CN114755361B - 一种治疗儿童过敏性鼻炎的中药复方组合物的质量检测方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种治疗儿童过敏性鼻炎的中药复方组合物的质量检测方法,该方法包括薄层色谱定性检测和高效液相定量检测。本发明通过大量实验筛选检测方法,特别是对薄层色谱的展开剂和高效液相的流动相和梯度洗脱方式进行筛选,优选出最佳的薄层色谱定性检测法和高效液相定量检测法,该发明可全面客观的对方中炒苍耳子、辛夷、炒白芍、白芷、醋乌梅、防风和川芎的成分含量进行检测和分析。对保证该中药复方的有效性和安全性具有重要意义。经方法学验证表明,本发明提供的高效液相色谱法,精密度高、重复性和稳定性好。
Description
技术领域
本发明涉及中药技术领域,具体为一种治疗儿童过敏性鼻炎的中药复方组合物的质量检测方法。
背景技术
过敏性鼻炎受遗传和环境因素综合影响,是涉及所有年龄群体的全球健康问题,且儿童患病率较成人高。过敏性鼻炎具有间歇性,持续性,反复性,发病率高等特点,常常伴有家族过敏史,也易引起一系列呼吸道炎症性疾病的发生,与支气管哮喘、鼻窦炎和结膜炎等疾病有一定的关联性。多年来,临床发现西药治疗过敏性鼻炎有一定治疗效果,但存在成分单一,时效长短不一,不良反应和副作用大等问题。中医治疗过敏性鼻炎具有独特优势,常以祛风通窍、温肺散寒、益气固表、补脾温肾为主,注重肺脾肾的整体调节,临床处方安全性高,复发率低。将应用于临床疗效显著的处方研发成为一种安全有效的中药制剂,可为过敏性鼻炎患者在药物治疗方面提供更多的选择。
本发明中药复方组合物是江苏省中医院开发的院内中药制剂,其由炒苍耳子、辛夷、炒白芍、白芷、醋乌梅、生石膏、防风、川芎八味中药组成,临床实验显示具有很好的治疗儿童过敏性鼻炎的功效。该中药复方申请人前期申请了专利,申请号为201910700774.8,发明名称为一种具有防治小儿变应性鼻炎作用的中药组合物及其制备方法与应用。目前,未有关于中药复方组合物的质量检测方法,本发明筛选出其薄层鉴别和高效液相鉴别方法,对保证和控制临床的有效性和安全性具有重要的意义。
发明内容
发明目的:本发明的目的在于提供一种治疗儿童过敏性鼻炎的中药复方组合物的质量检测方法。
技术方案:为实现上述目的,本发明提供如下技术方案:
一种治疗儿童过敏性鼻炎的中药复方组合物的质量检测方法,包括薄层色谱定性检测和高效液相定量检测;
中药复方组合物提取液的制备:按重量份数取生石膏,置于陶瓷药罐中先煎,然后将炒苍耳子、辛夷、炒白芍、白芷、醋乌梅、防风、川芎,加水浸泡后,合并生石膏先煎液,煎煮提取,合并提取液,减压浓缩,即得;
所述的薄层色谱定性检测包括以下步骤:
(1)辛夷薄层色谱鉴别,具体步骤如下:
1)取中药复方组合物提取液,旋干,加甲醇,超声,滤过,滤液蒸干,残渣加水溶解,用乙醚振摇萃取,合并乙醚萃取液,蒸干,残渣加甲醇溶解,作为中药复方组合物供试品溶液;
2)取缺辛夷的中药复方组合物,按上述中药复方组合物提取液的制备方法制备缺辛夷的阴性供试品;
3)另取辛夷对照药材粗粉,加三氯甲烷,密塞,超声处理,滤过,滤液蒸干,残渣加三氯甲烷溶解,作为辛夷对照药材溶液;
4)吸取上述三种溶液,分别点于同一硅胶G薄层板上,以三氯甲烷-乙醚为展开剂,展开,取出,晾干,喷以香草醛硫酸溶液,再加热至斑点显色清晰,中药复方组合物供试品溶液色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点,缺辛夷的阴性供试品未见干扰;
(2)白芍薄层色谱鉴别,具体步骤如下:
1)取中药复方组合物提取液,旋干,加乙醇超声处理,滤过,滤液蒸干,残渣加乙醇溶解,作为中药复方组合物供试品溶液;
2)取缺白芍的中药复方组合物,按上述中药复方组合物提取液的制备方法制备缺白芍的阴性供试品;
3)另取白芍对照药材粉末,加乙醇超声处理,滤过,滤液蒸干,残渣加乙醇溶解,即得白芍对照药材溶液;
4)吸取上述3种溶液,分别点于同一硅胶G薄层板上,以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸为展开剂,展开,取出,晾干,喷以香草醛硫酸溶液,再加热至斑点显色清晰,中药复方组合物供试品溶液色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点,缺白芍的阴性供试品未见干扰;
