CN114699484B - 一种外用生肤油在制备防治痔疮药物中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明涉及药物新适应症技术领域，具体公开了一种外用生肤油在制备防治痔疮药物中的应用。本发明的外用生肤油，由以下重量份配比的原材料制备而成：黄芩10‑50重量份、黄连10‑50重量份、黄柏10‑50重量份、大黄10‑50重量份、黄芪10‑30重量份、当归10‑30重量份、地榆10‑30重量份、乳香10‑30重量份、没药10‑30重量份、白芨10‑30重量份、地黄10‑30重量份、白芷10‑30重量份、白薇10‑30重量份、冰片3‑8重量份、食用植物油1000‑1500重量份和乳膏剂基质200‑500重量份。研究结果表明经肛门给予本发明制备的生肤油之治疗性使用后能有效发挥其清热通腑、清热凉血、益气活血、祛腐生肌之作用，能快速解除气滞血瘀型或脾虚气陷型导致的痔疮之疾苦。

Description

一种外用生肤油在制备防治痔疮药物中的应用

技术领域

本发明涉及药物新适应症技术领域，具体涉及一种外用生肤油在制备防治痔疮药物中的应用。

背景技术

痔疮是临床上一种最常见的直肠下端的肛垫出现了病理性肥大的肛门疾病。任何年龄都可发病，但随着年龄增长，发病率逐渐增高。据报道，我国肛肠疾病的发病率高达59％，其中痔疮就占了87％。另外，调查显示，女性痔疮的发病率为67％，男性为53.9％。根据发生部位的不同，痔可分为内痔(肛管血管垫的支持结构、血管丛及动静脉吻合支发生的病理性改变或移位)、外痔(齿状线远侧皮下血管丛的病理性扩张或血栓形成)和混合痔。痔疮的具体发病机制尚未完全明确，可能是由“便秘”、“腹泻”、“排便时用力过猛”、“久坐不动”等不良因素引起肛管血管垫的主要结构静脉丛曲张或肛管血管垫的下移所致。主要表现为间歇性便后出鲜血和脱出，或伴有排便困难、疼痛等症状。发病期间，不治或治疗不当，细菌容易侵入齿状线的凹陷处形成感染，进而化脓形成瘘管，导致肛瘘。

痔疮表现多样，包括疼痛、出血、脱出等，每位患者的表现不同，发生程度也不同。痔疮轻者，常因当痔疮发炎、肿胀等，会导致疼痛；出血以便时出血为主，便后出血少，血液通常随大便一起排出，给人的正常生活带来不便；重者往往是痔疮发展到一定程度时，可能脱出肛外，严重时候打喷嚏或走路，都可能会导致痔疮脱出，或是便血日久，可致不同程度的贫血，甚至出血性休克，危及生命；当然痔疮坏死、感染严重时，可经过血液系统引起全身感染，后果严重，危及生命健康。因此，患了痔疮，要积极应对。

中医认为痔的发生多与风、湿、燥、热、虚有关，有虚证、实证之分。虚证多见长期便秘难解、久患肠疾、或妊娠日久，久坐、负重而气血运行不畅，气机阻滞致使肛部气凝血瘀，气随血失，中气下陷，无力托承筋脉而下坠，进而发为痔疮。实证多为外感六淫或饮食不节，如受风、湿、燥、热等外邪，下迫大肠，邪气与气血在体内搏结于筋肉脉络，结滞不散而形成痔疮。基于痔疮的虚实之病因，其可分别辨证为风伤肠络型、湿热下注型、气滞血瘀型、脾虚气陷型等，并分别处以清热通腑、清热凉血、益气活血、补中升陷之内治方药，同时配以熏洗、敷药、塞药(九华膏、五倍子散、黄连膏、XXX痔疮膏、消痔膏等)等中医外治。

无论是西医，还是中医，当前痔疮疗法可分为保守治疗、门诊手术治疗和住院外科手术治疗等多种选项。如果是针对患有低程度内痔疾病的患者，一般会采用内科保守治疗模式。其保守治疗方案包括饮食干预(如增加纤维摄入量、多喝水)、生活方式的改变(如排便习惯养成)和药物治疗(中药内服与熏洗、敷药、塞药等外用)等。一旦保守治疗失败，可以选择传统的门诊手术，如传统硬化剂注射、透明帽辅助内镜下硬化术、胶圈套扎、超声多普勒引导下痔动脉结扎术、激光光凝、双极电凝、冷冻疗法、红外线凝固疗法等。硬化剂注射疗法适合Ⅰ、Ⅱ度出血性内痔患者。常用的硬化剂包括聚桂醇注射液、中成药注射剂等。注射硬化剂后，痔和痔块周围会产生无菌性炎症反应，黏膜下组织发生纤维化之后会使痔块发生萎缩，从而达到治疗目的，其特点虽是简单、方便，但是由于异位注射导致的医源性损伤(二次伤害)是其最大的局限。

然而遗憾的是不管在西医，或是在中医临床上依旧缺乏一种疗效显著、迅捷，且使用方便、无毒副作用的特效药物，特别是外用或局部使用药物。因此，积极寻找治疗痔疮的特效药物，成为许多医药学者关注的重点，也是本发明的主要目的。

