CN114720449A - 一种共振拉曼散射-红外吸收双模纳米探针的制备及应用 - Google Patents
一种共振拉曼散射-红外吸收双模纳米探针的制备及应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN114720449A CN114720449A CN202210218621.1A CN202210218621A CN114720449A CN 114720449 A CN114720449 A CN 114720449A CN 202210218621 A CN202210218621 A CN 202210218621A CN 114720449 A CN114720449 A CN 114720449A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- infrared absorption
- raman scattering
- nanoprobe
- resonance raman
- mode
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 238000001069 Raman spectroscopy Methods 0.000 title claims abstract description 93
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 title claims abstract description 92
- 239000000523 sample Substances 0.000 title claims abstract description 42
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims description 64
- 239000002105 nanoparticle Substances 0.000 claims abstract description 56
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims abstract description 45
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims abstract description 45
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims abstract description 45
- 239000000758 substrate Substances 0.000 claims abstract description 28
- 239000011258 core-shell material Substances 0.000 claims abstract description 27
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 16
- 239000004065 semiconductor Substances 0.000 claims abstract description 15
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims abstract description 15
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 claims abstract description 13
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims abstract description 11
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 claims abstract description 8
- SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N Glutaraldehyde Chemical compound O=CCCCC=O SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 7
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 33
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 18
- AMQJEAYHLZJPGS-UHFFFAOYSA-N N-Pentanol Chemical compound CCCCCO AMQJEAYHLZJPGS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 18
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N silicon dioxide Inorganic materials O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 16
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- 230000002902 bimodal effect Effects 0.000 claims description 13
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims description 11
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 claims description 10
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 claims description 10
- 238000002791 soaking Methods 0.000 claims description 9
- 108091023037 Aptamer Proteins 0.000 claims description 8
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 8
- 235000013855 polyvinylpyrrolidone Nutrition 0.000 claims description 8
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Polymers 0.000 claims description 8
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- BOTDANWDWHJENH-UHFFFAOYSA-N Tetraethyl orthosilicate Chemical compound CCO[Si](OCC)(OCC)OCC BOTDANWDWHJENH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 230000008073 immune recognition Effects 0.000 claims description 7
