CN114867725A

CN114867725A - Oga抑制剂化合物

Info

Publication number: CN114867725A
Application number: CN202080087697.4A
Authority: CN
Inventors: J·M·巴托洛梅-内布雷达; P·J·J·A·布伊恩斯特尔斯; A·I·德卢卡斯奥利瓦雷斯; J·E·利纳尔茨; C·马丁内兹拉门卡; D·欧里希; A·A·特拉班科-苏亚雷斯; Y·E·M·范鲁斯布鲁克; A·I·维尔特尔
Original assignee: Janssen Pharmaceutica NV
Current assignee: Janssen Pharmaceutica NV
Priority date: 2019-12-18
Filing date: 2020-12-18
Publication date: 2022-08-05
Also published as: CA3160405A1; AU2020409728A1; US20230099293A1; WO2021123294A1; IL293931A; MX2022007654A; KR20220118483A; BR112022011810A2; EP4077323A1; JP2023507184A

Abstract

本发明涉及O‑GlcNAc水解酶(OGA)抑制剂。本发明还涉及包含此类化合物的药物组合物、用于制备此类化合物和组合物的方法、以及此类化合物和组合物用于预防和治疗其中OGA的抑制是有益的障碍的用途，这些障碍是例如tau蛋白病，特别是阿尔茨海默氏病或进行性核上性麻痹；和伴有tau病理学的神经退行性疾病，特别是由C9ORF72突变引起的肌萎缩侧索硬化或额颞叶痴呆。

Description

OGA抑制剂化合物

技术领域

本发明涉及具有式(I)所示结构的O-GlcNAc水解酶(OGA)抑制剂

其中这些基团如在说明书中所定义。本发明还涉及包含此类化合物的药物组合物、用于制备此类化合物和组合物的方法、以及此类化合物和组合物用于预防和治疗其中OGA的抑制是有益的障碍的用途，这些障碍是例如tau蛋白病，特别是阿尔茨海默氏病或进行性核上性麻痹；和伴有tau病理学的神经退行性疾病，特别是由C9ORF72突变引起的肌萎缩侧索硬化或额颞叶痴呆；或α突触核蛋白病，特别是帕金森病、由帕金森病引起的痴呆(或由帕金森病引起的神经认知障碍)、路易体痴呆、多系统萎缩、以及由戈谢氏病引起的α突触核蛋白病。

背景技术

O-GlcN酰化是蛋白质的可逆修饰，其中N-乙酰基-D-葡糖胺残基被转移至丝氨酸残基和苏氨酸残基的羟基基团，产生O-GlcN酰化蛋白。已经在真核生物的胞质溶胶和细胞核中鉴定了超过1000种这样的靶蛋白。该修饰被认为调节大范围的细胞过程，包括转录、细胞骨架过程、细胞周期、蛋白酶体降解和受体信号传导。

O-GlcNAc转移酶(OGT)和O-GlcNAc水解酶(OGA)是描述向靶蛋白添加(OGT)或从靶蛋白去除(OGA)O-GlcNAc的仅有的两种蛋白质。OGA最初于1994年从脾脏制剂中纯化，1998年鉴定为由脑膜瘤表达的抗原，并且称为MGEA5，由作为细胞胞质区室中的单体的916个氨基酸(102915道尔顿)组成。它与ER相关的和高尔基体相关的糖基化过程(其对于蛋白质的运输和分泌是重要的)不同，并且不同于OGA具有酸性pH最佳值，而OGA在中性pH下显示出最高活性。

具有双天冬氨酸催化中心的OGA催化结构域位于该酶的N-末端部分，该酶的侧翼是两个柔性结构域。C-末端部分由其前面是茎结构域的推定的HAT(组蛋白乙酰转移酶结构域)组成。尚未证明HAT结构域具有催化活性。

O-GlcN酰化蛋白以及OGT和OGA本身在脑和神经元中特别丰富，表明这种修饰在中枢神经系统中起重要作用。实际上，研究证实O-GlcN酰化代表了促进神经元通讯、记忆形成和神经退行性疾病的关键调节机制。此外，已经显示OGT对于几种动物模型中的胚胎发生是必需的，并且ogt无效小鼠是胚胎致死的。OGA对于哺乳动物的发育也是必不可少的。两项独立研究表明，OGA纯合无效小鼠在出生后存活不过24-48小时。Oga缺失导致幼崽中糖原动员的缺陷，并且它在源自纯合敲除胚胎的MEF中导致基因组不稳定性相关的细胞周期停滞。杂合动物存活至成年期，但它们在转录和代谢方面均表现出改变。

已知O-GlcNAc循环中的扰动影响慢性代谢疾病，例如糖尿病以及癌症。Oga杂合性抑制了Apc-/+小鼠癌症模型中的肠道肿瘤发生，并且Oga基因(MGEA5)是一种有记录的人糖尿病易感基因位点。

此外，O-GlcNAc修饰已经在几种参与神经退行性疾病的发展和进展的蛋白质上被鉴定，并且已表明O-GlcNAc水平的变化与Tau在阿尔茨海默氏病中形成神经原纤维缠结(NFT)蛋白的相关性。此外，已经描述了帕金森病中α-突触核蛋白的O-GlcN酰化(Levine,PM,等人PNAS[美国国家科学院院刊]2019年1月29日,第116卷,第5期,第1511-1519页；Lewis,YE等人ACS Chem Biol.[ACS化学生物学]2017年4月21日,第2卷,第4期,第1020-1027页；Marotta,NP等人Nat Chem.[自然化学]2015年11月,第卷第11期,第913-20页)。

在中枢神经系统中已经描述了六种tau剪接变体。Tau在17号染色体上编码，并且其中在中枢神经系统中表达的最长剪接变体由441个氨基酸组成。这些同种型的不同之处在于位于微管结合结构域内的两个N-末端插入物(外显子2和3)和外显子10。在tau蛋白病中外显子10是值得考虑的目标，因为它具有多个突变，使得tau易于聚集，如下所述。Tau蛋白结合并稳定神经元微管细胞骨架，这对于调节细胞器沿轴突区室的细胞内运输是重要的。因此，tau在轴突的形成和维持其完整性中起重要作用。此外，还提出了树突棘生理学中的作用。

Tau聚集是多种所谓的tau蛋白病的潜在原因之一，例如PSP(进行性核上性麻痹)、唐氏综合征(DS)、FTLD(额颞叶痴呆)、FTDP-17(伴有帕金森综合征-17的额颞痴呆)、皮克氏病(Pick’s disease，PD)、CBD(皮质基底节变性)、嗜银颗粒疾病(agryophilic graindisease，AGD)和AD(阿尔茨海默氏病)。此外，tau病理学伴有其他神经退行性疾病，例如由C9ORF72突变引起的肌萎缩侧索硬化(ALS)或FTLD。在这些疾病中，tau通过过度磷酸化进行翻译后修饰，这被认为是使tau从微管分离并使其易于聚集。tau的O-GlcN酰化调节磷酸化的程度，因为携带O-GlcNAc残基的丝氨酸或苏氨酸残基不适于磷酸化。这有效地使得tau不易于从微管分离并且减少聚集成最终导致神经毒性和神经元细胞死亡的神经毒性缠结。这种机制还可以减少神经元通过脑中相互连接的回路释放的tau聚集体的细胞间扩散，最近已经讨论这会加速tau相关性痴呆的病理学。实际上，从AD患者的脑中分离的过度磷酸化的tau显示出显著降低的O-GlcN酰化水平。

施用于JNPL3 tau转基因小鼠的OGA抑制剂成功地减少了NFT形成和神经元损失而没有明显的副作用。该观察结果已在另一种tau蛋白病啮齿动物模型中得到证实，其中可诱导FTD中发现的突变tau的表达(tg4510)。OGA的小分子抑制剂的给药在减少tau聚集的形成和减弱皮质萎缩和脑室扩大方面是有效的。

此外，淀粉样蛋白前体蛋白(APP)的O-GlcN酰化有利于通过非淀粉样蛋白生成途径加工以产生可溶性APP片段并避免导致AD相关淀粉样蛋白-β(Aβ)形成的切割。

通过抑制OGA维持tau的O-GlcN酰化代表了减少上述神经退行性疾病中的tau-磷酸化和tau-聚集从而减弱或阻止神经退行性tau蛋白病-疾病的进展的潜在方法。

WO 2012/117219(萨米特公开有限公司(Summit Corp.plc.)，公开于2012年9月7日)描述了N-[[5-(羟基甲基)吡咯烷-2-基]甲基]烷基酰胺和N-烷基-2-[5-(羟基甲基)吡咯烷-2-基]乙酰胺衍生物作为OGA抑制剂。

WO 2014/159234(默克专利有限公司(Merck Patent GMBH)，公开于2014年10月2日)主要披露了在位置1处被乙酰胺基-噻唑基甲基或乙酰胺基噁唑基甲基取代基取代的4-苯基或苄基哌啶和哌嗪化合物，以及化合物N-[5-[(3-苯基-1-哌啶基)甲基]噻唑-2-基]乙酰胺；

WO 2016/0300443(神经内科公司(Asceneuron S.A.)，2016年3月3日公开)、WO2017/144633和WO 2017/0114639(神经内科公司，2017年8月31日公开)披露了1,4-双取代的哌啶或哌嗪作为OGA抑制剂；

WO 2017/144637(神经内科公司，2017年8月31日公开)披露了，更特别地，4-取代的1-[1-(1,3-苯并二氧杂环戊烯-5-基)乙基]-哌嗪；1-[1-(2,3-二氢苯并呋喃-5-基)乙基]-；1-[1-(2,3-二氢苯并呋喃-6-基)乙基]-；和1-[1-(2,3-二氢-1,4-苯并二噁英-6-基)乙基]-哌嗪衍生物作为OGA抑制剂；

WO 2017/106254(默沙东公司(Merck Sharp&Dohme Corp.)描述了取代的N-[5-[(4-亚甲基-1-哌啶基)甲基]噻唑-2-基]乙酰胺；WO 2018/217558(礼来公司(Eli Lillyand Company))描述了5-甲基-1,3,4-噁二唑-2-基，并且WO 2019/178191(比金马萨诸塞州股份有限公司(Biogen Ma Inc)描述了[(杂)芳基-3-基甲基]吡咯烷-1-基甲基-和[(杂)芳基-3-基甲基]哌啶-1-基甲基-衍生化合物作为OGA抑制剂；并且WO 2018/140299(礼来公司)披露了N-[氟-5-[[(2S,4S)-2-甲基-4-[(5-甲基-1,2,4-噁二唑-3-基)甲氧基[-1-哌啶基]甲基]噻唑-2-基]乙酰胺作为OGA抑制剂。

仍然需要具有有利的特性平衡的OGA抑制剂化合物，例如具有改善的效力、良好的生物利用度、药代动力学、和脑渗透和/或更好的毒性谱。因此，本发明的目的是提供克服这些问题中的至少一些问题的化合物。

发明内容

本发明涉及具有式(I)的化合物

及其互变异构体和立体异构形式，及其氘化形式，其中

X¹和X²各自独立地选自CR⁴和N，条件是X¹或X²中的一个是N；

R¹选自下组，该组由以下组成：任选地被各自独立地选自下组的一个或多个取代基取代的C_1-6烷基，该组由以下组成：卤代、-CN、-OC_1-4烷基、OH、-C(＝O)NR^xR^y，选自下组的5或6元杂芳基，该组由以下组成：吡唑基、咪唑基、噁唑基、异噁唑基、噻唑基、三唑基、吡啶基和嘧啶基，以及任选地被独立选择的一个或多个卤代取代基取代的C_3-6环烷基，其中该5或6元杂芳基任选地被独立选择的一个或两个C_1-4烷基取代基取代；被氧杂环丁烷基取代的C_1-6烷基，其中两个偕氢被氧杂环丁烷亚基替换的C_1-6烷基；四氢吡喃基；以及选自下组的5或6元杂芳基，该组由以下组成：吡唑基、咪唑基、噁唑基、噻唑基、三唑基、吡啶基和嘧啶基，其各自可以任选地被各自独立地选自下组的一个或两个取代基取代，该组由以下组成：卤代和C_1-4烷基；

条件是-OC_1-4烷基或-OH取代基在存在时是远离二环核的氮原子的至少两个碳原子；其中

R^x和R^y各自独立地选自下组，该组由以下组成：氢、C_1-4烷基、单卤代C_1-4烷基、多卤代C_1-4烷基、和C_3-6环烷基；或R^x和R^y连同它们所附接的氮原子一起形成选自下组的杂环基环，该组由以下组成：氮杂环丁烷基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基和吗啉基；

R²和R⁴在存在时各自独立地选自下组，该组由以下组成：氢、卤代、C_1-4烷基和C_3-6环烷基；

R³选自下组，该组由以下组成：

(a)选自下组的5或6元单环芳基或杂芳基基团，该组由以下组成：吡唑基、苯基和吡啶基；其各自被各自独立地选自下组的一个或多个取代基取代，该组由以下组成：卤代、C_1-4烷基、-CN、单卤代C_1-4烷基、多卤代C_1-4烷基、C_1-4烷氧基、单卤代C_1-4烷氧基、多卤代C_1-4烷氧基、-(C＝O)C_1-4烷基、和Het；并且其中至少一个取代基位于与将R⁴与二环核结合的NH接头呈邻位的碳原子处；或

(b)选自下组的9至10元二环杂芳基基团，该组由以下组成：1H-吲唑基、1H-苯并[d]咪唑基、1,8-萘啶基、吡唑并[1,5-a]吡啶基、咪唑并[1,2-a]吡啶基、咪唑并[1,5-a]吡啶基、咪唑并[1,5-b]哒嗪基、吲嗪基、1H-吲哚基、喹啉基、异喹啉基、和噻唑并[4,5-b]吡啶基；其任选地被各自独立地选自下组的一个或多个取代基取代，该组由以下组成：卤代、C_1-4烷基、-CN、单卤代C_1-4烷基、多卤代C_1-4烷基、C_1-4烷氧基、单卤代C_1-4烷氧基、多卤代C_1-4烷氧基、-(C＝O)C_1-4烷基、和Het；

其中Het选自下组，该组由以下组成：吡唑基、苯基、吡啶基，其任选地被各自独立地选自下组的一个或多个取代基取代，该组由以下组成：卤代、C_1-4烷基、-CN、C_1-4烷氧基；

及其药学上可接受的盐和溶剂化物；

用于作为药物使用；特别是用作用于在有需要的受试者中预防或治疗tau蛋白病，特别是选自下组的tau蛋白病的药物，该组由以下组成：阿尔茨海默氏病、进行性核上性麻痹、唐氏综合征、额颞叶痴呆、伴有帕金森综合征-17的额颞痴呆、皮克氏病、皮质基底节变性、和嗜银颗粒疾病；或伴有tau病理学的神经退行性疾病，特别是选自由C9ORF72突变引起的肌萎缩侧索硬化或额颞叶痴呆的神经退行性疾病，或用于在有需要的受试者中预防或治疗选自α突触核蛋白病的障碍，特别是帕金森病、由帕金森病引起的痴呆(或由帕金森病引起的神经认知障碍)、路易体痴呆、多系统萎缩、或由戈谢氏病引起的α突触核蛋白病。

本发明还涉及具有式(I)的化合物

及其互变异构体和立体异构形式，及其氘化形式，其中

X¹和X²各自独立地选自CR⁴和N，条件是X¹或X²中的一个是N；

R¹选自下组，该组由以下组成：未经取代的C_2-6烷基；被各自独立地选自下组的一个或多个取代基取代的C_1-6烷基，该组由以下组成：卤代、-CN、-OC_1-4烷基、OH、-C(＝O)NR^xR^y，选自下组的5或6元杂芳基，该组由以下组成：吡唑基、咪唑基、噁唑基、异噁唑基、噻唑基、三唑基、吡啶基和嘧啶基，以及任选地被独立选择的一个或多个卤代取代基取代的C_3-6环烷基，其中该5或6元杂芳基任选地被独立选择的一个或两个C_1-4烷基取代基取代；被氧杂环丁烷基取代的C_1-6烷基，其中两个偕氢被氧杂环丁烷亚基替换的C_1-6烷基；四氢吡喃基；以及选自下组的5或6元杂芳基，该组由以下组成：吡唑基、咪唑基、噁唑基、噻唑基、三唑基、吡啶基和嘧啶基，其各自可以任选地被各自独立地选自下组的一个或两个取代基取代，该组由以下组成：卤代和C_1-4烷基；

R³选自下组，该组由以下组成：

及其药学上可接受的盐和溶剂化物；

本发明例证了包含药学上可接受的载体以及上述化合物中的任一种的药物组合物。本发明例证了通过混合上述化合物中的任一种与药学上可接受的载体而制备的药物组合物。本发明例证了用于制备药物组合物的方法，该方法包括将上述化合物中的任一种与药学上可接受的载体混合。

本发明例示了预防或治疗由O-GlcNAc水解酶(OGA)的抑制介导的障碍的方法，该方法包括向有需要的受试者施用治疗有效量的上述化合物或药物组合物中的任一种。

本发明进一步例示了抑制OGA的方法，该方法包括向有需要的受试者施用预防或治疗有效量的上述化合物或药物组合物中的任一种。

本发明的一个实例是预防或治疗选自tau蛋白病的障碍的方法，特别是选自下组的tau蛋白病，该组由以下组成：阿尔茨海默氏病、进行性核上性麻痹、唐氏综合征、额颞叶痴呆、伴有帕金森综合征-17的额颞痴呆、皮克氏病、皮质基底节变性、和嗜银颗粒疾病；或伴有tau病理学的神经退行性疾病，特别是选自由C9ORF72突变引起的肌萎缩侧索硬化或额颞叶痴呆的神经退行性疾病，或预防或治疗选自α突触核蛋白病的障碍，特别是帕金森病、由帕金森病引起的痴呆(或由帕金森病引起的神经认知障碍)、路易体痴呆、多系统萎缩、或由戈谢氏病引起的α突触核蛋白病，包括向有需要的受试者施用预防或治疗有效量的上述化合物或药物组合物中的任一种。

