CN114728966B - 作为mnk抑制剂的吡咯并三嗪类化合物 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一类作为有丝分裂原激活的蛋白激酶作用激酶(MNK)抑制剂的吡咯并三嗪类化合物,以及它们在制备有丝分裂原激活的蛋白激酶作用激酶抑制剂药物中的应用,具体公开了式(I)所示化合物或其药学上可接受的盐。
Description
本申请主张如下优先权:
CN201911129114.5,申请日2019年11月18日。
CN202010329964.6,申请日2020年04月24日。
技术领域
本发明涉及一类作为有丝分裂原激活的蛋白激酶作用激酶(MNK)抑制剂的吡咯并三嗪类化合物,其药物组合物以及它们在制备有丝分裂原激活的蛋白激酶作用激酶抑制剂药物中的应用。具体涉及式(I)所示化合物或其药学上可接受的盐。
背景技术
有丝分裂原激活的蛋白激酶作用激酶(MAP kinase interacting kinase,简称MNK),属于丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶。人类的MNK有四种亚型,MNK1a,MNK1b和MNK2a,MNK2b,分别由MNK1和MNK2基因表达。4中亚型在N端都含有细胞核定位信号序列(nuclearlocalization signal,NLS)和与eIF4G结合的序列,是其可以进入细胞核发挥作用,识别并结合下游eIF4E。MNK1a和MNK2a亚型C端具有与MAPK结合位点,可以被上游ERK和p38磷酸化激活。MNK1a的C端的细胞核转出信号序列(nuclear export signal,NES)使其可以广泛存在于细胞质中,而其他3个亚型多数存在于细胞核中。
真核细胞翻译起始因子4E(eukaryotic initiation factor 4E,简称eIF4E)是一种帽结合蛋白,可以特异性地识别mRNA的5’端的帽子结构,是蛋白质翻译过程重要的起始因子。S209磷酸化的eIF4E可以促进下游蛋白质的翻译过程,主要包括c-MYC,cyclin D1,VEGF,FGF以及mcl-1和Bcl-2等抗凋亡蛋白。eIF4E在肺癌、结直肠癌、胃癌、胰腺导管癌等多种恶性肿瘤中表达上调。MNK是已知的唯一的可磷酸化eIF4E的激酶。此外,MNK处于多个涉及肿瘤和免疫信号通路的交汇处,如RAS和T细胞受体(TCR),可以选择性的控制抗肿瘤免疫响应的调节器的转录。MNK活性以及eIF4E的活化对肿瘤的发生和发展至关重要,但对正常的细胞并不是必须的。因此选择性的MNK抑制剂有望成为低毒性的抗肿瘤药物。
EFT508(WO2015/200481;WO2016/172010;WO2017/075394;WO2017/075412;WO2017/087808;WO2017/117052;WO2018/152117;WO2018/218038)是EFFECTORTHERAPEUTICS,INC.公司开发的选择性的口服MNK抑制剂。研究表明,eFT508可以选择性的抑制PD-1,LAG3,IL-10的表达,提高细胞毒性T细胞的功能,同时正常T细胞的增殖不受影响。临床前的研究发现,eFT508与PD-1单抗联用可以增强药效并提高响应率。目前已完成I期临床试验,安全性良好,目前单药用于血液瘤和趋势性前列腺癌均处于临床II期研究中,与Avelumab单抗联用用于微卫星稳定型结直肠癌(MSS CRC)的治疗处于临床II期研究中,与PD-1/PD-L1疗法联用(对单一PD-1/PD-L1疗法已产生疾病进展或无完全缓解或部分缓解的病人)用于实体瘤的治疗处于临床II期研究中。
发明内容
一方面,本发明提供了式(I)所示化合物或其药学上可接受的盐,
其中,R1为H、F、Cl、Br或C1-3烷基;
R2和R3各自独立地为H或C1-3烷基,其中所述C1-3烷基任选被1、2或3个独立选白F、Cl、Br或I的取代基所取代;
或R2和R3与它们相连的碳原子连接在一起形成环戊基、环己基或哌啶基,其中所述环戊基、环己基和哌啶基任选被1、2或3个Ra所取代;
各Ra独立地为H、F、Cl、Br或C1-3烷基;
R4为H、F、Cl、Br或C1-3烷基;
R5和R6各自独立地为H、F、Cl、Br、I或C1-3烷基;
R7为吡咯烷基,其中所述吡咯烷基任选被1、2或3个Rb所取代;
各Rb独立地为H、F、Cl、Br、I或C1-3烷基,其中所述C1-3烷基任选被1、2或3个独立选自F、Cl、Br或I的取代基所取代;
n为1或2。
在本发明的一些方案中,上述各Ra独立地为H、F、Cl、Br、-CH3或-CH2CH3,其他变量如本发明所定义。
在本发明的一些方案中,上述R2和R3各自独立地为H、-CH3或-CH2CH3,其他变量如本发明所定义。
在本发明的一些方案中,上述R2和R3与它们相连的碳原子连接在一起形成 Ra及其他变量如本发明所定义。
在本发明的一些方案中,上述R2和R3与它们相连的碳原子连接在一起形成 其他变量如本发明所定义。
在本发明的一些方案中,上述结构单元为 R1、Ra及其他变量如本发明所定义。
在本发明的一些方案中,上述结构单元为 其他变量如本发明所定义。
在本发明的一些方案中,上述化合物具有式(I-1)~(I-4)任一结构式所示结构:
其中,R1、R4、R5、R6、R7、Ra和n如本发明所定义。
在本发明的一些方案中,上述各Rb独立地H、F、Cl、Br、I、其他变量如本发明所定义。
在本发明的一些方案中,上述R7为其中所述任选被1或2个Rb所取代,Rb及其他变量如本发明所定义。
在本发明的一些方案中,上述R7为Rb及其他变量如本发明所定义。
在本发明的一些方案中,上述R7为其他变量如本发明所定义。
在本发明的一些方案中,上述R4为H或-CH3,其他变量如本发明所定义。
在本发明的一些方案中,上述化合物具有式(I-5)~式(I-9)任一结构式所示结构:
其中,R1、R5、R6、Ra和Rb如本发明所定义。
在本发明的一些方案中,上述R1为H、F、Cl或其他变量如本发明所定义。
在本发明的一些方案中,上述R5和R6各自独立地为H或其他变量如本发明所定义。
本发明还有一些方案是由上述变量任意组合而来。
在本发明的一些方案中,上述化合物为下式化合物:
在本发明的一些方案中,上述药学上可接受的盐为盐酸盐或三氟乙酸盐。
本发明还提供了上述化合物及其药学上可接受的盐在制备MNK1/2抑制剂药物中的应用。
本发明还提供了上述化合物及其药学上可接受的盐在制备治疗结直肠癌药物中的应用。
技术效果
本发明化合物对MNK1/2具有很高的选择性,且对该激酶具有显著的抑制活性,同时具有较好的透膜性和溶解性,且具有优良的药代动力学和药效学性质。
定义和说明
除非另有说明,本文所用的下列术语和短语旨在具有下列含义。一个特定的术语或短语在没有特别定义的情况下不应该被认为是不确定的或不清楚的,而应该按照普通的含义去理解。当本文中出现商品名时,意在指代其对应的商品或其活性成分。
这里所采用的术语“药学上可接受的”,是针对那些化合物、材料、组合物和/或剂型而言,它们在可靠的医学判断的范围之内,适用于与人类和动物的组织接触使用,而没有过多的毒性、刺激性、过敏性反应或其它问题或并发症,与合理的利益/风险比相称。
术语“药学上可接受的盐”是指本发明化合物的盐,由本发明发现的具有特定取代基的化合物与相对无毒的酸或碱制备。当本发明的化合物中含有相对酸性的功能团时,可以通过在纯的溶液或合适的惰性溶剂中用足够量的碱与这类化合物接触的方式获得碱加成盐。药学上可接受的碱加成盐包括钠、钾、钙、铵、有机胺或镁盐或类似的盐。当本发明的化合物中含有相对碱性的官能团时,可以通过在纯的溶液或合适的惰性溶剂中用足够量的酸与这类化合物接触的方式获得酸加成盐。药学上可接受的酸加成盐的实例包括无机酸盐,所述无机酸包括例如盐酸、氢溴酸、硝酸、碳酸,碳酸氢根,磷酸、磷酸一氢根、磷酸二氢根、硫酸、硫酸氢根、氢碘酸、亚磷酸等;以及有机酸盐,所述有机酸包括如乙酸、丙酸、异丁酸、马来酸、丙二酸、苯甲酸、琥珀酸、辛二酸、反丁烯二酸、乳酸、扁桃酸、邻苯二甲酸、苯磺酸、对甲苯磺酸、柠檬酸、酒石酸和甲磺酸等类似的酸;还包括氨基酸(如精氨酸等)的盐,以及如葡糖醛酸等有机酸的盐。本发明的某些特定的化合物含有碱性和酸性的官能团,从而可以被转换成任一碱或酸加成盐。
本发明的药学上可接受的盐可由含有酸根或碱基的母体化合物通过常规化学方法合成。一般情况下,这样的盐的制备方法是:在水或有机溶剂或两者的混合物中,经由游离酸或碱形式的这些化合物与化学计量的适当的碱或酸反应来制备。
本发明的化合物可以存在特定的几何或立体异构体形式。本发明设想所有的这类化合物,包括顺式和反式异构体、(-)-和(+)-对映体、(R)-和(S)-对映体、非对映异构体、(D)-异构体、(L)-异构体,及其外消旋混合物和其他混合物,例如对映异构体或非对映体富集的混合物,所有这些混合物都属于本发明的范围之内。烷基等取代基中可存在另外的不对称碳原子。所有这些异构体以及它们的混合物,均包括在本发明的范围之内。
除非另有说明,术语“对映异构体”或者“旋光异构体”是指互为镜像关系的立体异构体。
除非另有说明,术语“顺反异构体”或者“几何异构体”系由因双键或者成环碳原子单键不能自由旋转而引起。
除非另有说明,术语“非对映异构体”是指分子具有两个或多个手性中心,并且分子间为非镜像的关系的立体异构体。
除非另有说明,“(+)”表示右旋,“(-)”表示左旋,“(±)”表示外消旋。
除非另有说明,用楔形实线键和楔形虚线键/>表示一个立体中心的绝对构型,用直形实线键/>和直形虚线键/>表示立体中心的相对构型,用波浪线/>表示楔形实线键/>或楔形虚线键/>或用波浪线/>表示直形实线键/>和直形虚线键