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 claims description 7
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims description 7
- VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N Ammonium hydroxide Chemical compound [NH4+].[OH-] VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 claims description 6
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical group CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 238000000862 absorption spectrum Methods 0.000 claims description 6
- 235000011114 ammonium hydroxide Nutrition 0.000 claims description 6
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 claims description 6
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 6
- ZSIAUFGUXNUGDI-UHFFFAOYSA-N hexan-1-ol Chemical compound CCCCCCO ZSIAUFGUXNUGDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- PHTQWCKDNZKARW-UHFFFAOYSA-N isoamylol Chemical compound CC(C)CCO PHTQWCKDNZKARW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- ZXEKIIBDNHEJCQ-UHFFFAOYSA-N isobutanol Chemical compound CC(C)CO ZXEKIIBDNHEJCQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 6
- 229910021421 monocrystalline silicon Inorganic materials 0.000 claims description 5
- 238000012360 testing method Methods 0.000 claims description 5
- 238000001237 Raman spectrum Methods 0.000 claims description 4
- DKIDEFUBRARXTE-UHFFFAOYSA-N 3-mercaptopropanoic acid Chemical compound OC(=O)CCS DKIDEFUBRARXTE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- PCWGTDULNUVNBN-UHFFFAOYSA-N 4-methylpentan-1-ol Chemical compound CC(C)CCCO PCWGTDULNUVNBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 229910004613 CdTe Inorganic materials 0.000 claims description 3
- NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N N-Hydroxysuccinimide Chemical compound ON1C(=O)CCC1=O NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 229910007709 ZnTe Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 claims description 3
- ZOIORXHNWRGPMV-UHFFFAOYSA-N acetic acid;zinc Chemical compound [Zn].CC(O)=O.CC(O)=O ZOIORXHNWRGPMV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- UHYPYGJEEGLRJD-UHFFFAOYSA-N cadmium(2+);selenium(2-) Chemical compound [Se-2].[Cd+2] UHYPYGJEEGLRJD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 150000001718 carbodiimides Chemical class 0.000 claims description 3
- PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N gold Chemical compound [Au] PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 239000010931 gold Substances 0.000 claims description 3
- 229910052737 gold Inorganic materials 0.000 claims description 3
- AGBQKNBQESQNJD-UHFFFAOYSA-M lipoate Chemical compound [O-]C(=O)CCCCC1CCSS1 AGBQKNBQESQNJD-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 3
- 235000019136 lipoic acid Nutrition 0.000 claims description 3
- SBIBMFFZSBJNJF-UHFFFAOYSA-N selenium;zinc Chemical compound [Se]=[Zn] SBIBMFFZSBJNJF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 229910052979 sodium sulfide Inorganic materials 0.000 claims description 3
- GRVFOGOEDUUMBP-UHFFFAOYSA-N sodium sulfide (anhydrous) Chemical compound [Na+].[Na+].[S-2] GRVFOGOEDUUMBP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 229960002663 thioctic acid Drugs 0.000 claims description 3