本发明的另一个实例是上述化合物中的任一种用于在有需要的受试者中预防或治疗tau蛋白病，特别是选自下组的tau蛋白病，该组由以下组成：阿尔茨海默氏病、进行性核上性麻痹、唐氏综合征、额颞叶痴呆、伴有帕金森综合征-17的额颞痴呆、皮克氏病、皮质基底节变性、和嗜银颗粒疾病；或伴有tau病理学的神经退行性疾病，特别是选自由C9ORF72突变引起的肌萎缩侧索硬化或额颞叶痴呆的神经退行性疾病，或用于在有需要的受试者中预防或治疗选自α突触核蛋白病的障碍，特别是帕金森病、由帕金森病引起的痴呆(或由帕金森病引起的神经认知障碍)、路易体痴呆、多系统萎缩、或由戈谢氏病引起的α突触核蛋白病。

具体实施方式

本发明涉及如上文所定义的具有式(I)的化合物及其药学上可接受的加成盐和溶剂化物。具有式(I)的化合物是O-GlcNAc水解酶(OGA)的抑制剂，并且可用于预防或治疗tau蛋白病，特别是选自下组的tau蛋白病，该组由以下组成：阿尔茨海默氏病、进行性核上性麻痹、唐氏综合征、额颞叶痴呆、伴有帕金森综合征-17的额颞痴呆、皮克氏病、皮质基底节变性、和嗜银颗粒疾病；或者可用于预防或治疗伴有tau病理学的神经退行性疾病，特别是选自由C9ORF72突变引起的肌萎缩侧索硬化或额颞叶痴呆的神经退行性疾病；或者可用于预防或治疗α突触核蛋白病，特别是帕金森病、由帕金森病引起的痴呆(或由帕金森病引起的神经认知障碍)、路易体痴呆、多系统萎缩、或由戈谢氏病引起的α突触核蛋白病。

在一个特定的实施例中，本发明涉及如在本文中提及的具有式(I)的化合物及其互变异构体和立体异构形式，其中

X¹和X²各自独立地选自CR⁴和N，条件是X¹或X²中的一个是N；

R¹选自下组，该组由以下组成：未经取代的C_2-6烷基；被各自独立地选自下组的一个或多个取代基取代的C_1-6烷基，该组由以下组成：卤代、-CN、-OC_1-4烷基、OH、-C(＝O)NR^xR^y，选自下组的5或6元杂芳基，该组由以下组成：吡唑基、咪唑基、噁唑基、噻唑基、三唑基、吡啶基和嘧啶基，以及任选地被独立选择的一个或多个卤代取代基取代的C_3-6环烷基；被氧杂环丁烷基取代的C_1-6烷基，其中两个偕氢被氧杂环丁烷亚基替换的C_1-6烷基；四氢吡喃基；以及选自下组的5或6元杂芳基，该组由以下组成：吡唑基、咪唑基、噁唑基、噻唑基、三唑基、吡啶基和嘧啶基，其各自可以任选地被各自独立地选自下组的一个或两个取代基取代，该组由以下组成：卤代和C_1-4烷基；

R³选自下组，该组由以下组成：

其中Het选自下组，该组由以下组成：吡唑基、苯基、吡啶基，其任选地被各自独立地选自下组的一个或多个取代基取代，该组由以下组成：卤代、C_1-4烷基、-CN、C_1-4烷氧基。

在另一个特定的实施例中，本发明涉及如在本文中提及的具有式(I)的化合物及其互变异构体和立体异构形式，其中

X¹和X²各自独立地选自CR⁴和N，条件是X¹或X²中的一个是N；

R¹选自下组，该组由以下组成：未经取代的C_2-6烷基；被各自独立地选自下组的一个或多个取代基取代的C_1-6烷基，该组由以下组成：卤代、-CN、-OC_1-4烷基、OH、-C(＝O)NR^xR^y，选自下组的5或6元杂芳基，该组由以下组成：吡唑基、咪唑基、噁唑基、噻唑基、三唑基、吡啶基和嘧啶基，以及任选地被独立选择的一个或多个卤代取代基取代的C_3-6环烷基；四氢吡喃基；以及选自下组的5或6元杂芳基，该组由以下组成：吡唑基、咪唑基、噁唑基、噻唑基、三唑基、吡啶基和嘧啶基，其各自可以任选地被各自独立地选自下组的一个或两个取代基取代，该组由以下组成：卤代和C_1-4烷基；

条件是-OC_1-4烷基或-OH取代基在存在时是远离二环核的氮原子的至少两个碳原子；其中R^x和R^y各自独立地选自下组，该组由以下组成：氢、C_1-4烷基、单卤代C_1-4烷基、多卤代C_1-4烷基、和C_3-6环烷基；或R^x和R^y连同它们所附接的氮原子一起形成选自下组的杂环基环，该组由以下组成：氮杂环丁烷基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基和吗啉基；

R³选自下组，该组由以下组成：

(b)任选地被各自独立地选自下组的一个或多个取代基取代的1H-吲唑基基团，该组由以下组成：卤代、C_1-4烷基、-CN、单卤代C_1-4烷基、多卤代C_1-4烷基、C_1-4烷氧基、单卤代C_1-4烷氧基、多卤代C_1-4烷氧基、-(C＝O)C_1-4烷基、和Het；

在另一个实施例中，本发明涉及如在本文中提及的具有式(I)的化合物及其互变异构体和立体异构形式，其中

R¹选自下组，该组由以下组成：任选地被一个或多个卤代取代基取代的-C_1-4烷基-C(＝O)NR^xR^y；未经取代的C_2-6烷基；被各自独立地选自下组的一个或多个取代基取代的C_1-6烷基，该组由以下组成：卤代、-CN、-OC_1-4烷基、OH，选自下组的5或6元杂芳基，该组由以下组成：吡唑基、咪唑基、噁唑基、噻唑基、三唑基、吡啶基和嘧啶基，以及任选地被独立选择的一个或多个卤代取代基取代的C_3-6环烷基；四氢吡喃基；以及选自下组的5或6元杂芳基，该组由以下组成：吡唑基、咪唑基、噁唑基、噻唑基、三唑基、吡啶基和嘧啶基，其各自可以任选地被各自独立地选自下组的一个或两个取代基取代，该组由以下组成：卤代和C_1-4烷基；

条件是-OC_1-4烷基或-OH取代基在存在时是远离二环核的氮原子的至少两个碳原子；其中R^x和R^y各自独立地选自下组，该组由以下组成：氢、C_1-4烷基、单卤代C_1-4烷基、多卤代C_1-4烷基、和C_3-6环烷基；或R^x和R^y连同它们所附接的氮原子一起形成选自下组的杂环基环，该组由以下组成：氮杂环丁烷基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基和吗啉基。

R¹是任选地被一个或多个卤代取代基取代的-C_1-4烷基-C(＝O)NR^xR^y；其中R^x和R^y各自独立地选自下组，该组由以下组成：氢、C_1-4烷基、单卤代C_1-4烷基、多卤代C_1-4烷基和C_3-6环烷基；或R^x和R^y连同它们所附接的氮原子一起形成选自下组的杂环基环，该组由以下组成：氮杂环丁烷基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基和吗啉基。

R¹是任选地被一个或多个卤代取代基取代的-C_1-4烷基-C(＝O)NR^xR^y，特别是-CH₂-C(＝O)NR^xR^y；其中R^x和R^y各自独立地选自下组，该组由以下组成：氢、C_1-4烷基、单卤代C_1-4烷基、多卤代C_1-4烷基和C_3-6环烷基。

在另一个实施例中，本发明涉及如本文所述的具有式(I)的化合物，其中R¹是任选地被一个或多个卤代取代基取代的-C_1-4烷基-C(＝O)NR^xR^y，特别是-CH₂-C(＝O)NR^xR^y；其中R^x和R^y各自独立地选自下组，该组由以下组成：氢、C_1-4烷基和多卤代C_1-4烷基，特别是氢和C_1-4烷基。

在另一个实施例中，本发明涉及如本文所述的具有式(I)的化合物，其中R¹选自下组，该组由以下组成：未经取代的C_2-6烷基；被各自独立地选自下组的一个或多个取代基取代的C_1-6烷基，该组由以下组成：卤代、-CN、-OC_1-4烷基、OH、噁唑基，以及任选地被独立选择的一个或多个卤代取代基取代的C_3-6环烷基；四氢吡喃基；以及选自下组的5或6元杂芳基，该组由以下组成：吡唑基、咪唑基、噁唑基、噻唑基、三唑基、吡啶基和嘧啶基，其各自可以任选地被各自独立地选自下组的一个或两个取代基取代，该组由以下组成：卤代和C_1-4烷基。

在另一个实施例中，本发明涉及如本文所述的具有式(I)的化合物，其中R¹选自下组，该组由以下组成：未经取代的C_2-6烷基；被各自独立地选自下组的一个或多个取代基取代的C_1-6烷基，该组由以下组成：卤代、-CN、-OC_1-4烷基、OH、噁唑基，以及任选地被独立选择的一个或多个卤代取代基取代的C_3-6环烷基；以及任选地被卤代或C_1-4烷基取代的吡啶基；条件是-OC_1-4烷基或-OH取代基在存在时是远离二环核的氮原子的至少两个碳原子。

在另一个实施例中，本发明涉及如本文所述的具有式(I)的化合物，其中R¹选自下组，该组由以下组成：未经取代的C_2-6烷基；以及被各自独立地选自下组的一个或多个取代基取代的C_1-6烷基，该组由以下组成：卤代、-CN、-OC_1-4烷基、OH，以及任选地被独立选择的一个或多个卤代取代基取代的C_3-6环烷基；条件是-OC_1-4烷基或-OH取代基在存在时是远离二环核的氮原子的至少两个碳原子。

在另一个实施例中，本发明涉及如本文所述的具有式(I)的化合物，其中R¹选自下组，该组由以下组成：未经取代的C_2-6烷基，特别是C_4-6烷基；以及被各自独立地选自卤代的一个或多个取代基取代的C_1-6烷基。

在另一个实施例中，本发明涉及如本文所述的具有式(I)的化合物，其中R¹选自下组，该组由以下组成：被各自独立地选自下组的一个或多个取代基取代的C_1-6烷基，该组由以下组成：卤代、-CN、-OC_1-4烷基、OH、-C(＝O)NR^xR^y，选自下组的5或6元杂芳基，该组由以下组成：吡唑基、咪唑基、噁唑基、噻唑基、三唑基、吡啶基和嘧啶基，以及任选地被独立选择的一个或多个卤代取代基取代的C_3-6环烷基；被氧杂环丁烷基取代的C_1-6烷基，其中两个偕氢被氧杂环丁烷亚基替换的C_1-6烷基；四氢吡喃基；以及选自下组的5或6元杂芳基，该组由以下组成：吡唑基、咪唑基、噁唑基、噻唑基、三唑基、吡啶基和嘧啶基，其各自可以任选地被各自独立地选自下组的一个或两个取代基取代，该组由以下组成：卤代和C_1-4烷基；

条件是-OC_1-4烷基或-OH取代基在存在时是远离二环核的氮原子的至少两个碳原子。

在另一个实施例中，本发明涉及如本文所述的具有式(I)的化合物，其中R¹选自下组，该组由以下组成：任选地被一个或多个卤代取代基取代的-C_1-4烷基-C(＝O)NR^xR^y；被各自独立地选自下组的一个或多个取代基取代的C_1-6烷基，该组由以下组成：卤代、-CN、-OC_1-4烷基、OH，选自下组的5或6元杂芳基，该组由以下组成：吡唑基、咪唑基、噁唑基、噻唑基、三唑基、吡啶基和嘧啶基，以及任选地被独立选择的一个或多个卤代取代基取代的C_3-6环烷基；四氢吡喃基；以及选自下组的5或6元杂芳基，该组由以下组成：吡唑基、咪唑基、噁唑基、噻唑基、三唑基、吡啶基和嘧啶基，其各自可以任选地被各自独立地选自下组的一个或两个取代基取代，该组由以下组成：卤代和C_1-4烷基；

在又另一个实施例中，本发明涉及如本文所述的具有式(I)的化合物，其中R¹选自选自下组的5或6元杂芳基，该组由以下组成：吡唑基、咪唑基、噁唑基、噻唑基、三唑基、吡啶基和嘧啶基，其各自可以任选地被各自独立地选自下组的一个或两个取代基取代，该组由以下组成：卤代和C_1-4烷基。

在又另一个实施例中，本发明涉及如本文所述的具有式(I)的化合物，其中R¹选自选自下组的5或6元杂芳基，该组由以下组成：吡唑基和咪唑基，其各自可以任选地被各自独立地选自C_1-4烷基的一个或两个取代基取代。

在另一个实施例中，本发明涉及如本文所述的具有式(I)的化合物，其中R³选自下组，该组由以下组成：

(b)任选地被各自独立地选自下组的一个或多个取代基取代的1H-吲唑基，该组由以下组成：卤代、C_1-4烷基、-CN、单卤代C_1-4烷基、多卤代C_1-4烷基、C_1-4烷氧基、单卤代C_1-4烷氧基、多卤代C_1-4烷氧基、-(C＝O)C_1-4烷基、和Het；

其中Het选自下组，该组由以下组成：吡唑基、苯基、吡啶基，其任选地被各自独立地选自下组的一个或多个取代基取代，该组由以下组成：卤代、C_1-4烷基、-CN、和C_1-4烷氧基。

在另一个实施例中，本发明涉及如本文所述的具有式(I)的化合物，其中R³选自下组，该组由以下组成：(a)、(b)、和(c)：

其中R^1a、R^2a、R^1b和R^2b各自独立地选自下组，该组由以下组成：氢、卤代、C_1-4烷基、-CN、单卤代C_1-4烷基、多卤代C_1-4烷基、C_1-4烷氧基、单卤代C_1-4烷氧基、多卤代C_1-4烷氧基、-(C＝O)C_1-4烷基、和Het；条件是R^1a或R^2a中的至少一个、以及R^1b或R^2b中的至少一个不是氢；

Z¹和Z²各自独立地选自N、CH或CR^3b，条件是Z¹或Z²中的至少一个是N；

R^3a和R^3b在存在时各自独立地选自下组，该组由以下组成：卤代、C_1-4烷基、-CN、单卤代C_1-4烷基、多卤代C_1-4烷基、C_1-4烷氧基、单卤代C_1-4烷氧基、多卤代C_1-4烷氧基、-(C＝O)C_1-4烷基、和Het；其中

n代表0、1或2；

Het选自下组，该组由以下组成：吡唑基、苯基、吡啶基，其任选地被各自独立地选自下组的一个或多个取代基取代，该组由以下组成：卤代、C_1-4烷基、-CN、和C_1-4烷氧基；

R^1c和R^2c各自独立地选自下组，该组由以下组成：氢、卤代、C_1-4烷基、-CN、单卤代C_1-4烷基、多卤代C_1-4烷基、C_1-4烷氧基、单卤代C_1-4烷氧基、多卤代C_1-4烷氧基、和-(C＝O)C_1-4烷基；并且

C形成选自下组的稠合5元杂芳族环，该组由以下组成：吡唑基和咪唑基，其各自任选地被独立选择的一个或多个C_1-4烷基取代基取代。

其中R^1a、R^2a、R^1b和R^2b各自独立地选自下组，该组由以下组成：氢、卤代、C_1-4烷基、-CN、多卤代C_1-4烷基、C_1-4烷氧基、多卤代C_1-4烷氧基、-(C＝O)C_1-4烷基、和Het；条件是R^1a或R^2a中的至少一个、以及R^1b或R^2b中的至少一个不是氢；

R^3a和R^3b在存在时各自独立地选自下组，该组由以下组成：卤代、C_1-4烷基、-CN、多卤代C_1-4烷基、C_1-4烷氧基、多卤代C_1-4烷氧基、-(C＝O)C_1-4烷基、和Het；其中

n代表0或1；

R^1c和R^2c各自是氢；并且

C形成稠合5元杂芳族环，其选自任选地被一个C_1-4烷基取代的吡唑基。

在另一个实施例中，本发明涉及如本文所述的具有式(I)的化合物，其中

R³选自下组，该组由以下组成：(a)和(b)：

n代表0、1或2；并且

Het选自下组，该组由以下组成：吡唑基、苯基、吡啶基，其任选地被各自独立地选自下组的一个或多个取代基取代，该组由以下组成：卤代、C_1-4烷基、-CN、和C_1-4烷氧基。

R³选自下组，该组由以下组成：(a)和(b)：

其中R^1a、R^2a、R^1b和R^2b各自独立地选自下组，该组由以下组成：卤代、C_1-4烷基、-CN、单卤代C_1-4烷基、多卤代C_1-4烷基、C_1-4烷氧基、单卤代C_1-4烷氧基、多卤代C_1-4烷氧基、-(C＝O)C_1-4烷基、和Het；

n代表0、1或2；并且

在另一个实施例中，本发明涉及如本文所述的具有式(I)的化合物，其中R³是组(a)或(b)：

其中R^1a、R^2a、R^1b和R^2b各自独立地选自下组，该组由以下组成：卤代、C_1-4烷基、-CN、单卤代C_1-4烷基、多卤代C_1-4烷基、C_1-4烷氧基、单卤代C_1-4烷氧基、和多卤代C_1-4烷氧基；

Z¹和Z²各自独立地选自N、CH或CR^3b，条件是Z¹或Z²中的至少一个是N；并且

R^3a和R^3b在存在时各自独立地选自下组，该组由以下组成：卤代、C_1-4烷基、-CN、单卤代C_1-4烷基、多卤代C_1-4烷基、C_1-4烷氧基、单卤代C_1-4烷氧基、和多卤代C_1-4烷氧基；其中

n代表0、1或2。

n代表0、1或2。

其中R^1a、R^2a、R^1b和R^2b各自独立地选自下组，该组由以下组成：卤代、C_1-4烷基、-CN、多卤代C_1-4烷基、C_1-4烷氧基、和多卤代C_1-4烷氧基；