除非另有说明,术语“互变异构体”或“互变异构体形式”是指在室温下,不同官能团异构体处于动态平衡,并能很快的相互转化。若互变异构体是可能的(如在溶液中),则可以达到互变异构体的化学平衡。例如,质子互变异构体(proton tautomer)(也称质子转移互变异构体(prototropic tautomer))包括通过质子迁移来进行的互相转化,如酮-烯醇异构化和亚胺-烯胺异构化。价键异构体(valence tautomer)包括一些成键电子的重组来进行的相互转化。其中酮-烯醇互变异构化的具体实例是戊烷-2,4-二酮与4-羟基戊-3-烯-2-酮两个互变异构体之间的互变。
除非另有说明,术语“富含一种异构体”、“异构体富集”、“富含一种对映体”或者“对映体富集”指其中一种异构体或对映体的含量小于100%,并且,该异构体或对映体的含量大于等于60%,或者大于等于70%,或者大于等于80%,或者大于等于90%,或者大于等于95%,或者大于等于96%,或者大于等于97%,或者大于等于98%,或者大于等于99%,或者大于等于99.5%,或者大于等于99.6%,或者大于等于99.7%,或者大于等于99.8%,或者大于等于99.9%。
除非另有说明,术语“异构体过量”或“对映体过量”指两种异构体或两种对映体相对百分数之间的差值。例如,其中一种异构体或对映体的含量为90%,另一种异构体或对映体的含量为10%,则异构体或对映体过量(ee值)为80%。
可以通过的手性合成或手性试剂或者其他常规技术制备光学活性的(R)-和(S)-异构体以及D和L异构体。如果想得到本发明某化合物的一种对映体,可以通过不对称合成或者具有手性助剂的衍生作用来制备,其中将所得非对映体混合物分离,并且辅助基团裂开以提供纯的所需对映异构体。或者,当分子中含有碱性官能团(如氨基)或酸性官能团(如羧基)时,与适当的光学活性的酸或碱形成非对映异构体的盐,然后通过本领域所公知的常规方法进行非对映异构体拆分,然后回收得到纯的对映体。此外,对映异构体和非对映异构体的分离通常是通过使用色谱法完成的,所述色谱法采用手性固定相,并任选地与化学衍生法相结合(例如由胺生成氨基甲酸盐)。本发明的化合物可以在一个或多个构成该化合物的原子上包含非天然比例的原子同位素。例如,可用放射性同位素标记化合物,比如氚(3H),碘-125(125I)或C-14(14C)。又例如,可用重氢取代氢形成氘代药物,氘与碳构成的键比普通氢与碳构成的键更坚固,相比于未氘化药物,氘代药物有降低毒副作用、增加药物稳定性、增强疗效、延长药物生物半衰期等优势。本发明的化合物的所有同位素组成的变换,无论放射性与否,都包括在本发明的范围之内。“任选”或“任选地”指的是随后描述的事件或状况可能但不是必需出现的,并且该描述包括其中所述事件或状况发生的情况以及所述事件或状况不发生的情况。
术语“被取代的”是指特定原子上的任意一个或多个氢原子被取代基取代,可以包括重氢和氢的变体,只要特定原子的价态是正常的并且取代后的化合物是稳定的。当取代基为氧(即=O)时,意味着两个氢原子被取代。氧取代不会发生在芳香基上。术语“任选被取代的”是指可以被取代,也可以不被取代,除非另有规定,取代基的种类和数目在化学上可以实现的基础上可以是任意的。
当任何变量(例如R)在化合物的组成或结构中出现一次以上时,其在每一种情况下的定义都是独立的。因此,例如,如果一个基团被0-2个R所取代,则所述基团可以任选地至多被两个R所取代,并且每种情况下的R都有独立的选项。此外,取代基和/或其变体的组合只有在这样的组合会产生稳定的化合物的情况下才是被允许的。
当一个连接基团的数量为0时,比如-(CRR)0-,表示该连接基团为单键。
当其中一个变量选自单键时,表示其连接的两个基团直接相连,比如A-L-Z中L代表单键时表示该结构实际上是A-Z。
当一个取代基为空缺时,表示该取代基是不存在的,比如A-X中X为空缺时表示该结构实际上是A。当所列举的取代基中没有指明其通过哪一个原子连接到被取代的基团上时,这种取代基可以通过其任何原子相键合,例如,吡啶基作为取代基可以通过吡啶环上任意一个碳原子连接到被取代的基团上。
当所列举的连接基团没有指明其连接方向,其连接方向是任意的,例如,中连接基团L为-M-W-,此时-M-W-既可以按与从左往右的读取顺序相同的方向连接环A和环B构成/>也可以按照与从左往右的读取顺序相反的方向连接环A和环B构成/>所述连接基团、取代基和/或其变体的组合只有在这样的组合会产生稳定的化合物的情况下才是被允许的。
除非另有规定,当某一基团具有一个或多个可连接位点时,该基团的任意一个或多个位点可以通过化学键与其他基团相连。所述位点与其他基团连接的化学键可以用直形实线键直形虚线键/>或波浪线/>表示。例如-OCH3中的直形实线键表示通过该基团中的氧原子与其他基团相连;/>中的直形虚线键表示通过该基团中的氮原子的两端与其他基团相连;/>中的波浪线表示通过该苯基基团中的1和2位碳原子与其他基团相连;/>表示该哌啶基上的任意可连接位点可以通过1个化学键与其他基团相连,包括/>这4种连接方式,即使-N-上画出了H原子,但仍表示该位点的-N-可以通过化合键与其他基团相连。
除非另有规定,环上原子的数目通常被定义为环的元数,例如,“5-7元环”是指环绕排列5-7个原子的“环”。
除非另有规定,术语“C1-3烷基”用于表示直链或支链的由1至3个碳原子组成的饱和碳氢基团。所述C1-3烷基包括C1-2和C2-3烷基等;其可以是一价(如甲基)、二价(如亚甲基)或者多价(如次甲基)。C1-3烷基的实例包括但不限于甲基(Me)、乙基(Et)、丙基(包括n-丙基和异丙基)等。
除非另有规定,本发明术语“C6-10芳环”和“C6-10芳基”可以互换使用,术语“C6-10芳环”或“C6-10芳基”表示由6至10个碳原子组成的具有共轭π电子体系的环状碳氢基团,它可以是单环、稠合双环或稠合三环体系,其中各个环均为芳香性的。其可以是一价、二价或者多价,C6-10芳基包括C6-9、C9、C10和C6芳基等。C6-10芳基的实例包括但不限于苯基、萘基(包括1-萘基和2-萘基等)。
除非另有规定,Cn-n+m或Cn-Cn+m包括n至n+m个碳的任何一种具体情况,例如C1-12包括C1、C2、C3、C4、C5、C6、C7、C8、C9、C10、C11、和C12,也包括n至n+m中的任何一个范围,例如C1-12包括C1-3、C1-6、C1-9、C3-6、C3-9、C3-12、C6-9、C6-12、和C9-12等;同理,n元至n+m元表示环上原子数为n至n+m个,例如3-12元环包括3元环、4元环、5元环、6元环、7元环、8元环、9元环、10元环、11元环、和12元环,也包括n至n+m中的任何一个范围,例如3-12元环包括3-6元环、3-9元环、5-6元环、5-7元环、6-7元环、6-8元环、和6-10元环等。
术语“离去基团”是指可以被另一种官能团或原子通过取代反应(例如亲和取代反应)所取代的官能团或原子。例如,代表性的离去基团包括三氟甲磺酸酯;氯、溴、碘;磺酸酯基,如甲磺酸酯、甲苯磺酸酯、对溴苯磺酸酯、对甲苯磺酸酯等;酰氧基,如乙酰氧基、三氟乙酰氧基等等。
术语“保护基”包括但不限于“氨基保护基”、“羟基保护基”或“巯基保护基”。术语“氨基保护基”是指适合用于阻止氨基氮位上副反应的保护基团。代表性的氨基保护基包括但不限于:甲酰基;酰基,例如链烷酰基(如乙酰基、三氯乙酰基或三氟乙酰基);烷氧基羰基,如叔丁氧基羰基(Boc);芳基甲氧羰基,如苄氧羰基(Cbz)和9-芴甲氧羰基(Fmoc);芳基甲基,如苄基(Bn)、三苯甲基(Tr)、1,1-二-(4′-甲氧基苯基)甲基;甲硅烷基,如三甲基甲硅烷基(TMS)和叔丁基二甲基甲硅烷基(TBS)等等。术语“羟基保护基”是指适合用于阻止羟基副反应的保护基。代表性羟基保护基包括但不限于:烷基,如甲基、乙基和叔丁基;酰基,例如链烷酰基(如乙酰基);芳基甲基,如苄基(Bn),对甲氧基苄基(PMB)、9-芴基甲基(Fm)和二苯基甲基(二苯甲基,DPM);甲硅烷基,如三甲基甲硅烷基(TMS)和叔丁基二甲基甲硅烷基(TBS)等等。
本发明的化合物可以通过本领域技术人员所熟知的常规方法来确认结构,如果本发明涉及化合物的绝对构型,则该绝对构型可以通过本领域常规技术手段予以确证。例如单晶X射线衍射法(SXRD),把培养出的单晶用Bruker D8 venture衍射仪收集衍射强度数据,光源为CuKα辐射,扫描方式:扫描,收集相关数据后,进一步采用直接法(Shelxs97)解析晶体结构,便可以确证绝对构型。
本发明的化合物可以通过本领域技术人员所熟知的多种合成方法来制备,包括下面列举的具体实施方式、其与其他化学合成方法的结合所形成的实施方式以及本领域技术上人员所熟知的等同替换方式,优选的实施方式包括但不限于本发明的实施例。
本发明所使用的溶剂可经市售获得。无需进一步纯化即可使用。反应一般是在惰性氮气下、无水溶剂中进行的。
本发明采用下述缩略词:MeOH-d4代表氘代甲醇;CDCl3代表氘代氯仿;DMSO-d6代表氘代二甲基亚砜;D2O代表氘代水;Piv代表特戊酰基;DBU代表1,8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯。
本发明化合物依据本领域常规命名原则或者使用软件命名,市售化合物采用供应商目录名称。
具体实施方式
下面通过实施例对本发明进行详细描述,但并不意味着对本发明任何不利限制。本文已经详细地描述了本发明,其中也公开了其具体实施例方式,对本领域的技术人员而言,在不脱离本发明精神和范围的情况下针对本发明具体实施方式进行各种变化和改进将是显而易见的。本发明化合物的盐酸盐或三氟乙酸盐,加入饱和碳酸氢钠溶液调节pH到中性,经过高效液相色谱法分离(中性,碳酸氢铵体系)得到化合物的游离碱。
实施例1
合成路线:
