CN114717217A - 包括具有木聚糖酶活性的多肽和具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的多肽的组合物 - Google Patents

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Abstract

披露了包括具有木聚糖酶活性的多肽和具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的多肽的组合物，用于在例如动物饲料中使用。披露了具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的多肽、具有木聚糖酶活性的多肽以及编码这些多肽的多核苷酸。披露了包括这些多核苷酸的核酸构建体、载体以及宿主细胞，连同产生和使用这些多肽的方法。

Description

包括具有木聚糖酶活性的多肽和具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性 的多肽的组合物
本申请是申请日为2015年12月18日，申请号为201580068512.4，发明名称为“包括具有木聚糖酶活性的多肽和具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的多肽的组合物”的中国发明专利申请的分案申请。
对序列表的引用
本申请包含一个计算机可读形式的序列表，将其通过引用结合在此。
发明背景
发明领域
本发明涉及包括具有木聚糖酶活性的多肽和具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的多肽的组合物，用于在例如动物饲料中使用。本发明进一步涉及具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的多肽、具有木聚糖酶活性的多肽以及编码这些多肽的多核苷酸。本发明还涉及包括这些多核苷酸的核酸构建体、载体以及宿主细胞，连同产生和使用这些多肽的方法。
相关技术描述
木聚糖是在所有陆生植物中发现的半纤维素(波普尔(Popper)和陶西(Tuohy)，植物生理学(Plant Physiol.)，2010，153:373-383)。它们在次生细胞壁和木材细胞中尤其丰富。在具有II型细胞壁的草中，葡糖醛酸阿拉伯木聚糖是主要的半纤维素，并且在许多基于草的食物和饲料产品中作为可溶性或不可溶性膳食纤维存在。
植物木聚糖具有β-1,4-连接的吡喃木糖主链，该主链可以在O2或O3位置以物种和组织特异性方式被阿拉伯糖、4-O-甲基-葡萄糖醛酸、葡萄糖醛酸和乙酸取代。黍亚科(Panicoideae)与经济上重要的物种(例如玉米和高粱)的富含淀粉的种子在它们的细胞壁中具有特殊类型的高度取代的木聚糖。与其中在阿拉伯木聚糖主链中超过60％的木糖单元是未被取代的小麦面粉相比，未被取代的主链木糖的相应百分比在玉米核木聚糖中为20％-30％，并且在高粱中为35％-40％(惠思曼(Huismann) 等人，碳水化合物聚合物(Carbohydrate Polymers)，2000，42:269-279)。此外，在玉米和高粱中，这些木聚糖侧链可以比典型的其他木聚糖的单一阿拉伯糖或葡糖醛酸取代更长。这种附加的侧链复杂性通常是由于结合至该侧链阿拉伯糖或(4-O- 甲基)-葡萄糖醛酸的L-和D-半乳糖以及D-木糖造成的。玉米核木聚糖中约每十一分之一的阿拉伯糖还被阿魏酸酯化，并且约每五分之一木糖进行乙酰化(阿格尔 (Agger)等人农业与食品化学杂志(J.Agric.Food Chem)，2010，58:6141-6148)。所有组合的这些因素使得玉米和高粱中高度取代的木聚糖对抗由传统的木聚糖酶引起的降解。
基于序列相似性，将负责基于碳水化合物的聚合物的水解的已知的酶分类为酶家族(www.cazy.org)。家族内的酶共享一些特征，例如3D折叠，并且它们通常共同具有相同的反应机制。一些GH家族具有狭窄或单一底物特异性，然而其他家族具有宽泛的底物特异性。主要具有内切-木聚糖酶活性的这些酶之前已描述于糖苷水解酶家族(GH)5、8、10、11和30中。主要具有α-阿拉伯呋喃糖苷酶活性的这些酶之前已描述于糖苷水解酶家族(GH)3、43、51、54和62中。
通常使用可商购的GH10和GH11木聚糖酶来分解阿拉伯木聚糖的木糖主链。在动物饲料中，这导致谷物细胞壁的降解，伴随着随后改进包封在细胞内的营养素释放(淀粉和蛋白质)。木聚糖的降解还导致木糖低聚物的形成，木糖低聚物可用于后肠发酵，并且因此有助于动物获得更多可消化的能量。然而，这种木聚糖酶对侧链位阻敏感，并且虽然它们有效地降解来自小麦的阿拉伯木聚糖，但是它们对在黍亚科物种(例如玉米或高粱)的种子中发现的阿拉伯木聚糖不是非常有效的。
WO 2009/108941提出了超过500种具有许多如下活性的不同多肽序列在众多不同应用中的用途，所述活性是如纤维素酶、木质素酶、β-葡糖苷酶、半纤维素酶、木聚糖酶、α-淀粉酶、淀粉葡糖苷酶、果胶酸裂解酶、角质酶、脂肪酶、果胶酶或产麦芽糖α-淀粉酶活性。WO 2009/018537提出了多种具有不同活性的糖基水解酶和阿魏酸酯酶用于将木质纤维素生物质转化成可发酵的糖的用途。WO 2013/182669 披露了具有与嗜热团丝核菌(Myriococcum thermophilum)菌株CBS 389.93不同活性的多种糖基水解酶以及它们在生物质处理中的用途。WO 2009/108941提出了分泌具有不同活性的多种酶的酵母菌株用于生物质水解的用途。
在全世界范围内，玉米被用于动物饲料中，并且因此对发现能分解细胞壁中的高度支链化的木聚糖主链，以便释放更多陷在细胞壁中的淀粉和其他营养素的新的解决方案存在需求。
发明概述
本发明涉及包括一种或多种具有木聚糖酶活性的GH10或GH11多肽和一种或多种具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽的组合物，其中：
(a)GH62多肽包括基序 [H/Y][L/M]F[F/S][A/C/H/S/T/V][A/D/G/N/R]D[D/E/N]G(SEQ ID NO:1)；
(b)GH10或GH11多肽与GH62多肽一起从脱脂脱淀粉玉蜀黍(DFDSM)中溶解至少2.0％木糖；和
(c)GH10或GH11多肽与GH62多肽一起从DFDSM中溶解比当不存在GH62 多肽时GH10或GH11多肽可以溶解的多至少2倍的木糖；
其中(b)和(c)在如下反应条件下进行：
i)25mg GH10或GH11多肽/kg DFDSM，
ii)12.5mg GH62多肽/kg DFDSM，以及
iii)在40℃、pH 5下孵育4小时。
本申请进一步涉及具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的分离的多肽、具有木聚糖酶活性的分离的多肽、包括具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性和/或木聚糖酶活性的多肽的组合物、包括本发明的一种或多种多肽的动物饲料和动物饲料添加剂、改善动物性能的方法(包括向动物给予本发明的组合物)；用于改善动物饲料的营养价值的方法(包括向动物给予本发明的组合物)；从基于植物的材料中溶解木糖的方法(包括用本发明的组合物处理来自黍亚科的基于植物的材料)；从基于植物的材料中释放淀粉的方法(包括用本发明的组合物处理来自黍亚科的基于植物的材料)；用于改善动物饲料的营养价值的方法(包括向饲料中添加本发明的组合物)；制备动物饲料的方法(包括将本发明的组合物与来自黍亚科的基于植物的材料混合)；本发明的组合物在以下项中的用途：在动物饲料中、在动物饲料添加剂中、在用于在动物饲料中使用的组合物的制备中、用于改善动物饲料的营养价值、用于提高动物饲料的消化率、用于改善动物中的一种或多种性能参数、用于从黍亚科的基于植物的材料中释放木糖、和/或用于从黍亚科的基于植物的材料中释放淀粉；涉及编码本发明的多肽的多核苷酸；包括这些多核苷酸的核酸构建体；表达载体；重组宿主细胞；以及产生这些多肽的方法。
本申请还具体涉及以下项目：
1.一种组合物，包括一种或多种具有木聚糖酶活性的GH10或GH11多肽和一种或多种具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽，其中：
(a)GH62多肽包括基序 [H/Y][L/M]F[F/S][A/C/H/S/T/V][A/D/G/N/R]D[D/E/N]G(SEQ ID NO:1)；
(b)GH10或GH11多肽与GH62多肽一起从脱脂脱淀粉玉蜀黍(DFDSM)中溶解至少2.0％木糖；并且
(c)GH10或GH11多肽与GH62多肽一起从DFDSM中溶解比当不存在GH62 多肽时GH10或GH11多肽可以溶解的多至少2倍的木糖；
其中(b)和(c)在如下反应条件下进行：
i)25mg GH10或GH11多肽/kg DFDSM，
ii)12.5mg GH62多肽/kg DFDSM，以及
iii)在40℃、pH 5下孵育4小时。
2.如项目1所述的组合物，其中该GH62多肽包括一个或多个选自以下列表的基序，该列表由以下各项组成：[H/Y]LF[F/S][A/S/V][A/D/G]DNG(SEQ ID NO:2)、 YLFF[A/V][A/G]DNG(SEQ ID NO:3)、YLFFAGDNG(SEQ ID NO:4)、 [H/Y]LFSSDDNG(SEQ ID NO:5)、以及YLFSSDDNG(SEQ ID NO:6)。
3.如项目1至2中任一项所述的组合物，其中该具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽选自下组，该组由以下各项组成：
(a)与SEQ ID NO:9的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(b)与SEQ ID NO:12的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(c)与SEQ ID NO:15的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(d)与SEQ ID NO:18的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(e)与SEQ ID NO:21的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(f)与SEQ ID NO:24的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(g)与SEQ ID NO:27的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(h)与SEQ ID NO:30的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(i)与SEQ ID NO:36的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(j)与SEQ ID NO:42的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(k)与SEQ ID NO:48的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(l)与SEQ ID NO:54的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(m)与SEQ ID NO:60的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(n)与SEQ ID NO:66的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(o)与SEQ ID NO:105的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(p)与SEQ ID NO:108的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(q)与SEQ ID NO:114的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(r)与SEQ ID NO:120的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(s)与SEQ ID NO:123的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(t)与SEQ ID NO:126的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(u)与SEQ ID NO:132的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(v)与SEQ ID NO:138的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(w)与SEQ ID NO:141的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(x)与SEQ ID NO:147的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(y)与SEQ ID NO:150的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(z)与SEQ ID NO:156的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(aa)与SEQ ID NO:159的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(ab)与SEQ ID NO:162的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(ac)与SEQ ID NO:165的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(ad)与SEQ ID NO:168的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(ae)与SEQ ID NO:171的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(af)与SEQ ID NO:174的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(ag)选自下组的多肽的变体，该组由以下各项组成：SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:15、SEQ ID NO:18、SEQ ID NO:21、SEQ ID NO:24、SEQ ID NO: 27、SEQ IDNO:30、SEQ ID NO:36、SEQ ID NO:42、SEQ ID NO:48、SEQ ID NO: 54、SEQ ID NO:60、SEQID NO:66SEQ ID NO:105、SEQ ID NO:108、SEQ ID NO: 114、SEQ ID NO:120、SEQ ID NO:123、SEQ ID NO:126、SEQ ID NO:132、SEQ ID NO:138、SEQ ID NO:141、SEQ ID NO:147、SEQID NO:150、SEQ ID NO:156、 SEQ ID NO:159、SEQ ID NO:162、SEQ ID NO:165、SEQ ID NO:168、SEQ ID NO: 171和SEQ ID NO:174，其中该变体具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且包括在1、2、 3、4、5、6、7、8、9或10个位置中的一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合；
(ah)一种多肽，该多肽包括(a)、(b)、(c)、(d)、(e)、(f)、(g)、(h)、(i)、(j)、 (k)、(l)、(m)、(n)、(o)、(p)、(q)、(r)、(s)、(t)、(u)、(v)、(w)、(x)、(y)、(z)、(aa)、 (ab)、(ac)、(ad)、(ae)、(af)或(ag)的多肽以及N-末端和/或C-末端His-标签和/或 HQ-标签；和
(ai)(a)、(b)、(c)、(d)、(e)、(f)、(g)、(h)、(i)、(j)、(k)、(l)、(m)、(n)、(o)、 (p)、(q)、(r)、(s)、(t)、(u)、(v)、(w)、(x)、(y)、(z)、(aa)、(ab)、(ac)、(ad)、(ae)、 (af)、(ag)或(ah)的多肽的片段，该片段具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且具有该成熟多肽的至少90％的长度。
4.根据项目3所述的组合物，其中具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽包括以下项或由以下项组成：SEQ ID NO:9的氨基酸1至302，SEQ ID NO:12的氨基酸1至303，SEQID NO:15的氨基酸1至382，SEQ ID NO:18的氨基酸1至 378，SEQ ID NO:21的氨基酸1至311，SEQ ID NO:24的氨基酸1至302，SEQ ID NO:27的氨基酸1至309，SEQ ID NO:30的氨基酸1至438，SEQ ID NO:33的氨基酸1至446，SEQ ID NO:36的氨基酸1至438，SEQ ID NO:39的氨基酸1至446， SEQ ID NO:42的氨基酸1至318，SEQ ID NO:45的氨基酸1至326，SEQ IDNO: 48的氨基酸1至302，SEQ ID NO:51的氨基酸1至311，氨基酸SEQ ID NO:54 的1至364，SEQ ID NO:57的氨基酸1至373，SEQ ID NO:60的氨基酸1至436， SEQ ID NO:63的氨基酸1至444，SEQ ID NO:66的氨基酸1至302，SEQ ID NO: 69的氨基酸1至311，SEQ ID NO:105的氨基酸1至302，SEQ ID NO:108的氨基酸1至464，SEQ ID NO:111的氨基酸1至472，SEQ IDNO:114的氨基酸1至364， SEQ ID NO:117的氨基酸1至372，SEQ ID NO:120的氨基酸1至357，SEQ ID NO: 123的氨基酸1至302，SEQ ID NO:126的氨基酸1至453，SEQ ID NO:129的氨基酸1至461，SEQ ID NO:132的氨基酸1至377，SEQ ID NO:135的氨基酸1至 385，SEQ IDNO:138的氨基酸1至309，SEQ ID NO:141的氨基酸1至304，SEQ ID NO:144的氨基酸1至312，SEQ ID NO:147的氨基酸1至302，SEQ ID NO:150 的氨基酸1至302，SEQ ID NO:153的氨基酸1至310，SEQ ID NO:156的氨基酸 1至316，SEQ ID NO:159的氨基酸1至316，SEQ ID NO:162的氨基酸1至303， SEQ ID NO:165的氨基酸1至361，SEQ ID NO:168的氨基酸1至373，SEQ ID NO: 171的氨基酸1至302，或SEQ ID NO:174的氨基酸1至364。
5.如项目1至4中任一项所述的组合物，其中具有木聚糖酶活性的GH10或 GH11多肽选自下组，该组由以下各项组成：
(a)与SEQ ID NO:70的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(b)与SEQ ID NO:71的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(c)与SEQ ID NO:72的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(d)与SEQ ID NO:73的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(e)与SEQ ID NO:74的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(f)与SEQ ID NO:75的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(g)与SEQ ID NO:78的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(h)与SEQ ID NO:81的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(i)与SEQ ID NO:84的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(j)与SEQ ID NO:88的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(k)与SEQ ID NO:89的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(l)与SEQ ID NO:95的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(m)与SEQ ID NO:96的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(n)与SEQ ID NO:99的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(o)与SEQ ID NO:102的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(p)与SEQ ID NO:177的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(q)选自下组的多肽的变体，该组由以下各项组成：SEQ ID NO:70、SEQ ID NO:71、SEQ ID NO:72、SEQ ID NO:73、SEQ ID NO:74、SEQ ID NO:75、SEQ ID NO:78、SEQ ID NO:81、SEQ ID NO:84、SEQ ID NO:88、SEQ ID NO:89、SEQ ID NO:95、SEQ ID NO:96、SEQ IDNO:99、SEQ ID NO:102和SEQ ID NO:177，其中该变体具有木聚糖酶活性并且包括在1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个位置中的一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合；
(r)一种多肽，该多肽包括(a)、(b)、(c)、(d)、(e)、(f)、(g)、(h)、(i)、(j)、 (k)、(l)、(m)、(n)、(o)、(p)或(q)的多肽以及N-末端和/或C-末端His-标签和/或 HQ-标签；和
(s)(a)、(b)、(c)、(d)、(e)、(f)、(g)、(h)、(i)、(j)、(k)、(l)、(m)、(n)、(o)、 (p)、(q)或(r)的多肽的片段，该片段具有木聚糖酶活性并且具有该成熟多肽的至少90％的长度。
6.根据项目5所述的组合物，其中该GH10或GH11多肽包括以下项或由以下项组成：SEQ ID NO:70的氨基酸1至384，SEQ ID NO:71的氨基酸1至288， SEQ ID NO:72的氨基酸1至308，SEQ ID NO:73的氨基酸1至195，SEQ ID NO: 74的氨基酸1至203，SEQ ID NO:75的氨基酸1至182，SEQ ID NO:78的氨基酸 1至183，SEQ ID NO:81的氨基酸1至181，SEQ ID NO:84的氨基酸1至299， SEQ ID NO:87的氨基酸1至307，SEQ ID NO:88的氨基酸1至188，SEQID NO: 89的氨基酸1至189，SEQ ID NO:95的氨基酸1至328，SEQ ID NO:96的氨基酸 1至208，SEQ ID NO:99的氨基酸1至203，SEQ ID NO:102的氨基酸1至337，或SEQ ID NO:177的氨基酸1至323。
7.一种具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的分离的多肽，该多肽选自下组，该组由以下各项组成：
(a)与SEQ ID NO:12的多肽具有至少85％序列一致性的多肽；
(b)与SEQ ID NO:24的多肽具有至少97.6％序列一致性的多肽；
(c)与SEQ ID NO:27的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(d)与SEQ ID NO:30的多肽具有至少90％序列一致性的多肽；
(e)与SEQ ID NO:36的多肽具有至少92％序列一致性的多肽；
(f)与SEQ ID NO:48的多肽具有至少86％序列一致性的多肽；
(g)与SEQ ID NO:54的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(h)与SEQ ID NO:60的多肽具有至少81％序列一致性的多肽；
(i)与SEQ ID NO:66的多肽具有至少84％序列一致性的多肽；
(j)与SEQ ID NO:105的多肽具有至少87％序列一致性的多肽；
(k)与SEQ ID NO:108的多肽具有至少85％序列一致性的多肽；
(l)与SEQ ID NO:114的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(m)与SEQ ID NO:120的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(n)与SEQ ID NO:123的多肽具有至少89％序列一致性的多肽；
(o)与SEQ ID NO:126的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(p)与SEQ ID NO:138的多肽具有至少85％序列一致性的多肽；
(q)与SEQ ID NO:141的多肽具有至少89％序列一致性的多肽；
(r)与SEQ ID NO:147的多肽具有至少86％序列一致性的多肽；
(s)与SEQ ID NO:156的多肽具有至少96.4％序列一致性的多肽；
(t)与SEQ ID NO:162的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(u)与SEQ ID NO:165的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(v)与SEQ ID NO:168的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(w)与SEQ ID NO:171的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(x)与SEQ ID NO:174的多肽具有至少82％序列一致性的多肽；
(y)一种多肽，该多肽由在高严格条件或非常高严格条件下与以下各项杂交的多核苷酸编码
(i)SEQ ID NO:10的成熟多肽编码序列，
(ii)SEQ ID NO:22的成熟多肽编码序列，
(iii)SEQ ID NO:25的成熟多肽编码序列，
(iv)SEQ ID NO:28的成熟多肽编码序列，
(v)SEQ ID NO:34的成熟多肽编码序列，
(vi)SEQ ID NO:46的成熟多肽编码序列，
(vii)SEQ ID NO:52的成熟多肽编码序列，
(viii)SEQ ID NO:58的成熟多肽编码序列，
(ix)SEQ ID NO:64的成熟多肽编码序列，
(x)SEQ ID NO:103的成熟多肽编码序列，
(xi)SEQ ID NO:106的成熟多肽编码序列，
(xii)SEQ ID NO:112的成熟多肽编码序列，
(xiii)SEQ ID NO:118的成熟多肽编码序列，
(xiv)SEQ ID NO:121的成熟多肽编码序列，
(xv)SEQ ID NO:124的成熟多肽编码序列，
(xvi)SEQ ID NO:136的成熟多肽编码序列，
(xvii)SEQ ID NO:139的成熟多肽编码序列，
(xviii)SEQ ID NO:145的成熟多肽编码序列，
(xix)SEQ ID NO:154的成熟多肽编码序列，
(xx)SEQ ID NO:160的成熟多肽编码序列，
(xxi)SEQ ID NO:163的成熟多肽编码序列，
(xxii)SEQ ID NO:166的成熟多肽编码序列，
(xxiii)SEQ ID NO:169的成熟多肽编码序列，
(xxiv)SEQ ID NO:172的成熟多肽编码序列，
(xxv)(i)、(ii)、(iii)、(iv)、(v)、(vi)、(vii)、(viii)、(ix)、(x)、(xi)、(xii)、(xiii)、(xiv)、(xv)、(xvi)、(xvii)、(xviii)、(xix)、(xx)、(xxi)、(xxii)、(xxiii)或(xxiv) 的全长互补链；
(z)由以下多核苷酸编码的多肽，该多核苷酸与SEQ ID NO:10的成熟多肽编码序列具有至少85％序列一致性；
(aa)由以下多核苷酸编码的多肽，该多核苷酸与SEQ ID NO:22的成熟多肽编码序列具有至少97.6％序列一致性；
(ab)由以下多核苷酸编码的多肽，该多核苷酸与SEQ ID NO:25的成熟多肽编码序列具有至少80％序列一致性；
(ac)由以下多核苷酸编码的多肽，该多核苷酸与SEQ ID NO:28的成熟多肽编码序列具有至少90％序列一致性；
(ad)由以下多核苷酸编码的多肽，该多核苷酸与SEQ ID NO:34的成熟多肽编码序列具有至少92％序列一致性；
(ae)由以下多核苷酸编码的多肽，该多核苷酸与SEQ ID NO:46的成熟多肽编码序列具有至少86％序列一致性；
(af)由以下多核苷酸编码的多肽，该多核苷酸与SEQ ID NO:52的成熟多肽编码序列具有至少80％序列一致性；
(ag)由以下多核苷酸编码的多肽，该多核苷酸与SEQ ID NO:58的成熟多肽编码序列具有至少81％序列一致性；
(ah)由以下多核苷酸编码的多肽，该多核苷酸与SEQ ID NO:64的成熟多肽编码序列具有至少84％序列一致性；
(ai)由以下多核苷酸编码的多肽，该多核苷酸与SEQ ID NO:103的成熟多肽编码序列具有至少87％序列一致性；
(aj)由以下多核苷酸编码的多肽，该多核苷酸与SEQ ID NO:106的成熟多肽编码序列具有至少85％序列一致性；
(ak)由以下多核苷酸编码的多肽，该多核苷酸与SEQ ID NO:111的成熟多肽编码序列具有至少80％序列一致性；
(al)由以下多核苷酸编码的多肽，该多核苷酸与SEQ ID NO:118的成熟多肽编码序列具有至少80％序列一致性；
(am)由以下多核苷酸编码的多肽，该多核苷酸与SEQ ID NO:121的成熟多肽编码序列具有至少89％序列一致性；
(an)由以下多核苷酸编码的多肽，该多核苷酸与SEQ ID NO:124的成熟多肽编码序列具有至少80％序列一致性；
(ao)由以下多核苷酸编码的多肽，该多核苷酸与SEQ ID NO:136的成熟多肽编码序列具有至少85％序列一致性；
(ap)由以下多核苷酸编码的多肽，该多核苷酸与SEQ ID NO:139的成熟多肽编码序列具有至少89％序列一致性；
(aq)由以下多核苷酸编码的多肽，该多核苷酸与SEQ ID NO:145的成熟多肽编码序列具有至少86％序列一致性；
(ar)由以下多核苷酸编码的多肽，该多核苷酸与SEQ ID NO:154的成熟多肽编码序列具有至少96.4％序列一致性；
(as)由以下多核苷酸编码的多肽，该多核苷酸与SEQ ID NO:160的成熟多肽编码序列具有至少80％序列一致性；
(at)由以下多核苷酸编码的多肽，该多核苷酸与SEQ ID NO:163的成熟多肽编码序列具有至少80％序列一致性；
(au)由以下多核苷酸编码的多肽，该多核苷酸与SEQ ID NO:166的成熟多肽编码序列具有至少80％序列一致性；
(av)由以下多核苷酸编码的多肽，该多核苷酸与SEQ ID NO:169的成熟多肽编码序列具有至少80％序列一致性；
(aw)由以下多核苷酸编码的多肽，该多核苷酸与SEQ ID NO:172的成熟多肽编码序列具有至少82％序列一致性；
(ax)SEQ ID NO:12的变体，其中该变体具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且包括在1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13,14、15、16、17、18、19、20、 21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、 39、40、41、42、43、44或45个位置中的一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合；
(ay)SEQ ID NO:24的变体，其中该变体具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且包括在1、2、3、4、5、6或7个位置中的一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合；
(az)选自下组的多肽的变体，该组由以下各项组成：SEQ ID NO:27、SEQ ID NO:54、SEQ ID NO:60、SEQ ID NO:108、SEQ ID NO:114、SEQ ID NO:120、SEQ ID NO:126、SEQID NO:162、SEQ ID NO:165、SEQ ID NO:168、SEQ ID NO:171 或SEQ ID NO:174，其中该变体具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并包括在1、2、3、4、 5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、 24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、 42、43、44、45、46、47、48、49或50个位置中的一个或多个氨基酸取代、和/ 或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合；
(ba)SEQ ID NO:30的变体，其中该变体具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且包括在1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、 21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、 39、40、41、42或43个位置中的一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合；
(bb)SEQ ID NO:36的变体，其中该变体具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且包括在1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、 21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33或34个位置中的一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合；
(bc)选自下组的多肽的变体，该组由以下各项组成：SEQ ID NO:48或SEQ ID NO:147，其中该变体具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并包括在1、2、3、4、5、6、7、 8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、 27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41或42个位置中的一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合；
(bd)SEQ ID NO:66的变体，其中该变体具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且包括在1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13,14、15、16、17、18、19、20、 21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、 39、40、41、42、43、44、45、46、47或48个位置中的一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合；
(be)SEQ ID NO:105的变体，其中该变体具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且包括在1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、 20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、 38或39个位置中的一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合；
(bf)选自下组的多肽的变体，该组由以下各项组成：SEQ ID NO:123或SEQ ID NO:141，其中该变体具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并包括在1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、 27、28、29、30、31、32或33个位置中的一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合；
(bg)SEQ ID NO:138的变体，其中该变体具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且包括在1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、 20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、 38、39、40、41、42、43、44、45或46个位置中的一个或多个氨基酸取代、和/ 或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合；
(bh)SEQ ID NO:156的变体，其中该变体具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且包括在1、2、3、4、5、6、7、8、9、10或11个位置中的一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合；
(bi)一种多肽，该多肽包括(a)、(b)、(c)、(d)、(e)、(f)、(g)、(h)、(i)、(j)、(k)、(l)、(m)、(n)、(o)、(p)、(q)、(r)、(s)、(t)、(u)、(v)、(w)、(x)、(y)、(z)、(aa)、 (ab)、(ac)、(ad)、(ae)、(af)、(ag)、(ah)、(ai)、(aj)、(ak)、(al)、(am)、(an)、(ao)、 (ap)、(aq)、(ar)、(as)、(at)、(au)、(av)、(aw)、(ax)、(ay)、(az)、(ba)、(bb)、(bc)、 (bd)、(be)、(bf)、(bg)或(bh)的多肽以及N-末端和/或C-末端His-标签和/或HQ- 标签；和
(bj)(a)、(b)、(c)、(d)、(e)、(f)、(g)、(h)、(i)、(j)、(k)、(l)、(m)、(n)、(o)、 (p)、(q)、(r)、(s)、(t)、(u)、(v)、(w)、(x)、(y)、(z)、(aa)、(ab)、(ac)、(ad)、(ae)、 (af)、(ag)、(ah)、(ai)、(aj)、(ak)、(al)、(am)、(an)、(ao)、(ap)、(aq)、(ar)、(as)、 (at)、(au)、(av)、(aw)、(ax)、(ay)、(az)、(ba)、(bb)、(bc)、(bd)、(be)、(bf)、(bg)、 (bh)或(bi)的多肽的片段，该片段具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且具有该成熟多肽的至少90％的长度。
8.根据项目7所述的多肽，其中该多肽包括以下项或由以下项组成：SEQ ID NO:12的氨基酸1至303，SEQ ID NO:24的氨基酸1至302，SEQ ID NO:27的氨基酸1至309，SEQ IDNO:30的氨基酸1至438，SEQ ID NO:33的氨基酸1至446， SEQ ID NO:36的氨基酸1至438，SEQ ID NO:39的氨基酸1至446，SEQ ID NO: 48的氨基酸1至302，SEQ ID NO:51的氨基酸1至311，SEQ ID NO:54的氨基酸 1至364，SEQ ID NO:57的氨基酸1至373，SEQ ID NO:60的氨基酸1至436， SEQ ID NO:63的氨基酸1至444，SEQ ID NO:66的氨基酸1至302，SEQ ID NO:69的氨基酸1至311，SEQ ID NO:105的氨基酸1至302，SEQ ID NO:108的氨基酸1至464，SEQID NO:111的氨基酸1至472，SEQ ID NO:114的氨基酸1至364， SEQ ID NO:117的氨基酸1至372，SEQ ID NO:120的氨基酸1至357，SEQ ID NO: 123的氨基酸1至302，SEQ ID NO:126的氨基酸1至453，SEQ ID NO:129的氨基酸1至461，SEQ ID NO:138的氨基酸1至309，SEQ IDNO:141的氨基酸1至 304，SEQ ID NO:144的氨基酸1至312，SEQ ID NO:147的氨基酸1至302，SEQ ID NO:156的氨基酸1至316，SEQ ID NO:162的氨基酸1至303，SEQ ID NO:165 的氨基酸1至361，SEQ ID NO:168的氨基酸1至373，SEQ ID NO:171的氨基酸 1至302，或SEQID NO:174的氨基酸1至364。
9.一种组合物，该组合物包括项目7至8中任一项所述的一种或多种多肽。
10.如项目9所述的组合物，该组合物进一步包括一种或多种具有木聚糖酶活性的GH10或GH11多肽。
11.如项目10所述的组合物，其中具有木聚糖酶活性的GH10或GH11多肽选自下组，该组由以下各项组成：
(a)与SEQ ID NO:70的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(b)与SEQ ID NO:71的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(c)与SEQ ID NO:72的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(d)与SEQ ID NO:73的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(e)与SEQ ID NO:74的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(f)与SEQ ID NO:75的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(g)与SEQ ID NO:78的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(h)与SEQ ID NO:81的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(i)与SEQ ID NO:84的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(j)与SEQ ID NO:88的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(k)与SEQ ID NO:89的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(l)与SEQ ID NO:95的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(m)与SEQ ID NO:96的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(n)与SEQ ID NO:99的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(o)与SEQ ID NO:102的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(p)与SEQ ID NO:177的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(q)选自下组的多肽的变体，该组由以下各项组成：SEQ ID NO:70、SEQ ID NO:71、SEQ ID NO:72、SEQ ID NO:73、SEQ ID NO:74、SEQ ID NO:75、SEQ ID NO:78、SEQ ID NO:81、SEQ ID NO:84、SEQ ID NO:88、SEQ ID NO:89、SEQ ID NO:95、SEQ ID NO:96、SEQ IDNO:99、SEQ ID NO:102和SEQ ID NO:177，其中该变体具有木聚糖酶活性并且包括在1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个位置中的一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合；
(r)一种多肽，该多肽包括(a)、(b)、(c)、(d)、(e)、(f)、(g)、(h)、(i)、(j)、 (k)、(l)、(m)、(n)、(o)、(p)或(q)的多肽以及N-末端和/或C-末端His-标签和/或 HQ-标签；和
(s)(a)、(b)、(c)、(d)、(e)、(f)、(g)、(h)、(i)、(j)、(k)、(l)、(m)、(n)、(o)、 (p)、(q)或(r)的多肽的片段，该片段具有木聚糖酶活性并且具有该成熟多肽的至少90％的长度。
12.根据项目11的组合物，其中具有木聚糖酶活性的GH10或GH11多肽选自下组，该组由以下各项组成：SEQ ID NO:70的氨基酸1至384，SEQ ID NO:71 的氨基酸1至288，SEQID NO:72的氨基酸1至308，SEQ ID NO:73的氨基酸1 至195，SEQ ID NO:74的氨基酸1至203，SEQ ID NO:75的氨基酸1至182，SEQ ID NO:78的氨基酸1至183，SEQ ID NO:81的氨基酸1至181，SEQ ID NO:84 的氨基酸1至299，SEQ ID NO:87的氨基酸1至307，SEQ ID NO:88的氨基酸1 至188，SEQ ID NO:89的氨基酸1至189，SEQ ID NO:95的氨基酸1至328，SEQ IDNO:96的氨基酸1至208，SEQ ID NO:99的氨基酸1至203，SEQ ID NO:102 的氨基酸1至337，或SEQ ID NO:177的氨基酸1至323。
13.如项目1至6或9至12中任一项的组合物，该组合物进一步包括一种或多种调配剂、一种或多种另外的酶和/或一种或多种微生物。
14.一种动物饲料添加剂，其包括项目1至6或9至13中任一项所述的组合物和选自以下列表的一种或多种组分，该列表由以下各项组成：
一种或多种维生素；
一种或多种矿物质；
一种或多种氨基酸；和
一种或多种其他饲料成分。
15.一种动物饲料，其包括项目1至6或9至13中任一项所述的组合物或项目14所述的动物饲料添加剂以及来自黍亚科的基于植物的材料。
16.一种改善动物的一种或多种性能参数的方法，该方法包括向一种或多种动物给予项目1至6或9至13中任一项所述的组合物、项目14所述的动物饲料添加剂、或项目15所述的动物饲料。
17.一种从基于植物的材料中溶解木糖的方法，该方法包括用项目1至6或9 至13中任一项所述的组合物或项目14所述的动物饲料添加剂处理来自黍亚科的基于植物的材料。
18.一种从基于植物的材料中释放淀粉的方法，该方法包括用项目1至6或9 至13中任一项所述的组合物或项目14所述的动物饲料添加剂处理来自黍亚科的基于植物的材料。
19.一种用于改善动物饲料营养价值的方法，该方法包括向该饲料中添加项目 1至6或9至13中任一项所述的组合物或项目14所述的动物饲料添加剂。
20.一种制备动物饲料的方法，该方法包括将项目1至6或9至13中任一项所述的组合物或项目14所述的动物饲料添加剂与来自黍亚科的基于植物的材料混合。
21.项目1至6或9至13中任一项所述的组合物、项目14所述的动物饲料添加剂或项目15所述的动物饲料在以下各项中的用途：
在动物饲料中；
在动物饲料添加剂中；
在用于动物饲料的组合物的制备中；
用于改善动物饲料的营养价值；
用于增加动物饲料的消化率；
用于改善动物中的一个或多个性能参数；
用于从黍亚科的基于植物的材料中释放木糖；和/或
用于从黍亚科的基于植物的材料中释放淀粉。
22.一种具有木聚糖酶活性的分离的多肽，该分离的多肽选自下组，该组由以下各项组成：
(a)与SEQ ID NO:84的多肽具有至少84％序列一致性的多肽；
(b)与SEQ ID NO:99的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(c)与SEQ ID NO:102的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(d)一种多肽，该多肽由在高严格条件或非常高严格条件下与以下各项杂交的多核苷酸编码
(i)SEQ ID NO:82的成熟多肽编码序列，
(ii)SEQ ID NO:97的成熟多肽编码序列，
(iii)SEQ ID NO:100的成熟多肽编码序列，
(iv)(i)、(ii)或(iii)的全长互补链；
(e)由以下多核苷酸编码的多肽，该多核苷酸与SEQ ID NO:82的成熟多肽编码序列具有至少84％序列一致性；
(f)由以下多核苷酸编码的多肽，该多核苷酸与SEQ ID NO:97的成熟多肽编码序列具有至少80％序列一致性；
(g)由以下多核苷酸编码的多肽，该多核苷酸与SEQ ID NO:100的成熟多肽编码序列具有至少80％序列一致性；
(h)选自下组的多肽的变体，该组由以下各项组成：SEQ ID NO:84、SEQ ID NO:99或SEQ ID NO:102，其中该变体具有木聚糖酶活性并包括在1、2、3、4、5、 6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、 25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、 43、44、45、46、47、48、49或50个位置中的一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合；
(i)一种多肽，该多肽包括(a)、(b)、(c)、(d)、(e)、(f)、(g)、(h)或(i)的多肽以及N-末端和/或C-末端His-标签和/或HQ-标签；和
(j)(a)、(b)、(c)、(d)、(e)、(f)、(g)、(h)、(i)或(j)的多肽的片段，该片段具有木聚糖酶活性并且具有该成熟多肽的至少90％的长度。
23.根据项目22所述的多肽，其中该多肽包括以下项或由以下项组成：SEQ ID NO:84的氨基酸1至299，SEQ ID NO:87的氨基酸1至307，SEQ ID NO:99的氨基酸1至203，或SEQID NO:102的氨基酸1至337。
24.一种组合物，该组合物包括项目22至23中任一项所述的一种或多种多肽。
25.如项目24所述的组合物，该组合物进一步包括一种或多种调配剂、一种或多种另外的酶和/或一种或多种微生物。
26.一种动物饲料或动物饲料添加剂，其包括项目22至23中任一项所述的多肽或项目24至25中任一项所述的组合物以及选自以下列表的一种或多种组分，该列表由以下各项组成：
一种或多种维生素；
一种或多种矿物质；
一种或多种氨基酸；
一种或多种其他饲料成分；和
来自黍亚科的基于植物的材料。
27.一种多核苷酸，编码项目7至8或22至23中任一项所述的多肽。
28.一种核酸构建体或表达载体，该核酸构建体或表达载体包括项目27所述的多核苷酸，该多核苷酸可操作地连接至指导该多肽在表达宿主内的产生的一个或多个控制序列。
29.一种重组宿主细胞，该重组宿主细胞包括项目27所述的多核苷酸，该多核苷酸可操作地连接至指导该多肽的产生的一个或多个控制序列。
30.一种产生项目7至8或22至23中任一项所述的多肽的方法，该方法包括：
(a)在有益于产生该多肽的条件下培养项目29所述的重组宿主细胞；和
(b)回收该多肽。
序列表概述
SEQ ID NO:1是GH62保守基序：
[H/Y][L/M]F[F/S][A/C/H/S/T/V][A/D/G/N/R]D[D/E/N]G。
SEQ ID NO:2是GH62保守基序：[H/Y]LF[F/S][A/S/V][A/D/G]DNG
SEQ ID NO:3是GH62保守基序：YLFF[A/V][A/G]DNG
SEQ ID NO:4是GH62保守基序：YLFFAGDNG
SEQ ID NO:5是GH62保守基序：[H/Y]LFSSDDNG
SEQ ID NO:6是GH62保守基序：YLFSSDDNG
SEQ ID NO:7是如分离自胶囊青霉的GH62阿拉伯呋喃糖苷酶的基因序列。
SEQ ID NO:8是如从SEQ ID NO:7推导的并且如在WO 2006/125438中披露为SEQID NO:2的氨基酸序列。
SEQ ID NO:9是来自胶囊青霉的成熟GH62阿拉伯呋喃糖苷酶的氨基酸序列。
SEQ ID NO:10是如分离自黄灰青霉的GH62阿拉伯呋喃糖苷酶的基因序列。
SEQ ID NO:11是如从SEQ ID NO:10推导的氨基酸序列。
SEQ ID NO:12是来自黄灰青霉的成熟GH62阿拉伯呋喃糖苷酶的氨基酸序列。
SEQ ID NO:13是分离自棒曲霉的GH62阿拉伯呋喃糖苷酶的基因序列Uniprot:XM_001273614的密码子优化的DNA序列。
SEQ ID NO:14是如从SEQ ID NO:13(Uniprot:A1CCD2)推导出的并且如在WO2014/081884中披露为SEQ ID NO:996的氨基酸序列。
SEQ ID NO:15是来自棒曲霉的成熟GH62阿拉伯呋喃糖苷酶的氨基酸序列。
SEQ ID NO:16是分离自费希新萨托菌(Neosartorya fischeri)的GH62阿拉伯呋喃糖苷酶的基因序列Uniprot:XM_001265651的密码子优化的DNA序列。
SEQ ID NO:17是如从SEQ ID NO:16(Uniprot:A1CYD5)推导出的并且如在 WO2014/081884中披露为SEQ ID NO:1177的氨基酸序列。
SEQ ID NO:18是来自费希新萨托菌的成熟GH62阿拉伯呋喃糖苷酶的氨基酸序列。
SEQ ID NO:19是分离自玉蜀黍黑粉菌(Ustilago maydis)的GH62阿拉伯呋喃糖苷酶的基因序列Uniprot:XM_755363的密码子优化的DNA序列(参见格姆佩尔 (Kaemper)等人，自然，2006，444，97-101)。
SEQ ID NO:20是如从SEQ ID NO:19(Uniprot:Q4P6F4)推导的氨基酸序列。
SEQ ID NO:21是来自玉蜀黍黑粉菌的成熟GH62阿拉伯呋喃糖苷酶的氨基酸序列。
SEQ ID NO:22是如分离自草酸青霉菌的GH62阿拉伯呋喃糖苷酶的基因序列。
SEQ ID NO:23是如从SEQ ID NO:22推导的氨基酸序列。
SEQ ID NO:24是来自草酸青霉菌的成熟GH62阿拉伯呋喃糖苷酶的氨基酸序列。
SEQ ID NO:25是如分离自褐红篮状菌(Talaromyces pinophilus)的GH62阿拉伯呋喃糖苷酶的基因序列。
SEQ ID NO:26是如从SEQ ID NO:25推导的氨基酸序列。
SEQ ID NO:27是来自褐红篮状菌的成熟GH62阿拉伯呋喃糖苷酶的氨基酸序列。
SEQ ID NO:28是如分离自硝孢链霉菌(Streptomyces nitrosporeus)的GH62 阿拉伯呋喃糖苷酶的基因序列。
SEQ ID NO:29是如从SEQ ID NO:28推导的氨基酸序列。
SEQ ID NO:30是来自硝孢链霉菌的成熟GH62阿拉伯呋喃糖苷酶的氨基酸序列。
SEQ ID NO:31是来自SEQ ID NO:28与His-标签和赛威蛋白酶(Savinase)信号肽的重组表达DNA序列的DNA序列。
SEQ ID NO:32是如从SEQ ID NO:31推导的氨基酸序列。
SEQ ID NO:33是获自SEQ ID NO:32的成熟GH62阿拉伯呋喃糖苷酶的氨基酸序列。
SEQ ID NO:34是如分离自北疆链霉菌(Streptomyces beijiangensis)的GH62 阿拉伯呋喃糖苷酶的基因序列。
SEQ ID NO:35是如从SEQ ID NO:34推导的氨基酸序列。
SEQ ID NO:36是来自北疆链霉菌的成熟GH62阿拉伯呋喃糖苷酶的氨基酸序列。
SEQ ID NO:37是来自SEQ ID NO:34与His-标签和赛威蛋白酶(Savinase)信号肽的重组表达DNA序列的DNA序列。
SEQ ID NO:38是如从SEQ ID NO:37推导的氨基酸序列。
SEQ ID NO:39是获自SEQ ID NO:38的成熟GH62阿拉伯呋喃糖苷酶的氨基酸序列。
SEQ ID NO:40是如分离自棒曲霉的GH62阿拉伯呋喃糖苷酶的基因序列(参见费奥多罗娃(Fedorova)等人，公共科学图书馆(PLoS)，100046)。
SEQ ID NO:41是如从SEQ ID NO:40推导的氨基酸序列。
SEQ ID NO:42是来自棒曲霉的成熟GH62阿拉伯呋喃糖苷酶的氨基酸序列。
SEQ ID NO:43是来自SEQ ID NO:40与His-标签的重组表达的DNA序列的 DNA序列。
SEQ ID NO:44是如从SEQ ID NO:43推导的氨基酸序列。
SEQ ID NO:45是获自SEQ ID NO:44的成熟GH62阿拉伯呋喃糖苷酶的氨基酸序列。
SEQ ID NO:46是如分离自温特曲霉(Aspergillus wentii)的GH62阿拉伯呋喃糖苷酶的基因序列。
SEQ ID NO:47是如从SEQ ID NO:46推导的氨基酸序列。
SEQ ID NO:48是来自温特曲霉的成熟GH62阿拉伯呋喃糖苷酶的氨基酸序列。
SEQ ID NO:49是来自SEQ ID NO:46与His-标签的重组表达的DNA序列的 DNA序列。
SEQ ID NO:50是如从SEQ ID NO:49推导的氨基酸序列。
SEQ ID NO:51是获自SEQ ID NO:50的成熟GH62阿拉伯呋喃糖苷酶的氨基酸序列。
SEQ ID NO:52是如分离自梭孢端梗霉(Acrophialophora fusispora)的GH62 阿拉伯呋喃糖苷酶的基因序列。
SEQ ID NO:53是如从SEQ ID NO:52推导的氨基酸序列。
SEQ ID NO:54是来自梭孢端梗霉的成熟GH62阿拉伯呋喃糖苷酶的氨基酸序列。
SEQ ID NO:55是来自SEQ ID NO:52与His-标签的重组表达的DNA序列的 DNA序列。
SEQ ID NO:56是如从SEQ ID NO:55推导的氨基酸序列。
SEQ ID NO:57是获自SEQ ID NO:56的成熟GH62阿拉伯呋喃糖苷酶的氨基酸序列。
SEQ ID NO:58是如分离自链孢囊菌属物种(Streptosporangium sp)-60756的GH62阿拉伯呋喃糖苷酶的基因序列。
SEQ ID NO:59是如从SEQ ID NO:58推导的氨基酸序列。
SEQ ID NO:60是来自链孢囊菌属物种-60756的成熟GH62阿拉伯呋喃糖苷酶的氨基酸序列。
SEQ ID NO:61是来自SEQ ID NO:58与His-标签和赛威蛋白酶(Savinase)信号肽的重组表达DNA序列的DNA序列。
SEQ ID NO:62是如从SEQ ID NO:61推导的氨基酸序列。
SEQ ID NO:63是获自SEQ ID NO:62的成熟GH62阿拉伯呋喃糖苷酶的氨基酸序列。
SEQ ID NO:64是如分离自梭孢端梗霉(Acrophialophora fusispora)的GH62 阿拉伯呋喃糖苷酶的基因序列。
SEQ ID NO:65是如从SEQ ID NO:64推导的氨基酸序列。
SEQ ID NO:66是来自梭孢端梗霉的成熟GH62阿拉伯呋喃糖苷酶的氨基酸序列。
SEQ ID NO:67是来自SEQ ID NO:64与His-标签的重组表达的DNA序列的 DNA序列。
SEQ ID NO:68是如从SEQ ID NO:67推导的氨基酸序列。
SEQ ID NO:69是获自SEQ ID NO:68的成熟GH62阿拉伯呋喃糖苷酶的氨基酸序列。
SEQ ID NO:70是如在WO 1994/021785中披露为SEQ ID NO:5(Xyl II)的来自棘孢曲霉的成熟GH10木聚糖酶的氨基酸序列。
SEQ ID NO:71是来自丙酮丁醇梭菌(Swissprot Q97TP5)的成熟GH10木聚糖酶的氨基酸序列。
SEQ ID NO:72是如在WO 2005/059084中披露为SEQ ID NO:8的来自棘孢曲霉的成熟GH10木聚糖酶的氨基酸序列。
SEQ ID NO:73是如披露为WO 1996/23062的SEQ ID NO:2的来自疏棉状嗜热丝孢菌的成熟GH11木聚糖酶的氨基酸序列。
SEQ ID NO:74是如披露为WO 2011/057140的SEQ ID NO:305的来自嗜热网团菌的成熟GH11木聚糖酶的氨基酸序列。
SEQ ID NO:75是如披露为WO 2005/079585的SEQ ID NO:2的来自饲料类芽孢杆菌(Paenibacillus pabuli)的成熟GH11木聚糖酶的氨基酸序列。
SEQ ID NO:76是分离自嗜热脂肪芽孢杆菌的GH11木聚糖酶的基因序列。
SEQ ID NO:77是如从SEQ ID NO:76(Swissprot：P45705)推导的氨基酸序列。
SEQ ID NO:78是来自嗜热脂肪芽孢杆菌的成熟GH11木聚糖酶的氨基酸序列。
SEQ ID NO:79是来自SEQ ID NO:76与赛威蛋白酶(Savinase)信号肽的合成 DNA序列的DNA序列。
SEQ ID NO:80是如从SEQ ID NO:79推导的氨基酸序列。
SEQ ID NO:81是获自SEQ ID NO:80的成熟GH11木聚糖酶的氨基酸序列。
SEQ ID NO:82是如分离自北疆链霉菌的GH11木聚糖酶的基因序列。
SEQ ID NO:83是如从SEQ ID NO:88推导的氨基酸序列。
SEQ ID NO:84是来自北疆链霉菌的成熟GH11木聚糖酶的氨基酸序列。
SEQ ID NO:85是来自SEQ ID NO:82与His-标签和赛威蛋白酶(Savinase)信号肽的重组表达DNA序列的DNA序列。
SEQ ID NO:86是如从SEQ ID NO:85推导的氨基酸序列。
SEQ ID NO:87是获自SEQ ID NO:86的成熟GH62阿拉伯呋喃糖苷酶的氨基酸序列。
SEQ ID NO:88是如在WO 2014/019220中披露为SEQ ID NO:8的来自尖孢镰刀菌(FoxXyn 6)的成熟GH11木聚糖酶的氨基酸序列。
SEQ ID NO:89是如在WO 2014/020143中披露为SEQ ID NO:8的来自棒曲霉(AclXyn5)的成熟GH11木聚糖酶的氨基酸序列。
SEQ ID NO:90是迟缓芽孢杆菌分泌信号。
SEQ ID NO:91是His-标签RHHHHHHP。
SEQ ID NO:92是His-标签HHHHHHPR。
SEQ ID NO:93是如在WO 2006/114095中披露为SEQ ID NO:1的来自特异腐质霉的GH43阿拉伯呋喃糖苷酶的氨基酸序列。
SEQ ID NO:94是如在WO 2006/114095中披露为SEQ ID NO:2的来自大型亚灰树花菌(Meripilus giganteus)的GH51阿拉伯呋喃糖苷酶的氨基酸序列。
SEQ ID NO:95是如披露为WO 2013/068550中的SEQ ID NO:1的来自海栖热孢菌(Thermotoga maritima)MSB8的成熟GH10木聚糖酶XynB的氨基酸序列。
SEQ ID NO:96是如披露为WO 2009/018537的SEQ ID NO:41的来自嗜热毁丝霉的成熟GH11木聚糖酶Xyl6的氨基酸序列。
SEQ ID NO:97是分离自龙眼焦腐病菌(Lasiodiplodia theobromae)的GH11 木聚糖酶的基因序列。
SEQ ID NO:98是如从SEQ ID NO:97推导的氨基酸序列。
SEQ ID NO:99是来自龙眼焦腐病菌的成熟GH11木聚糖酶的氨基酸序列。
SEQ ID NO:100是如分离自Ascobolus stictoideus的GH10木聚糖酶的基因序列。
SEQ ID NO:101是如从SEQ ID NO:100推导的氨基酸序列。
SEQ ID NO:102是来自Ascobolus stictoideus的成熟GH10木聚糖酶的氨基酸序列。
SEQ ID NO:103是如分离自德氏霉属物种(Drechslera sp)的GH62阿拉伯呋喃糖苷酶的基因序列。
SEQ ID NO:104是如从SEQ ID NO:104推导的氨基酸序列。
SEQ ID NO:105是来自德氏霉属物种的成熟GH62阿拉伯呋喃糖苷酶的氨基酸序列。
SEQ ID NO:106是如分离自解木聚糖杆菌属物种(Xylanibacterium sp)-61981的GH62阿拉伯呋喃糖苷酶的基因序列。
SEQ ID NO:107是如从SEQ ID NO:106推导的氨基酸序列。
SEQ ID NO:108是来自解木聚糖杆菌属物种-61981的成熟GH62阿拉伯呋喃糖苷酶的氨基酸序列。
SEQ ID NO:109是来自SEQ ID NO:106与His-标签的重组表达的DNA序列的 DNA序列。
SEQ ID NO:110是如从SEQ ID NO:109推导的氨基酸序列。
SEQ ID NO:111是获自SEQ ID NO:110的成熟GH62阿拉伯呋喃糖苷酶的氨基酸序列。
SEQ ID NO:112是如分离自雪霉微座孢(Microdochium nivale)的GH62阿拉伯呋喃糖苷酶的基因序列。
SEQ ID NO:113是如从SEQ ID NO:112推导的氨基酸序列。
SEQ ID NO:114是来自雪霉微座孢的成熟GH62阿拉伯呋喃糖苷酶的氨基酸序列。
SEQ ID NO:115是来自SEQ ID NO:112与His-标签的重组表达的DNA序列的 DNA序列。
SEQ ID NO:116是如从SEQ ID NO:115推导的氨基酸序列。
SEQ ID NO:117是获自SEQ ID NO:116的成熟GH62阿拉伯呋喃糖苷酶的氨基酸序列。
SEQ ID NO:118是如分离自透明嗜热腐质霉(Humicola hyalothermophila)的GH62阿拉伯呋喃糖苷酶的基因序列。
SEQ ID NO:119是如从SEQ ID NO:118推导的氨基酸序列。
SEQ ID NO:120是来自透明嗜热腐质霉的成熟GH62阿拉伯呋喃糖苷酶的氨基酸序列。
SEQ ID NO:121是如分离自膝弯孢霉(Curvularia geniculata)的GH62阿拉伯呋喃糖苷酶的基因序列。
SEQ ID NO:122是如从SEQ ID NO:121推导的氨基酸序列。
SEQ ID NO:123是来自膝弯孢霉的成熟GH62阿拉伯呋喃糖苷酶的氨基酸序列。
SEQ ID NO:124是如分离自鲁特介斯糖霉菌(Glycomyces rutgersensis)的GH62阿拉伯呋喃糖苷酶的基因序列。
SEQ ID NO:125是如从SEQ ID NO:124推导的氨基酸序列。
SEQ ID NO:126是来自鲁特介斯糖霉菌的成熟GH62阿拉伯呋喃糖苷酶的氨基酸序列。
SEQ ID NO:127是来自SEQ ID NO:124与His-标签和赛威蛋白酶(Savinase) 信号肽的重组表达DNA序列的DNA序列。
SEQ ID NO:128是如从SEQ ID NO:127推导的氨基酸序列。
SEQ ID NO:129是获自SEQ ID NO:128的成熟GH62阿拉伯呋喃糖苷酶的氨基酸序列。
SEQ ID NO:130是如在美国国家科学院院刊(Proc Natl Acad Sci USA)，2010107:11889-11894和生物科技与生物化学(Biosci Biotechnol Biochem)2010 75: 342-345中所披露的如分离自灰盖鬼伞(Coprinopsis cinerea)的GH62阿拉伯呋喃糖苷酶的基因序列。
SEQ ID NO:131是如从SEQ ID NO:130推导的氨基酸序列。
SEQ ID NO:132是来自灰盖鬼伞的成熟GH62阿拉伯呋喃糖苷酶的氨基酸序列。
SEQ ID NO:133是来自SEQ ID NO:130与His-标签的重组表达的DNA序列的 DNA序列。
SEQ ID NO:134是如从SEQ ID NO:133推导的氨基酸序列。
SEQ ID NO:135是获自SEQ ID NO:134的成熟GH62阿拉伯呋喃糖苷酶的氨基酸序列。
SEQ ID NO:136是如分离自棘孢曲霉的GH62阿拉伯呋喃糖苷酶的基因序列。
SEQ ID NO:137是如从SEQ ID NO:136推导的氨基酸序列。
SEQ ID NO:138是来自棘孢曲霉的成熟GH62阿拉伯呋喃糖苷酶的氨基酸序列。
SEQ ID NO:139是如分离自嗜热雷米氏菌(Remersonia thermophila)的GH62 阿拉伯呋喃糖苷酶的基因序列。
SEQ ID NO:140是如从SEQ ID NO:139推导的氨基酸序列。
SEQ ID NO:141是来自嗜热雷米氏菌的成熟GH62阿拉伯呋喃糖苷酶的氨基酸序列。
SEQ ID NO:142是来自SEQ ID NO:139与His-标签的重组表达的DNA序列的 DNA序列。
SEQ ID NO:143是如从SEQ ID NO:142推导的氨基酸序列。
SEQ ID NO:144是获自SEQ ID NO:143的成熟GH62阿拉伯呋喃糖苷酶的氨基酸序列。
SEQ ID NO:145是如分离自暗边青霉(Penicillium soppii)的GH62阿拉伯呋喃糖苷酶的基因序列。
SEQ ID NO:155是如从SEQ ID NO:145推导的氨基酸序列。
SEQ ID NO:147是来自暗边青霉的成熟GH62阿拉伯呋喃糖苷酶的氨基酸序列。
SEQ ID NO:148是如分离自禾草离蠕孢(Bipolaris sorokiniana)的GH62阿拉伯呋喃糖苷酶的基因序列。
SEQ ID NO:149是如从SEQ ID NO:148推导的氨基酸序列。
SEQ ID NO:150是来自禾草离蠕孢的成熟GH62阿拉伯呋喃糖苷酶的氨基酸序列。
SEQ ID NO:151是来自SEQ ID NO:148与His-标签的重组表达的DNA序列的 DNA序列。
SEQ ID NO:152是如从SEQ ID NO:151推导的氨基酸序列。
SEQ ID NO:153是获自SEQ ID NO:152的成熟GH62阿拉伯呋喃糖苷酶的氨基酸序列。
SEQ ID NO:154是如分离自烟曲霉近缘种(Aspergillus fumigatiaffinis)的GH62 阿拉伯呋喃糖苷酶的基因序列。
SEQ ID NO:155是如从SEQ ID NO:154推导的氨基酸序列。
SEQ ID NO:156是来自烟曲霉近缘种的成熟GH62阿拉伯呋喃糖苷酶的氨基酸序列。
SEQ ID NO:157是如在“Genomic islands in the pathogenic filamentousfungus Aspergillus fumigatus[致病性丝状真菌烟曲霉中的基因组岛]”PLoS.DOI:10.1371/journal.pgen.1000046中披露的如分离自费希新萨托菌的GH62阿拉伯呋喃糖苷酶的基因序列。
SEQ ID NO:158是如从SEQ ID NO:157推导的氨基酸序列。
SEQ ID NO:159是来自费希新萨托菌的成熟GH62阿拉伯呋喃糖苷酶的氨基酸序列。
SEQ ID NO:160是如分离自沙生梭孢壳(Thielavia arenaria)的GH62阿拉伯呋喃糖苷酶的基因序列。
SEQ ID NO:161是如从SEQ ID NO:160推导的氨基酸序列。
SEQ ID NO:162是来自沙生梭孢壳的成熟GH62阿拉伯呋喃糖苷酶的氨基酸序列。
SEQ ID NO:163是如分离自绿毛壳菌(Chaetomium olivicolor)的GH62阿拉伯呋喃糖苷酶的基因序列。
SEQ ID NO:164是如从SEQ ID NO:163推导的氨基酸序列。
SEQ ID NO:165是来自绿毛壳菌的成熟GH62阿拉伯呋喃糖苷酶的氨基酸序列。
SEQ ID NO:166是如分离自栖土梭孢壳(Thielavia terricola)的GH62阿拉伯呋喃糖苷酶的基因序列。
SEQ ID NO:167是如从SEQ ID NO:166推导的氨基酸序列。
SEQ ID NO:168是来自栖土梭孢壳的成熟GH62阿拉伯呋喃糖苷酶的氨基酸序列。
SEQ ID NO:169是如分离自栖土梭孢壳的GH62阿拉伯呋喃糖苷酶的基因序列。
SEQ ID NO:170是如从SEQ ID NO:169推导的氨基酸序列。
SEQ ID NO:171是来自栖土梭孢壳的成熟GH62阿拉伯呋喃糖苷酶的氨基酸序列。
SEQ ID NO:172是如分离自腐质霉属物种(Humicola sp)的GH62阿拉伯呋喃糖苷酶的基因序列。
SEQ ID NO:173是如从SEQ ID NO:172推导的氨基酸序列。
SEQ ID NO:174是来自腐质霉属物种的成熟GH62阿拉伯呋喃糖苷酶的氨基酸序列。
SEQ ID NO:175是如在Nature[自然]，2006 444:97-101中披露的如分离自玉蜀黍黑粉菌的GH10木聚糖酶的基因序列。
SEQ ID NO:176是如从SEQ ID NO:175推导的氨基酸序列。
SEQ ID NO:177是来自玉蜀黍黑粉菌的成熟GH10木聚糖酶的氨基酸序列
SEQ ID NO:178是来自SEQ ID NO:175与His-标签的重组表达的DNA序列的 DNA序列。
SEQ ID NO:179是如从SEQ ID NO:178推导的氨基酸序列。
SEQ ID NO:180是获自SEQ ID NO:179的成熟GH10木聚糖酶的氨基酸序列。
定义
等位基因变体：术语“等位基因变体”意指占据同一染色体基因座的基因的两种或更多种可替代形式中的任一种。等位基因变异由突变天然产生，并且可以导致群体内的多态性。基因突变可以是沉默的(在所编码的多肽中没有改变)或可编码具有改变的氨基酸序列的多肽。多肽的等位基因变体是由基因的等位基因变体编码的多肽。
阿拉伯呋喃糖苷酶：术语“阿拉伯呋喃糖苷酶”意指一种α-L-阿拉伯呋喃糖苷阿拉伯呋喃水解酶(EC 3.2.1.55)，其催化α-L-阿拉伯糖苷中的末端非还原性α-L- 阿拉伯呋喃糖苷残基的水解。该酶对α-L-阿拉伯呋喃糖苷、包含(1,3)-和/或(1,2)-和/ 或(1,5)-键的α-L-阿拉伯聚糖、阿拉伯糖基木聚糖以及阿拉伯半乳聚糖起作用。α-L- 阿拉伯呋喃糖苷酶还被称为阿拉伯糖苷酶、α-阿拉伯糖苷酶、α-L-阿拉伯糖苷酶、α- 阿拉伯呋喃糖苷酶、多糖α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶、α-L-阿拉伯呋喃糖苷水解酶、L- 阿拉伯糖苷酶、或α-L-阿拉伯聚糖酶。可以使用每ml的100mM乙酸钠(pH 5) 中5mg的中等粘度小麦阿拉伯糖基木聚糖(麦格酶国际爱尔兰股份有限公司 (Megazyme International Ireland,Ltd.)，爱尔兰威克洛郡布瑞公司(Bray,Co. Wicklow,Ireland)以总体积200μl在40℃下持续30分钟，接着通过
Figure RE-GDA0003685268660000231
HPX-87H柱层析(伯乐实验室有限公司(Bio-Rad Laboratories,Inc.)，赫拉克勒斯，加利福尼亚州，美国)进行阿拉伯糖分析来测定阿拉伯呋喃糖苷酶活性。
本发明的阿拉伯呋喃糖苷酶具有选自以下列表的一种或多种多肽的阿拉伯呋喃糖苷酶活性的至少50％，该列表由以下各项组成：SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:12、 SEQ IDNO:15、SEQ ID NO:18、SEQ ID NO:21、SEQ ID NO:24、SEQ ID NO:27、SEQ ID NO:30、SEQ IDNO:33、SEQ ID NO:36、SEQ ID NO:39、SEQ ID NO:42、 SEQ ID NO:45、SEQ ID NO:48、SEQID NO:51、SEQ ID NO:54、SEQ ID NO:57、 SEQ ID NO:60、SEQ ID NO:63、SEQ ID NO:66、SEQ ID NO:69、SEQ ID NO:105、 SEQ ID NO:108、SEQ ID NO:111、SEQ ID NO:114、SEQ IDNO:117、SEQ ID NO: 120、SEQ ID NO:123、SEQ ID NO:126、SEQ ID NO:129、SEQ ID NO:132、SEQ ID NO:135、SEQ ID NO:138、SEQ ID NO:141、SEQ ID NO:144、SEQ ID NO:147、SEQ ID NO:150、SEQ ID NO:153、SEQ ID NO:156、SEQ ID NO:159、SEQ ID NO: 162、SEQ IDNO:165、SEQ ID NO:168、SEQ ID NO:171和SEQ ID NO:174。在一个优选的实施例中，本发明的阿拉伯呋喃糖苷酶具有选自以下列表的一种或多种多肽的阿拉伯呋喃糖苷酶活性的至少70％，该列表由以下各项组成：SEQ ID NO:9、 SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:15、SEQ ID NO:18、SEQ ID NO:21、SEQ ID NO:24、 SEQ ID NO:27、SEQ ID NO:30、SEQ ID NO:33、SEQ IDNO:36、SEQ ID NO:39、 SEQ ID NO:42、SEQ ID NO:45、SEQ ID NO:48、SEQ ID NO:51、SEQID NO:54、 SEQ ID NO:57、SEQ ID NO:60、SEQ ID NO:63、SEQ ID NO:66、SEQ ID NO:69、SEQ ID NO:105、SEQ ID NO:108、SEQ ID NO:111、SEQ ID NO:114、SEQ ID NO: 117、SEQ IDNO:120、SEQ ID NO:123、SEQ ID NO:126、SEQ ID NO:129、SEQ ID NO:132、SEQ ID NO:135、SEQ ID NO:138、SEQ ID NO:141、SEQ ID NO:144、 SEQ ID NO:147、SEQ ID NO:150、SEQ IDNO:153、SEQ ID NO:156、SEQ ID NO: 159、SEQ ID NO:162、SEQ ID NO:165、SEQ ID NO:168、SEQ ID NO:171和SEQ ID NO:174。在一个优选的实施例中，本发明的阿拉伯呋喃糖苷酶具有选自以下列表的一种或多种多肽的阿拉伯呋喃糖苷酶活性的至少80％，该列表由以下各项组成：SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:15、SEQ ID NO:18、SEQ ID NO: 21、SEQ ID NO:24、SEQ ID NO:27、SEQ ID NO:30、SEQ ID NO:33、SEQ ID NO: 36、SEQ ID NO:39、SEQ ID NO:42、SEQ ID NO:45、SEQ ID NO:48、SEQ ID NO: 51、SEQ ID NO:54、SEQ IDNO:57、SEQ ID NO:60、SEQ ID NO:63、SEQ ID NO: 66、SEQ ID NO:69、SEQ ID NO:105、SEQID NO:108、SEQ ID NO:111、SEQ ID NO:114、SEQ ID NO:117、SEQ ID NO:120、SEQ ID NO:123、SEQ ID NO:126、 SEQ ID NO:129、SEQ ID NO:132、SEQ ID NO:135、SEQ ID NO:138、SEQ ID NO: 141、SEQ ID NO:144、SEQ ID NO:147、SEQ ID NO:150、SEQ ID NO:153、SEQ IDNO:156、SEQ ID NO:159、SEQ ID NO:162、SEQ ID NO:165、SEQ ID NO:168、 SEQ ID NO:171和SEQ ID NO:174。在一个优选的实施例中，本发明的阿拉伯呋喃糖苷酶具有选自以下列表的一种或多种多肽的阿拉伯呋喃糖苷酶活性的至少90％，该列表由以下各项组成：SEQ IDNO:9、SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:15、SEQ ID NO:18、SEQ ID NO:21、SEQ ID NO:24、SEQ IDNO:27、SEQ ID NO:30、SEQ ID NO:33、SEQ ID NO:36、SEQ ID NO:39、SEQ ID NO:42、SEQ IDNO:45、SEQ ID NO:48、SEQ ID NO:51、SEQ ID NO:54、SEQ ID NO:57、SEQ ID NO:60、SEQ IDNO:63、SEQ ID NO:66、SEQ ID NO:69、SEQ ID NO:105、SEQ ID NO:108、SEQ ID NO:111、SEQID NO:114、SEQ ID NO:117、SEQ ID NO:120、SEQ ID NO:123、 SEQ ID NO:126、SEQ ID NO:129、SEQ ID NO:132、SEQ ID NO:135、SEQ ID NO: 138、SEQ ID NO:141、SEQ ID NO:144、SEQ ID NO:147、SEQ ID NO:150、SEQ ID NO:153、SEQ ID NO:156、SEQ ID NO:159、SEQ IDNO:162、SEQ ID NO:165、 SEQ ID NO:168、SEQ ID NO:171和SEQ ID NO:174。在一个优选的实施例中，本发明的阿拉伯呋喃糖苷酶具有选自以下列表的一种或多种多肽的阿拉伯呋喃糖苷酶活性的至少95％，该列表由以下各项组成：SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:15、SEQ ID NO:18、SEQ ID NO:21、SEQ ID NO:24、SEQ ID NO:27、SEQ ID NO:30、SEQ IDNO:33、SEQ ID NO:36、SEQ ID NO:39、SEQ ID NO:42、SEQ ID NO:45、SEQ ID NO:48、SEQ IDNO:51、SEQ ID NO:54、SEQ ID NO:57、SEQ ID NO:60、SEQ ID NO:63、SEQ ID NO:66、SEQ IDNO:69、SEQ ID NO:105、 SEQ ID NO:108、SEQ ID NO:111、SEQ ID NO:114、SEQ ID NO:117、SEQ ID NO: 120、SEQ ID NO:123、SEQ ID NO:126、SEQ ID NO:129、SEQ ID NO:132、SEQ IDNO:135、SEQ ID NO:138、SEQ ID NO:141、SEQ ID NO:144、SEQ ID NO:147、 SEQ ID NO:150、SEQ ID NO:153、SEQ ID NO:156、SEQ ID NO:159、SEQ ID NO: 162、SEQ ID NO:165、SEQ ID NO:168、SEQ ID NO:171和SEQ ID NO:174。
在一个优选的实施例中，本发明的阿拉伯呋喃糖苷酶具有SEQ ID NO:111的阿拉伯呋喃糖苷酶活性的至少50％，如至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少100％。在一个优选的实施例中，本发明的阿拉伯呋喃糖苷酶具有 SEQ ID NO:24的阿拉伯呋喃糖苷酶活性的至少50％，如至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少100％。
含阿拉伯木聚糖的材料：术语“含阿拉伯木聚糖的材料”意指包含阿拉伯木聚糖的任何材料。阿拉伯木聚糖是在植物(包括木头和谷物)的初生和次生细胞壁中发现的半纤维素，该阿拉伯木聚糖由两种戊糖、阿拉伯糖和木糖的共聚物组成。该阿拉伯木聚糖链包含大量的1,4-连接的木糖单元。许多木糖单元被2-、3-或2,3-取代的阿拉伯糖残基取代。
含阿拉伯木聚糖的材料的实例是草料、粗粮、种子和谷物(例如来自玉米、燕麦、黑麦、大麦、小麦的整体或通过粉碎、研磨等制备的)、树木或硬木(如杨树、柳树、桉树、棕榈、枫树、桦树)、竹子、草本和/或木本能源作物、农业粮食和饲料作物、动物饲料产品、木薯皮、可可豆荚、甘蔗、甜菜、槐豆粕、蔬菜或水果果渣、木材废料、树皮、刨花、锯末、木浆、制浆废液、废纸、纸板、建筑和拆除木材废料、工业或城市废水固体或污泥、肥料、来自酿造和/或发酵过程的副产物、湿酒糟、干酒糟、谷物渣、酒糟和甘蔗渣。
如在此所定义的草料还包括粗粮。草料是新鲜的植物物料，例如来自草料植物(禾草)和其他草料植物(海草、发芽谷物和豆类植物)或其任何组合的干草和青贮饲料。草料植物的实例是苜蓿(紫花苜蓿)、百脉根、芸苔属植物(例如，羽衣甘蓝、油菜籽(卡诺拉(canola))、芜菁甘蓝(瑞典芜菁)、萝卜)、三叶草(例如，杂三叶、红三叶、地三叶、白三叶)、禾草(例如，百慕大草、雀麦、伪燕麦草、羊茅、石南草(heath grass)、草地早熟禾、芒草、鸭茅(orchard grass)、黑麦草、柳枝稷、梯牧草(Timothy-grass))、玉米(玉蜀黍)、大麻、粟、大麦、燕麦、黑麦、高粱、大豆和小麦和蔬菜(如甜菜)。适用于青贮的作物是普通的禾草、三叶草、紫花苜蓿、野豌豆、燕麦、黑麦和玉蜀黍。草料进一步包括来自谷物产物的作物残余物(例如玉米秸秆，来自小麦、大麦、燕麦、黑麦和其他谷物的秸秆)，来自蔬菜像甜菜缨(beettop)的残余，来自油籽产物像来自大豆、油菜籽和其他豆类植物的茎和叶子的残余，以及来自用于动物或人类消耗的谷物精制过程或来自燃料生产或其他行业的部分。
粗粮一般是具有高水平纤维的干植物物料，例如来自种子和谷物以及作物残余物(例如秸秆、干椰肉(copra)、稻草、谷壳、甜菜废料)的纤维、麸、苞叶。
包含阿拉伯木聚糖的材料的优选来源是草料、粗粮、种子和谷物、甘蔗、甜菜和木浆。
体重增加：术语“体重增加”意指在给定时间段期间动物的活重的增加，例如，从第1天到第21天的体重增加。
cDNA：术语“cDNA”意指可以通过从获得自真核或原核细胞的成熟的、剪接的mRNA分子进行反转录而制备的DNA分子。cDNA缺乏可以存在于对应基因组 DNA中的内含子序列。早先的初始RNA转录本是mRNA的前体，其在呈现为成熟的剪接的mRNA之前要经一系列的步骤进行加工，包括剪接。
编码序列：术语“编码序列”意指直接指定一个多肽的氨基酸序列的多核苷酸。编码序列的边界一般由一个开放阅读框架决定，该开放阅读框架从一个起始密码子 (如ATG、GTG或TTG)开始并且以一个终止密码子(如TAA、TAG或TGA) 结束。编码序列可以是一种基因组DNA、cDNA、合成DNA或其组合。
控制序列：术语“控制序列”意指对于表达编码本发明的成熟多肽的多核苷酸所必需的核酸序列。每个控制序列对于编码该多肽的多核苷酸来说可以是天然的 (即，来自相同基因)或外源的(即，来自不同基因)，或相对于彼此是天然的或外源的。此类控制序列包括但不限于前导序列、聚腺苷酸化序列、前肽序列、启动子、信号肽序列、以及转录终止子。至少，控制序列包括启动子，以及转录和翻译终止信号。出于引入有利于将这些控制序列与编码一种多肽的多核苷酸的编码区连接的特异性限制酶切位点的目的，这些控制序列可以提供有多个接头。
表达：术语“表达”包括涉及多肽产生的任何步骤，包括但不限于，转录、转录后修饰、翻译、翻译后修饰、以及分泌。
表达载体：术语“表达载体”意直链性或环状DNA分子，该分子包含编码多肽的多核苷酸并且该多核苷酸可操作地与提供用于其表达的控制序列连接。
饲料转化率：术语“饲料转化率”是指用来增加动物的体重一个指定量的喂给动物的饲料量。改进的饲料转化率意指较低的饲料转化率。通过“较低的饲料转化率”或“改进的饲料转化率”，其意味着当饲料不包括所述饲料添加剂组合物时，与以将动物体重增加到相同量所需的饲料量相比，在饲料中使用饲料添加剂组合物导致需要将更少量的饲料喂给动物，以增加动物的体重一个指定量。
饲料效率：术语“饲料效率”是指当动物在一段时间内被任意喂养或喂养指定量的食物时每单位饲料的体重增加量。“增加的饲料效率”是指根据本发明的饲料添加剂组合物在饲料中的使用导致与不用所存在的所述饲料添加剂组合物喂养的动物相比，每单位饲料摄入的增加的增重。
片段：术语“片段”意指从成熟多肽或结构域的氨基和/或羧基末端缺失一个或多个(例如，若干个)氨基酸的多肽；其中该片段具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性。
在一方面，片段包含成熟多肽的至少90％的氨基酸，如272个氨基酸(SEQ ID NO:8或9)、273个氨基酸(SEQ ID NO:11或12)、344个氨基酸(SEQ ID NO: 14或15)、340个氨基酸(SEQ ID NO:17或18)、280个氨基酸(SEQ ID NO:20 或21)、272个氨基酸(SEQ ID NO:23或24)、278个氨基酸(SEQ ID NO:26 或27)、394个氨基酸(SEQ ID NO:29或30)、401个氨基酸(SEQ ID NO:32 或33)、394个氨基酸(SEQ ID NO:35或36)、401个氨基酸(SEQ ID NO:38 或39)、286个氨基酸(SEQ ID NO:41或42)、293个氨基酸(SEQ ID NO:44 或45)、272个氨基酸(SEQ ID NO:47或48)、280个氨基酸(SEQ ID NO:50 或51)、328个氨基酸(SEQ ID NO:53或54)、336个氨基酸(SEQ ID NO:56 或57)、392个氨基酸(SEQ ID NO:59或60)、400个氨基酸(SEQ ID NO:62 或63)、272个氨基酸(SEQ ID NO:65或66)、280个氨基酸(SEQ ID NO:68 或69)、346个氨基酸(SEQ ID NO:70)、259个氨基酸(SEQ ID NO:71)、277 个氨基酸(SEQ IDNO:72)、176个氨基酸(SEQ ID NO:73)、183个氨基酸(SEQ ID NO:74)、164个氨基酸(SEQ IDNO:75)、165个氨基酸(SEQ ID NO:77或 78)、163个氨基酸(SEQ ID NO:80或81)、269个氨基酸(SEQ ID NO:83或84)、 276个氨基酸(SEQ ID NO:86或87)、169个氨基酸(SEQ ID NO:88)、170个氨基酸(SEQ ID NO:89)、183个氨基酸(SEQ ID NO:98或99)、304个氨基酸 (SEQID NO:101或102)、272个氨基酸(SEQ ID NO:104或105)、418个氨基酸(SEQ ID NO:107或108)、328个氨基酸(SEQ ID NO:113或114)、322个氨基酸(SEQ ID NO:119或120)、272个氨基酸(SEQ ID NO:122或123)、408 个氨基酸(SEQ ID NO:125或126)、340个氨基酸(SEQ IDNO:131或132)、 279个氨基酸(SEQ ID NO:137或138)、274个氨基酸(SEQ ID NO:140或141)、 272个氨基酸(SEQ ID NO:146或147)、293个氨基酸(SEQ ID NO:148或149)、 272个氨基酸(SEQ ID NO:149或150)、285个氨基酸(SEQ ID NO:155或156)、 285个氨基酸(SEQID NO:158或159)、273个氨基酸(SEQ ID NO:161或162)、 325个氨基酸(SEQ ID NO:164或165)、336个氨基酸(SEQ ID NO:167或168)、 272个氨基酸(SEQ ID NO:170或171)、328个氨基酸(SEQ ID NO:173或174) 或291个氨基酸(SEQ ID NO:176或177)。
在另一方面，片段包含成熟多肽的至少92％的氨基酸，如278个氨基酸(SEQ IDNO:8或9)、279个氨基酸(SEQ ID NO:11或12)、351个氨基酸(SEQ ID NO: 14或15)、348个氨基酸(SEQ ID NO:17或18)、286个氨基酸(SEQ ID NO:20 或21)、278个氨基酸(SEQ ID NO:23或24)、284个氨基酸(SEQ ID NO:26 或27)、403个氨基酸(SEQ ID NO:29或30)、410个氨基酸(SEQ ID NO:32 或33)、403个氨基酸(SEQ ID NO:35或36)、410个氨基酸(SEQ ID NO:38 或39)、293个氨基酸(SEQ ID NO:41或42)、300个氨基酸(SEQ ID NO:44 或45)、278个氨基酸(SEQ ID NO:47或48)、286个氨基酸(SEQ ID NO:50 或51)、335个氨基酸(SEQ ID NO:53或54)、343个氨基酸(SEQ ID NO:56 或57)、401个氨基酸(SEQ ID NO:59或60)、408个氨基酸(SEQ ID NO:62 或63)、278个氨基酸(SEQ ID NO:65或66)、286个氨基酸(SEQ ID NO:68 或69)、353个氨基酸(SEQ ID NO:70)、265个氨基酸(SEQ ID NO:71)、283 个氨基酸(SEQID NO:72)、179个氨基酸(SEQ ID NO:73)、187个氨基酸(SEQ ID NO:74)、167个氨基酸(SEQID NO:75)、168个氨基酸(SEQ ID NO:77或 78)、167个氨基酸(SEQ ID NO:80或81)、275个氨基酸(SEQ ID NO:83或84)、 282个氨基酸(SEQ ID NO:86或87)、173个氨基酸(SEQ IDNO:88)、174个氨基酸(SEQ ID NO:89)、187个氨基酸(SEQ ID NO:98或99)、311个氨基酸(SEQ ID NO:101或102)、278个氨基酸(SEQ ID NO:104或105)、427个氨基酸(SEQ ID NO:107或108)、335个氨基酸(SEQ ID NO:113或114)、329个氨基酸(SEQ ID NO:119或120)、278个氨基酸(SEQ ID NO:122或123)、417 个氨基酸(SEQ ID NO:125或126)、347个氨基酸(SEQID NO:131或132)、 285个氨基酸(SEQ ID NO:137或138)、280个氨基酸(SEQ ID NO:140或141)、 278个氨基酸(SEQ ID NO:146或147)、299个氨基酸(SEQ ID NO:148或149)、 278个氨基酸(SEQ ID NO:149或150)、291个氨基酸(SEQ ID NO:155或156)、 291个氨基酸(SEQID NO:158或159)、279个氨基酸(SEQ ID NO:161或162)、 333个氨基酸(SEQ ID NO:164或165)、344个氨基酸(SEQ ID NO:167或168)、 278个氨基酸(SEQ ID NO:170或171)、335个氨基酸(SEQ ID NO:173或174) 或298个氨基酸(SEQ ID NO:176或177)。
在另一方面，片段包含成熟多肽的至少94％的氨基酸，如284个氨基酸(SEQ IDNO:8或9)、285个氨基酸(SEQ ID NO:11或12)、359个氨基酸(SEQ ID NO: 14或15)、355个氨基酸(SEQ ID NO:17或18)、292个氨基酸(SEQ ID NO:20 或21)、284个氨基酸(SEQ ID NO:23或24)、290个氨基酸(SEQ ID NO:26 或27)、412个氨基酸(SEQ ID NO:29或30)、419个氨基酸(SEQ ID NO:32 或33)、412个氨基酸(SEQ ID NO:35或36)、419个氨基酸(SEQ ID NO:38 或39)、299个氨基酸(SEQ ID NO:41或42)、306个氨基酸(SEQ ID NO:44 或45)、284个氨基酸(SEQ ID NO:47或48)、292个氨基酸(SEQ ID NO:50 或51)、342个氨基酸(SEQ ID NO:53或54)、351个氨基酸(SEQ ID NO:56 或57)、410个氨基酸(SEQ ID NO:59或60)、417个氨基酸(SEQ ID NO:62 或63)、284个氨基酸(SEQ ID NO:65或66)、292个氨基酸(SEQ ID NO:68 或69)、361个氨基酸(SEQ ID NO:70)、271个氨基酸(SEQ ID NO:71)、290 个氨基酸(SEQID NO:72)、183个氨基酸(SEQ ID NO:73)、191个氨基酸(SEQ ID NO:74)、171个氨基酸(SEQID NO:75)、172个氨基酸(SEQ ID NO:77或 78)、170个氨基酸(SEQ ID NO:80或81)、281个氨基酸(SEQ ID NO:83或84)、 289个氨基酸(SEQ ID NO:86或87)、177个氨基酸(SEQ IDNO:88)、178个氨基酸(SEQ ID NO:89)、191个氨基酸(SEQ ID NO:98或99)、317个氨基酸(SEQ ID NO:101或102)、284个氨基酸(SEQ ID NO:104或105)、437个氨基酸(SEQ ID NO:107或108)、343个氨基酸(SEQ ID NO:113或114)、336个氨基酸(SEQ ID NO:119或120)、284个氨基酸(SEQ ID NO:122或123)、426 个氨基酸(SEQ ID NO:125或126)、355个氨基酸(SEQID NO:131或132)、 291个氨基酸(SEQ ID NO:137或138)、286个氨基酸(SEQ ID NO:140或141)、 284个氨基酸(SEQ ID NO:146或147)、306个氨基酸(SEQ ID NO:148或149)、 284个氨基酸(SEQ ID NO:149或150)、298个氨基酸(SEQ ID NO:155或156)、 298个氨基酸(SEQID NO:158或159)、285个氨基酸(SEQ ID NO:161或162)、 340个氨基酸(SEQ ID NO:164或165)、351个氨基酸(SEQ ID NO:167或168)、 284个氨基酸(SEQ ID NO:170或171)、343个氨基酸(SEQ ID NO:173或174) 或304个氨基酸(SEQ ID NO:176或177)。
在另一方面，片段包含成熟多肽的至少96％的氨基酸，如290个氨基酸(SEQ IDNO:8或9)、291个氨基酸(SEQ ID NO:11或12)、367个氨基酸(SEQ ID NO: 14或15)、363个氨基酸(SEQ ID NO:17或18)、299个氨基酸(SEQ ID NO:20 或21)、290个氨基酸(SEQ ID NO:23或24)、297个氨基酸(SEQ ID NO:26 或27)、420个氨基酸(SEQ ID NO:29或30)、428个氨基酸(SEQ ID NO:32 或33)、420个氨基酸(SEQ ID NO:35或36)、428个氨基酸(SEQ ID NO:38 或39)、305个氨基酸(SEQ ID NO:41或42)、313个氨基酸(SEQ ID NO:44 或45)、290个氨基酸(SEQ ID NO:47或48)、299个氨基酸(SEQ ID NO:50 或51)、349个氨基酸(SEQ ID NO:53或54)、358个氨基酸(SEQ ID NO:56 或57)、419个氨基酸(SEQ ID NO:59或60)、426个氨基酸(SEQ ID NO:62 或63)、290个氨基酸(SEQ ID NO:65或66)、299个氨基酸(SEQ ID NO:68 或69)、369个氨基酸(SEQ ID NO:70)、276个氨基酸(SEQ ID NO:71)、296 个氨基酸(SEQID NO:72)、187个氨基酸(SEQ ID NO:73)、195个氨基酸(SEQ ID NO:74)、175个氨基酸(SEQID NO:75)、176个氨基酸(SEQ ID NO:77或 78)、174个氨基酸(SEQ ID NO:80或81)、287个氨基酸(SEQ ID NO:83或84)、 295个氨基酸(SEQ ID NO:86或87)、180个氨基酸(SEQ IDNO:88)、181个氨基酸(SEQ ID NO:89)、195个氨基酸(SEQ ID NO:98或99)、324个氨基酸(SEQ ID NO:101或102)、290个氨基酸(SEQ ID NO:104或105)、446个氨基酸(SEQ ID NO:107或108)、350个氨基酸(SEQ ID NO:113或114)、343个氨基酸(SEQ ID NO:119或120)、290个氨基酸(SEQ ID NO:122或123)、435 个氨基酸(SEQ ID NO:125或126)、362个氨基酸(SEQID NO:131或132)、 297个氨基酸(SEQ ID NO:137或138)、292个氨基酸(SEQ ID NO:140或141)、 290个氨基酸(SEQ ID NO:146或147)、312个氨基酸(SEQ ID NO:148或149)、 290个氨基酸(SEQ ID NO:149或150)、304个氨基酸(SEQ ID NO:155或156)、 304个氨基酸(SEQID NO:158或159)、291个氨基酸(SEQ ID NO:161或162)、 347个氨基酸(SEQ ID NO:164或165)、359个氨基酸(SEQ ID NO:167或168)、 290个氨基酸(SEQ ID NO:170或171)、350个氨基酸(SEQ ID NO:173或174) 或311个氨基酸(SEQ ID NO:176或177)。
在另一方面，片段包含成熟多肽的至少98％的氨基酸，如296个氨基酸(SEQ IDNO:8或9)、297个氨基酸(SEQ ID NO:11或12)、374个氨基酸(SEQ ID NO: 14或15)、370个氨基酸(SEQ ID NO:17或18)、305个氨基酸(SEQ ID NO:20 或21)、296个氨基酸(SEQ ID NO:23或24)、303个氨基酸(SEQ ID NO:26 或27)、429个氨基酸(SEQ ID NO:29或30)、437个氨基酸(SEQ ID NO:32 或33)、429个氨基酸(SEQ ID NO:35或36)、437个氨基酸(SEQ ID NO:38 或39)、312个氨基酸(SEQ ID NO:41或42)、319个氨基酸(SEQ ID NO:44 或45)、296个氨基酸(SEQ ID NO:47或48)、305个氨基酸(SEQ ID NO:50 或51)、357个氨基酸(SEQ ID NO:53或54)、366个氨基酸(SEQ ID NO:56 或57)、427个氨基酸(SEQ ID NO:59或60)、435个氨基酸(SEQ ID NO:62 或63)、296个氨基酸(SEQ ID NO:65或66)、305个氨基酸(SEQ ID NO:68 或69)、376个氨基酸(SEQ ID NO:70)、282个氨基酸(SEQ ID NO:71)、302 个氨基酸(SEQID NO:72)、191个氨基酸(SEQ ID NO:73)、199个氨基酸(SEQ ID NO:74)、178个氨基酸(SEQID NO:75)、179个氨基酸(SEQ ID NO:77或 78)、177个氨基酸(SEQ ID NO:80或81)、293个氨基酸(SEQ ID NO:83或84)、 301个氨基酸(SEQ ID NO:86或87)、184个氨基酸(SEQ IDNO:88)、185个氨基酸(SEQ ID NO:89)、199个氨基酸(SEQ ID NO:98或99)、331个氨基酸(SEQ ID NO:101或102)、296个氨基酸(SEQ ID NO:104或105)、455个氨基酸(SEQ ID NO:107或108)、357个氨基酸(SEQ ID NO:113或114)、350个氨基酸(SEQ ID NO:119或120)、296个氨基酸(SEQ ID NO:122或123)、444 个氨基酸(SEQ ID NO:125或126)、370个氨基酸(SEQID NO:131或132)、 303个氨基酸(SEQ ID NO:137或138)、298个氨基酸(SEQ ID NO:140或141)、 296个氨基酸(SEQ ID NO:146或147)、319个氨基酸(SEQ ID NO:148或149)、 296个氨基酸(SEQ ID NO:149或150)、310个氨基酸(SEQ ID NO:155或156)、 310个氨基酸(SEQID NO:158或159)、297个氨基酸(SEQ ID NO:161或162)、 354个氨基酸(SEQ ID NO:164或165)、366个氨基酸(SEQ ID NO:167或168)、 296个氨基酸(SEQ ID NO:170或171)、357个氨基酸(SEQ ID NO:173或174) 或317个氨基酸(SEQ ID NO:176或177)。
在另一方面，片段包含成熟多肽的至少99％的氨基酸，如299个氨基酸(SEQ IDNO:8或9)、300个氨基酸(SEQ ID NO:11或12)、378个氨基酸(SEQ ID NO: 14或15)、374个氨基酸(SEQ ID NO:17或18)、308个氨基酸(SEQ ID NO:20 或21)、299个氨基酸(SEQ ID NO:23或24)、306个氨基酸(SEQ ID NO:26 或27)、434个氨基酸(SEQ ID NO:29或30)、442个氨基酸(SEQ ID NO:32 或33)、434个氨基酸(SEQ ID NO:35或36)、442个氨基酸(SEQ ID NO:38 或39)、315个氨基酸(SEQ ID NO:41或42)、323个氨基酸(SEQ ID NO:44 或45)、299个氨基酸(SEQ ID NO:47或48)、308个氨基酸(SEQ ID NO:50 或51)、360个氨基酸(SEQ ID NO:53或54)、369个氨基酸(SEQ ID NO:56 或57)、432个氨基酸(SEQ ID NO:59或60)、440个氨基酸(SEQ ID NO:62 或63)、299个氨基酸(SEQ ID NO:65或66)、308个氨基酸(SEQ ID NO:68 或69)、380个氨基酸(SEQ ID NO:70)、285个氨基酸(SEQ ID NO:71)、305 个氨基酸(SEQID NO:72)、193个氨基酸(SEQ ID NO:73)、201个氨基酸(SEQ ID NO:74)、180个氨基酸(SEQID NO:75)、181个氨基酸(SEQ ID NO:77或 78)、179个氨基酸(SEQ ID NO:80或81)、296个氨基酸(SEQ ID NO:83或84)、 304个氨基酸(SEQ ID NO:86或87)、186个氨基酸(SEQ IDNO:88)、187个氨基酸(SEQ ID NO:89)、201个氨基酸(SEQ ID NO:98或99)、334个氨基酸(SEQ ID NO:101或102)、299个氨基酸(SEQ ID NO:104或105)、460个氨基酸(SEQ ID NO:107或108)、361个氨基酸(SEQ ID NO:113或114)、354个氨基酸(SEQ ID NO:119或120)、299个氨基酸(SEQ ID NO:122或123)、449 个氨基酸(SEQ ID NO:125或126)、374个氨基酸(SEQID NO:131或132)、 306个氨基酸(SEQ ID NO:137或138)、301个氨基酸(SEQ ID NO:140或141)、 299个氨基酸(SEQ ID NO:146或147)、322个氨基酸(SEQ ID NO:148或149)、 299个氨基酸(SEQ ID NO:149或150)、313个氨基酸(SEQ ID NO:155或156)、 313个氨基酸(SEQID NO:158或159)、300个氨基酸(SEQ ID NO:161或162)、 358个氨基酸(SEQ ID NO:164或165)、370个氨基酸(SEQ ID NO:167或168)、 299个氨基酸(SEQ ID NO:170或171)、361个氨基酸(SEQ ID NO:173或174) 或320个氨基酸(SEQ ID NO:176或177)。
高度支链化的木聚糖：术语“高度支链化的木聚糖”意指在阿拉伯木聚糖主链中的超过50％的木糖单元是被取代的。这优选地从如在惠思曼(Huismann)等人 CarbohydratePolymers[碳水化合物聚合物]，2000，42:269-279中进行的连锁分析来计算。
宿主细胞：术语“宿主细胞”意指易于用包含本发明的多核苷酸的核酸构建体或表达载体转化、转染、转导等的任何细胞类型。术语“宿主细胞“涵盖由于复制期间发生的突变而与亲本细胞不同的亲本细胞的任何后代。
分离的：术语“分离的”意指处于自然界中不存在的形式或环境中的物质。分离的物质的非限制性实例包括：(1)任何非天然存在的物质；(2)至少部分地从与其天然相关联的一种或多种或所有天然存在的成分中去除的任何物质，包括但不限于任何酶、变体、核酸、蛋白质、肽或辅因子；(3)相对于在自然界中发现的那种物质通过人工修饰的任何物质；或(4)通过相对于与其天然相关联的其他组分增加该物质的量(例如，宿主细胞中的重组体产量；编码该物质的基因的多个拷贝；以及比与编码该物质的基因天然相关联的启动子更强的启动子的使用)而修饰的任何物质。
成熟多肽：术语“成熟多肽”意指在翻译和任何翻译后修饰如N末端加工、C 末端截短、糖基化作用、磷酸化作用等之后处于其最终形式的多肽。
在一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:8的氨基酸1至302，并且SEQ ID NO:2 的氨基酸-26至-1是信号肽。在另一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:9的氨基酸1 至302。
在一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:11的氨基酸1至303，并且SEQ ID NO: 11的氨基酸-26至-1是信号肽。在另一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:12的氨基酸1至303。
在一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:14的氨基酸1至382，并且SEQ ID NO: 15的氨基酸-21至-1是信号肽。在另一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:15的氨基酸1至382。
在一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:17的氨基酸1至378，并且SEQ ID NO: 17的氨基酸-17至-1是信号肽。在另一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:18的氨基酸1至378。
在一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:20的氨基酸1至311，并且SEQ ID NO: 20的氨基酸-20至-1是信号肽。在另一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:21的氨基酸1至311。
在一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:23的氨基酸1至302，并且SEQ ID NO: 23的氨基酸-29至-1是信号肽。在另一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:24的氨基酸1至302。
在一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:26的氨基酸1至309，并且SEQ ID NO: 26的氨基酸-16至-1是信号肽。在另一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:27的氨基酸1至309。
在一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:29的氨基酸1至438，并且SEQ ID NO: 29的氨基酸-36至-1是信号肽。在另一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:30的氨基酸1至438。在一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:32的氨基酸1至446，并且SEQ ID NO:32的氨基酸-27至-1是信号肽。在另一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:33 的氨基酸1至446。
在一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:35的氨基酸1至438，并且SEQ ID NO: 35的氨基酸-36至-1是信号肽。在另一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:36的氨基酸1至438。在一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:38的氨基酸1至446，并且SEQ ID NO:38的氨基酸-27至-1是信号肽。在另一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:39 的氨基酸1至446。
在一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:41的氨基酸1至318，并且SEQ ID NO: 41的氨基酸-18至-1是信号肽。在另一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:42的氨基酸1至318。在一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:44的氨基酸1至326，并且SEQ ID NO:44的氨基酸-18至-1是信号肽。在另一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:45 的氨基酸1至326。
在一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:47的氨基酸1至302，并且SEQ ID NO: 47的氨基酸-25至-1是信号肽。在另一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:48的氨基酸1至302。在一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:50的氨基酸1至311，并且SEQ ID NO:50的氨基酸-25至-1是信号肽。在另一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:51 的氨基酸1至311。
在一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:53的氨基酸1至364，并且SEQ ID NO: 53的氨基酸-24至-1是信号肽。在另一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:54的氨基酸1至364。在一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:56的氨基酸1至373，并且SEQ ID NO:56的氨基酸-24至-1是信号肽。在另一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:57 的氨基酸1至373。
在一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:59的氨基酸1至436，并且SEQ ID NO: 59的氨基酸-31至-1是信号肽。在另一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:60的氨基酸1至436。在一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:62的氨基酸1至444，并且SEQ ID NO:62的氨基酸-27至-1是信号肽。在另一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:63 的氨基酸1至444。
在一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:65的氨基酸1至302，并且SEQ ID NO: 65的氨基酸-19至-1是信号肽。在另一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:66的氨基酸1至302。在一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:68的氨基酸1至311，并且SEQ ID NO:68的氨基酸-19至-1是信号肽。在另一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:69 的氨基酸1至311。
在一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:77的氨基酸1至183，并且SEQ ID NO: 77的氨基酸-27至-1是信号肽。在另一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:78的氨基酸1至302。在一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:80的氨基酸1至181，并且SEQ ID NO:80的氨基酸-27至-1是信号肽。在另一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:81 的氨基酸1至181。
在一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:83的氨基酸1至299，并且SEQ ID NO: 83的氨基酸-42至-1是信号肽。在另一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:84的氨基酸1至299。在一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:86的氨基酸1至307，并且SEQ ID NO:86的氨基酸-27至-1是信号肽。在另一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:87 的氨基酸1至307。
在一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:98的氨基酸1至203，并且SEQ ID NO: 98的氨基酸-19至-1是信号肽。在另一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:99的氨基酸1至203。
在一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:101的氨基酸1至337，并且SEQ ID NO: 101的氨基酸-18至-1是信号肽。在另一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:102的氨基酸1至337。
在一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:104的氨基酸1至302，并且SEQ ID NO: 104的氨基酸-24至-1是信号肽。在另一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:105的氨基酸1至302。
在一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:107的氨基酸1至464，并且SEQ ID NO: 107的氨基酸-36至-1是信号肽。在另一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:108的氨基酸1至464。在一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:110的氨基酸1至472，并且 SEQ ID NO:110的氨基酸-27至-1是信号肽。在另一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO: 111的氨基酸1至472。
在一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:113的氨基酸1至364，并且SEQ ID NO: 113的氨基酸-18至-1是信号肽。在另一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:114的氨基酸1至364。在一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:116的氨基酸1至372，并且 SEQ ID NO:116的氨基酸-18至-1是信号肽。在另一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO: 117的氨基酸1至372。
在一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:119的氨基酸1至357，并且SEQ ID NO: 119的氨基酸-27至-1是信号肽。在另一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:120的氨基酸1至357。
在一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:122的氨基酸1至302，并且SEQ ID NO: 122的氨基酸-24至-1是信号肽。在另一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:123的氨基酸1至302。
在一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:125的氨基酸1至453，并且SEQ ID NO: 125的氨基酸-39至-1是信号肽。在另一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:126的氨基酸1至453。在一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:128的氨基酸1至461，并且 SEQ ID NO:128的氨基酸-27至-1是信号肽。在另一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO: 129的氨基酸1至461。
在一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:131的氨基酸1至377，并且SEQ ID NO: 131的氨基酸-20至-1是信号肽。在另一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:132的氨基酸1至377。在一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:134的氨基酸1至385，并且SEQ ID NO:134的氨基酸-20至-1是信号肽。在另一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO: 135的氨基酸1至385。
在一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:137的氨基酸1至309，并且SEQ ID NO: 137的氨基酸-26至-1是信号肽。在另一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:138的氨基酸1至309。
在一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:140的氨基酸1至304，并且SEQ ID NO: 140的氨基酸-21至-1是信号肽。在另一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:141的氨基酸1至304。在一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:143的氨基酸1至312，并且 SEQ ID NO:143的氨基酸-21至-1是信号肽。在另一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO: 144的氨基酸1至312。
在一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:146的氨基酸1至302，并且SEQ ID NO: 146的氨基酸-26至-1是信号肽。在另一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:147的氨基酸1至302。
在一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:149的氨基酸1至302，并且SEQ ID NO: 149的氨基酸-23至-1是信号肽。在另一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:150的氨基酸1至302。在一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:152的氨基酸1至310，并且 SEQ ID NO:152的氨基酸-23至-1是信号肽。在另一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO: 153的氨基酸1至310。
在一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:155的氨基酸1至316，并且SEQ ID NO: 155的氨基酸-26至-1是信号肽。在另一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:156的氨基酸1至316。
在一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:158的氨基酸1至316，并且SEQ ID NO: 158的氨基酸-15至-1是信号肽。在另一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:159的氨基酸1至316。
在一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:161的氨基酸1至303，并且SEQ ID NO: 161的氨基酸-16至-1是信号肽。在另一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:162的氨基酸1至303。
在一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:164的氨基酸1至361，并且SEQ ID NO: 164的氨基酸-27至-1是信号肽。在另一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:165的氨基酸1至361。
在一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:167的氨基酸1至373，并且SEQ ID NO: 167的氨基酸-24至-1是信号肽。在另一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:168的氨基酸1至373。
在一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:170的氨基酸1至302，并且SEQ ID NO: 170的氨基酸-22至-1是信号肽。在另一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:171的氨基酸1至302。
在一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:173的氨基酸1至364，并且SEQ ID NO: 173的氨基酸-19至-1是信号肽。在另一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:174的氨基酸1至364。
在一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:176的氨基酸1至323，并且SEQ ID NO: 176的氨基酸-21至-1是信号肽。在另一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:177的氨基酸1至323。在一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:179的氨基酸1至331，并且 SEQ ID NO:179的氨基酸-21至-1是信号肽。在另一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO: 180的氨基酸1至331。
在本领域中已知的是，宿主细胞可以产生由相同多核苷酸表达的两种或更多种不同成熟多肽(即，具有一个不同的C-末端和/或N-末端氨基酸)的混合物。本领域还已知，不同的宿主细胞不同地加工多肽，并且因此一个表达一种多核苷酸的宿主细胞当与另一个表达相同多核苷酸的宿主细胞相比时可以产生一种不同的成熟多肽(例如，具有一个不同的C末端和/或N末端氨基酸)。
成熟多肽编码序列：术语“成熟多肽编码序列”意指编码具有阿拉伯呋喃糖苷酶或木聚糖酶活性的成熟多肽的多核苷酸。在一方面，成熟多肽编码序列是SEQ ID NO:10的核苷酸79至987；SEQ ID NO:10的核苷酸1至78编码信号肽。
在一方面，成熟多肽编码序列是SEQ ID NO:25的核苷酸49至70和核苷酸123 至1027的结合序列或其cDNA序列；SEQ ID NO:25的核苷酸1至48编码信号肽。
在一方面，成熟多肽编码序列是SEQ ID NO:22的核苷酸88至993；SEQ ID NO: 22的核苷酸1至87编码信号肽。
在一方面，成熟多肽编码序列是SEQ ID NO:28的核苷酸109至1422；SEQ ID NO:28的核苷酸1至108编码信号肽。
在一方面，成熟多肽编码序列是SEQ ID NO:31的核苷酸82至1419；SEQ ID NO:31的核苷酸1至81编码信号肽。
在一方面，成熟多肽编码序列是SEQ ID NO:34的核苷酸109至1422；SEQ ID NO:34的核苷酸1至108编码信号肽。
在一方面，成熟多肽编码序列是SEQ ID NO:37的核苷酸82至1419；SEQ ID NO:37的核苷酸1至81编码信号肽。
在一方面，成熟多肽编码序列是SEQ ID NO:46的核苷酸76至981；SEQ ID NO: 46的核苷酸1至75编码信号肽。
在一方面，成熟多肽编码序列是SEQ ID NO:49的核苷酸76至1008；SEQ ID NO:49的核苷酸1至75编码信号肽。