R^3a和R^3b在存在时各自独立地选自下组，该组由以下组成：卤代、C_1-4烷基、-CN、多卤代C_1-4烷基、C_1-4烷氧基、和多卤代C_1-4烷氧基；其中

n代表0或1。

在另一个实施例中，本发明涉及如本文所述的具有式(I)的化合物，其具有式(I-A)、(I-B)、(I-C)或(I-D)

其中每个变量如本文所定义，并且z1和z2各自独立地选自氢、氘和卤素，特别是氢。

定义

“卤代”应当表示氟、氯以及溴；“C_1-4烷基”和“C_1-6烷基”应当表示分别具有1个、2个、3个或4个碳原子，或1个、2个、3个、4个、5个或6个碳原子的直链或支链饱和烷基基团，例如甲基、乙基、1-丙基、2-丙基、丁基、1-甲基-丙基、2-甲基-1-丙基、1,1-二甲基乙基等；“C_1-4烷氧基”应当表示醚基团，其中C_1-4烷基如前所定义；如本文单独所用或用作另一个基团的一部分的“单卤代和多卤代C_1-4烷基”是指被1个、2个、3个或在有可能的情况下被如前所定义的更多个卤代原子取代的如前所定义的C_1-4烷基；“单卤代或多卤代C_1-4烷氧基”应当表示醚基团，其中单卤代或多卤代C_1-4烷基如前所定义。

一般而言，每当术语“取代”用于本发明时，除非另外指示或上下文中是明确的，否则意在指示在使用“取代”的表述中指示的原子或基团上的一个或多个氢(特别是1个至3个氢、优选地1个或2个氢、更优选地1个氢)被来自所指示基团的取代基的选择项替换，条件是未超过正常的化合价，并且该取代导致了化学稳定的化合物(即，足够稳健以承受从反应混合物分离至有用程度的纯度并且配制成治疗剂的化合物)。

如本文所用的术语“受试者”是指动物，优选地是哺乳动物，最优选地是人类，该受试者是或已经成为治疗、观察或实验的对象。因此，如本文所用，术语“受试者”涵盖患者、以及具有发展如本文所定义的疾病或病症风险的无症状或症前个体。

如本文所用的术语“治疗有效量”意指由研究员、兽医、医师或其他临床医生寻找的，在组织系统、动物或人类中引起生物学或医学应答的活性化合物或药物试剂的量，该应答包括正在被治疗的疾病或障碍的症状的减轻。如本文所用的术语“预防有效量”意指显著降低要预防的疾病或障碍发作可能性的活性化合物或药物试剂的量。

如本文所用，术语“组合物”旨在涵盖包含处于特定量的特定成分的产品，以及直接或间接地源于处于特定量的特定成分的组合的任何产品。

在上下文中，术语“具有式(I)的化合物”意指包括其加成盐、溶剂化物以及立体异构体。

在上下文中，术语“立体异构体”或“立体化学异构形式”可互换地使用。

本发明包括呈纯立体异构体形式或呈两种或更多种立体异构体的混合物的具有式(I)的化合物的所有立体异构体。

对映异构体为彼此不可重叠的镜像的立体异构体。对映异构体对的1:1混合物是外消旋体或外消旋混合物。非对映异构体(或非对映立体异构体)为不是对映异构体的立体异构体，即它们并非为镜像关系。如果化合物含有双键，则这些取代基可以呈E或Z构型。如果化合物含有双取代的环烷基基团，则这些取代基可以呈顺式或反式构型。因此，本发明包括对映异构体、非对映异构体、外消旋体、E异构体、Z异构体、顺式异构体、反式异构体及其混合物。

绝对构型是根据卡恩-英戈尔德-普雷洛格(Cahn-Ingold-Prelog)系统指定的。不对称原子处的构型由R或S规定。绝对构型未知的已拆分的化合物可以根据它们旋转平面偏振光的方向而由(+)或(-)指定。

当鉴定特定的立体异构体时，这意指所述立体异构体基本上不含其他异构体，即与小于50％、优选地小于20％、更优选地小于10％、甚至更优选地小于5％，特别是小于2％并且最优选地小于1％的其他立体异构体相关联。因此，当具有式(I)的化合物例如被指定为(R)时，这意指该化合物基本上不含(S)异构体；当具有式(I)的化合物例如被指定为E时，这意指该化合物基本上不含Z异构体；当具有式(I)的化合物例如被指定为顺式时，这意指该化合物基本上不含反式异构体。

用于在医学中使用，本发明的化合物的加成盐是指无毒性“药学上可接受的加成盐”。然而，其他盐可以适用于制备根据本发明的化合物或其药学上可接受的加成盐。化合物的适合的药学上可接受的加成盐包括可以例如通过将化合物的溶液与药学上可接受的酸的溶液混合而形成的酸加成盐，该药学上可接受的酸如盐酸、硫酸、富马酸、马来酸、琥珀酸、乙酸、苯甲酸、柠檬酸、酒石酸、碳酸或磷酸。此外，在本发明的化合物携带酸性部分时，其适合的药学上可接受的加成盐可以包括碱金属盐，例如钠盐或钾盐；碱土金属盐，例如钙盐或镁盐；以及与适合的有机配体形成的盐，例如季铵盐。

可以在药学上可接受的加成盐的制备中使用的代表性酸包括但不限于以下：乙酸、2,2-二氯乙酸、酰化氨基酸、己二酸、海藻酸、抗坏血酸、L-天冬氨酸、苯磺酸、苯甲酸、4-乙酰氨基苯甲酸、(+)-樟脑酸、樟脑磺酸、癸酸、己酸、辛酸、肉桂酸、柠檬酸、环拉酸、乙烷-1,2-二磺酸、乙磺酸、2-羟基-乙磺酸、甲酸、富马酸、半乳糖二酸、龙胆酸、葡庚糖酸、D-葡糖酸、D-葡萄糖醛酸、L-谷氨酸、β-氧代-戊二酸、乙醇酸、马尿酸、氢溴酸、盐酸、(+)-L-乳酸、(±)-DL-乳酸、乳糖酸、马来酸、(-)-L-苹果酸、丙二酸、(±)-DL-扁桃酸、甲磺酸、萘-2-磺酸、萘-1,5-二磺酸、1-羟基-2-萘甲酸、烟酸、硝酸、油酸、乳清酸、草酸、棕榈酸、双羟萘酸、磷酸、L-焦谷氨酸、水杨酸、4-氨基-水杨酸、癸二酸、硬脂酸、琥珀酸、硫酸、单宁酸、(+)-L-酒石酸、硫氰酸、对甲苯磺酸、三氟甲基磺酸以及十一碳烯酸。可以在药学上可接受的加成盐的制备中使用的代表性碱包括但不限于以下：氨、L-精氨酸、苯乙苄胺、苯乍生、氢氧化钙、胆碱、二甲基乙醇胺、二乙醇胺、二乙胺、2-(二乙基氨基)-乙醇、乙醇胺、乙二胺、N-甲基-葡糖胺、海巴明、1H-咪唑、L-赖氨酸、氢氧化镁、4-(2-羟基乙基)-吗啉、哌嗪、氢氧化钾、1-(2-羟基乙基)吡咯烷、仲胺、氢氧化钠、三乙醇胺、缓血酸胺以及氢氧化锌。

化合物的名称根据由化学文摘社(Chemical Abstracts Service)(CAS)商定的命名规则或者根据由国际纯粹与应用化学联合会(International Union of Pure andApplied Chemistry)(IUPAC)商定的命名规则来产生。

药理学

本发明的化合物及其药学上可接受的组合物抑制O-GlcNAc水解酶(OGA)并且因此可以用于治疗或预防涉及tau病理学(也称为tau蛋白病)的疾病，以及具有tau包涵体的疾病。此类疾病包括但不限于阿尔茨海默氏病、肌萎缩侧索硬化和帕金森综合征-痴呆复合征、嗜银颗粒疾病、慢性创伤性脑病、皮质基底节变性、弥散性神经原纤维缠结伴钙化、唐氏综合征、家族性英国型痴呆、家族性丹麦型痴呆、与17号染色体连锁的伴有帕金森综合征的额颞痴呆(由MAPT突变引起)、额颞叶变性(某些病例由C9ORF72突变引起)、吉斯特曼-斯召斯列疾病(

disease)、帕金森病、瓜德罗普岛帕金森综合征(Guadeloupean parkinsonism)、强直性肌营养不良、神经退行性病变伴有脑铁沉积、C型尼曼-皮克病(Niemann-Pick disease,type C)、具有神经原纤维缠结的非关岛运动神经元疾病、皮克氏病、脑炎后帕金森综合征、朊病毒蛋白脑淀粉样血管病、进行性皮层下神经胶质增生、进行性核上性麻痹、SLC9A6相关的精神发育迟滞、亚急性硬化性全脑炎、仅缠结痴呆、以及具有球状胶质包涵体的白质tau蛋白病。

本发明的化合物及其药学上可接受的组合物抑制O-GlcNAc水解酶(OGA)并且因此可以用于治疗或预防涉及α突触核蛋白病的疾病，特别是帕金森病、由帕金森病引起的痴呆(或由帕金森病引起的神经认知障碍)、路易体痴呆、多系统萎缩、或由戈谢氏病引起的α突触核蛋白病。

如本文所用，术语“治疗”旨在是指其中可能存在一种疾病的进展的减慢、中断、遏制或阻止或者症状的减轻的所有过程，但未必指示所有症状的全部消除。如本文所用，术语“预防”旨在是指其中可能存在一种疾病的发作的减慢、中断、遏制或阻止的所有过程。

本发明还涉及根据通式(I)的化合物、其立体异构形式或其药学上可接受的酸或碱加成盐，用于治疗或预防选自下组的疾病或病症，该组由以下组成：阿尔茨海默氏病、肌萎缩侧索硬化和帕金森综合征-痴呆复合征、嗜银颗粒疾病、慢性创伤性脑病、皮质基底节变性、弥散性神经原纤维缠结伴钙化、唐氏综合征、家族性英国型痴呆、家族性丹麦型痴呆、与17号染色体连锁的伴有帕金森综合征的额颞痴呆(由MAPT突变引起)、额颞叶变性(某些病例由C9ORF72突变引起)、吉斯特曼-斯召斯列疾病、瓜德罗普岛帕金森综合征、强直性肌营养不良、神经退行性病变伴有脑铁沉积、C型尼曼-皮克病、具有神经原纤维缠结的非关岛运动神经元疾病、皮克氏病、脑炎后帕金森综合征、朊病毒蛋白脑淀粉样血管病、进行性皮层下神经胶质增生、进行性核上性麻痹、SLC9A6相关的精神发育迟滞、亚急性硬化性全脑炎、仅缠结痴呆、具有球状胶质包涵体的白质tau蛋白病、帕金森病、由帕金森病引起的痴呆(或由帕金森病引起的神经认知障碍)、路易体痴呆、多系统萎缩、以及由戈谢氏病引起的α突触核蛋白病。

本发明还涉及根据通式(I)的化合物、其立体异构形式或其药学上可接受的酸或碱加成盐，用于治疗、预防、改善、控制选自下组的疾病或病症或者降低其风险，该组由以下组成：阿尔茨海默氏病、肌萎缩侧索硬化和帕金森综合征-痴呆复合征、嗜银颗粒疾病、慢性创伤性脑病、皮质基底节变性、弥散性神经原纤维缠结伴钙化、唐氏综合征、家族性英国型痴呆、家族性丹麦型痴呆、与17号染色体连锁的伴有帕金森综合征的额颞痴呆(由MAPT突变引起)、额颞叶变性(某些病例由C9ORF72突变引起)、吉斯特曼-斯召斯列疾病、瓜德罗普岛帕金森综合征、强直性肌营养不良、神经退行性病变伴有脑铁沉积、C型尼曼-皮克病、具有神经原纤维缠结的非关岛运动神经元疾病、皮克氏病、脑炎后帕金森综合征、朊病毒蛋白脑淀粉样血管病、进行性皮层下神经胶质增生、进行性核上性麻痹、SLC9A6相关的精神发育迟滞、亚急性硬化性全脑炎、仅缠结痴呆、具有球状胶质包涵体的白质tau蛋白病、帕金森病、由帕金森病引起的痴呆(或由帕金森病引起的神经认知障碍)、路易体痴呆、多系统萎缩、以及由戈谢氏病引起的α突触核蛋白病。特别地，这些疾病或病症可以特别是选自tau蛋白病，更特别是选自下组的tau蛋白病，该组由以下组成：阿尔茨海默氏病、进行性核上性麻痹、唐氏综合征、额颞叶痴呆、伴有帕金森综合征-17的额颞痴呆、皮克氏病、皮质基底节变性、和嗜银颗粒疾病；或者这些疾病或病症可以特别是伴有tau病理学的神经退行性疾病，更特别是选自由C9ORF72突变引起的肌萎缩侧索硬化或额颞叶痴呆的神经退行性疾病。

特别地，这些疾病或病症可以特别是选自α突触核蛋白病，更特别是选自下组的tau蛋白病，该组由以下组成：帕金森病、由帕金森病引起的痴呆(或由帕金森病引起的神经认知障碍)、路易体痴呆、多系统萎缩、以及由戈谢氏病引起的α突触核蛋白病。

阿尔茨海默氏病和tau蛋白病疾病的临床前状态：

近年来，美国国家老龄化研究所和国际工作组(United States(US)NationalInstitute for Aging and the International Working Group)提出了更好地确定AD临床前(无症状)阶段的指南(Dubois B等人,Lancet Neurol.[柳叶刀神经学]2014；13:614-629；Sperling,RA等人,Alzheimers Dement.[阿尔茨海默氏病与痴呆]2011；7:280-292)。假设模型假定Aβ累积和tau聚集在明显的临床损害发作前许多年开始。升高的淀粉样蛋白累积、tau聚集和AD发展的关键风险因素是年龄(即65岁或以上)、APOE基因型和家族史。大约三分之一的75岁以上的临床正常老年人表现出PET淀粉样蛋白和tau成像研究(后者目前不太先进)中Aβ或tau累积的证据。此外，观察到CSF测量中降低的Aβ水平，而CSF中未修饰的和磷酸化的tau的水平升高。在大型尸检研究中可以看到类似的发现，并且已经表明早在20岁及更年轻时就在脑中检测到tau聚集体。淀粉样蛋白阳性(Aβ+)临床上正常的个体一致地展示出在其他生物标志物上的“AD样内表型”的证据，包括功能性磁共振成像(MRI)和静息态连接两者中扰乱的功能性网络活性、氟脱氧葡萄糖¹⁸F(FDG)代谢减退、皮质变薄以及加速萎缩。累积的纵向数据也强烈地表明Aβ+临床上正常的个体认知减退和进展为轻度认知损害(MCI)和AD痴呆的风险增加。阿尔茨海默氏病的科学界达成共识，即这些Aβ+临床上正常的个体代表AD病理学连续体中的早期阶段。因此，有人认为，如果在广泛的神经退行性病变已发生之前的疾病阶段开始，用降低Aβ产生或tau聚集的治疗剂进行干预可能更有效。许多医药公司目前正在测试在前驱AD中的BACE抑制作用。

得益于不断发展的生物标志物研究，现在可以在第一症状发生之前的临床前阶段识别出阿尔茨海默氏病。所有与临床前阿尔茨海默氏病相关的不同问题，如定义和词汇、限制、自然史、进展标志物和在无症状阶段检测疾病的伦理后果，都在Alzheimer’s&Dementia[阿尔茨海默氏病与痴呆]12(2016)292-323中进行了综述。

在临床前阿尔茨海默氏病或tau蛋白病中可以识别两类个体。在PET扫描中明显具有淀粉样蛋白β或tau聚集，或者在CSF Aβ、tau和磷酸化tau方面发生改变的认知上正常的个体被定义为处于“阿尔茨海默氏病的无症状风险状态(AR-AD)”或处于“tau蛋白病的无症状状态”。据说患有家族性阿尔茨海默氏病的完全渗透性显性常染色体突变的个体患有“症前阿尔茨海默氏病”。已经针对多种形式的tau蛋白病描述了tau蛋白内的显性常染色体突变。

因此，在一个实施例中，本发明还涉及根据通式(I)的化合物，其立体异构形式或其药学上可接受的酸或碱加成盐，用于控制或降低临床前阿尔茨海默氏病、前驱性阿尔茨海默氏病、或在不同形式的tau蛋白病中观察到的与tau相关的神经退行性病变的风险。

还研究了帕金森病的前驱性状态。因此，在一个实施例中，本发明还涉及根据通式(I)的化合物，其立体异构形式或其药学上可接受的酸或碱加成盐，用于控制或降低前驱性帕金森病的风险。

如在上文已经提及的，术语“治疗”未必指示所有症状的全部消除，而是还可以指在上面提及的任何障碍中的对症治疗。鉴于具有式(I)的化合物的效用，提供治疗罹患任一种上文中提及的疾病的受试者如温血动物(包括人类)的方法，或预防受试者如温血动物(包括人类)罹患任一种上文中提及的疾病的方法。

所述方法包括向受试者如温血动物(包括人类)施用，即，全身施用或局部施用，优选口服施用预防或治疗有效量的具有式(I)的化合物、其立体异构形式、其药学上可接受的加成盐或溶剂化物。

因此，本发明还涉及用于预防和/或治疗任何上文中提及的疾病的方法，该方法包括向有需要的受试者施用预防或治疗有效量的根据本发明的化合物。

本发明还涉及用于调节O-GlcNAc水解酶(OGA)活性的方法，该方法包括向有需要的受试者施用预防或治疗有效量的根据本发明的和如权利要求书中所定义的化合物或根据本发明的和如权利要求书中所定义的药物组合物。

治疗方法还可包括以每天一到四次摄入之间的方案施用活性成分。在这些治疗方法中，根据本发明的化合物优选地在施用之前进行配制。如在下文中所述的，适合的药物配制品通过已知程序使用熟知并且容易可得的成分来制备。

