CN114755361B - 一种治疗儿童过敏性鼻炎的中药复方组合物的质量检测方法 - Google Patents
一种治疗儿童过敏性鼻炎的中药复方组合物的质量检测方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN114755361B CN114755361B CN202210435124.7A CN202210435124A CN114755361B CN 114755361 B CN114755361 B CN 114755361B CN 202210435124 A CN202210435124 A CN 202210435124A CN 114755361 B CN114755361 B CN 114755361B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- compound composition
- solution
- chinese medicine
- traditional chinese
- medicine compound
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 title claims abstract description 102
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims abstract description 95
- 239000003814 drug Substances 0.000 title claims abstract description 80
- 238000001514 detection method Methods 0.000 title claims abstract description 38
- 206010039085 Rhinitis allergic Diseases 0.000 title claims abstract description 28
- 201000010105 allergic rhinitis Diseases 0.000 title claims abstract description 28
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims abstract description 35
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 claims abstract description 34
- 238000010828 elution Methods 0.000 claims abstract description 10
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims abstract description 9
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 81
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 73
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 64
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims description 37
- 238000012360 testing method Methods 0.000 claims description 32
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 30
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 claims description 30
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 28
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 28
- 239000000523 sample Substances 0.000 claims description 28
- 239000012488 sample solution Substances 0.000 claims description 25
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 claims description 24
- 239000013558 reference substance Substances 0.000 claims description 24
- QAIPRVGONGVQAS-DUXPYHPUSA-N trans-caffeic acid Chemical compound OC(=O)\C=C\C1=CC=C(O)C(O)=C1 QAIPRVGONGVQAS-DUXPYHPUSA-N 0.000 claims description 22
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 21
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 19
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 18
- YKRGDOXKVOZESV-WRJNSLSBSA-N Paeoniflorin Chemical compound C([C@]12[C@H]3O[C@]4(O)C[C@](O3)([C@]1(C[C@@H]42)O[C@H]1[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)C)OC(=O)C1=CC=CC=C1 YKRGDOXKVOZESV-WRJNSLSBSA-N 0.000 claims description 18
- YKRGDOXKVOZESV-UHFFFAOYSA-N paeoniflorin Natural products O1C(C)(C2(CC34)OC5C(C(O)C(O)C(CO)O5)O)CC3(O)OC1C24COC(=O)C1=CC=CC=C1 YKRGDOXKVOZESV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 18
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 18
- 229930182470 glycoside Natural products 0.000 claims description 17
- 241000213006 Angelica dahurica Species 0.000 claims description 15
- 238000009210 therapy by ultrasound Methods 0.000 claims description 15
- 241000628997 Flos Species 0.000 claims description 14
- 244000236658 Paeonia lactiflora Species 0.000 claims description 14
- 235000008598 Paeonia lactiflora Nutrition 0.000 claims description 14
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims description 14
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 150000002338 glycosides Chemical class 0.000 claims description 12
- VYQNWZOUAUKGHI-UHFFFAOYSA-N monobenzone Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1OCC1=CC=CC=C1 VYQNWZOUAUKGHI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- ACEAELOMUCBPJP-UHFFFAOYSA-N (E)-3,4,5-trihydroxycinnamic acid Natural products OC(=O)C=CC1=CC(O)=C(O)C(O)=C1 ACEAELOMUCBPJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 11
- KSEBMYQBYZTDHS-HWKANZROSA-M (E)-Ferulic acid Natural products COC1=CC(\C=C\C([O-])=O)=CC=C1O KSEBMYQBYZTDHS-HWKANZROSA-M 0.000 claims description 11
- CWVRJTMFETXNAD-FWCWNIRPSA-N 3-O-Caffeoylquinic acid Natural products O[C@H]1[C@@H](O)C[C@@](O)(C(O)=O)C[C@H]1OC(=O)\C=C\C1=CC=C(O)C(O)=C1 CWVRJTMFETXNAD-FWCWNIRPSA-N 0.000 claims description 11
