CN114848685B - 抗过敏益生菌组合物及其应用、以及益生菌中药发酵物 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种抗过敏益生菌组合物及其应用、以及益生菌中药发酵物，所述益生菌组合物包括重量比为（2‑4）：（2‑4）：（1‑3）：（1‑3）的嗜酸乳杆菌、罗伊氏乳杆菌、动物双歧杆菌乳亚种和唾液乳杆菌。本发明将上述益生菌组合物对中药提取物进行发酵，中药组合物包括黄芪、山药、肉苁蓉、白芷、芫荽、蒲公英、薏苡仁、杏仁和甘草。本发明得到含中药及活益生菌的发酵产物具有较佳的抗过敏功效，且优于单纯中药组合物或单纯益生菌组合物。
Description
技术领域
本发明涉及益生菌技术领域，尤其涉及一种抗过敏益生菌组合物及其应用、以及益生菌中药发酵物。
背景技术
过敏是机体的免疫应答超出正常范围，即免疫系统对无害物质进行攻击，也叫变态反应。免疫应答是人的防卫体系重要的功能之一，变态反应是一种疾病，对人体的健康非常不利。
过敏的原因有外因、内因。外因是指某些物质进入人体后能够导致部分人的免疫系统发生异常反应，这些物质称为“变应原”，亦称过敏原，是造成过敏的罪魁祸首。常见吸入性过敏原，如鱼虾、尘埃尘螨、花粉棉絮、动物皮毛、真菌等。内因是因为部分人为“过敏体质”。过敏体质是指某类人群的免疫系统存在缺陷，他们的免疫系统异于常人，故容易做出“不辨敌友、无端攻击”的举动，从而导致过敏的发生。
目前全世界有30%-40%的人群被过敏问题困扰，有数亿人患过过敏性鼻炎，有3亿人患哮喘，过敏性疾病成为全球第六大疾病。流行病学数据显示，过去6年，我国过敏性鼻炎患病率从11.1%升高到17.6%，患病人数增加了1亿。过敏性鼻炎长期迁延，是哮喘、慢阻肺、心脑血管疾病、糖尿病等系统慢病的源头性疾病。“中国城市婴幼儿过敏流行病学调查”结果显示，婴幼儿中，约有40.9%的家长自报孩子曾发生或正在发生过敏性疾病症状，过敏性疾病是全球儿童的第三大疾病。同时63%的家长不了解宝宝的过敏症状与免疫力有关。
西医和中医对过敏机理均有一定的研究。其中，西医认为过敏反应是由肥大细胞和嗜碱性粒细胞释放的介质所触发的系统性的疾病。健康或正常人的机体内，其免疫调节T辅助细胞的第一型（Th1）与第二型（Th2）应维持在一个平衡状态，即健康状态。当第二型T辅助细胞（Th2）的活性过高/过盛时，其会帮助B细胞（B cell）制造较多的过敏抗体（IgE），就出现过敏现象。IgE 会与肥大细胞和嗜碱性粒细胞上表达的高亲和力 IgE 受体交联，产生并引发信号级交联反应，释放包括组胺、前列腺素和白三烯在内的介质。当这些介质从细胞中释放出来时，就会产生过敏的典型症状，包括组织肿胀、支气管收缩和血压下降等，这些均为过敏现像的表现。
中医对过敏也有着深刻的认知。其中，《黄帝内经》云：正气内存，邪不可干；邪之所凑，其气必虚！正气其为与邪气相对面言，是人体生命能力的统称。包括人体正常活动力的能力，自我调节适应环境的能力，抵抗疾病及康复自愈的能力。正气者，正风也！四季之春温、夏热（长夏署湿）、秋凉、冬寒为四季之正风！内经认为邪有六邪，风、寒、署、湿、燥、火六气为正常的气候变化，其过或不及，即为邪！因此邪也为大自然中存在的气候，人存于天地之间，与天地合，与外气相通，得时时刻刻准备与邪气做斗争。人体气血充赢则正气足，气血弱则正气虚，当人体正气虚不足以抵抗风、寒、署、湿等邪气之时，人即易生病。正气虚弱时之体质也即为敏感之体质，此时易发生过敏性疾病。也有相关研究表明，绝大部分的过敏反应（例如：哮喘，过敏性鼻炎，皮炎，荨麻疹，湿疹等）均发生在皮肤及粘膜（粘膜也是广义的皮肤）部位，中医认为，其均为肺所主，肺气虚，则易发生过敏性疾病。同时阳气虚，则不能很好的汽化津液，易使水汽上逆，出现过敏反应常有的大量清鼻涕、喉头水肿等反应。
此外，益生菌与过敏性疾病也有着一定的关联性。相关研究表明，过敏儿童在过敏发作前被发现体内有异常的微生物群，他们体内的梭菌含量较高，双岐杆菌含量较低。特异性皮炎婴儿的双歧杆菌在体外诱导更高的促炎细胞因子分泌，而来自健康婴儿的双歧杆菌肠道有更多的抗炎细胞因子分泌。
大多数情况下，食用益生菌的目的是调节肠道微生物群的组成及活性，这种调节可影响免疫系统。部分益生菌菌株在足够消耗后可调节部分免疫参数，有助于排除过敏原，减少炎症并刺激对常见抗原的耐受性。
肠道微生物群的另一个重要功能是提供一个保护肠屏障来抵御外来细菌，例如潜在的病原体。这种定殖抗性通过几种不同的机制发挥作用，例如对营养物质和结合位点的竞争以及抗微生物物质的产生。
益生菌被人食用后，定殖于肠道，能有效提高人体有益菌群的丰度，并产生乳酸、乙酸及维生素等物质，其中乳酸、乙酸等酸性物质可以抑制有害菌生长，维生素等物质可以促进宿主机体健康，对宿主有强大的益生功能。同时中医认为，肺与大肠相表里，肺与大肠会相互影响，益生菌调理肠道健康，即同时发挥了对肺功能的调节作用，因此，从中医理论也说明，服用益生菌有益于肺气稳固及人体正气的提升。
综上所述，中药及益生菌均能发挥一定的抗过敏功效。但是，哪些特定益生菌、哪些中药组合物能够发挥抗过敏功效是不明确的。
例如，中国发明专利CN103907927A公开了一种调理特禀体质的膳食，其虽然添加了植物（中药来源）成分，并对部分植物进行提取，再与益生菌等直接混合。其益生菌配方复杂，包括双歧杆菌（青春双歧杆菌、乳双歧杆菌、两歧双歧杆菌、短双歧杆菌、婴儿双歧杆菌、长双歧杆菌）、乳杆菌（嗜酸乳杆菌粉、干酪乳杆菌、保加利亚乳杆菌、德氏乳杆菌、乳亚种格氏乳杆菌、发酵乳杆菌、瑞士乳杆菌、唾液乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、罗伊氏乳杆菌、植物乳杆菌、副干酪乳杆菌、约氏乳杆菌），是绝大多数已知益生菌的堆积，无法确认其配伍的合理性且无法验证。此外，其添加的中药包括芦根、黄精、蒲公英、乌梅、淡竹叶、菊花、红枣、橘红、甘草、平卧菊三七、桑葚、百合、山药、金银花、枸杞、白芷、薄荷、薏苡仁等，也是罗列了部分药食同源来源的药材，并未按中医中药理论进行组方，无法说明其组方的合理性。