- 239000004246 zinc acetate Substances 0.000 claims description 3
- ZHLSOSXEBSWGDW-UHFFFAOYSA-N 3-aminopropyl triethyl silicate Chemical compound CCO[Si](OCC)(OCC)OCCCN ZHLSOSXEBSWGDW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 238000001816 cooling Methods 0.000 claims description 2
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 claims description 2
- 239000001267 polyvinylpyrrolidone Substances 0.000 claims description 2
- 235000011083 sodium citrates Nutrition 0.000 claims description 2
- 238000001514 detection method Methods 0.000 abstract description 123
- 102000007066 Prostate-Specific Antigen Human genes 0.000 description 55
- 108010072866 Prostate-Specific Antigen Proteins 0.000 description 54
- 239000000047 product Substances 0.000 description 12
- 229910052681 coesite Inorganic materials 0.000 description 10
- 229910052906 cristobalite Inorganic materials 0.000 description 10
- 229910052682 stishovite Inorganic materials 0.000 description 10
- 229910052905 tridymite Inorganic materials 0.000 description 10
- 102100023635 Alpha-fetoprotein Human genes 0.000 description 6
- 108010026331 alpha-Fetoproteins Proteins 0.000 description 6
- 239000000090 biomarker Substances 0.000 description 5
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 4
- 239000002086 nanomaterial Substances 0.000 description 4
- WYTZZXDRDKSJID-UHFFFAOYSA-N (3-aminopropyl)triethoxysilane Chemical compound CCO[Si](OCC)(OCC)CCCN WYTZZXDRDKSJID-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 3
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 3
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 description 3
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 2
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 2
- 238000000835 electrochemical detection Methods 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 2
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- 238000004445 quantitative analysis Methods 0.000 description 2
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 2
- 230000003595 spectral effect Effects 0.000 description 2
- 102000053602 DNA Human genes 0.000 description 1
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 1
- 240000007594 Oryza sativa Species 0.000 description 1
- 235000007164 Oryza sativa Nutrition 0.000 description 1
- 108020004682 Single-Stranded DNA Proteins 0.000 description 1
- 229910002808 Si–O–Si Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 238000005102 attenuated total reflection Methods 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 238000004737 colorimetric analysis Methods 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 238000007877 drug screening Methods 0.000 description 1
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 1
- 238000013399 early diagnosis Methods 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 239000003792 electrolyte Substances 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 239000003344 environmental pollutant Substances 0.000 description 1
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 1
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 1
