CN114891063B - 一种棕榈酰三肽-1的液相合成方法 - Google Patents

一种棕榈酰三肽-1的液相合成方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种棕榈酰三肽‑1的液相合成方法；属于药物合成技术领域；其步骤包括：以Boc‑Lys（Z）‑OH、Boc‑His‑OH、Boc‑Gly‑OH为原料，经过苄基化反应，脱保护，缩合等步骤制得多肽Pal‑Gly‑His‑Lys‑OH。在脱保护步骤中所用脱保护试剂包括以2‑甲基吲哚‑7‑甲醛为原料制得的新型磺酸化合物。本发明通过液相合成方法制得收率与纯度较高的棕榈酰三肽‑1。

Description

一种棕榈酰三肽-1的液相合成方法
技术领域
本发明属于药物合成技术领域，具体涉及一种棕榈酰三肽-1的液相合成方法。
背景技术
棕榈酰三肽-1是一种matrikine信号肽，它作用于真皮层，能促进细胞外基质如胶原蛋白和糖胺聚糖的合成，加强真皮层，使皮肤变得更厚，紧致，皱纹得到舒缓，对抗紫外线照射的能力更强。它具有氨基乙酸-组氨酸-赖氨酸（GHK）的氨基酸序列。GHK附着在棕榈酸（一种脂肪酸）上，以增加其皮肤渗透性和油溶性。
棕榈酰三肽-1能够减少细纹的出现，通过刺激胶原蛋白的产生，有助于使皮肤显得更加丰满和年轻。能够增加细胞活性并修复皮肤的天然屏障功能，以保持水分并保护人体免受异物侵害。随着年龄的增长，胶原蛋白的产量会下降，随着时间的流逝，皮肤中的胶原蛋白水平会下降。胶原蛋白可帮助皮肤保持水分，因此胶原蛋白的丢失也会导致皮肤脱水。棕榈酰三肽-1有助于增加胶原蛋白的产生时，它也会促进皮肤中的水合作用。除此之外，棕榈酰三肽-1对人皮肤成纤维细胞中的胶原蛋白、纤维连接蛋白、透明质酸的合成均有影响，可用于抗衰老化妆品的制备。
现有技术如公开号CN 108218956 A公开了一种棕榈酰三肽-1的液相合成方法；通过对棕榈酰三肽-1分段合成，分别合成了棕榈酰三肽-1序列中的二肽片段H-His-Lys（Z）-OBzl和另外一个片段Pal-Gly-OH，然后这两个片段以活化酯的方法合成了棕榈酰三肽片段，再通过氢化反应得到终产品棕榈酰三肽-1。该方法克服了固相反应中每一步必须使用保护氨基酸、溶剂种类多、试剂明显过量及溶剂难回收的缺点；但该合成方法中Boc-His（Trt）-Lys（Z）-OBzl脱Boc需要用到大量的TFA，对人体皮肤和设备具有强烈腐蚀性，容易污染环环境。
发明内容
本发明的目的在于提供一种能够得到较高收率与纯度的棕榈酰三肽-1的液相合成方法。
本发明为实现上述目的所采取的技术方案为：
一种棕榈酰三肽-1的液相合成方法，包括以下步骤：
S1：称取Boc-Lys（Z）-OH置于溶剂中，加入溴化苄与碱进行搅拌反应，萃取，合并有机相，干燥，过滤，淋洗，旋干，得到Boc-Lys（Z）-OBzl；
S2：将Boc-Lys（Z）-OBzl置于溶剂中，加入脱Boc试剂进行脱保护，得到H-Lys（Z）-OBzl；
S3：将H-Lys（Z）-OBzl置于容器中，加入溶剂、缩合剂、Boc-His-OH与碱反应试剂，设置反应温度，反应结束后，旋干溶剂，结晶，静置，过滤，洗涤，干燥，然后置于溶剂中加入脱Boc试剂进行脱保护，得到H-His-Lys（Z）-OBzl；重复氨基酸偶联步骤，按照肽顺序依次偶联Boc-Gly-OH、Pal-OH，得到Pal-Gly-His-Lys（Z）-OBzl；
S4：将Pal-Gly-His-Lys（Z）-OBzl置于溶剂中，加入氢化试剂与催化剂，搅拌反应，过滤，旋蒸，过滤，干燥，得到Pal-Gly-His-Lys-OH；
其中，步骤S2中脱Boc试剂选自MsOH、对甲苯磺酸、新型磺酸化合物、盐酸中的一种或几种混合；