在一方面，成熟多肽编码序列是SEQ ID NO:52的核苷酸73至318、核苷酸 470至1298和核苷酸1392至1408的结合序列；SEQ ID NO:52的核苷酸1至72 编码信号肽。
在一方面，成熟多肽编码序列是SEQ ID NO:55的核苷酸73至318、核苷酸 470至1298和核苷酸1392至1435的结合序列；SEQ ID NO:55的核苷酸1至72 编码信号肽。
在一方面，成熟多肽编码序列是SEQ ID NO:58的核苷酸94至1401；SEQ ID NO:58的核苷酸1至93编码信号肽。
在一方面，成熟多肽编码序列是SEQ ID NO:61的核苷酸82至1413；SEQ ID NO:61的核苷酸1至81编码信号肽。
在一方面，成熟多肽编码序列是SEQ ID NO:64的核苷酸58至330、核苷酸 403至655、核苷酸795至948和核苷酸1100至1325的结合序列；SEQ ID NO:64 的核苷酸1至57编码信号肽。
在一方面，成熟多肽编码序列是SEQ ID NO:67的核苷酸58至330、核苷酸 403至655、核苷酸795至948和核苷酸1100至1352的结合序列；SEQ ID NO:67 的核苷酸1至57编码信号肽。
在一方面，成熟多肽编码序列是SEQ ID NO:76的核苷酸82至633；SEQ ID NO: 76的核苷酸1至81编码信号肽。
在一方面，成熟多肽编码序列是SEQ ID NO:79的核苷酸82至624；SEQ ID NO: 79的核苷酸1至81编码信号肽。
在一方面，成熟多肽编码序列是SEQ ID NO:82的核苷酸127至1023；SEQ ID NO:82的核苷酸1至126编码信号肽。
在一方面，成熟多肽编码序列是SEQ ID NO:85的核苷酸82至1002；SEQ ID NO:85的核苷酸1至81编码信号肽。
在一方面，成熟多肽编码序列是SEQ ID NO:97的核苷酸58至269和核苷酸 328至724的结合序列；SEQ ID NO:97的核苷酸1至57编码信号肽。
在一方面，成熟多肽编码序列是SEQ ID NO:100的核苷酸55至71、核苷酸 121至524、核苷酸594至1054和核苷酸1142至1270的结合序列；SEQ ID NO:100 的核苷酸1至54编码信号肽。
在一方面，成熟多肽编码序列是SEQ ID NO:103的核苷酸73至978；SEQ ID NO:103的核苷酸1至72编码信号肽。
在一方面，成熟多肽编码序列是SEQ ID NO:106的核苷酸109至1500；SEQ ID NO:106的核苷酸1至108编码信号肽。
在一方面，成熟多肽编码序列是SEQ ID NO:109的核苷酸82至1497；SEQ ID NO:109的核苷酸1至81编码信号肽。
在一方面，成熟多肽编码序列是SEQ ID NO:112的核苷酸55至1146；SEQ ID NO:112的核苷酸1至54编码信号肽。
在一方面，成熟多肽编码序列是SEQ ID NO:115的核苷酸55至1170；SEQ ID NO:115的核苷酸1至54编码信号肽。
在一方面，成熟多肽编码序列是SEQ ID NO:118的核苷酸82至1135和核苷酸1226至1242的结合序列；SEQ ID NO:118的核苷酸1至81编码信号肽。
在一方面，成熟多肽编码序列是SEQ ID NO:121的核苷酸73至978；SEQ ID NO:121的核苷酸1至72编码信号肽。
在一方面，成熟多肽编码序列是SEQ ID NO:124的核苷酸118至1476；SEQ ID NO:124的核苷酸1至117编码信号肽。
在一方面，成熟多肽编码序列是SEQ ID NO:127的核苷酸82至1464；SEQ ID NO:127的核苷酸1至81编码信号肽。
在一方面，成熟多肽编码序列是SEQ ID NO:130的核苷酸61至93、核苷酸 152至162、核苷酸216至262和核苷酸323至1362的结合序列；SEQ ID NO:130 的核苷酸1至60编码信号肽。
在一方面，成熟多肽编码序列是SEQ ID NO:133的核苷酸61至93、核苷酸 152至162、核苷酸216至262和核苷酸323至1386的结合序列；SEQ ID NO:133 的核苷酸1至60编码信号肽。
在一方面，成熟多肽编码序列是SEQ ID NO:136的核苷酸79至1005；SEQ ID NO:136的核苷酸1至78编码信号肽。
在一方面，成熟多肽编码序列是SEQ ID NO:139的核苷酸64至358和核苷酸 512至1128的结合序列；SEQ ID NO:139的核苷酸1至63编码信号肽。
在一方面，成熟多肽编码序列是SEQ ID NO:142的核苷酸64至358和核苷酸 512至1152的结合序列；SEQ ID NO:142的核苷酸1至63编码信号肽。
在一方面，成熟多肽编码序列是SEQ ID NO:145的核苷酸79至984；SEQ ID NO:145的核苷酸1至78编码信号肽。
在一方面，成熟多肽编码序列是SEQ ID NO:148的核苷酸70至975；SEQ ID NO:148的核苷酸1至69编码信号肽。
在一方面，成熟多肽编码序列是SEQ ID NO:151的核苷酸70至999；SEQ ID NO:151的核苷酸1至69编码信号肽。
在一方面，成熟多肽编码序列是SEQ ID NO:154的核苷酸79至1026；SEQ ID NO:154的核苷酸1至78编码信号肽。
在一方面，成熟多肽编码序列是SEQ ID NO:157的核苷酸46至993；SEQ ID NO:157的核苷酸1至45编码信号肽。
在一方面，成熟多肽编码序列是SEQ ID NO:160的核苷酸49至957；SEQ ID NO:160的核苷酸1至48编码信号肽。
在一方面，成熟多肽编码序列是SEQ ID NO:163的核苷酸82至1147和核苷酸1208至1224的结合序列；SEQ ID NO:163的核苷酸1至81编码信号肽。
在一方面，成熟多肽编码序列是SEQ ID NO:166的核苷酸73至318、核苷酸 478至1333和核苷酸1396至1412的结合序列；SEQ ID NO:166的核苷酸1至72 编码信号肽。
在一方面，成熟多肽编码序列是SEQ ID NO:169的核苷酸67至95、核苷酸 229至469、核苷酸435至940和核苷酸1052至1280的结合序列；SEQ ID NO:169 的核苷酸1至66编码信号肽。
在一方面，成熟多肽编码序列是SEQ ID NO:172的核苷酸58至1132和核苷酸1199至1215的结合序列；SEQ ID NO:172的核苷酸1至57编码信号肽。
在一方面，成熟多肽编码序列是SEQ ID NO:175的核苷酸64至492、核苷酸 571至988和核苷酸1080至1201的结合序列；SEQ ID NO:175的核苷酸1至63 编码信号肽。
在一方面，成熟多肽编码序列是SEQ ID NO:178的核苷酸64至492、核苷酸 571至988和核苷酸1080至1225的结合序列；SEQ ID NO:178的核苷酸1至63 编码信号肽。
核酸构建体：术语“核酸构建体”意指单链或双链的核酸分子，该核酸分子是从天然存在的基因中分离的，或以本来不存在于自然界中的方式被修饰成含有核酸的区段，或是合成的，该核酸分子包括一个或多个控制序列。
营养素消化率：术语“营养素消化率”意指从胃肠道或胃肠道的指定区段(例如小肠)处消失的营养素的部分。营养素消化率可测量为所给予至受试者的营养素与受试者粪便中所排出来的营养素之间的差值、或给予至受试者的营养素与保留在胃肠道指定区段(例如回肠)上的消化物中的营养素之间的差值。
如在此使用的，营养素消化率可通过在一段时间期间收集总排泄物，测量所摄入营养素与所排泄的营养素之间的差值；或利用不会被动物吸收，并允许研究者计算整个胃肠道或胃肠道区段中所消失的营养的量的惰性标记物来测量。这种惰性标记物可以是二氧化钛、氧化铬或酸不溶性灰分。消化率可表示为营养素在饲料中的百分比，或表示为可消化的营养素的质量单位/饲料中的营养素的质量单位。如在此使用的，营养素消化率涵盖淀粉消化率、脂肪消化率、蛋白质消化率和氨基酸消化率。
如在此使用的，能量消化率意指所消耗的饲料总能量减去粪便的总能量，或所消耗的饲料总能量减去动物胃肠道指定区段(例如回肠)上的剩余消化物的总能量。如在此使用的，代谢能是指表观代谢能，并且意指所消耗的饲料总能量减去粪便、尿和消化的气体产物中包含的总能量。能量消化率和代谢能可测量为总能量的摄取与粪便中排泄的或胃肠道指定区段中存在的消化物中的总能量之间的差值，其使用与测量营养素消化率相同的方法，针对氮排泄进行适当校正以计算饲料的代谢能。
可操作地连接：术语“可操作地连接”意指如下的构造，其中，控制序列相对于多核苷酸的编码序列安置在适当位置，从而使得该控制序列指导该编码序列的表达。
序列一致性：用参数“序列一致性”来描述两个氨基酸序列之间或两个核苷酸序列之间的相关性。
出于本发明的目的，使用如在EMBOSS包(EMBOSS：欧洲分子生物学开放软件套件(The European Molecular Biology Open Software Suite)，赖斯(Rice)等人，2000，遗传学趋势(Trends Genet.)16:276-277)(优选3.0.0版或更新版本) 的尼德尔(Needle)程序中所实施的尼德尔曼-翁施(Needleman-Wunsch)算法(尼德尔曼(Needleman)和翁施(Wunsch)，1970，分子生物学杂志(J.Mol.Biol.) 48:443-453)来确定两个氨基酸序列之间的序列一致性的程度。使用6.1.0版。所用的任选参数是空位开放罚分10、空位延伸罚分0.5，和EBLOSUM62(BLOSUM62 的EMBOSS版)取代矩阵。尼德尔标注的“最长的一致性”的输出(使用-非简化选项获得)被用作百分比一致性，并且如下计算：
(一致的残基x 100)/(比对长度-比对中的空位总数)
出于本发明的目的，使用如在EMBOSS包(EMBOSS：欧洲分子生物学开放软件套件，赖斯(Rice)等人，2000，同上)(优选3.0.0版或更新版本)的尼德尔程序中所实施的尼德尔曼-翁施算法(尼德尔曼(Needleman)和翁施(Wunsch)， 1970，同上)来确定两个脱氧核糖核苷酸序列之间的序列一致性程度。使用6.1.0 版。所用的任选参数是空位开放罚分10、空位延伸罚分0.5，和EDNAFULL(NCBI NUC4.4的EMBOSS版)替代矩阵。尼德尔标注的“最长的一致性”的输出(使用 -非简化选项获得)被用作百分比一致性，并且如下计算：
(一致的脱氧核糖核酸核苷酸x 100)/(比对长度-比对中的空位总数)。
来自脱脂脱淀粉玉蜀黍(DFDSM)的溶解的木糖：术语“来自脱脂脱淀粉玉蜀黍(DFDSM)的溶解的木糖”意指，与酶孵育之前存在于底物中的木糖的总量相比，用酶孵育后在上清液中所测量的木糖的总量。如在此所述，酶将底物中的木聚糖溶解成可溶性片段(多糖)。由于木糖测定仅测量木糖(单糖)，所以溶解的木聚糖需要被酸水解，以便在进行木糖测定之前以单糖释放所有的木糖。来自脱脂脱淀粉玉蜀黍(DFDSM)的溶解的木糖百分率可以如在文中实例23中所描述的进行计算，并且在实例中以‘溶解的木糖百分率’表示。
术语“溶解来自脱脂脱淀粉玉蜀黍(DFDSM)的至少x％木糖”意指在如上所述的孵育之后，在上清液中测量的木糖总量至少为x％。术语“当GH62多肽不存在时，从DFDSM中溶解比GH10或GH11多肽至少多x倍的木糖”意指在如上所述的孵育之后，与当使用GH10或GH11木聚糖酶而不存在GH62阿拉伯呋喃糖苷酶时相比，使用GH10或GH11木聚糖酶和GH62阿拉伯呋喃糖苷酶组合在上清液中测量的木糖总量至少高x倍。
严格条件：不同的严格条件定义如下。
术语“非常低严格条件”意指对于长度为至少100个核苷酸的探针而言，遵循标准DNA印迹程序，在42℃下在5X SSPE、0.3％SDS、200微克/ml剪切并变性的鲑鱼精子DNA和25％甲酰胺中预杂交和杂交12至24小时。最后在60℃下使用 2.0X SSC、0.2％SDS将载体材料洗涤三次，每次15分钟。
术语“低严格条件”意指对于长度为至少100个核苷酸的探针而言，遵循标准 DNA印迹程序，在42℃下在5X SSPE、0.3％SDS、200微克/ml剪切并变性的鲑鱼精子DNA和25％甲酰胺中预杂交和杂交12至24小时。最后在60℃下使用1.0X SSC、0.2％SDS将载体材料洗涤三次，每次15分钟。
术语“中严格条件”意指对于长度为至少100个核苷酸的探针而言，遵循标准 DNA印迹程序，在42℃下在5X SSPE、0.3％SDS、200微克/ml剪切并变性的鲑鱼精子DNA和35％甲酰胺中预杂交和杂交12至24小时。最后在65℃下使用1.0X SSC、0.2％SDS将载体材料洗涤三次，每次15分钟。
术语“中高严格条件”意指对于长度为至少100个核苷酸的探针而言，遵循标准DNA印迹程序，在42℃下在5X SSPE、0.3％SDS、200微克/ml剪切并变性的鲑精DNA和35％甲酰胺中预杂交和杂交12至24小时。最后在70℃下使用1.0X SSC、0.2％SDS将载体材料洗涤三次，每次15分钟。
术语“高严格条件”意指对于长度为至少100个核苷酸的探针而言，遵循标准 DNA印迹程序，在42℃下在5X SSPE、0.3％SDS、200微克/ml剪切并变性的鲑鱼精子DNA和50％甲酰胺中预杂交和杂交12至24小时。载体材料最终使用0.5X SSC、0.2％SDS，在70℃下洗涤三次，每次15分钟。
术语“非常高严格条件”意指对于长度为至少100个核苷酸的探针而言，遵循标准DNA印迹程序，在42℃下在5X SSPE、0.3％SDS、200微克/ml剪切并变性的鲑鱼精子DNA和50％甲酰胺中预杂交和杂交12至24小时。载体材料最终使用 0.5X SSC、0.2％SDS，在75℃下洗涤三次，每次15分钟。
子序列：术语“子序列”意指使一个或多个(例如，若干个)核苷酸从成熟多肽编码序列的5'端和/或3'端缺失的多核苷酸；其中该子序列编码具有阿拉伯呋喃糖苷酶或木聚糖酶活性的片段。
基本上纯的多肽：术语“基本上纯的多肽”意指这样一种制剂，该制剂包含与其天然关联或重组关联的按重量计至多10％、至多8％、至多6％、至多5％、至多 4％、至多3％、至多2％、至多1％、以及至多0.5％的其他多肽材料。优选地，该多肽按存在于制剂中的总多肽材料的重量计是至少92％纯的，例如至少94％纯的、至少95％纯的、至少96％纯的、至少97％纯的、至少98％纯的、至少99％纯的、至少99.5％纯的、以及100％纯的。本发明的多肽优选处于基本上纯的形式。例如，这可以通过采用熟知的重组方法或采用经典的纯化方法制备多肽来实现。
变体：术语“变体”意指在一个或多个(若干个)位置包含改变(即，一个或多个(若干个)氨基酸残基的取代、插入和/或缺失)的具有木聚糖酶或阿拉伯呋喃糖苷酶活性的多肽。取代意指将占据某个位置的氨基酸替换为不同的氨基酸；缺失意指去除占据某个位置的氨基酸；并且插入意指邻近占据某个位置的氨基酸添加 1-3个氨基酸。
木聚糖酶：术语“木聚糖酶”意指1,4-β-D-木聚糖-木糖水解酶 (1,4-β-D-xylan-xylohydrolase)(E.C.3.2.1.8)，其催化木聚糖中1,4-β-D-木糖苷键的内部水解。木聚糖酶活性可以在37℃下在0.01％
Figure RE-GDA0003685268660000411
X-100和200mM磷酸钠(pH 6)中用0.2％AZCL-阿拉伯糖基木聚糖作为底物来确定。将一个单位的木聚糖酶活性定义为在37℃、pH 6下，在200mM磷酸钠(pH 6)中从作为底物的0.2％AZCL-阿拉伯糖基木聚糖每分钟产生1.0微摩尔天青蛋白。
命名
出于本发明的目的，命名[Y/F]意指在该位置处的氨基酸可以是酪氨酸(Try， Y)或苯丙氨酸(Phe，F)。同样，如在此所述，命名[V/G/A/I]意指在该位置处的氨基酸可以是缬氨酸(Val，V)、甘氨酸(Gly，G)、丙氨酸(Ala，A)或异亮氨酸(Ile，I)，对于如本文所述的其他组合，依次类推。除非进一步另有限制，氨基酸X被这样定义，使得它可以是20种天然氨基酸中的任一种。
发明详述
本发明的诸位发明人已经发现，来自糖苷水解酶家族62(在此称为GH62)的某些阿拉伯呋喃糖苷酶与一种或多种GH10或GH11木聚糖酶组合出乎意料地擅长溶解自亚家族黍亚科的基于植物的材料中发现于的位阻阿拉伯木聚糖的木糖主链。这是令人惊讶的，因为已知非常擅长溶解小麦阿拉伯木聚糖的阿拉伯呋喃糖苷酶 (例如，来自特异腐质霉(Humicola insolens)的具有WO 2006/114095的SEQ ID NO: 1的GH43、来自大型亚灰树花菌的具有WO 2006/114095的SEQ ID NO:2的GH51、或两者的组合)不能溶解发现于例如玉蜀黍、玉米、高粱、柳枝稷、粟、珍珠粟和谷子中的高度取代的阿拉伯木聚糖。
未处理的植物材料中存在的淀粉量使得难以检测阿拉伯木聚糖的显著溶解。因此，其中存在于植物材料中的淀粉和脂肪被除去而不影响取代度模式底物可用于帮助测定优于已知现有技术组合的改进的酶组合。一种模式底物是脱脂脱淀粉玉蜀黍 (DFDSM)，并且可以如在本文实验部分中所述的制备。重要的是，该模式底物不是使用强酸性或碱性条件或高温制备的，因为这样的条件可以除去存在于木聚糖主链上的侧链碳水化合物分子和/或酯基。如果这些侧链基团被除去，则复杂性和取代度将被降低，得到一种容易被已知溶液降解的阿拉伯木聚糖材料。正是因为这个原因，在生物质转化中使用热、酸和/或碱预处理。
可以将阿拉伯木聚糖的溶解测量为释放到上清液中的木糖的量。增加的溶解量将导致更多的木糖被释放，这可以使用例如如在本文所述的木糖测定方法来检测。不希望受理论的束缚，据信增加阿拉伯木聚糖的溶解打开细胞壁，这可导致陷在内部的营养如淀粉被释放。淀粉和其他营养素的释放可导致改进的动物性能和/或生物质向例如乙醇的改进的转化。
具有这种惊人特性的阿拉伯呋喃糖苷酶都包括基序 [H/Y][L/M]F[F/S][A/C/H/S/T/V][A/D/G/N/R]D[D/E/N]G(SEQ ID NO:1)。就本发明人迄今所知，该基序仅在来自家族GH62的阿拉伯呋喃糖苷酶中发现，并且存在于本发明的多肽中。
因此，在第一方面，本发明涉及包括一种或多种具有木聚糖酶活性的GH10或 GH11多肽和一种或多种具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽的组合物，其中：
(a)GH62多肽包括基序 [H/Y][L/M]F[F/S][A/C/H/S/T/V][A/D/G/N/R]D[D/E/N]G(SEQ ID NO:1)；
(b)GH10或GH11多肽与GH62多肽一起从脱脂脱淀粉玉蜀黍(DFDSM)中溶解至少2.0％木糖；和
(c)GH10或GH11多肽与GH62多肽一起从DFDSM中溶解比当不存在GH62 多肽时GH10或GH11多肽可以溶解的多至少2倍的木糖；
其中(b)和(c)在如下反应条件下进行：
i)25mg GH10或GH11多肽/kg DFDSM，
ii)12.5mg GH62多肽/kg DFDSM，以及
iii)在40℃、pH 5下孵育4小时。
在可替代的第一方面，本发明涉及包括一种或多种具有木聚糖酶活性的GH10 或GH11多肽和一种或多种具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽的组合物，其中：
(a)GH62多肽包括基序 [H/Y][L/M]F[F/S][A/C/H/S/T/V][A/D/G/N/R]D[D/E/N]G(SEQ ID NO:1)；
(b)GH10或GH11多肽与GH62多肽一起从脱脂脱淀粉玉蜀黍(DFDSM)中溶解至少2.0％木糖；和
(c)GH10或GH11多肽与GH62多肽一起从DFDSM中溶解比当不存在GH62 多肽时GH10或GH11多肽可以溶解的多至少2倍的木糖；
其中(b)和(c)在如下反应条件下进行：
i)10mg GH10或GH11多肽/kg DFDSM，
ii)10mg GH62多肽/kg DFDSM，以及
iii)在40℃、pH 5下孵育4小时。
在一个实施例中，该基序的位置1中的氨基酸是组氨酸或酪氨酸。在一个实施例中，该基序的位置2中的氨基酸是亮氨酸。在一个实施例中，该基序的位置4中的氨基酸是苯丙氨酸或丝氨酸。在一个实施例中，该基序的位置5中的氨基酸是丙氨酸、丝氨酸或缬氨酸。在一个实施例中，该基序的位置6中的氨基酸是丙氨酸、天冬氨酸或甘氨酸。在一个实施例中，该基序的位置8中的氨基酸是天冬酰胺。在一个优选实施例中，该GH62多肽包括基序[H/Y]LF[F/S][A/S/V][A/D/G]DNG(SEQ ID NO:2)。
在一个实施例中，该基序的位置1中的氨基酸是酪氨酸。在一个实施例中，该基序的位置2中的氨基酸是亮氨酸。在一个实施例中，该基序的位置4中的氨基酸是苯丙氨酸。在一个实施例中，该基序的位置5中的氨基酸是丙氨酸、半胱氨酸或缬氨酸，优选丙氨酸或缬氨酸，更优选丙氨酸。在一个实施例中，该基序的位置6 中的氨基酸是丙氨酸、天冬氨酸或甘氨酸，优选丙氨酸或甘氨酸，更优选甘氨酸。在一个实施例中，该基序的位置8中的氨基酸是天冬酰胺。在一个优选实施例中，该GH62多肽包括基序YLFF[A/V][A/G]DNG(SEQ ID NO:3)，甚至更优选基序 YLFFAGDNG(SEQ ID NO:4)。
在一个实施例中，该基序的位置1中的氨基酸是组氨酸或酪氨酸，优选酪氨酸。在一个实施例中，该基序的位置2中的氨基酸是亮氨酸。在一个实施例中，该基序的位置4中的氨基酸是丝氨酸。在一个实施例中，该基序的位置5中的氨基酸是丝氨酸或苏氨酸，优选丝氨酸。在一个实施例中，该基序的位置6中的氨基酸是天冬氨酸或甘氨酸，优选天冬氨酸。在一个实施例中，该基序的位置8中的氨基酸是天冬酰胺。在一个优选实施例中，该GH62多肽包括基序[H/Y]LFSSDDNG(SEQ ID NO: 5)，甚至更优选地包括基序YLFSSDDNG(SEQ ID NO:6)。
在可替代的第一方面，本发明涉及包括一种或多种具有木聚糖酶活性的GH10 或GH11多肽和一种或多种具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽的动物饲料或动物饲料添加剂，其中：
(a)GH62多肽包括基序 [H/Y][L/M]F[F/S][A/C/H/S/T/V][A/D/G/N/R]D[D/E/N]G(SEQ ID NO:1)；
(b)GH10或GH11多肽与GH62多肽一起从脱脂脱淀粉玉蜀黍(DFDSM)中溶解至少2.0％木糖；
(c)GH10或GH11多肽与GH62多肽一起从DFDSM中溶解比当不存在GH62 多肽时GH10或GH11多肽可以溶解的多至少2倍的木糖；
其中(b)和(c)在如下反应条件下进行：
i)10mg GH10或GH11多肽/kg DFDSM，
ii)10mg GH62多肽/kg DFDSM，以及
iii)在40℃、pH 5下孵育4小时；
(d)GH10或GH11多肽以每kg动物饲料0.01-200mg酶蛋白给予；和
(e)GH62多肽以每kg动物饲料0.01-200mg酶蛋白给予。
获得了以下数据点，其表明本发明的通用性。
Figure RE-GDA0003685268660000441
Figure RE-GDA0003685268660000451
Figure RE-GDA0003685268660000461
组合物的GH62多肽
下文披露了本发明第一方面的优选实施例，涉及具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽。
在一个实施例中，该组合物包括具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽，其中具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽与SEQ ID NO:8的成熟多肽具有至少 80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列一致性。
在一个实施例中，该多肽在SEQ ID NO:8的成熟多肽的1与10个之间的位置 (如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个位置)中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，该多肽优选地包括SEQID NO:8的氨基酸序列或其等位基因变体，或由其组成；包括SEQ ID NO:8的氨基酸序列和N-末端和/或C-末端His-标签和/或 HQ-标签；或是其片段，该片段具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且具有该成熟多肽的至少90％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:8的成熟多肽或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:8的氨基酸1至302或由其组成。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在一个实施例中，该组合物包括具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽，该多肽与SEQ ID NO:9具有至少80％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与 SEQ ID NO:9具有至少85％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:9具有至少86％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:9 具有至少87％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:9具有至少88％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:9具有至少89％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:9具有至少90％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:9具有至少91％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:9具有至少92％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:9具有至少93％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:9具有至少94％的序列一致性。在一个实施例中， GH62多肽与SEQ ID NO:9具有至少95％的序列一致性。在一个实施例中，GH62 多肽与SEQ ID NO:9具有至少96％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与 SEQ ID NO:9具有至少97％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:9具有至少98％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:9 具有至少99％的序列一致性。
在一个实施例中，该多肽在SEQ ID NO:9的1与10个之间的位置(如1、2、 3、4、5、6、7、8、9或10个位置)中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，该多肽优选地包括SEQ ID NO:9的氨基酸序列或其等位基因变体，或由其组成；包括SEQ ID NO:9或其等位变体和N-末端和/或C-末端His-标签和/或HQ-标签；或是其片段，该片段具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且具有SEQ ID NO:9的至少90％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:9的氨基酸1至302或由其组成。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在另一个实施例中，该组合物包括具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽，其中具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽与SEQ ID NO:11的成熟多肽具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列一致性。
在一个实施例中，该多肽在SEQ ID NO:11的成熟多肽的1与10个之间的位置(如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个位置)中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，该多肽优选地包括SEQID NO:11的氨基酸序列或其等位基因变体，或由其组成；包括SEQ ID NO:11的氨基酸序列和N-末端和/或C-末端His-标签和/或 HQ-标签；或是其片段，该片段具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且具有该成熟多肽的至少90％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ IDNO:11的成熟多肽或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:11的氨基酸1至303或由其组成。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在一个实施例中，该组合物包括具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽，该多肽与SEQ ID NO:12具有至少80％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:12具有至少85％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:12具有至少86％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO: 12具有至少87％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:12具有至少88％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:12具有至少89％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQID NO:12具有至少90％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:12具有至少91％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:12具有至少92％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:12具有至少93％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:12具有至少94％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:12具有至少95％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:12具有至少96％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:12具有至少97％的序列一致性。在一个实施例中， GH62多肽与SEQ ID NO:12具有至少98％的序列一致性。在一个实施例中，GH62 多肽与SEQ ID NO:12具有至少99％的序列一致性。
在一个实施例中，该多肽在SEQ ID NO:12的1与10个之间的位置(如1、2、 3、4、5、6、7、8、9或10个位置)中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，该多肽优选地包括SEQ ID NO:12的氨基酸序列或其等位基因变体，或由其组成；包括SEQ ID NO:12或其等位变体和N-末端和/或C-末端His-标签和/或HQ-标签；或是其片段，该片段具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且具有SEQ ID NO:12的至少90％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:12的氨基酸1至303或由其组成。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在另一个实施例中，该组合物包括具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽，其中具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽与SEQ ID NO:14的成熟多肽具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列一致性。
在一个实施例中，该多肽在SEQ ID NO:14的成熟多肽的1与10个之间的位置(如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个位置)中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，该多肽优选地包括SEQID NO:14的氨基酸序列或其等位基因变体，或由其组成；包括SEQ ID NO:14的氨基酸序列和N-末端和/或C-末端His-标签和/或 HQ-标签；或是其片段，该片段具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且具有该成熟多肽的至少90％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ IDNO:14的成熟多肽或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:14的氨基酸1至382或由其组成。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在一个实施例中，该组合物包括具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽，该多肽与SEQ ID NO:15具有至少80％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:15具有至少85％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:15具有至少86％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO: 15具有至少87％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:15具有至少88％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:15具有至少89％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQID NO:15具有至少90％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:15具有至少91％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:15具有至少92％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:15具有至少93％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:15具有至少94％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:15具有至少95％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:15具有至少96％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:15具有至少97％的序列一致性。在一个实施例中， GH62多肽与SEQ ID NO:15具有至少98％的序列一致性。在一个实施例中，GH62 多肽与SEQ ID NO:15具有至少99％的序列一致性。
在一个实施例中，该多肽在SEQ ID NO:15的1与10个之间的位置(如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个位置)中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，该多肽优选地包括SEQ ID NO:15的氨基酸序列或其等位基因变体，或由其组成；包括SEQ ID NO:15或其等位变体和N-末端和/或C-末端His-标签和/或HQ-标签；或是其片段，该片段具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且具有SEQ ID NO:15的至少90％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:15的氨基酸1至382或由其组成。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在另一个实施例中，该组合物包括具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽，其中具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽与SEQ ID NO:17的成熟多肽具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列一致性。
在一个实施例中，该多肽在SEQ ID NO:17的成熟多肽的1与10个之间的位置(如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个位置)中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，该多肽优选地包括SEQID NO:17的氨基酸序列或其等位基因变体，或由其组成；包括SEQ ID NO:17的氨基酸序列和N-末端和/或C-末端His-标签和/或 HQ-标签；或是其片段，该片段具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且具有该成熟多肽的至少90％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ IDNO:17的成熟多肽或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:17的氨基酸1至378或由其组成。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在一个实施例中，该组合物包括具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽，该多肽与SEQ ID NO:18具有至少80％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:18具有至少85％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:18具有至少86％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO: 18具有至少87％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:18具有至少88％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:18具有至少89％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQID NO:18具有至少90％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:18具有至少91％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:18具有至少92％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:18具有至少93％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:18具有至少94％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:18具有至少95％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:18具有至少96％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:18具有至少97％的序列一致性。在一个实施例中， GH62多肽与SEQ ID NO:18具有至少98％的序列一致性。在一个实施例中，GH62 多肽与SEQ ID NO:18具有至少99％的序列一致性。
在一个实施例中，该多肽在SEQ ID NO:18的1与10个之间的位置(如1、2、 3、4、5、6、7、8、9或10个位置)中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，该多肽优选地包括SEQ ID NO:18的氨基酸序列或其等位基因变体，或由其组成；包括SEQ ID NO:18或其等位变体和N-末端和/或C-末端His-标签和/或HQ-标签；或是其片段，该片段具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且具有SEQ ID NO:18的至少90％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:18的氨基酸1至378或由其组成。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在另一个实施例中，该组合物包括具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽，其中具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽与SEQ ID NO:20的成熟多肽具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列一致性。
在一个实施例中，该多肽在SEQ ID NO:20的成熟多肽的1与10个之间的位置(如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个位置)中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，该多肽优选地包括SEQID NO:20的氨基酸序列或其等位基因变体，或由其组成；包括SEQ ID NO:20的氨基酸序列和N-末端和/或C-末端His-标签和/或 HQ-标签；或是其片段，该片段具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且具有该成熟多肽的至少90％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ IDNO:20的成熟多肽或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:20的氨基酸1至311或由其组成。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在一个实施例中，该组合物包括具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽，该多肽与SEQ ID NO:21具有至少80％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:21具有至少85％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:21具有至少86％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO: 21具有至少87％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:21具有至少88％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:21具有至少89％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQID NO:21具有至少90％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:21具有至少91％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:21具有至少92％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:21具有至少93％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:21具有至少94％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:21具有至少95％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:21具有至少96％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:21具有至少97％的序列一致性。在一个实施例中， GH62多肽与SEQ ID NO:21具有至少98％的序列一致性。在一个实施例中，GH62 多肽与SEQ ID NO:21具有至少99％的序列一致性。
在一个实施例中，该多肽在SEQ ID NO:21的1与10个之间的位置(如1、2、 3、4、5、6、7、8、9或10个位置)中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，该多肽优选地包括SEQ ID NO:21的氨基酸序列或其等位基因变体，或由其组成；包括SEQ ID NO:21或其等位变体和N-末端和/或C-末端His-标签和/或HQ-标签；或是其片段，该片段具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且具有SEQ ID NO:21的至少90％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:21的氨基酸1至311或由其组成。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在另一个实施例中，该组合物包括具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽，其中具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽与SEQ ID NO:23的成熟多肽具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列一致性。
在一个实施例中，该多肽在SEQ ID NO:23的成熟多肽的1与10个之间的位置(如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个位置)中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，该多肽优选地包括SEQID NO:23的氨基酸序列或其等位基因变体，或由其组成；包括SEQ ID NO:23的氨基酸序列和N-末端和/或C-末端His-标签和/或 HQ-标签；或是其片段，该片段具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且具有该成熟多肽的至少90％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ IDNO:23的成熟多肽或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:23的氨基酸1至302或由其组成。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在一个实施例中，该组合物包括具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽，该多肽与SEQ ID NO:24具有至少80％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:24具有至少85％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:24具有至少86％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO: 24具有至少87％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:24具有至少88％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:24具有至少89％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQID NO:24具有至少90％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:24具有至少91％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:24具有至少92％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:24具有至少93％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:24具有至少94％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:24具有至少95％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:24具有至少96％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:24具有至少97％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:24具有至少98％的序列一致性。在一个实施例中，GH62 多肽与SEQ ID NO:24具有至少99％的序列一致性。
在一个实施例中，该多肽在SEQ ID NO:24的1与10个之间的位置(如1、2、 3、4、5、6、7、8、9或10个位置)中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，该多肽优选地包括SEQ ID NO:24的氨基酸序列或其等位基因变体，或由其组成；包括SEQ ID NO:24或其等位变体和N-末端和/或C-末端His-标签和/或HQ-标签；或是其片段，该片段具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且具有SEQ ID NO:24的至少90％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:24的氨基酸1至302或由其组成。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在另一个实施例中，该组合物包括具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽，其中具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽与SEQ ID NO:26的成熟多肽具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列一致性。
在一个实施例中，该多肽在SEQ ID NO:26的成熟多肽的1与10个之间的位置(如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个位置)中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，该多肽优选地包括SEQID NO:26的氨基酸序列或其等位基因变体，或由其组成；包括SEQ ID NO:26的氨基酸序列和N-末端和/或C-末端His-标签和/或 HQ-标签；或是其片段，该片段具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且具有该成熟多肽的至少90％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ IDNO:26的成熟多肽或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:26的氨基酸1至309或由其组成。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在一个实施例中，该组合物包括具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽，该多肽与SEQ ID NO:27具有至少80％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:27具有至少85％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:27具有至少86％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO: 27具有至少87％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:27具有至少88％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:27具有至少89％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQID NO:27具有至少90％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:27具有至少91％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:27具有至少92％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:27具有至少93％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:27具有至少94％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:27具有至少95％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:27具有至少96％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:27具有至少97％的序列一致性。在一个实施例中， GH62多肽与SEQ ID NO:27具有至少98％的序列一致性。在一个实施例中，GH62 多肽与SEQ ID NO:27具有至少99％的序列一致性。
在一个实施例中，该多肽在SEQ ID NO:27的1与10个之间的位置(如1、2、 3、4、5、6、7、8、9或10个位置)中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，该多肽优选地包括SEQ ID NO:27的氨基酸序列或其等位基因变体，或由其组成；包括SEQ ID NO:27或其等位变体和N-末端和/或C-末端His-标签和/或HQ-标签；或是其片段，该片段具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且具有SEQ ID NO:27的至少90％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:27的氨基酸1至309或由其组成。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在另一个实施例中，该组合物包括具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽，其中具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽与SEQ ID NO:29的成熟多肽具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列一致性。
在一个实施例中，该多肽在SEQ ID NO:29的成熟多肽的1与10个之间的位置(如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个位置)中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，该多肽优选地包括SEQID NO:29的氨基酸序列或其等位基因变体，或由其组成；包括SEQ ID NO:29的氨基酸序列和N-末端和/或C-末端His-标签和/或 HQ-标签，如SEQ ID NO:32或SEQ ID NO:33的成熟多肽；或是其片段，该片段具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且具有该成熟多肽的至少90％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:29的成熟多肽或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:29的氨基酸1至438或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:32的成熟多肽或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:32的氨基酸1至446或由其组成。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在一个实施例中，该组合物包括具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽，该多肽与SEQ ID NO:30具有至少80％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:30具有至少85％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:30具有至少86％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO: 30具有至少87％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:30具有至少88％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:30具有至少89％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQID NO:30具有至少90％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:30具有至少91％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:30具有至少92％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:30具有至少93％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:30具有至少94％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:30具有至少95％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:30具有至少96％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:30具有至少97％的序列一致性。在一个实施例中， GH62多肽与SEQ ID NO:30具有至少98％的序列一致性。在一个实施例中，GH62 多肽与SEQ ID NO:30具有至少99％的序列一致性。
在一个实施例中，该多肽在SEQ ID NO:30的1与10个之间的位置(如1、2、 3、4、5、6、7、8、9或10个位置)中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，该多肽在SEQ ID NO:33的1与10个之间的位置(如1、2、3、4、5、6、7、8、9 或10个位置)中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/ 或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，该多肽优选地包括SEQ ID NO:30的氨基酸序列或其等位基因变体，或由其组成；包括SEQ IDNO:30或其等位变体和N-末端和/或C-末端的His-标签和/或HQ-标签，如SEQ ID NO:33；或是其片段，该片段具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且具有SEQ ID NO:30的至少 90％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:30的氨基酸1至438或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:33的氨基酸1至446或由其组成。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在另一个实施例中，该组合物包括具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽，其中具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽与SEQ ID NO:35的成熟多肽具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列一致性。
在一个实施例中，该多肽在SEQ ID NO:35的成熟多肽的1与10个之间的位置(如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个位置)中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，该多肽优选地包括SEQID NO:35的氨基酸序列或其等位基因变体，或由其组成；包括SEQ ID NO:35的氨基酸序列和N-末端和/或C-末端His-标签和/或 HQ-标签，如SEQ ID NO:38或SEQ ID NO:39的成熟多肽；或是其片段，该片段具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且具有该成熟多肽的至少90％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:35的成熟多肽或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:35的氨基酸1至438或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:38的成熟多肽或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:38的氨基酸1至446或由其组成。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在一个实施例中，该组合物包括具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽，该多肽与SEQ ID NO:36具有至少80％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:36具有至少85％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:36具有至少86％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO: 36具有至少87％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:36具有至少88％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:36具有至少89％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQID NO:36具有至少90％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:36具有至少91％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:36具有至少92％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:36具有至少93％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:36具有至少94％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:36具有至少95％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:36具有至少96％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:36具有至少97％的序列一致性。在一个实施例中， GH62多肽与SEQ ID NO:36具有至少98％的序列一致性。在一个实施例中，GH62 多肽与SEQ ID NO:36具有至少99％的序列一致性。
在一个实施例中，该多肽在SEQ ID NO:36的1与10个之间的位置(如1、2、 3、4、5、6、7、8、9或10个位置)中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，该多肽在SEQ ID NO:39的1与10个之间的位置(如1、2、3、4、5、6、7、8、9 或10个位置)中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/ 或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，该多肽优选地包括SEQ ID NO:36的氨基酸序列或其等位基因变体，或由其组成；包括SEQ IDNO:36或其等位变体和N-末端和/或C-末端的His-标签和/或HQ-标签，如SEQ ID NO:39；或是其片段，该片段具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且具有SEQ ID NO:36的至少 90％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:36的氨基酸1至438或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:39的氨基酸1至446或由其组成。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在另一个实施例中，该组合物包括具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽，其中具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽与SEQ ID NO:41的成熟多肽具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列一致性。
在一个实施例中，该多肽在SEQ ID NO:41的成熟多肽的1与10个之间的位置(如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个位置)中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，该多肽优选地包括SEQID NO:41的氨基酸序列或其等位基因变体，或由其组成；包括SEQ ID NO:41的氨基酸序列和N-末端和/或C-末端His-标签和/或 HQ-标签，如SEQ ID NO:44或SEQ ID NO:45的成熟多肽；或是其片段，该片段具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且具有该成熟多肽的至少90％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:41的成熟多肽或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:41的氨基酸1至318或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:44的成熟多肽或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:44的氨基酸1至326或由其组成。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在一个实施例中，该组合物包括具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽，该多肽与SEQ ID NO:42具有至少80％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:42具有至少85％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:42具有至少86％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO: 42具有至少87％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:42具有至少88％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:42具有至少89％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQID NO:42具有至少90％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:42具有至少91％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:42具有至少92％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:42具有至少93％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:42具有至少94％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:42具有至少95％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:42具有至少96％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:42具有至少97％的序列一致性。在一个实施例中， GH62多肽与SEQ ID NO:42具有至少98％的序列一致性。在一个实施例中，GH62 多肽与SEQ ID NO:42具有至少99％的序列一致性。
在一个实施例中，该多肽在SEQ ID NO:42的1与10个之间的位置(如1、2、 3、4、5、6、7、8、9或10个位置)中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，该多肽在SEQ ID NO:45的1与10个之间的位置(如1、2、3、4、5、6、7、8、9 或10个位置)中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/ 或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，该多肽优选地包括SEQ ID NO:42的氨基酸序列或其等位基因变体，或由其组成；包括SEQ IDNO:42或其等位变体和N-末端和/或C-末端的His-标签和/或HQ-标签，如SEQ ID NO:45；或是其片段，该片段具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且具有SEQ ID NO:42的至少 90％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:42的氨基酸1至318或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:45的氨基酸1至326或由其组成。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在另一个实施例中，该组合物包括具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽，其中具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽与SEQ ID NO:47的成熟多肽具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列一致性。
在一个实施例中，该多肽在SEQ ID NO:47的成熟多肽的1与10个之间的位置(如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个位置)中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，该多肽优选地包括SEQID NO:47的氨基酸序列或其等位基因变体，或由其组成；包括SEQ ID NO:47的氨基酸序列和N-末端和/或C-末端His-标签和/或 HQ-标签，如SEQ ID NO:50或SEQ ID NO:51的成熟多肽；或是其片段，该片段具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且具有该成熟多肽的至少90％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:47的成熟多肽或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:47的氨基酸1至302或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:50的成熟多肽或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:50的氨基酸1至311或由其组成。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在一个实施例中，该组合物包括具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽，该多肽与SEQ ID NO:48具有至少80％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:48具有至少85％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:48具有至少86％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO: 48具有至少87％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:48具有至少88％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:48具有至少89％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQID NO:48具有至少90％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:48具有至少91％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:48具有至少92％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:48具有至少93％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:48具有至少94％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:48具有至少95％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:48具有至少96％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:48具有至少97％的序列一致性。在一个实施例中， GH62多肽与SEQ ID NO:48具有至少98％的序列一致性。在一个实施例中，GH62 多肽与SEQ ID NO:48具有至少99％的序列一致性。
在一个实施例中，该多肽在SEQ ID NO:48的1与10个之间的位置(如1、2、 3、4、5、6、7、8、9或10个位置)中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，该多肽在SEQ ID NO:51的1与10个之间的位置(如1、2、3、4、5、6、7、8、9 或10个位置)中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/ 或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，该多肽优选地包括SEQ ID NO:48的氨基酸序列或其等位基因变体，或由其组成；包括SEQ IDNO:48或其等位变体和N-末端和/或C-末端的His-标签和/或HQ-标签，如SEQ ID NO:51；或是其片段，该片段具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且具有SEQ ID NO:48的至少 90％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:48的氨基酸1至302或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:51的氨基酸1至311或由其组成。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在另一个实施例中，该组合物包括具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽，其中具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽与SEQ ID NO:53的成熟多肽具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列一致性。
在一个实施例中，该多肽在SEQ ID NO:53的成熟多肽的1与10个之间的位置(如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个位置)中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，该多肽优选地包括SEQID NO:53的氨基酸序列或其等位基因变体，或由其组成；包括SEQ ID NO:53的氨基酸序列和N-末端和/或C-末端His-标签和/或 HQ-标签，如SEQ ID NO:56或SEQ ID NO:57的成熟多肽；或是其片段，该片段具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且具有该成熟多肽的至少90％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:53的成熟多肽或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:53的氨基酸1至364或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:56的成熟多肽或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:56的氨基酸1至373或由其组成。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在一个实施例中，该组合物包括具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽，该多肽与SEQ ID NO:54具有至少80％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:54具有至少85％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:54具有至少86％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO: 54具有至少87％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:54具有至少88％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:54具有至少89％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQID NO:54具有至少90％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:54具有至少91％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:54具有至少92％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:54具有至少93％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:54具有至少94％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:54具有至少95％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:54具有至少96％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:54具有至少97％的序列一致性。在一个实施例中， GH62多肽与SEQ ID NO:54具有至少98％的序列一致性。在一个实施例中，GH62 多肽与SEQ ID NO:54具有至少99％的序列一致性。
在一个实施例中，该多肽在SEQ ID NO:54的1与10个之间的位置(如1、2、 3、4、5、6、7、8、9或10个位置)中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，该多肽在SEQ ID NO:57的1与10个之间的位置(如1、2、3、4、5、6、7、8、9 或10个位置)中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/ 或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，该多肽优选地包括SEQ ID NO:54的氨基酸序列或其等位基因变体，或由其组成；包括SEQ IDNO:54或其等位变体和N-末端和/或C-末端的His-标签和/或HQ-标签，如SEQ ID NO:57；或是其片段，该片段具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且具有SEQ ID NO:54的至少 90％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:54的氨基酸1至364或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:57的氨基酸1至373或由其组成。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在另一个实施例中，该组合物包括具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽，其中具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽与SEQ ID NO:59的成熟多肽具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列一致性。
在一个实施例中，该多肽在SEQ ID NO:59的成熟多肽的1与10个之间的位置(如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个位置)中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，该多肽优选地包括SEQID NO:65的氨基酸序列或其等位基因变体，或由其组成；包括SEQ ID NO:59的氨基酸序列和N-末端和/或C-末端His-标签和/或 HQ-标签，如SEQ ID NO:62或SEQ ID NO:63的成熟多肽；或是其片段，该片段具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且具有该成熟多肽的至少90％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:59的成熟多肽或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:59的氨基酸1至436或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:62的成熟多肽或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:62的氨基酸1至444或由其组成。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在一个实施例中，该组合物包括具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽，该多肽与SEQ ID NO:60具有至少80％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:60具有至少85％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:60具有至少86％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO: 60具有至少87％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:60具有至少88％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:60具有至少89％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQID NO:60具有至少90％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:60具有至少91％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:60具有至少92％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:60具有至少93％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:60具有至少94％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:60具有至少95％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:60具有至少96％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:60具有至少97％的序列一致性。在一个实施例中， GH62多肽与SEQ ID NO:60具有至少98％的序列一致性。在一个实施例中，GH62 多肽与SEQ ID NO:60具有至少99％的序列一致性。
在一个实施例中，该多肽在SEQ ID NO:60的1与10个之间的位置(如1、2、 3、4、5、6、7、8、9或10个位置)中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，该多肽在SEQ ID NO:63的1与10个之间的位置(如1、2、3、4、5、6、7、8、9 或10个位置)中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/ 或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，该多肽优选地包括SEQ ID NO:60的氨基酸序列或其等位基因变体，或由其组成；包括SEQ IDNO:60或其等位变体和N-末端和/或C-末端的His-标签和/或HQ-标签，如SEQ ID NO:63；或是其片段，该片段具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且具有SEQ ID NO:60的至少 90％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:60的氨基酸1至436或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:63的氨基酸1至444或由其组成。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在另一个实施例中，该组合物包括具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽，其中具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽与SEQ ID NO:65的成熟多肽具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列一致性。
在一个实施例中，该多肽在SEQ ID NO:65的成熟多肽的1与10个之间的位置(如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个位置)中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，该多肽优选地包括SEQID NO:65的氨基酸序列或其等位基因变体，或由其组成；包括SEQ ID NO:65的氨基酸序列和N-末端和/或C-末端His-标签和/或 HQ-标签，如SEQ ID NO:68或SEQ ID NO:69的成熟多肽；或是其片段，该片段具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且具有该成熟多肽的至少90％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:65的成熟多肽或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:65的氨基酸1至302或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:68的成熟多肽或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:68的氨基酸1至311或由其组成。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在一个实施例中，该组合物包括具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽，该多肽与SEQ ID NO:66具有至少80％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:66具有至少85％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:66具有至少86％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO: 66具有至少87％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:66具有至少88％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:66具有至少89％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQID NO:66具有至少90％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:66具有至少91％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:66具有至少92％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:66具有至少93％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:66具有至少94％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:66具有至少95％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:66具有至少96％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:66具有至少97％的序列一致性。在一个实施例中， GH62多肽与SEQ ID NO:66具有至少98％的序列一致性。在一个实施例中，GH62 多肽与SEQ ID NO:66具有至少99％的序列一致性。
在一个实施例中，该多肽在SEQ ID NO:66的1与10个之间的位置(如1、2、 3、4、5、6、7、8、9或10个位置)中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，该多肽在SEQ ID NO:69的1与10个之间的位置(如1、2、3、4、5、6、7、8、9 或10个位置)中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/ 或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，该多肽优选地包括SEQ ID NO:66的氨基酸序列或其等位基因变体，或由其组成；包括SEQ IDNO:66或其等位变体和N-末端和/或C-末端的His-标签和/或HQ-标签，如SEQ ID NO:69；或是其片段，该片段具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且具有SEQ ID NO:66的至少 90％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:66的氨基酸1至302或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:69的氨基酸1至311或由其组成。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在另一个实施例中，该组合物包括具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽，其中具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽与SEQ ID NO:104的成熟多肽具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列一致性。
在一个实施例中，该多肽在SEQ ID NO:104的成熟多肽的1与10个之间的位置(如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个位置)中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，该多肽优选地包括SEQID NO:104的氨基酸序列或其等位基因变体，或由其组成；包括SEQ ID NO:104的氨基酸序列和N-末端和/或C-末端His-标签和 /或HQ-标签；或是其片段，该片段具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且具有该成熟多肽的至少90％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ IDNO:104的成熟多肽或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:104的氨基酸1至302 或由其组成。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在一个实施例中，该组合物包括具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽，该多肽与SEQ ID NO:105具有至少80％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:105具有至少85％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与 SEQ ID NO:105具有至少86％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:105具有至少87％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO: 105具有至少88％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:105 具有至少89％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:105具有至少90％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:105具有至少 91％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:105具有至少92％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:105具有至少93％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:105具有至少94％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:105具有至少95％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:105具有至少96％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:105具有至少97％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:105具有至少98％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:105具有至少99％的序列一致性。
在一个实施例中，该多肽在SEQ ID NO:105的1与10个之间的位置(如1、2、 3、4、5、6、7、8、9或10个位置)中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，该多肽优选地包括SEQ ID NO:105的氨基酸序列或其等位基因变体，或由其组成；包括SEQ ID NO:105或其等位变体和N-末端和/或C-末端His-标签和/或HQ-标签；或是其片段，该片段具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且具有SEQ ID NO:105的至少 90％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:105的氨基酸1至302 或由其组成。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在另一个实施例中，该组合物包括具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽，其中具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽与SEQ ID NO:107的成熟多肽具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列一致性。
在一个实施例中，该多肽在SEQ ID NO:107的成熟多肽的1与10个之间的位置(如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个位置)中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，该多肽优选地包括SEQID NO:107的氨基酸序列或其等位基因变体，或由其组成；包括SEQ ID NO:107的氨基酸序列和N-末端和/或C-末端His-标签和 /或HQ-标签，如SEQ ID NO:110或SEQ ID NO:111的成熟多肽；或是其片段，该片段具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且具有该成熟多肽的至少90％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:107的成熟多肽或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:107的氨基酸1至464或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:110的成熟多肽或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ IDNO:110的氨基酸1至472或由其组成。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在一个实施例中，该组合物包括具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽，该多肽与SEQ ID NO:108具有至少80％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:108具有至少85％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与 SEQ ID NO:108具有至少86％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:108具有至少87％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO: 108具有至少88％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:108 具有至少89％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:108具有至少90％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:108具有至少 91％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:108具有至少92％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:108具有至少93％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:108具有至少94％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:108具有至少95％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:108具有至少96％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:108具有至少97％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:108具有至少98％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:108具有至少99％的序列一致性。
在一个实施例中，该多肽在SEQ ID NO:108的1与10个之间的位置(如1、2、 3、4、5、6、7、8、9或10个位置)中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，该多肽在SEQ ID NO:111的1与10个之间的位置(如1、2、3、4、5、6、7、8、9 或10个位置)中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/ 或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，该多肽优选地包括SEQ ID NO:108的氨基酸序列或其等位基因变体，或由其组成；包括SEQ IDNO:108 或其等位变体和N-末端和/或C-末端的His-标签和/或HQ-标签，如SEQ ID NO:111；或是其片段，该片段具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且具有SEQ ID NO:108的至少 90％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:108的氨基酸1至464 或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:111的氨基酸1至472 或由其组成。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在另一个实施例中，该组合物包括具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽，其中具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽与SEQ ID NO:113的成熟多肽具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列一致性。
在一个实施例中，该多肽在SEQ ID NO:113的成熟多肽的1与10个之间的位置(如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个位置)中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，该多肽优选地包括SEQID NO:113的氨基酸序列或其等位基因变体，或由其组成；包括SEQ ID NO:113的氨基酸序列和N-末端和/或C-末端His-标签和 /或HQ-标签，如SEQ ID NO:116或SEQ ID NO:117的成熟多肽；或是其片段，该片段具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且具有该成熟多肽的至少90％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:113的成熟多肽或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:113的氨基酸1至364或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:116的成熟多肽或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ IDNO:116的氨基酸1至372或由其组成。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在一个实施例中，该组合物包括具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽，该多肽与SEQ ID NO:114具有至少80％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:114具有至少85％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与 SEQ ID NO:114具有至少86％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:114具有至少87％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO: 114具有至少88％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:114 具有至少89％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:114具有至少90％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:114具有至少 91％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:114具有至少92％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:114具有至少93％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:114具有至少94％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:114具有至少95％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:114具有至少96％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:114具有至少97％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:114具有至少98％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:114具有至少99％的序列一致性。
在一个实施例中，该多肽在SEQ ID NO:114的1与10个之间的位置(如1、2、 3、4、5、6、7、8、9或10个位置)中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，该多肽在SEQ ID NO:117的1与10个之间的位置(如1、2、3、4、5、6、7、8、9 或10个位置)中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/ 或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，该多肽优选地包括SEQ ID NO:114的氨基酸序列或其等位基因变体，或由其组成；包括SEQ IDNO:114 或其等位变体和N-末端和/或C-末端的His-标签和/或HQ-标签，如SEQ ID NO:117；或是其片段，该片段具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且具有SEQ ID NO:114的至少90％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:114的氨基酸1至364 或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:117的氨基酸1至372 或由其组成。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在另一个实施例中，该组合物包括具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽，其中具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽与SEQ ID NO:119的成熟多肽具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列一致性。
在一个实施例中，该多肽在SEQ ID NO:119的成熟多肽的1与10个之间的位置(如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个位置)中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，该多肽优选地包括SEQID NO:119的氨基酸序列或其等位基因变体，或由其组成；包括SEQ ID NO:119的氨基酸序列和N-末端和/或C-末端His-标签和 /或HQ-标签；或是其片段，该片段具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且具有该成熟多肽的至少90％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ IDNO:119的成熟多肽或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:119的氨基酸1至357 或由其组成。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在一个实施例中，该组合物包括具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽，该多肽与SEQ ID NO:120具有至少80％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:120具有至少85％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与 SEQ ID NO:120具有至少86％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:120具有至少87％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO: 120具有至少88％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:120 具有至少89％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:120具有至少90％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:120具有至少 91％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:120具有至少92％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:120具有至少93％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:120具有至少94％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:120具有至少95％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:120具有至少96％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:120具有至少97％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:120具有至少98％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:120具有至少99％的序列一致性。
在一个实施例中，该多肽在SEQ ID NO:120的1与10个之间的位置(如1、2、 3、4、5、6、7、8、9或10个位置)中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，该多肽优选地包括SEQ ID NO:120的氨基酸序列或其等位基因变体，或由其组成；包括SEQ ID NO:120或其等位变体和N-末端和/或C-末端His-标签和/或HQ-标签；或是其片段，该片段具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且具有SEQ ID NO:120的至少 90％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:120的氨基酸1至357 或由其组成。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在另一个实施例中，该组合物包括具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽，其中具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽与SEQ ID NO:122的成熟多肽具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列一致性。
在一个实施例中，该多肽在SEQ ID NO:122的成熟多肽的1与10个之间的位置(如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个位置)中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，该多肽优选地包括SEQID NO:122的氨基酸序列或其等位基因变体，或由其组成；包括SEQ ID NO:122的氨基酸序列和N-末端和/或C-末端His-标签和 /或HQ-标签；或是其片段，该片段具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且具有该成熟多肽的至少90％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ IDNO:122的成熟多肽或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:122的氨基酸1至302 或由其组成。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在一个实施例中，该组合物包括具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽，该多肽与SEQ ID NO:123具有至少80％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:123具有至少85％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与 SEQ ID NO:123具有至少86％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:123具有至少87％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO: 123具有至少88％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:123 具有至少89％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:123具有至少90％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:123具有至少 91％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:123具有至少92％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:123具有至少93％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:123具有至少94％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:123具有至少95％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:123具有至少96％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:123具有至少97％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:123具有至少98％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:123具有至少99％的序列一致性。
在一个实施例中，该多肽在SEQ ID NO:123的1与10个之间的位置(如1、2、 3、4、5、6、7、8、9或10个位置)中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，该多肽优选地包括SEQ ID NO:123的氨基酸序列或其等位基因变体，或由其组成；包括SEQ ID NO:123或其等位变体和N-末端和/或C-末端His-标签和/或HQ-标签；或是其片段，该片段具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且具有SEQ ID NO:123的至少 90％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:123的氨基酸1至302 或由其组成。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在另一个实施例中，该组合物包括具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽，其中具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽与SEQ ID NO:125的成熟多肽具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列一致性。
在一个实施例中，该多肽在SEQ ID NO:125的成熟多肽的1与10个之间的位置(如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个位置)中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，该多肽优选地包括SEQID NO:125的氨基酸序列或其等位基因变体，或由其组成；包括SEQ ID NO:125的氨基酸序列和N-末端和/或C-末端His-标签和 /或HQ-标签，如SEQ ID NO:128或SEQ ID NO:129的成熟多肽；或是其片段，该片段具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且具有该成熟多肽的至少90％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:125的成熟多肽或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:125的氨基酸1至453或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:128的成熟多肽或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ IDNO:128的氨基酸1至461或由其组成。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在一个实施例中，该组合物包括具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽，该多肽与SEQ ID NO:126具有至少80％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:126具有至少85％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与 SEQ ID NO:126具有至少86％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:126具有至少87％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO: 126具有至少88％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:126 具有至少89％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:126具有至少90％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:126具有至少 91％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:126具有至少92％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:126具有至少93％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:126具有至少94％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:126具有至少95％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:126具有至少96％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:126具有至少97％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:126具有至少98％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:126具有至少99％的序列一致性。
在一个实施例中，该多肽在SEQ ID NO:126的1与10个之间的位置(如1、2、 3、4、5、6、7、8、9或10个位置)中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，该多肽在SEQ ID NO:129的1与10个之间的位置(如1、2、3、4、5、6、7、8、9 或10个位置)中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/ 或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，该多肽优选地包括SEQ ID NO:126的氨基酸序列或其等位基因变体，或由其组成；包括SEQ IDNO:126 或其等位变体和N-末端和/或C-末端的His-标签和/或HQ-标签，如SEQ ID NO:129；或是其片段，该片段具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且具有SEQ ID NO:126的至少 90％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:126的氨基酸1至453 或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:129的氨基酸1至461 或由其组成。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在另一个实施例中，该组合物包括具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽，其中具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽与SEQ ID NO:131的成熟多肽具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列一致性。
在一个实施例中，该多肽在SEQ ID NO:131的成熟多肽的1与10个之间的位置(如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个位置)中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，该多肽优选地包括SEQID NO:131的氨基酸序列或其等位基因变体，或由其组成；包括SEQ ID NO:131的氨基酸序列和N-末端和/或C-末端His-标签和 /或HQ-标签，如SEQ ID NO:134或SEQ ID NO:135的成熟多肽；或是其片段，该片段具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且具有该成熟多肽的至少90％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:131的成熟多肽或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:131的氨基酸1至377或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:134的成熟多肽或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ IDNO:134的氨基酸1至385或由其组成。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在一个实施例中，该组合物包括具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽，该多肽与SEQ ID NO:132具有至少80％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:132具有至少85％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与 SEQ ID NO:132具有至少86％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:132具有至少87％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO: 132具有至少88％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:132 具有至少89％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:132具有至少90％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:132具有至少 91％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:132具有至少92％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:132具有至少93％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:132具有至少94％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:132具有至少95％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:132具有至少96％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:132具有至少97％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:132具有至少98％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:132具有至少99％的序列一致性。