- 230000005284 excitation Effects 0.000 description 1
- 238000011049 filling Methods 0.000 description 1
- 238000001917 fluorescence detection Methods 0.000 description 1
- 230000004907 flux Effects 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 238000000504 luminescence detection Methods 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 231100000719 pollutant Toxicity 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 210000002307 prostate Anatomy 0.000 description 1
- 238000004451 qualitative analysis Methods 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 235000009566 rice Nutrition 0.000 description 1
- 238000011896 sensitive detection Methods 0.000 description 1
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
- G01N21/62—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light
- G01N21/63—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light optically excited
- G01N21/65—Raman scattering
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
- G01N21/17—Systems in which incident light is modified in accordance with the properties of the material investigated
- G01N21/25—Colour; Spectral properties, i.e. comparison of effect of material on the light at two or more different wavelengths or wavelength bands
- G01N21/31—Investigating relative effect of material at wavelengths characteristic of specific elements or molecules, e.g. atomic absorption spectrometry
- G01N21/35—Investigating relative effect of material at wavelengths characteristic of specific elements or molecules, e.g. atomic absorption spectrometry using infrared light
- G01N21/3577—Investigating relative effect of material at wavelengths characteristic of specific elements or molecules, e.g. atomic absorption spectrometry using infrared light for analysing liquids, e.g. polluted water
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/543—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
- G01N33/54313—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals the carrier being characterised by its particulate form
- G01N33/54346—Nanoparticles
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
- Y02P70/00—Climate change mitigation technologies in the production process for final industrial or consumer products
- Y02P70/50—Manufacturing or production processes characterised by the final manufactured product
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Pathology (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Spectroscopy & Molecular Physics (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Nanotechnology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Investigating, Analyzing Materials By Fluorescence Or Luminescence (AREA)
Abstract
本发明公开了共振拉曼散射‑红外吸收双模纳米探针，是由下述方法制备的：1）取半导体纳米粒子，制备核壳纳米粒子；2）制备氨基化核壳纳米粒子；3）将氨基化核壳纳米粒子分散于5~20mL的浓度为10~25%戊二醛溶液中，在20~60℃的条件下搅拌4~16小时；离心，收集产物，得共振拉曼散射‑红外吸收双模纳米探针；所述的共振拉曼散射‑红外吸收双模纳米探针在生物分子识别方面的应用；一种抗原检测方法，它包括：制备特异性抗原抗体纳米探针分散液；制备固定特异性抗体的基底；组装分散液与基底，获得固定有探针的基底，进行检测分析。
Description
技术领域
本发明属于纳米生物技术领域，具体涉及一种共振拉曼散射-红外吸收双模纳米探针的制备及应用。
背景技术
