治疗水痘和带状疱疹的药物中的用途。
第六方面，本申请提供了预防或治疗水痘和带状疱疹的方法，包括向有需要的个体给予第一方面或第二方面所述的抗体，或者第四方面所述的药物组合物。
在其他方面，本申请还提供编码本发明抗体或其轻链或重链的分离的核酸分子以及包含所述核酸分子的载体、包含所述载体的宿主细胞以及产生所述抗体的方法。在一些实施方案中，所述核酸分子可操作地连接到调控氨基酸序列，调控氨基酸序列可以被用所述载体转化过的宿主细胞识别。在一些实施方案中，产生抗体的方法包括培养宿主细胞以便于表达核酸。在一些实施方案中，产生抗体的方法还包括从宿主细胞培养基中回收抗体。
此外，本文所述的特异性针对水痘-带状疱疹病毒的抗体也可用于检测生物样品中水痘-带状疱疹病毒的存在。基于抗体的检测方法在本领域是众所周知的，并且包括例如ELISA、免疫印迹、放射免疫试验、免疫荧光、免疫沉淀以及其它相关技术。
应当理解，以上详细描述仅为了使本领域技术人员更清楚地了解本申请的内容，而并非意图在任何方面加以限制。本领域技术人员能够对所述实施方案进行各种改动和变化。
实施例
以下实施例仅用于说明而非限制本申请范围的目的。
实施例1：重组蛋白的制备
制备和鉴定水痘-带状疱疹病毒特异性抗体的过程中需要用到gH糖蛋白(SEQ IDNO:11)和gL糖蛋白(SEQ ID NO:12)。gH和gL只有在细胞内分别合成，一起发生折叠形成gH/gL二聚体后才能有效的分泌表达，且gH/gL二聚体有大量的翻译后修饰(如糖基化或二硫键等)，因而利用哺乳动物细胞表达系统将更有利于保持重组蛋白的结构和功能。此外，在gH糖蛋白的C端添加His标签(SEQ ID NO:13)，更有利于重组蛋白的纯化和单克隆抗体功能的鉴定。根据Uniprot数据库中水痘-带状疱疹病毒Oka株的gH糖蛋白和gL糖蛋白的氨基酸序列，设计并合成编码gH(包含His标签)和gL重组蛋白的基因。利用常规的分子生物学技术分别将合成的编码gH-His和gL重组蛋白基因克隆至合适的真核表达载体(如invitrogen公司的pcDNA3.1等)，然后利用脂质体(如invitrogen公司的293fectin等)或其它转染试剂(如PEI等)将制备的重组蛋白表达质粒转染入HEK293细胞(如invitrogen公司的HEK293F)，在无血清悬浮培养条件下培养3-5天。然后通过离心等方式收获培养上清。利用金属螯合亲和层析柱(如GE公司的HisTrap FF等)对上清中的重组蛋白进行一步纯化。然后利用脱盐柱(如GE公司的Hitrap desaulting等)将重组蛋白保存缓冲液置换为PBS(pH7.0)或者其他合适的缓冲液。必要时，可以对样品进行过滤除菌，然后分装保存于-20℃。
在制备重组抗体时，抗体重链恒定区可以是人IgG1亚型(SEQ ID NO:14)、人IgG2亚型(SEQ ID NO:15)、人IgG4亚型(SEQ ID NO:16)、或者鼠IgG1亚型(SEQ ID NO:17)、鼠IgG2a(SEQ ID NO:18)亚型、轻链恒定区可以是人κ亚型(SEQ ID NO:19)、人λ亚型(SEQ IDNO:20)、鼠κ亚型(SEQ ID NO:21)、鼠λ亚型(SEQ ID NO：22)。利用常规的分子生物学手段，将编码抗体重链可变区和轻链可变区的核苷酸序列分别克隆至融合有编码重链恒定区和轻链恒定区核苷酸序列的真核表达载体(如invitrogen公司的pcDNA3.1等)，组合表达全抗体。利用脂质体(如invitrogen公司的293fectin等)或其它转染试剂(如PEI等)将制备的重组抗体表达质粒转染入HEK293细胞(如invitrogen公司的HEK293F)，在无血清悬浮培养条件下培养3-5天。然后通过离心等方式收获培养上清，利用ProteinA/G亲和层析柱(如GE公司的Mabselect SURE等)进行一步纯化。然后利用脱盐柱(如GE公司的Hitrap desaulting等)将重组蛋白保存缓冲液置换为PBS(pH7.0)或者其它合适的缓冲液。必要时，可以对抗体样品进行过滤除菌，然后分装保存于-20℃。
实施例2：鼠抗水痘-带状疱疹病毒重组蛋白gH/gL单克隆抗体的筛选
2.1小鼠免疫及免疫抗体库的制备
以实施例1中制备的重组蛋白gH-His/gL为抗原，免疫6-8周龄的BALB/c小鼠，免疫剂量为50μg/只小鼠，每14天加强免疫1次，初免后8周处死小鼠并收集脾细胞。使用小鼠淋巴细胞分离液(达科为生物技术股份有限公司，CAT#DKW33-R0100)对小鼠脾脏淋巴细胞进行分离。利用细胞总RNA提取试剂盒(天根生化科技(北京)有限公司，CAT#DP430)，将分离的淋巴细胞进行总RNA的提取。以提取的总RNA为模板，利用第一链cDNA合成试剂盒(Thermoscientific，CAT#K1621)分别合成抗体重链可变区和轻链可变区的cDNA，反转录引物采取基因特异性引物，引物配对区分别位于抗体重链恒定区和抗体轻链恒定区，具体序列分别为PmCGR:TGCATTTGAACTCCTTGCC(SEQ ID NO:23)和PmCKR:CCATCAATCTTCCACTTGAC(SEQ IDNO:24)。将合成的cDNA立即存放于-70℃保存备用。然后以反转录得到的cDNA为模板，参考文献(Krebber A,Bornhauser S,Burmester J,et al.Reliable cloning of functionalantibody variable domains from hybridomas and spleen cell repertoiresemploying a reengineered phage display system.J Immunol Methods.1997；201(1):35-55，通过引用方式将上述文献的全部内容并入本文中)合成引物，并利用PCR分别扩增编码鼠抗体VH和VK的核苷酸序列，然后利用重叠延伸PCR技术，构建单链抗体(scFv)基因。最后将制备的小鼠单链抗体核苷酸序列克隆至载体pADSCFV-S(实验技术流程可参见中国专利申请第201510097117.0号的实施例1，通过引用方式将上述专利申请的全部内容并入本文中)，构建scFv库。抗体库的库容达到2.13E+08，正确率为50％。
2.2抗水痘-带状疱疹病毒重组蛋白gH/gL小鼠单链抗体的筛选
参照文献(实验技术流程可参见中国专利申请第201510097117.0号，通过引用方式将上述专利申请的全部内容并入本文中)，以实施例1制备的重组蛋白gH-His/gL为抗原，利用固相筛选策略(实验方案参考噬菌体展示：通用实验指南/(美)克拉克森(Clackson,T.),(美)洛曼(Lowman,H.B.)编；马岚等译。化学工业出版社，2008.5，通过引用方式将上述文献的全部内容并入本文中)筛选上述构建的展示小鼠单链抗体的噬菌体库，通过结合、洗脱、中和、感染、扩增的方式共进行三轮筛选，最终获得多株序列不同，但均能特异性结合重组蛋白gH-His/gL的单链抗体，包括克隆S7A10(氨基酸序列如SEQ ID NO:25所示)、S8E1(氨基酸序列如SEQ ID NO:26所示)和S8B8(氨基酸序列如SEQ ID NO:27所示)。
实施例3：鼠抗水痘-带状疱疹病毒重组蛋白gH/gL单克隆抗体的亲和力分析
利用常规分子生物学方法，将编码特异性结合gH/gL的单链抗体的轻重链的核苷酸序列克隆至真核表达载体，制备重组人IgG1-κ形式鼠-人嵌合抗体。
利用Biacore X100通过表面等离子共振技术测定抗gH/gL抗体的亲和力。氨基偶联试剂盒(BR-1000-50)、人抗体捕获试剂盒(BR-1008-39)、CM5芯片(BR100012)和pH7.4的10×HBS-EP(BR100669)等相关试剂和耗材均购自GE healthcare。依照试剂盒中的说明书，用1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(1-Ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimide hydrochloride，EDC)和N-羟基琥珀酰亚胺(N-Hydroxysuccinimide，NHS)对羧基化CM5芯片表面进行活化，将抗人IgG(Fc)抗体(捕获抗体)用10mM pH5.0的乙酸钠稀释至25μg/mL，之后以流速10μL/min注射以实现大约多至10000个响应单位(RU)的偶联量。注射捕获抗体之后，注射1M的乙醇胺以封闭未反应的基团。对于动力学测量，稀释抗gH/gL抗体至0.5-1μg/mL，10μL/min注射，保证50RU左右的抗体被抗人Fc的抗体捕获。然后将重组蛋白gH/gL设置一系列的浓度梯度(例如1.23nM、3.7nM、11.1nM、33.3nM和100nM)，于25℃下30μL/min从低浓度到高浓度进行注射，结合时间为120s，解离时间为3600s，以10μL/min注射3M的MgCl2 30s对芯片表面进行再生。使用Biacore X100评估软件第2.0.1版，通过1:1结合模型拟合结合和解离传感图来计算结合速率(Ka)和解离速率(Kd)。以比率Kd/Ka计算解离平衡常数(KD)。拟合结果如表1所示。
表1.重组抗水痘-带状疱疹病毒重组蛋白gH/gL单克隆抗体结合水痘-带状疱疹病毒重组蛋白gH/gL的亲和力常数
K<sub>a</sub> K<sub>d</sub> K<sub>D</sub>
S8B8-IgG1 4.488E+5 2.068E-4 4.609E-10
S7A10-IgG1 1.721E+5 9.531E-4 5.539E-9
S8E1-IgG1 6.695E+4 2.995E-4 4.473E-9
实施例4：鼠抗水痘-带状疱疹病毒重组蛋白gH/gL单克隆抗体的表位分析