- GYFFKZTYYAFCTR-JUHZACGLSA-N 4-O-trans-caffeoylquinic acid Chemical compound O[C@@H]1C[C@](O)(C(O)=O)C[C@@H](O)[C@H]1OC(=O)\C=C\C1=CC=C(O)C(O)=C1 GYFFKZTYYAFCTR-JUHZACGLSA-N 0.000 claims description 11
- GYFFKZTYYAFCTR-UHFFFAOYSA-N 5-O-(6'-O-galloyl)-beta-D-glucopyranosylgentisic acid Natural products OC1CC(O)(C(O)=O)CC(O)C1OC(=O)C=CC1=CC=C(O)C(O)=C1 GYFFKZTYYAFCTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 11
- 241000206501 Actaea <angiosperm> Species 0.000 claims description 11
- PZIRUHCJZBGLDY-UHFFFAOYSA-N Caffeoylquinic acid Natural products CC(CCC(=O)C(C)C1C(=O)CC2C3CC(O)C4CC(O)CCC4(C)C3CCC12C)C(=O)O PZIRUHCJZBGLDY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 11
- CWVRJTMFETXNAD-KLZCAUPSSA-N Neochlorogenin-saeure Natural products O[C@H]1C[C@@](O)(C[C@@H](OC(=O)C=Cc2ccc(O)c(O)c2)[C@@H]1O)C(=O)O CWVRJTMFETXNAD-KLZCAUPSSA-N 0.000 claims description 11
- 235000004883 caffeic acid Nutrition 0.000 claims description 11
- 229940074360 caffeic acid Drugs 0.000 claims description 11
- 235000001368 chlorogenic acid Nutrition 0.000 claims description 11
- CWVRJTMFETXNAD-JUHZACGLSA-N chlorogenic acid Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)C[C@@](O)(C(O)=O)C[C@H]1OC(=O)\C=C\C1=CC=C(O)C(O)=C1 CWVRJTMFETXNAD-JUHZACGLSA-N 0.000 claims description 11
- 229940074393 chlorogenic acid Drugs 0.000 claims description 11
- FFQSDFBBSXGVKF-KHSQJDLVSA-N chlorogenic acid Natural products O[C@@H]1C[C@](O)(C[C@@H](CC(=O)C=Cc2ccc(O)c(O)c2)[C@@H]1O)C(=O)O FFQSDFBBSXGVKF-KHSQJDLVSA-N 0.000 claims description 11
- BMRSEYFENKXDIS-KLZCAUPSSA-N cis-3-O-p-coumaroylquinic acid Natural products O[C@H]1C[C@@](O)(C[C@@H](OC(=O)C=Cc2ccc(O)cc2)[C@@H]1O)C(=O)O BMRSEYFENKXDIS-KLZCAUPSSA-N 0.000 claims description 11
- QAIPRVGONGVQAS-UHFFFAOYSA-N cis-caffeic acid Natural products OC(=O)C=CC1=CC=C(O)C(O)=C1 QAIPRVGONGVQAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 11
- GYFFKZTYYAFCTR-LMRQPLJMSA-N cryptochlorogenic acid Natural products O[C@H]1C[C@@](O)(C[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C=Cc2ccc(O)c(O)c2)C(=O)O GYFFKZTYYAFCTR-LMRQPLJMSA-N 0.000 claims description 11
- 235000001785 ferulic acid Nutrition 0.000 claims description 11
- KSEBMYQBYZTDHS-HWKANZROSA-N ferulic acid Chemical compound COC1=CC(\C=C\C(O)=O)=CC=C1O KSEBMYQBYZTDHS-HWKANZROSA-N 0.000 claims description 11
- 229940114124 ferulic acid Drugs 0.000 claims description 11
- KSEBMYQBYZTDHS-UHFFFAOYSA-N ferulic acid Natural products COC1=CC(C=CC(O)=O)=CC=C1O KSEBMYQBYZTDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 11
- QURCVMIEKCOAJU-UHFFFAOYSA-N trans-isoferulic acid Natural products COC1=CC=C(C=CC(O)=O)C=C1O QURCVMIEKCOAJU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 11
- 229910052602 gypsum Inorganic materials 0.000 claims description 10
- 239000010440 gypsum Substances 0.000 claims description 10
- 239000012085 test solution Substances 0.000 claims description 10
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- IBPFZCOJYVDKGN-UHFFFAOYSA-N OC.OC=O.ClC(Cl)Cl.CCOC(C)=O Chemical compound OC.OC=O.ClC(Cl)Cl.CCOC(C)=O IBPFZCOJYVDKGN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- WORJEOGGNQDSOE-UHFFFAOYSA-N chloroform;methanol Chemical compound OC.ClC(Cl)Cl WORJEOGGNQDSOE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 9
- 241000218394 Magnolia liliiflora Species 0.000 claims description 8
- 241000218378 Magnolia Species 0.000 claims description 7
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 claims description 7
- QSKWJTXWJJOJFP-UHFFFAOYSA-N chloroform;ethoxyethane Chemical compound ClC(Cl)Cl.CCOCC QSKWJTXWJJOJFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 claims description 7
- 239000003208 petroleum Substances 0.000 claims description 7
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims description 7
- 238000002791 soaking Methods 0.000 claims description 7
- 238000005303 weighing Methods 0.000 claims description 7
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 229960002576 amiloride Drugs 0.000 claims description 6
- 239000009670 cang er zi wan Substances 0.000 claims description 6
- 238000005259 measurement Methods 0.000 claims description 6
- 239000012528 membrane Substances 0.000 claims description 6