疾病相关生物标志物的识别和定量分析对一些重大疾病的早期诊断、病情监测和疗效评估有着至关重要的意义。近年来，快速发展的纳米科学为生物标志物的临床检测注入了新的活力。基于多样的纳米探针衍生出了一系列有前途的检测方法，如酶联免疫吸附法、电化学检测法、电化学发光检测法和比色检测法。虽然这些单模探针可实现对生物标志物的灵敏检测，但单信号输出模式抗干扰能力有限，易出现假阳性或假阴性结果。构建能够提供两种读出信号的双模纳米探针是解决这一问题的一种可行方案。双模纳米探针可提供两个独立的输出信号，具有更大的信息通量，两个输出信号间可相互验证，提高检测结果的准确性。目前已开发出荧光-比色、电化学-光电化学和荧光-表面共振拉曼等多种双模探针并被应用于生物标志物的检测。然而，双模纳米探针的开发仍处于起步阶段。荧光检测中有机染料的光漂白、光电化学检测中光源与电极之间的相对位置变化、电化学检测中电解液的蒸发以及某些吸附污染物引起的过电位等因素对检测信号的准确性产生了一些不良影响。因此，开发具有可靠读出信号的新型双模纳米探针是很有价值的。某些无机半导体纳米材料在特定的激发光辐照下会产生共振拉曼散射现象，在对应的拉曼光谱中可观察到等间距的多声子共振拉曼谱线，具有显著的指纹特征和良好的抗干扰能力。使用SiO2包覆这类无机半导体纳米材料，不仅能有效改善其水溶性和化学稳定性，还可以引入SiO2独特的红外指纹吸收作为另一种输出信号。这种SiO2的红外指纹吸收来源于其结构中Si-O-Si键的反对称伸缩振动中的横向光学声子模和纵向光学声子模，光谱轮廓特征明显且不会对来源于无机半导体纳米材料的共振拉曼散射信号造成干扰。因此，将无机半导体纳米材料和SiO2进行复合，有望构建一种具有共振拉曼散射和红外吸收双输出信号的纳米探针。该探针可以用于蛋白、DNA、RNA等生物分子的定性及定量分析。两种输出信号互相间没有干扰，能够互相验证，优势互补，从而提高了检测准确性，扩宽了检测线性范围，可在设备资源受限的情况下更为灵活地选择检测模式。
发明内容
本发明的目的是为解决现有单模及双模纳米探针准确性不足，而提供一种制备工艺简单、抗干扰能力强、兼具共振拉曼散射和红外吸收两种输出信号的双模纳米探针及检测特异性抗原的方法。
共振拉曼散射-红外吸收双模纳米探针，是由下述方法制备的：
1）取半导体纳米粒子，分散于浓度为0.05~0.3g/mL的PVP戊醇溶液中，加入乙醇、氨水和浓度为0.1~0.3g/mL柠檬酸钠水溶液，搅拌均匀；加入正硅酸乙酯，搅拌均匀，在20~80℃的条件下静置反应1~16小时；离心，去离子水漂洗，收集产物，得半导体@二氧化硅核壳纳米粒子；
2）将步骤1）制备的1mg核壳纳米粒子分散于20mL溶剂中，加入5μL的3-氨丙基三乙氧基硅氧烷，20~80℃下搅拌1~16小时，离心，并使用去离子水漂洗，收集产物，得氨基化半导体@二氧化硅核壳纳米粒子；所述的溶剂为异丙醇、正戊醇、正丁醇、异丁醇、异戊醇、正己醇或异己醇；
3）将步骤2）中获得的氨基化核壳纳米粒子分散于5~20mL的浓度为10~25 %戊二醛溶液中，在20~60℃的条件下搅拌4~16小时；离心，收集产物，得共振拉曼散射-红外吸收双模纳米探针；
步骤1）所述的半导体纳米粒子、正戊醇、聚乙烯吡咯烷酮、乙醇、氨水、柠檬酸钠和正硅酸乙酯，质量比为1:4000:500:400:50:1:45~1:12000:2000:1500:200:3:200；
所述的半导体纳米粒子为ZnS、ZnSe、ZnTe、CdS、CdSe或CdTe；
所述的半导体纳米粒子为ZnS；制备方法为：将1.83g醋酸锌、1.56g硫化钠和0.28g巯基丙酸溶解在40mL水中，在90℃下反应3小时；冷却至室温后，使用去离子水漂洗并收集产物，得ZnS纳米粒子。
所述的共振拉曼散射-红外吸收双模纳米探针在生物分子识别方面的应用。
一种抗原检测方法，它包括：
1）纳米探针分散液制备：取权利要求1所述的共振拉曼散射-红外吸收双模纳米探针，加入1mL浓度为0.01~2 mg/mL的抗体或适体溶液，4~40℃下孵育1~24小时；离心漂洗后，获得特异性抗原抗体纳米探针分散液；
2）基底制备：表面涂覆有金层的单晶硅基底浸泡于硫辛酸乙醇溶液中10~15小时，漂洗，再浸泡于0.1g/mL的碳二亚胺和0.01 g/mL的N-羟基丁二酰亚胺混合水溶液中0.5~1小时，漂洗，再浸泡于步骤1）所述的抗体或适体溶液中，35~45℃孵育0.5~2小时，加入牛血清白蛋白溶液封闭剩余活性位点，得基底；
3）免疫识别：将1mL待测的特异性抗原溶液与步骤1）中获得的纳米探针分散液混合，于37~45℃下孵育0.5~1.5小时，加入40~60μL浓度为0.01g/mL的牛血清白蛋白溶液封闭剩余活性位点，离心、漂洗，收集产物；与步骤2）中获得的基底混合，37~45℃下孵育0.5~1.5小时，完成免疫识别组装，获得固定纳米探针的基底；
4）测试步骤3）中获得的固定有纳米探针的基底的红外吸收光谱，获取位于1099cm-1处的吸收峰的吸光度值作为分析结果；
5）在激发光照射下测试步骤3）中获得的固定纳米探针的基底的共振拉曼光谱，获取共振拉曼散射强度作为分析结果，识别待测的特异性抗原；
步骤5）所述的激发光，波长为325nm、488nm或532nm。
本发明提供了共振拉曼散射-红外吸收双模纳米探针，是由下述方法制备的：1）取半导体纳米粒子，制备半导体@二氧化硅核壳纳米粒子；2）将步骤1）制备的1mg核壳纳米粒子分散于20mL溶剂中，加入5μL的3-氨丙基三乙氧基硅氧烷，20~80℃下搅拌1~16小时，离心，并使用去离子水漂洗，收集产物，得氨基化半导体@二氧化硅核壳纳米粒子；3）将氨基化核壳纳米粒子分散于5~20mL的浓度为10~25%戊二醛溶液中，在20~60℃的条件下搅拌4~16小时；离心，收集产物，得共振拉曼散射-红外吸收双模纳米探针；所述的共振拉曼散射-红外吸收双模纳米探针在生物分子识别方面的应用；一种抗原检测方法，它包括：制备特异性抗原抗体纳米探针分散液；制备固定特异性抗体的基底；组装分散液与基底，获得固定有探针的基底，进行检测分析；本发明共振拉曼散射-红外吸收双模纳米探针具有以下优点：1）双模探针所提供的共振拉曼散射信号和红外吸收信号均来源于其组分自身结构的振转光谱，属于材料的指纹信号，具有明显的可识别特征和优异的抗干扰能力；2）双输出信号之间没有干扰且能够互相验证，确保了检测结果的准确性；3）双输出信号之间优势互补，拓宽了检测线性范围；4）信号输出方式有两种，可根据需要和检测条件自主调整和选择；5）适用范围广，本发明所述的双模纳米探针可根据需求调整表面识别单元，应用于蛋白、DNA和RNA等多种生物分子的定性和定量检测，更有望应用于药物筛选、司法鉴定、食品安全和环境监测等领域。
附图说明
图1共振拉曼散射-红外吸收双模纳米探针检测生物标志物示意图。
具体实施方式
实施例1 共振拉曼散射-红外吸收双模纳米探针的制备及抗原检测方法
1、制备方法
共振拉曼散射-红外吸收双模纳米探针，是由下述方法制备的：
1）ZnS纳米粒子制备：将1.83g醋酸锌、1.56g硫化钠和0.28g巯基丙酸溶解在40mL水中，装入反应釜，在90℃下反应3小时；待反应釜冷却至室温后，使用去离子水漂洗并收集产物，得ZnS纳米粒子；
2）ZnS@SiO2核壳纳米粒子制备：将1mg ZnS纳米粒子分散于10mL浓度为0.1g/mL的PVP戊醇溶液中，加入1mL乙醇、0.05mL氨水和1.2mL浓度为0.13g/mL柠檬酸钠水溶液，搅拌均匀；加入0.1mL正硅酸乙酯，再次搅拌均匀，放置于20℃下反应1小时，离心，并使用去离子水漂洗，收集产物，得ZnS@SiO2核壳纳米粒子；
3）氨基化的ZnS@SiO2核壳纳米粒子的制备：将1mg ZnS@SiO2核壳纳米粒子分散于20mL异丙醇中，加入5μL的3-氨丙基三乙氧基硅氧烷，于20℃下搅拌反应1小时，离心，并使用去离子水漂洗，收集产物，得氨基化的ZnS@SiO2核壳纳米粒子；
4）将步骤3）中获得的氨基修饰的ZnS@SiO2核壳纳米粒子分散于5 mL浓度10%的戊二醛溶液中，在20℃下搅拌反应4小时；离心，收集产物，得共振拉曼散射-红外吸收双模纳米探针。