在一个实施例中，该多肽在SEQ ID NO:132的1与10个之间的位置(如1、2、 3、4、5、6、7、8、9或10个位置)中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，该多肽在SEQ ID NO:135的1与10个之间的位置(如1、2、3、4、5、6、7、8、9 或10个位置)中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/ 或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，该多肽优选地包括SEQ ID NO:132的氨基酸序列或其等位基因变体，或由其组成；包括SEQ IDNO:132 或其等位变体和N-末端和/或C-末端的His-标签和/或HQ-标签，如SEQ ID NO:135；或是其片段，该片段具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且具有SEQ ID NO:132的至少 90％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:132的氨基酸1至377 或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:135的氨基酸1至385 或由其组成。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在另一个实施例中，该组合物包括具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽，其中具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽与SEQ ID NO:137的成熟多肽具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列一致性。
在一个实施例中，该多肽在SEQ ID NO:137的成熟多肽的1与10个之间的位置(如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个位置)中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，该多肽优选地包括SEQID NO:137的氨基酸序列或其等位基因变体，或由其组成；包括SEQ ID NO:137的氨基酸序列和N-末端和/或C-末端His-标签和 /或HQ-标签；或是其片段，该片段具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且具有该成熟多肽的至少90％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ IDNO:137的成熟多肽或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:137的氨基酸1至309 或由其组成。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在一个实施例中，该组合物包括具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽，该多肽与SEQ ID NO:138具有至少80％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:138具有至少85％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与 SEQ ID NO:138具有至少86％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:138具有至少87％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO: 138具有至少88％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:138 具有至少89％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:138具有至少90％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:138具有至少 91％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:138具有至少92％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:138具有至少93％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:138具有至少94％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:138具有至少95％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:138具有至少96％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:138具有至少97％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:138具有至少98％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:138具有至少99％的序列一致性。
在一个实施例中，该多肽在SEQ ID NO:138的1与10个之间的位置(如1、2、 3、4、5、6、7、8、9或10个位置)中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，该多肽优选地包括SEQ ID NO:138的氨基酸序列或其等位基因变体，或由其组成；包括SEQ ID NO:138或其等位变体和N-末端和/或C-末端His-标签和/或HQ-标签；或是其片段，该片段具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且具有SEQ ID NO:138的至少 90％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:138的氨基酸1至308 或由其组成。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在另一个实施例中，该组合物包括具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽，其中具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽与SEQ ID NO:140的成熟多肽具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列一致性。
在一个实施例中，该多肽在SEQ ID NO:140的成熟多肽的1与10个之间的位置(如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个位置)中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，该多肽优选地包括SEQID NO:140的氨基酸序列或其等位基因变体，或由其组成；包括SEQ ID NO:140的氨基酸序列和N-末端和/或C-末端His-标签和 /或HQ-标签，如SEQ ID NO:143或SEQ ID NO:144的成熟多肽；或是其片段，该片段具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且具有该成熟多肽的至少90％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:140的成熟多肽或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:140的氨基酸1至304或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:143的成熟多肽或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ IDNO:143的氨基酸1至312或由其组成。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在一个实施例中，该组合物包括具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽，该多肽与SEQ ID NO:141具有至少80％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:141具有至少85％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与 SEQ ID NO:141具有至少86％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:141具有至少87％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO: 141具有至少88％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:141 具有至少89％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:141具有至少90％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:141具有至少 91％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:141具有至少92％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:141具有至少93％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:141具有至少94％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:141具有至少95％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:141具有至少96％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:141具有至少97％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:141具有至少98％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:141具有至少99％的序列一致性。
在一个实施例中，该多肽在SEQ ID NO:141的1与10个之间的位置(如1、2、 3、4、5、6、7、8、9或10个位置)中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，该多肽在SEQ ID NO:144的1与10个之间的位置(如1、2、3、4、5、6、7、8、9 或10个位置)中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/ 或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，该多肽优选地包括SEQ ID NO:141的氨基酸序列或其等位基因变体，或由其组成；包括SEQ IDNO:141 或其等位变体和N-末端和/或C-末端的His-标签和/或HQ-标签，如SEQ ID NO:144；或是其片段，该片段具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且具有SEQ ID NO:141的至少 90％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:141的氨基酸1至304 或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:144的氨基酸1至312 或由其组成。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在另一个实施例中，该组合物包括具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽，其中具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽与SEQ ID NO:146的成熟多肽具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列一致性。
在一个实施例中，该多肽在SEQ ID NO:146的成熟多肽的1与10个之间的位置(如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个位置)中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，该多肽优选地包括SEQID NO:146的氨基酸序列或其等位基因变体，或由其组成；包括SEQ ID NO:146的氨基酸序列和N-末端和/或C-末端His-标签和 /或HQ-标签；或是其片段，该片段具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且具有该成熟多肽的至少90％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ IDNO:146的成熟多肽或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:146的氨基酸1至302 或由其组成。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在一个实施例中，该组合物包括具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽，该多肽与SEQ ID NO:147具有至少80％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:147具有至少85％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与 SEQ ID NO:147具有至少86％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:147具有至少87％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO: 147具有至少88％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:147 具有至少89％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:147具有至少90％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:147具有至少 91％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:147具有至少92％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:147具有至少93％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:147具有至少94％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:147具有至少95％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:147具有至少96％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:147具有至少97％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:147具有至少98％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:147具有至少99％的序列一致性。
在一个实施例中，该多肽在SEQ ID NO:147的1与10个之间的位置(如1、2、 3、4、5、6、7、8、9或10个位置)中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，该多肽优选地包括SEQ ID NO:147的氨基酸序列或其等位基因变体，或由其组成；包括SEQ ID NO:147或其等位变体和N-末端和/或C-末端His-标签和/或HQ-标签；或是其片段，该片段具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且具有SEQ ID NO:147的至少 90％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:147的氨基酸1至302 或由其组成。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在另一个实施例中，该组合物包括具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽，其中具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽与SEQ ID NO:149的成熟多肽具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列一致性。
在一个实施例中，该多肽在SEQ ID NO:149的成熟多肽的1与10个之间的位置(如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个位置)中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，该多肽优选地包括SEQID NO:149的氨基酸序列或其等位基因变体，或由其组成；包括SEQ ID NO:149的氨基酸序列和N-末端和/或C-末端His-标签和 /或HQ-标签，如SEQ ID NO:152或SEQ ID NO:153的成熟多肽；或是其片段，该片段具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且具有该成熟多肽的至少90％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:149的成熟多肽或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:149的氨基酸1至302或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:152的成熟多肽或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ IDNO:152的氨基酸1至310或由其组成。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在一个实施例中，该组合物包括具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽，该多肽与SEQ ID NO:150具有至少80％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:150具有至少85％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与 SEQ ID NO:150具有至少86％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:150具有至少87％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO: 150具有至少88％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:150 具有至少89％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:150具有至少90％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:150具有至少 91％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:150具有至少92％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:150具有至少93％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:150具有至少94％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:150具有至少95％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:150具有至少96％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:150具有至少97％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:150具有至少98％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:150具有至少99％的序列一致性。
在一个实施例中，该多肽在SEQ ID NO:150的1与10个之间的位置(如1、2、 3、4、5、6、7、8、9或10个位置)中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，该多肽在SEQ ID NO:153的1与10个之间的位置(如1、2、3、4、5、6、7、8、9 或10个位置)中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/ 或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，该多肽优选地包括SEQ ID NO:150的氨基酸序列或其等位基因变体，或由其组成；包括SEQ IDNO:150 或其等位变体和N-末端和/或C-末端的His-标签和/或HQ-标签，如SEQ ID NO:153；或是其片段，该片段具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且具有SEQ ID NO:150的至少 90％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:150的氨基酸1至302 或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:153的氨基酸1至310 或由其组成。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在另一个实施例中，该组合物包括具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽，其中具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽与SEQ ID NO:155的成熟多肽具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列一致性。
在一个实施例中，该多肽在SEQ ID NO:155的成熟多肽的1与10个之间的位置(如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个位置)中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，该多肽优选地包括SEQID NO:155的氨基酸序列或其等位基因变体，或由其组成；包括SEQ ID NO:155的氨基酸序列和N-末端和/或C-末端His-标签和 /或HQ-标签；或是其片段，该片段具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且具有该成熟多肽的至少90％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ IDNO:155的成熟多肽或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:155的氨基酸1至316 或由其组成。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在一个实施例中，该组合物包括具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽，该多肽与SEQ ID NO:156具有至少80％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:156具有至少85％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与 SEQ ID NO:156具有至少86％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:156具有至少87％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO: 156具有至少88％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:156 具有至少89％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:156具有至少90％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:156具有至少 91％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:156具有至少92％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:156具有至少93％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:156具有至少94％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:156具有至少95％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:156具有至少96％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:156具有至少97％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:156具有至少98％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:156具有至少99％的序列一致性。
在一个实施例中，该多肽在SEQ ID NO:156的1与10个之间的位置(如1、2、 3、4、5、6、7、8、9或10个位置)中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，该多肽优选地包括SEQ ID NO:156的氨基酸序列或其等位基因变体，或由其组成；包括SEQ ID NO:156或其等位变体和N-末端和/或C-末端His-标签和/或HQ-标签；或是其片段，该片段具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且具有SEQ ID NO:156的至少 90％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:156的氨基酸1至316 或由其组成。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在另一个实施例中，该组合物包括具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽，其中具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽与SEQ ID NO:158的成熟多肽具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列一致性。
在一个实施例中，该多肽在SEQ ID NO:158的成熟多肽的1与10个之间的位置(如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个位置)中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，该多肽优选地包括SEQID NO:158的氨基酸序列或其等位基因变体，或由其组成；包括SEQ ID NO:158的氨基酸序列和N-末端和/或C-末端His-标签和 /或HQ-标签；或是其片段，该片段具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且具有该成熟多肽的至少90％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ IDNO:158的成熟多肽或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:158的氨基酸1至316 或由其组成。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在一个实施例中，该组合物包括具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽，该多肽与SEQ ID NO:159具有至少80％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:159具有至少85％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与 SEQ ID NO:159具有至少86％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:159具有至少87％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO: 159具有至少88％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:159 具有至少89％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:159具有至少90％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:159具有至少 91％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:159具有至少92％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:159具有至少93％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:159具有至少94％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:159具有至少95％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:159具有至少96％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:159具有至少97％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:159具有至少98％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:159具有至少99％的序列一致性。
在一个实施例中，该多肽在SEQ ID NO:159的1与10个之间的位置(如1、2、 3、4、5、6、7、8、9或10个位置)中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，该多肽优选地包括SEQ ID NO:159的氨基酸序列或其等位基因变体，或由其组成；包括SEQ ID NO:159或其等位变体和N-末端和/或C-末端His-标签和/或HQ-标签；或是其片段，该片段具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且具有SEQ ID NO:159的至少 90％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:159的氨基酸1至316 或由其组成。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在另一个实施例中，该组合物包括具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽，其中具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽与SEQ ID NO:161的成熟多肽具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列一致性。
在一个实施例中，该多肽在SEQ ID NO:161的成熟多肽的1与10个之间的位置(如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个位置)中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，该多肽优选地包括SEQID NO:161的氨基酸序列或其等位基因变体，或由其组成；包括SEQ ID NO:161的氨基酸序列和N-末端和/或C-末端His-标签和/或HQ-标签；或是其片段，该片段具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且具有该成熟多肽的至少90％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ IDNO:161的成熟多肽或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:161的氨基酸1至303 或由其组成。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在一个实施例中，该组合物包括具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽，该多肽与SEQ ID NO:162具有至少80％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:162具有至少85％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与 SEQ ID NO:162具有至少86％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:162具有至少87％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO: 162具有至少88％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:162 具有至少89％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:162具有至少90％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:162具有至少 91％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:162具有至少92％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:162具有至少93％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:162具有至少94％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:162具有至少95％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:162具有至少96％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:162具有至少97％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:162具有至少98％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:162具有至少99％的序列一致性。
在一个实施例中，该多肽在SEQ ID NO:162的1与10个之间的位置(如1、2、 3、4、5、6、7、8、9或10个位置)中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，该多肽优选地包括SEQ ID NO:162的氨基酸序列或其等位基因变体，或由其组成；包括SEQ ID NO:162或其等位变体和N-末端和/或C-末端His-标签和/或HQ-标签；或是其片段，该片段具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且具有SEQ ID NO:162的至少 90％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:162的氨基酸1至303 或由其组成。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在另一个实施例中，该组合物包括具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽，其中具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽与SEQ ID NO:164的成熟多肽具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列一致性。
在一个实施例中，该多肽在SEQ ID NO:164的成熟多肽的1与10个之间的位置(如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个位置)中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，该多肽优选地包括SEQID NO:164的氨基酸序列或其等位基因变体，或由其组成；包括SEQ ID NO:164的氨基酸序列和N-末端和/或C-末端His-标签和 /或HQ-标签；或是其片段，该片段具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且具有该成熟多肽的至少90％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ IDNO:164的成熟多肽或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:164的氨基酸1至361 或由其组成。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在一个实施例中，该组合物包括具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽，该多肽与SEQ ID NO:165具有至少80％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:165具有至少85％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与 SEQ ID NO:165具有至少86％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:165具有至少87％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO: 165具有至少88％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:165 具有至少89％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:165具有至少90％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:165具有至少 91％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:165具有至少92％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:165具有至少93％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:165具有至少94％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:165具有至少95％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:165具有至少96％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:165具有至少97％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:165具有至少98％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:165具有至少99％的序列一致性。
在一个实施例中，该多肽在SEQ ID NO:165的1与10个之间的位置(如1、2、 3、4、5、6、7、8、9或10个位置)中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，该多肽优选地包括SEQ ID NO:165的氨基酸序列或其等位基因变体，或由其组成；包括SEQ ID NO:165或其等位变体和N-末端和/或C-末端His-标签和/或HQ-标签；或是其片段，该片段具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且具有SEQ ID NO:165的至少 90％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:165的氨基酸1至361 或由其组成。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在另一个实施例中，该组合物包括具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽，其中具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽与SEQ ID NO:167的成熟多肽具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列一致性。
在一个实施例中，该多肽在SEQ ID NO:167的成熟多肽的1与10个之间的位置(如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个位置)中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，该多肽优选地包括SEQID NO:167的氨基酸序列或其等位基因变体，或由其组成；包括SEQ ID NO:167的氨基酸序列和N-末端和/或C-末端His-标签和 /或HQ-标签；或是其片段，该片段具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且具有该成熟多肽的至少90％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ IDNO:167的成熟多肽或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:167的氨基酸1至373 或由其组成。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在一个实施例中，该组合物包括具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽，该多肽与SEQ ID NO:168具有至少80％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:168具有至少85％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与 SEQ ID NO:168具有至少86％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:168具有至少87％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO: 168具有至少88％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:168 具有至少89％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:168具有至少90％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:168具有至少 91％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:168具有至少92％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:168具有至少93％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:168具有至少94％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:168具有至少95％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:168具有至少96％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:168具有至少97％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:168具有至少98％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:168具有至少99％的序列一致性。
在一个实施例中，该多肽在SEQ ID NO:168的1与10个之间的位置(如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个位置)中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，该多肽优选地包括SEQ ID NO:168的氨基酸序列或其等位基因变体，或由其组成；包括SEQ ID NO:168或其等位变体和N-末端和/或C-末端His-标签和/或HQ-标签；或是其片段，该片段具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且具有SEQ ID NO:168的至少 90％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:168的氨基酸1至373 或由其组成。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在另一个实施例中，该组合物包括具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽，其中具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽与SEQ ID NO:170的成熟多肽具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列一致性。
在一个实施例中，该多肽在SEQ ID NO:170的成熟多肽的1与10个之间的位置(如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个位置)中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，该多肽优选地包括SEQID NO:170的氨基酸序列或其等位基因变体，或由其组成；包括SEQ ID NO:170的氨基酸序列和N-末端和/或C-末端His-标签和 /或HQ-标签；或是其片段，该片段具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且具有该成熟多肽的至少90％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ IDNO:170的成熟多肽或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:170的氨基酸1至302 或由其组成。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在一个实施例中，该组合物包括具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽，该多肽与SEQ ID NO:171具有至少80％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:171具有至少85％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与 SEQ ID NO:171具有至少86％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:171具有至少87％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO: 171具有至少88％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:171 具有至少89％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:171具有至少90％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:171具有至少 91％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:171具有至少92％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:171具有至少93％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:171具有至少94％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:171具有至少95％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:171具有至少96％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:171具有至少97％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:171具有至少98％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:171具有至少99％的序列一致性。
在一个实施例中，该多肽在SEQ ID NO:171的1与10个之间的位置(如1、2、 3、4、5、6、7、8、9或10个位置)中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，该多肽优选地包括SEQ ID NO:171的氨基酸序列或其等位基因变体，或由其组成；包括SEQ ID NO:171或其等位变体和N-末端和/或C-末端His-标签和/或HQ-标签；或是其片段，该片段具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且具有SEQ ID NO:171的至少 90％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:171的氨基酸1至302 或由其组成。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在另一个实施例中，该组合物包括具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽，其中具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽与SEQ ID NO:173的成熟多肽具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列一致性。
在一个实施例中，该多肽在SEQ ID NO:173的成熟多肽的1与10个之间的位置(如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个位置)中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，该多肽优选地包括SEQID NO:173的氨基酸序列或其等位基因变体，或由其组成；包括SEQ ID NO:173的氨基酸序列和N-末端和/或C-末端His-标签和 /或HQ-标签；或是其片段，该片段具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且具有该成熟多肽的至少90％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ IDNO:173的成熟多肽或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:173的氨基酸1至364 或由其组成。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在一个实施例中，该组合物包括具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽，该多肽与SEQ ID NO:174具有至少80％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:174具有至少85％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与 SEQ ID NO:174具有至少86％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:174具有至少87％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO: 174具有至少88％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:174 具有至少89％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:174具有至少90％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:174具有至少 91％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:174具有至少92％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:174具有至少93％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:174具有至少94％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:174具有至少95％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:174具有至少96％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:174具有至少97％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:174具有至少98％的序列一致性。在一个实施例中，GH62多肽与SEQ ID NO:174具有至少99％的序列一致性。
在一个实施例中，该多肽在SEQ ID NO:174的1与10个之间的位置(如1、2、 3、4、5、6、7、8、9或10个位置)中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，该多肽优选地包括SEQ ID NO:174的氨基酸序列或其等位基因变体，或由其组成；包括SEQ ID NO:174或其等位变体和N-末端和/或C-末端His-标签和/或HQ-标签；或是其片段，该片段具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且具有SEQ ID NO:174的至少 90％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:174的氨基酸1至364 或由其组成。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
组合物的GH10和GH11多肽
下文披露了本发明第一方面的优选实施例，涉及具有木聚糖酶活性的GH10或GH11多肽。
在一个实施例中，该组合物包括具有木聚糖酶活性的GH10多肽，例如如在 WO1994/021785中披露为SEQ ID NO:5且在此披露为SEQ ID NO:70的来自棘孢曲霉的木聚糖酶(Xyl II)。
在一个实施例中，该组合物包括具有木聚糖酶活性的GH10多肽，该多肽与SEQ IDNO:70具有至少80％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO: 70具有至少85％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:70具有至少86％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:70具有至少87％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:70具有至少88％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:70具有至少89％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:70具有至少90％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:70具有至少91％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:70具有至少92％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:70具有至少93％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:70具有至少94％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:70具有至少95％的序列一致性。在一个实施例中， GH10多肽与SEQ ID NO:70具有至少96％的序列一致性。在一个实施例中，GH10 多肽与SEQ ID NO:70具有至少97％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:70具有至少98％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:70具有至少99％的序列一致性。
在一个实施例中，该多肽在SEQ ID NO:70的1与10个之间的位置(如1、2、 3、4、5、6、7、8、9或10个位置)中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，该多肽优选地包括SEQ ID NO:70的氨基酸序列或其等位基因变体，或由其组成；包括SEQ ID NO:70或其等位变体和N-末端和/或C-末端His-标签和/或HQ-标签；或是其片段，该片段具有木聚糖酶活性并且具有SEQID NO:70的至少90％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:70的氨基酸1至384或由其组成。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在一个实施例中，该组合物包括具有木聚糖酶活性的GH10多肽，例如如在细菌学杂志(J.Bacteriol.)2001,183(16):4823中披露为Swissprot:Q97TP5并且在此披露为SEQID NO:71的来自丙酮丁醇梭杆菌的木聚糖酶。
在一个实施例中，该组合物包括具有木聚糖酶活性的GH10多肽，该多肽与SEQ IDNO:71具有至少80％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO: 71具有至少85％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:71具有至少86％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:71具有至少87％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:71具有至少88％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:71具有至少89％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:71具有至少90％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:71具有至少91％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:71具有至少92％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:71具有至少93％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:71具有至少94％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:71具有至少95％的序列一致性。在一个实施例中， GH10多肽与SEQ ID NO:71具有至少96％的序列一致性。在一个实施例中，GH10 多肽与SEQ ID NO:71具有至少97％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:71具有至少98％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:71具有至少99％的序列一致性。
在一个实施例中，该多肽在SEQ ID NO:71的1与10个之间的位置(如1、2、 3、4、5、6、7、8、9或10个位置)中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，该多肽优选地包括SEQ ID NO:71的氨基酸序列或其等位基因变体，或由其组成；包括SEQ ID NO:71或其等位变体和N-末端和/或C-末端His-标签和/或HQ-标签；或是其片段，该片段具有木聚糖酶活性并且具有SEQID NO:71的至少90％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:71的氨基酸1至288或由其组成。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在一个实施例中，该组合物包括具有木聚糖酶活性的GH10多肽，例如如在 WO2005/059084中披露为SEQ ID NO:8且在此披露为SEQ ID NO:72的来自棘孢曲霉的木聚糖酶。
在一个实施例中，该组合物包括具有木聚糖酶活性的GH10多肽，该多肽与SEQ IDNO:72具有至少80％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO: 72具有至少85％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:72具有至少86％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:72具有至少87％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:72具有至少88％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:72具有至少89％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:72具有至少90％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:72具有至少91％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:72具有至少92％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:72具有至少93％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:72具有至少94％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:72具有至少95％的序列一致性。在一个实施例中， GH10多肽与SEQ ID NO:72具有至少96％的序列一致性。在一个实施例中，GH10 多肽与SEQ ID NO:72具有至少97％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:72具有至少98％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:72具有至少99％的序列一致性。
在一个实施例中，该多肽在SEQ ID NO:72的1与10个之间的位置(如1、2、 3、4、5、6、7、8、9或10个位置)中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，该多肽优选地包括SEQ ID NO:72的氨基酸序列或其等位基因变体，或由其组成；包括SEQ ID NO:72或其等位变体和N-末端和/或C-末端His-标签和/或HQ-标签；或是其片段，该片段具有木聚糖酶活性并且具有SEQID NO:72的至少90％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:72的氨基酸1至308或由其组成。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在一个实施例中，该组合物包括具有木聚糖酶活性的GH11多肽，例如如在 WO1996/23062中披露为SEQ ID NO:2且在此披露为SEQ ID NO:73的来自疏棉状嗜热丝孢菌的木聚糖酶。
在一个实施例中，该组合物包括具有木聚糖酶活性的GH10多肽，该多肽与SEQ IDNO:73具有至少80％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO: 73具有至少85％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:73具有至少86％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:73具有至少87％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:73具有至少88％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:73具有至少89％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:73具有至少90％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:73具有至少91％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:73具有至少92％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:73具有至少93％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:73具有至少94％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:73具有至少95％的序列一致性。在一个实施例中， GH10多肽与SEQ ID NO:73具有至少96％的序列一致性。在一个实施例中，GH10 多肽与SEQ ID NO:73具有至少97％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:73具有至少98％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:73具有至少99％的序列一致性。
在一个实施例中，该多肽在SEQ ID NO:73的1与10个之间的位置(如1、2、 3、4、5、6、7、8、9或10个位置)中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，该多肽优选地包括SEQ ID NO:73的氨基酸序列或其等位基因变体，或由其组成；包括SEQ ID NO:73或其等位变体和N-末端和/或C-末端His-标签和/或HQ-标签；或是其片段，该片段具有木聚糖酶活性并且具有SEQID NO:73的至少90％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:73的氨基酸1至195或由其组成。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在一个实施例中，该组合物包括具有木聚糖酶活性的GH11多肽，例如如在 WO2011/057140中披露为SEQ ID NO:305且在此披露为SEQ ID NO:74的来自嗜热网团菌的木聚糖酶。
在一个实施例中，该组合物包括具有木聚糖酶活性的GH10多肽，该多肽与SEQ IDNO:74具有至少80％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO: 74具有至少85％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:74具有至少86％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:74具有至少87％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:74具有至少88％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:74具有至少89％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:74具有至少90％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:74具有至少91％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:74具有至少92％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:74具有至少93％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:74具有至少94％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:74具有至少95％的序列一致性。在一个实施例中， GH10多肽与SEQ ID NO:74具有至少96％的序列一致性。在一个实施例中，GH10 多肽与SEQ ID NO:74具有至少97％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:74具有至少98％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:74具有至少99％的序列一致性。
在一个实施例中，该多肽在SEQ ID NO:74的1与10个之间的位置(如1、2、 3、4、5、6、7、8、9或10个位置)中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，该多肽优选地包括SEQ ID NO:74的氨基酸序列或其等位基因变体，或由其组成；包括SEQ ID NO:74或其等位变体和N-末端和/或C-末端His-标签和/或HQ-标签；或是其片段，该片段具有木聚糖酶活性并且具有SEQID NO:74的至少90％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:74的氨基酸1至203或由其组成。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在一个实施例中，该组合物包括具有木聚糖酶活性的GH11多肽，例如如在WO2005/079585中披露为SEQ ID NO:2且在此披露为SEQ ID NO:75的来自饲料类芽孢杆菌(Paenibacillus pabuli)的木聚糖酶。
在一个实施例中，该组合物包括具有木聚糖酶活性的GH10多肽，该多肽与SEQ IDNO:75具有至少80％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO: 75具有至少85％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:75具有至少86％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:75具有至少87％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:75具有至少88％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:75具有至少89％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:75具有至少90％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:75具有至少91％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:75具有至少92％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:75具有至少93％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:75具有至少94％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:75具有至少95％的序列一致性。在一个实施例中， GH10多肽与SEQ ID NO:75具有至少96％的序列一致性。在一个实施例中，GH10 多肽与SEQ ID NO:75具有至少97％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:75具有至少98％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:75具有至少99％的序列一致性。
在一个实施例中，该多肽在SEQ ID NO:75的1与10个之间的位置(如1、2、 3、4、5、6、7、8、9或10个位置)中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，该多肽优选地包括SEQ ID NO:75的氨基酸序列或其等位基因变体，或由其组成；包括SEQ ID NO:75或其等位变体和N-末端和/或C-末端His-标签和/或HQ-标签；或是其片段，该片段具有木聚糖酶活性并且具有SEQID NO:75的至少90％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:75的氨基酸1至182或由其组成。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在一个实施例中，该组合物包括具有木聚糖酶活性的GH11多肽，例如如在此披露为SEQ ID NO:78的来自嗜热脂肪土芽孢杆菌的木聚糖酶。在一个实施例中，该组合物包括具有木聚糖酶活性的GH10多肽，该多肽与SEQ ID NO:77的成熟多肽具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％的序列一致性。
在一个实施例中，该多肽在SEQ ID NO:77的成熟多肽的1与10个之间的位置(如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个位置)中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，该多肽优选地包括SEQID NO:77的氨基酸序列或其等位基因变体，或由其组成；包括SEQ ID NO:77的氨基酸序列和N-末端和/或C-末端His-标签和/或HQ-标签，如SEQ ID NO:80或SEQ ID NO:81的成熟多肽；或是其片段，该片段具有木聚糖酶活性并且具有该成熟多肽的至少90％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:77的成熟多肽或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括 SEQ ID NO:77的氨基酸1至183或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ IDNO:80的成熟多肽或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:80 的氨基酸1至181或由其组成。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在一个实施例中，该组合物包括具有木聚糖酶活性的GH10多肽，该多肽与SEQ IDNO:78具有至少80％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO: 78具有至少85％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:78具有至少86％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:78具有至少87％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:78具有至少88％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:78具有至少89％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:78具有至少90％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:78具有至少91％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:78具有至少92％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:78具有至少93％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:78具有至少94％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:78具有至少95％的序列一致性。在一个实施例中， GH10多肽与SEQ ID NO:78具有至少96％的序列一致性。在一个实施例中，GH10 多肽与SEQ ID NO:78具有至少97％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:78具有至少98％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:78具有至少99％的序列一致性。
在一个实施例中，该多肽在SEQ ID NO:78的1与10个之间的位置(如1、2、 3、4、5、6、7、8、9或10个位置)中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，该多肽在SEQ ID NO:81的1与10个之间的位置(如1、2、3、4、5、6、7、8、9 或10个位置)中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/ 或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，该多肽优选地包括SEQ ID NO:78的氨基酸序列或其等位基因变体，或由其组成；包括SEQ IDNO:78或其等位变体和N-末端和/或C-末端His-标签和/或HQ-标签，如SEQ ID NO:81；或是其片段，该片段具有木聚糖酶活性并且具有SEQ ID NO:78的至少90％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:78的氨基酸1至183或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:81的氨基酸1至181或由其组成。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在一个实施例中，该组合物包括具有木聚糖酶活性的GH11多肽，例如如在此披露为SEQ ID NO:84的来自北疆链霉菌的木聚糖酶。在一个实施例中，该组合物包括具有木聚糖酶活性的GH10多肽，该多肽与SEQ ID NO:83的成熟多肽具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％的序列一致性。
在一个实施例中，该多肽在SEQ ID NO:83的成熟多肽的1与10个之间的位置(如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个位置)中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，该多肽优选地包括SEQID NO:83的氨基酸序列或其等位基因变体，或由其组成；包括SEQ ID NO:83的氨基酸序列和N-末端和/或C-末端His-标签和/或 HQ-标签，如SEQ ID NO:86或SEQ ID NO:87的成熟多肽；或是其片段，该片段具有木聚糖酶活性并且具有该成熟多肽的至少90％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:83的成熟多肽或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括 SEQ ID NO:83的氨基酸1至299或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ IDNO:86的成熟多肽或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:86 的氨基酸1至307或由其组成。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在一个实施例中，该组合物包括具有木聚糖酶活性的GH10多肽，该多肽与SEQ IDNO:84具有至少80％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO: 84具有至少85％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:84具有至少86％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:84具有至少87％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:84具有至少88％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:84具有至少89％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:84具有至少90％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:84具有至少91％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:84具有至少92％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:84具有至少93％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:84具有至少94％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:84具有至少95％的序列一致性。在一个实施例中， GH10多肽与SEQ ID NO:84具有至少96％的序列一致性。在一个实施例中，GH10 多肽与SEQ ID NO:84具有至少97％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:84具有至少98％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:84具有至少99％的序列一致性。
在一个实施例中，该多肽在SEQ ID NO:84的1与10个之间的位置(如1、2、 3、4、5、6、7、8、9或10个位置)中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，该多肽在SEQ ID NO:87的1与10个之间的位置(如1、2、3、4、5、6、7、8、9 或10个位置)中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/ 或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，该多肽优选地包括SEQ ID NO:84的氨基酸序列或其等位基因变体，或由其组成；包括SEQ IDNO:84或其等位变体和N-末端和/或C-末端His-标签和/或HQ-标签，如SEQ ID NO:87；或是其片段，该片段具有木聚糖酶活性并且具有SEQ ID NO:84的至少90％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:84的氨基酸1至299或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:87的氨基酸1至307或由其组成。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在一个实施例中，该组合物包括具有木聚糖酶活性的GH11多肽，例如如在 WO2014/019220中公披露为SEQ ID NO:2且如在此披露为SEQ ID NO:88的称为 FoxXyn6的来自尖孢镰刀菌的木聚糖酶。
在一个实施例中，该组合物包括具有木聚糖酶活性的GH10多肽，该多肽与SEQ IDNO:88具有至少80％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO: 88具有至少85％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:88具有至少86％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:88具有至少87％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:88具有至少88％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:88具有至少89％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:88具有至少90％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:88具有至少91％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:88具有至少92％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:88具有至少93％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:88具有至少94％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:88具有至少95％的序列一致性。在一个实施例中， GH10多肽与SEQ ID NO:88具有至少96％的序列一致性。在一个实施例中，GH10 多肽与SEQ ID NO:88具有至少97％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:88具有至少98％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:88具有至少99％的序列一致性。
在一个实施例中，该多肽在SEQ ID NO:88的1与10个之间的位置(如1、2、 3、4、5、6、7、8、9或10个位置)中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，该多肽优选地包括SEQ ID NO:88的氨基酸序列或其等位基因变体，或由其组成；包括SEQ ID NO:88或其等位变体和N-末端和/或C-末端His-标签和/或HQ-标签；或是其片段，该片段具有木聚糖酶活性并且具有SEQID NO:88的至少90％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:88的氨基酸1至188或由其组成。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在一个实施例中，该组合物包括具有木聚糖酶活性的GH11多肽，例如如在 WO2014/020143中公披露为SEQ ID NO:7且如在此披露为SEQ ID NO:89的称为 AclXyn5的来自尖孢镰刀菌的木聚糖酶。
在一个实施例中，该组合物包括具有木聚糖酶活性的GH10多肽，该多肽与SEQ IDNO:89具有至少80％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO: 89具有至少85％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:89具有至少86％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:89具有至少87％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:89具有至少88％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:89具有至少89％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:89具有至少90％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:89具有至少91％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:89具有至少92％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:89具有至少93％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:89具有至少94％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:89具有至少95％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:89具有至少96％的序列一致性。在一个实施例中，GH10 多肽与SEQ ID NO:89具有至少97％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:89具有至少98％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:89具有至少99％的序列一致性。
在一个实施例中，该多肽在SEQ ID NO:89的1与10个之间的位置(如1、2、 3、4、5、6、7、8、9或10个位置)中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，该多肽优选地包括SEQ ID NO:89的氨基酸序列或其等位基因变体，或由其组成；包括SEQ ID NO:89或其等位变体和N-末端和/或C-末端His-标签和/或HQ-标签；或是其片段，该片段具有木聚糖酶活性并且具有SEQID NO:89的至少90％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:89的氨基酸1至189或由其组成。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在一个实施例中，该组合物包括具有木聚糖酶活性的GH10多肽，例如如在 WO2013/068550中披露为SEQ ID NO:1并且如在此披露为SEQ ID NO:95的称为 XynB的来自海栖热孢菌MSB8的木聚糖酶。
在一个实施例中，该组合物包括具有木聚糖酶活性的GH10多肽，该多肽与SEQ IDNO:95具有至少80％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO: 95具有至少85％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:95具有至少86％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:95具有至少87％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:95具有至少88％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:95具有至少89％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:95具有至少90％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:95具有至少91％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:95具有至少92％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:95具有至少93％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:95具有至少94％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:95具有至少95％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:95具有至少96％的序列一致性。在一个实施例中，GH10 多肽与SEQ ID NO:95具有至少97％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:95具有至少98％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:95具有至少99％的序列一致性。
在一个实施例中，该多肽在SEQ ID NO:95的1与10个之间的位置(如1、2、 3、4、5、6、7、8、9或10个位置)中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，该多肽优选地包括SEQ ID NO:95的氨基酸序列或其等位基因变体，或由其组成；包括SEQ ID NO:95或其等位变体和N-末端和/或C-末端His-标签和/或HQ-标签；或是其片段，该片段具有木聚糖酶活性并且具有SEQID NO:95的至少90％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:95的氨基酸1至328或由其组成。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在一个实施例中，该组合物包括具有木聚糖酶活性的GH11多肽，例如如在 WO2009/018537中公披露为SEQ ID NO:41且如在此披露为SEQ ID NO:96的称为 Xyl6的来自嗜热毁丝霉的木聚糖酶。
在一个实施例中，该组合物包括具有木聚糖酶活性的GH11多肽，该多肽与SEQ IDNO:96具有至少80％的序列一致性。在一个实施例中，GH11多肽与SEQ ID NO: 96具有至少85％的序列一致性。在一个实施例中，GH11多肽与SEQ ID NO:96具有至少86％的序列一致性。在一个实施例中，GH11多肽与SEQ ID NO:96具有至少87％的序列一致性。在一个实施例中，GH11多肽与SEQ ID NO:96具有至少88％的序列一致性。在一个实施例中，GH11多肽与SEQ ID NO:96具有至少89％的序列一致性。在一个实施例中，GH11多肽与SEQ ID NO:96具有至少90％的序列一致性。在一个实施例中，GH11多肽与SEQ ID NO:96具有至少91％的序列一致性。在一个实施例中，GH11多肽与SEQ ID NO:96具有至少92％的序列一致性。在一个实施例中，GH11多肽与SEQ ID NO:96具有至少93％的序列一致性。在一个实施例中，GH11多肽与SEQ ID NO:96具有至少94％的序列一致性。在一个实施例中，GH11多肽与SEQ ID NO:96具有至少95％的序列一致性。在一个实施例中， GH11多肽与SEQ ID NO:96具有至少96％的序列一致性。在一个实施例中，GH11 多肽与SEQ ID NO:96具有至少97％的序列一致性。在一个实施例中，GH11多肽与SEQ ID NO:96具有至少98％的序列一致性。在一个实施例中，GH11多肽与SEQ ID NO:96具有至少99％的序列一致性。
在一个实施例中，该多肽在SEQ ID NO:96的1与10个之间的位置(如1、2、 3、4、5、6、7、8、9或10个位置)中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，该多肽优选地包括SEQ ID NO:96的氨基酸序列或其等位基因变体，或由其组成；包括SEQ ID NO:96或其等位变体和N-末端和/或C-末端His-标签和/或HQ-标签；或是其片段，该片段具有木聚糖酶活性并且具有SEQID NO:96的至少90％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:96的氨基酸1至208或由其组成。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在一个实施例中，该组合物包括具有木聚糖酶活性的GH11多肽，其中具有木聚糖酶活性的GH11多肽与SEQ ID NO:98的成熟多肽具有至少80％，例如至少 85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少 92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少 99％、或100％的序列一致性。
在一个实施例中，该多肽在SEQ ID NO:98的成熟多肽的1与10个之间的位置(如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个位置)中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，该多肽优选地包括SEQID NO:98的氨基酸序列或其等位基因变体，或由其组成；包括SEQ ID NO:98的氨基酸序列和N-末端和/或C-末端His-标签和/或 HQ-标签；或是其片段，该片段具有木聚糖酶活性并且具有该成熟多肽的至少90％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:98的成熟多肽或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:98的氨基酸1至203或由其组成。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在一个实施例中，该组合物包括具有木聚糖酶活性的GH11多肽，该多肽与SEQ IDNO:99具有至少80％的序列一致性。在一个实施例中，GH11多肽与SEQ ID NO: 99具有至少85％的序列一致性。在一个实施例中，GH11多肽与SEQ ID NO:99具有至少86％的序列一致性。在一个实施例中，GH11多肽与SEQ ID NO:99具有至少87％的序列一致性。在一个实施例中，GH11多肽与SEQ ID NO:99具有至少88％的序列一致性。在一个实施例中，GH11多肽与SEQ ID NO:99具有至少89％的序列一致性。在一个实施例中，GH11多肽与SEQ ID NO:99具有至少90％的序列一致性。在一个实施例中，GH11多肽与SEQ ID NO:99具有至少91％的序列一致性。在一个实施例中，GH11多肽与SEQ ID NO:99具有至少92％的序列一致性。在一个实施例中，GH11多肽与SEQ ID NO:99具有至少93％的序列一致性。在一个实施例中，GH11多肽与SEQ ID NO:99具有至少94％的序列一致性。在一个实施例中，GH11多肽与SEQ ID NO:99具有至少95％的序列一致性。在一个实施例中， GH11多肽与SEQ ID NO:99具有至少96％的序列一致性。在一个实施例中，GH11 多肽与SEQ ID NO:99具有至少97％的序列一致性。在一个实施例中，GH11多肽与SEQ ID NO:99具有至少98％的序列一致性。在一个实施例中，GH11多肽与SEQ ID NO:99具有至少99％的序列一致性。
在一个实施例中，该多肽在SEQ ID NO:99的1与10个之间的位置(如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个位置)中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，该多肽优选地包括SEQ ID NO:99的氨基酸序列或其等位基因变体，或由其组成；包括SEQ ID NO:99或其等位变体和N-末端和/或C-末端His-标签和/或HQ-标签；或是其片段，该片段具有木聚糖酶活性并且具有SEQ IDNO:99的至少90％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:99的氨基酸1至203或由其组成。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在一个实施例中，该组合物包括具有木聚糖酶活性的GH10多肽，其中具有木聚糖酶活性的GH10多肽与SEQ ID NO:101的成熟多肽具有至少80％，例如至少 85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少 92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少 99％、或100％的序列一致性。
在一个实施例中，该多肽在SEQ ID NO:101的成熟多肽的1与10个之间的位置(如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个位置)中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，该多肽优选地包括SEQID NO:101的氨基酸序列或其等位基因变体，或由其组成；包括SEQ ID NO:101的氨基酸序列和N-末端和/或C-末端His-标签和 /或HQ-标签；或是其片段，该片段具有木聚糖酶活性并且具有该成熟多肽的至少 90％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:101的成熟多肽或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:101的氨基酸1至337或由其组成。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在一个实施例中，该组合物包括具有木聚糖酶活性的GH10多肽，该多肽与SEQ IDNO:102具有至少80％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO: 102具有至少85％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:102 具有至少86％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:102具有至少87％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:102具有至少 88％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:102具有至少89％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ IDNO:102具有至少90％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:102具有至少91％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:102具有至少92％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:102具有至少93％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:102具有至少94％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:102具有至少95％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:102具有至少96％的序列一致性。在一个实施例中， GH10多肽与SEQ ID NO:102具有至少97％的序列一致性。在一个实施例中，GH10 多肽与SEQ ID NO:102具有至少98％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:102具有至少99％的序列一致性。
在一个实施例中，该多肽在SEQ ID NO:102的1与10个之间的位置(如1、2、 3、4、5、6、7、8、9或10个位置)中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，该多肽优选地包括SEQ ID NO:102的氨基酸序列或其等位基因变体，或由其组成；包括SEQ ID NO:102或其等位变体和N-末端和/或C-末端His-标签和/或HQ-标签；或是其片段，该片段具有木聚糖酶活性并且具有SEQID NO:102的至少90％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:102的氨基酸1至337或由其组成。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在一个实施例中，该组合物包括具有木聚糖酶活性的GH10多肽，例如在真菌遗传学和生物学(Fungal Genetics and Biology)29,145-151(2000)中所披露的并在此披露为SEQ ID NO:177的来自玉蜀黍黑粉菌的木聚糖酶。在一个实施例中，该组合物包括具有木聚糖酶活性的GH10多肽，该多肽与SEQ ID NO:176的成熟多肽具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％的序列一致性。
在一个实施例中，该多肽在SEQ ID NO:176的成熟多肽的1与10个之间的位置(如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个位置)中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，该多肽优选地包括SEQID NO:176的氨基酸序列或其等位基因变体，或由其组成；包括SEQ ID NO:176的氨基酸序列和N-末端和/或C-末端His-标签和 /或HQ-标签，如SEQ ID NO:179或SEQ ID NO:180的成熟多肽；或是其片段，该片段具有木聚糖酶活性并且具有该成熟多肽的至少90％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:176的成熟多肽或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:176的氨基酸1至323或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:179的成熟多肽或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:179的氨基酸1至331或由其组成。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在一个实施例中，该组合物包括具有木聚糖酶活性的GH10多肽，该多肽与SEQ IDNO:177具有至少80％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO: 177具有至少85％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:177 具有至少86％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:177具有至少87％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:177具有至少 88％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:177具有至少89％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ IDNO:177具有至少90％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:177具有至少91％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:177具有至少92％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:177具有至少93％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:177具有至少94％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:177具有至少95％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:177具有至少96％的序列一致性。在一个实施例中， GH10多肽与SEQ ID NO:177具有至少97％的序列一致性。在一个实施例中，GH10 多肽与SEQ ID NO:177具有至少98％的序列一致性。在一个实施例中，GH10多肽与SEQ ID NO:177具有至少99％的序列一致性。
在一个实施例中，该多肽在SEQ ID NO:177的1与10个之间的位置(如1、2、 3、4、5、6、7、8、9或10个位置)中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，该多肽在SEQ ID NO:180的1与10个之间的位置(如1、2、3、4、5、6、7、8、9 或10个位置)中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/ 或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，该多肽优选地包括SEQ ID NO:177的氨基酸序列或其等位基因变体，或由其组成；包括SEQ IDNO:177 或其等位变体和N-末端和/或C-末端His-标签和/或HQ-标签，如SEQ ID NO:180；或是其片段，该片段具有木聚糖酶活性并且具有SEQ ID NO:177的至少90％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:177的氨基酸1至323或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:180的氨基酸1至331或由其组成。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
组合
在下面的段落中，列出了本发明第一方面的具有木聚糖酶活性的GH10或 GH11多肽与具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽的具体组合。
在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:9的GH62多肽和SEQ ID NO:70的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:9的GH62 多肽和SEQ IDNO:71的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:9的GH62多肽和SEQID NO:72的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:9的GH62多肽和SEQ ID NO:73的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:9的GH62多肽和SEQ ID NO:74的 GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:9的GH62多肽和 SEQ ID NO:75的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO: 9的GH62多肽和SEQ ID NO:78的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:9的GH62多肽和SEQ ID NO:81的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ IDNO:9的GH62多肽和SEQ ID NO:84的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQID NO:9的GH62多肽和SEQ ID NO:87的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:9的GH62 多肽和SEQ ID NO:88的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:9的GH62多肽和SEQ ID NO:89的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:9的GH62多肽和SEQ ID NO:95的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:9的GH62多肽和SEQ ID NO:96的 GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:9的GH62多肽和 SEQ ID NO:99的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO: 9的GH62多肽和SEQ ID NO:102的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:9的GH62多肽和SEQ ID NO:180的GH10多肽。
在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:12的GH62多肽和SEQ ID NO:70的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:12的 GH62多肽和SEQ IDNO:71的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:12的GH62多肽和SEQID NO:72的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:12的GH62多肽和SEQ ID NO:73的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:12的GH62多肽和SEQ ID NO: 74的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:12的GH62 多肽和SEQ ID NO:75的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:12的GH62多肽和SEQ ID NO:78的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ IDNO:12的GH62多肽和SEQ ID NO:81的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQID NO:12的GH62多肽和SEQ ID NO:84 的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:12的GH62多肽和SEQ ID NO:87的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:12的GH62多肽和SEQ ID NO:88的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:12的GH62多肽和SEQ ID NO:89的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:12的GH62多肽和SEQ ID NO:95的 GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:12的GH62多肽和SEQ ID NO:96的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO: 12的GH62多肽和SEQ ID NO:99的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:12的GH62多肽和SEQ ID NO:102的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:12的GH62多肽和SEQ ID NO:180的GH10 多肽。
在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:15的GH62多肽和SEQ ID NO:70的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:15的 GH62多肽和SEQ IDNO:71的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:15的GH62多肽和SEQID NO:72的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:15的GH62多肽和SEQ ID NO:73的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:15的GH62多肽和SEQ ID NO: 74的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:15的GH62 多肽和SEQ ID NO:75的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:15的GH62多肽和SEQ ID NO:78的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ IDNO:15的GH62多肽和SEQ ID NO:81的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQID NO:15的GH62多肽和SEQ ID NO:84 的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:15的GH62多肽和SEQ ID NO:87的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:15的GH62多肽和SEQ ID NO:88的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:15的GH62多肽和SEQ ID NO:89的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:15的GH62多肽和SEQ ID NO:95的 GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:15的GH62多肽和SEQ ID NO:96的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO: 15的GH62多肽和SEQ ID NO:99的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:15的GH62多肽和SEQ ID NO:102的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:15的GH62多肽和SEQ ID NO:180的GH10 多肽。
在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:18的GH62多肽和SEQ ID NO:70的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:18的 GH62多肽和SEQ IDNO:71的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:18的GH62多肽和SEQID NO:72的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:18的GH62多肽和SEQ ID NO:73的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:18的GH62多肽和SEQ ID NO: 74的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:18的GH62 多肽和SEQ ID NO:75的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:18的GH62多肽和SEQ ID NO:78的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ IDNO:18的GH62多肽和SEQ ID NO:81的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQID NO:18的GH62多肽和SEQ ID NO:84 的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:18的GH62多肽和SEQ ID NO:87的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:18的GH62多肽和SEQ ID NO:88的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:18的GH62多肽和SEQ ID NO:89的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:18的GH62多肽和SEQ ID NO:95的 GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:18的GH62多肽和SEQ ID NO:96的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO: 18的GH62多肽和SEQ ID NO:99的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:18的GH62多肽和SEQ ID NO:102的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:18的GH62多肽和SEQ ID NO:180的GH10 多肽。
在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:21的GH62多肽和SEQ ID NO:70的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:21的 GH62多肽和SEQ IDNO:71的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:21的GH62多肽和SEQID NO:72的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:21的GH62多肽和SEQ ID NO:73的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:21的GH62多肽和SEQ ID NO: 74的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:21的GH62 多肽和SEQ ID NO:75的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:21的GH62多肽和SEQ ID NO:78的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ IDNO:21的GH62多肽和SEQ ID NO:81的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQID NO:21的GH62多肽和SEQ ID NO:84 的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:21的GH62多肽和SEQ ID NO:87的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:21的GH62多肽和SEQ ID NO:88的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:21的GH62多肽和SEQ ID NO:89的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:21的GH62多肽和SEQ ID NO:95的 GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:21的GH62多肽和SEQ ID NO:96的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO: 21的GH62多肽和SEQ ID NO:99的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:21的GH62多肽和SEQ ID NO:102的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:21的GH62多肽和SEQ ID NO:180的GH10 多肽。