- YQBNJPACAUPNLV-UHFFFAOYSA-N peucedanin Chemical compound O1C(=O)C=CC2=C1C=C1OC(C(C)C)=C(OC)C1=C2 YQBNJPACAUPNLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- MWOOGOJBHIARFG-UHFFFAOYSA-N vanillin Chemical compound COC1=CC(C=O)=CC=C1O MWOOGOJBHIARFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- FGQOOHJZONJGDT-UHFFFAOYSA-N vanillin Natural products COC1=CC(O)=CC(C=O)=C1 FGQOOHJZONJGDT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 235000012141 vanillin Nutrition 0.000 claims description 6
- FPIPGXGPPPQFEQ-UHFFFAOYSA-N 13-cis retinol Natural products OCC=C(C)C=CC=C(C)C=CC1=C(C)CCCC1(C)C FPIPGXGPPPQFEQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- PEWFWDOPJISUOK-UHFFFAOYSA-N 4-(2,3-Dihydroxy-3-methylbutoxy)furo(3,2-g)chromen-7-one Chemical compound O1C(=O)C=CC2=C1C=C1OC=CC1=C2OCC(O)C(C)(O)C PEWFWDOPJISUOK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 239000000919 ceramic Substances 0.000 claims description 5
- FPIPGXGPPPQFEQ-BOOMUCAASA-N Vitamin A Natural products OC/C=C(/C)\C=C\C=C(\C)/C=C/C1=C(C)CCCC1(C)C FPIPGXGPPPQFEQ-BOOMUCAASA-N 0.000 claims description 4
- XSDQTOBWRPYKKA-UHFFFAOYSA-N amiloride Chemical compound NC(=N)NC(=O)C1=NC(Cl)=C(N)N=C1N XSDQTOBWRPYKKA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 230000002950 deficient Effects 0.000 claims description 4
- 235000021419 vinegar Nutrition 0.000 claims description 4
- 239000000052 vinegar Substances 0.000 claims description 4
- 235000019155 vitamin A Nutrition 0.000 claims description 4
- 239000011719 vitamin A Substances 0.000 claims description 4
- 229940045997 vitamin a Drugs 0.000 claims description 4
- 241001180876 Saposhnikovia Species 0.000 claims description 3
- OSGAYBCDTDRGGQ-UHFFFAOYSA-L calcium sulfate Chemical compound [Ca+2].[O-]S([O-])(=O)=O OSGAYBCDTDRGGQ-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 3
- 238000007865 diluting Methods 0.000 claims description 3
- 238000002347 injection Methods 0.000 claims description 3
- 239000007924 injection Substances 0.000 claims description 3
- 238000007789 sealing Methods 0.000 claims description 3
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 claims description 3
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 239000002024 ethyl acetate extract Substances 0.000 claims description 2
- 239000011505 plaster Substances 0.000 claims description 2
- 239000012088 reference solution Substances 0.000 claims description 2
- 241000244269 Peucedanum Species 0.000 claims 1
- FPIPGXGPPPQFEQ-OVSJKPMPSA-N all-trans-retinol Natural products OC\C=C(/C)\C=C\C=C(/C)\C=C\C1=C(C)CCCC1(C)C FPIPGXGPPPQFEQ-OVSJKPMPSA-N 0.000 claims 1
- 235000019169 all-trans-retinol Nutrition 0.000 claims 1
- 239000011717 all-trans-retinol Substances 0.000 claims 1
- 239000012467 final product Substances 0.000 claims 1
- 239000012071 phase Substances 0.000 abstract description 13
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 abstract description 4
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 abstract description 4
- 238000012216 screening Methods 0.000 abstract description 3
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 14
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 10
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 235000006484 Paeonia officinalis Nutrition 0.000 description 3
- 241001106477 Paeoniaceae Species 0.000 description 3
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 3
- CUKSFECWKQBVED-INIZCTEOSA-N Decursin Chemical compound C1=CC(=O)OC2=C1C=C1C[C@H](OC(=O)C=C(C)C)C(C)(C)OC1=C2 CUKSFECWKQBVED-INIZCTEOSA-N 0.000 description 2
- CUKSFECWKQBVED-UHFFFAOYSA-N Grandivittin Natural products C1=CC(=O)OC2=C1C=C1CC(OC(=O)C=C(C)C)C(C)(C)OC1=C2 CUKSFECWKQBVED-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000112528 Ligusticum striatum Species 0.000 description 2
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 2
- JXZWWIMXTVJNSF-UHFFFAOYSA-N decursin Natural products CC(=CC(=O)OC1Oc2cc3OC(=O)C=Cc3cc2CC1(C)C)C JXZWWIMXTVJNSF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WBKFWQBXFREOFH-UHFFFAOYSA-N dichloromethane;ethyl acetate Chemical compound ClCCl.CCOC(C)=O WBKFWQBXFREOFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 2
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 2
- 239000012925 reference material Substances 0.000 description 2
