CN114831171A - 适用于鲜果贮藏的高氧应激保鲜方法和应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开一种适用于鲜果贮藏的高氧应激保鲜方法，所述方法是以50％‑100％高浓度氧气为主要气体，以高纯氮气为辅助气体对鲜果进行20‑30min短时刺激进行保鲜的。本发明方法操作便捷安全，成本低，利用高浓度氧气短时刺激鲜果，使机体产生应激反应，改变代谢通路，机体抗性增加，高效抑制了贮藏过程中鲜果表面微生物的生长，减少了鲜果的腐烂率，激活了机体抗氧化酶活性与抗氧化成分，抑制了活性氧与丙二醛含量的积累，减轻了组织细胞氧化损伤，延缓了鲜果的成熟与衰老。

Description

适用于鲜果贮藏的高氧应激保鲜方法和应用

技术领域

本发明属于食品保鲜技术领域，尤其是一种适用于鲜果贮藏的高氧应激保鲜方法和应用。

背景技术

枸杞是一种著名的药食兼用的植物，其中多糖、类胡萝卜素、游离氨基酸、酚类化合物等功能成分含量高，具有较强的抗氧化活性，因此深受世界各国人民的喜爱。而鲜食枸杞果更是在世界上被认为是一种新型的超级水果，近年来鲜果需求量急剧上升，但由于鲜食枸杞高效保鲜技术薄弱，严重制约了鲜食枸杞产业的发展。

近年来，国内外有许多用于果蔬保鲜的物理和化学技术，如气调、紫外辐射联合壳聚糖涂层、壳聚糖纳米二氧化硅薄膜、氯化钙浸渍法、香精油(百里香-迷迭香、百里香-肉桂等)、 1-甲基环丙烯(1-MCP)、抗氧化剂(褪黑素、抗坏血酸、氨基酸、马齿苋提取物)等。其中，气调保鲜被认为是处理皮薄多汁的浆果果实最方便、安全、可行、有效、环保的方法。因为与化学处理及浸泡、涂膜方式相比，气体保鲜有较少的安全问题且相对容易实施，可减轻处理对浆果带来的伤害。

通过检索，发现如下几篇与本发明专利申请相关的专利公开文献：

1、一种用于冷却牛肉贮藏保鲜的高氧气调包装气体组成(CN104621231A)，本发明适当降低了混合气体中的O₂浓度，并适当提高CO₂，将气调包装中的气体体积配比设定为50％～55％O₂+35％～40％CO₂+10％N₂，顶隙空间比为2.5:1～3:1，包装后的牛肉贮藏在 4±1℃的条件下。本发明的气体组成既能保持与80％O₂高氧包装等同的良好护色效果，又能将冷却牛肉的货架期由80％O₂高氧气调包装下的12～16天延长到至少20天以上，还能减少贮藏前期的贮藏汁液损失。

2、一种鲜切刺嫩芽高浓度氧气气调包装结合低温贮藏保鲜方法(CN104957244A)，其步骤如下：(1)挑选；(2)清洗；(3)晾干；(4)整理；(5)装袋；(6)抽气；(7) 充气；(8)密封；(9)贮藏。该方法采用高阻隔性聚乙烯薄膜作为气调包装袋，高氧气调包装充气比例分别为75％-95％氧气和25％-5％二氧化碳气体，气调包装后再结合低温贮藏。本发明应用于鲜切刺嫩芽的保鲜中，显著了降低无氧呼吸产生毒害影响，同时降低呼吸作用，防止颜色改变，减少水分蒸发和病虫害的侵染，最大程度保持刺嫩芽原有的独特风味和营养成分，有效延长鲜切刺嫩芽货架期。该技术方案显著抑制鲜切刺嫩芽腐烂、褐变以及维生素 C和总酚等营养成分降低，提高其硬度和抗氧化活性，其产品具有较高感观品质和卫生质量，产品保鲜期从2～3延长至10～12天，价格可以提高2倍。

通过对比，本发明专利申请与上述专利公开文献存在本质的不同。

发明内容

本发明目的在于填补鲜食枸杞保鲜技术领域的空缺，提供一种适用于鲜果贮藏的高氧应激保鲜方法和应用。

本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：

一种适用于鲜果贮藏的高氧应激保鲜方法，所述方法是以50％-100％高浓度氧气为主要气体，以高纯氮气为辅助气体对鲜果进行20-30min短时刺激进行保鲜的。

进一步地，具体步骤如下：

(1)鲜果采后预冷处理：新鲜果实采后盛装在果蔬箱内，为防止失水过多，将打孔的 PE保鲜袋套在果蔬箱外侧，然后整体在冷库低温鼓风去除田间热，温度为0±1℃，时间为18-24 小时；

(2)挑拣样品：预冷结束后，挑选无病害，无磕碰，大小、颜色均匀的鲜果；

(3)高氧应激处理：将挑拣好的鲜果放入到密封的气调箱内，先用高纯氮气将密封的气调箱其余气体排出，再向密封的气调箱内通入50％-100％O₂(w/w)的高浓度氧气应激处理 20-30min，然后打开密封的气调箱，静置20-30min，使气调箱内残留的高浓度氧释放，降低氧浓度使其恢复到自然状态；

(4)静态贮藏：将高氧应激处理好的鲜果放在PE保鲜袋内于0±1℃条件下贮藏。

进一步地，所述步骤(1)中PE保鲜袋的孔的直径为0.013-0.020mm。

进一步地，所述步骤(4)中将高氧应激处理好的鲜果放在MAP自发气调及0±1℃条件下贮藏。

进一步地，所述鲜果为鲜食枸杞、灵武长枣、大青葡萄。

进一步地，当鲜果为鲜食枸杞时，高氧应激处理时的条件为：向密封的气调箱内通入90％ O₂(w/w)的高浓度氧气分别短时应激处理30min，然后打开密封的气调箱，静置30min；

当鲜果为灵武长枣时，高氧应激处理时的条件为：向密封的气调箱内通入50％O₂(w/w) 浓度的氧气短时应激处理30min，然后打开密封的气调箱，静置30min；

当鲜果为大青葡萄时，高氧应激处理时的条件为：向密封的气调箱内通入80％O₂(w/w) 浓度的氧气短时应激处理30min，然后打开密封的气调箱，静置30min。

如上所述的保鲜方法在鲜果贮藏方面中的应用。

本发明取得的优点和积极效果为：

1、本发明在鲜食枸杞采后低温鼓风预冷处理过程中，将打了孔的PE保鲜袋套在果蔬箱外侧进行预冷处理，既能达到快速降温的效果，又能保持良好的透气性，有效缓解外界环境对其引起的严重失水问题，保持鲜食枸杞的水分含量，达到较好保鲜效果。

2、本发明在低温状态下对鲜食枸杞进行50％-100％高浓度氧气应激处理，有效抑制鲜果如鲜食枸杞表面微生物的生长，减少了鲜果在贮藏过程中的腐烂，保鲜效果优于未做任何处理的空白对照组，是一种低成本、操作方便安全、有效环保的新型保鲜技术。

