CN114740105B - 一种脯氨酸和n-甲基脯氨酸的液相色谱分离检测方法及其应用 - Google Patents
一种脯氨酸和n-甲基脯氨酸的液相色谱分离检测方法及其应用 Download PDFInfo
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Abstract
本发明公开了一种脯氨酸和N‑甲基脯氨酸的液相色谱分离检测方法，其特征在于：应用高效液相色谱法，并采用蒸发光散射检测器联用，所述高效液相色谱法以COSMOSIL HILIC 4.6×250mm，5μm为色谱柱，10mM的乙酸铵水溶液和乙腈为流动相，10mM的乙酸铵水溶液和乙腈的体积比为15：85。本发明选择蒸发光散射检测器(ELSD)，这属于一款通用型检测器，稳定性好、灵敏度高，解决了原料(脯氨酸)和产物(N‑甲基脯氨酸)二者信号响应的问题；其次我们采用HiLiC洗脱模式，解决了原料和产物难分离的问题。二者的巧妙结合，可快速进行检测，方法的灵敏度高，操作简单，大大降低了分析成本，缩短了分析时间，保证了检测结果的准确性。
Description
技术领域
本发明涉及分析技术领域，具体涉及一种将脯氨酸还原成脯氨醇的方法及1-甲基吡咯烷-2-丙烯酸的制备方法。
背景技术
马来酸吡咯替尼是我国自主研发，用于治疗人表皮生长因子受体HER-2阳性的小分子靶向新药，N-甲基-D，L-脯氨酸是合成马来酸吡咯替尼边链的关键中间体。“D，L-脯氨酸”为合成“N-甲基-D，L-脯氨酸”的关键原料(路线见下方)，检测中发现使用常规分析手段很难对二者进行有效的分离和检测，原因(1)原料与产物二者基本无紫外吸收，不能使用实验室常规的紫外检测器进行检测，原因(2)原料与产物二者均属于大极性化合物，在常规的色谱柱上几乎无保留行为，很难进行分离。
GB/T32946-2016公开了蜂蜜中脯氨酸的测定，高效液相色谱法。采用液相色谱荧光检测器检测。采用荧光检测器，需要对样品进行衍生化，操作复杂。
发明内容
针对现有技术中所存在的不足，本发明的目的在于提供一种脯氨酸和N-甲基脯氨酸的液相色谱分离检测方法及其应用，方便快捷，方便。
为实现上述目的，本发明采用了如下的技术方案：一种脯氨酸和N-甲基脯氨酸的液相色谱分离检测方法，其特征在于：应用高效液相色谱法，并采用蒸发光散射检测器联用，所述高效液相色谱法以COSMOSIL HILIC 4.6×250mm，5μm为色谱柱，10mM的乙酸铵水溶液和乙腈为流动相。
上述方案中：10mM的乙酸铵水溶液和乙腈的体积比为15：85。
上述方案中：所述脯氨酸为D,L-脯氨酸，所述N-甲基脯氨酸为N-甲基-D,L-脯氨酸。
上述方案中：流动相流速1.0ml/min，色谱柱温度：30℃，运行时间：20min。
上述方案中：蒸发光散射检测器工作参数为：雾化器温度：40℃漂移管稳定：45℃，雾化器流量：1.6L/min。
所述的脯氨酸和N-甲基脯氨酸的液相色谱分离检测方法在监测脯氨酸反应成N-甲基脯氨酸的反应中的应用。
本发明选择蒸发光散射检测器(ELSD)，这属于一款通用型检测器，稳定性好、灵敏度高，解决了原料(脯氨酸)和产物(N-甲基脯氨酸)二者信号响应的问题；其次我们采用HiLiC洗脱模式，解决了原料和产物难分离的问题。二者的巧妙结合，可快速进行检测，方法的灵敏度高，操作简单，大大降低了分析成本，缩短了分析时间，保证了检测结果的准确性。
附图说明
图1为实施例1中的空白溶剂色谱图。
图2为实施例1中的N-甲基-D，L-脯氨酸对照色谱图。
图3为实施例1中的D，L-脯氨酸对照色谱图。
图4为实施例2中的用紫外检测器测定混合对照品溶液色谱图。
图5为实施例2中的用ELSD检测器测定混合对照品溶液色谱图。
图6为实施例3中的供试品溶液色谱图。
图7为实施例4中的N-甲基-D，L-脯氨酸线性回归图。
图8为实施例4中的D，L-脯氨酸线性回归图。
图9为实施例5中的N-甲基-D，L-脯氨酸和D，L-脯氨酸LOQ色谱图。
图10为实施例5中的N-甲基-D，L-脯氨酸和D，L-脯氨酸LOD色谱图。
图11为实施例6中的混合对照品溶液色谱图。
图12为中控图谱。
具体实施方式
下面通过具体实施方式对本发明作进一步详细的说明：
实施例1
高效液相色谱仪：安捷伦1260HPLC系统、安捷伦1260InfimityⅡELSD检测器
色谱柱：COSMOSIL HILIC 4.6×250mm，5μm；
流动相组成：0.01mol/L的乙酸铵缓冲液溶液-乙腈(15：85)
ELSD雾化器温度：40℃
ELSD漂移管温度：45℃
ELSD雾化气流量：1.6L/min
流速：1.0ml/min
柱温：30℃
运行时间：20min
进样体积：20ul
取N-甲基-D，L-脯氨酸和D，L-脯氨酸对照品，分别用50％乙腈溶解，配制成含N-甲基-D，L-脯氨酸和D，L-脯氨酸均为2mg/ml的对照品溶液。按上述条件进行高效液相色谱分析，记录色谱图。结果见图1～3，图1为空白溶剂色谱图，可以看出空白无干扰检测色谱峰；图2中保留时间为9.628min的色谱峰为N-甲基-D，L-脯氨酸；图3中保留时间为14.496min的色谱峰为D，L-脯氨酸。