新型磺酸化合物的结构式为
Figure DEST_PATH_IMAGE001
。
本发明采用新型磺酸化合物作为脱保护试剂进行脱保护能够得到收率较高的产物，同时能够在较短的时间内以及使用较少重量份的脱Boc保护试剂就能够得到收率与纯度较高的中间产物，进而得到收率与纯度较高的棕榈酰三肽-1。
需要说明的是，在本发明的一些实施例中，步骤S1中，溶剂为DMF、丙酮、乙酸乙酯、甲基叔丁基醚、二氯甲烷中的一种或几种混合。
需要说明的是，在本发明的一些实施例中，步骤S1中，碱为碳酸钠、碳酸钾、碳酸铯中的一种或几种混合。
需要说明的是，在本发明的一些实施例中，步骤S2中，脱保护试剂的浓度为10~90wt%。
需要说明的是，在本发明的一些实施例中，步骤S2中，溶剂为二氯甲烷、四氢呋喃、甲基叔丁基醚、丙酮、甲醇中的一种或几种混合。
需要说明的是，在本发明的一些实施例中，步骤S3中，缩合剂为HOBT/EDCI，DIC/HOBt，DIC/HOAt，HATU，HBTU中的一种或几种混合。
需要说明的是，在本发明的一些实施例中，步骤S4中，溶剂为醋酸、四氢呋喃、二氧六环中的一种或几种混合。
需要说明的是，在本发明的一些实施例中，步骤S4中，氢化试剂为环己烯、环己二烯、甲酸、甲酸铵、氢气中的一种或几种混合。
需要说明的是，在本发明的一些实施例中，新型磺酸化合物以2-甲基吲哚-7-甲醛为原料制得。
需要说明的是，在本发明的一些实施例中，棕榈酰三肽-1的收率高于89.62%。
本发明采用新型磺酸化合物作为脱保护试剂进行脱保护能够得到收率较高的产物，同时能够在较短的时间内以及使用较少重量份的脱Boc保护试剂就能够得到收率与纯度较高的中间产物，进而得到收率与纯度较高的棕榈酰三肽-1。因此，本发明是一种能够得到较高收率与纯度的棕榈酰三肽-1的液相合成方法。
附图说明
图1为实施例9中苯并三氮唑与苯并三氮唑衍生物的红外谱图。
具体实施方式
下面结合具体实施方式对本发明进行进一步的详细描述，给出的实施例仅为了阐明本发明，而不是为了限制本发明的范围。以下提供的实施例可作为本技术领域普通技术人员进行进一步改进的指南，并不以任何方式构成对本发明的限制。
需要说明的是，在本发明的一些实施例中，步骤S1中，称取5~15重量份Boc-Lys（Z）-OH置于15~25重量份溶剂中，加入3.5~7.5重量份溴化苄与3~12重量份碱进行搅拌反应2~4h，用10~18重量份乙酸乙酯萃取2~3次，合并有机相并用10~15重量份水洗涤2~3次，用10~15重量份饱和食盐水洗涤1~3次，合并有机相并用无水硫酸钠干燥，过滤，用乙酸乙酯淋洗，旋干，得到Boc-Lys（Z）-OBzl。
需要说明的是，在本发明的一些实施例中，步骤S2中，将5~8重量份上述Boc-Lys（Z）-OBzl置于15~25重量份溶剂中，加入2.5~3.5重量份脱Boc试剂，搅拌均匀，静置反应0.5~1.5h进行脱保护，得到H-Lys（Z）-OBzl。
需要说明的是，在本发明的一些实施例中，步骤S3中，将3.5~6.5重量份的H-Lys（Z）-OBzl置于容器中，加入20~30重量份溶剂、2.2~3.5重量份缩合剂、4.5~7.5重量份Boc-His-OH与0.75~1.5重量份碱反应试剂，当温度降至20~25℃时，再加入2.5~3.55重量份缩合剂，将温度升至30~40℃，HPLC监控原料反应完全，反应结束后，旋干溶剂，向容器中加入15~25重量份二甲基甲酰胺和10~20重量份水，在20~25℃下加入3.5~4.5重量份碳酸钠固体进行搅拌结晶，静置，过滤，用水洗涤2~3次，干燥，然后置于20~30重量份溶剂中加入2.5~3.5重量份脱Boc试剂脱保护1.5~3.5h，HPLC监控判定反应结束，得到H-His-Lys（Z）-OBzl；重复氨基酸偶联步骤，按照肽顺序依次偶联10~15重量份Boc-Gly-OH、2.5~3.5重量份Pal-OH，得到Pal-Gly-His-Lys（Z）-OBzl。