在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:24的GH62多肽和SEQ ID NO:70的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:24的 GH62多肽和SEQ IDNO:71的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:24的GH62多肽和SEQID NO:72的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:24的GH62多肽和SEQ ID NO:73的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:24的GH62多肽和SEQ ID NO: 74的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:24的GH62 多肽和SEQ ID NO:75的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:24的GH62多肽和SEQ ID NO:78的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ IDNO:24的GH62多肽和SEQ ID NO:81的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQID NO:24的GH62多肽和SEQ ID NO:84 的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:24的GH62多肽和SEQ ID NO:87的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:24的GH62多肽和SEQ ID NO:88的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:24的GH62多肽和SEQ ID NO:89的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:24的GH62多肽和SEQ ID NO:95的 GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:24的GH62多肽和SEQ ID NO:96的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO: 24的GH62多肽和SEQ ID NO:99的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:24的GH62多肽和SEQ ID NO:102的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:24的GH62多肽和SEQ ID NO:180的GH10 多肽。
在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:27的GH62多肽和SEQ ID NO:70的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:27的 GH62多肽和SEQ IDNO:71的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:27的GH62多肽和SEQID NO:72的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:27的GH62多肽和SEQ ID NO:73的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:27的GH62多肽和SEQ ID NO: 74的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:27的GH62 多肽和SEQ ID NO:75的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:27的GH62多肽和SEQ ID NO:78的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ IDNO:27的GH62多肽和SEQ ID NO:81的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQID NO:27的GH62多肽和SEQ ID NO:84 的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:27的GH62多肽和SEQ ID NO:87的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:27的GH62多肽和SEQ ID NO:88的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:27的GH62多肽和SEQ ID NO:89的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:27的GH62多肽和SEQ ID NO:95的 GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:27的GH62多肽和SEQ ID NO:96的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO: 27的GH62多肽和SEQ ID NO:99的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:27的GH62多肽和SEQ ID NO:102的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:27的GH62多肽和SEQ ID NO:180的GH10 多肽。
在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:30的GH62多肽和SEQ ID NO:70的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:30的 GH62多肽和SEQ IDNO:71的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:30的GH62多肽和SEQID NO:72的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:30的GH62多肽和SEQ ID NO:73的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:30的GH62多肽和SEQ ID NO: 74的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:30的GH62 多肽和SEQ ID NO:75的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:30的GH62多肽和SEQ ID NO:78的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ IDNO:30的GH62多肽和SEQ ID NO:81的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQID NO:30的GH62多肽和SEQ ID NO:84 的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:30的GH62多肽和SEQ ID NO:87的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:30的GH62多肽和SEQ ID NO:88的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:30的GH62多肽和SEQ ID NO:89的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:30的GH62多肽和SEQ ID NO:95的 GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:30的GH62多肽和SEQ ID NO:96的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO: 30的GH62多肽和SEQ ID NO:99的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:30的GH62多肽和SEQ ID NO:102的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:30的GH62多肽和SEQ ID NO:180的GH10 多肽。
在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:36的GH62多肽和SEQ ID NO:70的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:36的 GH62多肽和SEQ IDNO:71的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:36的GH62多肽和SEQID NO:72的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:36的GH62多肽和SEQ ID NO:73的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:36的GH62多肽和SEQ ID NO: 74的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:36的GH62 多肽和SEQ ID NO:75的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:36的GH62多肽和SEQ ID NO:78的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ IDNO:9的GH62多肽和SEQ ID NO:81的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQID NO:36的GH62多肽和SEQ ID NO:84的 GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:36的GH62多肽和SEQ ID NO:87的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO: 36的GH62多肽和SEQ ID NO:88的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:36的GH62多肽和SEQ ID NO:89的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:36的GH62多肽和SEQ ID NO:95的GH10 多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:36的GH62多肽和SEQ ID NO:96的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:36 的GH62多肽和SEQ ID NO:99的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:36的GH62多肽和SEQ ID NO:102的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:36的GH62多肽和SEQ ID NO:180的GH10 多肽。
在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:42的GH62多肽和SEQ ID NO:70的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:42的 GH62多肽和SEQ IDNO:71的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:42的GH62多肽和SEQID NO:72的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:42的GH62多肽和SEQ ID NO:73的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:42的GH62多肽和SEQ ID NO: 74的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:42的GH62 多肽和SEQ ID NO:75的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:42的GH62多肽和SEQ ID NO:78的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ IDNO:42的GH62多肽和SEQ ID NO:81的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQID NO:42的GH62多肽和SEQ ID NO:84 的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:42的GH62多肽和SEQ ID NO:87的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:42的GH62多肽和SEQ ID NO:88的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:42的GH62多肽和SEQ ID NO:89的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:42的GH62多肽和SEQ ID NO:95的 GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:42的GH62多肽和SEQ ID NO:96的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO: 42的GH62多肽和SEQ ID NO:99的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:42的GH62多肽和SEQ ID NO:102的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:42的GH62多肽和SEQ ID NO:180的GH10 多肽。
在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:48的GH62多肽和SEQ ID NO:70的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:48的 GH62多肽和SEQ IDNO:71的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:48的GH62多肽和SEQID NO:72的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:48的GH62多肽和SEQ ID NO:73的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:48的GH62多肽和SEQ ID NO: 74的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:48的GH62 多肽和SEQ ID NO:75的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:48的GH62多肽和SEQ ID NO:78的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ IDNO:48的GH62多肽和SEQ ID NO:81的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQID NO:48的GH62多肽和SEQ ID NO:84 的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:48的GH62多肽和SEQ ID NO:87的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物不包括SEQ ID NO:48的GH62多肽和SEQ ID NO:88的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:48的GH62多肽和SEQ ID NO:89的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:48的GH62多肽和SEQ ID NO:95 的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:48的GH62多肽和SEQ ID NO:96的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:48的GH62多肽和SEQ ID NO:99的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:48的GH62多肽和SEQ ID NO:102的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:48的GH62多肽和SEQ ID NO:180 的GH10多肽。
在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:54的GH62多肽和SEQ ID NO:70的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:54的 GH62多肽和SEQ IDNO:71的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:54的GH62多肽和SEQID NO:72的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:54的GH62多肽和SEQ ID NO:73的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:54的GH62多肽和SEQ ID NO: 74的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:54的GH62 多肽和SEQ ID NO:75的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:54的GH62多肽和SEQ ID NO:78的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ IDNO:54的GH62多肽和SEQ ID NO:81的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQID NO:54的GH62多肽和SEQ ID NO:84 的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:54的GH62多肽和SEQ ID NO:87的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:54的GH62多肽和SEQ ID NO:88的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:54的GH62多肽和SEQ ID NO:89的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:54的GH62多肽和SEQ ID NO:95的 GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:54的GH62多肽和SEQ ID NO:96的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO: 54的GH62多肽和SEQ ID NO:99的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:54的GH62多肽和SEQ ID NO:102的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:54的GH62多肽和SEQ ID NO:180的GH10 多肽。
在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:60的GH62多肽和SEQ ID NO:70的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:60的 GH62多肽和SEQ IDNO:71的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:60的GH62多肽和SEQID NO:72的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:60的GH62多肽和SEQ ID NO:73的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:60的GH62多肽和SEQ ID NO: 74的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:60的GH62 多肽和SEQ ID NO:75的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:60的GH62多肽和SEQ ID NO:78的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ IDNO:60的GH62多肽和SEQ ID NO:81的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQID NO:60的GH62多肽和SEQ ID NO:84 的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:60的GH62多肽和SEQ ID NO:87的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:60的GH62多肽和SEQ ID NO:88的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:60的GH62多肽和SEQ ID NO:89的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:60的GH62多肽和SEQ ID NO:95的 GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:60的GH62多肽和SEQ ID NO:96的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO: 60的GH62多肽和SEQ ID NO:99的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:60的GH62多肽和SEQ ID NO:102的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:60的GH62多肽和SEQ ID NO:180的GH10 多肽。
在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:66的GH62多肽和SEQ ID NO:70的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:66的 GH62多肽和SEQ IDNO:71的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:66的GH62多肽和SEQID NO:72的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:66的GH62多肽和SEQ ID NO:73的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:66的GH62多肽和SEQ ID NO: 74的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:66的GH62 多肽和SEQ ID NO:75的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:66的GH62多肽和SEQ ID NO:78的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ IDNO:66的GH62多肽和SEQ ID NO:81的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQID NO:66的GH62多肽和SEQ ID NO:84 的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:66的GH62多肽和SEQ ID NO:87的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:66的GH62多肽和SEQ ID NO:88的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:66的GH62多肽和SEQ ID NO:89的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:66的GH62多肽和SEQ ID NO:95的 GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:66的GH62多肽和SEQ ID NO:96的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO: 66的GH62多肽和SEQ ID NO:99的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:66的GH62多肽和SEQ ID NO:102的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:66的GH62多肽和SEQ ID NO:180的GH10 多肽。
在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:105的GH62多肽和SEQ ID NO:70的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:105的 GH62多肽和SEQID NO:71的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:105的GH62多肽和SEQ ID NO:72的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:105的GH62多肽和SEQ ID NO:73的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:105的GH62多肽和SEQ ID NO: 74的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:105的GH62 多肽和SEQ ID NO:75的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQID NO:105的GH62多肽和SEQ ID NO:78的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:105的GH62多肽和SEQ ID NO:81的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:105的GH62多肽和SEQ ID NO: 84的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:105的GH62 多肽和SEQ ID NO:87的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:105的GH62多肽和SEQ ID NO:88的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:105的GH62多肽和SEQ ID NO:89的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:105的GH62多肽和SEQ ID NO: 95的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:105的GH62 多肽和SEQ ID NO:96的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:105的GH62多肽和SEQ ID NO:99的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:105的GH62多肽和SEQ ID NO:102的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:105的GH62多肽和SEQID NO: 180的GH10多肽。
在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:108的GH62多肽和SEQ ID NO:70的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:108的 GH62多肽和SEQID NO:71的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:108的GH62多肽和SEQ ID NO:72的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:108的GH62多肽和SEQ ID NO:73的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:108的GH62多肽和SEQ ID NO: 74的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:108的GH62 多肽和SEQ ID NO:75的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQID NO:108的GH62多肽和SEQ ID NO:78的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:108的GH62多肽和SEQ ID NO:81的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:108的GH62多肽和SEQ ID NO: 84的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:108的GH62 多肽和SEQ ID NO:87的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:108的GH62多肽和SEQ ID NO:88的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:108的GH62多肽和SEQ ID NO:89的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:108的GH62多肽和SEQ ID NO: 95的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:108的GH62 多肽和SEQ ID NO:96的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:108的GH62多肽和SEQ ID NO:99的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:108的GH62多肽和SEQ ID NO:102的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:108的GH62多肽和SEQID NO: 180的GH10多肽。
在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:114的GH62多肽和SEQ ID NO:70的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:114的 GH62多肽和SEQID NO:71的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:114的GH62多肽和SEQ ID NO:72的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:114的GH62多肽和SEQ ID NO:73的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:114的GH62多肽和SEQ ID NO: 74的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:114的GH62 多肽和SEQ ID NO:75的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQID NO:114的GH62多肽和SEQ ID NO:78的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:114的GH62多肽和SEQ ID NO:81的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:114的GH62多肽和SEQ ID NO: 84的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:114的GH62 多肽和SEQ ID NO:87的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:114的GH62多肽和SEQ ID NO:88的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:114的GH62多肽和SEQ ID NO:89的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:114的GH62多肽和SEQ ID NO: 95的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:114的GH62 多肽和SEQ ID NO:96的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:114的GH62多肽和SEQ ID NO:99的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:114的GH62多肽和SEQ ID NO:102的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:114的GH62多肽和SEQID NO: 180的GH10多肽。
在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:120的GH62多肽和SEQ ID NO:70的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:120的 GH62多肽和SEQID NO:71的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:120的GH62多肽和SEQ ID NO:72的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:120的GH62多肽和SEQ ID NO:73的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:120的GH62多肽和SEQ ID NO: 74的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:120的GH62 多肽和SEQ ID NO:75的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQID NO:120的GH62多肽和SEQ ID NO:78的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:120的GH62多肽和SEQ ID NO:81的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:120的GH62多肽和SEQ ID NO: 84的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:120的GH62 多肽和SEQ ID NO:87的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:120的GH62多肽和SEQ ID NO:88的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:120的GH62多肽和SEQ ID NO:89的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:120的GH62多肽和SEQ ID NO: 95的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:120的GH62 多肽和SEQ ID NO:96的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:120的GH62多肽和SEQ ID NO:99的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:120的GH62多肽和SEQ ID NO:102的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:120的GH62多肽和SEQID NO: 180的GH10多肽。
在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:123的GH62多肽和SEQ ID NO:70的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:123的 GH62多肽和SEQID NO:71的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:123的GH62多肽和SEQ ID NO:72的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:123的GH62多肽和SEQ ID NO:73的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:123的GH62多肽和SEQ ID NO: 74的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:123的GH62 多肽和SEQ ID NO:75的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQID NO:123的GH62多肽和SEQ ID NO:78的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:123的GH62多肽和SEQ ID NO:81的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:123的GH62多肽和SEQ ID NO: 84的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:123的GH62 多肽和SEQ ID NO:87的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:123的GH62多肽和SEQ ID NO:88的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:123的GH62多肽和SEQ ID NO:89的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:123的GH62多肽和SEQ ID NO: 95的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:123的GH62 多肽和SEQ ID NO:96的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:123的GH62多肽和SEQ ID NO:99的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:123的GH62多肽和SEQ ID NO:102的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:123的GH62多肽和SEQID NO: 180的GH10多肽。
在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:126的GH62多肽和SEQ ID NO:70的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:126的 GH62多肽和SEQID NO:71的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:126的GH62多肽和SEQ ID NO:72的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:126的GH62多肽和SEQ ID NO:73的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:126的GH62多肽和SEQ ID NO: 74的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:126的GH62 多肽和SEQ ID NO:75的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQID NO:126的GH62多肽和SEQ ID NO:78的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:126的GH62多肽和SEQ ID NO:81的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:126的GH62多肽和SEQ ID NO: 84的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:126的GH62 多肽和SEQ ID NO:87的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:126的GH62多肽和SEQ ID NO:88的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:126的GH62多肽和SEQ ID NO:89的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:126的GH62多肽和SEQ ID NO: 95的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:126的GH62 多肽和SEQ ID NO:96的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:126的GH62多肽和SEQ ID NO:99的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:126的GH62多肽和SEQ ID NO:102的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:126的GH62多肽和SEQID NO: 180的GH10多肽。
在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:132的GH62多肽和SEQ ID NO:70的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:132的 GH62多肽和SEQID NO:71的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:132的GH62多肽和SEQ ID NO:72的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:132的GH62多肽和SEQ ID NO:73的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:132的GH62多肽和SEQ ID NO: 74的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:132的GH62 多肽和SEQ ID NO:75的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQID NO:132的GH62多肽和SEQ ID NO:78的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:132的GH62多肽和SEQ ID NO:81的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:132的GH62多肽和SEQ ID NO: 84的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:132的GH62 多肽和SEQ ID NO:87的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:132的GH62多肽和SEQ ID NO:88的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:132的GH62多肽和SEQ ID NO:89的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:132的GH62多肽和SEQ ID NO: 95的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:132的GH62 多肽和SEQ ID NO:96的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:132的GH62多肽和SEQ ID NO:99的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:132的GH62多肽和SEQ ID NO:102的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:132的GH62多肽和SEQID NO: 180的GH10多肽。
在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:138的GH62多肽和SEQ ID NO:70的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:138的GH62多肽和SEQ IDNO:71的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:138的GH62多肽和SEQID NO:72的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:138的GH62多肽和SEQ ID NO:73的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:138的GH62多肽和SEQ ID NO: 74的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:138的GH62 多肽和SEQ ID NO:75的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:138的GH62多肽和SEQ ID NO:78的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ IDNO:138的GH62多肽和SEQ ID NO:81的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQID NO:138的GH62多肽和SEQ ID NO: 84的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:138的GH62 多肽和SEQ ID NO:87的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:138的GH62多肽和SEQ ID NO:88的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:138的GH62多肽和SEQ ID NO:89的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:138的GH62多肽和SEQ ID NO: 95的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:138的GH62 多肽和SEQ ID NO:96的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:138的GH62多肽和SEQ ID NO:99的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:138的GH62多肽和SEQ ID NO:102的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:138的GH62多肽和SEQ ID NO: 180的GH10多肽。
在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:141的GH62多肽和SEQ ID NO:70的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:141的 GH62多肽和SEQID NO:71的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:141的GH62多肽和SEQ ID NO:72的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:141的GH62多肽和SEQ ID NO:73的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:141的GH62多肽和SEQ ID NO: 74的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:141的GH62 多肽和SEQ ID NO:75的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQID NO:141的GH62多肽和SEQ ID NO:78的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:141的GH62多肽和SEQ ID NO:81的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:141的GH62多肽和SEQ ID NO: 84的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:141的GH62 多肽和SEQ ID NO:87的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:141的GH62多肽和SEQ ID NO:88的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:141的GH62多肽和SEQ ID NO:89的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:141的GH62多肽和SEQ ID NO: 95的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:141的GH62 多肽和SEQ ID NO:96的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:141的GH62多肽和SEQ ID NO:99的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:141的GH62多肽和SEQ ID NO:102的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:141的GH62多肽和SEQID NO: 180的GH10多肽。
在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:147的GH62多肽和SEQ ID NO:70的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:147的 GH62多肽和SEQID NO:71的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:147的GH62多肽和SEQ ID NO:72的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:147的GH62多肽和SEQ ID NO:73的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:147的GH62多肽和SEQ ID NO: 74的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:147的GH62 多肽和SEQ ID NO:75的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQID NO:147的GH62多肽和SEQ ID NO:78的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:147的GH62多肽和SEQ ID NO:81的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:147的GH62多肽和SEQ ID NO: 84的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:147的GH62 多肽和SEQ ID NO:87的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:147的GH62多肽和SEQ ID NO:88的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:147的GH62多肽和SEQ ID NO:89的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:147的GH62多肽和SEQ ID NO: 95的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:147的GH62 多肽和SEQ ID NO:96的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:147的GH62多肽和SEQ ID NO:99的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:147的GH62多肽和SEQ ID NO:102的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:147的GH62多肽和SEQID NO: 180的GH10多肽。
在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:150的GH62多肽和SEQ ID NO:70的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:150的 GH62多肽和SEQID NO:71的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:150的GH62多肽和SEQ ID NO:72的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:150的GH62多肽和SEQ ID NO:73的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:150的GH62多肽和SEQ ID NO: 74的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:150的GH62 多肽和SEQ ID NO:75的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQID NO:150的GH62多肽和SEQ ID NO:78的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:150的GH62多肽和SEQ ID NO:81的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:150的GH62多肽和SEQ ID NO: 84的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:150的GH62 多肽和SEQ ID NO:87的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:150的GH62多肽和SEQ ID NO:88的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:150的GH62多肽和SEQ ID NO:89的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:150的GH62多肽和SEQ ID NO: 95的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:150的GH62 多肽和SEQ ID NO:96的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:150的GH62多肽和SEQ ID NO:99的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:150的GH62多肽和SEQ ID NO:102的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:150的GH62多肽和SEQID NO: 180的GH10多肽。
在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:156的GH62多肽和SEQ ID NO:70的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:156的 GH62多肽和SEQID NO:71的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:156的GH62多肽和SEQ ID NO:72的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:156的GH62多肽和SEQ ID NO:73的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:156的GH62多肽和SEQ ID NO: 74的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:156的GH62 多肽和SEQ ID NO:75的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQID NO:156的GH62多肽和SEQ ID NO:78的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:156的GH62多肽和SEQ ID NO:81的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:156的GH62多肽和SEQ ID NO: 84的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:156的GH62 多肽和SEQ ID NO:87的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:156的GH62多肽和SEQ ID NO:88的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:156的GH62多肽和SEQ ID NO:89的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:156的GH62多肽和SEQ ID NO: 95的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:156的GH62 多肽和SEQ ID NO:96的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:156的GH62多肽和SEQ ID NO:99的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:156的GH62多肽和SEQ ID NO:102的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:156的GH62多肽和SEQID NO: 180的GH10多肽。
在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:159的GH62多肽和SEQ ID NO:70的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:159的 GH62多肽和SEQID NO:71的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:159的GH62多肽和SEQ ID NO:72的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:159的GH62多肽和SEQ ID NO:73的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:159的GH62多肽和SEQ ID NO: 74的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:159的GH62 多肽和SEQ ID NO:75的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQID NO:159的GH62多肽和SEQ ID NO:78的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:159的GH62多肽和SEQ ID NO:81的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:159的GH62多肽和SEQ ID NO: 84的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:159的GH62 多肽和SEQ ID NO:87的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:159的GH62多肽和SEQ ID NO:88的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:159的GH62多肽和SEQ ID NO:89的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:159的GH62多肽和SEQ ID NO: 95的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:159的GH62 多肽和SEQ ID NO:96的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:159的GH62多肽和SEQ ID NO:99的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:159的GH62多肽和SEQ ID NO:102的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:159的GH62多肽和SEQID NO: 180的GH10多肽。
在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:162的GH62多肽和SEQ ID NO:70的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:162的 GH62多肽和SEQID NO:71的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:162的GH62多肽和SEQ ID NO:72的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:162的GH62多肽和SEQ ID NO:73的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:162的GH62多肽和SEQ ID NO: 74的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:162的GH62 多肽和SEQ ID NO:75的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQID NO:162的GH62多肽和SEQ ID NO:78的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:162的GH62多肽和SEQ ID NO:81的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:162的GH62多肽和SEQ ID NO: 84的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:162的GH62 多肽和SEQ ID NO:87的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:162的GH62多肽和SEQ ID NO:88的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:162的GH62多肽和SEQ ID NO:89的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:162的GH62多肽和SEQ ID NO: 95的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:162的GH62 多肽和SEQ ID NO:96的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:162的GH62多肽和SEQ ID NO:99的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:162的GH62多肽和SEQ ID NO:102的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:162的GH62多肽和SEQID NO: 180的GH10多肽。
在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:165的GH62多肽和SEQ ID NO:70的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:165的 GH62多肽和SEQID NO:71的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:165的GH62多肽和SEQ ID NO:72的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:165的GH62多肽和SEQ ID NO:73的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:165的GH62多肽和SEQ ID NO: 74的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:165的GH62 多肽和SEQ ID NO:75的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQID NO:165的GH62多肽和SEQ ID NO:78的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:165的GH62多肽和SEQ ID NO:81的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:165的GH62多肽和SEQ ID NO: 84的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:165的GH62 多肽和SEQ ID NO:87的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:165的GH62多肽和SEQ ID NO:88的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:165的GH62多肽和SEQ ID NO:89的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:165的GH62多肽和SEQ ID NO: 95的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:165的GH62 多肽和SEQ ID NO:96的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:165的GH62多肽和SEQ ID NO:99的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:165的GH62多肽和SEQ ID NO:102的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:165的GH62多肽和SEQID NO: 180的GH10多肽。
在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:168的GH62多肽和SEQ ID NO:70的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:168的 GH62多肽和SEQID NO:71的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:168的GH62多肽和SEQ ID NO:72的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:168的GH62多肽和SEQ ID NO:73的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:168的GH62多肽和SEQ ID NO: 74的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:168的GH62 多肽和SEQ ID NO:75的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQID NO:168的GH62多肽和SEQ ID NO:78的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:168的GH62多肽和SEQ ID NO:81的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:168的GH62多肽和SEQ ID NO: 84的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:168的GH62 多肽和SEQ ID NO:87的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:168的GH62多肽和SEQ ID NO:88的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:168的GH62多肽和SEQ ID NO:89的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:168的GH62多肽和SEQ ID NO: 95的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:168的GH62 多肽和SEQ ID NO:96的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:168的GH62多肽和SEQ ID NO:99的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:168的GH62多肽和SEQ ID NO:102的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:168的GH62多肽和SEQID NO: 180的GH10多肽。
在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:171的GH62多肽和SEQ ID NO:70的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:171的 GH62多肽和SEQID NO:71的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:171的GH62多肽和SEQ ID NO:72的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:171的GH62多肽和SEQ ID NO:73的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:171的GH62多肽和SEQ ID NO: 74的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:171的GH62 多肽和SEQ ID NO:75的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQID NO:171的GH62多肽和SEQ ID NO:78的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:171的GH62多肽和SEQ ID NO:81的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:171的GH62多肽和SEQ ID NO: 84的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:171的GH62 多肽和SEQ ID NO:87的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:171的GH62多肽和SEQ ID NO:88的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:171的GH62多肽和SEQ ID NO:89的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:171的GH62多肽和SEQ ID NO: 95的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:171的GH62 多肽和SEQ ID NO:96的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:171的GH62多肽和SEQ ID NO:99的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:171的GH62多肽和SEQ ID NO:102的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:171的GH62多肽和SEQID NO: 180的GH10多肽。
在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:174的GH62多肽和SEQ ID NO:70的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:174的 GH62多肽和SEQID NO:71的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:174的GH62多肽和SEQ ID NO:72的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:174的GH62多肽和SEQ ID NO:73的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:174的GH62多肽和SEQ ID NO: 74的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:174的GH62 多肽和SEQ ID NO:75的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQID NO:174的GH62多肽和SEQ ID NO:78的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:174的GH62多肽和SEQ ID NO:81的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:174的GH62多肽和SEQ ID NO: 84的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:174的GH62 多肽和SEQ ID NO:87的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:174的GH62多肽和SEQ ID NO:88的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:174的GH62多肽和SEQ ID NO:89的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:174的GH62多肽和SEQ ID NO: 95的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:174的GH62 多肽和SEQ ID NO:96的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:174的GH62多肽和SEQ ID NO:99的GH11多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:174的GH62多肽和SEQ ID NO:102的GH10多肽。在一个实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:174的GH62多肽和SEQID NO: 180的GH10多肽。
在一个另外优选的实施例中，本发明的组合物包括一种或多种选自由SEQ ID NO:71、SEQ ID NO:72和SEQ ID NO:180组成的列表的GH10多肽以及一种或多种选自以下列表的GH62多肽，该列表由以下各项组成：SEQ ID NO:9、SEQ ID NO: 21、SEQ ID NO:24、SEQ IDNO:27、SEQ ID NO:45、SEQ ID NO:51、SEQ ID NO: 57、SEQ ID NO:69、SEQ ID NO:105、SEQID NO:123、SEQ ID NO:129、SEQ ID NO:138、SEQ ID NO:147、SEQ ID NO:153、SEQ ID NO:156、SEQ ID NO:159、 SEQ ID NO:162、SEQ ID NO:165、SEQ ID NO:171和SEQ ID NO:174。
在一个另外优选的实施例中，本发明的动物饲料或动物饲料添加剂包括一种或多种选自由SEQ ID NO:71、SEQ ID NO:72和SEQ ID NO:180组成的列表的GH10 多肽以及一种或多种选自以下列表的GH62多肽，该列表由以下各项组成：SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:21、SEQ ID NO:24、SEQ ID NO:27、SEQ ID NO:45、SEQ ID NO:51、SEQ ID NO:57、SEQ ID NO:69、SEQ ID NO:105、SEQ ID NO:123、SEQ ID NO:129、SEQ ID NO:138、SEQ ID NO:147、SEQID NO:153、SEQ ID NO:156、 SEQ ID NO:159、SEQ ID NO:162、SEQ ID NO:165、SEQ ID NO:171和SEQ ID NO: 174。在一个实施例中，将GH10多肽以0.01-200mg酶蛋白/kg动物饲料进行给予，并且将GH62多肽以0.01-200mg酶蛋白/kg动物饲料进行给予。
在一个另外优选的实施例中，本发明的组合物包括SEQ ID NO:73的GH11多肽和一种或多种选自以下列表的GH62多肽，该列表由以下各项组成：SEQ ID NO: 24、SEQ ID NO:33、SEQ ID NO:39、SEQ ID NO:45、SEQ ID NO:51、SEQ ID NO: 69、SEQ ID NO:105、SEQ IDNO:111、SEQ ID NO:117、SEQ ID NO:123、SEQ ID NO:129、SEQ ID NO:138、SEQ ID NO:144、SEQ ID NO:147、SEQ ID NO:153、 SEQ ID NO:156、SEQ ID NO:159、SEQ ID NO:162、SEQ IDNO:165、SEQ ID NO: 171和SEQ ID NO:174。
在一个另外优选的实施例中，本发明的动物饲料或动物饲料添加剂包括SEQ IDNO:73的GH11多肽和一种或多种选自以下列表的GH62多肽，该列表由以下各项组成：SEQ IDNO:24、SEQ ID NO:33、SEQ ID NO:39、SEQ ID NO:45、SEQ ID NO:51、SEQ ID NO:69、SEQ IDNO:105、SEQ ID NO:111、SEQ ID NO:117、 SEQ ID NO:123、SEQ ID NO:129、SEQ ID NO:138、SEQ ID NO:144、SEQ ID NO: 147、SEQ ID NO:153、SEQ ID NO:156、SEQ ID NO:159、SEQ ID NO:162、SEQ ID NO:165、SEQ ID NO:171和SEQ ID NO:174。在一个实施例中，将GH10多肽以0.01-200mg酶蛋白/kg动物饲料进行给予，并且将GH62多肽以0.01-200mg酶蛋白/kg动物饲料进行给予。
在一个另外优选的实施例中，本发明的组合物包括一种或多种选自由SEQ ID NO:75、SEQ ID NO:78、SEQ ID NO:81、SEQ ID NO:87、SEQ ID NO:88、SEQ ID NO:96和SEQ IDNO:99组成的列表的GH11多肽以及一种或多种选自以下列表的 GH62多肽，该列表由以下各项组成：SEQ ID NO:21、SEQ ID NO:24、SEQ ID NO: 27、SEQ ID NO:33、SEQ ID NO:39、SEQID NO:45、SEQ ID NO:51、SEQ ID NO: 57、SEQ ID NO:63、SEQ ID NO:69、SEQ ID NO:105、SEQ ID NO:111、SEQ ID NO: 117、SEQ ID NO:123、SEQ ID NO:129、SEQ ID NO:138、SEQ IDNO:144、SEQ ID NO:147、SEQ ID NO:153、SEQ ID NO:156、SEQ ID NO:159、SEQ ID NO:162、SEQ ID NO:165、SEQ ID NO:171和SEQ ID NO:174。
在一个另外优选的实施例中，本发明的动物饲料或动物饲料添加剂包括一种或多种选自由SEQ ID NO:75、SEQ ID NO:78、SEQ ID NO:81、SEQ ID NO:87、SEQ ID NO:88、SEQID NO:96和SEQ ID NO:99组成的列表的GH11多肽以及一种或多种选自以下列表的GH62多肽，该列表由以下各项组成：SEQ ID NO:21、SEQ ID NO:24、SEQ ID NO:27、SEQ ID NO:33、SEQ ID NO:39、SEQ ID NO:45、SEQ ID NO:51、SEQ ID NO:57、SEQ ID NO:63、SEQ ID NO:69、SEQ ID NO:105、SEQ ID NO:111、SEQ ID NO:117、SEQ ID NO:123、SEQ ID NO:129、SEQID NO:138、 SEQ ID NO:144、SEQ ID NO:147、SEQ ID NO:153、SEQ ID NO:156、SEQ ID NO:159、SEQ ID NO:162、SEQ ID NO:165、SEQ ID NO:171和SEQ ID NO:174。在一个实施例中，将GH10多肽以0.01-200mg酶蛋白/kg动物饲料进行给予，并且将 GH62多肽以0.01-200mg酶蛋白/kg动物饲料进行给予。
在一个另外的实施例中，具有木聚糖酶活性的GH10或GH11多肽和如以上所列出的具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽的具体组合溶解至少2.0％，例如至少2.5％、至少3.0％、至少3.5％、至少4.0％、至少4.5％、至少5.0％、至少5.5％、或至少6.0％的来自DFDSM的木糖，并且比GH62多肽不存在时，GH10或GH11 多肽能从DFDSM溶解的木糖多至少2倍。
在一个另外的实施例中，具有木聚糖酶活性的GH10或GH11多肽和如以上所列出的具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽的具体组合溶解至少2.0％，例如至少2.5％、至少3.0％、至少3.5％、至少4.0％、至少4.5％、至少5.0％、至少5.5％、或至少6.0％的来自DFDSM的木糖，并且比GH62多肽不存在时，GH10或GH11 多肽能从DFDSM溶解的木糖多至少2.25倍。
在一个另外的实施例中，具有木聚糖酶活性的GH10或GH11多肽和如以上所列出的具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽的具体组合溶解至少2.0％，例如至少2.5％、至少3.0％、至少3.5％、至少4.0％、至少4.5％、至少5.0％、至少5.5％、或至少6.0％的来自DFDSM的木糖，并且比GH62多肽不存在时，GH10或GH11 多肽能从DFDSM溶解的木糖多至少2.5倍。
在一个另外的实施例中，具有木聚糖酶活性的GH10或GH11多肽和如以上所列出的具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽的具体组合溶解至少2.0％，例如至少2.5％、至少3.0％、至少3.5％、至少4.0％、至少4.5％、至少5.0％、至少5.5％、或至少6.0％的来自DFDSM的木糖，并且比GH62多肽不存在时，GH10或GH11 多肽能从DFDSM溶解的木糖多至少2.75倍。
在一个另外的实施例中，具有木聚糖酶活性的GH10或GH11多肽和如以上所列出的具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽的具体组合溶解至少2.0％，例如至少2.5％、至少3.0％、至少3.5％、至少4.0％、至少4.5％、至少5.0％、至少5.5％、或至少6.0％的来自DFDSM的木糖，并且比GH62多肽不存在时，GH10或GH11 多肽能从DFDSM溶解的木糖多至少3倍。
在一个另外的实施例中，具有木聚糖酶活性的GH10或GH11多肽和如以上所列出的具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽的具体组合溶解至少2.0％，例如至少2.5％、至少3.0％、至少3.5％、至少4.0％、至少4.5％、至少5.0％、至少5.5％、或至少6.0％的来自DFDSM的木糖，并且比GH62多肽不存在时，GH10或GH11 多肽能从DFDSM溶解的木糖多至少3.25倍。
在一个另外的实施例中，具有木聚糖酶活性的GH10或GH11多肽和如以上所列出的具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽的具体组合溶解至少2.0％，例如至少2.5％、至少3.0％、至少3.5％、至少4.0％、至少4.5％、至少5.0％、至少5.5％、或至少6.0％的来自DFDSM的木糖，并且比GH62多肽不存在时，GH10或GH11 多肽能从DFDSM溶解的木糖多至少3.5倍。
在一个另外的实施例中，具有木聚糖酶活性的GH10或GH11多肽和如以上所列出的具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽的具体组合溶解至少2.0％，例如至少2.5％、至少3.0％、至少3.5％、至少4.0％、至少4.5％、至少5.0％、至少5.5％、或至少6.0％的来自DFDSM的木糖，并且比GH62多肽不存在时，GH10或GH11 多肽能从DFDSM溶解的木糖多至少3.75倍。
在一个另外的实施例中，具有木聚糖酶活性的GH10或GH11多肽和如以上所列出的具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽的具体组合溶解至少2.0％，例如至少2.5％、至少3.0％、至少3.5％、至少4.0％、至少4.5％、至少5.0％、至少5.5％、或至少6.0％的来自DFDSM的木糖，并且比GH62多肽不存在时，GH10或GH11 多肽能从DFDSM溶解的木糖多至少4倍。
具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的多肽
在第二方面，本发明涉及具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且与SEQ ID NO:11的成熟多肽具有至少85％，例如至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少 90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少 97％、至少98％、至少99％的序列一致性的多肽，这些多肽具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性。在一个实施例中，这些多肽与SEQID NO:11的成熟多肽相差多达45个氨基酸，例如1和45个之间的氨基酸，例如1-40、1-35、1-30、1-25、1-20、1-15、 1-10或1-5个氨基酸，或1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、 34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44或45个氨基酸。
在第二方面的延续中，本发明进一步涉及与SEQ ID NO:12具有至少85％的序列一致性的多肽，这些多肽具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:12具有至少86％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:12具有至少87％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:12具有至少88％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:12具有至少89％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:12具有至少90％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:12具有至少91％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:12具有至少92％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:12具有至少93％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:12具有至少94％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ IDNO:12具有至少95％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:12 具有至少96％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:12具有至少 97％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:12具有至少98％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:12具有至少99％的序列一致性。
在一个实施例中，这些多肽与SEQ ID NO:12相差多达45个氨基酸，例如1 与50个之间的氨基酸，如1-40、1-35、1-30、1-25、1-20、1-15、1-10或1-5个氨基酸，或1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、 19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、 37、38、39、40、41、42、43、44或45个氨基酸。在一个实施例中，该多肽具有SEQ ID NO:12的多肽的至少60％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、或至少100％的活性。
在一个实施例中，该多肽优选地包括SEQ ID NO:11和/或SEQ ID NO:12的氨基酸序列或其等位基因变体，或由其组成；包括SEQ ID NO:11和/或SEQ ID NO:12 的氨基酸序列和N-末端和/或C-末端His-标签和/或HQ-标签；或是其片段，该片段具有阿拉伯呋喃糖苷酶活并且具有该成熟多肽的至少90％，如至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:12的成熟多肽或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:11的氨基酸1至303或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:12的氨基酸1至303或由其组成。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在第二方面的延续中，本发明涉及具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的多肽，该多肽由多核苷酸编码，该多核苷酸在高严格条件、或非常高严格条件下，与(i)SEQ ID NO:10的成熟多肽编码序列、或(ii)(i)的全长补体杂交(萨姆布鲁克(Sambrook) 等人，1989，分子克隆，实验室手册(Molecular Cloning,A Laboratory Manual)，第二版，冷泉港(ColdSpring Harbor)，纽约)。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在第二方面的延续中，本发明涉及由以下多核苷酸编码的具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的多肽，该多核苷酸与SEQ ID NO:10的成熟多肽编码序列或其cDNA序列具有至少85％，例如至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列一致性。在一个另外的实施例中，该多肽已经被分离。
在第二方面的延续中，本发明涉及具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的SEQ ID NO: 12的变体，这些变体包括在一个或多个(例如，若干个)位置处的一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，在SEQ ID NO:12中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合的位置的数目不超过45，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、 20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、 38、39、40、41、42、43、44或45。在一个实施例中，在SEQ ID NO:12中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合的位置的数目不超过10，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10 个。在另一个实施例中，在SEQ ID NO:12中的取代、缺失和/或插入的数目不超过 10，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在一个另外的实施例中，SEQ ID NO: 12中取代，优选保守取代的数目不超过10，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或 10个。在一个实施例中，该变体具有SEQ ID NO:12的多肽的至少60％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、或至少100％的活性。
氨基酸改变可以具有次要性质，即不显著影响蛋白质的折叠和/或活性的保守氨基酸取代或插入；典型地1-30个氨基酸的小缺失；小的氨基或羧基末端延伸，如氨基末端蛋氨酸残基；至多20-25个残基的小接头肽；或通过改变净电荷或另一功能来促进纯化的小延伸，如多组氨酸序列(poly-histidine tract)、抗原性表位或结合结构域。
保守取代的实例是在下组的范围内：碱性氨基酸(精氨酸、赖氨酸及组氨酸)、酸性氨基酸(谷氨酸和天冬氨酸)、极性氨基酸(谷氨酰胺和天冬酰胺)、疏水性氨基酸(亮氨酸、异亮氨酸及缬氨酸)、芳香族氨基酸(苯丙氨酸、色氨酸及酪氨酸)及小氨基酸(甘氨酸、丙氨酸、丝氨酸、苏氨酸及甲硫氨酸)。一般不会改变比活性的氨基酸取代是本领域已知的并且例如由H.诺伊拉特(Neurath)和R.L.希尔(Hill)，1979，在蛋白质(The Proteins)，学术出版社(Academic Press)，纽约中描述。常见取代是Ala/Ser、Val/Ile、Asp/Glu、Thr/Ser、Ala/Gly、Ala/Thr、Ser/Asn、 Ala/Val、Ser/Gly、Tyr/Phe、Ala/Pro、Lys/Arg、Asp/Asn、Leu/Ile、Leu/Val、Ala/Glu 以及Asp/Gly。
可替代地，氨基酸改变具有这样一种性质：改变多肽的物理化学特性。例如，氨基酸改变可以提高多肽的热稳定性、改变底物特异性、改变最适pH，等等。
可以根据本领域中已知的程序，如定点诱变或丙氨酸扫描诱变(坎宁汉(Cunningham)和威尔斯(Wells)，1989，科学(Science)244:1081-1085)来鉴定多肽中的必需氨基酸。在后一项技术中，在该分子中的每个残基处引入单个丙氨酸突变，并且对所得突变体分子的活性进行测试以鉴定对于该分子的阿拉伯呋喃糖苷酶活性至关重要的氨基酸残基。还见希尔顿(Hilton)等人，1996，生物化学杂志(J.Biol.Chem.)271:4699-4708。也可结合假定接触位点氨基酸的突变，如通过以下技术例如核磁共振、结晶学、电子衍射、或光亲和标记进行确定的对结构进行物理学分析，从而确定酶的活性位点或其他生物学相互作用。参见，例如德沃斯 (de Vos)等人，1992，科学(Science)255:306-312；史密斯(Smith)等人，1992，分子生物学杂志(J.Mol.Biol.)224:899-904；乌乐达维尔(Wlodaver)等人，1992，欧洲生物化学学会联盟通讯(FEBS Lett.)309:59-64。还可以从与相关多肽的比对来推断鉴定必需氨基酸。
可以做出单个或多个氨基酸取代、缺失和/或插入并且使用已知的诱变、重组和/或改组方法进行测试，随后进行有关筛选程序，如由里德哈尔-奥尔森 (Reidhaar-Olson)和萨奥尔(Sauer)，1988，科学(Science)241:53-57；博维(Bowie) 和萨奥尔，1989，美国科学院院刊(Proc.Natl.Acad.Sci.USA)86:2152-2156；WO 95/17413；或WO 95/22625所披露的那些。可以使用的其他方法包括易错PCR、噬菌体展示(例如，罗曼(Lowman)等人，1991，生物化学(Biochemistry) 30:10832-10837；美国专利号5,223,409；WO 92/06204)和区域定向诱变(德比舍尔(Derbyshire)等人，1986，基因(Gene)46:145；Ner等人，1988，DNA 7:127)。
可以结合诱变/改组方法与高通量自动化筛选方法来检测由宿主细胞表达的克隆的、诱变的多肽的活性(内斯(Ness)等人，1999，自然生物技术(Nature Biotechnology)17:893-896)。编码活性多肽的诱变的DNA分子可以回收自宿主细胞，并且使用本领域的标准方法对其进行迅速测序。这些方法允许迅速确定多肽中单个氨基酸残基的重要性。
多肽可以是杂合多肽，其中一个多肽的区域融合在另一多肽的区域的N末端或 C末端。
多肽还可以是融合多肽或可切割的融合多肽，其中另一多肽融合在本发明的多肽的N-末端或C-末端。通过将编码另一种多肽的多核苷酸与本发明多核苷酸融合而产生融合多肽。用于产生融合多肽的技术在本领域是已知的，并且包括连接编码多肽的编码序列，这样使得它们在框内并且使得融合多肽的表达处于相同的一个或多个启动子和终止子的控制下。融合多肽还可以使用内含肽技术来构建，其中融合多肽在翻译后产生(库珀(Cooper)等人，1993，欧洲分子生物学学会杂志(EMBO J.)12:2575-2583；道森(Dawson)等人，1994，科学(Science)266:776-779)。
融合多肽可以在两种多肽之间进一步包括切割位点。在融合蛋白分泌之时，该位点被切割，从而释放出这两种多肽。切割位点的实例包括但不限于在如下文献中披露的位点：马丁(Martin)等人，2003，工业微生物学生物技术杂志(i)3:568-576；蒂娜(Svetina)等人，2000，生物技术杂志(J.Biotechnol.)76:245-251；拉斯马森-威尔逊(Rasmussen-Wilson)等人，1997，应用与环境微生物学(Appl.Environ. Microbiol.)63:3488-3493；沃德(Ward)等人，1995，生物技术(Biotechnology) 13:498-503；以及孔特雷拉斯(Contreras)等人，1991，生物技术9:378-381；伊顿 (Eaton)等人，1986，生物化学(Biochemistry)25:505-512；Collins-Racie等人， 1995，生物技术13:982-987；卡特(Carter)等人，1989，蛋白质：结构、功能和遗传学(Proteins:Structure,Function,andGenetics)6:240-248；和史蒂文斯 (Stevens)，2003，世界药物发现(Drug DiscoveryWorld)4:35-48。
碳水化合物分子通常在翻译后修饰过程中附接至来自真菌来源的多肽。为了辅助质谱分析，该多肽可以用内切糖苷酶孵育以使各N-连接的位置去糖基化。对于每个去糖基化的N-连接位点，一个N-乙酰己糖胺仍然在该蛋白质主链上。
在一个实施例中，第二方面的多肽包括基序
[H/Y][L/M]F[F/S][A/C/H/S/T/V][A/D/G/N/R]D[D/E/N]G(SEQ ID NO:1)，优选基序[H/Y]LF[F/S][A/S/V][A/D/G]DNG(SEQ ID NO:2)，更优选基序
YLFF[A/V][A/G]DNG(SEQ ID NO:3)，或甚至更优选基序YLFFAGDNG(SEQ ID NO:4)。
在第三方面，本发明涉及具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且与SEQ ID NO:23的成熟多肽具有至少97.6％，例如至少97.9％、至少98.2％、至少98.5％、至少98.8％、至少91.1％、至少99.4％、至少99.7％的序列一致性的多肽，这些多肽具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性。在一个实施例中，这些多肽与SEQ ID NO:23的成熟多肽相差多达7个氨基酸，例如1与7个之间的氨基酸，如1、2、3、4、5、6或7个氨基酸。
在第三方面的延续中，本发明进一步涉及与SEQ ID NO:24具有至少97.6％的序列一致性的多肽，这些多肽具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性。在一个实施例中，该多肽与SEQ IDNO:24具有至少97.9％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:24具有至少98.2％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:24 具有至少98.5％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:24具有至少98.8％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:24具有至少99.1％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:24具有至少99.4％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:24具有至少99.7％的序列一致性。
在一个实施例中，这些多肽与SEQ ID NO:24相差多达7个氨基酸，例如1与 7个之间的氨基酸，如1、2、3、4、5、6或7个氨基酸。在一个实施例中，该多肽具有SEQ ID NO:24的多肽的至少60％、至少70％、至少75％、至少80％、至少 85％、至少90％、至少95％、或至少100％的活性。
在一个实施例中，该多肽优选地包括SEQ ID NO:23和/或SEQ ID NO:24的氨基酸序列或其等位基因变体，或由其组成；包括SEQ ID NO:23和/或SEQ ID NO:24 的氨基酸序列和N-末端和/或C-末端His-标签和/或HQ-标签；或是其片段，该片段具有阿拉伯呋喃糖苷酶活并且具有该成熟多肽的至少90％，如至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:24的成熟多肽或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:23的氨基酸1至302或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:24的氨基酸1至302或由其组成。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在第三方面的延续中，本发明涉及具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的多肽，该多肽由以下多核苷酸编码，该多核苷酸在非常高严格条件下与(i)SEQ ID NO:22的成熟多肽编码序列或(ii)(i)的全长补体杂交。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在第三方面的延续中，本发明涉及由以下多核苷酸编码的具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的多肽，该多核苷酸与SEQ ID NO:22的成熟多肽编码序列或其cDNA序列具有至少97.6％，例如至少97.9％、至少98.2％、至少98.5％、至少98.8％、至少 91.1％、至少99.4％、至少99.7％、或100％的序列一致性。在一个另外的实施例中，该多肽已经被分离。
在第三方面的延续中，本发明涉及具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的SEQ ID NO: 24的变体，这些变体包括在一个或多个(例如，若干个)位置处的一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，在SEQ ID NO:24中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合的位置的数目不超过7，例如1、2、3、4、5、6或7个。在另一个实施例中，在SEQ ID NO:24中的取代、缺失和/或插入的数目不超过7，例如1、2、3、4、5、6或7个。在一个另外的实施例中，SEQ ID NO:24中取代，优选保守取代的数目不超过7，例如1、2、3、4、 5、6或7个。在一个实施例中，该变体具有SEQ ID NO:24的多肽的至少60％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、或至少100％的活性。在本发明的第二方面中描述了氨基酸变化和保守取代的实例。
在一个实施例中，第三方面的多肽包括基序
[H/Y][L/M]F[F/S][A/C/H/S/T/V][A/D/G/N/R]D[D/E/N]G(SEQ ID NO:1)，优选基序[H/Y]LF[F/S][A/S/V][A/D/G]DNG(SEQ ID NO:2)，更优选基序
YLFF[A/V][A/G]DNG(SEQ ID NO:3)，或甚至更优选基序YLFFAGDNG(SEQ ID NO:4)。
在第四方面，本发明涉及具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且与SEQ ID NO:26的成熟多肽具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少 89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少 96％、至少97％、至少98％、至少99％的序列一致性的多肽，这些多肽具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性。在一个实施例中，这些多肽与SEQ ID NO:26的成熟多肽相差多达50个氨基酸，例如1与50个之间的氨基酸，如1-45、1-40、1-35、1-30、1-25、 1-20、1-15、1-10或1-5个氨基酸，或1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、 13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、 31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、 49或50个氨基酸。
在第四方面的延续中，本发明进一步涉及与SEQ ID NO:27具有至少80％的序列一致性的多肽，这些多肽具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:27具有至少85％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:27具有至少86％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:27具有至少87％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:27具有至少88％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:27具有至少89％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:27具有至少90％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:27具有至少91％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:27具有至少92％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:27具有至少93％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ IDNO:27具有至少94％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:27 具有至少95％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:27具有至少 96％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:27具有至少97％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:27具有至少98％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ IDNO:27具有至少99％的序列一致性。
在一个实施例中，这些多肽与SEQ ID NO:27相差多达50个氨基酸，例如1 与50个之间的氨基酸，如1-45、1-40、1-35、1-30、1-25、1-20、1-15、1-10或1-5 个氨基酸，或1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、 18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、 36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49或50个氨基酸。在一个实施例中，该多肽具有SEQ ID NO:27的多肽的至少60％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、或至少100％的活性。
在一个实施例中，该多肽优选地包括SEQ ID NO:26和/或SEQ ID NO:27的氨基酸序列或其等位基因变体，或由其组成；包括SEQ ID NO:26和/或SEQ ID NO:27 的氨基酸序列和N-末端和/或C-末端His-标签和/或HQ-标签；或是其片段，该片段具有阿拉伯呋喃糖苷酶活并且具有该成熟多肽的至少90％，如至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:27的成熟多肽或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:26的氨基酸1至309或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:27的氨基酸1至309或由其组成。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在第三方面的延续中，本发明涉及具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的多肽，该多肽由以下多核苷酸编码，该多核苷酸在高严格条件或非常高严格条件下与(i)SEQ ID NO:25的成熟多肽编码序列或(ii)(i)的全长补体杂交。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在第四方面的延续中，本发明涉及由以下多核苷酸编码的具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的多肽，该多核苷酸与SEQ ID NO:25的成熟多肽编码序列或其cDNA序列具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列一致性。在一个另外的实施例中，该多肽已经被分离。
在第四方面的延续中，本发明涉及具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的SEQ ID NO: 27的变体，这些变体包括在一个或多个(例如，若干个)位置处的一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，在SEQ ID NO:27中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合的位置的数目不超过50，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、 20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、 38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49或50个。在一个实施例中，在SEQ ID NO:27中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和 /或一个或多个氨基酸插入或其任何组合的位置的数目不超过10，例如1、2、3、4、 5、6、7、8、9或10个。在另一个实施例中，在SEQ ID NO:27中的取代、缺失和 /或插入的数目不超过10，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在一个另外的实施例中，SEQ ID NO:27中取代，优选保守取代的数目不超过10，例如1、2、 3、4、5、6、7、8、9或10个。在一个实施例中，该变体具有SEQ ID NO:27的多肽的至少60％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、或至少100％的活性。在本发明的第二方面中描述了氨基酸变化和保守取代的实例。
在一个实施例中，第四方面的多肽包括基序
[H/Y][L/M]F[F/S][A/C/H/S/T/V][A/D/G/N/R]D[D/E/N]G(SEQ ID NO:1)，优选基序[H/Y]LF[F/S][A/S/V][A/D/G]DNG(SEQ ID NO:2)，更优选基序
YLFF[A/V][A/G]DNG(SEQ ID NO:3)，或甚至更优选基序YLFFAGDNG(SEQ ID NO:4)。
在第五方面，本发明涉及具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且与SEQ ID NO:29的成熟多肽具有至少90％，例如至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少 95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％的序列一致性的多肽，这些多肽具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性。在一个实施例中，这些多肽与SEQ ID NO:29的成熟多肽相差多达43个氨基酸，例如1和43个之间的氨基酸，例如1-40、1-35、1-30、 1-25、1-20、1-15、1-10或1-5个氨基酸，或1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、 12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42或43个氨基酸。
在第五方面的延续中，本发明进一步涉及与SEQ ID NO:30具有至少90％的序列一致性的多肽，这些多肽具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:30具有至少91％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:30具有至少92％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:30具有至少93％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:30具有至少94％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:30具有至少95％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:30具有至少96％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:30具有至少97％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:30具有至少98％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:30具有至少99％的序列一致性。
在一个实施例中，这些多肽与SEQ ID NO:30相差多达43个氨基酸，如1-40、 1-35、1-30、1-25、1-20、1-15、1-10或1-5个氨基酸，或1、2、3、4、5、6、7、8、 9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、 27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42或43个氨基酸。在一个实施例中，这些多肽与SEQ ID NO:33相差多达43个氨基酸，如1-40、 1-35、1-30、1-25、1-20、1-15、1-10或1-5个氨基酸，或1、2、3、4、5、6、7、8、 9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、 27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42或43个氨基酸。在一个实施例中，该多肽具有SEQ ID NO:30的多肽的至少60％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、或至少100％的活性。
在一个实施例中，该多肽优选地包括SEQ ID NO:29和/或SEQ ID NO:30的氨基酸序列或其等位基因变体，或由其组成；包括SEQ ID NO:29和/或SEQ ID NO:30 的氨基酸序列和N-末端和/或C-末端His-标签和/或HQ-标签，如SEQ ID NO:33；或是其片段，该片段具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且具有该成熟多肽的至少90％，如至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:29的成熟多肽或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:32的成熟多肽或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:29的氨基酸1至438或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:30的氨基酸1至438或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:32的氨基酸1至446或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:33的氨基酸1至446或由其组成。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在第五方面的延续中，本发明涉及具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的多肽，该多肽由以下多核苷酸编码，该多核苷酸在高严格条件或非常高严格条件下与(i)SEQ ID NO:28的成熟多肽编码序列或(ii)(i)的全长补体杂交。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在第五方面的延续中，本发明涉及由以下多核苷酸编码的具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的多肽，该多核苷酸与SEQ ID NO:28的成熟多肽编码序列或其cDNA序列具有至少90％，例如至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列一致性。在一个另外的实施例中，该多肽已经被分离。
在第五方面的延续中，本发明涉及具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的SEQ ID NO: 30的变体，这些变体包括在一个或多个(例如，若干个)位置处的一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，在SEQ ID NO:30中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合的位置的数目不超过45，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、 20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、 38、39、40、41、42、43、44或45个。在一个实施例中，在SEQ ID NO:30中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合的位置的数目不超过10，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或 10个。在另一个实施例中，在SEQ ID NO:30中的取代、缺失和/或插入的数目不超过10，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在一个另外的实施例中，SEQ ID NO:30中取代，优选保守取代的数目不超过10，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在一个实施例中，该变体具有SEQ ID NO:30的多肽的至少60％、至少 70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、或至少100％的活性。在本发明的第二方面中描述了氨基酸变化和保守取代的实例。
在一个实施例中，第五方面的多肽包括基序
[H/Y][L/M]F[F/S][A/C/H/S/T/V][A/D/G/N/R]D[D/E/N]G(SEQ ID NO:1)，优选基序[H/Y]LF[F/S][A/S/V][A/D/G]DNG(SEQ ID NO:2)，更优选基序
YLFF[A/V][A/G]DNG(SEQ ID NO:3)，或甚至更优选基序YLFFAGDNG(SEQ ID NO:4)。
在第六方面，本发明涉及具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且与SEQ ID NO:35的成熟多肽具有至少92％，例如至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少 97％、至少98％、至少99％的序列一致性的多肽，这些多肽具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性。在一个实施例中，这些多肽与SEQ ID NO:35的成熟多肽相差多达34个氨基酸，例如1和34个之间的氨基酸，例如1-30、1-25、1-20、1-15、1-10或1-5个氨基酸，或1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、 19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33或34个氨基酸。
在一个实施例中，这些多肽与SEQ ID NO:36的成熟多肽相差多达34个氨基酸，例如1和34个之间的氨基酸，例如1-30、1-25、1-20、1-15、1-10或1-5个氨基酸，或1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、 19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33或34个氨基酸。在一个实施例中，这些多肽与SEQ ID NO:39的成熟多肽相差多达34个氨基酸，例如1和34个之间的氨基酸，例如1-30、1-25、1-20、1-15、1-10或1-5个氨基酸，或1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、 21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33或34个氨基酸。在一个实施例中，该多肽具有SEQ ID NO:36的多肽的至少60％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、或至少100％的活性。
