CN114752091A - 一种玉米醇溶蛋白/金银花提取物复合抗菌保鲜膜的制备方法 - Google Patents

一种玉米醇溶蛋白/金银花提取物复合抗菌保鲜膜的制备方法 Download PDF

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Abstract

本发明提供了一种玉米醇溶蛋白/金银花提取物复合抗菌保鲜膜的制备方法，是将金银花提取物与纳米玉米醇溶蛋白溶于乙醇溶液中，充分搅拌，加入酸调节pH至5‑11，超声振荡后将溶液流延至制膜平板上形成膜状材料，待自然干燥后将膜状材料剥离即得玉米醇溶蛋白/金银花提取物复合抗菌保鲜膜。本发明采用负载吸附的方式，制备成玉米醇溶蛋白负载金银花提取物的抗菌材料，可使二者优势互补，不仅充分应用天然产物易于降解、绿色环保的优势，而且充分利用玉米醇溶蛋白的吸附性和生物兼容性，作为抗菌保鲜膜，具有良好的抗菌性能，是一种非常有前景的天然抗菌保鲜材料。

Description

一种玉米醇溶蛋白/金银花提取物复合抗菌保鲜膜的制备 方法
技术领域
本发明涉及复合抗菌膜的制备，尤其涉及一种玉米醇溶蛋白/金银花提取物复合抗菌保鲜膜的制备方法。
背景技术
近年来，国内外对植物源抗菌剂的研究取得了较大的进展。目前统计，约有2000种左右植物可用作抗菌剂的提取与制备。现已发现的植物源抗菌活性的物质结构主要包括萜稀类、生物碱类、黄酮类、酚类、醌类、醛类、醇类、苯丙素类、香素类、木脂素类、甾体、有机酸类、精油等。
金银花为忍冬科植物忍冬的干燥花蕾或带初开的花，在我国传统中药处方中广泛用于治疗发烧、感染、疮疡和肿胀等疾病，2002年被列入原卫生部公布的《既是食品又是药品的药物名单》，成为药食同源食品被广泛应用于保健食品和功能饮料行业。现代药理学研究表明，金银花提取物具有解热、保肝、抗菌、抗炎、抗氧化、抗病毒等广泛的生物活性。因此，开展金银花中天然抗菌植物源物质的提取制备，亦成为金银花提取物及其相关制品研究的热点。玉米醇溶蛋白，是一种广泛存在于植物中的食物蛋白，在60%~90%乙醇或70%~80%丙酮中易溶，在水或无水乙醇中不溶，它在食品、医药和化工行业多作为成膜材料。玉米醇溶蛋白具有乳化、配体结合、凝胶等多种特性，已被用于构建各种机制载体材料，而且越来越多的研究表明，蛋白质膜对于功能材料的包埋、保护和递送有着特别的作用。
发明内容
本发明的目的是一种改性玉米醇溶蛋白手性分离膜的制备方法，是采用低温萃取技术，开展金银花中油溶性成分的提取及纯化，完成金银花提取物-金银花提取物的提取，并利用玉米醇溶蛋白与金银花负载技术，建立负载型抗菌材料的绿色合成方法，改善玉米醇溶蛋白抗菌性能，提高金银花抗菌稳定性及生物兼容性，为天然抗菌保鲜开发提供新的材料。
一、玉米醇溶蛋白/金银花提取物复合抗菌保鲜膜的制备
本发明改性玉米醇溶蛋白手性分离膜的制备方法，包括以下步骤：
（1）金银花提取物的制备：在干燥的金银花中加入正己烷或异丙醇溶剂，采用低温萃取技术，萃取温度10-16℃，萃取时间2-4小时，将所得萃取溶剂浓缩蒸馏，得到金银花提取物；
（2）纳米玉米醇溶蛋白材料的制备：将玉米醇溶蛋白充分溶解于60-90%的乙醇溶液中，调节pH至9-11，边搅拌边加去离子水，至大量絮状沉淀产生，将溶剂旋蒸，冷冻干燥得纳米玉米醇溶蛋白；
（3）玉米醇溶蛋白/金银花提取物复合抗菌保鲜膜的制备：将金银花提取物与纳米玉米醇溶蛋白溶于乙醇溶液中，充分搅拌，加入盐酸调节pH至5-11，超声振荡后将此成膜溶液流延至制膜平板上形成膜状材料，待自然干燥后将膜状材料剥离即得玉米醇溶蛋白/金银花提取物复合抗菌保鲜膜。金银花提取物与纳米玉米醇溶蛋白的质量比为1:1-1:10；乙醇溶液的浓度为60-90%；制膜平板为聚乙烯、聚四氟乙烯、石英或玻璃材质。
二、玉米醇溶蛋白/金银花提取物复合抗菌保鲜膜的制备的抗菌性能实验