发明内容
为了克服现有技术的不足，本发明的目的之一在于提供一种抗过敏益生菌组合物，具有良好的抗过敏功效。
本发明的目的之二在于提供一种抗过敏的中药益生菌发酵物，具有较佳的抗过敏功效，且优于单纯中药组合物或单纯益生菌组合物。
本发明的目的之三在于提供一种抗过敏产品，包括所述抗过敏益生菌组合物。
本发明的目的之四在于将所述抗过敏益生菌组合物应用于制备抗过敏产品中。
本发明的目的之一采用如下技术方案实现：
一种抗过敏益生菌组合物，所述益生菌组合物包括重量比为（2-4）：（2-4）：（1-3）：（1-3）的嗜酸乳杆菌、罗伊氏乳杆菌、动物双歧杆菌乳亚种和唾液乳杆菌。
在本发明中，按重量比分别取嗜酸乳杆菌菌粉、罗伊氏乳杆菌菌粉、动物双歧杆菌乳亚种菌粉和唾液乳杆菌菌粉进行混合，即得所述益生菌组合物。本发明中所用的嗜酸乳杆菌菌粉、罗伊氏乳杆菌菌粉、动物双歧杆菌乳亚种菌粉和唾液乳杆菌菌粉的规格是相同的。例如，上述4种菌粉的规格均为活菌数大于1.0×109~1.0×1011CFU/克，具体地，4种菌粉规格可以均为活菌数大于1.0×109CFU/克、或均为活菌数大于1.0×1010CFU/克、或均为活菌数大于1.0×1011CFU/克。
在本发明中，抗过敏包括预防和/或治疗过敏反应。
在本发明的一个优选实施方式中，在所述益生菌组合物中，嗜酸乳杆菌、罗伊氏乳杆菌、动物双歧杆菌乳亚种和唾液乳杆菌的重量比为3：3：2：2，在此比例范围内，抗过敏效果较佳。此时，4种菌粉规格可以均为活菌数大于1.0×109CFU/克、或均为活菌数大于1.0×1010CFU/克、或均为活菌数大于1.0×1011CFU/克，更加优选地为活菌数大于1.0×1011CFU/克。所述益生菌组合物在其它比例范围内也可以发挥抗过敏功效，例如嗜酸乳杆菌、罗伊氏乳杆菌、动物双歧杆菌乳亚种和唾液乳杆菌的重量比为4：2：3：1；或者为2：4：1：3；或者为1：1：1：1；或者为2：2：3：3；或者为3：2：3：2；又或者为2：3：2：3。
在本发明的一个优选实施方式中，嗜酸乳杆菌菌粉、罗伊氏乳杆菌菌粉、动物双歧杆菌乳亚种菌粉和唾液乳杆菌菌粉规格均为活菌数大于1.0×1011CFU/克，当嗜酸乳杆菌、罗伊氏乳杆菌、动物双歧杆菌乳亚种和唾液乳杆菌的重量比为3：3：2：2时，分别取上述4种菌粉0.03克、0.03克、0.02克和0.02克，获得的益生菌组合物的活菌数则定为100亿。特别说明，如单菌株菌粉规格不同，则益生菌组合物配方中所称取的单菌株菌粉重量做出相应调整，以活菌数为准。
在本发明的一个优选实施方式中，所述嗜酸乳杆菌为保藏编号为CGMCC NO.15705的嗜酸乳杆菌K43；所述罗伊氏乳杆菌为保藏编号为CGMCC NO.15703的罗伊氏乳杆菌K07；所述动物双歧杆菌乳亚种为保藏编号为CGMCC NO.15026的动物双歧杆菌乳亚种Y6；所述唾液乳杆菌为保藏编号为CGMCC NO.15701的唾液乳杆菌K2。
其中，嗜酸乳杆菌 K43，主要存在小肠中，同时又具极佳的耐酸性，可以胃液中存活，它释放乳酸、乙酸和一些对有害菌起作用的抗菌素（嗜酸乳菌素（acidolin）、嗜酸杆菌素（acidophilin）、乳酸菌素（1aetocidon）），可拮抗肠道致病菌。研究显示，其具有较好的抗炎作用。
罗伊氏乳杆菌K07，其耐酸、耐胆盐，可产生短链脂肪酸（如丁酸），从而促进肠道上皮细胞的增值，有利于修复肠道粘膜；可产生抑菌物质（罗伊氏素），抑制有害菌生长；可合成B族维生素，将无机硒转化为可供机体利用的有机硒，具明显的抗氧化功效，有利于炎症细胞的修复，改善过敏症状。
动物双歧杆菌乳亚种Y6，其耐酸、耐胆盐、耐氧，在肠道中有很高的定殖能力，可以提高宿主免疫力，减少过敏反应发生。
唾液乳杆菌K2，其耐酸、耐胆盐，高产胞外多糖，且胞外多糖具促自然杀伤细胞活性。研究显示，具有抗炎、改善过敏症状功效。
以上四种菌株共同作用，通过抗过敏试验研究显示，具有较好的抗过敏功效，并且本发明对四种菌的配比进行了优化。
在本发明的一个优选实施方式中，所述过敏为由Thl/Th2失衡导致的过敏，包括过敏性鼻炎、过敏性哮喘、结膜炎、皮炎、湿疹、荨麻疹、食物过敏和药物过敏等。
本发明的目的之二采用如下技术方案实现：
一种抗过敏的中药益生菌发酵物，由目的之一任一项所述的益生菌组合物对中药提取液进行发酵而成，所述中药提取液由中药组合物经过提取而成，所述中药组合物由以下原料组成：黄芪10-20份、山药8-16份、肉苁蓉8-16份、白芷8-16份、芫荽6-12份、蒲公英10-16份、薏苡仁8-16份、杏仁8-12份、甘草4-8份。
相关研究表明，绝大部分的过敏反应发生在皮肤及粘膜（粘膜也是广义的皮肤）部位。中医认为，过敏均为肺所主，因此要抗过敏，补肺气固表为第一要务；其次中医认为脾属土，肺属金，五行相生相克，土生金，脾为肺之母，且中医认为，虚则补其母，可通过健脾益胃来补气生血，气血旺则正气足；同时身体阳气可以促进汽化津液、曛和水汽。再次要解毒、袪风，除去身体津液、血液中毒素；同时要解表、利湿，调通水道，输布津液，首先使水不再上逆而出（例如过敏性鼻炎，水湿上泛，从鼻部出；过敏性哮喘，引发喉头水肿导致呼吸道堵塞等），再是促进排出体内毒素；从而减少身体津液、血液中毒素，达止痒、解除炎症、水肿等过敏相关症状功效。
方中黄芪味甘，性微温；归脾、肺经，为补气要药，且固表（中医肺之表即为皮肤、粘膜等，固表，风、寒、湿、火等邪气就很难乘虚而入，进行人体，从而建立起一道坚实的防线），同时还能利水，为君药。