第一步
将化合物1a(100g,462mmol)溶于乙醇(500mL)中,在0℃下滴加浓硫酸(49.94g,509mmol,纯度:98%),反应液在95℃下搅拌16小时。反应完成后,反应液减压浓缩除掉大部分乙醇,浓缩液加入水(300mL),用乙酸乙酯(250mL×3)萃取,合并的有机相用饱和碳酸氢钠(300mL)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩,得到化合物1b。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.60(s,1H),7.78(s,1H),4.48-4.42(m,2H),2.58(s,3H),1.43(t,J=7.2Hz,3H)。
第二步
将化合物1b(10.0g,41.0mmol)溶于二氯甲烷(200mL)中,在0℃下搅拌加入三氟乙酸酐(17.2g,81.9mmol)和过氧化氢尿素(8.09g,86.0mmol),反应液升至25℃下搅拌16小时。向反应液中加入水(200mL),用二氯甲烷(100mL×3)萃取,合并有机相,依次用饱和碳酸氢钠(200mL×2)和饱和食盐水(500mL)洗涤,用无水硫酸钠干燥,过滤,减压浓缩,得到化合物1c。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.23(s,1H),7.29(s,1H),4.52-4.45(m,2H),2.29(s,3H),1.41(t,J-7.2Hz,3H)。
第三步
将化合物1c(22.0g,84.6mmol)溶于N,N-二甲基甲酰胺(130mL)中,在0℃下搅拌加入三氟乙酸酐(35.5g,169mmol),反应液在50℃下搅拌1小时。向反应液中加入水(200mL),用乙酸乙酯(100mL×4)萃取,合并有机相,依次用饱和碳酸氢钠(200mL×3)和饱和食盐水(150mL×3)洗涤,用无水硫酸钠干燥,过滤,减压浓缩。粗品在石油醚/乙酸乙酯混合液(8/1,90mL)中室温下搅拌2h,过滤得到化合物1d。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.89(br s,1H),7.75(s,1H),4.46-4.41(m,2H),2.44(s,3H),1.43(t,J=7.2Hz,3H)。
第四步
将化合物1d(2.00g,7.69mmol)溶于乙醇(20mL)中,加入氨水(16.2g,115mmol,纯度:25%),反应液在40℃下搅拌16小时。反应液减压浓缩,粗品在甲醇/二氯甲烷混合液(1/5,48mL)中室温下搅拌过夜。然后过滤,用二氯甲烷(5mL×2)洗涤,滤饼减压浓缩得到化合物1e。
MS-ESI计算值[M+H]+231和233,实测值231和233。
第五步
将化合物1e(37.0g,67.3mmol)和环己酮(26.4g,269mmol)溶于二氧六环(400mL)中,搅拌下滴加浓硫酸(3.30g,33.6mmol,纯度:98%),反应液在95℃下搅拌3小时。反应液减压浓缩,粗品在乙酸乙酯(100mL)中室温下搅拌3小时,过滤,将滤饼在饱和碳酸氢钠溶液(350mL)中室温下搅拌1小时,过滤,滤饼减压干燥得到化合物1f。MS-ESI计算值[M+H]+311和313,实测值311和313。
第六步
将化合物1g(50g,0.442mol),1,8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯(DBU,67.3g,0.442mol)溶于四氢呋喃(500mL)中。将反应液加热至55℃,在此温度下,向反应液中加入乙醛(9.74g,0.221mol)。反应液在55℃下搅拌18小时。将反应液降至22℃,用乙酸(25mL)淬灭。反应液减压浓缩,剩余物溶于乙酸乙酯(1000mL)和稀盐酸(1000mL,1M),分液后保留有机相,水相用乙酸乙酯萃取(300mL×3),合并有机相,有机相依次用饱和碳酸氢钠溶液(100mL)和食盐水(200mL)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,浓缩,粗产物经过柱层析法分离(4/1,石油醚/乙酸乙酯,Rf=0.56)得到化合物1h。
MS-ESI计算值[M+H]+226,实测值226。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.29(br s,1H),7.48(d,J=3.2Hz,1H),4.35(q,J=7.2Hz,2H),4.29(q,J=7.2Hz,2H),2.61(s,3H),1.38(t,J=7.2Hz,3H),1.35(m,J=7.2Hz,3H)。
第七步
将化合物1h(11.0g,48.8mmol)溶于N-甲基吡咯烷酮(60mL)中,向反应液中加入叔丁醇钾(6.03g,53.7mmol)。反应液在25℃下搅拌0.5小时后,加入化合物1i(9.78g,53.7mmol)的N-甲基吡咯烷酮(30mL)溶液。反应液继续搅拌20小时。将反应液用水(200mL)洗涤,乙酸乙酯萃取(200mL×3),合并有机相,有机相用饱和食盐水(20mL×3)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,浓缩,粗产物经过柱层析法分离(4/1,石油醚/乙酸乙酯,Rf=0.55)得到化合物1j。
MS-ESI计算值[M+H]+241,实测值241。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.49(s,1H),4.35(q,J=7.2Hz,2H),4.27(q,J=7.2Hz,2H),2.57(s,3H),1.40(t,J=7.2Hz,3H),1.34(t,J=7.2Hz,3H)。
第八步
将化合物1j(10.2g,42.5mmol)溶于甲酰胺(120mL),向反应液中加入磷酸(832mg,8.49mmol)。反应液在125℃下搅拌16小时。将反应液降至22℃,此时有大量白色固体析出。将混合物过滤,收集的滤饼加入到石油醚/乙酸乙酯混合溶液(1/1,100mL)中,混合物在30℃下搅拌0.5小时,过滤得化合物1k。
MS-ESI计算值[M+H]+222,实测值222。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.90(s,1H),7.84(s,1H),4.23(q,J=7.2Hz,2H),2.61(s,3H),1.28(t,J=7.2Hz,3H)。
第九步
将化合物1k(4.00g,18.0mmol)溶于无水四氢呋喃(50mL)中。在25℃下,向反应液滴加甲基溴化镁(30.1ml,90.3mmol),滴加完毕,反应升温至25℃,搅拌15小时。反应液用饱和氯化铵溶液(100mL)淬灭,乙酸乙酯(50mL×5)萃取,合并有机相,有机相用饱和食盐水(10mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,减压浓缩,粗产物经过薄层色谱层析法分离(2/1,石油醚/乙酸乙酯,Rf=0.39)得到化合物1l。MS-ESI计算值[M+H]+208,实测值208。
1H NMR(400MHz,CDCl3)7.30(br s,1H),7.24(br s,1H),2.59(s,3H),1.54(s,6H)。
第十步
将化合物1l(1.00g,4.83mmol),双氧水(4.64ml,48.26mmol,含量:30%)溶于无水四氢呋喃(30mL)中。在0℃下,向反应液滴加冷的甲磺酸(3.44mL,48.26mmol)的水(10mL)溶液。反应液在0℃,搅拌1小时。反应液用10%亚硫酸钠水溶液(15mL)淬灭,直至淀粉碘化钾试纸显示阴性。溶液用乙酸乙酯(50mL×3)萃取,合并有机相,有机相用饱和食盐水(10mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,减压浓缩,粗产物经过柱层析色谱法分离(2/1,石油醚/乙酸乙酯,Rf=0.38)得到化合物1m。
MS-ESI计算值[M+H]+166,实测值166。
第十一步
将化合物1m(400mg,2.42mmol)溶于无水四氢呋喃(10mL),向反应液中加入三乙胺(0.674mL,4.84mmol),特戊酰氯(350mg,4.84mmol)。反应液在0℃下搅拌1小时,反应液用水(10mL)洗涤,乙酸乙酯萃取(10mL×5),合并有机相,有机相用饱和食盐水(10mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,减压浓缩,粗产物经过薄层色谱层析法分离(2/1,石油醚/乙酸乙酯,Rf=0.63)得到化合物1n。
MS-ESI计算值[M+H]+250,实测值250。1H NMR(400MHz,MeOH-d4)7.61(s,1H),7.47(s,1H),2.34(s,3H),1.38(s,9H)。
第十二步
将化合物1n(450mg,1.81mmol)溶于三氯氧磷(8.85mL)中。反应液在100℃下搅拌1小时。将反应液降至室温,倒入饱和碳酸氢铵溶液(300mL)中。混合物用二氯甲烷萃取(50mL×3),合并有机相,有机相用饱和食盐水(20mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,浓缩得到化合物1o。
MS-ESI计算值[M+H]+268,实测值268。
第十三步
将化合物1o(2.00g,7.47mmol),2,4-二甲氧基苄胺(1.87g,11.21mmol),三乙胺(2.27g,22.4mmol)溶于无水四氢呋喃(30mL)中。反应液在70℃下搅拌1小时。反应液减压浓缩得到粗品化合物1p。
