CN114705785A - 一种植物油中氯酞酸的检测方法 - Google Patents
一种植物油中氯酞酸的检测方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN114705785A CN114705785A CN202210424479.6A CN202210424479A CN114705785A CN 114705785 A CN114705785 A CN 114705785A CN 202210424479 A CN202210424479 A CN 202210424479A CN 114705785 A CN114705785 A CN 114705785A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- phase
- oil
- vegetable oil
- chlorophthalic acid
- sample
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- BKFXSOCDAQACQM-UHFFFAOYSA-N 3-chlorophthalic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC(Cl)=C1C(O)=O BKFXSOCDAQACQM-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 68
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 36
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 title claims abstract description 32
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 title claims abstract description 32
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 67
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 30
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims abstract description 30
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims abstract description 23
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims abstract description 20
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 16
- 238000000746 purification Methods 0.000 claims abstract description 10
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims abstract description 10
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims abstract description 7
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 claims abstract description 7
- -1 acetonitrile saturated normal hexane Chemical class 0.000 claims abstract description 6
- 239000000523 sample Substances 0.000 claims description 31
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N methanoic acid Natural products OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 16
- 238000001294 liquid chromatography-tandem mass spectrometry Methods 0.000 claims description 15
- 239000011259 mixed solution Substances 0.000 claims description 15
- 239000012086 standard solution Substances 0.000 claims description 11
- USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N Ammonium acetate Chemical compound N.CC(O)=O USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- 239000005695 Ammonium acetate Substances 0.000 claims description 10
- 235000019257 ammonium acetate Nutrition 0.000 claims description 10
- 229940043376 ammonium acetate Drugs 0.000 claims description 10
- 238000005259 measurement Methods 0.000 claims description 10
- 239000012528 membrane Substances 0.000 claims description 9
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 9
- OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 4-(3-methoxyphenyl)aniline Chemical compound COC1=CC=CC(C=2C=CC(N)=CC=2)=C1 OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 claims description 8