需要说明的是，在本发明的一些实施例中，步骤S4中，将步骤S3中得到的Pal-Gly-His-Lys（Z）-OBzl置于15~25重量份溶剂中，加入4.5~7.5重量份氢化试剂与0.35~0.65重量份催化剂，搅拌反应1~2h，MS检测反应完毕后，过滤除去催化剂，旋蒸以除去溶剂，过滤，干燥，得到Pal-Gly-His-Lys-OH。
需要说明的是，在本发明的一些实施例中，新型磺酸化合物的制备方法，其步骤包括：
将2-甲基吲哚-7-甲醛、无水乙醇、乙酰乙酸乙酯置于容器中，加入尿素、氨基磺酸，加热至50~60℃进行搅拌回流反应2~3h，冷却，静置，洗涤，重结晶，抽滤，清洗，干燥，得到固体物质；将上述固体物质溶于溶剂中，在冰浴下搅拌均匀，缓慢加入氯磺酸，并在40~50℃下加热回流45~60min，冷却，静置10~14h，将下层油状物质溶于无水乙醚，洗涤至pH为6~7，抽滤，干燥，得到新型磺酸化合物；其结构式为
Figure DEST_PATH_IMAGE002
。
进一步需要说明的是，在本发明的一些实施例中，按重量份计，2-甲基吲哚-7-甲醛为4~12份、无水乙醇为30~60份、乙酰乙酸乙酯为6~15份、尿素为4~8份、氨基磺酸为1.5~4.5份、溶剂为50~80份、氯磺酸为8~15份。
以下结合具体实施方式和附图对本发明的技术方案作进一步详细描述：
实施例1：
新型磺酸化合物的制备方法，其步骤包括：
按重量份计，将8重量份2-甲基吲哚-7-甲醛、45重量份无水乙醇、10重量份乙酰乙酸乙酯置于容器中，加入4.5重量份尿素、2.5重量份氨基磺酸，加热至55℃进行搅拌回流反应2h，冷却，置于0℃下静置12h，抽滤，依次用乙醚、冰水和50%乙醇/水洗涤2次，得到的产物用无水乙醇重结晶，抽滤，再用蒸馏水清洗2次，真空干燥，得到固体物质；将上述固体物质溶于60重量份二氯甲烷中，在冰浴下搅拌均匀，缓慢加入9重量份氯磺酸，并在45℃下加热回流50min，冷却，静置12h，将下层油状物质溶于无水乙醚，洗涤至pH为6.5，抽滤，真空干燥，得到新型磺酸化合物；其结构式为
Figure 653332DEST_PATH_IMAGE001
。
实施例2：
一种棕榈酰三肽-1的液相合成方法，包括以下步骤：
S1：称取7.5重量份Boc-Lys（Z）-OH置于20重量份丙酮中，加入3.9重量份溴化苄与4.5重量份碳酸钾进行搅拌反应3h，用14重量份乙酸乙酯萃取3次，合并有机相并用12重量份水洗涤3次，用14重量份饱和食盐水洗涤2次，合并有机相并用无水硫酸钠干燥，过滤，用乙酸乙酯淋洗，旋干，得到Boc-Lys（Z）-OBzl；
S2：将6.5重量份上述Boc-Lys（Z）-OBzl置于20重量份二氯甲烷中，加入2.5重量份浓度为60wt%的MsOH，搅拌均匀，静置反应1h进行脱保护，得到H-Lys（Z）-OBzl；
S3：将4.5重量份H-Lys（Z）-OBzl置于容器中，加入25重量份二氯甲烷、2.5重量份HOBt、5.5重量份Boc-His-OH与0.75重量份DIEA，当温度降至22℃时，再加入2.75重量份DIC，将温度升至35℃，HPLC监控原料反应完全，反应结束后，旋干溶剂，向容器中加入20重量份二甲基甲酰胺和15重量份水，在25℃下加入4重量份碳酸钠固体进行搅拌结晶，静置，过滤，用水洗涤2次，干燥，然后置于25重量份二氯甲烷中加入3.2重量份浓度为60wt%的MsOH，搅拌均匀，静置反应1h进行脱保护，HPLC监控判定反应结束，得到H-His-Lys（Z）-OBzl；重复氨基酸偶联步骤，按照肽顺序依次偶联12.5重量份Boc-Gly-OH、2.85重量份Pal-OH，得到Pal-Gly-His-Lys（Z）-OBzl；