3、本发明对鲜食枸杞进行高浓度氧气20-30min短时处理，有效诱导鲜果如枸杞鲜果体内抗氧化酶相关的基因表达水平，激活鲜果如鲜食枸杞抗氧化酶活性与抗坏血酸和谷胱甘肽抗氧化成分的循环再生，抑制活性氧和丙二醛的积累，减轻对组织细胞的膜伤害及氧化损伤，保持了鲜食枸杞的色泽，硬度，口感及营养成分。

4、本发明的高氧应激鲜果保鲜方法，操作方便简单且保鲜效果明显，该技术方法在低温条件下利用高氧非生物胁迫(50％-100％O₂)与短时处理(20-30min)结合，使鲜果快速氧化应激后产生抗性，起到了“植物疫苗”的作用，达到“抑氧夺鲜”的效果，有效解决了鲜果贮藏过程中发霉腐烂、软化、失色、失味等问题，延长了鲜果的贮藏期，保鲜时长为25-30天，好果率90％以上，效果明显优于对鲜果如鲜食枸杞未经高氧应激而只在低温状态下进行单一冷藏的处理及低温条件下高氧非生物胁迫(50％-100％O₂)和长时处理(＞60min)结合的效果。在第30天时，未经高氧应激只在低温状态下进行单一冷藏处理与高氧长时处理鲜果腐烂率约为25-30％，而高氧短时应激处理组腐烂率仅约为10％。

5、本发明的高氧应激鲜果保鲜方法，不限于对鲜食枸杞的保鲜，对于其他果蔬同样适用，不同果蔬最佳高氧应激浓度、短处理时长及频率不同。

6、本发明方法能够很好地保持果实色泽，硬度，口感，营养成分及好果率，并通过激活抗氧化系统，增强抗褐变能力，减轻果实在贮藏过程中由于活性氧积累造成的组织氧化损伤，有效延缓果实的成熟衰老。

7、本发明方法操作便捷安全，成本低，利用高浓度氧气短时刺激鲜果，使机体产生应激反应，改变代谢通路，机体抗性增加，高效抑制了贮藏过程中鲜果表面微生物的生长，减少了鲜果的腐烂率，激活了机体抗氧化酶活性与抗氧化成分，抑制了活性氧与丙二醛含量的积累，减轻了组织细胞氧化损伤，延缓了鲜果的成熟与衰老。

8、本发明方法在鲜果采后预冷处理时，新鲜果实采后盛装在果蔬箱内，为防止失水过多，将打孔的PE保鲜袋套在果蔬箱外侧，然后整体在冷库低温鼓风去除田间热，该步骤中将新鲜果实、果蔬箱和PE保鲜袋整体放在冷库里预冷，预冷的同时冷库带有鼓风，增强预冷效果，同时为避免鼓风引起的失水问题在果蔬箱外侧套了打孔的PE保鲜袋，不会阻止冷库的凉气进入到果蔬箱内，且尽可能保住鲜食枸杞果的水分。本申请人在预实验的时候试验过，如果果蔬箱外不套PE保鲜袋并直接将其放在冷库预冷的话，失水非常严重，套了打孔的保鲜袋效果提高了很多。

附图说明

图1为本发明实施例1中不同温度介导高氧应激对鲜食枸杞腐烂率变化影响图；

图2为本发明实施例1中不同温度介导高氧应激对鲜食枸杞失重率变化影响图；

图3为本发明实施例1中不同温度介导高氧应激对鲜食枸杞硬度变化影响图；

图4为本发明实施例1中不同温度介导高氧应激对鲜食枸杞色泽L*值变化影响图；

图5为本发明实施例1中不同时长高氧刺激对鲜食枸杞腐烂率变化影响图；

图6为本发明实施例1中不同时长高氧刺激对鲜食枸杞失重率变化影响图；

图7为本发明实施例1中不同时长高氧刺激对鲜食枸杞硬度变化影响图；

图8为本发明实施例1中不同时长高氧刺激对鲜食枸杞色泽L*值变化影响图；

图9为本发明实施例1中90％O₂短时应激处理鲜食枸杞保鲜效果及菌落总数变化图；其中，A₁为贮藏第30天时，鲜食枸杞未经高氧应激单一低温贮藏空白处理效果图，A₂为贮藏第30天时，鲜食枸杞未经高氧应激单一低温贮藏空白处理培养基菌落总数(10^-3)图，B₁为贮藏第30天时，鲜食枸杞90％O₂短时应激处理30min效果图，B₂为贮藏第30天时，鲜食枸杞90％O₂短时应激处理30min培养基菌落总数(10^-3)图；C为菌落总数变化图；

图10为本发明实施例1中90％O₂短时应激处理鲜食枸杞超氧阴离子释放量、过氧化氢及丙二醛含量变化图；其中，A为超氧阴离子释放量

含量变化图，B为过氧化氢(H₂O₂) 含量变化图，C为丙二醛(MDA)含量变化图；

图11为本发明实施例1中90％O₂短时应激处理鲜食枸杞抗氧化成分变化图；其中，A 为抗坏血酸(ASA)含量变化图，B为谷胱甘肽(GSH)含量变化图；

图12为本发明实施例1中90％O₂短时应激处理鲜食枸杞抗氧化酶变化图；其中，A为超氧化物歧化酶(SOD)，B为过氧化氢酶(CAT)，C为抗坏血酸过氧化物酶(APX)， D为脱氢抗坏血酸还原酶(DHAR)，E为单脱氢抗坏血酸还原酶(MDHAR)，F为谷胱甘肽还原酶(GR)；

图13为本发明实施例2中经不同浓度氧气短时应激处理的灵武长枣外观及内部组织微观结构图；其中A为灵武长枣外观品质图，B为灵武长枣内部组织微观结构图；

图14为本发明实施例2中经不同浓度氧气短时应激处理的灵武长枣硬度变化图；

图15为本发明实施例2中经不同浓度氧气短时应激处理的灵武长枣电导率变化图；

图16为本发明实施例2中经不同浓度氧气短时应激处理的灵武长枣品质相关酶活变化图；

图17为本发明实施例3中经不同高氧方式处理的灵武长枣硬度变化图；

图18为本发明实施例3中经不同高氧方式处理的灵武长枣电导率变化图；

图19为本发明实施例3中经不同高氧方式处理的灵武长枣品质相关酶活变化图；

图20为本发明实施例4中80％O₂短时应激处理大青葡萄保鲜效果、色泽a*值及硬度变化图；其中，A为贮藏第35天时，80％％O₂短时应激处理30min大青葡萄保鲜效果图， B为贮藏第35天时，空白对照组保鲜效果图，C为色泽a*值变化图，D为硬度变化图；