山药补脾养胃，生津益肺，补肾涩精，协助黄芪补肺气同时补脾养胃，使气血有生化之源，同时补肾涩精，补养先天以益后天，为臣药。
肉苁蓉味甘、咸，性温。归肾、大肠经，具补肾阳、益精血、润肠通便功效，主要取其补益肾阳，助汽化津液功效，因此同为臣药。
白芷解表散寒，同时又祛风止痒，将邪气驱逐出体外，同为臣药。
芫荽归肺、胃经，发表透疹，可将诸邪驱出体外，以解除皮肤过敏症状，同时又健胃，同为臣药。《本草纲目》称“芫荽性味辛温香窜，内通心脾，外达四肢”
蒲公英归清热利湿，调节水道又具解毒功效，能使湿、毒、热等从水道除去，同为臣药。
杏仁下肺气，调通上焦水道，薏苡仁健脾渗湿，调通中下焦水道共同作用，调通人体水道，使人体湿、毒、热等邪顺利通过水道排出体外，共同做为佐药。
甘草补脾益气，清热解毒，调和诸药做为使药。
以上诸药，共同作用，发挥补气固表益阳，益气健脾、解表透疹、利水解毒功效，从而解除过敏症状。
在本发明的一个优选实施方式中，所述中药组合物由以下原料组成：黄芪12-18份、山药9-15份、肉苁蓉9-15份、白芷9-15份、芫荽7-11份、蒲公英11-15份、薏苡仁9-15份、杏仁9-12份、甘草5-8份。
在本发明的一个优选实施方式中，所述抗过敏的中药益生菌发酵物由益生菌组合物对中药提取液进行发酵而成，所述益生菌组合物由以下益生菌菌株组成：保藏编号为CGMCC NO.15705的嗜酸乳杆菌K43、保藏编号为CGMCC NO.15703的罗伊氏乳杆菌K07、保藏编号为CGMCC NO.15026的动物双歧杆菌乳亚种Y6和保藏编号为CGMCC NO.15701的唾液乳杆菌K2；所述中药提取液由中药组合物经过提取而成，所述中药组合物由以下原料组成：黄芪16份、山药12份、肉苁蓉12份、白芷12份、芫荽9份、蒲公英12份、薏苡仁12份、杏仁9份、甘草6份。
在本发明的一个优选实施方式中，所述抗过敏的中药益生菌发酵物由益生菌组合物对中药提取液进行发酵而成，所述益生菌组合物包括重量比为（2-4）：（2-4）：（1-3）：（1-3）的嗜酸乳杆菌、罗伊氏乳杆菌、动物双歧杆菌乳亚种和唾液乳杆菌。更加优选地，嗜酸乳杆菌、罗伊氏乳杆菌、动物双歧杆菌乳亚种和唾液乳杆菌的重量比为3：3：2：2。上述所指重量比是上述4种益生菌的二级种子发酵液重量比。
本发明的目的之三采用如下技术方案实现：
一种抗过敏产品，包括目的之一任一项所述的抗过敏益生菌组合物。
在本发明的一个优选实施方式中，所述抗过敏产品包括药品、保健品和功能性食品。
本发明的目的之四采用如下技术方案实现：
本发明还提供了将目的之一任一项所述的抗过敏益生菌组合物在制备抗过敏产品中的应用，其中，所述抗过敏产品包括药品、保健品和功能性食品。
在本发明的一个优选实施方式中，所述抗过敏产品为口服制剂，所述口服制剂的剂型包括口服液、滴剂、片剂、粉剂、胶囊剂或颗粒剂。
相比现有技术，本发明的有益效果在于：
（1）本发明所提供的抗过敏益生菌组合物，具有良好的抗过敏功效，能够提高免疫力。
（2）本发明所提供的抗过敏的中药益生菌发酵物，中药组合物包括黄芪、山药、肉苁蓉、白芷、芫荽、蒲公英、薏苡仁、杏仁和甘草，以上诸药经提取后，添加本发明的益生菌组合物进行发酵，得到含中药及活益生菌的发酵产物，其具有较佳的抗过敏功效，且优于单纯中药组合物或单纯益生菌组合物。
生物材料保藏信息：
本发明所提供的菌株，嗜酸乳杆菌 K43，保藏编号为CGMCC NO.15705，分类命名为：嗜酸乳杆菌Lactobacillus acidophilus，已于2018年4月28日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心 (地址：北京市朝阳区北辰西路1号院 3号，中国科学院微生物研究所，邮政编码：100101)，保藏单位的缩写为CGMCC。
本发明所提供的菌株，唾液乳杆菌 K2，保藏编号为CGMCC NO.15701，分类命名为：唾液乳杆菌Lactobacillus salivarius，已于2018年4月28日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心 (地址：北京市朝阳区北辰西路1号院 3号，中国科学院微生物研究所，邮政编码：100101)，保藏单位的缩写为CGMCC。
本发明所提供的菌株，罗伊氏乳杆菌K07，保藏编号为CGMCC NO.15703，分类命名为：罗伊氏乳杆菌Lactobacillus reuteri ，已于2018年4月28日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心 (地址：北京市朝阳区北辰西路1号院 3号，中国科学院微生物研究所，邮政编码：100101)，保藏单位的缩写为CGMCC。
本发明所提供的菌株，动物双歧杆菌乳亚种Y6，保藏编号为CGMCC NO.15026，分类命名为：动物双歧杆菌乳亚种Bifidobacterium animalis subsp.lactis，已于2017年12月7日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心 (地址：北京市朝阳区北辰西路1号院 3号，中国科学院微生物研究所，邮政编码：100101)，保藏单位的缩写为CGMCC。
具体实施方式
下面，结合具体实施方式，对本发明做进一步描述，需要说明的是，在不相冲突的前提下，以下描述的各实施例之间或各技术特征之间可以任意组合形成新的实施例。在下述实施例中所采用的原材料、设备等除特殊限定外均可以通过商业渠道购买获得。
试验体系一：抗过敏功效小鼠试验方法
在本发明以下的试验体系中，均采用小鼠试验进行抗过敏验证，具体的理论基础以及试验方法如下。
