CN114652669B - 一种具有清火抗敏作用的牙膏及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提出了一种具有清火抗敏作用的牙膏及其制备方法，属于牙膏技术领域，将田七、大黄、薄荷叶混合后经过水加热提取，得到水提取物；滤渣酶解，得到酶解产物，将水提取物加入发酵培养基中，接种有益菌发酵培养，得到发酵产物；将β‑葡聚糖酶、生物溶菌蛋白酶混合得到生物酶制剂；将低聚木糖、大豆低聚糖和异麦芽酮糖混合得到益生元；将发酵产物、酶解产物、生物酶制剂、益生元和抗敏组合物混合得到活性组分后，包裹于微胶囊内，与保湿剂、甜味剂、摩擦剂、增稠剂、发泡剂、芳香剂混匀制备成具有清火抗敏作用的牙膏。本发明牙膏能起到抑制有害菌群的生长，抗敏镇痛，起到很好的止血镇痛、消炎抑菌、改善牙龈血液微循环等效果。
Description
技术领域
本发明涉及牙膏技术领域，具体涉及一种具有清火抗敏作用的牙膏及其制备方法。
背景技术
牙膏是日常生活中常用的清洁用品，其基本功能在于清洁牙齿、清新口气，保持口腔清洁。随着全球环保和保健意识的增强，人们对牙膏的要求也越来越高，要求其在具有一定功效和使用方便的同时，确保对人体无毒，对环境无害。
富有中国传统特色的中草药牙膏以其绿色天然、安全、功效独特的优势顺应了现代人追求健康、崇尚自然的消费观念，成为牙膏行业发展的亮点。中草药牙膏是在普通牙膏的基础上添加了某些中草药提取物，具有清热解毒、消炎止血作用的药物，对缓解牙龈炎症有一定辅助作用。
近几年来，中草药牙膏发展较快，其种类繁多，功能各异。但中草药牙膏通常含有生物碱和刺激性强的物质，长期使用，可能损害口腔粘膜，还可能因长期不断的刺激，引起牙龈炎、口腔炎、舌炎等。由于口腔环境比较特殊，如果牙膏的药物成份本来就是专业的口喉用药，则可避免对口腔粘膜的刺激。中草药牙膏中选择本来就是口腔用药的药物，将更适合口腔环境，可以更专业解决牙龈肿痛、口腔溃疡、牙龈萎缩等口腔问题。
中国专利201210584585.7中公开了一种可同时清洁美白修复牙齿的牙膏，所述牙膏含有羟基磷灰石、珍珠岩、摩擦剂和牙膏可接受的辅料。该发明所述牙膏，同时含有羟基磷灰石和珍珠岩，羟基磷灰石和珍珠岩复配后产生协同作用，通过摩擦剂清除口腔污垢与细菌，除了能够修复牙釉质外，还能够打磨牙齿表面凹凸面，达到抛光亮白的目的，能够同时对牙齿实现清洁、修复和美白的目的，功能丰富，能够满足广大消费者的需求。该专利主要对牙齿的清洁作用，并没有对消炎、抗过敏进行关注，另外其公开使用的摩擦剂为单一摩擦型二氧化硅，其对牙齿依然具有一定程度的磨损。
中国专利201710789677.1中公开了一种美白牙膏及其制备方法，所述的美白牙膏包含植酸钠和三聚磷酸钠，所述植酸钠和三聚磷酸钠的质量之和与所述牙膏的质量的百分比为0.5-10％，且所述植酸钠与三聚磷酸钠的质量比为1:1-1:7。该发明的牙膏中加入了多种有效成分，它们通过协同效应，让牙膏中各有效成分的作用得到最大程度的发挥，并解决有效活性成分的配伍性及其带来的膏体结粒、粗糙、易分离出液体、脱壳等问题，从而达到清洁除渍，提高牙面光洁度，减少色素和污渍在牙面上的再次形成，有效增强牙膏美白作用的目的，并没有对消炎、抗过敏进行关注，同样该申请中公开使用的摩擦剂为单一高清洁型二氧化硅，会对牙齿有一定程度的磨损。
发明内容
本发明的目的在于提出一种具有清火抗敏作用的牙膏及其制备方法，将活性组分制备成微胶囊制剂，加入牙膏其他组分中，能够将有效成分包裹起来，避免其与空气直接接触而发生氧化或被降解，直至牙膏被挤出后，在牙膏摩擦剂的作用下，使用者在往复摩擦的过程中，微胶囊被压迫使得活性组分溶出，其益生元、有益菌部分留在口腔中，起到抑制有害菌群的生长，抗敏组合物能附着在牙齿上，起到很好的抗敏镇痛、安定作用，从而使牙本质敏感症状缓解，甚至消失，其他活性组分在刷牙的过程中接触到牙龈部分，起到很好的止血镇痛、消炎抑菌、改善牙龈血液微循环等效果，从而，制得的牙膏具有较好的清火、消炎、抗敏的功效，具有广阔的应用前景。
本发明的技术方案是这样实现的：
本发明提供一种具有清火抗敏作用的牙膏的制备方法，将田七、大黄、薄荷叶混合制粉后经过水加热提取，得到水提取物；其中，滤渣酶解，得到酶解产物，然后将所述水提取物加入发酵培养基中，接种凝结芽孢杆菌、酿酒酵母菌和副干酪乳杆菌进行发酵培养，得到发酵产物；另外，将β-葡聚糖酶、生物溶菌蛋白酶混合得到生物酶制剂；将低聚木糖、大豆低聚糖和异麦芽酮糖混合得到益生元；将所述发酵产物、所述酶解产物、所述生物酶制剂、所述益生元和抗敏组合物混合得到活性组分后，将所述活性组分包裹于海藻酸钠和氯化钙形成的微胶囊内，与保湿剂、甜味剂、摩擦剂、增稠剂、发泡剂、芳香剂混匀制备成具有清火抗敏作用的牙膏。