实施例2
高效液相色谱仪：安捷伦1260HPLC系统、安捷伦1260VWD检测器和安捷伦1260InfimityⅡELSD检测器
色谱柱：COSMOSIL HILIC 4.6×250mm，5μm；
流动相组成：0.01mol/L的乙酸铵缓冲液溶液-乙腈(15：85)
ELSD雾化器温度：40℃
ELSD漂移管温度：45℃
ELSD雾化气流量：1.6L/min
波长(UV)：210nm
流速：1.0ml/min
柱温：30℃
运行时间：20min
进样体积：20ul
取N-甲基-D，L-脯氨酸和D，L-脯氨酸对照品，分别用50％乙腈溶解，配制成含N-甲基-D，L-脯氨酸和D，L-脯氨酸均为2mg/ml的混合对照品溶液。按上述条件进行高效液相色谱分析，记录色谱图。结果见附图4～5，图4是紫外检测器210nm下的检测图谱，保留时间为9.513min的色谱峰为N-甲基-D，L-脯氨酸，保留时间为14.308min的色谱峰为D，L-脯氨酸；图5是ELSD检测器下的检测图谱，保留时间为9.618min的色谱峰为N-甲基-D，L-脯氨酸，保留时间为14.422min的色谱峰为D，L-脯氨酸。可看出紫外检测器的响应值低，ELSD检测器的响应值明显优于紫外检测器。分离度6.5，符合要求。
实施例3：
高效液相色谱仪：安捷伦1260HPLC系统、安捷伦1260InfimityⅡELSD检测器
色谱柱：COSMOSIL HILIC 4.6×250mm，5μm；
流动相组成：0.01mol/L的乙酸铵缓冲液溶液-乙腈(体积比15：85)
ELSD雾化器温度：40℃
ELSD漂移管温度：45℃
ELSD雾化气流量：1.6L/min
流速：1.0ml/min
柱温：30℃
运行时间：20min
进样体积：20ul
取N-甲基-D，L-脯氨酸供试品，分别用50％乙腈溶解，配制成浓度为1mg/ml的供试品溶液。按上述条件进行高效液相色谱分析，记录色谱图。结果见附图6，图6中保留时间为9.755min的色谱峰为N-甲基-D，L-脯氨酸，保留时间为15.433min的色谱峰为D，L-脯氨酸。
实施例4：
高效液相色谱仪：安捷伦1260HPLC系统、安捷伦1260InfimityⅡELSD检测器
色谱柱：COSMOSIL HILIC 4.6×250mm，5μm；
流动相组成：0.01mol/L的乙酸铵缓冲液溶液-乙腈(15：85)
ELSD雾化器温度：40℃
ELSD漂移管温度：45℃
ELSD雾化气流量：1.6L/min
流速：1.0ml/min
柱温：30℃
运行时间：20min
进样体积：20ul
取实施例2项下混合对照品溶液。按上述条件进行高效液相色谱分析，依次进样0.5μl、2μl、6μl、10μl、20μl、30μl，记录色谱图。结果见附图7～8和表格1～2，表格1和图7为N-甲基-D，L-脯氨酸线性回归结果；表格2和图8为D，L-脯氨酸线性回归结果。由结果可知，二者线性结果均符合r≥0.995的标准要求。
表1
表2
实施例5
高效液相色谱仪：安捷伦1260HPLC系统、安捷伦1260InfimityⅡELSD检测器
色谱柱：COSMOSIL HILIC 4.6×250mm，5μm；
流动相组成：0.01mol/L的乙酸铵缓冲液溶液-乙腈(15：85)
ELSD雾化器温度：40℃
ELSD漂移管温度：45℃
ELSD雾化气流量：1.6L/min
流速：1.0ml/min
柱温：30℃
运行时间：20min
进样体积：20ul
取实施例1项下对照品溶液，逐级稀释进样，得到信噪比S/N≈10时作为定量限LOQ，得到信噪比S/N≈3时作为检测限LOD。按上述条件进行高效液相色谱分析，记录色谱图。结果见附图9～10，图9为LOQ图谱；图10为LOD图谱。实验结果表明，N-甲基-D，L-脯氨酸的LOQ为0.33ug，LOD为0.11ug；D，L-脯氨酸的LOQ为0.42ug，LOD为0.14ug。
实施例6
高效液相色谱仪：安捷伦1260HPLC系统、安捷伦1260InfimityⅡELSD检测器
色谱柱：COSMOSIL HILIC 4.6×250mm，5μm；
流动相组成：0.01mol/L的乙酸铵缓冲液溶液-乙腈(体积比20：80)
ELSD雾化器温度：40℃
ELSD漂移管温度：45℃
ELSD雾化气流量：1.6L/min
流速：1.0ml/min
柱温：30℃
运行时间：20min
进样体积：20ul
取实施例2项下混合对照品溶液。按上述条件进行高效液相色谱分析，记录色谱图。结果见附图11，图11中保留时间为7.248min的色谱峰为N-甲基-D，L-脯氨酸，保留时间为9.498min的色谱峰为D，L-脯氨酸，分离度5.8，符合要求。实验结果表明，调整流动相后依然能获得很好的分离度。