可适合于治疗或预防上面提及的任何障碍或其症状的本发明的化合物可以单独施用或与一种或多种另外的治疗剂组合施用。联合疗法包括：含有具有式(I)的化合物以及一种或多种另外的治疗剂的单个药物剂量配制品的施用，以及具有式(I)的化合物和以其自身分开的药物剂量配制品存在的每种另外的治疗剂的施用。例如，可以向患者施用一起处于单个口服剂量组合物(如片剂或胶囊)中的具有式(I)的化合物和治疗剂，或可以将每种药剂以分开的口服剂量配制品施用。

技术人员将熟悉本文提及的疾病或病症的替代性命名、疾病分类学以及分类系统。例如，美国精神病学协会(American Psychiatric Association)精神障碍诊断和统计手册(Diagnostic&Statistical Manual of Mental Disorders，DSM-5^TM)第五版采用术语如神经认知障碍(NCD)(重度和轻度)，特别是由阿尔茨海默氏病引起的神经认知障碍。技术人员可以使用此类术语作为用于一些本文提及的疾病或病症的替代性命名。

药物组合物

本发明还提供了用于预防或治疗其中O-GlcNAc水解酶(OGA)的抑制是有益的疾病的组合物，这些疾病如阿尔茨海默氏病、进行性核上性麻痹、唐氏综合征、额颞叶痴呆、伴有帕金森综合征-17的额颞痴呆、皮克氏病、皮质基底节变性、嗜银颗粒疾病、肌萎缩侧索硬化、由C9ORF72突变引起的额颞叶痴呆、帕金森病、由帕金森病引起的痴呆(或由帕金森病引起的神经认知障碍)、路易体痴呆、多系统萎缩、或由戈谢氏病引起的α突触核蛋白病，所述组合物包含治疗有效量的根据式(I)的化合物以及药学上可接受的载体或稀释剂。

虽然活性成分可以单独施用，但优选地其作为药物组合物呈现。因此，本发明进一步提供了药物组合物，该药物组合物包含根据本发明的化合物以及药学上可接受的载体或稀释剂。该载体或稀释剂在与该组合物的其他成分相容的意义上必须是“可接受的”并且对于其接受者是无害的。

可以通过制药领域所熟知的任何方法来制备本发明的药物组合物。治疗有效量的呈碱形式或加成盐形式的作为活性成分的特定化合物与药学上可接受的载体组合成紧密混合物，该载体可以取决于施用所希望的制剂形式而采用多种多样的形式。这些药物组合物希望为适合于、优选地适合于全身施用(如口服、经皮或肠胃外施用)；或局部施用(如经由吸入、鼻喷雾、滴眼剂或经由霜剂、凝胶剂、洗发剂等)的单一剂型。例如，在制备为口服剂型的组合物时，可以采用任何常见的药物介质，在口服液体制剂(如悬浮液、糖浆剂、酏剂和溶液剂)的情况下，采用例如像水、二醇类、油类、醇类等；或在散剂、丸剂、胶囊剂和片剂的情况下，采用固体载体如淀粉、糖、高岭土、润滑剂、粘合剂、崩解剂等。片剂和胶囊剂由于其施用简易性而代表了最有利的口服剂量单位形式，在该情况下显然采用固体药物载体。对于肠胃外组合物而言，载体通常将至少在很大程度上包含无菌水，但也可以包括其他成分例如以辅助溶解性。例如可制备可注射溶液，其中载体包含盐溶液、葡萄糖溶液或盐水和葡萄糖溶液的混合物。也可以制备可注射悬浮液，在这种情况下可以采用适当的液体载体、助悬剂等。在适合于经皮施用的组合物中，载体任选地包含渗透增强剂和/或适合的可湿润剂，任选地与小比例的具有任何性质的适合的添加剂组合，这些添加剂不会对皮肤造成任何显著有害作用。所述添加剂可以促进向皮肤施用并且/或者可以有助于制备所希望的组合物。这些组合物能够以不同方式，例如作为透皮贴剂、作为滴剂或作为软膏剂施用。

特别有利的是，将上述药物组合物以剂量单位形式配制，以实现施用的简易性和剂量的均匀性。如本说明书和权利要求书中所用的剂量单位形式在本文中是指适合作为单位剂量的物理离散单位，每一单位含有经计算以与所希望的药物载体结合而产生所希望的治疗效果的预定量的活性成分。此类剂量单位形式的实例是片剂(包括刻痕或包衣片剂)、胶囊剂、丸剂、散剂包、糯米纸囊剂、可注射溶液或悬浮液、茶匙剂、汤匙剂等，以及分离的多个这些剂量单位形式。

如本领域的技术人员所熟知的，施用的确切剂量和频率取决于所使用的具有式(I)的特定化合物，所治疗的特定病症，所治疗的病症的严重程度，特定患者的年龄、体重、性别、障碍程度以及总体身体健康状况，以及个体可以服用的其他药物。此外，显而易见的是，所述有效日用量可以降低或提高，这取决于所治疗的受试者的应答和/或取决于给出本发明的化合物处方的医生的评估。

取决于施用模式，该药物组合物将包含按重量计从0.05％至99％，优选地按重量计从0.1％至70％，更优选地按重量计从0.1％至50％的活性成分，以及按重量计从1％至99.95％，优选地按重量计从30％至99.9％，更优选地按重量计从50％至99.9％的药学上可接受的载体，所有的百分数都基于该组合物的总重量。

本发明的化合物可以用于全身施用(如口服、经皮或肠胃外施用)；或局部施用(如经由吸入、鼻喷雾、滴眼剂或经由霜剂、凝胶剂、洗发剂等)。化合物优选地口服施用。如本领域的技术人员所熟知的，施用的确切剂量和频率取决于所使用的根据式(I)的特定化合物，所治疗的特定病症，所治疗的病症的严重程度，特定患者的年龄、体重、性别、障碍程度以及总体身体健康状况，以及个体可以服用的其他药物。此外，显而易见的是，所述有效日用量可以降低或提高，这取决于所治疗的受试者的应答和/或取决于给出本发明的化合物处方的医生的评估。

可以与载体材料组合以产生单一剂型的具有式(I)的化合物的量将取决于所治疗的疾病、哺乳动物种类以及特定施用模式而变化。然而，作为一般指导，本发明的化合物的适合的单位剂量可以例如优选地含有0.1mg至约1000mg之间的活性化合物。优选的单位剂量是在1mg至大约500mg之间。更优选的单位剂量是在1mg至大约300mg之间。甚至更优选的单位剂量是在1mg至大约100mg之间。这样的单位剂量可以每天超过一次地施用，例如一天2、3、4、5或6次，但是优选地每天1次或2次，这样使得对于一个70kg的成人每次施用的总剂量是每kg受试者体重在0.001至大约15mg的范围中。优选的剂量是每次施用每kg受试者体重0.01至约1.5mg，并且此类疗法可以持续多个星期或月，并且在一些情况中，持续多年。然而，应当理解，任何特定患者的具体剂量水平取决于各种因素，包括采用的特定化合物的活性；所治疗的个体的年龄、体重、总体健康状况、性别和饮食；施用时间和途径；排泄速率；先前施用的其他药物；及进行医疗的特定疾病的严重程度，如本领域技术人员所理解的。

典型剂量可以是一天服用一次或一天多次的一片1mg至约100mg片剂或1mg至约300mg，或者一天服用一次的、并且含有在比例上含量较高的活性成分的一粒延时释放(time-release)的胶囊或片剂。延时释放效应可以通过在不同的pH值下溶解的胶囊材料、通过经渗透压造成的缓慢释放的胶囊、或者通过控制释放的任何其他已知手段来获得。

如本领域技术人员将理解的，在一些情况下有必要使用这些范围外的剂量。此外，应当注意临床医生或治疗医师结合个体患者应答将知道如何以及何时开始、中断、调节或终止治疗。

本发明还提供了试剂盒，其包含根据本发明的化合物、处方信息(也称为“说明书”)、泡罩包装或瓶、以及容器。此外，本发明提供了试剂盒，其包含根据本发明的药物组合物、处方信息(也称为“说明书”)、泡罩包装或瓶、以及容器。处方信息优选包括关于施用根据本发明的化合物或药物组合物而给患者的建议或指导。特别地，处方信息包括如下给患者的建议或指导：关于根据本发明的所述化合物或药物组合物的施用，关于如何使用根据本发明的化合物或药物组合物，以在有需要的受试者中预防和/或治疗tau蛋白病。因此，在一个实施例中，本发明提供了套装试剂盒，其包含具有式(I)的化合物或其立体异构体，或其药学上可接受的盐或溶剂化物，或包含所述化合物的药物组合物，以及用于预防或治疗tau蛋白病的指导。本文提及的试剂盒特别地可以是适于商业销售的药物包装。

对于以上提供的组合物、方法以及试剂盒，本领域技术人员将理解，用于各个的优选化合物是根据以上优选提到的那些化合物。用于组合物、方法和试剂盒的其他优选化合物是在以下非限制性实例中提供的那些化合物。

实验部分

在下文中，术语“m.p.”意指熔点，“min”意指分钟，“ACN”意指乙腈，“aq.”意指水性，“BrettPhos”意指[(2-二-环己基膦基-3,6-二甲氧基-2′,4′,6′-三异丙基-1,1′-联苯基)-2-(2′-氨基-1,1′-联苯基)]甲磺酸钯(II)，“DAST”意指(二乙基氨基)三氟化硫，“DCM”意指二氯甲烷，“DIAD”意指偶氮二甲酸二异丙酯，“DIPE”意指二异丙醚，“DMF”意指二甲基甲酰胺，“DMA”意指N,N-二甲基乙酰胺，“DMSO”意指二甲基亚砜，“EDC-HCl”意指N-(3-二甲基氨基丙基)-N′-乙基碳二亚胺盐酸盐，“FCC”意指快速柱色谱法，“HOBt”意指1-羟基苯并三唑，“OL”意指有机层，“PdCl₂(dppf)₂”意指[1,1′-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)与二氯甲烷的络合物，“Pd(PPh₃)₄”意指四(三苯基膦)钯(0)，“Pd₂(dba)₃”意指三(二亚苄基丙酮)二钯(0)，“X-Phos”意指2-二环己基膦基-2',4',6'-三-异丙基-1,1'-联苯基，“Xant-Phos”意指4,5-双(二苯基膦基)-9,9-二甲基呫吨，“r.t.”或“RT”意指室温，“rac”或“RS”意指外消旋，“LC-MS”意指液相色谱法/质谱法，“HPLC”意指高效液相色谱法，“r.m.”意指反应混合物，“RP”意指反相，“R_t”意指保留时间(以分钟计)，“MIK”意指甲基异丁基酮，“[M+H]⁺”意指化合物的游离碱的质子化质量，“wt”意指重量，“EtOAc”意指乙酸乙酯，“MeOH”意指甲醇，“NCS”意指N-氯代琥珀酰亚胺，“RBF”意指圆底烧瓶，“sat”意指饱和，“soltn”或“sol.”意指溶液，“THF”意指四氢呋喃，“TPP”意指三苯基膦。

除非另外指明，否则无论何时在本文中表明符号“RS”，其都是指化合物是在所指示中心的外消旋混合物。当将一种或多种混合物分离时，已经将在一些化合物中心的立体化学构型指定为“R”或“S”；对于一些化合物，尽管该化合物本身已经作为单一的立体异构体被分离并且是对映异构体纯的/非对映体纯的，但是当绝对立体化学未确定时，已经将在所指示中心的立体化学构型指定为“R*”或“S*”。通过由超临界流体色谱法(SFC)分析外消旋混合物，随后SFC比较该一种或多种分离的对映异构体，来确定在本文中报道的化合物的对映异构体过量。

微波辅助的反应是在单模式反应器中进行的：InitiatorTM Sixty EXP微波反应器(拜泰齐公司(Biotage AB))。

使用试剂级溶剂，在硅胶60F254板(默克公司(Merck))上进行薄层色谱法(TLC)。使用标准技术，在硅胶上进行开口柱色谱法，粒度

网目＝230-400(默克公司)。

使用易连接筒柱，在不规则硅胶(粒度15μm-40μm)上(正相一次性快速柱)，在以下不同的快速系统上运行自动快速柱色谱法：来自阿尔钦仪器公司(Armen Instrument)的SPOT或LAFLASH系统、或来自因特奇美拉公司(Interchim)的

430evo系统、或来自安捷伦公司(Agilent)的971-FP系统、或来自拜泰齐公司的Isolera1SV系统。

中间体1

2-(4-氯-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-1-基)-N,N-二甲基乙酰胺

在RT下，在氮气气氛下，将K₂CO₃(22.73g，164mmol)添加至4-氯-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶(21.05g，0.14mol)在DMF(426ml)中的搅拌悬浮液中。然后，逐滴添加在DMF(100ml)中的2-氯-N,N-二甲基乙酰胺(14.83mL，0.14mol)并将混合物在70℃下搅拌16h。然后，将混合物过滤并用CH₃CN洗涤。将滤饼丢弃，并将滤液在真空中蒸发。向残余物中添加DCM并将固体滤出并用DCM洗涤以产出淡黄色固体。将滤液蒸发并向残余物中再次添加DCM。将固体滤出并用DMC洗涤以产出呈淡绿色的固体。将这两种固体分别通过快速柱色谱法(二氧化硅；在MeOH中的7M氨溶液，在DCM中，0/100至7/93)纯化。收集所希望的级分并在真空中蒸发以产出呈固体的I-1(14.94g，46％)。

中间体2

叔丁基2-(4-氯-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-1-基)乙酸

向DMF(40mL)、4-氯-1H-咪唑并(4,5-c)吡啶(1.0g，6.5mmol)和K₂CO₃(1.5g，6.51mmol)的混合物中添加溴乙酸叔丁酯(1.18mL，7.81mmol)，并将其在RT下搅拌16h。将溶剂在真空中蒸发并将残余物溶解在EtOAc和水中。将有机层用水(x2)和盐水洗涤，然后分离，干燥(MgSO4)，过滤并将溶剂在真空中蒸发。将粗产物通过快速柱色谱法(二氧化硅，在庚烷中的EtOAc 0/100至80/20)纯化，以从DIPE研磨后产出呈固体的I-2(1.25g，66％)。

从所指示的中间体和试剂以类似的方式合成以下中间体：

中间体12

2-(4-氯咪唑并[4,5-c]吡啶-1-基)-N-甲基-N-(三氘甲基)乙酰胺

在0℃下，在氮气下，将氢化钠[7646-69-7](在矿物油中的60％分散体，39mg，0.97mmol)添加至I-11(200mg，0.89mmol)在干N,N-二甲基甲酰胺[68-12-2](3mL)中的搅拌溶液中。将混合物搅拌5min，添加碘甲烷[74-884](60μL，2.28g/mL,0.97mmol)并将RM(反应混合物)在RT下搅拌20h。在此之后，将混合物用饱和NH4Cl水溶液淬灭并用EtOAc萃取水相。将有机层分离，经MgSO4干燥，过滤，并将溶剂在真空中蒸发。将所得残余物通过硅胶快速柱色谱法，使用洗脱液(梯度：在DCM中的MeOH 0/100至7/95)纯化以产出呈白色固体的I-12(91％纯度，64％)。

中间体13

4-氯-1-(2,2-二氟丙基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶

在0℃下，将DIAD(0.96mL，4.9mmol)添加至4-氯-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶(0.50g，3.26mmol)、2,2-二氟丙醇(0.47g，4.88mmol)和TPP(1.28g，4.88mmol)在THF(80mL)中的搅拌且冷却(0℃)的溶液中。将混合物在0℃下搅拌30min，并然后在RT下搅拌。没有形成产物。将混合物加热至60℃过夜。观察到2种异构体。将产物在硅胶(洗脱液：在DCM中的0-2％MeOH)上纯化。在这种洗脱体系中，极性较高的异构体是所希望的异构体。将其他异构体首先从柱上洗脱，并与三苯基膦氧化物共洗脱且不经纯化。将极性较高的所希望的异构体在RP((固定相：RP XBridge制备型C18 OBD-10μm，30x150mm，流动相：在水中的0.25％NH₄HCO₃溶液，CH₃CN)上再纯化。将纯级分蒸发以给出I-13(130mg，17％)。

中间体14

2-氯-6-甲基-4-(三氟甲基)盐酸苯胺

向2-甲基-4-(三氟甲基)苯胺(5g，0.029mol)在DMF(50mL)中的搅拌溶液(20℃)中以小部分添加NCS(4.28g，0.031mol)。将随后的溶液加热至50℃持续2h，然后冷却并在真空中浓缩。将残余物用DCM稀释并用饱和K₂CO₃溶液(2x)处理，并将OL经MgSO₄干燥，过滤并在真空中浓缩以提供仍含有DMF的棕褐色油状物。将其通过硅胶色谱法(使用80g redisep快速柱，以在庚烷中的0-40％EtOAc洗脱)纯化以提供棕褐色油状物(5.6g，产率93.6％)。将其溶解在DIPE中并用在i-PrOH中的6M HCl处理并搅拌过夜。通过过滤和干燥将亮白色固体收集以提供I-14(5.6g，产率80％)。

中间体15

2-异丙基-4-甲基吡啶-3-胺

在N₂流下，将Pd(PPh₃)₄(45.1g，39.0mmol)添加至2-溴-4-甲基吡啶-3-胺(73.0g，390mmol)和异丙烯基硼酸频哪醇酯(78.7g，468mmol)在二噁烷(741mL)和NaHCO₃水溶液(742mL，1M，742mmol)中的处于3颈RBF中的混合物中。将RM在100℃下搅拌过夜，然后将其冷却至RT，通过