在一个实施例中，该多肽优选地包括SEQ ID NO:35和/或SEQ ID NO:36的氨基酸序列或其等位基因变体，或由其组成；包括SEQ ID NO:35和/或SEQ ID NO:36 的氨基酸序列和N-末端和/或C-末端His-标签和/或HQ-标签，如SEQ ID NO:39；或是其片段，该片段具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且具有该成熟多肽的至少90％，如至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:35的成熟多肽或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:38的成熟多肽或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:35的氨基酸1至438或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:36的氨基酸1至438或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:38的氨基酸1至446或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:39的氨基酸1至446或由其组成。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在第六方面的延续中，本发明涉及具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的多肽，该多肽由以下多核苷酸编码，该多核苷酸在高严格条件或非常高严格条件下与(i)SEQ ID NO:34的成熟多肽编码序列或(ii)(i)的全长补体杂交。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在第六方面的延续中，本发明涉及由以下多核苷酸编码的具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的多肽，该多核苷酸与SEQ ID NO:34的成熟多肽编码序列或其cDNA序列具有至少92％，例如至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列一致性。在一个另外的实施例中，该多肽已经被分离。
在第六方面的延续中，本发明涉及具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的SEQ ID NO: 36的变体，这些变体包括在一个或多个(例如，若干个)位置处的一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，在SEQ ID NO:36中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合的位置的数目不超过34，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、 20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33或34个。在一个实施例中，在SEQ ID NO:36中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合的位置的数目不超过10，例如1、 2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在另一个实施例中，在SEQ ID NO:36中的取代、缺失和/或插入的数目不超过10，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在一个另外的实施例中，SEQ ID NO:36中取代，优选保守取代的数目不超过10，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在一个实施例中，该变体具有SEQ ID NO:36的多肽的至少60％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、或至少100％的活性。在本发明的第二方面中描述了氨基酸变化和保守取代的实例。
在一个实施例中，第六方面的多肽包括基序
[H/Y][L/M]F[F/S][A/C/H/S/T/V][A/D/G/N/R]D[D/E/N]G(SEQ ID NO:1)，优选基序[H/Y]LF[F/S][A/S/V][A/D/G]DNG(SEQ ID NO:2)，更优选基序
YLFF[A/V][A/G]DNG(SEQ ID NO:3)，或甚至更优选基序YLFFAGDNG(SEQ ID NO:4)。
在第七方面，本发明涉及具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且与SEQ ID NO:47的成熟多肽具有至少86％，例如至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少 91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少 98％、至少99％的序列一致性的多肽，这些多肽具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性。在一个实施例中，这些多肽与SEQ ID NO:47的成熟多肽相差多达42个氨基酸，例如1 与42个之间的氨基酸，如1-35、1-30、1-25、1-20、1-15、1-10或1-5个氨基酸，或1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、 39、40、41或42个氨基酸。
在第七方面的延续中，本发明进一步涉及与SEQ ID NO:48具有至少86％的序列一致性的多肽，这些多肽具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:48具有至少87％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:48具有至少88％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:48具有至少89％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:48具有至少90％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:48具有至少91％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:48具有至少92％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:48具有至少93％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:48具有至少94％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:48具有至少95％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ IDNO:48具有至少96％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:48 具有至少97％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:48具有至少 98％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:48具有至少99％的序列一致性。
在一个实施例中，这些多肽与SEQ ID NO:48相差多达42个氨基酸，例如1 与42个之间的氨基酸，如1-35、1-30、1-25、1-20、1-15、1-10或1-5个氨基酸，或1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、 39、40、41或42个氨基酸。在一个实施例中，这些多肽与SEQ ID NO:51相差多达42个氨基酸，例如1与42个之间的氨基酸，如1-35、1-30、1-25、1-20、1-15、 1-10或1-5个氨基酸，或1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、 16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、 34、35、36、37、38、39、40、41或42个氨基酸。在一个实施例中，该多肽具有 SEQ ID NO:48的多肽的至少60％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、或至少100％的活性。
在一个实施例中，该多肽优选地包括SEQ ID NO:47和/或SEQ ID NO:48的氨基酸序列或其等位基因变体，或由其组成；包括SEQ ID NO:47和/或SEQ ID NO:48 的氨基酸序列和N-末端和/或C-末端His-标签和/或HQ-标签，如SEQ ID NO:51；或是其片段，该片段具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且具有该成熟多肽的至少90％，如至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:47的成熟多肽或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:50的成熟多肽或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:47的氨基酸1至537或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:48的氨基酸1至537或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:50的氨基酸1至311或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:51的氨基酸1至311或由其组成。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在第七方面的延续中，本发明涉及具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的多肽，该多肽由以下多核苷酸编码，该多核苷酸在高严格条件或非常高严格条件下与(i)SEQ ID NO:46的成熟多肽编码序列或(ii)(i)的全长补体杂交。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在第七方面的延续中，本发明涉及由以下多核苷酸编码的具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的多肽，该多核苷酸与SEQ ID NO:46的成熟多肽编码序列或其cDNA序列具有至少86％，例如至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列一致性。在一个另外的实施例中，该多肽已经被分离。
在第七方面的延续中，本发明涉及具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的SEQ ID NO: 48的变体，这些变体包括在一个或多个(例如，若干个)位置处的一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，在SEQ ID NO:48中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合的位置的数目不超过42，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、 20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41或42个。在一个实施例中，在SEQ ID NO:48中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合的位置的数目不超过10，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在另一个实施例中，在SEQ ID NO:48中的取代、缺失和/或插入的数目不超过10，例如1、 2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在一个另外的实施例中，SEQ ID NO:48中取代，优选保守取代的数目不超过10，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在一个实施例中，该变体具有SEQ ID NO:48的多肽的至少60％、至少70％、至少 75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、或至少100％的活性。在本发明的第二方面中描述了氨基酸变化和保守取代的实例。
在一个实施例中，第七方面的多肽包括基序
[H/Y][L/M]F[F/S][A/C/H/S/T/V][A/D/G/N/R]D[D/E/N]G(SEQ ID NO:1)，优选基序[H/Y]LF[F/S][A/S/V][A/D/G]DNG(SEQ ID NO:2)，更优选基序
YLFF[A/V][A/G]DNG(SEQ ID NO:3)，或甚至更优选基序YLFFAGDNG(SEQ ID NO:4)。
在第八方面，本发明涉及具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且与SEQ ID NO:53的成熟多肽具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少 89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少 96％、至少97％、至少98％、至少99％的序列一致性的多肽，这些多肽具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性。在一个实施例中，这些多肽与SEQ ID NO:53的成熟多肽相差多达50个氨基酸，例如1与50个之间的氨基酸，如1-45、1-40、1-35、1-30、1-25、 1-20、1-15、1-10或1-5个氨基酸，或1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、 13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、 31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、 49或50个氨基酸。
在第八方面的延续中，本发明进一步涉及与SEQ ID NO:54具有至少80％的序列一致性的多肽，这些多肽具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:54具有至少85％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:54具有至少86％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:54具有至少87％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:54具有至少88％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:54具有至少89％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:54具有至少90％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:54具有至少91％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:54具有至少92％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:54具有至少93％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ IDNO:54具有至少94％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:54 具有至少95％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:54具有至少 96％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:54具有至少97％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:54具有至少98％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ IDNO:54具有至少99％的序列一致性。
在一个实施例中，这些多肽与SEQ ID NO:54相差多达50个氨基酸，例如1 与50个之间的氨基酸，如1-45、1-40、1-35、1-30、1-25、1-20、1-15、1-10或1-5 个氨基酸，或1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、 18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、 36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49或50个氨基酸。在一个实施例中，这些多肽与SEQ ID NO:57相差多达50个氨基酸，例如1与50个之间的氨基酸，如1-45、1-40、1-35、1-30、1-25、1-20、1-15、1-10或1-5个氨基酸，或1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、 20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、 38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49或50个氨基酸。在一个实施例中，该多肽具有SEQ ID NO:54的多肽的至少60％、至少70％、至少75％、至少 80％、至少85％、至少90％、至少95％、或至少100％的活性。
在一个实施例中，该多肽优选地包括SEQ ID NO:53和/或SEQ ID NO:54的氨基酸序列或其等位基因变体，或由其组成；包括SEQ ID NO:53和/或SEQ ID NO:54 的氨基酸序列和N-末端和/或C-末端His-标签和/或HQ-标签，如SEQ ID NO:57；或是其片段，该片段具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且具有该成熟多肽的至少90％，如至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:53的成熟多肽或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:56的成熟多肽或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:53的氨基酸1至364或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:54的氨基酸1至364或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:56的氨基酸1至373或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:57的氨基酸1至373或由其组成。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在第八方面的延续中，本发明涉及具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的多肽，该多肽由以下多核苷酸编码，该多核苷酸在高严格条件或非常高严格条件下与(i)SEQ ID NO:52的成熟多肽编码序列或(ii)(i)的全长补体杂交。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在第八方面的延续中，本发明涉及由以下多核苷酸编码的具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的多肽，该多核苷酸与SEQ ID NO:52的成熟多肽编码序列或其cDNA序列具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列一致性。在一个另外的实施例中，该多肽已经被分离。
在第八方面的延续中，本发明涉及具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的SEQ ID NO: 54的变体，这些变体包括在一个或多个(例如，若干个)位置处的一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，在SEQ ID NO:54中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合的位置的数目不超过50，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、 20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、 38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49或50个。在一个实施例中，在SEQ ID NO:54中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和 /或一个或多个氨基酸插入或其任何组合的位置的数目不超过10，例如1、2、3、4、 5、6、7、8、9或10个。在另一个实施例中，在SEQ ID NO:54中的取代、缺失和 /或插入的数目不超过10，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在一个另外的实施例中，SEQ ID NO:54中取代，优选保守取代的数目不超过10，例如1、2、 3、4、5、6、7、8、9或10个。在一个实施例中，该变体具有SEQ ID NO:54的多肽的至少60％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、或至少100％的活性。在本发明的第二方面中描述了氨基酸变化和保守取代的实例。
在一个实施例中，第八方面的多肽包括基序
[H/Y][L/M]F[F/S][A/C/H/S/T/V][A/D/G/N/R]D[D/E/N]G(SEQ ID NO:1)，优选基序[H/Y]LF[F/S][A/S/V][A/D/G]DNG(SEQ ID NO:2)，更优选基序
YLFF[A/V][A/G]DNG(SEQ ID NO:3)，或甚至更优选基序YLFFAGDNG(SEQ ID NO:4)。
在第九方面，本发明涉及具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且与SEQ ID NO:59的成熟多肽具有至少81％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少 89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少 96％、至少97％、至少98％、至少99％的序列一致性的多肽，这些多肽具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性。在一个实施例中，这些多肽与SEQ ID NO:59的成熟多肽相差多达50个氨基酸，例如1与50个之间的氨基酸，如1-45、1-40、1-35、1-30、1-25、 1-20、1-15、1-10或1-5个氨基酸，或1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、 13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、 49或50个氨基酸。
在第九方面的延续中，本发明进一步涉及与SEQ ID NO:60具有至少81％的序列一致性的多肽，这些多肽具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:60具有至少86％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:60具有至少87％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:60具有至少88％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:60具有至少89％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:60具有至少90％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:60具有至少91％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:60具有至少92％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:60具有至少93％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:60具有至少94％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ IDNO:60具有至少95％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:60 具有至少96％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:60具有至少 97％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:60具有至少98％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:60具有至少99％的序列一致性。
在一个实施例中，这些多肽与SEQ ID NO:60相差多达50个氨基酸，例如1 与50个之间的氨基酸，如1-45、1-40、1-35、1-30、1-25、1-20、1-15、1-10或1-5 个氨基酸，或1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、 18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、 36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49或50个氨基酸。在一个实施例中，这些多肽与SEQ ID NO:63相差多达50个氨基酸，例如1与50个之间的氨基酸，如1-45、1-40、1-35、1-30、1-25、1-20、1-15、1-10或1-5个氨基酸，或1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、 20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、 38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49或50个氨基酸。在一个实施例中，该多肽具有SEQ ID NO:60的多肽的至少60％、至少70％、至少75％、至少 80％、至少85％、至少90％、至少95％、或至少100％的活性。
在一个实施例中，该多肽优选地包括SEQ ID NO:59和/或SEQ ID NO:60的氨基酸序列或其等位基因变体，或由其组成；包括SEQ ID NO:59和/或SEQ ID NO:60 的氨基酸序列和N-末端和/或C-末端His-标签和/或HQ-标签；或是其片段，该片段具有阿拉伯呋喃糖苷酶活并且具有该成熟多肽的至少90％，如至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:59的成熟多肽或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:62的成熟多肽或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:59的氨基酸1至436或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:60的氨基酸1至436或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:62的氨基酸1至444或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:63的氨基酸1至444或由其组成。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在第九方面的延续中，本发明涉及具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的多肽，该多肽由以下多核苷酸编码，该多核苷酸在高严格条件或非常高严格条件下与(i)SEQ ID NO:58的成熟多肽编码序列或(ii)(i)的全长补体杂交。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在第九方面的延续中，本发明涉及由以下多核苷酸编码的具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的多肽，该多核苷酸与SEQ ID NO:58的成熟多肽编码序列或其cDNA序列具有至少81％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列一致性。在一个另外的实施例中，该多肽已经被分离。
在第九方面的延续中，本发明涉及具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的SEQ ID NO: 60的变体，该变体在一个或多个(例如，若干个)位置包括缺失和/或插入。在一个实施例中，在SEQ ID NO:60中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合的位置的数目不超过50，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、 21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、 39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49或50个。在一个实施例中，在SEQ ID NO:60中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合的位置的数目不超过10，例如1、2、3、4、5、6、 7、8、9或10个。在另一个实施例中，在SEQ ID NO:60中的取代、缺失和/或插入的数目不超过10，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在一个另外的实施例中，SEQ ID NO:60中取代，优选保守取代的数目不超过10，例如1、2、3、4、 5、6、7、8、9或10个。在一种变体中，该多肽具有SEQ ID NO:60的多肽的至少60％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、或至少 100％的活性。在本发明的第二方面中描述了氨基酸变化和保守取代的实例。
在一个实施例中，第九方面的多肽包括基序
[H/Y][L/M]F[F/S][A/C/H/S/T/V][A/D/G/N/R]D[D/E/N]G(SEQ ID NO:1)，优选基序[H/Y]LF[F/S][A/S/V][A/D/G]DNG(SEQ ID NO:2)，更优选基序
YLFF[A/V][A/G]DNG(SEQ ID NO:3)，或甚至更优选基序YLFFAGDNG(SEQ ID NO:4)。
在第十方面，本发明涉及具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且与SEQ ID NO:65的成熟多肽具有至少84％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少 89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少 96％、至少97％、至少98％、至少99％的序列一致性的多肽，这些多肽具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性。在一个实施例中，这些多肽与SEQ ID NO:65的成熟多肽相差多达48个氨基酸，例如1与48个之间的氨基酸，如1-45、1-40、1-35、1-30、1-25、 1-20、1-15、1-10或1-5个氨基酸，或1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、 13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、 31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47或48 个氨基酸。
在第十方面的延续中，本发明进一步涉及与SEQ ID NO:66具有至少84％的序列一致性的多肽，这些多肽具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:66具有至少86％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:66具有至少87％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:66具有至少88％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:66具有至少89％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:66具有至少90％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:66具有至少91％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:66具有至少92％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:66具有至少93％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:66具有至少94％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ IDNO:66具有至少95％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:66 具有至少96％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:66具有至少 97％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:66具有至少98％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:66具有至少99％的序列一致性。
在一个实施例中，这些多肽与SEQ ID NO:66相差多达48个氨基酸，如1-45、 1-40、1-35、1-30、1-25、1-20、1-15、1-10或1-5个氨基酸，或1、2、3、4、5、6、 7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、 44、45、46、47或48个氨基酸。在一个实施例中，这些多肽与SEQ ID NO:69相差多达48个氨基酸，如1-45、1-40、1-35、1-30、1-25、1-20、1-15、1-10或1-5 个氨基酸，或1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、 18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、 36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47或48个氨基酸。在一个实施例中，该多肽具有SEQ ID NO:66的多肽的至少60％、至少70％、至少75％、至少 80％、至少85％、至少90％、至少95％、或至少100％的活性。
在一个实施例中，该多肽优选地包括SEQ ID NO:65和/或SEQ ID NO:66的氨基酸序列或其等位基因变体，或由其组成；包括SEQ ID NO:65和/或SEQ ID NO:66 的氨基酸序列和N-末端和/或C-末端His-标签和/或HQ-标签，如SEQ ID NO:69；或是其片段，该片段具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且具有该成熟多肽的至少90％，如至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:65的成熟多肽或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:68的成熟多肽或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:65的氨基酸1至311或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:66的氨基酸1至311或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:68的氨基酸1至311或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:69的氨基酸1至311或由其组成。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在第十方面的延续中，本发明涉及具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的多肽，该多肽由以下多核苷酸编码，该多核苷酸在高严格条件或非常高严格条件下与(i)SEQ ID NO:64的成熟多肽编码序列或(ii)(i)的全长补体杂交。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在第十方面的延续中，本发明涉及由以下多核苷酸编码的具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的多肽，该多核苷酸与SEQ ID NO:64的成熟多肽编码序列或其cDNA序列具有至少84％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列一致性。在一个另外的实施例中，该多肽已经被分离。
在第十方面的延续中，本发明涉及具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的SEQ ID NO: 66的变体，这些变体包括在一个或多个(例如，若干个)位置处的一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，在SEQ ID NO:66中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合的位置的数目不超过48，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、 20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、 38、39、40、41、42、43、44、45、46、47或48个。在一个实施例中，在SEQ ID NO:66中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合的位置的数目不超过10，例如1、2、3、4、5、6、7、 8、9或10个。在另一个实施例中，在SEQ ID NO:66中的取代、缺失和/或插入的数目不超过10，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在一个另外的实施例中，SEQ ID NO:66中取代，优选保守取代的数目不超过10，例如1、2、3、4、5、 6、7、8、9或10个。在一个实施例中，该变体具有SEQ ID NO:66的多肽的至少 60％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、或至少 100％的活性。在本发明的第二方面中描述了氨基酸变化和保守取代的实例。
在一个实施例中，第十方面的多肽包括基序
[H/Y][L/M]F[F/S][A/C/H/S/T/V][A/D/G/N/R]D[D/E/N]G(SEQ ID NO:1)，优选基序[H/Y]LF[F/S][A/S/V][A/D/G]DNG(SEQ ID NO:2)，更优选基序
YLFF[A/V][A/G]DNG(SEQ ID NO:3)，或甚至更优选基序YLFFAGDNG(SEQ ID NO:4)。
在第十一方面，本发明涉及具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且与SEQ ID NO:104 的成熟多肽具有至少87％，例如至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％的序列一致性的多肽，这些多肽具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性。在一个实施例中，这些多肽与SEQ ID NO:104的成熟多肽相差多达39个氨基酸，例如1与39 个之间的氨基酸，如1-35、1-30、1-25、1-20、1-15、1-10或1-5个氨基酸，或1、 2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、 22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38或39 个氨基酸。
在第十一方面的延续中，本发明进一步涉及与SEQ ID NO:105具有至少87％的序列一致性的多肽，这些多肽具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性。在一个实施例中，该多肽与SEQ IDNO:105具有至少88％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与 SEQ ID NO:105具有至少89％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:105具有至少90％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:105 具有至少91％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:105具有至少92％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQID NO:105具有至少93％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:105具有至少94％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:105具有至少95％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:105具有至少96％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:105具有至少97％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQID NO:105具有至少98％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:105具有至少99％的序列一致性。
在一个实施例中，这些多肽与SEQ ID NO:105相差多达39个氨基酸，例如1 与39个之间的氨基酸，如1-35、1-30、1-25、1-20、1-15、1-10或1-5个氨基酸，或1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、 21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38 或39个氨基酸。在一个实施例中，该多肽具有SEQ ID NO:105的多肽的至少60％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、或至少100％的活性。
在一个实施例中，该多肽优选地包括SEQ ID NO:104和/或SEQ ID NO:105的氨基酸序列或其等位基因变体，或由其组成；包括SEQ ID NO:104和/或SEQ ID NO: 105的氨基酸序列和N-末端和/或C-末端His-标签和/或HQ-标签；或是其片段，该片段具有阿拉伯呋喃糖苷酶活并且具有该成熟多肽的至少90％，如至少91％、至少 92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少 99％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:105的成熟多肽或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:104的氨基酸1至302或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:105的氨基酸1至302或由其组成。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在第十一方面的延续中，本发明涉及具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的多肽，该多肽由以下多核苷酸编码，该多核苷酸在非常高严格条件下与(i)SEQ ID NO:103的成熟多肽编码序列或(ii)(i)的全长补体杂交。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在第十一方面的延续中，本发明涉及由以下多核苷酸编码的具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的多肽，该多核苷酸与SEQ ID NO:103的成熟多肽编码序列或其cDNA 序列具有至少87％，例如至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列一致性。在一个另外的实施例中，该多肽已经被分离。
在第十一方面的延续中，本发明涉及具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的SEQ ID NO:105的变体，这些变体包括在一个或多个(例如，若干个)位置处的一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，在SEQ ID NO:105中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合的位置的数目不超过39，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、 19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、 37、38或39个。在一个实施例中，在SEQ ID NO:105中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合的位置的数目不超过10，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在另一个实施例中，在SEQ ID NO:105中的取代、缺失和/或插入的数目不超过10，例如1、2、3、 4、5、6、7、8、9或10个。在一个另外的实施例中，SEQ ID NO:105中取代，优选保守取代的数目不超过10，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在一个实施例中，该变体具有SEQ ID NO:105的多肽的至少60％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、或至少100％的活性。在本发明的第二方面中描述了氨基酸变化和保守取代的实例。
在一个实施例中，第十一方面的多肽包括基序
[H/Y][L/M]F[F/S][A/C/H/S/T/V][A/D/G/N/R]D[D/E/N]G(SEQ ID NO:1)，优选基序[H/Y]LF[F/S][A/S/V][A/D/G]DNG(SEQ ID NO:2)，更优选基序
YLFF[A/V][A/G]DNG(SEQ ID NO:3)，或甚至更优选基序YLFFAGDNG(SEQ ID NO:4)。
在第十二方面，本发明涉及具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且与SEQ ID NO:107 的成熟多肽具有至少85％，例如至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％的序列一致性的多肽，这些多肽具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性。在一个实施例中，这些多肽与SEQ ID NO:107的成熟多肽相差多达50个氨基酸，例如1与50个之间的氨基酸，如1-45、 1-40、1-35、1-30、1-25、1-20、1-15、1-10或1-5个氨基酸，或1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、 44、45、46、47、48、49或50个氨基酸。
在第十二方面的延续中，本发明进一步涉及与SEQ ID NO:108具有至少85％的序列一致性的多肽，这些多肽具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性。在一个实施例中，该多肽与SEQ IDNO:108具有至少86％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与 SEQ ID NO:108具有至少87％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:108具有至少88％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:108 具有至少89％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:108具有至少90％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQID NO:108具有至少91％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:108具有至少92％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:108具有至少93％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:108具有至少94％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:108具有至少95％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQID NO:108具有至少96％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:108具有至少97％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与 SEQ ID NO:108具有至少98％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:108具有至少99％的序列一致性。
在一个实施例中，这些多肽与SEQ ID NO:108相差多达50个氨基酸，如1-45、 1-40、1-35、1-30、1-25、1-20、1-15、1-10或1-5个氨基酸，或1、2、3、4、5、6、 7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、 26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、 44、45、46、47、48、49或50个氨基酸。在一个实施例中，这些多肽与SEQID NO: 111相差多达50个氨基酸，如1-45、1-40、1-35、1-30、1-25、1-20、1-15、1-10 或1-5个氨基酸，或1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、 17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、 35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49或50个氨基酸。在一个实施例中，该多肽具有SEQ ID NO:108的多肽的至少60％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、或至少100％的活性。
在一个实施例中，该多肽优选地包括SEQ ID NO:107和/或SEQ ID NO:108的氨基酸序列或其等位基因变体，或由其组成；包括SEQ ID NO:107和/或SEQ ID NO: 108的氨基酸序列和N-末端和/或C-末端His-标签和/或HQ-标签，如SEQ ID NO: 111；或是其片段，该片段具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且具有该成熟多肽的至少 90％，如至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少 97％、至少98％或至少99％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:107 的成熟多肽或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:110的成熟多肽或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQID NO:107的氨基酸1至464或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:108的氨基酸1至 464或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:110的氨基酸1至472或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:111的氨基酸1至 472或由其组成。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在第十二方面的延续中，本发明涉及具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的多肽，该多肽由以下多核苷酸编码，该多核苷酸在高严格条件或非常高严格条件下与(i)SEQ ID NO:106的成熟多肽编码序列或(ii)(i)的全长补体杂交。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在第十二方面的延续中，本发明涉及由以下多核苷酸编码的具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的多肽，该多核苷酸与SEQ ID NO:106的成熟多肽编码序列或其cDNA 序列具有至少85％，例如至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列一致性。在一个另外的实施例中，该多肽已经被分离。
在第十二方面的延续中，本发明涉及具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的SEQ ID NO:108的变体，这些变体包括在一个或多个(例如，若干个)位置处的一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，在SEQ ID NO:108中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合的位置的数目不超过50，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、 19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、 37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49或50个。在一个实施例中，在SEQ IDNO:108中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合的位置的数目不超过10，例如1、2、 3、4、5、6、7、8、9或10个。在另一个实施例中，在SEQ ID NO:108中的取代、缺失和/或插入的数目不超过10，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在一个另外的实施例中，SEQ ID NO:108中取代，优选保守取代的数目不超过10，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在一个实施例中，该变体具有SEQ ID NO: 108的多肽的至少60％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、或至少100％的活性。在本发明的第二方面中描述了氨基酸变化和保守取代的实例。
在一个实施例中，第十二方面的多肽包括基序
[H/Y][L/M]F[F/S][A/C/H/S/T/V][A/D/G/N/R]D[D/E/N]G(SEQ ID NO:1)，优选基序[H/Y]LF[F/S][A/S/V][A/D/G]DNG(SEQ ID NO:2)，更优选基序
YLFF[A/V][A/G]DNG(SEQ ID NO:3)，或甚至更优选基序YLFFAGDNG(SEQ ID NO:4)。
在第十三方面，本发明涉及具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且与SEQ ID NO:113 的成熟多肽具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％的序列一致性的多肽，这些多肽具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性。在一个实施例中，这些多肽与SEQ ID NO:113的成熟多肽相差多达50个氨基酸，例如1与50个之间的氨基酸，如1-45、1-40、1-35、1-30、 1-25、1-20、1-15、1-10或1-5个氨基酸，或1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、 12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、 30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、 48、49或50个氨基酸。
在第十三方面的延续中，本发明进一步涉及与SEQ ID NO:114具有至少80％的序列一致性的多肽，这些多肽具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性。在一个实施例中，该多肽与SEQ IDNO:114具有至少85％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与 SEQ ID NO:114具有至少86％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:114具有至少87％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:114 具有至少88％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:114具有至少89％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQID NO:114具有至少90％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:114具有至少91％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:114具有至少92％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:114具有至少93％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:114具有至少94％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQID NO:114具有至少95％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:114具有至少96％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与 SEQ ID NO:114具有至少97％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:114具有至少98％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:114 具有至少99％的序列一致性。
在一个实施例中，这些多肽与SEQ ID NO:114相差多达50个氨基酸，如1-45、 1-40、1-35、1-30、1-25、1-20、1-15、1-10或1-5个氨基酸，或1、2、3、4、5、6、 7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、 44、45、46、47、48、49或50个氨基酸。在一个实施例中，这些多肽与SEQID NO: 117相差多达50个氨基酸，如1-45、1-40、1-35、1-30、1-25、1-20、1-15、1-10 或1-5个氨基酸，或1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、 17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、 35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49或50个氨基酸。在一个实施例中，该多肽具有SEQ ID NO:114的多肽的至少60％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、或至少100％的活性。
在一个实施例中，该多肽优选地包括SEQ ID NO:113和/或SEQ ID NO:114的氨基酸序列或其等位基因变体，或由其组成；包括SEQ ID NO:113和/或SEQ ID NO: 114的氨基酸序列和N-末端和/或C-末端His-标签和/或HQ-标签，如SEQ ID NO: 117；或是其片段，该片段具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且具有该成熟多肽的至少 90％，如至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少 97％、至少98％或至少99％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:113 的成熟多肽或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:116的成熟多肽或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQID NO:113的氨基酸1至 364或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:114的氨基酸1至 364或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:116的氨基酸1至372或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:117的氨基酸1至 372或由其组成。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在第十三方面的延续中，本发明涉及具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的多肽，该多肽由以下多核苷酸编码，该多核苷酸在高严格条件或非常高严格条件下与(i)SEQ ID NO:112的成熟多肽编码序列或(ii)(i)的全长补体杂交。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在第十三方面的延续中，本发明涉及由以下多核苷酸编码的具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的多肽，该多核苷酸与SEQ ID NO:112的成熟多肽编码序列或其cDNA 序列具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列一致性。在一个另外的实施例中，该多肽已经被分离。
在第十三方面的延续中，本发明涉及具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的SEQ ID NO:114的变体，这些变体包括在一个或多个(例如，若干个)位置处的一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，在SEQ ID NO:114中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合的位置的数目不超过50，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、 19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、 37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49或50个。在一个实施例中，在SEQ IDNO:114中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合的位置的数目不超过10，例如1、2、 3、4、5、6、7、8、9或10个。在另一个实施例中，在SEQ ID NO:114中的取代、缺失和/或插入的数目不超过10，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在一个另外的实施例中，SEQ ID NO:114中取代，优选保守取代的数目不超过10，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在一个实施例中，该变体具有SEQ ID NO: 114的多肽的至少60％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、或至少100％的活性。在本发明的第二方面中描述了氨基酸变化和保守取代的实例。
在一个实施例中，第十三方面的多肽包括基序
[H/Y][L/M]F[F/S][A/C/H/S/T/V][A/D/G/N/R]D[D/E/N]G(SEQ ID NO:1)，优选基序[H/Y]LF[F/S][A/S/V][A/D/G]DNG(SEQ ID NO:2)，更优选基序
YLFF[A/V][A/G]DNG(SEQ ID NO:3)，或甚至更优选基序YLFFAGDNG(SEQ ID NO:4)。
在第十四方面，本发明涉及具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且与SEQ ID NO:119 的成熟多肽具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％的序列一致性的多肽，这些多肽具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性。在一个实施例中，这些多肽与SEQ ID NO:119的成熟多肽相差多达50个氨基酸，例如1与50个之间的氨基酸，如1-45、1-40、1-35、1-30、 1-25、1-20、1-15、1-10或1-5个氨基酸，或1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、 12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、 30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、 48、49或50个氨基酸。
在第十四方面的延续中，本发明进一步涉及与SEQ ID NO:120具有至少80％的序列一致性的多肽，这些多肽具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性。在一个实施例中，该多肽与SEQ IDNO:120具有至少85％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与 SEQ ID NO:120具有至少86％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:120具有至少87％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:120 具有至少88％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:120具有至少89％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQID NO:120具有至少90％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:120具有至少91％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:120具有至少92％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:120具有至少93％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:120具有至少94％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQID NO:120具有至少95％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:120具有至少96％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与 SEQ ID NO:120具有至少97％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:120具有至少98％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:120 具有至少99％的序列一致性。
在一个实施例中，这些多肽与SEQ ID NO:120相差多达50个氨基酸，例如1 与50个之间的氨基酸，如1-45、1-40、1-35、1-30、1-25、1-20、1-15、1-10或1-5 个氨基酸，或1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、 18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49或50个氨基酸。在一个实施例中，该多肽具有SEQ ID NO:120的多肽的至少60％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、或至少100％的活性。
在一个实施例中，该多肽优选地包括SEQ ID NO:119和/或SEQ ID NO:120的氨基酸序列或其等位基因变体，或由其组成；包括SEQ ID NO:119和/或SEQ ID NO: 120的氨基酸序列和N-末端和/或C-末端His-标签和/或HQ-标签；或是其片段，该片段具有阿拉伯呋喃糖苷酶活并且具有该成熟多肽的至少90％，如至少91％、至少 92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少 99％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:120的成熟多肽或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:119的氨基酸1至357或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:120的氨基酸1至357或由其组成。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在第十四方面的延续中，本发明涉及具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的多肽，该多肽由以下多核苷酸编码，该多核苷酸在高严格条件或非常高严格条件下与(i)SEQ ID NO:118的成熟多肽编码序列或(ii)(i)的全长补体杂交。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在第十四方面的延续中，本发明涉及由以下多核苷酸编码的具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的多肽，该多核苷酸与SEQ ID NO:118的成熟多肽编码序列或其cDNA 序列具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列一致性。在一个另外的实施例中，该多肽已经被分离。
在第十四方面的延续中，本发明涉及具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的SEQ ID NO:120的变体，这些变体包括在一个或多个(例如，若干个)位置处的一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，在SEQ ID NO:120中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合的位置的数目不超过50，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、 19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、 37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49或50个。在一个实施例中，在SEQ IDNO:120中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合的位置的数目不超过10，例如1、2、 3、4、5、6、7、8、9或10个。在另一个实施例中，在SEQ ID NO:120中的取代、缺失和/或插入的数目不超过10，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在一个另外的实施例中，SEQ ID NO:120中取代，优选保守取代的数目不超过10，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在一个实施例中，该变体具有SEQ ID NO: 120的多肽的至少60％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、或至少100％的活性。在本发明的第二方面中描述了氨基酸变化和保守取代的实例。
在一个实施例中，第十四方面的多肽包括基序
[H/Y][L/M]F[F/S][A/C/H/S/T/V][A/D/G/N/R]D[D/E/N]G(SEQ ID NO:1)，优选基序[H/Y]LF[F/S][A/S/V][A/D/G]DNG(SEQ ID NO:2)，更优选基序
YLFF[A/V][A/G]DNG(SEQ ID NO:3)，或甚至更优选基序YLFFAGDNG(SEQ ID NO:4)。
在第十五方面，本发明涉及具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且与SEQ ID NO:122 的成熟多肽具有至少89％，例如至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％的序列一致性的多肽，这些多肽具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性。在一个实施例中，这些多肽与SEQ ID NO:122的成熟多肽相差多达33个氨基酸，例如1和33个之间的氨基酸，例如1-30、 1-25、1-20、1-15、1-10或1-5个氨基酸，或1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、 12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32或33个氨基酸。
在第十五方面的延续中，本发明进一步涉及与SEQ ID NO:123具有至少89％的序列一致性的多肽，这些多肽具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性。在一个实施例中，该多肽与SEQ IDNO:123具有至少90％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与 SEQ ID NO:123具有至少91％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:123具有至少92％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:123 具有至少93％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:123具有至少94％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQID NO:123具有至少95％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:123具有至少96％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:123具有至少97％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:123具有至少98％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:123具有至少99％的序列一致性。
在一个实施例中，这些多肽与SEQ ID NO:123的成熟多肽相差多达50个氨基酸，例如1和33个之间的氨基酸，例如1-30、1-25、1-20、1-15、1-10或1-5个氨基酸，或1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、 19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32或33个氨基酸。在一个实施例中，该多肽具有SEQ ID NO:123的多肽的至少60％、至少70％、至少 75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、或至少100％的活性。
在一个实施例中，该多肽优选地包括SEQ ID NO:122和/或SEQ ID NO:123的氨基酸序列或其等位基因变体，或由其组成；包括SEQ ID NO:122和/或SEQ ID NO: 123的氨基酸序列和N-末端和/或C-末端His-标签和/或HQ-标签；或是其片段，该片段具有阿拉伯呋喃糖苷酶活并且具有该成熟多肽的至少90％，如至少91％、至少 92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少 99％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:123的成熟多肽或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:122的氨基酸1至302或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:123的氨基酸1至302或由其组成。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在第十五方面的延续中，本发明涉及具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的多肽，该多肽由以下多核苷酸编码，该多核苷酸在高严格条件或非常高严格条件下与(i)SEQ ID NO:121的成熟多肽编码序列或(ii)(i)的全长补体杂交。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在第十五方面的延续中，本发明涉及由以下多核苷酸编码的具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的多肽，该多核苷酸与SEQ ID NO:121的成熟多肽编码序列或其cDNA 序列具有至少89％，例如至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列一致性。在一个另外的实施例中，该多肽已经被分离。
在第十五方面的延续中，本发明涉及具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的SEQ ID NO:123的变体，这些变体包括在一个或多个(例如，若干个)位置处的一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，SEQ ID NO:123中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合的位置的数目不超过 33，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、 19、20、21、22、23、24、24、25、26、27、28、29、30、31、32或33个。在一个实施例中，在SEQ ID NO:123中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合的位置的数目不超过10，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在另一个实施例中，在SEQ ID NO:123 中的取代、缺失和/或插入的数目不超过10，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或 10个。在一个另外的实施例中，SEQ ID NO:123中取代，优选保守取代的数目不超过10，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在一个实施例中，该变体具有SEQ ID NO:123的多肽的至少60％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、或至少100％的活性。在本发明的第二方面中描述了氨基酸变化和保守取代的实例。
在一个实施例中，第十五方面的多肽包括基序
[H/Y][L/M]F[F/S][A/C/H/S/T/V][A/D/G/N/R]D[D/E/N]G(SEQ ID NO:1)，优选基序[H/Y]LF[F/S][A/S/V][A/D/G]DNG(SEQ ID NO:2)，更优选基序
YLFF[A/V][A/G]DNG(SEQ ID NO:3)，或甚至更优选基序YLFFAGDNG(SEQ ID NO:4)。
在第十六方面，本发明涉及具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且与SEQ ID NO:125 的成熟多肽具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％的序列一致性的多肽，这些多肽具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性。在一个实施例中，这些多肽与SEQ ID NO:125的成熟多肽相差多达50个氨基酸，例如1与50个之间的氨基酸，如1-45、1-40、1-35、1-30、 1-25、1-20、1-15、1-10或1-5个氨基酸，或1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、 12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、 30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、 48、49或50个氨基酸。
在第十六方面的延续中，本发明进一步涉及与SEQ ID NO:126具有至少80％的序列一致性的多肽，这些多肽具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性。在一个实施例中，该多肽与SEQ IDNO:126具有至少85％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与 SEQ ID NO:126具有至少86％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:126具有至少87％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:126 具有至少88％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:126具有至少89％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQID NO:126具有至少90％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:126具有至少91％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:126具有至少92％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:126具有至少93％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:126具有至少94％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQID NO:126具有至少95％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:126具有至少96％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与 SEQ ID NO:126具有至少97％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:126具有至少98％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:126 具有至少99％的序列一致性。
在一个实施例中，这些多肽与SEQ ID NO:126相差多达50个氨基酸，如1-45、 1-40、1-35、1-30、1-25、1-20、1-15、1-10或1-5个氨基酸，或1、2、3、4、5、6、 7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、 26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49或50个氨基酸。在一个实施例中，这些多肽与SEQID NO: 129相差多达50个氨基酸，如1-45、1-40、1-35、1-30、1-25、1-20、1-15、1-10 或1-5个氨基酸，或1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、 17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、 35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49或50个氨基酸。在一个实施例中，该多肽具有SEQ ID NO:126的多肽的至少60％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、或至少100％的活性。
在一个实施例中，该多肽优选地包括SEQ ID NO:125和/或SEQ ID NO:126的氨基酸序列或其等位基因变体，或由其组成；包括SEQ ID NO:125和/或SEQ ID NO: 126的氨基酸序列和N-末端和/或C-末端His-标签和/或HQ-标签，如SEQ ID NO: 129；或是其片段，该片段具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且具有该成熟多肽的至少 90％，如至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:125 的成熟多肽或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:128的成熟多肽或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ IDNO:125的氨基酸1至 453或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:126的氨基酸1至 453或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:128的氨基酸1至 461或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:129的氨基酸1至 461或由其组成。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在第十六方面的延续中，本发明涉及具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的多肽，该多肽由以下多核苷酸编码，该多核苷酸在高严格条件或非常高严格条件下与(i)SEQ ID NO:124的成熟多肽编码序列或(ii)(i)的全长补体杂交。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在第十六方面的延续中，本发明涉及由以下多核苷酸编码的具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的多肽，该多核苷酸与SEQ ID NO:124的成熟多肽编码序列或其cDNA 序列具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列一致性。在一个另外的实施例中，该多肽已经被分离。
在第十六方面的延续中，本发明涉及具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的SEQ ID NO:126的变体，这些变体包括在一个或多个(例如，若干个)位置处的一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，在SEQ ID NO:126中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合的位置的数目不超过50，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、 19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、 37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49或50个。在一个实施例中，在SEQ IDNO:126中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合的位置的数目不超过10，例如1、2、 3、4、5、6、7、8、9或10个。在另一个实施例中，在SEQ ID NO:126中的取代、缺失和/或插入的数目不超过10，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在一个另外的实施例中，SEQ ID NO:126中取代，优选保守取代的数目不超过10，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在一个实施例中，该变体具有SEQ ID NO: 126的多肽的至少60％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、或至少100％的活性。在本发明的第二方面中描述了氨基酸变化和保守取代的实例。
在一个实施例中，第十六方面的多肽包括基序 [H/Y][L/M]F[F/S][A/C/H/S/T/V][A/D/G/N/R]D[D/E/N]G(SEQ ID NO:1)。
在第十七方面，本发明涉及具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且与SEQ ID NO:137 的成熟多肽具有至少85％，例如至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％的序列一致性的多肽，这些多肽具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性。在一个实施例中，这些多肽与SEQ ID NO:137的成熟多肽相差多达46个氨基酸，例如1与46个之间的氨基酸，例如1-45、1-40、1-35、1-30、1-25、1-20、 1-15、1-10或1-5个氨基酸，或1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、 14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、 32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45或46个氨基酸。
在第十七方面的延续中，本发明进一步涉及与SEQ ID NO:138具有至少85％的序列一致性的多肽，这些多肽具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性。在一个实施例中，该多肽与SEQ IDNO:138具有至少86％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与 SEQ ID NO:138具有至少87％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:138具有至少88％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:138 具有至少89％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:138具有至少90％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQID NO:138具有至少91％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:138具有至少92％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:138具有至少93％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:138具有至少94％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:138具有至少95％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQID NO:138具有至少96％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:138具有至少97％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与 SEQ ID NO:138具有至少98％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:138具有至少99％的序列一致性。
在一个实施例中，这些多肽与SEQ ID NO:138的成熟多肽相差多达46个氨基酸，例如1与46个之间的氨基酸，如1-45、1-40、1-35、1-30、1-25、1-20、1-15、 1-10或1-5个氨基酸，或1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、 16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、38、39、40、41、42、43、44、45或46个氨基酸。在一个实施例中，该多肽具有SEQ ID NO:138的多肽的至少60％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、或至少100％的活性。
在一个实施例中，该多肽优选地包括SEQ ID NO:137和/或SEQ ID NO:138的氨基酸序列或其等位基因变体，或由其组成；包括SEQ ID NO:137和/或SEQ ID NO: 138的氨基酸序列和N-末端和/或C-末端His-标签和/或HQ-标签；或是其片段，该片段具有阿拉伯呋喃糖苷酶活并且具有该成熟多肽的至少90％，如至少91％、至少 92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少 99％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:138的成熟多肽或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:137的氨基酸1至309或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:138的氨基酸1至309或由其组成。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在第十七方面的延续中，本发明涉及具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的多肽，该多肽由以下多核苷酸编码，该多核苷酸在高严格条件或非常高严格条件下与(i)SEQ ID NO:136的成熟多肽编码序列或(ii)(i)的全长补体杂交。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在第十七方面的延续中，本发明涉及由以下多核苷酸编码的具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的多肽，该多核苷酸与SEQ ID NO:136的成熟多肽编码序列或其cDNA 序列具有至少85％，例如至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列一致性。在一个另外的实施例中，该多肽已经被分离。
在第十七方面的延续中，本发明涉及具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的SEQ ID NO:138的变体，这些变体包括在一个或多个(例如，若干个)位置处的一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，在SEQ ID NO:138中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合的位置的数目不超过46，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、 19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、 37、38、39、40、41、42、43、44、45或46个。在一个实施例中，在SEQ ID NO: 138中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合的位置的数目不超过10，例如1、2、3、4、5、6、7、8、 9或10个。在另一个实施例中，在SEQ ID NO:138中的取代、缺失和/或插入的数目不超过10，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在一个另外的实施例中， SEQ ID NO:138中取代，优选保守取代的数目不超过10，例如1、2、3、4、5、6、 7、8、9或10个。在一个实施例中，该变体具有SEQ ID NO:138的多肽的至少60％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、或至少100％的活性。在本发明的第二方面中描述了氨基酸变化和保守取代的实例。
在一个实施例中，第十七方面的多肽包括基序
[H/Y][L/M]F[F/S][A/C/H/S/T/V][A/D/G/N/R]D[D/E/N]G(SEQ ID NO:1)，优选基序[H/Y]LF[F/S][A/S/V][A/D/G]DNG(SEQ ID NO:2)，更优选基序
YLFF[A/V][A/G]DNG(SEQ ID NO:3)，或甚至更优选基序YLFFAGDNG(SEQ ID NO:4)。
在第十八方面，本发明涉及具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且与SEQ ID NO:140 的成熟多肽具有至少89％，例如至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％的序列一致性的多肽，这些多肽具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性。在一个实施例中，这些多肽与SEQ ID NO:140的成熟多肽相差多达33个氨基酸，例如1和33个之间的氨基酸，例如1-30、 1-25、1-20、1-15、1-10或1-5个氨基酸，或1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、 12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32或33个氨基酸。
在第十八方面的延续中，本发明进一步涉及与SEQ ID NO:141具有至少89％的序列一致性的多肽，这些多肽具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性。在一个实施例中，该多肽与SEQ IDNO:141具有至少90％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与 SEQ ID NO:141具有至少91％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:141具有至少92％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:141 具有至少93％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:141具有至少94％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQID NO:141具有至少95％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:141具有至少96％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:141具有至少97％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:141具有至少98％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:141具有至少99％的序列一致性。
在一个实施例中，这些多肽与SEQ ID NO:141的成熟多肽相差多达33个氨基酸，例如1和33个之间的氨基酸，例如1-30、1-25、1-20、1-15、1-10或1-5个氨基酸，或1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、 19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32或33个氨基酸。在一个实施例中，这些多肽与SEQ ID NO:144的成熟多肽相差多达1和33个氨基酸，如1-30、1-25、1-20、1-15、1-10或1-5个氨基酸，或1、2、3、4、5、6、7、8、9、 10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、 28、29、30、31、32或33个氨基酸。在一个实施例中，该多肽具有SEQ ID NO:141 的多肽的至少60％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、或至少100％的活性。
在一个实施例中，该多肽优选地包括SEQ ID NO:140和/或SEQ ID NO:141的氨基酸序列或其等位基因变体，或由其组成；包括SEQ ID NO:140和/或SEQ ID NO: 141的氨基酸序列和N-末端和/或C-末端His-标签和/或HQ-标签，如SEQ ID NO: 144；或是其片段，该片段具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且具有该成熟多肽的至少 90％，如至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少 97％、至少98％或至少99％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:140 的成熟多肽或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:143的成熟多肽或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQID NO:140的氨基酸1至 304或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:141的氨基酸1至 304或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:143的氨基酸1至312或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:144的氨基酸1至 312或由其组成。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在第十八方面的延续中，本发明涉及具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的多肽，该多肽由以下多核苷酸编码，该多核苷酸在非常高严格条件下与(i)SEQ ID NO:139的成熟多肽编码序列或(ii)(i)的全长补体杂交。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在第十八方面的延续中，本发明涉及由以下多核苷酸编码的具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的多肽，该多核苷酸与SEQ ID NO:139的成熟多肽编码序列或其cDNA 序列具有至少89％，例如至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列一致性。在一个另外的实施例中，该多肽已经被分离。
在第十八方面的延续中，本发明涉及具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的SEQ ID NO:141的变体，这些变体包括在一个或多个(例如，若干个)位置处的一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，SEQ ID NO:141中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合的位置的数目不超过 33，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、 19、20、21、22、23、24、24、25、26、27、28、29、30、31、32或33个。在一个实施例中，在SEQ ID NO:141中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合的位置的数目不超过10，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在另一个实施例中，在SEQ ID NO:141 中的取代、缺失和/或插入的数目不超过10，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或 10个。在一个另外的实施例中，SEQ ID NO:141中取代，优选保守取代的数目不超过10，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在一个实施例中，该变体具有SEQ ID NO:141的多肽的至少60％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、或至少100％的活性。在本发明的第二方面中描述了氨基酸变化和保守取代的实例。
在一个实施例中，第十八方面的多肽包括基序
[H/Y][L/M]F[F/S][A/C/H/S/T/V][A/D/G/N/R]D[D/E/N]G(SEQ ID NO:1)，优选基序[H/Y]LF[F/S][A/S/V][A/D/G]DNG(SEQ ID NO:2)，更优选基序
YLFF[A/V][A/G]DNG(SEQ ID NO:3)，或甚至更优选基序YLFFAGDNG(SEQ ID NO:4)。
在第十九方面，本发明涉及具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且与SEQ ID NO:146 的成熟多肽具有至少86％，例如至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％的序列一致性的多肽，这些多肽具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性。在一个实施例中，这些多肽与SEQ ID NO:146的成熟多肽相差多达42个氨基酸，例如1与42个之间的氨基酸，如1-40、1-35、1-30、1-25、1-20、1-15、1-10或1-5 个氨基酸，或1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、 36、37、38、39、40、41或42个氨基酸。
在第十九方面的延续中，本发明进一步涉及与SEQ ID NO:147具有至少86％的序列一致性的多肽，这些多肽具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性。在一个实施例中，该多肽与SEQ IDNO:147具有至少87％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与 SEQ ID NO:147具有至少88％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:147具有至少89％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:147 具有至少90％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:147具有至少91％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQID NO:147具有至少92％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:147具有至少93％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:147具有至少94％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:147具有至少95％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:147具有至少96％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQID NO:147具有至少97％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:147具有至少98％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与 SEQ ID NO:147具有至少99％的序列一致性。
在一个实施例中，这些多肽与SEQ ID NO:147相差多达42个氨基酸，例如1 与42个之间的氨基酸，如42个氨基酸，如1-40、1-35、1-30、1-25、1-20、1-15、 1-10或1-5个氨基酸，或1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、 16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、 34、35、36、37、38、39、40、41或42个氨基酸。在一个实施例中，该多肽具有 SEQ ID NO:147的多肽的至少60％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、或至少100％的活性。
在一个实施例中，该多肽优选地包括SEQ ID NO:146和/或SEQ ID NO:147的氨基酸序列或其等位基因变体，或由其组成；包括SEQ ID NO:146和/或SEQ ID NO: 147的氨基酸序列和N-末端和/或C-末端His-标签和/或HQ-标签；或是其片段，该片段具有阿拉伯呋喃糖苷酶活并且具有该成熟多肽的至少90％，如至少91％、至少 92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少 99％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:147的成熟多肽或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:146的氨基酸1至302或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:147的氨基酸1至302或由其组成。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在第十九方面的延续中，本发明涉及具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的多肽，该多肽由以下多核苷酸编码，该多核苷酸在高严格条件或非常高严格条件下与(i)SEQ ID NO:145的成熟多肽编码序列或(ii)(i)的全长补体杂交。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在第十九方面的延续中，本发明涉及由以下多核苷酸编码的具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的多肽，该多核苷酸与SEQ ID NO:145的成熟多肽编码序列或其cDNA 序列具有至少86％，例如至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列一致性。在一个另外的实施例中，该多肽已经被分离。
在第十九方面的延续中，本发明涉及具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的SEQ ID NO:147的变体，这些变体包括在一个或多个(例如，若干个)位置处的一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，在SEQ ID NO:147中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合的位置的数目不超过42，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、 19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、 37、38、39、40、41或42个。在一个实施例中，在SEQ ID NO:147中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合的位置的数目不超过10，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在另一个实施例中，在SEQ ID NO:147中的取代、缺失和/或插入的数目不超过10，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在一个另外的实施例中，SEQ ID NO:147 中取代，优选保守取代的数目不超过10，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10 个。在一个实施例中，该变体具有SEQ ID NO:147的多肽的至少60％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、或至少100％的活性。在本发明的第二方面中描述了氨基酸变化和保守取代的实例。
在一个实施例中，第十九方面的多肽包括基序
[H/Y][L/M]F[F/S][A/C/H/S/T/V][A/D/G/N/R]D[D/E/N]G(SEQ ID NO:1)，优选基序[H/Y]LF[F/S][A/S/V][A/D/G]DNG(SEQ ID NO:2)，更优选基序
YLFF[A/V][A/G]DNG(SEQ ID NO:3)，或甚至更优选基序YLFFAGDNG(SEQ ID NO:4)。
在第二十方面，本发明涉及具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且与SEQ ID NO:155 的成熟多肽具有至少96.4％，例如至少96.7％、至少97.0％、至少97.3％、至少97.6％、至少97.9％、至少98.2％、至少98.5％、至少98.8％、至少91.1％、至少99.4％、、至少99.7％的序列一致性的多肽，这些多肽具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性。在一个实施例中，这些多肽与SEQID NO:155的成熟多肽相差多达11个氨基酸，例如1与 11个之间的氨基酸，如1、2、3、4、5、6、7、8、9、10或11个氨基酸。在一个实施例中，该多肽具有SEQ ID NO:155的多肽的至少60％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、或至少100％的活性。
在第二十方面的延续中，本发明进一步涉及与SEQ ID NO:156具有至少96.4％的序列一致性的多肽，这些多肽具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性。在一个实施例中，该多肽与SEQID NO:156具有至少96.7％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与 SEQ ID NO:156具有至少97.0％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:156具有至少97.3％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:156 具有至少97.6％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:156具有至少97.9％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:156具有至少98.2％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ IDNO:156具有至少98.5％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:156具有至少98.8％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:156具有至少99.1％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:156具有至少99.4％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:156具有至少99.7％的序列一致性。
在一个实施例中，这些多肽与SEQ ID NO:156相差多达11个氨基酸，例如1 与11个之间的氨基酸，如1、2、3、4、5、6、7、8、9、10或11个氨基酸。
在一个实施例中，该多肽优选地包括SEQ ID NO:155和/或SEQ ID NO:156的氨基酸序列或其等位基因变体，或由其组成；包括SEQ ID NO:155和/或SEQ ID NO: 156的氨基酸序列和N-末端和/或C-末端His-标签和/或HQ-标签；或是其片段，该片段具有阿拉伯呋喃糖苷酶活并且具有该成熟多肽的至少90％，如至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少 99％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:156的成熟多肽或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:155的氨基酸1至316或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:156的氨基酸1至316或由其组成。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在第二十方面的延续中，本发明涉及具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的多肽，该多肽由以下多核苷酸编码，该多核苷酸在非常高严格条件下与(i)SEQ ID NO:154的成熟多肽编码序列或(ii)(i)的全长补体杂交。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在第二十方面的延续中，本发明涉及由以下多核苷酸编码的具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的多肽，该多核苷酸与SEQ ID NO:154的成熟多肽编码序列或其cDNA 序列具有至少96.4％，例如至少96.7％、至少97.0％、至少97.3％、至少97.6％、至少97.9％、至少98.2％、至少98.5％、至少98.8％、至少91.1％、至少99.4％、至少 99.7％、或100％的序列一致性。在一个另外的实施例中，该多肽已经被分离。
在第二十方面的延续中，本发明涉及具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的SEQ ID NO:156的变体，这些变体包括在一个或多个(例如，若干个)位置处的一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，在SEQ ID NO:156中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合的位置的数目不超过10，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在另一个实施例中，在SEQ ID NO:156中的取代、缺失和/或插入的数目不超过10，例如1、2、3、4、5、6、7、 8、9或10个。在一个另外的实施例中，SEQ ID NO:156中取代，优选保守取代的数目不超过10，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在一个实施例中，该变体具有SEQID NO:155的多肽的至少60％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、或至少100％的活性。在本发明的第二方面中描述了氨基酸变化和保守取代的实例。
在一个实施例中，第二十方面的多肽包括基序
[H/Y][L/M]F[F/S][A/C/H/S/T/V][A/D/G/N/R]D[D/E/N]G(SEQ ID NO:1)，优选基序[H/Y]LF[F/S][A/S/V][A/D/G]DNG(SEQ ID NO:2)，更优选基序[H/Y]LFSSDDNG (SEQ IDNO:5)，或甚至更优选基序YLFSSDDNG(SEQ ID NO:6)。
在第二十一方面，本发明涉及具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且与SEQ ID NO: 161的成熟多肽具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％的序列一致性的多肽，这些多肽具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性。在一个实施例中，这些多肽与SEQ ID NO:161的成熟多肽相差多达50个氨基酸，例如1与50个之间的氨基酸，如1-45、1-40、1-35、1-30、 1-25、1-20、1-15、1-10或1-5个氨基酸，或1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、 12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、 30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、 48、49或50个氨基酸。
在第二十一方面的延续中，本发明进一步涉及与SEQ ID NO:162具有至少80％的序列一致性的多肽，这些多肽具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性。在一个实施例中，该多肽与SEQID NO:162具有至少85％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与 SEQ ID NO:162具有至少86％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:162具有至少87％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:162 具有至少88％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:162具有至少89％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQID NO:162具有至少90％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:162具有至少91％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:162具有至少92％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:162具有至少93％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:162具有至少94％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQID NO:162具有至少95％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:162具有至少96％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与 SEQ ID NO:162具有至少97％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:162具有至少98％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:162 具有至少99％的序列一致性。
在一个实施例中，这些多肽与SEQ ID NO:162相差多达50个氨基酸，例如1 与50个之间的氨基酸，如1-45、1-40、1-35、1-30、1-25、1-20、1-15、1-10或1-5 个氨基酸，或1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、 18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49或50个氨基酸。在一个实施例中，该多肽具有SEQ ID NO:162的多肽的至少60％、至少70％、至少 75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、或至少100％的活性。