MS-ESI计算值[M+H]+399,实测值399。
第十四步
将化合物1p(3.50g,8.78mmol)溶于甲醇(3mL)和四氢呋喃(20mL)中,向反应液中加入氢氧化钠(703mg,17.6mmol)的水(20mL)溶液。反应液在25℃下搅拌0.5小时。反应液浓缩除去有机溶剂,水相用稀盐酸水溶液(1M)调节至pH=7,混合物用二氯甲烷萃取(50mL×3),合并有机相,有机相用饱和食盐水(10mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,减压浓缩,粗产物经过柱层析法分离(2/1,石油醚/乙酸乙酯,Rf=0.32)得到化合物1q。MS-ESI计算值[M+H]+315,实测值315。1H NMR(400MHz,MeOH-d4)δ7.67(s,1H),7.21(d,J=8.4Hz,1H),7.07(s,1H),6.56(d,J=2.4Hz,1H),6.47(dd,J=2.4,8.4Hz,1H),4.66(s,2H),3.90(s,3H),3.79(s,3H),2.36(s,3H)。
第十五步
将化合物1q(350mg,1.11mmol)溶于N,N-二甲基甲酰胺(10mL)中,加入氢氧化钠(89.1mg,2.23mmol)和1-(2-溴乙基)吡咯烷(238mg,1.34mmol)。反应液在50℃下搅拌2.5小时。反应液加入水(10mL),乙酸乙酯(20mL×4)萃取,合并有机相,用饱和食盐水(50mL×3)洗涤,用无水硫酸钠干燥,过滤,减压浓缩,剩余物经柱层析法(10/1,二氯甲烷/甲醇,Rf=0.28)分离得到化合物1r。
MS-ESI计算值[M+H]+412,实测值412。
第十六步
将化合物1r(190mg,462μmol)加入三氟乙酸(5mL)中,反应液在100℃下搅拌24小时。反应液直接减压浓缩。剩余物经高效液相色谱法(三氟乙酸条件)纯化得到化合物1s的三氟乙酸盐。
MS-ESI计算值[M+H]+262,实测值262。
第十七步
向化合物1s的三氟乙酸盐(100mg,0.266mmol)的无水二氧六环(5mL)溶液中加入1f(91.2mg,0.293mmol),甲烷磺酸(2-二环己基膦)-3,6-二甲氧基-2,4,6-三异丙基-1,1-联苯)(2-氨基-1,1-联苯-2-基)钯(II)(24.2mg,26.6μmol)和碳酸铯(217mg,0.666mmol)。反应液用氮气置换三次,在95℃下搅拌16小时。反应液降至室温,减压浓缩,剩余物经过高效液相色谱法(盐酸条件)纯化得化合物1的盐酸盐。
MS-ESI计算值[M+H]+492,实测值492。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.23(s,1H),8.93(s,1H),8.67(s,1H),8.13(s,1H),7.82(s,1H),4.35-4.34(m,2H),3.62-3.61(m,4H),3.22-3.13(m,6H),2.97-2.93(m,2H),2.04-1.91(m,4H),1.75-1.67(m,6H),1.51-1.48(m,2H),1.29-1.23(m,2H)。
实施例2
合成路线:
第一步
将化合物1e(500mg,2.16mmol)和N-叔丁氧羰基-4-哌啶酮(1.72g,8.66mmol)溶于二氧六环(10mL)中,搅拌下滴加浓硫酸(106mg,1.08mmol,纯度:98%),反应液在95℃下搅拌16小时。反应液减压浓缩,粗品在乙酸乙酯(20mL)中室温下搅拌1小时,过滤,减压浓缩得到化合物2a。
MS-ESI计算值[M+Na]+434和436,实测值434和436。
第二步
将化合物1s三氟乙酸盐(100mg,266umol)溶于无水二氧六环(5mL)中,加入化合物2a(157mg,293umol),三(二亚苄基丙酮)二钯(24.4mg,26.6umol),4,5-双(二苯基磷)-9,9-二甲基氧杂蒽(30.8mg,53.3umol)和碳酸铯(304mg,0.932mmol),置换氮气三次,反应液在110℃搅拌16小时。反应液直接减压浓缩,剩余物经柱层析法分离(10/1,二氯甲烷/甲醇,Rf=0.35)纯化,洗脱剂浓缩后得到化合物2b。
MS-ESI计算值[M+H]+593,实测值593。
第三步
将化合物2b(150mg,132umol)溶于三氟乙酸(2mL),在25℃搅拌1小时,反应液直接减压浓缩,剩余物经过高效液相色谱法(盐酸条件)纯化得化合物2的盐酸盐。
MS-ESI计算值[M+H]+493,实测值493。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.09(s,1H),10.55(s,1H),9.60(s,1H),8.68(s,1H),8.13(s,1H),7.83(s,1H),4.40-4.38(m,2H),3.60-3.59(m,4H),3.47-3.37(m,4H),3.28-3.25(m,2H),3.12-3.08(m,2H),2.53-2.52(m,6H),2.02-1.89(m,4H),1.84-1.81(m,2H)。
实施例3
合成路线:
化合物2的盐酸盐→化合物3的盐酸盐
第一步
将化合物2的盐酸盐(40.0mg,75.6μmol)溶于甲醇(2mL)和二氯甲烷(2mL)中,随后加入甲醛水溶液(18.4mg,0.226mmol,纯度:37%),乙酸(7.72mg,0.128mmol)和醋酸硼氢化钠(64.1mg,0.302mol),反应液在25℃下搅拌16小时。反应液直接减压浓缩。剩余物经高效液相色谱法(盐酸条件)纯化得到化合物3的盐酸盐。
MS-ESI计算值[M+H]+507,实测值507。1H NMR(400MHz,D2O)δ7.67(s,1H),7.51(s,1H),6.93(s,1H),3.87-3.86(m,2H),3.78-3.76(m,2H),3.68-3.66(m,2H),3.52-3.51(m,2H),3.31-3.30(m,4H),3.19-3.13(m,2H),2.95(s,3H),2.17-2.13(m,2H),2.10(s,3H),1.99-1.90(m,4H),1.83(s,3H)。
实施例4
合成路线:
第一步
参照实施例1第一步得到化合物4b。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.81(d,J=1.6Hz,1H),8.03(d,J=8.4Hz,1H),7.98(dd,J=1.6,8.4Hz,1H),4.48(q,J=7.2Hz,2H),1.44(t,J=7.2Hz,3H)。
第二步
参照实施例1第二步得到化合物4c。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.40(d,J=1.6Hz,1H),7.51(d,J=8.4Hz,1H),7.40(dd,J=1.6,8.4Hz,1H),4.46(q,J=7.2Hz,2H),1.41(t,J=7.2Hz,3H)。
第三步
参照实施例1第三步得到化合物4d。MS-ESI计算值[M+H]+246和248,实测值246和248。
第四步
参照实施例1第四步得到化合物4e。MS-ESI计算值[M+H]+217和219,实测值217和219。
第五步
参照实施例1第五步得到化合物4f。MS-ESI计算值[M+H]+297和299,实测值297和299。
第六步
将化合物1s的三氟乙酸盐(40.0mg,0.107mmol)溶于无水二氧六环(2mL)中,加入化合物4f(35.2mg,0.117mmol),三(二亚苄基丙酮)二钯(9.76mg,10.7μmol),4,5-双(二苯基膦)-9,9-二甲基氧杂蒽(12.3mg,21.3μmol)和碳酸铯(121mg,0.373mmol),置换氮气三次,反应液在110℃搅拌16小时。反应液直接减压浓缩,粗产物经过柱层析法(10/1,二氯甲烷/甲醇,Rf=0.32)分离纯化,粗品经高效液相色谱法(盐酸盐)纯化得到化合物4的盐酸盐。MS-ESI计算值[M+H]+478,实测值478。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.12(s,1H),10.38(s,1H),8.84(s,1H),8.10(s,1H),7.83(s,1H),6.97(s,1H),4.74-4.70(m,2H),3.60(s,4H),3.11-2.96(m,4H),2.66(s,3H),2.02-1.91(m,4H),1.76-1.67(m,4H),1.53-1.51(m,2H),1.30-1.24(m,2H)。
实施例5
合成路线:
第一步
参照实施例1第一步得到化合物5b。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.62(d,J=0.8Hz,1H),7.77(dd,J=1.6,9.2Hz,1H),4.49(q,J=7.2Hz,2H),1.44(t,J=7.2Hz,4H)。
第二步
参照实施例1第二步得到化合物5c。计算值[M+H]+264和266,实测值264和266。
第三步
参照实施例1第三步得到化合物5d。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.84(d,J=8.4Hz,1H),4.47(q,J=7.2Hz,2H),1.43(t,J=7.2Hz,3H)。
第四步
参照实施例1第四步得到化合物5e。MS-ESI计算值[M+H]+235和237,实测值235和237。