取三组10支无菌小号试管依次编号，采用二倍稀释法，于第一组为实验组每管各加1.0 mL肉汤培养基，然后在第1管加1.0 mL成膜液，混匀后取出1.0 mL加于第2管，第2管混均取出1.0 mL加于第3管，如此作倍比稀释至第8管，然后每管再均匀加入大肠杆菌或金黄色葡萄菌悬液各0.05 mL混匀，然后将各管置37℃温箱中培养24 h。另设第9管为菌液对照管，第10管为培养基空白对照管，以培养基清亮，未见细菌生长为成膜液的最低抑菌浓度(MIC) 。第二组和第三组实验方法同第一组，将成膜液分别换成金银花提取液和纳米玉米醇溶蛋白做不同材料的抗菌性能对比实验。
实验结果：玉米醇溶蛋白/金银花提取物复合抗菌保鲜膜用于大肠杆菌和金黄色葡萄球菌比单纯用纳米玉米醇溶蛋白或金银花提取物的抑菌效果增强。纳米玉米醇溶蛋白/金银花提取物复合抗菌保鲜膜最小抑菌浓度低于玉米醇溶蛋白和金银花提取液，对常见病菌如大肠杆菌达到、金黄色葡萄球菌有很好的效果，对大肠杆菌的MIC达到2.0 mg/mL，对金黄色葡萄球菌的MIC达到2.5 mg/mL。
本发明的有益效果：本发明采用负载吸附的方式，制备成玉米醇溶蛋白负载金银花提取物的抗菌材料，可使二者优势互补，不仅充分应用天然产物易于降解、绿色环保的优势，而且充分利用玉米醇溶蛋白的吸附性和生物兼容性，作为抗菌保鲜膜，具有良好的抑菌抗菌性能，是一种非常有前景的天然抗菌保鲜材料。
具体实施方式
下面通过具体实施例对本发明党改性玉米醇溶蛋白手性分离膜及性能做进一步说明。
实施例1
（1）采用低温萃取法，取1.0g金银花，放入三口瓶中，加入50mL正己烷溶剂浸没金银花，采用低温萃取技术，萃取温度为15 ℃，萃取时间2小时，将所得萃取溶剂浓缩蒸馏，得到金银花提取物，制备得约0.2g金银花提取物。
（2）纳米玉米醇溶蛋白材料的制备：将1.0 g玉米醇溶蛋白溶解于10 mL乙醇溶液中充分溶解，调节pH至9，边搅拌边加入去离子水，至大量絮状沉淀产生，将溶剂旋蒸，冷冻干燥得纳米玉米醇溶蛋白，制备得约0.9g纳米玉米醇溶蛋白材料。
（3）取0.1g金银花提取物和0.5g纳米玉米醇溶蛋白溶解在10 mL60%的乙醇水溶液中，充分搅拌，加盐酸调节pH至5.0，超声振荡后将该溶液流延至聚四氟乙烯材料的平板上成膜状材料，待自然干燥后将膜状材料剥离即得玉米醇溶蛋白/金银花提取物复合抗菌保鲜膜。进行抗菌性能测试，对大肠杆菌的MIC达到2.8 mg/mL，对金黄色葡萄球菌的MIC达到3.2 mg/mL。
实施例2
步骤（1）、（2）同实施例1。
（3）取0.1g金银花提取物和0.8g纳米玉米醇溶蛋白溶解在10 mL70%的乙醇水溶液中，充分搅拌，加盐酸调节pH至8.0，超声振荡后将该溶液流延至玻璃的平板上成膜状材料，待自然干燥后将膜状材料剥离即得玉米醇溶蛋白/金银花提取物复合抗菌保鲜膜。进行抗菌性能测试，对大肠杆菌的MIC达到5.5 mg/mL，对金黄色葡萄球菌的MIC达到5.5 mg/mL。
实施例3
步骤（1）、（2）同实施例1。
（3）取0.1g金银花提取物和0.8g纳米玉米醇溶蛋白溶解在10 mL80%的乙醇水溶液中，充分搅拌，加盐酸调节pH至10.0，超声振荡后将该溶液流延至聚乙烯材料的平板上成膜状材料，待自然干燥后将膜状材料剥离即得玉米醇溶蛋白/金银花提取物复合抗菌保鲜膜。进行抗菌性能测试，对大肠杆菌的MIC达到2.0 mg/mL，对金黄色葡萄球菌的MIC达到3.5mg/mL。
实施例4
步骤（1）、（2）同实施例1。
（2）取约0.1g金银花提取物和1.0g纳米玉米醇溶蛋白溶解在10 mL90%的乙醇水溶液中，充分搅拌，加盐酸调节pH至11.0，超声振荡后将该溶液流延至石英的平板上成膜状材料，待自然干燥后将膜状材料剥离即得玉米醇溶蛋白/金银花提取物复合抗菌保鲜膜。进行抗菌性能测试，对大肠杆菌的MIC达到3.5 mg/mL，对金黄色葡萄球菌的MIC达到4.5 mg/mL。
实施例5
步骤（1）、（2）同实施例1。
（3）取0.1g金银花提取物和1.0g纳米玉米醇溶蛋白溶解在10 mL70%的乙醇水溶液中，充分搅拌，加盐酸调节pH至8.0，超声振荡后将该溶液流延至聚乙烯材料的平板上成膜状材料，待自然干燥后将膜状材料剥离即得玉米醇溶蛋白/金银花提取物复合抗菌保鲜膜。进行抗菌性能测试，对大肠杆菌的MIC达到4.5 mg/mL，对金黄色葡萄球菌的MIC达到5.5mg/mL。