过敏是一种免疫疾病，是人体内免疫功能失调呈现不平衡的情况。与正常人相比，过敏患者血清IgE水平显着升高，肥大细胞数较多并且细胞膜上的IgE受体也较多。健康/正常人的机体内，其免疫调节T辅助细胞的第一型（Th1）与第二型（Th2）应维持在一个平衡状态，即健康状态。当第二型T辅助细胞（Th2）的活性过高/过盛时，其会帮助B细胞（B cell）制造较多的过敏抗体（IgE），就出现过敏现象。由此可以通过检测IgE浓度，从而确定过敏程度。
小鼠是常用的试验动物，可以通过测定过敏小鼠血液中过敏抗体（IgE）浓度来客观评价过敏的程度，具体试验如下。
动物来源：选取昆明种小白鼠，来源于南方医科大学动物实验中心，体重在18-22g之间，雌、雄各半，年龄6-8周。
实验方法：取小鼠，随机分组，每组10只，除正常进食外，空白对比组，给纯化水灌胃；试验组给予样品灌胃。灌胃每天1次，至抗过敏试验结束。
致敏：小鼠灌胃第10天，用100μL的卵清蛋白与弗氏完全佐剂的1：1完全乳化液体对小鼠进行腹腔注 射完成第一次致敏，第14天再用100μL的卵清蛋白与弗氏不完全佐剂的1：1完全乳化液体对小鼠腹腔注射完成第二次致敏。第25天，开始对小鼠进行激发，每隔24小时 对小鼠注射50mg的卵清蛋白，共注射3次，最后一次激发后24小时，分别对小鼠尾部采血，使用小鼠卵清蛋白特异性IgE(OVA- sIgE)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒对血浆中的卵清蛋白(OVA)特异性IgE浓度(ng/mL)进行测定。小鼠卵清蛋白特异性IgE(OVA sIgE)酶联免疫分析试剂盒购买自上海科艾博生物。
试验体系二：益生菌抗过敏筛选试验
2.1初步抗过敏筛选试验
对一些列的益生菌菌株进行小鼠抗过敏试验，包括青春双歧杆菌Y54、嗜酸乳杆菌K43、副干酪乳杆菌K9、动物双歧杆菌乳亚种Y6、长双歧杆菌W68、罗伊氏乳杆菌K07、戊糖片球菌LN-PT16、唾液乳杆菌K2及其不同菌株的组合。以上菌株分别制成的冻干菌粉，按上述“试验体系一：抗过敏功效小鼠试验方法”对小鼠进行灌胃并进行抗过敏试验，试验结束后尾部采血，测定小鼠血液中IgE浓度。
小鼠剂量折算方法：按每人每天150亿CFU益生菌食用量，人体重按平均70公斤计，每公斤体重服用量为2.14亿/kg，小白鼠剂量按人体10倍，即21.4亿CFU/kg，因此取整按22亿CFU/kg（往上计）计，给小鼠灌胃（空白组给予纯化水灌胃）。具体结果见下表1。
表1 不同菌株以及菌株组合的抗过敏结果记录表
备注：以上配比均以菌粉重量比进行配比，4种菌粉规格均为活菌数大于1.0×1011CFU/克。
从上表1可得出，小鼠血液中IgE浓度测定结果，单一菌株IgE测定数值从小到大依次为：嗜酸乳杆菌 K43组、罗伊氏乳杆菌K07组、动物双歧杆菌乳亚种Y6组 、唾液乳杆菌K2组 、戊糖片球菌LN-PT16组、长双歧杆菌W68组、 副干酪乳杆菌K9组、青春双歧杆菌Y54组。其中嗜酸乳杆菌 K43组、罗伊氏乳杆菌K07组、动物双歧杆菌乳亚种Y6组 、唾液乳杆菌K2组与空白对照组IgE差值在400ng/ml之上。
两种菌株相互组合显示：10号组及11号组测定IgE值与空白对照组差值小于各自菌种IgE值的与空白对照组差值的平均值，证明相互间有拮抗作用。12号组、13号组、14号组、15号组测定IgE值与空白对照组差值大于各自菌种IgE值与空白对照组差值的平均值，相互间有促进作用，且12号组及14号组两组测定IgE值与空白对照组差值较大，显示有较好的抗过敏功效。因此初步选定嗜酸乳杆菌 K43、罗伊氏乳杆菌K07、动物双歧杆菌乳亚种Y6及唾液乳杆菌K2组成的4菌株复方，进一步验证这4种菌株是否起到相互促进作用，并进一步对其配比进行研究。
2.2不同配比复方菌株抗过敏筛选试验
取嗜酸乳杆菌 K43、罗伊氏乳杆菌K07、动物双歧杆菌乳亚种Y6及唾液乳杆菌K2按不同配比组合，并按照“试验体系一：抗过敏功效小鼠试验方法”进行抗过敏功效筛选试验。四种菌株的复方配比如下表2所示。
表2 菌株配比表
备注：以上配比均以菌粉重量比进行配比，4种菌粉规格均为活菌数大于1.0×1011CFU/克。
取以上组合1~组合7的复合菌株冻干粉，按“试验体系一：抗过敏功效小鼠试验方法”对小鼠进行灌胃并进行抗过敏试验，试验结束后尾部采血，测定小鼠血液中IgE浓度。
小鼠剂量折算方法：按每人每天150亿CFU益生菌食用量，人体重按平均70公斤计，每公斤体重服用量为2.14亿/kg，小白鼠剂量按人体10倍，即21.4亿CFU/kg，因此取整按22亿CFU/kg（往上入）计，给小鼠灌胃复合冻干菌粉（空白组给予蒸馏水灌胃）。具体结果见下表3。
表3 复合菌株的抗过敏结果记录表
从上表3抗过敏试验数据结果看，抗过敏试验效果：复方菌株组合5>复方菌株组合6>复方菌株组合1>复方菌株组合3>复方菌株组合7 >复方菌株组合2 > 复方菌株组合4。结合表1的结果可得，无论是血清IgE值还是与空白对照组IgE差值，复方菌株抗过敏数据均优于单菌株，四种菌株在抗过敏效果中有相互促进的作用，组合复方菌株抗过敏效果优于单菌株。且最佳菌株配比组合为嗜酸乳杆菌 K43、罗伊氏乳杆菌K07、动物双歧杆菌乳亚种Y6及唾液乳杆菌K2的重量比为3：3：2：2。
试验体系三：益生菌发酵中药及其抗过敏试验研究
本试验体系的实施例1-6采用优化配比的复合益生菌（嗜酸乳杆菌 K43、罗伊氏乳杆菌K07、动物双歧杆菌乳亚种Y6及唾液乳杆菌K2的配比为3：3：2：2，按二级种子液配比）对中药组合：黄芪、山药、肉苁蓉、白芷、芫荽、蒲公英、薏苡仁、杏仁、甘草，进行益生菌发酵中药提取物研究。
本试验体系的实施例7-15采用不同配比的复合益生菌对中药提取液进行发酵。
对比例1为纯中药，不发酵试验。
对比例2为纯益生菌，无中药，发酵试验。
对比例3与实施例5区别为中药组合物中不含肉苁蓉、芫荽。
具体操作如下所述。
实施例1