在一个实施例中，该多肽优选地包括SEQ ID NO:161和/或SEQ ID NO:162的氨基酸序列或其等位基因变体，或由其组成；包括SEQ ID NO:161和/或SEQ ID NO: 162的氨基酸序列和N-末端和/或C-末端His-标签和/或HQ-标签；或是其片段，该片段具有阿拉伯呋喃糖苷酶活并且具有该成熟多肽的至少90％，如至少91％、至少 92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少 99％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:162的成熟多肽或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:161的氨基酸1至303或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:162的氨基酸1至303或由其组成。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在第二十一方面的延续中，本发明涉及具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的多肽，该多肽由以下多核苷酸编码，该多核苷酸在高严格条件或非常高严格条件下与(i) SEQ ID NO:160的成熟多肽编码序列或(ii)(i)的全长补体杂交。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在第二十一方面的延续中，本发明涉及由以下多核苷酸编码的具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的多肽，该多核苷酸与SEQ ID NO:160的成熟多肽编码序列或其cDNA 序列具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列一致性。在一个另外的实施例中，该多肽已经被分离。
在第二十一方面的延续中，本发明涉及具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的SEQ ID NO:162的变体，这些变体包括在一个或多个(例如，若干个)位置处的一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，在SEQ ID NO:162中包括一个或多个氨基酸取代、和/ 或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合的位置的数目不超过50，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、 18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、 36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49或50个。在一个实施例中，在SEQ IDNO:162中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合的位置的数目不超过10，例如1、 2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在另一个实施例中，在SEQ ID NO:162中的取代、缺失和/或插入的数目不超过10，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在一个另外的实施例中，SEQ ID NO:162中取代，优选保守取代的数目不超过10，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在一个实施例中，该变体具有SEQ ID NO:162的多肽的至少60％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、或至少100％的活性。在本发明的第二方面中描述了氨基酸变化和保守取代的实例。
在一个实施例中，第二十一方面的多肽包括基序
[H/Y][L/M]F[F/S][A/C/H/S/T/V][A/D/G/N/R]D[D/E/N]G(SEQ ID NO:1)，优选基序[H/Y]LF[F/S][A/S/V][A/D/G]DNG(SEQ ID NO:2)，更优选基序
YLFF[A/V][A/G]DNG(SEQ ID NO:3)，或甚至更优选基序YLFFAGDNG(SEQ ID NO:4)。
在第二十二方面，本发明涉及具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且与SEQ ID NO: 164的成熟多肽具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％的序列一致性的多肽，这些多肽具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性。在一个实施例中，这些多肽与SEQ ID NO:164的成熟多肽相差多达50个氨基酸，例如1与50个之间的氨基酸，如1-45、1-40、1-35、1-30、 1-25、1-20、1-15、1-10或1-5个氨基酸，或1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、 12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、 30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、 48、49或50个氨基酸。
在第二十二方面的延续中，本发明进一步涉及与SEQ ID NO:165具有至少80％的序列一致性的多肽，这些多肽具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性。在一个实施例中，该多肽与SEQID NO:165具有至少85％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与 SEQ ID NO:165具有至少86％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:165具有至少87％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:165 具有至少88％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:165具有至少89％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQID NO:165具有至少90％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:165具有至少91％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:165具有至少92％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:165具有至少93％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:165具有至少94％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQID NO:165具有至少95％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:165具有至少96％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与 SEQ ID NO:165具有至少97％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:165具有至少98％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:165 具有至少99％的序列一致性。
在一个实施例中，这些多肽与SEQ ID NO:165相差多达50个氨基酸，例如1 与50个之间的氨基酸，如1-45、1-40、1-35、1-30、1-25、1-20、1-15、1-10或1-5 个氨基酸，或1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、 18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49或50个氨基酸。在一个实施例中，该多肽具有SEQ ID NO:165的多肽的至少60％、至少70％、至少 75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、或至少100％的活性。
在一个实施例中，该多肽优选地包括SEQ ID NO:164和/或SEQ ID NO:165的氨基酸序列或其等位基因变体，或由其组成；包括SEQ ID NO:164和/或SEQ ID NO: 165的氨基酸序列和N-末端和/或C-末端His-标签和/或HQ-标签；或是其片段，该片段具有阿拉伯呋喃糖苷酶活并且具有该成熟多肽的至少90％，如至少91％、至少 92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少 99％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:165的成熟多肽或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:164的氨基酸1至361或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:165的氨基酸1至361或由其组成。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在第二十二方面的延续中，本发明涉及具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的多肽，该多肽由以下多核苷酸编码，该多核苷酸在高严格条件或非常高严格条件下与(i) SEQ ID NO:163的成熟多肽编码序列或(ii)(i)的全长补体杂交。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在第二十二方面的延续中，本发明涉及由以下多核苷酸编码的具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的多肽，该多核苷酸与SEQ ID NO:163的成熟多肽编码序列或其cDNA 序列具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列一致性。在一个另外的实施例中，该多肽已经被分离。
在第二十二方面的延续中，本发明涉及具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的SEQ ID NO:165的变体，这些变体包括在一个或多个(例如，若干个)位置处的一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，在SEQ ID NO:165中包括一个或多个氨基酸取代、和/ 或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合的位置的数目不超过50，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、 18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、 36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49或50个。在一个实施例中，在SEQ IDNO:165中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合的位置的数目不超过10，例如1、 2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在另一个实施例中，在SEQ ID NO:165中的取代、缺失和/或插入的数目不超过10，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在一个另外的实施例中，SEQ ID NO:165中取代，优选保守取代的数目不超过10，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在一个实施例中，该变体具有SEQ ID NO:165的多肽的至少60％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、或至少100％的活性。在本发明的第二方面中描述了氨基酸变化和保守取代的实例。
在一个实施例中，第二十二方面的多肽包括基序
[H/Y][L/M]F[F/S][A/C/H/S/T/V][A/D/G/N/R]D[D/E/N]G(SEQ ID NO:1)，优选基序[H/Y]LF[F/S][A/S/V][A/D/G]DNG(SEQ ID NO:2)，更优选基序
YLFF[A/V][A/G]DNG(SEQ ID NO:3)，或甚至更优选基序YLFFAGDNG(SEQ ID NO:4)。
在第二十三方面，本发明涉及具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且与SEQ ID NO: 167的成熟多肽具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％的序列一致性的多肽，这些多肽具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性。在一个实施例中，这些多肽与SEQ ID NO:167的成熟多肽相差多达50个氨基酸，例如1与50个之间的氨基酸，如1-45、1-40、1-35、1-30、 1-25、1-20、1-15、1-10或1-5个氨基酸，或1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、 12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、 30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、 48、49或50个氨基酸。
在第二十三方面的延续中，本发明进一步涉及与SEQ ID NO:168具有至少80％的序列一致性的多肽，这些多肽具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性。在一个实施例中，该多肽与SEQID NO:168具有至少85％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与 SEQ ID NO:168具有至少86％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:168具有至少87％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:168 具有至少88％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:168具有至少89％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQID NO:168具有至少90％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:168具有至少91％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:168具有至少92％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:168具有至少93％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:168具有至少94％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQID NO:168具有至少95％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:168具有至少96％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与 SEQ ID NO:168具有至少97％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:168具有至少98％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:168 具有至少99％的序列一致性。
在一个实施例中，这些多肽与SEQ ID NO:168相差多达50个氨基酸，例如1 与50个之间的氨基酸，如1-45、1-40、1-35、1-30、1-25、1-20、1-15、1-10或1-5 个氨基酸，或1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、 18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49或50个氨基酸。在一个实施例中，该多肽具有SEQ ID NO:168的多肽的至少60％、至少70％、至少 75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、或至少100％的活性。
在一个实施例中，该多肽优选地包括SEQ ID NO:167和/或SEQ ID NO:168的氨基酸序列或其等位基因变体，或由其组成；包括SEQ ID NO:167和/或SEQ ID NO: 168的氨基酸序列和N-末端和/或C-末端His-标签和/或HQ-标签；或是其片段，该片段具有阿拉伯呋喃糖苷酶活并且具有该成熟多肽的至少90％，如至少91％、至少 92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少 99％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:168的成熟多肽或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:167的氨基酸1至373或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:168的氨基酸1至373或由其组成。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在第二十三方面的延续中，本发明涉及具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的多肽，该多肽由以下多核苷酸编码，该多核苷酸在高严格条件或非常高严格条件下与(i) SEQ ID NO:166的成熟多肽编码序列或(ii)(i)的全长补体杂交。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在第二十三方面的延续中，本发明涉及由以下多核苷酸编码的具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的多肽，该多核苷酸与SEQ ID NO:166的成熟多肽编码序列或其cDNA 序列具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列一致性。在一个另外的实施例中，该多肽已经被分离。
在第二十三方面的延续中，本发明涉及具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的SEQ ID NO:168的变体，这些变体包括在一个或多个(例如，若干个)位置处的一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，在SEQ ID NO:168中包括一个或多个氨基酸取代、和/ 或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合的位置的数目不超过50，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、 18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、 36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49或50个。在一个实施例中，在SEQ IDNO:168中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合的位置的数目不超过10，例如1、 2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在另一个实施例中，在SEQ ID NO:168中的取代、缺失和/或插入的数目不超过10，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在一个另外的实施例中，SEQ ID NO:168中取代，优选保守取代的数目不超过10，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在一个实施例中，该变体具有SEQ ID NO:168的多肽的至少60％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、或至少100％的活性。在本发明的第二方面中描述了氨基酸变化和保守取代的实例。
在一个实施例中，第二十三方面的多肽包括基序
[H/Y][L/M]F[F/S][A/C/H/S/T/V][A/D/G/N/R]D[D/E/N]G(SEQ ID NO:1)，优选基序[H/Y]LF[F/S][A/S/V][A/D/G]DNG(SEQ ID NO:2)，更优选基序
YLFF[A/V][A/G]DNG(SEQ ID NO:3)，或甚至更优选基序YLFFAGDNG(SEQ ID NO:4)。
在第二十四方面，本发明涉及具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且与SEQ ID NO: 170的成熟多肽具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％的序列一致性的多肽，这些多肽具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性。在一个实施例中，这些多肽与SEQ ID NO:170的成熟多肽相差多达50个氨基酸，例如1与50个之间的氨基酸，如1-45、1-40、1-35、1-30、 1-25、1-20、1-15、1-10或1-5个氨基酸，或1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、 12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、 30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、 48、49或50个氨基酸。
在第二十四方面的延续中，本发明进一步涉及与SEQ ID NO:171具有至少80％的序列一致性的多肽，这些多肽具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性。在一个实施例中，该多肽与SEQID NO:171具有至少85％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与 SEQ ID NO:171具有至少86％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:171具有至少87％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:171 具有至少88％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:171具有至少89％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQID NO:171具有至少90％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:171具有至少91％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:171具有至少92％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:171具有至少93％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:171具有至少94％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQID NO:171具有至少95％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:171具有至少96％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与 SEQ ID NO:171具有至少97％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:171具有至少98％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:171 具有至少99％的序列一致性。
在一个实施例中，这些多肽与SEQ ID NO:171相差多达50个氨基酸，例如1 与50个之间的氨基酸，如1-45、1-40、1-35、1-30、1-25、1-20、1-15、1-10或1-5 个氨基酸，或1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、 18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49或50个氨基酸。在一个实施例中，该多肽具有SEQ ID NO:171的多肽的至少60％、至少70％、至少 75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、或至少100％的活性。
在一个实施例中，该多肽优选地包括SEQ ID NO:170和/或SEQ ID NO:171的氨基酸序列或其等位基因变体，或由其组成；包括SEQ ID NO:170和/或SEQ ID NO: 171的氨基酸序列和N-末端和/或C-末端His-标签和/或HQ-标签；或是其片段，该片段具有阿拉伯呋喃糖苷酶活并且具有该成熟多肽的至少90％，如至少91％、至少 92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少 99％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:171的成熟多肽或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:170的氨基酸1至302或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:171的氨基酸1至302或由其组成。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在第二十四方面的延续中，本发明涉及具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的多肽，该多肽由以下多核苷酸编码，该多核苷酸在高严格条件或非常高严格条件下与(i) SEQ ID NO:169的成熟多肽编码序列或(ii)(i)的全长补体杂交。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在第二十四方面的延续中，本发明涉及由以下多核苷酸编码的具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的多肽，该多核苷酸与SEQ ID NO:169的成熟多肽编码序列或其cDNA 序列具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列一致性。在一个另外的实施例中，该多肽已经被分离。
在第二十四方面的延续中，本发明涉及具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的SEQ ID NO:171的变体，这些变体包括在一个或多个(例如，若干个)位置处的一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，在SEQ ID NO:171中包括一个或多个氨基酸取代、和/ 或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合的位置的数目不超过50，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、 18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、 36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49或50个。在一个实施例中，在SEQ IDNO:171中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合的位置的数目不超过10，例如1、 2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在另一个实施例中，在SEQ ID NO:171中的取代、缺失和/或插入的数目不超过10，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在一个另外的实施例中，SEQ ID NO:171中取代，优选保守取代的数目不超过10，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在一个实施例中，该变体具有SEQ ID NO:171的多肽的至少60％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、或至少100％的活性。在本发明的第二方面中描述了氨基酸变化和保守取代的实例。
在一个实施例中，第二十四方面的多肽包括基序
[H/Y][L/M]F[F/S][A/C/H/S/T/V][A/D/G/N/R]D[D/E/N]G(SEQ ID NO:1)，优选基序[H/Y]LF[F/S][A/S/V][A/D/G]DNG(SEQ ID NO:2)，更优选基序
YLFF[A/V][A/G]DNG(SEQ ID NO:3)，或甚至更优选基序YLFFAGDNG(SEQ ID NO:4)。
在第二十五方面，本发明涉及具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且与SEQ ID NO: 173的成熟多肽具有至少82％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％的序列一致性的多肽，这些多肽具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性。在一个实施例中，这些多肽与SEQ ID NO:173的成熟多肽相差多达50个氨基酸，例如1与50个之间的氨基酸，如1-45、1-40、1-35、1-30、 1-25、1-20、1-15、1-10或1-5个氨基酸，或1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、 12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、 30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、 48、49或50个氨基酸。
在第二十五方面的延续中，本发明进一步涉及与SEQ ID NO:174具有至少82％的序列一致性的多肽，这些多肽具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性。在一个实施例中，该多肽与SEQID NO:174具有至少85％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与 SEQ ID NO:174具有至少86％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:174具有至少87％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:174 具有至少88％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:174具有至少89％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQID NO:174具有至少90％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:174具有至少91％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:174具有至少92％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:174具有至少93％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:174具有至少94％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQID NO:174具有至少95％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:174具有至少96％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与 SEQ ID NO:174具有至少97％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:174具有至少98％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:174 具有至少99％的序列一致性。
在一个实施例中，这些多肽与SEQ ID NO:174相差多达50个氨基酸，例如1 与50个之间的氨基酸，如1-45、1-40、1-35、1-30、1-25、1-20、1-15、1-10或1-5 个氨基酸，或1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、 18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49或50个氨基酸。在一个实施例中，该多肽具有SEQ ID NO:174的多肽的至少60％、至少70％、至少 75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、或至少100％的活性。
在一个实施例中，该多肽优选地包括SEQ ID NO:173和/或SEQ ID NO:174的氨基酸序列或其等位基因变体，或由其组成；包括SEQ ID NO:173和/或SEQ ID NO: 174的氨基酸序列和N-末端和/或C-末端His-标签和/或HQ-标签；或是其片段，该片段具有阿拉伯呋喃糖苷酶活并且具有该成熟多肽的至少90％，如至少91％、至少 92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少 99％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:174的成熟多肽或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:173的氨基酸1至364或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:174的氨基酸1至364或由其组成。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在第二十五方面的延续中，本发明涉及具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的多肽，该多肽由以下多核苷酸编码，该多核苷酸在高严格条件或非常高严格条件下与(i) SEQ ID NO:172的成熟多肽编码序列或(ii)(i)的全长补体杂交。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在第二十五方面的延续中，本发明涉及由以下多核苷酸编码的具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的多肽，该多核苷酸与SEQ ID NO:172的成熟多肽编码序列或其cDNA 序列具有至少82％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列一致性。在一个另外的实施例中，该多肽已经被分离。
在第二十五方面的延续中，本发明涉及具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的SEQ ID NO:174的变体，这些变体包括在一个或多个(例如，若干个)位置处的一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，在SEQ ID NO:174中包括一个或多个氨基酸取代、和/ 或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合的位置的数目不超过50，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、 18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、 36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49或50个。在一个实施例中，在SEQ IDNO:174中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合的位置的数目不超过10，例如1、 2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在另一个实施例中，在SEQ ID NO:174中的取代、缺失和/或插入的数目不超过10，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在一个另外的实施例中，SEQ ID NO:174中取代，优选保守取代的数目不超过10，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在一个实施例中，该变体具有SEQ ID NO:174的多肽的至少60％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、或至少100％的活性。在本发明的第二方面中描述了氨基酸变化和保守取代的实例。
在一个实施例中，第二十五方面的多肽包括基序
[H/Y][L/M]F[F/S][A/C/H/S/T/V][A/D/G/N/R]D[D/E/N]G(SEQ ID NO:1)，优选基序[H/Y]LF[F/S][A/S/V][A/D/G]DNG(SEQ ID NO:2)，更优选基序
YLFF[A/V][A/G]DNG(SEQ ID NO:3)，或甚至更优选基序YLFFAGDNG(SEQ ID NO:4)。
具有木聚糖酶活性的多肽
在第二十六方面，本发明涉及具有木聚糖酶活性并且与SEQ ID NO:83的成熟多肽具有至少84％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％的序列一致性的多肽，这些多肽具有木聚糖酶活性。在一个实施例中，这些多肽与SEQ IDNO:83的成熟多肽相差多达48个氨基酸，例如1与48个之间的氨基酸，如1-45、1-40、1-35、1-30、1-25、1-20、1-15、1-10 或1-5个氨基酸，或1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、 17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、 35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47或48个氨基酸。
在第二十六方面的延续中，本发明进一步涉及与SEQ ID NO:84具有至少84％的序列一致性的多肽，这些多肽具有木聚糖酶活性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:84具有至少85％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:84 具有至少86％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:84具有至少 87％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:84具有至少88％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:84具有至少89％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:84具有至少90％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:84具有至少91％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:84具有至少92％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与 SEQ ID NO:84具有至少93％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQID NO: 84具有至少94％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:84具有至少95％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:84具有至少96％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:84具有至少97％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:84具有至少98％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:84具有至少99％的序列一致性。
在一个实施例中，这些多肽与SEQ ID NO:84相差多达48个氨基酸，例如1 与48个之间的氨基酸，如1-45、1-40、1-35、1-30、1-25、1-20、1-15、1-10或1-5 个氨基酸，或1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、 18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、 36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47或48个氨基酸。在一个实施例中，这些多肽与SEQ ID NO:87相差多达48个氨基酸，例如1与48个之间的氨基酸，如1-45、1-40、1-35、1-30、1-25、1-20、1-15、1-10或1-5个氨基酸，或1、 2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、 22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、 40、41、42、43、44、45、46、47或48个氨基酸。在一个实施例中，该多肽具有 SEQ IDNO:84的多肽的至少60％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、或至少100％的活性。
在一个实施例中，该多肽优选地包括SEQ ID NO:83和/或SEQ ID NO:84的氨基酸序列或其等位基因变体，或由其组成；包括SEQ ID NO:84的氨基酸序列和 N-末端和/或C-末端His-标签和/或HQ-标签，如SEQ ID NO:86和/或SEQ ID NO: 87；或是其片段，该片段具有木聚糖酶活性且具有至少90％，如至少91％、至少 92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少 99％的成熟多肽的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:83的成熟多肽或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:86的成熟多肽或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:83的氨基酸1至299或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:84的氨基酸1至299或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:86的氨基酸1至307或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:87的氨基酸1至307或由其组成。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在第二十六方面的延续中，本发明涉及具有木聚糖酶活性的多肽，该多肽由以下多核苷酸编码，该多核苷酸在高严格条件或非常高严格条件下与(i)SEQ ID NO: 82的成熟多肽编码序列或(ii)(i)的全长补体杂交。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在第二十六方面的延续中，本发明涉及由以下多核苷酸编码的具有木聚糖酶活性的多肽，该多核苷酸与SEQ ID NO:82的成熟多肽编码序列或其cDNA序列具有至少84％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列一致性。在一个另外的实施例中，该多肽已经被分离。
在第二十六方面的延续中，本发明涉及具有木聚糖酶活性的SEQ ID NO:84的变体，这些变体包括在一个或多个(例如，若干个)位置处的一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，在SEQID NO:84中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合的位置的数目不超过48，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、 20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、 38、39、40、41、42、43、44、45、46、47或48个。在另一个实施例中，在SEQ ID NO:84中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合的位置的数目是在1与48之间，如1-45、1-40、 1-35、1-30、1-25、1-20、1-15、1-10或1-5个位置。在一个实施例中，在SEQ ID NO: 84中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合的位置的数目不超过10，例如1、2、3、4、5、6、7、8、 9或10个。在另一个实施例中，在SEQ ID NO:84中的取代、缺失和/或插入的数目不超过10，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在一个另外的实施例中， SEQ ID NO:84中取代，优选保守取代的数目不超过10，例如1、2、3、4、5、6、 7、8、9或10个。在一个实施例中，该变体具有SEQ ID NO:84的多肽的至少60％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、或至少100％的活性。在本发明的第二方面中描述了氨基酸变化和保守取代的实例。
在第二十七方面，本发明涉及具有木聚糖酶活性并且与SEQ ID NO:98的成熟多肽具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％的序列一致性的多肽，这些多肽具有木聚糖酶活性。在一个实施例中，这些多肽与SEQ IDNO:98的成熟多肽相差多达40个氨基酸，例如1与40个之间的氨基酸，如1-35、1-30、1-25、1-20、1-15、1-10或1-5个氨基酸，或1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、 19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、 37、38、39或40个氨基酸。
在第二十七方面的延续中，本发明进一步涉及与SEQ ID NO:99具有至少80％的序列一致性的多肽，这些多肽具有木聚糖酶活性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:99具有至少85％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:99 具有至少86％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:99具有至少 87％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:99具有至少88％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:99具有至少89％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:99具有至少90％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:99具有至少91％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:99具有至少92％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与 SEQ ID NO:99具有至少93％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQID NO: 99具有至少94％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:99具有至少95％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:99具有至少96％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:99具有至少97％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:99具有至少98％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:99具有至少99％的序列一致性。
在一个实施例中，这些多肽与SEQ ID NO:99相差多达40个氨基酸，例如1 与40个之间的氨基酸，如1-35、1-30、1-25、1-20、1-15、1-10或1-5个氨基酸，或1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、 21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、 39或40个氨基酸。在一个实施例中，该多肽具有SEQ ID NO:99的多肽的至少60％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、或至少100％的活性。
在一个实施例中，该多肽优选地包括SEQ ID NO:98和/或SEQ ID NO:99的氨基酸序列或其等位基因变体，或由其组成；包括SEQ ID NO:99的氨基酸序列和 N-末端和/或C-末端His-标签和/或HQ-标签；或是其片段，该片段具有木聚糖酶活性且具有至少90％，如至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％的成熟多肽的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:98的成熟多肽或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:98的氨基酸1至203或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括 SEQ ID NO:99的氨基酸1至203或由其组成。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在第二十七方面的延续中，本发明涉及具有木聚糖酶活性的多肽，该多肽由以下多核苷酸编码，该多核苷酸在高严格条件或非常高严格条件下与(i)SEQ ID NO: 97的成熟多肽编码序列或(ii)(i)的全长补体杂交。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在第二十七方面的延续中，本发明涉及由以下多核苷酸编码的具有木聚糖酶活性的多肽，该多核苷酸与SEQ ID NO:97的成熟多肽编码序列或其cDNA序列具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列一致性。在一个另外的实施例中，该多肽已经被分离。
在第二十七方面的延续中，本发明涉及具有木聚糖酶活性的SEQ ID NO:99的变体，这些变体包括在一个或多个(例如，若干个)位置处的一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，在SEQID NO:99中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合的位置的数目不超过40，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、 20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、 38、39或40个。在另一个实施例中，在SEQ ID NO:99中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合的位置的数目是在1与48之间，如1-45、1-40、1-35、1-30、1-25、1-20、1-15、1-10 或1-5个位置。在一个实施例中，在SEQID NO:99中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合的位置的数目不超过10，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在另一个实施例中，在SEQ ID NO:99中的取代、缺失和/或插入的数目不超过10，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在一个另外的实施例中，SEQ ID NO:99中取代，优选保守取代的数目不超过10，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在一个实施例中，该变体具有SEQ ID NO:99的多肽的至少60％、至少70％、至少75％、至少 80％、至少85％、至少90％、至少95％、或至少100％的活性。在本发明的第二方面中描述了氨基酸变化和保守取代的实例。
在第二十八方面，本发明涉及具有木聚糖酶活性并且与SEQ ID NO:101的成熟多肽具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％的序列一致性的多肽，这些多肽具有木聚糖酶活性。在一个实施例中，这些多肽与SEQ IDNO:101的成熟多肽相差多达50个氨基酸，例如1与50个之间的氨基酸，如1-45、1-40、1-35、1-30、1-25、1-20、1-15、1-10 或1-5个氨基酸，或1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、 17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、 35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49或50个氨基酸。
在第二十八方面的延续中，本发明进一步涉及与SEQ ID NO:102具有至少80％的序列一致性的多肽，这些多肽具有木聚糖酶活性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:102具有至少85％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO: 102具有至少86％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:102具有至少87％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:102具有至少88％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:102具有至少89％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:102具有至少90％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:102具有至少91％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:102具有至少92％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:102具有至少93％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:102具有至少94％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与 SEQ IDNO:102具有至少95％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:102具有至少96％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:102 具有至少97％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:102具有至少98％的序列一致性。在一个实施例中，该多肽与SEQ ID NO:102具有至少99％的序列一致性。
在一个实施例中，这些多肽与SEQ ID NO:102相差多达50个氨基酸，例如1 与50个之间的氨基酸，如1-45、1-40、1-35、1-30、1-25、1-20、1-15、1-10或1-5 个氨基酸，或1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、 18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、 36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49或50个氨基酸。在一个实施例中，该多肽具有SEQ ID NO:102的多肽的至少60％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、或至少100％的活性。
在一个实施例中，该多肽优选地包括SEQ ID NO:101和/或SEQ ID NO:102的氨基酸序列或其等位基因变体，或由其组成；包括SEQ ID NO:102的氨基酸序列和N-末端和/或C-末端His-标签和/或HQ-标签；或是其片段，该片段具有木聚糖酶活性且具有至少90％，如至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％的成熟多肽的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:101的成熟多肽或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:101的氨基酸1至203或由其组成。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:102的氨基酸1至203或由其组成。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在第二十八方面的延续中，本发明涉及具有木聚糖酶活性的多肽，该多肽由以下多核苷酸编码，该多核苷酸在高严格条件或非常高严格条件下与(i)SEQ ID NO: 100的成熟多肽编码序列或(ii)(i)的全长补体杂交。在一个实施例中，该多肽已经被分离。
在第二十八方面的延续中，本发明涉及由以下多核苷酸编码的具有木聚糖酶活性的多肽，该多核苷酸与SEQ ID NO:100的成熟多肽编码序列或其cDNA序列具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少 90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少 97％、至少98％、至少99％、或100％的序列一致性。在一个另外的实施例中，该多肽已经被分离。
在第二十八方面的延续中，本发明涉及具有木聚糖酶活性的SEQ ID NO:102 的变体，这些变体包括在一个或多个(例如，若干个)位置处的一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，在SEQID NO:102中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合的位置的数目不超过 40，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、 19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、 37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49或50个。在另一个实施例中，在SEQ ID NO:102中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合的位置的数目是在1与48之间，如1-45、1-40、1-35、1-30、1-25、1-20、1-15、1-10或1-5个位置。在一个实施例中，在SEQ ID NO:102中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合的位置的数目不超过10，例如1、2、 3、4、5、6、7、8、9或10个。在另一个实施例中，在SEQ ID NO:102中的取代、缺失和/或插入的数目不超过10，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在一个另外的实施例中，SEQID NO:102中取代，优选保守取代的数目不超过10，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在一个实施例中，该变体具有SEQ ID NO: 102的多肽的至少60％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、或至少100％的活性。在本发明的第二方面中描述了氨基酸变化和保守取代的实例。
具有阿拉伯呋喃糖苷酶或木聚糖酶活性的多肽的来源
本发明的具有阿拉伯呋喃糖苷酶或木聚糖酶活性的多肽可以从任何属的微生物中获得。出于本发明的目的，如在此结合一种给定的来源使用的术语“从...中获得”应意指由多核苷酸编码的多肽是由该来源或者由其中已经插入来自该来源的多核苷酸的一种菌株产生的。在一个方面中，获得自给定来源的多肽被分泌到细胞外。
该多肽可以是一种真菌多肽。在一个实施例中，该多肽是来自散囊菌目的真菌，或来自曲霉科，或来自青霉属，或来自以下物种：黄灰青霉、草酸青霉、胶囊青霉或暗边青霉。
在一个实施例中，该多肽是来自散囊菌目的真菌，或来自曲霉科，或来自曲霉属，或来自以下物种：棒曲霉、温特曲霉、棘孢曲霉或烟曲霉近缘种。
在一个实施例中，该多肽是来自散囊菌目的真菌，或来自曲霉科，或来自新萨托菌属(Neosartorya)，或来自以下物种：费希新萨托菌。
在一个实施例中，该多肽是来自散囊菌目的真菌，或来自发菌科，或来自踝节菌属，或来自以下物种：褐红篮状菌(Talaromyces pinophilus)。
在一个实施例中，该多肽是来自黑粉菌目(Ustilaginales)的真菌，或来自黑粉菌科(Ustilaginaceae)，或来自黑粉菌属(Ustilago)，或来自以下物种：玉蜀黍黑粉菌(Ustilago maydis)。
在一个实施例中，该多肽是来自子囊菌门的真菌，或来自端梗孢属，或来自以下物种：梭孢端梗霉(Acrophialophora fusispora)。
该多肽可以是细菌多肽。在一个实施例中，该多肽是来自放线菌目的细菌，或来自链霉菌科，或来自链霉菌属，或来自以下物种：硝孢链霉菌(Streptomyces nitrosporeus)或北疆链霉菌。
在一个实施例中，该多肽是来自放线菌目的细菌，或来自链孢子囊菌科，或来自链孢子囊菌属，或来自以下物种：链孢囊菌属物种-60756。
在一个实施例中，该多肽是来自葡萄座腔菌目的真菌，或来自葡萄座腔茵科，或来自毛双孢属，或来自以下物种：龙眼焦腐病菌。
在一个实施例中，该多肽是来自盘菌目的真菌，或来自粪盘菌科，或来自粪盘菌属，或来自以下物种：Ascobolus stictoideus。
在一个实施例中，该多肽是来自格孢腔目的真菌，或来自孢腔菌科(Pleosporaceae)，或来自德氏霉属(Drechslera)或来自以下物种：德氏霉属物种(Drechslera sp)。
在一个实施例中，该多肽是来自微球菌目的细菌，或来自原小单孢菌科(Promicromonosporaceae)，或来自解木聚糖杆菌属(Xylanibacterium)，或来自以下物种：解木聚糖杆菌属物种-61981。
在一个实施例中，该多肽是来自炭角菌目的真菌，或来自Microdochiaceae科，或来自微座孢属(Microdochium)，或来自以下物种：雪霉微座孢。
在一个实施例中，该多肽是来自粪壳菌目的真菌，或来自毛壳菌科，或腐质霉属，或来自以下物种：透明嗜热腐质霉或腐质霉属物种。
在一个实施例中，该多肽是来自格孢腔目的真菌，或来自孢腔菌科(Pleosporaceae)，或来自弯孢属或来自以下物种：膝弯孢霉。
在一个实施例中，该多肽是来自糖霉菌目(Glycomycetales)的真菌，或来自糖霉菌科(Glycomycetaceae)，或来自糖霉菌属(Glycomyces)，或来自以下物种：鲁特介斯糖霉菌。
在一个实施例中，该多肽是来自粪壳菌目的真菌，或来自雷米氏菌属(Remersonia)，或来自以下物种：嗜热雷米氏菌(Remersonia thermophile)。
在一个实施例中，该多肽是来自粪壳菌目的真菌，或来自毛壳菌科，或来自梭孢壳属，或来自以下物种：沙生梭孢壳或栖土梭孢壳。
在一个实施例中，该多肽是来自粪壳菌目的真菌，或来自毛壳菌科，或来自毛壳菌属，或来自以下物种：绿毛壳菌。
将理解的是，对于以上提到的物种而言，本发明涵盖完全状态和不完全状态(perfect and imperfect states)二者、以及其他分类学等效物，例如无性型，而不管它们已知的物种名称是什么。本领域的普通技术人员将容易地识别适当等效物的身份。
这些物种的菌株可以容易地在许多培养物保藏中心为公众所获得，如美国典型培养物保藏中心(ATCC)、德国微生物菌种保藏中心(Deutsche Sammlung vonMikroorganismen und Zellkulturen GmbH，DSMZ)、荷兰菌种保藏中心 (CentraalbureauVoor Schimmelcultures，CBS)以及美国农业研究菌种保藏中心北方地区研究中心(NRRL)。
可以使用以上提到的探针从其他来源，包括从自然界(例如，土壤、堆肥、水等等)分离的微生物或直接从自然材料(例如，土壤、堆肥、水等等)获得的DNA 样品鉴定和获得该多肽。用于从自然生活环境中直接分离微生物和DNA的技术是本领域熟知的。然后可以通过类似地筛选另一微生物的基因组DNA或cDNA文库或混合的DNA样品来获得编码该多肽的多核苷酸。一旦已经用探针检测到编码多肽的多核苷酸，则可以通过利用本领域普通技术人员所知的技术分离或克隆多核苷酸(参见，例如萨姆布鲁克(Sambrook)等人，1989，上文)。
改进动物性能的方法
在第二十九方面，本发明涉及改进动物的一种或多种性能参数的方法，该方法包括向一种或多种动物施用在此所定义的本发明的第一方面或本发明的第一方面的任何实施例(如与‘组合物的GH62多肽’相关的部分、或者与‘组合物的GH10 和GH11多肽’相关的部分、或者关于‘组合’的部分或如在本发明的第二至第二十八方面中任一项所述的)的组合物。在一个实施例中，性能参数选自以下列表，该列表由以下各项组成：体重增加、欧洲生产效率因子(EPEF)、欧洲生产效能因子(EFF)以及FCR。
本发明的第二十九方面还涉及改进动物的一种或多种性能参数的方法，该方法包括向一种或多种动物施用一种动物饲料添加剂，该动物饲料添加剂包括在此所定义的本发明的第一方面或本发明的第一方面的任何实施例(如与‘组合物的GH62 多肽’相关的部分、或者与‘组合物的GH10和GH11多肽’相关的部分、或者关于“组合”或如在本发明的第二至第二十八方面中任一项所述的部分中)的组合物以及一种或多种调配剂。在一个实施例中，性能参数选自以下列表，该列表由以下各项组成：体重增加、欧洲生产效率因子(EPEF)、欧洲生产效能因子(EFF)以及 FCR。在一个另外的实施例中，该动物饲料添加剂包括一种或多种选自以下列表的组分，该列表由以下各项组成：一种或多种另外的酶、一种或多种微生物、一种或多种维生素、一种或多种矿物质、一种或多种氨基酸、一种或多种其他饲料成分、或其任何组合。
本发明的第二十九方面进一步涉及改进动物的一种或多种性能参数的方法，该方法包括向一种或多种动物施用一种动物饲料，该动物饲料包括在此所定义的本发明的第一方面或本发明的第一方面的任何实施例(如与‘组合物的GH62多肽’相关的部分、或者与‘组合物的GH10和GH11多肽’相关的部分、或者关于‘组合’或如在本发明的第二至第二十八方面中任一项所述的部分中)的组合物、一种或多种调配剂以及来自黍亚科的基于植物的材料。在一个实施例中，性能参数选自以下列表，该列表由以下各项组成：体重增加、欧洲生产效率因子(EPEF)、欧洲生产效能因子(EFF)以及FCR。在一个另外的实施例中，该动物饲料添加剂包括一种或多种选自以下列表的组分，该列表由以下各项组成：一种或多种另外的酶、一种或多种微生物、一种或多种维生素、一种或多种矿物质、一种或多种氨基酸、一种或多种其他饲料成分、或其任何组合。
本发明的第二十九方面还涉及一种改进动物的一种或多种性能参数的方法，该方法包括向一种或多种动物施用一种动物饲料添加剂，该动物饲料添加剂包括具有木聚糖酶活性并且与SEQ ID NO:71的多肽具有至少80％，例如至少85％、至少 86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少 93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％的序列一致性的多肽。在一个实施例中，这些多肽与SEQ ID NO:71的成熟多肽相差多达25 个氨基酸，例如1与25个之间的氨基酸，如1-25、1-20、1-15、1-10或1-5个氨基酸，或1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24或25个氨基酸。在一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:71 的氨基酸序列或由其组成；或者是其片段，该片段具有木聚糖酶活性并且具有该多肽的至少90％，如至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少 96％、至少97％、至少98％或至少99％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括 SEQ ID NO:71的氨基酸1至288或由其组成。
本发明的第二十九方面还涉及一种改进动物的一种或多种性能参数的方法，该方法包括向一种或多种动物施用一种动物饲料添加剂，该动物饲料添加剂包括具有木聚糖酶活性并且与SEQ ID NO:78的多肽具有至少80％，例如至少85％、至少 86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少 93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％的序列一致性的多肽。在一个实施例中，这些多肽与SEQ ID NO:78的成熟多肽相差多达25 个氨基酸，例如1与25个之间的氨基酸，如1-25、1-20、1-15、1-10或1-5个氨基酸，或1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24或25个氨基酸。在一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:78 的氨基酸序列或由其组成；或者是其片段，该片段具有木聚糖酶活性并且具有该多肽的至少90％，如至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少 96％、至少97％、至少98％或至少99％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括 SEQ ID NO:78的氨基酸1至181或由其组成。
本发明的第二十九方面还涉及一种改进动物的一种或多种性能参数的方法，该方法包括向一种或多种动物施用一种动物饲料添加剂，该动物饲料添加剂包括具有木聚糖酶活性并且与SEQ ID NO:177的多肽具有至少80％，例如至少85％、至少 86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少 93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％的序列一致性的多肽。在一个实施例中，这些多肽与SEQ ID NO:177的成熟多肽相差多达 25个氨基酸，例如1与25个之间的氨基酸，如1-25、1-20、1-15、1-10或1-5个氨基酸，或1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、 19、20、21、22、23、24或25个氨基酸。在一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO: 177的氨基酸序列或由其组成；或者是其片段，该片段具有木聚糖酶活性并且具有该多肽的至少90％，如至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:177的氨基酸1至323或由其组成。
在一个实施例中，来自黍亚科的基于植物的材料是玉蜀黍、玉米、高粱、柳枝稷、粟、珍珠粟、谷子或其经加工的形式，如研磨的玉米、研磨的玉蜀黍、脱脂玉蜀黍、脱脂脱淀粉的玉蜀黍、研磨的高粱、研磨的柳枝稷、研磨的粟、研磨的谷子、研磨的珍珠粟、或其任何组合。在一个另外的实施例中，来自黍亚科的基于植物的材料是来自植物的种子部分(如胚乳和/或果壳)。
溶解木糖的方法
在第三十方面，本发明涉及从基于植物的材料中溶解木糖的方法，该方法包括用在此所定义的本发明的第一方面或本发明的第一方面的任何实施例(如在与‘组合物的GH62多肽’相关的部分、或与‘组合物的GH10和GH11多肽’相关的部分、或关于‘组合’的部分或如本发明的第二至第二十八方面中任一项所述)的组合物处理来自黍亚科的基于植物的材料。在一个实施例中，来自黍亚科的基于植物的材料是玉蜀黍、玉米、高粱、柳枝稷、粟、珍珠粟、谷子或其经加工的形式，如研磨的玉米、研磨的玉蜀黍、脱脂玉蜀黍、脱脂脱淀粉的玉蜀黍、研磨的高粱、研磨的柳枝稷、研磨的粟、研磨的谷子、研磨的珍珠粟、或其任何组合。在一个另外的实施例中，来自黍亚科的基于植物的材料是来自植物的种子部分(如胚乳和/或果壳)。
本发明的第三十方面还涉及从基于植物的材料中溶解木糖的方法，该方法包括用在此所定义的本发明的第一方面或任何实施例(如在与‘组合物的GH62多肽’相关的部分、或与‘组合物的GH10和GH11多肽’相关的部分、或关于‘组合’的部分或如本发明的第二至第二十八方面中任一项所述)的组合物以及一种或多种调配剂处理来自黍亚科的基于植物的材料。在另一个实施例中，来自黍亚科的基于植物的材料是玉蜀黍、玉米、高粱、柳枝稷、粟、珍珠粟、谷子或其经加工的形式 (如研磨的玉米、研磨的玉蜀黍、脱脂玉蜀黍、脱脂脱淀粉的玉蜀黍、研磨的高粱、研磨的柳枝稷、研磨的粟、研磨的谷子、研磨的珍珠粟或其任何组合。在一个另外的实施例中，来自黍亚科的基于植物的材料是来自植物的种子部分(如胚乳和/或果壳)。
本发明的第三十方面还涉及一种从基于植物的材料中溶解木糖的方法，该方法包括用在此所定义的本发明第一方面或任何实施例(如在与‘组合物的GH62多肽’相关的部分、或与‘组合物的GH10和GH11多肽’相关的部分、或关于‘组合’的部分中、或如本发明的第二至第二十八方面中任一项所述)的动物饲料添加剂以及一种或多种调配剂处理来自黍亚科的基于植物的材料。在另一个实施例中，来自黍亚科的基于植物的材料是玉蜀黍、玉米、高粱、柳枝稷、粟、珍珠粟、谷子或其经加工的形式(如研磨的玉米、研磨的玉蜀黍、脱脂玉蜀黍、脱脂脱淀粉的玉蜀黍、研磨的高粱、研磨的柳枝稷、研磨的粟、研磨的谷子、研磨的珍珠粟或其任何组合。在一个另外的实施例中，来自黍亚科的基于植物的材料是来自植物的种子部分(如胚乳和/或果壳)。
本发明的第三十方面还涉及从基于植物的材料中溶解木糖的方法，该方法包括用一种动物饲料添加剂处理基于植物的材料，该动物饲料添加剂包括具有木聚糖酶活性并且与SEQ ID NO:71的多肽具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少 87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少 94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％的序列一致性的多肽。在一个实施例中，这些多肽与SEQ ID NO:71的成熟多肽相差多达25个氨基酸，例如1与25个之间的氨基酸，如1-25、1-20、1-15、1-10或1-5个氨基酸，或1、 2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、 22、23、24或25个氨基酸。在一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:71的氨基酸序列或由其组成；或者是其片段，该片段具有木聚糖酶活性并且具有该多肽的至少90％，如至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO: 71的氨基酸1至288或由其组成。
本发明的第三十方面还涉及从基于植物的材料中溶解木糖的方法，该方法包括用一种动物饲料添加剂处理基于植物的材料，该动物饲料添加剂包括具有木聚糖酶活性并且与SEQ ID NO:78的多肽具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少 87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少 94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％的序列一致性的多肽。在一个实施例中，这些多肽与SEQ ID NO:78的成熟多肽相差多达25个氨基酸，例如1与25个之间的氨基酸，如1-25、1-20、1-15、1-10或1-5个氨基酸，或1、 2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、 22、23、24或25个氨基酸。在一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:78的氨基酸序列或由其组成；或者是其片段，该片段具有木聚糖酶活性并且具有该多肽的至少90％，如至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO: 78的氨基酸1至181或由其组成。
本发明的第三十方面还涉及从基于植物的材料中溶解木糖的方法，该方法包括用一种动物饲料添加剂处理基于植物的材料，该动物饲料添加剂包括具有木聚糖酶活性并且与SEQ ID NO:177的多肽具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％的序列一致性的多肽。在一个实施例中，这些多肽与SEQ ID NO:177的成熟多肽相差多达25个氨基酸，例如1与25个之间的氨基酸，如1-25、1-20、1-15、1-10或1-5个氨基酸，或1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、 21、22、23、24或25个氨基酸。在一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:177的氨基酸序列或由其组成；或者是其片段，该片段具有木聚糖酶活性并且具有该多肽的至少90％，如至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO: 177的氨基酸1至323或由其组成。
释放淀粉的方法
在第三十一方面，本发明涉及从基于植物的材料中释放淀粉的方法，该方法包括用在此所定义的本发明的第一方面或本发明的第一方面的任何实施例(如在与‘组合物的GH62多肽’相关的部分、或与‘组合物的GH10和GH11多肽’相关的部分、或关于‘组合’的部分或如本发明的第二至第二十八方面中任一项所述) 的组合物处理来自黍亚科的基于植物的材料。在一个实施例中，来自黍亚科的基于植物的材料是玉蜀黍、玉米、高粱、柳枝稷、粟、珍珠粟、谷子或其经加工的形式，如研磨的玉米、研磨的玉蜀黍、脱脂玉蜀黍、脱脂脱淀粉的玉蜀黍、研磨的高粱、研磨的柳枝稷、研磨的粟、研磨的谷子、研磨的珍珠粟、或其任何组合。在一个另外的实施例中，来自黍亚科的基于植物的材料是来自植物的种子部分(如胚乳和/或果壳)。
本发明的第三十一方面还涉及从基于植物的材料中释放淀粉的方法，该方法包括用在此所定义的本发明的第一方面或任何实施例(如在与‘组合物的GH62多肽’相关的部分、或与‘组合物的GH10和GH11多肽’相关的部分、或关于‘组合’的部分或如本发明的第二至第二十八方面中任一项所述)的组合物以及一种或多种调配剂处理来自黍亚科的基于植物的材料。在另一个实施例中，来自黍亚科的基于植物的材料是玉蜀黍、玉米、高粱、柳枝稷、粟、珍珠粟、谷子或其经加工的形式 (如研磨的玉米、研磨的玉蜀黍、脱脂玉蜀黍、脱脂脱淀粉的玉蜀黍、研磨的高粱、研磨的柳枝稷、研磨的粟、研磨的谷子、研磨的珍珠粟或其任何组合。在一个另外的实施例中，来自黍亚科的基于植物的材料是来自植物的种子部分(如胚乳和/或果壳)。
本发明的第三十一方面还涉及一种从基于植物的材料中释放淀粉的方法，该方法包括用在此所定义的本发明第一方面或任何实施例(如在与‘组合物的GH62多肽’相关的部分、或与‘组合物的GH10和GH11多肽’相关的部分、或关于‘组合’的部分中、或如本发明的第二至第二十八方面中任一项所述)的动物饲料添加剂以及一种或多种调配剂处理来自黍亚科的基于植物的材料。在另一个实施例中，来自黍亚科的基于植物的材料是玉蜀黍、玉米、高粱、柳枝稷、粟、珍珠粟、谷子或其经加工的形式(如研磨的玉米、研磨的玉蜀黍、脱脂玉蜀黍、脱脂脱淀粉的玉蜀黍、研磨的高粱、研磨的柳枝稷、研磨的粟、研磨的谷子、研磨的珍珠粟或其任何组合。在一个另外的实施例中，来自黍亚科的基于植物的材料是来自植物的种子部分(如胚乳和/或果壳)。
用于改进动物饲料的营养价值的方法
术语改进动物饲料的营养价值意指提高饲料中的营养素的可利用性。在本发明中，改进营养价值具体是指改进饲料中包含阿拉伯木聚糖的部分(例如，如半纤维素)的溶解和降解，从而导致营养素从胚乳细胞中的释放增加，所述胚乳具有由高度顽固性半纤维素组成的细胞壁。因此，改进的阿拉伯糖和/或木糖提取表明细胞壁的破坏，并且结果是饲料的营养价值得到改进，导致生长速率和/或体重增加和/或饲料转化(即相对于体重增加的饲料摄取量)增加。此外，阿拉伯糖和/或木糖释放可以直接抑或通过后肠中的细菌发酵改进这些组分本身的利用，从而导致短链脂肪酸的产生，所述短链脂肪酸可以在后肠中容易地被吸收并用于能量代谢。
在第三十二方面，本发明涉及一种用于改进动物饲料的营养价值的方法，该方法包括用在此所定义的本发明的第一方面或本发明的第一方面的任何实施例(如在与‘组合物的GH62多肽’相关的部分、或与‘组合物的GH10和GH11多肽’相关的部分、或关于‘组合’的部分或如本发明的第二至第二十八方面中任一项所述) 的组合物处理包括来自黍亚科的基于植物的材料的动物饲料。在一个实施例中，来自黍亚科的基于植物的材料是玉蜀黍、玉米、高粱、柳枝稷、粟、珍珠粟、谷子或其经加工的形式，如研磨的玉米、研磨的玉蜀黍、脱脂玉蜀黍、脱脂脱淀粉的玉蜀黍、研磨的高粱、研磨的柳枝稷、研磨的粟、研磨的谷子、研磨的珍珠粟、或其任何组合。在一个另外的实施例中，来自黍亚科的基于植物的材料是来自植物的种子部分(如胚乳和/或果壳)。
本发明的第三十二方面还涉及一种用于改进动物饲料的营养价值的方法，该方法包括用具有木聚糖酶活性并且与SEQ ID NO:71的多肽具有至少80％，例如至少 85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少 92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少 99％的序列一致性的多肽处理包括来自黍亚科的基于植物的材料的动物饲料。在一个实施例中，这些多肽与SEQ ID NO:71的成熟多肽相差多达25个氨基酸，例如1 与25个之间的氨基酸，如1-25、1-20、1-15、1-10或1-5个氨基酸，或1、2、3、 4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、 24或25个氨基酸。在一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:71的氨基酸序列或由其组成；或者是其片段，该片段具有木聚糖酶活性并且具有该多肽的至少90％，如至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:71的氨基酸1至288或由其组成。
本发明的第三十二方面还涉及一种用于改进动物饲料的营养价值的方法，该方法包括用具有木聚糖酶活性并且与SEQ ID NO:78的多肽具有至少80％，例如至少 85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少 92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少 99％的序列一致性的多肽处理包括来自黍亚科的基于植物的材料的动物饲料。在一个实施例中，这些多肽与SEQ ID NO:78的成熟多肽相差多达25个氨基酸，例如1 与25个之间的氨基酸，如1-25、1-20、1-15、1-10或1-5个氨基酸，或1、2、3、 4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、 24或25个氨基酸。在一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:78的氨基酸序列或由其组成；或者是其片段，该片段具有木聚糖酶活性并且具有该多肽的至少90％，如至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:78的氨基酸1至181或由其组成。
本发明的第三十二方面还涉及一种用于改进动物饲料的营养价值的方法，该方法包括用具有木聚糖酶活性并且与SEQ ID NO:177的多肽具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％的序列一致性的多肽处理包括来自黍亚科的基于植物的材料的动物饲料。在一个实施例中，这些多肽与SEQ ID NO:177的成熟多肽相差多达25个氨基酸，例如1与25个之间的氨基酸，如1-25、1-20、1-15、1-10或1-5个氨基酸，或1、2、 3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24或25个氨基酸。在一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:177的氨基酸序列或由其组成；或者是其片段，该片段具有木聚糖酶活性并且具有该多肽的至少 90％，如至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少 97％、至少98％或至少99％的长度。在另一个实施例中，该多肽包括SEQ ID NO:177 的氨基酸1至323或由其组成。
制备动物饲料的方法
在第三十三方面，本发明涉及一种制备动物饲料的方法，该方法包括将在此所定义的本发明第一方面或任何实施例(如在与‘组合物的GH62多肽’相关的部分、或与‘组合物的GH10和GH11多肽’相关的部分、或关于‘组合’的部分或如本发明的第二至第二十八方面中任一项所述)的组合物与来自黍亚科的基于植物的材料如玉蜀黍、玉米、高粱、柳枝稷、粟、珍珠粟、谷子或其经加工的形式(如研磨的玉米、研磨的玉蜀黍、脱脂玉蜀黍、脱脂脱淀粉的玉蜀黍、研磨的高粱、研磨的柳枝稷、研磨的粟、研磨的谷子、研磨的珍珠粟或其任何组合)混合。在一个优选实施例中，来自黍亚科的基于植物的材料是来自植物的种子部分(如胚乳和/或果壳)，优选来自玉蜀黍、玉米、高粱、柳枝稷、粟、珍珠粟、谷子或其经加工的形式(如研磨的玉米、研磨的玉蜀黍、脱脂玉蜀黍、脱脂脱淀粉的玉蜀黍、研磨的高粱、研磨的柳枝稷、研磨的粟、研磨的谷子、研磨的珍珠粟或其任何组合)的种子部分。在另一个优选实施例中，来自黍亚科的基于植物的材料是来自包括高度支链化的木聚糖的植物部分，如植物的种子部分(如胚乳和/或果壳)。
多核苷酸
本发明还涉及编码本发明多肽的分离的多核苷酸。
用于分离或克隆多核苷酸的技术是本领域中已知的并且包括从基因组DNA或cDNA，或其组合进行分离。可以例如通过使用熟知的聚合酶链反应(PCR)或表达文库的抗体筛选来检测具有共有结构特征的克隆DNA片段，实现从基因组DNA 克隆多核苷酸。参见例如，伊尼斯(Innis)等人，1990，PCR：方法和应用指南(PCR: A Guide to Methods andApplication)，学术出版社(Academic Press)，纽约。可以使用其他核酸扩增程序例如连接酶链式反应(LCR)、连接激活转录(LAT)和基于多核苷酸的扩增(NASBA)。这些多核苷酸可以克隆自芽孢杆菌属的菌株或相关有机体，并且因此，例如可以是该多核苷酸多肽编码区的等位基因变体或物种变体。
本发明还涉及包括下述多核苷酸或由其组成的分离的多核苷酸，所述分离的多核苷酸与SEQ ID NO:10的成熟多肽编码序列具有至少85％，例如至少86％、至少 87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少 94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％的序列一致性程度，这些分离的多核苷酸编码具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的多肽。
本发明还涉及包括下述多核苷酸或由其组成的分离的多核苷酸，所述分离的多核苷酸与SEQ ID NO:25的成熟多肽编码序列具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少 93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％的序列一致性程度，这些分离的多核苷酸编码具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的多肽。
本发明还涉及包括下述多核苷酸或由其组成的分离的多核苷酸，所述分离的多核苷酸与SEQ ID NO:28的成熟多肽编码序列具有至少90％，例如至少91％、至少 92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少 99％、或100％的序列一致性程度，这些分离的多核苷酸编码具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的多肽。
本发明还涉及包括下述多核苷酸或由其组成的分离的多核苷酸，所述分离的多核苷酸与SEQ ID NO:34的成熟多肽编码序列具有至少92％，例如至少93％、至少 94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列一致性程度，这些分离的多核苷酸编码具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的多肽。
本发明还涉及包括下述多核苷酸或由其组成的分离的多核苷酸，所述分离的多核苷酸与SEQ ID NO:46的成熟多肽编码序列具有至少86％，例如至少87％、至少 88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少 95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％的序列一致性程度，这些分离的多核苷酸编码具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的多肽。
本发明还涉及包括下述多核苷酸或由其组成的分离的多核苷酸，所述分离的多核苷酸与SEQ ID NO:52的成熟多肽编码序列具有至少80％，例如至少85％、至少 86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少 93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％的序列一致性程度，这些分离的多核苷酸编码具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的多肽。
本发明还涉及包括下述多核苷酸或由其组成的分离的多核苷酸，所述分离的多核苷酸与SEQ ID NO:58的成熟多肽编码序列具有至少81％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少 93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％的序列一致性程度，这些分离的多核苷酸编码具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的多肽。
本发明还涉及包括下述多核苷酸或由其组成的分离的多核苷酸，所述分离的多核苷酸与SEQ ID NO:64的成熟多肽编码序列具有至少81％，例如至少85％、至少 86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少 93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％的序列一致性程度，这些分离的多核苷酸编码具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的多肽。
本发明还涉及包括下述多核苷酸或由其组成的分离的多核苷酸，所述分离的多核苷酸与SEQ ID NO:82的成熟多肽编码序列具有至少84％，例如至少85％、至少 86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少 93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％的序列一致性程度，这些分离的多核苷酸编码具有木聚糖酶活性的多肽。
本发明还涉及包括下述多核苷酸或由其组成的分离的多核苷酸，所述分离的多核苷酸与SEQ ID NO:97的成熟多肽编码序列具有至少80％，例如至少85％、至少 86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少 93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％的序列一致性程度，这些分离的多核苷酸编码具有木聚糖酶活性的多肽。
本发明还涉及包括下述多核苷酸或由其组成的分离的多核苷酸，所述分离的多核苷酸与SEQ ID NO:100的成熟多肽编码序列具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％的序列一致性程度，这些分离的多核苷酸编码具有木聚糖酶活性的多肽。
本发明还涉及包括下述多核苷酸或由其组成的分离的多核苷酸，所述分离的多核苷酸与SEQ ID NO:103的成熟多肽编码序列具有至少87％，例如至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％的序列一致性程度，这些分离的多核苷酸编码具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的多肽。
本发明还涉及包括下述多核苷酸或由其组成的分离的多核苷酸，所述分离的多核苷酸与SEQ ID NO:106的成熟多肽编码序列具有至少85％，例如至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％的序列一致性程度，这些分离的多核苷酸编码具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的多肽。
本发明还涉及包括下述多核苷酸或由其组成的分离的多核苷酸，所述分离的多核苷酸与SEQ ID NO:112的成熟多肽编码序列具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％的序列一致性程度，这些分离的多核苷酸编码具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的多肽。
本发明还涉及包括下述多核苷酸或由其组成的分离的多核苷酸，所述分离的多核苷酸与SEQ ID NO:118的成熟多肽编码序列具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％的序列一致性程度，这些分离的多核苷酸编码具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的多肽。
本发明还涉及包括下述多核苷酸或由其组成的分离的多核苷酸，所述分离的多核苷酸与SEQ ID NO:121的成熟多肽编码序列具有至少89％，例如至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列一致性程度，这些分离的多核苷酸编码具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的多肽。
本发明还涉及包括下述多核苷酸或由其组成的分离的多核苷酸，所述分离的多核苷酸与SEQ ID NO:124的成熟多肽编码序列具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％的序列一致性程度，这些分离的多核苷酸编码具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的多肽。
本发明还涉及包括下述多核苷酸或由其组成的分离的多核苷酸，所述分离的多核苷酸与SEQ ID NO:136的成熟多肽编码序列具有至少84％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％的序列一致性程度，这些分离的多核苷酸编码具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的多肽。
本发明还涉及包括下述多核苷酸或由其组成的分离的多核苷酸，所述分离的多核苷酸与SEQ ID NO:139的成熟多肽编码序列具有至少89％，例如至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列一致性程度，这些分离的多核苷酸编码具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的多肽。
本发明还涉及包括下述多核苷酸或由其组成的分离的多核苷酸，所述分离的多核苷酸与SEQ ID NO:145的成熟多肽编码序列具有至少86％，例如至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％的序列一致性程度，这些分离的多核苷酸编码具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的多肽。
本发明还涉及包括下述多核苷酸或由其组成的分离的多核苷酸，所述分离的多核苷酸与SEQ ID NO:154的成熟多肽编码序列具有至少97％，例如至少98％、至少99％、或100％的序列一致性程度，这些分离的多核苷酸编码具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的多肽。
本发明还涉及包括下述多核苷酸或由其组成的分离的多核苷酸，所述分离的多核苷酸与SEQ ID NO:157的成熟多肽编码序列具有至少97％，例如至少98％、至少99％、或100％的序列一致性程度，这些分离的多核苷酸编码具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的多肽。
本发明还涉及包括下述多核苷酸或由其组成的分离的多核苷酸，所述分离的多核苷酸与SEQ ID NO:160的成熟多肽编码序列具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％的序列一致性程度，这些分离的多核苷酸编码具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的多肽。
本发明还涉及包括下述多核苷酸或由其组成的分离的多核苷酸，所述分离的多核苷酸与SEQ ID NO:163的成熟多肽编码序列具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％的序列一致性程度，这些分离的多核苷酸编码具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的多肽。
本发明还涉及包括下述多核苷酸或由其组成的分离的多核苷酸，所述分离的多核苷酸与SEQ ID NO:166的成熟多肽编码序列具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％的序列一致性程度，这些分离的多核苷酸编码具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的多肽。
本发明还涉及包括下述多核苷酸或由其组成的分离的多核苷酸，所述分离的多核苷酸与SEQ ID NO:169的成熟多肽编码序列具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％的序列一致性程度，这些分离的多核苷酸编码具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的多肽。
本发明还涉及包括下述多核苷酸或由其组成的分离的多核苷酸，所述分离的多核苷酸与SEQ ID NO:172的成熟多肽编码序列具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％的序列一致性程度，这些分离的多核苷酸编码具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的多肽。
编码本发明多肽的多核苷酸的修饰对于合成实质上类似于该多肽的多肽可能是必需的。术语“实质上类似”于该多肽是指该多肽的非天然发生的形式。
核酸构建体
本发明还涉及核酸构建体，这些核酸构建体包括可操作地连接至一个或多个控制序列的本发明的多核苷酸，在与控制序列相容的条件下，这个或这些控制序列指导编码序列在合适的宿主细胞中的表达。
该多核苷酸可以按多种方式操纵，以提供该多肽的表达。取决于表达载体，在其插入载体以前操纵多核苷酸可以是希望的或必需的。用于利用重组DNA方法修饰多核苷酸的技术是本领域熟知的。
该控制序列可以是一个启动子，即，被宿主细胞识别以对编码本发明多肽的多核苷酸进行表达的一种多核苷酸。该启动子包含转录控制序列，这些序列介导了该多肽的表达。该启动子可以是在宿主细胞中显示出转录活性的任何多核苷酸，包括突变型、截短型及杂合型启动子，并且可以是由编码与该宿主细胞同源或异源的细胞外或细胞内多肽的基因获得。
用于在细菌宿主细胞中指导本发明的核酸构建体的转录的适合启动子的实例是从以下基因中获得的启动子：解淀粉芽孢杆菌α-淀粉酶基因(amyQ)、地衣芽孢杆菌α-淀粉酶基因(amyL)、地衣芽孢杆菌青霉素酶基因(penP)、嗜热脂肪芽孢杆菌产麦芽糖淀粉酶基因(amyM)、枯草芽孢杆菌果聚糖蔗糖酶基因(sacB)、枯草芽孢杆菌xylA和xylB基因、苏云金杆菌cryIIIA基因(阿盖塞(Agaisse)和勒尔克吕(Lereclus)，1994，分子微生物学(Molecular Microbiology)13:97-107)、大肠杆菌lac操纵子、大肠杆菌trc启动子(埃贡(Egon)等人，1988，基因(Gene) 69:301-315)、天蓝链霉菌琼脂水解酶基因(dagA)、以及原核β-内酰胺酶基因(维拉-卡马洛夫(Villa-Kamaroff)等人，1978，美国国家科学院院刊(Proc.Natl.Acad. Sci.USA)75:3727-3731)以及tac启动子(德波尔(DeBoer)等人，1983，美国国家科学院院刊80:21-25)。其他启动子描述在吉尔伯特(Gilbert)等人，1980，科学美国人(Scientific American)242:74-94的“来自重组细菌的有用蛋白质(Useful proteinsfrom recombinant bacteria)”；以及在萨姆布鲁克(Sambrook)等人，1989，见上文。串联启动子的实例披露在WO 99/43835中。
用于指导本发明的核酸构建体在丝状真菌宿主细胞中的转录的合适启动子的实例是从以下各项的基因获得的启动子：构巢曲霉乙酰胺酶、黑曲霉中性α-淀粉酶、黑曲霉酸稳定性α-淀粉酶、黑曲霉或泡盛曲霉葡糖淀粉酶(glaA)、米曲霉TAKA 淀粉酶、米曲霉碱性蛋白酶、米曲霉丙糖磷酸异构酶、尖镰孢胰蛋白酶样蛋白酶(WO 96/00787)、镶片镰孢淀粉葡糖苷酶(WO 00/56900)、镶片镰孢Daria(WO 00/56900)、镶片镰孢Quinn(WO 00/56900)、米黑根毛霉(Rhizomucor miehei)脂肪酶、米黑根毛霉天冬氨酸蛋白酶、里氏木霉β-葡糖苷酶、里氏木霉纤维二糖水解酶I、里氏木霉纤维二糖水解酶II、里氏木霉内切葡聚糖酶I、里氏木霉内切葡聚糖酶II、里氏木霉内切葡聚糖酶III、里氏木霉内切葡聚糖酶V、里氏木霉木聚糖酶I、里氏木霉木聚糖酶II、里氏木霉木聚糖酶III、里氏木霉β-木糖苷酶、以及里氏木霉翻译延长因子，以及NA2tpi启动子(一种修饰的启动子，其来自曲霉属中性α-淀粉酶基因，其中未翻译的前导子由曲霉属丙糖磷酸异构酶基因的未翻译的前导子替代；非限制性实例包括修饰的启动子，其来自黑曲霉中性α-淀粉酶的基因，其中未翻译的前导子由构巢曲霉或米曲霉丙糖磷酸异构酶基因的未翻译的前导子替代)；以及其突变型启动子、截短型启动子、以及杂合型启动子。其他启动子描述于美国专利号 6,011,147中。
在酵母宿主中，有用的启动子获得自以下各项的基因：酿酒酵母烯醇酶 (ENO1)、酿酒酵母半乳糖激酶(GAL1)、酿酒酵母醇去氢酶/甘油醛-3-磷酸去氢酶(ADH1、ADH2/GAP)、酿酒酵母丙糖磷酸异构酶(TPI)、酿酒酵母金属硫蛋白(CUP1)、以及酿酒酵母3-磷酸甘油酸激酶。罗马诺斯(Romanos)等人，1992，酵母(Yeast)8:423-488描述了酵母宿主细胞的其他有用的启动子。
控制序列还可以是由宿主细胞识别以终止转录的一种转录终止子。该终止子可操作地连接到编码该多肽的多核苷酸的3'末端。在该宿主细胞中起作用的任何终止子都可以用于本发明中。
细菌宿主细胞的优选终止子从针对以下各项的基因获得：克劳氏芽孢杆菌碱性蛋白酶(aprH)、地衣芽孢杆菌α-淀粉酶(amyL)、和大肠杆菌核糖体RNA(rrnB)。
用于丝状真菌宿主细胞的优选终止子是从以下各项的基因获得：构巢曲霉乙酰胺酶、构巢曲霉邻氨基苯甲酸合酶、黑曲霉葡糖淀粉酶、黑曲霉α-葡糖苷酶、米曲霉TAKA淀粉酶、尖镰孢胰蛋白酶样蛋白酶、里氏木霉β-葡糖苷酶、里氏木霉纤维二糖水解酶I、里氏木霉纤维二糖水解酶II、里氏木霉内切葡聚糖酶I、里氏木霉内切葡聚糖酶II、里氏木霉内切葡聚糖酶III、里氏木霉内切葡聚糖酶V、里氏木霉木聚糖酶I、里氏木霉木聚糖酶II、里氏木霉木聚糖酶III、里氏木霉β-木糖苷酶以及里氏木霉翻译延长因子。
用于酵母宿主细胞的优选终止子是从酿酒酵母烯醇化酶、酿酒酵母细胞色素C(CYC1)、以及酿酒酵母甘油醛-3-磷酸脱氢酶的基因获得。用于酵母宿主细胞的其他有用的终止子由罗马努斯等人，1992，见上文描述。
该控制序列还可以是在启动子下游并且在基因编码序列上游的mRNA稳定子区域，它增加该基因的表达。
适合的mRNA稳定子区的实例是从以下获得的：苏云金芽孢杆菌cryIIIA基因 (WO94/25612)和枯草芽孢杆菌SP82基因(化(Hue)等人，1995，细菌学杂志 (Journal ofBacteriology)177:3465-3471)。
该控制序列还可以是一个前导序列，一种对宿主细胞翻译很重要的非翻译 mRNA区域。该前导序列可操作地连接到编码该多肽的多核苷酸的5’末端。可以使用在宿主细胞中具有功能的任何前导序列。
用于丝状真菌宿主细胞的优选前导序列是从米曲霉TAKA淀粉酶和构巢曲霉丙糖磷酸异构酶的基因获得。
酵母宿主细胞的适合的前导子是从以下各项的基因中获得的：酿酒酵母烯醇酶(ENO-1)、酿酒酵母3-磷酸甘油酸激酶、酿酒酵母α-因子、和酿酒酵母醇去氢酶 /甘油醛-3-磷酸去氢酶(ADH2/GAP)。
控制序列还可以是一种多腺苷酸化序列，可操作地连接至该多核苷酸的3’-末端并且当转录时由宿主细胞识别为将聚腺苷酸残基添加至所转录的mRNA的信号的序列。可以使用在宿主细胞中起作用的任何多腺苷酸化序列。
用于丝状真菌宿主细胞的优选聚腺苷酸化序列是从以下各项的基因获得：构巢曲霉邻氨基苯甲酸合酶、黑曲霉葡糖淀粉酶、黑曲霉α-葡糖苷酶、米曲霉TAKA 淀粉酶以及尖镰孢胰蛋白酶样蛋白酶。
对于酵母宿主细胞有用的聚腺苷酸化序列在郭(Guo)和谢尔曼(Sherman)， 1995，分子细胞生物学(Mol.Cellular Biol.)15:5983-5990中得以描述。
控制序列还可以是编码连接至多肽的N-末端的信号肽并指导该多肽进入细胞的分泌途径的信号肽编码区域。多核苷酸的编码序列的5’端本身可包含在翻译阅读框中天然与编码多肽的编码序列区段相连接的信号肽编码序列。可替代地，编码序列5’端可以包含对于该编码序列是外源的信号肽编码序列。在编码序列不天然地包含信号肽编码序列的情况下，可能需要外源信号肽编码序列。可替代地，外源信号肽编码序列可简单地替换天然的信号肽编码序列以便增强该多肽的分泌。然而，可以使用指导所表达多肽进入宿主细胞的分泌通路的任何信号肽编码序列。
用于细菌宿主细胞的有效信号肽编码序列是从以下各项的基因获得的信号肽编码序列：芽孢杆菌属NCIB 11837产麦芽糖淀粉酶、地衣芽孢杆菌枯草杆菌蛋白酶、地衣芽孢杆菌β-内酰胺酶、嗜热脂肪芽孢杆菌α-淀粉酶、嗜热脂肪芽孢杆菌中性蛋白酶(nprT、nprS、nprM)以及枯草芽孢杆菌prsA。其他信号序列由西莫宁 (Simonen)和帕尔瓦(Palva)，1993，微生物评论(Microbiological Reviews)57: 109-137描述。
用于丝状真菌宿主细胞的有效信号肽编码序列是获得自以下项的基因的信号肽编码序列：黑曲霉中性淀粉酶、黑曲霉葡糖淀粉酶、米曲霉TAKA淀粉酶、特异腐质霉纤维素酶、特异腐质霉内切葡聚糖酶V、柔毛腐质霉脂肪酶以及米黑根毛霉天冬氨酸蛋白酶。
对于酵母宿主细胞有用的信号肽获得自以下项的基因：酿酒酵母α-因子和酿酒酵母转化酶。见上文，罗马诺斯(Romanos)等人(1992)描述了其他有用的信号肽编码序列。
控制序列还可以是编码位于多肽的N-末端的前肽的前肽编码序列。生成的多肽被称为前体酶(proenzyme)或多肽原(或者在一些情况下被称为酶原(zymogen))。多肽原通常是无活性的并且可以通过从该多肽原上催化切割或自动催化切割前肽而被转化成一种活性多肽。可以从枯草芽孢杆菌碱性蛋白酶(aprE)、枯草芽孢杆菌中性蛋白酶(nprT)、嗜热毁丝霉漆酶(WO 95/33836)、米黑根毛霉天冬氨酸蛋白酶和酿酒酵母醹-因子的基因获得前肽编码序列。
当信号肽和前肽序列同时存在时，前肽序列的位置紧邻于多肽的N-末端，且信号肽序列的位置紧邻于前肽序列的N-末端。
还可能希望地是添加调控序列，这些调控序列相对于宿主细胞的生长来调节多肽的表达。调控序列的实例是使得基因的表达响应于化学或物理刺激(包括调控化合物的存在)而开启或关闭的那些序列。原核系统中的调控序列包括lac、tac以及 trp操纵子系统。在酵母中，可以使用ADH2系统或GAL1系统。在丝状真菌中，可以使用黑曲霉葡糖淀粉酶启动子、米曲霉TAKAα-淀粉酶启动子和米曲霉葡糖淀粉酶启动子、里氏木霉纤维二糖水解酶I启动子以及里氏木霉纤维二糖水解酶II启动子。调节序列的其他实例是允许基因扩增的那些。在真核系统中，这些调节序列包括在甲氨蝶呤存在下被扩增的二氢叶酸还原酶基因以及用重金属扩增的金属硫蛋白基因。在这些情况中，编码多肽的多核苷酸将与调节序列可操作地连接。
表达载体
本发明还涉及包括本发明的多核苷酸、启动子、以及转录和翻译终止信号的重组表达载体。不同的核苷酸和控制序列可以连接在一起以产生一个重组表达载体，这一重组表达载体可以包括一个或多个便利的限制酶切位点以允许在这些位点处插入或取代编码该变体的多核苷酸。可替代地，该多核苷酸可以通过将该多核苷酸或包括该多核苷酸的核酸构建体插入用于表达的适当载体中来表达。在产生该表达载体时，该编码序列是位于该载体中，这样使得该编码序列与该供表达的适当控制序列可操作地连接。
重组表达载体可以是任何载体(例如，质粒或病毒)，其能够方便地进行重组 DNA程序，并且能够引起多核苷酸的表达。载体的选择将典型地取决于该载体与有待引入该载体的宿主细胞的相容性。该载体可以是一种线性的或闭合的环状质粒。
载体可以是自主复制载体，即，作为染色体外实体存在的载体，其复制独立于染色体复制，例如，质粒、染色体外元件、微染色体或人工染色体。该载体可以包含用于确保自我复制的任何装置。可替代地，该载体可以是这样载体，当它被引入该宿主细胞中时，被整合到基因组中并且与其中已整合了它的一个或多个染色体一起复制。此外，可以使用单一载体或质粒或两个或更多个载体或质粒(这些载体或质粒共同含有待引入到宿主细胞的基因组中的总DNA)或转座子。
该载体优选包含允许容易选择转化细胞、转染细胞、转导细胞或类似细胞的一个或多个选择性标记。选择性标记是一种基因，该基因的产物提供了杀生物剂抗性或病毒抗性、重金属抗性、营养缺陷型的原养型等。
细菌性选择性标记的实例是地衣芽孢杆菌或枯草芽孢杆菌dal基因，或赋予抗生素抗性(如氨比西林、氯霉素、卡那霉素、新霉素、大观霉素或四环素抗性)的标记。用于酵母宿主细胞的适合的标记包括但不限于ADE2、HIS3、LEU2、LYS2、 MET3、TRP1、以及URA3。用于在丝状真菌宿主细胞中使用的选择性标记包括但不限于，adeA(磷酸核糖酰氨基咪唑-琥珀羧胺合酶)、adeB(磷酸核糖酰-氨基咪唑合酶)、amdS(乙酰胺酶)、argB(鸟氨酸氨甲酰基转移酶)、bar(草丁膦乙酰转移酶)、hph(潮霉素磷酸转移酶)、niaD(硝酸还原酶)、pyrG(乳清酸核苷-5'磷酸脱羧酶)、sC(硫酸腺苷基转移酶)、以及trpC(邻氨基苯甲酸合酶)、连同其等效物。优选在曲霉属细胞中使用的是构巢曲霉或米曲霉amdS和pyrG基因以及吸水链霉菌(Streptomyces hygroscopicus)bar基因。在木霉属细胞中优选使用的是adeA、adeB、amdS、hph以及pyrG基因。
选择性标记可以是如在WO 2010/039889中描述的双选择性标记系统。在一方面，双选择性标记是hph-tk双选择性标记系统。
载体优选含有允许载体整合到宿主细胞的基因组中或载体在细胞中独立于基因组自主复制的一个或多个元件。
用于整合到宿主细胞基因组中，该载体可以依赖于编码多肽的多核苷酸的序列或该载体中通过同源或非同源重组而整合到该基因组中的任何其他元件。可替代地，该载体可以包含用于指导通过同源重组而整合到宿主细胞基因组中的一个或多个染色体中的一个或多个精确位置处的另外的多核苷酸。为了增加在精确位置处整合的可能性，这些整合的元件应包含足够数量的核酸，例如100至10,000个碱基对、 400至10,000个碱基对、以及800至10,000个碱基对，这些碱基对与对应的靶序列具有高度的序列一致性以提高同源重组的可能性。这些整合元件可以是与宿主细胞的基因组内的靶序列同源的任何序列。此外，这些整合元件可以是非编码多核苷酸或编码多核苷酸。另一方面，该载体可以通过非同源重组整合到宿主细胞的基因组中。
对于自主复制，载体可以进一步包括使该载体能够在所讨论的宿主细胞中自主复制的复制起点。复制起点可以是在细胞中起作用的介导自主复制的任何质粒复制子。术语“复制起点”或“质粒复制子”意指使质粒或载体能够在体内复制的多核苷酸。
细菌复制起点的实例是允许在大肠杆菌中复制的质粒pBR322、pUC19、 pACYC177、以及pACYC184的复制起点，以及允许在芽孢杆菌属中复制的质粒 pUB110、pE194、pTA1060、以及pAMβ1的复制起点。
用于酵母宿主细胞中的复制起点的实例是2微米复制起点；ARS1；ARS4；ARS1 与CEN3的组合；及ARS4与CEN6的组合。
在丝状真菌细胞中有用的复制起点的实例是AMA1和ANS1(格姆斯(Gems) 等人，1991，基因(Gene)98:61-67；卡伦(Cullen)等人，1987，核酸研究(Nucleic Acids Res.)15:9163-9175；WO 00/24883)。AMA1基因的分离和包括该基因的质粒或载体的构建可根据WO00/24883披露的方法完成。
可以将本发明的多核苷酸的多于一个的拷贝插入到宿主细胞中以增加多肽的产生。通过将序列的至少一个另外的拷贝整合到宿主细胞基因组中或者通过包含一个与该多核苷酸一起的可扩增的选择性标记基因可以获得多核苷酸的增加的拷贝数目，其中通过在适当的选择性试剂的存在下培养细胞可以选择包含选择性标记基因的经扩增的拷贝的细胞、以及由此该多核苷酸的另外的拷贝。
用于连接以上所描述的元件以构建本发明的重组表达载体的程序是本领域的普通技术人员熟知的(参见，例如，萨姆布鲁克(Sambrook)等人，1989，见上文)。
宿主细胞
本发明还涉及重组宿主细胞，这些重组宿主细胞包括本发明的多核苷酸，该多核苷酸可操作地连接至一个或多个控制序列，该一个或多个控制序列指导本发明的多肽的产生。将包含多核苷酸的构建体或载体引入到宿主细胞中，这样使得该构建体或载体被维持作为染色体整合体或作为自主复制的染色体外载体，如早前所描述。术语“宿主细胞”涵盖由于复制期间发生的突变与亲本细胞不同的亲本细胞的任何后代。宿主细胞的选择在很大程度上取决于编码该多肽的基因及其来源。
该宿主细胞可以是有用于重组产生本发明的多肽的任何细胞，例如原核细胞或真核细胞。
原核宿主细胞可以是任何革兰氏阳性或革兰氏阴性细菌。革兰氏阳性细菌包括但不限于：芽孢杆菌属、梭菌属、肠球菌属、土芽孢杆菌属、乳杆菌属、乳球菌属、海洋芽孢杆菌属、葡萄球菌属、链球菌属、以及链霉菌属。革兰氏阴性细菌包括但不限于：弯曲杆菌属、大肠杆菌、黄杆菌属、梭杆菌属、螺杆菌属、泥杆菌属、奈瑟氏菌属、假单孢菌属、沙门氏菌属、以及脲原体属。
细菌宿主细胞可以是任何芽孢杆菌属细胞，包括但不限于：嗜碱芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、短芽孢杆菌、环状芽孢杆菌、克劳氏芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌、坚硬芽孢杆菌、灿烂芽孢杆菌、迟缓芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、嗜热脂肪芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌以及苏云金芽孢杆菌细胞。
细菌宿主细胞还可以是任何链球菌属细胞，包括但不限于：似马链球菌、酿脓链球菌、乳房链球菌以及马链球菌兽瘟亚种细胞。
细菌宿主细胞还可以是任何链霉菌属细胞，包括但不限于：不产色链霉菌、除虫链霉菌、天蓝链霉菌、灰色链霉菌以及浅青紫链霉菌细胞。
将DNA引入芽孢杆菌属细胞中可通过以下来实现：原生质体转化(参见例如，张(Chang)和科恩(Cohen)，1979，分子遗传学与基因组学(Mol.Gen.Genet.) 168:111-115)、感受态细胞转化(参见，例如，杨格(Young)和斯皮宰曾(Spizizen)， 1961，细菌学杂志(J.Bacteriol.)81:823-829；或杜拜努(Dubnau)以及大卫杜夫 -阿贝尔森(Davidoff-Abelson)，1971，分子生物学杂志(J.Mol.Biol.)56:209-221)、电穿孔(参见，例如，茂川(Shigekawa)和道尔(Dower)，1988，生物技术 (Biotechniques)6:742-751)、或者接合(参见，例如克勒(Koehler)和索恩(Thorne)， 1987，细菌学杂志169:5271-5278)。将DNA引入大肠杆菌细胞中可通过以下来实现：原生质体转化(参见，例如，哈纳汗(Hanahan)，1983，分子生物学杂志(J. Mol.Biol.)166:557-580)或电穿孔(参见，例如，道尔(Dower)等人，1988，核酸研究(Nucleic Acids Res.)16:6127-6145)。将DNA引入链霉菌属细胞中可通过以下来实现：原生质体转化、电穿孔(参见例如，贡(Gong)等人，2004，叶线形微生物学(FoliaMicrobiol.)(Praha(布拉格))49:399-405)、接合(参见例如，马佐迪耶(Mazodier)等人，1989，细菌学杂志(J.Bacteriol.)171:3583-3585)、或转导(参见例如，伯克(Burke)等人，2001，美国科学院院刊(Proc.Natl.Acad. Sci.USA)98:6289-6294)。将DNA引入假单孢菌属细胞中可通过以下来实现：电穿孔(参见，例如，蔡(Choi)等人，2006，微生物学方法杂志(J.Microbiol.Methods) 64:391-397)或接合(参见，例如，皮内多(Pinedo)和斯梅茨(Smets)，2005，应用与环境微生物学(Appl.Environ.Microbiol.)71:51-57)。将DNA引入链球菌属细胞中可通过以下来实现：天然感受态(参见，例如，佩里(Perry)和藏满(Kuramitsu)，1981，感染与免疫(Infect.Immun.)32:1295-1297)、原生质体转化(参见，例如，凯特(Catt)和乔力克(Jollick)，1991，微生物学(Microbios) 68:189-207)、电穿孔(参见，例如，巴克利(Buckley)等人，1999，应用与环境微生物学(Appl.Environ.Microbiol.)65:3800-3804)、或者接合(参见，例如，克莱威尔(Clewell)，1981，微生物学评论(Microbiol.Rev.)45:409-436)。然而，可以使用本领域已知的将DNA引入宿主细胞的任何方法。
宿主细胞还可以是真核细胞，如哺乳动物、昆虫、植物、或真菌细胞。
宿主细胞可以是真菌细胞。如在此使用的“真菌”包括子囊菌门(Ascomycota)、担子菌门(Basidiomycota)、壶菌门(Chytridiomycota)、以及接合菌门(Zygomycota)、连同卵菌门(Oomycota)和全部有丝分裂孢子真菌(如由霍克斯沃思(Hawksworth) 等人在安斯沃思和拜斯比真菌词典(Ainsworth and Bisby’s Dictionary of The Fungi)，第8版，1995，国际应用生物科学中心(CAB International)，大学出版社(University Press)，英国剑桥(Cambridge，UK)中进行定义的)。
该真菌宿主细胞可以是酵母细胞。如在此使用的“酵母”包括产子嚢酵母(内孢霉目)、产担子酵母和属于半知菌类(芽孢纲)的酵母。由于酵母的分类可能在将来变化，为了本发明的目的，酵母应当如酵母的生物学与活性(Biology and Activities of Yeast)(斯金纳(Skinner)，帕斯莫尔(Passmore)和达文波特(Davenport) 编著，应用细菌学学会专题论文集系列9(Soc.App.Bacteriol.Symposium Series No. 9)，1980)所描述那样定义。
酵母宿主细胞可以是假丝酵母属、汉逊酵母属、克鲁弗酵母属、毕赤酵母属、酵母属、裂殖酵母属、或耶氏酵母属细胞，如乳酸克鲁维酵母(Kluyveromyces lactis)、卡尔酵母、酿酒酵母、糖化酵母、道格拉氏酵母、克鲁弗酵母、诺地酵母、卵形酵母或解脂耶氏酵母(Yarrowia lipolytica)细胞。
真菌宿主细胞可以是丝状真菌细胞。“丝状真菌”包括真菌门(Eumycota)和卵菌门的亚门(如由霍克斯沃思等人，1995，见上文所定义)的所有丝状形式。丝状真菌通常的特征在于由壳多糖、纤维素、葡聚糖、壳聚糖、甘露聚糖、以及其他复杂多糖构成的菌丝体壁。营养生长是通过菌丝延长，而碳分解代谢是专性需氧的。相反，酵母(如酿酒酵母)的营养生长是通过单细胞菌体的出芽(budding)，而碳分解代谢可以是发酵的。
丝状真菌宿主细胞可以是枝顶孢霉属、曲霉属、短梗霉属、烟管霉属(Bjerkandera)、拟腊菌属、金孢子菌属、鬼伞属、革盖菌属(Coriolus)、隐球菌属、线黑粉菌科(Filibasidium)、镰孢属、腐质霉属、梨孢菌属、毛霉属、毁丝霉属、新美鞭菌属、链孢菌属、拟青霉属、青霉属、平革菌属、射脉菌属(Phlebia)、瘤胃壶菌属、侧耳属(Pleurotus)、裂褶菌属、篮状菌属、嗜热子囊菌属、梭孢壳属、弯颈霉属、栓菌属(Trametes)或木霉属细胞。
例如，丝状真菌宿主细胞可以是泡盛曲霉、臭曲霉、烟曲霉、日本曲霉、构巢曲霉、黑曲霉、米曲霉、黑刺烟管菌(Bjerkandera adusta)、干拟蜡菌(Ceriporiopsisaneirina)、卡内基拟蜡菌(Ceriporiopsis caregiea)、浅黄拟蜡孔菌(Ceriporiopsisgilvescens)、潘诺希塔拟蜡菌(Ceriporiopsis pannocinta)、环带拟蜡菌(Ceriporiopsisrivulosa)、微红拟蜡菌(Ceriporiopsis subrufa)、虫拟蜡菌(Ceriporiopsissubvermispora)、狭边金孢子菌(Chrysosporium inops)、嗜角质金孢子菌、卢克诺文思金孢子菌(Chrysosporium lucknowense)、粪状金孢子菌(Chrysosporium merdarium)、租金孢子菌、昆士兰金孢子菌(Chrysosporium queenslandicum)、热带金孢子菌、褐薄金孢子菌(Chrysosporium zonatum)、灰盖鬼伞(Coprinus cinereus)、毛革盖菌(Coriolushirsutus)、杆孢状镰孢、谷类镰孢、库威镰孢、大刀镰孢、禾谷镰孢、禾赤镰孢、异孢镰孢、合欢木镰孢、尖镰孢、多枝镰孢、粉红镰孢、接骨木镰孢、肤色镰孢、拟分枝孢镰孢、硫色镰孢、圆镰孢、拟丝孢镰孢、镶片镰孢、特异腐质霉、柔毛腐质霉、米黑毛霉、嗜热毁丝霉、粗糙链孢菌、产紫青霉、黄孢平革菌(Phanerochaete chrysosporium)、射脉菌(Phlebia radiata)、刺芹侧耳(Pleurotus eryngii)、土生梭孢壳霉、长域毛栓菌(Trametes villosa)、变色栓菌(Trametes versicolor)、哈茨木霉、康宁木霉、长枝木霉、里氏木霉、或绿色木霉细胞。
可以将真菌细胞通过涉及原生质体形成、原生质体转化、以及细胞壁再生的方法以本身已知的方式转化。用于转化曲霉属和木霉属宿主细胞的适合程序在EP 238023和约尔顿(Yelton)等人，1984，美国国家科学院院刊(Proc.Natl.Acad.Sci. USA)81:1470-1474以及科里蒂森(Christensen)等人，1988，生物/技术 (Bio/Technology)6:1419-1422中描述。用于转化镰刀菌属物种的适合方法在马拉迪耶(Malardier)等人，1989，基因(Gene)78:147-156和WO 96/00787中描述。可以使用由如以下文献描述的程序转化酵母：贝克尔(Becker)和瓜伦特(Guarente)，在阿贝尔森(Abelson)，J.N.和西蒙(Simon)，M.I.编，酵母遗传学与分子生物学指南(Guide to Yeast Genetics and Molecular Biology)，酶学方法(Guide to Yeast Genetics and Molecular Biology,Methods in Enzymology)，第194卷，第182-187页，学术出版社有限公司(Academic Press,Inc.)，纽约；伊藤(Ito)等人，1983，细菌学杂志(J.Bacteriol.)153:163；以及亨内恩(Hinnen)等人，1978，美国国家科学院院刊(Proc.Natl.Acad.Sci.USA)75:1920。
产生的方法
本发明还涉及产生本发明多肽的方法，该方法包括：(a)在有益于产生该多肽的条件下培养细胞，该细胞以其野生型形式产生该多肽；以及任选地，(b)回收该多肽。该多肽可以例如是本发明的第二至第二十八方面中的任一种。
在一方面,该细胞是青霉属细胞。在另一方面，该细胞是黄灰青霉细胞。在另一方面，该细胞是草酸青霉细胞。在另一方面，该细胞是胶囊青霉细胞。在另一方面，该细胞是暗边青霉细胞。在一方面，该细胞是曲霉属细胞。在另一方面，该细胞是棒曲霉细胞。在另一方面，该细胞是温特曲霉细胞。在另一方面，该细胞是棘孢曲霉细胞。在另一方面，该细胞是烟曲霉近缘种细胞。
在一方面，该细胞是新萨托菌属细胞。在另一方面，该细胞是费希新萨托菌细胞。在一方面，该细胞是篮状菌属细胞。在另一方面，该细胞是褐红篮状菌细胞。在一方面，该细胞是黑粉菌属细胞。在另一方面，该细胞是玉蜀黍黑粉菌细胞。在一方面，该细胞是端梗孢霉细胞。在另一方面，该细胞是梭孢端梗霉细胞。在一方面，该细胞是链霉菌属细胞。在另一方面，该细胞是硝孢链霉菌细胞。在另一方面，该细胞是北疆链霉菌细胞。在一方面，该细胞是链孢子囊菌属细胞。在另一方面，该细胞是链孢囊菌属物种-60756细胞。
在一方面，该细胞是毛双孢属细胞。在另一方面，该细胞是龙眼焦腐病菌细胞。在一方面，该细胞是粪盘菌属细胞。在另一方面，该细胞是Ascobolus stictoideus细胞。在一方面，该细胞是内脐蠕孢属细胞。在另一方面，该细胞是德氏霉属物种细胞。在一方面，该细胞是解木聚糖杆菌属细胞。在另一方面，该细胞是解木聚糖杆菌属物种-61981细胞。在一方面，该细胞是微结节菌属细胞。在另一方面，该细胞是雪霉微座孢细胞。在一方面，该细胞是腐质霉细胞。在另一方面，该细胞是透明嗜热腐质霉细胞。在另一方面，该细胞是腐质霉属物种细胞。
在一方面，该细胞是弯孢霉细胞。在另一方面，该细胞是膝弯孢霉细胞。在一方面，该细胞是糖霉菌属细胞。在另一方面，该细胞是鲁特介斯糖霉菌细胞。在一方面，该细胞是雷米氏菌属(Remersonia)细胞。在另一方面，该细胞是嗜热雷米氏菌细胞。在一方面，该细胞是栓菌属细胞。在另一方面，该细胞是沙生梭孢壳细胞。在另一方面，该细胞是栖土梭孢壳细胞。在一方面，该细胞是毛壳菌属细胞。在另一方面，该细胞是绿毛壳菌细胞。