S4：将步骤S3中得到的Pal-Gly-His-Lys（Z）-OBzl置于25重量份丙酮中，加入5.5重量份甲酸与0.35~0.65重量份Pd/C，搅拌反应1.5h，MS检测反应完毕后，过滤除去催化剂，旋蒸以除去溶剂，过滤，干燥，得到Pal-Gly-His-Lys-OH。
实施例3：
一种棕榈酰三肽-1的液相合成方法，与实施例2不同的是，步骤S1中，称取10重量份Boc-Lys（Z）-OH置于25重量份DMF中，加入4.5重量份溴化苄与5重量份碳酸铯进行搅拌反应4h，TLC板无原料点即判定反应结束，用18重量份乙酸乙酯萃取3次，合并有机相并用14重量份水洗涤3次，用15重量份饱和食盐水洗涤2次，合并有机相并用无水硫酸钠干燥，过滤，用乙酸乙酯淋洗，旋干，得到Boc-Lys（Z）-OBzl。
实施例4：
一种棕榈酰三肽-1的液相合成方法，与实施例2不同的是，步骤S1中，称取12.5重量份Boc-Lys（Z）-OH置于20重量份DMF中，加入4.68重量份溴化苄与11.5重量份碳酸铯进行搅拌反应3h，TLC板无原料点即判定反应结束，用20重量份乙酸乙酯萃取3次，合并有机相并用15重量份水洗涤3次，用20重量份饱和食盐水洗涤2次，合并有机相并用无水硫酸钠干燥，过滤，用乙酸乙酯淋洗，旋干，得到Boc-Lys（Z）-OBzl。
实施例5：
一种棕榈酰三肽-1的液相合成方法，与实施例2不同的是，步骤S2中，将8重量份上述Boc-Lys（Z）-OBzl置于25重量份二氯甲烷中，加入3.5重量份浓度为60wt%的MsOH，搅拌均匀，静置反应1h进行脱保护，得到H-Lys（Z）-OBzl。
实施例6：
一种棕榈酰三肽-1的液相合成方法，与实施例2不同的是，步骤S2中，将6.5重量份上述Boc-Lys（Z）-OBzl置于20重量份二氯甲烷中，加入2.5重量份浓度为60wt%的盐酸，搅拌均匀，静置反应1h进行脱保护，得到H-Lys（Z）-Obzl。
实施例7：
一种棕榈酰三肽-1的液相合成方法，与实施例2不同的是，步骤S2中，将6.5重量份上述Boc-Lys（Z）-OBzl置于20重量份二氯甲烷中，加入2.5重量份浓度为60wt%的实施例1中的新型磺酸化合物，搅拌均匀，静置反应1h进行脱保护，得到H-Lys（Z）-OBzl。
实施例8：
一种棕榈酰三肽-1的液相合成方法，与实施例7不同的是，步骤S3中，将脱保护试剂MsOH替换为实施例1中的新型磺酸化合物。
在一些实施例中，将缩合剂与苯并三氮唑衍生物共同使用，同时缩合剂与苯并三氮唑衍生物的重量比为1:0.35~0.65，两者使用特定比例进行结合使用，其缩短了缩合时间，提高了棕榈酰三肽-1的收率与纯度。
其中，苯并三氮唑衍生物由5-氯吲哚-2-羧酸乙酯改性苯并三氮唑。
在如下实施例中，苯并三氮唑衍生物的制备方法为：
将30~50重量份苯并三氮唑置于容器中，加入100~150重量份去离子水、12~18重量份氢氧化钠，在20~30min内缓慢加入30~50重量份5-氯吲哚-2-羧酸乙酯，在75~95℃下搅拌反应2~4h，冷却至室温，滴加盐酸析出沉淀，过滤，用去离子水洗涤2~3次，真空干燥，得到苯并三氮唑衍生物。
实施例9：
苯并三氮唑衍生物的制备方法为：
将40重量份苯并三氮唑置于容器中，加入120重量份去离子水、15重量份氢氧化钠，在25min内缓慢加入35重量份5-氯吲哚-2-羧酸乙酯，在85℃下搅拌反应3h，冷却至室温，滴加盐酸析出沉淀，过滤，用去离子水洗涤3次，真空干燥，得到苯并三氮唑衍生物。
实施例10：