一种抗过敏的中药益生菌发酵物，其益生菌发酵中药过程如下：
取以下材料：黄芪18份、山药10份、肉苁蓉14份、白芷8份、芫荽6份、蒲公英13份、薏苡仁16份、杏仁8份、甘草8份。嗜酸乳杆菌 K43、罗伊氏乳杆菌K07、动物双歧杆菌乳亚种Y6及唾液乳杆菌K2种子甘油管，备用。
上述中药益生菌发酵产物的制备方法包括以下步骤：
（1）将配方量的黄芪、山药、肉苁蓉、白芷、芫荽、蒲公英、薏苡仁、杏仁、甘草进行粉碎，过8目筛，得药粉。
（2）药材粗粉加入提取罐中，加10倍量（按药材重量计）水，加热回流提取2小时，提取完成后，转移至已灭菌后的发酵罐中，按提取液液体量，加入2.0%葡萄糖做为营养底物，搅拌使溶解，调pH值5.5左右，灭菌，放冷至37℃。
（3）将嗜酸乳杆菌 K43、罗伊氏乳杆菌K07、动物双歧杆菌乳亚种Y6及唾液乳杆菌K2种子甘油管，加MRS液体培养基分别活化，培养，得一级种子液。再将一级种子液，加MRS液体培养基扩掊，得二级种子液。将二级种子液，按嗜酸乳杆菌 K43、罗伊氏乳杆菌K07、动物双歧杆菌乳亚种Y6及唾液乳杆菌K2（3：3：2：2）比例配制，备用。
（4）培养：将混合二级种子液，按3.5%比例（按总加水重量计），加入到灭菌培养罐中，37℃培养10小时，即得益生菌中药发酵液。
（5）放出培养液，先100目初步滤过，除去药渣，再用400目滤布滤过，得中药益生菌发酵提取物。同时取发酵提取物，进行菌量检测。
（6）或再进一步将中药益生菌发酵提取物低温浓缩（低于40℃）至药材：发酵浓缩液（1：1），加入液体量20%海藻糖作为冻干保护剂，置冻干机中，按以下程序进行冻干，得中药益生菌发酵提取物冻干粉。冻干程序如下：预冻：-42~-50℃4h，冻结后进行抽真空干燥，干燥条件为：真空度为2~5Pa，干燥温度为-40~26℃，干燥时间40~50h。干燥终点判断：干燥室在不抽真空条件下，10分钟真空度上升不超过15Pa。
（7）在第（2）步及第5步完成时，各取50ml样品2份，5000转离心，取上清液，分别测pH值、600nm下吸光值，以对比发酵前后pH值及吸光值情况，以验证发酵情况及益生菌发酵对提中药提取液颜色的改变。具体见结果统计表4。
实施例 2
一种抗过敏的中药益生菌发酵物，其益生菌发酵中药过程如下：
取以下材料：黄芪12份、山药13份、肉苁蓉8份、白芷10份、芫荽12份、蒲公英16份、薏苡仁13份、杏仁10份、甘草6份。嗜酸乳杆菌 K43、罗伊氏乳杆菌K07、动物双歧杆菌乳亚种Y6及唾液乳杆菌K2种子甘油管备用。
上述中药益生菌发酵产物的制备方法包括以下步骤：
（1）将配方量的黄芪、山药、肉苁蓉、白芷、芫荽、蒲公英、薏苡仁、杏仁、甘草进行粉碎，过12目筛，得药粉。
（2）药材粗粉加入超声提取罐中，加10倍量（按药材重计）水，超声提取30分钟，提取条件：温度35℃，超声功率：1200瓦/单个超声头，超声2秒停1秒。提取完成后，转移至已灭菌后的发酵罐中，按提取液液体量，加入2.5%葡萄糖做为营养底物，搅拌使溶解，调pH值5.5左右，灭菌，提取液放冷至37℃。
（3）将嗜酸乳杆菌 K43、罗伊氏乳杆菌K07、动物双歧杆菌乳亚种Y6及唾液乳杆菌K2种子甘油管，加MRS液体培养基分别活化，37℃培养，得一级种子液。再将一级种子液，加MRS液体培养基37℃扩掊，得二级种子液。将二级种子液，按嗜酸乳杆菌 K43、罗伊氏乳杆菌K07、动物双歧杆菌乳亚种Y6及唾液乳杆菌K2（3：3：2：2）比例配制，备用。
（4）培养：将混合二级种子液，按2.5%（按总加水重量计）比例，加入到灭菌培养罐中，37℃培养12小时，即得益生菌中药发酵液。
（5）放出培养液，先100目初步滤过，除去药渣，再用400目滤布滤过，得中药益生菌发酵提取物。同时取发酵提取物，进行菌量检测。
（6）或再进一步将中药益生菌发酵提取物低温浓缩（低于40℃）至药材：发酵浓缩液（1：1），加入液体量20%海藻糖作为冻干保护剂，置冻干机中，按以下程序进行冻干，得中药益生菌发酵提取物冻干粉。冻干程序如下：预冻：-42~-50℃4h，冻结后进行抽真空干燥，干燥条件为：真空度为2~5Pa，干燥温度为-40~26℃，干燥时间40~50h。干燥终点判断：干燥室在不抽真空条件下，10分钟真空度上升不超过15Pa。
（7）在第（2）步及第5步完成时，各取50ml样品2份，5000转离心，取上清液，分别测pH值、600nm下吸光值，以对比发酵前后pH值及吸光值情况，以验证发酵情况及益生菌发酵对提中药提取液颜色的改变及益生菌发酵对提中药提取液颜色的改变。具体见结果统计表4。
实施例 3
一种抗过敏的中药益生菌发酵物，其益生菌发酵中药过程如下：
取以下材料：黄芪10份、山药16份、肉苁蓉10份、白芷14份、芫荽8份、蒲公英14份、薏苡仁10份、杏仁12份、甘草7份.嗜酸乳杆菌 K43、罗伊氏乳杆菌K07、动物双歧杆菌乳亚种Y6及唾液乳杆菌K2种子甘油管备用。
上述中药益生菌发酵产物的制备方法包括以下步骤：
（1）将配方量的黄芪、山药、肉苁蓉、白芷、芫荽、蒲公英、薏苡仁、杏仁、甘草进行粉碎，过14目筛，得药粉。
（2）药材粗粉加入超高压提取器中，加10倍量（按药材重计）水提取30分钟，提取条件：先浸泡30分钟，升压力为400MPa，保压3分钟，循环周期10次，温度为常温。提取完成后。提取完成后，转移至已灭菌后的发酵罐中，按提取液液体量，加入1.5%葡萄糖做为营养底物，搅拌使溶解，调pH值5.5左右，灭菌，提取液放冷至37℃。
（3）将嗜酸乳杆菌 K43、罗伊氏乳杆菌K07、动物双歧杆菌乳亚种Y6及唾液乳杆菌K2种子甘油管，加MRS液体培养基分别活化，37℃培养，得一级种子液。再将一级种子液，加MRS液体培养基37℃扩掊，得二级种子液。将二级种子液，按嗜酸乳杆菌 K43、罗伊氏乳杆菌K07、动物双歧杆菌乳亚种Y6及唾液乳杆菌K2（3：3：2：2）比例配制，备用。