图21为本发明实施例4中80％O₂短时应激处理大青葡萄可溶性固形物变化图；

图22为本发明实施例4中80％O₂短时应激处理大青葡萄电导率、抗氧化能力、超氧化物歧化酶(SOD)活性及脂氧合酶(LOX)活性变化图；其中，A为电导率变化图，B为自有基清除率(DPPH)变化图，C为SOD酶活变化图，D为LOX酶活变化图；

图23为本发明实施例4中80％O₂短时应激处理大青葡萄总酚及褐变相关酶活变化图；其中，A为总酚变化图，B为苯丙氨酸解氨酶(PAL)酶活变化图，C为多酚氧化酶(PPO) 酶活变化图，D为过氧化物酶(POD)酶活变化图。

具体实施方式

下面详细叙述本发明的实施例，需要说明的是，本实施例是叙述性的，不是限定性的，不能以此限定本发明的保护范围。

本发明中所使用的原料，如无特殊说明，均为常规的市售产品；本发明中所使用的方法，如无特殊说明，均为本领域的常规方法。

一种适用于鲜果贮藏的高氧应激保鲜方法，所述方法是以50％-100％高浓度氧气为主要气体，以高纯氮气为辅助气体对鲜果进行20-30min短时刺激进行保鲜的。本发明主要优化了鲜食枸杞的最佳高氧应激浓度、时间等工艺参数，可实现标准化企业示范应用，提高鲜食枸杞采后贮藏品质，降低鲜果腐烂率等。

较优地，具体步骤如下：

(1)鲜果采后预冷处理：新鲜果实采后盛装在果蔬箱内，为防止失水过多，将打孔的 PE保鲜袋套在果蔬箱外侧，然后整体在冷库低温鼓风去除田间热，温度为0±1℃，时间为18-24 小时；

(2)挑拣样品：预冷结束后，挑选无病害，无磕碰，大小、颜色均匀的鲜果；

(3)高氧应激处理：将挑拣好的鲜果放入到密封的气调箱内，先用高纯氮气将密封的气调箱其余气体排出，再向密封的气调箱内通入50％-100％O₂(w/w)的高浓度氧气应激处理 20-30min，然后打开密封的气调箱，静置20-30min，使气调箱内残留的高浓度氧释放，降低氧浓度使其恢复到自然状态；

(4)静态贮藏：将高氧应激处理好的鲜果放在PE保鲜袋内于0±1℃条件下贮藏。

较优地，所述步骤(1)中PE保鲜袋的孔的直径为0.013-0.020mm。

较优地，所述步骤(4)中将高氧应激处理好的鲜果放在MAP自发气调及0±1℃条件下贮藏。

较优地，所述鲜果为鲜食枸杞、灵武长枣、大青葡萄。

较优地，当鲜果为鲜食枸杞时，高氧应激处理时的条件为：向密封的气调箱内通入90％O₂ (w/w)的高浓度氧气分别短时应激处理30min，然后打开密封的气调箱，静置30min；

当鲜果为灵武长枣时，高氧应激处理时的条件为：向密封的气调箱内通入50％O₂(w/w) 浓度的氧气短时应激处理30min，然后打开密封的气调箱，静置30min；

当鲜果为大青葡萄时，高氧应激处理时的条件为：向密封的气调箱内通入80％O₂(w/w) 浓度的氧气短时应激处理30min，然后打开密封的气调箱，静置30min。

如上所述的保鲜方法在鲜果贮藏方面中的应用。

具体地，相关制备及检测实施例如下：

实施例1

一种适于鲜食枸杞贮藏的高氧应激保鲜方法，具体步骤如下：

1、鲜食枸杞采后预冷处理：新鲜果实采后先在冷库低温鼓风去除田间热18-24h，为防止失水过多，将打孔的PE保鲜袋(0.014mm)套在果蔬箱外侧。

2、挑拣样品：预冷结束后，挑选无病害，无磕碰，大小、颜色均匀的鲜果。

3、高氧应激处理：将挑拣好的鲜食枸杞放入到密封的气调箱内，先用高纯氮气将密封的气调箱其余气体排出，在向密封的气调箱内通入90％O₂(w/w)的高浓度氧气分别短时应激处理30min、长时处理60min，然后打开密封的气调箱，静置30min，使气调箱内残留的高浓度氧释放，降低氧浓度使其恢复到自然状态，不做任何处理的鲜食枸杞果实做为对照组。

4、静态贮藏：将经预冷处理后低温条件下高氧短时应激30min处理与高氧长时处理60min 的鲜食枸杞，未做任何处理的鲜食枸杞及未经预冷直接高氧短时应激30min处理的鲜食枸杞放在PE保鲜袋内于0±1℃条件下贮藏。

品质评价：定期对鲜食枸杞的品质指标进行测定。

相关检测如下：

1、不同温度介导高氧应激对鲜食枸杞腐烂率变化影响

由图1可以看出，贮藏第5d时，在常温条件下的枸杞鲜果的腐烂率已高达33.46％，而在低温贮藏条件下的各处理组均未出现腐烂现象，由此可见常温条件下其内部生理代谢活性和果实表面微生物的繁殖极快导致枸杞鲜果在常温条件保鲜期短于5天。此外，在低温贮藏环境下的各处理组，未经预冷处理直接经90％O₂短时应激处理的枸杞鲜果在贮藏第10天时出现了腐烂现象，早于本发明经预冷处理后90％O₂短时应激处理组与低温贮藏空白对照组，且腐烂率保持较高水平。本发明预冷后经90％O₂短时应激处理的枸杞鲜果在贮藏第20天时才出现了腐烂现象，且在第30天时，其腐烂率显著(P≤0.05)低于其他处理组，可见在低温条件下进行本发明的高氧短时应激处理即90％O₂+30min、预冷处理与0±1℃条件下贮藏之间具有协同作用，本发明方法同时使用高氧短时应激处理、预冷处理与0±1℃条件下贮藏能够更好地抑制贮藏环境中微生物的生长繁殖。

2、不同温度介导高氧应激对鲜食枸杞失重率变化影响

由图2可以看出，贮藏于常温条件下的枸杞鲜果在贮藏第0-5d时，其失重率显著(P≤ 0.05)高于其他低温贮藏处理组，这是由于在贮藏过程中，果实采后的呼吸作用和水分蒸腾作用仍在进行，加之常温贮藏并且未散去“田间热”进而促进呼吸作用和水分蒸腾作用，同时无法适应高氧应激反应产生抗性，品质骤然劣变。低温贮藏条件下的枸杞鲜果的失重率均呈上升趋势，其中本发明预冷后经过90％O₂短时应激处理有效抑制了失重率的上升并且显著 (P≤0.05)低于未经预冷直接90％O₂短时应激处理和空白对照低温贮藏处理组；此外，未经预冷直接90％O₂短时应激处理的枸杞鲜果其失重率高于空白对照低温贮藏处理组。以上结果表明，低温条件下进行本发明的高氧短时应激处理即90％O₂+30min、预冷处理与0±1℃条件下贮藏之间具有协同作用，本发明方法同时使用高氧短时应激处理、预冷处理与0±1℃条件下贮藏能够更好地保持果实水分。