本发明还涉及产生本发明的多肽的方法，这些方法包括(a)在有益于产生该多肽的条件下培养一种本发明的重组宿主细胞；并且可任选地(b)回收该多肽。该多肽可以例如是本发明的第二至第二十八方面中的任一种。
这些宿主细胞是在适合于使用本领域中已知的方法产生该多肽的一种营养培养基中培养的。例如，可以通过摇瓶培养、或在实验室或工业发酵罐中小规模或大规模发酵(包括连续、分批、补料分批或固态发酵)培养细胞，所述培养在适合的培养基中并且在允许表达和/或分离多肽的条件下进行。该培养是使用本领域中已知的程序，在一种适合营养培养基中发生，该培养基包括碳和氮来源及无机盐。适合的培养基可从商业供应商获得或可以根据公开的组成(例如，在美国典型培养物保藏中心的目录中)制备。如果多肽被分泌到该营养培养基中，那么可直接从培养基中回收多肽。如果多肽不分泌，那么其可从细胞裂解液中进行回收。
可以使用特异性针对该多肽的本领域已知的方法来检测该多肽。这些检测方法包括但不限于，特异性抗体的使用、酶产物的形成或酶底物的消失。例如，可以使用酶测定来确定该多肽的活性。
可以使用本领域已知的方法来回收多肽。例如，可以通过常规程序，包括但不限于，收集、离心、过滤、萃取、喷雾干燥、蒸发或沉淀，从该营养培养基回收该多肽。在一方面，回收包括该多肽的发酵液。
可以通过本领域中已知的多种程序来纯化该多肽以获得基本上纯的多肽，这些程序包括但不限于：色谱法(例如，离子交换色谱、亲和色谱、疏水作用色谱、色谱聚焦、以及尺寸排阻色谱)、电泳程序(例如，制备型等电点聚焦)、差别溶解度(例如，硫酸铵沉淀)、SDS-PAGE、或提取(参见例如，蛋白纯化(Protein Purification)，詹森(Janson)和赖登(Ryden)编辑，VCH出版社(VCH Publishers)，纽约，1989)。
在一个替代性方面中，没有回收该多肽，而是将表达该多肽的本发明的宿主细胞用作该多肽的来源。
发酵液配制品或细胞组合物
本发明还涉及包括本发明的多肽的发酵液配制品或细胞组合物。发酵液产物进一步包括在发酵过程中使用的另外的成分，例如像，细胞(包括含有编码本发明的多肽的基因的宿主细胞，这些宿主细胞被用于产生感兴趣的多肽)、细胞碎片、生物质、发酵介质和/或发酵产物。在一些实施例中，该组合物是含有一种或多种有机酸、杀灭的细胞和/或细胞碎片以及培养基的细胞杀灭的全培养液。
如在此使用的术语“发酵液”是指由细胞发酵产生、不经历或经历最低限的回收和/或纯化的制剂。例如，当微生物培养株在允许蛋白质合成(例如，由宿主细胞的酶表达)并且将蛋白质分泌到细胞培养基中的碳受限的条件下孵育生长到饱和时，产生发酵液。发酵液可以包含在发酵结束时得到的发酵材料的未分级的或分级的内容物。典型地，发酵液是未分级的并且包括耗尽的培养基以及例如通过离心去除微生物细胞(例如，丝状真菌细胞)之后存在的细胞碎片。在一些实施例中，发酵液包含用过的细胞培养基、胞外酶以及有活力的和/或无活力的微生物细胞。
在一个实施例中，该发酵液配制品和细胞组合物包括第一有机酸组分(包括至少一种1-5碳的有机酸和/或其盐)以及第二有机酸组分(包括至少一种6碳或更多碳的有机酸和/或其盐)。在一个具体实施例中，该第一有机酸组分是乙酸、甲酸、丙酸、其盐、或两种或更多种前述酸的混合物并且该第二有机酸组分是苯甲酸、环己烷羧酸、4-甲基戊酸、苯乙酸、其盐、或两种或更多种前述酸的混合物。
在一方面，该组合物包含一种或多种有机酸，并且任选地进一步包含杀死的细胞和/或细胞碎片。在一个实施例中，从细胞杀灭的全培养液中去除这些杀灭的细胞和/或细胞碎片，以提供不含这些组分的组合物。
这些发酵液配制品或细胞组合物可以进一步包括防腐剂和/或抗微生物(例如，抑菌)剂，包括但不限于山梨醇、氯化钠、山梨酸钾、以及本领域中已知的其他试剂。
该细胞杀灭的全培养液或组合物可以包含在发酵结束时得到的发酵材料的未分级的内容物。典型地，该细胞杀灭的全培养液或组合物包括用过的培养基以及在微生物细胞(例如，丝状真菌细胞)生长至饱和、在碳限制条件下孵育以允许蛋白合成之后存在的细胞碎片。在一些实施例中，该细胞杀灭的全培养液或组合物包括用过的细胞培养基、胞外酶和杀灭的丝状真菌细胞。在一些实施例中，可以使用本领域已知的方法来使细胞杀灭的全培养液或组合物中存在的微生物细胞透性化和/ 或裂解。
如在此描述的，全培养液或细胞组合物典型地是液体，但是可以包含不溶性组分，例如杀灭的细胞、细胞碎片、培养基组分和/或一种或多种不溶性酶。在一些实施例中，可以除去不溶性组分以提供澄清的液体组合物。
本发明的全液配制品和细胞组合物可以通过WO 90/15861或WO 2010/096673 中所描述的方法来产生。
酶组合物
优选地，这些组合物富含本发明第一方面的多肽。术语“富集”表示组合物的阿拉伯呋喃糖苷酶活性和木聚糖酶活性已增加，例如富集因子为至少1.1，如至少 1.2、至少1.3、至少1.4、至少1.5、至少2.0、至少3.0、至少4.0、至少5.0、至少 10。在一个实施例中，该组合物包括本发明第一方面的多肽和一种或多种调配剂，如在下文“调配剂”部分中所述。
本发明还涉及包括具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的、本发明第二至第二十五方面中任一项的多肽的组合物。优选地，这些组合物富含本发明第二方面的多肽。术语“富含”指示，该组合物的阿拉伯呋喃糖苷酶活性已经增加，例如，富集因子为至少1.1，如至少1.2、至少1.3、至少1.4、至少1.5、至少2.0、至少3.0、至少4.0、至少5.0、至少10。在一个实施例中，该组合物包括本发明第二方面的多肽和一种或多种调配剂，如在下文“调配剂”部分中所述。在一个另外的实施例中，该组合物进一步包括一种或多种具有木聚糖酶活性的GH10或GH11多肽。
本发明还涉及包括具有木聚糖酶活性的、本发明第二十六至第二十八方面中任一项的多肽的组合物。优选地，这些组合物富含本发明第二方面的多肽。术语“富含”指示，该组合物的阿拉伯呋喃糖苷酶活性已经增加，例如，富集因子为至少1.1，如至少1.2、至少1.3、至少1.4、至少1.5、至少2.0、至少3.0、至少4.0、至少5.0、至少10。在一个实施例中，该组合物包括本发明第二方面的多肽和一种或多种调配剂，如在下文“调配剂”部分中所述。在一个另外的实施例中，该组合物进一步包括一种或多种具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽。
这些组合物可以包括本发明的多肽作为主要酶组分，例如单组分组合物。此类组合物可以进一步包括调配剂，如在以下“调配剂”部分中所述。可替代地，这些组合物可以包括多种酶活性，如一种或多种(例如，若干种)选自下组的酶，该组由以下各项组成：植酸酶、木聚糖酶、半乳聚糖酶、α-半乳糖苷酶、蛋白酶、磷脂酶、葡糖苷酸酶、溶血磷脂酶、淀粉酶、β-葡聚糖酶、阿拉伯呋喃糖苷酶、β-木糖苷酶、内-1,4-β-木聚糖酶乙酰木聚糖酯酶、阿魏酸酯酶、纤维素酶、纤维二糖水解酶、β-糖苷酶、支链淀粉酶或其任何混合物。
目前期望以一种或多种以下量(剂量范围)使用木聚糖酶：0.01-200；0.05-100；0.1-50；0.2-20；0.1-1；0.2-2；0.5-5；或1-10，其中所有这些范围是mg木聚糖酶蛋白/kg底物(ppm)。目前期望以一种或多种以下量(剂量范围)施用阿拉伯呋喃糖苷酶：0.01-200；0.05-100；0.1-50；0.2-20；0.1-1；0.2-2；0.5-5；或1-10，其中所有这些范围是mg阿拉伯呋喃糖苷酶蛋白/kg底物(ppm)。进一步预期GH10或 GH11木聚糖酶与GH62阿拉伯呋喃糖苷酶的比例是在100:1至1:100木聚糖酶: 阿拉伯呋喃糖苷酶的范围内，如50:1至1:50、50:1至1:10、25:1至1:5、10: 1至1:2或如10:1至1:50、5:1至1:25、2:1至1:10木聚糖酶:阿拉伯呋喃糖苷酶的范围。
调配剂
本发明的酶可以配制为液体或固体。针对液体配制品，该调配剂可以包括多元醇(如，例如，甘油、乙二醇或丙二醇)、盐(如，例如，氯化钠、苯甲酸钠、山梨酸钾)或糖或糖衍生物(如，例如，糊精、葡萄糖、蔗糖、和山梨醇)。因此，在一个实施例中，该组合物是一种液体组合物，该液体组合物包括本发明的多肽和一种或多种选自以下列表的调配剂，该列表由以下各项组成：甘油、乙二醇、1,2- 丙二醇、1,3-丙二醇、氯化钠、苯甲酸钠、山梨酸钾、糊精、葡萄糖、蔗糖、和山梨醇。
针对固体配制品，该配制品可以是例如作为颗粒、喷雾干粉或聚结物。调配剂可以包括盐(有机的或无机的锌、钠、钾或钙盐，例如，如乙酸钙、苯甲酸钙、碳酸钙、氯化钙、柠檬酸钙、山梨酸钙、硫酸钙、乙酸钾、苯甲酸钾、碳酸钾、氯化钾、柠檬酸钾、山梨酸钾、硫酸钾、乙酸钠、苯甲酸钠、碳酸钠、氯化钠、柠檬酸钠、硫酸钠、乙酸锌、苯甲酸锌、碳酸锌、氯化锌、柠檬酸锌、山梨酸锌、硫酸锌)、淀粉或糖或糖衍生物(像例如，蔗糖、糊精、葡萄糖、乳糖、山梨醇)。
在一个实施例中，该固体组合物是处于颗粒形式。该颗粒可以具有基体结构(matrix structure)，其中组分是均匀混合的。然而，该颗粒典型地包括核心颗粒和一种或多种包衣，该包衣典型地是盐的和/或蜡质的包衣。该核心颗粒可以是任选地与一种或多种另外的酶组合的本发明的木聚糖酶并且任选地连同一种或多种盐的均匀共混物，抑或是惰性颗粒(具有本发明的木聚糖酶，该木聚糖酶任选地与施加到其上的一种或多种另外的酶组合)。
在一个实施例中，核心颗粒的材料选自下组，该组由以下各项组成：无机盐(如乙酸钙、苯甲酸钙、碳酸钙、氯化钙、柠檬酸钙、山梨酸钙、硫酸钙、乙酸钾、苯甲酸钾、碳酸钾、氯化钾、柠檬酸钾、山梨酸钾、硫酸钾、乙酸钠、苯甲酸钠、碳酸钠、氯化钠、柠檬酸钠、硫酸钠、乙酸锌、苯甲酸锌、碳酸锌、氯化锌、柠檬酸锌、山梨酸锌、硫酸锌)、淀粉或糖或糖衍生物(像例如，蔗糖、糊精、葡萄糖、乳糖、山梨醇)、糖或糖衍生物(像例如，蔗糖、糊精、葡萄糖、乳糖、山梨醇)、有机小分子、淀粉、面粉、纤维素和矿物质。
盐包衣典型地至少是1μm厚并且可以是一种具体的盐或多种盐的混合物，例如Na2SO4、K2SO4、MgSO4和/或柠檬酸钠。其他实例是在例如WO 2008/017659、WO 2006/034710、WO 1997/05245、WO 1998/54980、WO 1998/55599、WO 2000/70034中描述的那些，或是例如在WO 2001/00042中描述的聚合物包衣。
在另一个实施例中，该组合物是一种固体组合物，该固体组合物包括本发明的木聚糖酶和一种或多种选自以下列表的一种或多种调配剂，该列表由以下各项组成：氯化钠、苯甲酸钠、山梨酸钾、硫酸钠、硫酸钾、硫酸镁、硫代硫酸钠、碳酸钙、柠檬酸钠、糊精、葡萄糖、蔗糖、山梨醇、乳糖、淀粉和纤维素。在一个优选实施例中，该调配剂选自以下化合物中的一种或多种：硫酸钠、糊精、纤维素、硫代硫酸钠和碳酸钙。在一个优选实施例中，该固体组合物是处于颗粒形式。在一个实施例中，该固体组合物是处于颗粒形式，并且包括核心颗粒、包含本发明的木聚糖酶的酶层以及盐包衣。
在另外的实施例中，该调配剂选自以下化合物中的一种或多种：甘油、乙二醇、 1,2-丙二醇或1,3-丙二醇、氯化钠、苯甲酸钠、山梨酸钾、硫酸钠、硫酸钾、硫酸镁、硫代硫酸钠、碳酸钙、柠檬酸钠、糊精、葡萄糖、蔗糖、山梨醇、乳糖、淀粉和纤维素。在一个优选实施例中，该调配剂选自以下化合物中的一种或多种：1,2- 丙二醇、1,3-丙二醇、硫酸钠、糊精、纤维素、硫代硫酸钠和碳酸钙。
来自黍亚科的基于植物的材料
在一个实施例中，来自黍亚科的基于植物的材料是来自蜀黍族，如级别须芒草属(Andropogon)或安德罗特氏菌属或水蔗草属(Apluda)或楔颖草属(Apocopis) 或荩草属(Arthraxon)或孔颖草属(Bothriochloa)或细柄草属(Capillipedium)或葫芦草属(Chionachne)或金须草属(Chrysopogon)或空轴茅属(Coelorachis)或薏苡属(Coix)或香茅属(Cymbopogon)或双花草属(Dichanthium)或双黄茅属 (Diheteropogon)或觿茅属(Dimeria)或香鳞茅属(Elionurus)或娱蚣草属 (Eremochloa)或优解草属(Euclasta)或金茅属(Eulalia)或吉曼草属(Germainia) 或牛鞭草属(Hemarthria)或异蛇尾草属(Heteropholis)或黄茅属(Heteropogon) 或苞芽属(Hyparrhenia)或金苞茅属(Hyperthelia)或白茅属(Imperata)或鸭嘴草属(Ischaemum)或合穗茅属(Iseilema)或泰蔗草属(Kerriochloa)或莠竹属 (Microstegium)或芒羽藓属(Miscanthidium)或芒属或毛俭草属(Mnesithea)或蛇尾草属(Ophiuros)或偏基草属(Oxyrhachis)或束尾草属(Phacelurus)或蜥尾禾属()Pholiurus或金丝草属(Pogonatherum)或多裔草属(Polytoca)或单序草属(Polytrias)或假金发草属(Pseudopogonatherum)或假高粱属(Pseudosorghum) 或皱颖草属(Rhytachne)或筒轴茅属(Rottboellia)或甘蔗属(Saccharum)或针粱草属(Sarga)或裂稃草属(Schizachyrium)或沟颖草属(Sehima)或假高粱属 (Sorghastrum)或高粱属(Sorghum)或大油芒属(Spodiopogon)或假蛇尾草属(Thaumastochloa)或疣颖草属(Thelepogon)或菅草属(Themeda)或皱芒草属(Trachypogon)或荻属(Triarrhena)或摩擦草属(Tripsacum)或尾鳞草属(Urelytrum) 或香根草属(Vetiveria)或河马草属(Vossia)或旱米草属(Xerochloa)或玉蜀黍属。
在一个优选实施例中，来自黍亚科的基于植物的材料是来自玉蜀黍属(Zea) 级别，如物种二倍体多年生类玉米(Zea diploperennis)、繁茂类玉米(Zea luxurians)、玉蜀黍(Zea mays)、尼加拉瓜类玉米(Zea nicaraguensis)或四倍体多年生类玉米 (Zeaperennis)。
在一个优选实施例中，来自黍亚科的基于植物的材料来自高粱属级别，如物种阔叶高粱(Sorghum amplum)、狭叶高粱(Sorghum angustum)、澳大利亚高粱 (Sorghumaustraliense)、双色高粱(Sorghum bicolor)、短柄高粱(Sorghum brachypodum)、球茎高粱(Sorghum bulbosum)、龙骨状高粱(Sorghum ecarinatum)、外鞘柄高粱(Sorghumexstans)、格兰德高粱(Sorghum grande)、假高粱(Sorghum halepense)、高粱杂种栽培品种、中间高粱(Sorghum interjectum)、非可迁黍(Sorghum intrans)、疏花高粱(Sorghumlaxiflorum)、利奥克拉德高粱(Sorghum leiocladum)、巨籽高粱(Sorghummacrospermum)、麦特粒高粱(Sorghum matarankense)、光高粱(Sorghum nitidum)、羽状高粱(Sorghum plumosum)、拟高梁(Sorghum propinquum)、紫绢毛高粱(Sorghumpurpureosericeum)、针茅高粱(Sorghum stipoideum)、苏丹草(Sorghum sudanense)、帝汶高粱(Sorghum timorense)、多色高粱(Sorghum versicolor)、高粱属物种(Sorghum sp.)‘西尔克’(‘Silk’)、或如WO 2007/002267中所定义的高粱属物种。
在另一个实施例中，来自黍亚科的基于植物的材料来自黍族，如级别缠芒草属(Acritochaete)、凤头黍属(Acroceras)、Alexfloydia、毛颖草属(Alloteropsis)、姬苇属(Amphicarpum)、钩穗草属(Ancistrachne)、瓶刷草属(Anthephora)、臂形草属(Brachiaria)、纤隐草属(Calyptochloa)、蒺藜草属(Cenchrus)、髯柄草属(Chaetium)、鬃禾属(Chaetopoa)、鬃针茅属(Chamaeraphis)、绿兜草属(Chlorocalymma)、蔺隐草属(Cleistochloa)、拱稃草属(Cyphochlaena)、弓果黍属(Cyrtococcum)、二型花属(Dichanthelium)、马唐属(Digitaria)、假狗尾草属(Dissochondrus)、稗草属(Echinochloa)、内毛草属(Entolasia)、野黍属(Eriochloa)、同鳞虎属(Homopholis)、水鞭草属(Hygrochloa)、林行黍属 (Hylebates)、火鸡草属(Ixophorus)、小芦竹属(Lasiacis)、玉毛虫属(Leucophrys)、泥稗属(Louisiella)、长颖马唐属(Megaloprotachne)、大序黍属(Megathyrsus)、糖蜜草属(Melinis)、新小竹属(Microcalamus)、Moorochloa、脉颖草属(Neurachne)、水斗草属(Odontelytrum)、球米草属(Oplismenus)、露籽草属(Ottochloa)、黍属(Panicum)、秃刷草属(Paractaenum)、异脉颖草属(Paraneurachne)、隐鬃草属(Paratheria)、Parodiophyllochloa、类雀稗属(Paspalidium)、狼尾草属 (Pennisetum)、鬃刷草属(Plagiosetum)、灿穗黍属(Poecilostachys)、钩毛草属(Pseudechinolaena)、枝狼草属(Pseudochaetochloa)、伪针茅属(Pseudoraphis)、 Rupichloa、囊颖草属(Sacciolepis)、盾颖黍属(Scutachne)、狗尾草属(Setaria)、坚狗尾草属(Setariopsis)、胁穗草属(Snowdenia)、滨刺草属(Spinifex)、钝叶草属(Stenotaphrum)、芒马唐属(Stereochlaena)、交雀草属(Thrasya)、萏雷草属(Thuarea)、窗颖草属(Thyridolepis)、贫地黍属(Tricholaena)、未归类的黍、节鞭草属(Uranthoecium)、尾稃草属(Urochloa)、Walwhalleya、丝梗黍属 (Whiteochloa)、柱梗黍属(Yakirra)、Yvesia、Zuloagaea或沙芜草属(Zygochloa)。
在一个优选实施例中，来自黍亚科的基于植物的材料是来自黍属级别，如以下物种：紫茎黍(Panicum adenophorum)、尖头黍(Panicum aff.Aquaticum)JKT-2012、苦黍(Panicum amarum)、蓝黍(Panicum antidotale)、粉绿黍(Panicum aquaticum)、天栌黍(Panicum arctum)、筒节黍(Panicum arundinariae)、暗红黍(Panicum atrosanguineum)、奥里科姆黍(Panicum auricomum)、折萼黍(Panicum auritum)、巴氏黍(Panicumbartlettii)、伯氏黍(Panicum bergii)、糠稷(Panicum bisulcatum)、勃氏黍(Panicumboliviense)、布拉柴维尔黍(Panicum brazzavillense)、短叶黍 (Panicumbrevifolium)、卡瓜苏黍(Panicum caaguazuense)、坎佩斯特雷黍(Panicum campestre)、毛绒稷(Panicum capillare)、卡宴恩瑟黍(Panicum cayennense)、卡约恩瑟黍(Panicumcayoense)、塞尔维黍(Panicum cervicatum)、绿亮状黍(Panicum chloroleucum)、克氏黍(Panicum claytonii)、着色黍(Panicum coloratum)、暗蓝黍(Panicum cyanescens)、多籽黍(Panicum decompositum)、焦色黍(Panicum deustum)、洋野黍(Panicumdichotomiflorum)、细叶黍(Panicum dinklagei)、黄藓黍(Panicum distichophyllum)、藤黍(Panicum dregeanum)、象脚黍(Panicum elephantipes)、傅氏黍(Panicum fauriei)、柔性黍(Panicum flexile)、弗吕科拉黍(Panicum fluviicola)、铺地黍(Panicum gouinii)、细长黍(Panicum gracilicaule)、广东黍(Panicum granuliferum)、危地马拉黍(Panicumguatemalense)、霍氏黍 (Panicum hallii)、杂多穗黍(Panicum heterostachyum)、腺毛茎黍(Panicum hirticaule)、恶味黍(Panicum hirtum)、雨林黍(Panicum hylaeicum)、背倚黍(Panicum incumbens)、致病黍(Panicum infestum)、意大利黍(Panicum italicum)、光泽黍(Panicum laetum)、光滑节点黍(Panicum laevinode)、绵柄黍(Panicum lanipes)、拉科尼亚黍(Panicum larcomianum)、长梗黍(Panicum longipedicellatum)、町田黍(Panicum machrisianum)、软毛黍(Panicum malacotrichum)、珠黍(Panicummargaritiferum)、硬叶黍(Panicum micranthum)、猪粟(Panicum miliaceum)、多花黍(Panicum milioides)、粒结节黍(Panicum millegrana)、神秘黍(Panicum mystasipum)、纳塔莱黍(Panicum natalense)、霞石黍(Panicum nephelophilum)、多脉黍(Panicumnervosum)、心叶稷(Panicum notatum)、奥格罗黍(Panicum olyroides)、水生黍(Panicumpaludosum)、扩展黍(Panicum pansum)、周毛黍 (Panicum pantrichum)、小叶黍(Panicumparvifolium)、铃珑黍(Panicum parviglume)、佩氏黍(Panicum pedersenii)、潘氏黍(Panicum penicillatu)、彼氏黍(Panicum petersonii)、苇状黍(Panicumphragmitoides)、皮奥伊州黍(Panicum piauiense)、疏毛黍(Panicum pilosum)、丰饶黍(Panicum pleianthum)、多毛黍 (Panicum polycomum)、黄精黍(Panicum polygonatum)、柳叶箬黍(Panicum pseudisachne)、多疣黍(Panicum pygmaeum)、梨果黍(Panicumpyrularium)、昆士兰单黍(Panicum queenslandicum)、葡萄状黍(Panicum racemosum)、铺地黍(Panicum repens)、桧藓稷(Panicum rhizogonum)、微硬毛黍(Panicum rigidulum)、紫萼黍(Panicum rivale)、野稷(Panicum rude)、汝孜黍(Panicum rudgei)、欣氏黍(Panicum schinzii)、施拉克黍(Panicum schwackeanum)、塞氏黍(Panicum sellowii)、半裸黍(Panicum seminudum)、毛梗黍(Panicum stapfianum)、窄纹黍(Panicum stenodes)、草黄黍(Panicum stramineum)、亚亮黍(Panicum subalbidum)、亚提拉米苏黍(Panicumsubtiramulosum)、细柄黍(Panicum sumatrense)、柔叶黍(Panicum tenellum)、细叶黍(Panicum tenuifolium)、长毛黍(Panicum trichanthum)、毛鹧鸪黍(Panicumtrichidiachne)、毛样黍(Panicum trichoides)、毛腺状黍(Panicum tricholaenoides)、阔叶黍(Panicum tuerckheimii)、圆锥黍(Panicum turgidum)、长尖黍(Panicumurvilleanum)、强壮黍(Panicum validum)、委内瑞拉黍(Panicum venezuelae)、鲜绿黍(Panicum verrucosum)、柳枝稷(Panicum virgatum)、宽叶雀稗(Panicum wettsteinii)、黍属(Panicum sp.)、黍属克里斯汀(Christin)16-200、黍属ELS-2011、黍属EM389或黍属福雷斯特(Forest)761。。
在一个另外的实施例中，来自黍亚科的基于植物的材料是玉蜀黍(maize)(玉蜀黍属(zea))、玉米(corn)(玉蜀黍属)、高粱(高粱属)、柳枝稷(switchgrass) (柳枝稷(Panicum virgatum))、粟(millet)(黍(Panicum miliaceum))、珍珠粟(Cenchrusviolaceus，还称珍珠稷(Pennisetum glaucum))、谷子(粟(Setaria italica)，还称为秫米(Panicum italicum))，或其经加工的形式，如研磨的玉米、研磨的玉蜀黍、脱脂玉蜀黍、脱脂脱淀粉的玉蜀黍、研磨的高粱、研磨的柳枝稷、研磨的粟、研磨的谷子、研磨的珍珠粟、或其任何组合。
在一个实施例中，来自黍亚科的基于植物的材料是来自植物的种子。在一个优选的实施例中，来自黍亚科的基于植物的材料是来自玉蜀黍(maize)(玉蜀黍属 (zea))、玉米(corn)(玉蜀黍属)、高粱(高粱属)、柳枝稷(switchgrass) (柳枝稷(Panicum virgatum))、粟(millet)(黍(Panicum miliaceum))、珍珠粟(Cenchrus violaceus，还称珍珠稷(Pennisetum glaucum))、谷子(粟(Setaria italica)，还称为秫米(Panicum italicum))的种子，或其中该种子已经被加工，如研磨的玉米、研磨的玉蜀黍、脱脂玉蜀黍、脱脂脱淀粉的玉蜀黍、研磨的高粱、研磨的柳枝稷、研磨的粟、研磨的谷子、研磨的珍珠粟、或其任何组合。
动物饲料和动物饲料添加剂
本发明还涉及包括本发明第一方面的组合物的动物饲料和动物饲料添加剂。在一个实施例中，该动物饲料添加剂包括调配剂和本发明第一方面的组合物。在一个实施例中，该动物饲料包括调配剂和本发明第一方面的组合物。在另外的实施例中，该调配剂包括以下化合物中的一种或多种：甘油、乙二醇、1,2-丙二醇或1,3-丙二醇、氯化钠、苯甲酸钠、山梨酸钾、硫酸钠、硫酸钾、硫酸镁、硫代硫酸钠、碳酸钙、柠檬酸钠、糊精、葡萄糖、蔗糖、山梨醇、乳糖、淀粉和纤维素。
在一个实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂包括一种或多种另外的酶。在一个实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂包括一种或多种微生物。在一个实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂包括一种或多种维生素。在一个实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂包括一种或多种矿物质。在一个实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂包括一种或多种氨基酸。在一个另外的实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂进一步包括一种或多种调配剂和一种或多种选自以下列表的组分，该列表由以下各项组成：一种或多种另外的酶；一种或多种微生物；一种或多种维生素；一种或多种矿物质；一种或多种氨基酸；和一种或多种其他饲料成分。
本发明还涉及包括本发明第二至第二十八方面中任一项的多肽的动物饲料和动物饲料添加剂。在一个实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂包括调配剂和本发明第二至第二十八方面中任一项的一种或多种多肽。在另外的实施例中，该调配剂包括以下化合物中的一种或多种：甘油、乙二醇、1,2-丙二醇或1,3-丙二醇、氯化钠、苯甲酸钠、山梨酸钾、硫酸钠、硫酸钾、硫酸镁、硫代硫酸钠、碳酸钙、柠檬酸钠、糊精、葡萄糖、蔗糖、山梨醇、乳糖、淀粉和纤维素。在一个实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂包括一种或多种另外的酶。在一个优选的实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂进一步包括一种或多种具有木聚糖酶活性的GH10或 GH11多肽。在一个实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂包括一种或多种微生物。在一个实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂包括一种或多种维生素。在一个实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂包括一种或多种矿物质。在一个实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂包括一种或多种氨基酸。在一个另外的实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂进一步包括一种或多种调配剂和一种或多种选自以下列表的组分，该列表由以下各项组成：一种或多种另外的酶；一种或多种微生物；一种或多种维生素；一种或多种矿物质；一种或多种氨基酸；和一种或多种其他饲料成分。
本发明进一步涉及包括以下多肽的动物饲料或动物饲料添加剂，该多肽具有木聚糖酶活性并且与SEQ ID NO:71的多肽具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％的序列一致性。在一个实施例中，这些多肽与SEQ IDNO:71的成熟多肽相差多达25个氨基酸，例如1与25个之间的氨基酸，如1-25、1-20、1-15、1-10或1-5个氨基酸，或1、 2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、 22、23、24或25个氨基酸。在一个实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂进一步包括如在以上调配剂部分中所述的调配剂。在另外的实施例中，该调配剂包括以下化合物中的一种或多种：甘油、乙二醇、1,2-丙二醇或1,3-丙二醇、氯化钠、苯甲酸钠、山梨酸钾、硫酸钠、硫酸钾、硫酸镁、硫代硫酸钠、碳酸钙、柠檬酸钠、糊精、葡萄糖、蔗糖、山梨醇、乳糖、淀粉和纤维素。在一个实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂包括一种或多种另外的酶。在一个优选的实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂进一步包括一种或多种具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽。在一个实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂包括一种或多种微生物。在一个实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂包括一种或多种维生素。在一个实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂包括一种或多种矿物质。在一个实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂包括一种或多种氨基酸。在一个另外的实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂进一步包括一种或多种调配剂和一种或多种选自以下列表的组分，该列表由以下各项组成：一种或多种另外的酶；一种或多种微生物；一种或多种维生素；一种或多种矿物质；一种或多种氨基酸；和一种或多种其他饲料成分。
在一个实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂包括下述多肽，所述多肽包括SEQ ID NO:71的氨基酸序列或其等位基因变体或由它们组成；或是其片段，该片段具有木聚糖酶活性并且具有该多肽的至少90％，如至少91％、至少92％、至少 93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、或至少99％的长度。在另一个实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂包括下述多肽，所述多肽包括 SEQ ID NO:71的氨基酸1至288或由其组成。
在另一个实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂包括具有木聚糖酶活性的变体多肽，其中该多肽是SEQ ID NO:71的变体，该变体包括在1、2、3、4、5、6、 7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24或25 个位置中的一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，在SEQ ID NO:71中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合的位置的数目不超过10，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在另一个实施例中，在SEQ ID NO:71中的取代、缺失和/或插入的数目不超过10，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在一个另外的实施例中，SEQ ID NO:71 中取代，优选保守取代的数目不超过10，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10 个。在本发明的第二方面中描述了氨基酸变化和保守取代的实例。
本发明进一步涉及包括以下多肽的动物饲料或动物饲料添加剂，该多肽具有木聚糖酶活性并且与SEQ ID NO:78的多肽具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％的序列一致性。在一个实施例中，这些多肽与SEQ IDNO:78的成熟多肽相差多达25个氨基酸，例如1与25个之间的氨基酸，如1-25、1-20、1-15、1-10或1-5个氨基酸，或1、 2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、 22、23、24或25个氨基酸。在一个实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂进一步包括如在以上调配剂部分中所述的调配剂。在另外的实施例中，该调配剂包括以下化合物中的一种或多种：甘油、乙二醇、1,2-丙二醇或1,3-丙二醇、氯化钠、苯甲酸钠、山梨酸钾、硫酸钠、硫酸钾、硫酸镁、硫代硫酸钠、碳酸钙、柠檬酸钠、糊精、葡萄糖、蔗糖、山梨醇、乳糖、淀粉和纤维素。在一个实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂包括一种或多种另外的酶。在一个优选的实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂进一步包括一种或多种具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽。在一个实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂包括一种或多种微生物。在一个实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂包括一种或多种维生素。在一个实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂包括一种或多种矿物质。在一个实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂包括一种或多种氨基酸。在一个另外的实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂进一步包括一种或多种调配剂和一种或多种选自以下列表的组分，该列表由以下各项组成：一种或多种另外的酶；一种或多种微生物；一种或多种维生素；一种或多种矿物质；一种或多种氨基酸；和一种或多种其他饲料成分。
在一个实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂包括下述多肽，所述多肽包括SEQ ID NO:78的氨基酸序列或其等位基因变体或由它们组成；或是其片段，该片段具有木聚糖酶活性并且具有该多肽的至少90％，如至少91％、至少92％、至少 93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、或至少99％的长度。在另一个实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂包括下述多肽，所述多肽包括 SEQ ID NO:78的氨基酸1至183或由其组成。在另一个实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂包括下述多肽，所述多肽包括SEQID NO:81的氨基酸1至181或由其组成。
在另一个实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂包括具有木聚糖酶活性的变体多肽，其中该多肽是SEQ ID NO:78的变体，该变体包括在1、2、3、4、5、6、 7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24或25 个位置中的一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，在SEQ ID NO:78中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合的位置的数目不超过10，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在另一个实施例中，在SEQ ID NO:78中的取代、缺失和/或插入的数目不超过10，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在一个另外的实施例中，SEQ ID NO:78 中取代，优选保守取代的数目不超过10，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10 个。在本发明的第二方面中描述了氨基酸变化和保守取代的实例。
本发明进一步涉及包括以下多肽的动物饲料或动物饲料添加剂，该多肽具有木聚糖酶活性并且与SEQ ID NO:177的多肽具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％的序列一致性。在一个实施例中，这些多肽与SEQ IDNO:177的成熟多肽相差多达25个氨基酸，例如1与25个之间的氨基酸，如1-25、1-20、1-15、1-10或1-5个氨基酸，或1、 2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24或25个氨基酸。在一个实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂进一步包括如在以上调配剂部分中所述的调配剂。在另外的实施例中，该调配剂包括以下化合物中的一种或多种：甘油、乙二醇、1,2-丙二醇或1,3-丙二醇、氯化钠、苯甲酸钠、山梨酸钾、硫酸钠、硫酸钾、硫酸镁、硫代硫酸钠、碳酸钙、柠檬酸钠、糊精、葡萄糖、蔗糖、山梨醇、乳糖、淀粉和纤维素。在一个实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂包括一种或多种另外的酶。在一个优选的实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂进一步包括一种或多种具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽。在一个实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂包括一种或多种微生物。在一个实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂包括一种或多种维生素。在一个实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂包括一种或多种矿物质。在一个实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂包括一种或多种氨基酸。在一个另外的实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂进一步包括一种或多种调配剂和一种或多种选自以下列表的组分，该列表由以下各项组成：一种或多种另外的酶；一种或多种微生物；一种或多种维生素；一种或多种矿物质；一种或多种氨基酸；和一种或多种其他饲料成分。
在一个实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂包括下述多肽，所述多肽包括SEQ ID NO:177的氨基酸序列或其等位基因变体或由它们组成；或是其片段，该片段具有木聚糖酶活性并且具有该多肽的至少90％，如至少91％、至少92％、至少 93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、或至少99％的长度。在另一个实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂包括下述多肽，所述多肽包括 SEQ ID NO:177的氨基酸1至323或由其组成。在另一个实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂包括下述多肽，所述多肽包括SEQID NO:180的氨基酸1至331 或由其组成。
在另一个实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂包括具有木聚糖酶活性的变体多肽，其中该多肽是SEQ ID NO:177的变体，该变体包括在1、2、3、4、5、6、 7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24或25 个位置中的一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，在SEQ ID NO:177中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合的位置的数目不超过10，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在另一个实施例中，在SEQ ID NO:177中的取代、缺失和/或插入的数目不超过10，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在一个另外的实施例中，SEQ ID NO:177 中取代，优选保守取代的数目不超过10，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10 个。在本发明的第二方面中描述了氨基酸变化和保守取代的实例。
本发明进一步涉及包括以下多肽的动物饲料或动物饲料添加剂，该多肽具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且与SEQ ID NO:15的多肽具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％的序列一致性。在一个实施例中，这些多肽与SEQ ID NO:15的成熟多肽相差多达25 个氨基酸，例如1与25个之间的氨基酸，如1-25、1-20、1-15、1-10或1-5个氨基酸，或1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24或25个氨基酸。在一个实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂进一步包括如在以上调配剂部分中所述的调配剂。在另外的实施例中，该调配剂包括以下化合物中的一种或多种：甘油、乙二醇、1,2-丙二醇或1,3-丙二醇、氯化钠、苯甲酸钠、山梨酸钾、硫酸钠、硫酸钾、硫酸镁、硫代硫酸钠、碳酸钙、柠檬酸钠、糊精、葡萄糖、蔗糖、山梨醇、乳糖、淀粉和纤维素。在一个实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂包括一种或多种另外的酶。在一个优选的实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂进一步包括一种或多种具有木聚糖酶活性的GH10或 GH11多肽。在一个实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂包括一种或多种微生物。在一个实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂包括一种或多种维生素。在一个实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂包括一种或多种矿物质。在一个实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂包括一种或多种氨基酸。在一个另外的实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂进一步包括一种或多种调配剂和一种或多种选自以下列表的组分，该列表由以下各项组成：一种或多种另外的酶；一种或多种微生物；一种或多种维生素；一种或多种矿物质；一种或多种氨基酸；和一种或多种其他饲料成分。
在一个实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂包括下述多肽，所述多肽包括SEQ ID NO:15的氨基酸序列或其等位基因变体或由它们组成；或是其片段，该片段具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且具有该多肽的至少90％，如至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、或至少99％的长度。在另一个实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂包括下述多肽，所述多肽包括SEQ ID NO:15的氨基酸1至323或由其组成。在另一个实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂包括下述多肽，所述多肽包括SEQ ID NO:180的氨基酸1 至331或由其组成。
在另一个实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂包括具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的变体多肽，其中该多肽是SEQ ID NO:15的变体，该变体包括在1、2、3、4、 5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、 24或25个位置中的一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，在SEQ ID NO:15中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合的位置的数目不超过10，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在另一个实施例中，在SEQ ID NO:15中的取代、缺失和/或插入的数目不超过10，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在一个另外的实施例中，SEQ ID NO:15 中取代，优选保守取代的数目不超过10，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10 个。在本发明的第二方面中描述了氨基酸变化和保守取代的实例。
本发明进一步涉及包括以下多肽的动物饲料或动物饲料添加剂，该多肽具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且与SEQ ID NO:18的多肽具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％的序列一致性。在一个实施例中，这些多肽与SEQ ID NO:18的成熟多肽相差多达25 个氨基酸，例如1与25个之间的氨基酸，如1-25、1-20、1-15、1-10或1-5个氨基酸，或1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24或25个氨基酸。在一个实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂进一步包括如在以上调配剂部分中所述的调配剂。在另外的实施例中，该调配剂包括以下化合物中的一种或多种：甘油、乙二醇、1,2-丙二醇或1,3-丙二醇、氯化钠、苯甲酸钠、山梨酸钾、硫酸钠、硫酸钾、硫酸镁、硫代硫酸钠、碳酸钙、柠檬酸钠、糊精、葡萄糖、蔗糖、山梨醇、乳糖、淀粉和纤维素。在一个实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂包括一种或多种另外的酶。在一个优选的实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂进一步包括一种或多种具有木聚糖酶活性的GH10或 GH11多肽。在一个实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂包括一种或多种微生物。在一个实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂包括一种或多种维生素。在一个实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂包括一种或多种矿物质。在一个实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂包括一种或多种氨基酸。在一个另外的实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂进一步包括一种或多种调配剂和一种或多种选自以下列表的组分，该列表由以下各项组成：一种或多种另外的酶；一种或多种微生物；一种或多种维生素；一种或多种矿物质；一种或多种氨基酸；和一种或多种其他饲料成分。
在一个实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂包括下述多肽，所述多肽包括SEQ ID NO:18的氨基酸序列或其等位基因变体或由它们组成；或是其片段，该片段具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且具有该多肽的至少90％，如至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、或至少99％的长度。在另一个实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂包括下述多肽，所述多肽包括SEQ ID NO:18的氨基酸1至323或由其组成。在另一个实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂包括下述多肽，所述多肽包括SEQ ID NO:180的氨基酸1 至331或由其组成。
在另一个实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂包括具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的变体多肽，其中该多肽是SEQ ID NO:18的变体，该变体包括在1、2、3、4、 5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、 24或25个位置中的一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，在SEQ ID NO:18中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合的位置的数目不超过10，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在另一个实施例中，在SEQ ID NO:18中的取代、缺失和/或插入的数目不超过10，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在一个另外的实施例中，SEQ ID NO:18 中取代，优选保守取代的数目不超过10，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10 个。在本发明的第二方面中描述了氨基酸变化和保守取代的实例。
本发明进一步涉及包括以下多肽的动物饲料或动物饲料添加剂，该多肽具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且与SEQ ID NO:21的多肽具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％的序列一致性。在一个实施例中，这些多肽与SEQ ID NO:21的成熟多肽相差多达25 个氨基酸，例如1与25个之间的氨基酸，如1-25、1-20、1-15、1-10或1-5个氨基酸，或1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24或25个氨基酸。在一个实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂进一步包括如在以上调配剂部分中所述的调配剂。在另外的实施例中，该调配剂包括以下化合物中的一种或多种：甘油、乙二醇、1,2-丙二醇或1,3-丙二醇、氯化钠、苯甲酸钠、山梨酸钾、硫酸钠、硫酸钾、硫酸镁、硫代硫酸钠、碳酸钙、柠檬酸钠、糊精、葡萄糖、蔗糖、山梨醇、乳糖、淀粉和纤维素。在一个实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂包括一种或多种另外的酶。在一个优选的实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂进一步包括一种或多种具有木聚糖酶活性的GH10或GH11多肽。在一个实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂包括一种或多种微生物。在一个实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂包括一种或多种维生素。在一个实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂包括一种或多种矿物质。在一个实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂包括一种或多种氨基酸。在一个另外的实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂进一步包括一种或多种调配剂和一种或多种选自以下列表的组分，该列表由以下各项组成：一种或多种另外的酶；一种或多种微生物；一种或多种维生素；一种或多种矿物质；一种或多种氨基酸；和一种或多种其他饲料成分。
在一个实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂包括下述多肽，所述多肽包括SEQ ID NO:21的氨基酸序列或其等位基因变体或由它们组成；或是其片段，该片段具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且具有该多肽的至少90％，如至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、或至少99％的长度。在另一个实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂包括下述多肽，所述多肽包括SEQ ID NO:21的氨基酸1至323或由其组成。在另一个实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂包括下述多肽，所述多肽包括SEQ ID NO:180的氨基酸1 至331或由其组成。
在另一个实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂包括具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的变体多肽，其中该多肽是SEQ ID NO:21的变体，该变体包括在1、2、3、4、 5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、 24或25个位置中的一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，在SEQ ID NO:21中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合的位置的数目不超过10，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在另一个实施例中，在SEQ ID NO:21中的取代、缺失和/或插入的数目不超过10，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在一个另外的实施例中，SEQ ID NO:21 中取代，优选保守取代的数目不超过10，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10 个。在本发明的第二方面中描述了氨基酸变化和保守取代的实例。
本发明进一步涉及包括以下多肽的动物饲料或动物饲料添加剂，该多肽具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且与SEQ ID NO:42的多肽具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％的序列一致性。在一个实施例中，这些多肽与SEQ ID NO:42的成熟多肽相差多达25 个氨基酸，例如1与25个之间的氨基酸，如1-25、1-20、1-15、1-10或1-5个氨基酸，或1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24或25个氨基酸。在一个实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂进一步包括如在以上调配剂部分中所述的调配剂。在另外的实施例中，该调配剂包括以下化合物中的一种或多种：甘油、乙二醇、1,2-丙二醇或1,3-丙二醇、氯化钠、苯甲酸钠、山梨酸钾、硫酸钠、硫酸钾、硫酸镁、硫代硫酸钠、碳酸钙、柠檬酸钠、糊精、葡萄糖、蔗糖、山梨醇、乳糖、淀粉和纤维素。在一个实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂包括一种或多种另外的酶。在一个优选的实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂进一步包括一种或多种具有木聚糖酶活性的GH10或 GH11多肽。在一个实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂包括一种或多种微生物。在一个实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂包括一种或多种维生素。在一个实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂包括一种或多种矿物质。在一个实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂包括一种或多种氨基酸。在一个另外的实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂进一步包括一种或多种调配剂和一种或多种选自以下列表的组分，该列表由以下各项组成：一种或多种另外的酶；一种或多种微生物；一种或多种维生素；一种或多种矿物质；一种或多种氨基酸；和一种或多种其他饲料成分。
在一个实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂包括下述多肽，所述多肽包括SEQ ID NO:42的氨基酸序列或其等位基因变体或由它们组成；或是其片段，该片段具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且具有该多肽的至少90％，如至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、或至少99％的长度。在另一个实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂包括下述多肽，所述多肽包括SEQ ID NO:42的氨基酸1至323或由其组成。在另一个实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂包括下述多肽，所述多肽包括SEQ ID NO:180的氨基酸1 至331或由其组成。
在另一个实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂包括具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的变体多肽，其中该多肽是SEQ ID NO:42的变体，该变体包括在1、2、3、4、 5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、 24或25个位置中的一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，在SEQ ID NO:42中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合的位置的数目不超过10，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在另一个实施例中，在SEQ ID NO:42中的取代、缺失和/或插入的数目不超过10，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在一个另外的实施例中，SEQ ID NO:42 中取代，优选保守取代的数目不超过10，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10 个。在本发明的第二方面中描述了氨基酸变化和保守取代的实例。
本发明进一步涉及包括以下多肽的动物饲料或动物饲料添加剂，该多肽具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且与SEQ ID NO:132的多肽具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％的序列一致性。在一个实施例中，这些多肽与SEQ ID NO:132的成熟多肽相差多达 25个氨基酸，例如1与25个之间的氨基酸，如1-25、1-20、1-15、1-10或1-5个氨基酸，或1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24或25个氨基酸。在一个实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂进一步包括如在以上调配剂部分中所述的调配剂。在另外的实施例中，该调配剂包括以下化合物中的一种或多种：甘油、乙二醇、1,2-丙二醇或1,3-丙二醇、氯化钠、苯甲酸钠、山梨酸钾、硫酸钠、硫酸钾、硫酸镁、硫代硫酸钠、碳酸钙、柠檬酸钠、糊精、葡萄糖、蔗糖、山梨醇、乳糖、淀粉和纤维素。在一个实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂包括一种或多种另外的酶。在一个优选的实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂进一步包括一种或多种具有木聚糖酶活性的GH10或 GH11多肽。在一个实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂包括一种或多种微生物。在一个实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂包括一种或多种维生素。在一个实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂包括一种或多种矿物质。在一个实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂包括一种或多种氨基酸。在一个另外的实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂进一步包括一种或多种调配剂和一种或多种选自以下列表的组分，该列表由以下各项组成：一种或多种另外的酶；一种或多种微生物；一种或多种维生素；一种或多种矿物质；一种或多种氨基酸；和一种或多种其他饲料成分。
在一个实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂包括下述多肽，所述多肽包括SEQ ID NO:132的氨基酸序列或其等位基因变体或由它们组成；或是其片段，该片段具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且具有该多肽的至少90％，如至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、或至少99％的长度。在另一个实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂包括下述多肽，所述多肽包括SEQ ID NO:132的氨基酸1至323或由其组成。在另一个实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂包括下述多肽，所述多肽包括SEQ ID NO:180的氨基酸1 至331或由其组成。
在另一个实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂包括具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的变体多肽，其中该多肽是SEQ ID NO:132的变体，该变体包括在1、2、3、 4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、 24或25个位置中的一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，在SEQ ID NO:132中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合的位置的数目不超过10，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10 个。在另一个实施例中，在SEQ ID NO:132中的取代、缺失和/或插入的数目不超过10，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在一个另外的实施例中，SEQ ID NO:132中取代，优选保守取代的数目不超过10，例如1、2、3、4、5、6、7、8、 9或10个。在本发明的第二方面中描述了氨基酸变化和保守取代的实例。
本发明进一步涉及包括以下多肽的动物饲料或动物饲料添加剂，该多肽具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且与SEQ ID NO:150的多肽具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％的序列一致性。在一个实施例中，这些多肽与SEQ ID NO:150的成熟多肽相差多达 25个氨基酸，例如1与25个之间的氨基酸，如1-25、1-20、1-15、1-10或1-5个氨基酸，或1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24或25个氨基酸。在一个实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂进一步包括如在以上调配剂部分中所述的调配剂。在另外的实施例中，该调配剂包括以下化合物中的一种或多种：甘油、乙二醇、1,2-丙二醇或1,3-丙二醇、氯化钠、苯甲酸钠、山梨酸钾、硫酸钠、硫酸钾、硫酸镁、硫代硫酸钠、碳酸钙、柠檬酸钠、糊精、葡萄糖、蔗糖、山梨醇、乳糖、淀粉和纤维素。在一个实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂包括一种或多种另外的酶。在一个优选的实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂进一步包括一种或多种具有木聚糖酶活性的GH10或 GH11多肽。在一个实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂包括一种或多种微生物。在一个实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂包括一种或多种维生素。在一个实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂包括一种或多种矿物质。在一个实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂包括一种或多种氨基酸。在一个另外的实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂进一步包括一种或多种调配剂和一种或多种选自以下列表的组分，该列表由以下各项组成：一种或多种另外的酶；一种或多种微生物；一种或多种维生素；一种或多种矿物质；一种或多种氨基酸；和一种或多种其他饲料成分。
在一个实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂包括下述多肽，所述多肽包括SEQ ID NO:150的氨基酸序列或其等位基因变体或由它们组成；或是其片段，该片段具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且具有该多肽的至少90％，如至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、或至少99％的长度。在另一个实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂包括下述多肽，所述多肽包括SEQ ID NO:150的氨基酸1至323或由其组成。在另一个实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂包括下述多肽，所述多肽包括SEQ ID NO:180的氨基酸1 至331或由其组成。
在另一个实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂包括具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的变体多肽，其中该多肽是SEQ ID NO:150的变体，该变体包括在1、2、3、 4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、 24或25个位置中的一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，在SEQ ID NO:150中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合的位置的数目不超过10，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10 个。在另一个实施例中，在SEQ ID NO:150中的取代、缺失和/或插入的数目不超过10，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在一个另外的实施例中，SEQ ID NO:150中取代，优选保守取代的数目不超过10，例如1、2、3、4、5、6、7、8、 9或10个。在本发明的第二方面中描述了氨基酸变化和保守取代的实例。
本发明还涉及包括以下多肽的动物饲料或动物饲料添加剂，该多肽具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且与SEQ ID NO:159的多肽具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％的序列一致性。在一个实施例中，这些多肽与SEQID NO:159的成熟多肽相差多达25 个氨基酸，例如1与25个之间的氨基酸，如1-25、1-20、1-15、1-10或1-5个氨基酸，或1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、 20、21、22、23、24或25个氨基酸。在一个实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂进一步包括如在以上调配剂部分中所述的调配剂。在另外的实施例中，该调配剂包括以下化合物中的一种或多种：甘油、乙二醇、1,2-丙二醇或1,3-丙二醇、氯化钠、苯甲酸钠、山梨酸钾、硫酸钠、硫酸钾、硫酸镁、硫代硫酸钠、碳酸钙、柠檬酸钠、糊精、葡萄糖、蔗糖、山梨醇、乳糖、淀粉和纤维素。在一个实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂包括一种或多种另外的酶。在一个优选的实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂进一步包括一种或多种具有木聚糖酶活性的GH10或 GH11多肽。在一个实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂包括一种或多种微生物。在一个实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂包括一种或多种维生素。在一个实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂包括一种或多种矿物质。在一个实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂包括一种或多种氨基酸。在一个另外的实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂进一步包括一种或多种调配剂和一种或多种选自以下列表的组分，该列表由以下各项组成：一种或多种另外的酶；一种或多种微生物；一种或多种维生素；一种或多种矿物质；一种或多种氨基酸；和一种或多种其他饲料成分。
在一个实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂包括下述多肽，所述多肽包括SEQ ID NO:159的氨基酸序列或其等位基因变体或由它们组成；或是其片段，该片段具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且具有该多肽的至少90％，如至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、或至少99％的长度。在另一个实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂包括下述多肽，所述多肽包括SEQ ID NO:159的氨基酸1至323或由其组成。在另一个实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂包括下述多肽，所述多肽包括SEQ ID NO:180的氨基酸1 至331或由其组成。
在另一个实施例中，该动物饲料或动物饲料添加剂包括具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的变体多肽，其中该多肽是SEQ ID NO:159的变体，该变体包括在1、2、3、 4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、 24或25个位置中的一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合。在一个实施例中，在SEQ ID NO:159中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合的位置的数目不超过10，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10 个。在另一个实施例中，在SEQ ID NO:159中的取代、缺失和/或插入的数目不超过10，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在一个另外的实施例中，SEQ ID NO:159中取代，优选保守取代的数目不超过10，例如1、2、3、4、5、6、7、8、 9或10个。在本发明的第二方面中描述了氨基酸变化和保守取代的实例。
动物饲料组合物或饮食具有相对高的蛋白含量。家禽和猪饮食的特征如WO 01/58275，表B第2-3栏所示。鱼饮食可被表征为该表B第4栏中所示的。此外，这类鱼食通常具有200-310g/kg的粗脂肪含量。
根据本发明的动物饲料组合物具有粗蛋白含量为50-800g/kg，并且此外还包括至少一种如在此要求保护的木聚糖酶和/或至少一种如在此要求保护的阿拉伯呋喃糖苷酶。
此外，或可替代地(对于以上指出的粗蛋白含量)，本发明的动物饲料组合物具有10-30MJ/kg的可代谢能量的含量；和/或0.1-200g/kg的钙含量；和/或0.1-200 g/kg的有效磷含量；和/或0.1-100g/kg的甲硫氨酸含量；和/或0.1-150g/kg的甲硫氨酸加半胱氨酸含量；和/或0.5-50g/kg的赖氨酸含量。
在具体实施例中，可代谢能量、粗蛋白、钙、磷、甲硫氨酸、甲硫氨酸加半胱氨酸、和/或赖氨酸的含量落入WO 01/58275，表B，范围2、3、4或5(R.2-5)中的任何一个中。
粗蛋白以氮(N)乘以系数6.25计算，即粗蛋白(g/kg)＝N(g/kg)X 6.25。通过凯氏定氮法(Kjeldahl method)测定氮含量(A.O.A.C.,1984，官方分析方法(Official Methodsof Analysis)第14版，官方分析化学家集(Association of Official AnalyticalChemists)，华盛顿特区)。
可代谢能量可根据NRC出版物猪的营养需求(Nutrient requirements inswine)，第十次再版1988，国家研究委员会农业部动物营养协会猪营养分会计算。美国国家科学院出版社，华盛顿特区，第2-6页和欧洲家禽饲养材料能量值表(European Table ofEnergy Values for Poultry Feed-stuffs)，斯克得霍特(Spelderholt)家禽研究与推广中心，7361DA贝克贝亨，荷兰，Grafisch bedrijf Ponsen&looijen公司，瓦赫宁恩.ISBN90-71463-12-5计算。
完整的动物饮食中钙、有效磷和氨基酸的饮食含量是在饲料表(如饲料表(Veevoedertabel)1997，化学成分数据(gegevens over chemische samenstelling)，饲料的消化率和营养价值(verteerbaarheid en voederwaarde van voedermiddelen)，中央饲料局(Central Veevoederbureau)，Runderweg 6,8219pk莱利斯塔德，ISBN 90-72839-13-7)的基础上计算。
在具体实施例中，本发明的动物饲料组合物包含如上定义的至少一种植物性蛋白。
本发明的动物饲料组合物还可以包含动物性蛋白，如肉和骨粉、羽毛粉、和/ 或鱼粉，通常量为0-25％。本发明的动物饲料组合物还可以包含具有可溶物的干酒糟(DriedDistillers Grains)，通常量为0-30％。
在另一具体实施例中，本发明的动物饲料组合物包含0-80％的玉米；和/或 0-80％的高粱；和/或0-70％小麦；和/或0-70％的大麦；和/或0-30％的燕麦；和/或 0-40％的大豆粉；和/或0-25％的鱼粉；和/或0-25％的肉和骨粉；和/或0-20％的乳清。
该动物饲料可以包括植物蛋白。在具体实施例中，这些植物性蛋白的蛋白含量是至少为10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、或90％(w/w)。植物性蛋白可以衍生自植物性蛋白来源，如豆类和谷类，例如得自蝶形花科(豆科)，十字花科，藜科和早熟禾科植物的材料，如大豆粉饼，羽扇豆粉饼，油菜籽粉饼，及其组合。
在一个具体实施例中，植物性蛋白来源是来自豆科(Fabaceae)的一种或多种植物的材料，如大豆、羽扇豆、豌豆、豆。在另一个具体实施例中，植物性蛋白来源是得自藜科的一种或多种植物，例如甜菜、糖甜菜、菠菜或奎奴亚藜的材料。植物性蛋白来源的其他实例是油菜和卷心菜。在另一个具体实施例中，大豆是一种优选的植物性蛋白来源。植物性蛋白来源的其他实例是谷物，如大麦、小麦、黑麦、燕麦、玉蜀黍(玉米)、水稻、和高粱。
可将动物饮食制成例如糊状饲料(非丸状)或丸状饲料。通常，混合研磨的饲料并根据所讨论的这些种类的说明添加充足量的必需维生素和矿物质。以固体或液体酶配制品的形式添加酶。例如，对于糊状饲料，在成分混合步骤前或期间可添加固体或液体酶配制品。对于丸状饲料，在饲料成分步骤前或期间还可添加该(固体或液体)木聚糖酶/酶制剂。典型地，液体酶制剂包括本发明的木聚糖酶和/或阿拉伯呋喃糖苷酶，任选地具有多元醇(如甘油、乙二醇或丙二醇)，并且是在压丸步骤后添加，如通过将该液体配制品喷涂至丸粒上。也可以将酶掺入饲料添加剂或预混物。
可替代地，可以通过冷冻液体酶溶液与膨胀剂(例如研磨的大豆粉)的混合物，并且然后冻干该混合物，来制备木聚糖酶和/或阿拉伯呋喃糖苷酶。
对于每种酶，饮食中的最终酶浓度在0.01-200mg蛋白酶蛋白/kg饮食的范围内，优选在0.05-100mg/kg饮食之间，更优选地是0.1-50mg，甚至更优选地是0.2-20 mg酶蛋白/kg动物饮食。
目前期望以一种或多种以下量(剂量范围)施用木聚糖酶：0.01-200；0.05-100；0.1-50；0.2-20；0.1-1；0.2-2；0.5-5；或1-10，其中所有这些范围是mg木聚糖酶蛋白/kg饲料(ppm)。目前期望以一种或多种以下量(剂量范围)施用阿拉伯呋喃糖苷酶：0.01-200；0.05-100；0.1-50；0.2-20；0.1-1；0.2-2；0.5-5；或1-10，其中所有这些范围是mg阿拉伯呋喃糖苷酶蛋白/kg饲料(ppm)。进一步预期GH10或 GH11木聚糖酶与GH62阿拉伯呋喃糖苷酶的比例是在100:1至1:100木聚糖酶: 阿拉伯呋喃糖苷酶的范围内，如50:1至1:50、50:1至1:10、25:1至1:5、10: 1至1:2或如10:1至1:50、5:1至1:25、2:1至1:10木聚糖酶:阿拉伯呋喃糖苷酶的范围。
为了确定每kg饲料中木聚糖酶的mg数和/或阿拉伯呋喃糖苷酶蛋白的mg数，从饲料组合物中纯化木聚糖酶和/或阿拉伯呋喃糖苷酶，并且使用相关测定法(参见木聚糖酶或阿拉伯呋喃糖苷酶活性)确定经纯化的木聚糖酶和/或阿拉伯呋喃糖苷酶的比活性。还使用相同测定法同样地确定饲料组合物的木聚糖酶和/或阿拉伯呋喃糖苷酶活性，并且根据这两个确定结果，计算以每kg饲料中木聚糖酶的mg数和/或阿拉伯呋喃糖苷酶蛋白的mg数计的剂量。
在一个具体实施例中，本发明的动物饲料添加剂意欲以0.01％至10.0％，更具体0.05％至5.0％或0.2％至1.0％(％指g添加剂/100g饲料)的水平包含(或规定为必须包含)在动物饮食或饲料中。具体地说，对预混物也是如此。
将同样的规则应用于确定饲料添加剂中的木聚糖酶mg数或阿拉伯呋喃糖苷酶 mg数。当然，如果样品使用了用于制备饲料添加剂或饲料的木聚糖酶或阿拉伯呋喃糖苷酶，可以由此样品确定比活性(不需要从饲料组合物或添加剂中纯化木聚糖酶或阿拉伯呋喃糖苷酶)。
另外的酶
在另一个实施例中，在此所描述的这些组合物任选地包括一种或多种酶。酶可在来自NC-IUBMB，1992的手册酶命名法(Enzyme Nomenclature)的基础上分类，还可以在以下网址参见ENZYME网站：http://www.expasy.ch/enzyme/。ENZYME 是相对于酶命名法的信息仓库。它主要基于国际生物化学和分子生物学联合会命名委员会(IUB-MB)，学术出版社公司(Academic Press，Inc.)，1992的推荐并且描述了所表征的酶的每种类型，为所述酶提供EC(酶委员会)编号(Bairoch A.The ENZYME database，2000，Nucleic Acids Res 28:304-305)。该IUB-MB酶命名法是基于它们的底物特异性并且偶尔也会基于他们的分子机制；此种分类并不反映这些酶的结构特征。
亨利萨特(Henrissat)等人在“2013年的碳水化合物活性酶数据库(Thecarbohydrate-active enzymes database)(CAZy)”，核酸研究(Nucl.Acids Res.)(2014年1月1日)(D1):D490-D495中描述了某些糖苷水解酶(例如内切葡聚糖酶、木聚糖酶、半乳聚糖酶、甘露聚糖酶、葡聚糖酶、溶菌酶和半乳糖苷酶)的另一种分类；还参见www.cazy.org。
因此，本发明的组合物还可以包括选自下组的至少一种其他的酶，该组由以下各项组成：植酸酶(EC 3.1.3.8或3.1.3.26)；木聚糖酶(EC 3.2.1.8)；半乳聚糖酶 (EC3.2.1.89)；α-半乳糖苷酶(EC 3.2.1.22)；蛋白酶(EC 3.4)，磷脂酶A1(EC 3.1.1.32)；磷脂酶A2(EC 3.1.1.4)；溶血磷脂酶(EC 3.1.1.5)；磷脂酶C(3.1.4.3)；磷脂酶D(EC 3.1.4.4)；淀粉酶，如，例如α-淀粉酶(EC 3.2.1.1)；溶菌酶(EC 3.2.1.17)；阿拉伯呋喃糖苷酶(EC3.2.1.55)；β-木糖苷酶(EC 3.2.1.37)；乙酰木聚糖酯酶(EC 3.1.1.72)；阿魏酸酯酶(EC3.1.1.73)；纤维素酶(E.C.3.2.1.4)；纤维二糖水解酶(EC 3.2.1.91)；β-葡糖苷酶(EC3.2.1.21)；支链淀粉酶(EC 3.2.1.41) 和β-葡聚糖酶(EC 3.2.1.4或EC 3.2.1.6)，或其任何混合物。
在一个具体实施例中，本发明的组合物包括植酸酶(EC 3.1.3.8或3.1.3.26)。可商购的植酸酶的实例包括Bio-FeedTM植酸酶(诺维信(Novozymes))、
Figure RE-GDA0003685268660002131
Figure RE-GDA0003685268660002132
NP和
Figure RE-GDA0003685268660002133
HiPhos(帝斯曼营养产品公司(DSM NutritionalProducts))、NatuphosTM(巴斯夫(BASF))、
Figure RE-GDA0003685268660002134
和
Figure RE-GDA0003685268660002135
Blue(AB 酶公司(ABEnzymes))、
Figure RE-GDA0003685268660002136
(Huvepharma)、
Figure RE-GDA0003685268660002137
XP(范恩尼姆 /杜邦公司(Verenium/DuPont))和
Figure RE-GDA0003685268660002138
PHY(杜邦公司(DuPont))。其他优选的植酸酶包括描述于，例如，WO98/28408、WO 00/43503、和WO 03/066847中的那些。
在一个具体实施例中，本发明的组合物包括木聚糖酶(EC 3.2.1.8)。可商购的木聚糖酶的实例包括
Figure RE-GDA0003685268660002139
WX和
Figure RE-GDA00036852686600021310
G2(帝斯曼营养产品公司 (DSMNutritional Products))、
Figure RE-GDA00036852686600021311
XT和Barley(AB维斯塔公司(AB Vista))、
Figure RE-GDA00036852686600021312
(范恩尼姆公司(Verenium))、
Figure RE-GDA00036852686600021313
X(Huvepharma)和
Figure RE-GDA00036852686600021314
XB(木聚糖酶/β-葡聚糖酶，杜邦公司(DuPont))。
在一个具体实施例中，本发明的组合物包括蛋白酶(EC 3.4)。可商购的蛋白酶的实例包括
Figure RE-GDA00036852686600021315
ProAct(帝斯曼营养产品公司(DSM Nutritional Products))。
微生物
在一个实施例中，该动物饲料组合物进一步包含一种或多种另外的微生物。在一个具体实施例中，该动物饲料组合物进一步包括来自以下属中的一个或多个属的细菌：乳杆菌属、乳球菌属、链球菌属、芽孢杆菌属、片球菌属、肠球菌属、明串珠菌属、Carnobacterium、杆菌属、丙酸杆菌属、双歧杆菌属、梭菌属和巨型球菌属(Megasphaera)或其任何组合。
在一个优选实施例中，动物饲料组合物进一步包括来自下列菌株中的一种或多种的细菌：枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、多粘菌芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌、环状芽孢杆菌、两歧双歧杆菌、动物双歧杆菌、肉食杆菌属物种(Carnobacterium sp.)、丁酸梭菌、梭菌属物种、屎肠球菌、肠球菌属物种、乳酸杆菌属物种、嗜酸乳杆菌、香肠乳杆菌 (Lactobacillus farciminus)、鼠李糖乳杆菌、罗伊氏乳杆菌、唾液乳酸杆菌、乳酸乳球菌、乳球菌属物种、明串珠菌属物种、埃氏巨型球菌(Megasphaera elsdenii)、巨型球菌属物种(Megasphaera sp.)、乳酸片球菌(Pediococcus acidilactici)、片球菌属物种、特氏丙酸杆菌(Propionibacteriumthoenii)、丙酸杆菌属物种、以及链球菌属物种。
在一个更优选的实施例中，该动物饲料组合物进一步包括来自枯草芽孢杆菌的以下菌株中的一个或多个菌株的细菌：3A-P4(PTA-6506)；15A-P4(PTA-6507)； 22C-P1(PTA-6508)；2084(NRRL B-500130)；LSSA01(NRRL-B-50104)；BS27 (NRRL B-501 05)；BS 18(NRRL B-50633)；和BS 278(NRRL B-50634)。
该动物饲料组合物中的每种细菌菌株的细菌计数为1x104和1x1014CFU/kg 的干物质之间，优选地1x106和1x1012CFU/kg的干物质之间，并且更优选地1x 107至1x1011CFU/kg的干物质之间。在一个更优选的实施例中，该动物饲料组合物中的每种细菌菌株的细菌计数为1x108和1x1010CFU/kg的干物质之间。
该动物饲料组合物中的每种细菌菌株的细菌计数为1x105和1x1015CFU/动物/天之间，优选地1x107和1x1013CFU/动物/天之间，并且更优选地1x108和1x 1012CFU/动物/天之间。在一个更优选的实施例中，该动物饲料组合物中的每种细菌菌株的细菌计数为1x109和1x1011CFU/动物/天之间。
在另一个实施例中，该一种或多种细菌菌株以稳定的孢子形式存在。
预混物
在一个实施例中，该动物饲料可以包括预混物，该预混物例如包括混合到动物饲料中的维生素、矿物质、酶、防腐剂、抗生素、其他饲料成分或其任何组合。
维生素和矿物质
在另一个实施例中，该动物饲料可以包括一种或多种维生素，例如一种或多种脂溶性维生素和/或一种或多种水溶性维生素。在另一个实施例中，该动物饲料可任选地包括一种或多种矿物质，例如一种或多种痕量矿物质和/或一种或多种巨量矿物质。
通常脂溶性和水溶性维生素以及痕量矿物质形成了用于添加到饲料中的所谓的预混物的一部分，而大量矿物质通常是单独地添加到饲料中。
脂溶性维生素的非限制性实例包括维生素A、维生素D3、维生素E、以及维生素K，例如维生素K3。
水溶性维生素的非限制性实例包括维生素B12、生物素和胆碱、维生素B1、维生素B2、维生素B6、烟酸、叶酸和泛酸盐(panthothenate)，例如Ca-D-泛酸盐。
痕量矿物质的非限制性实例包括硼、钴、氯化物、铬、铜、氟化物、碘、铁、锰、钼、硒和锌。
大量矿物质的非限制性实例包括钙、镁、钾和钠。
在WO 01/58275的表A中，列出了这些组分的营养需求(以家禽和仔猪/猪为例)。营养需求指的是应在饮食中提供指定浓度的这些组分。
在可替代的实施例中，本发明的动物饲料添加剂包含WO 01/58275的表A中指定的单独组分中的至少一种。至少一种指的是一种或两种或三种或四种等直至所有十三种、或直至所有15种单独组分中的任一种，一种或多种。更具体地，该至少一种单独组分以提供在表A的第四栏或第五栏或第六栏说明的范围内的饲料中浓度(in-feed-concentration)的量包括在本发明的添加剂内。
在仍另外的实施例中，本发明的动物饲料添加剂包含以下维生素中的至少一种，优选使得其饲料内浓度落入下表1中所限定的范围之内(分别对于小猪饮食和肉仔鸡饮食)。
表1：一般性维生素建议
维生素 小猪饮食 肉仔鸡饮食
维生素A 10,000-15,000IU/kg饲料 8-12,500IU/kg饲料
维生素D3 1800-2000IU/kg饲料 3000-5000IU/kg饲料
维生素E 60-100mg/kg饲料 150-240mg/kg饲料
维生素K3 2-4mg/kg饲料 2-4mg/kg饲料
维生素B1 2-4mg/kg饲料 2-3mg/kg饲料
维生素B2 6-10mg/kg饲料 7-9mg/kg饲料
维生素B6 4-8mg/kg饲料 3-6mg/kg饲料
维生素B12 0.03-0.05mg/kg饲料 0.015-0.04mg/kg饲料
烟酸(维生素B3) 30-50mg/kg饲料 50-80mg/kg饲料
泛酸 20-40mg/kg饲料 10-18mg/kg饲料
叶酸 1-2mg/kg饲料 1-2mg/kg饲料
生物素 0.15-0.4mg/kg饲料 0.15-0.3mg/kg饲料
氯化胆碱 200-400mg/kg饲料 300-600mg/kg饲料
氨基酸
本发明的组合物还可包括一种或多种氨基酸。用于动物饲料的氨基酸的实例是赖氨酸、丙氨酸、β-丙氨酸、苏氨酸、甲硫氨酸和色氨酸。
其他饲料成分
本发明的组合物可以进一步包括着色剂、稳定剂、生长改进添加剂和香料化合物/调味品、多不饱和脂肪酸(PUFA)；活性氧产生物质、抗微生物肽和抗真菌多肽。
着色剂的实例是类葫萝卜素，例如β-胡萝卜素、虾青素、和叶黄素。
香料化合物/调味料的实例是甲氧甲酚，茴香醚，十、十一和/或十二内酯、紫罗酮、鸢尾酮、姜辣素、哌啶、亚丙基苯酞(propylidene phatalide)、亚丁基苯酞 (butylidenephatalide)、辣椒素和鞣质。
抗微生物肽(AMP)的实例是CAP18、林可霉素(Leucocin)A、三色肽(Tritrpticin)、Protegrin-1、死亡素(Thanatin)、防卫素(Defensin)、乳铁蛋白、乳铁蛋白肽、和奥维司匹林(Ovispirin)如诺维司匹林(Novispirin)(罗伯特莱勒 (RobertLehrer)，2000)、菌丝霉素(Plectasins)以及他汀类，包含在WO 03/044049 和WO 03/048148中所披露的化合物和多肽，以及以上的保留了抗微生物活性的变体或片段。
抗真菌多肽(AFP)的实例是巨大曲霉(Aspergillus giganteus)和黑曲霉的肽，连同其保留了抗真菌活性的变体和片段，如在WO 94/01459和WO 02/090384中披露的。
多不饱和脂肪酸的实例为C18、C20和C22多不饱和脂肪酸，如花生四烯酸、二十二碳六烯酸、二十碳五烯酸和γ-亚油酸。
产生活性氧的种类的实例为化学品，如过硼酸盐、过硫酸盐或过碳酸盐；和酶，如氧化酶、加氧酶或合成酶。
本发明的组合物可以进一步包括至少一种氨基酸。用于动物饲料的氨基酸的实例是赖氨酸、丙氨酸、β-丙氨酸、苏氨酸、甲硫氨酸和色氨酸。
用途
本发明还针对用于使用具有木聚糖酶和/或阿拉伯呋喃糖苷酶活性的多肽或其组合物(用于例如动物饲料)的方法。本发明还针对用于使用具有木聚糖酶和/或阿拉伯呋喃糖苷酶活性的多肽或其组合物的方法，如例如以下所描述的那些。
在动物饲料中的用途
本发明还针对用于在动物饲料中使用本发明的木聚糖酶和/或阿拉伯呋喃糖苷酶的方法。
术语动物包括所有动物。动物的实例为非反刍动物和反刍动物。反刍动物包括例如，动物，如绵羊、山羊、和牛，例如，肉牛、奶牛和牛犊。在具体实施例中，动物为非反刍动物。非反当动物包括单胃动物，如猪(pig或swine)(包括但不限于小猪、生长中的猪和大母猪)；家禽，如火鸡，鸭和鸡(包括但不限于肉仔鸡、蛋鸡)；马(包括但不限于热血动物、冷血动物和温血动物)，小牛；和鱼(包括但不限于鲑鱼、鳟鱼、罗非鱼、鲶鱼和鲤鱼)；和甲壳类动物(包括但不限于河虾和对虾)。
在根据本发明的用途中，可在饮食之前、之后或同时将木聚糖酶和/或阿拉伯呋喃糖苷酶饲喂给动物。优选后者。
在一个具体实施例中，明确限定了将木聚糖酶和/或阿拉伯呋喃糖苷酶添加至饲料或动物饲料添加剂中的形式。明确限定意指如通过大小排阻色谱法(参见WO 01/58275的实例12)确定的，木聚糖酶和/或阿拉伯呋喃糖苷酶制剂至少为50％纯。在其他具体实施例中，如通过此方法确定的，木聚糖酶和/或阿拉伯呋喃糖苷酶制剂为至少60％、70％、80％、85％、88％、90％、92％、94％、或至少95％纯。
明确限定的木聚糖酶和/或阿拉伯呋喃糖苷酶制剂是有利的。例如，对于实质上不受其他木聚糖酶和/或阿拉伯呋喃糖苷酶干扰或污染的木聚糖酶和/或阿拉伯呋喃糖苷酶而言，更容易确定它在饲料中的正确剂量。术语正确配量具体指得到一致和恒定的结果的目标，和基于所希望的效果优化剂量的能力。
然而，为了在动物饲料中使用，木聚糖酶和/或阿拉伯呋喃糖苷酶不必那么纯；它可以例如包括其他酶，此时可将其称为木聚糖酶和/或阿拉伯呋喃糖苷酶制剂。
该木聚糖酶和/或阿拉伯呋喃糖苷酶制剂可以(a)直接添加至饲料，或者(b)它可以用于随后添加至饲料(或者用于处理过程中)的一种或多种中间组合物，如饲料添加剂或者预混物的生产。不论是否根据上述(a)或(b)来使用，上文所述的纯度指的都是原始木聚糖酶和/或阿拉伯呋喃糖苷酶制剂的纯度。
本发明的优选实施方式
在下面的一组项目中描述了本发明的优选实施例。
1.一种组合物，包括一种或多种具有木聚糖酶活性的GH10或GH11多肽和一种或多种具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽，其中：
(a)GH62多肽包括基序 [H/Y][L/M]F[F/S][A/C/H/S/T/V][A/D/G/N/R]D[D/E/N]G(SEQ ID NO:1)；
(b)GH10或GH11多肽与GH62多肽一起从脱脂脱淀粉玉蜀黍(DFDSM)中溶解至少2.0％木糖；和
(c)GH10或GH11多肽与GH62多肽一起从DFDSM中溶解比当不存在GH62多肽时GH10或GH11多肽可以溶解的多至少2倍的木糖；
其中(b)和(c)在如下反应条件下进行：
i)25mg GH10或GH11多肽/kg DFDSM，
ii)12.5mg GH62多肽/kg DFDSM，以及
iii)在40℃、pH 5下孵育4小时。
2.如项目1所述的组合物，其中该GH62多肽包括一个或多个选自以下列表的基序，该列表由以下各项组成：[H/Y]LF[F/S][A/S/V][A/D/G]DNG(SEQ ID NO:2)、 YLFF[A/V][A/G]DNG(SEQ ID NO:3)、YLFFAGDNG(SEQ ID NO:4)、 [H/Y]LFSSDDNG(SEQ ID NO:5)、以及YLFSSDDNG(SEQ ID NO:6)。
3.如项目1至2中任一项所述的组合物，其中该具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽选自下组，该组由以下各项组成：
(a)与SEQ ID NO:9的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(b)与SEQ ID NO:12的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(c)与SEQ ID NO:15的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(d)与SEQ ID NO:18的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(e)与SEQ ID NO:21的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(f)与SEQ ID NO:24的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(g)与SEQ ID NO:27的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(h)与SEQ ID NO:30的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(i)与SEQ ID NO:36的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(j)与SEQ ID NO:42的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(k)与SEQ ID NO:48的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(l)与SEQ ID NO:54的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(m)与SEQ ID NO:60的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(n)与SEQ ID NO:66的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(o)与SEQ ID NO:105的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(p)与SEQ ID NO:108的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(q)与SEQ ID NO:114的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(r)与SEQ ID NO:120的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(s)与SEQ ID NO:123的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(t)与SEQ ID NO:126的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(u)与SEQ ID NO:132的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(v)与SEQ ID NO:138的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(w)与SEQ ID NO:141的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(x)与SEQ ID NO:147的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(y)与SEQ ID NO:150的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(z)与SEQ ID NO:156的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(aa)与SEQ ID NO:159的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(ab)与SEQ ID NO:162的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(ac)与SEQ ID NO:165的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(ad)与SEQ ID NO:168的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(ae)与SEQ ID NO:171的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(af)与SEQ ID NO:174的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(ag)选自下组的多肽的变体，该组由以下各项组成：SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:15、SEQ ID NO:18、SEQ ID NO:21、SEQ ID NO:24、SEQ ID NO: 27、SEQ IDNO:30、SEQ ID NO:36、SEQ ID NO:42、SEQ ID NO:48、SEQ ID NO: 54、SEQ ID NO:60、SEQID NO:66SEQ ID NO:105、SEQ ID NO:108、SEQ ID NO: 114、SEQ ID NO:120、SEQ ID NO:123、SEQ ID NO:126、SEQ ID NO:132、SEQ ID NO:138、SEQ ID NO:141、SEQ ID NO:147、SEQID NO:150、SEQ ID NO:156、 SEQ ID NO:159、SEQ ID NO:162、SEQ ID NO:165、SEQ ID NO:168、SEQ ID NO: 171和SEQ ID NO:174，其中该变体具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且包括在1、2、3、 4、5、6、7、8、9或10个位置中的一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合；
(ah)一种多肽，该多肽包括(a)、(b)、(c)、(d)、(e)、(f)、(g)、(h)、(i)、(j)、 (k)、(l)、(m)、(n)、(o)、(p)、(q)、(r)、(s)、(t)、(u)、(v)、(w)、(x)、(y)、(z)、(aa)、 (ab)、(ac)、(ad)、(ae)、(af)或(ag)的多肽以及N-末端和/或C-末端His-标签和/或 HQ-标签；和
(ai)(a)、(b)、(c)、(d)、(e)、(f)、(g)、(h)、(i)、(j)、(k)、(l)、(m)、(n)、(o)、 (p)、(q)、(r)、(s)、(t)、(u)、(v)、(w)、(x)、(y)、(z)、(aa)、(ab)、(ac)、(ad)、(ae)、 (af)、(ag)或(ah)的多肽的片段，该片段具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且具有该成熟多肽的至少90％的长度。
4.根据项目3所述的组合物，其中具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽包括以下项或由以下项组成：SEQ ID NO:9的氨基酸1至302，SEQ ID NO:12的氨基酸1至303，SEQID NO:15的氨基酸1至382，SEQ ID NO:18的氨基酸1至378，SEQ ID NO:21的氨基酸1至311，SEQ ID NO:24的氨基酸1至302，SEQ ID NO:27的氨基酸1 至309，SEQ ID NO:30的氨基酸1至438，SEQ ID NO:33的氨基酸1至446，SEQ ID NO:36的氨基酸1至438，SEQ ID NO:39的氨基酸1至446，SEQ ID NO:42的氨基酸1 至318，SEQ ID NO:45的氨基酸1至326，SEQ ID NO:48的氨基酸1至302，SEQ ID NO:51的氨基酸1至311，氨基酸SEQ ID NO:54的1至364，SEQ IDNO:57的氨基酸1 至373，SEQ ID NO:60的氨基酸1至436，SEQ ID NO:63的氨基酸1至444，SEQ ID NO:66的氨基酸1至302，SEQ ID NO:69的氨基酸1至311，SEQ ID NO:105的氨基酸 1至302，SEQ ID NO:108的氨基酸1至464，SEQ ID NO:111的氨基酸1至472，SEQ ID NO:114的氨基酸1至364，SEQ ID NO:117的氨基酸1至372，SEQ ID NO:120的氨基酸1至357，SEQ IDNO:123的氨基酸1至302，SEQ ID NO:126的氨基酸1至453，SEQ ID NO:129的氨基酸1至461，SEQ ID NO:132的氨基酸1至377，SEQ ID NO:135的氨基酸1至385，SEQ ID NO:138的氨基酸1至309，SEQ ID NO:141的氨基酸1至304， SEQ ID NO:144的氨基酸1至312，SEQ ID NO:147的氨基酸1至302，SEQ ID NO:150 的氨基酸1至302，SEQ ID NO:153的氨基酸1至310，SEQID NO:156的氨基酸1至 316，SEQ ID NO:159的氨基酸1至316，SEQ ID NO:162的氨基酸1至303，SEQ ID NO:165的氨基酸1至361，SEQ ID NO:168的氨基酸1至373，SEQ ID NO:171的氨基酸1至302，或SEQ ID NO:174的氨基酸1至364。
5.如项目1至4中任一项所述的组合物，其中具有木聚糖酶活性的GH10或 GH11多肽选自下组，该组由以下各项组成：
(a)与SEQ ID NO:70的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(b)与SEQ ID NO:71的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(c)与SEQ ID NO:72的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(d)与SEQ ID NO:73的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(e)与SEQ ID NO:74的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(f)与SEQ ID NO:75的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(g)与SEQ ID NO:78的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(h)与SEQ ID NO:81的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(i)与SEQ ID NO:84的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(j)与SEQ ID NO:88的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(k)与SEQ ID NO:89的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(l)与SEQ ID NO:95的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(m)与SEQ ID NO:96的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(n)与SEQ ID NO:99的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(o)与SEQ ID NO:102的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(p)与SEQ ID NO:177的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(q)选自下组的多肽的变体，该组由以下各项组成：SEQ ID NO:70、SEQ ID NO:71、SEQ ID NO:72、SEQ ID NO:73、SEQ ID NO:74、SEQ ID NO:75、SEQ ID NO:78、SEQ ID NO:81、SEQ ID NO:84、SEQ ID NO:88、SEQ ID NO:89、SEQ ID NO:95、SEQ ID NO:96、SEQ IDNO:99、SEQ ID NO:102和SEQ ID NO:177，其中该变体具有木聚糖酶活性并且包括在1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个位置中的一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合；
(r)一种多肽，该多肽包括(a)、(b)、(c)、(d)、(e)、(f)、(g)、(h)、(i)、(j)、 (k)、(l)、(m)、(n)、(o)、(p)或(q)的多肽以及N-末端和/或C-末端His-标签和/或HQ- 标签；和
(s)(a)、(b)、(c)、(d)、(e)、(f)、(g)、(h)、(i)、(j)、(k)、(l)、(m)、(n)、(o)、 (p)、(q)或(r)的多肽的片段，该片段具有木聚糖酶活性并且具有该成熟多肽的至少90％的长度。
6.根据项目5所述的组合物，其中该GH10或GH11多肽包括以下项或由以下项组成：SEQ ID NO:70的氨基酸1至384，SEQ ID NO:71的氨基酸1至288，SEQ ID NO:72的氨基酸1至308，SEQ ID NO:73的氨基酸1至195，SEQ ID NO:74的氨基酸1 至203，SEQ ID NO:75的氨基酸1至182，SEQ ID NO:78的氨基酸1至183，SEQ ID NO:81的氨基酸1至181，SEQ ID NO:84的氨基酸1至299，SEQ ID NO:87的氨基酸1 至307，SEQ ID NO:88的氨基酸1至188，SEQ IDNO:89的氨基酸1至189，SEQ ID NO:95的氨基酸1至328，SEQ ID NO:96的氨基酸1至208，SEQID NO:99的氨基酸1 至203，SEQ ID NO:102的氨基酸1至337，或SEQ ID NO:177的氨基酸1至323。
7.如项目1至6中任一项所述的组合物，其中GH10或GH11多肽与GH62多肽一起从DFDSM中溶解至少0.4％的木糖，并且GH10或GH11多肽与GH62多肽一起从 DFDSM中溶解比当不存在GH62多肽时GH10或GH11多肽可以溶解的多至少2.5倍的木糖。
8.如项目1至6中任一项所述的组合物，其中GH10或GH11多肽与GH62多肽一起从DFDSM中溶解至少0.4％的木糖，并且GH10或GH11多肽与GH62多肽一起从 DFDSM中溶解比当不存在GH62多肽时GH10或GH11多肽可以溶解的多至少3倍的木糖。
9.如项目1至6中任一项所述的组合物，其中GH10或GH11多肽与GH62多肽一起从DFDSM中溶解至少0.4％的木糖，并且GH10或GH11多肽与GH62多肽一起从 DFDSM中溶解比当不存在GH62多肽时GH10或GH11多肽可以溶解的多至少3.5倍的木糖。
10.如项目1至6中任一项所述的组合物，其中GH10或GH11多肽与GH62多肽一起从DFDSM中溶解至少0.4％的木糖，并且GH10或GH11多肽与GH62多肽一起从 DFDSM中溶解比当不存在GH62多肽时GH10或GH11多肽可以溶解的多至少4倍的木糖。
11.如项目1至6中任一项所述的组合物，其中GH10或GH11多肽与GH62多肽一起从DFDSM中溶解至少0.6％的木糖，并且GH10或GH11多肽与GH62多肽一起从 DFDSM中溶解比当不存在GH62多肽时GH10或GH11多肽可以溶解的多至少2倍的木糖。
12.如项目1至6中任一项所述的组合物，其中GH10或GH11多肽与GH62多肽一起从DFDSM中溶解至少0.6％的木糖，并且GH10或GH11多肽与GH62多肽一起从 DFDSM中溶解比当不存在GH62多肽时GH10或GH11多肽可以溶解的多至少2.5倍的木糖。
13.如项目1至6中任一项所述的组合物，其中GH10或GH11多肽与GH62多肽一起从DFDSM中溶解至少0.6％的木糖，并且GH10或GH11多肽与GH62多肽一起从 DFDSM中溶解比当不存在GH62多肽时GH10或GH11多肽可以溶解的多至少3倍的木糖。
14.如项目1至6中任一项所述的组合物，其中GH10或GH11多肽与GH62多肽一起从DFDSM中溶解至少0.6％的木糖，并且GH10或GH11多肽与GH62多肽一起从 DFDSM中溶解比当不存在GH62多肽时GH10或GH11多肽可以溶解的多至少3.5倍的木糖。
15.如项目1至6中任一项所述的组合物，其中GH10或GH11多肽与GH62多肽一起从DFDSM中溶解至少0.8％的木糖，并且GH10或GH11多肽与GH62多肽一起从 DFDSM中溶解比当不存在GH62多肽时GH10或GH11多肽可以溶解的多至少2倍的木糖。
16.如项目1至6中任一项所述的组合物，其中GH10或GH11多肽与GH62多肽一起从DFDSM中溶解至少0.8％的木糖，并且GH10或GH11多肽与GH62多肽一起从 DFDSM中溶解比当不存在GH62多肽时GH10或GH11多肽可以溶解的多至少2.5倍的木糖。
17.如项目1至6中任一项所述的组合物，其中GH10或GH11多肽与GH62多肽一起从DFDSM中溶解至少0.8％的木糖，并且GH10或GH11多肽与GH62多肽一起从 DFDSM中溶解比当不存在GH62多肽时GH10或GH11多肽可以溶解的多至少3倍的木糖。
18.如项目1至6中任一项所述的组合物，其中GH10或GH11多肽与GH62多肽一起从DFDSM中溶解至少0.8％的木糖，并且GH10或GH11多肽与GH62多肽一起从 DFDSM中溶解比当不存在GH62多肽时GH10或GH11多肽可以溶解的多至少3.5倍的木糖。
19.如项目1至6中任一项所述的组合物，其中GH10或GH11多肽与GH62多肽一起从DFDSM中溶解至少1.0％的木糖，并且GH10或GH11多肽与GH62多肽一起从 DFDSM中溶解比当不存在GH62多肽时GH10或GH11多肽可以溶解的多至少2倍的木糖。
20.如项目1至6中任一项所述的组合物，其中GH10或GH11多肽与GH62多肽一起从DFDSM中溶解至少1.0％的木糖，并且GH10或GH11多肽与GH62多肽一起从DFDSM中溶解比当不存在GH62多肽时GH10或GH11多肽可以溶解的多至少2.5倍的木糖。
21.如项目1至6中任一项所述的组合物，其中GH10或GH11多肽与GH62多肽一起从DFDSM中溶解至少1.0％的木糖，并且GH10或GH11多肽与GH62多肽一起从 DFDSM中溶解比当不存在GH62多肽时GH10或GH11多肽可以溶解的多至少3倍的木糖。
22.如项目1至6中任一项所述的组合物，其中GH10或GH11多肽与GH62多肽一起从DFDSM中溶解至少1.0％的木糖，并且GH10或GH11多肽与GH62多肽一起从 DFDSM中溶解比当不存在GH62多肽时GH10或GH11多肽可以溶解的多至少3.5倍的木糖。
23.一种具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的分离的多肽，该多肽选自下组，该组由以下各项组成：
(a)与SEQ ID NO:12的多肽具有至少85％序列一致性的多肽；
(b)与SEQ ID NO:24的多肽具有至少97.6％序列一致性的多肽；
(c)与SEQ ID NO:27的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(d)与SEQ ID NO:30的多肽具有至少90％序列一致性的多肽；
(e)与SEQ ID NO:36的多肽具有至少92％序列一致性的多肽；
(f)与SEQ ID NO:48的多肽具有至少86％序列一致性的多肽；
(g)与SEQ ID NO:54的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(h)与SEQ ID NO:60的多肽具有至少81％序列一致性的多肽；
(i)与SEQ ID NO:66的多肽具有至少84％序列一致性的多肽；
(j)与SEQ ID NO:105的多肽具有至少87％序列一致性的多肽；
(k)与SEQ ID NO:108的多肽具有至少85％序列一致性的多肽；
(l)与SEQ ID NO:114的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(m)与SEQ ID NO:120的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(n)与SEQ ID NO:123的多肽具有至少89％序列一致性的多肽；
(o)与SEQ ID NO:126的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(p)与SEQ ID NO:138的多肽具有至少85％序列一致性的多肽；
(q)与SEQ ID NO:141的多肽具有至少89％序列一致性的多肽；
(r)与SEQ ID NO:147的多肽具有至少86％序列一致性的多肽；
(s)与SEQ ID NO:156的多肽具有至少96.4％序列一致性的多肽；
(t)与SEQ ID NO:162的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(u)与SEQ ID NO:165的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(v)与SEQ ID NO:168的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(w)与SEQ ID NO:171的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(x)与SEQ ID NO:174的多肽具有至少82％序列一致性的多肽；
(y)一种多肽，该多肽由在高严格条件或非常高严格条件下与以下各项杂交的多核苷酸编码
(i)SEQ ID NO:10的成熟多肽编码序列，
(ii)SEQ ID NO:22的成熟多肽编码序列，
(iii)SEQ ID NO:25的成熟多肽编码序列，
(iv)SEQ ID NO:28的成熟多肽编码序列，
(v)SEQ ID NO:34的成熟多肽编码序列，
(vi)SEQ ID NO:46的成熟多肽编码序列，
(vii)SEQ ID NO:52的成熟多肽编码序列，
(viii)SEQ ID NO:58的成熟多肽编码序列，
(ix)SEQ ID NO:64的成熟多肽编码序列，
(x)SEQ ID NO:103的成熟多肽编码序列，
(xi)SEQ ID NO:106的成熟多肽编码序列，
(xii)SEQ ID NO:112的成熟多肽编码序列，
(xiii)SEQ ID NO:118的成熟多肽编码序列，
(xiv)SEQ ID NO:121的成熟多肽编码序列，
(xv)SEQ ID NO:124的成熟多肽编码序列，
(xvi)SEQ ID NO:136的成熟多肽编码序列，
(xvii)SEQ ID NO:139的成熟多肽编码序列，
(xviii)SEQ ID NO:145的成熟多肽编码序列，
(xix)SEQ ID NO:154的成熟多肽编码序列，
(xx)SEQ ID NO:160的成熟多肽编码序列，
(xxi)SEQ ID NO:163的成熟多肽编码序列，
(xxii)SEQ ID NO:166的成熟多肽编码序列，
(xxiii)SEQ ID NO:169的成熟多肽编码序列，
(xxiv)SEQ ID NO:172的成熟多肽编码序列，
(xxv)(i)、(ii)、(iii)、(iv)、(v)、(vi)、(vii)、(viii)、(ix)、(x)、(xi)、(xii)、(xiii)、(xiv)、(xv)、(xvi)、(xvii)、(xviii)、(xix)、(xx)、(xxi)、(xxii)、(xxiii)或(xxiv) 的全长互补链；
(z)由以下多核苷酸编码的多肽，该多核苷酸与SEQ ID NO:10的成熟多肽编码序列具有至少85％序列一致性；
(aa)由以下多核苷酸编码的多肽，该多核苷酸与SEQ ID NO:22的成熟多肽编码序列具有至少97.6％序列一致性；
(ab)由以下多核苷酸编码的多肽，该多核苷酸与SEQ ID NO:25的成熟多肽编码序列具有至少80％序列一致性；
(ac)由以下多核苷酸编码的多肽，该多核苷酸与SEQ ID NO:28的成熟多肽编码序列具有至少90％序列一致性；
(ad)由以下多核苷酸编码的多肽，该多核苷酸与SEQ ID NO:34的成熟多肽编码序列具有至少92％序列一致性；
(ae)由以下多核苷酸编码的多肽，该多核苷酸与SEQ ID NO:46的成熟多肽编码序列具有至少86％序列一致性；
(af)由以下多核苷酸编码的多肽，该多核苷酸与SEQ ID NO:52的成熟多肽编码序列具有至少80％序列一致性；
(ag)由以下多核苷酸编码的多肽，该多核苷酸与SEQ ID NO:58的成熟多肽编码序列具有至少81％序列一致性；
(ah)由以下多核苷酸编码的多肽，该多核苷酸与SEQ ID NO:64的成熟多肽编码序列具有至少84％序列一致性；
(ai)由以下多核苷酸编码的多肽，该多核苷酸与SEQ ID NO:103的成熟多肽编码序列具有至少87％序列一致性；
(aj)由以下多核苷酸编码的多肽，该多核苷酸与SEQ ID NO:106的成熟多肽编码序列具有至少85％序列一致性；
(ak)由以下多核苷酸编码的多肽，该多核苷酸与SEQ ID NO:111的成熟多肽编码序列具有至少80％序列一致性；
(al)由以下多核苷酸编码的多肽，该多核苷酸与SEQ ID NO:118的成熟多肽编码序列具有至少80％序列一致性；
(am)由以下多核苷酸编码的多肽，该多核苷酸与SEQ ID NO:121的成熟多肽编码序列具有至少89％序列一致性；
(an)由以下多核苷酸编码的多肽，该多核苷酸与SEQ ID NO:124的成熟多肽编码序列具有至少80％序列一致性；
(ao)由以下多核苷酸编码的多肽，该多核苷酸与SEQ ID NO:136的成熟多肽编码序列具有至少85％序列一致性；
(ap)由以下多核苷酸编码的多肽，该多核苷酸与SEQ ID NO:139的成熟多肽编码序列具有至少89％序列一致性；
(aq)由以下多核苷酸编码的多肽，该多核苷酸与SEQ ID NO:145的成熟多肽编码序列具有至少86％序列一致性；
(ar)由以下多核苷酸编码的多肽，该多核苷酸与SEQ ID NO:154的成熟多肽编码序列具有至少96.4％序列一致性；
(as)由以下多核苷酸编码的多肽，该多核苷酸与SEQ ID NO:160的成熟多肽编码序列具有至少80％序列一致性；
(at)由以下多核苷酸编码的多肽，该多核苷酸与SEQ ID NO:163的成熟多肽编码序列具有至少80％序列一致性；
(au)由以下多核苷酸编码的多肽，该多核苷酸与SEQ ID NO:166的成熟多肽编码序列具有至少80％序列一致性；
(av)由以下多核苷酸编码的多肽，该多核苷酸与SEQ ID NO:169的成熟多肽编码序列具有至少80％序列一致性；
(aw)由以下多核苷酸编码的多肽，该多核苷酸与SEQ ID NO:172的成熟多肽编码序列具有至少82％序列一致性；
(ax)SEQ ID NO:12的变体，其中该变体具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且包括在1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13,14、15、16、17、18、19、20、 21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、 39、40、41、42、43、44或45个位置中的一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合；
(ay)SEQ ID NO:24的变体，其中该变体具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且包括在1、2、3、4、5、6或7个位置中的一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合；
(az)选自下组的多肽的变体，该组由以下各项组成：SEQ ID NO:27、SEQ ID NO:54、SEQ ID NO:60、SEQ ID NO:108、SEQ ID NO:114、SEQ ID NO:120、SEQ ID NO:126、SEQID NO:162、SEQ ID NO:165、SEQ ID NO:168、SEQ ID NO:171 或SEQ ID NO:174，其中该变体具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并包括在1、2、3、4、 5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、 24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、 42、43、44、45、46、47、48、49或50个位置中的一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合；
(ba)SEQ ID NO:30的变体，其中该变体具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且包括在1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、 21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、 39、40、41、42或43个位置中的一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合；
(bb)SEQ ID NO:36的变体，其中该变体具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且包括在1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、 21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33或34个位置中的一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合；
(bc)选自下组的多肽的变体，该组由以下各项组成：SEQ ID NO:48或SEQ ID NO:147，其中该变体具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并包括在1、2、3、4、5、6、7、 8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、 27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41或42个位置中的一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合；