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 8
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 claims description 6
- 238000010828 elution Methods 0.000 claims description 6
- 238000002013 hydrophilic interaction chromatography Methods 0.000 claims description 6
- 239000012488 sample solution Substances 0.000 claims description 6
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 6
- HNSDLXPSAYFUHK-UHFFFAOYSA-N 1,4-bis(2-ethylhexyl) sulfosuccinate Chemical compound CCCCC(CC)COC(=O)CC(S(O)(=O)=O)C(=O)OCC(CC)CCCC HNSDLXPSAYFUHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 235000019483 Peanut oil Nutrition 0.000 claims description 4
- 238000004811 liquid chromatography Methods 0.000 claims description 4
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 claims description 4
- 239000000312 peanut oil Substances 0.000 claims description 4
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 claims description 3
- 238000007664 blowing Methods 0.000 claims description 3
- 238000010812 external standard method Methods 0.000 claims description 3
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 3
- 238000002347 injection Methods 0.000 claims description 3
- 239000007924 injection Substances 0.000 claims description 3
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 239000003549 soybean oil Substances 0.000 claims description 3
- 235000012424 soybean oil Nutrition 0.000 claims description 3
- 239000007921 spray Substances 0.000 claims description 3
- 239000003643 water by type Substances 0.000 claims description 3
- 235000019486 Sunflower oil Nutrition 0.000 claims description 2
- 239000000828 canola oil Substances 0.000 claims description 2
- 235000019519 canola oil Nutrition 0.000 claims description 2
- 235000005687 corn oil Nutrition 0.000 claims description 2
- 239000002285 corn oil Substances 0.000 claims description 2
- 235000012343 cottonseed oil Nutrition 0.000 claims description 2
- 239000002385 cottonseed oil Substances 0.000 claims description 2
- 239000000944 linseed oil Substances 0.000 claims description 2
- 235000021388 linseed oil Nutrition 0.000 claims description 2
- 235000019488 nut oil Nutrition 0.000 claims description 2
- 239000010466 nut oil Substances 0.000 claims description 2
- 239000011148 porous material Substances 0.000 claims description 2
- 239000003813 safflower oil Substances 0.000 claims description 2
- 239000008159 sesame oil Substances 0.000 claims description 2
- 235000011803 sesame oil Nutrition 0.000 claims description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims description 2
- 239000002600 sunflower oil Substances 0.000 claims description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 abstract description 6
- 239000012535 impurity Substances 0.000 abstract description 5
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 abstract description 4
- 239000000047 product Substances 0.000 abstract description 4
- 239000000447 pesticide residue Substances 0.000 abstract description 2
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 35
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 16
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 9
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 9
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 7
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 4
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 4
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 4
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 3
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 3
- 239000004009 herbicide Substances 0.000 description 3
- 238000001819 mass spectrum Methods 0.000 description 3
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 2
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 2
- 150000001793 charged compounds Chemical class 0.000 description 2
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 2
- 238000001212 derivatisation Methods 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 2
- 238000004817 gas chromatography Methods 0.000 description 2
- 230000002363 herbicidal effect Effects 0.000 description 2
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 2
- 238000012797 qualification Methods 0.000 description 2
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 2
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 2
- 239000012224 working solution Substances 0.000 description 2
- KZCBXHSWMMIEQU-UHFFFAOYSA-N Chlorthal Chemical compound OC(=O)C1=C(Cl)C(Cl)=C(C(O)=O)C(Cl)=C1Cl KZCBXHSWMMIEQU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 206010074268 Reproductive toxicity Diseases 0.000 description 1
- 239000004809 Teflon Substances 0.000 description 1
- 229920006362 Teflon® Polymers 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 238000012271 agricultural production Methods 0.000 description 1
- 230000004075 alteration Effects 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 1
- 150000007942 carboxylates Chemical class 0.000 description 1
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 1
- 238000005238 degreasing Methods 0.000 description 1
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 1
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 239000003344 environmental pollutant Substances 0.000 description 1
- PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N gold Chemical compound [Au] PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000010931 gold Substances 0.000 description 1
- 229910052737 gold Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000000703 high-speed centrifugation Methods 0.000 description 1
- 230000036210 malignancy Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 238000002414 normal-phase solid-phase extraction Methods 0.000 description 1
- 239000005416 organic matter Substances 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- XDEPVFFKOVDUNO-UHFFFAOYSA-N pentafluorobenzyl bromide Chemical compound FC1=C(F)C(F)=C(CBr)C(F)=C1F XDEPVFFKOVDUNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000575 pesticide Substances 0.000 description 1
- 231100000719 pollutant Toxicity 0.000 description 1
- 238000003908 quality control method Methods 0.000 description 1
- 230000007696 reproductive toxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000372 reproductive toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 210000004872 soft tissue Anatomy 0.000 description 1
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 238000004704 ultra performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 229910021642 ultra pure water Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000012498 ultrapure water Substances 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
- G01N30/04—Preparation or injection of sample to be analysed
- G01N30/06—Preparation
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
- G01N30/04—Preparation or injection of sample to be analysed
- G01N30/06—Preparation
- G01N30/14—Preparation by elimination of some components
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
- G01N30/26—Conditioning of the fluid carrier; Flow patterns
- G01N30/28—Control of physical parameters of the fluid carrier
- G01N30/34—Control of physical parameters of the fluid carrier of fluid composition, e.g. gradient
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
- G01N30/60—Construction of the column
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
- G01N30/62—Detectors specially adapted therefor
- G01N30/72—Mass spectrometers
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A20/00—Water conservation; Efficient water supply; Efficient water use
- Y02A20/20—Controlling water pollution; Waste water treatment
Landscapes
- Physics & Mathematics (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Other Investigation Or Analysis Of Materials By Electrical Means (AREA)
Abstract
本发明属于农药残留检测技术领域,公开了一种植物油中氯酞酸的检测方法。采用水、乙酸和乙腈溶液对样品进行涡旋混合提取,加入氯化钠进行涡旋混匀后离心,最后在所得上层清液中加入乙腈饱和正己烷溶液进行涡旋混合净化,将植物油样品与水、乙酸、乙腈和氯化钠的比例控制在1g:(1~1.5)mL:(0.04~0.06)mL:(4~6)mL:(0.4~0.6)g;上述特定处理方法能够将杂质有效去除且仅保留目标产物。测得氯酞酸的仪器检测限为0.3ng/mL、方法检测限为0.15μg/kg且相关系数R2>0.99,该方法具有快速简便、准确灵敏、环保廉价等特点,对植物油中氯酞酸残留检测具有实际应用及指导意义。
Description
技术领域
本发明属于农药残留检测技术领域,具体涉及一种植物油中氯酞酸的检测方法。
背景技术
除草剂是农业生产中的重要物质,对于杀灭有害杂草以提高农产品产量具有重大意义,其中氯酞酸,化学名四氯对苯二甲酸,是氯代酸性除草剂中的重要一种。虽然氯酞酸具有良好的除草效果,但是由于其水溶性较强,且具有漂移性,容易在水质、环境、土壤、作物以及果实中造成残留污染。此外,研究表明,氯代酸性除草剂具有生殖毒性和引起人类软组织恶性肿瘤等风险。因此,其早在多年前就已经被我国在内的许多国家列入了环境优先监测的污染物黑名单。
2021年9月3日起正式实施的《食品安全国家标准食品中农药最大残留量》(GB2763-2021)标准中新增了氯酞酸在植物油中的临时最大残留限量值为0.01mg/kg。但是截至目前,国内仍尚未有植物油中氯酞酸检测方法的相关标准或者文献报道。当前,针对氯酞酸检测方法的研究较少,仅有的标准和文献报道主要是针对水质中氯酞酸的测定。水质中氯酞酸的测定方法为采用二氯甲烷或固相萃取小柱萃取水质样品中的氯酞酸,经浓缩丙酮复溶后,再采用五氟苄基溴进行衍生化,之后再对衍生物进行过柱净化,再复溶样品,最后采用气相色谱法进行测定。由于氯酞酸具有较强的极性、沸点高且不易挥发,如果采用气相色谱气进行分析,就必须先进行衍生化,衍生化后再进行过柱净化,此处理方法使用了大量的有机溶剂,并且前处理过程复杂、耗时长、成本高,不符合当前倡导的绿色、低碳、环保的主流要求。