3、不同温度介导高氧应激对鲜食枸杞硬度变化影响

由图3可以看出，贮藏于常温条件下的枸杞鲜果在贮藏第0-5d时，由于常温条件下细胞壁代谢相关酶活性均处于极其活跃的状态，导致硬度急剧下降并失去了鲜食价值。值得注意的是，在整个贮藏过程中，本发明预冷后经90％O₂短时应激处理并且贮藏于低温条件下贮藏的枸杞鲜果硬度值均显著(P≤0.05)高于其他处理组，可能抑制了细胞壁代谢相关酶活性，有效保持果实原果胶等营养成分，进而延缓了枸杞鲜果硬度的下降。而未经预冷直接90％O₂短时应急处理的枸杞鲜果其硬度值明显(P≤0.05)低于空白对照低温贮藏处理的枸杞鲜果。以上结果表明，低温条件下进行本发明的高氧短时应激处理即90％O₂+30min、预冷处理与 0±1℃条件下贮藏之间具有协同作用，本发明方法同时使用高氧短时应激处理、预冷处理与 0±1℃条件下贮藏能够更好地保持果实硬度。

4、不同温度介导高氧应激对鲜食枸杞色泽L*值变化影响

由图4可知，随着贮藏时间的增加，枸杞鲜果的色泽由鲜亮逐渐变暗。其中，在贮藏第 5d时，常温贮藏条件下的枸杞鲜果的L*值降低了33％左右，其下降速度均显著(P≤0.05) 大于其他低温贮藏处理组，这是由于在常温条件下更加促进了细胞壁代谢酶活性以及类胡萝卜素的降解，无法适应高氧应激带来的胁迫。而在低温贮藏条件下的处理组中，本发明预冷后经90％O₂短时应激处理的枸杞鲜果L*值均显著(P≤0.05)高于其他处理组，而未经预冷直接90％O₂短时应急处理的枸杞鲜果其L*值明显(P≤0.05)低于空白对照低温贮藏处理的枸杞鲜果。以上结果表明，低温条件下进行本发明的高氧短时应激处理即90％O₂+30min、预冷处理与0±1℃条件下贮藏之间具有协同作用，本发明方法同时使用高氧短时应激处理、预冷处理与0±1℃条件下贮藏能更好的保持果实鲜亮的色泽，使果实内类胡萝卜素等抗氧化成分保持较高水平。

5、不同时长高氧刺激对鲜食枸杞腐烂率变化影响

由图5可以看出，高氧刺激30min与60min的处理组与空白对照组腐烂率在贮藏期间均呈上升趋势，在贮藏15天之后，与对照组相比，明显看出，高氧长时60min刺激的鲜食枸杞腐烂率在中后期保持较低水平，但贮藏末期坏果率快速上升，而本发明高氧短时30min刺激的鲜食枸杞腐烂率在整个贮藏期间一直保持较低的腐烂率水平，因此本发明的高氧在短时间内刺激果蔬可以更好地起到保鲜效果。

6、不同时长高氧刺激对鲜食枸杞失重率变化影响

由图6可以看出，高氧刺激30min与60min的处理组与空白对照组失重率在贮藏期间均呈上升趋势，值得注意的是，高氧长时60min刺激的鲜食枸杞失重率水平不仅高于高氧短时 30min刺激的鲜食枸杞果实，还高于空白对照组。而本发明高氧短时30min刺激的鲜食枸杞失重率在整个贮藏期间一直保持最低的水平，因此本发明的高氧在短时间内刺激果蔬可以更好地起到保鲜效果，保持果蔬水分。

7、不同时长高氧刺激对鲜食枸杞硬度变化影响

由图7可以看出，高氧刺激30min与60min的处理组与空白对照组硬度在贮藏期间整体均呈下降趋势，值得注意的是，高氧长时60min刺激的鲜食枸杞硬度水平在贮藏前20天一直高于空白对照组，但贮藏后期明显下降趋势变快，表明品质劣变加快。与高氧长时60min刺激的鲜食枸杞和空白对照组相比，本发明高氧短时30min刺激的鲜食枸杞硬度在整个贮藏期间一直保持最高的水平，因此本发明的高氧在短时间内刺激果蔬可以更好的起到保鲜效果，保持果蔬硬度。

8、不同时长高氧刺激对鲜食枸杞色泽L*值变化影响

由图8可以看出，高氧刺激30min与60min的处理组与空白对照组色泽L*值在贮藏期间整体呈相同的变化趋势，值得注意的是，与空白对照组相比，在贮藏早期高氧刺激降低了L* 值，而贮藏中后期经高氧刺激的鲜食枸杞果实L*值高于空白对照组。其中，经高氧长时60min 刺激的处理组L*值下降较快，且水平低于本发明高氧短时30min刺激的鲜食枸杞L*值。总体来说，本发明的高氧在短时间内刺激果蔬可以更好地起到保鲜效果，保持果蔬鲜亮的色泽。

9、高氧应激处理对鲜食枸杞保鲜效果及菌落总数变化影响

由图9可以看出，贮藏第30天时，本发明90％高氧应激处理组鲜食枸杞(B₂)保鲜效果明显优于空白处理组(A₁)，经90％高氧应激处理的鲜果颜色更鲜亮，腐烂程度更低，与图5、图8表现结果一致。与空白对照组相比，菌落总数的测定(图A₂,B₂和C)也证明了本发明高氧应激处理组菌落总数水平在整个贮藏期间均低于空白对照组，说明本发明的高氧应激处理能够显著抑制果实表面微生物的生长，抑制真菌对果实造成的侵染，提高枸杞果实在冷藏过程中的好果率，维持枸杞果实的品质。

10、高氧应激处理对鲜食枸杞超氧阴离子释放量

过氧化氢(H₂O₂)及丙二醛(MDA)含量变化影响

果实衰老和品质下降可能归因于ROS(如，

和H₂O₂)引起的细胞内蛋白质、DNA 和脂质氧化损伤而细胞膜脂质的氧化损伤主要通过MDA来评价。由图10A可知，果实经本发明90％高氧应激处理后

释放量显著低于对照组(P≤0.05)。且对照组在10d时出现了一个峰值，而本发明的高氧应激处理组抑制了峰值的出现。贮藏10d时，本发明的高氧应激处理和对照果实的最大产率分别为31.7nmol min^-1g^-1和95.0nmol min^-1g^-1。即与空白对照组相比，本发明的90％高氧应激处理在第10天降低了约66.7％(P≤0.05)