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 2
- 229940126680 traditional chinese medicines Drugs 0.000 description 2
- 238000010792 warming Methods 0.000 description 2
- 206010067484 Adverse reaction Diseases 0.000 description 1
- 206010010741 Conjunctivitis Diseases 0.000 description 1
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- 241000212322 Levisticum officinale Species 0.000 description 1
- PBCJIPOGFJYBJE-UHFFFAOYSA-N acetonitrile;hydrate Chemical compound O.CC#N PBCJIPOGFJYBJE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000006838 adverse reaction Effects 0.000 description 1
- 230000032683 aging Effects 0.000 description 1
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 description 1
- 230000007815 allergy Effects 0.000 description 1
- 230000004075 alteration Effects 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 208000006673 asthma Diseases 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- ZYGHJZDHTFUPRJ-UHFFFAOYSA-N benzo-alpha-pyrone Natural products C1=CC=C2OC(=O)C=CC2=C1 ZYGHJZDHTFUPRJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000004777 chromones Chemical class 0.000 description 1
- 238000012937 correction Methods 0.000 description 1
- 235000001671 coumarin Nutrition 0.000 description 1
- 150000004775 coumarins Chemical class 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 230000005182 global health Effects 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 241000411851 herbal medicine Species 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 208000027866 inflammatory disease Diseases 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 208000030603 inherited susceptibility to asthma Diseases 0.000 description 1
- 238000007689 inspection Methods 0.000 description 1
- 238000010829 isocratic elution Methods 0.000 description 1
- 239000001645 levisticum officinale Substances 0.000 description 1
- 229930013686 lignan Natural products 0.000 description 1
- 150000005692 lignans Chemical class 0.000 description 1
- 235000009408 lignans Nutrition 0.000 description 1
- 125000000325 methylidene group Chemical group [H]C([H])=* 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 230000002688 persistence Effects 0.000 description 1
- 150000007965 phenolic acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000000241 respiratory effect Effects 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 238000002137 ultrasound extraction Methods 0.000 description 1
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 1
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 1
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 1
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 1
- 150000003722 vitamin derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 229940126673 western medicines Drugs 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/90—Plate chromatography, e.g. thin layer or paper chromatography
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
- G01N30/26—Conditioning of the fluid carrier; Flow patterns
- G01N30/28—Control of physical parameters of the fluid carrier
- G01N30/34—Control of physical parameters of the fluid carrier of fluid composition, e.g. gradient
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
- G01N30/88—Integrated analysis systems specially adapted therefor, not covered by a single one of the groups G01N30/04 - G01N30/86
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
- G01N30/88—Integrated analysis systems specially adapted therefor, not covered by a single one of the groups G01N30/04 - G01N30/86
- G01N2030/8809—Integrated analysis systems specially adapted therefor, not covered by a single one of the groups G01N30/04 - G01N30/86 analysis specially adapted for the sample
Landscapes
- Physics & Mathematics (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
本发明公开了一种治疗儿童过敏性鼻炎的中药复方组合物的质量检测方法，该方法包括薄层色谱定性检测和高效液相定量检测。本发明通过大量实验筛选检测方法，特别是对薄层色谱的展开剂和高效液相的流动相和梯度洗脱方式进行筛选，优选出最佳的薄层色谱定性检测法和高效液相定量检测法，该发明可全面客观的对方中炒苍耳子、辛夷、炒白芍、白芷、醋乌梅、防风和川芎的成分含量进行检测和分析。对保证该中药复方的有效性和安全性具有重要意义。经方法学验证表明，本发明提供的高效液相色谱法，精密度高、重复性和稳定性好。
Description
技术领域
本发明涉及中药技术领域，具体为一种治疗儿童过敏性鼻炎的中药复方组合物的质量检测方法。
背景技术