发明内容

针对上述现有技术中的缺乏防治痔疮的特效药物的问题：

本发明的第一个目的在于提供一种有效防治痔疮的经肛门给药之生肤油制剂。

本发明的第二个目的在于提供了一种上述有效防治痔疮的经肛门给药之生肤油之制备方法。

本发明的第三个目的在于提供了上述有效防治痔疮的经肛门给药之生肤油制剂之医药用途。

本发明的发明构思如下：

早在明代陈实功的《外科正宗》就明确了：“夫痔者，乃素积湿热，过食炙焯；或因久坐而血脉不行；又因七情而过伤生冷，以及担轻负重，竭力远行，气血纵横，经络交错；又或酒色过度，肠胃受伤，以致浊气瘀血流注肛门，俱能发痔”。换而言之，肛肠疾病多因湿热下注而生，又因湿热偏重而发。而这一认知与现代医学对痔疮(是人体直肠末端黏膜下和肛管皮肤下静脉丛发生扩张和屈曲所形成的柔软静脉团，多见于久站、久坐者，常见症状为肛门疼痛、肿胀、出血等)理解是一致的。另外，清代吴师机在《理瀹骈文》中提出“外治之理即内治之理，外治之药亦内治之药，所异者法尔”之内治与外治机制一致的说法，也引导了后世医者在遵循辨证论治处以内服之药时，改为外用之品(也就是中医外治)。

中医外治是中医的特色疗法，也是保守治疗的优势所在。虽然，目前治疗痔疮的主要手段仍是手术切除，但是手术创伤大、疗程长、痛苦多，往往患者不接受，而选择保守治疗。作为中医外治的明星产品有国内某知名药企生产的XXX麝香痔疮膏(麝香、牛黄、珍珠、煅炉甘石、硼砂、冰片等)、九华膏(滑石，月石，龙骨，川贝，冰片，朱砂等)等，其中XXX麝香痔疮膏占了中药24％的市场份额。虽然XXX麝香痔疮膏确实是市场占比最大，但也间接说明其疗效并未到达绝对强悍而称霸市场。究其原因，可从其组方而得知。与九华膏类似，XXX麝香痔疮膏中使用大量的清热解毒、消肿止痛、止血生肌之药物，用以处置湿热下注型痔疮，虽会起到一定效果，但其内含麝香辛烈，抗妊娠而不适宜于孕妇；而且因其含有大量的极寒之品，对于临床上多有的日久体虚(气滞血瘀或脾虚气陷型)导致痔疮的治疗效果就更显拙劣，也就是它们只适用于患有痔疮人群中的一小部分群体而已。反过来，我们不得不思考前辈医家针对痔疮病因病机的归纳认知，考虑将复杂且有效的清热通腑、清热凉血、益气活血、补中升陷之内治方药，调整为可经肛门给药的新药物。

申请人的前期研究证实了外用生肤油(黄芩、黄连、黄柏、大黄等清热燥湿，泻火解毒，益气脱毒生肌，为君；黄芪、当归、地榆、乳香、没药等活血行气，化瘀止痛，凉血止血，达行气活血通络，消肿止痛，为臣；地黄、白芨、白芷、白薇等敛阴生肌，解毒疗疮，消肿排脓，可使前药清热不伤阴，解毒不耗气，用为佐；冰片和植物油调和诸药共奏脱毒与生肌之功为使)能快速无瘢痕修复多种因素导致的皮肤创伤，如烧烫伤、溃疡性结肠炎、糖尿病性足溃疡和坏疽。当然，从生肤油的组方和其救治过的病种(溃疡性结肠炎、糖尿病性足溃疡、烧烫伤等)来分析可以得知其具有“清热通腑、清热凉血、益气活血、祛腐生肌”的功效”。不过，能否有效消除痔疮之疾苦，那还需利用专业的疾病模型，通过大量科学实验检证，并深入系统地进行研究和揭示。

因此，申请人针对生肤油防治痔疮进行了大量的科学实验研究，通过分别建立化学药物诱导的痔疮大鼠模型以及模拟痔疮出血、肿胀的轻、中、重度划伤皮肤之大鼠模型，研究所制备的生肤油经外用局部给药对病症的治疗作用。研究结果表明使用本申请制备的生肤油时，既能加快痔疮模型大鼠的肛门肿胀、出血、肛门直肠系数以及患部组织结构等修复，还能促使模拟痔疮出血、肿胀的轻度、中度、重度皮肤划伤模型大鼠之创伤愈合。其治疗效果均明显优于XXX麝香痔疮膏组和生肤油之成份(乳香联合白芨的提取物组合)组。而且，临床上保守治疗测试结果也表明经肛门给予生肤油涂抹处置能够快速解除临床上多有的日久体虚(气滞血瘀型和脾虚气陷型)导致的痔疮之疾苦(肛内肿物脱出，伴有剧烈疼痛；自愿者亦都是尝试过XXX麝香痔疮膏，在无明显改善后才选用了本发明的生肤油制剂)。

为了实现第一个目的，本发明采用了如下技术措施：

一种防治痔疮的外用生肤油，由以下重量份配比的原材料制备而成：黄芩10-50重量份、黄连10-50重量份、黄柏10-50重量份、大黄10-50重量份、黄芪10-30重量份、当归10-30重量份、地榆10-30重量份、乳香10-30重量份、没药10-30重量份、地黄10-30重量份、白芨10-30重量份、白芷10-30重量份、白薇10-30重量份、冰片3-8重量份、食用植物油1000-1500重量份和乳膏剂基质200-500重量份；

所述食用植物油选自芝麻油、椰油、花生油、豆油、亚麻油、蓖麻油和橄榄油中的至少一种，优选自芝麻油和椰油中的至少一种。

所述乳膏基质选自凡士林、石蜡、脂肪醇和蜂蜡中的至少一种，其中凡士林优选为液化的医用凡士林。

为了实现第二个目的，本发明采用了如下技术措施：

一种上述防治痔疮的经肛门给药之生肤油的制备方法，其步骤如下：将食用植物油置入容器中，然后向其中加入黄芩、大黄、黄连、黄柏、黄芪、当归、地榆、地黄、白芨、白芷、白薇各药材干粉末，搅拌均匀；静置浸泡3-10日后，搅拌加热，在搅拌、油温为50-90℃下保持1-2小时后停止加热，过滤去渣后，向其中加入乳香和没药的干粉末，50-90℃下搅拌5-30分钟，停止加热后再经过闪式提取装置20000rpm高速剪切3-5次(每次5min)，负压过5000目筛去渣后，收集滤油，待油温调至60℃时，向其中加入冰片和乳膏剂基质，充分搅匀，冷却，得到防治痔疮的经肛门给药之生肤油。

上述方法制成的外用生肤油在常温下为固态但在37℃温度下可流动，适用于经肛门给药。

进一步，所用黄芩、大黄、黄连、黄柏、黄芪、当归、地榆、地黄、白芷、白薇、白芨、乳香和没药这13味中药材干粉末均为过200目筛。

为了实现本发明的第三个目的，本发明还采用了如下技术措施：

本发明同时也提供了上述经肛门给药之生肤油在制备防治致炎化学物质所致痔疮(包括模拟临床痔疮出血、肿胀之病症，建立了轻、中、重度皮肤划伤)药物中的应用，以及其治疗临床脾虚气陷型(反复肛内肿物脱出多年)痔疮和气滞血瘀型(产后肛内肿物脱出)痔疮药物中的应用。

本发明各中药原料的组方原则如下：黄芩、黄连、黄柏、大黄清热燥湿，泻火解毒，为君；黄芪、当归、地榆、乳香、没药活血化瘀，消肿止痛，用为臣；地黄、白芨、白芷、白薇敛阴生肌，祛腐疗疮，消肿排脓，为佐；冰片和植物油调和诸药共奏脱毒与生肌之功为使。

本发明中痔疮大鼠模型建立和指标评估如下：

除空白对照组给予等量生理盐水外，对造模组的每只大鼠每天均予以在肛门以内0.2cm处，4点位黏膜下浆肌层给药(1％的角叉菜胶溶液100μL+0.5％的脂多糖溶液10μL+10mg/mL的溴丙胺太林溶液40μL+酚磺乙胺注射液30μL)1次，连续给药7天。造模给药结束后半小时，再使用带软胶管的注射器轻轻插入大鼠直肠深处约2cm处给予0.25ml的相应药物(除空白对照组及模型组给予等量生理盐水外，其余分别给予XXX麝香痔疮膏、实施例1生肤油、实施例2生肤油、乳香和白芨提取物的混合物)，每日1次。每天称量大鼠体质量、肛门红肿情况以及是否便血等，每日用相机拍照记录大鼠肛门红肿程度及分泌物变化情况，连续7天。给药7天后，测量大鼠体重，使用二氧化碳处死大鼠，取肛门直肠2cm润洗干净使用电子天平对大鼠直肠重量进行测定，记录大鼠肛门直肠系数，同时将所取组织置于福尔马林溶液中固定24h。然后将组织依次进行流水冲洗、脱水、石蜡包埋，接着进行组织切片、HE常规染色，并在光学显微镜下观察，对组织进行病理学评分。

与现有技术相比，本发明具有以下优点和效果：研究结果表明经肛门给予本发明制备的生肤油之治疗性使用后能有效发挥其清热通腑、清热凉血、益气活血、祛腐生肌之作用，快速消退痔疮模型大鼠的肛门肿胀、出血，明显减轻患部黏膜下层组织内中性粒细胞及单核细胞的浸润程度，显著减少患部黏膜绒毛内糖原水平，促进模拟痔疮出血、肿胀的轻、中、重度划伤模型大鼠之皮肤创伤愈合，而且其疗效明显优于XXX麝香痔疮膏(目前国内同领域的明星产品)组和生肤油之成份(乳香+白芨)组。最重要的是经肛门给予本发明制备的生肤油能够快速解除临床上多有的日久体虚(气滞血瘀和脾虚气陷型)导致的痔疮之疾苦。

本发明中的生肤油对防治痔疮具有以下优势：①药物成本低；②经肛门使用方便；③康复痔疮效果快且好。

附图说明

图1为实施例1、2制备的经肛门给药之生肤油对痔疮模型大鼠的直肠肛门系数的影响(Mean±SEM，n＝8)。注：“**”为与空白对照组相比，两组数据间存在显著性差异(p<0.01)；“#”为与模型组相比，两组数据间存在显著性差异(p<0.05)。

图2为实施例1、2制备的经肛门给药之生肤油对痔疮模型大鼠的肛门及直肠大体观的影响(Mean±SEM，n＝8)。图A为各受试大鼠肛门及直肠大体观的代表图；图B为外观评分图。注：“***”为与空白对照组相比，两组数据间存在显著性差异(p<0.001)；“#、##”为与模型组相比，两组数据间存在显著性差异(p<0.05、0.01)。

图3为实施例1、2制备的经肛门给药之生肤油对痔疮模型大鼠的肛门直肠组织结构的影响。图A标注有4X、20X的图分别为光镜下4倍(标尺为200μm)和20倍(标尺为50μm)的肛门直肠组织HE染色代表图。虚线框示意为患部，20倍也正是其放大图像。图B标注有PAS的图为光镜下20倍(标尺为50μm)的肛门直肠组织PAS染色代表图。图C为肛门直肠组织PAS染色后绒毛内糖原水平定量图(Mean±SEM，n＝8)。注：“***”为与对照组相比，两组数据间存在显著性差异(p<0.001)；“#、##和###”为与模型组相比，两组数据间存在显著性差异(p<0.05、0.01和0.001)。

图4为实施例1、2制备的经肛门给药之生肤油对轻度皮肤划伤模型大鼠的创伤修复影响。

图5为实施例1、2制备的经肛门给药之生肤油对中度皮肤划伤模型大鼠的创伤修复影响。

图6为实施例1、2制备的经肛门给药之生肤油对重度皮肤划伤模型大鼠的创伤修复影响。

图7为实施例1制备的经肛门给药之生肤油对脾虚气陷型痔疮(反复肛内肿物脱出)的修复影响。

图8为实施例1制备的经肛门给药之生肤油对气滞血瘀型痔疮(产后肛内肿物脱出)的修复影响。

具体实施方式

下面申请人将结合具体实施例对本发明的技术方案作进一步的详细说明，目的在于使本领域技术人员对本申请有更加清楚的理解和认识。

本发明实施例中所用黄芩、大黄、黄连、黄柏、黄芪、当归、地榆、地黄、白芷、白薇、白芨、乳香和没药13味中药材干粉末均为过200目筛。

实施例1：一种防治痔疮的经肛门给药之生肤油的制备方法，其步骤如下：

将1L芝麻油置入容器中，然后加入黄芩、大黄、黄连、黄柏的干粉末各30g，黄芪、当归、地榆、地黄、白芷、白薇、白芨的干粉末各10g，搅拌均匀；静置浸泡10日后，搅拌加热，在搅拌、油温为50℃下保持2小时后停止加热，过滤去渣后，向其中加入乳香和没药的干粉末各10g，继续加热至油温达到50℃后，搅拌30分钟；停止加热后，再经过闪式提取装置10000rpm高速剪切5次(每次5min)；负压过5000目筛，收集滤油；待油温调至60℃时，向滤油中加入冰片3g和200g液化的医用凡士林、30g蜂蜡，充分搅匀，待冷却至室温，得经肛门给药的生肤油①，装100ml灭菌瓶后密闭储存。

另外，本申请中使用到的白芨+乳香组药物，是参照生肤油①的制备方法而得到相应的提取物之制剂的。具体步骤为：将100mL芝麻油置入容器中，然后加入白芨的干粉末10g，搅拌均匀；静置浸泡10日后，搅拌加热，在搅拌、油温为50℃下保持2小时后停止加热，过滤去渣后，向其中加入乳香的干粉末10g；继续加热至油温达到50℃后，再经过闪式提取装置10000rpm高速剪切5次(每次5min)；负压过5000目筛，收集滤油，向滤油中加入20g液化的医用凡士林、3g蜂蜡，充分搅匀，待冷却至室温，得乳香和白芨的提取物(以下简记为“白芨+乳香组药物”、“白芨+乳香组”、“乳香+白芨组”的含义均表示为此处制备的乳香和白芨的提取物)，装100ml灭菌瓶后密闭储存。

实施例2：一种防治痔疮的经肛门给药之生肤油的制备方法，其步骤如下：

将1.5L芝麻油置入容器中，然后加入黄芩、大黄、黄连、黄柏的干粉末各50g，黄芪、当归、地榆、地黄、白芷、白薇、白芨的干粉末各30g，搅拌均匀；静置浸泡3日后，搅拌加热，在搅拌、油温为90℃下保持1小时后停止加热，过滤去渣后，向其中加入乳香和没药的干粉末各10g，搅拌30分钟；停止加热后，再经过闪式提取装置10000rpm高速剪切3次(每次5min)；负压过5000目筛，收集滤油；待油温调至60℃时，向滤油中加入冰片8g和200g液化的医用凡士林、50g蜂蜡，充分搅匀，待冷却至室温，得外用生肤油②，装100ml灭菌瓶后密闭储存。

实施例3实施例1、2制备的生肤油①和②对痔疮模型大鼠的肛门直肠系数的影响

受试动物为SPF级SD(6周龄)大鼠48只(由辽宁长生生物技术股份有限公司提供)。自由饮水饮食，饲养间温度保持在25±1℃，明暗周期为12小时。

(1)分组与给药

将48只大鼠均分为6组：空白对照组、模型组、XXX麝香痔疮膏组、实施例①生肤油(即实施例1制备的生肤油①，下同)组、实施例②生肤油(即实施例2制备的生肤油②，下同)组和实施例1制备的(下同)乳香+白芨组。造模组的每只大鼠每次注射痔疮诱导药物为：1％的角叉菜胶溶液100μL+0.5％的脂多糖溶液10μL+10mg/mL的溴丙胺太林溶液40μL+酚磺乙胺注射液30μL(酚磺乙胺注射液取原剂型使用，角叉菜胶溶液、脂多糖溶液、溴丙胺太林溶液均是取对应原料药用生理盐水配成溶液，各组分混匀后一次注射；参考文献：建立一种新型痔疮动物模型的方法研究.中国现代应用药学.2019,36(5):526-531)，空白对照组的每只大鼠每次注射生理盐水180μL。除空白对照组给予等量生理盐水外，各组大鼠注射点均在肛门以内0.2cm处，4点位黏膜下浆肌层，每天给药1次，连续给药7天。造模同时给药，每天注射造模药物半小时后使用带软胶管的注射器轻轻插入大鼠直肠深处约2cm处给予相应药物；空白对照组及模型组给予等量生理盐水，每日给药1次；XXX麝香痔疮膏组给予0.25mlXXX麝香痔疮膏，每天1次；实施例①和实施例②生肤油组分别给予相应制备的生肤油0.25ml，每天1次；乳香+白芨组给予0.25ml乳香和白芨的提取物，每天1次。每天称量大鼠体重、肛门红肿情况以及是否便血等，每日用相机拍照记录大鼠肛门红肿程度及分泌物变化情况，连续7天。

(2)大鼠肛门直肠系数测定

给药7天后，测量大鼠体重，使用二氧化碳处死大鼠，取肛门直肠2cm润洗干净使用电子天平对大鼠直肠重量进行测定，记录大鼠肛门直肠系数。

(3)实验结果

连续7天给药后，对模型大鼠肛门直肠系数进行测定，结果如图1所示：与空白组(0.0017±0.00016)相比，模型组大鼠直肠肛门系数明显上升且存在显著性差异(0.0024±0.00012，p<0.01)；与模型组相比，实施例①生肤油(0.0020±0.00025)、实施例②生肤油(0.0020±0.00011，p<0.05)、XXX麝香痔疮膏(0.0022±0.00010)及乳香+白芨(0.0021±0.00008)处置的大鼠直肠肛门系数均有不同程度下降，其中实施例②生肤油下降最多，与模型组之间存在显著性差异。

实施例4实施例1、2制备的生肤油①和②对痔疮模型大鼠的肛门及直肠大体观的影响

受试动物为SPF级SD(6周龄)大鼠48只(由辽宁长生生物技术股份有限公司提供)。自由饮水饮食，饲养间温度保持在25±1℃，明暗周期为12小时。

(1)分组与给药

将48只大鼠均分为6组：空白对照组、模型组、XXX麝香痔疮膏组、实施例①生肤油组、实施例②生肤油组和乳香+白芨组。造模组的每只大鼠每次注射痔疮诱导药物为：1％的角叉菜胶溶液100μL+0.5％的脂多糖溶液10μL+10mg/mL的溴丙胺太林溶液40μL+酚磺乙胺注射液30μL(酚磺乙胺注射液取原剂型使用，角叉菜胶溶液、脂多糖溶液、溴丙胺太林溶液均是取对应原料药用生理盐水配成溶液，各组分混匀后一次注射)，空白对照组的每只大鼠每次注射生理盐水180μL。除空白对照组给予等量生理盐水外，各组大鼠注射点均在肛门以内0.2cm处，4点位黏膜下浆肌层，每天给药1次，连续给药7天。造模同时给药，每天注射造模药物半小时后使用带软胶管的注射器轻轻插入大鼠直肠深处约2cm处给予相应药物；空白对照组及模型组给予等量生理盐水，每日给药1次；XXX麝香痔疮膏组给予0.25ml XXX麝香痔疮膏，每天1次；实施例①和实施例②生肤油组分别给予相应制备的生肤油0.25ml，每天1次；乳香+白芨组给予0.25ml乳香和白芨的提取物，每天1次。

(2)大鼠肛门及直肠大体观的观察

于实验的第1、3、5、7天拍照记录大鼠肛门的分泌物及红肿情况；给药7天后，用二氧化碳处死大鼠，取直肠2cm组织，并对大鼠肛门直肠大体观的水肿和血丝呈现程度进行评分。具体评分如下：(1)水肿的评分标准采用4级评分法。无水肿，肛门边缘皮肤柔软，无异常突起，皮纹正常(0分)；轻度水肿，肛门周围组织轻度隆起，皮纹存在(2分)；中度水肿，肛门周围组织中度隆起，皮纹不明显(4分)；重度水肿，肛门周围组织重度隆起，皮纹消失，皮肤发亮(6分)；(2)血丝的评分标准分3度。无血丝(0分)，少量血丝(2分)，大量血丝(4分)。以上两个指标进行评分后，各以权重50％计算，得到大鼠肛门直肠的外观评分。

(3)实验结果

连续7天给药后，对模型大鼠肛门大体观及组织结构进行观察，结果如图2所示：正常组(0.0±0.0)大鼠肛门正常，无红肿等明显改变。模型组大鼠第3天开始出现肛门红肿、血管扩张，第7天解剖后直肠可见明显黏膜充血水肿，肠壁增厚，与空白组相比存在显著性差异(5.5±0.63，p<0.001)；与模型组相比，XXX麝香痔疮膏组肛门出现较轻的红肿和血管扩张，但无显著性差异(5.0±0.53)；与模型组相比，实施例①、②生肤油组则在第5天出现肛门红肿最为严重，红肿症状较轻，少量血管扩张，第7天时基本消除红肿，且解剖后直肠无肿胀与血丝(3.5±0.50，p<0.05；2.75±0.37，p<0.05)；与模型组相比，乳香+白芨组肛门红肿较轻，第7天解剖后直肠虽只有少量血丝，但也无明显差异(4.75±0.65)。

实施例5实施例1、2制备的生肤油①和②对痔疮模型大鼠的肛门直肠组织结构的影响

受试动物为SPF级SD(6周龄)大鼠48只(由辽宁长生生物技术股份有限公司提供)。自由饮水饮食，饲养间温度保持在25±1℃，明暗周期为12小时。

(1)分组与给药

将48只大鼠均分为6组：空白对照组、模型组、XXX麝香痔疮膏组、实施例①生肤油组、实施例②生肤油组和乳香+白芨组。造模组的每只大鼠每次注射痔疮诱导药物为：1％的角叉菜胶溶液100μL+0.5％的脂多糖溶液10μL+10mg/mL的溴丙胺太林溶液40μL+酚磺乙胺注射液30μL(酚磺乙胺注射液取原剂型使用，角叉菜胶溶液、脂多糖溶液、溴丙胺太林溶液均是取对应原料药用生理盐水配成溶液，各组分混匀后一次注射)，空白对照组的每只大鼠每次注射生理盐水180μL。除空白对照组给予等量生理盐水外，各组大鼠注射点均在肛门以内0.2cm处，4点位黏膜下浆肌层，每天给药1次，连续给药7天。造模同时给药，每天注射造模药物半小时后使用带软胶管的注射器轻轻插入大鼠直肠深处约2cm处给予相应药物；空白对照组及模型组给予等量生理盐水，每日给药1次；XXX麝香痔疮膏组给予0.25ml XXX麝香痔疮膏，每天1次；实施例①和实施例②生肤油组分别给予相应制备的生肤油0.25ml，每天1次；乳香+白芨组给予0.25ml乳香和白芨的提取物，每天1次。

(2)大鼠肛门直肠组织结构观察

于实验的第1、3、5、7天拍照记录大鼠肛门的分泌物及红肿情况；给药7天后，用二氧化碳处死大鼠，取直肠2cm组织，放入37wt％的福尔马林溶液中固定后然后将其卷成“瑞士卷”样(内部为绒毛部分)，用1mL注射器的针头刺进中部，放入包埋框，脱水机固定，然后将其制成蜡块并进行切片，将切好的大鼠直肠组织(厚2μm)置于载玻片上，捞片后，放入60℃烘片机中3h，烘干。随后通过苏木精－伊红染色(Hematoxy-lin-Eosin，H&E)检测直肠组织的形态学变化。再运用PAS染色观察直肠组织中糖原的分布情况，若细胞质中出现紫红色的颗粒，即为组织中散在的糖原。最后在光学显微镜下观察，拍照进行病理分析。

(3)实验结果

如大鼠直肠HE染色图(图3A)显示，连续7天给药后，正常组大鼠直肠局部组织无明显病理形态学改变(黏膜结构完整，各结构层次清晰，糖原分布量较少，隐窝处的结构未见肿胀变形)，肛周组织的细胞基本正常。模型组大鼠直肠局部组织部分结构不完整，糖原较空白对照组呈现明显增多的趋势，隐窝肿胀，特别是黏膜上皮细胞部分变性，黏膜下明显肿胀，并伴有大量中性粒细胞及单核细胞浸润，间质明显充血、出血、水肿，大量小血管增生、扩张充血，淋巴管扩张水肿以及大痔核和肉芽肿形成等病理变化。XXX麝香痔疮膏组与乳香+白芨组大鼠黏膜上皮部分细胞变性，黏膜下有较多中性粒细胞及单核细胞浸润，间质充血水肿，较多小血管增生、扩张充血，淋巴管扩张水肿以及较大痔核和肉芽肿形成等病理变化。实施例①生肤油组大鼠直肠局部组织黏膜上皮细胞正常，直肠黏膜下有少量中性粒细胞，存在轻度水肿和散在充血以及小痔核和肉芽肿形成等病理变化。实施例②生肤油组大鼠直肠局部组织黏膜上皮部分细胞变性，大鼠直肠黏膜下有少量中性粒细胞及单核细胞浸润，间质轻度充血，少量小血管增生、扩张充血，痔核和肉芽肿形成等病理变化基本消退。

肛门直肠组织的PAS染色及其定量分析的结果如图3B和3C所示，空白对照组大鼠直肠黏膜结构完整，各结构层次清晰，组织中的糖原被染为紫红色；模型组中实验大鼠的肛门直肠组织相对于空白组而言，紫红色范围明显增多，多成颗粒状，且相对较集中，说明组织中糖原含量高；实施例①生肤油组黏膜结构有轻微损伤，肿胀情况得到明显缓解，糖原较空白组而言仍较多，但相对于模型组、XXX麝香痔疮膏组和乳香+白芨组，则明显减少；实施例②生肤油组的肛门直肠结构趋近于空白组，其组织结构完整，糖原分布同空白组相近，隐窝处较少见肿胀现象。

实施例6实施例1、2制备的生肤油①和②对轻度皮肤划伤模型大鼠创面的修复影响

受试动物为SPF级SD(6周龄)大鼠5只(由辽宁长生生物技术股份有限公司提供)。自由饮水饮食，饲养间温度保持在25±1℃，明暗周期为12小时。

(1)实验方法

将5只SD大鼠背部的毛用适量脱毛膏和刮毛刀脱去，将整个鼠背分成左右侧且上中下各三个区域(面积大小约1.5cm×1.5cm)，然后使用静脉采血针头制成六连排针(取下六支针头按0.25厘米间距插入橡皮擦，露出针头，并固定好使其在橡皮檫内不移位)制备轻度划伤模型：使用排针在大鼠背部去毛皮肤进行井字型划伤处理1次，每一道划痕深度达角质层和真皮层之间，约为0.2mm，出现少量出血点与轻微肿胀。建模后，将划伤区域分别分为5组，即模型组、实施例①生肤油组、实施例②生肤油组、地塞米松组和XXX麝香痔疮膏组；除模型组外，其余组大鼠损伤部位用生理盐水润洗后给予相应药物涂抹，即分别予以涂抹实施例①生肤油0.25ml、实施例②生肤油0.25ml、地塞米松0.25ml(取地塞米松5mg并用生理盐水稀释至10ml)、XXX麝香膏0.25ml，对照组则予以等量生理盐水涂抹，每12h给药1次。划伤后分5个时间点(伤后0min、10min、30min和6h、24h)观察并拍照记录大鼠背部皮肤恢复情况。

(2)实验结果

轻度划伤实验结果如图4所示：模型组大鼠皮肤轻度损伤表浅，创面见少量出血点，伴有轻度渗血，且皮肤损伤区域一直处于轻微红肿状态。6h后红肿开始缓解，24h时已出现结痂，痂皮较浅、软。给予治疗药物10min后，与模型组相比，实施例①生肤油组和实施例②生肤油组的大鼠创面皮肤的红肿与出血程度均基本消退，而且疤痕较其他组变浅，均未见色素沉着。由于表皮轻度损伤，实施例①生肤油组与实施例②生肤油组的疤痕差异不明显，但可见实施例②生肤油组的大鼠皮肤表面有明显光泽，涂抹部分皮肤细嫩；相比模型组，地塞米松组和XXX麝香痔疮膏组也呈现一定改善效果，但仍旧表现出肿胀明显，血痂未掉的状态。

实施例7实施例1、2制备的生肤油①和②对中度皮肤划伤模型大鼠创面的修复影响

受试动物为SPF级SD(6周龄)大鼠5只(由辽宁长生生物技术股份有限公司提供)。自由饮水饮食，饲养间温度保持在25±1℃，明暗周期为12小时。

(1)实验方法

将5只SD大鼠背部的毛用适量脱毛膏和刮毛刀脱去，将整个鼠背分成左右侧且上中下各三个区域(面积大小约1.5cm×1.5cm)，然后使用静脉采血针头制成六连排针(取下六支针头按0.25厘米间距插入橡皮擦，露出针头，并固定好使其在橡皮檫内不移位)：使用排针在大鼠背部去毛皮肤进行井字型划伤处理3次，深度达真皮层，约为0.5mm，损伤创面处见大量出血点和渗血，伴中度的红肿状态。建模后，将划伤区域分别分为5组，即模型组、实施例①生肤油组、实施例②生肤油组、地塞米松组和XXX麝香痔疮膏组；除模型组外，其余组大鼠损伤部位用生理盐水润洗后给予相应药物涂抹，即分别予以涂抹实施例①生肤油0.25ml、实施例②生肤油0.25ml、地塞米松0.25ml(取地塞米松5mg并用生理盐水稀释至10ml)、XXX麝香膏0.25ml，对照组则予以等量生理盐水涂抹，每12h给药1次。划伤后分5个时间点(伤后0min、10min、30min和6h、24h)观察并拍照记录大鼠背部皮肤恢复情况。

(2)实验结果

中度划伤实验结果如图5所示，模型组大鼠皮肤轻度损伤较深，创面见大量出血点，伴有明显渗血，且皮肤损伤区域一直处于红肿状态。24h时红肿开始减轻，出现大量深红色条状韧且硬的痂皮。与模型组相比，分别给予实施例①生肤油和实施例②生肤油治疗30min后，两组大鼠创面皮肤的红肿与出血程度明显减轻，并开始结痂；6h时，出血停止红肿几乎完全消除，生肤油①、②组均未出现伤口干燥的现象。其中，给予实施例①生肤油涂抹后伤口红肿快速消退，出血减轻，疤痕较浅；给予实施例②生肤油涂抹后，伤痕周围正常皮肤水分充足并有明显光泽，疤痕变淡，无色素沉着。在伤后6h时，相比模型组，地塞米松组也呈现一定改善效果，但XXX麝香痔疮膏组的效果明显最差(接近无效状态)，并且直到伤后24h仍旧表现出肿胀明显，血痂未掉的状态。

实施例8实施例1、2制备的生肤油①和②对重度皮肤划伤模型大鼠创面的修复影响

受试动物为SPF级SD(6周龄)大鼠5只(由辽宁长生生物技术股份有限公司提供)。自由饮水饮食，饲养间温度保持在25±1℃，明暗周期为12小时。

(1)实验方法

将5只SD大鼠背部的毛用适量脱毛膏和刮毛刀脱去，将整个鼠背分成左右侧且上中下各三个区域(面积大小约1.5cm×1.5cm)，然后使用静脉采血针头制成六连排针(取下六支针头按0.25厘米间距插入橡皮擦，露出针头，并固定好使其在橡皮檫内不移位)：使用排针在大鼠背部去毛皮肤进行井字型划伤处理5次，深度达真皮层以下，约为1mm，损伤创面处见大量出血点和渗血，伴严重的肿胀状态。建模后，将划伤区域分别分为5组，即模型组、实施例①生肤油组、实施例②生肤油组、地塞米松组和XXX麝香痔疮膏组；除模型组外，其余组大鼠损伤部位用生理盐水润洗后给予相应药物涂抹，即分别予以涂抹实施例①生肤油0.25ml、实施例②生肤油0.25ml、地塞米松0.25ml(取地塞米松5mg并用生理盐水稀释至10ml)、XXX麝香膏0.25ml，对照组则予以等量生理盐水涂抹，每12h给药1次。划伤后分5个时间点(伤后0min、10min、30min和6h、24h)观察并拍照记录大鼠背部皮肤恢复情况。

(2)实验结果

重度划伤实验结果如图6所示，模型大鼠创面皮肤组织严重破裂，其深度达筋膜层，损伤创面大量渗血，伴有损伤四周明显隆起和红肿。模型组大鼠皮肤损伤区域一直处于片状出血状态，24h时红肿仍旧未消退，且呈现块状皮革样深褐色硬痂皮。与模型组相比，给予生肤油治疗10min后，该组大鼠创面皮肤出血明显减少，仅出现轻微的红肿，并开始结痂；治疗6h时，创面出血停止，红肿几乎完全消除，并开始结痂。实施例①生肤油组和实施例②生肤油组的大鼠创面均未出现疤痕干燥皲裂现象，且疤痕周围皮肤更为细嫩亮泽。其中，实施例①生肤油组大鼠创面红肿消退与止血时间更短，疤痕表面完整；实施例②生肤油组的大鼠创面疤痕柔软且延展性更强，并随大鼠腹部皮肤延展生长并出现褶皱。在伤后24h时，相比模型组，地塞米松组和XXX麝香痔疮膏组的改善效果均不理想，地塞米松组和XXX麝香痔疮膏组的效果差不多，并且直到伤后24h仍旧均表现出明显肿胀，血痂未掉、疤痕干燥皲裂的状态。

实施例9实施例1制备的生肤油①治疗脾虚气陷型痔疮(反复肛内肿物脱出多年)典型案例一

(1)治疗方法

如图7，56岁胡氏男性，反复肛内肿物脱出15年，伴肿痛3天。3天前因疼痛难忍自购XXX麝香痔疮膏涂抹在患处，未见明显改善，于是在当地医院求诊，被诊为脾虚气陷型痔疮。建议其手术根治，但患者仍旧选择保守治疗，自愿尝试生肤油。在医生的帮助下，润洗患处后，均匀涂抹实施例①生肤油，一日3次，每次约2-3毫升，连续擦拭6天。于使用生肤油前、使用3天后和6天后拍照记录。治疗一个疗程(6天)，血栓逐渐吸收，糜烂面愈合，痔核缩小。

(2)治疗结果

如图7，患者使用前肛门处可见3颗蚕豆大小红色肿物(痔核)，触之较硬，并感剧痛；其中1颗肿物表明有明显溃破且有渗血。使用生肤油3天后，血肿逐渐吸收，肿物糜烂面愈合，痔核明显缩小，且由3颗减少至2颗，疼痛已无。使用生肤油6天后，原肛门处脱落出肿物基本消退了，自觉无任何不适感。

实施例10实施例1制备的生肤油①治疗气滞血瘀型痔疮(产后肛内肿物脱出)典型案例二

(1)治疗方法

如图8，32岁孙氏女性，产后肛内肿物脱出多日，伴肿胀疼痛，经产科邀请肛肠科医生会诊，被诊断为气滞血瘀型产后复合嵌顿痔，建议其保守治疗。该产妇自愿尝试生肤油。在医生的帮助下，润洗患处后，均匀涂抹实施例①生肤油，一日3次，每次约2-3毫升，连续擦拭6天。基于产妇意愿，于使用生肤油前、使用6天后拍照记录。

(2)治疗结果

如图8，患者使用前肛门处可见菜花状红色肿物(痔核)，静卧时自觉患处疼痛，触之更痛。使用生肤油当天，自觉疼痛明显减轻，重坠感缓解。使用生肤油6天后，原肛门处脱落出肿物(痔核)完全消退了，疼痛及重坠感等不适感觉全部消除了。

Claims (3)

1.一种外用生肤油在制备防治痔疮药物中的应用，其特征在于，所述外用生肤油由以下重量份配比的原材料制备而成：黄芩10-50重量份、黄连10-50重量份、黄柏10-50重量份、大黄10-50重量份、黄芪10-30重量份、当归10-30重量份、地榆10-30重量份、乳香10-30重量份、没药10-30重量份、白芨10-30重量份、地黄10-30重量份、白芷10-30重量份、白薇10-30重量份、冰片3-8重量份、食用植物油1000-1500重量份和乳膏剂基质200-500重量份；

所述食用植物油选自芝麻油、椰油、花生油、豆油、亚麻油、蓖麻油和橄榄油中的至少一种；

所述乳膏剂基质选自凡士林、石蜡、脂肪醇和蜂蜡中的至少一种；

所述外用生肤油的制备方法，其步骤如下：将食用植物油置入容器中，然后向其中加入黄芩、大黄、黄连、黄柏、黄芪、当归、地榆、地黄、白芨、白芷、白薇各药材干粉末，搅拌均匀；静置浸泡3-10日后，搅拌加热，在搅拌、油温为50-90℃下保持1-2小时后停止加热，过滤去渣后，向其中加入乳香和没药的干粉末，50-90℃下搅拌 5-30分钟，过滤去渣后，收集滤油，待油温调至60℃时，向其中加入冰片和乳膏剂基质，充分搅匀，冷却，得到所述外用生肤油；

所述痔疮为临床脾虚气陷型痔疮或气滞血瘀型痔疮。

2.根据权利要求1所述的一种外用生肤油在制备防治痔疮药物中的应用，其特征在于，所述外用生肤油的制备方法，其步骤如下：将食用植物油置入容器中，然后向其中加入黄芩、大黄、黄连、黄柏、黄芪、当归、地榆、地黄、白芨、白芷、白薇各药材干粉末，搅拌均匀；静置浸泡3-10日后，搅拌加热，在搅拌、油温为50-90℃下保持1-2小时后停止加热，过滤去渣后，向其中加入乳香和没药的干粉末，50-90℃下搅拌 5-30分钟，停止加热后再经过闪式提取装置20000 rpm高速剪切3-5次，负压过5000目筛去渣后，收集滤油，待油温调至60℃时，向其中加入冰片和乳膏剂基质，充分搅匀，冷却，得到所述外用生肤油。

3.根据权利要求1所述的一种外用生肤油在制备防治痔疮药物中的应用，其特征在于，所用黄芩、大黄、黄连、黄柏、黄芪、当归、地榆、地黄、白芷、白薇、白芨、乳香和没药中药材干粉末均为过200目筛。

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