第五步
参照实施例1第五步得到化合物5f。MS-ESI计算值[M+H]+315和317,实测值315和317。
第六步
将化合物1s的三氟乙酸盐(40.0mg,0.107mmol)溶于无水二氧六环(2mL)中,加入化合物15f(38.9mg,0.117mmol),三(二亚苄基丙酮)二钯(9.76mg,10.6μmol),4,5-双(二苯基膦)-9,9-二甲基氧杂蒽(12.3mg,21.3μmol)和碳酸铯(121mg,0.373mmol),置换氮气三次,反应液在110℃搅拌16小时。反应液直接减压浓缩,粗产物经过柱层析法(10/1,二氯甲烷/甲醇,Rf=0.32)分离纯化,粗品经高效液相色谱法(盐酸条件)纯化得到化合物5的盐酸盐。MS-ESI计算值[M+H]+496,实测值496。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.27(s,1H),8.96(s,1H),8.82(d,J=10.8Hz,1H),8.17(s,1H),7.88(s,1H),4.36-4.34(m,2H),3.62(s,4H),3.17-3.14(m,2H),2.92-2.89(m,2H),2.53(s,3H),2.07-2.02(m,2H),1.92-1.90(m,2H),1.79-1.75(m,2H),1.68-1.65(m,2H),1.61-1.58(m,3H),1.29-1.23(s,1H)。
实施例6
合成路线:
化合物6的盐酸盐
第一步
参照实施例1第一步得到化合物6b。MS-ESI计算值[M+H]+264和266,实测值264和266。
第二步
参照实施例1第二步得到化合物6c。MS-ESI计算值[M+H]+280和282,实测值280和282。
第三步
参照实施例1第三步得到化合物6d。MS-ESI计算值[M+H]+280和282,实测值280和282。
第四步
参照实施例1第四步得到化合物6e。MS-ESI计算值[M+H]+251和253,实测值251和253。
第五步
参照实施例1第五步得到化合物6f。MS-ESI计算值[M+H]+331和333,实测值331和333。
第六步
参照实施例4第六步得到化合物6的盐酸盐。MS-ESI计算值[M+H]+512,实测值512。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.71(s,1H),10.45(s,1H),8.80(br s,1H),8.18(br s,1H),7.87(br s,1H),4.37(br s,2H),3.66-3.65(m,4H),3.12(br s,2H),2.91(br s,2H),2.55(s,3H),2.04-2.00(m,2H),1.93-1.87(m,2H),1.78-1.74(m,2H),1.65-1.58(m,5H),1.26-1.21(m,1H)。
实施例7
合成路线:
第一步
将化合物1e(500mg,1.97mmol)和环戊酮(664mg,7.89mmol)溶于无水二氧六环(6mL)中,向反应液中逐滴加入浓硫酸(98.7mg,0.986mmol,纯度:98%),反应液在95℃下搅拌3小时。反应液减压浓缩除去部分二氧六环(约3mL),过滤。向收集的滤饼中加入正己烷(10mL),室温下搅拌2小时,过滤,滤饼真空干燥2小时,得到化合物7a。MS-ESI计算值[M+H]+297和299,实测值297和299。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.16(s,1H),8.02(s,1H),2.71-2.78(m,2H),2.37(s,3H),1.91-1.93(m,2H),1.79-1.84(m,2H),1.63-1.67(m,2H)。
第二步
参照实施例4第六步得到化合物7的盐酸盐。MS-ESI计算值[M+H]+478,实测值478。1H NMR(400MHz,D2O)δ7.68(s,1H),7.49(s,1H),7.00(s,1H),4.02-4.01(m,2H),3.70-3.69(m,2H),3.57-3.56(m,2H),3.28(s,3H),3.18-3.17(m,2H),2.58-2.57(m,2H),2.14-2.13(m,3H),2.00-1.93(m,5H),1.84-1.79(m,4H),1.69-1.66(m,1H)。
实施例8
合成路线:
第一步
将化合物1e(500mg,1.97mmol)和丙酮(458mg,7.89mmol)溶于无水二氧六环(6mL)中,向反应液中逐滴加入浓硫酸(96.7mg,0.966mmol,纯度:98%),反应液在95℃下搅拌6小时。反应液减压浓缩除去二氧六环(约3mL),过滤。收集的滤饼用石油醚/乙酸乙酯混合溶液(10/1,8mL×2)洗涤,滤饼真空干燥2小时,得到化合物8a。MS-ESI计算值[M+H]+271和273,实测值271和273。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.82(s,1H),8.01(s,1H),2.37(s,3H),1.74(s,6H)。
第二步
参照实施例4第六步得到化合物8的盐酸盐。MS-ESI计算值[M+H]+452,实测值452。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.96(s,1H),9.71(s,1H),8.65(s,1H),8.12(s,1H),7.82(s,1H),4.38-4.37(m,2H),3.67-3.65(m,2H),3.60-3.59(m,2H),3.16-3.10(m,2H),2.47-2.46(m,6H),2.02-1.90(m,4H),1.80-1.76(m,6H)。
实施例9
合成路线:
第一步
将化合物1e(500mg,1.97mmol)和化合物9a(1.06g,7.88mmol)溶于无水二氧六环(6mL)中,向反应液中逐滴加入浓硫酸(98.7mg,0.985mmol,纯度:98%),反应液在95℃下搅拌1.5小时。反应液减压浓缩除去部分二氧六环(约3mL),过滤。向收集的滤饼中加入正己烷(12mL),室温下搅拌2小时,过滤,滤饼真空干燥2小时,得到化合物9b。MS-ESI计算值[M+H]+347和349,实测值347和349。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.57(s,1H),8.05(s,1H),3.17-3.25(m,2H),2.39(s,3H),2.14-2.27(m,4H),1.61-1.64(m,2H)。
第二步
参照实施例4第六步得到化合物9的盐酸盐。MS-ESI计算值[M+H]+528,实测值528。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.91(s,1H),10.46(s,1H),8.68(s,1H),8.13(s,1H),7.83(s,1H),4.38-4.37(m,2H),3.60-3.59(m,4H),3.27-3.10(m,4H),2.43-2.41(m,6H),2.18-2.16(m,4H),2.07-2.02(m,2H),1.90-1.88(m,2H),1.69-1.66(m,2H)。
实施例10
合成路线:
第一步
将化合物6e(1.50g,4.71mmol)和环戊酮(1.59g,18.9mmol)溶于二氧六环(10mL)中,搅拌下滴加浓硫酸(462mg,4.71mmol),反应液在95℃下搅拌16小时。反应液加入水(10mL),乙酸乙酯(15mL×4)萃取,合并有机相,用无水硫酸钠干燥,过滤,减压浓缩。剩余物经柱层析分离(1/1,石油醚/乙酸乙酯,Rf=0.31)纯化得到化合物10a。MS-ESI计算值[M+H]+317和319,实测值317和319。
第二步
将化合物1s的三氟乙酸盐(230mg,613μmol)溶于无水二氧六环(5mL)中,加入化合物10a(249mg,674μmol),三(二亚苄基丙酮)二钯(56.1mg,61.3μmol),4,5-双(二苯基膦)-9,9-二甲基氧杂蒽(70.9mg,123μmol)和碳酸铯(699mg,2.14mmol),置换氮气三次,反应液在110℃搅拌16小时。反应液直接减压浓缩,剩余物经柱层析法分离(10/1,二氯甲烷/甲醇,Rf=0.35)纯化,洗脱剂浓缩后再经高效液相色谱法(盐酸体系)纯化得到化合物10的盐酸盐。MS-ESI计算值[M+H]+498,实测值498。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.68(s,1H),10.26(s,1H),8.79(s,1H),8.17(s,1H),7.86(s,1H),4.38-4.36(m,2H),3.61-3.60(m,4H),3.13-3.11(m,2H),2.83-2.78(m,2H),2.52(s,3H),2.03-1.83(m,8H),1.75-1.74(m,2H)。
实施例11
合成路线:
第一步
将化合物11a盐酸盐(500mg,3.48mmol)溶于1,2-二溴乙烷(5mL),然后加入N,N-二异丙基乙胺(900mg,6.97mmol),反应液在25℃下搅拌14小时。反应完成后,反应液用水(30mL)稀释,乙酸乙酯(20mL×4)萃取,有机相用无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩,经柱层析分离(3∶1,石油醚/乙酸乙酯,Rf=0.6)得到化合物11b。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ=3.41(t,J=7.0Hz,2H),2.99(t,J=13.3Hz,2H),2.92(t,J=7.0Hz,2H),2.83(t,J=7.0Hz,2H),2.29(tt,J=7.1,14.5Hz,2H)。