作为本发明的进一步改进，包括以下步骤：
S1.中药组合物的制备：将田七、大黄、薄荷叶分别洗净，干燥，粉碎后混合，得到中药粉，加入水中，加热提取，过滤，滤渣留用，滤液干燥，得到水提取物；
S2.酶解：将步骤S1的滤渣加入水中，加入纤维素酶和蛋白酶，酶解，过滤，滤渣留用，滤液冷冻干燥，得到酶解产物；
S3.益生菌种子液的培养：将凝结芽孢杆菌、酿酒酵母菌和副干酪乳杆菌分别接种到高氏培养基中，培养，分别培养成菌种种子液；
S4.发酵培养基的制备：将步骤S1中水提取物、碳源、水溶性氮源、维生素、无机盐用无菌水溶解，用PBS溶液调节培养基pH值，灭菌备用；
S5.生物酶制剂的制备：将β-葡聚糖酶、生物溶菌蛋白酶混合均匀，加入保护剂，得到生物酶制剂；
S6.益生菌发酵产物：将步骤S3制得的菌种种子液依次接种到步骤S4制得的发酵培养基中进行发酵培养，得到益生菌发酵产物；
S7.益生元的制备：将低聚木糖、大豆低聚糖和异麦芽酮糖混合粉碎，得到益生元；
S8.活性组分的制备：将步骤S2制得的酶解产物、步骤S5制得的生物酶制剂、步骤S6制得的益生菌发酵产物、步骤S7制得的益生元和抗敏组合物混合均匀，得到活性组分；
S9.缓释微胶囊的制备：将步骤S8制得的活性组分加入含有海藻酸钠的水溶液中，混合均匀，得到水相；将亲油乳化剂加入食用油中，得到油相；将水相和油相混合，高速乳化，形成乳液，滴加氯化钙溶液，常温固化，过滤，干燥，得到缓释微胶囊；
S10.具有清火抗敏作用的牙膏的制备：将保湿剂、甜味剂溶于水中，加入摩擦剂、增稠剂混匀，然后加入发泡剂、芳香剂、步骤S9制得的缓释微胶囊，混匀后脱气，得到所述具有清火抗敏作用的牙膏。
作为本发明的进一步改进，步骤S1中所述田七、大黄、薄荷叶的质量比为 10：(3-5)：(1-2)；所述加热至温度为90-100℃，提取时间为3-5h；步骤S2 中所述滤渣、纤维素酶和蛋白酶的质量比为100：(5-10)：(2-4)；所述酶解条件为35-45℃，酶解时间为2-4h；所述蛋白酶选自木瓜蛋白酶、无花果蛋白酶、菠萝蛋白酶中的至少一种。
作为本发明的进一步改进，步骤S3中所述凝结芽孢杆菌、酿酒酵母菌和副干酪乳杆菌的质量比为(3-5)：(1-3)：(2-5)；所述培养条件为35-40℃，培养时间为24-30h；所述菌种种子液中含菌量为108-109cfu/mL；步骤S4中所述水提取物、碳源、水溶性氮源、维生素、无机盐和无菌水的质量比为(5-10)： (7-12)：(3-5)：(0.1-1)：(0.5-2)：100；所述碳源选自葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖、果糖、水溶性淀粉中的一种或几种混合；所述水溶性氮源选自尿素、硝酸盐、铵盐、氨基酸中的至少一种；所述硝酸盐选自硝酸钠、硝酸钾、硝酸铵、硝酸铜、硝酸锰、硝酸镁、硝酸锌中的至少一种；所述铵盐选自氯化铵、硫酸铵中的至少一种；所述氨基酸选自苯丙氨酸、丝氨酸、赖氨酸、苏氨酸、甘氨酸、缬氨酸、色氨酸、亮氨酸、丙氨酸、半胱氨酸、甲硫氨酸、异亮氨酸中的至少一种；所述维生素选自维生素C、维生素B1、维生素B2、维生素B6、维生素B12、维生素A、维生素K、维生素D、叶酸、泛酸中的至少一种；所述无机盐选自氯化钠、氯化钾、氯化钙、硫酸镁、氯化铁、硫酸锌、硫酸铜、硫酸锰、氯化锌、氯化铜、氯化锰中的至少一种；所述调节培养基pH值为6.9-7.2，所述灭菌方法为紫外线灭菌或60Co灭菌。
作为本发明的进一步改进，步骤S5中所述β-葡聚糖酶、生物溶菌蛋白酶、保护剂的质量比为(3-5)：10：(1-2)；所述生物溶菌蛋白酶选自植物油溶菌酶、动物源溶菌酶或微生物溶菌酶的至少一种，所述动物源溶菌酶选自鸡蛋蛋清溶菌酶、人溶菌酶、牛溶菌酶、马溶菌酶、羊溶菌酶中的至少一种；所述植物源溶菌酶选自木瓜溶菌酶、无花果溶菌酶、大麦溶菌酶中的至少一种；所述保护剂选自复合酶稳定剂AES、复合酶保护剂AFP、复合酶稳定剂DPD、复合蛋白保护剂DP4、复合蛋白保护剂HPD，均购于Seebio公司；步骤S6中所述凝结芽孢杆菌、酿酒酵母菌和副干酪乳杆菌菌种种子液的接种量分别为2-4％、1-3％和 2-5％；所述发酵培养条件为36-40℃，300-500r/min，发酵培养48-72h。