2、前列腺特异性抗原检测
振拉曼散射-红外吸收双模纳米探针检测前列腺特异性抗原，具体步骤如下：
1）纳米探针分散液制备：取共振拉曼散射-红外吸收双模纳米探针0.1mg，加入1mL浓度为0.01 mg/mL的前列腺特异性抗原抗体溶液，40℃下孵育1小时，离心保留沉淀、漂洗后，获得ZnS@SiO2@前列腺特异性抗原抗体纳米探针分散液；
2）基底制备：表面涂覆有金层的单晶硅基底浸泡于0.1g/mL的硫辛酸乙醇溶液中12小时，漂洗后浸泡于0.1g/mL的碳二亚胺和0.01 g/mL的N-羟基丁二酰亚胺混合水溶液中0.5小时；再次漂洗后将基底浸泡于0.02mg/mL的前列腺特异性抗原抗体溶液中，40℃孵育1小时，加入0.01g/mL的牛血清白蛋白溶液封闭剩余活性位点；
3）免疫识别：将1mL待测的前列腺特异性抗原溶液与步骤1）中获得的纳米探针分散液混合并于40℃下孵育1小时，加入50μL浓度为0.01g/mL的牛血清白蛋白溶液封闭剩余活性位点，离心漂洗，收集；与步骤2）中获得的基底混合，40℃孵育1小时完成免疫识别组装；
4）以衰减全反射模式测试步骤3）中获得的固定有纳米探针的基底的红外吸收光谱，获取位于1099cm-1处的吸收峰的吸光度值作为分析结果；
5）在325nm波长的激发光照射下测试步骤3）中获得的固定有纳米探针的基底的共振拉曼光谱，获取348cm-1处的共振拉曼散射强度作为分析结果。两种信号对前列腺特异性抗原的检测限可达10 fg/mL，检测范围从10 fg/mL至100 ng/mL。
实施例2共振拉曼散射-红外吸收双模纳米探针的制备及抗原检测方法
制备共振拉曼散射-红外吸收双模纳米探针的原料ZnS纳米粒子为市售，尺寸为10~60nm；其余制备于检测方法同实施例1。最终两种信号对前列腺特异性抗原的检测限可达50 fg/mL，检测范围从50 fg/mL至100 ng/mL。
实施例3共振拉曼散射-红外吸收双模纳米探针的制备及抗原检测方法
将实施例1共振拉曼散射-红外吸收双模纳米探针制备的步骤2）中的反应温度更换为80℃，其余步骤和操作不变。最终两种信号对前列腺特异性抗原的检测限可达10 fg/mL，检测范围从10 fg/mL至100 ng/mL。
实施例4共振拉曼散射-红外吸收双模纳米探针的制备及抗原检测方法
将实施例1共振拉曼散射-红外吸收双模纳米探针制备的步骤2）中的反应时间更换为16小时，其余步骤和操作不变。最终两种信号对前列腺特异性抗原的检测限可达10fg/mL，检测范围从10 fg/mL至100 ng/mL。
实施例5共振拉曼散射-红外吸收双模纳米探针的制备及抗原检测方法
将实施例1共振拉曼散射-红外吸收双模纳米探针制备的步骤2）中的10 mL 浓度为0.1 g/mL的PVP戊醇溶液更换为30 mL浓度为0.3 g/mL的PVP戊醇溶液，其余步骤和操作不变。最终两种信号对前列腺特异性抗原的检测限可达10 fg/mL，检测范围从10 fg/mL至100 ng/mL。
实施例6共振拉曼散射-红外吸收双模纳米探针的制备及抗原检测方法
将实施例1共振拉曼散射-红外吸收双模纳米探针制备的步骤2）中的乙醇添加量更换为2 mL，其余步骤和操作不变。最终两种信号对前列腺特异性抗原的检测限可达10fg/mL，检测范围从10 fg/mL至100 ng/mL。
实施例7共振拉曼散射-红外吸收双模纳米探针的制备及抗原检测方法
将实施例1共振拉曼散射-红外吸收双模纳米探针制备的步骤2）中的浓度为0.13g/mL柠檬酸钠水溶液更换为浓度为0.26 g/mL柠檬酸钠水溶液，其余步骤和操作不变。最终两种信号对前列腺特异性抗原的检测限可达20 fg/mL，检测范围从20 fg/mL至100 ng/mL。
实施例8共振拉曼散射-红外吸收双模纳米探针的制备及抗原检测方法
将实施例1共振拉曼散射-红外吸收双模纳米探针制备的步骤2）中的氨水添加量更换为0.5 mL，其余步骤和操作不变。最终两种信号对前列腺特异性抗原的检测限可达10fg/mL，检测范围从10 fg/mL至100 ng/mL。
实施例9共振拉曼散射-红外吸收双模纳米探针的制备及抗原检测方法
将实施例1共振拉曼散射-红外吸收双模纳米探针制备的步骤2）中的0.1mL正硅酸乙酯更换为0.45 mL正硅酸乙酯，其余步骤和操作不变。最终两种信号对前列腺特异性抗原的检测限可达100 fg/mL，检测范围从100 fg/mL至50 ng/mL。
实施例10共振拉曼散射-红外吸收双模纳米探针的制备及抗原检测方法
将实施例1共振拉曼散射-红外吸收双模纳米探针制备的步骤2）中的PVP戊醇溶液浓度更换为0.05 g/mL，其余步骤和操作不变。最终两种信号对前列腺特异性抗原的检测限可达20 fg/mL，检测范围从20 fg/mL至100 ng/mL。实施例11共振拉曼散射-红外吸收双模纳米探针的制备及抗原检测方法
将实施例1共振拉曼散射-红外吸收双模纳米探针制备的步骤3）中的3-氨丙基三乙氧基硅氧烷的添加量更换为50 μL，其余步骤和操作不变。最终两种信号对前列腺特异性抗原的检测限可达10 fg/mL，检测范围从10 fg/mL至100 ng/mL。
实施例12共振拉曼散射-红外吸收双模纳米探针的制备及抗原检测方法
将实施例1共振拉曼散射-红外吸收双模纳米探针制备的步骤3）中的反应温度更换为80 ℃，其余步骤和操作不变。最终两种信号对前列腺特异性抗原的检测限可达20 fg/mL，检测范围从20 fg/mL至100 ng/mL。
实施例13共振拉曼散射-红外吸收双模纳米探针的制备及抗原检测方法
将实施例1共振拉曼散射-红外吸收双模纳米探针制备的步骤3）中的反应时间更换为16小时，其余步骤和操作不变。最终两种信号对前列腺特异性抗原的检测限可达10fg/mL，检测范围从10 fg/mL至100 ng/mL。
实施例14共振拉曼散射-红外吸收双模纳米探针的制备及抗原检测方法
将实施例1共振拉曼散射-红外吸收双模纳米探针制备的步骤3）中分散ZnS@SiO2核壳纳米粒子的溶剂更换为正丁醇，其余步骤和操作不变。最终两种信号对前列腺特异性抗原的检测限可达10 fg/mL，检测范围从10 fg/mL至100 ng/mL。
实施例15共振拉曼散射-红外吸收双模纳米探针的制备及抗原检测方法
将实施例1共振拉曼散射-红外吸收双模纳米探针制备的步骤3）中分散ZnS@SiO2核壳纳米粒子的溶剂更换为异丁醇，其余步骤和操作不变。
最终两种信号对前列腺特异性抗原的检测限可达100 fg/mL，检测范围从100 fg/mL至100 ng/mL。
实施例16共振拉曼散射-红外吸收双模纳米探针的制备及抗原检测方法
将实施例1共振拉曼散射-红外吸收双模纳米探针制备的步骤3）中分散ZnS@SiO2核壳纳米粒子的溶剂更换为异戊醇，其余步骤和操作不变。最终两种信号对前列腺特异性抗原的检测限可达50 fg/mL，检测范围从50 fg/mL至100 ng/mL。
实施例17共振拉曼散射-红外吸收双模纳米探针的制备及抗原检测方法
将实施例1共振拉曼散射-红外吸收双模纳米探针制备的步骤3）中分散ZnS@SiO2核壳纳米粒子的溶剂更换为正己醇，其余步骤和操作不变。最终两种信号对前列腺特异性抗原的检测限可达100 fg/mL，检测范围从100 fg/mL至100 ng/mL。
实施例18共振拉曼散射-红外吸收双模纳米探针的制备及抗原检测方法
将实施例1共振拉曼散射-红外吸收双模纳米探针制备的步骤3）中分散ZnS@SiO2核壳纳米粒子的溶剂更换为异己醇，其余步骤和操作不变。最终两种信号对前列腺特异性抗原的检测限可达10 fg/mL，检测范围从200 fg/mL至100 ng/mL。