（4）培养：将混合二级种子液，按1.5%（按总加水重量计）比例，加入到灭菌培养罐中，37℃培养14小时，即得益生菌中药发酵液。
（5）放出培养液，先100目初步滤过，除去药渣，再用400目滤布滤过，得中药益生菌发酵提取物。同时取发酵提取物，进行菌量检测。
（6）或再进一步将中药益生菌发酵提取物低温浓缩（低于40℃）至药材：发酵浓缩液（1：1），加入液体量20%海藻糖作为冻干保护剂，置冻干机中，按以下程序进行冻干，得中药益生菌发酵提取物冻干粉。冻干程序如下：预冻：-42~-50℃4h，冻结后进行抽真空干燥，干燥条件为：真空度为2~5Pa，干燥温度为-40~26℃，干燥时间40~50h。干燥终点判断：干燥室在不抽真空条件下，10分钟真空度上升不超过15Pa。
（7）在第（2）步及第5步完成时，各取50ml样品2份，5000转离心，取上清液，分别测pH值、600nm下吸光值，以对比发酵前后pH值及吸光值情况，以验证发酵情况及益生菌发酵对提中药提取液颜色的改变。具体见结果统计表4。
实施例4
一种抗过敏的中药益生菌发酵物，其益生菌发酵中药过程如下：
取以下材料：黄芪20份、山药14份、肉苁蓉13份、白芷16份、芫荽10份、蒲公英8份、薏苡仁8份、杏仁6份、甘草5份。嗜酸乳杆菌 K43、罗伊氏乳杆菌K07、动物双歧杆菌乳亚种Y6及唾液乳杆菌K2种子甘油管，备用。
上述中药益生菌发酵产物的制备方法包括以下步骤：
（1）将配方量的黄芪、山药、肉苁蓉、白芷、芫荽、蒲公英、薏苡仁、杏仁、甘草进行粉碎，过10目筛，得药粉。
（2）药材粗粉加入提取罐中，加10倍量（按药材重计）水，加热回流提取2小时，提取完成后，转移至已灭菌后的发酵罐中，按提取液液体量，加入3.5%葡萄糖做为营养底物，搅拌使溶解，调pH值5.5左右，灭菌，提取液放冷至37℃。
（3）将嗜酸乳杆菌 K43、罗伊氏乳杆菌K07、动物双歧杆菌乳亚种Y6及唾液乳杆菌K2种子甘油管，加MRS液体培养基分别活化，培养，得一级种子液。再将一级种子液，加MRS液体培养基扩掊，得二级种子液。将二级种子液，按嗜酸乳杆菌 K43、罗伊氏乳杆菌K07、动物双歧杆菌乳亚种Y6及唾液乳杆菌K2（3：3：2：2）比例配制，备用。
（4）培养：将混合二级种子液，按2%（按总加水重量计）比例，加入到灭菌培养罐中，37℃培养16小时，即得益生菌中药发酵液。
（5）放出培养液，先100目初步滤过，除去药渣，再用400目滤布滤过，得中药益生菌发酵提取物。同时取发酵提取物，进行菌量检测。
（6）或再进一步将中药益生菌发酵提取物低温浓缩（低于40℃）至药材：发酵浓缩液（1：1），加入液体量20%海藻糖作为冻干保护剂，置冻干机中，按以下程序进行冻干，得中药益生菌发酵提取物冻干粉。冻干程序如下：预冻：-42~-50℃4h，冻结后进行抽真空干燥，干燥条件为：真空度为2~5Pa，干燥温度为-40~26℃，干燥时间40~50h。干燥终点判断：干燥室在不抽真空条件下，10分钟真空度上升不超过15Pa。
（7）在第（2）步及第5步完成时，各取50ml样品2份，5000转离心，取上清液，分别测pH值、600nm下吸光值，以对比发酵前后pH值及吸光值情况，以验证发酵情况及益生菌发酵对提中药提取液颜色的改变。具体见结果统计表4。
实施例5
一种抗过敏的中药益生菌发酵物，其益生菌发酵中药过程如下：
取以下材料：黄芪16份、山药12份、肉苁蓉12份、白芷12份、芫荽9份、蒲公英12份、薏苡仁12份、杏仁9份、甘草6份。嗜酸乳杆菌 K43、罗伊氏乳杆菌K07、动物双歧杆菌乳亚种Y6及唾液乳杆菌K2种子甘油管备用。
上述中药益生菌发酵产物的制备方法包括以下步骤：
（1）将配方量的黄芪、山药、肉苁蓉、白芷、芫荽、蒲公英、薏苡仁、杏仁、甘草进行粉碎，过12目筛，得药粉。
（2）药材粗粉加入超声提取罐中，加10倍量（按药材重计）水，超声提取60分钟，提取条件：温度35℃，超声功率：1200瓦/单个超声头，超声2秒停1秒。提取完成后，转移至已灭菌后的发酵罐中，按提取液液体量，加入3%葡萄糖做为营养底物，搅拌使溶解，调pH值5.5左右，灭菌，提取液放冷至37℃。
（3）将嗜酸乳杆菌 K43、罗伊氏乳杆菌K07、动物双歧杆菌乳亚种Y6及唾液乳杆菌K2种子甘油管，加MRS液体培养基分别活化，37℃培养，得一级种子液。再将一级种子液，加MRS液体培养基37℃扩掊，得二级种子液。将二级种子液，按嗜酸乳杆菌 K43、罗伊氏乳杆菌K07、动物双歧杆菌乳亚种Y6及唾液乳杆菌K2（3：3：2：2）比例配制，备用。
（4）培养：将混合二级种子液，按3%（按总加水重量计）比例，加入到灭菌培养罐中，37℃培养12小时，即得益生菌中药发酵液。
（5）放出培养液，先100目初步滤过，除去药渣，再用400目滤布滤过，得中药益生菌发酵提取物。同时取发酵提取物，进行菌量检测。
（6）或再进一步将中药益生菌发酵提取物低温浓缩（低于40℃）至药材：发酵浓缩液（1：1），加入液体量20%海藻糖作为冻干保护剂，置冻干机中，按以下程序进行冻干，得中药益生菌发酵提取物冻干粉。冻干程序如下：预冻：-42~-50℃4h，冻结后进行抽真空干燥，干燥条件为：真空度为2~5Pa，干燥温度为-40~26℃，干燥时间40~50h。干燥终点判断：干燥室在不抽真空条件下，10分钟真空度上升不超过15Pa。
（7）在第（2）步及第5步完成时，各取50ml样品2份，5000转离心，取上清液，分别测pH值、600nm下吸光值，以对比发酵前后pH值及吸光值情况，以验证发酵情况及益生菌发酵对提中药提取液颜色的改变。具体见结果统计表4。
实施例 6
一种抗过敏的中药益生菌发酵物，其益生菌发酵中药过程如下：
取以下材料：黄芪14份、山药8份、肉苁蓉16份、白芷13份、芫荽11份、蒲公英10份、薏苡仁14份、杏仁11份、甘草4份。嗜酸乳杆菌 K43、罗伊氏乳杆菌K07、动物双歧杆菌乳亚种Y6及唾液乳杆菌K2种子甘油管备用。