使用水痘-带状疱疹病毒重组蛋白gH/gL包被96孔ELISA板(3μg/mL，100μL/孔)，4℃冰箱包被过夜。利用封闭液PBS-0.1％吐温20-3％牛奶在37℃封闭1小时。用固定浓度(5×1010-1×1011cfu/mL)的各个抗重组蛋白gH/gL纯化噬菌体(S7A10、S8B8和S8E1)分别对抗重组蛋白gH/gL的抗体(S7A10、S8B8和S8E1)进行梯度稀释，起始浓度为10μg/mL，3倍梯度稀释，8-10个浓度梯度，100μL/孔加入封闭好的96孔ELISA板中，37℃孵育1小时。使用PBS-0.1％吐温20洗涤ELISA板，然后加入HRP抗M13二抗(北京义翘神州科技股份有限公司，11973-MM05T-H)，37℃孵育1小时。使用PBS-0.1％吐温20洗涤ELISA板，加入OPD底物显色液，5-10分钟后用1M的H2SO4终止显色，使用酶标仪测定492nm/630nm双波长光密度值。ELISA分析结果如图1所示，S8E1-IgG1单克隆抗体不能阻断S8B8噬菌体、S7A10噬菌体与重组蛋白gH/gL的结合(图1A)；S8B8-IgG1单克隆抗体可以部分阻断S8E1噬菌体与重组蛋白gH/gL的结合信号，但是对S7A10噬菌体与重组蛋白gH/gL的结合没有影响(图1B)；S7A10-IgG1单克隆抗体不能阻断S8B8噬菌体、S7A10噬菌体与重组蛋白gH/gL的结合(图1C)。
实施例5：鼠抗水痘-带状疱疹病毒重组蛋白gH/gL单克隆抗体的中和活性
通过抗体与VZV病毒混合后感染MRC5细胞形成空斑减少确定抗体(S7A10、S8B8和S8E1)中和活性。MRC-5细胞以1.5×105个/孔接种6孔细胞培养板，培养72小时成单层细胞，90％铺满时，去除培养液上清，加入病毒维持液(含2％血清的MEM培养基)，每孔400μL。用病毒维持液将VZV(Oka)稀释至2000pfu/mL，即与抗体等体积混合后每100μL含100pfu的VZV；用病毒稀释液将抗体进行2倍梯度稀释，起始浓度是20μg/mL，8个浓度梯度，即与VZV等体积混合后抗体浓度为10μg/mL、5μg/mL、2.5μg/mL、1.25μg/mL、0.62μg/mL、0.31μg/mL、0.16μg/mL和0.08μg/mL。VZV与抗体等体积混合，25℃放置1小时，感染6孔板的MRC5细胞，每孔100μL。37℃吸附1小时，吸弃上清，PBS洗2次，每孔加入3mL的维持液，37℃维持培养8天，将上清去掉，PBS清洗一次，每孔加入1mL的考马斯亮蓝染色液，作用10分钟后，PBS清洗1次，置于明亮处计数空斑，用Reed和Muench法计算空斑减少50％的抗体浓度(PRNT50)。实验结果如表2所示。
表2.鼠抗水痘-带状疱疹病毒重组蛋白gH/gL单克隆抗体的中和活性
抗体 S7A10 S8B8 S8E1
PRNT50(μg/mL) 0.34 0.38 0.38
实施例6：抗水痘-带状疱疹病毒重组蛋白gH/gL单克隆抗体抑制病毒在细胞间传播的活性
VZV病毒感染MRC5细胞后24小时加入抗体(S7A10、S8B8和S8E1)，通过形成空斑减少确定抗体抑制病毒在细胞间传播的活性。MRC-5细胞以1.5×105个/孔接种6孔细胞培养板，培养72小时成单层细胞，90％铺满，去培养上清，加入病毒维持液(含2％血清的MEM培养基)，每孔400μL。用病毒维持液将VZV稀释至1000pfu/mL，感染6孔板的MRC5细胞，每孔100μL，即每孔感染100pfu的VZV。37℃吸附1小时，吸弃上清，PBS洗2次，每孔加入3mL的维持液，37℃维持培养24小时。用病毒稀释液将抗体进行2倍梯度稀释，起始浓度是400μg/mL，8个浓度梯度，加入6孔板感染了VZV的MRC5细胞，每孔30μL，即培养液中抗体浓度为4μg/mL、2μg/mL、1μg/mL、0.5μg/mL、0.25μg/mL和0.125μg/mL。37℃维持培养7天，将上清去掉，PBS清洗一次，每孔加入1mL的考马斯亮蓝染色液，作用10分钟后，PBS清洗1次，置于明亮处计数空斑，计算空斑减少50％的抗体浓度。实验结果如表3所示。
表3.鼠抗水痘-带状疱疹病毒重组蛋白gH/gL单克隆抗体抑制病毒在细胞间传播的活性
抗体 S7A10 S8B8 S8E1
PRNT50(μg/mL) 0.93 3.21 2.82
实施例7：全人源抗水痘-带状疱疹病毒重组蛋白gH/gL单克隆抗体的筛选
以实施例1制备的重组蛋白gH-His/gL为抗原，利用固相筛选策略(实验方案参考噬菌体展示：通用实验指南/(美)克拉克森(Clackson,T.),(美)洛曼(Lowman,H.B.)编；马岚等译。化学工业出版社，2008.5，通过引用方式将上述文献的全部内容并入本文中)筛选天然人噬菌体抗体库(实验技术流程可参见中国专利申请第201510097117.0号中的实施例1，通过引用方式将上述专利申请的全部内容并入本文中)，最终获得1株特异性结合重组蛋白gH-His/gL的全人源单链抗体H4H8-L1B7。
实施例8：全人源抗水痘-带状疱疹病毒重组蛋白gH/gL单克隆抗体的表位分析
利用常规分子生物学方法，将编码H4H8-L1B7的轻重链克隆至真核表达载体，制备重组人IgG1-κ形式全人源单克隆抗体。
参照实施例4，用固定浓度(5×1010-1×1011cfu/mL)的各个抗重组蛋白gH/gL纯化噬菌体(S7A10、S8E1、S8B8和H4H8-L1B7)分别对抗重组蛋白gH/gL的抗体(H4H8-L1B7-IgG1)进行梯度稀释，测定人抗重组蛋白gH/gL单克隆抗体H4H8-L1B7-IgG1对抗重组蛋白gH/gL噬菌体结合重组蛋白gH/gL的阻断。ELISA分析结果见图2，H4H8-L1B7-IgG1单克隆抗体可以完全阻断H4H8-L1B7噬菌体和S8E1噬菌体与重组蛋白gH/gL的结合信号，对其它2种噬菌体(S7A10和S8B8)与重组蛋白gH/gL的结合信号没有任何影响。
实施例9：全人源抗水痘-带状疱疹病毒重组蛋白gH/gL单克隆抗体H4H8-L1B7轻链突变库的构建和筛选
9.1H4H8-L1B7轻链突变库的构建及筛选
基于双载体噬菌体展示系统，利用轻链CDR突变的策略(具体操作可参照申请人之前提交的中国专利第201510097117.0号中的实施例5，通过引用方式将上述专利申请的全部内容并入本文中)对H4H8-L1B7单克隆抗体进行体外亲和力成熟。利用经典重叠延伸PCR方法构建了库容量超过5.5E+07的LCDR3突变库，突变库设计方案见表4。
表4.LCDR3突变库设计方案
Figure BDA0002969488080000211
Figure BDA0002969488080000221
以重组蛋白gH-His/gL为抗原，以H4H8-L1B7重链为基础，利用固相筛选策略对L1B7(SEQ ID NO:28)的LCDR3突变库进行了2轮筛选，最终获得3个轻链突变体L13C1(SEQID NO:8)、L13C7(SEQ ID NO:9)和L14H8(SEQ ID NO:10)。
9.2H4H8-L1B7轻链突变体亲和力分析
利用常规分子生物学方法，将编码H4H8-L14H8、H4H8-L13C1和H4H8-L13C7的轻重链克隆至真核表达载体，制备重组人IgG1-κ形式全人源单克隆抗体。
参照实施例3，利用Biacore X100评估软件第2.0.1版对H4H8-L1B7轻链突变体亲和力进行了分析，结果见表5。
表5.H4H8-L1B7轻链突变体结合重组蛋白gH/gL的亲和力常数
K<sub>a</sub> K<sub>d</sub> K<sub>D</sub>
H4H8-L13C1-IgG1 2.601E+5 1.281E-4 4.925E-10
H4H8-L13C7-IgG1 2.494E+5 1.211E-4 4.855E-10
H4H8-L14H8-IgG1 3.666E+5 1.062E-4 2.896E-10
实施例10：抗水痘-带状疱疹病毒重组蛋白gH/gL单克隆抗体的中和活性
参照实施例5，测定单克隆抗体H4H8-L14H8、H4H8-L13C1和H4H8-L13C7的中和活性。实验结果如表6所示。
表6.抗水痘-带状疱疹病毒重组蛋白gH/gL单克隆抗体的中和活性
H4H8-L14H8 H4H8-L13C1 H4H8-L13C7
PRNT50(μg/mL) 0.016 0.016 >0.4
实施例11：抗水痘-带状疱疹病毒重组蛋白gH/gL单克隆抗体抑制病毒在细胞间传播的活性
参照实施例6，测定单克隆抗体H4H8-L14H8、H4H8-L13C1和H4H8-L13C7的抑制病毒在细胞间传播的活性。实验结果如表7所示。
表7.抗水痘-带状疱疹病毒重组蛋白gH/gL单克隆抗体抑制病毒在细胞间传播的活性
H4H8-L14H8 H4H8-L13C1 H4H8-L13C7
PRNT50(μg/mL) 0.31 0.28 >2
实施例12：抗水痘-带状疱疹病毒单克隆抗体介导对感染细胞的ADCC作用
本申请发明人通过将CD16a质粒转入Invivogen公司的jurkat-dual细胞中,构建了Jurkat-Dual-CD16a报告基因细胞株。当抗体依赖性的细胞介导的细胞毒作用(antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity，ADCC)效应发生时，活化信号通过CD16a分子转至下游的NF-κB通路，最后通过萤光素酶检测ADCC活性。水痘-带状疱疹病毒(VZV)以MOI＝0.01感染T75细胞培养瓶中90％铺满的MRC5细胞，镜下观察，待瓶中细胞有50％-60％发生病变(感染96小时)，经胰酶消化后，收集细胞。将Jurkat-Dual-CD16a细胞和感染了VZV的靶细胞(MRC-5细胞)以效靶比15:1的比例混合。待测分子H4H8-L14H8-IgG1、H4H8-L13C1-IgG1、H4H8-L1B7-IgG1和同型对照IgG1抗体分别以终浓度60μg/mL起始，3倍梯度稀释，共10个浓度点，与上述混合细胞共培养。孵育20h后，离心取50μL上清，酶标仪中设置好自动上样程序，在每孔中加入50μL荧光素酶检测液quanti-luc(invivogen,货号rep-qlc2)并进行全波长检测测定萤光强度。基于Jurkat-Dual-CD16a报告基因体系的ADCC活性结果显示(图3)，H4H8-L14H8-IgG1和H4H8-L13C1-IgG1的ADCC活性好于H4H8-L1B7-IgG1。
上文对本申请的各项发明的示例性实施方案进行了描述，但是，在不脱离本申请的实质和范围的情况下，本领域技术人员能够对本申请描述的示例性实施方案进行修改或改进，由此得到的变形方案或等同方案也属于本申请的范围。