作为本发明的进一步改进，步骤S7中所述低聚木糖、大豆低聚糖和异麦芽酮糖的质量比为(10-15)：(3-5)：(2-7)；步骤S8中所述酶解产物、生物酶制剂、益生菌发酵产物、益生元和抗敏组合物的质量比为(7-12)：(1-3)：(5-10)：(2-5)：(1-3)；所述抗敏组合物选自氟化钠、氟化锶、氟化钾、氯化钠、氯化钾中的至少一种；优选地，为氟化锶和氯化钠的组合物，质量比为 (2-3)：(7-12)。
作为本发明的进一步改进，步骤S9中所述含有海藻酸钠的水溶液中海藻酸钠的含量为15-25wt％；所述活性组分在水相中的含量为12-20wt％；所述亲油乳化剂选自司盘-20、司盘-40、司盘-60、司盘-80中的至一种；所述食用油选自大豆油、玉米油、菜籽油、橄榄油、亚麻籽油、花生油中的至少一种；所述亲油乳化剂在油相中的含量为2-5wt％；所述水相和油相的质量比为10：(17-22)；所述高速乳化条件为12000-15000r/min乳化3-5min；所述固化时间为30-60min。
作为本发明的进一步改进，步骤S10中所述保湿剂选自1,3-丁二醇、山梨醇、木糖醇、甘油和聚乙二醇中的至少一种；所述甜味剂为糖精或/和香精；所述摩擦剂选自二氧化硅、碳酸钙、二水磷酸氢钙、方解石粉、无水焦磷酸钙、氢氧化铝中的至少一种；所述增稠剂选自羧甲基纤维素钠、纤维素胶、黄原胶和卡拉胶中的至少一种；所述发泡剂选自十二烷基硫酸钠、月桂醇硫酸酯钠、椰油酰胺丙基甜菜碱中的至少一种；所述芳香剂选自天然香料、合成香料或香精；所述缓释微胶囊、保湿剂、甜味剂、摩擦剂、增稠剂、发泡剂、芳香剂和水的质量比为(5-12)： (15-22)：(1-2)：(45-52)：(1-5)：(2-4)：(0.5-1)：(20-30)。
作为本发明的进一步改进，具体包括以下步骤：
S1.中药组合物的制备：将10重量份田七、3-5重量份大黄、1-2重量份薄荷叶分别洗净，干燥，粉碎后混合，得到中药粉，加入水中，加热至90-100℃提取 3-5h，过滤，滤渣留用，滤液干燥，得到水提取物；
S2.酶解：将100重量份步骤S1的滤渣加入水中，加入5-10重量份纤维素酶和2-4重量份蛋白酶，35-45℃酶解2-4h，过滤，滤渣留用，滤液冷冻干燥，得到酶解产物；
S3.益生菌种子液的培养：将3-5重量份凝结芽孢杆菌、1-3重量份酿酒酵母菌和2-5重量份副干酪乳杆菌分别接种到高氏培养基中，35-40℃培养24-30h，分别培养成菌种种子液，含菌量为108-109cfu/mL；
S4.发酵培养基的制备：将5-10重量份步骤S1中水提取物、7-12重量份碳源、 3-5重量份水溶性氮源、0.1-1重量份维生素、0.5-2重量份无机盐用100重量份无菌水溶解，用PBS溶液调节培养基pH值至6.9-7.2，紫外线灭菌或60Co灭菌备用；
S5.生物酶制剂的制备：将3-5重量份β-葡聚糖酶、10重量份生物溶菌蛋白酶混合均匀，加入1-2重量份保护剂，得到生物酶制剂；
S6.益生菌发酵产物：将步骤S3制得的凝结芽孢杆菌、酿酒酵母菌和副干酪乳杆菌菌种种子液依次接种到步骤S4制得的发酵培养基中，接种量分别为2-4％、 1-3％和2-5％，温度为36-40℃，转速为300-500r/min，发酵培养48-72h，得到益生菌发酵产物；
S7.益生元的制备：将10-15重量份低聚木糖、3-5重量份大豆低聚糖和2-7 重量份异麦芽酮糖混合粉碎，得到益生元；
S8.活性组分的制备：将7-12重量份步骤S2制得的酶解产物、1-3重量份步骤S5制得的生物酶制剂、5-10重量份步骤S6制得的益生菌发酵产物、2-5重量份步骤S7制得的益生元、1-3重量份抗敏组合物混合均匀，得到活性组分；所述抗敏组合物为氟化锶和氯化钠的组合物，质量比为(2-3)：(7-12)；
S9.缓释微胶囊的制备：将步骤S8制得的活性组分加入含有15-25wt％海藻酸钠的水溶液中，混合均匀，得到水相，所述活性组分在水相中的含量为12-20wt％；将亲油乳化剂加入食用油中，得到油相，所述亲油乳化剂在油相中的含量为 2-5wt％；将10重量份水相和17-22重量份油相混合，12000-15000r/min乳化 3-5min，形成乳液，滴加氯化钙溶液，常温固化30-60min，过滤，干燥，得到缓释微胶囊；
S10.具有清火抗敏作用的牙膏的制备：将15-22重量份保湿剂、1-2重量份甜味剂溶于20-30重量份水中，搅拌10-30min，加入45-52重量份摩擦剂、1-5重量份增稠剂混匀，然后加入2-4重量份发泡剂、0.5-1重量份芳香剂、5-12重量份步骤S9制得的缓释微胶囊，搅拌20-40min，混匀后脱气，得到所述具有清火抗敏作用的牙膏。
本发明进一步保护一种上述的制备方法制得的具有清火抗敏作用的牙膏。
本发明具有如下有益效果：本发明添加的田七、大黄和薄荷叶经过水提取后，得到的水提取物含有丰富的三七总皂苷、三七多糖、三七素、薄荷醇、大黄素、有机醇类、有机酸类等，具有良好的止血镇痛、消炎抑菌、抗氧化、清除自由基、改善牙龈血液微循环等效果，进一步滤渣经过复合酶酶解，复合酶包括纤维素酶和蛋白酶，通过纤维素酶将田七、大黄、薄荷叶的细胞壁酶解，其活性物质得到大量的释放，同时其蛋白质物质被酶解，得到的酶解产物中含有丰富的氨基酸、短肽、单糖、寡糖、薄荷酮、黄酮类化合物、薄荷脑、异薄荷酮、蒽类衍生物、苷类化合物、鞣质类、挥发油等，具有清新口气、清凉口感、清火解热、消炎抗菌、滋养牙龈、活血止痛等效果；
牙本质过敏是由于牙本质外露、牙本质小管开放造成的，降低牙本质的通透性是治疗牙本质过敏的理论依据，主要是防治牙齿对冷、热、酸、甜等出现的过敏性疼痛。本发明抗敏组合物包括氟化锶和氯化钠的混合物，其中，氟离子作用在过敏牙本质上，加强牙本质继续钙化，或产生更多牙本质，减小牙本质小管的直径，减小液压传导，锶离子能被牙釉、牙本质吸收，生成碳酸锶、氢氧化锶等沉淀物，降低牙体硬组织的渗透性，提高牙组织的缓冲作用，减少龈缘牙周组织对刺激性物质或不良刺激如酸、甜、冷、热的敏感性，达到脱敏镇痛效应。同时，锶离子又能与牙周组织密切结合，增强牙组织的防病能力，达到脱敏效果。直接作用于牙本质神经末梢，起到镇痛、安定作用，从而使牙本质敏感症状缓解，甚至消失。氯化钠的添加能有效提高口腔盐浓度，提高渗透压，使得有害菌失水收缩，从而有效抑制有害菌繁殖；氟化锶和氯化钠的添加具有协同增效的作用。
有害菌是对口腔造成不利环境的细菌的总称，包括变异链球菌、远缘链球菌以及具核梭杆菌等。这些有害菌在口腔中，能将口腔中残留的食物残渣分解成酸，或者其他有害物质，腐蚀牙齿和牙龈，甚至还会释放硫化氢气体，导致口腔产生口臭。本发明牙膏中添加了大量的益生菌，包括凝结芽孢杆菌、酿酒酵母菌和副干酪乳杆菌，在口腔中形成优势菌群，具有协同增效的作用，通过与口腔中有害菌竞争黏膜表面的结合位点，减少有害菌的定植，并分泌有机酸、过氧化氢和细菌素等各种抗菌物质，抑制致病菌的生长，达到平衡口腔菌群，降低口腔挥发性硫化物的产生，清洗口气，预防口臭和口腔疾病，另外，益生菌还可以降低口腔 pH值，防止牙菌斑和牙结石的形成，抑制有害菌群，减少牙周病的发生，避免牙龈炎、牙周过敏等情况，从而维护牙周健康。
本发明活性组分中还添加了益生元，包括低聚木糖、大豆低聚糖和异麦芽酮糖，能够残留在口腔部分位点，通过选择性的刺激有益菌菌落，包括本发明中添加的凝结芽孢杆菌、酿酒酵母菌和副干酪乳杆菌的生长，从而加强有益菌的菌群优势，进一步弱化有害菌群，降低有害菌群对口腔的不利影响，从而进一步起到改善口腔健康的作用；
本发明活性组分中还添加了生物酶制剂，包括生物溶菌蛋白酶和β-葡聚糖酶，其中，生物溶菌蛋白酶能高效的水解有害菌的细胞壁，通过催化细菌细胞壁肽聚糖中N-乙酰氨基葡糖与N-乙酰胞壁酸之间的1,4-β-糖苷键水解，从而使得选择地抑制甚至杀灭有害菌；另一方面，β-葡聚糖酶能高效催化葡聚糖分解，从而防止链球菌突变体附于牙齿上，进而减少有害菌在口腔、牙齿上的滋生，降低口腔中有害菌的数量，从而避免引起口腔炎症、过敏等症状的出现。两种酶一方面酶解有害细菌细胞壁，一方面防止糖类物质附着于牙齿上，减少细菌滋生，两者协同作用下，能明显降低口腔中有害菌的数量，从而保护牙齿。
本发明将活性组分制备成微胶囊制剂，加入牙膏其他组分中，能够将有效成分包裹起来，避免其与空气直接接触而发生氧化或被降解，直至牙膏被挤出后，在牙膏摩擦剂的作用下，使用者在往复摩擦的过程中，微胶囊被压迫使得活性组分溶出，其益生元、有益菌部分留在口腔中，起到抑制有害菌群的生长，抗敏组合物能附着在牙齿上，起到很好的抗敏镇痛、安定作用，从而使牙本质敏感症状缓解，甚至消失，其他活性组分在刷牙的过程中接触到牙龈部分，起到很好的止血镇痛、消炎抑菌、改善牙龈血液微循环等效果，从而，制得的牙膏具有较好的清火、消炎、抗敏的功效，具有广阔的应用前景。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动性的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1为本发明测试例2中各组变异链球菌的生长曲线图；
图2为本发明测试例2中各组远缘链球菌的生长曲线图。
具体实施方式
下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
纤维素酶，酶活力10000U/g，木瓜蛋白酶，型号夏盛FDG-4703，β-葡聚糖酶，酶活力10000U/g，型号夏盛SDG-2401，购于夏盛(北京)生物科技开发有限公司；无花果蛋白酶，来源于无花果树乳胶，购于上海阿拉丁生化科技股份有限公司；鸡蛋蛋清溶菌酶，酶活力2000U/mg，购于南宁庞博生物工程有限公司。
凝结芽孢杆菌，100亿CFU/g，购于欧克拜克生物；酿酒酵母菌，200亿CFU/g，购于潍坊益昊生物技术有限公司；副干酪乳杆菌，为副干酪乳杆菌JLPF-176，100 亿CFU/g，购于山东中科嘉亿生物工程有限公司。
低聚木糖，干物质含量大于70％，异麦芽酮糖，购于明瑞集团(河南)有限公司；大豆低聚糖，有效物质含量大于99％，购于山东骄阳生物科技有限公司，糖精钠，购于河南美之洁食品添加剂有限公司；柠檬香精，有效物质含量大于 99％，相对密度为0.91-1.12，购于上海朗枫香料有限公司。
复合酶稳定剂AES和复合蛋白保护剂HPD，购于Seebio公司。
实施例1
本实施例提供一种具有清火抗敏作用的牙膏，具体包括以下步骤：
S1.中药组合物的制备：将10重量份田七、3重量份大黄、1重量份薄荷叶分别洗净，干燥，粉碎后混合，得到中药粉，加入200重量份水中，加热至90℃提取3h，过滤，滤渣留用，滤液于70℃烘箱干燥2h，得到水提取物；
S2.酶解：将100重量份步骤S1的滤渣加入200重量份水中，加入5重量份纤维素酶和2重量份木瓜蛋白酶，35℃酶解2h，过滤，滤渣留用，滤液冷冻干燥，得到酶解产物；
S3.益生菌种子液的培养：将3重量份凝结芽孢杆菌、1重量份酿酒酵母菌和 2重量份副干酪乳杆菌分别接种到高氏培养基中，35℃培养24h，分别培养成菌种种子液，含菌量为108cfu/mL；
S4.发酵培养基的制备：将5重量份步骤S1中水提取物、5重量份葡萄糖、2 重量份蔗糖、2重量份尿素、1重量份硝酸钠、0.1重量份维生素C、0.1重量份氯化钙、0.1重量份硫酸镁、0.1重量份氯化铁、0.1重量份硫酸锌、0.1重量份硫酸铜用100重量份无菌水溶解，用PBS溶液调节培养基pH值至6.9，紫外线灭菌备用；
S5.生物酶制剂的制备：将3重量份β-葡聚糖酶、10重量份鸡蛋蛋清溶菌酶混合均匀，加入1重量份复合蛋白保护剂HPD，得到生物酶制剂；
S6.益生菌发酵产物：将步骤S3制得的凝结芽孢杆菌、酿酒酵母菌和副干酪乳杆菌菌种种子液依次接种到步骤S4制得的发酵培养基中，接种量分别为2％、 1％和2％，温度为36℃，转速为300r/min，发酵培养48h，得到益生菌发酵产物；
S7.益生元的制备：将10重量份低聚木糖、3重量份大豆低聚糖和2重量份异麦芽酮糖混合粉碎，得到益生元；
S8.活性组分的制备：将7重量份步骤S2制得的酶解产物、1重量份步骤S5 制得的生物酶制剂、5重量份步骤S6制得的益生菌发酵产物、2重量份步骤S7 制得的益生元、1重量份抗敏组合物混合均匀，得到活性组分；所述抗敏组合物为氟化锶和氯化钠的组合物，质量比为2：7；
S9.缓释微胶囊的制备：将步骤S8制得的活性组分加入含有15wt％海藻酸钠的水溶液中，混合均匀，得到水相，所述活性组分在水相中的含量为12wt％；将亲油乳化剂加入大豆油中，得到油相，所述亲油乳化剂在油相中的含量为2wt％；将10重量份水相和17重量份油相混合，12000r/min乳化3min，形成乳液，滴加 15重量份5wt％的氯化钙溶液，常温固化30min，过滤，70℃干燥3h，得到缓释微胶囊；
S10.具有清火抗敏作用的牙膏的制备：将10重量份1,3-丁二醇、5重量份木糖醇、1重量份糖精钠溶于20重量份水中，搅拌10min，加入25重量份碳酸钙、 20重量份二水磷酸氢钙、1重量份黄原胶混匀，然后加入2重量份椰油酰胺丙基甜菜碱、0.5重量份柠檬香精、5重量份步骤S9制得的缓释微胶囊，搅拌20min，混匀后脱气，得到所述具有清火抗敏作用的牙膏。
实施例2
本实施例提供一种具有清火抗敏作用的牙膏，具体包括以下步骤：
S1.中药组合物的制备：将10重量份田七、5重量份大黄、2重量份薄荷叶分别洗净，干燥，粉碎后混合，得到中药粉，加入200重量份水中，加热至100℃提取5h，过滤，滤渣留用，滤液于70℃烘箱干燥2h，得到水提取物；
S2.酶解：将100重量份步骤S1的滤渣加入200重量份水中，加入10重量份纤维素酶和4重量份无花果蛋白酶，45℃酶解4h，过滤，滤渣留用，滤液冷冻干燥，得到酶解产物；
S3.益生菌种子液的培养：将5重量份凝结芽孢杆菌、3重量份酿酒酵母菌和 5重量份副干酪乳杆菌分别接种到高氏培养基中，40℃培养30h，分别培养成菌种种子液，含菌量为109cfu/mL；
S4.发酵培养基的制备：将10重量份步骤S1中水提取物、10重量份葡萄糖、2重量份乳糖、3重量份尿素、1重量份硝酸钠、1重量份硝酸钾、0.7重量份维生素C、0.2重量份维生素B1、0.1重量份维生素A、1.5重量份氯化钠、0.2重量份氯化锌、0.2重量份氯化铜、01.重量份氯化锰用100重量份无菌水溶解，用PBS 溶液调节培养基pH值至7.2，60Co灭菌备用；
S5.生物酶制剂的制备：将5重量份β-葡聚糖酶、10重量份鸡蛋蛋清溶菌酶混合均匀，加入2重量份复合蛋白保护剂HPD，得到生物酶制剂；
S6.益生菌发酵产物：将步骤S3制得的凝结芽孢杆菌、酿酒酵母菌和副干酪乳杆菌菌种种子液依次接种到步骤S4制得的发酵培养基中，接种量分别为4％、 3％和5％，温度为40℃，转速为500r/min，发酵培养72h，得到益生菌发酵产物；
S7.益生元的制备：将15重量份低聚木糖、5重量份大豆低聚糖和7重量份异麦芽酮糖混合粉碎，得到益生元；
S8.活性组分的制备：将12重量份步骤S2制得的酶解产物、3重量份步骤 S5制得的生物酶制剂、10重量份步骤S6制得的益生菌发酵产物、5重量份步骤 S7制得的益生元、3重量份抗敏组合物混合均匀，得到活性组分；所述抗敏组合物为氟化锶和氯化钠的组合物，质量比为3：12；
S9.缓释微胶囊的制备：将步骤S8制得的活性组分加入含有25wt％海藻酸钠的水溶液中，混合均匀，得到水相，所述活性组分在水相中的含量为20wt％；将亲油乳化剂加入食用油中，得到油相，所述亲油乳化剂在油相中的含量为5wt％；将10重量份水相和22重量份油相混合，15000r/min乳化5min，形成乳液，滴加 15重量份10wt％氯化钙溶液，常温固化60min，过滤，70℃干燥3h，得到缓释微胶囊；
S10.具有清火抗敏作用的牙膏的制备：将10重量份木糖醇、12重量份甘油、2重量份糖精钠溶于30重量份水中，搅拌30min，加入52重量份二氧化硅、5 重量份羧甲基纤维素钠混匀，然后加入4重量份椰油酰胺丙基甜菜碱、1重量份柠檬香精、12重量份步骤S9制得的缓释微胶囊，搅拌40min，混匀后脱气，得到所述具有清火抗敏作用的牙膏。
实施例3
本实施例提供一种具有清火抗敏作用的牙膏，具体包括以下步骤：
S1.中药组合物的制备：将10重量份田七、4重量份大黄、1.5重量份薄荷叶分别洗净，干燥，粉碎后混合，得到中药粉，加入200重量份水中，加热至95℃提取4h，过滤，滤渣留用，滤液于70℃烘箱干燥2h，得到水提取物；
S2.酶解：将100重量份步骤S1的滤渣加入200重量份水中，加入7重量份纤维素酶和3重量份无花果蛋白酶，40℃酶解3h，过滤，滤渣留用，滤液冷冻干燥，得到酶解产物；
S3.益生菌种子液的培养：将4重量份凝结芽孢杆菌、2重量份酿酒酵母菌和 3.5重量份副干酪乳杆菌分别接种到高氏培养基中，37℃培养28h，分别培养成菌种种子液，含菌量为109cfu/mL；
S4.发酵培养基的制备：将7重量份步骤S1中水提取物、7重量份葡萄糖、2 重量份果糖、1重量份乳糖、2重量份尿素、1重量份苯丙氨酸、1重量份丝氨酸、 0.4重量份维生素C、0.1重量份维生素A、0.3重量份重量份氯化钾、0.2重量份氯化钙、0.1重量份硫酸镁、0.2重量份氯化铁、0.2重量份硫酸锌用100重量份无菌水溶解，用PBS溶液调节培养基pH值至7.1，紫外线灭菌备用；
S5.生物酶制剂的制备：将4重量份β-葡聚糖酶、10重量份鸡蛋蛋清溶菌酶混合均匀，加入1.5重量份复合酶稳定剂AES，得到生物酶制剂；
S6.益生菌发酵产物：将步骤S3制得的凝结芽孢杆菌、酿酒酵母菌和副干酪乳杆菌菌种种子液依次接种到步骤S4制得的发酵培养基中，接种量分别为3％、 2％和3.5％，温度为38℃，转速为400r/min，发酵培养56h，得到益生菌发酵产物；
S7.益生元的制备：将12重量份低聚木糖、4重量份大豆低聚糖和5重量份异麦芽酮糖混合粉碎，得到益生元；
S8.活性组分的制备：将10重量份步骤S2制得的酶解产物、2重量份步骤 S5制得的生物酶制剂、7重量份步骤S6制得的益生菌发酵产物、3.5重量份步骤 S7制得的益生元、2重量份抗敏组合物混合均匀，得到活性组分；所述抗敏组合物为氟化锶和氯化钠的组合物，质量比为2.5：10；
S9.缓释微胶囊的制备：将步骤S8制得的活性组分加入含有20wt％海藻酸钠的水溶液中，混合均匀，得到水相，所述活性组分在水相中的含量为17wt％；将亲油乳化剂加入食用油中，得到油相，所述亲油乳化剂在油相中的含量为3.5wt％；将10重量份水相和20重量份油相混合，13500r/min乳化4min，形成乳液，滴加 10重量份7wt％氯化钙溶液，常温固化45min，过滤，70℃干燥3h，得到缓释微胶囊；
S10.具有清火抗敏作用的牙膏的制备：将10重量份聚乙二醇、5重量份1,3- 丁二醇、2重量份甘油、1.5重量份糖精钠溶于25重量份水中，搅拌20min，加入20重量份碳酸钙、27重量份二氧化硅、3重量份黄原胶混匀，然后加入3重量份椰油酰胺丙基甜菜碱、0.7重量份柠檬香精、8重量份步骤S9制得的缓释微胶囊，搅拌30min，混匀后脱气，得到所述具有清火抗敏作用的牙膏。
实施例4
与实施例3相比，抗敏组合物为单一的氟化锶，其他条件均不改变。
实施例5
与实施例3相比，抗敏组合物为单一的氯化钠，其他条件均不改变。
实施例6
与实施例3相比，步骤S2中只添加了纤维素酶，其他条件均不改变。
步骤S2具体步骤如下：
S2.酶解：将100重量份步骤S1的滤渣加入200重量份水中，加入10重量份纤维素酶，40℃酶解3h，过滤，滤渣留用，滤液冷冻干燥，得到酶解产物。
实施例7
与实施例3相比，步骤S2中只添加了无花果蛋白酶，其他条件均不改变。
步骤S2具体步骤如下：
S2.酶解：将100重量份步骤S1的滤渣加入200重量份水中，加入10重量份无花果蛋白酶，40℃酶解3h，过滤，滤渣留用，滤液冷冻干燥，得到酶解产物。
对比例1
与实施例3相比，步骤S1中未添加田七，其他条件均不改变。
步骤S1具体步骤如下：
S1.中药组合物的制备：将14重量份大黄、1.5重量份薄荷叶分别洗净，干燥，粉碎后混合，得到中药粉，加入200重量份水中，加热至95℃提取4h，过滤，滤渣留用，滤液于70℃烘箱干燥2h，得到水提取物。
对比例2
与实施例3相比，步骤S1中未添加大黄，其他条件均不改变。
步骤S1具体步骤如下：
S1.中药组合物的制备：将14重量份田七、1.5重量份薄荷叶分别洗净，干燥，粉碎后混合，得到中药粉，加入200重量份水中，加热至95℃提取4h，过滤，滤渣留用，滤液于70℃烘箱干燥2h，得到水提取物。
对比例3
与实施例3相比，未进行步骤S2酶解步骤，其他条件均不改变。
具体包括以下步骤：
S1.中药组合物的制备：将10重量份田七、4重量份大黄、1.5重量份薄荷叶分别洗净，干燥，粉碎后混合，得到中药粉，加入200重量份水中，加热至95℃提取4h，过滤，滤渣留用，滤液于70℃烘箱干燥2h，得到水提取物；
S2.益生菌种子液的培养：将4重量份凝结芽孢杆菌、2重量份酿酒酵母菌和 3.5重量份副干酪乳杆菌分别接种到高氏培养基中，37℃培养28h，分别培养成菌种种子液，含菌量为109cfu/mL；
S3.发酵培养基的制备：将7重量份步骤S1中水提取物、7重量份葡萄糖、2 重量份果糖、1重量份乳糖、2重量份尿素、1重量份苯丙氨酸、1重量份丝氨酸、 0.4重量份维生素C、0.1重量份维生素A、0.3重量份重量份氯化钾、0.2重量份氯化钙、0.1重量份硫酸镁、0.2重量份氯化铁、0.2重量份硫酸锌用100重量份无菌水溶解，用PBS溶液调节培养基pH值至7.1，紫外线灭菌备用；
S4.生物酶制剂的制备：将4重量份β-葡聚糖酶、10重量份鸡蛋蛋清溶菌酶混合均匀，加入1.5重量份复合酶稳定剂AES，得到生物酶制剂；
S5.益生菌发酵产物：将步骤S2制得的凝结芽孢杆菌、酿酒酵母菌和副干酪乳杆菌菌种种子液依次接种到步骤S3制得的发酵培养基中，接种量分别为3％、 2％和3.5％，温度为38℃，转速为400r/min，发酵培养56h，得到益生菌发酵产物；
S6.益生元的制备：将12重量份低聚木糖、4重量份大豆低聚糖和5重量份异麦芽酮糖混合粉碎，得到益生元；
S7.活性组分的制备：将2重量份步骤S5制得的生物酶制剂、7重量份步骤 S5制得的益生菌发酵产物、3.5重量份步骤S6制得的益生元、2重量份抗敏组合物混合均匀，得到活性组分；所述抗敏组合物为氟化锶和氯化钠的组合物，质量比为2.5：10；
S8.缓释微胶囊的制备：将步骤S7制得的活性组分加入含有20wt％海藻酸钠的水溶液中，混合均匀，得到水相，所述活性组分在水相中的含量为17wt％；将亲油乳化剂加入食用油中，得到油相，所述亲油乳化剂在油相中的含量为3.5wt％；将10重量份水相和20重量份油相混合，13500r/min乳化4min，形成乳液，滴加 10重量份7wt％氯化钙溶液，常温固化45min，过滤，70℃干燥3h，得到缓释微胶囊；
S9.具有清火抗敏作用的牙膏的制备：将10重量份聚乙二醇、5重量份1,3- 丁二醇、2重量份甘油、1.5重量份糖精钠溶于25重量份水中，搅拌20min，加入20重量份碳酸钙、27重量份二氧化硅、3重量份黄原胶混匀，然后加入3重量份椰油酰胺丙基甜菜碱、0.7重量份柠檬香精、8重量份步骤S8制得的缓释微胶囊，搅拌30min，混匀后脱气，得到所述具有清火抗敏作用的牙膏。