过敏性鼻炎受遗传和环境因素综合影响，是涉及所有年龄群体的全球健康问题，且儿童患病率较成人高。过敏性鼻炎具有间歇性，持续性，反复性，发病率高等特点，常常伴有家族过敏史，也易引起一系列呼吸道炎症性疾病的发生，与支气管哮喘、鼻窦炎和结膜炎等疾病有一定的关联性。多年来，临床发现西药治疗过敏性鼻炎有一定治疗效果，但存在成分单一，时效长短不一，不良反应和副作用大等问题。中医治疗过敏性鼻炎具有独特优势，常以祛风通窍、温肺散寒、益气固表、补脾温肾为主，注重肺脾肾的整体调节，临床处方安全性高，复发率低。将应用于临床疗效显著的处方研发成为一种安全有效的中药制剂，可为过敏性鼻炎患者在药物治疗方面提供更多的选择。
本发明中药复方组合物是江苏省中医院开发的院内中药制剂，其由炒苍耳子、辛夷、炒白芍、白芷、醋乌梅、生石膏、防风、川芎八味中药组成，临床实验显示具有很好的治疗儿童过敏性鼻炎的功效。该中药复方申请人前期申请了专利，申请号为201910700774.8，发明名称为一种具有防治小儿变应性鼻炎作用的中药组合物及其制备方法与应用。目前，未有关于中药复方组合物的质量检测方法，本发明筛选出其薄层鉴别和高效液相鉴别方法，对保证和控制临床的有效性和安全性具有重要的意义。
发明内容
发明目的：本发明的目的在于提供一种治疗儿童过敏性鼻炎的中药复方组合物的质量检测方法。
技术方案：为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：
一种治疗儿童过敏性鼻炎的中药复方组合物的质量检测方法，包括薄层色谱定性检测和高效液相定量检测；
中药复方组合物提取液的制备：按重量份数取生石膏，置于陶瓷药罐中先煎，然后将炒苍耳子、辛夷、炒白芍、白芷、醋乌梅、防风、川芎，加水浸泡后，合并生石膏先煎液，煎煮提取，合并提取液，减压浓缩，即得；
所述的薄层色谱定性检测包括以下步骤：
(1)辛夷薄层色谱鉴别，具体步骤如下：
1)取中药复方组合物提取液，旋干，加甲醇，超声，滤过，滤液蒸干，残渣加水溶解，用乙醚振摇萃取，合并乙醚萃取液，蒸干，残渣加甲醇溶解，作为中药复方组合物供试品溶液；
2)取缺辛夷的中药复方组合物，按上述中药复方组合物提取液的制备方法制备缺辛夷的阴性供试品；
3)另取辛夷对照药材粗粉，加三氯甲烷，密塞，超声处理，滤过，滤液蒸干，残渣加三氯甲烷溶解，作为辛夷对照药材溶液；
4)吸取上述三种溶液，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-乙醚为展开剂，展开，取出，晾干，喷以香草醛硫酸溶液，再加热至斑点显色清晰，中药复方组合物供试品溶液色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，缺辛夷的阴性供试品未见干扰；
(2)白芍薄层色谱鉴别，具体步骤如下：
1)取中药复方组合物提取液，旋干，加乙醇超声处理，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇溶解，作为中药复方组合物供试品溶液；
2)取缺白芍的中药复方组合物，按上述中药复方组合物提取液的制备方法制备缺白芍的阴性供试品；
3)另取白芍对照药材粉末，加乙醇超声处理，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇溶解，即得白芍对照药材溶液；
4)吸取上述3种溶液，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以香草醛硫酸溶液，再加热至斑点显色清晰，中药复方组合物供试品溶液色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，缺白芍的阴性供试品未见干扰；
(3)白芷薄层色谱鉴别，具体步骤如下：
1)取中药复方组合物提取液，旋干，加甲醇，超声，滤过，滤液蒸干，残渣加水溶解，用乙醚振摇萃取，合并乙醚萃取液，蒸干，残渣加甲醇溶解，作为中药复方组合物供试品溶液；
2)取缺白芷的中药复方组合物，按上述中药复方组合物提取液的制备方法制备缺白芷的阴性供试品；
3)另取白芷对照药材，加乙醚浸泡，时时振摇，滤过，滤液蒸干，残渣加乙酸乙酯溶解，作为白芷对照药材供试品溶液；
4)吸取上述3种溶液，分别点于同一硅胶G薄层板上，以30～60℃石油醚-乙醚为展开剂，25℃以下展开，取出，晾干，置紫外光灯下检视，中药复方组合物供试品溶液色谱中，在与对照药材溶液色谱相应位置上，荧光下显相同颜色的斑点，缺白芷的阴性供试品未见干扰；
(4)防风薄层色谱鉴别，具体步骤如下：
1)取中药复方组合物提取液，用乙酸乙酯振摇萃取，合并乙酸乙酯萃取液，蒸干，残渣加甲醇溶解，作为中药复方组合物供试品溶液；
2)取缺防风的中药复方组合物，按上述中药复方组合物提取液的制备方法制备缺防风的阴性供试品；
3)另取防风对照药材粉末，加丙酮，超声处理，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇溶解，作为防风对照药材溶液；
4)吸取上述3种溶液，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以三氯甲烷-甲醇为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯下检视，中药复方组合物供试品溶液色谱中，在与对照药材溶液色谱相应位置上，荧光下显相同颜色的斑点，缺防风的阴性供试品未见干扰。
作为优选方案，以上所述的治疗儿童过敏性鼻炎的中药复方组合物的质量检测方法，步骤(1)辛夷薄层色谱鉴别，以体积比为5:1的三氯甲烷-乙醚为最佳的展开剂；
步骤(2)白芍薄层色谱鉴别，以体积比为40:5:10:0.2的三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸为最佳的展开剂；
步骤(3)白芷薄层色谱鉴别，以体积比为3:2的30～60℃石油醚-乙醚为最佳的展开剂；
步骤(4)防风薄层色谱鉴别，以体积比为8:1的三氯甲烷-甲醇为最佳的展开剂。
作为优选方案，以上所述的治疗儿童过敏性鼻炎的中药复方组合物的质量检测方法，其特征在于，中药复方组合物提取液的制备：按重量份数取生石膏15～45份，置于陶瓷药罐中先煎，然后将炒苍耳子6～18份、辛夷6～18份、炒白芍10～30份、白芷10～30份、醋乌梅10～30份、防风6～18份、川芎6～18份，加入3～10倍水浸泡后，合并生石膏先煎液，煎煮提取2次，每次15～20min，合并提取液，减压浓缩，即得。
作为优选方案，以上所述的治疗儿童过敏性鼻炎的中药复方组合物的质量检测方法，所述的高效液相定量检测包括以下步骤：
1)混合对照品溶液的制备：精密称定适量的绿原酸、咖啡酸、隐绿原酸、芍药内脂苷、芍药苷、阿魏酸、升麻素苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷、水合氧化前胡素、木兰脂素对照品，加甲醇溶解，超声处理5～10min，定容，摇匀，制成混合对照品溶液；
2)供试品溶液的制备：精密量取权利要求3制备得到的中药复方组合物提取液，旋干，加入甲醇溶解，定容，摇匀，过0.22μm滤膜，取续滤液，即得；
3)标准曲线的绘制：取上述步骤1)混合对照品溶液，用甲醇逐级稀释得到5个浓度，精密吸取不同浓度混合对照品溶液，并分别进样10μL，注入高效液相色谱仪中测定；以对照品的浓度X为横坐标，峰面积Y为纵坐标，得标准曲线方程为：绿原酸Y＝4057.3X+34.183,R2＝0.9996；咖啡酸Y＝9831.1X-3.5412,R2＝0.9999；隐绿原酸Y＝4036.5X-4.9754,R2＝0.9997；芍药内脂苷Y＝7915.3X+27.006,R2＝0.9995；芍药苷Y＝11370X-16.399,R2＝0.9998；阿魏酸Y＝15542X-12.632,R2＝0.9995；升麻素苷Y＝71954X-66.172,R2＝0.9994；5-O-甲基维斯阿米醇苷Y＝65894X-67.537,R2＝0.9994；水合氧化前胡素Y＝24587X-160.85,R2＝0.9998；木兰脂素Y＝20372X-13.386，R2＝0.9993；
4)含量测定：分别精密吸取步骤1)混合对照品溶液和步骤2)供试品溶液，注入液相色谱仪，依据步骤3)的标准曲线方程，计算出供试品溶液中绿原酸、咖啡酸、隐绿原酸、芍药内脂苷、芍药苷、阿魏酸、升麻素苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷、水合氧化前胡素、木兰脂素的含量。
作为优选方案，以上所述的治疗儿童过敏性鼻炎的中药复方组合物的质量检测方法，在色谱条件方面进行优化：
本发明采用紫外检测器对检测波长进行考察，提取210nm、230nm、254nm、278nm、327nm处的色谱图，发现检测波长为230nm时，色谱峰出峰数目较多、基线平稳、峰形较好，故选230nm为检测波长；
本发明比较了乙腈-水、乙腈-0.05％磷酸水、乙腈-0.1％磷酸水3个不同洗脱系统在同一梯度下的洗脱效果。结果发现以乙腈-0.1％磷酸水为流动相时，中药复方中各成分能达到较好的分离效果，故最终选定以乙腈-0.1％磷酸水为流动相。
本发明比较了柱温为25℃、30℃、40℃时同一样品的出峰情况，发现降低柱温可有效改善芍药苷峰形拖尾情况，且分离度较好，最终选择以25℃为色谱柱柱温。
作为优选方案，以上所述的治疗儿童过敏性鼻炎的中药复方组合物的质量检测方法，步骤3)和步骤4)的色谱条件为：色谱柱：AgilentZorbaxSB-C18色谱柱，规格为4.6mm×250mm，5μm；流动相：乙腈为A相，0.1％磷酸为B项，柱温：25℃；流速：1.0mL·min-1，检测波长：230nm；进样体积：10μL。
在优选出最佳的流动相组成后，由于中药复方含有酚酸、木脂素类、香豆素类、色原酮类、苷类等多类成分。等度洗脱方式不能很好的实现各成分的分离，因此本发明进一步筛选了梯度洗脱方式。
作为优选方案，以上所述的治疗儿童过敏性鼻炎的中药复方组合物的质量检测方法，梯度洗脱程序如下：
| 时间/min | 流动相A/％ | 流动相B/％ |