释放量。同时，由图10B可知，与

释放量趋势相似，除第20天外，本发明的90％高氧应激处理的果实H₂O₂含量均低于空白对照组。图10C显示，MDA含量在两组中均呈现先升高后降低的趋势。随着贮藏时间的延长，本发明的90％高氧应激处理组MDA含量也明显低于对照组(P≤ 0.05)，在第30天时，本发明的90％高氧应激处理组比对照组下降36.7％。由以上结果可知，与对照组相比，本发明的高氧应激处理降低了果实ROS和MDA的积累，有助于缓解枸杞果实的膜损伤，维持采后品质。

11、高氧应激处理对鲜食枸杞抗坏血酸(ASA)和谷胱甘肽(GSH)含量变化影响

抗坏血酸(ASA)和还原型谷胱甘肽(GSH)是植物中有效的抗氧化剂，是ASA-GSH途径的重要组成部分，通过清除ROS来防御氧化损伤。由图11A可知，空白对照组ASA含量整个贮藏期间呈下降趋势，而本发明的90％高氧应激处理虽然在应激初期由于机体反应降低了ASA含量，但快速改变机体通路，延缓了ASA含量的下降的趋势，且与对照组相比保持在较高水平。由图11B可知，贮藏初期，本发明的90％高氧应激处理快速激活了GSH含量的积累，以抵抗活性氧带来的伤害，并且在贮藏后期呈上升趋势，水平基本高于空白对照组。以上结果说明，本发明的高氧应激处理促进了鲜食枸杞体内抗氧化剂成分的生成，提高了清除有害活性氧的能力。

12、高氧应激处理对鲜食枸杞抗氧化酶活变化影响

抗氧化系统在果蔬的成熟和衰老过程中起着重要作用。SOD酶作为抗氧化损伤的第一道防线，可以作为细胞内活性氧的高效清除剂，催化分解为H₂O₂，再被CAT和APX酶转化为氧和无毒的水。由图12A-C可知，鲜食枸杞SOD,CAT,APX酶活在早期阶段呈上升趋势,用以抵抗H₂O₂含量和

迅速增加来控制水果品质变化，在枸杞鲜莓抗氧化损伤的防御反应中发挥关键作用，能够更好地清除活性氧，维持贮藏质量。且在整个贮藏期间，与对照组相比,本发明的90％高氧应激处理改善果实的抗氧化能力,不仅提高了SOD、CAT和APX的活性，还抑制了H₂O₂含量和

释放量。此外，非酶性内源抗氧化剂，如ASA和GSH，对控制植物体内ROS的积累也至关重要，他们受APX、DHAR、MDHAR和GR活性的调控。值得注意的是,由图12C-F可知，本发明的90％高氧应激处理组的APX、DHAR，MDHAR和GR 酶活均高于空白对照组，促进了ASA-GSH循环。以上结果表明，本发明的高氧应激处理可有效提高枸杞鲜果中活性氧清除酶的活性，促进ASA和GSH的循环再生，从而增强枸杞鲜果中活性氧的清除能力，减少活性氧的积累，提高枸杞鲜果冷藏品质。

实施例2

一种适于灵武长枣贮藏的高氧应激保鲜方法，具体步骤如下：

1、灵武长枣采后预冷处理：新鲜果实采后先在冷库低温鼓风去除田间热18-24h，为防止失水过多，将打孔的PE保鲜袋(0.014mm)套在果蔬箱外侧。

2、挑拣样品：预冷结束后，挑选无病害，无磕碰，大小、颜色均匀的鲜果。

3、氧气应激处理：将挑拣好的灵武长枣放入到密封的气调箱内，先用高纯氮气将密封的气调箱其余气体排出，在向密封的气调箱内通入0％(w/w)、50％O₂(w/w)、90％O₂(w/w) 浓度的氧气短时应激处理30min，然后打开密封的气调箱，静置30min，使气调箱内残留的高浓度氧释放，降低氧浓度使其恢复到自然状态，不做任何处理的灵武长枣果实做为对照组。

4、静态贮藏：将0％(w/w)与50％O₂(w/w)、90％O₂(w/w)低浓度氧与高浓度氧短时应激30min处理的灵武长枣与未做任何处理的空白对照组放在PE保鲜袋内于0±1℃条件下贮藏。

品质评价：定期对灵武长枣的品质指标进行测定。

相关检测如下：

1、不同浓度氧气短时应激处理对灵武长枣外观品质及内部组织微观结构的变化影响

不同浓度氧气短时应激处理对灵武长枣枣外观品质的影响如图13A所示。从图13A可以看出，灵武长枣在第56天时，无论是50％高氧应激处理，还是90％高氧应激处理，鲜果颜色都比较饱满鲜艳。而对照组和0％低氧处理组分别从第28天和第35天开始出现果皮皱缩现象。利用扫描电镜观察灵武长枣果肉的微观结构，结果如图13B所示，贮藏初期，鲜枣果肉细胞呈现晶态排列、细胞间隙小、细胞结构完整等特点。但随着贮存时间的延长，细胞间隙逐渐变大，甚至出现明显的细胞破裂。值得注意的是，虽然在高氧应激处理的样品中，由于高氧胁迫的作用，细胞结构在早期表现出不利的结构，但后期组织结构的损伤却减缓了。尤其是50％高氧应激处理组，相比其他处理组不仅延缓了鲜枣的转红期，还延缓了组织内部的损伤。

2、不同浓度氧气短时应激处理对灵武长枣硬度的变化影响

硬度是衡量贮藏质量的重要指标之一，可以在一定程度上揭示贮藏期间果实的商业价值和成熟度。如图14可知，灵武长枣的硬度在贮藏过程中逐渐降低。其中，50％高氧应激处理组的果实相比其他处理组在整个贮藏期间能显著保持较高的硬度水平。90％高氧应激处理在贮藏前35天能够保持较高的硬度值，但是贮藏后期硬度下降严重，可能因为氧气浓度过高，在贮藏后期对其细胞膜造成一定伤害，0％低氧处理整个贮藏期间与空白对照硬度差别不大。因此，在低温贮藏条件下，适宜浓度的高氧应激处理即50％O₂+30min能保持灵武长枣果实的鲜脆口感。

3、不同浓度氧气短时应激处理对灵武长枣电导率的变化影响

电导率是反应果蔬细胞膜完整性的一个重要指标，较高的电导率通常表示细胞膜的完整性较低，枣果实营养物质流失速度加快。从图15可以看出，从整体上观察灵武长枣果实电导率的变化表明，随着贮藏时间的增加果实的电导率总体呈上升趋势，说明随着贮藏时间的增加细胞膜的完整性逐渐在降低。与图13B电镜扫描组织结构结果一致，值得注意的是，在整个贮藏过程中，50％高氧应激处理组果实的电导率与其他处理组相比一直处于相对较低的水平，而90％高氧应激处理组和0％低氧处理组的果实电导率在贮藏前28天低于空白对照组， 28天之后电导率增加较快，电导率值高于空白对照组。可见，在50％高氧短激处理下，在一定时间内明显保护了灵武长枣的细胞膜的完整程度，减缓了枣果实内部营养物质流失的速度，保证了灵武长枣的品质质量；而在0％低氧和90％高氧短激处理下，后期会对鲜枣果实产生一定的损伤，加快了灵武长枣的氧化速度，破坏了果实细胞膜的完整程度，从而造成了枣果果肉组织内营养物质的流失；因此，在一定的时间内，适宜浓度的高氧应激处理即 50％O₂+30min能保证灵武长枣果实细胞膜的完整程度。