过滤，用EtOAc洗涤并分离各层。将水层再次用EtOAc(2x)萃取，并将合并的有机层用盐水洗涤，经MgSO₄干燥，并在真空下浓缩以给出呈深黄色油状物的粗产物。将粗产物溶解在DCM中，然后冷却至0℃，并然后添加HCl(400mL，2M，800mmol)并将所得混合物在0℃下搅拌20min。将水层再次用EtOAc(2x)萃取，并将合并的有机层用盐水洗涤，经MgSO₄干燥，并在真空下浓缩以提供呈深黄色油状物的粗产物。将粗产物溶解在DCM中，然后冷却至0℃，并然后添加HCl(400mL，2M，800mmol)并将所得混合物在0℃下搅拌20min。分离水层，然后用DCM(3x)萃取。将合并的水层置于圆底烧瓶中，与DCM(200mL)混合，然后冷却至0℃。分批添加Na₂CO₃(87g，82mmol)，搅拌5min，然后添加100mL水。将所得混合物搅拌20min，然后分离有机层。将水层用DCM(2x)萃取。将合并的有机层干燥(MgSO₄)，过滤并蒸发，以产出4-甲基-2-(丙-1-烯-2-基)吡啶-3-胺(55.7g，96％)，将其原样用于下一步骤。

向4-甲基-2-(丙-1-烯-2-基)吡啶-3-胺(24.0g，0.162mol)在EtOH(687mL)中的溶液中添加Pd/C(10％，2.1g，1.9mmol)，然后将其在H₂气氛下搅拌8小时。将悬浮液通过

过滤，并在真空中浓缩以产出黄色油状物(24g)。将其在硅胶上，使用洗脱液(梯度：在DCM中的0-2％MeOH)纯化。收集所希望的级分，并将溶剂蒸发，以给出呈油状物的I-15(18.8g，77％)。

中间体16

2,6-二氯-4-(三氟甲氧基)苯胺

将4-(三氟甲氧基)苯胺(1.15mL，1.31g/mL，8.47mmol)溶解在DMF(27mL)中。添加NCS(1.24g，9.32mmol)，并然后将反应在60℃下搅拌4hr。添加另外的NCS(0.1当量)，并将混合物在60℃下再搅拌2h。将混合物用饱和NaHCO₃稀释并用EtOAc萃取。将有机层分离，干燥(MgSO4)，过滤，并将溶剂在真空中蒸发。将粗产物通过快速柱色谱法(二氧化硅；在庚烷中的EtOAc 0/100至20/80)纯化。收集所希望的级分并在真空中浓缩以产出呈橙色粘稠固体的I-16(1.97g，产率93％)。

中间体17

2,6-二甲基-4-(三氟甲基)苯胺

将2,6-二溴-4-(三氟甲基)苯胺[72678-19-4](63.8g，200mmol)在干THF(1000mL)中的处于3L 4颈烧瓶中的混合物用氮气脱气10min。添加双(三叔丁基膦)钯(0)[53199-31-8](3.0g，5.87mmol)，并然后用注射器添加甲基氯化锌[5158-46-3](300mL，2M，600mmol)(放热反应，温度50℃)，并将混合物搅拌1h同时冷却至室温。将r.m.用100ml的水小心地分解。将溶液通过

过滤，并将有机物蒸发(30℃，100mm Hg)。向该水性残余物中添加更多水(200mL)，并将残余物用DCM萃取，并然后将有机层在MgSO₄上干燥，过滤并蒸发。在减压下，将残余物蒸馏(浴温125℃，6mm Hg)。这提供了呈油状物的I-17的一个级分(25.04g，66％)，bp 6mm Hg，78℃-82℃。

中间体18

2-[4-[2,6-二甲基-4-(三氟甲基)苯胺基]咪唑并[4,5-c]吡啶-1-基]乙酸

将I-7(389mg，2.05mmol)和Cs₂CO₃[534-17-8](1.217g，3.735mmol)添加至I-2(500mg，1.87mmol)在tBuOH[75-65-0](31mL)中的溶液中。最后，添加BrettPhos[1470372-59-8](102mg，0.11mmol)并将混合物在100℃下，在氮气气氛下加热16h。在此之后，将RM在减压下浓缩并将所得残余物溶解在水中。将水性溶液用DCM(3x)萃取，然后将合并的OL经MgSO₄干燥，过滤并将溶剂在真空中蒸发。将所得残余物通过反相(Phenomenex Gemini C18100x30mm 5μm柱；从81％[25mM NH₄HCO₃]-19％[ACN:MeOH(1:1)]至45％[25mM NH₄HCO₃]-55％[ACN:MeOH(1:1)])纯化以产出呈白色固体的305mg(44％)的中间体18。

中间体19

4-氯-1-(5-氟吡啶-2-基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶

在RT下，将K₂CO₃(540mg，3.91mmol)添加至4-氯-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶[2770-01-6](600mg，3.91mmol)和2,5-二氟吡啶[84476-99-3](462μL，1.27g/mL，5.12mmol)在DMF(9mL)中的搅拌溶液中。然后，将反应混合物在160℃下搅拌18h。将混合物冷却至RT并将溶剂在真空中去除。将残余物通过快速柱色谱法(二氧化硅；在庚烷中的EtOAc 0/100至100/0)纯化。收集所希望的级分并在真空中浓缩以产出呈白色固体的I-19(142mg，15％)。

中间体20

2-异丙基-6-甲基-4-(三氟甲基)苯胺

将2-甲基-4-(三氟甲基)苯胺[67169-22-6](1g，5.71mmol)溶解在DMF(20mL)中。将反应在0℃下冷却。添加N-溴代琥珀酰亚胺(1.12g，6.28mmol)。将混合物升温至r.t.并在rt下搅拌16hr。添加EtOAc和饱和NaHCO₃，将有机层分离，用水洗涤并经MgSO₄干燥。将溶液过滤，并将所有挥发物在真空中蒸发。将粗产物通过快速柱色谱法(二氧化硅；在庚烷中的EtOAc 0/100至20/80)纯化。收集所希望的级分并在真空中浓缩以产出呈棕色粘稠油状物的2-溴-6-甲基-4-(三氟甲基)苯胺(1.38g，94％)。

将碳酸铯(2.15g，6.61mmol)添加至预先用氮气脱气5min的[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)二氯甲烷[95464-05-4](135mg，0.17mmol)在水(2.5mL)和1,4-二噁烷(20mL)中的搅拌溶液中。将混合物在rt下搅拌5min，然后顺序添加2-溴-6-甲基-4-(三氟甲基)苯胺(700mg，2.76mmol)和三氟(丙-1-烯-2-基)硼酸钾[395083-14-4](612mg，4.13mmol)。将反应混合物在95℃下搅拌16h。将混合物用饱和NaHCO₃稀释并用EtOAc萃取。将有机层分离，干燥(MgSO₄)，过滤，并将溶剂在真空中蒸发。将粗产物通过快速柱色谱法(二氧化硅；在庚烷中的EtOAc 0/100至10/90)纯化。收集所希望的级分并在真空中浓缩以产出呈黄色油状物的2-甲基-6-(丙-1-烯-2-基)-4-(三氟甲基)苯胺(416mg，95％)。

在RT下，在氮气气氛下，将钯碳(66mg，0.062mmol)添加至2-甲基-6-(丙-1-烯-2-基)-4-(三氟甲基)苯胺(416mg，1.93mmol)在甲醇(20mL)中的搅拌溶液中。然后，用氢替换氮气气氛，并将反应混合物在RT下搅拌16h。将混合物经

垫过滤并用MeOH/DCM混合物洗涤，然后将溶剂在真空中去除以产出呈棕色油状物的2-异丙基-6-甲基-4-(三氟甲基)苯胺(394mg，94％)。

中间体21

1,4,6-三甲基-1H-吲唑-5-胺

在氮气下，将碳酸铯(3.68g，11.29mmol)和碘甲烷(0.42mL，2.28g/mL，6.79mmol)添加至6-甲基-5-硝基-1H-吲唑[81115-43-7](1g，5.64mmol)在THF(25mL)中的混合物中。将混合物在rt下搅拌18h。将溶剂在真空中蒸发并将残余物溶解在EtOAc和水中。将有机层用水(x2)和盐水洗涤，然后分离，干燥(MgSO₄)，过滤并将溶剂在真空中蒸发。将粗产物通过快速柱色谱法(二氧化硅；在庚烷中的EtOAc 0/100至50/50)纯化。收集所希望的级分并在真空中浓缩以产出呈黄色固体的1,6-二甲基-5-硝基-1H-吲唑(573mg，53％)。

在氮气下，将Pd/C(10％)(80mg，0.075mmol)添加至1,6-二甲基-5-硝基-1H-吲唑(572mg，2.99mmol)在MeOH(10mL)中的搅拌溶液中。将混合物在大气压和RT下氢化18h。将混合物通过

垫过滤，并将滤饼用甲醇洗涤。将滤液在真空中蒸发以产出呈白色固体的1,6-二甲基-1H-吲唑-5-胺(431，89％)。

将1,6-二甲基-1H-吲唑-5-胺(0.43g，2.67mmol)溶解在DCM(20mL)中。然后将在DCM(20mL)中的Br₂(0.15mL，3.12g/mL，2.94mmol)溶液在剧烈搅拌下滴入溶液中。将混合物在室温下搅拌16h。然后，添加DCM，并将溶液用水处理并将有机层用MgSO4干燥。将溶液过滤，并将所有挥发物在真空中蒸发。将粗产物通过快速柱色谱法(二氧化硅；在庚烷中的EtOAc 0/100至50/50)纯化。收集所希望的级分，并在真空中浓缩以产出呈白色固体的4-溴-1,6-二甲基-1H-吲唑-5-胺(610mg，95％)。

在氮气下，将4-溴-1,6-二甲基-1H-吲唑-5-胺(610mg，2.54mmol)和甲基硼酸[13061-96-6](380mg，6.35mmol)添加至1,4-二噁烷(8mL)、水(2mL)、和碳酸钠(808mg，7.62mmol)的搅拌溶液中。然后，添加PdCl₂(dppf)₂[95464-05-4](104mg，0.13mmol)。将反应混合物在105℃下搅拌过夜。添加水和EtOAc。将有机层分离，干燥(MgSO₄)并过滤，并将溶剂在真空中蒸发。将粗产物通过快速柱色谱法(二氧化硅；在庚烷中的EtOAc 0/100至50/50)纯化。收集所希望的级分并在真空中浓缩以产出呈黄色固体的I-21(330mg，74％)。

中间体22

1-丁基-4-氯-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶[2137779-69-0]

在氮气下，在0℃下，将4-氯-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶[2770-01-6](500mg，3.26mmol)溶在DMF(7.6mL)中，并分批添加氢化钠(97.3mg，4.2mmol)。允许RM达到RT并继续搅拌45min。然后，在0℃下逐滴添加1-溴丁烷[109-65-9](0.35mL，1.269g/mL，3.3mmol)，并允许RM达到RT并搅拌过夜。添加NaHCO₃饱和溶液，并将其用EtOAC萃取，然后用水和盐水洗涤，然后经MgSO₄干燥，并将溶剂在真空中去除。将残余物通过快速柱色谱法(庚烷/EtOAc从100/0至25/75)纯化以获得呈无色油状物的I-22(300mg，产率43.945％)。

中间体23

3-[(4-氯咪唑并[4,5-c]吡啶-1-基)甲基]-5-甲基-异噁唑

在RT下，将3-氯甲基-5-甲基异噁唑[35166-37-1](180mg，1.3mmol)添加至4-氯-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶[2770-01-6](200mg，1.24mmol)和K₂CO₃[584-08-7](207mg，1.49mmol)在乙腈[75-05-8](4mL)中的搅拌溶液中。将RM在75℃下搅拌16h。将混合物用饱和NaHCO₃稀释并用EtOAc萃取。将有机层干燥(MgSO4)，过滤，并将溶剂在真空中蒸发。将粗产物通过硅胶快速柱色谱法，使用洗脱液(梯度：在DCM中的MeOH 0/100至3.5/96.5)纯化以产出呈白色泡沫状固体的I-23(85％纯度，64％)。

中间体24

3-[(4-氯咪唑并[4,5-c]吡啶-1-基)甲基]异噁唑

从3-(氯甲基)异噁唑[57684-71-6]和4-氯-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶[2770-01-6]起始，以类似I-23的方式制备中间体24。

中间体25

2-氯-6-甲基-4-(三氟甲氧基)盐酸苯胺

在压力管中装入K₂CO₃(7.14g，0.052mol)在蒸馏水(7mL)中的溶液，然后添加二噁烷(70mL)。将悬浮液用N₂吹扫，同时添加2-溴-6-氯-4-(三氟甲氧基)苯胺(5g，0.017mol)、1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁-二氯钯(ii)二氯甲烷络合物(1.42g，0.0017mol)和三甲基环硼氧烷(2.67mL，0.019mol)。将管加帽并置于120℃的油浴中，并将悬浮液在该温度下搅拌16h。将所得悬浮液用EtOAc/水处理以获得清晰的相分离并分离各层。将水层用EtOAc(3x)萃取，并将合并的OL用盐水、MgSO₄处理，过滤并在真空中浓缩以提供油状物。将其通过硅胶色谱法(使用120g Redisep快速柱，以在庚烷中的0-10％EtOAc的梯度洗脱)纯化以提供无色油状物。将其溶解在DIPE中并用在iPrOH中的6N HCl处理，将其在rt下搅拌16h后提供白色固体，将该白色固体通过过滤收集以给出I-25(2.46g，产率55％)。

中间体26

2-异丙基-6-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)苯胺

在0℃下，向在DMF(干)(16mL)中的2-异丙基-6-甲基苯胺[773887-07-3](1g，6.701mmol)中添加NBS(1.30g，7.4mmol)。然后允许反应混合物升温至RT并搅拌过夜。然后将水添加至r.m.中，并将其用DCM萃取。将有机层经MgSO₄干燥并与MIK共蒸发。然后使用洗脱液(纯庚烷至20％的EtOAc)将粗产物纯化。将所有产物级分合并并蒸发以给出4-溴-2-异丙基-6-甲基苯胺(1.30g，产率85％)。

将4-溴-2-异丙基-6-甲基苯胺(871mg，3.82mmol)、1-甲基-1H-吡唑-4-硼酸(744mg，4.58mmol)和碳酸钠(1.2g，11mmol)在1,4-二噁烷(16mL)和水(0.1mL)的混合物中的溶液用N₂鼓泡5分钟。然后添加PdCl₂(dppf)₂[95464-05-4](156mg，0.191mmol)并将反应混合物在100℃下搅拌6小时。添加水和EtOAc并分离各层，将有机层经MgSO₄干燥并蒸发。使用纯庚烷至在庚烷中的50％EtOAc进行柱色谱法纯化。合并所希望的级分，并将溶剂蒸发以产出I-26(855mg，产率98％)。

中间体27

2,4-二甲基-6-(三氟甲基)吡啶-3-胺

在两个微波瓶中进行该反应：

1.将2,4-二溴-6-(三氟甲基)吡啶-3-胺[1214365-67-9](900mg，2.813mmol)溶解在1,4-二噁烷(7.2mL)和水(0.9mL)的混合物中。将三甲基环硼氧烷[823-96-1](1.13mL，0.896g/mL，8.07mmol)、1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁-二氯钯(II)二氯甲烷络合物[95464-05-4](206mg，0.252mmol)和K₂CO₃(1.2g，8.5mmol)添加至溶液中，并使用微波将混合物在140℃下加热1h。将水和EtOAc添加至混合物中，并萃取水层。然后将其用盐水洗涤，经MgSO₄干燥，并将溶剂蒸发。

2.将2,4-二溴-6-(三氟甲基)吡啶-3-胺[1214365-67-9](100mg，0.313mmol)溶解在1,4-二噁烷(0.8mL)和水(0.1mL)的混合物中。将三甲基环硼氧烷[823-96-1](0.126mL，0.896g/mL，0.896mmol)、1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁-二氯钯(II)二氯甲烷络合物[95464-05-4](23mg，0.028mmol)和K₂CO₃(0.13g，0.94mmol)添加至溶液中，并使用微波将混合物在140℃下加热1h。将两种粗的r.m.合并，并用FCC(使用纯DCM作为洗脱液)纯化。将所有产物级分合并并蒸发以产出I-27(424mg，产率79％)。

中间体28

4-(二氟甲基)-2-甲基吡啶-3-胺

在-20℃下，将氢化铝锂[16853-85-3](0.2g，5.14mmol)添加至甲基3-氨基-2-氯异烟酸盐[173435-41-1](1g，4.29mmol)在干THF(10mL)中的搅拌溶液中。将混合物在0℃下搅拌30min。添加NH₄Cl(800mg)、MeOH(5mL)和MgSO₄，并将混合物搅拌15min。将混合物过滤并在真空中浓缩。将粗产物通过快速柱色谱法(二氧化硅；在DCM中的MeOH 0/100至3.5/96.5)纯化。收集所希望的级分并在真空中浓缩以产出呈白色固体的(3-氨基-2-氯吡啶-4-基)甲醇(704mg，100％)。

将戴斯-马丁过碘烷[87413-09-0](2.82g，6.66mmol)添加至(3-氨基-2-氯吡啶-4-基)甲醇(704mg，4.44mmol)在THF(44mL)和DCM(44mL)中的搅拌溶液中。然后，将混合物用饱和NaHCO₃溶液和Na₂S₂O₃(1.5g)以及EtOAc(45mL)淬灭。将混合物搅拌30min并然后用EtOAc(20mL)稀释。将有机层分离，用水和盐水洗涤，经MgSO₄干燥，过滤并在真空中浓缩。将粗产物通过快速柱色谱法(二氧化硅；在DCM中的EtOAc 0/100至30/70)纯化。收集所希望的级分并在真空中浓缩以产出呈黄色固体的3-氨基-2-氯异烟醛(480mg，68％)。

在-78℃下，在氮气下，将DAST[38078-09-0](1.71mL，1.22g/mL，12.3mmol)添加至3-氨基-2-氯异烟醛(480mg，3.07mmol)在无水DCM(30mL)中的溶液中。将反应从-78℃搅拌至rt，持续48h。在0℃下，将反应用饱和NaHCO₃稀释并用EtOAc萃取。将有机层分离，干燥(MgSO4)，过滤，并将溶剂在真空中蒸发。将粗产物通过快速柱色谱法(二氧化硅；在庚烷中的EtOAc 0/100至12/88)纯化以产出呈橙色呈固体的I-28(170mg，30％)。