第二步
将化合物11b(250mg,795μmol)溶于N,N-二甲基甲酰胺(4mL)中,然后加入化合物1q(187mg,875μmol)和氢氧化钠(63.6mg,1.59mmol),并于50℃下搅拌0.5小时。反应完成后,向反应液中加入水(50mL)稀释,用乙酸乙酯萃取(30mL×3),合并的有机相用无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩,经柱层析分离(1∶1,石油醚/乙酸乙酯,Rf=0.1)得到化合物11c。MS-ESI计算值[M+H]+448,实测值448。
第三步
将化合物11c(300mg,670μmol)溶于三氟乙酸(3.0mL)中,反应液在100℃下搅拌1小时。反应完成后,将反应液浓缩,剩余物经过高效液相色谱法(盐酸体系)纯化得化合物11d的盐酸盐。
MS-ESI计算值[M+H]+298,实测值298。
第四步
将化合物11d的盐酸盐(108mg,323μmol),化合物1f(111mg,356μmol)溶于无水二氧六环(2mL)中,然后加入碳酸铯(264mg,809μmol)和甲烷磺酸(2-二环己基膦)-3,6-二甲氧基-2,4,6-三异丙基-1,1-联苯)(2-氨基-1,1-联苯-2-基)钯(II)(29.3mg,32.4μmol),反应液在氮气保护下105℃搅拌12小时。反应完成后,将反应液减压浓缩,经柱层析分离(10∶1,二氯甲烷/甲醇,Rf=0.3)得到粗品化合物。向粗品中加入甲醇(5mL),15℃搅拌16小时,过滤,滤饼用甲醇洗涤(2mL×2),干燥得到化合物11。
MS-ESI计算值[M+H]+528,实测值528。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ=10.21(s,1H),8.91(s,1H),8.66(s,1H),8.09(s,1H),7.72(s,1H),4.09(t,J=5.6Hz,2H),3.06-2.92(m,4H),2.89-2.77(m,4H),2.49-2.46(m,6H),2.31-2.18(m,2H),1.82-1.72(m,2H),1.71-1.59(m,3H),1.54-1.42(m,2H),1.35-1.20(m,1H)。
实施例12
合成路线:
第一步
将化合物11d的三氟乙酸盐(90mg,219μmol),化合物7a(72mg,241μmol)溶于无水二氧六环(2mL)中,然后加入碳酸铯(250mg,766μmol)和甲烷磺酸(2-二环己基膦)-3,6-二甲氧基-2,4,6-三异丙基-1,1-联苯)(2-氨基-1,1-联苯-2-基)钯(II)(20mg,21.9μmol),反应液在氮气保护下105℃搅拌12小时。减压浓缩反应液,经柱层析分离(10∶1,二氯甲烷/甲醇,Rf=0.3)纯化得到粗品化合物。向粗品中加入甲醇和乙醇混合溶液(4/1,10mL),20℃搅拌16小时,过滤,滤饼用甲醇洗涤(2mL×2),水洗涤(2mL×2),干燥得到化合物12。MS-ESI计算值[M+H]+514,实测值514。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ=10.00(s,1H),8.84(s,1H),8.64(s,1H),8.08(s,1H),7.70(s,1H),4.08(t,J=5.6Hz,2H),3.00(t,J=13.5Hz,2H),2.91-2.78(m,6H),2.47(s,3H),2.46(s,3H),2.31-2.18(m,2H),2.04-1.92(m,2H),1.91-1.78(m,2H),1.76-1.62(m,2H)。
实施例13
合成路线:
第一步
将化合物13a(2.00g,26.6mmol)和1,4-二溴丁烷(5.75g,26.6mmol)溶于乙腈(100mL),然后加入碳酸钾(7.36g,53.26mmol),反应液在80℃下搅拌12小时。反应完成后,过滤反应液,滤液减压浓缩,用二氯甲烷(250mL)稀释,用饱和碳酸钾水溶液洗涤(75mL×1),收集有机相,水相用二氯甲烷萃取(75mL×9),合并的有机相用无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩得到无色油状产品13b。
MS-ESI计算值[M+H]+130,实测值130。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ=3.61-3.55(m,1H),3.40-3.34(m,1H),2.99(br s,1H),2.69-2.62(m,1H),2.61-2.54(m,4H),1.84-1.70(m,4H),1.04(d,J=6.5Hz,3H)。
第二步
将化合物13b(2.95g,23.1mmol)溶于二氯甲烷(25mL),冷却至0℃,然后在0℃下加入三苯基膦(9.07g,34.6mmol)和四溴化碳(9.94g,30.0mmol),反应液在15℃下搅拌12小时。反应完成后,加水(150mL)稀释,用二氯甲烷萃取(100mL×3),收集有机相。用饱和碳酸氢钠水溶液将水相值调至pH=9,用乙酸乙酯萃取(100mL×3)。合并有机相,用无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩得到黄色油状产品13c。粗品直接用于下一步反应。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ=2.84-2.77(m,1H),2.65-2.59(m,1H),2.58-2.52(m,1H),2.51-2.48(m,2H),2.51-2.46(m,1H),1.76-1.71(m,3H),1.74-1.71(m,2H),1.66(d,J=6.6Hz,3H)。
第三步
将化合物1q(200mg,636μmol)溶于N,N-二甲基甲酰胺(4mL)中,然后加入化合物13c(134mg,700μmol)和氢氧化钠(50.9mg,1.27mmol),并于50℃下搅拌2小时。反应完成后,减压浓缩反应液,向反应液中加入水(50mL)稀释,用乙酸乙酯萃取(30mL×3),合并的有机相用饱和食盐水洗涤(40mL×1),用无水硫酸钠干燥,过滤,减压浓缩滤液得到黄色固体化合物13d。粗品直接用于下一步反应。
MS-ESI计算值[M+H]+426,实测值426。
第四步
将化合物13d(300mg,670μmol)溶于三氟乙酸(10mL)中,反应液在100℃下搅拌12小时。反应完成后,将反应液浓缩,剩余物经过高效液相色谱法(盐酸体系)纯化得化合物13e的盐酸盐。
MS-ESI计算值[M+H]+276,实测值276。
第五步
将化合物13e的盐酸盐(76.0mg,244μmol),化合物7a(72.4mg,244μmol)溶于无水二氧六环(3mL)中,然后加入碳酸铯(159mg,487μmol)和甲烷磺酸(2-二环己基膦)-3,6-二甲氧基-2,4,6-三异丙基-1,1-联苯)(2-氨基-1,1-联苯-2-基)钯(II)(22.1mg,24.4μmol),反应液在氮气保护下105℃搅拌12小时。反应完成后,将反应液减压浓缩,加入水(50mL)稀释,用乙酸乙酯萃取(30mL×3),合并的有机相用饱和食盐水洗涤(40mL×1),用无水硫酸钠干燥,过滤,减压浓缩滤液,剩余物经过高效液相色谱(盐酸体系)纯化得到化合物13的盐酸盐。13的盐酸盐用二氯甲烷(30mL)溶解后依次用饱和碳酸氢钠水溶液(20mL)和饱和食盐水(20mL)洗涤,有机相用无水硫酸钠干燥,过滤,减压浓缩滤液,剩余物经薄层层析分离纯化(10∶1,二氯甲烷/甲醇,Rf=0.3)得到化合物13。
MS-ESI计算值[M+H]+492,实测值492。1H NMR(400MHz,MeOH-d4)δ=8.87-8.77(m,1H),8.08-8.00(m,1H),7.63-7.52(m,1H),4.71-4.53(m,1H),4.37-4.12(m,1H),3.67-3.37(m,3H),3.05-2.91(m,3H),2.65-2.52(m,6H),2.22-2.04(m,6H),1.97-1.76(m,5H),1.55-1.33(m,3H)。
实施例14
合成路线:
第一步
将化合物14a(2.00g,26.6mmol)和1,4-二溴丁烷(5.75g,26.6mmol)溶于乙腈(100mL),然后加入碳酸钾(7.36g,53.26mmol),反应液在80℃下搅拌12小时。过滤反应液,滤液减压浓缩,用二氯甲烷(250mL)稀释,用饱和碳酸钾水溶液洗涤(75mL×1),收集有机相,水相用二氯甲烷萃取(75mL×9),合并的有机相用无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩得到化合物14b。
MS-ESI计算值[M+H]+130,实测值130。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ=3.63-3.58(m,1H),3.41-3.35(m,1H),2.90(br s,1H),2.73-2.66(m,1H),2.63-2.57(m,4H),1.82-1.74(m,4H),1.06(d,J=6.5Hz,3H)。
第二步
将化合物14b(2.48g,19.2mmol)溶于二氯甲烷(25mL),冷却至0℃,然后在0℃下加入三苯基膦(7.55g,28.8mmol)和四溴化碳(8.28g,25.0mmol),反应液在15℃下搅拌12小时。向反应液中加水(150mL)稀释,用二氯甲烷萃取(100mL×3),收集有机相。用饱和碳酸氢钠水溶液将水相调至pH=9,用乙酸乙酯萃取(100mL×3)。合并有机相,用无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩得到化合物14c。粗品直接用于下一步反应。
第三步
将化合物1q(250mg,795μmol)溶于N,N-二甲基甲酰胺(3mL)中,然后加入化合物14c(229mg,1.19mmol)和氢氧化钠(63.6mg,1.59mmol),并于50℃下搅拌2小时。反应完成后,减压浓缩反应液,向反应液中加入水(30mL)稀释,用1M盐酸水溶液将反应液调至pH=3,用二氯甲烷洗涤(50mL×3)。用1M氢氧化钠水溶液将反应液调至pH=11,用二氯甲烷萃取(60mL×3),合并的有机相用饱和食盐水洗涤(150mL×1),用无水硫酸钠干燥,过滤,减压浓缩滤液得到化合物14d。粗品直接用于下一步反应。
MS-ESI计算值[M+H]+426,实测值426。
第四步
将化合物14d(430mg,1.01mmol)溶于三氟乙酸(15mL)中,反应液在100℃下搅拌3小时。反应完成后,将反应液浓缩,剩余物经过高效液相色谱纯化(盐酸体系)得到化合物14e的盐酸盐。
MS-ESI计算值[M+H]+276,实测值276。
第五步
将化合物14e的盐酸盐(80.0mg,206μmol),化合物7a(61.2mg,206μmol)溶于无水二氧六环(6mL)中,然后加入碳酸铯(168mg,515μmol)和甲烷磺酸(2-二环己基膦)-3,6-二甲氧基-2,4,6-三异丙基-1,1-联苯)(2-氨基-1,1-联苯-2-基)钯(II)(18.7mg,20.6μmol),反应液在氮气保护下95℃搅拌12小时。反应完成后,将反应液减压浓缩,柱层析分离纯化(10∶1,二氯甲烷/甲醇,Rf=0.25),得到粗品。粗品经过高效液相色谱纯化(盐酸体系)得到化合物14的盐酸盐。
MS-ESI计算值[M+H]+492,实测值492。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ=7.76-7.68(m,1H),7.53-7.45(m,1H),7.05-6.98(m,1H),4.12-4.02(m,1H),3.98-3.88(m,1H),3.77-3.59(m,3H),3.31-3.21(m,2H),2.68-2.53(m,2H),2.20-2.08(m,5H),2.06-1.93(m,4H),1.89-1.77(m,5H),1.73-1.62(m,2H),1.53-1.47(m,3H)。
实施例15
合成路线:
第一步
将化合物1q(357mg,1.14mmol)和化合物15a(300mg,1.14mmol)溶于N,N-二甲基甲酰胺(3mL)中,向反应液中加入氢氧化钠(136mg,3.41mmol),反应液在50℃下搅拌0.5小时。反应液用水(60mL)稀释,乙酸乙酯(60mL×3)萃取,合并有机相,有机相用水(200mL×1)和饱和食盐水(200mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩,粗品经柱层析法分离(2/1,石油醚/乙酸乙酯,Rf=0.45)得到化合物15b。MS-ESI计算值[M+H]+498,实测值498。
第二步
将化合物15b(255mg,0.509mmol)溶于三氟乙酸(20mL)中。反应液在氮气保护下100℃下搅拌2小时。反应液减压浓缩,得到化合物15c的三氟乙酸盐。MS-ESI计算值[M+H]+248,实测值248。
第三步
将化合物15c的三氟乙酸盐(200mg,0.554mmol)溶于四氢呋喃(3mL)和甲醇(3mL),向反应液中加入二叔丁基二碳酸酯(121mg,0.554mmol)和三乙胺(224mg,2.21mmol)。反应液在25℃下搅拌1小时。反应液用水(60mL)稀释,二氯甲烷(60mL×4)萃取,合并有机相,有机相依次用水(200mL×1)和饱和食盐水(200mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩,粗品经高效液相色谱法(中性条件)纯化得到化合物15d。MS-ESI计算值[M+H]+348,实测值348。
第四步
将化合物15d(40mg,0.115mmol)和1f(40.5mg,0.125mmol)溶于无水二氧六环(3mL)中,氮气下,向混合液中加入碳酸铯(102mg,0.313mmol)和甲烷磺酸(2-二环己基膦)-3,6-二甲氧基-2,4,6-三异丙基-1,1-联苯)(2-氨基-1,1-联苯-2-基)钯(II)(9.45mg,10.4μmol),反应液在100℃下搅拌12小时。反应液浓缩,粗产物经过柱层析法分离(20∶1,二氯甲烷/甲醇,Rf=0.35)得到化合物15e。
MS-ESI计算值[M+H]+578,实测值578。
第五步
将化合物15e(68.0mg,0.113mmol)溶于无水甲醇(3mL)中,加入盐酸/甲醇溶液(4.23mL,4M,16.9mmol),反应液在25℃下搅拌1小时。反应液浓缩,剩余物在甲醇(30mL)中搅拌1小时,过滤,甲醇(10mL×2)洗涤。滤饼在甲醇(30mL)中搅拌1小时,过滤,甲醇(10mL×2)洗涤,收集滤饼,减压干燥得到化合物15的盐酸盐。
MS-ESI计算值[M+H]+478,实测值478。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.22(s,1H),8.99(br s,2H),8.90(s,1H),8.66(s,1H),8.10(s,1H),7.72(s,1H),4.09-3.96(m,2H),3.23-3.12(m,2H),3.07-2.92(m,3H),2.81-2.71(m,1H),2.53-2.51(m,6H),2.17-2.05(m,1H),1.82-1.58(m,7H),1.54-1.45(m,2H),1.34-1.21(m,1H)。
实施例16
合成路线:
化合物15的盐酸盐→化合物16的盐酸盐
将化合物15的盐酸盐(30mg,0.049mmol)溶于无水甲醇(3mL)中,向反应液中加入甲醛水溶液(6.39mg,78.7μmol,纯度:37%)和氰基硼氢化钠(6.60mg,0.105mmol)。反应液在10℃下搅拌1小时。反应液加入水(20mL)淬灭,减压浓缩除去甲醇,过滤,甲醇(3mL×2)洗涤。粗品经高效液相色谱法(盐酸条件)纯化得到化合物16的盐酸盐。MS-ESI计算值[M+H]+492,实测值492。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.65-10.43(m,1H),10.22(s,1H),8.91(s,1H),8.66(s,1H),8.10(s,1H),7.76-7.70(m,1H),4.14-3.99(m,2H),3.79-3.42(m,2H),3.16-2.92(m,4H),2.86-2.81(m,3H),2.53-2.51(m,6H),2.30-1.84(m,2H),1.81-1.58(m,6H),1.53-1.42(m,2H),1.34-1.22(m,1H)。
体外活性测试
1.体外评价本发明化合物对MNK2蛋白激酶的抑制活性
实验目的:检测化合物的MNK2蛋白激酶抑制活性
实验材料:测定缓冲溶液:8mM 3-(N-吗啉)丙磺酸,0.2mM的乙二胺四乙酸二钠,0.01%月桂醇聚氧乙烯醚,5%甘油,0.1%β-巯基乙醇,1mg牛血清蛋白
实验操作:使用Eurofins Pharma Discovery Services UK Limited的KinaseProfilerTM服务进行Mnk2蛋白激酶抑制活性测定。将含有待测化合物的系列DMSO稀释液(始于10μM,按3倍系列稀释),MNK2(h)蛋白激酶和0.33mg/mL的髓鞘碱性蛋白加入到将新鲜制备的缓冲溶液(pH 7.0)中,均匀搅拌。加入33P-ATP(放射强度10μCi/μL)和10mM乙酸镁混合物引发反应,室温反应40分钟,加入磷酸稀释到0.5%的浓度停止反应。10μL的反应液使用P30过滤机(P30filtermat)过滤,用0.425%磷酸洗涤四次,每次4分钟,甲醇洗涤一次,干燥后使用Filter-Binding方法检测放射强度。
化合物的蛋白激酶抑制活性表达为相对空白底物(单纯DMSO)残存的蛋白激酶活性的百分比。利用Prism4软件包(GraphPad)计算IC50值和曲线。
表1 本发明实施例化合物对MNK2蛋白激酶抑制活性的IC50
实验结论:本发明化合物均表现出优异的对MNK2蛋白激酶的抑制活性。
2.体外评价本发明化合物对MNK1蛋白激酶的抑制活性
实验目的:检测化合物的MNK1蛋白激酶抑制活性
实验材料:测定缓冲溶液:20mM 4-羟乙基哌嗪乙磺酸(pH 7.5),10mM氯化镁,1mM乙二醇二乙醚二胺四乙酸,0.02%月桂醇聚氧乙烯醚,0.02mg/mL牛血清白蛋白,0.1mM钒酸钠,2mM二硫苏糖醇,1%DMSO。
实验操作:使用Reaction Biology Corp.的Kinase HotSpot Profiling服务进行Mnk1蛋白激酶抑制活性测定。将底物加入新鲜制备的缓冲液中,然后加入的MNK1(h),搅拌均匀。使用Echo550加入含有待测化合物的系列DMSO稀释液(始于3μM,按3倍系列稀释),加入33P-ATP(最终放射强度0.01μCi/μL)引发反应,室温下预温育120分钟。然后使用P81离子交换纸(Whatman#3698-915)过滤,用0.75%磷酸洗涤。测量残余在滤纸上的放射性磷酸化底物浓度。
化合物的蛋白激酶抑制活性数据表示为相对空白底物(单纯DMSO)残存的蛋白激酶活性的百分比。利用Prism4软件包(GraphPad)计算IC50值和曲线拟合。
表2 本发明实施例化合物对MNK1蛋白激酶抑制活性的IC50
化合物编号 | 对MNK1的IC50(nM) |
化合物1(盐酸盐) | 54.65 |
实验结论:本发明化合物表现出优异的对MNK1蛋白激酶的抑制活性。
3.体外评价本发明化合物对eIF4E磷酸化的抑制活性
实验目的:检测化合物对HCT116细胞株的eIF4E磷酸化抑制IC50值。
实验材料:HCT116细胞(ATCC),RPMl1640培养基(Life technology),胎牛血清(Hyclone),双抗(青霉素、链霉素)(Millipore),磷酸盐缓冲液(Corning),384孔细胞板(PerkinElmer),UltraTM p-eIF4E(Ser209)Assay Kit(PerkinElmer)。
实验操作:将HCT116细胞消化后制成细胞悬液,铺板于96孔板中。然后将细胞板放到培养箱中培养过夜。将化合物稀释到相应浓度加入到细胞培养板中,继续培养3小时。随后用lysis buffer将细胞裂解,并将裂解液转移到384孔板中。按照试剂盒说明书新鲜配置混合受体,并加入384孔板中,室温孵育1小时,按照试剂盒说明书新鲜配置混合供体,并加入到384孔板中,室温孵育1小时,在EnVision上用标准AlphaLISA程序读取信号,用Graphpad prism进行曲线拟合并计算IC50。
表3 本发明实施例化合物对eIF4E磷酸化抑制活性的IC50
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实验结论:本发明化合物表现出优异的对eIF4E磷酸化抑制活性。
4.本发明化合物的药代动力学评价
实验目的:测试化合物在CD-1小鼠体内药代动力学
实验材料:CD-1小鼠(雄性,7~9周龄,上海西普尔-必凯实验动物有限公司)
实验操作:以标准方案测试化合物静脉注射及口服给药后的啮齿类动物药代特征,实验中候选化合物配成澄清溶液或均匀悬浮液,给予小鼠单次静脉注射及口服灌胃给药。静注及口服溶媒为10%的羟丙基β环糊精水溶液或生理盐水溶液。该项目使用四只雄性C57BL/6小鼠,两只小鼠进行静脉注射给药,给药剂量为0.5mg/kg,收集0h(给药前)和给药后0.083,0.25,0.5,1,2,4,8,12,24h的血浆样品,另外两只小鼠口服灌胃给药,给药剂量为2mg/kg,收集0h(给药前)和给药后0.25,0.5,1,2,4,8,12,24h的血浆样品,收集24小时内的全血样品,3000g离心10分钟,分离上清得血浆样品,加入420倍体积含内标的乙腈溶液沉淀蛋白,在800rpm涡旋10分钟,取上清液1μL进样,以LC-MS/MS分析方法定量分析血药浓度,并计算药代参数,如达峰浓度(Cmax),清除率(CL),半衰期(T1/2),组织分布(Vdss),药时曲线下面积(AUC0-last),生物利用度(F)等。
表4 本发明实施例化合物在小鼠体内的药代动力学结果
ND:未确定(由于消除相无法确定所以相关参数无法计算);--:未检测。
实验结论:本发明化合物在CD-1小鼠中表现出较好的吸收。
5.本发明化合物在CT-26小鼠移植瘤中的体内药效实验
实验目的:测试化合物在CT-26小鼠移植瘤中的体内药效实验
实验材料:CT-26细胞,RMPI-1640培养基,含10%胎牛血清,小鼠(雌性,上海必凯实验动物有限公司)
实验操作:CT-26细胞培养于RMPI-1640培养基,含10%胎牛血清,在5%CO2的37℃培养箱中进行培养。经传代生长至合适浓度且肿瘤细胞在对数生长期进行收集肿瘤细胞,计数重悬于DPBS(磷酸盐缓冲溶液),调整细胞悬液浓度至3×106/mL用于接种。
小鼠结肠癌移植瘤的建立:收集细胞,调整浓度为3×106细胞/毫升(用DPBS重悬成细胞悬液),在无菌条件下,于小鼠的右侧背部皮下注射0.1mL的肿瘤细胞,每只小鼠接种的细胞数为3×105。待肿瘤生长至一定大小后用数显游标卡尺来测定肿瘤的长(a)和宽(b),计算肿瘤体积,肿瘤体积(Tumor volume,TV)的计算公式为:TV=a×b2/2。
CT-26肿瘤细胞接种:接种当天按照动物体重进行分组给药,每组8只动物,接种当天视为D0。待肿瘤大小长至60mm3左右按照肿瘤大小及体重对抗体组进行分组。实验期间每周三次测定动物的体重和肿瘤大小,同时每天观察和记录动物的临床症状,每次给药均参考最近一次称量的动物体重。测定化合物在30mg/Kg QD(一天一次),90mg/Kg QD(一天一次),200mg/Kg QD(一天一次)的剂量下,给药21天,对小鼠结肠癌移植瘤抑制效果,具体信息如下表5所示。
抗肿瘤活性的评价指标为相对肿瘤增殖率T/C(%),T/C(%)>40%为无效,T/C(%)≤40%,并经统计学处理P<0.05为有效,T/C(%)的计算公式为:T/C(%)=(TRTV/CRTV)×100%。TRTV为治疗组的相对肿瘤体积,CRTV为阴性对照组的相对肿瘤体积;TGI(%)a=(1-处理组给药结束时平均瘤体积/溶剂对照组治疗结束时平均瘤体积)×100%。
表5 本发明实施例化合物在CT-26移植瘤模型中的抗肿瘤体内药效
化合物 | 给药剂量 | TGI% | T/C% |
化合物12 | 30mg/Kg,QD | 63.57 | 36.43 |
化合物12 | 90mg/Kg,QD | 68.89 | 31.11 |
化合物12 | 200mg/Kg,QD | 68.51 | 33.31 |
实验结论:本发明化合物对小鼠结肠癌移植瘤抑制效果显著。
Claims (26)
1.式(I)所示化合物或其药学上可接受的盐,
其中,R1为H、F、Cl、Br或C1-3烷基;
R2和R3各自独立地为H或C1-3烷基,其中所述C1-3烷基任选被1、2或3个独立选自F、Cl、Br或I的取代基所取代;
或R2和R3与它们相连的碳原子连接在一起形成环戊基、环己基或哌啶基,其中所述环戊基、环己基和哌啶基任选被1、2或3个Ra所取代;
各Ra独立地为H、F、Cl、Br或C1-3烷基;
R4为H、F、Cl、Br或C1-3烷基;
R5和R6各自独立地为H、F、Cl、Br、I或C1-3烷基;
R7为吡咯烷基,其中所述吡咯烷基任选被1、2或3个Rb所取代;
各Rb独立地为H、F、Cl、Br、I或C1-3烷基,其中所述C1-3烷基任选被1、2或3个独立选自F、Cl、Br或I的取代基所取代;
n为1或2。
2.根据权利要求1所述化合物或其药学上可接受的盐,其中各Ra独立地为H、F、Cl、Br、-CH3或-CH2CH3。
3.根据权利要求1所述化合物或其药学上可接受的盐,其中R2和R3各自独立地为H、-CH3或-CH2CH3。
4.根据权利要求1或2所述化合物或其药学上可接受的盐,其中R2和R3与它们相连的碳原子连接在一起形成
5.根据权利要求4所述化合物或其药学上可接受的盐,其中R2和R3与它们相连的碳原子连接在一起形成
6.根据权利要求1或3所述化合物或其药学上可接受的盐,其中结构单元为/>
7.根据权利要求6所述化合物或其药学上可接受的盐,其中结构单元为
8.根据权利要求1所述化合物或其药学上可接受的盐,其化合物具有式(I-1)~(I-4)任一结构式所示结构:
其中,R1、R4、R5、R6、R7、Ra和n如权利要求1所定义。
9.根据权利要求1所述化合物或其药学上可接受的盐,其中各Rb独立地H、F、Cl、Br、I、
10.根据权利要求1、8或9任一项所述化合物或其药学上可接受的盐,其中R7为 其中所述/>任选被1或2个Rb所取代。
11.根据权利要求10所述化合物或其药学上可接受的盐,其中R7为
12.根据权利要求11所述化合物或药学上可接受的盐,其中R7为
13.根据权利要求1或8所述化合物或其药学上可接受的盐,其中R4为H或-CH3。
14.根据权利要求8所述化合物或其药学上可接受的盐,其化合物具有式(I-5)~式(I-9)任一结构式所示结构:
其中,R1、R5、R6、Ra和Rb如权利要求8所定义。
15.根据权利要求1、8或14述化合物或其药学上可接受的盐,其中R1为H、F、Cl或
16.根据权利要求1、8或14所述化合物或其药学上可接受的盐,其中R5和R6各自独立地为H或
17.下式化合物或其药学上可接受的盐:
18.根据权利要求1~3、5、7~9、11、12、14、17任一项所述化合物或其药学上可接受的盐,其中所述药学上可接受的盐为盐酸盐或三氟乙酸盐。
19.根据权利要求4所述化合物或其药学上可接受的盐,其中所述药学上可接受的盐为盐酸盐或三氟乙酸盐。
20.根据权利要求6所述化合物或其药学上可接受的盐,其中所述药学上可接受的盐为盐酸盐或三氟乙酸盐。
21.根据权利要求10所述化合物或其药学上可接受的盐,其中所述药学上可接受的盐为盐酸盐或三氟乙酸盐。
22.根据权利要求13所述化合物或其药学上可接受的盐,其中所述药学上可接受的盐为盐酸盐或三氟乙酸盐。
23.根据权利要求15所述化合物或其药学上可接受的盐,其中所述药学上可接受的盐为盐酸盐或三氟乙酸盐。
24.根据权利要求16所述化合物或其药学上可接受的盐,其中所述药学上可接受的盐为盐酸盐或三氟乙酸盐。
25.根据权利要求1~17任一项所述化合物或其药学上可接受的盐在制备MNK1/2抑制剂药物中的应用。
26.根据权利要求1~17任一项所述化合物或其药学上可接受的盐在制备治疗结直肠癌的药物中的应用。
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