一种棕榈酰三肽-1的液相合成方法，与实施例2不同的是，步骤S3中，将4.5重量份H-Lys（Z）-OBzl置于容器中，加入25重量份二氯甲烷、2.5重量份HOBt与苯并三氮唑衍生物混合物（其中HOBt与苯并三氮唑衍生物的重量比为1:0.35）、5.5重量份Boc-His-OH与0.75重量份DIEA，当温度降至22℃时，再加入2.75重量份DIC，将温度升至35℃，HPLC监控原料反应完全，反应结束后，旋干溶剂，向容器中加入20重量份二甲基甲酰胺和15重量份水，在25℃下加入4重量份碳酸钠固体进行搅拌结晶，静置，过滤，用水洗涤2次，干燥，然后置于25重量份二氯甲烷中加入3.2重量份浓度为60wt%的MsOH，搅拌均匀，静置反应1h进行脱保护，HPLC监控判定反应结束，得到H-His-Lys（Z）-OBzl；重复氨基酸偶联步骤，按照肽顺序依次偶联12.5重量份Boc-Gly-OH、2.85重量份Pal-OH，得到Pal-Gly-His-Lys（Z）-OBzl。
实施例11：
一种棕榈酰三肽-1的液相合成方法，与实施例10不同的是，步骤S3中，HOBt与苯并三氮唑衍生物的重量比为1:0.65。
实施例12：
一种棕榈酰三肽-1的液相合成方法，与实施例10不同的是，步骤S3中，将4.5重量份H-Lys（Z）-OBzl置于容器中，加入25重量份二氯甲烷、2.5重量份HOBt与苯并三氮唑衍生物混合物（其中HOBt与苯并三氮唑衍生物的重量比为1:0.35）、5.5重量份Boc-His-OH与0.75重量份DIEA，当温度降至22℃时，再加入2.75重量份DIC，将温度升至35℃，HPLC监控原料反应完全，反应结束后，旋干溶剂，向容器中加入20重量份二甲基甲酰胺和15重量份水，在25℃下加入4重量份碳酸钠固体进行搅拌结晶，静置，过滤，用水洗涤2次，干燥，然后置于25重量份二氯甲烷中加入3.2重量份浓度为60wt%的实施例1中的新型磺酸化合物，搅拌均匀，静置反应1h进行脱保护，HPLC监控判定反应结束，得到H-His-Lys（Z）-OBzl；重复氨基酸偶联步骤，按照肽顺序依次偶联12.5重量份Boc-Gly-OH、2.85重量份Pal-OH，得到Pal-Gly-His-Lys（Z）-OBzl。
实施例13：
1. 核磁结构表征
采用核磁共振仪（AM-400）对实施例1中的新型磺酸化合物进行核酸数据表征。
1H NMR（400MHz, DMSO）：12.49（s，1H，NH）、7.84（s，1H，OH）、7.71（d，1H，CH）、7.22（s，1H，CH）、7.06（t，1H，CH）、7.02（d，1H，CH）、6.15（s，1H，CH）、2.36（d，2H，CH2）、2.29（s，3H，CH3）、2.14（t，1H，SO3H）；因此，以2-甲基吲哚-7-甲醛为原料，进而制备新型磺酸化合物。
2. 红外结构表征
采用红外光谱仪（360FT）对实施例9中的苯并三氮唑衍生物进行红外结构表征。
图1为实施例9中苯并三氮唑与苯并三氮唑衍生物的红外谱图；由图1可以看出，在3350cm-1附近出现的特征吸收峰为N-H键的伸缩振动；在1625cm-1附近出现的特征吸收峰为C=C键的伸缩振动；在1595cm-1附近出现的特征吸收峰为N=N的伸缩振动；而苯并三氮唑衍生物在2930cm-1、2860cm-1附近出现的较强的特征吸收峰为烷基的伸缩振动；在1750cm-1附近出现的特征吸收峰为酯基的伸缩振动；由此可知，采用5-氯吲哚-2-羧酸乙酯改性苯并三氮唑制得苯并三氮唑衍生物。
3. 脱Boc试剂脱保护的性能测试
（1）试样：将实施例2、实施例6、实施例7步骤S2中H-Lys（Z）-Obzl的收率分别记为试验组1、试验组2、试验组3，其结果如表1所示。
表1 脱Boc试剂对H-Lys（Z）-Obzl收率的影响