(3)白芷薄层色谱鉴别,具体步骤如下:
1)取中药复方组合物提取液,旋干,加甲醇,超声,滤过,滤液蒸干,残渣加水溶解,用乙醚振摇萃取,合并乙醚萃取液,蒸干,残渣加甲醇溶解,作为中药复方组合物供试品溶液;
2)取缺白芷的中药复方组合物,按上述中药复方组合物提取液的制备方法制备缺白芷的阴性供试品;
3)另取白芷对照药材,加乙醚浸泡,时时振摇,滤过,滤液蒸干,残渣加乙酸乙酯溶解,作为白芷对照药材供试品溶液;
4)吸取上述3种溶液,分别点于同一硅胶G薄层板上,以30~60℃石油醚-乙醚为展开剂,25℃以下展开,取出,晾干,置紫外光灯下检视,中药复方组合物供试品溶液色谱中,在与对照药材溶液色谱相应位置上,荧光下显相同颜色的斑点,缺白芷的阴性供试品未见干扰;
(4)防风薄层色谱鉴别,具体步骤如下:
1)取中药复方组合物提取液,用乙酸乙酯振摇萃取,合并乙酸乙酯萃取液,蒸干,残渣加甲醇溶解,作为中药复方组合物供试品溶液;
2)取缺防风的中药复方组合物,按上述中药复方组合物提取液的制备方法制备缺防风的阴性供试品;
3)另取防风对照药材粉末,加丙酮,超声处理,滤过,滤液蒸干,残渣加乙醇溶解,作为防风对照药材溶液;
4)吸取上述3种溶液,分别点于同一硅胶GF254薄层板上,以三氯甲烷-甲醇为展开剂,展开,取出,晾干,置紫外光灯下检视,中药复方组合物供试品溶液色谱中,在与对照药材溶液色谱相应位置上,荧光下显相同颜色的斑点,缺防风的阴性供试品未见干扰。
作为优选方案,以上所述的治疗儿童过敏性鼻炎的中药复方组合物的质量检测方法,步骤(1)辛夷薄层色谱鉴别,以体积比为5:1的三氯甲烷-乙醚为最佳的展开剂;
步骤(2)白芍薄层色谱鉴别,以体积比为40:5:10:0.2的三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸为最佳的展开剂;
步骤(3)白芷薄层色谱鉴别,以体积比为3:2的30~60℃石油醚-乙醚为最佳的展开剂;
步骤(4)防风薄层色谱鉴别,以体积比为8:1的三氯甲烷-甲醇为最佳的展开剂。
作为优选方案,以上所述的治疗儿童过敏性鼻炎的中药复方组合物的质量检测方法,其特征在于,中药复方组合物提取液的制备:按重量份数取生石膏15~45份,置于陶瓷药罐中先煎,然后将炒苍耳子6~18份、辛夷6~18份、炒白芍10~30份、白芷10~30份、醋乌梅10~30份、防风6~18份、川芎6~18份,加入3~10倍水浸泡后,合并生石膏先煎液,煎煮提取2次,每次15~20min,合并提取液,减压浓缩,即得。
作为优选方案,以上所述的治疗儿童过敏性鼻炎的中药复方组合物的质量检测方法,所述的高效液相定量检测包括以下步骤:
1)混合对照品溶液的制备:精密称定适量的绿原酸、咖啡酸、隐绿原酸、芍药内脂苷、芍药苷、阿魏酸、升麻素苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷、水合氧化前胡素、木兰脂素对照品,加甲醇溶解,超声处理5~10min,定容,摇匀,制成混合对照品溶液;
2)供试品溶液的制备:精密量取权利要求3制备得到的中药复方组合物提取液,旋干,加入甲醇溶解,定容,摇匀,过0.22μm滤膜,取续滤液,即得;
3)标准曲线的绘制:取上述步骤1)混合对照品溶液,用甲醇逐级稀释得到5个浓度,精密吸取不同浓度混合对照品溶液,并分别进样10μL,注入高效液相色谱仪中测定;以对照品的浓度X为横坐标,峰面积Y为纵坐标,得标准曲线方程为:绿原酸Y=4057.3X+34.183,R2=0.9996;咖啡酸Y=9831.1X-3.5412,R2=0.9999;隐绿原酸Y=4036.5X-4.9754,R2=0.9997;芍药内脂苷Y=7915.3X+27.006,R2=0.9995;芍药苷Y=11370X-16.399,R2=0.9998;阿魏酸Y=15542X-12.632,R2=0.9995;升麻素苷Y=71954X-66.172,R2=0.9994;5-O-甲基维斯阿米醇苷Y=65894X-67.537,R2=0.9994;水合氧化前胡素Y=24587X-160.85,R2=0.9998;木兰脂素Y=20372X-13.386,R2=0.9993;