中间体29

2-(4-氯-6-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-1-基)-N,N-二甲基乙酰胺

将在POCl₃(20mL，1.65g/mL，215mmol)中的4-羟基-6-甲基-3-硝基吡啶-2(1H)-酮[4966-90-9](5g，29mmol)在100℃下搅拌2h。将混合物在rt下冷却，然后在真空中浓缩并与甲苯共蒸发。将粗产物通过快速柱色谱法(二氧化硅；在庚烷中的EtOAc 0/100至20/80)纯化。收集所希望的级分并在真空中浓缩以产出呈白色固体的2,4-二氯-6-甲基-3-硝基吡啶(2.77g，45％)。

将7N在甲醇中的氨溶液[7664-41-7](14.1mL，7M，98.59mmol)添加至2,4-二氯-6-甲基-3-硝基吡啶(2.77g，13.4mmol)在THF(28mL)中的搅拌溶液中。将溶剂在真空中蒸发，并将混合物通过快速柱色谱法(二氧化硅；在庚烷中的EtOAc 0/100至20/80)纯化。收集所希望的级分并在真空中浓缩以产出呈黄色固体的2-氯-6-甲基-3-硝基吡啶-4-胺(1.0g，36％)。

将铁粉[7439-89-6](1.52g，27.2mmol)添加至2-氯-6-甲基-3-硝基吡啶-4-胺(1g，5.3mmol)、氯化铵(2.42g，27.2mmol)和水(4.8mL)在乙醇(18.5mL)中的溶液中。允许混合物冷却至RT，将混合物通过

过滤。将溶剂在真空中蒸发。将残余物通过快速柱色谱法(硅胶，洗脱液：DCM/MeOH 100/0至95/5)纯化。收集所希望的级分并浓缩以产出呈棕色固体的2-氯-6-甲基吡啶-3,4-二胺(410mg，44％)。

将的混合物2-氯-6-甲基吡啶-3,4-二胺(360mg，2.28mmol)、原甲酸三乙酯[122-51-0](2.2mL，0.89g/mL，13mmol)和乙酸酐[108-24-7](2.2mL，1.08g/mL，23mmol)在140℃下搅拌5h。通过蒸发去除过量试剂。然后将混合物用水处理，并在0℃下添加NaOH(10％)直到pH 9。将混合物在真空中浓缩。将残余物通过快速柱色谱法(硅胶，DCM/MeOH 100/0至95/5)纯化。收集所希望的级分并浓缩以产出呈白色固体的4-氯-6-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶(306mg，70％)。

在r.t.下，在氮气气氛下，将碳酸钾(577mg，2.51mmol)添加至4-氯-6-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶(350mg，2.09mmol)在乙腈(8.0mL)中的混合物中。然后逐滴添加在乙腈(8mL)中的2-氯-N,N-二甲基乙酰胺[2675-89-0](226μL，1.18g/mL，2.2mmol)，并将混合物在70℃下搅拌16h。将混合物用水稀释并用EtOAc萃取。将有机层用水(x2)和盐水洗涤，然后分离，干燥(MgSO₄)，过滤并将溶剂在真空中蒸发。将粗产物通过快速柱色谱法(二氧化硅，在庚烷中的EtOAc 0/100至80/20)纯化以产出呈白色粘性固体的I-29(307mg，58％)。

以类似的方式制备以下中间体。

中间体31

2-氟-6-异丙基-4-(三氟甲基)苯胺

步骤1.

2-氟-6-异丙烯基-4-(三氟甲基)苯胺

将碳酸铯[534-17-8](1.712g，5.256mmol)添加至[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)二氯甲烷[95464-05-4](107.563mg，0.131mmol)在水(2.01mL)和1,4-二噁烷(16.0mL)的预先脱气溶液中的搅拌溶液中。将混合物在rt下搅拌5min，然后顺序添加2-溴-6-氟-4-(三氟甲基)苯胺[1034325-63-7](565mg，2.19mmol)和三氟(丙-1-烯-2-基)硼酸钾[395083-14-4](486mg,3.28mmol)。将反应混合物在95℃下搅拌16h，此时TLC分析指示完全转化。将rm用饱和水性NaHCO₃溶液稀释，并用EtOAc萃取。将有机层分离，干燥(MgSO₄)，过滤，并将溶剂在真空中蒸发。将粗产物通过快速柱色谱法(二氧化硅；在庚烷中的EtOAc 0/100至10/90)纯化。收集所希望的级分并在真空中浓缩以产出217mg(44.76％)的2-氟-6-异丙烯基-4-(三氟甲基)苯胺。

步骤2.

在rt下，在氮气气氛下，将钯碳[7440-05-3](33.4mg，0.031mmol)添加至2-氟-6-异丙烯基-4-(三氟甲基)苯胺(215mg，0.98mmol)在甲醇(10mL)中的搅拌溶液中。然后，用氢替换氮气气氛，并将rm在rt下搅拌16h。将混合物经

垫过滤，用MeOH/DCM的混合物洗涤，并将溶剂在真空中去除以产出呈橙色油状物的168mg(73.6％)的I-31。

中间体32

1-(5-氟-2-吡啶基)-3,5-二甲基-吡唑-4-胺

步骤1.

2-(3,5-二甲基-4-硝基-吡唑-1-基)-5-氟-吡啶

在氮气下，将3,5-二甲基-4-硝基-1h-吡唑[14531-55-6](600mg，4.25mmol)、2-溴-5-氟吡啶[41404-58-4](1.53g，8.50mmol)和K₂CO₃[584-08-7](1.24g，8.93mmol)溶解在处于密封管中的预先脱气的DMA(3mL)中。然后添加碘化铜[7681-65-4](41mg，0.21mmol)和N,N'-二甲基环己烷-1,2-二胺[61798-24-1](138μL，0.902g/mL，0.85mmol)，并将所得混合物在180℃下搅拌4h。将rm用饱和NaHCO₃水溶液稀释，并用EtOAc萃取。将有机层分离，经MgSO₄干燥，过滤，并将溶剂在真空中蒸发。将所得残余物通过硅胶快速柱色谱法，使用洗脱液(梯度：EtOAc/庚烷，0/100至20/80)纯化以产出呈黄色固体的146mg(14％)的2-(3,5-二甲基-4-硝基-吡唑-1-基)-5-氟-吡啶。

步骤2.

1-(5-氟-2-吡啶基)-3,5-二甲基-吡唑-4-胺

将铁[7439-89-6](0.17g，3.09mmol)添加至2-(3,5-二甲基-4-硝基-吡唑-1-基)-5-氟-吡啶(146mg，0.62mmol)和NH₄Cl[12125-02-9](132mg，2.47mmol)在乙醇(4mL)和水(0.62mL)的混合物中的搅拌悬浮液中。将混合物在65℃下搅拌3h，然后将其经

垫过滤，用MeOH/DCM混合物洗涤，然后将溶剂在真空中去除。将所得残余物用NaHCO₃稀释，并用CHCl₃/MeOH(4:1)的混合物萃取。将有机层经MgSO₄干燥，过滤并将溶剂在真空中蒸发以产出呈黄色油状物的I-32(106mg，82％)。

以类似的方式制备以下中间体：

中间体41

2-(4-氯吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-N,N-二甲基-乙酰胺

在RT下，和在氮气气氛(15mL)下，向4-氯-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶[871836-51-0](846mg，5.51mmol)在DMF中的混合物中经1min分批添加NaH[7646-69-7](331mg，8.26mmol)。将RM在RT下搅拌1h，然后逐滴添加2-氯-N,N-二甲基乙酰胺[2675-89-0](0.68mL，1.182g/mL，6.61mmol)，并将所得混合物在RT下搅拌2.5h。将溶剂在真空中蒸发，并将所得残余物在EtOAc和水之间分配。将有机层分离，然后用水(x2)和盐水洗涤，经MgSO₄干燥，过滤，并将溶剂在真空中蒸发。将所得残余物通过硅胶快速柱色谱法，使用洗脱液(梯度：EtOAc/庚烷，0/100至20/80)纯化以产出呈白色固体的I-41(566mg，43％)。

中间体42

2-(4-乙酰胺基吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-N,N-二甲基-乙酰胺

在氮气下，将乙酰胺[60-35-5](123mg，2.07mmol)和I-17(450mg，1.88mmol)添加至乙酸钯(II)[3375-31-3](17.0mg，0.075mmol)、9,9-二甲基-4,5-双(二苯基膦基)呫吨[161265-03-8](98.2mg，0.17mmol)和碳酸铯[534-17-8](1.23g，3.77mmol)在无水二噁烷(10mL)中的搅拌溶液中。将所得混合物搅拌并加热至90℃持续18h，然后将其在减压下浓缩。将所得残余物在EtOAc和水之间分配。将有机层分离，用水洗涤，经MgSO₄干燥，过滤并在真空中蒸发。将所得残余物通过硅胶快速柱色谱法，使用洗脱液(梯度：在DCM中的DCM/MeOH(9:1)，0/100至100/0)纯化以产出呈黄色固体的I-42(390mg，79％)。

中间体43

2-(4-氨基吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-N,N-二甲基-乙酰胺

将盐酸在甲醇[132228-87-6](3.6mL，1.25M，4.48mmol)中的溶液添加至I-18(390mg，1.49mmol)在MeOH(2mL)中的溶液中，并将混合物在80℃下搅拌18h。将另一部分的在甲醇中的盐酸[132228-87-6](1.2mL，1.25M，1.49mmol)添加至RM中，将其搅拌并在80℃下加热48h。在此之后，将溶剂在真空中蒸发，并将所得残余物在NaHCO₃和EtOAc之间分配。将Ol分离，并将水层用EtOAc反萃取。将合并的有机层经MgSO₄干燥，过滤并在真空中蒸发以产出呈黄色固体的I-43(431mg，97％)。

中间体44

1-丁基-4-氯-吡唑并[4,3-c]吡啶

在RT下，向4-氯-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶[871836-51-0](100mg，0.65mmol)在无水DMF(4.0mL)中的溶液中添加NaH(在矿物油中的60％分散体)[7646-69-7](26.0mg，0.65mmol)。当气体逸出停止时，在RT下添加1-溴丁烷[109-65-9](70μL，1.276g/mL，0.65mmol)。将RM在RT下搅拌3h，然后将其用水淬灭并添加EtOAc。将水层用EtOAc萃取(3x)。将合并的有机层用盐水洗涤，经MgSO₄干燥，过滤并在减压下浓缩。将所得残余物通过硅胶快速柱色谱法，使用洗脱液(梯度：庚烷/EtOAc，100/0至90/10)纯化以提供呈油状物的I-44(50mg 36.6％)，及其呈油状物的区域异构体2-丁基-4-氯-吡唑并[4,3-c]吡啶(28mg，20.5％)。

中间体45

3,4-二氟-2,6-二甲基苯胺

步骤1.

2,6-二溴-3,4-二氟苯胺

将N-溴代琥珀酰亚胺[128-08-5](16.2g，91.02mmol)添加至3,4-二氟苯胺[3863-11-4](3.84mL，38.73mmol)在乙腈(100mL)中的搅拌溶液中。将混合物在86℃下搅拌16h。将混合物在真空中浓缩，并将残余物通过硅胶快速柱色谱法，使用洗脱液(梯度：EtOAc/庚烷，5/95至20/80)纯化。收集所希望的级分并在真空中浓缩以提供呈棕色固体的2,6-二溴-3,4-二氟苯胺(9g，79％)。

步骤2.

在氮气气氛下，将Pd₂dba₃[51364-51-3](160mg，0.17mmol)、X-Phos[564483-18-7](166mg，0.35mmol)和磷酸三钾[7778-53-2](2.22g，10.46mmol)稀释在处于密封管中的1,4-二噁烷(35mL，通过氮气鼓泡预先脱气5分钟)中。然后，添加2,6-二溴-3,4-二氟苯胺(1g，3.49mmol)和三甲基环硼氧烷[823-96-1](1.46mL，0.9g/mL，10.46mmol)，并将混合物在100℃下搅拌18h。将混合物经

过滤，并用DCM/MeOH(9:1)的混合物洗涤。将溶剂在真空中浓缩，并将残余物通过硅胶快速柱色谱法(干法填充)，使用洗脱液(梯度：EtOAc/庚烷，0/100至30/70)纯化以提供I-45的两个级分：级分1(700mg，64％)和级分2(79mg，14％)均为红色油状物。将级分1通过硅胶快速柱色谱法，使用洗脱液(梯度：EtOAc/庚烷，0/100至30/70)再纯化以提供呈红色油状物的I-45的第三个级分(288mg，52％)。

中间体46

N-(2,6-二甲基-4-(三氟甲基)苯基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-胺吡啶

步骤1.

外消旋-4-氯-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶吡啶

将3,4-二氢-2H-吡喃[110-87-2](2.38mL，26.05mmol)和对甲苯磺酸一水合物[6192-52-5](0.25g，1.30mmol)添加至4-氯-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶[2770-01-6](2g，13.02mmol)在DCM(60mL)中的搅拌溶液中。将混合物在40℃下搅拌48h。将混合物用饱和NaHCO₃稀释并用DCM(x2)萃取。将有机层分离，干燥(MgSO₄)，过滤，并将溶剂在真空中蒸发。将粗产物通过硅胶快速柱色谱法，使用洗脱液(梯度：EtOAc/庚烷，0/100至100/0)纯化。收集所希望的级分并在真空中浓缩以产出呈无色油状物的外消旋-4-氯-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶(2.5g，79％)。

步骤2.

N-(2,6-二甲基-4-(三氟甲基)苯基)-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-胺

将外消旋-4-氯-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶(1g，4.21mmol)、I-27(0.876g，4.63mmol)和Cs₂CO₃[534-17-8](3.02g，9.26mmol)在DMA(16mL)中的混合物用氮气脱气。添加Pd(OAc)₂[3375-31-3](189mg，0.84mmol)和Xantphos[161265-03-8](487mg，0.84mmol)，并将混合物在130℃下加热16h。将混合物在减压下浓缩。将残余物用水稀释，用DCM萃取，在MgSO₄上干燥，过滤，并将溶剂在真空中蒸发。将粗产物通过硅胶快速柱色谱法，使用洗脱液(梯度：EtOAc/庚烷，0/100至80/20)纯化。收集所希望的级分并在真空中浓缩以产出呈黄色泡沫状物的N-(2,6-二甲基-4-(三氟甲基)苯基)-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-胺(906mg，55％)。

步骤3

N-(2,6-二甲基-4-(三氟甲基)苯基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-胺吡啶

将TFA[76-05-1](5.91mL，76.58mmol)添加至N-(2,6-二甲基-4-(三氟甲基)苯基)-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-胺(906mg，2.32mmol)的搅拌溶液中。将反应混合物在rt下搅拌1.5h。将溶剂在真空中蒸发。将混合物用饱和NaHCO₃稀释并用DCM萃取。将有机层分离，干燥(MgSO4)，过滤，并将溶剂在真空中蒸发以产出呈黄色固体的I-46(495mg，70％)，将其不经纯化用于下一反应步骤。

最终化合物的制备

化合物1

1-(2,2-二氟丙基)-N-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-胺

将I-13(200mg，0.863mmol)、I-15(160mg，1.07mmol)和Cs₂CO₃(563mg，1.73mmol)在tBuOH(2.4mL)中的混合物用N₂脱气。添加Pd(OAc)₂(36mg，0.16mmol)和Xantphos[161265-03-8](60.5mg，0.104mmol)，并将混合物在110℃下加热1h。将混合物稀释在DCM中并经

过滤，并将溶剂在真空中浓缩。将产物在硅胶(洗脱液：在DCM中的0-5％7M NH₃/MeOH)上纯化。将所希望的级分蒸发并从DIPE中结晶。将晶体滤出并干燥以产出呈白色固体的化合物编号1(139mg，47％)。

从所指示的中间体和试剂以类似的方式合成以下化合物

化合物4

2-(4-((2,6-二甲基-4-(三氟甲基)苯基)氨基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-1-基)-N-甲基乙酰胺

将I-2(389mg，2.05mmol)和Cs₂CO₃(1.22g，3.74mmol)添加至中间体8(500mg，1.87mmol)和tBuOH(31mL)的溶液中。然后，添加BrettPhos[1470372-59-8](102mg，0.11mmol)，并将混合物在100℃下，在氮气气氛下加热16小时。将混合物在减压下浓缩，吸收在水中，用DCM萃取，在MgSO₄上干燥，过滤，并将溶剂在真空中蒸发。将粗产物通过反相(Phenomenex Gemini C18 100x30mm 5μm柱；从81％[25mM NH₄HCO₃]-19％[ACN:MeOH(1:1)]至45％[25mM NH₄HCO₃]-55％[ACN:MeOH(1:1)])纯化。收集所希望的级分并浓缩以产出呈白色固体的2-(4-((2,6-二甲基-4-(三氟甲基)苯基)氨基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-1-基)乙酸(305mg，44％)。

在rt下，将N-甲基咪唑[616-47-7](36μL，0.74g/mL，0.33mmol)添加至2-(4-((2,6-二甲基-4-(三氟甲基)苯基)氨基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-1-基)乙酸(70mg，0.19mmol)和甲胺盐酸盐[593-51-1](19.5mg，0.29mmol)在NMP(1.18mL)和ACN(0.59mL)中的搅拌溶液中。将反应在65℃下加热15min直到得到均匀溶液。在RT下，添加HOBt[123333-53-9](39mg，0.29mmol)和EDC-HCl[25952-53-8](53mg，0.27mmol)，将混合物在65℃下搅拌1.5h，并然后在rt下搅拌16h。将混合物在0℃下用饱和NaHCO₃稀释并用EtOAc萃取。将有机层分离，干燥(MgSO₄)，过滤，并将溶剂在真空中蒸发。将粗产物通过快速柱色谱法(二氧化硅；在DCM中的0-10％MeOH)纯化。收集所希望的级分并在真空中浓缩。将产物用DIPE研磨以产出呈白色固体的化合物编号4(62.5，85％)。

化合物5

2-[4-[2,6-二甲基-4-(三氟甲基)苯胺基]咪唑并[4,5-c]吡啶-1-基]乙酰胺

在rt下，将N-甲基咪唑[616-47-7](43.07μL，0.742g/mL，0.387mmol)添加至I-18(83mg，0.228mmol)和NH₃[7664-41-7](在二噁烷中的0.5M，683.461μL 0.342mmol)在NMP[872-50-4](1.4mL)和ACN(0.698mL)的混合物中的搅拌溶液中。将反应在65℃下加热15min直到得到均匀溶液。在r.t.下，添加HOBt[123333-53-9](46.176mg，0.342mmol)和EDC-HCl[25952-53-8](63.034mg，0.319mmol)。将混合物在65℃下搅拌1.5h。将混合物在0℃下用饱和NaHCO₃稀释并用EtOAc萃取。将有机层分离，干燥(MgSO₄)，过滤，并将溶剂在真空中蒸发。将粗产物通过快速柱色谱法(二氧化硅；在DCM中的MeOH 0/100至10/90)纯化。将粗产物通过反相(Phenomenex Gemini C18 100x30mm 5μm柱；从72％[25mM NH₄HCO₃]-28％[ACN:MeOH(1:1)]至36％[25mM NH₄HCO₃]-64％[ACN:MeOH(1:1)])纯化。收集所希望的级分并在真空中浓缩。将产物用DIPE研磨以产出呈白色固体的化合物编号5。

化合物6

2-(4-((2,6-二甲基-4-(三氟甲基)苯基)氨基)-7-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-1-基)-N,N-二甲基乙酰胺

将N-碘代琥珀酰亚胺(95mg，0.42mmol)分批添加至化合物61(150mg，0.38mmol)在DMF(1.5mL)中的溶液中。将反应混合物在室温下搅拌16h。将混合物用饱和NaHCO₃稀释并用EtOAc萃取。将有机层分离，干燥(MgSO₄)，过滤，并将溶剂在真空中蒸发。将粗产物通过快速柱色谱法(二氧化硅；在庚烷中的EtOAc 0/100至30/70)纯化。收集所希望的级分并在真空中浓缩以产出呈白色固体的2-(4-((2,6-二甲基-4-(三氟甲基)苯基)氨基)-7-碘-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-1-基)-N,N-二甲基乙酰胺(172mg，82％)。

在氮气下，将三甲基环硼氧烷[823-96-1](69μL，0.9g/mL，0.49mmol)添加至2-(4-((2,6-二甲基-4-(三氟甲基)苯基)氨基)-7-碘-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-1-基)-N,N-二甲基乙酰胺(170mg，0.33mmol)、K₃PO₄(140mg，0.66mmol)、X-Phos[564483-18-7](16mg，0.033mmol)和Pd₂(dba)₃[51364-51-3](15.05mg，0.016mmol)在1,4-二噁烷(3mL)中的搅拌悬浮液中。将混合物在95℃下搅拌16h。添加相同量的三甲基环硼氧烷[823-96-1](69μL，0.9g/mL，0.49mmol)、2-(4-((2,6-二甲基-4-(三氟甲基)苯基)氨基)-7-碘-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-1-基)-N,N-二甲基乙酰胺(170mg，0.33mmol)、X-Phos[564483-18-7](16mg，0.033mmol)和Pd₂(dba)₃[51364-51-3](15.05mg，0.016mmol)。将反应在110℃下再搅拌16h。添加水和EtOAc。将有机层分离，干燥(MgSO₄)并过滤，并将溶剂在真空中蒸发。将粗产物通过快速柱色谱法(二氧化硅；在庚烷中的EtOAc 0/100至50/50)纯化。收集所希望的级分并在真空中浓缩以产出淡黄色粘性固体。将粗产物通过反相(Phenomenex Gemini C18100x30mm 5μm柱；从72％[25mM NH₄HCO₃]-28％[ACN:MeOH(1:1)]至36％[25mM NH₄HCO₃]-64％[ACN:MeOH(1:1)])纯化以产出在用DIPE研磨后呈灰白色固体的化合物编号6(22mg，16％)。

从所指示的中间体和试剂以类似的方式合成以下化合物

化合物59

N-(2,6-二甲基-4-(三氟甲基)苯基)-1-(异噁唑-3-基甲基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-胺

将3-(氯甲基)异噁唑[57684-71-6](32μL，0.34mmol)添加至I-46(100mg，0.33mmol)和K₂CO₃[584-08-7](55mg，0.39mmol)在CH₃CN(1.5mL)中的搅拌溶液中。将反应混合物在75℃下搅拌16h。将混合物经

过滤，并用DCM/MeOH(9:1)的混合物洗涤。将溶剂在真空中浓缩，并将残余物通过硅胶快速柱色谱法(干法填充)，使用洗脱液(梯度：MeOH/DCM，0/100至1.8/98.2)纯化。收集所希望的级分并在真空中浓缩。将残余物通过反相色谱法(Phenomenex Gemini C18 100x30mm 5μm柱；从70％[25mM NH₄HCO₃]-30％[ACN:MeOH(1:1)]至27％[25mM NH₄HCO₃]-73％[ACN:MeOH(1:1)])纯化。收集所希望的级分并在真空中浓缩以产出呈白色泡沫状固体的化合物编号59(13mg，10％)。

化合物60

N-(2,6-二甲基-4-(三氟甲基)苯基)-1-(5-氟吡啶-2-基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-胺

将I-18(142mg，0.57mmol)、I-17(119mg，0.63mmol)和Cs₂CO₃(409mg，1.26mmol)、DMA(2.2mL)的混合物用氮气脱气。添加Pd(OAc)₂[3375-31-3](12.8mg，0.057mmol)和Xantphos[161265-03-8](33.1mg，0.057mmol)，并将混合物在120℃下加热18h。将混合物在减压下浓缩。将残余物用水稀释，用DCM萃取，在MgSO₄上干燥，过滤，并将溶剂在真空中蒸发。将粗产物通过反相色谱法(从90％[0.1％HCOOH]-10％[ACN:MeOH 1:1]至54％[0.1％HCOOH]-46％[ACN:MeOH 1:1])纯化。收集所希望的级分并在真空中浓缩以产出呈白色固体的化合物编号60(80mg，35％)。

化合物61

2-(4-((2,6-二甲基-4-(三氟甲基)苯基)氨基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-1-基)-N,N-二甲基乙酰胺

将I-1(8.03g，33.64mmol)、I-17(7.0g，37mmol)和Cs₂CO₃(24.1g，74mmol)在DMA(104mL)中的混合物用氮气脱气。添加Pd(OAc)2[3375-31-3](755mg，3.36mmol)和Xantphos[161265-03-8](1.95g，3.36mmol)，并将混合物在120℃下加热16h。冷却后，添加的5％LiCl(100ml)水性溶液，并将混合物用EtOAc(4x)萃取。将有机层分离并用更多5％LiCl的水性溶液洗涤。将有机层分离，干燥(Na₂SO₄)，过滤，并将溶剂在真空中蒸发。将残余物通过快速柱色谱法(二氧化硅；在MeOH中的7M氨溶液，在DCM中，0/100至4/96)纯化。收集所希望的级分，并将溶剂在真空中蒸发。将残余物用Et2O研磨。将固体滤出，用Et2O洗涤并在50℃下在干燥器中干燥3天以产出呈灰白色固体的化合物编号61(7.9g，60％)。

化合物62

2-[7-氯-4-[2,6-二甲基-4-(三氟甲基)苯胺基]咪唑并[4,5-c]吡啶-1-基]-N,N-二甲基-乙酰胺

将NCS[128-09-6](38mg，0.28mmol)分批添加至化合物61(100mg，0.26mmol)在DMF(1mL)中的溶液中。将反应混合物在室温下搅拌16h。将混合物用饱和NaHCO₃稀释并用EtOAc萃取。将有机层分离，干燥(MgSO₄)，过滤，并将溶剂在真空中蒸发。将粗产物通过反相(Phenomenex Gemini C18 100x30mm 5μm柱；从81％[0.1％HCOOH]-19％[ACN:MeOH(1:1)]至45％[0.1％HCOOH]-55％[ACN:MeOH(1:1)])纯化。收集所希望的级分并浓缩。将产物用DIPE研磨以产出呈灰白色固体的化合物编号62(52mg，47％)。

化合物63

2-[4-[2,6-二甲基-4-(三氟甲基)苯胺基]咪唑并[4,5-c]吡啶-1-基]-N-乙基-N-甲基-乙酰胺

在RT下，将N-甲基咪唑[616-47-7](36μL，0.742g/mL，0.327mmol)添加至I-18(70mg，0.19mmol)和N-乙基甲基胺[624-78-2](25μL，0.688g/mL，0.288mmol)在NMP[872-50-4](1.18mL)和ACN(0.589mL)中的搅拌溶液中。将反应在65℃下加热15min直到得到均匀溶液。在RT下添加HOBt[123333-53-9](39mg，0.29mmol)和EDC-HCl[25952-53-8](53mg，0.27mmol)，并将RM在65℃下搅拌1.5h。将RM在0℃下用饱和NaHCO₃淬灭并用EtOAc萃取。将有机层分离，经MgSO4干燥，过滤，并将溶剂在真空中蒸发。将所得残余物通过硅胶快速柱色谱法，使用洗脱液(梯度：在DCM中的MeOH 0/100至10/90)纯化以产出在用DIPE研磨后呈白色固体的69mg(87％)的化合物编号63。

化合物64

2-[4-[2,6-二甲基-4-(三氟甲基)苯胺基]吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基]-N,N-二甲基-乙酰胺

在N₂流下，将Pd₂dba₃[51364-51-3](9.7mg，0.017mmol)添加至碳酸铯[534-17-8](330mg，1.01mmol)和XantPhos[161265-03-8](19.5mg，0.034mmol)在DMF(15mL)中的脱气溶液中。将所得混合物在40℃下搅拌2min，然后在N₂流下添加I-43(100mg，0.34mmol)。将混合物在40℃下再搅拌5min，最后添加[2-碘-1,3-二甲基-5-(三氟甲基)苯[875550-67-7](121.5mg，0.41mmol)，并将RM在85℃下搅拌18h。添加水，并将混合物用EtOAc萃取。将合并的有机层经MgSO₄干燥，过滤并在真空中蒸发以提供残余物(该残余物与从在100mg(0.34mmol)的I-43上进行类似程序得到的粗产物结合)，将所得混合物通过快速柱色谱法，使用洗脱液(梯度：在DCM中的DCM/MeOH(20:1)，0/100至5/95)纯化。收集所希望的级分并在真空中浓缩。将所得残余物用二乙基醚研磨并过滤以产出呈淡白色固体的化合物编号64(261mg，99％产率)。

化合物65

2-[4-[(2-异丙基-4-甲基-3-吡啶基)氨基]吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基]-N,N-二甲基-乙酰胺

在N₂流下，将Pd₂dba₃[51364-51-3](4.5mg，0.0078mmol)添加至Cs₂CO₃[534-17-8](151.5mg，0.46mmol)和XantPhos[161265-03-8](9.0mg，0.015mmol)在DMF(15mL)中的溶液中，并将混合物在40℃下搅拌2min。在N₂流下添加I-41(50mg，0.155mmol，74％纯度的批次)，并将所得混合物在40℃下搅拌5min，然后添加4-甲基-2-(1-甲基乙基)-3-吡啶胺[1698293-93-4](28mg，0.18mmol)。将RM在85℃下搅拌18h。将RM在减压下蒸发，然后将所得残余物与从在100mg(0.31mmol，74％纯度)的I-41上进行类似程序得到的粗产物结合，并将其通过制备型HPLC(固定相：XBridge制备型C18 3.5μm，4.6x100mm；流动相：从95％[65mMNH₄OAc+ACN(90:10)]-5％[100％非对映异构过量乙腈]至63％[65mM NH₄OAc+ACN(90:10)]-37％[100％非对映异构过量乙腈])纯化以提供化合物编号65(38mg，23％)。

化合物66

1-丁基-N-(2,6-二氯苯基)吡唑并[4,3-c]吡啶-4-胺

将I-44(120mg，0.57mmol)、2,6-二氯苯胺[608-31-1](464mg，2.86mmol)和Cs₂CO₃[534-17-8](0.522g，1.60mmol)在tBuOH(2.3mL)中的混合物用N₂脱气。添加Pd(OAc)₂[3375-31-3](5mg，0.023mmol)和Xantphos[161265-03-8](13mg，0.023mmol)，并将混合物在80℃下加热1h。将溶剂在真空中去除，并将所得残余物用水稀释并用DCM萃取。将有机层经MgSO₄干燥，并将溶剂在减压下去除。将所得残余物通过RP(固相：XBridge C18_3.5μm，100x4.6mm，流动相：0.2％NH₄HCO₃+MeOH)纯化以提供呈白色固体的化合物编号66(90mg，47％)。

从所指示的中间体和试剂以类似的方式合成以下化合物：

还根据与本文描述的那些类似的程序制备以下化合物：

从所指示的中间体和试剂，根据与本文描述的那些类似的程序制备以下化合物：

化合物81

2-(4-((2,6-二甲基-4-(三氟甲基)苯基)氨基)-7-甲基-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-N,N-二甲基乙酰胺

从化合物64起始，与针对化合物6的合成所述类似地制备化合物81。

化合物82

N-(2,6-二甲基-4-(三氟甲基)苯基)-1-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-胺

在氮气下，将I-46(120mg，0.39mmol)、4-碘-1-甲基-1H-咪唑[71759-87-0](166mg，0.78mmol)和磷酸钾[7778-53-2](336mg，1.57mmol)稀释在处于密封管中的无水二甘醇二甲醚[111-96-6](3mL，预先用氮气脱气5min)中。然后，添加碘化铜(I)[7681-65-4](23mg，0.12mmol)和反式-1,2-环己烷二胺[1121-22-8](14μL，0.12mmol)，并将混合物在120℃下搅拌16h。将混合物经

过滤，并用DCM/MeOH(9:1)的混合物洗涤。将溶剂在真空中浓缩，并将残余物通过硅胶快速柱色谱法(干法填充)，使用洗脱液(梯度：MeOH/DCM，0/100至2/98)纯化。收集所希望的级分并在真空中浓缩以产出呈黄色粘性固体的化合物编号82(36mg，22％)。

从所指示的中间体和试剂以类似的方式合成以下化合物

分析部分

熔点

值是峰值或熔融范围，并且所获得的值具有通常与这种分析方法相关的实验不确定性。

DSC823e或DSC1 STAR(表示为(a))和梅特勒-托利多公司(Mettler-Toledo)MP50：

对于多种化合物，熔点是用DSC823e或DSC1 STAR(梅特勒-托利多公司)来测定的。使用10℃/分钟的温度梯度来测量熔点。最高温度是300℃。

对于多种化合物，熔点是用MP50(梅特勒-托利多公司)(表示为(b))来测定的。使用10℃/分钟的温度梯度来测量熔点。

LCMS

通用程序

使用LC泵、二极管阵列(DAD)或UV检测器以及如在对应的方法中所指定的柱进行高效液相色谱法(HPLC)测量。如果必要的话，包括其他检测器(参见下文的方法表格)。

将来自柱的流带至配置有大气压离子源的质谱仪(MS)。设置调谐参数(例如扫描范围、停留时间等)以便获得允许鉴定化合物的标称单一同位素分子量(MW)的离子和/或准确质量单一同位素分子量的离子在技术人员的知识内。利用适当的软件进行数据采集。

通过其实验保留时间(R_t)和离子描述化合物。如果未在数据表中不同地指定，那么报告的分子离子对应于[M+H]⁺(质子化的分子)和/或[M-H]^-(去质子化的分子)。在该化合物不是直接可电离的情况下，指定加合物的类型(即[M+NH₄]⁺、[M+HCOO]^-、[M+CH₃COO]^-等)。对于具有多种同位素模式的分子(Br、Cl等)来说，报告的值是针对最低同位素质量获得的值。获得的所有结果具有通常与所使用的方法相关的实验不确定性。

在下文中，“SQD”单四极检测器、“MSD”质量选择检测器、“QTOF”四极杆飞行时间、“rt”室温、“BEH”桥接的乙基硅氧烷/二氧化硅杂合物、“HSS”高强度二氧化硅、“CSH”带电的表面杂化、“UPLC”超高效液相色谱法、“DAD”二极管阵列检测。

表1.LC-MS方法(以mL/min表示流量；以℃表示柱温(T)；以min表示运行时间)。

表2.分析数据-LCMS：[M+H]⁺意指该化合物的游离碱的质子化质量，[M-H]^-意指该化合物的游离碱的去质子化质量或指定的加合物的类型([M+CH₃COO]^-)。R_t意指保留时间(以min计)。对于一些化合物，确定准确质量。

NMR

对于多种化合物，在以400MHz操作的Bruker AV III HD光谱仪上，或在以500MHz操作的Bruker Avance NEO上，或在以400MHz操作的Bruker Avance NEO光谱仪上，使用氯仿-d(氘化的氯仿，CDCl₃)或DMSO-d₆(氘化的DMSO，二甲基-d6亚砜)作为溶剂记录¹H NMR谱。化学位移(δ)被报告为相对于四甲基硅烷(TMS)(用作内部标准)的百万分率(ppm)。

化合物编号10：¹H NMR(400MHz,DMSO)δ＝8.42(s,1H),8.03(s,1H),7.58(d,J＝5.8,1H),7.46(s,1H),7.43(s,1H),6.81(d,J＝5.8,1H),5.22(s,2H),3.11(s,3H),2.88(s,3H),2.62(q,J＝7.5,2H),2.19(s,3H),1.06(t,J＝7.5,3H)。

化合物编号12：¹H NMR(400MHz,DMSO)δ＝8.41(s,1H),8.03(s,1H),7.57(d,J＝5.8,1H),7.49-7.40(m,2H),6.79(d,J＝5.8,1H),5.22(s,2H),3.29-3.17(m,1H),3.11(s,3H),2.88(s,3H),2.18(s,3H),1.10(d,J＝6.9,6H)。

化合物编号13：¹H NMR(400MHz,DMSO)δ＝8.15(s,1H),8.02-7.98(m,2H),7.52(d,J＝5.7,1H),7.30(s,1H),6.74(d,J＝5.8,1H),5.21(s,2H),4.00(s,3H),3.11(s,3H),2.88(s,3H),2.34(s,3H),2.26(s,3H)。

化合物编号42：¹H NMR(400MHz,DMSO)δ8.43(br s,1H),8.04(s,1H),7.59(d,J＝5.8Hz,1H),7.45(s,2H),6.82(d,J＝5.8Hz,1H),5.22(s,2H),2.21(s,6H)。

化合物编号45：¹H NMR(400MHz,DMSO)δ＝8.05(s,1H),8.01(s,1H),7.65(d,J＝5.8,1H),7.41(d,J＝8.4,2H),7.31(d,J＝8.2,2H),6.79(d,J＝5.8,1H),5.22(s,2H),3.11(s,3H),2.88(s,3H),2.37(s,3H),2.16(s,3H),2.05(s,3H)。

化合物编号47：¹H NMR(400MHz,DMSO)δ8.35(s,1H),8.02(s,1H),7.58(d,J＝5.8Hz,1H),7.30(dd,J＝8.3,2.9Hz,1H),7.18(dd,J＝10.0,2.9Hz,1H),6.79(d,J＝5.8Hz,1H),5.22(s,2H),3.25-3.15(m,1H),3.11(s,3H),2.88(s,3H),1.09(d,J＝6.8Hz,6H)。

化合物编号52：¹H NMR(400MHz,DMSO)δ＝8.43(s,1H),8.08(s,1H),7.59(d,J＝5.8,1H),7.45(s,2H),6.85(d,J＝5.8,1H),5.32(s,2H),3.00-2.92(m,1H),2.85(s,3H),2.22(s,6H),1.00-0.88(m,4H)。

化合物编号53：¹H NMR(400MHz,DMSO)δ8.43(br s,1H),8.04(s,1H),7.59(d,J＝5.8Hz,1H),7.45(s,2H),6.82(d,J＝5.8Hz,1H),5.22(s,2H),2.21(s,6H)

化合物编号59：¹H NMR(400MHz,DMSO)δ8.92(d,J＝1.6Hz,1H),8.51(br s,1H),8.31(s,1H),7.62(d,J＝5.8Hz,1H),7.44(s,2H),6.85(d,J＝5.8Hz,1H),6.62(d,J＝1.6Hz,1H),5.62(s,2H),2.19(s,6H)。

化合物编号61：¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δppm 2.21(s,6H),2.88(s,3H),3.12(s,3H),5.23(s,2H),6.82(d,J＝5.70Hz,1H),7.45(s,2H),7.59(d,J＝5.70Hz,1H),8.04(s,1H),8.42(s,1H)。

化合物编号63：¹H NMR(400MHz,DMSO)δ8.43(s,3H),8.06(d,J＝12.2Hz,3H),7.59(d,J＝5.8Hz,3H),7.45(s,6H),6.80(dd,J＝12.1,5.8Hz,3H),5.24(s,0.9H),5.20(s,1.1H),3.09(s,1.7H),2.85(s,1.3H),2.21(s,6H),1.24(t,J＝7.1Hz,1.3H),1.04(t,J＝7.1Hz,1.7H)。观察到两种旋转异构体，比率60:40。

化合物编号64：¹H NMR(300MHz,氯仿-d)δppm 2.31(s,6H),3.00(s,3H),3.14(s,3H),5.12(s,2H),6.55(br s,1H),6.75(br d,J＝6.05Hz,1H),6.94(s,1H),7.46(s,2H),7.95(br d,J＝5.91Hz,1H)。

化合物编号65：¹H NMR(300MHz,氯仿-d)δppm 1.15-1.23(m,6H)2.23(s,3H)2.99(s,3H)3.11(s,3H)3.37-3.58(m,1H)5.11(s,2H)6.73(br d,J＝5.91Hz,1H)6.82(br s,1H)7.13(br d,J＝4.67Hz,1H)7.91(br d,J＝5.91Hz,1H)8.53(d,J＝4.67Hz,1H)

化合物编号66：¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δppm 0.88(t,J＝7.37Hz,3H),1.24(sxt,J＝7.44Hz,2H),1.78(quin,J＝7.21Hz,2H),4.29(t,J＝6.93Hz,2H),6.87(br d,J＝5.50Hz,1H),7.26-7.35(m,1H),7.55(d,J＝8.14Hz,2H),7.59(br s,1H),7.99(br s,1H),9.38(br s,1H)。

化合物编号67：¹H NMR(400MHz,氯仿-d)δppm 0.94(t,J＝7.32Hz,3H),1.26-1.38(m,2H),1.77-1.96(m,2H),4.21-4.29(m,2H),6.57(d,J＝6.92Hz,1H),7.41(s,1H),7.48(d,J＝6.51Hz,1H),8.49(s,2H),9.43(br s,1H)。

化合物编号68：¹H NMR(400MHz,氯仿-d)δppm 0.94(t,J＝7.37Hz,3H),1.22-1.38(m,2H),1.78-1.94(m,2H),1.94-2.17(m,1H),2.20(s,6H),4.26(t,J＝7.15Hz,2H),6.72(d,J＝6.16Hz,1H),7.18(s,1H),7.84(br d,J＝6.16Hz,1H),8.39(s,2H)。

化合物编号78：1H NMR(400MHz,氯仿-d)δppm 2.20(d,J＝2.4Hz,3H)2.21(s,3H)3.05(s,3H)3.17(s,3H)4.93(s,2H)6.65(d,J＝5.9Hz,1H)6.75(br s,1H)6.89-6.97(m,1H)7.83(s,1H)7.88(d,J＝5.8Hz,1H)。

药理学实例

1)OGA-生化测定

该测定基于重组人脑膜瘤表达的抗原5(MGEA5)(也称为O-GlcNAc酶(OGA))对荧光素单-β-D-N-乙酰基-葡糖胺(FM-GlcNAc)(Mariappa等人,2015,Biochem J[生物化学杂志]470:255)的水解的抑制。水解FM-GlcNAc(马克基因技术公司(Marker Genetechnologies)，目录号M1485)导致β-D-N-葡糖胺乙酸盐和荧光素的形成。后者的荧光可以在485nm的激发波长和538nm的发射波长下测量。酶活性的增加导致荧光信号的增加。在定向基因公司(OriGene)(目录号TP322411)购买全长OGA酶。将酶在-20℃下储存在25mMTris.HCl，pH 7.3，100mM甘氨酸，10％甘油中。作为参考化合物测试Thiamet G和GlcNAcStatin(Yuzwa等人,2008Nature Chemical Biology[自然化学生物学]4:483；Yuzwa等人,2012Nature Chemical Biology[自然化学生物学]8:393)。该测定在补充有0.005％吐温-20的200mM柠檬酸盐/磷酸盐缓冲液中进行。将35.6g Na₂HPO₄ 2H₂O(西格玛公司(Sigma)，#C0759)溶解在1L水中以获得200mM溶液。将19.2g柠檬酸(默克公司，#1.06580)溶解在1L水中以获得100mM溶液。用柠檬酸溶液将磷酸钠溶液的pH调节至7.2。用于终止反应的缓冲液由500mM碳酸盐缓冲液(pH 11.0)组成。734mg将FM-GlcNAc溶解在5.48mL DMSO中以获得250mM溶液，并储存在-20℃下。OGA以2nM浓度使用，并且FM-GlcNAc以100uM最终浓度使用。在测定缓冲液中制备稀释液。

将50nl溶解在DMSO中的化合物分配到黑色Proxiplate TM 384Plus测定板(珀金埃尔默公司(Perkin Elmer)，#6008269)上，随后添加3μl fl-OGA酶混合物。将板在室温下预孵育60min，然后添加2μl FM-GlcNAc底物混合物。最终的DMSO浓度不超过1％。将板以1000rpm短暂离心1min，并在室温下孵育6h。为了终止反应，添加5μl终止缓冲液并将板以1000rpm再次离心1min。在赛默科技公司(Thermo Scientific)Fluoroskan Ascent或珀金埃尔默公司(PerkinElmer)EnVision中定量荧光，激发波长为485nm，发射波长为538nm。

对于分析，通过最小平方和方法拟合最佳拟合曲线。由此获得IC₅₀值和希尔系数。高对照(无抑制剂)和低对照(标准抑制剂的饱和浓度)用于定义最小值和最大值。

2)OGA-细胞测定

在杨森公司(Janssen)建立了可诱导P301L突变型人Tau(同种型2N4R)的HEK293细胞。Thiamet-G用于板验证(高对照)和作为参考化合物(参考EC₅₀测定验证)。通过如前所述使用检测O-GlcN酰化残基的单克隆抗体(CTD110.6；细胞信号传导公司(CellSignaling)，#9875)对O-GlcN酰化蛋白进行免疫细胞化学(ICC)检测来评估OGA抑制(Dorfmueller等人,2010Chemistry&biology[化学与生物学],17:1250)。OGA的抑制将导致O-GlcN酰化蛋白水平的增加，导致实验中的信号增加。细胞核用Hoechst染色以提供细胞培养物质量对照和粗略估计的即时化合物毒性(如果有的话)。ICC图片用珀金埃尔默公司Opera Phenix平板显微镜成像，并用提供的软件珀金埃尔默公司Harmony 4.1进行定量。

按照标准程序，将细胞在DMEM高葡萄糖(西格玛公司，#D5796)中繁殖。细胞测定前2天将细胞分开，计数并接种于聚-D-赖氨酸(PDL)包被的96孔(葛莱娜公司(Greiner)，#655946)板(细胞密度为12,000个细胞/cm²(4,000个细胞/孔))的100μl测定培养基中(低葡萄糖培养基用于降低GlcN酰化的基础水平)(Park等人,2014The Journal of biologicalchemistry[生物化学杂志]289:13519)。在化合物测试当天，从测定板中去除培养基并用90μl新鲜测定培养基补充。将10μl的10倍最终浓度的化合物添加至孔中。在细胞孵育箱中孵育6小时之前不久将板离心。DMSO浓度设定为0.2％。通过施加真空丢弃培养基。为了细胞染色，去除培养基，并用100μl D-PBS(西格玛公司，#D8537)洗涤细胞一次。从下一步开始，除非另有说明，否则测定体积总是50μl，并且在没有搅拌和在室温下进行孵育。在室温下，将细胞在50μl 4％多聚甲醛(PFA，阿法埃莎公司(Alpha aesar)，#043368)PBS溶液中固定15分钟。然后将PFA PBS溶液丢弃并在10mM Tris缓冲液(生命技术公司(LifeTechnologies)，#15567-027)、150mM NaCl(生命技术公司，#24740-0110)，0.1％Triton X(阿法埃莎公司，#A16046)(pH 7.5(ICC缓冲液))中洗涤细胞一次，之后在相同缓冲液中透化10分钟。随后在室温下，将样品在含有5％山羊血清(西格玛公司，#G9023)的ICC中封闭45-60分钟。然后将样品与第一抗体(来自商业提供者的1/1000，参见上文)在4℃下孵育过夜，并且随后在ICC缓冲液中洗涤3次，持续5分钟。将样品与第二荧光抗体(1/500稀释，生命技术公司，#A-21042)一起孵育，并用在ICC(生命技术公司，#H3570)中最终浓度为1μg/ml的Hoechst33342进行细胞核染色1小时。在分析之前，将样品在ICC碱缓冲液中手动洗涤2次，持续5分钟。

使用珀金埃尔默公司Phenix Opera使用水20x物镜并每孔记录9个视野进行成像。在488nm处的强度读数用作孔中总蛋白质的O-GlcN酰化水平的量度。为了评估化合物的潜在毒性，使用Hoechst染色计数细胞核。使用参数非线性回归模型拟合计算IC₅₀值。作为最大抑制，在每个平板上存在200uM浓度的Thiamet G。另外，在每个板上计算Thiamet G的浓度应答。

表5.生化测定和细胞测定中的结果。根据如上所述的程序对本发明的代表性化合物进行测试，结果列示在下表中(n.d.意指未确定)。下表中报告的值受与所用测定和设备相关的误差范围的影响。

根据如上所述的程序对本发明的代表性化合物进行测试，结果列示在下表中(n.d.意指未确定)。下表中报告的值受典型误差范围的影响，并且是具体化合物数次运行的平均值，这些值在设备再次校准后获得。

Claims

1.一种具有式(I)的化合物

或其互变异构体或立体异构形式，或其氘化形式，其中

X¹和X²各自独立地选自CR⁴和N，条件是X¹或X²中的一个是N；

R³选自下组，该组由以下组成：

或其药学上可接受的盐或溶剂化物；用于作为药物使用。

2.一种具有式(I)的化合物

或其互变异构体或立体异构形式，或其氘化形式，其中

X¹和X²各自独立地选自CR⁴和N，条件是X¹或X²中的一个是N；

R³选自下组，该组由以下组成：

或其药学上可接受的盐或溶剂化物。

3.根据权利要求2所述的化合物，其中R³选自下组，该组由以下组成：

4.根据权利要求2或3所述的化合物，其中R³选自下组，该组由以下组成：(a)、(b)、和(c)：

n代表0、1或2；

5.根据权利要求2至4中任一项所述的化合物，其中具有式(I)的化合物具有式(I-A)、(I-B)、(I-C)或(I-D)

其中z1和z2各自独立地选自氢、氘和卤素，并且其余变量如权利要求2至4中任一项所定义。

6.一种药物组合物，该药物组合物包含预防或治疗有效量的根据权利要求2至5中任一项所述的化合物、和药学上可接受的载体。

7.一种用于制备根据权利要求6所述的药物组合物的方法，该方法包括：将药学上可接受的载体与预防或治疗有效量的根据权利要求2至5中任一项所述的化合物混合。

8.根据权利要求2至5中任一项所述的化合物或根据权利要求6所述的药物组合物，用于作为药物使用。

9.根据权利要求1所述使用的化合物，用于治疗或预防tau蛋白病或α突触核蛋白病。

10.根据权利要求2至5中任一项所述的化合物或根据权利要求6所述的药物组合物，用于在治疗或预防tau蛋白病或α突触核蛋白病中使用。

11.根据权利要求9或10所述使用的化合物或药物组合物，其中该tau蛋白病选自下组，该组由以下组成：阿尔茨海默氏病、肌萎缩侧索硬化和帕金森综合征-痴呆复合征、嗜银颗粒疾病、慢性创伤性脑病、皮质基底节变性、弥散性神经原纤维缠结伴钙化、唐氏综合征、家族性英国型痴呆、家族性丹麦型痴呆、与17号染色体连锁的伴有帕金森综合征的额颞痴呆(由MAPT突变引起)、额颞叶变性(某些病例由C9ORF72突变引起)、吉斯特曼-斯召斯列疾病、帕金森病、瓜德罗普岛帕金森综合征、强直性肌营养不良、神经退行性病变伴有脑铁沉积、C型尼曼-皮克病、具有神经原纤维缠结的非关岛运动神经元疾病、皮克氏病、脑炎后帕金森综合征、朊病毒蛋白脑淀粉样血管病、进行性皮层下神经胶质增生、进行性核上性麻痹、SLC9A6相关的精神发育迟滞、亚急性硬化性全脑炎、仅缠结痴呆、以及具有球状胶质包涵体的白质tau蛋白病；并且该α突触核蛋白病选自下组，该组由以下组成：帕金森病、由帕金森病引起的痴呆(或由帕金森病引起的神经认知障碍)、路易体痴呆、多系统萎缩、以及由戈谢氏病引起的α突触核蛋白病。

12.根据权利要求1所述使用的化合物，用于控制或降低临床前阿尔茨海默氏病、前驱性阿尔茨海默氏病、或在不同形式的tau蛋白病中观察到的与tau相关的神经退行性病变的风险。

13.根据权利要求2至5中任一项所述的化合物或根据权利要求6所述的药物组合物，用于在控制或降低临床前阿尔茨海默氏病、前驱性阿尔茨海默氏病、或在不同形式的tau蛋白病中观察到的与tau相关的神经退行性病变的风险中使用。

14.根据权利要求所述使用的化合物，用于控制或降低前驱性帕金森病的风险。

15.根据权利要求2至5中任一项所述的化合物或根据权利要求6所述的药物组合物，用于在控制或降低前驱性帕金森病的风险中使用。

16.一种预防或治疗选自下组的障碍的方法，该组由以下组成：tau蛋白病或α突触核蛋白病，特别是选自下组的tau蛋白病，该组由以下组成：阿尔茨海默氏病、肌萎缩侧索硬化和帕金森综合征-痴呆复合征、嗜银颗粒疾病、慢性创伤性脑病、皮质基底节变性、弥散性神经原纤维缠结伴钙化、唐氏综合征、家族性英国型痴呆、家族性丹麦型痴呆、与17号染色体连锁的伴有帕金森综合征的额颞痴呆(由MAPT突变引起)、额颞叶变性(某些病例由C9ORF72突变引起)、吉斯特曼-斯召斯列疾病、帕金森病、瓜德罗普岛帕金森综合征、强直性肌营养不良、神经退行性病变伴有脑铁沉积、C型尼曼-皮克病、具有神经原纤维缠结的非关岛运动神经元疾病、皮克氏病、脑炎后帕金森综合征、朊病毒蛋白脑淀粉样血管病、进行性皮层下神经胶质增生、进行性核上性麻痹、SLC9A6相关的精神发育迟滞、亚急性硬化性全脑炎、仅缠结痴呆、以及具有球状胶质包涵体的白质tau蛋白病；或特别是选自由以下组成的组的α突触核蛋白病：帕金森病、由帕金森病引起的痴呆(或由帕金森病引起的神经认知障碍)、路易体痴呆、多系统萎缩、以及由戈谢氏病引起的α突触核蛋白病；该方法包括向有需要的受试者施用预防或治疗有效量的根据权利要求2至4中任一项所述的化合物或根据权利要求6所述的药物组合物。