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序列表
<110> 北京智仁美博生物科技有限公司
<120> 抗水痘-带状疱疹病毒的抗体及其用途
<160> 28
<170> CNIPASequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 118
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 1
Gln Val Gln Leu Lys Glu Ser Gly Pro Gly Pro Val Lys Pro Ser Gln
1 5 10 15
Ser Leu Ser Leu Thr Cys Ser Val Thr Gly Tyr Ser Ile Thr Ser Gly
20 25 30
Asn Tyr Trp Asn Trp Val Arg Gln Phe Pro Gly Asn Lys Leu Glu Trp
35 40 45
Met Ala Tyr Ile Ser Tyr Asp Gly Ser Thr Tyr Tyr Asn Pro Ser Leu
50 55 60
Lys Asn Arg Ile Ser Ile Thr Arg Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Phe
65 70 75 80
Leu Lys Leu Asn Ser Val Thr Thr Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Glu Gly Tyr Tyr Gly Tyr Trp Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr
100 105 110
Leu Val Thr Val Ser Ala
115
<210> 2
<211> 106
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 2
Glu Asn Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Ile Leu Ser Ala Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Lys Val Thr Met Thr Cys Arg Ala Ser Ser Ser Val Ser Tyr Met
20 25 30
His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Ser Ser Pro Lys Pro Trp Ile Tyr
35 40 45
Ala Thr Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser
50 55 60
Gly Ser Gly Thr Ser Tyr Ser Leu Thr Ile Ser Arg Val Glu Ala Glu
65 70 75 80
Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Trp Ser Ser Asn Pro Phe Thr
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Phe Gly Ser Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105
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<211> 121
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 3
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Ser Leu Ser Leu Thr Cys Ser Val Thr Gly Tyr Ser Ile Thr Ser Gly
20 25 30
Tyr Tyr Trp Asn Trp Ile Arg Gln Phe Pro Gly Asn Lys Leu Glu Trp
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Met Gly Tyr Ile Ser Tyr Asp Gly Ser Asn Asn Tyr Asn Thr Ser Leu
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Lys Asn Arg Ile Ser Ile Thr Arg Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Phe
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Leu Lys Leu Asn Ser Val Thr Thr Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys
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Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Val Tyr Phe Cys Ser Gln Ser
85 90 95
Thr His Val Pro Trp Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Met Lys
100 105 110
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<211> 118
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 5
Glu Val Lys Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Lys Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Thr Met Ser Trp Val Arg Gln Thr Pro Glu Lys Arg Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Phe Ile Ser Asn Gly Gly Asp Asn Asn Tyr Tyr Ala Asp Thr Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Ile Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
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85 90 95
Ala Arg His Asn Gly Asn Trp Gly Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr
100 105 110
Leu Val Thr Val Ser Ala
115
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<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 6
Gln Asn Val Leu Thr Gln Ser Pro Thr Thr Met Ala Ala Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Lys Ile Thr Ile Thr Cys Ser Ala Ser Ser Ser Ile Ser Ser Asn
20 25 30
Tyr Leu His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Phe Ser Pro Lys Leu Leu
35 40 45
Ile Tyr Arg Thr Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro Ala Arg Phe Ser
50 55 60
Gly Ser Gly Ser Gly Thr Ser Tyr Ser Leu Thr Ile Gly Thr Met Glu
65 70 75 80
Ala Glu Asp Val Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Gly Ser Ser Ile Pro
85 90 95
Leu Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105
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<211> 121
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<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 7
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Gly Ala Ser Gly Phe Thr Phe Asn Thr Tyr
20 25 30
Ala Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Met Glu Trp Val
35 40 45
Ala Val Ile Ser Tyr Gly Gly Gly Asn Arg Tyr Tyr Ala Ala Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Phe