Figure 304893DEST_PATH_IMAGE003
由表1可以看出，脱保护1h时，采用MsOH进行脱保护得到H-Lys（Z）-Obzl的收率低于84%，纯度高于98%，采用盐酸进行脱保护得到H-Lys（Z）-Obzl的收率低于76%，纯度高于97%，而采用新型磺酸化合物进行脱保护得到H-Lys（Z）-Obzl的收率高于91.5%，纯度高于98.5%，高于试验组1、试验组2，说明采用2-甲基吲哚-7-甲醛为原料，进而制备新型磺酸化合物，将其作为脱Boc试剂，在较短时间能够得到收率较高的H-Lys（Z）-Obzl。
（2）将实施例2、实施例6、实施例7步骤S2中的脱保护试剂的重量份换成3.5重量份，进而计算H-Lys（Z）-Obzl的收率。
表2 脱Boc保护试剂的重量份对H-Lys（Z）-Obzl收率的影响
Figure DEST_PATH_IMAGE004
由表2可以看出，随着重量份的增加，采用MsOH进行脱保护得到H-Lys（Z）-Obzl的收率低于88%，采用盐酸进行脱保护得到H-Lys（Z）-Obzl的收率低于79%，而采用新型磺酸化合物进行脱保护得到H-Lys（Z）-Obzl的收率高于96.5%，且收率增加量较高，说明采用2-甲基吲哚-7-甲醛为原料，进而制备新型磺酸化合物，将其作为脱Boc试剂，使用较少重量份的脱Boc保护试剂就能够得到收率较高的H-Lys（Z）-Obzl。
4. 缩合剂对产物产率的性能测试
根据实施例10中的实验步骤，将缩合剂HOBt替换为HOBt与苯并三氮唑衍生物混合物，其中HOBt与苯并三氮唑衍生物的重量比分别为1:0、1:0.25、1:0.35、1:0.45、1:0.55、1:0.65、1:0.75时，分别记为试验组A、试验组B、试验组C、试验组D、试验组E、试验组F、试验组G，计算Pal-Gly-His-Lys（Z）-OBzl的收率。
表3 Pal-Gly-His-Lys（Z）-OBzl的收率与纯度
Figure 491155DEST_PATH_IMAGE005
由表3可以看出，试验组B-F中Pal-Gly-His-Lys（Z）-OBzl的收率高于93%、纯度高于98%，对比试验组B-F与试验组A、试验组G，试验组B-F中Pal-Gly-His-Lys（Z）-OBzl的收率与纯度均高于试验组A、试验组G，说明采用将缩合剂HOBt与苯并三氮唑衍生物共同使用，且HOBt与苯并三氮唑衍生物的重量比为1:0.35~0.65时，其具有更好的缩合效果，得到收率与纯度较高的产物。
5. 棕榈酰三肽-1的收率
实施例2-8、实施例10-12中步骤S4中棕榈酰三肽-1的收率与纯度如表3所示。
表4 棕榈酰三肽-1的收率与纯度
Figure DEST_PATH_IMAGE006
由表4可以看出，实施例2-7中棕榈酰三肽-1的收率高于81.5%，纯度高于98%；实施例8中棕榈酰三肽-1的收率高于89.8，纯度高于99%；对比实施例2与实施例8，实施例8中棕榈酰三肽-1的收率与纯度均高于实施例2，说明采用新型磺酸化合物作为脱保护试剂进行脱保护能够得到收率与纯度较高的棕榈酰三肽-l。实施例10-12中棕榈酰三肽-1的收率高于87%，纯度高于99%；对比实施例10-11与实施例2，实施例12与实施例8，实施例10-11中棕榈酰三肽-1的收率与纯度均高于实施例2，实施例12中棕榈酰三肽-1的收率与纯度均高于实施例8，且显著高于实施例2，说明将缩合剂HOBt与苯并三氮唑衍生物共同使用将各氨基酸进行缩合，且采用新型磺酸化合物作为脱保护试剂进行脱保护，其进一步提高了棕榈酰三肽-1的收率与纯度。
本发明的操作步骤中的常规操作为本领域技术人员所熟知，在此不进行赘述。