4、不同浓度氧气短时应激处理对灵武长枣PPO、POD、ADH酶活的变化影响

作为果蔬组织内重要的抗氧化酶之一，POD的主要任务是帮助果蔬清除自由基，抑制果蔬的氧化现象。从图16A可知，随着贮藏时间的增加，灵武长枣POD酶活呈先增加后减小的趋势。在第28天时，0％低氧和90％高氧短激处理的果实出现了酶活的高峰，在第35天，空白对照组的灵武长枣果实出现酶活的高峰，在第42天时，50％高氧短激处理组才出现了酶活的高峰。可见，50％高氧短激处理组灵武长枣的抗氧化酶活性维持时间较长，抗氧化能力较强；酶峰出现过后活性又降低，说明了随着果实的成熟，自由基数量大增，破坏了抗氧化剂的抵御能力，造成了果实的衰老。由此可见，适宜浓度的高氧应激处理能即50％O₂+30min减缓灵武长枣果实氧化的速度，起到保鲜作用。

作为果蔬呼吸作用中重要的氧化酶之一，PPO的主要任务是传递信息，氧化酚类物质变成醌，醌类化合物接下来形成褐色聚合物，在果蔬采后贮藏过程中与组织褐变联系紧密。由图16B可知，在贮藏前28天PPO酶活性较低，甚至趋于0。从第28天开始，0％低氧处理组的果实PPO酶活活性开始处于上升趋势，而从第35天开始，空白对照组和90％高氧短激处理组的果实PPO酶活开始上升，50％高氧短激处理组灵武长枣的PPO酶活性在第49天之后才有了明显上升的趋势，说明该处理延缓了果实的氧化进程；而0％低氧处理组的灵武长枣氧化速度最快，其次是90％高氧短激处理。所以，适宜浓度的高氧应激处理即50％O₂+30mi n能减缓灵武长枣果实氧化的速度，减轻褐变，起到一定的保鲜作用。

作为鲜枣果实组织内重要的乙醇催化酶，ADH的主要工作流程是以乙醇作为底物，分解转化乙醇，从某种程度上可以避免乙醇对果蔬机体的伤害。由图16C可知，随着贮藏时间的增加，ADH酶活的变化呈先增加后减小的趋势。在第21时，0％低氧和90％高氧短激处理过的果实出现了酶活的高峰，在第35天时，空白对照组出现了酶活的高峰，而50％高氧短激处理组的果实在第35天才出现了酶活的高峰。可以看出，0％低氧和90％高氧短激处理过的灵武长枣果实组织内部乙醇的累积迅速，从而使乙醇催化酶的酶活性很快增强，但也很快丧失活性；相反，50％高氧短激处理组果实的ADH酶活性维持时间较长，从而减少乙醇的累积，因此灵武长枣酒化速度低于其他三组；酶峰出现过后活性又降低，说明了随着果实的成熟，乙醇含量大增，破坏了乙醇催化酶的抵御能力，造成了鲜枣果实的酒化现象。由此可见，适宜浓度的高氧应激处理即50％O₂+30min更能减缓灵武长枣果实酒化的速度，起到较好的保鲜作用。

实施例3

一种适于灵武长枣贮藏的高氧应激保鲜方法，具体步骤如下：

1、灵武长枣采后预冷处理：新鲜果实采后先在冷库低温鼓风去除田间热18-24h，为防止失水过多，将打孔的PE保鲜袋(0.014mm)套在果蔬箱外侧。

2、挑拣样品：预冷结束后，挑选无病害，无磕碰，大小、颜色均匀的鲜果。

3、氧气处理：将挑拣好的灵武长枣放入到密封的气调箱内，先用高纯氮气将密封的气调箱其余气体排出，在向密封的气调箱内通入50％O₂(w/w)浓度的氧气短时应激处理30min，然后打开密封的气调箱，静置30min，使气调箱内残留的高浓度氧释放，降低氧浓度使其恢复到自然状态；另一组为50％O₂(w/w)浓度的氧气持续处理，使其一直处于高氧氛围；不做任何处理的灵武长枣果实做为空白对照组。

4、静态贮藏：将50％高浓度氧短时应激30min处理的灵武长枣，50％高浓度的氧气持续处理与未做任何处理的空白对照组放在PE保鲜袋内于0±1℃条件下贮藏。

品质评价：定期对灵武长枣的品质指标进行测定。

相关检测如下：

1、不同高氧处理方式对灵武长枣硬度的变化影响

硬度是衡量贮藏质量的重要指标之一，可以在一定程度上揭示贮藏期间果实的商业价值和成熟度。如图17可知，灵武长枣的硬度在贮藏过程中逐渐降低。其中，本发明的50％高氧应激处理组的果实相比其他处理组在整个贮藏期间能显著保持较高的硬度水平，50％高氧持续处理与空白对照组整个贮藏期间硬度差别不大。结果表明，在低温贮藏条件下，本发明的高氧应激处理比高氧持续处理与空白对照组能更好地保持灵武长枣果实的鲜脆口感。本发明的高氧应激处理即50％O₂(w/w)浓度的氧气、短时应激处理30min之间具有协同作用。

2、不同高氧处理方式对灵武长枣电导率的变化影响

电导率是反应果蔬细胞膜完整性的一个重要指标，较高的电导率通常表示细胞膜的完整性较低，枣果实营养物质流失速度加快。从图18可以看出，从整体上观察灵武长枣果实电导率的变化表明，随着贮藏时间的增加果实的电导率总体呈上升趋势，说明随着贮藏时间的增加细胞膜的完整性逐渐在降低。值得注意的是，在整个贮藏过程中，本发明的50％高氧应激处理组果实的电导率与其他处理组相比一直处于相对较低的水平，而50％高氧持续处理虽然在贮藏早期抑制了电导率，但贮藏中后期电导率上升较快，且水平高于空白对照组。可见，在本发明的50％高氧短激处理下，在一定时间内明显保护了灵武长枣的细胞膜的完整程度，减缓了枣果实内部营养物质流失的速度，保证了灵武长枣的品质质量；而50％高氧持续处理，后期会对鲜枣果实产生一定的损伤，加快了灵武长枣的氧化速度，破坏了果实细胞膜的完整程度，从而造成了枣果果肉组织内营养物质的流失；因此，在长期贮藏下，本发明的高氧应激处理比高氧持续处理和空白对照组更能保证灵武长枣果实细胞膜的完整程度。本发明的高氧应激处理即50％O₂(w/w)浓度的氧气、短时应激处理30min之间具有协同作用。