65 70 75 80
Leu Gln Leu Asn Thr Leu Arg Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Ala Arg Asp Asn His Tyr Phe Phe Gly Met Asp Val Trp Gly
100 105 110
Arg Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
115 120
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<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 8
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Val Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Ser Ser Trp
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Glu Gly Phe Tyr Phe Pro Ile
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Asn Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
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<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 9
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Val Ser Ala Ser Val Gly
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Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Ser Ser Trp
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ala Thr Tyr Phe Pro Ile
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Asn Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
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<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 10
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Val Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Ser Ser Trp
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Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
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Tyr Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
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Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Ser Tyr Phe Pro Ile
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Ala Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
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<212> PRT
<213> 水痘-带状疱疹病毒(Varicella zoster)
<400> 11
Asn Lys Ser Tyr Val Thr Pro Thr Pro Ala Thr Arg Ser Ile Gly His
1 5 10 15
Met Ser Ala Leu Leu Arg Glu Tyr Ser Asp Arg Asn Met Ser Leu Lys
20 25 30
Leu Glu Ala Phe Tyr Pro Thr Gly Phe Asp Glu Glu Leu Ile Lys Ser
35 40 45
Leu His Trp Gly Asn Asp Arg Lys His Val Phe Leu Val Ile Val Lys
50 55 60
Val Asn Pro Thr Thr His Glu Gly Asp Val Gly Leu Val Ile Phe Pro
65 70 75 80
Lys Tyr Leu Leu Ser Pro Tyr His Phe Lys Ala Glu His Arg Ala Pro
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Phe Pro Ala Gly Arg Phe Gly Phe Leu Ser His Pro Val Thr Pro Asp
100 105 110
Val Ser Phe Phe Asp Ser Ser Phe Ala Pro Tyr Leu Thr Thr Gln His
115 120 125
Leu Val Ala Phe Thr Thr Phe Pro Pro Asn Pro Leu Val Trp His Leu
130 135 140
Glu Arg Ala Glu Thr Ala Ala Thr Ala Glu Arg Pro Phe Gly Val Ser
145 150 155 160
Leu Leu Pro Ala Arg Pro Thr Val Pro Lys Asn Thr Ile Leu Glu His
165 170 175
Lys Ala His Phe Ala Thr Trp Asp Ala Leu Ala Arg His Thr Phe Phe
180 185 190
Ser Ala Glu Ala Ile Ile Thr Asn Ser Thr Leu Arg Ile His Val Pro
195 200 205
Leu Phe Gly Ser Val Trp Pro Ile Arg Tyr Trp Ala Thr Gly Ser Val
210 215 220
Leu Leu Thr Ser Asp Ser Gly Arg Val Glu Val Asn Ile Gly Val Gly
225 230 235 240
Phe Met Ser Ser Leu Ile Ser Leu Ser Ser Gly Leu Pro Ile Glu Leu
245 250 255
Ile Val Val Pro His Thr Val Lys Leu Asn Ala Val Thr Ser Asp Thr
260 265 270
Thr Trp Phe Gln Leu Asn Pro Pro Gly Pro Asp Pro Gly Pro Ser Tyr
275 280 285
Arg Val Tyr Leu Leu Gly Arg Gly Leu Asp Met Asn Phe Ser Lys His
290 295 300
Ala Thr Val Asp Ile Cys Ala Tyr Pro Glu Glu Ser Leu Asp Tyr Arg
305 310 315 320
Tyr His Leu Ser Met Ala His Thr Glu Ala Leu Arg Met Thr Thr Lys
325 330 335
Ala Asp Gln His Asp Ile Asn Glu Glu Ser Tyr Tyr His Ile Ala Ala
340 345 350
Arg Ile Ala Thr Ser Ile Phe Ala Leu Ser Glu Met Gly Arg Thr Thr
355 360 365
Glu Tyr Phe Leu Leu Asp Glu Ile Val Asp Val Gln Tyr Gln Leu Lys
370 375 380
Phe Leu Asn Tyr Ile Leu Met Arg Ile Gly Ala Gly Ala His Pro Asn
385 390 395 400
Thr Ile Ser Gly Thr Ser Asp Leu Ile Phe Ala Asp Pro Ser Gln Leu
405 410 415
His Asp Glu Leu Ser Leu Leu Phe Gly Gln Val Lys Pro Ala Asn Val
420 425 430
Asp Tyr Phe Ile Ser Tyr Asp Glu Ala Arg Asp Gln Leu Lys Thr Ala
435 440 445
Tyr Ala Leu Ser Arg Gly Gln Asp His Val Asn Ala Leu Ser Leu Ala
450 455 460
Arg Arg Val Ile Met Ser Ile Tyr Lys Gly Leu Leu Val Lys Gln Asn
465 470 475 480
Leu Asn Ala Thr Glu Arg Gln Ala Leu Phe Phe Ala Ser Met Ile Leu
485 490 495