实施例19共振拉曼散射-红外吸收双模纳米探针的制备及抗原检测方法
将实施例1共振拉曼散射-红外吸收双模纳米探针制备的步骤3）中分散ZnS@SiO2核壳纳米粒子的溶剂量更换为30 mL，其余步骤和操作不变。最终两种信号对前列腺特异性抗原的检测限可达10 fg/mL，检测范围从10 fg/mL至100 ng/mL。
实施例20共振拉曼散射-红外吸收双模纳米探针的制备及抗原检测方法
将实施例1共振拉曼散射-红外吸收双模纳米探针制备的步骤4）中所使用的戊二醛溶液浓度更换为25%，其余步骤和操作不变。最终两种信号对前列腺特异性抗原的检测限可达20 fg/mL，检测范围从10 fg/mL至100 ng/mL。
实施例21共振拉曼散射-红外吸收双模纳米探针的制备及抗原检测方法
将实施例1共振拉曼散射-红外吸收双模纳米探针制备的步骤4）中所使用的戊二醛溶液量更换为20 mL，其余步骤和操作不变。最终两种信号对前列腺特异性抗原的检测限可达10 fg/mL，检测范围从10 fg/mL至100 ng/mL。
实施例22共振拉曼散射-红外吸收双模纳米探针的制备及抗原检测方法
将实施例1共振拉曼散射-红外吸收双模纳米探针制备的步骤4）中所使用的前列腺特异性抗原抗体溶液浓度更换为2 mg/mL，其余步骤和操作不变。最终两种信号对前列腺特异性抗原的检测限可达20 fg/mL，检测范围从10 fg/mL至100 ng/mL。
实施例23共振拉曼散射-红外吸收双模纳米探针的制备及抗原检测方法
将实施例1共振拉曼散射-红外吸收双模纳米探针制备的步骤4）中加入前列腺特异性抗原抗体溶液后的温度更换为4 ℃，孵育时间更换为24小时，其余步骤和操作不变。最终两种信号对前列腺特异性抗原的检测限可达10 pg/mL，检测范围从10 fg/mL至100 ng/mL。
实施例24共振拉曼散射-红外吸收双模纳米探针的制备及抗原检测方法
将实施例1中制备的固定有前列腺特异性抗体的单晶硅基底更换为修饰有前列腺特异性抗原抗体的Fe3O4纳米粒子；免疫识别组装后通过磁铁分离产物；其余步骤和操作同实施例1。最终两种信号对前列腺特异性抗原的检测限可达10 fg/mL，检测范围从10 fg/mL至50 ng/mL。
实施例25共振拉曼散射-红外吸收双模纳米探针的制备及抗原检测方法
将实施例2中市售ZnS纳米粒子更换为购买的ZnSe纳米粒子，其余步骤和操作不变。最终两种信号对前列腺特异性抗原的检测限可达20 fg/mL，检测范围从20 fg/mL至100ng/mL。
实施例26共振拉曼散射-红外吸收双模纳米探针的制备及抗原检测方法
将实施例2中市售ZnS纳米粒子更换为购买的ZnTe纳米粒子，其余步骤和操作不变。最终两种信号对前列腺特异性抗原的检测限可达10 fg/mL，检测范围从10 fg/mL至100ng/mL。
实施例27共振拉曼散射-红外吸收双模纳米探针的制备及抗原检测方法
将实施例2中市售ZnS纳米粒子更换为购买的CdS纳米粒子，其余步骤和操作不变。最终两种信号对前列腺特异性抗原的检测限可达20 fg/mL，检测范围从20 fg/mL至100ng/mL。实施例28共振拉曼散射-红外吸收双模纳米探针的制备及抗原检测方法
将实施例2中市售ZnS纳米粒子更换为购买的CdSe纳米粒子，其余步骤和操作不变。最终两种信号对前列腺特异性抗原的检测限可达20 fg/mL，检测范围从10 fg/mL至100ng/mL。
实施例29共振拉曼散射-红外吸收双模纳米探针的制备及抗原检测方法
将实施例2中市售ZnS纳米粒子更换为购买的CdTe纳米粒子，其余步骤和操作不变。最终两种信号对前列腺特异性抗原的检测限可达50 fg/mL，检测范围从10 fg/mL至100ng/mL。实施例30共振拉曼散射-红外吸收双模纳米探针的制备及抗原检测方法
将实施例24中修饰有前列腺特异性抗原抗体的Fe3O4纳米粒子更换为修饰有前列腺特异性抗原抗体的MnFe2O4纳米粒子，其余步骤和操作不变。最终两种信号对前列腺特异性抗原的检测限可达20 fg/mL，检测范围从20 fg/mL至50 ng/mL。
实施例31共振拉曼散射-红外吸收双模纳米探针的制备及抗原检测方法
将实施例1中用作识别单元的前列腺特异性抗原抗体更换为前列腺特异性抗原适体，其余步骤和操作不变。最终两种信号对前列腺特异性抗原的检测限可达10 fg/mL，检测范围从10 fg/mL至100 ng/mL。
实施例32 共振拉曼散射-红外吸收双模纳米探针的制备及甲胎蛋白检测
将实施例1中用作识别单元的前列腺特异性抗原抗体更换为甲胎蛋白抗体，将前列腺特异性抗原更换为甲胎蛋白，其余步骤和操作不变。最终两种信号对前列腺特异性抗原的检测限可达20 fg/mL，检测范围从20 fg/mL至100 ng/mL。实施例33 共振拉曼散射-红外吸收双模纳米探针的制备及甲胎蛋白检测
将实施例32中前列腺特异性抗原中用作识别单元的甲胎蛋白抗体更换为甲胎蛋白适体，其余步骤和操作不变。最终两种信号对前列腺特异性抗原的检测限可达10 fg/mL，检测范围从10 fg/mL至100 ng/mL。实施例34 共振拉曼散射-红外吸收双模纳米探针的制备及DNA检测
将实施例1中前列腺特异性抗原抗体更换为适体，将前列腺特异性抗原更换为待测单链DNA，其余步骤和操作不变。最终两种信号对前列腺特异性抗原的检测限可达10 fg/mL，检测范围从10 fg/mL至100 ng/mL。
实施例35 共振拉曼散射-红外吸收双模纳米探针的制备及RNA检测
将实施例1中前列腺特异性抗原抗体更换为适体，将前列腺特异性抗原更换为待测单链RNA，其余步骤和操作不变。最终两种信号对前列腺特异性抗原的检测限可达10 pg/mL，检测范围从10 pg/mL至10 ng/mL。
Claims (7)
1.共振拉曼散射-红外吸收双模纳米探针，是由下述方法制备的：
1）取半导体纳米粒子，分散于浓度为0.05~0.3g/mL的PVP戊醇溶液中，加入乙醇、氨水和浓度为0.1~0.3g/mL柠檬酸钠水溶液，搅拌均匀；加入正硅酸乙酯，搅拌均匀，在20~80℃的条件下静置反应1~16小时；离心，去离子水漂洗，收集产物，得半导体@二氧化硅核壳纳米粒子；
2）将步骤1）制备的1mg核壳纳米粒子分散于20mL溶剂中，加入5μL的3-氨丙基三乙氧基硅氧烷，20~80℃下搅拌1~16小时，离心，并使用去离子水漂洗，收集产物，得氨基化半导体@二氧化硅核壳纳米粒子；所述的溶剂为异丙醇、正戊醇、正丁醇、异丁醇、异戊醇、正己醇或异己醇；
3）将步骤2）中获得的氨基化核壳纳米粒子分散于5~20mL的浓度为10~25 %戊二醛溶液中，在20~60℃的条件下搅拌4~16小时；离心，收集产物，得共振拉曼散射-红外吸收双模纳米探针。
2.根据权利要求1所述的共振拉曼散射-红外吸收双模纳米探针，其特征在于：步骤1）所述的半导体纳米粒子、正戊醇、聚乙烯吡咯烷酮、乙醇、氨水、柠檬酸钠和正硅酸乙酯，质量比为1:4000:500:400:50:1:45~1:12000:2000:1500:200:3:200。
3.根据权利要求2所述的共振拉曼散射-红外吸收双模纳米探针，其特征在于：所述的半导体纳米粒子为ZnS、ZnSe、ZnTe、CdS、CdSe或CdTe。
4.根据权利要求3所述的共振拉曼散射-红外吸收双模纳米探针，其特征在于：所述的半导体纳米粒子为ZnS；制备方法为：将1.83g醋酸锌、1.56g硫化钠和0.28g巯基丙酸溶解在40mL水中，在90℃下反应3小时；冷却至室温后，使用去离子水漂洗并收集产物，得ZnS纳米粒子。
5.权利要求1所述的共振拉曼散射-红外吸收双模纳米探针在生物分子识别方面的应用。
6.一种抗原检测方法，它包括：