| 0～4 | 2→2 | 98→98 |
| 4～6 | 2→10.4 | 98→89.6 |
| 6～16 | 10.4→10.5 | 89.6→89.5 |
| 16～18 | 10.5→11.5 | 89.5→88.5 |
| 18～35 | 11.5→11.7 | 88.5→88.3 |
| 35～38 | 11.7→13.1 | 88.3→86.9 |
| 38～50 | 13.1→13.2 | 86.9→86.8 |
| 50～55 | 13.2→23 | 86.8→77 |
| 55～70 | 23→27.5 | 77→72.5 |
| 70～80 | 27.5→33 | 72.5→67 |
| 80～100 | 33→50 | 67→50 |
| 100～110 | 50→50 | 50→50 |
与现有技术相比，本发明的有益效果是：
本发明通过大量实验筛选检测方法，特别是对薄层色谱的展开剂和高效液相的流动相和梯度洗脱方式进行筛选，优选出最佳的薄层色谱定性鉴别法和高效液相色谱定量检测法，可全面客观的对方中炒苍耳子、辛夷、炒白芍、白芷、醋乌梅、防风和川芎的成分含量进行检测和分析。对保证该中药复方的有效性和安全性具有重要意义。经方法学验证表明，本发明提供的高效液相色谱法，精密度高、重复性和稳定性好。
附图说明
图1为本发明辛夷不同点样量的薄层鉴别示意图；图中1:阴性(5μL)2:对照药材(5μL)3:供试品(1μL)4:供试品(3μL)5:供试品(5μL)；
图2为本发明三氯甲烷-乙醚(5:1)下中药复方组合物辛夷薄层鉴别示意图；图中1:阴性2:对照药材3～4:供试品；
图3为本发明二氯甲烷-乙酸乙酯(9:1)下中药复方组合物辛夷薄层鉴别示意图；图中1:阴性2:对照药材3～4:供试品；
图4为本发明白芍不同点样量的薄层鉴别示意图；图中1:阴性(15μL)2:对照药材(10μL)3:供试品(5μL)4:供试品(10μL)5:供试品(15μL)；
图5为本发明三氯甲烷-甲醇(9:1)下中药复方组合物白芍薄层鉴别示意图；图中1:阴性2:对照药材3～4:供试品；
图6为本发明三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(40:5:10:0.2)下中药复方组合物白芍薄层鉴别示意图；1:阴性2:对照药材3～4:供试品；
图7为本发明白芷的不同点样量的薄层鉴别示意图；图中1:阴性(5μL)2:对照药材(5μL)3:供试品(1μL)4:供试品(3μL)5:供试品(5μL)；
图8为本发明石油醚(30～60℃)-乙醚(3:2)下中药复方组合物白芷薄层鉴别示意图；图中1:阴性2:对照药材3～4:供试品；
图9为本发明二氯甲烷-甲醇-浓氨(9:1:0.5)下中药复方组合物白芷薄层鉴别示意图；图中1:阴性2:对照药材3～4:供试品；
图10为本发明防风不同点样量的薄层鉴别示意图；图中1:阴性(15μL)2:对照药材(10μL)3:供试品(5μL)4:供试品(10μL)5:供试品(15μL)；
图11为本发明三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(12:8:3:0.2)中药复方组合物防风薄层鉴别示意图；图中1:阴性2:对照药材3～4:供试品；
图12为本发明三氯甲烷-甲醇(8:1)中药复方组合物防风薄层鉴别示意图，图中1:阴性2:对照药材3～4:供试品；
图13为本发明中药复方组合物对照品和供试品溶液色谱示意图。
图14为本发明中药复方组合物供试品溶液指纹图谱示意图。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例，基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1一种治疗儿童过敏性鼻炎的中药复方组合物的制备方法，具体包括以下步骤：
取生石膏15g置于陶瓷药罐中，加10倍水先煎15min；另取苍耳子6g、辛夷6g、白芍10g、白芷10g、乌梅10g、防风6g、川芎6g，加3倍水浸泡1h；合并生石膏先煎液，煎煮两次，第一次煎煮20min，滤过；第二次加水250ml，煎煮15min，滤过，合并两次提取液，减压浓缩至50ml，即得。
实施例2一种治疗儿童过敏性鼻炎的中药复方组合物的薄层色谱鉴别，具体步骤如下：
步骤1：对辛夷薄层色谱鉴别，具体步骤如下：
1)取实施例1中药复方组合物10mL，旋干，加甲醇30ml，超声30min，滤过，滤液蒸干，残渣加水10ml溶解，滤过，用乙醚振摇提取2次，每次10ml，合并乙醚提取液，蒸干，残渣加甲醇2ml溶解，作为中药复方组合物供试品溶液。
取缺辛夷的其它中药复方，按实施例1方法制备得到缺辛夷的阴性供试品溶液；
2)另取辛夷对照药材粗粉1g，加三氯甲烷10ml，密塞，超声处理30min，滤过，滤液蒸干，残渣加三氯甲烷2ml使溶解，作为辛夷对照药材溶液；
3)照薄层色谱法(《中华人民共和国药典》四部通则0502)试验，吸取上述三种溶液，分别点于同一硅胶G薄层板上，分别以三氯甲烷-乙醚(5:1)、二氯甲烷-乙酸乙酯(9:1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1％香草醛硫酸溶液，105℃加热检视。如图1～3，以三氯甲烷-乙醚(5:1)为展开剂时展开效果较好，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性供试品溶液未见干扰。
步骤2：对白芍薄层色谱鉴别，具体步骤如下：
1)取实施例1中药复方组合物10mL，旋干，加乙醇10ml，超声提取30min，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，作为中药复方组合物供试品溶液。
取缺白芍的其它中药复方，按实施例1方法制备得到缺白芍的阴性供试品溶液；
2)另取白芍对照药材0.5g，加乙醇10ml，超声提取30min，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，作为白芍对照药材溶液；
3)照薄层色谱法(《中华人民共和国药典》四部通则0502)试验，吸取上述3种溶液，分别点于同一硅胶G薄层板上，分别以三氯甲烷-甲醇(9:1)、三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(40:5:10:0.2)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1％香草醛硫酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，如图4～6，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(40:5:10:0.2)为展开剂时展开效果较好，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性供试品溶液未见干扰。
步骤3：对白芷薄层色谱鉴别，具体步骤如下：
1)取实施例1中药复方组合物10ml，旋干，加甲醇30ml，超声30min，滤过，滤液蒸干，残渣加水10ml溶解，滤过，用乙醚振摇提取2次，每次10ml，合并乙醚提取液，蒸干，残渣加甲醇2ml溶解，作为供试品溶液。
取缺白芷的其它中药复方，按实施例1方法制备得到缺白芷的阴性供试品溶液；
2)另取白芷对照药材0.5g，加乙醚10ml浸泡1h，时时振摇，滤过，滤液蒸干，残渣加乙酸乙酯1ml溶解，作为白芷对照药材溶液；
3)照薄层色谱法(《中华人民共和国药典》四部通则0502)试验，吸取上述3种溶液，分别点于同一硅胶G薄层板上，分别以石油醚(30～60℃)-乙醚(3:2)、二氯甲烷-甲醇-浓氨(9:1:0.5)为展开剂，25℃以下展开，取出，晾干，置紫外光灯(366nm)下检视，如图7～9，以石油醚(30～60℃)-乙醚(3:2)为展开剂时展开效果较好，供试品溶液色谱中，在与对照药材溶液色谱相应位置上，荧光下显相同颜色斑点，阴性供试品溶液未见干扰。
步骤4：对防风薄层色谱鉴别，具体步骤如下：
1)取实施例1中药复方组合物10ml，用乙酸乙酯萃取3次，每次20ml，合并萃取液，水浴蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。
取缺防风的其它中药复方，按实施例1方法制备得到缺防风的阴性供试品溶液；
2)另取防风对照药材1g，加丙酮20ml，超声处理20min，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇1ml使溶解，作为防风对照药材溶液；
3)照薄层色谱法(《中华人民共和国药典》四部通则0502)试验，吸取上述3种溶液，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，分别以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(12:8:3:0.2)、三氯甲烷-甲醇(8:1)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(254nm)下检视。如图10～12，以三氯甲烷-甲醇(8:1)为展开剂时展开效果较好，供试品溶液色谱中，在与对照药材溶液色谱相应位置上，荧光下显相同颜色的斑点，阴性供试品溶液未见干扰。
实施例3中药复方组合物的含量测定方法
(1)色谱条件：色谱柱：AgilentZorbaxSB-C18色谱柱，规格为4.6mm×250mm，5μm；流动相：乙腈为A相，0.1％磷酸为B项；柱温：25℃；流速：1.0mL·min-1，检测波长：230nm；进样体积：10μL，按表1进行梯度洗脱。理论板数按芍药苷峰计算不低于3000；
表1梯度洗脱表
(2)混合对照品溶液的制备：精密称定绿原酸、咖啡酸、隐绿原酸、芍药内脂苷、芍药苷、阿魏酸、升麻素苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷、水合氧化前胡素、木兰脂素对照品，加甲醇溶解，超声处理10min，定容，摇匀，制成质量浓度分别为0.250、0.149、0.854、2.095、0.713、0.139、0.305、1.023、0.520、0.811mg·mL-1的混合对照品溶液，过0.22μm滤膜；
(3)供试品溶液的制备：精密量取实施例1制备得到的中药复方组合物10ml，旋干，加甲醇溶解，定容至50mL容量瓶，摇匀，过0.22μm滤膜，取续滤液，即得；
(4)系统适应性试验：
1)分别精密吸取混合对照品溶液、供试品溶液各10μL，注入液相色谱仪，按上述色谱条件测定。理论板数按芍药苷峰计算不低于3000，见图13(图中峰5为绿原酸、6为咖啡酸、7为隐绿原酸、9为芍药内脂苷、11为芍药苷、13为升麻素苷、14为阿魏酸、17为5-O-甲基维斯阿米醇苷、21为水合氧化前胡素、29为木兰脂素)。
2)取上述混合对照品溶液，用甲醇逐级稀释2、4、8、16和32倍，得到5个不同的浓度的混合对照品溶液，精密吸取5个浓度的混合对照品，并分别进样10μL，注入高效液相色谱仪中测定。以对照品的浓度(X)为横坐标，峰面积(Y)为纵坐标绘制标准曲线，得绿原酸Y＝4057.3X+34.183，R2＝0.9996；咖啡酸Y＝9831.1X-3.5412，R2＝0.9999；隐绿原酸Y＝4036.5X-4.9754，R2＝0.9997；芍药内脂苷Y＝7915.3X+27.006，R2＝0.9995；芍药苷Y＝11370X-16.399，R2＝0.9998；阿魏酸Y＝15542X-12.632，R2＝0.9995；升麻素苷Y＝71954X-66.172，R2＝0.9994；5-O-甲基维斯阿米醇苷Y＝65894X-67.537，R2＝0.9994；水合氧化前胡素Y＝24587X-160.85，R2＝0.9998；木兰脂素Y＝20372X-13.386，R2＝0.9993；
(5)含量测定：
精密量取按实施例1方法制备得到的10批(S1～S10)中药复方组合物提取液各10ml，旋干，加甲醇溶解，定容至50mL容量瓶中，过0.22μm滤膜，按上述色谱条件，分别进样10μL，根据测定峰面积，代入标准曲线，计算10批中药复方组合物中的绿原酸、咖啡酸、隐绿原酸、芍药内脂苷、芍药苷、阿魏酸、升麻素苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷、水合氧化前胡素、木兰脂素的含量，计算结果见表2。
表2不同批次中药复方组合物中10种成分含量(μg/ml，n＝10)
(6)指纹图谱建立：
精密量取按实施例1方法制备得到的10批(S1～S10)中药复方组合物提取液各10ml，旋干，加甲醇定容至50ml，过0.22μm滤膜，按上述色谱条件，分别进样10μL，记录色谱图，将色谱图依次导入中药色谱指纹图谱相似度评价软件(2012A版)进行分析。选取S1的色谱图为参照图谱，时间宽度设定为0.1min，采用中位数法，经多点矫正，以Mark峰匹配得10批中药复方组合物提取液的指纹图谱，结果见图14；系统导出其相似度结果，结果见表3。10批中药复方组合物提取液的相似度结果均在0.9以上，表明10批中药复方组合物提取液的化学成分一致性较好。
表3 10批中药复方组合物提取液相似度
| 编号 | 批号 | 相似度 | 编号 | 批号 | 相似度 |
| S1 | 20211101 | 0.999 | S6 | 20211106 | 0.998 |
| S2 | 20211102 | 0.999 | S7 | 20211107 | 0.999 |
| S3 | 20211103 | 0.997 | S8 | 20211108 | 0.999 |
| S4 | 20211104 | 0.999 | S9 | 20211109 | 0.998 |
| S5 | 20211105 | 0.999 | S10 | 20211110 | 0.999 |
尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。
Claims (7)
1.一种治疗儿童过敏性鼻炎的中药复方组合物的质量检测方法，其特征在于，包括薄层色谱定性检测和高效液相定量检测；
中药复方组合物提取液按以下制备方法得到：按重量份数取生石膏，置于陶瓷药罐中先煎，然后将炒苍耳子、辛夷、炒白芍、白芷、醋乌梅、防风、川芎，加水浸泡后，合并生石膏先煎液，煎煮提取，合并提取液，减压浓缩，即得；
所述的薄层色谱定性检测包括以下步骤：
(1)辛夷薄层色谱鉴别，具体步骤如下：
1)取上述中药复方组合物提取液，旋干，加甲醇，超声，滤过，滤液蒸干，残渣加水溶解，用乙醚振摇萃取，合并乙醚萃取液，蒸干，残渣加甲醇溶解，作为中药复方组合物供试品溶液；
2)取缺辛夷的中药复方组合物，按上述中药复方组合物提取液的制备方法制备得到缺辛夷的阴性供试品；
3)另取辛夷对照药材粗粉，加三氯甲烷，密塞，超声处理，滤过，滤液蒸干，残渣加三氯甲烷溶解，作为辛夷对照药材溶液；
4)吸取上述三种溶液，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-乙醚为展开剂，展开，取出，晾干，喷以香草醛硫酸溶液，再加热至斑点显色清晰，中药复方组合物供试品溶液色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，缺辛夷的阴性供试品未见干扰；
(2)白芍薄层色谱鉴别，具体步骤如下：
1)取中药复方组合物提取液，旋干，加乙醇超声处理，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇溶解，作为中药复方组合物供试品溶液；
2)取缺白芍的中药复方组合物，按上述中药复方组合物提取液的制备方法制备缺白芍的阴性供试品；
3)另取白芍对照药材粉末，加乙醇超声处理，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇溶解，即得白芍对照药材溶液；
4)吸取上述3种溶液，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以香草醛硫酸溶液，再加热至斑点显色清晰，中药复方组合物供试品溶液色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，缺白芍的阴性供试品未见干扰；
(3)白芷薄层色谱鉴别，具体步骤如下：
1)取中药复方组合物提取液，旋干，加甲醇，超声，滤过，滤液蒸干，残渣加水溶解，用乙醚振摇萃取，合并乙醚萃取液，蒸干，残渣加甲醇溶解，作为中药复方组合物供试品溶液；
2)取缺白芷的中药复方组合物，按上述中药复方组合物提取液的制备方法制备缺白芷的阴性供试品；
3)另取白芷对照药材，加乙醚浸泡，时时振摇，滤过，滤液蒸干，残渣加乙酸乙酯溶解，作为白芷对照药材供试品溶液；
4)吸取上述3种溶液，分别点于同一硅胶G薄层板上，以30～60℃石油醚-乙醚为展开剂，25℃以下展开，取出，晾干，置紫外光灯下检视，中药复方组合物供试品溶液色谱中，在与对照药材溶液色谱相应位置上，荧光下显相同颜色的斑点，缺白芷的阴性供试品未见干扰；
(4)防风薄层色谱鉴别，具体步骤如下：
1)取中药复方组合物提取液，用乙酸乙酯萃取，合并乙酸乙酯萃取液，蒸干，残渣加甲醇溶解，作为中药复方组合物供试品溶液；
2)取缺防风的中药复方组合物，按上述中药复方组合物提取液的制备方法制备缺防风的阴性供试品；
3)另取防风对照药材粉末，加丙酮，超声处理，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇溶解，作为防风对照药材溶液；
4)吸取上述3种溶液，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以三氯甲烷-甲醇为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯下检视，中药复方组合物供试品溶液色谱中，在与对照药材溶液色谱相应位置上，荧光下显相同颜色的斑点，缺防风的阴性供试品未见干扰。
2.根据权利要求1所述的治疗儿童过敏性鼻炎的中药复方组合物的质量检测方法，其特征在于，
步骤(1)辛夷薄层色谱鉴别，以体积比为5:1的三氯甲烷-乙醚为展开剂；
步骤(2)白芍薄层色谱鉴别，以体积比为40:5:10:0.2的三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸为展开剂；
步骤(3)白芷薄层色谱鉴别，以体积比为3:2的30～60℃石油醚-乙醚为展开剂；
步骤(4)防风薄层色谱鉴别，以体积比为8:1的三氯甲烷-甲醇为展开剂。
3.根据权利要求1所述的治疗儿童过敏性鼻炎的中药复方组合物的质量检测方法，其特征在于，中药复方组合物提取液的制备：按重量份数取生石膏15～45份，置于陶瓷药罐中先煎，然后将炒苍耳子6～18份、辛夷6～18份、炒白芍10～30份、白芷10～30份、醋乌梅10～30份、防风6～18份、川芎6～18份，加入3～10倍水浸泡后，合并生石膏先煎液，煎煮提取2次，每次15～20min，合并提取液，减压浓缩，即得。
4.根据权利要求1所述的治疗儿童过敏性鼻炎的中药复方组合物的质量检测方法，其特征在于，所述的高效液相定量检测包括以下步骤：
1)混合对照品溶液的制备：精密称定适量的绿原酸、咖啡酸、隐绿原酸、芍药内脂苷、芍药苷、阿魏酸、升麻素苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷、水合氧化前胡素、木兰脂素对照品，加甲醇溶解，超声处理5～10min，定容，摇匀，制成混合对照品溶液；
2)供试品溶液的制备：精密量取权利要求3制备得到的中药复方组合物提取液，旋干，加入甲醇溶解，定容，摇匀，过0.22μm滤膜，取续滤液，即得；
3)标准曲线的绘制：取上述步骤1)混合对照品溶液，用甲醇逐级稀释得到5个浓度，精密吸取不同浓度的混合对照品溶液，并分别进样10μL，注入高效液相色谱仪中测定；以对照品的浓度X为横坐标，峰面积Y为纵坐标，得标准曲线方程为：绿原酸Y＝4057.3X+34.183,R2＝0.9996；咖啡酸Y＝9831.1X-3.5412,R2＝0.9999；隐绿原酸Y＝4036.5X-4.9754,R2＝0.9997；芍药内脂苷Y＝7915.3X+27.006,R2＝0.9995；芍药苷Y＝11370X-16.399,R2＝0.9998；阿魏酸Y＝15542X-12.632,R2＝0.9995；升麻素苷Y＝71954X-66.172,R2＝0.9994；5-O-甲基维斯阿米醇苷Y＝65894X-67.537,R2＝0.9994；水合氧化前胡素Y＝24587X-160.85,R2＝0.9998；木兰脂素Y＝20372X-13.386，R2＝0.9993；
4)含量测定：分别精密吸取步骤1)混合对照品溶液和步骤2)供试品溶液，注入液相色谱仪，依据步骤3)的标准曲线方程，计算出供试品溶液中绿原酸、咖啡酸、隐绿原酸、芍药内脂苷、芍药苷、阿魏酸、升麻素苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷、水合氧化前胡素、木兰脂素的含量。
5.根据权利要求4所述的治疗儿童过敏性鼻炎的中药复方组合物的质量检测方法，其特征在于，
步骤1)混合对照品溶液的制备：精密称定绿原酸、咖啡酸、隐绿原酸、芍药内脂苷、芍药苷、阿魏酸、升麻素苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷、水合氧化前胡素、木兰脂素对照品，加甲醇溶解，超声处理5～10min，定容，摇匀，制成质量浓度分别为0.250、0.149、0.854、2.095、0.713、0.139、0.305、1.023、0.520、0.811mg·mL-1的混合对照品溶液。
6.根据权利要求4所述的治疗儿童过敏性鼻炎的中药复方组合物的质量检测方法，其特征在于，步骤3)和步骤4)的色谱条件为：色谱柱：AgilentZorbaxSB-C18色谱柱，规格为4.6mm×250mm，5μm；流动相：乙腈为A相，0.1％磷酸为B项，梯度洗脱；柱温：25℃；流速：1.0mL·min-1，检测波长：230nm；进样体积：10μL。
7.根据权利要求6所述的治疗儿童过敏性鼻炎的中药复方组合物的质量检测方法，其特征在于，梯度洗脱程序如下：
。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202210435124.7A CN114755361B (zh) | 2022-04-24 | 2022-04-24 | 一种治疗儿童过敏性鼻炎的中药复方组合物的质量检测方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202210435124.7A CN114755361B (zh) | 2022-04-24 | 2022-04-24 | 一种治疗儿童过敏性鼻炎的中药复方组合物的质量检测方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN114755361A CN114755361A (zh) | 2022-07-15 |
| CN114755361B true CN114755361B (zh) | 2024-03-08 |
Family
ID=82332615
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202210435124.7A Active CN114755361B (zh) | 2022-04-24 | 2022-04-24 | 一种治疗儿童过敏性鼻炎的中药复方组合物的质量检测方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN114755361B (zh) |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101543545A (zh) * | 2008-03-28 | 2009-09-30 | 北京亚东生物制药有限公司 | 治疗鼻炎的中药制剂及其质量控制方法 |
| CN106324174A (zh) * | 2015-06-18 | 2017-01-11 | 天津市药品检验所 | 一种中药配方颗粒的质量标准 |
| WO2021073175A1 (zh) * | 2019-10-16 | 2021-04-22 | 石家庄以岭药业股份有限公司 | 一种中药组合物中多种成分鉴别及含量的测定方法 |
| CN113769023A (zh) * | 2021-09-23 | 2021-12-10 | 江苏省中医院 | 一种治疗高血压的中药复方组合物及其质量检测方法 |
-
2022
- 2022-04-24 CN CN202210435124.7A patent/CN114755361B/zh active Active
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101543545A (zh) * | 2008-03-28 | 2009-09-30 | 北京亚东生物制药有限公司 | 治疗鼻炎的中药制剂及其质量控制方法 |
| CN106324174A (zh) * | 2015-06-18 | 2017-01-11 | 天津市药品检验所 | 一种中药配方颗粒的质量标准 |
| WO2021073175A1 (zh) * | 2019-10-16 | 2021-04-22 | 石家庄以岭药业股份有限公司 | 一种中药组合物中多种成分鉴别及含量的测定方法 |
| CN113769023A (zh) * | 2021-09-23 | 2021-12-10 | 江苏省中医院 | 一种治疗高血压的中药复方组合物及其质量检测方法 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| 小儿鼻炎片的质量标准研究;曹红;付聪;邢俊波;陈玉敏;水彩红;姜春来;胡丹;;解放军药学学报;20091015(第05期);全文 * |
| 鼻渊合剂的质量标准;陈晓斌;周琴妹;张登山;黄露;;中国药师;20101005(第10期);全文 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN114755361A (zh) | 2022-07-15 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN105467059B (zh) | 一种治疗血尿的中药组合物的质量检测方法 | |
| CN110320311B (zh) | 一种杜仲壮骨丸的质量检测方法 | |
| CN111999423B (zh) | 一种颈痛颗粒指纹图谱的建立方法及其应用 | |
| Zhang et al. | Pharmacokinetics difference of multiple active constituents from decoction and maceration of Fuzi Xiexin Tang after oral administration in rat by UPLC–MS/MS | |
| CN113063885B (zh) | 用于制备保元汤的组合物，保元汤制品，及其指纹图谱测定和质量检测方法 | |
| CN102426205B (zh) | 血栓心脉宁胶囊的检测方法 | |
| CN110187044A (zh) | 一种银翘解毒口服液的质量检测方法 | |
| CN114609269B (zh) | 一种清金益气组合物的检测方法及其指纹图谱构建方法 | |
| CN101095896B (zh) | 一种治疗胆囊疾病的中药组合物及其指纹图谱分析方法 | |
| CN113390985B (zh) | 一种麻黄汤物质基准及其制备方法和质量检测方法 | |
| CN102218122A (zh) | 一种海龙蛤蚧口服液的质量控制检测方法 | |
| CN107643343B (zh) | 一种玉女煎标准汤的hplc指纹图谱测定方法 | |
| CN104614450A (zh) | 一种消渴清制剂的指纹图谱检测方法 | |
| CN114755361B (zh) | 一种治疗儿童过敏性鼻炎的中药复方组合物的质量检测方法 | |
| CN104614475A (zh) | 一种消渴清颗粒的含量检测方法 | |
| CN114674947B (zh) | 一种快速全面控制半夏厚朴汤标准汤剂质量的检测方法 | |
| CN106918670B (zh) | 一种药物组合物的质量检测方法 | |
| CN114942291A (zh) | 潜阳育阴颗粒的质量检测方法 | |
| CN107976488A (zh) | 一种药物组合物的检测方法 | |
| CN106526000A (zh) | 升麻葛根汤组合物指纹图谱的建立方法及指纹图谱 | |
| CN113156010A (zh) | 一种厚朴温中汤物质基准的质量控制方法 | |
| CN113252837A (zh) | 一种荆防合剂的质量检测方法 | |
| CN111999415A (zh) | 一种紫灯片hplc指纹图谱建立方法 | |
| CN108107130B (zh) | 一种参枝苓制剂指纹图谱的测定方法 | |
| CN101953868B (zh) | 蒺藜总皂苷的检测方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant |