CN114668820A - 小麦麸皮多酚提取物在制备降血脂药物中的应用 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了小麦麸皮多酚提取物在制备降血脂药物中的应用。属于医药技术领域。小麦麸皮多酚提取物可降低肥胖大鼠食物效应比，抑制大鼠体重增长；降低肥胖大鼠体脂、Lee’s指数、肥胖指数。降低肝脏重量及肝脏系数。可明显降低肥胖大鼠血清中TG、TC、HDL‑C、LHL‑C、ALP、ALT、AST、TBA水平。降低肝匀浆中ADPN、LEP水平，升高LPL、HL水平。降低肥胖大鼠肝匀浆中IL‑6、IL‑1β、TNF‑α水平、升高GSH‑PX活力。病理结果显示小麦麸皮多酚提取物可不同程度的减轻高血脂引起的肝损伤程度。

Description

小麦麸皮多酚提取物在制备降血脂药物中的应用
技术领域
本发明涉及医药技术领域，更具体的说是涉及小麦麸皮多酚提取物在制备降血脂药物中的应用。
背景技术
随着全球经济的快速发展，肥胖患者数目迅速增加，已成为全球日益严峻的话题，而超重或者肥胖是由于多种原因引起的脂肪成分过多且超出正常人平均量的病理状态。血脂异常是肥胖患者常见的代谢标志之一，血脂水平能够反映全身性的脂质代谢状态。如今，高热量饮食习惯的流行，饮食中摄入的脂肪增加，体内的游离脂肪酸增多，积聚的甘油三酯也逐渐增多，一旦超过了肝脏存储的极限，将会产生有毒的脂质代谢物，这些代谢物又会导致肝损伤或肝功能障碍，而肝组织是调节人体脂质代谢的核心器官，主要控制着肝组织的合成代谢和分解代谢，当机体出现高脂血症时，会导致机体出现氧化应激反应，氧化应激会进一步损伤肝组织，导致肝细胞损伤甚至凋亡，肝组织的损伤又会增加血液中的血脂水平，从而形成脂质代谢的恶性循环，肥胖与肝损伤风险增加有关。肥胖使肝细胞易于发生脂质过氧化的同时，还会炎症变性，从而增加肝纤维化、肝硬化甚至肝细胞癌的可能。
综上，探究制备降血脂药物是本领域技术人员亟需解决的问题。
发明内容
有鉴于此，本发明提供了小麦麸皮多酚提取物在制备降血脂药物中的应用。本发明采用75％医用乙醇提取小麦麸皮多酚，应用在高脂大鼠模型，观察其降血脂作用及对高血脂造成肝损伤的保护作用，及其机制。为进一步开发小麦麸皮在降脂中的作用奠定理论基础。
为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：
小麦麸皮多酚提取物在制备降血脂药物中的应用。
进一步的，所述降血脂是指降低血清中TG水平。
进一步的，所述降血脂是指降低血清中TC水平。
进一步的，所述降血脂是指降低血清中HDL-C水平。进一步的，所述降血脂是指降低血清中LHL-C水平。
进一步的，所述降血脂是指降低血清中ALP水平。
进一步的，所述降血脂是指降低血清中ALT水平。
进一步的，所述降血脂是指降低血清中AST水平。
进一步的，所述降血脂是指降低血清中TBA水平。
进一步的，所述小麦麸皮多酚提取物的制备方法如下：小麦麸皮加入20倍体积的75％医用乙醇，50℃热浸提取两次，每次24小时，过滤、浓缩、冻干即可；
所述小麦麸皮多酚提取物包括如下成分：甜菜碱、胆碱、腺苷、亚油酸、5-十七烷基间苯二酚、5-十九烷基间苯二酚、5-二十一烷基问苯二酚、5-二十三烷基间苯二酚、5-二十五烷基问苯二酚和芹菜素。
经由上述的技术方案可知，与现有技术相比，本发明取得的有益效果为：小麦麸皮多酚提取物可抑制肥胖大鼠肥胖程度，降低血清中血脂水平，减轻肥胖引起的肝损伤程度；对肥胖及肥胖引起的肝损伤有一定的疗效。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据提供的附图获得其他的附图。
图1附图为本发明实施例1正常对照组02大鼠肝脏在400倍下的光镜检查结果，镜下观察描述：肝细胞结构基本正常；
图2附图为本发明实施例1正常对照组04大鼠肝脏在400倍下的光镜检查结果，镜下观察描述：肝细胞结构基本正常；
图3附图为本发明实施例1正常对照组08大鼠肝脏在400倍下的光镜检查结果，镜下观察描述：肝细胞结构基本正常；
图4附图为本发明实施例1正常对照组09大鼠肝脏在400倍下的光镜检查结果，镜下观察描述：肝细胞结构基本正常；
图5附图为本发明实施例1模型组11大鼠肝脏在400倍下的光镜检查结果，镜下观察描述：部分肝细胞脂肪变性；
图6附图为本发明实施例1模型组17大鼠肝脏在400倍下的光镜检查结果，镜下观察描述：部分肝细胞脂肪变性；
图7附图为本发明实施例1模型组15大鼠肝脏在400倍下的光镜检查结果，镜下观察描述：部分肝细胞脂肪变性；
图8附图为本发明实施例1模型组20大鼠肝脏在400倍下的光镜检查结果，镜下观察描述：部分肝细胞脂肪变性；
图9附图为本发明实施例1阳性药组22大鼠肝脏在400倍下的光镜检查结果，镜下观察描述：少部分肝细胞脂肪变性；
图10附图为本发明实施例1阳性药组25大鼠肝脏在400倍下的光镜检查结果，镜下观察描述：肝细胞结构基本正常；
图11附图为本发明实施例1阳性药组28大鼠肝脏在400倍下的光镜检查结果，镜下观察描述：部分肝细胞脂肪变性；
图12附图为本发明实施例1阳性药组30大鼠肝脏在400倍下的光镜检查结果，镜下观察描述：部分肝细胞脂肪变性；
图13附图为本发明实施例1小麦麸皮多酚提取物低剂量组74大鼠肝脏在400倍下的光镜检查结果，镜下观察描述：少部分肝细胞脂肪变性；
图14附图为本发明实施例1小麦麸皮多酚提取物低剂量组75大鼠肝脏在400倍下的光镜检查结果，镜下观察描述：少部分肝细胞脂肪变性；
图15附图为本发明实施例1小麦麸皮多酚提取物低剂量组76大鼠肝脏在400倍下的光镜检查结果，镜下观察描述：少部分肝细胞脂肪变性；
图16附图为本发明实施例1小麦麸皮多酚提取物低剂量组80大鼠肝脏在400倍下的光镜检查结果，镜下观察描述：少部分肝细胞脂肪变性；
图17附图为本发明实施例1小麦麸皮多酚提取物中剂量组83大鼠肝脏在400倍下的光镜检查结果，镜下观察描述：肝细胞结构基本正常；
图18附图为本发明实施例1小麦麸皮多酚提取物中剂量组84大鼠肝脏在400倍下的光镜检查结果，镜下观察描述：少部分肝细胞脂肪变性；
图19附图为本发明实施例1小麦麸皮多酚提取物中剂量组86大鼠肝脏在400倍下的光镜检查结果，镜下观察描述：少部分肝细胞脂肪变性；
图20附图为本发明实施例1小麦麸皮多酚提取物中剂量组87大鼠肝脏在400倍下的光镜检查结果，镜下观察描述：少部分肝细胞脂肪变性；
图21附图为本发明实施例1小麦麸皮多酚提取物高剂量组91大鼠肝脏在400倍下的光镜检查结果，镜下观察描述：少部分肝细胞脂肪变性；
图22附图为本发明实施例1小麦麸皮多酚提取物高剂量组93大鼠肝脏在400倍下的光镜检查结果，镜下观察描述：少部分肝细胞脂肪变性；
图23附图为本发明实施例1小麦麸皮多酚提取物高剂量组98大鼠肝脏在400倍下的光镜检查结果，镜下观察描述：少部分肝细胞脂肪变性；
图24附图为本发明实施例1小麦麸皮多酚提取物高剂量组99大鼠肝脏在400倍下的光镜检查结果，镜下观察描述：少部分肝细胞脂肪变性。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1
一、试验材料
1.受试物：小麦麸皮多酚提取物
名称/缩写号：小麦麸皮多酚提取物
提供单位：新疆维吾尔自治区分析测试研究院。
制备方法：小麦麸皮多酚提取物是小麦麸皮加入20倍体积的75％医用乙醇，50℃热浸提取两次，每次24小时，过滤、浓缩、冻干待用。
成分鉴定：主要为多酚类(包括多糖、生物碱)，化合物包括：甜菜碱、胆碱、腺苷、亚油酸、5-十七烷基间苯二酚、5-十九烷基间苯二酚、5-二十一烷基问苯二酚、5-二十三烷基间苯二酚、5-二十五烷基问苯二酚、芹菜素。
批号：2021080701。
数量：7.0kg。
性状和保存条件：褐色蜜膏；密闭、-20℃保存。
药物配制方法：临用前采用蒸馏水配制。
2.阳性对照药：Trimethylglycine
名称/缩写号：甜菜碱/TMG。
来源：USA。
批号和规格：SWU446，每粒内容物0.7g。
性状和保存条件：白色胶囊；密闭、阴凉避光处保存。
用法用量：口服。2粒/次，1次/日。
功能主治：保肝、解毒、补充人体半胱氨酸。用于脂肪肝、高血脂症。
配制方法：临用前去除胶囊壳，采用橄榄油配制。
3.1试验动物饲料
鼠饲料(SPF级)：玉米73.5％，麦麸20％，鱼粉5％，谷粉1％，食盐0.5％(正常对照组所用的饲料中剔除麦麸)。新疆医科大学实验动物中心提供，生产许可证号：SCXK(新)2018-0003。
高脂饲料：基础饲料81.5％(上述鼠饲料不加麦麸)，猪油10％，胆固醇2％，蛋黄粉2％，花生4％，胆酸盐0.5％。由新疆医科大学实验动物中心提供。
3.2动物实验室条件
实验室面积：整体实验室120m2；
相对湿度：30～50％；
温度：20～26℃；
照明条件：12h:12h明暗交替照明；
盒内环境：保持盒内环境清洁干燥；
动物饮食：每日添加饲料和饮水；
动物活动：保持动物自由活动。
4.仪器设备
电子天平：常熟市天量仪器有限责任公司，型号LT1000B；
电子天平：北京赛多利斯科学仪器有限公司，型号BS323S；
电子天平：上海佑科仪器仪表有限公司，型号YP5002；
全自动生化分析仪：深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司，型号BS-480；
台式离心机：上海安亭科学仪器厂，型号TDL80-2B；
酶标仪：深圳雷杜生命科学仪器有限公司，型号RT-6100；
紫外分光光度计：日本岛津，型号：UV-2501PC；
高速低温离心机：美国Sigma，型号Sigma 3K30；
智能脱水机：武汉天之瑞医疗科技有限公司，型号TZT-12M；
切片机：莱卡，型号LEICA-RM2016；
包埋机：常州市中威电子仪器有限公司，型号BMJ-A；
超纯水仪：四川沃特实验仪器设备有限公司，型号SC082132；
数显恒温水浴锅：金坛市医疗仪器厂，型号HH-S4。
5.主要试剂
胆固醇：Klontech(医药级)，朋远生物公司，批号：C27H460；
总胆固醇(TC)：深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司产，批号：141621006；
甘油三酯(TG)：深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司产，批号：141721004；
高密度胆固醇(HDL-C)：深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司产，批号：142121007；
丙氨酸氨基转移酶(ALT)：深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司产，批号：140121005；
天门冬氨酸氨基转移酶(AST)：深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司产，批号：140221004；
葡萄糖(GLU)：深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司产，批号：141521009；
碱性磷酸酶(ALP)：深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司产，批号：140321004；
乳酸脱氢酶(LDH)：深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司产，批号：142721003；
总蛋白(TP)：深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司产，批号：140821007；
白蛋白(ALB)：深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司产，批号：148321004；
肌酐(CREA)：深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司产，批号：141121009；
总胆汁酸(TBA)：深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司产，批号：143221004；
尿酸(UA)：深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司产，批号：141221005；
尿素(URE)：深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司产，批号：141321006；
总蛋白(TP)：南京建成生物工程研究所，批号：20220112；
过氧化氢酶(CAT)测试盒：南京建成生物工程研究所，批号：20211111；
丙二醛(MDA)测试盒：南京建成生物工程研究所，批号：20211116；
总超氧化物歧化酶(T-SOD)测试盒：南京建成生物工程研究所，批号：20211116；
总抗氧化能力(T-AOC)测试盒：南京建成生物工程研究所，批号：20211115；
谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)测试盒：南京建成生物工程研究所，批号：20211115；
肿瘤坏死因子(TNF-α)：江莱生物科技有限公司，批号：JL13202；
白介素-1β(IL-1β)：江莱生物科技有限公司，批号：JL20884；
白介素-6(IL-6)：江莱生物科技有限公司，批号：JL20896；
脂蛋白脂酶(LPL)及肝脂酶(HL)：南京建成生物工程研究所，批号：20211116；
瘦素(LEP)：江莱生物科技有限公司，批号：JL12793；
脂联素(ADPN)：江莱生物科技有限公司，批号：JL18310；
无水乙醇：天津市风船化学试剂科技有限公司，批号：20200809；
甲醛：天津市风船化学试剂科技有限公司，批号：20190928；
冰醋酸：天津市北联精细化学品开发有限公司，批号：20201120；
氯仿：天津致远化学试剂有限公司，批号：2021032040。
试验内容
一、肥胖大鼠模型的建立
1肥胖大鼠模型的建立方法：
1.1造模：SD大鼠140只，雌雄兼用，其中随机抽取10只作为正常对照组饲以基础饲料，另130只作为模型组饲以高脂饲料，每周称重一次。造模13周后，眼眶静脉采血，全自动血生化仪测定血清中TC、TG、HDL-C、TP，计算LDL-C，另随机取4只模型组大鼠肝脏组织，10％中性甲醛固定，石蜡包埋，切片，HE染色，进行肝脏组织病理学检查，并按表1进行肝脏组织病理学变化分级及评分判定。
其中，
LDL-C含量＝TC含量－(HDL-C含量+TG含量/2.2)
表1 显微镜下肝组织病理变化分级标准
Figure BDA0003596984190000061
1.2造模结果：
造模期间，正常对照组饲喂基础饲料，模型组饲喂高脂饲料，造模期间，各组大鼠体重均有所增加，与正常对照组比较，模型组大鼠体重前9周增长略低于正常对照组，但统计无差异；其中，在造模第5、6周，模型组雌性大鼠体重均值低于正常对照组(P<0.05)，分析原因可能是造模初期大鼠对高脂饲料不适应所致。造模第12周开始，模型组大鼠体重增长高于正常对照组，其中第12、13、14周模型组雄性大鼠体重均值显著高于正常对照组(P<0.05、P<0.01)。且造模第14周时，模型组雄性大鼠体重均值比正常对照组大鼠体重均值高出130％(见表2～4)。
计算公式：体重增长率％＝(模型组大鼠体重均值-正常对照组体重均值)/正常对照组体重均值
表2 肥胖大鼠造模期间体重数据表(
Figure BDA0003596984190000071
g)(第0～4周)
Figure BDA0003596984190000072
表3 肥胖大鼠造模期间体重数据表(
Figure BDA0003596984190000073
g)(第5～9周)
Figure BDA0003596984190000074
注：与正常对照组比较，*P<0.05
表4 肥胖大鼠造模期间体重数据表(
Figure BDA0003596984190000075
g)(第10～14周)
Figure BDA0003596984190000076
注：与正常对照组比较，*P<0.05、**P<0.01
造模13周后，血清中血生化指标模型组与正常对照组比较，模型组TC、TG、HDL-C水平均显著升高，其中大鼠血清中TG、TC、HDL-C水平有统计学差异(P<0.05、P<0.01)(见表5)。
表5 肥胖大鼠造模期间血生化数据表
Figure BDA0003596984190000077
Figure BDA0003596984190000078
Figure BDA0003596984190000081
注：与正常对照组比较，*P<0.05、**P<0.01
随机取4只模型组大鼠肝脏组织，进行肝脏组织病理学检查，其中少部分肝细胞脂肪变性(3/4例)；偶见炎性细胞浸润灶(1/4例)。
以上体重均值、血液生化学、肝脏组织病理学检查结果提示：肥胖大鼠模型造模成功。
二、肥胖大鼠给药及处理方法：
2.1分组及给药：
造模13周后，筛选成模大鼠50只，根据TC、TG结果，随机分为5组；模型组(蒸馏水5.0ml/kg)，阳性药组(TMG 0.10g/kg)，小麦麸皮多酚提取物低、中、高剂量组(1.50、3.00、6.00g/kg)，每组10只，灌胃给药；另外正常对照组每日蒸馏水灌胃(5.0ml/kg)；连续给药9周。试验结束前12h，禁食不禁水，最后一次给药1h后，乙醚麻醉处死。
2.2观察指标：
2.2.1一般性观察：给药期间进行一般性观察，并记录每周体重变化，测定进食量并计算食物效应比(摄入每克食物造成的体重增加)，直至给药结束。
食物效应比＝体重增加量(g)/饮食量(g)
2.2.2脏器系数及肥胖指数测定：试验结束时，麻醉解剖大鼠，摘取肝脏、肾脏、周围脂肪组织，称重，计算肝脏、肾脏脏器系数、肥胖指数，测量体长并计算Lee’s指数。其余脂肪样品分管-80℃冻存待测。
脏器系数＝脏器重(g)/体重(g)×100％；
肥胖指数＝体脂重(g)/体重(g)×100％；
Figure BDA0003596984190000082
2.2.3血液生化学测定：试验结束前一天，禁食不禁水12h，给药1h后乙醚麻醉动物，腹主动脉取血，分离血清测定血生化指标：总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度胆固醇(HDL-C)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、计算低密度胆固醇(LDL-C)、葡萄糖(GLU)、碱性磷酸酶(ALP)、乳酸脱氢酶(LDH)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、肌酐(CREA)、总胆汁酸(TBA)、尿酸(UA)、尿素(URE)含量。
2.2.4相关指标测定：取一定量肝组织做肝匀浆，依据说明书测定总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH-Px)、丙二醛(MDA)、过氧化氢酶(CAT)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、白介素-1β、6(IL-1β、IL-6)；脂蛋白脂酶(LPL)、肝脂酶(HL)、瘦素(LEP)、脂联素(ADPN)的含量。
2.2.5病理组织学检查：取部分肝脏于10％甲醛固定，石蜡包埋，切片，HE染色，进行组织病理学检查，观察肝组织脂肪变性的程度。
2.2.6数据统计处理方法：所有试验数据均以
Figure BDA0003596984190000091
表示，计量性资料采用单因素方差分析，计数性资料采用χ2检验，P<0.05为具有统计学意义，统计软件为SPSS 25.0版。
三、试验结果：
3.1对肥胖大鼠食物效应比及体重的影响对肥胖大鼠体脂、Lee’s指数、肥胖指数的影响
给药期间，每周称重一次，并测定进食量。正常对照组大鼠精神状况良好，饮食水正常，体重有所增加。模型组大鼠精神状况良好，饮水正常，进食量、体重(P<0.01)高于正常对照组，给药结束时，体重均值、食物效应比高于正常对照组(P<0.05)。给药期间，各给药组大鼠精神状况良好；给药结束时阳性药组，小麦麸皮多酚提取物高、中、低剂量组三个剂量组食物效应比与模型组比较均有所降低，且有统计学差异(P<0.01)；各给药组体重在给药3周内与模型组比较未见统计学差异，自给药第4周开始，小麦麸皮多酚提取物高剂量组体重低于模型组至给药结束(P<0.05)，同时，各给药组大鼠体重增长均滞后于模型组；至给药结束时，各给药组大鼠体重均低于模型组，其中雄性大鼠阳性药组、小麦麸皮多酚提取物高、中、低剂量组有统计学差异(P<0.01)。结果提示：小麦麸皮多酚提取物可降低肥胖大鼠食物效应比，抑制大鼠体重增长。结果见表6、7。
表6 对肥胖大鼠给药期间体重变化的影响(
Figure BDA0003596984190000092
n＝5)
Figure BDA0003596984190000093
Figure BDA0003596984190000101
注：与正常对照组比较，#P<0.05、##P<0.01，与模型组比较，*P<0.05、**P<0.01
表7 对肥胖大鼠给药期间食物效应比变化的影响(
Figure BDA0003596984190000102
n＝5)
Figure BDA0003596984190000103
注：与正常对照组比较，#P<0.05、##P<0.01，与模型组比较，*P<0.05、**P<0.01
3.2对肥胖大鼠体脂、Lee’s指数、肥胖指数的影响
试验结束时，大鼠解剖，测量体长，剥离腹部体脂并称重，计算Lee’s指数、肥胖指数。与正常对照组比较，模型组大鼠体脂、Lee’s指数、肥胖指数均升高，其中雌性大鼠体脂、肥胖指数，雄性大鼠体脂、Lee’s指数、肥胖指数有统计学差异(P<0.05或P<0.01)。与模型组比较，各给药组大鼠体脂、Lee’s指数、肥胖指数均低于模型组，其中小麦麸皮多酚提取物中剂量组雄性、小麦麸皮多酚提取物高剂量组雄性大鼠体脂、Lee’s指数、肥胖指数有统计学差异(P<0.05或P<0.01)；小麦麸皮多酚提取物中剂量组雌性大鼠体脂、肥胖指数低于模型组，且有统计学差异(P<0.05)。结果提示，小麦麸皮多酚提取物中剂量组、小麦麸皮多酚提取物高剂量组可降低肥胖大鼠体脂、Lee’s指数、肥胖指数。结果见表8。
表8 对肥胖大鼠脏器及肥胖指数的影响(
Figure BDA0003596984190000111
n＝5)
Figure BDA0003596984190000112
注：与正常对照组比较，#P<0.05、##P<0.01，与模型组比较，*P<0.05、**P<0.01
3.3对肥胖大鼠肝脏、肾脏重量的影响
试验结束时，大鼠解剖，摘取肝脏、肾脏称重，并计算脏器系数。与正常对照组比较，模型组大鼠肝重显著增加、肝脏系数亦显著增加，有统计学差异(P<0.05)；与模型组比较，各给药组肝重低于模型组，且均有统计差异(P<0.05、P<0.01)；各给药组肝脏系数亦低于模型组，其中阳性药组、小麦麸皮多酚提取物低剂量组、小麦麸皮多酚提取物中剂量组、小麦麸皮多酚提取物高剂量组雌性大鼠有统计学差异(P<0.05)，阳性药组、小麦麸皮多酚提取物中剂量组、小麦麸皮多酚提取物高剂量组雄性大鼠有统计学差异(P<0.05)。与正常对照组比较，模型组雄性大鼠肾脏重量有统计学差异，各给药组与模型组比较无统计学差异。结果提示：小麦麸皮多酚提取物可降低肥胖大鼠肝脏重量及肝脏系数，对肾脏重量及肾脏系数无明显影响。结果见表8。
3.4对肥胖大鼠血生化指标的影响
试验结束前一天，禁食不禁水12h，给药1h后乙醚麻醉动物，腹主动脉取血，分离血清，全自动血生化仪测定血生化指标。
血脂水平的影响：
与正常对照组比较，模型组大鼠血清TG、TC、HDL-C、LDL-C水平均显著升高，有统计学显著差异(P<0.01)。各给药组血清TG、TC、HDL-C、LDL-C水平均低于模型组，其中阳性药组、小麦麸皮多酚提取物低剂量组、小麦麸皮多酚提取物中剂量组、小麦麸皮多酚提取物高剂量组雄性大鼠血清TG、TC、HDL-C、LDL-C显著低于模型组，有统计学差异(P<0.01)；阳性药组、小麦麸皮多酚提取物低剂量组、小麦麸皮多酚提取物中剂量组、小麦麸皮多酚提取物高剂量组雌性大鼠血清TG、TC、LDL-C水平低于模型组，有统计学差异(P<0.01)；阳性药组、小麦麸皮多酚提取物中剂量组、小麦麸皮多酚提取物高剂量组雌性大鼠血清HDL-C水平低于模型组，有统计学显著差异(P<0.01)。
结果提示：小麦麸皮多酚提取物可明显降低肥胖大鼠血清中血脂水平。结果见表9。
表9 对肥胖大鼠血生化指标的影响(
Figure BDA0003596984190000121
n＝5)
Figure BDA0003596984190000122
注：与正常对照组比较，#P<0.05、##P<0.01，与模型组比较，*P<0.05、**P<0.01
对GLU指标的影响：
与正常对照组比较，模型组GLU水平略有降低，但无统计学差异。小麦麸皮多酚提取物中剂量组大鼠GLU水平低于模型组，有统计学差异(P<0.01)。结果见表9。
对ALP、ALT、AST指标的影响：
与正常对照组比较，模型组大鼠血清ALP、ALT、AST水平均显著升高，其中ALP雄性大鼠、ALT、AST雌雄大鼠有统计学差异(P<0.05或P<0.01)。
与模型组比较，阳性药组、小麦麸皮多酚提取物低剂量组雌性大鼠、小麦麸皮多酚提取物中剂量组、小麦麸皮多酚提取物高剂量组，血清ALP、ALT水平水平低于模型组，统计有差异(P<0.05或P<0.01)；小麦麸皮多酚提取物低剂量组雄性、小麦麸皮多酚提取物中剂量组、小麦麸皮多酚提取物高剂量组大鼠，血清AST水平低于模型组，有统计学差异(P<0.05或P<0.01)。
结果提示：小麦麸皮多酚提取物可明显降低肥胖大鼠血清中ALP、ALT、AST水平。结果见表9。
对TBA、CREA、TP、ALB指标的影响：
与正常对照组比较，模型组大鼠TBA水平显著升高，有统计学差异(P<0.05或P<0.01)。而CREA、TP、ALB水平统计无差异。结果见表10。
表10 对肥胖大鼠血生化指标的影响(
Figure BDA0003596984190000131
n＝5)
Figure BDA0003596984190000132
注：与正常对照组比较，#P<0.05、##P<0.01，与模型组比较，*P<0.05、**P<0.01
与模型组比较，阳性药组、小麦麸皮多酚提取物低剂量组、小麦麸皮多酚提取物中剂量组、小麦麸皮多酚提取物高剂量组大鼠，血清TBA水平均降低，有统计学差异(P<0.05或P<0.01)。结果见表10。
与模型组比较，小麦麸皮多酚提取物中剂量组，血清CREA水平均降低，有统计学显著差异(P<0.05或P<0.01)。结果见表10。
与模型组比较，小麦麸皮多酚提取物低剂量组、小麦麸皮多酚提取物中剂量组、小麦麸皮多酚提取物高剂量组均值均低于模型组，其中小麦麸皮多酚提取物中剂量组雄性、小麦麸皮多酚提取物高剂量组雌性大鼠血清TP、ALB水平有统计学差异(P<0.01)。结果见表10。
结果提示：小麦麸皮多酚提取物可明显降低肥胖大鼠血清中TBA、TP、ALB水平。结果见表10。
对LDH、UA、URE指标的影响：
与正常对照组比较，模型组大鼠LDH、UA、URE无统计差异。与模型组比较，小麦麸皮多酚提取物大鼠LDH、UA水平水平无有统计学差异。结果见表10。
3.5对肥胖大鼠肝匀浆中相关指标IL-6、IL-1β、TNF-α、MDA、GSH-PX、CAT、SOD、T-AOC的影响
与正常对照组比较，模型组大鼠肝匀浆中IL-6、IL-1β、TNF-α、MDA水平有所升高，GSH-PX活力有所降低，但统计无差异。结果见表11。
对IL-6水平的影响：各给药组与模型组比较，IL-6水平均有所降低，其中阳性药组、小麦麸皮多酚提取物低剂量组、小麦麸皮多酚提取物中剂量组、小麦麸皮多酚提取物高剂量组大鼠，有统计学差异(P<0.05或P<0.01)。结果见表11。
对IL-1β水平的影响：各给药组与模型组比较，IL-1β水平均有所降低，其中小麦麸皮多酚提取物中剂量组雌性大鼠、有统计学差异(P<0.05或P<0.01)。结果见表11。
对TNF-α水平的影响：各给药组与模型组比较，TNF-α水平均有所降低，其中阳性药组雄性大鼠、小麦麸皮多酚提取物低剂量组雄性大鼠、小麦麸皮多酚提取物中剂量组、小麦麸皮多酚提取物高剂量组大鼠，有统计学差异(P<0.05或P<0.01)。结果见表11。
对MDA水平的影响：各给药组与模型组比较，MDA水平均有所降低，其中阳性药组雄性大鼠，有统计学差异(P<0.05或P<0.01)。结果见表11。
对GSH-PX活力的影响：各给药组与模型组比较，小麦麸皮多酚提取物低剂量组雄性、小麦麸皮多酚提取物中剂量组雄性、小麦麸皮多酚提取物高剂量组雌性大鼠GSH-PX活力均有所升高，有统计学差异(P<0.05或P<0.01)。结果见表11。
对CAT、SOD、T-AOC活力的影响：与正常对照组比较，模型组雌性大鼠CAT、T-AOC水平低于正常对照组，有统计学差异(P<0.05)。与模型组比较，小麦麸皮多酚提取物中剂量组雄性大鼠、小麦麸皮多酚提取物高剂量组雌性大鼠CAT水平高于模型组，统计虽有差异(P<0.05或P<0.01)，但无生物学意义。SOD各组之间无统计学差异。结果见表11、12。
结果提示：小麦麸皮多酚提取物可降低肥胖大鼠肝匀浆中IL-6、IL-1β、TNF-α水平、升高GSH-PX活力。对CAT、SOD、T-AOC活力个别组之间虽有差异，但无统计学意义。提示小麦麸皮多酚提取物具有一定保护肝组织的功能。结果见表11、12。
表11 对肥胖大鼠相关指标的影响(
Figure BDA0003596984190000141
n＝5)
Figure BDA0003596984190000142
Figure BDA0003596984190000151
注：与正常对照组比较，#P<0.05、##P<0.01，与模型组比较，*P<0.05、**P<0.01
3.6对肥胖大鼠肝匀浆中ADPN、LEP、LPL、HL水平的影响
与正常对照组比较，模型组大鼠肝匀浆中ADPN、LEP水平升高，LPL、HL水平降低，其中LEP、LPL、HL水平有统计学差异(P<0.05或P<0.01)。
对ADPN水平的影响：各给药组与模型组比较，ADPN水平均有所降低，其中小麦麸皮多酚提取物低剂量组、小麦麸皮多酚提取物中剂量组、小麦麸皮多酚提取物高剂量组雌性大鼠，有统计学差异(P<0.05或P<0.01)。
对LEP水平的影响：各给药组与模型组比较，LEP水平均有所降低，其中小麦麸皮多酚提取物低剂量组、小麦麸皮多酚提取物中剂量组、小麦麸皮多酚提取物高剂量组大鼠，有统计学差异(P<0.05或P<0.01)。
对LPL、HL水平的影响：各给药组与模型组比较，LPL、HL水平均有所升高，其中小麦麸皮多酚提取物低剂量组、小麦麸皮多酚提取物高剂量组雄性大鼠LPL水平有统计学差异(P<0.05)；小麦麸皮多酚提取物中剂量组雄性大鼠、小麦麸皮多酚提取物高剂量组雄性大鼠HL水平有统计学差异(P<0.01)。
结果提示：小麦麸皮多酚提取物可降低肥胖大鼠肝匀浆中ADPN、LEP水平，升高LPL、HL水平；结果见表12。
表12 对肥胖大鼠相关指标的影响(
Figure BDA0003596984190000152
n＝5)
Figure BDA0003596984190000153
Figure BDA0003596984190000161
注：与正常对照组比较，#P<0.05、##P<0.01，与模型组比较，*P<0.05、**P<0.01
3.7病理诊断结果：
试验结束解剖摘取大鼠肝脏，常规固定、切片染色，光镜检查。结果见表13。部分切片结果见图1～24。
正常对照组(10例)：肝细胞肝小叶结构清楚，肝细胞索排列整齐，肝细胞形态正常，未见变性、坏死等改变(10/10例)。
模型组(10例)：少部分肝细胞脂肪变性(6/10例)；部分肝细胞脂肪变性(4/10例)；偶见炎性细胞浸润灶(2/10例)。
阳性药组(10例)：肝细胞形态正常(2/10例)；少部分肝细胞脂肪变性(6/10例)；部分肝细胞脂肪变性(2/10例)；偶见炎性细胞浸润灶(2/10例)。
小麦麸皮多酚提取物低剂量组(7例)：肝细胞形态正常(0/10例)；少部分肝细胞脂肪变性(7/10例)。
小麦麸皮多酚提取物中剂量组(10例)：肝细胞形态正常(3/10例)；少部分肝细胞脂肪变性(6/10例)；部分肝细胞脂肪变性(1/10例)；偶见炎性细胞浸润灶(1/10例)。
小麦麸皮多酚提取物高剂量组(10例)：肝细胞形态正常(2/10例)；少部分肝细胞脂肪变性(6/10例)；部分肝细胞脂肪变性(2/10例)；偶见炎性细胞浸润灶(3/10例)。
表13 小麦麸皮提取物对高脂血症大鼠降脂作用的影响
Figure BDA0003596984190000162
Figure BDA0003596984190000171
结果表明：正常对照组大鼠病理检查肝细胞形态均正常，模型组部分肝细胞脂肪变性(6/10例)，偶见炎性细胞浸润灶(4/10例)；小麦麸皮多酚提取物中剂量组肝细胞形态3只(2/10)未见病理改变，6只(6/10例)部分肝细胞脂肪变性；小麦麸皮多酚提取物高剂量组肝细胞形态2只(2/10)未见病理改变，6只(6/10例)部分肝细胞脂肪变性；与模型组比较，小麦麸皮多酚中、高剂量组肝细胞脂肪变性程度减轻。结果提示：小麦麸皮多酚提取物可不同程度的减轻高血脂引起的大鼠肝损伤程度。
四、结论：
SD大鼠饲以高脂饲料14周，建立肥胖大鼠模型，给药9周，期间进行一般性观察，每周称重一次，测定进食量，计算Lee’s指数，给药结束后，采血测定血液生化学指标，摘取脂肪计算肥胖指数，肝组织做肝匀浆测定相关指标，并做病理组织学检查。
4.1给药期间，各组大鼠精神状况良好，饮食水正常；至给药结束时，各给药组大鼠食物效应、体脂、Lee’s指数、肥胖指数比、肝重、肝脏系数与模型组比较均有所降低。
4.2试验结束时，小麦麸皮多酚提取物组血清TG、TC、HDL-C、LHL-C、ALP、ALT、AST、TBA、TP、ALB水平低于模型组。小麦麸皮多酚提取物中剂量组血清CREA水平低于模型组；小麦麸皮多酚提取物中剂量组大鼠GLU水平低于模型组。
4.3与模型组比较，IL-1β、IL-6、TNF-α水平小麦麸皮多酚提取物各剂量组大鼠均有所降低，GSH-PX活力均有所升高；SOD各组之间无统计学差异。小麦麸皮多酚提取物各剂量组ADPN、LEP水平均有所降低；小麦麸皮多酚提取物低剂量组、小麦麸皮多酚提取物高剂量组大鼠LPL、HL水平均有所升高。
4.5病理结果显示：小麦麸皮多酚提取物中剂量组肝细胞形态3只(3/10)未见病理改变，小麦麸皮多酚提取物高剂量组肝细胞形态2只(2/10)未见病理改变。
结果表明：小麦麸皮多酚提取物可降低肥胖大鼠食物效应比，抑制大鼠体重增长；降低肥胖大鼠体脂、Lee’s指数、肥胖指数。降低肝脏重量及肝脏系数。可明显降低肥胖大鼠血清中TG、TC、HDL-C、LDL-C、ALP、ALT、AST、TBA水平。降低肝匀浆中ADPN、LEP水平，升高LPL、HL水平。降低肥胖大鼠血清中TP、ALB水平，降低肥胖大鼠肝匀浆中IL-6、IL-1β、TNF-α水平、升高GSH-PX活力。病理结果显示小麦麸皮多酚提取物可不同程度的减轻高血脂引起的肝损伤程度。
结果提示：小麦麸皮多酚提取物可抑制肥胖大鼠肥胖程度，降低血清中血脂水平，减轻肥胖引起的肝损伤程度；对肥胖及肥胖引起的肝损伤有一定的疗效。
本说明书中各个实施例采用递进的方式描述，每个实施例重点说明的都是与其他实施例的不同之处，各个实施例之间相同相似部分互相参见即可。
对所公开的实施例的上述说明，使本领域专业技术人员能够实现或使用本发明。对这些实施例的多种修改对本领域的专业技术人员来说将是显而易见的，本文中所定义的一般原理可以在不脱离本发明的精神或范围的情况下，在其它实施例中实现。因此，本发明将不会被限制于本文所示的这些实施例，而是要符合与本文所公开的原理和新颖特点相一致的最宽的范围。

Claims (10)

1.小麦麸皮多酚提取物在制备降血脂药物中的应用。
2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述降血脂是指降低血清中TG水平。
3.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述降血脂是指降低血清中TC水平。
4.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述降血脂是指降低血清中HDL-C水平。
5.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述降血脂是指降低血清中LHL-C水平。
6.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述降血脂是指降低血清中ALP水平。
7.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述降血脂是指降低血清中ALT水平。
8.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述降血脂是指降低血清中AST水平。
9.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述降血脂是指降低血清中TBA水平。
10.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述小麦麸皮多酚提取物的制备方法如下：小麦麸皮加入20倍体积的75％医用乙醇，50℃热浸提取两次，每次24小时，过滤、浓缩、冻干即可；
所述小麦麸皮多酚提取物包括如下成分：甜菜碱、胆碱、腺苷、亚油酸、5-十七烷基间苯二酚、5-十九烷基间苯二酚、5-二十一烷基问苯二酚、5-二十三烷基间苯二酚、5-二十五烷基问苯二酚和芹菜素。
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Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH06340532A (ja) * 1993-06-01 1994-12-13 Nippon Beet Sugar Mfg Co Ltd 血中脂質の上昇抑制又は低減剤

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