1）纳米探针分散液制备：取权利要求1所述的共振拉曼散射-红外吸收双模纳米探针，加入1mL浓度为0.01~2 mg/mL的抗体或适体溶液，4~40℃下孵育1~24小时；离心漂洗后，获得特异性抗原抗体纳米探针分散液；
2）基底制备：表面涂覆有金层的单晶硅基底浸泡于硫辛酸乙醇溶液中10~15小时，漂洗，再浸泡于0.1g/mL的碳二亚胺和0.01 g/mL的N-羟基丁二酰亚胺混合水溶液中0.5~1小时，漂洗，再浸泡于步骤1）所述的抗体或适体溶液中，35~45℃孵育0.5~2小时，加入牛血清白蛋白溶液封闭剩余活性位点，得基底；
3）免疫识别：将1mL待测的特异性抗原溶液与步骤1）中获得的纳米探针分散液混合，于37~45℃下孵育0.5~1.5小时，加入40~60μL浓度为0.01g/mL的牛血清白蛋白溶液封闭剩余活性位点，离心、漂洗，收集产物；与步骤2）中获得的基底混合，37~45℃下孵育0.5~1.5小时，完成免疫识别组装，获得固定纳米探针的基底；
4）测试步骤3）中获得的固定有纳米探针的基底的红外吸收光谱，获取位于1099 cm-1处的吸收峰的吸光度值作为分析结果；
5）在激发光照射下测试步骤3）中获得的固定纳米探针的基底的共振拉曼光谱，获取共振拉曼散射强度作为分析结果，识别待测的特异性抗原。
7.根据权利要求5所述的一种抗原检测方法，其特征在于：步骤5）所述的激发光，波长为325nm、488nm或532nm。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202210218621.1A CN114720449A (zh) | 2022-03-08 | 2022-03-08 | 一种共振拉曼散射-红外吸收双模纳米探针的制备及应用 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202210218621.1A CN114720449A (zh) | 2022-03-08 | 2022-03-08 | 一种共振拉曼散射-红外吸收双模纳米探针的制备及应用 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN114720449A true CN114720449A (zh) | 2022-07-08 |
Family
ID=82238166
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202210218621.1A Pending CN114720449A (zh) | 2022-03-08 | 2022-03-08 | 一种共振拉曼散射-红外吸收双模纳米探针的制备及应用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN114720449A (zh) |
-
2022
- 2022-03-08 CN CN202210218621.1A patent/CN114720449A/zh active Pending
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Rousserie et al. | Semiconductor quantum dots for multiplexed bio-detection on solid-state microarrays | |
| JPH0754324B2 (ja) | 液体試料中の抗原および／または抗体を測定するための試験用剤 | |
| KR101486149B1 (ko) | 경쟁 면역반응을 이용한 표면-증강 라만 산란 기반의 질병 진단용 마커 검출 방법 | |
| CN110596060B (zh) | 一种检测前列腺特异性抗原的光谱分析中荧光传感器的构建方法及其应用 | |
| CN110763834A (zh) | 一种检测免疫标志物含量的方法、试剂和试剂盒 | |
| CN110736734A (zh) | 一种cTnI均相化学发光检测试剂盒、检测方法与装置 | |
| Tang et al. | Magnetic bead-based fluorescence immunoassay for aflatoxin B 1 in food using biofunctionalized rhodamine B-doped silica nanoparticles | |
| CN108445216B (zh) | 一种人抗缪勒氏管激素测定试剂盒及其制备方法与应用 | |
| CN108802360B (zh) | 一种血清中可交换铜和铜蓝蛋白一步同时检测用试剂盒、制备方法及应用 | |
| Yin et al. | A microfluidic chip-based MRS immunosensor for biomarker detection via enzyme-mediated nanoparticle assembly | |
| JP2005502871A (ja) | レーザ励起蛍光検出毛管電気泳動法を利用する粒子均一アッセイ法 | |
| CN110632040B (zh) | 一种血清中前列腺特异性抗原的分析方法 | |
| CN106771199B (zh) | 一种用于非诊断目的的检测肿瘤标志物的比色免疫分析方法 | |
| US20230305001A1 (en) | Ultra-sensitive digital rapid chromatographic assay system and method for analytes detection | |
| CN110672850A (zh) | 甲型肝炎病毒抗体IgM检测试剂盒及其制备方法 | |
| CN115343484B (zh) | 一种超快速与高灵敏检测促甲状腺激素的化学发光免疫分析方法 | |
| CN114720449A (zh) | 一种共振拉曼散射-红外吸收双模纳米探针的制备及应用 | |
| CN116183934A (zh) | 一种检测阿尔茨海默病标志物Aβ1-42的试剂盒 | |
| CN105929181A (zh) | 一种基于纳米材料的生物检材中海洛因的检验方法 | |
| EP1994407A1 (en) | Method for determination of concentration, charge or unit size of a substance | |
| CN112683968A (zh) | 一种检测唾液酸化糖链抗原kl-6铱纳米点电化学发光传感器的制备及应用 | |
| CN113125704A (zh) | 一种均相化学发光测定试剂盒及其应用 | |
| KR101743150B1 (ko) | 체외진단 시약용 형광 실리카 나노입자, 이의 제조 방법 및 이를 이용하는 분자 면역 진단 키트 | |
| CN109682964A (zh) | Au@Fe3O4MNPs-Ab2纳米酶检测探针的制备方法及检测多组分抗原的方法 | |
| Hu et al. | Ultra-sensitive fluorescent immunoassay based on bright AIE nanoparticle for biomarkers detection and quantification |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination |