CN114711172B - 一种海水石斑鱼高密度保活方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种海水石斑鱼高密度保活方法，属于海水鱼保活技术领域。所述高密度保活方法包括：保活实验前将活鱼暂养24‑48h，暂养后进行低温驯化，然后进行梯度降温，低温驯化后将石斑鱼在60‑70mg/L浓度的CO2水溶液中进行麻醉，然后于15‑16℃水中进行保活。通过本发明的保活方法，可使石斑鱼在鱼水质量比为1:1.7的高密度下有水保活72h的存活率达到90％以上。本发明的保活方案成本低、可操作性强，能有效提高石斑鱼的存活率和延长存活时间，提高石斑鱼保活密度，增加鲜活石斑鱼的经济效益。
Description
技术领域
本发明涉及海水鱼保活技术领域，特别是涉及一种海水石斑鱼高密度保活方法。
背景技术
珍珠龙胆石斑鱼营养丰富，肉质鲜嫩，深受消费者喜爱，是重要的名贵海水养殖鱼类。因其养殖区域主要集中在沿海地区，为满足内陆消费者需求，珍珠龙胆石斑鱼多采用有水保活方式进行贮运和销售。但是石斑鱼性格暴躁，在捕捞、装载、转运等过程中会因受到刺激产生强烈的应激反应，且其背鳍充满坚硬的背刺，当受到应激刺激后，背刺竖立进行攻击，导致鲜活石斑鱼运输密度受限、应激作用造成表皮受损，诱发抗病能力减弱、存活率低、同时也会造成鱼体内血清皮质醇激素的升高，往往造成极大的经济损失。
提高水产品的保活运输存活率能够提高活鱼的经济价值。因此，研究高密度活鱼的保活运输方案很有必要。
发明内容
本发明的目的是针对现有的海水石斑鱼运输保活方法存在的问题，提出一种石斑鱼低温驯化结合CO2麻醉的高密度保活方法。
为实现上述目的，本发明提供了如下方案：
技术方案一：一种海水石斑鱼高密度保活方法，包括以下步骤：
(1)暂养：将石斑鱼放入暂养池暂养；
(2)低温驯化：将暂养后的石斑鱼梯度降温，进行低温驯化；
(3)麻醉：将低温驯化后的石斑鱼进行二氧化碳麻醉；
(4)高密度保活：麻醉后，调整鱼水质量比，进行高密度保活。
进一步地，步骤(1)中所述暂养的时间为24-48h。
进一步地，步骤(2)中所述梯度降温为：当水温高于20℃，每小时降温3-4℃；当水温在16-20℃时，每小时降温2-3℃；当水温低于16℃时，每小时降温1-2℃，使最终温度维持在15-16℃。
进一步地，步骤(3)中所述麻醉为：按体积比计，向水中通入CO2:O2＝1:1的混合气体。
进一步地，所述混合气体通入时间为15-30s，直至水中CO2浓度达到60-70mg/L。
进一步地，步骤(4)中所述鱼水质量比为1:1.7-3.3。
进一步地，步骤(4)中所述高密度保活包括：(1)向水中充氧至溶解氧含量为7-9mg/L；(2)保持水温在15-16℃；(3)每间隔24h抽出总体积1/2的水，再加入同温同体积的水。
进一步地，步骤(2)中所述保持水温的方法为：当水温低于15℃，加热至15-16℃；当温度高于16℃，降温至15-16℃。
本发明公开了以下技术效果：
本发明采用二氧化碳进行麻醉保活后水产品无休药期，并且二氧化碳麻醉成本低，有效提高了鲜活水产品的经济效益。二氧化碳麻醉处理后的水产品，可降低呼吸频率、耗氧量；同时新陈代谢活力减弱，鱼体的活动减少，可防止鱼类在容器中激烈游动而造成伤害。
本发明将暂养后的活鱼进行程序降温，降温到15-16℃，达到低温驯化目的，再将低温驯化的石斑鱼进行CO2麻醉，在水温15-16℃下，进行高密度保活。先进行低温驯化再复合CO2麻醉操作处理，一方面能够有效的消除鱼类从暂养状态直接转移到麻醉溶液时，产生的强烈的应激反应，降低血清皮质醇的含量；另一方面可以最大限度的提高保活密度、延长保活时间、降低保活运输成本、提高经济效益，本发明的保活方案存活率高达90％以上。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1为各实施例和对比例石斑鱼保活72h存活率变化；
图2为实施例3和对比例1保活过程中石斑鱼血清皮质醇含量变化；
图3为实施例3和对比例1保活过程中石斑鱼血清溶菌酶活性变化；
图4为实施例3和对比例1保活过程中石斑鱼谷丙转氨酶活性变化；
图5为实施例3和对比例1保活过程中石斑鱼血清谷草转氨酶活性变化。
具体实施方式
现详细说明本发明的多种示例性实施方式，该详细说明不应认为是对本发明的限制，而应理解为是对本发明的某些方面、特性和实施方案的更详细的描述。
应理解本发明中所述的术语仅仅是为描述特别的实施方式，并非用于限制本发明。另外，对于本发明中的数值范围，应理解为还具体公开了该范围的上限和下限之间的每个中间值。在任何陈述值或陈述范围内的中间值以及任何其他陈述值或在所述范围内的中间值之间的每个较小的范围也包括在本发明内。这些较小范围的上限和下限可独立地包括或排除在范围内。
除非另有说明，否则本文使用的所有技术和科学术语具有本发明所述领域的常规技术人员通常理解的相同含义。虽然本发明仅描述了优选的方法和材料，但是在本发明的实施或测试中也可以使用与本文所述相似或等同的任何方法和材料。本说明书中提到的所有文献通过引用并入，用以公开和描述与所述文献相关的方法和/或材料。在与任何并入的文献冲突时，以本说明书的内容为准。
关于本文中所使用的“包含”、“包括”、“具有”、“含有”等等，均为开放性的用语，即意指包含但不限于。
本发明基于安全、环保、无残留的理念，将海水石斑鱼进行高密度保活，通过低温结合CO2麻醉作用，可操作性强。为使本发明实现的操作流程易于明白直观，下面结合具体实施例对本发明进行具体说明：
统计存活率：观察72h高密度保活的石斑鱼鱼鳃是否出现张合现象，如无张合现象，刺激鱼体无反应且鳃盖张开，判定为已经死亡，结束保活。统计存活率的公式为：存活率＝(S1-S2)/S1×100％，其中，S1为初始活鱼条数，S2为死亡数量。
实施例1
一种海水石斑鱼高密度保活方法，其过程如下：
(1)暂养：选取体型无外伤，生命力旺盛，大小均匀的石斑鱼(700±50g/尾)，平均长度35.00±5.00cm，在暂养池(90×45×30cm)中进行暂养，暂养温度26℃，时间24h，暂养池配备循环系统、加热系统、充氧系统；
(2)低温驯化：将暂养后的海水石斑鱼进行程序降温，水温26℃，每小时降温3℃，使温度降到20℃；待温度降到20℃时，每小时降温2℃，使温度降到16℃；待温度降到16℃时，每小时降温1℃，使温度降到15℃，并使温度维持在15℃；
(3)麻醉：在海水中通入按体积比计，CO2:O2为1:1的混合气体20s，使CO2浓度达到60-70mg/L，将低温驯化后的海水石斑鱼进行麻醉；
(4)高密度保活：当鱼进入麻醉状态后，调整鱼水质量比为1:3.3，在水温15℃下，进行保活；
(5)统计存活率。
实施例2
一种海水石斑鱼高密度保活方法，其过程如下：
(1)暂养：选取体型无外伤，生命力旺盛，大小均匀的石斑鱼(700±50g/尾)，平均长度35.00±5.00cm，在暂养池(90×45×30cm)中进行暂养，暂养温度26℃，时间24h，暂养池配备循环系统、加热系统、充氧系统；
(2)低温驯化：将暂养后的海水石斑鱼进行程序降温，水温26℃，每小时降温3℃，使温度降到20℃；待温度降到20℃时，每小时降温2℃，使温度降到16℃；待温度降到16℃时，每小时降温1℃，使温度降到15℃，并使温度维持在15℃；
(3)麻醉：在海水中通入按体积比计，CO2:O2为1:1的混合气体20s，使CO2浓度达到60-70mg/L，将低温驯化后的海水石斑鱼进行麻醉；
(4)高密度保活：当鱼进入麻醉状态后，调整鱼水质量比为1:2.5，在水温15℃下，进行保活；
(5)统计存活率。
实施例3
一种海水石斑鱼高密度保活方法，其过程如下：
(1)暂养：选取体型无外伤，生命力旺盛，大小均匀的石斑鱼(700±50g/尾)，平均长度35.00±5.00cm，在暂养池(90×45×30cm)中进行暂养，暂养温度26℃，时间24h，暂养池配备循环系统、加热系统、充氧系统；
(2)低温驯化：将暂养后的海水石斑鱼进行程序降温，水温26℃，每小时降温3℃，使温度降到20℃；待温度降到20℃时，每小时降温2℃，使温度降到16℃；待温度降到16℃时，每小时降温1℃，使温度降到15℃，并使温度维持在15℃；
(3)麻醉：在海水中通入按体积比计，CO2:O2为1:1的混合气体20s，使CO2浓度达到60-70mg/L，将低温驯化后的海水石斑鱼进行麻醉；
(4)高密度保活：当鱼进入麻醉状态后，调整鱼水质量比为1:1.7，在水温15℃下，进行保活；
(5)统计存活率。
实施例4
一种海水石斑鱼高密度保活方法，其过程如下：
(1)暂养：选取体型无外伤，生命力旺盛，大小均匀的石斑鱼(700±50g/尾)，平均长度35.00±5.00cm，在暂养池(90×45×30cm)中进行暂养，暂养温度26℃，时间24h，暂养池配备循环系统、加热系统、充氧系统；
(2)低温驯化：将暂养后的海水石斑鱼进行程序降温，水温26℃，每小时降温3℃，使温度降到20℃；待温度降到20℃时，每小时降温2℃，使温度降到16℃；待温度降到16℃时，每小时降温1℃，使温度降到15℃，并使温度维持在15℃；
(3)麻醉：在海水中通入按体积比计，CO2:O2为1:1的混合气体20s，使CO2浓度达到60-70mg/L，将低温驯化后的海水石斑鱼进行麻醉；
(4)高密度保活：高鱼水质量比保活：当鱼进入麻醉状态后，调整鱼水质量比为1:1.5，在水温15℃下，进行保活；
(5)统计存活率。
对比例1
与实施例3相比，先进行CO2麻醉后，再进行低温驯化，其余操作与实施例3相同，具体如下：
(1)暂养：选取体型无外伤，生命力旺盛，大小均匀的石斑鱼(700±50g/尾)，平均长度35.00±5.00cm，在暂养池(90×45×30cm)中进行暂养，暂养温度26℃，时间24h，暂养池配备循环系统、加热系统、充氧系统；
(2)麻醉：在海水中通入按体积比计，CO2:O2为1:1的混合气体20s，使CO2浓度达到60-70mg/L，将低温驯化后的海水石斑鱼进行麻醉；
(3)低温驯化：将暂养后的海水石斑鱼进行程序降温，水温26℃，每小时降温3℃，使温度降到20℃；待温度降到20℃时，每小时降温2℃，使温度降到16℃；待温度降到16℃时，每小时降温1℃，使温度降到15℃，并使温度维持在15℃；
(4)高密度保活：当鱼进入麻醉状态后，调整鱼水质量比为1:2.0，在水温15℃下，进行保活；
(5)统计存活率。
图1是统计计算各组实施例与对比例石斑鱼保活72h存活率变化：存活率的多少决定石斑鱼的经济价值的高低，由图1可知，实施例1、2、3低温驯化后进行麻醉的石斑鱼的72h存活率均达90％以上，而对比例1中的72h存活率的尚未达到70％。使用本发明可以有效的提高石斑鱼高密度保活的存活率。实施例4中的存活率低的原因是石斑鱼的保活密度过大，导致竞争增加，生存环境变差。
图2是测定实施例3和对比例1保活过程中石斑鱼血清皮质醇含量变化：在保活过程中，皮质醇浓度可以反应出石斑鱼应激反应的高低，皮质醇的分泌能释放氨基酸、葡萄糖以及脂肪酸，这些被输送入血液里充当能量使用，增加机体获得生存的机会，皮质醇激素一般不被贮存，将直接进人血液，因此血浆皮质醇水平常可作为衡量鱼所受应激性强度的指标，鱼受到的刺激越强，血液中皮质醇的含量就越高。由图2可知，使用本发明的先低温驯化再麻醉保活的方法，血清皮质醇含量实施例3的低于对比例1，使用本发明可以有效的降低石斑鱼高密度保活过程中的应激反应。
图3是测定实施例3和对比例1保活过程中石斑鱼血清溶菌酶活性变化：溶菌酶是水生动物血淋巴细胞酶系统中的重要组成部分，广泛存在于鱼体的黏液、血清和某些淋巴组织中，是衡量机体非特异性免疫状态的指标之一。当机体受到胁迫刺激时，导非特异性免疫系统会遭到破坏，特异性免疫功能下降且无法恢复正常。实施例3中的溶菌酶活性增加趋势相对于对比例1增加缓慢，且活性低，在48h出现下降的趋势，而对比例1中的溶菌酶的活性持续增加。使用本发明可以有效的降低石斑鱼高密度保活过程中的应激反应。
图4和图5是测定实施例3和对比例1保活过程中石斑鱼血清中谷丙转氨酶和谷草转氨酶活性的变化：谷丙转氨酶和谷草转氨酶多存在于心肌细胞和肝脏细胞，正常情况下谷丙转氨酶和谷草转氨酶的活性均处于较低且稳定的水平，是反应心肌细胞和肝脏健康状况的重要指标。随着保活时间的延长，谷丙转氨酶和谷草转氨酶的活性均不断增加，两种酶含量增加可能是由于饥饿胁迫作用产生了应激反应，肝脏发生损伤导致细胞膜通透性增加，谷丙转氨酶和谷草转氨酶渗入血清中，从而导致血清中这两种酶的活性增强。且对比例1的谷丙转氨酶和谷草转氨酶活力高于实施例3，可能是高密度和低温共同胁迫作用，说明CO2麻醉保活能在一定程度上有效减弱低温胁迫的影响。
经本发明方法处理后，可以有效的降低石斑鱼保活过程中的血清皮质醇含量，溶菌酶、谷丙转氨酶和谷草转氨的活性，减少石斑鱼保活过程中的应激反应。本发明保活后的存活率高，并且CO2溶液比较容易获得，可以显著提高经济效益。
在不背离本发明的范围或精神的情况下，可对本发明说明书的具体实施方式做多种改进和变化，这对本领域技术人员而言是显而易见的。由本发明的说明书得到的其他实施方式对技术人员而言是显而易见的。本申请说明书和实施例仅是示例性的。
Claims (2)
1.一种海水石斑鱼高密度保活方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)暂养：将石斑鱼放入暂养池暂养；
(2)低温驯化：将暂养后的石斑鱼梯度降温，进行低温驯化；
(3)麻醉：将低温驯化后的石斑鱼进行二氧化碳麻醉；
(4)高密度保活：麻醉后，调整鱼水质量比，进行高密度保活；
在步骤(3)中，所述麻醉为：按体积比计，向水中通入CO2:O2＝1:1的混合气体；所述混合气体通入时间为20s，直至水中CO2浓度达到60-70mg/L；
在步骤(4)中，所述鱼水质量比为1:3.3；
在步骤(4)中，所述高密度保活包括：(1)向水中充氧至溶解氧含量为7-9mg/L；(2)保持水温在15℃；(3)每间隔24h抽出总体积1/2的水，再加入同温同体积的水；
步骤(1)中所述暂养的时间为24h；
步骤(2)中所述梯度降温为：当水温高于20℃，每小时降温3-4℃；当水温在16-20℃时，每小时降温2-3℃；当水温低于16℃时，每小时降温1-2℃，使最终温度维持在15-16℃。
2.如权利要求1所述的一种海水石斑鱼高密度保活方法，其特征在于，所述保持水温的方法为：当水温低于15℃，加热至15-16℃；当温度高于16℃，降温至15-16℃。
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