Claims (5)

1.一种玉米醇溶蛋白/金银花提取物复合抗菌保鲜膜的制备方法，包括以下步骤：
（1）金银花提取物的制备：在干燥的金银花中加入溶剂，采用低温萃取技术，萃取温度10-16℃，萃取时间2-4小时，将所得萃取溶剂浓缩蒸馏，得到金银花提取物；
（2）纳米玉米醇溶蛋白材料的制备：将玉米醇溶蛋白充分溶解于60-90%的乙醇溶液中，调节pH至9-11，边搅拌边加去离子水，至大量絮状沉淀产生，将溶剂旋蒸，冷冻干燥得纳米玉米醇溶蛋白；
（3）玉米醇溶蛋白/金银花提取物复合抗菌保鲜膜的制备：将金银花提取物与纳米玉米醇溶蛋白溶于乙醇溶液中，充分搅拌，加酸调节pH至5-11，超声振荡后将溶液流延至制膜平板上形成膜状材料，待自然干燥后将膜状材料剥离即得玉米醇溶蛋白/金银花提取物复合抗菌保鲜膜。
2.根据权利要求1所述一种玉米醇溶蛋白/金银花提取物复合抗菌保鲜膜的制备方法，其特征在于：步骤（1）中，所述溶剂为正己烷或异丙醇。
3.根据权利要求1所述一种玉米醇溶蛋白/金银花提取物复合抗菌保鲜膜的制备方法，其特征在于：步骤（3）中，金银花提取物与纳米玉米醇溶蛋白的质量比为1:1-1:10。
4.根据权利要求1所述一种玉米醇溶蛋白/金银花提取物复合抗菌保鲜膜的制备方法，其特征在于：步骤（3）中，乙醇溶液的浓度为60-90%。
5.根据权利要求1所述一种玉米醇溶蛋白/金银花提取物复合抗菌保鲜膜的制备方法，其特征在于：步骤（3）中，制膜平板为聚乙烯、聚四氟乙烯、石英或玻璃材质。
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