实施例7
D,L-脯氨酸150g，甲醇600ml，多聚甲醛45g，10％Pd/c2g，投入3000ml高压釜中，通入氢气，50℃，反应16个小时左右，HPLC取样监控，
取样的样品过滤掉Pd/c，称取反应液，反应液加乙腈稀释至N-甲基-D,L-脯氨酸(按照N-甲基-D,L-脯氨酸理论得量计算)的浓度为2mg/ml，计算浓度时要将反应液中的甲醇计算成溶剂。监控图谱如图12所示。
当监控原料反应完全，反应液过滤，滤液减压浓缩至干，得到白色固体N-甲基-D,L-脯氨酸160g，收率94.9％。
最后说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制，尽管参照较佳实施例对本发明进行了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的宗旨和范围，其均应涵盖在本发明的权利要求范围当中。
Claims (5)
1.一种脯氨酸和N-甲基脯氨酸的液相色谱分离检测方法，其特征在于：应用高效液相色谱法，并采用蒸发光散射检测器联用，所述高效液相色谱法以 COSMOSIL HILIC 4.6×250mm，5μm 为色谱柱，10mM 的乙酸铵水溶液和乙腈为流动相；所述脯氨酸为D，L-脯氨酸，所述 N-甲基脯氨酸为 N-甲基-D，L-脯氨酸。
2.根据权利要求 1 所述脯氨酸和 N-甲基脯氨酸的液相色谱分离检测方法，其特征在于：所述10mM 的乙酸铵水溶液和乙腈的体积比为15：85 或 20：80。
3.根据权利要求 2 所述脯氨酸和 N-甲基脯氨酸的液相色谱分离检测方法，其特征在于：所述流动相流速 1.0ml/min，色谱柱温度：30℃ ，运行时间：20min ，进样体积：20ul。
4.根据权利要求 2所述脯氨酸和 N-甲基脯氨酸的液相色谱分离检测方法，其特征在于：所述蒸发光散射检测器工作参数为：雾化器温度：40℃ ，漂移管温度：45℃，雾化器流量：1.6 L/min。
5.权利要求 1-4 任一项所述的脯氨酸和 N-甲基脯氨酸的液相色谱分离检测方法在监测脯氨酸反应成 N-甲基脯氨酸的反应中的应用。
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Citations (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2009074569A1 (en) * | 2007-12-11 | 2009-06-18 | Bracco International Bv | Targeting and therapeutic compounds with a polyproline-comprising spacer and gas-filled microvesicles comprising said compounds |
| CN102590420A (zh) * | 2012-02-15 | 2012-07-18 | 上海德诺产品检测有限公司 | 一种乳制品中l-羟脯氨酸含量的检测方法 |
| CN105301132A (zh) * | 2015-10-29 | 2016-02-03 | 中国农业科学院特产研究所 | 一种非衍生快速检测药用植物中结合氨基酸的方法 |
| GB201700527D0 (en) * | 2016-01-12 | 2017-03-01 | Waters Technologies Corp | Methods for determining relative response factors for impurity analysis using LC with absorbance and evaporative light scattering detection |
| FR3058142A1 (fr) * | 2016-10-28 | 2018-05-04 | Gelatines Weishardt | Composition de peptides de collagene de peau de poisson et son utilisation a titre de medicament |
| JP2018100906A (ja) * | 2016-12-20 | 2018-06-28 | 花王株式会社 | キラルアミノ酸の分離方法 |
| CN109239252A (zh) * | 2018-09-10 | 2019-01-18 | 吉尔生化（上海）有限公司 | 一种针对连续多个脯氨酸多肽的检测方法 |