因此,亟需建立一种灵敏、准确、便捷的植物油中氯酞酸残留检测方法,填补植物油中氯酞酸残留检测的技术空白点,为我国植物油中氯酞酸残留检测提供有力的技术支撑手段。
发明内容
本发明的目的是为了填补目前植物油中氯酞酸残留检测的技术空白点,而提供了一种新的植物油中氯酞酸的检测方法,该方法步骤简单、有机物用量少、对环境友好且回收率、重复性、灵敏度和检测限均满足当前国家标准(GB2763-2021)规定的氯酞酸临时最大残留限量值的要求。
具体地,本发明提供了一种植物油中氯酞酸的检测方法,其中,该方法包括如下步骤:
S1:样品前处理
取适量植物油样品于离心管中,采用水、乙酸和乙腈的混合溶液进行涡旋混合提取,接着加入氯化钠进行涡旋混匀后再进行离心;取上层清液加入乙腈饱和的正己烷溶液进行涡旋混合净化,静置分层;收集下层清液并于35~45℃下氮吹至干,加入乙腈复溶,最后经0.1~0.3μm滤膜过滤得到待测样品溶液,留待LC-MS/MS检测;其中,所述植物油样品与水、乙酸、乙腈以及氯化钠的比例为1g:(1~1.5)mL:(0.04~0.06)mL:(4~6)mL:(0.4~0.6)g;
S2:配制标准溶液
将氯酞酸标准品用溶剂溶解并配制成具有2~100ng/mL浓度梯度的氯酞酸系列标准溶液;
S3:样品检测
将步骤S2中的氯酞酸系列标准溶液进行LC-MS/MS测定,得到标准工作曲线;将步骤S1中的待测样品溶液进行LC-MS/MS测定,采用外标法定量,将所得检测曲线与标准工作曲线进行比对,得到待测植物油中氯酞酸的含量。
在一种优选的实施方式中,步骤S1中,所述涡旋混合提取的条件为涡旋10~15min;所述涡旋混匀的条件为涡旋30~60s;所述涡旋混合净化的条件为涡旋60~90s。
在一种优选的实施方式中,步骤S1中,所述离心的条件包括离心转速为10000~20000rpm,离心时间为5~10min。
在一种优选的实施方式中,步骤S1中,所述滤膜为有机滤膜,所述滤膜的孔径为0.22μm。
在一种优选的实施方式中,步骤S3中,所述LC-MS/MS测定过程中液相色谱条件包括:色谱柱为Waters BEH HILIC;柱温为35℃;流速为0.30mL/min;进样量为2μL;流动相以含0.02%v/v甲酸的10mmol/L乙酸铵水溶液作为A相且以含乙腈作为B相,采用梯度洗脱且梯度洗脱程序如下:0~0.3min的流动相为3%A相和97%B相的混合溶液,0.3~3.5min的流动相为3%~40%A相和97~60%B相的混合溶液,3.5~4min的流动相为40%~3%A相和60%~97%B相的混合溶液,4~6.5min的流动相为3%A相和97%B相的混合溶液。
在一种优选的实施方式中,步骤S3中,所述LC-MS/MS测定过程中质谱条件包括:采用Dionex Ultimate 3000/TSQ QUANTIVA超高效液相色谱质谱联用仪;离子源为ESI-;离子源电压为2800V;离子传输管温度为350℃;喷针温度为300℃;质谱扫描信息为:定量离子对为258.8/178.8,碰撞能为15V;定性离子对为258.8/176.8,碰撞能为15V。
在一种优选的实施方式中,所述植物油为花生油、红花籽油、芥菜籽油、玉米油、亚麻籽油、麻油、坚果油、棉籽油、大豆油和葵花子油中的至少一种。
本发明的有益效果是:
(1)本发明提供了一种植物油中氯酞酸的检测方法,先采用水、乙酸和乙腈的混合溶液对植物油样品进行涡旋混合提取,再加入氯化钠进行涡旋混匀后进行高速离心,最后在所得上层清液中加入乙腈饱和的正己烷溶液进行涡旋混合净化,并且在样品前处理过程中将植物油样品与水、乙酸、乙腈以及氯化钠的比例控制在1g:(1~1.5)mL:(0.04~0.06)mL:(4~6)mL:(0.4~0.6)g;通过上述特定的样品前处理方式,能够将样品中影响测试结果的杂质有效去除,同时仅保留目标产物。通过本发明所提供的检测方法,测得氯酞酸的仪器检测限为0.3ng/mL,氯酞酸的方法检测限为0.15μg/kg;并且氯酞酸标准品在2~100ng/mL工作曲线范围内的相关系数R2>0.99,具有良好的线性关系,有利于定性定量测定,易于推广使用。
(2)氯酞酸为二羧酸化合物,其在ESI负模式下产生质荷比为302.8的分子离子峰信号很弱,由于氯酞酸还会形成失去羧酸根的258.8的准分子离子,其分子离子峰信号比302.8的分子离子峰要强。因此,本发明优选采用258.8作为氯酞酸的母离子,能够显著提高氯酞酸的灵敏度。
(3)本发明采用液相色谱串联质谱法对氯酞酸进行测定,植物油样品则无需进行衍生化处理,简化了样品前处理实验步骤,同时在样品前处理过程中避免使用二氯甲烷等大量有机溶剂,提高了实验人员的人身安全性和实现了环境保护。
(4)本发明优选采用HILIC亲水色谱柱对氯酞酸进行分析,能够大大提高其保留时间,克服了常规C18色谱柱对氯酞酸不保留、与基质共流出以及干扰氯酞酸测定的缺点。
(5)本发明在进行液相色谱分离过程中,在10mmol/L乙酸铵水溶液中添加了体积比0.02%v/v的甲酸作为A相,测试所得的峰形对称且峰窄,不仅能够改善目标物的峰形,同时还能提高目标物在色谱柱中的保留,能够更好的与其他杂质峰进行区分开,提高了定量和定性的准确性和灵敏性。
(6)由于氯酞酸的极性较强,几乎不溶于正己烷,因此在样品前处理的净化过程中,采用乙腈饱和的正己烷对样液进行有效的除脂除杂净化,同时不会造成目标物的损失,提高了实验过程的回收率。
附图说明
图1为氯酞酸标准样品的标准曲线图;
图2(a)为2ng/mL氯酞酸的提取离子流图;(b)为2ng/mL氯酞酸的质谱图;
图3(a)为色谱柱为C18色谱柱的氯酞酸保留效果图;(b)为色谱柱为HILIC色谱柱的氯酞酸保留效果图;
图4(a)为流动相A相为10mmol/L乙酸铵水溶液的总离子流图(TIC);(b)为在流动相A相为10mmol/L乙酸铵水溶液中添加0.02%甲酸的总离子流图(TIC)。
具体实施方式
以下将通过实施例对本发明进行详细描述。
(1)本发明实施例和对比例中所涉及到的试剂药品如下:
氯酞酸标准品(纯度99.5%,BePure);乙腈、正己烷(色谱纯,瑞典欧普森);甲酸(质谱级,美国ACS化学试剂);乙酸铵(色谱纯,德国Sigma公司);乙酸(≥99.8%,国药集团化学试剂有限公司);氯化钠(优级纯,西陇科学);水(符合GB/T6682-2008规定的一级水)。
(2)本发明实施例和对比例中所涉及到的实验仪器如下:
Dionex Ultimate 3000/TSQ QUANTIVA超高效液相色谱质谱联用仪(美国Thermo公司);MTV-100多管旋涡混匀仪(北京金洋万达科技有限公司);IKA MS3 Digital数显型旋涡混匀器(厦门锐思捷科学仪器有限公司);柯瑞峰超纯水系统(四川德立世科技有限公司);GL-20C-II高速冷冻离心机(上海安亭科学仪器厂);KQ-600DE型数控超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司);0.22μm聚四氟乙烯针头式过滤器(天津津腾)。
实施例1
S1:样品前处理
称取5g植物油样品(精确至0.01g)于50mL离心管中,分别加入5mL水、0.2mL乙酸和20mL乙腈溶液后进行涡旋混合提取10min,接着加入2g氯化钠进行涡旋混匀30s后,在转速为10000rpm下离心5min,静置分层;取上清液8mL,加入5mL乙腈饱和的正己烷涡旋混合净化1min,静置分层后,弃去上层正己烷层,并收集下层清液并于45℃下进行水浴氮吹至干,加入1mL乙腈进行复溶混匀,最后经0.22μm有机微孔滤膜过滤获得待测样品溶液。
S2:配制标准溶液
(1)配制标准品:将氯酞酸标准品用甲醇溶解配制成1.0mg/mL的标准储备溶液,将所得标准储备溶液用乙腈稀释成浓度为1.0μg/mL标准工作溶液;
(2)配制标准溶液:分别取步骤(1)中的标准工作溶液20、50、100、200、500和1000μL于10mL容量瓶中,采用乙腈进行定容,得到浓度梯度为2ng/mL、5ng/mL、10ng/mL、20ng/mL、50ng/mL、和100ng/mL的氯酞酸系列标准溶液。
S3:样品检测
将步骤S2中的氯酞酸系列标准溶液进行LC-MS/MS测定,得到标准工作曲线;将步骤S1中的待测样品溶液进行LC-MS/MS测定,采用外标法定量,将所得检测曲线与标准工作曲线进行比对,得到待测植物油中氯酞酸的含量。
LC-MS/MS检测过程中,液相色谱条件包括:色谱柱为Waters BEH HILIC;柱温为35℃;流速为0.30mL/min;进样量为2μL;流动相以含0.02%v/v甲酸的10mmol/L乙酸铵水溶液作为A相且以含乙腈作为B相,采用梯度洗脱且梯度洗脱程序如下:0~0.3min的流动相为3%A相和97%B相的混合溶液,0.3~3.5min的流动相为3%~40%A相和97~60%B相的混合溶液,3.5~4min的流动相为40%~3%A相和60%~97%B相的混合溶液,4~6.5min的流动相为3%A相和97%B相的混合溶液。
LC-MS/MS检测过程中,质谱条件包括:采用Dionex Ultimate 3000/TSQ QUANTIVA超高效液相色谱质谱联用仪;离子源为ESI-;离子源电压为2800V;离子传输管温度为350℃;喷针温度为300℃;质谱扫描信息为:定量离子对为258.8/178.8,碰撞能为15V;定性离子对为258.8/176.8,碰撞能为15V。
选择10倍信噪比时对应的浓度作为该目标物的检测限,氯酞酸标准曲线相关系数所得结果见表1和图1,以及2ng/mL氯酞酸在上述检测条件下的提取离子流图和质谱图的测试结果见图2。本发明所提供的检测方法对氯酞酸的仪器检测限为0.3ng/mL,对氯酞酸的方法检测限为0.15μg/kg,由此可以说明本检测方法灵敏度高,检测限均满足当前国家标准(GB 2763-2021)规定的氯酞酸临时最大残留限量值的要求(0.01mg/kg),能够满足植物油中氯酞酸残留的检测需求。
表1
对比例1~2
对比例1:与实施例1不同的是,在样品检测时,液相色谱柱选择C18色谱柱,其余条件均与实施例1相同,所得测试结果对比图如图3所示。从图3对比图可知,本发明采用HILIC亲水色谱柱对氯酞酸进行分析,能够大大提高其的保留时间(保留时间为3.90min),克服了常规C18色谱柱对氯酞酸不保留(保留时间仅为0.89min)、与基质共流出以及干扰氯酞酸测定的缺点。
对比例2:与实施例1不同的是,在样品检测时,选择不添加0.02%v/v的甲酸的10mmol/L乙酸铵水溶液作为A相(也即直接以10mmol/L乙酸铵水溶液作为A相),其余条件均与实施例1相同,所得测试结果对比图如图4所示。从图4对比图可知,本发明在进行样品检测时,在10mmol/L乙酸铵水溶液中添加了体积比0.02%v/v的甲酸,测试所得的峰形对称且峰窄,不仅能够改善目标物的峰形,同时还能提高目标物在色谱柱中的保留,能够更好的与其他杂质峰进行区分开,提高了定量和定性的准确性和灵敏性。
测试例
以市售的花生油和大豆油作为测试对象,采用阴性样品分别加标2.5μg/kg、5μg/kg和10μg/kg的氯酞酸标准溶液,同时做平行试验(n=6),测定回收率及RSD见表2。从表2实验数据结果显示,在三个加标浓度条件下氯酞酸的回收率在74.0%~91.7%,相对标准偏差RSD(n=6)在3.8%~6.7%。上述测定结果符合GB/T27404-2008《实验室质量控制规范食品理化检测》的要求。
表2
应用本发明所提供的植物油中氯酞酸的检测方法,对50个批次的市售植物油进行检测,结果显示有1个批次的花生油样品中检出氯酞酸,含量为0.4μg/kg,远低于GB 2763-2021中规定的临时最大残留限量值0.01mg/kg。
尽管上面已经示出和描述了本发明的实施例,可以理解的是,上述实施例是示例性的,不能理解为对本发明的限制,本领域的普通技术人员在不脱离本发明的原理和宗旨的情况下在本发明的范围内可以对上述实施例进行变化、修改、替换和变型。
Claims (7)
1.一种植物油中氯酞酸的检测方法,其特征在于,该方法包括如下步骤:
S1:样品前处理
取适量植物油样品于离心管中,采用水、乙酸和乙腈的混合溶液进行涡旋混合提取,接着加入氯化钠进行涡旋混匀后再进行离心;取上层清液加入乙腈饱和的正己烷溶液进行涡旋混合净化,静置分层;收集下层清液并于35~45℃下氮吹至干,加入乙腈复溶,最后经0.1~0.3μm滤膜过滤得到待测样品溶液,留待LC-MS/MS检测;其中,所述植物油样品与水、乙酸、乙腈以及氯化钠的比例为1g:(1~1.5)mL:(0.04~0.06)mL:(4~6)mL:(0.4~0.6)g;
S2:配制标准溶液
将氯酞酸标准品用溶剂溶解并配制成具有2~100ng/mL浓度梯度的氯酞酸系列标准溶液;
S3:样品检测
将步骤S2中的氯酞酸系列标准溶液进行LC-MS/MS测定,得到标准工作曲线;将步骤S1中的待测样品溶液进行LC-MS/MS测定,采用外标法定量,将所得检测曲线与标准工作曲线进行比对,得到待测植物油中氯酞酸的含量。
2.根据权利要求1所述的植物油中氯酞酸的检测方法,其特征在于,步骤S1中,所述涡旋混合提取的条件为涡旋10~15min;所述涡旋混匀的条件为涡旋30~60s;所述涡旋混合净化的条件为涡旋60~90s。
3.根据权利要求1所述的植物油中氯酞酸的检测方法,其特征在于,步骤S1中,所述离心的条件包括离心转速为10000~20000rpm,离心时间为5~10min。
4.根据权利要求1所述的植物油中氯酞酸的检测方法,其特征在于,步骤S1中,所述滤膜为有机滤膜,所述滤膜的孔径为0.22μm。
5.根据权利要求1所述的植物油中氯酞酸的检测方法,其特征在于,步骤S3中,所述LC-MS/MS测定过程中液相色谱条件包括:色谱柱为Waters BEH HILIC;柱温为35℃;流速为0.30mL/min;进样量为2μL;流动相以含0.02%v/v甲酸的10mmol/L乙酸铵水溶液作为A相且以含乙腈作为B相,采用梯度洗脱且梯度洗脱程序如下:0~0.3min的流动相为3%A相和97%B相的混合溶液,0.3~3.5min的流动相为3%~40%A相和97~60%B相的混合溶液,3.5~4min的流动相为40%~3%A相和60%~97%B相的混合溶液,4~6.5min的流动相为3%A相和97%B相的混合溶液。
6.根据权利要求1所述的植物油中氯酞酸的检测方法,其特征在于,步骤S3中,所述LC-MS/MS测定过程中质谱条件包括:采用Dionex Ultimate 3000/TSQ QUANTIVA超高效液相色谱质谱联用仪;离子源为ESI-;离子源电压为2800V;离子传输管温度为350℃;喷针温度为300℃;质谱扫描信息为:定量离子对为258.8/178.8,碰撞能为15V;定性离子对为258.8/176.8,碰撞能为15V。
7.根据权利要求1所述的植物油中氯酞酸的检测方法,其特征在于,所述植物油为花生油、红花籽油、芥菜籽油、玉米油、亚麻籽油、麻油、坚果油、棉籽油、大豆油和葵花子油中的至少一种。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN202210424479.6A CN114705785B (zh) | 2022-04-21 | 2022-04-21 | 一种植物油中氯酞酸的检测方法 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN202210424479.6A CN114705785B (zh) | 2022-04-21 | 2022-04-21 | 一种植物油中氯酞酸的检测方法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN114705785A true CN114705785A (zh) | 2022-07-05 |
CN114705785B CN114705785B (zh) | 2023-11-07 |
Family
ID=82174966
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN202210424479.6A Active CN114705785B (zh) | 2022-04-21 | 2022-04-21 | 一种植物油中氯酞酸的检测方法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN114705785B (zh) |
Citations (8)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH1067602A (ja) * | 1996-08-23 | 1998-03-10 | Daicel Chem Ind Ltd | 農薬用効力増強剤及び農薬組成物 |
CN1824638A (zh) * | 2006-03-31 | 2006-08-30 | 山东神工化工股份有限公司 | 一种4-氯邻苯二甲酸.单钠盐的生产方法 |
CN101852698A (zh) * | 2009-04-02 | 2010-10-06 | 天津市农业科学院中心实验室 | 中药材农药残留样品测定前的处理方法 |
WO2013169537A1 (en) * | 2012-05-08 | 2013-11-14 | Dow Corning Corporation | Purification of chlorosilanes using chromatography |
CN107045023A (zh) * | 2017-03-16 | 2017-08-15 | 贵州出入境检验检疫局检验检疫综合技术中心 | 一种同时测定烟草中常用除草剂残留量的方法 |
WO2018213596A1 (en) * | 2017-05-17 | 2018-11-22 | Spogen Biotech Inc. | Devices, systems, and methods for agrochemical detection and agrochemical compositions |
SG11201903145TA (en) * | 2016-11-03 | 2019-05-30 | Hanmi Pharmaceutical Co Ltd | Pharmaceutical complex formulation comprising amlodipine, losartan and chlorthalidone |
US20210223219A1 (en) * | 2018-04-16 | 2021-07-22 | Chinese Academy Of Inspection And Quarantine | Electronic id database and detection method for pesticide compound in edible agro-products based on lc-q-orbitrap |
-
2022
- 2022-04-21 CN CN202210424479.6A patent/CN114705785B/zh active Active
Patent Citations (8)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH1067602A (ja) * | 1996-08-23 | 1998-03-10 | Daicel Chem Ind Ltd | 農薬用効力増強剤及び農薬組成物 |
CN1824638A (zh) * | 2006-03-31 | 2006-08-30 | 山东神工化工股份有限公司 | 一种4-氯邻苯二甲酸.单钠盐的生产方法 |
CN101852698A (zh) * | 2009-04-02 | 2010-10-06 | 天津市农业科学院中心实验室 | 中药材农药残留样品测定前的处理方法 |
WO2013169537A1 (en) * | 2012-05-08 | 2013-11-14 | Dow Corning Corporation | Purification of chlorosilanes using chromatography |
SG11201903145TA (en) * | 2016-11-03 | 2019-05-30 | Hanmi Pharmaceutical Co Ltd | Pharmaceutical complex formulation comprising amlodipine, losartan and chlorthalidone |
CN107045023A (zh) * | 2017-03-16 | 2017-08-15 | 贵州出入境检验检疫局检验检疫综合技术中心 | 一种同时测定烟草中常用除草剂残留量的方法 |
WO2018213596A1 (en) * | 2017-05-17 | 2018-11-22 | Spogen Biotech Inc. | Devices, systems, and methods for agrochemical detection and agrochemical compositions |
US20210223219A1 (en) * | 2018-04-16 | 2021-07-22 | Chinese Academy Of Inspection And Quarantine | Electronic id database and detection method for pesticide compound in edible agro-products based on lc-q-orbitrap |
Non-Patent Citations (5)
Title |
---|
ABUBAKAR LAWAL ET AL: "Chemometrics approach to QuECHERS-dSPE for multi-standard determination of pesticides in blank samples of Milli-Q-water using high-performance liquid chromatography-Tandem Mass Spectrometry(LC-MS/MS)", 《CHEMSEARCH JOURNAL 》 * |
J. S. CHOI ET AL: "Effect of temperature,moisture,and soil texture on DCPA degradation", 《AGRONOMY JOURNAL》 * |
兰红梅 等: "HPLC 法快速监测5- 羟基间苯二甲酸反应液", 《山东化工》, no. 10 * |
温新民, 彭延庆, 陈卫东: "四氟邻苯二甲酸的合成工艺改进", 中国药物化学杂志, no. 01 * |
高亚娟 等: "化工园区生化出水氯代烃污染物的臭氧氧化降解", 《化工环保》, vol. 39, no. 6 * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN114705785B (zh) | 2023-11-07 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Yang et al. | Solid-phase microextraction with on-fiber silylation for simultaneous determinations of endocrine disrupting chemicals and steroid hormones by gas chromatography–mass spectrometry | |
Quilliam | Chemical methods for domoic acid, the amnesic shellfish poisoning (ASP) toxin | |
CN105784894B (zh) | 一种用于中药的农药残留检测方法 | |
Vartiainen et al. | The determination of traces of fluoroacetic acid by extractive alkylation, pentafluorobenzylation and capillary gas chromatography-mass spectrometry | |
CN113325119B (zh) | 一种农药残留样品前处理浓缩方法 | |
Oertel et al. | Determination of scopolamine in human serum by gas chromatography-ion trap tandem mass spectrometry | |
CN113030362A (zh) | 一种分散液液微萃取结合气相色谱法同时测定植物油中多种有机磷的方法 | |
CN114705785A (zh) | 一种植物油中氯酞酸的检测方法 | |
CN115372493A (zh) | 一种检测中药中24种农药残留量的方法及应用 | |
CN109187780B (zh) | 一种复方益母颗粒的检测方法 | |
CN112098566A (zh) | 一种检测大蒜中苯醚甲环唑、嘧菌酯的方法 | |
CN108982684B (zh) | 一种检测和鉴别石格菜的方法 | |
CN114910588B (zh) | 一种茶叶中茅草枯、草芽畏、戊硝酚、消螨酚和毒菌酚的同步检测方法 | |
CN113640401B (zh) | 一种土壤中马兜铃酸的检测方法 | |
CN110927314A (zh) | 一种新精神活性物质5,6-mdai的检测方法 | |
KR100439737B1 (ko) | 미량 산성농약의 동시 검출법 | |
CN113640415B (zh) | 一种检测松露子实体中α-雄烷醇含量的方法 | |
LU502638B1 (en) | METHOD FOR RAPID ANALYSIS OF TRACE AMOUNTS OF ß-RECEPTOR BLOCKERS IN ENVIRONMENTAL SEDIMENT | |
CN112816578B (zh) | 一种含氨基小分子蘑菇毒素的检测方法以及一种试剂盒 | |
CN113933443B (zh) | 一种蔬菜或水果中啶虫脒原位快速检测方法 | |
CN113671064B (zh) | 一种定量分析血浆中氨来占诺的血药浓度的检测方法 | |
CN114778746B (zh) | 液相色谱串联质谱法检测血液中9种生物碱的方法和应用 | |
KR20030078097A (ko) | 수질 시료 중에 잔류하는 글리포세이트, 엔도탈,클로람벤의 동시 검출법 | |
CN109633071B (zh) | 一种利用uplc-ms/ms法检测水中噻森铜的方法 | |
CN110794062B (zh) | 一种蔬菜中环氧虫啶和氟吡呋喃酮残留的检测方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PB01 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
GR01 | Patent grant | ||
GR01 | Patent grant |