Leu Asn Phe Arg Glu Gly Leu Glu Asn Ser Ser Arg Val Leu Asp Gly
500 505 510
Arg Thr Thr Leu Leu Leu Met Thr Ser Met Cys Thr Ala Ala His Ala
515 520 525
Thr Gln Ala Ala Leu Asn Ile Gln Glu Gly Leu Ala Tyr Leu Asn Pro
530 535 540
Ser Lys His Met Phe Thr Ile Pro Asn Val Tyr Ser Pro Cys Met Gly
545 550 555 560
Ser Leu Arg Thr Asp Leu Thr Glu Glu Ile His Val Met Asn Leu Leu
565 570 575
Ser Ala Ile Pro Thr Arg Pro Gly Leu Asn Glu Val Leu His Thr Gln
580 585 590
Leu Asp Glu Ser Glu Ile Phe Asp Ala Ala Phe Lys Thr Met Met Ile
595 600 605
Phe Thr Thr Trp Thr Ala Lys Asp Leu His Ile Leu His Thr His Val
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Pro Glu Val Phe Thr Cys Gln Asp Ala Ala Ala Arg Asn Gly Glu Tyr
625 630 635 640
Val Leu Ile Leu Pro Ala Val Gln Gly His Ser Tyr Val Ile Thr Arg
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675 680 685
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725 730 735
Gln Leu Ala Ala Met Gly Asn Ser Thr Ile Pro Pro Phe Asn Pro Asp
740 745 750
Met His Gly Asp Asp Ser Lys Ala Val Leu Leu Phe Pro Asn Gly Thr
755 760 765
Val Val Thr Leu Leu Gly Phe Glu Arg Arg
770 775
<210> 12
<211> 138
<212> PRT
<213> 水痘-带状疱疹病毒(Varicella zoster)
<400> 12
Leu His Leu Gln Asp Asp Thr Pro Leu Phe Phe Gly Ala Lys Pro Leu
1 5 10 15
Ser Asp Val Ser Leu Ile Ile Thr Glu Pro Cys Val Ser Ser Val Tyr
20 25 30
Glu Ala Trp Asp Tyr Ala Ala Pro Pro Val Ser Asn Leu Ser Glu Ala
35 40 45
Leu Ser Gly Ile Val Val Lys Thr Lys Cys Pro Val Pro Glu Val Ile
50 55 60
Leu Trp Phe Lys Asp Lys Gln Met Ala Tyr Trp Thr Asn Pro Tyr Val
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Thr Leu Lys Gly Leu Thr Gln Ser Val Gly Glu Glu His Lys Ser Gly
85 90 95
Asp Ile Arg Asp Ala Leu Leu Asp Ala Leu Ser Gly Val Trp Val Asp
100 105 110
Ser Thr Pro Ser Ser Thr Asn Ile Pro Glu Asn Gly Cys Val Trp Gly
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Ala Asp Arg Leu Phe Gln Arg Val Cys Gln
130 135
<210> 13
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 13
His His His His His His
1 5
<210> 14
<211> 330
<212> PRT
<213> 智人(Homo sapiens)
<400> 14
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
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100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu
225 230 235 240
Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 15
<211> 326
<212> PRT
<213> 智人(Homo sapiens)
<400> 15
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg
1 5 10 15
Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Asn Phe Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Thr Val Glu Arg Lys Cys Cys Val Glu Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
100 105 110
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
115 120 125
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
130 135 140
Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
145 150 155 160
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn
165 170 175
Ser Thr Phe Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Val His Gln Asp Trp
180 185 190
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro
195 200 205
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu
210 215 220
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn
225 230 235 240
Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
245 250 255
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
260 265 270
Thr Pro Pro Met Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
275 280 285
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
290 295 300
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
305 310 315 320
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325
<210> 16
<211> 327
<212> PRT
<213> 智人(Homo sapiens)
<400> 16
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg
1 5 10 15
Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr
65 70 75 80
Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
100 105 110
Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys
115 120 125
Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val
130 135 140
Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp
145 150 155 160
Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe
165 170 175
Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp
180 185 190
Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu
195 200 205
Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg
210 215 220
Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys
225 230 235 240
Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp
245 250 255
Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys
260 265 270
Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser
275 280 285
Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser
290 295 300
Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser
305 310 315 320
Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys
325
<210> 17
<211> 324
<212> PRT
<213> 小家鼠(Mus musculus)
<400> 17
Ala Lys Thr Thr Pro Pro Ser Val Tyr Pro Leu Ala Pro Gly Ser Ala
1 5 10 15
Ala Gln Thr Asn Ser Met Val Thr Leu Gly Cys Leu Val Lys Gly Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Thr Trp Asn Ser Gly Ser Leu Ser Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Glu Ser Asp Leu Tyr Thr Leu
50 55 60
Ser Ser Ser Val Thr Val Pro Ser Ser Pro Arg Pro Ser Glu Thr Val
65 70 75 80
Thr Cys Asn Val Ala His Pro Ala Ser Ser Thr Lys Val Asp Lys Lys
85 90 95
Ile Val Pro Arg Asp Cys Gly Cys Lys Pro Cys Ile Cys Thr Val Pro
100 105 110
Glu Val Ser Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Val Leu
115 120 125
Thr Ile Thr Leu Thr Pro Lys Val Thr Cys Val Val Val Asp Ile Ser
130 135 140
Lys Asp Asp Pro Glu Val Gln Phe Ser Trp Phe Val Asp Asp Val Glu
145 150 155 160
Val His Thr Ala Gln Thr Gln Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr
165 170 175
Phe Arg Ser Val Ser Glu Leu Pro Ile Met His Gln Asp Trp Leu Asn
180 185 190
Gly Lys Glu Phe Lys Cys Arg Val Asn Ser Ala Ala Phe Pro Ala Pro
195 200 205
Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Arg Pro Lys Ala Pro Gln
210 215 220
Val Tyr Thr Ile Pro Pro Pro Lys Glu Gln Met Ala Lys Asp Lys Val
225 230 235 240
Ser Leu Thr Cys Met Ile Thr Asp Phe Phe Pro Glu Asp Ile Thr Val
245 250 255
Glu Trp Gln Trp Asn Gly Gln Pro Ala Glu Asn Tyr Lys Asn Thr Gln
260 265 270
Pro Ile Met Asn Thr Asn Gly Ser Tyr Phe Val Tyr Ser Lys Leu Asn
275 280 285
Val Gln Lys Ser Asn Trp Glu Ala Gly Asn Thr Phe Thr Cys Ser Val
290 295 300
Leu His Glu Gly Leu His Asn His His Thr Glu Lys Ser Leu Ser His
305 310 315 320
Ser Pro Gly Lys
<210> 18
<211> 330
<212> PRT
<213> 小家鼠(Mus musculus)
<400> 18
Ala Lys Thr Thr Ala Pro Ser Val Tyr Pro Leu Ala Pro Val Cys Gly
1 5 10 15
Asp Thr Thr Gly Ser Ser Val Thr Leu Gly Cys Leu Val Lys Gly Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Leu Thr Trp Asn Ser Gly Ser Leu Ser Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Asp Leu Tyr Thr Leu
50 55 60
Ser Ser Ser Val Thr Val Thr Ser Ser Thr Trp Pro Ser Gln Ser Ile
65 70 75 80
Thr Cys Asn Val Ala His Pro Ala Ser Ser Thr Lys Val Asp Lys Lys
85 90 95
Ile Glu Pro Arg Gly Pro Thr Ile Lys Pro Cys Pro Pro Cys Lys Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Asn Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Ile Lys Asp Val Leu Met Ile Ser Leu Ser Pro Ile Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser Glu Asp Asp Pro Asp Val Gln Ile Ser Trp
145 150 155 160
Phe Val Asn Asn Val Glu Val His Thr Ala Gln Thr Gln Thr His Arg
165 170 175
Glu Asp Tyr Asn Ser Thr Leu Arg Val Val Ser Ala Leu Pro Ile Gln
180 185 190
His Gln Asp Trp Met Ser Gly Lys Glu Phe Lys Cys Lys Val Asn Asn
195 200 205
Lys Asp Leu Pro Ala Pro Ile Glu Arg Thr Ile Ser Lys Pro Lys Gly
210 215 220
Ser Val Arg Ala Pro Gln Val Tyr Val Leu Pro Pro Pro Glu Glu Glu
225 230 235 240
Met Thr Lys Lys Gln Val Thr Leu Thr Cys Met Val Thr Asp Phe Met
245 250 255
Pro Glu Asp Ile Tyr Val Glu Trp Thr Asn Asn Gly Lys Thr Glu Leu
260 265 270
Asn Tyr Lys Asn Thr Glu Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Tyr Phe
275 280 285
Met Tyr Ser Lys Leu Arg Val Glu Lys Lys Asn Trp Val Glu Arg Asn
290 295 300
Ser Tyr Ser Cys Ser Val Val His Glu Gly Leu His Asn His His Thr
305 310 315 320
Thr Lys Ser Phe Ser Arg Thr Pro Gly Lys
325 330
<210> 19
<211> 107
<212> PRT
<213> 智人(Homo sapiens)
<400> 19
Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu
1 5 10 15
Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe
20 25 30
Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln
35 40 45
Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser
50 55 60
Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu
65 70 75 80
Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser
85 90 95
Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
100 105
<210> 20
<211> 106
<212> PRT
<213> 智人(Homo sapiens)
<400> 20