| WO2019233576A1 (de) * | 2018-06-06 | 2019-12-12 | Wacker Chemie Ag | Hochaufgelöste flüssigchromatographie basierend auf einem sägezahngradienten |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US10588980B2 (en) * | 2014-06-23 | 2020-03-17 | Novartis Ag | Fatty acids and their use in conjugation to biomolecules |
-
2022
- 2022-03-17 CN CN202210263786.0A patent/CN114740105B/zh active Active
Patent Citations (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2009074569A1 (en) * | 2007-12-11 | 2009-06-18 | Bracco International Bv | Targeting and therapeutic compounds with a polyproline-comprising spacer and gas-filled microvesicles comprising said compounds |
| CN102590420A (zh) * | 2012-02-15 | 2012-07-18 | 上海德诺产品检测有限公司 | 一种乳制品中l-羟脯氨酸含量的检测方法 |
| CN105301132A (zh) * | 2015-10-29 | 2016-02-03 | 中国农业科学院特产研究所 | 一种非衍生快速检测药用植物中结合氨基酸的方法 |
| GB201700527D0 (en) * | 2016-01-12 | 2017-03-01 | Waters Technologies Corp | Methods for determining relative response factors for impurity analysis using LC with absorbance and evaporative light scattering detection |
| FR3058142A1 (fr) * | 2016-10-28 | 2018-05-04 | Gelatines Weishardt | Composition de peptides de collagene de peau de poisson et son utilisation a titre de medicament |
| JP2018100906A (ja) * | 2016-12-20 | 2018-06-28 | 花王株式会社 | キラルアミノ酸の分離方法 |
| WO2019233576A1 (de) * | 2018-06-06 | 2019-12-12 | Wacker Chemie Ag | Hochaufgelöste flüssigchromatographie basierend auf einem sägezahngradienten |
| CN109239252A (zh) * | 2018-09-10 | 2019-01-18 | 吉尔生化（上海）有限公司 | 一种针对连续多个脯氨酸多肽的检测方法 |
Non-Patent Citations (5)
| Title |
|---|
| Betaines in Fruits of Citrus Genus Plants;Luigi Servillo et al;《J. Agric. Food Chem》;全文 * |
| HPLC-ELSD法测定花丹安神合剂中N-甲基-反式-4-羟基-L-脯氨酸的含量;张小利;路发凯;马梦杰;;江苏科技信息(18);全文 * |
| Retention Mechanism Studies of Selected Amino Acids and Vitamin B6 on HILIC Columns with Evaporative Light Scattering Detection;Noga Sylwia et al;《 Chromatographia》;全文 * |
| Simultaneous determination of key osmoregulants in halophytes using HPLC-ELSD;Umme Kalsoom et al;《Chromatographia》;全文 * |
| 液相色谱-蒸发光散射检测器同时测定饲料中18种氨基酸;陈枚 等;《豆丁网》;全文 * |
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| CN114740105A (zh) | 2022-07-12 |
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