3、不同高氧处理方式对灵武长枣PPO、POD、ADH酶活的变化影响

作为果蔬组织内重要的抗氧化酶之一，POD的主要任务是帮助果蔬清除自由基，抑制果蔬的氧化现象。从图19A可知，随着贮藏时间的增加，灵武长枣POD酶活呈先增加后减小的趋势。在第35天时，空白对照组的灵武长枣果实出现酶活的高峰，在第42天时，本发明的50％高氧短激处理组与50％高氧持续处理组才出现了酶活的高峰，且本发明的50％高氧短激处理组比50％高氧持续处理组POD水平更高，可见，本发明的50％高氧短激处理组灵武长枣的抗氧化酶活性维持时间较长，抗氧化能力较强；酶峰出现过后活性又降低，说明了随着果实的成熟，自由基数量大增，破坏了抗氧化剂的抵御能力，造成了果实的衰老。由此可见，本发明的高氧应激处理比高氧持续处理和空白对照组更能增强灵武长枣果实抗氧化能力，起到保鲜作用。本发明的高氧应激处理即50％O₂(w/w)浓度的氧气、短时应激处理30min 之间具有协同作用。

作为果蔬呼吸作用中重要的氧化酶之一，PPO的主要任务是传递信息，氧化酚类物质变成醌，醌类化合物接下来形成褐色聚合物，在果蔬采后贮藏过程中与组织褐变联系紧密。由图19B可知，在贮藏前28天PPO酶活性较低，甚至趋于0。从第28天开始，50％高氧持续处理组的果实PPO酶活活性开始处于上升趋势，而从第35天开始，空白对照组的果实PPO 酶活开始上升，本发明的50％高氧短激处理组灵武长枣的PPO酶活性在第49天之后才有了明显上升的趋势，说明该处理延缓了果实的氧化进程；而50％高氧持续处理组的灵武长枣氧化速度最快，其次是空白对照处理。所以，本发明的高氧应激处理比高氧持续处理和空白对照组更能减缓灵武长枣果实氧化的速度，减轻褐变，起到一定的保鲜作用。

作为鲜枣果实组织内重要的乙醇催化酶，ADH的主要工作流程是以乙醇作为底物，分解转化乙醇，从某种程度上可以避免乙醇对果蔬机体的伤害。由图19C可知，随着贮藏时间的增加，ADH酶活的变化呈先增加后减小的趋势。在第21时，50％高氧持续处理过的果实出现了酶活的高峰，在第35天时，空白对照组出现了酶活的高峰，而本发明的50％高氧短激处理组的果实在第35天才出现了酶活的高峰。可以看出，50％高氧持续处理过的灵武长枣果实组织内部乙醇的累积迅速，从而使乙醇催化酶的酶活性很快增强，但也很快丧失活性；相反，本发明的50％高氧短激处理组果实的ADH酶活性维持时间较长，从而减少乙醇的累积，因此灵武长枣酒化速度低于其他两组；酶峰出现过后活性又降低，说明了随着果实的成熟，乙醇含量大增，破坏了乙醇催化酶的抵御能力，造成了鲜枣果实的酒化现象。由此可见，本发明的高氧应激处理比高氧持续处理和空白对照组更能减缓灵武长枣果实酒化的速度，起到较好的保鲜作用。

实施例4

一种适于大青葡萄贮藏的高氧应激保鲜方法，具体步骤如下：

1、大青葡萄采后预冷处理：新鲜果实采后先在冷库低温鼓风去除田间热18-24h，为防止失水过多，将打孔的PE保鲜袋(0.014mm)套在果蔬箱外侧。

2、挑拣样品：预冷结束后，挑选无病害，无磕碰，大小、颜色均匀的鲜果。

3、高氧应激处理：将挑拣好的大青葡萄放入到密封的气调箱内，先用高纯氮气将密封的气调箱其余气体排出，在向密封的气调箱内通入80％O₂(w/w)浓度的氧气短时应激处理 30min，然后打开密封的气调箱，静置30min，使气调箱内残留的高浓度氧释放，降低氧浓度使其恢复到自然状态，不做任何处理的鲜食枸杞果实做为对照组。

4、静态贮藏：将高浓度氧短时应激30min处理的大青葡萄与未做任何处理的空白对照组放在PE保鲜袋内于0±1℃条件下贮藏。

品质评价：定期对大青葡萄的品质指标进行测定。

相关检测如下：

1、高氧应激处理对大青葡萄保鲜效果、色泽及硬度的变化影响

外观品质是果蔬商品价值的重要指标，由图20A-B可知，在大青葡萄贮藏第35天时，与未经高氧应激处理的空白对照组相比，经本发明的80％高氧应激处理的果实显著抑制了果实的腐烂，保持了果实的商品价值。从色泽上看，色差a*值越低代表果实偏绿，越高代表果实偏红，从图17可以观察到色差a*值整体呈现上升趋势，说明大青葡萄随着贮藏时间的增加，会逐渐失色。但从图中很明显能看出，整个贮藏期间经本发明的80％高氧应激处理的果实色差a*值明显低于空白组，说明本发明的80％高氧应激处理更能保持大青葡萄的绿色。果蔬的硬度(Firmness)往往可以反映其新鲜程度，从图20D中可以观察到硬度值整体呈现下降趋势，说明大青葡萄随着贮藏时间的增加，大青葡萄果肉变软。值得注意的是，经本发明的80％高氧应激处理的果实硬度值从第15天以后均显著高于空白组，说明本发明的高氧应激处理能够减缓果实变软，保持果实硬度。

2、高氧应激处理对大青葡萄可溶性固形物的变化影响

果实的可溶性固形物(Soluble Solid Content,SSC)是衡量果实成熟度和品质的重要指标，且直接决定果蔬的味道。从图21可以观察到空白组的SSC在贮藏期间没有显著性变化，而经过本发明的80％高氧应激处理后的大青葡萄比空白组SSC增大了，说明该处理有效增加了大青葡萄的甜度，改善了果实的品质。

3、高氧应激处理对大青葡萄细胞膜透性、抗氧化能力的变化影响

果实膜透性的变化由相对电导率来表达，膜透性越大，膜的损伤程度越大。从图22A 中可以看出，电导率在整个贮藏期间呈先下降后上升的趋势。随着果实的成熟，机体内糖含量增加，酸含量减少，导致氢离子减少，贮藏后期因为果实组织细胞膜受到损伤，电导率呈上升趋势。而经本发明的80％高氧应激处理后的大青葡萄远低于空白组电导率水平，这说明本发明的80％高氧应激处理能够延缓果实成熟，减少大青葡萄果实膜的损伤。LOX特异性催化膜脂不饱和脂肪酸向饱和脂肪酸转化，加速过氧化代谢物的积累，破坏细胞膜结构，诱导膜脂过氧化。此外，LOX还会促进细胞膜功能的丧失，从而降低采后贮藏能力。从图20D 中可以看出大青葡萄整体LOX成先上升在下降的趋势，本发明的80％高氧应激处理组比空白组峰值晚出现7天，说明间接性高氧处理延缓了LOX峰值的出现，并且保持了较低水平的LOX活性。所以本发明的高氧应激处理能够维持细胞膜功能，是提高果实采后贮藏能力的有效处理技术。