Gly Gln Pro Lys Ala Ala Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser
1 5 10 15
Glu Glu Leu Gln Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp
20 25 30
Phe Tyr Pro Gly Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Ser Ser Pro
35 40 45
Val Lys Ala Gly Val Glu Thr Thr Thr Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn
50 55 60
Lys Tyr Ala Ala Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys
65 70 75 80
Ser His Arg Ser Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val
85 90 95
Glu Lys Thr Val Ala Pro Thr Glu Cys Ser
100 105
<210> 21
<211> 107
<212> PRT
<213> 小家鼠(Mus musculus)
<400> 21
Arg Ala Asp Ala Ala Pro Thr Val Ser Ile Phe Pro Pro Ser Ser Glu
1 5 10 15
Gln Leu Thr Ser Gly Gly Ala Ser Val Val Cys Phe Leu Asn Asn Phe
20 25 30
Tyr Pro Lys Asp Ile Asn Val Lys Trp Lys Ile Asp Gly Ser Glu Arg
35 40 45
Gln Asn Gly Val Leu Asn Ser Trp Thr Asp Gln Asp Ser Lys Asp Ser
50 55 60
Thr Tyr Ser Met Ser Ser Thr Leu Thr Leu Thr Lys Asp Glu Tyr Glu
65 70 75 80
Arg His Asn Ser Tyr Thr Cys Glu Ala Thr His Lys Thr Ser Thr Ser
85 90 95
Pro Ile Val Lys Ser Phe Asn Arg Asn Glu Cys
100 105
<210> 22
<211> 106
<212> PRT
<213> 小家鼠(Mus musculus)
<400> 22
Gly Gln Pro Lys Ser Ser Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser
1 5 10 15
Glu Glu Leu Glu Thr Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Thr Ile Thr Asp
20 25 30
Phe Tyr Pro Gly Val Val Thr Val Asp Trp Lys Val Asp Gly Thr Pro
35 40 45
Val Thr Gln Gly Met Glu Thr Thr Gln Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn
50 55 60
Lys Tyr Met Ala Ser Ser Tyr Leu Thr Leu Thr Ala Arg Ala Trp Glu
65 70 75 80
Arg His Ser Ser Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly His Thr Val
85 90 95
Glu Lys Ser Leu Ser Arg Ala Asp Cys Ser
100 105
<210> 23
<211> 19
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 23
tgcatttgaa ctccttgcc 19
<210> 24
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 24
ccatcaatct tccacttgac 20
<210> 25
<211> 239
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 25
Gln Val Gln Leu Lys Glu Ser Gly Pro Gly Pro Val Lys Pro Ser Gln
1 5 10 15
Ser Leu Ser Leu Thr Cys Ser Val Thr Gly Tyr Ser Ile Thr Ser Gly
20 25 30
Asn Tyr Trp Asn Trp Val Arg Gln Phe Pro Gly Asn Lys Leu Glu Trp
35 40 45
Met Ala Tyr Ile Ser Tyr Asp Gly Ser Thr Tyr Tyr Asn Pro Ser Leu
50 55 60
Lys Asn Arg Ile Ser Ile Thr Arg Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Phe
65 70 75 80
Leu Lys Leu Asn Ser Val Thr Thr Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Glu Gly Tyr Tyr Gly Tyr Trp Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr
100 105 110
Leu Val Thr Val Ser Ala Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser
115 120 125
Gly Gly Gly Gly Ser Glu Asn Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Ile Leu
130 135 140
Ser Ala Ser Pro Gly Glu Lys Val Thr Met Thr Cys Arg Ala Ser Ser
145 150 155 160
Ser Val Ser Tyr Met His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Ser Ser Pro
165 170 175
Lys Pro Trp Ile Tyr Ala Thr Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro Ala
180 185 190
Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Ser Tyr Ser Leu Thr Ile Ser
195 200 205
Arg Val Glu Ala Glu Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Trp Ser
210 215 220
Ser Asn Pro Phe Thr Phe Gly Ser Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
225 230 235
<210> 26
<211> 248
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 26
Glu Val Lys Leu Val Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln
1 5 10 15
Ser Leu Ser Leu Thr Cys Ser Val Thr Gly Tyr Ser Ile Thr Ser Gly
20 25 30
Tyr Tyr Trp Asn Trp Ile Arg Gln Phe Pro Gly Asn Lys Leu Glu Trp
35 40 45
Met Gly Tyr Ile Ser Tyr Asp Gly Ser Asn Asn Tyr Asn Thr Ser Leu
50 55 60
Lys Asn Arg Ile Ser Ile Thr Arg Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Phe
65 70 75 80
Leu Lys Leu Asn Ser Val Thr Thr Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Glu Asp Val Asn Tyr Pro Pro Tyr Ala Leu Asp Tyr Trp Gly
100 105 110
Gln Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly
115 120 125
Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Ser Ile Val Met Thr Gln Thr Pro
130 135 140
Leu Ser Leu Pro Val Ser Leu Gly Asp Gln Ala Ser Ile Ser Cys Arg
145 150 155 160
Ser Ser Gln Ser Leu Val His Ser Asn Gly Asn Thr Tyr Leu His Trp
165 170 175
Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Val
180 185 190
Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser
195 200 205
Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu
210 215 220
Gly Val Tyr Phe Cys Ser Gln Ser Thr His Val Pro Trp Thr Phe Gly
225 230 235 240
Gly Gly Thr Lys Leu Glu Met Lys
245
<210> 27
<211> 241
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 27
Glu Val Lys Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Lys Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Thr Met Ser Trp Val Arg Gln Thr Pro Glu Lys Arg Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Phe Ile Ser Asn Gly Gly Asp Asn Asn Tyr Tyr Ala Asp Thr Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Ile Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Ser Ser Leu Lys Ser Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg His Asn Gly Asn Trp Gly Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr
100 105 110
Leu Val Thr Val Ser Ala Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser
115 120 125
Gly Gly Gly Gly Ser Gln Asn Val Leu Thr Gln Ser Pro Thr Thr Met
130 135 140
Ala Ala Ser Pro Gly Glu Lys Ile Thr Ile Thr Cys Ser Ala Ser Ser
145 150 155 160
Ser Ile Ser Ser Asn Tyr Leu His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Phe
165 170 175
Ser Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Arg Thr Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val
180 185 190
Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Ser Tyr Ser Leu Thr
195 200 205
Ile Gly Thr Met Glu Ala Glu Asp Val Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln
210 215 220
Gly Ser Ser Ile Pro Leu Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Ile
225 230 235 240
Lys
<210> 28
<211> 107
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 28
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Val Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Ser Ser Trp
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ala Asn Ser Phe Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105

Claims (10)

1.针对水痘-带状疱疹病毒的抗体，其包含含HCDR1、HCDR2和HCDR3氨基酸序列的重链可变区以及含LCDR1、LCDR2和LCDR3氨基酸序列的轻链可变区，其中
所述HCDR1氨基酸序列为SGNYWN，所述HCDR2氨基酸序列为YISYDGSTYYNPSLKN，所述HCDR3氨基酸序列为GYYGYWFAY，所述LCDR1氨基酸序列为RASSSVSYMH，所述LCDR2氨基酸序列为ATSNLAS，所述LCDR3氨基酸序列为QQWSSNPFT；或者
所述HCDR1氨基酸序列为SGYYWN，所述HCDR2氨基酸序列为YISYDGSNNYNTSLKN，所述HCDR3氨基酸序列为EDVNYPPYALDY，所述LCDR1氨基酸序列为RSSQSLVHSNGNTYLH，所述LCDR2氨基酸序列为KVSNRFS，所述LCDR3氨基酸序列为SQSTHVPWT；或者
所述HCDR1氨基酸序列为SYTMS，所述HCDR2氨基酸序列为FISNGGDNNYYADTVKG，所述HCDR3氨基酸序列为HNGNWGFAY，所述LCDR1氨基酸序列为SASSSISSNYLH，所述LCDR2氨基酸序列为RTSNLAS，所述LCDR3氨基酸序列为QQGSSIPLT；或者
所述HCDR1氨基酸序列为TYAMH，所述HCDR2氨基酸序列为VISYGGGNRYYAASVKG，所述HCDR3氨基酸序列为ARDNHYFFGMDV，所述LCDR1氨基酸序列为RASQGISSWLA，所述LCDR2氨基酸序列为AASSLQS，所述LCDR3氨基酸序列为QQANSFPLT、QEGFYFPIN、QQATYFPIN或QQSSYFPIA；
其中HCDR和LCDR氨基酸序列根据Kabat定义。
2.根据权利要求1所述的抗体，其中所述抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQ IDNO:1、3、5或者7所示。
3.根据权利要求1所述的抗体，其中所述抗体的轻链可变区的氨基酸序列如SEQ IDNO:2、4、6、8、9、10或者28所示。
4.根据权利要求1所述的抗体，其中
所述抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示，所述抗体的轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示；或者
所述抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示，所述抗体的轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:4所示；或者
所述抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:5所示，所述抗体的轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:6所示；
所述抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:7所示，所述抗体的轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:8所示；或者
所述抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:7所示，所述抗体的轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:9所示；或者
所述抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:7所示，所述抗体的轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:10所示；或者
所述抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:7所示，所述抗体的轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:28所示。
5.针对水痘-带状疱疹病毒的抗体，其中所述抗体的重链可变区的氨基酸序列与SEQID NO:1、3、5和7中任何一项具有至少90％的一致性，并且所述抗体的轻链可变区的氨基酸序列与SEQ ID NO:2、4、6、8、9、10和28中任何一项具有至少90％的一致性。
6.根据权利要求1-5中任一项所述的抗体，其中
所述抗体为全抗体、Fab片段、F(ab’)2片段或单链Fv片段(scFv)，优选地，所述抗体为全人源抗体；和/或
所述抗体为单克隆抗体；和/或
所述抗体还包含选自IgG1亚型、IgG2亚型或IgG4亚型的重链恒定区，优选地，所述重链恒定区为IgG1亚型；和/或
所述抗体还包含选自κ亚型或者λ亚型的轻链恒定区，优选地，所述轻链恒定区为κ亚型。
7.如权利要求1-6中任一项所述的抗体，其中
所述抗体结合水痘-带状疱疹病毒gH/gL蛋白；和/或
所述抗体介导抗体依赖性的细胞介导的细胞毒作用(ADCC)。
8.核酸分子，其编码权利要求1-7中任一项所述的抗体。
9.药物组合物，其包含权利要求1-6中任一项所述的抗体以及药学上可接受的赋形剂、稀释剂或载体。
10.权利要求1-7中任一项所述的抗体、权利要求8所述的核酸分子或权利要求9所述的药物组合物在制备用于预防或治疗水痘和带状疱疹的药物中的用途。
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