以上所述的实施例对本发明的技术方案进行了详细说明，应理解的是以上所述仅为本发明的具体实施例，并不用于限制本发明，凡在本发明的原则范围内所做的任何修改、补充或类似方式替代等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种棕榈酰三肽-1的液相合成方法，包括以下步骤：
S1：称取Boc-Lys（Z）-OH置于溶剂中，加入溴化苄与碱进行搅拌反应，萃取，合并有机相，干燥，过滤，淋洗，旋干，得到Boc-Lys（Z）-OBzl；
S2：将所述Boc-Lys（Z）-OBzl置于溶剂中，加入脱Boc试剂进行脱保护，得到H-Lys（Z）-OBzl；
S3：将所述H-Lys（Z）-OBzl置于容器中，加入溶剂、缩合剂、Boc-His-OH与碱反应试剂，设置反应温度，反应结束后，旋干溶剂，结晶，静置，过滤，洗涤，干燥，然后置于溶剂中加入脱Boc试剂进行脱保护，得到H-His-Lys（Z）-OBzl；重复氨基酸偶联步骤，按照肽顺序依次偶联Boc-Gly-OH、Pal-OH，得到Pal-Gly-His-Lys（Z）-OBzl；
S4：将所述Pal-Gly-His-Lys（Z）-OBzl置于溶剂中，加入氢化试剂与催化剂，搅拌反应，过滤，旋蒸，过滤，干燥，得到Pal-Gly-His-Lys-OH；
所述步骤S2中脱Boc试剂选自新型磺酸化合物；
所述新型磺酸化合物的结构式为
Figure QLYQS_1
；
所述新型磺酸化合物以2-甲基吲哚-7-甲醛为原料制得。
2.根据权利要求1所述的一种棕榈酰三肽-1的液相合成方法，其特征是：所述步骤S1中，溶剂为DMF、丙酮、乙酸乙酯、甲基叔丁基醚、二氯甲烷中的一种或几种混合。
3.根据权利要求1所述的一种棕榈酰三肽-1的液相合成方法，其特征是：所述步骤S1中，碱为碳酸钠、碳酸钾、碳酸铯中的一种或几种混合。
4.根据权利要求1所述的一种棕榈酰三肽-1的液相合成方法，其特征是：所述步骤S2中，脱保护试剂的浓度为10~90wt%。
5.根据权利要求1所述的一种棕榈酰三肽-1的液相合成方法，其特征是：所述步骤S2中，溶剂为二氯甲烷、四氢呋喃、甲基叔丁基醚、丙酮、甲醇中的一种或几种混合。
6.根据权利要求1所述的一种棕榈酰三肽-1的液相合成方法，其特征是：所述步骤S3中，缩合剂为HOBT/EDCI，DIC/HOBt，DIC/HOAt，HATU，HBTU中的一种或几种混合。
7.根据权利要求1所述的一种棕榈酰三肽-1的液相合成方法，其特征是：所述步骤S4中，溶剂为醋酸、四氢呋喃、二氧六环中的一种或几种混合。
8.根据权利要求1所述的一种棕榈酰三肽-1的液相合成方法，其特征是：所述步骤S4中，氢化试剂为环己烯、环己二烯、甲酸、甲酸铵、氢气中的一种或几种混合。
9.根据权利要求1所述的一种棕榈酰三肽-1的液相合成方法，其特征是：所述新型磺酸化合物的制备方法，包括：
将2-甲基吲哚-7-甲醛、无水乙醇、乙酰乙酸乙酯置于容器中，加入尿素、氨基磺酸，加热至50~60℃进行搅拌回流反应2~3h，冷却，静置，洗涤，重结晶，抽滤，清洗，干燥，得到固体物质；将上述固体物质溶于溶剂中，在冰浴下搅拌均匀，缓慢加入氯磺酸，并在40~50℃下加热回流45~60min，冷却，静置10~14h，将下层油状物质溶于无水乙醚，洗涤至pH为6~7，抽滤，干燥，得到新型磺酸化合物。
10.根据权利要求9所述的一种棕榈酰三肽-1的液相合成方法，其特征是：按重量份计，所述2-甲基吲哚-7-甲醛为4~12份、无水乙醇为30~60份、乙酰乙酸乙酯为6~15份、尿素为4~8份、氨基磺酸为1 .5~4.5份、溶剂为50~80份、氯磺酸为8~15份。
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