(bd)SEQ ID NO:66的变体，其中该变体具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且包括在1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、 21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47或48个位置中的一个或多个氨基酸取代、和 /或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合；
(be)SEQ ID NO:105的变体，其中该变体具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且包括在1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、 21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38或 39个位置中的一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合；
(bf)选自下组的多肽的变体，该组由以下各项组成：SEQ ID NO:123或SEQ ID NO:141，其中该变体具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并包括在1、2、3、4、5、6、7、 8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、 27、28、29、30、31、32或33个位置中的一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合；
(bg)SEQ ID NO:138的变体，其中该变体具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且包括在1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、 21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、 39、40、41、42、43、44、45或46个位置中的一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合；
(bh)SEQ ID NO:156的变体，其中该变体具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且包括在1、2、3、4、5、6、7、8、9、10或11个位置中的一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合；
(bi)一种多肽，该多肽包括(a)、(b)、(c)、(d)、(e)、(f)、(g)、(h)、(i)、(j)、 (k)、(l)、(m)、(n)、(o)、(p)、(q)、(r)、(s)、(t)、(u)、(v)、(w)、(x)、(y)、(z)、(aa)、 (ab)、(ac)、(ad)、(ae)、(af)、(ag)、(ah)、(ai)、(aj)、(ak)、(al)、(am)、(an)、(ao)、 (ap)、(aq)、(ar)、(as)、(at)、(au)、(av)、(aw)、(ax)、(ay)、(az)、(ba)、(bb)、(bc)、 (bd)、(be)、(bf)、(bg)或(bh)的多肽以及N-末端和/或C-末端His-标签和/或HQ-标签；和
(bj)(a)、(b)、(c)、(d)、(e)、(f)、(g)、(h)、(i)、(j)、(k)、(l)、(m)、(n)、(o)、 (p)、(q)、(r)、(s)、(t)、(u)、(v)、(w)、(x)、(y)、(z)、(aa)、(ab)、(ac)、(ad)、(ae)、 (af)、(ag)、(ah)、(ai)、(aj)、(ak)、(al)、(am)、(an)、(ao)、(ap)、(aq)、(ar)、(as)、 (at)、(au)、(av)、(aw)、(ax)、(ay)、(az)、(ba)、(bb)、(bc)、(bd)、(be)、(bf)、(bg)、 (bh)或(bi)的多肽的片段，该片段具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且具有该成熟多肽的至少90％的长度。
24.根据项目23所述的多肽，其中该多肽包括以下项或由以下项组成：SEQ ID NO:12的氨基酸1至303，SEQ ID NO:24的氨基酸1至302，SEQ ID NO:27的氨基酸1 至309，SEQID NO:30的氨基酸1至438，SEQ ID NO:33的氨基酸1至446，SEQ ID NO:36的氨基酸1至438，SEQ ID NO:39的氨基酸1至446，SEQ ID NO:48的氨基酸1 至302，SEQ ID NO:51的氨基酸1至311，SEQ ID NO:54的氨基酸1至364，SEQ ID NO:57的氨基酸1至373，SEQ ID NO:60的氨基酸1至436，SEQ ID NO:63的氨基酸1 至444，SEQ ID NO:66的氨基酸1至302，SEQ ID NO:69的氨基酸1至311，SEQ ID NO:105的氨基酸1至302，SEQ ID NO:108的氨基酸1至464，SEQID NO:111的氨基酸1至472，SEQ ID NO:114的氨基酸1至364，SEQ ID NO:117的氨基酸1至372，SEQ ID NO:120的氨基酸1至357，SEQ ID NO:123的氨基酸1至302，SEQ ID NO:126的氨基酸1至453，SEQ ID NO:129的氨基酸1至461，SEQ ID NO:138的氨基酸1至309， SEQ IDNO:141的氨基酸1至304，SEQ ID NO:144的氨基酸1至312，SEQ ID NO:147 的氨基酸1至302，SEQ ID NO:156的氨基酸1至316，SEQ ID NO:162的氨基酸1至 303，SEQ ID NO:165的氨基酸1至361，SEQ ID NO:168的氨基酸1至373，SEQ ID NO:171的氨基酸1至302，或SEQ IDNO:174的氨基酸1至364。
25.一种组合物，该组合物包括项目23至24中任一项所述的一种或多种多肽。
26.如项目25所述的组合物，该组合物进一步包括一种或多种具有木聚糖酶活性的GH10或GH11多肽。
27.如项目26所述的组合物，其中具有木聚糖酶活性的GH10或GH11多肽选自下组，该组由以下各项组成：
(a)与SEQ ID NO:70的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(b)与SEQ ID NO:71的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(c)与SEQ ID NO:72的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(d)与SEQ ID NO:73的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(e)与SEQ ID NO:74的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(f)与SEQ ID NO:75的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(g)与SEQ ID NO:78的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(h)与SEQ ID NO:81的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(i)与SEQ ID NO:84的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(j)与SEQ ID NO:88的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(k)与SEQ ID NO:89的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(l)与SEQ ID NO:95的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(m)与SEQ ID NO:96的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(n)与SEQ ID NO:99的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(o)与SEQ ID NO:102的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(p)与SEQ ID NO:177的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(q)选自下组的多肽的变体，该组由以下各项组成：SEQ ID NO:70、SEQ ID NO:71、SEQ ID NO:72、SEQ ID NO:73、SEQ ID NO:74、SEQ ID NO:75、SEQ ID NO:78、SEQ ID NO:81、SEQ ID NO:84、SEQ ID NO:88、SEQ ID NO:89、SEQ ID NO:95、SEQ ID NO:96、SEQ IDNO:99、SEQ ID NO:102和SEQ ID NO:177，其中该变体具有木聚糖酶活性并且包括在1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个位置中的一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合；
(r)一种多肽，该多肽包括(a)、(b)、(c)、(d)、(e)、(f)、(g)、(h)、(i)、(j)、 (k)、(l)、(m)、(n)、(o)、(p)或(q)的多肽以及N-末端和/或C-末端His-标签和/或HQ- 标签；和
(s)(a)、(b)、(c)、(d)、(e)、(f)、(g)、(h)、(i)、(j)、(k)、(l)、(m)、(n)、(o)、 (p)、(q)或(r)的多肽的片段，该片段具有木聚糖酶活性并且具有该成熟多肽的至少90％的长度。
28.根据项目27的组合物，其中具有木聚糖酶活性的GH10或GH11多肽选自下组，该组由以下各项组成：SEQ ID NO:70的氨基酸1至384，SEQ ID NO:71的氨基酸1至288，SEQ IDNO:72的氨基酸1至308，SEQ ID NO:73的氨基酸1至195，SEQ ID NO:74的氨基酸1至203，SEQID NO:75的氨基酸1至182，SEQ ID NO:78的氨基酸1 至183，SEQ ID NO:81的氨基酸1至181，SEQ ID NO:84的氨基酸1至299，SEQ ID NO:87的氨基酸1至307，SEQ ID NO:88的氨基酸1至188，SEQ ID NO:89的氨基酸1 至189，SEQ ID NO:95的氨基酸1至328，SEQ ID NO:96的氨基酸1至208，SEQ ID NO:99的氨基酸1至203，SEQ ID NO:102的氨基酸1至337，或SEQID NO:177的氨基酸1至323。
29.如项目1至22或25至28中任一项所述的组合物，该组合物进一步包括一种或多种调配剂。
30.如项目29所述的组合物，其中该一种或多种调配剂选自下组，该组由以下各项组成：甘油、乙二醇、1,2-丙二醇或1,3-丙二醇、氯化钠、苯甲酸钠、山梨酸钾、硫酸钠、硫酸钾、硫酸镁、硫代硫酸钠、碳酸钙、柠檬酸钠、糊精、葡萄糖、蔗糖、山梨醇、乳糖、淀粉和纤维素或其任何组合。
31.如项目1至22或25至30中任一项所述的组合物，该组合物进一步包括一种或多种另外的酶。
32.如项目31所述的组合物，其中该一种或多种另外的酶选自下组，该组由以下各项组成：植酸酶、木聚糖酶、半乳聚糖酶、α-半乳糖苷酶、蛋白酶、磷脂酶A1、磷脂酶A2、溶血磷脂酶、磷脂酶C、磷脂酶D、淀粉酶、溶菌酶、阿拉伯呋喃糖苷酶、β-木糖苷酶、乙酰木聚糖酯酶、阿魏酸酯酶、纤维素酶、纤维二糖水解酶、β- 葡糖苷酶、支链淀粉酶、和β-葡聚糖酶或其任何组合。
33.如项目1至22或25至32中任一项所述的组合物，该组合物进一步包括一种或多种微生物。
34.如项目33所述的组合物，其中该一种或多种微生物选自下组，该组由以下各项组成：枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、多粘菌芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌、环状芽孢杆菌、两歧双歧杆菌、动物双歧杆菌、肉食杆菌属物种(Carnobacterium sp.)、丁酸梭菌、梭菌属物种、屎肠球菌、肠球菌属物种、乳酸杆菌属物种、嗜酸乳杆菌、香肠乳杆菌 (Lactobacillus farciminus)、鼠李糖乳杆菌、罗伊氏乳杆菌、唾液乳酸杆菌、乳酸乳球菌、乳球菌属物种、明串珠菌属物种、埃氏巨型球菌(Megasphaera elsdenii)、巨型球菌属物种(Megasphaera sp.)、乳酸片球菌(Pediococcusacidilactici)、片球菌属物种、特氏丙酸杆菌(Propionibacterium thoenii)、丙酸杆菌属物种、以及链球菌属物种或其任何组合。
35.如项目1至22或25至34中任一项所述的组合物，该组合物进一步包括来自黍亚科的基于植物的材料。
36.如项目35所述的组合物，其中该来自黍亚科的基于植物的材料是玉蜀黍、玉米、高粱、柳枝稷、粟、珍珠粟、谷子、或其经加工的形式，如研磨的玉米、研磨的玉蜀黍、脱脂玉蜀黍、脱脂脱淀粉的玉蜀黍、研磨的高粱、研磨的柳枝稷、研磨的粟、研磨的谷子、研磨的珍珠粟、或其任何组合。
37.如项目35至36中任一项所述的组合物，其中该来自黍亚科的基于植物的材料是来自植物的种子部分(如胚乳和/或果壳)。
38.一种动物饲料添加剂，其包括项目1至22或25至34中任一项所述的组合物和选自以下列表的一种或多种组分，该列表由以下各项组成：
一种或多种维生素；
一种或多种矿物质；
一种或多种氨基酸；和
一种或多种其他饲料成分。
39.一种动物饲料，其包括项目1至22或25至34中任一项所述的组合物或项目 38所述的动物饲料添加剂以及来自黍亚科的基于植物的材料。
40.如项目39所述的动物饲料，其中该来自黍亚科的基于植物的材料是玉蜀黍、玉米、高粱、柳枝稷、粟、珍珠粟、谷子，或其经加工的形式，如研磨的玉米、研磨的玉蜀黍、脱脂玉蜀黍、脱脂脱淀粉的玉蜀黍、研磨的高粱、研磨的柳枝稷、研磨的粟、研磨的谷子、研磨的珍珠粟或其任何组合。
41.如项目39至40中任一项所述的动物饲料，其中该来自黍亚科的基于植物的材料是来自植物的种子部分(如胚乳和/或果壳)。
42.一种改进动物的一种或多种性能参数的方法，该方法包括向一种或多种动物给予项目1至22或25至37中任一项所述的组合物、项目38的动物饲料添加剂、或项目39至41中任一项的动物饲料。
43.如项目42所述的方法，其中性能参数选自以下列表，该列表由以下各项组成：体重增加、欧洲生产效率因子(EPEF)、欧洲生产效能因子(EFF)以及FCR。
44.一种从基于植物的材料中溶解木糖的方法，该方法包括用项目1至22或25 至37中任一项所述的组合物或项目38所述的动物饲料添加剂处理来自黍亚科的基于植物的材料。
45.一种从基于植物的材料中释放淀粉的方法，该方法包括用项目1至22或25 至37中任一项所述的组合物或项目38所述的动物饲料添加剂处理来自黍亚科的基于植物的材料。
46.一种用于改善动物饲料营养价值的方法，该方法包括向饲料中添加项目1 至22或25至37中任一项所述的组合物或项目38所述的动物饲料添加剂。
47.一种制备动物饲料的方法，该方法包括将项目1至22或25至37中任一项所述的组合物或项目38所述的动物饲料添加剂与来自黍亚科的基于植物的材料混合。
48.如项目1至22或25至37中任一项所述的组合物、项目38所述的动物饲料添加剂、或项目39至41中任一项所述的动物饲料在以下各项中的用途：
在动物饲料中；
在动物饲料添加剂中；
在用于在动物饲料中使用的组合物的制备中；
用于改善动物饲料的营养价值；
用于增加动物饲料的消化率；
用于改善动物中的一个或多个性能参数；
用于从黍亚科的基于植物的材料中释放木糖；和/或
用于从黍亚科的基于植物的材料中释放淀粉。
49.一种具有木聚糖酶活性的分离的多肽，该分离的多肽选自下组，该组由以下各项组成：
(a)与SEQ ID NO:84的多肽具有至少84％序列一致性的多肽；
(b)与SEQ ID NO:99的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(c)与SEQ ID NO:102的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(d)一种多肽，该多肽由在高严格条件或非常高严格条件下与以下各项杂交的多核苷酸编码
(i)SEQ ID NO:82的成熟多肽编码序列，
(ii)SEQ ID NO:97的成熟多肽编码序列，
(iii)SEQ ID NO:100的成熟多肽编码序列，
(iv)(i)、(ii)或(iii)的全长互补链；
(e)由以下多核苷酸编码的多肽，该多核苷酸与SEQ ID NO:82的成熟多肽编码序列具有至少84％序列一致性；
(f)由以下多核苷酸编码的多肽，该多核苷酸与SEQ ID NO:97的成熟多肽编码序列具有至少80％序列一致性；
(g)由以下多核苷酸编码的多肽，该多核苷酸与SEQ ID NO:100的成熟多肽编码序列具有至少80％序列一致性；
(h)选自下组的多肽的变体，该组由以下各项组成：SEQ ID NO:84、SEQ ID NO:99或SEQ ID NO:102，其中该变体具有木聚糖酶活性并包括在1、2、3、4、5、 6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、 25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、 43、44、45、46、47、48、49或50个位置中的一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合；
(i)一种多肽，该多肽包括(a)、(b)、(c)、(d)、(e)、(f)、(g)、(h)或(i)的多肽以及N-末端和/或C-末端His-标签和/或HQ-标签；和
(j)(a)、(b)、(c)、(d)、(e)、(f)、(g)、(h)、(i)或(j)的多肽的片段，该片段具有木聚糖酶活性并且具有该成熟多肽的至少90％的长度。
50.根据项目49所述的多肽，其中该多肽包括以下项或由以下项组成：SEQ ID NO:84的氨基酸1至299，SEQ ID NO:87的氨基酸1至307，SEQ ID NO:99的氨基酸1 至203，或SEQID NO:102的氨基酸1至337。
51.一种组合物，该组合物包括项目49至50中任一项所述的一种或多种多肽。
52.如项目51所述的组合物，该组合物进一步包括一种或多种调配剂。
53.如项目52所述的组合物，其中该一种或多种调配剂选自下组，该组由以下各项组成：甘油、乙二醇、1,2-丙二醇或1,3-丙二醇、氯化钠、苯甲酸钠、山梨酸钾、硫酸钠、硫酸钾、硫酸镁、硫代硫酸钠、碳酸钙、柠檬酸钠、糊精、葡萄糖、蔗糖、山梨醇、乳糖、淀粉和纤维素或其任何组合。
54.如项目51至53中任一项所述的组合物，该组合物进一步包括一种或多种另外的酶。
55.如项目54所述的组合物，其中该一种或多种另外的酶选自下组，该组由以下各项组成：植酸酶、木聚糖酶、半乳聚糖酶、α-半乳糖苷酶、蛋白酶、磷脂酶A1、磷脂酶A2、溶血磷脂酶、磷脂酶C、磷脂酶D、淀粉酶、溶菌酶、阿拉伯呋喃糖苷酶、β-木糖苷酶、乙酰木聚糖酯酶、阿魏酸酯酶、纤维素酶、纤维二糖水解酶、β- 葡糖苷酶、支链淀粉酶、和β-葡聚糖酶或其任何组合。
56.如项目51至55中任一项所述的组合物，该组合物进一步包括一种或多种微生物。
57.如项目56所述的组合物，其中该一种或多种微生物选自下组，该组由以下各项组成：枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、多粘菌芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌、环状芽孢杆菌、两歧双歧杆菌、动物双歧杆菌、肉食杆菌属物种(Carnobacterium sp.)、丁酸梭菌、梭菌属物种、屎肠球菌、肠球菌属物种、乳酸杆菌属物种、嗜酸乳杆菌、香肠乳杆菌 (Lactobacillus farciminus)、鼠李糖乳杆菌、罗伊氏乳杆菌、唾液乳酸杆菌、乳酸乳球菌、乳球菌属物种、明串珠菌属物种、埃氏巨型球菌(Megasphaera elsdenii)、巨型球菌属物种(Megasphaera sp.)、乳酸片球菌(Pediococcusacidilactici)、片球菌属物种、特氏丙酸杆菌(Propionibacterium thoenii)、丙酸杆菌属物种、以及链球菌属物种或其任何组合。
58.如项目51至57中任一项所述的组合物，该组合物进一步包括来自黍亚科的基于植物的材料。
59.如项目58所述的组合物，其中该来自黍亚科的基于植物的材料是玉蜀黍、玉米、高粱、柳枝稷、粟、珍珠粟、谷子、或其经加工的形式，如研磨的玉米、研磨的玉蜀黍、脱脂玉蜀黍、脱脂脱淀粉的玉蜀黍、研磨的高粱、研磨的柳枝稷、研磨的粟、研磨的谷子、研磨的珍珠粟、或其任何组合。
60.如项目58至59中任一项所述的组合物，其中该来自黍亚科的基于植物的材料是来自植物的种子部分(如胚乳和/或果壳)。
61.一种动物饲料添加剂，其包括项目51至57中任一项所述的组合物和选自以下列表的一种或多种组分，该列表由以下各项组成：
一种或多种维生素；
一种或多种矿物质；
一种或多种氨基酸；和
一种或多种其他饲料成分。
62.一种动物饲料，其包括项目51至60中任一项所述的组合物或项目61所述的动物饲料添加剂以及来自黍亚科的基于植物的材料。
63.如项目62所述的动物饲料，其中该来自黍亚科的基于植物的材料是玉蜀黍、玉米、高粱、柳枝稷、粟、珍珠粟、谷子，或其经加工的形式，如研磨的玉米、研磨的玉蜀黍、脱脂玉蜀黍、脱脂脱淀粉的玉蜀黍、研磨的高粱、研磨的柳枝稷、研磨的粟、研磨的谷子、研磨的珍珠粟或其任何组合。
64.如项目62至63中任一项所述的动物饲料，其中该来自黍亚科的基于植物的材料是来自植物的种子部分(如胚乳和/或果壳)。
65.一种编码如项目23至24或49至50中任一项所述的多肽的多核苷酸。
66.一种核酸构建体或表达载体，包括可操作地连接至一个或多个控制序列的如项目65所述的多核苷酸，该一个或多个控制序列指导该多肽在表达宿主中的产生。
67.一种重组宿主细胞，该重组宿主细胞包括如项目65所述的多核苷酸，该多核苷酸可操作地连接至指导该多肽产生的一个或多个控制序列上。
68.一种产生项目23至24或49至50中任一项所述的多肽的方法，该方法包括：
(a)在有益于产生该多肽的条件下培养细胞，该细胞以其野生型形式产生该多肽；和
(b)回收该多肽。
69.一种产生项目23至24或49至50中任一项所述的多肽的方法，该方法包括：
(a)在有益于产生该多肽的条件下培养项目67所述的重组宿主细胞；和
(b)回收该多肽。
70.一种用编码如项目23至24或49至50中任一项所述的多肽的多核苷酸转化的转基因植物、植物部分或植物细胞。
71.一种包括如项目23至24或49至50中任一项所述的多肽的全培养液配制品或细胞培养组合物。
通过以下实例进一步描述本发明，这些实例不应当解释为限制本发明的范围。
实例
菌株
菌株的来源列于表S1中。
基因测序，随后的读取和基因发现的装配(即基因功能的注释)对于本领域技术人员是已知的并且该服务是可商购的。
表S1：菌株的分离
Figure RE-GDA0003685268660002331
Figure RE-GDA0003685268660002332
Figure RE-GDA0003685268660002341
Figure RE-GDA0003685268660002342
Figure RE-GDA0003685268660002351
在‘来自嗜热脂肪土芽孢杆菌的内切木聚糖酶基因(xynA)的核苷酸序列分析’，微生物学与生物技术杂志(J.Microbiol Biotechnol.)1995 5:117-124中未报告来自嗜热脂肪土芽孢杆菌(SEQ ID NO:76)的GH11木聚糖酶的起源。
底物的制备
脱淀粉玉蜀黍(DSM)的制备
在53℃下，将107kg的经研磨的玉蜀黍(<10mm)在槽中与253kg的自来水混合以制作浆料。该浆料的温度是47℃并且是pH 5.9。用1L的1N NaOH将该 pH调节至6.15，并且然后将该槽加热至95℃。在52℃下添加1.119kg的
Figure RE-GDA0003685268660002352
α-淀粉酶(诺维信公司，巴格斯瓦德(Bagsvaerd)，丹麦)并在95℃下孵育80分钟。在该孵育结束时测量的pH是6.17。将冷自来水添加到该浆料中并对该浆料进行离心，用Westfalia倾析器CA-225-110(4950±10rpm，流速约600l/h) 将该浆料倾析3次，给出64.5kg的污泥。然后收集该污泥，进行冷冻并冻干以给出17.1kg的脱淀粉的玉蜀黍(DSM)。
脱脂脱淀粉玉蜀黍(DFDSM)的制备
将500mL丙酮添加到100克的脱淀粉的玉蜀黍中，如上所描述的进行制备。将该浆料搅拌5分钟并允许其沉降。倾析该丙酮并重复该程序2次。将该残余物空气干燥过夜以给出在室温下储存的脱脂脱淀粉玉蜀黍(DFDSM)。
脱淀粉高粱的制备
将完整的高粱种子进行研磨并过筛，并将低于0.5mm的部分用于进一步加工。将过筛的部分以20％干物质悬浮于25mM NaOAc(pH 5.5)中并进行脱淀粉。该脱淀粉涉及在85℃下用500ppm Termamyl SCα-淀粉酶(诺维信公司，巴格斯瓦德 (Bagsvaerd)，丹麦)进行第一步是，持续20min，接着在65℃下用250ppm Attenuzyme Flex(诺维信公司，巴格斯瓦德，丹麦)过夜孵育。对该浆料进行离心并倾析该液体。在这之后，通过添加MilliQ水和200ppmTermamyl SC和200ppm Attenuzyme Flex进行另一个脱淀粉，并在65℃下孵育过夜。
通过经过沃特曼F玻璃纤维过滤器的真空过滤，将该高粱纤维从该液体中分离。然后用过量的水洗涤该滤饼若干次以去除可溶性糖。最后将脱淀粉的高粱纤维在65℃的烤箱中干燥，并将该干燥的纤维在咖啡研磨机中进行快速研磨，这样使得粒度一般少于1mm。
测定
木糖测定
从2.5mg木糖/mL的储液(通过将0.125g木糖溶解于50mL去离子水中进行制备)制备从0至125μg木糖/mL的木糖标准曲线。
测定原理。通过木糖变旋酶(XMR)使用来自麦格酶国际爱尔兰公司(MegazymeInternational Ireland)的D-木糖测定试剂盒催化D-木糖的α-和β-异头形式的相互转化。在pH 7.5，在β-木糖脱氢酶(β-XDH)存在下，通过NAD+将β-D-木糖氧化成 D-木糖酸。在该反应中形成的NADH的量采用D-木糖的量进行化学计量，并通过在340nm处的吸光度增加进行测量。
Figure RE-GDA0003685268660002361
Figure RE-GDA0003685268660002362
实例1：来自胶囊青霉的GH62阿拉伯呋喃糖苷酶(SEQ ID NO:9)
将来自胶囊青霉的GH62阿拉伯呋喃糖苷酶(SEQ ID NO:9)如WO 2006/125438中所述的进行克隆、表达和纯化。
实例2：来自黄灰青霉的GH62阿拉伯呋喃糖苷酶(SEQ ID NO:12)的克隆
如WO 2013024021中所述，将具有核苷酸序列SEQ ID NO:10的阿拉伯呋喃糖苷酶从分离自黄灰青霉的基因组DNA中进行PCR扩增，并使用BamHI和HindIII 限制性位点克隆到表达载体pDAu222中。
将最终的表达质粒单独地转化到米曲霉Bech2表达宿主中。宿主生物体米曲霉BECh2被描述于WO 00/39322中。它是JaL228(描述于WO 98/123000中)的突变体，而JaL228是IF04177的突变体。在转化时将阿拉伯呋喃糖苷酶基因通过异位整合整合到米曲霉bech2宿主细胞基因组中。
将编码amdS的基因用作标记。在补充有10mM乙酰胺的蔗糖培养基琼脂上选择转化体。为了生产重组阿拉伯呋喃糖苷酶，将单个曲霉属物种转化体在各自含有 150ml的DAP-4C-1培养基(WO 12/103350)的18个500ml带挡板烧瓶中进行培养。将培养物在旋转台上以200RPM在30℃下振荡3天。随后将培养液经由一堆具有1.6、1.2和0.7μm孔径的过滤器、接着是穿过0.45μm过滤器通过过滤与细胞材料分离。
实例3：来自黄灰青霉的GH62阿拉伯呋喃糖苷酶(SEQ ID NO:12)的纯化
将来自实例2的过滤液调节至pH 8.0并且在0.22μm PES过滤器(Nalge Nunc 国际集团，耐尔根实验室耗材(Nalgene labware)目录号595-4520)上进行过滤。将滤液加载到用50mM TRIS(pH 8.0)平衡的MEP HypercelTM柱(颇尔公司(Pall Corporation)，长岛(LongIsland)，纽约，美国)上。用平衡缓冲液洗涤后，将结合的蛋白质用50mM乙酸(pH 4.5)分批洗脱。收集多个部分并且通过SDS-PAGE 进行分析。将这些部分施加到用50mM乙酸(pH 4.5)平衡的SP
Figure RE-GDA0003685268660002363
快流柱(通用电气医疗集团(GE Healthcare)，皮斯卡塔韦，新泽西州，美国)上，并且用从0至1000mM氯化钠的线性梯度经20CV对结合蛋白进行洗脱。收集多个部分并且通过SDS-PAGE进行分析。
实例4：来自棒曲霉(SEQ ID NO:15)、费希新萨托菌(SEQ ID NO:18)和玉蜀黍黑粉菌(SEQ ID NO:21)的GH62阿拉伯呋喃糖苷酶的克隆
将来自棒曲霉(Uniprot：XM_001273614)、费希新萨托菌(Uniprot： XM_001265651)和玉蜀黍黑粉菌(Uniprot：XM_755363)的野生型基因针对米曲霉进行密码子优化，分别得到核苷酸序列SEQ ID NO:13、SEQ ID NO:16和SEQ ID NO:19，所述基因是合成的并是可商购的(基因技术公司(Gene Art)和生命技术公司(LifeTechnologies))。将大肠杆菌DH10B感受态细胞用包含如以上所述的基因的构建体进行转化，以重新构建和维持。
将最终的表达质粒单独地转化到米曲霉MT3568表达宿主中。米曲霉MT3568 是米曲霉JaL355的衍生物(WO 02/40694)，其中通过用pyrG基因破坏米曲霉乙酰胺酶(amdS)基因恢复pyrG营养缺陷型。在转化时将阿拉伯呋喃糖苷酶基因通过同源重组整合到米曲霉MT3568宿主细胞基因组中。
将编码amdS的基因用作标记。在补充有10mM乙酰胺的蔗糖琼脂板上选择转化体。选择含有相应的阿拉伯呋喃糖苷酶表达构建体的一个重组米曲霉克隆，并在旋转振荡器上在各自含有300ml DAP4C-1的3*1-升带挡板的锥形烧瓶中培养 (DAP4C-1培养基由11g的MgSO4·7H2O、1g KH2PO4、2g的柠檬酸一水合物、 20g的右旋糖、10g的麦芽糖、6g的K3PO4·3H2O、0.5g的酵母提取物、0.5ml的痕量金属溶液构成，并且添加去离子水至1升)。将培养基分配到烧瓶中，向每个 300ml部分中添加1克CaCO3。将培养基在高压灭菌器中灭菌。冷却后，将以下物质添加至300ml的培养基中：7ml的过滤灭菌的50％w/v(NH4)2HPO4、和10ml 的过滤灭菌的20％乳酸)。在30℃、180rpm下的3天培养时间后，使用0.22μm 1- 升瓶(博罗西尔(Borosil))顶部真空过滤器(通用电气医疗集团)通过过滤收获含酶的上清液。
实例5：来自棒曲霉(SEQ ID NO:15)、费希新萨托菌(SEQ ID NO:18)和玉蜀黍黑粉菌(SEQ ID NO:21)的GH62阿拉伯呋喃糖苷酶的纯化
将来自实例4的滤液进行pH调节至pH 7，加载到Toyopearl Phenyl-650树脂柱(东曹生命科学公司(Tosoh Bioscience))上，并用平衡缓冲液(硫酸铵(1.5M) +HEPES(50mM，pH 7))进行平衡。在用平衡缓冲液洗涤后，将结合的蛋白质用在HEPES(50mM，pH 7)中的0.9M硫酸铵分批洗脱。收集多个部分并且通过 SDS-PAGE进行分析。合并含有约41kDa(SEQID NO:15和SEQ ID NO:18)或 34kDa(SEQ ID NO:21)的条带的部分。使用配备有10KDa截留膜的Quixstand 将样品与HEPES(50mM，pH 7)进行缓冲液交换并浓缩。
实例6：来自草酸青霉菌(SEQ ID NO:24)和褐红篮状菌(SEQ ID NO:27)的GH62 阿拉伯呋喃糖苷酶的克隆
如WO 2013029496中所述，将具有核苷酸序列SEQ ID NO:22和SEQ ID NO: 25的阿拉伯呋喃糖苷酶从分离自草酸青霉菌和褐红篮状菌的基因组DNA中分别进行PCR扩增，并克隆到表达载体pCaHj505中。
将最终的表达质粒单独地转化到米曲霉MT3568表达宿主中。米曲霉MT3568 是米曲霉JaL355的衍生物(WO 02/40694)，其中通过用pyrG基因破坏米曲霉乙酰胺酶(amdS)基因恢复pyrG营养缺陷型。在转化时将阿拉伯呋喃糖苷酶基因通过同源重组整合到米曲霉MT3568宿主细胞基因组中。
将编码amdS的基因用作标记。在补充有10mM乙酰胺的pyrG培养基琼脂上选择转化体。选择一个包含对应的阿拉伯呋喃糖苷酶表达构建体的重组米曲霉克隆，并且在旋转摇床上在4个2-升带挡板的锥形瓶(Erlenmeyer flask)中进行培养，每个锥形瓶包含400mlYPM(1％酵母提取物、2％蛋白胨和2％麦芽糖)。在30℃下的3天培养时间后，使用0.22μm 1-升瓶顶部真空过滤器(康宁公司(Corning Inc.)，康宁(Corning)，纽约，美国)通过过滤收获含酶的上清液。
实例7：来自草酸青霉菌(SEQ ID NO:24)和褐红篮状菌(SEQ ID NO:27)的GH62 阿拉伯呋喃糖苷酶的纯化
将1600ml体积的来自实例6的米曲霉的经过滤培养液用硫酸铵(80％饱和) 沉淀，再溶解于50ml的20mM NaOAc(pH 5.5)中，用同一缓冲液透析，并且通过0.45μm过滤器过滤。最终体积是60ml。将该溶液施加至用20mM NaOAc(pH 5.5)平衡的40ml Q
Figure RE-GDA0003685268660002381
快流柱(通用电气医疗集团，白金汉郡，英国) 上。使用0-0.25M NaCl的线性梯度NaCl洗脱这些蛋白质。使用具有50mM MES 的
Figure RE-GDA0003685268660002382
4％-12％Bis-Tris凝胶通过SDS-PAGE分析各部分。将所得凝胶用INSTANTBLUETM染色。合并含有大约33kDa的条带的部分。然后将合并的溶液通过超滤进行浓缩。
实例8：来自硝孢链霉菌(SEQ ID NO:33)、北疆链霉菌(SEQ ID NO:39)和链孢囊菌属物种-60756(SEQ ID NO:63)的GH62阿拉伯呋喃糖苷酶的克隆
从硝孢链霉菌(SEQ ID NO:28)、北疆链霉菌(SEQ ID NO:34)和链孢囊菌属物种-60756(SEQ ID NO:58)克隆细菌GH62序列。
如WO 12/025577中所述，将AraF克隆到芽孢杆菌表达载体中。将编码成熟 AraF肽的DNA框内克隆到克劳氏芽孢杆菌分泌信号(BcSP；具有以下氨基酸序列：MKKPLGKIVASTALLISVAFSSSIASA(SEQ ID NO:90))中。BcSP分别替代了所有基因中的所有天然分泌信号。
将亲和标签序列引入BcSP序列的下游以便于该纯化过程(His-标签；具有以下氨基酸序列：HHHHHHPR(SEQ ID NO:92)。因此，被表达的基因包括BcSP 序列，其后是His-标签序列，随后是成熟的野生型AraF序列(如分别示于SEQ ID NO:31、SEQ ID NO:37和SEQ IDNO:61中)。
将这些最终表达质粒(BcSP-His-tag-GH62)单独地转化到枯草芽孢杆菌表达宿主中。在转化时将AraF BcSP融合基因通过同源重组整合至枯草芽孢杆菌宿主细胞基因组中。
在三联启动子系统的控制下表达该基因构建体(如描述于WO 99/43835中)。将编码氯霉素乙酰转移酶的基因用作标记物(如描述于狄代丽柯森(Diderichsen) 等人，1993，质粒(Plasmid)30:312-315中)。在每ml补充有6毫克氯霉素的LB 培养基琼脂上选择转化体。选择一个包含对应的阿拉伯呋喃糖苷酶表达构建体的重组枯草芽孢杆菌克隆，并且在旋转摇床上在500mL带挡板的锥形瓶中进行培养，每个锥形瓶包含100ml基于酵母提取物的培养基。在30℃至37℃下的3-5天培养时间后，通过离心收获包含酶的上清液并通过His-标签纯化对这些酶进行纯化。
实例9：来自硝孢链霉菌(SEQ ID NO:33)、北疆链霉菌(SEQ ID NO:39)和链孢囊菌属物种-60756(SEQ ID NO:63)的GH62阿拉伯呋喃糖苷酶的纯化
在5mL HisTrap Excel柱(通用电气医疗集团生命科学部(GE Healthcare LifeSciences))上，使用Ni2+作为金属离子，通过固定化金属层析(IMAC)纯化来自实例8的His-标记的酶。该纯化发生在pH 8下，并用咪唑对结合蛋白进行洗脱。通过SDS-PAGE对经纯化的酶的纯度进行检查并在缓冲剂交换后通过Abs 280nm 确定每种酶的浓度。
实例10：来自棒曲霉的GH62阿拉伯呋喃糖苷酶(SEQ ID NO:45)的克隆
将具有核苷酸序列SEQ ID NO:40的阿拉伯呋喃糖苷酶从分离自棒曲霉的基因组DNA中进行PCR扩增，并克隆到曲霉属表达载体pMStr366中。该载体pMStr366 是表达载体pMStr57(WO 04/032648)的一个版本，所述表达载体pMStr57已被修饰以允许插入CDS与具有序列RHHHHHHP(SEQ ID NO:91)的载体编码的HIS 标签融合。所得融合物的核苷酸序列示于SEQ ID NO:43中，并且His标记的蛋白的肽翻译示于SEQ ID NO:44中。
证实了克隆于表达载体中的经标记的阿拉伯呋喃糖苷酶编码基因的序列，并将该表达构建体转化到米曲霉菌株MT3568(WO 11/057140)中。在从原生质体再生期间，在乙酰胺上选择转化体，并且随后在选择下重新分离(克里斯滕森 (Christensen)等人，1988，生物/技术(Bio/Technology)6,1419-1422和WO 04/032648)。
为了生产重组阿拉伯呋喃糖苷酶，将单个曲霉属转化体在各自含有150ml的 DAP-4C-1培养基(WO 12/103350)的两个500ml带挡板烧瓶中进行培养。将培养物在旋转台上以150RPM在30℃下振荡3天。随后将培养液通过穿过0.22um过滤器与细胞材料分离。
实例11：来自棒曲霉的阿拉伯呋喃糖苷酶(SEQ ID NO:45)的纯化
将来自实例10的过滤样品的pH调节至约pH 7.5，并添加1.8M硫酸铵。将该样品施加至
Figure RE-GDA0003685268660002391
探测器上的5ml HiTrapTM Phenyl(HS)柱上。在加载之前，该柱已在5个柱体积(CV)的50mM HEPES+1.8M硫酸铵(pH 7)中平衡。为了除去未结合的材料，将该柱用5CV的50mM HEPES+1.8M硫酸铵(pH 7)进行洗涤。使用50mM HEPES+20％异丙醇(pH 7)将靶蛋白从柱洗脱到10ml环中。从该环中，将样品装载到已经用3CV的50mM HEPES+100mM NaCl(pH7.0)平衡的脱盐柱(HiPrepTM 26/10脱盐)上。将靶蛋白用50mM HEPES+100mM NaCl(pH 7.0)洗脱，选择相关部分，并基于色谱图进行合并。流速为5ml/min。
实例12：来自温特氏曲霉的GH62阿拉伯呋喃糖苷酶(SEQ ID NO:51)的克隆
如WO 2013024021中所述，将具有核苷酸序列SEQ ID NO:46的阿拉伯呋喃糖苷酶从分离自温特氏曲霉的基因组DNA中进行PCR扩增，并使用BamHI和MluI 限制性位点克隆到表达载体pDAu222中，以产生具有示于SEQ ID NO:49中的核苷酸序列和示于SEQ ID NO:50中的His标记的蛋白的肽翻译的C-末端His-标签融合构建体。
证实了克隆于表达载体中的经标记的阿拉伯呋喃糖苷酶编码基因的序列，并将该表达构建体转化到米曲霉菌株MT3568(WO 11/057140)中。在从原生质体再生期间，在乙酰胺上选择转化体，并且随后在选择下重新分离(克里斯滕森 (Christensen)等人，1988，生物/技术(Bio/Technology)6,1419-1422和WO 04/032648)。
为了生产重组阿拉伯呋喃糖苷酶，将单个曲霉属转化体在各自含有150ml的 DAP-4C-1培养基(WO 12/103350)的两个500ml带挡板烧瓶中进行培养。将培养物在旋转台上以150RPM在30℃下振荡3天。随后将培养液通过穿过0.22um过滤器与细胞材料分离。
实例13：来自温特氏曲霉的GH62阿拉伯呋喃糖苷酶(SEQ ID NO:51)的纯化
将来自实例12的过滤液调节至pH 8.0并且在0.22μm PES过滤器(Nalge Nunc 国际集团，耐尔根实验室耗材(Nalgene labware)目录号595-4520)上进行过滤。将滤液加载到用50mM TRIS(pH 8.0)平衡的MEP HypercelTM柱(颇尔公司(Pall Corporation)，长岛(Long Island)，纽约，美国)上。用平衡缓冲液洗涤后，将结合的蛋白质用50mM乙酸(pH4.5)分批洗脱。收集多个部分并且通过SDS-PAGE 进行分析。将这些部分施加到用50mM乙酸(pH 4.5)平衡的SP
Figure RE-GDA0003685268660002401
快流柱(通用电气医疗集团(GE Healthcare)，皮斯卡塔韦，新泽西州，美国)上，并且用从0至1000mM氯化钠的线性梯度经20CV对结合蛋白进行洗脱。收集多个部分并且通过SDS-PAGE进行分析。
实例14：来自梭孢端梗霉的GH62阿拉伯呋喃糖苷酶(SEQ ID NO:57)的克隆
将具有核苷酸序列SEQ ID NO:52的阿拉伯呋喃糖苷酶从分离自梭孢端梗霉的基因组DNA中进行PCR扩增，并使用BamHI和MluI限制性位点克隆到如WO 2013024021中所述的表达载体pDAu222中，以产生具有示于SEQ ID NO:55中的核苷酸序列和示于SEQ ID NO:56中的His标记的蛋白的肽翻译的C-末端His-标签融合构建体。
证实了克隆于表达载体中的经标记的阿拉伯呋喃糖苷酶编码基因的序列，并将该表达构建体转化到米曲霉菌株MT3568(WO 11/057140)中。在从原生质体再生期间，在乙酰胺上选择转化体，并且随后在选择下重新分离(克里斯滕森 (Christensen)等人，1988，生物/技术(Bio/Technology)6,1419-1422和WO 04/032648)。
为了生产重组阿拉伯呋喃糖苷酶，将单个曲霉属转化体在各自含有150ml的DAP-4C-1培养基(WO 12/103350)的两个500ml带挡板烧瓶中进行培养。将培养物在旋转台上以150RPM在30℃下振荡3天。随后将培养液通过穿过0.22um过滤器与细胞材料分离。
实例15：来自梭孢端梗霉的GH62阿拉伯呋喃糖苷酶(SEQ ID NO:57)的纯化
将来自实例14的过滤液调节至pH 8.0并且在0.22μm PES过滤器(Nalge Nunc 国际集团，耐尔根实验室耗材(Nalgene labware)目录号595-4520)上进行过滤。将滤液加载到用50mM TRIS(pH 8.0)平衡的MEP HypercelTM柱(颇尔公司(Pall Corporation)，长岛(Long Island)，纽约，美国)上。用平衡缓冲液洗涤后，将结合的蛋白质用50mM乙酸(pH4.5)分批洗脱。收集多个部分并且通过SDS-PAGE 进行分析。将这些部分施加到用50mM乙酸(pH 4.5)平衡的SP
Figure RE-GDA0003685268660002411
快流柱(通用电气医疗集团(GE Healthcare)，皮斯卡塔韦，新泽西州，美国)上，并且用从0至1000mM氯化钠的线性梯度经20CV对结合蛋白进行洗脱。收集多个部分并且通过SDS-PAGE进行分析。
实例16：来自梭孢端梗霉的GH62阿拉伯呋喃糖苷酶(SEQ ID NO:69)的克隆
将具有核苷酸序列SEQ ID NO:64的阿拉伯呋喃糖苷酶从分离自梭孢端梗霉的基因组DNA中进行PCR扩增，并使用BamHI和MluI限制性位点克隆到如WO 2013024021中所述的表达载体pDAu222中，以产生具有示于SEQ ID NO:67中的核苷酸序列和示于SEQ ID NO:68中的His标记的蛋白的肽翻译的C-末端His-标签融合构建体。
证实了克隆于表达载体中的经标记的阿拉伯呋喃糖苷酶编码基因的序列，并将该表达构建体转化到米曲霉菌株MT3568(WO 11/057140)中。在从原生质体再生期间，在乙酰胺上选择转化体，并且随后在选择下重新分离(克里斯滕森 (Christensen)等人，1988，生物/技术(Bio/Technology)6,1419-1422和WO 04/032648)。
为了生产重组阿拉伯呋喃糖苷酶，将单个曲霉属转化体在各自含有150ml的 DAP-4C-1培养基(WO 12/103350)的两个500ml带挡板烧瓶中进行培养。将培养物在旋转台上以150RPM在30℃下振荡3天。随后将培养液通过穿过0.22um过滤器与细胞材料分离。
实例17：来自梭孢端梗霉的GH62阿拉伯呋喃糖苷酶(SEQ ID NO:69)的纯化
将来自实例16的过滤液调节至pH 8.0并且在0.22μm PES过滤器(Nalge Nunc 国际集团，耐尔根实验室耗材(Nalgene labware)目录号595-4520)上进行过滤。将滤液加载到用50mM TRIS(pH 8.0)平衡的MEP HypercelTM柱(颇尔公司(Pall Corporation)，长岛(Long Island)，纽约，美国)上。用平衡缓冲液洗涤后，将结合的蛋白质用50mM乙酸(pH4.5)分批洗脱。收集多个部分并且通过SDS-PAGE 进行分析。将这些部分施加到用50mM乙酸(pH 4.5)平衡的SP
Figure RE-GDA0003685268660002412
快流柱(通用电气医疗集团(GE Healthcare)，皮斯卡塔韦，新泽西州，美国)上，并且用从0至1000mM氯化钠的线性梯度经20CV对结合蛋白进行洗脱。收集多个部分并且通过SDS-PAGE进行分析。
实例18：来自嗜热脂肪土芽孢杆菌的GH11木聚糖酶1(SEQ ID NO:81)的克隆
来自嗜热脂肪土芽孢杆菌的GH11木聚糖酶1基因已由卓(Cho，S)和崔(Choi， Y)(来自嗜热脂肪土芽孢杆菌的内切木聚糖酶基因(xynA)的核苷酸序列分析，微生物学与生物技术杂志(J Microbiol Biotechnol)1995 5:117-124 (UNIPROT:P45705))公开。基于公开的核苷酸序列(SEQ ID NO:76)，将编码来自嗜热脂肪土芽孢杆菌的GH11木聚糖酶1的基因克隆为密码子优化的合成基因。具有SEQ ID NO:79的合成基因由DNA2.0公司(总公司(Headquarter)，1430 奥布赖恩大道(1430O'Brien Drive)，套房(Suite)E，门洛帕克(Menlo Park)，加州94025，美国)合成。将合成基因作为克隆片段递送到其标准克隆载体中。将线性整合载体系统用于来自嗜热脂肪土芽孢杆菌的GH11木聚糖酶1的表达克隆。线性整合构建体是一种PCR融合产物，该融合产物由两个枯草芽孢杆菌同源染色体区域之间的基因连同一个强启动子与氯霉素抗性标记的融合制备。通过SOE PCR 进行融合(霍顿(Horton)，R.M.，亨特(Hunt)，H.D.，胡(Ho)，S.N.，皮伦 (Pullen)，J.K.以及皮斯(Pease)，L.R.(1989)，不使用限制酶，通过重叠延伸的基因剪接工程化杂种基因(Engineeringhybrid genes without the use of restriction enzymes,gene splicing by overlapextension)基因(Gene)77:61-68)。SOE PCR方法也描述于专利申请WO 2003095658中。在三联启动子系统(如WO 99/43835中所述)的控制下表达该基因，该启动子系统由包含稳定化序列的地衣芽孢杆菌α- 淀粉酶基因(amyL)启动子、解淀粉芽孢杆菌α-淀粉酶基因(amyQ)启动子和苏云金杆菌cryIIIA启动子组成。编码氯霉素乙酰基转移酶的基因被用作标记(描述于例如戴德瑞奇森(Diderichsen)，B.；波尔森(Poulsen)，G.B.；约根森(Joergensen)，S.T.；枯草芽孢杆菌的有用的克隆载体(A useful cloning vector for Bacillussubtilis) 质粒(Plasmid)30:312(1993)中)。在芽孢杆菌染色体上通过同源重组将最终的基因构建体整合到果胶酸裂解酶位点中。将该基因从质粒(DNA2.0公司递送)通过PCR进行扩增，其中基因特异性引物包含至两个侧翼片段的突出端。从菌株 iMB1361的基因组DNA扩增上游和下游侧翼片段(描述于专利申请WO 2003095658中)。用迟缓芽孢杆菌分泌信号(具有以下氨基酸序列： MKKPLGKIVASTALLISVAFSSSIASA，SEQ ID NO:90)代替天然的分泌信号来表达该GH11木聚糖酶1。该所得表达的基因序列是SEQ ID NO:79。通过重叠延伸 (SOE)PCR反应使这2个线性载体片段和基因片段经受剪接，以将这3个片段装配进一个线性载体构建体中。将等分部分的该PCR产物转化到枯草芽孢杆菌中。在每ml补充有6μg氯霉素的LB板上选择转化体。将包含该整合表达构建体的重组枯草芽孢杆菌克隆在液体培养基中进行生长。采集包含酶的上清液并如实例19 中所描述的将该酶进行纯化。
实例19：来自嗜热脂肪土芽孢杆菌的GH11木聚糖酶1(SEQ ID NO:81)的纯化
将过滤液调节至pH 8.0并且在0.22μm PES过滤器(Nalge Nunc国际集团，耐尔根实验室耗材(Nalgene labware)目录号595-4520)上进行过滤。将滤液加载到用50mM TRIS(pH 8.0)平衡的MEP HypercelTM柱(颇尔公司(Pall Corporation)，长岛(Long Island)，纽约，美国)上。用平衡缓冲液洗涤后，将结合的蛋白质用 100mM乙酸(pH 4.5)分批洗脱。收集多个部分并且通过SDS-PAGE进行分析。将这些部分合并并且将其施加至在20mM MES(pH6.0)中平衡的SephadexTM G-25 (中等)(通用电气医疗集团，皮斯卡塔韦，新泽西州，美国)柱上。然后将这些部分施加到用20mM MES(pH 6.0)平衡的SP
Figure RE-GDA0003685268660002431
快流柱(通用电气医疗集团，皮斯卡塔韦，新泽西州，美国)上，并且用从0至1000mM氯化钠的线性梯度经20CV对结合蛋白进行洗脱。收集多个部分并且通过SDS-PAGE进行分析。
实例20：来自北疆链霉菌的GH11木聚糖酶(SEQ ID NO:87)的克隆
从北疆链霉菌(SEQ ID NO:82)克隆细菌木聚糖酶序列。如WO 12/025577中所述，将木聚糖酶克隆到芽孢杆菌表达载体中。将编码成熟木聚糖酶肽的DNA框内克隆到克劳氏芽孢杆菌分泌信号(BcSP；具有以下氨基酸序列： MKKPLGKIVASTALLISVAFSSSIASA(SEQ IDNO:90)，该序列源于克劳氏芽孢杆菌的蛋白酶AprH)中。BcSP替代了天然分泌信号。
将亲和标签序列引入BcSP序列的下游(His-标签；具有以下氨基酸序列：HHHHHHPR(SEQ ID NO:92)。因此，被表达的基因包括BcSP序列，其后是His- 标签序列，随后是成熟的野生型木聚糖酶序列(如SEQ ID NO:85中所示)。
将最终表达质粒(BcSP-His-tag-GH11)转化到枯草芽孢杆菌表达宿主中。在转化时将Xyl BcSP融合基因通过同源重组整合至枯草芽孢杆菌宿主细胞基因组中。
在三联启动子系统的控制下表达该基因构建体(如描述于WO 99/43835中)。将编码氯霉素乙酰转移酶的基因用作标记物(如描述于(狄代丽柯森(Diderichsen) 等人，1993，质粒(Plasmid)30:312-315)中)。在每ml补充有6毫克氯霉素的 LB培养基琼脂上选择转化体。选择一个包含对应的木聚糖酶表达构建体的重组枯草芽孢杆菌克隆，并且在旋转摇床上在500mL带挡板的锥形瓶(Erlenmeyer flask) 中进行培养，每个锥形瓶包含100ml基于酵母提取物的培养基。在30℃至37℃下的3-5天培养时间后，通过离心收获包含酶的上清液，并如实例21中所述纯化该酶。
实例21：来自北疆链霉菌的GH11木聚糖酶(SEQ ID NO:87)的纯化
将经过滤的培养液施加至在100mM乙酸钠(pH 5.0)、5mM CaCl2中平衡的SephadexTM G-25(中等)(通用电气医疗集团，皮斯卡塔韦，新泽西州，美国)柱上。将这些部分合并，并且添加等体积的于MQ-水中的9g/L NaCl。然后使用具有 10,000MWCO PES膜的Vivaspin 20离心浓缩器(赛多利斯斯泰迪生物技术公司 (Sartorius Stedim BiotechGmbH)，37070哥廷根，德国)将每个样品浓缩6次。使用SDS-PAGE分析确定蛋白质浓度。
实例22：在底物脱脂脱淀粉玉蜀黍(DFDSM)中的可溶性和不可溶性膳食纤维的测量以及与在酶促孵育后测量的可溶性木糖的相关性
将400mg的脱脂脱淀粉玉蜀黍(DFDSM)添加至NaOAc-缓冲液(5mL，pH 5)中。将该混合物加热至90℃-100℃之间，然后添加Termamyl 300DX(100μL，诺维信公司，巴格斯瓦德(Bagsvaerd)，丹麦)并将该混合物孵育1hr。然后冷却该混合物并添加来自黑曲霉的淀粉葡糖苷酶(500μL，目录号E-AMGDF，用于麦格酶总淀粉和膳食纤维(Megazyme Total Starchand Dietary Fiber)，麦格酶国际爱尔兰公司(Megazyme International Ireland)，爱尔兰威克洛郡(Wicklow，Ireland))，并将样品在60℃下孵育过夜(16h)。然后将该混合物冷却并以2500x g在5℃下离心10min。收集该上清液，并将NaOAc-缓冲液(5mL，pH 5)添加至残余物中并以2500x g，在5℃下离心10min。将该程序重复两次。然后收集这些上清液，进行合并，并如在A中所述地分析其可溶性NSP。如在B中所述地分析该残余物的不可溶性NSP。
A：可溶性NSP，上清液
将这些经合并的上清液稀释至固定体积，从中取出上清液的5mL等分试样。向该等分试样中添加20.1mL冷的99.9％乙醇并将该混合物置于冰上约15min，用于沉淀具有DP>10的聚合物。在2500x g、5℃下离心10min后，丢弃该上清液。
将5mL冷的80％乙醇添加至该沉淀中并将该混合物置于冰上约15min。在 2500xg、5℃下离心10min后，丢弃该上清液。
通过添加MQ水(7.9mL)、肌醇(0.5mL，内标)和12M H2SO4(0.3mL) 并在125℃高压灭菌55分钟进行该沉淀物的酸性水解。
B：不可溶性NSP，残余物
通过添加MQ水(74mL)、肌醇(10mL，内标)和12M H2SO4(3mL)并在125℃高压灭菌55分钟，将在AMG处理后获得的沉淀进行水解。
C.GLC分析
高压灭菌后，用氢硼化物还原这些样品以产生糖醇(alditol sugars)并过乙酰化将这些糖醇衍生化以变得易挥发用于在具有FID检测器的仪器上的GLC分析(皮特森(Pettersson)等人，(1995)“确定为中性糖残余物、糖醛酸残余物、和硫酸木素的总膳食纤维(乌普萨拉方法(the Uppsala method))，协作研究”，AOAC 国际杂志(J.AOAC Int.)78:1030-1044)。相对于肌醇确定这些可溶性或不可溶性糖的浓度。
实例23：计算溶解的木糖百分比
当DFDSM与酶在40℃下孵育4个小时时，该酶溶解该底物中的木聚糖并且然后进一步通过酸水解这种经溶解的木聚糖。使用D-木糖测定试剂盒(Megazyme，目录号K-木糖)通过分光光度法测量释放的木糖。然后这种木糖(实际上是经酶溶解的木聚糖)与通过如在实例22的部分C中所述的GLC测量的底物的总木糖的量相关。
该DFDSM包含99％不可溶性和1％可溶性木糖，总共14.81％木糖，其代表根据分析在样品(DFDSM)中存在的木糖聚合物(DP>10)的浓度。基于通过Megazyme 试剂盒(基于样品重量计算释放)测量的木糖的释放，释放的木糖的量可以如下计算：例如1％释放自400mg的样品等于4mg的木糖。在400mg样品中，有400mg x 14.81％木糖，等于59.22mg木糖。总木糖(不溶性+可溶性)释放是4mg/59.22mg 的情况，其代表6.75％的总木糖聚合物的释放，但是应该注意的是该值必须针对非酶补充对照获得的被动释放进行校正。这种校正值在本文中被定义为溶解的木糖百分比。
实例24：使用GH10或GH11木聚糖酶和GH43和/或GH51阿拉伯呋喃糖苷酶的组合对脱脂脱淀粉玉蜀黍(DFDSM)进行水解
将脱脂脱淀粉玉蜀黍(DFDSM，400mg)添加至包含氯化钙(5mM)的pH 5 的水性乙酸钠(0.1M，3.9mL)溶液中，并将该混合物加热至40℃持续30分钟。添加100μL缓冲液或酶溶液并将该样品在40℃下加热4小时。将该样品冷却至5℃并离心(4000rpm，5℃)10分钟。将1.7mL的该样品转移至艾本德(Eppendorf) 管中并通过加热至95℃持续10分钟将该酶灭活。然后将样品冷冻直至水解(72 小时内，并且水解后立即进行木糖测定)。
解冻该上清液并离心(14000rpm)5分钟。在玻璃管中用Milli-Q水(250μL) 稀释该上清液(250μL)并添加HCl(1.63M，2.0mL)。将该反应加热至100℃持续1小时然后在冰浴中冷却。添加NaOH水溶液(1.3M，2.5mL)，同时将样品在冰上冷却，并且将样品储存在0-5℃下，同时使用木糖测定分析木糖含量。这些结果呈现于表2、表3和表4中。
表2：使用GH10或GH11木聚糖酶或GH43、GH51或GH62阿拉伯呋喃糖苷酶从DFDSM中 的木糖释放
表2显示当用木聚糖酶(Ronozyme WX，来自疏棉状嗜热丝孢菌的GH11木聚糖酶或SEQ ID NO:70的GH10木聚糖酶)、如在WO 2006/114095中披露为SEQ ID NO:1(在此为SEQID NO:93)的来自特异腐质霉的GH43阿拉伯呋喃糖苷酶、如在WO 2006/114095中披露为SEQID NO:2(在此为SEQ ID NO:94)的来自大型亚灰树花菌的GH51阿拉伯呋喃糖苷酶、或本发明的GH62阿拉伯呋喃糖苷酶(SEQ ID NO:24)孵育DFDSM时，在上清液酸水解后测定的木糖量(总木糖的干物质的％以及溶解的木糖％)。
Figure RE-GDA0003685268660002451
1如实例23中所述，计算溶解的木糖的百分比。
表3：使用GH10木聚糖酶和GH43、GH51或GH62阿拉伯呋喃糖苷酶从DFDSM中的木糖 释放
表3显示当单独地或与如在WO 2006/114095中披露为SEQ ID NO:1(在此为 SEQID NO:93)的来自特异腐质霉的GH43阿拉伯呋喃糖苷酶、如在WO 2006/114095中披露为SEQID NO:2(在此为SEQ ID NO:94)的来自大型亚灰树花菌的GH51阿拉伯呋喃糖苷酶、或GH43和GH51阿拉伯呋喃糖苷酶两者组合地使用SEQ ID NO:70的GH10木聚糖酶孵育DFDSM时，在上清液酸水解后测定的木糖量(总木糖的干物质的％以及溶解的木糖％)。供参考，还用SEQID NO:70的 GH10木聚糖酶测试了本发明的GH62阿拉伯呋喃糖苷酶(SEQ ID NO:24)。
Figure RE-GDA0003685268660002461
1如实例23中所述，计算溶解的木糖的百分比。
表4：使用GH11木聚糖酶和GH43、GH51或GH62阿拉伯呋喃糖苷酶从DFDSM中的木糖 释放
表4显示当单独地或与如在WO 2006/114095中披露为SEQ ID NO:1(在此为 SEQID NO:93)的来自特异腐质霉的GH43阿拉伯呋喃糖苷酶、如在WO 2006/114095中披露为SEQID NO:2(在此为SEQ ID NO:94)的来自大型亚灰树花菌的GH51阿拉伯呋喃糖苷酶、或GH43和GH51阿拉伯呋喃糖苷酶两者组合地使用Ronozyme WX(一种来自疏棉状嗜热丝孢菌的GH11木聚糖酶)孵育DFDSM时，在上清液酸水解后测定的木糖量(总木糖的干物质的％以及溶解的木糖％)。供参考，还用Ronozyme WX测试了本发明的GH62阿拉伯呋喃糖苷酶(SEQ IDNO:24)。
Figure RE-GDA0003685268660002462
Figure RE-GDA0003685268660002471
1如实例23中所述，计算溶解的木糖的百分比。
结论
结果表明，与单独的GH10或GH11木聚糖酶相比，对于GH10或GH11木聚糖酶与现有技术的GH43或GH51阿拉伯呋喃糖苷酶的组合，溶解的木糖百分率并非显著更高的。此外，与单独的GH10或GH11木聚糖酶相比，对于GH10或GH11 木聚糖酶、现有技术的GH43阿拉伯呋喃糖苷酶(其对二取代的木糖具有活性)和现有技术的GH51阿拉伯呋喃糖苷酶(其对C2-或C3-位的单-取代的木糖具有活性) 的组合，溶解的木聚糖酶百分率也并非显著更高的。
相比之下，GH10或GH11木聚糖酶和SEQ ID NO:24(GH62阿拉伯呋喃糖苷酶)的组合比单独的GH10或GH11木聚糖酶释放多至少4倍的溶解的木糖百分率。
实例25：使用GH10木聚糖酶和GH62阿拉伯呋喃糖苷酶的组合对脱脂脱淀粉玉蜀黍(DFDSM)进行水解
将脱脂脱淀粉玉蜀黍(DFDSM，400mg)添加至包含氯化钙(5mM)的pH 5 的水性乙酸钠(0.1M，3.9mL)溶液中，并将该混合物加热至40℃持续30分钟。添加100μL缓冲液或酶溶液并将该样品在40℃下加热4小时。将该样品冷却至5℃并离心(4000rpm，5℃)10分钟。将1.7mL的该样品转移至艾本德(Eppendorf) 管中并通过加热至95℃持续10分钟将该酶灭活。然后将样品冷冻直至水解(72 小时内，并且水解后立即进行木糖测定)。
解冻该上清液并离心(14000rpm)5分钟。在玻璃管中用Milli-Q水(250μL) 稀释该上清液(250μL)并添加HCl(1.63M，2.0mL)。将该反应加热至100℃持续1小时然后在冰浴中冷却。加入NaOH水溶液(1.3M，2.5mL)，同时样品在冰上冷却，并且将样品储存在0-5℃下，同时使用木糖测定分析木糖含量。这些结果呈现于表5、6、7、8和9中。
表5：使用GH10木聚糖酶(SEQ ID NO:72)和两种不同GH62阿拉伯呋喃糖苷酶(SEQ ID NO:24或63)从DFDSM中的木糖释放
表5显示当单独地或与GH62阿拉伯呋喃糖苷酶(SEQ ID NO:24或63)组合地使用SEQ ID NO:72(GH10木聚糖酶)孵育DFDSM时，在上清液酸水解后测定的木糖量(总木糖的干物质的％以及溶解的木糖％)。
Figure RE-GDA0003685268660002472
1如实例23中所述，计算溶解的木糖的百分比。
表6：使用GH10木聚糖酶(SEQ ID NO:72)和GH62阿拉伯呋喃糖苷酶(SEQ ID NO: 24)从DFDSM中的木糖释放
表6显示当单独地或与GH62阿拉伯呋喃糖苷酶(SEQ ID NO:24)组合地使用SEQ IDNO:72(GH10木聚糖酶)孵育DFDSM时，在上清液酸水解后测定的木糖量(总木糖的干物质的％以及溶解的木糖％)。
Figure RE-GDA0003685268660002481
1如实例23中所述，计算溶解的木糖的百分比。
表7：使用GH10木聚糖酶(SEQ ID NO:72)和GH62阿拉伯呋喃糖苷酶(SEQ ID NO: 24)从DFDSM中的木糖释放
表7显示当单独地或与GH62阿拉伯呋喃糖苷酶(SEQ ID NO:24)组合地使用SEQ IDNO:72(GH10木聚糖酶)孵育DFDSM时，在上清液酸水解后测定的木糖量(总木糖的干物质的％以及溶解的木糖％)。
Figure RE-GDA0003685268660002482
1如实例23中所述，计算溶解的木糖的百分比。
表8：使用GH10木聚糖酶(SEQ ID NO:70或72)和GH62阿拉伯呋喃糖苷酶(SEQ ID NO:9)从DFDSM中的木糖释放
表8显示当单独地或与GH62阿拉伯呋喃糖苷酶(SEQ ID NO:9)组合地使用 SEQ IDNO:70或72(GH10木聚糖酶)孵育DFDSM时，在上清液酸水解后测定的木糖量(总木糖的干物质的％以及溶解的木糖％)。
Figure RE-GDA0003685268660002483
1如实例23中所述，计算溶解的木糖的百分比。
表9：使用GH10木聚糖酶(SEQ ID NO:71)和GH62阿拉伯呋喃糖苷酶(SEQ ID NO: 21)从DFDSM中的木糖释放
表9显示当单独地或与GH62阿拉伯呋喃糖苷酶(SEQ ID NO:21)组合地使用SEQ IDNO:71(GH10木聚糖酶)孵育DFDSM时，在上清液酸水解后测定的木糖量(总木糖的干物质的％以及溶解的木糖％)。
Figure RE-GDA0003685268660002491
1如实例23中所述，计算溶解的木糖的百分比。
结论
结果显示，与单独的GH10木聚糖酶相比，对于测试的所有GH10木聚糖酶和 GH62阿拉伯呋喃糖苷酶的组合，溶解的木糖百分率是显著更高的(至少2倍)。实例26：使用GH11木聚糖酶和GH62阿拉伯呋喃糖苷酶的组合对脱脂脱淀粉玉蜀黍(DFDSM)进行水解
将脱脂脱淀粉玉蜀黍(DFDSM，400mg)添加至包含氯化钙(5mM)的pH 5 的水性乙酸钠(0.1M，3.9mL)溶液中，并将该混合物加热至40℃持续30分钟。添加100μL缓冲液或酶溶液并将该样品在40℃下加热4小时。将该样品冷却至5℃并离心(4000rpm，5℃)10分钟。将1.7mL的该样品转移至艾本德(Eppendorf) 管中并通过加热至95℃持续10分钟将该酶灭活。然后将样品冷冻直至水解(72 小时内，并且水解后立即进行木糖测定)。
解冻该上清液并离心(14000rpm)5分钟。在玻璃管中用Milli-Q水(250μL) 稀释该上清液(250μL)并添加HCl(1.63M，2.0mL)。将该反应加热至100℃持续1小时然后在冰浴中冷却。添加NaOH水溶液(1.3M，2.5mL)，同时将样品在冰上冷却，并且将样品储存在0-5℃下，同时使用木糖测定分析木糖含量。结果呈现于表10至18(包括端值)中。
表10：使用GH11木聚糖酶(SEQ ID NO:73)和两种不同GH62阿拉伯呋喃糖苷酶(SEQ ID NO:9或12)从DFDSM中的木糖释放
表10显示当单独地或与GH62阿拉伯呋喃糖苷酶(SEQ ID NO:9或12)组合地使用SEQ ID NO:73(GH11木聚糖酶)孵育DFDSM时，在上清液酸水解后测定的木糖量(总木糖的干物质的％以及溶解的木糖％)。
Figure RE-GDA0003685268660002492
Figure RE-GDA0003685268660002501
1如实例23中所述，计算溶解的木糖的百分比。
表11：使用GH11木聚糖酶(SEQ ID NO:73)和四种不同的GH62阿拉伯呋喃糖苷酶 (SEQ ID NO:9、15、18或21)从DFDSM中的木糖释放
表11显示当单独地或与GH62阿拉伯呋喃糖苷酶(SEQ ID NO:9、15、18或 21)组合地使用SEQ ID NO:73(GH11木聚糖酶)孵育DFDSM时，在上清液酸水解后测定的木糖量(总木糖的干物质的％以及溶解的木糖％)。
Figure RE-GDA0003685268660002502
1如实例23中所述，计算溶解的木糖的百分比。
表12：使用GH11木聚糖酶(SEQ ID NO:73、75、81、84)和两种不同GH62阿拉伯呋喃 糖苷酶(SEQ ID NO:9或12)从DFDSM中的木糖释放
表12显示当单独地或与GH62阿拉伯呋喃糖苷酶(SEQ ID NO:9或12)组合地使用SEQ ID NO:73、75、81或84(GH11木聚糖酶)孵育DFDSM时，在上清液酸水解后测定的木糖量(总木糖的干物质的％以及溶解的木糖％)。
Figure RE-GDA0003685268660002503
Figure RE-GDA0003685268660002511
1如实例23中所述，计算溶解的木糖的百分比。
表13：使用GH11木聚糖酶(SEQ ID NO:74)和GH62阿拉伯呋喃糖苷酶(SEQ ID NO: 9)从DFDSM中的木糖释放
表13显示当单独地或与GH62阿拉伯呋喃糖苷酶(SEQ ID NO:9)组合地使用SEQ IDNO:74(GH11木聚糖酶)孵育DFDSM时，在上清液酸水解后测定的木糖量(总木糖的干物质的％以及溶解的木糖％)。
Figure RE-GDA0003685268660002512
1如实例23中所述，计算溶解的木糖的百分比。
表14：使用GH11木聚糖酶(SEQ ID NO:78)和三种不同的GH62阿拉伯呋喃糖苷酶 (SEQ ID NO:51、57或69)从DFDSM中的木糖释放
表14显示当单独地或与GH62阿拉伯呋喃糖苷酶(SEQ ID NO:51、57或69) 组合地使用SEQ ID NO:78(GH11木聚糖酶)孵育DFDSM时，在上清液酸水解后测定的木糖量(总木糖的干物质的％以及溶解的木糖％)。
Figure RE-GDA0003685268660002513
1如实例23中所述，计算溶解的木糖的百分比。
表15：使用GH11木聚糖酶(SEQ ID NO:78)和三种不同的GH62阿拉伯呋喃糖苷酶 (SEQ ID NO:27、45或63)从DFDSM中的木糖释放
表15显示当单独地或与GH62阿拉伯呋喃糖苷酶(SEQ ID NO:27、45或63) 组合地使用SEQ ID NO:78(GH11木聚糖酶)孵育DFDSM时，在上清液酸水解后测定的木糖量(总木糖的干物质的％以及溶解的木糖％)。
Figure RE-GDA0003685268660002521
1如实例23中所述，计算溶解的木糖的百分比。
表16：使用GH11木聚糖酶(SEQ ID NO:73或78)和GH62阿拉伯呋喃糖苷酶(SEQ ID NO:21)从DFDSM中的木糖释放
表16显示当单独地或与GH62阿拉伯呋喃糖苷酶(SEQ ID NO:27、45或63) 组合地使用SEQ ID NO:78(GH11木聚糖酶)孵育DFDSM时，在上清液酸水解后测定的木糖量(总木糖的干物质的％以及溶解的木糖％)。
Figure RE-GDA0003685268660002522
1如实例23中所述，计算溶解的木糖的百分比。
表17：使用GH11木聚糖酶(SEQ ID NO:88)和四种不同的GH62阿拉伯呋喃糖苷酶 (SEQ ID NO:9、12、24或27)从DFDSM中的木糖释放
表17显示当单独地或与GH62阿拉伯呋喃糖苷酶(SEQ ID NO:9、12、24或 27)组合地使用SEQ ID NO:88(GH11木聚糖酶)孵育DFDSM时，在上清液酸水解后测定的木糖量(总木糖的干物质的％以及溶解的木糖％)。
Figure RE-GDA0003685268660002523
1如实例23中所述，计算溶解的木糖的百分比。
表18：使用GH11木聚糖酶(SEQ ID NO:89)和四种不同的GH62阿拉伯呋喃糖苷酶 (SEQ ID NO:9、12、24或27)从DFDSM中的木糖释放
表18显示当单独地或与GH62阿拉伯呋喃糖苷酶(SEQ ID NO:9、12、24或27)组合地使用SEQ ID NO:89(GH11木聚糖酶)孵育DFDSM时，在上清液酸水解后测定的木糖量(总木糖的干物质的％以及溶解的木糖％)。
Figure RE-GDA0003685268660002531
1如实例23中所述，计算溶解的木糖的百分比。
结论
结果显示，与单独的GH11木聚糖酶相比，对于测试的所有GH11木聚糖酶和GH62阿拉伯呋喃糖苷酶的组合，溶解的木糖百分率是显著更高的(至少2倍)。
实例27：使用商业动物饲料木聚糖酶和GH62阿拉伯呋喃糖苷酶的组合对脱脂脱淀粉玉蜀黍(DFDSM)进行水解
将脱脂脱淀粉玉蜀黍(DFDSM，400mg)添加至包含氯化钙(5mM)的pH 5 的水性乙酸钠(0.1M，3.9mL)溶液中，并将该混合物加热至40℃持续30分钟。添加100μL缓冲液或酶溶液并将该样品在40℃下加热4小时。将该样品冷却至5℃并离心(4000rpm，5℃)10分钟。将1.7mL的该样品转移至艾本德(Eppendorf) 管中并通过加热至95℃持续10分钟将该酶灭活。然后将样品冷冻直至水解(72 小时内，并且水解后立即进行木糖测定)。
解冻该上清液并离心(14000rpm)5分钟。在玻璃管中用Milli-Q水(250μL) 稀释该上清液(250μL)并添加HCl(1.63M，2.0mL)。将该反应加热至100℃持续1小时然后在冰浴中冷却。添加NaOH水溶液(1.3M，2.5mL)，同时将样品在冰上冷却，并且将样品储存在0-5℃下，同时使用木糖测定分析木糖含量。这些结果呈现于表19、20和21中。
表19：使用罗酶宝(Rovabio)Excel和四种不同的GH62阿拉伯呋喃糖苷酶(SEQ ID NO:9、12、24或27)从DFDSM中的木糖释放
表19显示当单独地或与GH62阿拉伯呋喃糖苷酶(SEQ ID NO:9、12、24或 27)组合地使用罗酶宝Excel AP孵育DFDSM时，在上清液酸水解后测定的木糖量 (总木糖的干物质的％以及溶解的木糖％)。罗酶宝Excel AP可获得自安迪苏 (Adisseo)，并且该产品声明指出它具有木聚糖酶活性和内切-1,3(4)-β-葡聚糖酶活性。
Figure RE-GDA0003685268660002532
Figure RE-GDA0003685268660002541
1如实例23中所述，计算溶解的木糖的百分比。
表20：使用艾克拿斯(Econase)XT和四种不同的GH62阿拉伯呋喃糖苷酶(SEQ ID NO:9、12、24或27)从DFDSM中的木糖释放
表20显示当单独地或与GH62阿拉伯呋喃糖苷酶(SEQ ID NO:9、12、24或 27)组合地使用艾克拿斯XT 25孵育DFDSM时，在上清液酸水解后测定的木糖量 (总木糖的干物质的％以及溶解的木糖％)。艾克拿斯XT 25可获得自AB酶公司(AB Enzymes)，并且该产品声明指出它具有内切-1,4-β-木聚糖酶活性。
Figure RE-GDA0003685268660002542
1如实例23中所述，计算溶解的木糖的百分比。
表21：使用Belfeed和四种不同的GH62阿拉伯呋喃糖苷酶(SEQ ID NO:9、12、24或 27)从DFDSM中的木糖释放
表21显示当单独地或与GH62阿拉伯呋喃糖苷酶(SEQ ID NO:9、12、24或 27)组合地使用Belfeed B 1100MP孵育DFDSM时，在上清液酸水解后测定的木糖量(总木糖的干物质的％以及溶解的木糖％)。Belfeed B 1100MP可获得自 Beldem，并且该产品声明指出它具有特定的戊聚糖酶内切-1,4-β-木聚糖酶(EC 3.2.1.8)活性。
Figure RE-GDA0003685268660002543
1如实例23中所述，计算溶解的木糖的百分比。
结论
结果显示，与单独的可商购的木聚糖酶相比，对于测试的所有可商购的木聚糖酶和GH62阿拉伯呋喃糖苷酶的组合，溶解的木糖百分率是显著更高的(至少2倍)。
实例28：来自龙眼焦腐病菌的GH11木聚糖酶(SEQ ID NO:99)的克隆
将具有核苷酸序列SEQ ID NO:97的木聚糖酶从分离自龙眼焦腐病菌的基因组DNA中进行PCR扩增，并克隆到为pCaHj505(WO 2013029496)的衍生物的表达载体pSUN515中。
将最终的表达质粒转化到米曲霉MT3568表达宿主中。米曲霉MT3568是米曲霉JaL355的衍生物(WO 02/40694)，其中通过用pyrG基因破坏米曲霉乙酰胺酶 (amdS)基因恢复pyrG营养缺陷型。在转化时将木聚糖酶基因通过同源重组整合到米曲霉MT3568宿主细胞基因组中。
将编码amdS的基因用作标记。在补充有10mM乙酰胺的pyrG培养基琼脂上选择转化体。选择一个包含木聚糖酶表达构建体的重组米曲霉克隆，并且在旋转摇床上在4个2-升带挡板的锥形瓶(Erlenmeyer flask)中进行培养，每个锥形瓶包含 400ml YPM(1％酵母提取物、2％蛋白胨和2％麦芽糖)。在30℃下的3天培养时间后，使用0.22μm 1-升瓶顶部真空过滤器(康宁公司(Corning Inc.)，康宁(Corning)，纽约，美国)通过过滤收获含酶的上清液。
实例29：来自龙眼焦腐病菌的GH11木聚糖酶(SEQ ID NO:99)的纯化
将1600ml体积的米曲霉(实例32)的经过滤的上清液用硫酸铵(80％饱和) 沉淀，再溶解于50ml的20mM Tris-HCl(pH 7.5)中，用同一缓冲液透析，并且通过0.45μm过滤器过滤。最终体积是75ml。将该溶液施加至用20mM Tris-HCl (pH 7.5)平衡的40ml Q
Figure RE-GDA0003685268660002551
快流柱(通用电气医疗集团，白金汉郡，英国)上。使用0-0.25M NaCl的线性梯度NaCl洗脱这些蛋白质。使用具有50mM MES的
Figure RE-GDA0003685268660002552
4％-12％Bis-Tris凝胶通过SDS-PAGE分析各部分。将所得凝胶用INSTANTBLUETM染色。合并含有大约22kDa的条带的部分。然后将合并的溶液通过超滤进行浓缩。
实例30：来自Ascobolus stictoideus的GH10木聚糖酶(SEQ ID NO:102)的克隆
将具有核苷酸序列SEQ ID NO:100和示于SEQ ID NO:101中的蛋白质的肽翻译的木聚糖酶从分离自Ascobolus stictoideus的基因组DNA中进行PCR扩增，并使用BamHI和XhoI限制站点克隆到如WO 2013024021中所述的表达载体pDAu222 中。
证实了克隆于表达载体中的木聚糖酶编码基因的序列，并将该表达构建体转化到米曲霉菌株MT3568(WO 11/057140)中，以产生具有蛋白质序列SEQ ID NO:102 的分泌成熟肽。在从原生质体再生期间，在乙酰胺上选择转化体，并且随后在选择下重新分离(克里斯滕森(Christensen)等人，1988，生物/技术(Bio/Technology) 6,1419-1422和WO 04/032648)。
为了生产重组木聚糖酶，将单个曲霉属转化体在各自含有180ml的DAP-4C-1 培养基(WO 12/103350)的六个500ml带挡板烧瓶中进行培养。将培养物在旋转台上以150RPM在26℃下振荡3天。随后将培养液通过穿过0.22um过滤器与细胞材料分离。
实例31：来自Ascobolus stictoideus的GH10木聚糖酶(SEQ ID NO:102)的纯化
使用配备有10KDa截留筒(通用电气医疗集团，QuixStand产品编号： QSM-02SP/50；10KDa筒产品编号：UFP-10E-4MA)的QuixStand切向流超滤系统将经过滤的培养液与HEPES(50mM，pH 7)进行缓冲液交换。将经缓冲液交换的样品装载到包装有UNOsphereTMQ(伯乐实验室(Bio-Rad Laboratories)，赫拉克勒斯(Hercules)，加州；目录号：156-0105)的柱上，将该柱用与用于样品的缓冲液交换相同的缓冲液进行平衡。用平衡缓冲液洗涤后，按照以下顺序使用逐步增加的NaCl浓度洗脱结合的蛋白质：50mM、100mM、200mM、500mM和1000mM。收集包括贯流(flow through)和洗流(wash)的所有部分并通过SDS-PAGE分析。经分析，观察到纯化的样品处于贯流中。使用与上述相同的超滤系统浓缩该贯流。将经纯化的样品的量通过光谱法(A280)测定并使用SDS-PAGE进行分析。
实例32：来自暗边青霉、棘孢曲霉、烟曲霉近缘种、费希新萨托菌、沙生梭孢壳、栖土梭孢壳、绿毛壳菌、膝弯孢霉、德氏霉属物种、和腐质霉属物种的GH62阿拉伯呋喃糖苷酶(SEQ ID NO:105、123、138、147、156、159、162、165、168、171 和174)的克隆
将具有核苷酸序列SEQ ID NO:145、136、154、157、160、169、166、163、 121、103和172的阿拉伯呋喃糖苷酶编码基因从分离自暗边青霉、棘孢曲霉、烟曲霉近缘种、费希新萨托菌、沙生梭孢壳、栖土梭孢壳、绿毛壳菌、膝弯孢霉、德氏霉属物种、和腐质霉属物种的基因组DNA进行PCR扩增，并克隆到曲霉属表达载体pMStr57(WO 04/032648)中。
证实了克隆于表达载体中的阿拉伯呋喃糖苷酶编码基因的序列，并将表达构建体转化到米曲霉菌株MT3568(WO 11/057140)中。在从原生质体再生期间，在乙酰胺上选择转化体，并且随后在选择下重新分离(克里斯滕森(Christensen)等人， 1988，生物/技术(Bio/Technology)6,1419-1422和WO 04/032648)。
为了生产重组阿拉伯呋喃糖苷酶，针对每个阿拉伯呋喃糖苷酶选择单个曲霉属转化体，并将该转化体在包含150ml的DAP-4C-1培养基(WO 12/103350)的500 ml带挡板烧瓶中进行培养。将培养物在旋转台上以150RPM在30℃下振荡4天。随后将培养液通过穿过0.22um过滤器与细胞材料分离。
实例33：来自暗边青霉、棘孢曲霉、烟曲霉近缘种、费希新萨托菌、沙生梭孢壳、栖土梭孢壳、绿毛壳菌、膝弯孢霉、德氏霉属物种、和腐质霉属物种的GH62阿拉伯呋喃糖苷酶(SEQ ID NO:105、123、138、147、156、159、162、165、168、171 和174)的纯化
将经过滤的样品调节至约pH 7.5，并添加1.8M硫酸铵。将该样品施加至
Figure RE-GDA0003685268660002561
探测器上的5ml HiTrapTM Phenyl(HS)柱上。在加载之前，该柱已在5个柱体积 (CV)的50mMHEPES+1.8M AMS(pH 7)中平衡。为了除去未结合的材料，将该柱用5CV的50mM HEPES+1.8MAMS(pH 7)进行洗涤。使用50mM HEPES +20％异丙醇(pH 7)将靶蛋白从柱洗脱到10ml环中。从该环中，将样品装载到已经用3CV的50mM HEPES+100mM NaCl(pH 7.0)平衡的脱盐柱(HiPrepTM 26/10脱盐)上。将靶蛋白用50mM HEPES+100mM NaCl(pH 7.0)洗脱，选择相关部分，并基于色谱图进行合并。流速为5ml/min。
实例34：来自解木聚糖杆菌属物种-61981和鲁特介斯糖霉菌的GH62阿拉伯呋喃糖苷酶(SEQ ID NO:111和129)的克隆
如实例8所述，将来自解木聚糖杆菌属物种-61981(SEQ ID NO:106)和鲁特介斯糖霉菌(SEQ ID NO:124)的细菌GH62序列克隆到芽孢杆菌表达载体中，以给出可操作地连接至如分别示于SEQ ID NO:109和SEQ ID NO:127中的成熟野生型AraF序列和克劳氏芽孢杆菌分泌信号上的His-标签序列。然后如实例8中所述表达基因构建体。
实例35：来自解木聚糖杆菌属物种-61981和鲁特介斯糖霉菌的GH62阿拉伯呋喃糖苷酶(SEQ ID NO:111和129)的纯化
将pH调节至pH 8，通过0.2μM进行过滤，并且将上清液施加于5ml HisTrapTM excel柱上。在加载之前，该柱已经在5个柱体积(CV)的50mM Tris/HCl(pH 8) 中平衡好。为了去除未结合的材料，将该柱用8CV的50mM Tris/HCl(pH 8)进行洗涤，靶标的洗脱是用50mMHEPES(pH 7)+10mM咪唑获得。将洗脱的蛋白在HiPrepTM 26/10脱盐柱上进行脱盐，将该脱盐柱使用3CV的50mM HEPES(pH 7)+100mM NaCl进行平衡。也将此缓冲液用于靶标的洗脱，并且流速是10ml/min。选择相关部分，并且基于色谱图和SDS-PAGE分析进行合并。
实例36：来自雪霉微座孢的GH62阿拉伯呋喃糖苷酶(SEQ ID NO:117)的克隆
将具有核苷酸序列SEQ ID NO:112的阿拉伯呋喃糖苷酶编码基因从分离自雪霉微座孢的基因组DNA中进行PCR扩增，并克隆到曲霉属表达载体pMStr366中。该载体pMStr366是表达载体pMStr57(WO 04/032648)的一个版本，所述表达载体pMStr57已被修饰以允许插入CDS与具有序列RHHHHHHP(SEQ ID NO:91) 的载体编码的HIS标签融合。所得融合物的核苷酸序列示于SEQ ID NO:115中，并且His标记的蛋白的肽翻译示于SEQ ID NO:116中。
证实了克隆于表达载体中的经标记的阿拉伯呋喃糖苷酶编码基因的序列，并将该表达构建体转化到米曲霉菌株MT3568(WO 11/057140)中。在从原生质体再生期间，在乙酰胺上选择转化体，并且随后在选择下重新分离(克里斯滕森 (Christensen)等人，1988，生物/技术(Bio/Technology)6,1419-1422和WO 04/032648)。
为了生产重组阿拉伯呋喃糖苷酶，选择单个曲霉属转化体，并将该转化体在包含100ml的YPG培养基(WO 05/066338)的500ml带挡板烧瓶中进行培养。将培养物在旋转台上以150RPM在30℃下振荡4天。随后将培养液通过穿过0.22um 过滤器与细胞材料分离。
实例37：来自雪霉微座孢的GH62阿拉伯呋喃糖苷酶(SEQ ID NO:117)的克隆
如实例35所述纯化GH62阿拉伯呋喃糖苷酶。
实例38：来自透明嗜热腐质霉的GH62阿拉伯呋喃糖苷酶(SEQ ID NO:120)的克隆
将具有核苷酸序列SEQ ID NO:118的阿拉伯呋喃糖苷酶从分离自透明嗜热腐质霉的基因组DNA中进行PCR扩增，并克隆到为pCaHj505(WO 2013029496)的衍生物的表达载体pSUN515中。
将最终的表达质粒转化到米曲霉MT3568表达宿主中。米曲霉MT3568是米曲霉JaL355的衍生物(WO 02/40694)，其中通过用pyrG基因破坏米曲霉乙酰胺酶 (amdS)基因恢复pyrG营养缺陷型。在转化时将阿拉伯呋喃糖苷酶基因通过同源重组整合到米曲霉MT3568宿主细胞基因组中。
将编码amdS的基因用作标记。在补充有10mM乙酰胺的pyrG培养基琼脂上选择转化体。选择一个包含阿拉伯呋喃糖苷酶表达构建体的重组米曲霉克隆，并且在旋转摇床上在4个2-升带挡板的锥形瓶(Erlenmeyer flask)中进行培养，每个锥形瓶包含400ml YPM(1％酵母提取物、2％蛋白胨和2％麦芽糖)。在30℃下的3 天培养时间后，使用0.22μm 1-升瓶顶部真空过滤器(康宁公司(Corning Inc.)，康宁(Corning)，纽约，美国)通过过滤收获含酶的上清液。
实例39：来自透明嗜热腐质霉的GH62阿拉伯呋喃糖苷酶(SEQ ID NO:120)的纯化
将1400ml体积的经过滤的上清液用硫酸铵(80％饱和)沉淀，再溶解于50ml 的20mM Bis-Tris(pH 6.0)中，用同一缓冲液透析，并且通过0.45μm过滤器过滤。最终体积是80ml。将该溶液施加至用20mM Bis-Tris(pH 6.0)平衡的50ml Q
Figure RE-GDA0003685268660002581
快流柱(通用电气医疗集团，白金汉郡，英国)上。使用0-0.25M NaCl 的线性梯度NaCl洗脱这些蛋白质。使用Mini-PROTEAN TGX无染色4％-15％预制凝胶(伯乐实验室(Bio-RadLaboratories)，加州，美国)通过SDS-PAGE分析部分。合并含有大约39kDa的条带的部分。然后将合并的溶液通过超滤进行浓缩。
实例40：来自灰盖鬼伞、嗜热雷米氏菌和禾草离蠕孢的GH62阿拉伯呋喃糖苷酶(SEQ ID NO:135、144和153)的克隆
将具有核苷酸序列SEQ ID NO:130、139和148的阿拉伯呋喃糖苷酶编码基因从分离自灰盖鬼伞、嗜热雷米氏菌和禾草离蠕孢的基因组DNA中进行PCR扩增，并克隆到曲霉属表达载体pMStr366中。该载体pMStr366是表达载体pMStr57(WO 04/032648)的一个版本，所述表达载体pMStr57已被修饰以允许插入CDS与具有序列RHHHHHHP(SEQ ID NO:91)的载体编码的HIS标签融合。所得融合体的核苷酸序列示于SEQ ID NO:133、142和151中，并且His标记的蛋白的肽翻译显示于SEQ ID NO:134、143和152中。
证实了克隆于表达载体中的经标记的阿拉伯呋喃糖苷酶编码基因的序列，并将表达构建体转化到米曲霉菌株MT3568(WO 11/057140)中。在从原生质体再生期间，在乙酰胺上选择转化体，并且随后在选择下重新分离(克里斯滕森(Christensen) 等人，1988，生物/技术(Bio/Technology)6,1419-1422和WO 04/032648)。
为了生产重组阿拉伯呋喃糖苷酶，针对每个阿拉伯呋喃糖苷酶选择单个曲霉属转化体，并将该转化体在包含150ml的DAP-4C-1培养基(WO 12/103350)的500 ml带挡板烧瓶中进行培养。将培养物在旋转台上以150RPM在30℃下振荡4天。随后将培养液通过穿过0.22um过滤器与细胞材料分离。
实例41：来自灰盖鬼伞和嗜热雷米氏菌的GH62阿拉伯呋喃糖苷酶(SEQ ID NO:135和144)的纯化
如实例35所述纯化GH62阿拉伯呋喃糖苷酶。
实例42：来自禾草离蠕孢的GH62阿拉伯呋喃糖苷酶(SEQ ID NO:153)的纯化
将过滤液调节至pH 7.0并且在0.22μm PES过滤器(Nalge Nunc国际集团，耐尔根实验室耗材(Nalgene labware)目录号595-4520)上进行过滤。将滤液加载到用50mM TRIS(pH 7.0)平衡的MEP HypercelTM柱(颇尔公司(Pall Corporation)，长岛(Long Island)，纽约，美国)上。用平衡缓冲液洗涤后，将结合的蛋白质用 100mM乙酸(pH 4.0)分批洗脱。收集多个部分并且通过SDS-PAGE进行分析。将这些部分合并，并且施加到在50mM TRIS(pH 7.0)中平衡的SephadexTM G-25 (中等)(通用电气医疗集团，皮斯卡塔韦，新泽西州，美国)柱上。然后将这些部分施加到在50mM TRIS(pH 7.0)中平衡的SOURCETM 15S(通用电气医疗集团，皮斯卡塔韦，新泽西州，美国)柱上，并且用从0-1000mM氯化钠的线性梯度经 10CV对结合蛋白进行洗脱。收集多个部分并且通过SDS-PAGE进行分析。
实例43：来自玉蜀黍黑粉菌的GH10木聚糖酶(SEQ ID NO:180)的克隆
将具有核苷酸序列SEQ ID NO:175的木聚糖酶编码基因从分离自玉蜀黍黑粉菌的基因组DNA中进行PCR扩增，并克隆到曲霉属表达载体pMStr366中。该载体pMStr366是表达载体pMStr57(WO 04/032648)的一个版本，所述表达载体 pMStr57已被修饰以允许插入CDS与具有序列RHHHHHHP(SEQ ID NO:91)的载体编码的HIS标签融合。所得融合物的核苷酸序列示于SEQ ID NO:178中，并且His标记的蛋白的肽翻译示于SEQ ID NO:179中。
证实了克隆于表达载体中的标记的木聚糖酶编码基因的序列，并将该表达构建体转化到米曲霉菌株MT3568(WO 11/057140)中。在从原生质体再生期间，在乙酰胺上选择转化体，并且随后在选择下重新分离(克里斯滕森(Christensen)等人，1988，生物/技术(Bio/Technology)6,1419-1422和WO 04/032648)。
为了生产重组木聚糖酶，选择单个曲霉属转化体，并将转化体在包含150ml 的DAP-4C-1培养基(WO 12/103350)的500ml带挡板烧瓶中进行培养。将培养物在旋转台上以150RPM在30℃下振荡3天。随后将培养液通过穿过0.45um过滤器与细胞材料分离。
实例44：来自玉蜀黍黑粉菌的GH10木聚糖酶(SEQ ID NO:180)的纯化
将pH调节至pH 8，通过0.2μM进行过滤，并且将上清液施加于5ml HisTrapTM excel柱上。在加载之前，该柱已经在5个柱体积(CV)的50mM Tris/HCl(pH 8) 中平衡好。为了去除未结合的材料，将该柱用8CV的50mM Tris/HCl(pH 8)进行洗涤，靶标的洗脱是用50mMHEPES(pH 7)+10mM咪唑获得。将洗脱的蛋白在HiPrepTM 26/10脱盐柱上进行脱盐，将该脱盐柱使用3CV的50mM HEPES(pH 7)+100mM NaCl进行平衡。也将此缓冲液用于靶标的洗脱，并且流速是10ml/min。选择相关部分，并且基于色谱图和SDS-PAGE分析进行合并。
实例45：使用GH10木聚糖酶和GH62阿拉伯呋喃糖苷酶的组合对脱脂脱淀粉玉蜀黍(DFDSM)进行水解
将脱脂脱淀粉玉蜀黍(DFDSM，400mg)添加至包含氯化钙(5mM)的pH 5 的水性乙酸钠(0.1M，3.9mL)溶液中，并将该混合物加热至40℃持续30分钟。添加100μL缓冲液或酶溶液并将该样品在40℃下加热4小时。将该样品冷却至5℃并离心(4000rpm，5℃)10分钟。将1.7mL的该样品转移至艾本德(Eppendorf) 管中并通过加热至95℃持续10分钟将该酶灭活。然后将样品冷冻直至水解(72 小时内，并且水解后立即进行木糖测定)。
解冻该上清液并离心(14000rpm)5分钟。在玻璃管中用Milli-Q水(250μL) 稀释该上清液(250μL)并添加HCl(1.63M，2.0mL)。将该反应加热至100℃持续1小时然后在冰浴中冷却。添加NaOH水溶液(1.3M，2.5mL)，同时将样品在冰上冷却，并且将样品储存在0℃-5℃下，同时使用木糖测定分析木糖含量。结果呈现于表22中。
表22：使用GH10木聚糖酶(SEQ ID NO:95)和四种不同的GH62阿拉伯呋喃糖苷酶 (SEQ ID NO:21、24、27或44)从DFDSM中的木糖释放
表22显示，当单独地或与GH62阿拉伯呋喃糖苷酶(SEQ ID NO:21、24、27 或44)组合地使用SEQ ID NO:95(对应于WO 2013/068550的SEQ ID NO:1的 GH10木聚糖酶)孵育DFDSM时，在上清液酸水解后测定的木糖量(总木糖的干物质的％以及溶解的木糖％)。
Figure RE-GDA0003685268660002601
1如实例23中所述，计算溶解的木糖的百分比。
结论
结果显示，与单独的木聚糖酶相比，对于测试的所有现有技术的木聚糖酶和 GH62阿拉伯呋喃糖苷酶的组合，溶解的木糖百分率是显著更高的(至少2倍)。实例46：使用GH11木聚糖酶和GH62阿拉伯呋喃糖苷酶的组合对脱脂脱淀粉玉蜀黍(DFDSM)进行水解
如实例45中所述进行实验，并且结果呈现于表23至27中(包括端值)。
表23：使用两种不同的GH11木聚糖酶(SEQ ID NO:73或74)和GH62阿拉伯呋喃糖苷 酶(SEQ ID NO:24)从DFDSM的木糖释放
表23显示当单独地或与GH62阿拉伯呋喃糖苷酶(SEQ ID NO:24)组合地使用SEQID NO:73或74(GH11木聚糖酶)孵育DFDSM时，在上清液酸水解后测定的木糖量(总木糖的干物质的％以及溶解的木糖％)。
Figure RE-GDA0003685268660002611
1如实例23中所述，计算溶解的木糖的百分比。
表24：使用GH11木聚糖酶(SEQ ID NO:73)和四种不同的GH62阿拉伯呋喃糖苷酶 (SEQ ID NO:21、27、45或63)从DFDSM中的木糖释放
表24显示当单独地或与GH62阿拉伯呋喃糖苷酶(SEQ ID NO 21、27、45或 63)组合地使用SEQ ID NO:73(GH11木聚糖酶)孵育DFDSM时，在上清液酸水解后测定的木糖量(总木糖的干物质的％以及溶解的木糖％)。
Figure RE-GDA0003685268660002612
Figure RE-GDA0003685268660002621
1如实例23中所述，计算溶解的木糖的百分比。
表25：使用七种不同的GH11木聚糖酶(SEQ ID NO:73、74、75、78、81、88或89)和八 种不同的GH62阿拉伯呋喃糖苷酶(SEQ ID NO:15、18、21、24、39、51、57或69)从DFDSM中的木 糖释放
表25显示当与GH62阿拉伯呋喃糖苷酶(SEQ ID NO:15、18、21、24、39、 51、57或69)组合地使用GH11木聚糖酶(SEQ ID NO:73、74、75、78、81、88 或89)孵育DFDSM时，在上清液酸水解后测定的木糖量(总木糖的干物质的％以及溶解的木糖％)。
Figure RE-GDA0003685268660002622
Figure RE-GDA0003685268660002631
1如实例23中所述，计算溶解的木糖的百分比。
表26：使用两种不同的GH11木聚糖酶(SEQ ID NO:73或78)和八种不同的GH62阿拉 伯呋喃糖苷酶(SEQ ID NO:111、117、120、129、135、138、144或147)从DFDSM中的木糖释放
表26显示当与GH62阿拉伯呋喃糖苷酶(SEQ ID NO:111、117、120、129、 135、138、144或147)组合地使用GH11木聚糖酶(SEQ ID NO:73或78)孵育 DFDSM时，在上清液酸水解后测定的木糖量(总木糖的干物质的％以及溶解的木糖％)。
Figure RE-GDA0003685268660002632
Figure RE-GDA0003685268660002641
1如实例23中所述，计算溶解的木糖的百分比。
表27：使用GH11木聚糖酶(SEQ ID NO:99)和GH62阿拉伯呋喃糖苷酶(SEQ ID NO: 24)从DFDSM中的木糖释放
表27显示当单独地或与GH62阿拉伯呋喃糖苷酶(SEQ ID NO:24)组合地使用SEQID NO:99(GH11木聚糖酶)孵育DFDSM时，在上清液酸水解后测定的木糖量(总木糖的干物质的％以及溶解的木糖％)。
Figure RE-GDA0003685268660002642
结论
结果显示，与单独的GH11木聚糖酶相比，对于测试的GH11木聚糖酶和GH62 阿拉伯呋喃糖苷酶的组合，溶解的木糖百分率是显著更高的(至少2倍)。
实例47：使用GH10木聚糖酶和GH62阿拉伯呋喃糖苷酶的组合对脱脂脱淀粉玉蜀黍(DFDSM)进行水解
如实例45中所述进行实验，并且结果呈现于表28至30中(包括端值)。
表28：使用三种不同的GH10木聚糖酶(SEQ ID NO:70、71或72)和八种不同的GH62 阿拉伯呋喃糖苷酶(SEQ ID NO:24、27、45、51、57或69)从DFDSM中的木糖释放
表28显示当与GH62阿拉伯呋喃糖苷酶(SEQ ID NO:24、27、45、51、57或 69)组合地使用GH10木聚糖酶(SEQ ID NO:70、71或72)孵育DFDSM时，在上清液酸水解后测定的木糖量(总木糖的干物质的％以及溶解的木糖％)。
Figure RE-GDA0003685268660002651
1如实例23中所述，计算溶解的木糖的百分比。
表29：使用两种不同的GH10木聚糖酶(SEQ ID NO:70和72)和八种不同的GH62阿拉 伯呋喃糖苷酶(SEQ ID NO:111、117、120、129、135、138、144或147)从DFDSM中的木糖释放
表29显示当与GH62阿拉伯呋喃糖苷酶(SEQ ID NO:111、117、120、129、 135、138、144或147)组合地使用GH10木聚糖酶(SEQ ID NO:70或72)孵育 DFDSM时，在上清液酸水解后测定的木糖量(总木糖的干物质的％以及溶解的木糖％)。
Figure RE-GDA0003685268660002652
Figure RE-GDA0003685268660002661
1如实例23中所述，计算溶解的木糖的百分比。
表30：使用两种不同的GH10木聚糖酶(SEQ ID NO:102和180)和GH62阿拉伯呋喃糖 苷酶(SEQ ID NO:24)从DFDSM中的木糖释放
表30显示当单独地或与GH62阿拉伯呋喃糖苷酶(SEQ ID NO:24)组合地使用SEQID NO:102或180(GH10木聚糖酶)孵育DFDSM时，在上清液酸水解后测定的木糖量(总木糖的干物质的％以及溶解的木糖％)。
Figure RE-GDA0003685268660002662
1如实例23中所述，计算溶解的木糖的百分比。
结论
结果显示，与单独的GH10木聚糖酶相比，对于测试的所有GH10木聚糖酶和 GH62阿拉伯呋喃糖苷酶的组合，溶解的木糖百分率是显著更高的(至少2倍)。
实例48：使用GH10木聚糖酶和GH62阿拉伯呋喃糖苷酶的组合对脱脂脱淀粉玉蜀黍(DFDSM)进行水解
如实例45中所述进行实验，并且结果呈现于表31中。
表31：使用GH10木聚糖酶(SEQ ID NO:72)和十种不同的GH62阿拉伯呋喃糖苷酶 (SEQ ID NO:105、123、153、156、159、162、165、168、171或174)从DFDSM中的木糖释放
表31显示当与GH62阿拉伯呋喃糖苷酶(SEQ ID NO:105、123、153、156、 159、162、165、168、171或174)组合地使用GH10木聚糖酶(SEQ ID NO:72) 孵育DFDSM时，在上清液酸水解后测定的木糖量(总木糖的干物质的％以及溶解的木糖％)。
Figure RE-GDA0003685268660002671
1如实例23中所述，计算溶解的木糖的百分比。
结论
结果显示，与单独的GH10木聚糖酶相比，对于测试的所有GH10木聚糖酶和GH62阿拉伯呋喃糖苷酶的组合，溶解的木糖百分率是显著更高的(至少2倍)。实例49：使用GH11木聚糖酶和GH62阿拉伯呋喃糖苷酶的组合对脱脂脱淀粉玉蜀黍(DFDSM)进行水解
如实例45中所述进行实验，并且结果呈现于表32至34中(包括端值)。
表32：使用GH11木聚糖酶(SEQ ID NO:78)和十种不同的GH62阿拉伯呋喃糖苷酶 (SEQ ID NO:105、123、153、156、159、162、165、168、171或174)从DFDSM中的木糖释放
表32显示当与GH62阿拉伯呋喃糖苷酶(SEQ ID NO:105、123、153、156、 159、162、165、168、171或174)组合地使用GH11木聚糖酶(SEQ ID NO:78) 孵育DFDSM时，在上清液酸水解后测定的木糖量(总木糖的干物质的％以及溶解的木糖％)。
Figure RE-GDA0003685268660002681
1如实例23中所述，计算溶解的木糖的百分比。
表33：使用GH11木聚糖酶(SEQ ID NO:73)和十种不同的GH62阿拉伯呋喃糖苷酶 (SEQ ID NO:105、123、153、156、159、162、165、168、171或174)从DFDSM中的木糖释放
表33显示当与GH62阿拉伯呋喃糖苷酶(SEQ ID NO:105、123、153、156、159、162、165、168、171或174)组合地使用GH11木聚糖酶(SEQ ID NO:73) 孵育DFDSM时，在上清液酸水解后测定的木糖量(总木糖的干物质的％以及溶解的木糖％)。
Figure RE-GDA0003685268660002691
1如实例23中所述，计算溶解的木糖的百分比。
表34：使用GH11木聚糖酶(SEQ ID NO:96)和十种不同的GH62阿拉伯呋喃糖苷酶 (SEQ ID NO:105、123、153、156、159、162、165、168、171或174)从DFDSM中的木糖释放
表34显示当与GH62阿拉伯呋喃糖苷酶(SEQ ID NO:105、123、153、156、 159、162、165、168、171或174)组合地使用GH11木聚糖酶(SEQ ID NO:96) 孵育DFDSM时，在上清液酸水解后测定的木糖量(总木糖的干物质的％以及溶解的木糖％)。
Figure RE-GDA0003685268660002692
Figure RE-GDA0003685268660002701
1如实例23中所述，计算溶解的木糖的百分比。
结论
结果显示，与单独的GH11木聚糖酶相比，对于测试的所有GH11木聚糖酶和 GH62阿拉伯呋喃糖苷酶的组合，溶解的木糖百分率是显著更高的(至少2倍)。
实例50：玉米和小麦DDGS中的阿拉伯木聚糖的水解的测定
底物
使用来自欧洲的基于玉米的燃料乙醇厂的玉米DDGS作为底物(93.35％干底物)。使用来自欧洲的基于小麦的燃料乙醇厂的小麦DDGS作为底物(92.43％干底物)。将DDGS在咖啡搅拌器中研磨3-4分钟，并在水中充分地洗涤(六次，每次洗涤后接着以3000rpm离心15分钟)以除去可溶性干物质。
在反复洗涤后，测量干燥底物(DS)的量，并且制备用于该试验的于水中的 15％DS浆液，并使用1M NaOH调节至pH 4.8。
酶
使用的酶是来自棘孢曲霉的GH10木聚糖酶(SEQ ID NO:72)和来自胶囊青霉的GH62阿拉伯呋喃糖苷酶(SEQ ID NO:9)。
测定
将4g浆液转移到PCR管板中。将叠氮化钠(0.05％)和酶(见表30)添加至每个孔。将该板用手动板密封件覆盖，并将样品在40℃和500rpm下孵育24小时，其中在0和24小时后取样。将样品煮沸10分钟以使酶失活，离心并过滤(0.2μm 过滤器)。
表35：实验设计和酶剂量
Figure RE-GDA0003685268660002711
分析方法
1.白利糖度测量
使用梅特勒-托利多(Mettler Toledo)白利糖度仪测量可溶性干物质(白利糖度)。
2.在320nm处的吸收
在用水稀释50x后测量在320nm处的吸收。在320nm处的吸收是包含阿魏酸的可溶性片段的量度。用阿魏酸标准品(A320(OD)＝0.0147+0.0628*[以μg/ ml计的阿魏酸浓度])校准该测定
3.木糖(针对24小时的样品)
使用来自麦格酶公司(Megazyme)的“D-木糖测定试剂盒”确定木糖含量。
结果
表36：使用白利糖度测量确定的可溶性干物质
Figure RE-GDA0003685268660002712
Figure RE-GDA0003685268660002721
表37：通过在320nm处的吸收测量的包含阿魏酸的可溶性片段的量
测试 底物/酶 0小时 样品1(mg/mL) 样品2(mg/mL)
1 小麦，空白 0.163 0.258 0.328
2 小麦，GH10 0.163 0.347 0.378
3 小麦，GH62 0.163 0.215 0.261
4 小麦，GH10+GH62 0.163 0.354 0.424
5 小麦，GH10+GH62 0.163 0.359 0.421
6 小麦，GH10+GH62 0.163 0.368 0.375
7 玉米，空白 0.027 0.043 0.047
8 玉米，GH10 0.027 0.279 0.287
9 玉米，GH62 0.027 0.061 0.047
10 玉米，GH10+GH62 0.027 0.432 0.456
11 玉米，GH10+GH62 0.027 0.504 0.475
12 玉米，GH10+GH62 0.027 0.510 0.534
表38：自DDGS中的木糖释放
Figure RE-GDA0003685268660002722
Figure RE-GDA0003685268660002731
从该实例的数据得出结论，对于小麦DDGS，GH10木聚糖酶(SEQ ID NO:72) 能够完全降解底物，并且添加GH62阿拉伯呋喃糖苷酶不会产生任何额外的木糖释放。
对于玉米DDGS，单独的GH10木聚糖酶(SEQ ID NO:72)不能完全降解底物。然而，当添加GH62阿拉伯呋喃糖苷酶(SEQ ID NO:9)时，木糖的释放显著改进。该实例清楚地显示较少取代的基于小麦的底物和高度取代的基于玉米的底物之间的差异，并且GH10木聚糖酶和GH62阿拉伯呋喃糖苷酶的组合针对单独的基于玉米的底物而言显著优于GH10木聚糖酶。
Figure IDA0003543022890000011
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Claims (12)

1.一种具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的分离的多肽，该多肽选自下组，该组由以下各项组成：
(a)与SEQ ID NO:12的多肽具有至少85％序列一致性的多肽；
(b)与SEQ ID NO:24的多肽具有至少97.6％序列一致性的多肽；
(c)与SEQ ID NO:27的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(d)与SEQ ID NO:30的多肽具有至少90％序列一致性的多肽；
(e)与SEQ ID NO:36的多肽具有至少92％序列一致性的多肽；
(f)与SEQ ID NO:48的多肽具有至少86％序列一致性的多肽；
(g)与SEQ ID NO:54的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(h)与SEQ ID NO:60的多肽具有至少81％序列一致性的多肽；
(i)与SEQ ID NO:66的多肽具有至少84％序列一致性的多肽；
(j)与SEQ ID NO:105的多肽具有至少87％序列一致性的多肽；
(k)与SEQ ID NO:108的多肽具有至少85％序列一致性的多肽；
(l)与SEQ ID NO:114的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(m)与SEQ ID NO:120的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(n)与SEQ ID NO:123的多肽具有至少89％序列一致性的多肽；
(o)与SEQ ID NO:126的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(p)与SEQ ID NO:138的多肽具有至少85％序列一致性的多肽；
(q)与SEQ ID NO:141的多肽具有至少89％序列一致性的多肽；
(r)与SEQ ID NO:147的多肽具有至少86％序列一致性的多肽；
(s)与SEQ ID NO:156的多肽具有至少96.4％序列一致性的多肽；
(t)与SEQ ID NO:162的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(u)与SEQ ID NO:165的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(v)与SEQ ID NO:168的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(w)与SEQ ID NO:171的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(x)与SEQ ID NO:174的多肽具有至少82％序列一致性的多肽；
(y)一种多肽，该多肽由在高严格条件或非常高严格条件下与以下各项杂交的多核苷酸编码
(i)SEQ ID NO:10的成熟多肽编码序列，
(ii)SEQ ID NO:22的成熟多肽编码序列，
(iii)SEQ ID NO:25的成熟多肽编码序列，
(iv)SEQ ID NO:28的成熟多肽编码序列，
(v)SEQ ID NO:34的成熟多肽编码序列，
(vi)SEQ ID NO:46的成熟多肽编码序列，
(vii)SEQ ID NO:52的成熟多肽编码序列，
(viii)SEQ ID NO:58的成熟多肽编码序列，
(ix)SEQ ID NO:64的成熟多肽编码序列，
(x)SEQ ID NO:103的成熟多肽编码序列，
(xi)SEQ ID NO:106的成熟多肽编码序列，
(xii)SEQ ID NO:112的成熟多肽编码序列，
(xiii)SEQ ID NO:118的成熟多肽编码序列，
(xiv)SEQ ID NO:121的成熟多肽编码序列，
(xv)SEQ ID NO:124的成熟多肽编码序列，
(xvi)SEQ ID NO:136的成熟多肽编码序列，
(xvii)SEQ ID NO:139的成熟多肽编码序列，
(xviii)SEQ ID NO:145的成熟多肽编码序列，
(xix)SEQ ID NO:154的成熟多肽编码序列，
(xx)SEQ ID NO:160的成熟多肽编码序列，
(xxi)SEQ ID NO:163的成熟多肽编码序列，
(xxii)SEQ ID NO:166的成熟多肽编码序列，
(xxiii)SEQ ID NO:169的成熟多肽编码序列，
(xxiv)SEQ ID NO:172的成熟多肽编码序列，
(xxv)(i)、(ii)、(iii)、(iv)、(v)、(vi)、(vii)、(viii)、(ix)、(x)、(xi)、(xii)、(xiii)、(xiv)、(xv)、(xvi)、(xvii)、(xviii)、(xix)、(xx)、(xxi)、(xxii)、(xxiii)或(xxiv)的全长互补链；
(z)由以下多核苷酸编码的多肽，该多核苷酸与SEQ ID NO:10的成熟多肽编码序列具有至少85％序列一致性；
(aa)由以下多核苷酸编码的多肽，该多核苷酸与SEQ ID NO:22的成熟多肽编码序列具有至少97.6％序列一致性；
(ab)由以下多核苷酸编码的多肽，该多核苷酸与SEQ ID NO:25的成熟多肽编码序列具有至少80％序列一致性；
(ac)由以下多核苷酸编码的多肽，该多核苷酸与SEQ ID NO:28的成熟多肽编码序列具有至少90％序列一致性；
(ad)由以下多核苷酸编码的多肽，该多核苷酸与SEQ ID NO:34的成熟多肽编码序列具有至少92％序列一致性；
(ae)由以下多核苷酸编码的多肽，该多核苷酸与SEQ ID NO:46的成熟多肽编码序列具有至少86％序列一致性；
(af)由以下多核苷酸编码的多肽，该多核苷酸与SEQ ID NO:52的成熟多肽编码序列具有至少80％序列一致性；
(ag)由以下多核苷酸编码的多肽，该多核苷酸与SEQ ID NO:58的成熟多肽编码序列具有至少81％序列一致性；
(ah)由以下多核苷酸编码的多肽，该多核苷酸与SEQ ID NO:64的成熟多肽编码序列具有至少84％序列一致性；
(ai)由以下多核苷酸编码的多肽，该多核苷酸与SEQ ID NO:103的成熟多肽编码序列具有至少87％序列一致性；
(aj)由以下多核苷酸编码的多肽，该多核苷酸与SEQ ID NO:106的成熟多肽编码序列具有至少85％序列一致性；
(ak)由以下多核苷酸编码的多肽，该多核苷酸与SEQ ID NO:111的成熟多肽编码序列具有至少80％序列一致性；
(al)由以下多核苷酸编码的多肽，该多核苷酸与SEQ ID NO:118的成熟多肽编码序列具有至少80％序列一致性；
(am)由以下多核苷酸编码的多肽，该多核苷酸与SEQ ID NO:121的成熟多肽编码序列具有至少89％序列一致性；
(an)由以下多核苷酸编码的多肽，该多核苷酸与SEQ ID NO:124的成熟多肽编码序列具有至少80％序列一致性；
(ao)由以下多核苷酸编码的多肽，该多核苷酸与SEQ ID NO:136的成熟多肽编码序列具有至少85％序列一致性；
(ap)由以下多核苷酸编码的多肽，该多核苷酸与SEQ ID NO:139的成熟多肽编码序列具有至少89％序列一致性；
(aq)由以下多核苷酸编码的多肽，该多核苷酸与SEQ ID NO:145的成熟多肽编码序列具有至少86％序列一致性；
(ar)由以下多核苷酸编码的多肽，该多核苷酸与SEQ ID NO:154的成熟多肽编码序列具有至少96.4％序列一致性；
(as)由以下多核苷酸编码的多肽，该多核苷酸与SEQ ID NO:160的成熟多肽编码序列具有至少80％序列一致性；
(at)由以下多核苷酸编码的多肽，该多核苷酸与SEQ ID NO:163的成熟多肽编码序列具有至少80％序列一致性；
(au)由以下多核苷酸编码的多肽，该多核苷酸与SEQ ID NO:166的成熟多肽编码序列具有至少80％序列一致性；
(av)由以下多核苷酸编码的多肽，该多核苷酸与SEQ ID NO:169的成熟多肽编码序列具有至少80％序列一致性；
(aw)由以下多核苷酸编码的多肽，该多核苷酸与SEQ ID NO:172的成熟多肽编码序列具有至少82％序列一致性；
(ax)SEQ ID NO:12的变体，其中该变体具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且包括在1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13,14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44或45个位置中的一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合；
(ay)SEQ ID NO:24的变体，其中该变体具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且包括在1、2、3、4、5、6或7个位置中的一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合；
(az)选自下组的多肽的变体，该组由以下各项组成：SEQ ID NO:27、SEQ ID NO:54、SEQID NO:60、SEQ ID NO:108、SEQ ID NO:114、SEQ ID NO:120、SEQ ID NO:126、SEQ ID NO:162、SEQ ID NO:165、SEQ ID NO:168、SEQ ID NO:171或SEQ ID NO:174，其中该变体具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并包括在1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49或50个位置中的一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合；
(ba)SEQ ID NO:30的变体，其中该变体具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且包括在1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42或43个位置中的一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合；
(bb)SEQ ID NO:36的变体，其中该变体具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且包括在1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33或34个位置中的一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合；
(bc)选自下组的多肽的变体，该组由以下各项组成：SEQ ID NO:48或SEQ ID NO:147，其中该变体具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并包括在1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41或42个位置中的一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合；
(bd)SEQ ID NO:66的变体，其中该变体具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且包括在1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13,14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47或48个位置中的一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合；
(be)SEQ ID NO:105的变体，其中该变体具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且包括在1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38或39个位置中的一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合；
(bf)选自下组的多肽的变体，该组由以下各项组成：SEQ ID NO:123或SEQ ID NO:141，其中该变体具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并包括在1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32或33个位置中的一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合；
(bg)SEQ ID NO:138的变体，其中该变体具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且包括在1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45或46个位置中的一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合；
(bh)SEQ ID NO:156的变体，其中该变体具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且包括在1、2、3、4、5、6、7、8、9、10或11个位置中的一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合；
(bi)一种多肽，该多肽包括(a)、(b)、(c)、(d)、(e)、(f)、(g)、(h)、(i)、(j)、(k)、(l)、(m)、(n)、(o)、(p)、(q)、(r)、(s)、(t)、(u)、(v)、(w)、(x)、(y)、(z)、(aa)、(ab)、(ac)、(ad)、(ae)、(af)、(ag)、(ah)、(ai)、(aj)、(ak)、(al)、(am)、(an)、(ao)、(ap)、(aq)、(ar)、(as)、(at)、(au)、(av)、(aw)、(ax)、(ay)、(az)、(ba)、(bb)、(bc)、(bd)、(be)、(bf)、(bg)或(bh)的多肽以及N-末端和/或C-末端His-标签和/或HQ-标签；和
(bj)(a)、(b)、(c)、(d)、(e)、(f)、(g)、(h)、(i)、(j)、(k)、(l)、(m)、(n)、(o)、(p)、(q)、(r)、(s)、(t)、(u)、(v)、(w)、(x)、(y)、(z)、(aa)、(ab)、(ac)、(ad)、(ae)、(af)、(ag)、(ah)、(ai)、(aj)、(ak)、(al)、(am)、(an)、(ao)、(ap)、(aq)、(ar)、(as)、(at)、(au)、(av)、(aw)、(ax)、(ay)、(az)、(ba)、(bb)、(bc)、(bd)、(be)、(bf)、(bg)、(bh)或(bi)的多肽的片段，该片段具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性并且具有该成熟多肽的至少90％的长度。
2.根据权利要求1所述的多肽，其中该多肽包括以下项或由以下项组成：SEQ ID NO:12的氨基酸1至303，SEQ ID NO:24的氨基酸1至302，SEQ ID NO:27的氨基酸1至309，SEQ IDNO:30的氨基酸1至438，SEQ ID NO:33的氨基酸1至446，SEQ ID NO:36的氨基酸1至438，SEQID NO:39的氨基酸1至446，SEQ ID NO:48的氨基酸1至302，SEQ ID NO:51的氨基酸1至311，SEQ ID NO:54的氨基酸1至364，SEQ ID NO:57的氨基酸1至373，SEQ ID NO:60的氨基酸1至436，SEQ ID NO:63的氨基酸1至444，SEQ ID NO:66的氨基酸1至302，SEQ ID NO:69的氨基酸1至311，SEQ ID NO:105的氨基酸1至302，SEQ ID NO:108的氨基酸1至464，SEQ ID NO:111的氨基酸1至472，SEQ ID NO:114的氨基酸1至364，SEQ ID NO:117的氨基酸1至372，SEQID NO:120的氨基酸1至357，SEQ ID NO:123的氨基酸1至302，SEQ ID NO:126的氨基酸1至453，SEQ ID NO:129的氨基酸1至461，SEQ ID NO:138的氨基酸1至309，SEQ ID NO:141的氨基酸1至304，SEQ ID NO:144的氨基酸1至312，SEQ ID NO:147的氨基酸1至302，SEQ ID NO:156的氨基酸1至316，SEQ ID NO:162的氨基酸1至303，SEQ ID NO:165的氨基酸1至361，SEQID NO:168的氨基酸1至373，SEQ ID NO:171的氨基酸1至302，或SEQ ID NO:174的氨基酸1至364。
3.一种组合物，该组合物包括权利要求1至2中任一项所述的一种或多种多肽。
4.如权利要求3所述的组合物，该组合物进一步包括一种或多种具有木聚糖酶活性的GH10或GH11多肽。
5.如权利要求4所述的组合物，其中具有木聚糖酶活性的GH10或GH11多肽选自下组，该组由以下各项组成：
(a)与SEQ ID NO:70的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(b)与SEQ ID NO:71的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(c)与SEQ ID NO:72的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(d)与SEQ ID NO:73的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(e)与SEQ ID NO:74的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(f)与SEQ ID NO:75的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(g)与SEQ ID NO:78的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(h)与SEQ ID NO:81的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(i)与SEQ ID NO:84的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(j)与SEQ ID NO:88的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(k)与SEQ ID NO:89的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(l)与SEQ ID NO:95的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(m)与SEQ ID NO:96的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(n)与SEQ ID NO:99的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(o)与SEQ ID NO:102的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(p)与SEQ ID NO:177的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(q)选自下组的多肽的变体，该组由以下各项组成：SEQ ID NO:70、SEQ ID NO:71、SEQID NO:72、SEQ ID NO:73、SEQ ID NO:74、SEQ ID NO:75、SEQ ID NO:78、SEQ ID NO:81、SEQID NO:84、SEQ ID NO:88、SEQ ID NO:89、SEQ ID NO:95、SEQ ID NO:96、SEQ ID NO:99、SEQID NO:102和SEQ ID NO:177，其中该变体具有木聚糖酶活性并且包括在1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个位置中的一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合；
(r)一种多肽，该多肽包括(a)、(b)、(c)、(d)、(e)、(f)、(g)、(h)、(i)、(j)、(k)、(l)、(m)、(n)、(o)、(p)或(q)的多肽以及N-末端和/或C-末端His-标签和/或HQ-标签；和
(s)(a)、(b)、(c)、(d)、(e)、(f)、(g)、(h)、(i)、(j)、(k)、(l)、(m)、(n)、(o)、(p)、(q)或(r)的多肽的片段，该片段具有木聚糖酶活性并且具有该成熟多肽的至少90％的长度。
6.根据权利要求5的组合物，其中具有木聚糖酶活性的GH10或GH11多肽选自下组，该组由以下各项组成：SEQ ID NO:70的氨基酸1至384，SEQ ID NO:71的氨基酸1至288，SEQ IDNO:72的氨基酸1至308，SEQ ID NO:73的氨基酸1至195，SEQ ID NO:74的氨基酸1至203，SEQID NO:75的氨基酸1至182，SEQ ID NO:78的氨基酸1至183，SEQ ID NO:81的氨基酸1至181，SEQ ID NO:84的氨基酸1至299，SEQ ID NO:87的氨基酸1至307，SEQ ID NO:88的氨基酸1至188，SEQ ID NO:89的氨基酸1至189，SEQ ID NO:95的氨基酸1至328，SEQ ID NO:96的氨基酸1至208，SEQ ID NO:99的氨基酸1至203，SEQ ID NO:102的氨基酸1至337，或SEQ ID NO:177的氨基酸1至323。
7.一种具有木聚糖酶活性的分离的多肽，该分离的多肽选自下组，该组由以下各项组成：
(a)与SEQ ID NO:84的多肽具有至少84％序列一致性的多肽；
(b)与SEQ ID NO:99的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(c)与SEQ ID NO:102的多肽具有至少80％序列一致性的多肽；
(d)一种多肽，该多肽由在高严格条件或非常高严格条件下与以下各项杂交的多核苷酸编码
(i)SEQ ID NO:82的成熟多肽编码序列，
(ii)SEQ ID NO:97的成熟多肽编码序列，
(iii)SEQ ID NO:100的成熟多肽编码序列，
(iv)(i)、(ii)或(iii)的全长互补链；
(e)由以下多核苷酸编码的多肽，该多核苷酸与SEQ ID NO:82的成熟多肽编码序列具有至少84％序列一致性；
(f)由以下多核苷酸编码的多肽，该多核苷酸与SEQ ID NO:97的成熟多肽编码序列具有至少80％序列一致性；
(g)由以下多核苷酸编码的多肽，该多核苷酸与SEQ ID NO:100的成熟多肽编码序列具有至少80％序列一致性；
(h)选自下组的多肽的变体，该组由以下各项组成：SEQ ID NO:84、SEQ ID NO:99或SEQID NO:102，其中该变体具有木聚糖酶活性并包括在1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49或50个位置中的一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合；
(i)一种多肽，该多肽包括(a)、(b)、(c)、(d)、(e)、(f)、(g)、(h)或(i)的多肽以及N-末端和/或C-末端His-标签和/或HQ-标签；和
(j)(a)、(b)、(c)、(d)、(e)、(f)、(g)、(h)、(i)或(j)的多肽的片段，该片段具有木聚糖酶活性并且具有该成熟多肽的至少90％的长度。
8.根据权利要求7所述的多肽，其中该多肽包括以下项或由以下项组成：SEQ ID NO:84的氨基酸1至299，SEQ ID NO:87的氨基酸1至307，SEQ ID NO:99的氨基酸1至203，或SEQ IDNO:102的氨基酸1至337。
9.一种多核苷酸，编码权利要求1至2或7至8中任一项所述的多肽。
10.一种核酸构建体或表达载体，该核酸构建体或表达载体包括权利要求9所述的多核苷酸，该多核苷酸可操作地连接至指导该多肽在表达宿主内的产生的一个或多个控制序列。
11.一种重组宿主细胞，该重组宿主细胞包括权利要求9所述的多核苷酸，该多核苷酸可操作地连接至指导该多肽的产生的一个或多个控制序列。
12.一种产生权利要求1至2或7至8中任一项所述的多肽的方法，该方法包括：
(a)在有益于产生该多肽的条件下培养权利要求11所述的重组宿主细胞；和
(b)回收该多肽。
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