4)含量测定:分别精密吸取步骤1)混合对照品溶液和步骤2)供试品溶液,注入液相色谱仪,依据步骤3)的标准曲线方程,计算出供试品溶液中绿原酸、咖啡酸、隐绿原酸、芍药内脂苷、芍药苷、阿魏酸、升麻素苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷、水合氧化前胡素、木兰脂素的含量。
作为优选方案,以上所述的治疗儿童过敏性鼻炎的中药复方组合物的质量检测方法,在色谱条件方面进行优化:
本发明采用紫外检测器对检测波长进行考察,提取210nm、230nm、254nm、278nm、327nm处的色谱图,发现检测波长为230nm时,色谱峰出峰数目较多、基线平稳、峰形较好,故选230nm为检测波长;
本发明比较了乙腈-水、乙腈-0.05%磷酸水、乙腈-0.1%磷酸水3个不同洗脱系统在同一梯度下的洗脱效果。结果发现以乙腈-0.1%磷酸水为流动相时,中药复方中各成分能达到较好的分离效果,故最终选定以乙腈-0.1%磷酸水为流动相。
本发明比较了柱温为25℃、30℃、40℃时同一样品的出峰情况,发现降低柱温可有效改善芍药苷峰形拖尾情况,且分离度较好,最终选择以25℃为色谱柱柱温。
作为优选方案,以上所述的治疗儿童过敏性鼻炎的中药复方组合物的质量检测方法,步骤3)和步骤4)的色谱条件为:色谱柱:AgilentZorbaxSB-C18色谱柱,规格为4.6mm×250mm,5μm;流动相:乙腈为A相,0.1%磷酸为B项,柱温:25℃;流速:1.0mL·min-1,检测波长:230nm;进样体积:10μL。
在优选出最佳的流动相组成后,由于中药复方含有酚酸、木脂素类、香豆素类、色原酮类、苷类等多类成分。等度洗脱方式不能很好的实现各成分的分离,因此本发明进一步筛选了梯度洗脱方式。
作为优选方案,以上所述的治疗儿童过敏性鼻炎的中药复方组合物的质量检测方法,梯度洗脱程序如下:
时间/min | 流动相A/% | 流动相B/% |
0~4 | 2→2 | 98→98 |
4~6 | 2→10.4 | 98→89.6 |
6~16 | 10.4→10.5 | 89.6→89.5 |
16~18 | 10.5→11.5 | 89.5→88.5 |
18~35 | 11.5→11.7 | 88.5→88.3 |
35~38 | 11.7→13.1 | 88.3→86.9 |
38~50 | 13.1→13.2 | 86.9→86.8 |
50~55 | 13.2→23 | 86.8→77 |
55~70 | 23→27.5 | 77→72.5 |
70~80 | 27.5→33 | 72.5→67 |
80~100 | 33→50 | 67→50 |
100~110 | 50→50 | 50→50 |
与现有技术相比,本发明的有益效果是:
本发明通过大量实验筛选检测方法,特别是对薄层色谱的展开剂和高效液相的流动相和梯度洗脱方式进行筛选,优选出最佳的薄层色谱定性鉴别法和高效液相色谱定量检测法,可全面客观的对方中炒苍耳子、辛夷、炒白芍、白芷、醋乌梅、防风和川芎的成分含量进行检测和分析。对保证该中药复方的有效性和安全性具有重要意义。经方法学验证表明,本发明提供的高效液相色谱法,精密度高、重复性和稳定性好。
附图说明
图1为本发明辛夷不同点样量的薄层鉴别示意图;图中1:阴性(5μL)2:对照药材(5μL)3:供试品(1μL)4:供试品(3μL)5:供试品(5μL);
图2为本发明三氯甲烷-乙醚(5:1)下中药复方组合物辛夷薄层鉴别示意图;图中1:阴性2:对照药材3~4:供试品;
图3为本发明二氯甲烷-乙酸乙酯(9:1)下中药复方组合物辛夷薄层鉴别示意图;图中1:阴性2:对照药材3~4:供试品;
图4为本发明白芍不同点样量的薄层鉴别示意图;图中1:阴性(15μL)2:对照药材(10μL)3:供试品(5μL)4:供试品(10μL)5:供试品(15μL);
图5为本发明三氯甲烷-甲醇(9:1)下中药复方组合物白芍薄层鉴别示意图;图中1:阴性2:对照药材3~4:供试品;
图6为本发明三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(40:5:10:0.2)下中药复方组合物白芍薄层鉴别示意图;1:阴性2:对照药材3~4:供试品;
图7为本发明白芷的不同点样量的薄层鉴别示意图;图中1:阴性(5μL)2:对照药材(5μL)3:供试品(1μL)4:供试品(3μL)5:供试品(5μL);
图8为本发明石油醚(30~60℃)-乙醚(3:2)下中药复方组合物白芷薄层鉴别示意图;图中1:阴性2:对照药材3~4:供试品;
图9为本发明二氯甲烷-甲醇-浓氨(9:1:0.5)下中药复方组合物白芷薄层鉴别示意图;图中1:阴性2:对照药材3~4:供试品;
图10为本发明防风不同点样量的薄层鉴别示意图;图中1:阴性(15μL)2:对照药材(10μL)3:供试品(5μL)4:供试品(10μL)5:供试品(15μL);
图11为本发明三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(12:8:3:0.2)中药复方组合物防风薄层鉴别示意图;图中1:阴性2:对照药材3~4:供试品;
图12为本发明三氯甲烷-甲醇(8:1)中药复方组合物防风薄层鉴别示意图,图中1:阴性2:对照药材3~4:供试品;
图13为本发明中药复方组合物对照品和供试品溶液色谱示意图。
图14为本发明中药复方组合物供试品溶液指纹图谱示意图。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例中的附图,对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例,基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本发明保护的范围。
实施例1一种治疗儿童过敏性鼻炎的中药复方组合物的制备方法,具体包括以下步骤:
取生石膏15g置于陶瓷药罐中,加10倍水先煎15min;另取苍耳子6g、辛夷6g、白芍10g、白芷10g、乌梅10g、防风6g、川芎6g,加3倍水浸泡1h;合并生石膏先煎液,煎煮两次,第一次煎煮20min,滤过;第二次加水250ml,煎煮15min,滤过,合并两次提取液,减压浓缩至50ml,即得。
实施例2一种治疗儿童过敏性鼻炎的中药复方组合物的薄层色谱鉴别,具体步骤如下:
步骤1:对辛夷薄层色谱鉴别,具体步骤如下:
1)取实施例1中药复方组合物10mL,旋干,加甲醇30ml,超声30min,滤过,滤液蒸干,残渣加水10ml溶解,滤过,用乙醚振摇提取2次,每次10ml,合并乙醚提取液,蒸干,残渣加甲醇2ml溶解,作为中药复方组合物供试品溶液。
取缺辛夷的其它中药复方,按实施例1方法制备得到缺辛夷的阴性供试品溶液;
2)另取辛夷对照药材粗粉1g,加三氯甲烷10ml,密塞,超声处理30min,滤过,滤液蒸干,残渣加三氯甲烷2ml使溶解,作为辛夷对照药材溶液;
3)照薄层色谱法(《中华人民共和国药典》四部通则0502)试验,吸取上述三种溶液,分别点于同一硅胶G薄层板上,分别以三氯甲烷-乙醚(5:1)、二氯甲烷-乙酸乙酯(9:1)为展开剂,展开,取出,晾干,喷以1%香草醛硫酸溶液,105℃加热检视。如图1~3,以三氯甲烷-乙醚(5:1)为展开剂时展开效果较好,供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点,阴性供试品溶液未见干扰。
步骤2:对白芍薄层色谱鉴别,具体步骤如下:
1)取实施例1中药复方组合物10mL,旋干,加乙醇10ml,超声提取30min,滤过,滤液蒸干,残渣加乙醇2ml使溶解,作为中药复方组合物供试品溶液。
取缺白芍的其它中药复方,按实施例1方法制备得到缺白芍的阴性供试品溶液;
2)另取白芍对照药材0.5g,加乙醇10ml,超声提取30min,滤过,滤液蒸干,残渣加乙醇2ml使溶解,作为白芍对照药材溶液;
3)照薄层色谱法(《中华人民共和国药典》四部通则0502)试验,吸取上述3种溶液,分别点于同一硅胶G薄层板上,分别以三氯甲烷-甲醇(9:1)、三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(40:5:10:0.2)为展开剂,展开,取出,晾干,喷以1%香草醛硫酸溶液,在105℃加热至斑点显色清晰,如图4~6,以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(40:5:10:0.2)为展开剂时展开效果较好,供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点,阴性供试品溶液未见干扰。
步骤3:对白芷薄层色谱鉴别,具体步骤如下:
1)取实施例1中药复方组合物10ml,旋干,加甲醇30ml,超声30min,滤过,滤液蒸干,残渣加水10ml溶解,滤过,用乙醚振摇提取2次,每次10ml,合并乙醚提取液,蒸干,残渣加甲醇2ml溶解,作为供试品溶液。
取缺白芷的其它中药复方,按实施例1方法制备得到缺白芷的阴性供试品溶液;
2)另取白芷对照药材0.5g,加乙醚10ml浸泡1h,时时振摇,滤过,滤液蒸干,残渣加乙酸乙酯1ml溶解,作为白芷对照药材溶液;
3)照薄层色谱法(《中华人民共和国药典》四部通则0502)试验,吸取上述3种溶液,分别点于同一硅胶G薄层板上,分别以石油醚(30~60℃)-乙醚(3:2)、二氯甲烷-甲醇-浓氨(9:1:0.5)为展开剂,25℃以下展开,取出,晾干,置紫外光灯(366nm)下检视,如图7~9,以石油醚(30~60℃)-乙醚(3:2)为展开剂时展开效果较好,供试品溶液色谱中,在与对照药材溶液色谱相应位置上,荧光下显相同颜色斑点,阴性供试品溶液未见干扰。
步骤4:对防风薄层色谱鉴别,具体步骤如下:
1)取实施例1中药复方组合物10ml,用乙酸乙酯萃取3次,每次20ml,合并萃取液,水浴蒸干,残渣加甲醇1ml使溶解,作为供试品溶液。
取缺防风的其它中药复方,按实施例1方法制备得到缺防风的阴性供试品溶液;
2)另取防风对照药材1g,加丙酮20ml,超声处理20min,滤过,滤液蒸干,残渣加乙醇1ml使溶解,作为防风对照药材溶液;
3)照薄层色谱法(《中华人民共和国药典》四部通则0502)试验,吸取上述3种溶液,分别点于同一硅胶GF254薄层板上,分别以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(12:8:3:0.2)、三氯甲烷-甲醇(8:1)为展开剂,展开,取出,晾干,置紫外光灯(254nm)下检视。如图10~12,以三氯甲烷-甲醇(8:1)为展开剂时展开效果较好,供试品溶液色谱中,在与对照药材溶液色谱相应位置上,荧光下显相同颜色的斑点,阴性供试品溶液未见干扰。
实施例3中药复方组合物的含量测定方法
(1)色谱条件:色谱柱:AgilentZorbaxSB-C18色谱柱,规格为4.6mm×250mm,5μm;流动相:乙腈为A相,0.1%磷酸为B项;柱温:25℃;流速:1.0mL·min-1,检测波长:230nm;进样体积:10μL,按表1进行梯度洗脱。理论板数按芍药苷峰计算不低于3000;
表1梯度洗脱表
(2)混合对照品溶液的制备:精密称定绿原酸、咖啡酸、隐绿原酸、芍药内脂苷、芍药苷、阿魏酸、升麻素苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷、水合氧化前胡素、木兰脂素对照品,加甲醇溶解,超声处理10min,定容,摇匀,制成质量浓度分别为0.250、0.149、0.854、2.095、0.713、0.139、0.305、1.023、0.520、0.811mg·mL-1的混合对照品溶液,过0.22μm滤膜;
(3)供试品溶液的制备:精密量取实施例1制备得到的中药复方组合物10ml,旋干,加甲醇溶解,定容至50mL容量瓶,摇匀,过0.22μm滤膜,取续滤液,即得;
(4)系统适应性试验:
1)分别精密吸取混合对照品溶液、供试品溶液各10μL,注入液相色谱仪,按上述色谱条件测定。理论板数按芍药苷峰计算不低于3000,见图13(图中峰5为绿原酸、6为咖啡酸、7为隐绿原酸、9为芍药内脂苷、11为芍药苷、13为升麻素苷、14为阿魏酸、17为5-O-甲基维斯阿米醇苷、21为水合氧化前胡素、29为木兰脂素)。
2)取上述混合对照品溶液,用甲醇逐级稀释2、4、8、16和32倍,得到5个不同的浓度的混合对照品溶液,精密吸取5个浓度的混合对照品,并分别进样10μL,注入高效液相色谱仪中测定。以对照品的浓度(X)为横坐标,峰面积(Y)为纵坐标绘制标准曲线,得绿原酸Y=4057.3X+34.183,R2=0.9996;咖啡酸Y=9831.1X-3.5412,R2=0.9999;隐绿原酸Y=4036.5X-4.9754,R2=0.9997;芍药内脂苷Y=7915.3X+27.006,R2=0.9995;芍药苷Y=11370X-16.399,R2=0.9998;阿魏酸Y=15542X-12.632,R2=0.9995;升麻素苷Y=71954X-66.172,R2=0.9994;5-O-甲基维斯阿米醇苷Y=65894X-67.537,R2=0.9994;水合氧化前胡素Y=24587X-160.85,R2=0.9998;木兰脂素Y=20372X-13.386,R2=0.9993;
(5)含量测定:
精密量取按实施例1方法制备得到的10批(S1~S10)中药复方组合物提取液各10ml,旋干,加甲醇溶解,定容至50mL容量瓶中,过0.22μm滤膜,按上述色谱条件,分别进样10μL,根据测定峰面积,代入标准曲线,计算10批中药复方组合物中的绿原酸、咖啡酸、隐绿原酸、芍药内脂苷、芍药苷、阿魏酸、升麻素苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷、水合氧化前胡素、木兰脂素的含量,计算结果见表2。
表2不同批次中药复方组合物中10种成分含量(μg/ml,n=10)
(6)指纹图谱建立:
精密量取按实施例1方法制备得到的10批(S1~S10)中药复方组合物提取液各10ml,旋干,加甲醇定容至50ml,过0.22μm滤膜,按上述色谱条件,分别进样10μL,记录色谱图,将色谱图依次导入中药色谱指纹图谱相似度评价软件(2012A版)进行分析。选取S1的色谱图为参照图谱,时间宽度设定为0.1min,采用中位数法,经多点矫正,以Mark峰匹配得10批中药复方组合物提取液的指纹图谱,结果见图14;系统导出其相似度结果,结果见表3。10批中药复方组合物提取液的相似度结果均在0.9以上,表明10批中药复方组合物提取液的化学成分一致性较好。
表3 10批中药复方组合物提取液相似度
编号 | 批号 | 相似度 | 编号 | 批号 | 相似度 |
S1 | 20211101 | 0.999 | S6 | 20211106 | 0.998 |
S2 | 20211102 | 0.999 | S7 | 20211107 | 0.999 |
S3 | 20211103 | 0.997 | S8 | 20211108 | 0.999 |
S4 | 20211104 | 0.999 | S9 | 20211109 | 0.998 |
S5 | 20211105 | 0.999 | S10 | 20211110 | 0.999 |
尽管已经示出和描述了本发明的实施例,对于本领域的普通技术人员而言,可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型,本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。
Claims (7)
1.一种治疗儿童过敏性鼻炎的中药复方组合物的质量检测方法,其特征在于,包括薄层色谱定性检测和高效液相定量检测;
中药复方组合物提取液按以下制备方法得到:按重量份数取生石膏,置于陶瓷药罐中先煎,然后将炒苍耳子、辛夷、炒白芍、白芷、醋乌梅、防风、川芎,加水浸泡后,合并生石膏先煎液,煎煮提取,合并提取液,减压浓缩,即得;
所述的薄层色谱定性检测包括以下步骤:
(1)辛夷薄层色谱鉴别,具体步骤如下:
1)取上述中药复方组合物提取液,旋干,加甲醇,超声,滤过,滤液蒸干,残渣加水溶解,用乙醚振摇萃取,合并乙醚萃取液,蒸干,残渣加甲醇溶解,作为中药复方组合物供试品溶液;
2)取缺辛夷的中药复方组合物,按上述中药复方组合物提取液的制备方法制备得到缺辛夷的阴性供试品;
3)另取辛夷对照药材粗粉,加三氯甲烷,密塞,超声处理,滤过,滤液蒸干,残渣加三氯甲烷溶解,作为辛夷对照药材溶液;
4)吸取上述三种溶液,分别点于同一硅胶G薄层板上,以三氯甲烷-乙醚为展开剂,展开,取出,晾干,喷以香草醛硫酸溶液,再加热至斑点显色清晰,中药复方组合物供试品溶液色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点,缺辛夷的阴性供试品未见干扰;
(2)白芍薄层色谱鉴别,具体步骤如下:
1)取中药复方组合物提取液,旋干,加乙醇超声处理,滤过,滤液蒸干,残渣加乙醇溶解,作为中药复方组合物供试品溶液;
2)取缺白芍的中药复方组合物,按上述中药复方组合物提取液的制备方法制备缺白芍的阴性供试品;
3)另取白芍对照药材粉末,加乙醇超声处理,滤过,滤液蒸干,残渣加乙醇溶解,即得白芍对照药材溶液;
4)吸取上述3种溶液,分别点于同一硅胶G薄层板上,以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸为展开剂,展开,取出,晾干,喷以香草醛硫酸溶液,再加热至斑点显色清晰,中药复方组合物供试品溶液色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点,缺白芍的阴性供试品未见干扰;
(3)白芷薄层色谱鉴别,具体步骤如下:
1)取中药复方组合物提取液,旋干,加甲醇,超声,滤过,滤液蒸干,残渣加水溶解,用乙醚振摇萃取,合并乙醚萃取液,蒸干,残渣加甲醇溶解,作为中药复方组合物供试品溶液;
2)取缺白芷的中药复方组合物,按上述中药复方组合物提取液的制备方法制备缺白芷的阴性供试品;
3)另取白芷对照药材,加乙醚浸泡,时时振摇,滤过,滤液蒸干,残渣加乙酸乙酯溶解,作为白芷对照药材供试品溶液;
4)吸取上述3种溶液,分别点于同一硅胶G薄层板上,以30~60℃石油醚-乙醚为展开剂,25℃以下展开,取出,晾干,置紫外光灯下检视,中药复方组合物供试品溶液色谱中,在与对照药材溶液色谱相应位置上,荧光下显相同颜色的斑点,缺白芷的阴性供试品未见干扰;
(4)防风薄层色谱鉴别,具体步骤如下:
1)取中药复方组合物提取液,用乙酸乙酯萃取,合并乙酸乙酯萃取液,蒸干,残渣加甲醇溶解,作为中药复方组合物供试品溶液;
2)取缺防风的中药复方组合物,按上述中药复方组合物提取液的制备方法制备缺防风的阴性供试品;
3)另取防风对照药材粉末,加丙酮,超声处理,滤过,滤液蒸干,残渣加乙醇溶解,作为防风对照药材溶液;
4)吸取上述3种溶液,分别点于同一硅胶GF254薄层板上,以三氯甲烷-甲醇为展开剂,展开,取出,晾干,置紫外光灯下检视,中药复方组合物供试品溶液色谱中,在与对照药材溶液色谱相应位置上,荧光下显相同颜色的斑点,缺防风的阴性供试品未见干扰。
2.根据权利要求1所述的治疗儿童过敏性鼻炎的中药复方组合物的质量检测方法,其特征在于,
步骤(1)辛夷薄层色谱鉴别,以体积比为5:1的三氯甲烷-乙醚为展开剂;
步骤(2)白芍薄层色谱鉴别,以体积比为40:5:10:0.2的三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸为展开剂;
步骤(3)白芷薄层色谱鉴别,以体积比为3:2的30~60℃石油醚-乙醚为展开剂;
步骤(4)防风薄层色谱鉴别,以体积比为8:1的三氯甲烷-甲醇为展开剂。
3.根据权利要求1所述的治疗儿童过敏性鼻炎的中药复方组合物的质量检测方法,其特征在于,中药复方组合物提取液的制备:按重量份数取生石膏15~45份,置于陶瓷药罐中先煎,然后将炒苍耳子6~18份、辛夷6~18份、炒白芍10~30份、白芷10~30份、醋乌梅10~30份、防风6~18份、川芎6~18份,加入3~10倍水浸泡后,合并生石膏先煎液,煎煮提取2次,每次15~20min,合并提取液,减压浓缩,即得。
4.根据权利要求1所述的治疗儿童过敏性鼻炎的中药复方组合物的质量检测方法,其特征在于,所述的高效液相定量检测包括以下步骤:
1)混合对照品溶液的制备:精密称定适量的绿原酸、咖啡酸、隐绿原酸、芍药内脂苷、芍药苷、阿魏酸、升麻素苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷、水合氧化前胡素、木兰脂素对照品,加甲醇溶解,超声处理5~10min,定容,摇匀,制成混合对照品溶液;
2)供试品溶液的制备:精密量取权利要求3制备得到的中药复方组合物提取液,旋干,加入甲醇溶解,定容,摇匀,过0.22μm滤膜,取续滤液,即得;
3)标准曲线的绘制:取上述步骤1)混合对照品溶液,用甲醇逐级稀释得到5个浓度,精密吸取不同浓度的混合对照品溶液,并分别进样10μL,注入高效液相色谱仪中测定;以对照品的浓度X为横坐标,峰面积Y为纵坐标,得标准曲线方程为:绿原酸Y=4057.3X+34.183,R2=0.9996;咖啡酸Y=9831.1X-3.5412,R2=0.9999;隐绿原酸Y=4036.5X-4.9754,R2=0.9997;芍药内脂苷Y=7915.3X+27.006,R2=0.9995;芍药苷Y=11370X-16.399,R2=0.9998;阿魏酸Y=15542X-12.632,R2=0.9995;升麻素苷Y=71954X-66.172,R2=0.9994;5-O-甲基维斯阿米醇苷Y=65894X-67.537,R2=0.9994;水合氧化前胡素Y=24587X-160.85,R2=0.9998;木兰脂素Y=20372X-13.386,R2=0.9993;
4)含量测定:分别精密吸取步骤1)混合对照品溶液和步骤2)供试品溶液,注入液相色谱仪,依据步骤3)的标准曲线方程,计算出供试品溶液中绿原酸、咖啡酸、隐绿原酸、芍药内脂苷、芍药苷、阿魏酸、升麻素苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷、水合氧化前胡素、木兰脂素的含量。
5.根据权利要求4所述的治疗儿童过敏性鼻炎的中药复方组合物的质量检测方法,其特征在于,
步骤1)混合对照品溶液的制备:精密称定绿原酸、咖啡酸、隐绿原酸、芍药内脂苷、芍药苷、阿魏酸、升麻素苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷、水合氧化前胡素、木兰脂素对照品,加甲醇溶解,超声处理5~10min,定容,摇匀,制成质量浓度分别为0.250、0.149、0.854、2.095、0.713、0.139、0.305、1.023、0.520、0.811mg·mL-1的混合对照品溶液。
6.根据权利要求4所述的治疗儿童过敏性鼻炎的中药复方组合物的质量检测方法,其特征在于,步骤3)和步骤4)的色谱条件为:色谱柱:AgilentZorbaxSB-C18色谱柱,规格为4.6mm×250mm,5μm;流动相:乙腈为A相,0.1%磷酸为B项,梯度洗脱;柱温:25℃;流速:1.0mL·min-1,检测波长:230nm;进样体积:10μL。
7.根据权利要求6所述的治疗儿童过敏性鼻炎的中药复方组合物的质量检测方法,其特征在于,梯度洗脱程序如下:
。
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Citations (4)
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---|---|---|---|---|
CN101543545A (zh) * | 2008-03-28 | 2009-09-30 | 北京亚东生物制药有限公司 | 治疗鼻炎的中药制剂及其质量控制方法 |
CN106324174A (zh) * | 2015-06-18 | 2017-01-11 | 天津市药品检验所 | 一种中药配方颗粒的质量标准 |
WO2021073175A1 (zh) * | 2019-10-16 | 2021-04-22 | 石家庄以岭药业股份有限公司 | 一种中药组合物中多种成分鉴别及含量的测定方法 |
CN113769023A (zh) * | 2021-09-23 | 2021-12-10 | 江苏省中医院 | 一种治疗高血压的中药复方组合物及其质量检测方法 |
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Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN101543545A (zh) * | 2008-03-28 | 2009-09-30 | 北京亚东生物制药有限公司 | 治疗鼻炎的中药制剂及其质量控制方法 |
CN106324174A (zh) * | 2015-06-18 | 2017-01-11 | 天津市药品检验所 | 一种中药配方颗粒的质量标准 |
WO2021073175A1 (zh) * | 2019-10-16 | 2021-04-22 | 石家庄以岭药业股份有限公司 | 一种中药组合物中多种成分鉴别及含量的测定方法 |
CN113769023A (zh) * | 2021-09-23 | 2021-12-10 | 江苏省中医院 | 一种治疗高血压的中药复方组合物及其质量检测方法 |
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
小儿鼻炎片的质量标准研究;曹红;付聪;邢俊波;陈玉敏;水彩红;姜春来;胡丹;;解放军药学学报;20091015(第05期);全文 * |
鼻渊合剂的质量标准;陈晓斌;周琴妹;张登山;黄露;;中国药师;20101005(第10期);全文 * |
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