上述中药益生菌发酵产物的制备方法包括以下步骤：
（1）将配方量的黄芪、山药、肉苁蓉、白芷、芫荽、蒲公英、薏苡仁、杏仁、甘草进行粉碎，过16目筛，得药粉。
（2）药材粗粉加入超高压提取器中，加10倍量（按药材重计）水提取30分钟，提取条件：先浸泡60分钟，升压力为400MPa，保压5分钟，循环周期8次，温度为常温。提取完成后。提取完成后，转移至已灭菌后的发酵罐中，按提取液液体量，加入4.0%葡萄糖做为营养底物，搅拌使溶解，调pH值5.5左右，灭菌，提取液放冷至37℃。
（3）将嗜酸乳杆菌 K43、罗伊氏乳杆菌K07、动物双歧杆菌乳亚种Y6及唾液乳杆菌K2种子甘油管，加MRS液体培养基分别活化，37℃培养，得一级种子液。再将一级种子液，加MRS液体培养基37℃扩掊，得二级种子液。将二级种子液，按嗜酸乳杆菌 K43、罗伊氏乳杆菌K07、动物双歧杆菌乳亚种Y6及唾液乳杆菌K2（3：3：2：2）比例配制，备用。
（4）培养：将混合二级种子液，按4%（按总加水重量计）比例，加入到灭菌培养罐中，37℃培养14小时，即得益生菌中药发酵液。
（5）放出培养液，先100目初步滤过，除去药渣，再用400目滤布滤过，得中药益生菌发酵提取物。同时取发酵提取物，进行菌量检测。
（6）或再进一步将中药益生菌发酵提取物低温浓缩（低于40℃）至药材：发酵浓缩液（1：1），加入液体量20%海藻糖作为冻干保护剂，置冻干机中，按以下程序进行冻干，得中药益生菌发酵提取物冻干粉。冻干程序如下：预冻：-42~-50℃4h，冻结后进行抽真空干燥，干燥条件为：真空度为2~5Pa，干燥温度为-40~26℃，干燥时间40~50h。干燥终点判断：干燥室在不抽真空条件下，10分钟真空度上升不超过15Pa。
（7）在第（2）步及第5步完成时，各取50ml样品2份，5000转离心，取上清液，分别测pH值、600nm下吸光值，以对比发酵前后pH值及吸光值情况，以验证发酵情况及益生菌发酵对提中药提取液颜色的改变。具体见结果统计表4。
取以上实施例1-6的样品，分别测菌落总数、pH值、600nm下吸光值，对比发酵前后pH值及吸光值情况，以验证发酵情况及益生菌发酵对提中药提取液颜色的改变等。同时品尝发酵前后口感，具体见结果统计表4。
表4 实施例1-6菌落总数、发酵前后pH值、吸光值对比表
备注：实施例1-6发酵时加入了种子液，因此，实施例1-6样品，发酵前液按加入种子液量，按相同比例加入MRS液体培养基（无菌种），离心后，取上清液测定发酵前pH值及吸光值，以消除加入种子液的影响，发酵后样品也为上清液测定。
从上表4的结果可得：（1）发酵后，每毫升发酵液中益生菌达亿级别菌落总数，总体发酵效果较好；（2）发酵液pH值下降，由5.4-5.5下降至3.9-4.2左右，符合发酵过程。（3）发酵液在600nm下吸光值大大下降，说明提取液中有较大比例的深色物质为益生菌所喜好底物，发酵过程中被消耗，发酵液颜色降低，有利于提高产品的市场接受度。（4）从菌落总数看，发酵14-16小时，并未较12小时有较大增加，但较10小时增加较大，因此发酵12-14小时为较合理的发酵时间；（5）特意品尝发酵前后口感，发现各实施示例发酵后，苦、辛味均有降低，口感变好。
取实施示例1-6中药益生菌发酵液样品，按菌落总数平均中位数，约5.7亿CFU/ml菌落总数计，进行小鼠抗过敏筛选试验。并设计空白对照组（纯化水灌胃），按上“试验体系一：抗过敏功效小鼠试验方法”对小鼠进行灌胃并进行抗过敏试验，试验结束后尾部采血，测定小鼠血液中IgE浓度。
小鼠剂量折算方法：按每人每天服用含150亿CFU益生菌中药发酵液计，人体重按平均70公斤计，每公斤体重服用量为2.14亿/kg，小白鼠剂量按人体10倍，即21.4亿/kg计，发酵液按5.7亿CFU/ml计，即给小鼠灌胃量为3.75ml/公斤，取整按4ml/公斤给小鼠灌胃（空白组给予纯化水灌胃）。具体结果见下表5。
表5 实施例1-6小鼠试验结果记录表
从上表5结果看，实施例5及实施例6较佳。在进行中药提取时，实施例5为超声提取，实施例6为超高压提取，从生产的方便程度及设备价格等各方面综合考虑，超声提取较为实用，因此，选实施例5为较佳的实施方式；同时为验证实施例5配方中各成分配伍及工艺等的合理性，进一步采取实施例7-12和对比例1-3进行验证。
对比例1为纯中药，不发酵试验组，其余试验条件与实施例5相同。
对比例2为纯益生菌，无中药，发酵试验组，其余试验条件与实施例5相同。
对比例3与实施例5区别在于：中药组合物中不含肉苁蓉、芫荽，其余与实施例5相同。
实施例7-12与实施例5的区别在于：益生菌组合物中4种益生菌的配比不同，其余与实施例5相同。
表6 对比例1-3和实施例7-12试验条件表
备注：以上二级种子液分别为嗜酸乳杆菌 K43、罗伊氏乳杆菌K07、动物双歧杆菌乳亚种Y6及唾液乳杆菌K2的重量配比。
取以上对比例1-3和实施例7-12的样品，分别测菌落总数、pH值、600nm下吸光值，对比发酵前后pH值及吸光值情况，以验证发酵与否对样品的影响、以及益生菌发酵对中药提取液颜色的改变情况。同时品尝发酵前后口感，具体见结果统计表7及试用者说明情况。
表7 对比例1-3和实施例7-12菌落总数、发酵前后pH值、吸光值对比表
备注：对比例2，发酵前液体pH值调整为5.5左右，与其他例基本相同；对比例1-3和实施例7-12，发酵时加入了种子液，因此，对比例1-3和实施例7-12样品发酵前液，按加入种子液量，按相同比例加入MRS液体培养基（无菌种），离心后，取上清液测定发酵前pH值及吸光值，以消除加入种子液的影响，发酵后样品也为上清液测定。
从上表7的结果可得：（1）对比例2菌落总数值（亿CFU/ml）较对比例3和实施例7-12低，对比例2单纯以葡萄糖作为营养底物，其发酵效果不太佳，证明本发明的中药组合物成分，也是益生菌可以使用的营养底物；（2）对比例3和实施例7-12，测定菌落总数为5-7亿CFU/ml，与实施例1-6差距不明显，因此以下试验中灌胃量还按实施例1-6相同量进行。（3）发酵后pH值下降；（4）发酵后，发酵上清液600nm处吸光值下降；（5）品尝发酵前后口感，发现对比例3和实施例7-12发酵后，苦、辛味均有降低，口感变好，各对比例相差不明显。
取对比例1-3和实施例7-12的样品，按实施例1-6相同剂量，进行小鼠抗过敏筛选试验。并设计空白对照组（纯化水灌胃），按上“试验体系一：抗过敏功效小鼠试验方法”对小鼠进行灌胃并进行抗过敏试验，试验结束后尾部采血，测定小鼠血液中IgE浓度。具体结果见下表8。
表8 对比例1-3和实施例7-12小鼠试验结果记录表
从上表8结果及与表5对比看，（1）实施例5的试验结果优于对比例1组，说明中药经益生菌发酵后，抗过敏功效有较大的提高；（2）对比例3与实施例5比较，对比例3组与实施例5组有较大差距，说明配方中添加有肉苁蓉与芫荽后，抗过敏功效有较大提高；（3）实施例5组优于实施例7-12组，说明二级种子液以嗜酸乳杆菌 K43、罗伊氏乳杆菌K07、动物双歧杆菌乳亚种Y6及唾液乳杆菌K2的二级种子液质量比3：3：2：2为试验最佳配比。
肉苁蓉味甘、咸，性温。归肾、大肠经，具补肾阳、益精血、润肠通便功效，配方中主要取其补益肾阳，助汽化津液功效，其同时也润通大肠，而大肠与肺互为表里，大肠通畅有助于肺气的顺降，利于诸邪从大便排出体外。而其补益肾阳的功效，更是人体水液汽化的原动力，是动力的源泉。阳气不振，必水湿内停、湿毒内盛，特别是肾阳，西医也有肾源性水肿，所指基本相同。
芫荽归肺、胃经，发表透疹，可将诸邪驱出体外，以解除皮肤过敏症状，同时又健胃，《本草纲目》称“芫荽性味辛温香窜，内通心脾，外达四肢”，这种特性，可以将身体内诸邪（如湿、毒等）通过心脉送达体表、四肢，其性又辛温，通过发表透疹方式排出体外。因此，其不单单是发表透疹，还通过其内通心脾的特点，将身体内部的湿毒外逐。
肉苁蓉味甘、咸，性温，芫荽味辛，性温，均为温性药材，与易过敏体质大多为虚、寒特性相配。因此，也较大的增强了配方的功效，与实验结果相吻合。
本发明实施例所提供的抗过敏的中药益生菌发酵物，中药组合物包括黄芪、山药、肉苁蓉、白芷、芫荽、蒲公英、薏苡仁、杏仁和甘草，以上诸药经提取后，添加本发明的益生菌组合物进行发酵，得到含中药及活益生菌的发酵产物，其具有较佳的抗过敏功效，且优于单纯中药组合物或单纯益生菌组合物。
上述实施方式仅为本发明的优选实施方式，不能以此来限定本发明保护的范围，本领域的技术人员在本发明的基础上所做的任何非实质性的变化及替换均属于本发明所要求保护的范围。
Claims (10)
1.一种抗过敏益生菌组合物，其特征在于，所述益生菌组合物包括重量比为（2-4）：（2-4）：（1-3）：（1-3）的嗜酸乳杆菌、罗伊氏乳杆菌、动物双歧杆菌乳亚种和唾液乳杆菌；所述嗜酸乳杆菌为保藏编号为CGMCC NO.15705的嗜酸乳杆菌K43；所述罗伊氏乳杆菌为保藏编号为CGMCC NO.15703的罗伊氏乳杆菌K07；所述动物双歧杆菌乳亚种为保藏编号为CGMCCNO.15026的动物双歧杆菌乳亚种Y6；所述唾液乳杆菌为保藏编号为CGMCC NO.15701的唾液乳杆菌K2。
2.如权利要求1所述的抗过敏益生菌组合物，其特征在于，在所述益生菌组合物中，嗜酸乳杆菌、罗伊氏乳杆菌、动物双歧杆菌乳亚种和唾液乳杆菌的重量比为3：3：2：2。
3.如权利要求1所述的抗过敏益生菌组合物，其特征在于，所述过敏为由Thl/Th2失衡导致的过敏，包括过敏性鼻炎、过敏性哮喘、结膜炎、湿疹、荨麻疹、食物过敏和药物过敏。
4.如权利要求1所述的抗过敏益生菌组合物，其特征在于，所述过敏为由Thl/Th2失衡导致的过敏，包括皮炎。
5.一种抗过敏的中药益生菌发酵物，其特征在于，由权利要求1-4任一项所述的益生菌组合物对中药提取液进行发酵而成，所述中药提取液由中药组合物经过提取而成，所述中药组合物由以下原料组成：黄芪10-20份、山药8-16份、肉苁蓉8-16份、白芷8-16份、芫荽6-12份、蒲公英10-16份、薏苡仁8-16份、杏仁8-12份、甘草4-8份；所述中药益生菌发酵物含有权利要求1-4任一项所述的益生菌组合物。
6.如权利要求5所述的抗过敏的中药益生菌发酵物，其特征在于，所述中药组合物由以下原料组成：黄芪12-18份、山药9-15份、肉苁蓉9-15份、白芷9-15份、芫荽7-11份、蒲公英11-15份、薏苡仁9-15份、杏仁9-12份、甘草5-8份。
7.如权利要求5所述的抗过敏的中药益生菌发酵物，其特征在于，由益生菌组合物对中药提取液进行发酵而成，所述益生菌组合物由以下益生菌菌株组成：保藏编号为CGMCCNO.15705的嗜酸乳杆菌K43、保藏编号为CGMCC NO.15703的罗伊氏乳杆菌K07、保藏编号为CGMCC NO.15026的动物双歧杆菌乳亚种Y6和保藏编号为CGMCC NO.15701的唾液乳杆菌K2；所述中药提取液由中药组合物经过提取而成，所述中药组合物由以下原料组成：黄芪16份、山药12份、肉苁蓉12份、白芷12份、芫荽9份、蒲公英12份、薏苡仁12份、杏仁9份、甘草6份。
8.一种抗过敏产品，其特征在于，包括权利要求1-4任一项所述的抗过敏益生菌组合物。
9.一种权利要求1-4任一项所述的抗过敏益生菌组合物在制备抗过敏产品中的应用，其中，所述抗过敏产品包括药品。
10.如权利要求9所述的应用，其特征在于，所述抗过敏产品为口服制剂，所述口服制剂的剂型包括口服液、滴剂、片剂、粉剂、胶囊剂或颗粒剂。
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