实施例中大青葡萄的抗氧化能力通过DPPH清除自由基速率来表达，从图20B中可以看出，在35天贮藏期内，与空白组相比，本发明的80％高氧应激处理的果实DPPH表现出最高水平，且在最后一周其清除自由基的能力显著高于空白组，说明80％高氧应激处理具有最高清除自由基的能力。众所周知，植物衰老的主要原因是活性氧(ROS)的产生，活性氧对植物细胞的蛋白质和脂质产生氧化损伤，导致果实软化和衰老，因此，控制活性氧的产生是果蔬采后贮藏延缓衰老的重要手段。而活性氧对机体的损坏可以通过活性氧保护酶来调节。 SOD是植物体内一种重要的活性氧清除酶，具有抗氧化、抗衰老的作用。多项研究表明，高SOD活性可抑制活性氧对果实的伤害。因此，本文研究了抗氧化酶SOD对大青葡萄衰老品质的影响，如图20C所示，在整个贮藏期间本发明的80％高氧应激处理的SOD水平一开始由于果实自身的应激反应低于空白组，但在第10天左右之后都高于空白组，有效地提高了SOD活性，增强了果实的抗氧化性。

4、高氧应激处理对大青葡萄总酚及抗褐变相关酶活的变化影响

酚类物质是新鲜果蔬的主要营养物质，它可以赋予果蔬促进人体健康的功能，而PAL 是植物体内苯丙烷代谢途径的关键酶，其活性高低控制植物体内多种生酚类化合物。此外，酚类物质与PAL均在植物本身作为应对生物和非生物胁迫产生的次生代谢物中发挥着重要的作用。从图21中可以观察出前14天，经过本发明的80％高氧应激处理后引起果实酚类物质变化波动较大，这说明酚类物质的波动趋势是由植物的防御反应和高氧刺激一起造成的。在14天之后，两个处理组总酚含量表现为相同的变化趋势，先增加后减小，并且可以很明显的看出，经本发明的80％高氧应激处理的果实比空白组总酚含量低，这说明高氧应激处理可以减缓酚类物质的增加。从图21中可以观察到不同组处理PAL值基本呈现相同的变化趋势。有趣的是，与图21相比较，空白组及本发明的80％高氧应激处理果实对应的总酚含量与PAL值的表现出相同的水平，这是因为PAL参与了褐变底物(酚类化合物)的合成，因此，经过本发明的80％高氧应激处理的果实保持较低总酚含量的同时，PAL水平较空白组与保持了较低水平。说明本发明的高氧应激处理抑制了大青葡萄果实褐变底物的合成。

多酚氧化酶(PPO)与果实组织的衰老和褐变密切相关，其活性已成为衡量果实衰老的重要指标，当氧气存在时，PPO催化酚类化合物转化为醌类，然后次生的非酶反映积累黑色素导致褐变。从图23C中可以看出，两个处理组的PPO表现为相同的变化趋势，且本发明的 80％高氧应激处理比空白组PPO表现出较高水平。POD活性随贮藏时间的延长而减小，如图20D所示，本发明的80％高氧应激处理的果实比空白组POD表现出较高水平。从图23 中可以看出，本发明的高氧应激处理有效的抑制了大青葡萄采后果实的褐变，因为它起到了抗褐变抑制剂作用的三种模式之一，降低了果实总酚的含量，增加了PPO和POD的活性，另外两种模式分别为：一，增加总酚的含量，降低PAL、PPO及POD活性；二，增加总酚的含量及PAL、PPO和POD活性。

尽管为说明目的公开了本发明的实施例，但是本领域的技术人员可以理解：在不脱离本发明及所附权利要求的精神和范围内，各种替换、变化和修改都是可能的，因此，本发明的范围不局限于实施例所公开的内容。

Claims (7)

1.一种适用于鲜果贮藏的高氧应激保鲜方法，其特征在于：所述方法是以50％-100％高浓度氧气为主要气体，以高纯氮气为辅助气体对鲜果进行20-30min短时刺激进行保鲜的。

2.根据权利要求1所述的适用于鲜果贮藏的高氧应激保鲜方法，其特征在于：具体步骤如下：

(1)鲜果采后预冷处理：新鲜果实采后盛装在果蔬箱内，为防止失水过多，将打孔的PE保鲜袋套在果蔬箱外侧，然后整体在冷库低温鼓风去除田间热，温度为0±1℃，时间为18-24小时；

(2)挑拣样品：预冷结束后，挑选无病害，无磕碰，大小、颜色均匀的鲜果；

(3)高氧应激处理：将挑拣好的鲜果放入到密封的气调箱内，先用高纯氮气将密封的气调箱其余气体排出，再向密封的气调箱内通入50％-100％O₂(w/w)的高浓度氧气应激处理20-30min，然后打开密封的气调箱，静置20-30min，使气调箱内残留的高浓度氧释放，降低氧浓度使其恢复到自然状态；

(4)静态贮藏：将高氧应激处理好的鲜果放在PE保鲜袋内于0±1℃条件下贮藏。

3.根据权利要求1所述的适用于鲜果贮藏的高氧应激保鲜方法，其特征在于：所述步骤(1)中PE保鲜袋的孔的直径为0.013-0.020mm。

4.根据权利要求1所述的适用于鲜果贮藏的高氧应激保鲜方法，其特征在于：所述步骤(4)中将高氧应激处理好的鲜果放在MAP自发气调及0±1℃条件下贮藏。

5.根据权利要求1至4任一项所述的适用于鲜果贮藏的高氧应激保鲜方法，其特征在于：所述鲜果为鲜食枸杞、灵武长枣、大青葡萄。

6.根据权利要求5所述的适用于鲜果贮藏的高氧应激保鲜方法，其特征在于：当鲜果为鲜食枸杞时，高氧应激处理时的条件为：向密封的气调箱内通入90％O₂(w/w)的高浓度氧气分别短时应激处理30min，然后打开密封的气调箱，静置30min；

当鲜果为灵武长枣时，高氧应激处理时的条件为：向密封的气调箱内通入50％O₂(w/w)浓度的氧气短时应激处理30min，然后打开密封的气调箱，静置30min；

当鲜果为大青葡萄时，高氧应激处理时的条件为：向密封的气调箱内通入80％O₂(w/w)浓度的氧气短时应激处理30min，然后打开密封的气调箱，静置30min。

7.如权利要求1至6任一项所述的保鲜方法在鲜果贮藏方面中的应用。

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