对比例4
与实施例3相比，步骤S3中未添加凝结芽孢杆菌，其他条件均不改变。
步骤S3具体步骤如下：
S3.益生菌种子液的培养：将2重量份酿酒酵母菌和3.5重量份副干酪乳杆菌分别接种到高氏培养基中，37℃培养28h，分别培养成菌种种子液，含菌量为 109cfu/mL。
对比例5
与实施例3相比，步骤S3中未添加酿酒酵母菌，其他条件均不改变。
步骤S3具体步骤如下：
S3.益生菌种子液的培养：将4重量份凝结芽孢杆菌和3.5重量份副干酪乳杆菌分别接种到高氏培养基中，37℃培养28h，分别培养成菌种种子液，含菌量为 109cfu/mL。
对比例6
与实施例3相比，步骤S3中未添加副干酪乳杆菌，其他条件均不改变。
步骤S3具体步骤如下：
S3.益生菌种子液的培养：将4重量份凝结芽孢杆菌、2重量份酿酒酵母菌分别接种到高氏培养基中，37℃培养28h，分别培养成菌种种子液，含菌量为 109cfu/mL。
对比例7
与实施例3相比，步骤S4发酵培养基的制备中未添加步骤S1中水提取物，其他条件均不改变。
步骤S4具体如下：
S4.发酵培养基的制备：将7重量份葡萄糖、2重量份果糖、1重量份乳糖、2 重量份尿素、1重量份苯丙氨酸、1重量份丝氨酸、0.4重量份维生素C、0.1重量份维生素A、0.3重量份重量份氯化钾、0.2重量份氯化钙、0.1重量份硫酸镁、 0.2重量份氯化铁、0.2重量份硫酸锌用100重量份无菌水溶解，用PBS溶液调节培养基pH值至7.1，紫外线灭菌备用。
对比例8
与实施例3相比，未进行发酵步骤，其他条件均不改变。
具体包括以下步骤：
S1.中药组合物的制备：将10重量份田七、4重量份大黄、1.5重量份薄荷叶分别洗净，干燥，粉碎后混合，得到中药粉，加入200重量份水中，加热至95℃提取4h，过滤，滤渣留用，滤液于70℃烘箱干燥2h，得到水提取物；
S2.酶解：将100重量份步骤S1的滤渣加入200重量份水中，加入7重量份纤维素酶和3重量份无花果蛋白酶，40℃酶解3h，过滤，滤渣留用，滤液冷冻干燥，得到酶解产物；
S3.生物酶制剂的制备：将4重量份β-葡聚糖酶、10重量份鸡蛋蛋清溶菌酶混合均匀，加入1.5重量份复合酶稳定剂AES，得到生物酶制剂；
S4.益生元的制备：将12重量份低聚木糖、4重量份大豆低聚糖和5重量份异麦芽酮糖混合粉碎，得到益生元；
S5.活性组分的制备：将10重量份步骤S2制得的酶解产物、2重量份步骤 S3制得的生物酶制剂、3.5重量份步骤S4制得的益生元、2重量份抗敏组合物混合均匀，得到活性组分；所述抗敏组合物为氟化锶和氯化钠的组合物，质量比为 2.5：10；
S6.缓释微胶囊的制备：将步骤S5制得的活性组分加入含有20wt％海藻酸钠的水溶液中，混合均匀，得到水相，所述活性组分在水相中的含量为17wt％；将亲油乳化剂加入食用油中，得到油相，所述亲油乳化剂在油相中的含量为3.5wt％；将10重量份水相和20重量份油相混合，13500r/min乳化4min，形成乳液，滴加10重量份7wt％氯化钙溶液，常温固化45min，过滤，70℃干燥3h，得到缓释微胶囊；
S7.具有清火抗敏作用的牙膏的制备：将10重量份聚乙二醇、5重量份1,3- 丁二醇、2重量份甘油、1.5重量份糖精钠溶于25重量份水中，搅拌20min，加入20重量份碳酸钙、27重量份二氧化硅、3重量份黄原胶混匀，然后加入3重量份椰油酰胺丙基甜菜碱、0.7重量份柠檬香精、8重量份步骤S6制得的缓释微胶囊，搅拌30min，混匀后脱气，得到所述具有清火抗敏作用的牙膏。
对比例9
与实施例3相比，步骤S5中未添加β-葡聚糖酶，其他条件均不改变。
步骤S5具体如下：
S5.生物酶制剂的制备：将14重量份鸡蛋蛋清溶菌酶加入1.5重量份复合酶稳定剂AES，混合均匀，得到生物酶制剂。
对比例10
与实施例3相比，步骤S5中未添加鸡蛋蛋清溶菌酶，其他条件均不改变。
步骤S5具体如下：
S5.生物酶制剂的制备：将14重量份β-葡聚糖酶加入1.5重量份复合酶稳定剂AES，混合均匀，得到生物酶制剂。
对比例11
与实施例3相比，未进行步骤S5，其他条件均不改变。
具体包括以下步骤：
S1.中药组合物的制备：将10重量份田七、4重量份大黄、1.5重量份薄荷叶分别洗净，干燥，粉碎后混合，得到中药粉，加入200重量份水中，加热至95℃提取4h，过滤，滤渣留用，滤液于70℃烘箱干燥2h，得到水提取物；
S2.酶解：将100重量份步骤S1的滤渣加入200重量份水中，加入7重量份纤维素酶和3重量份无花果蛋白酶，40℃酶解3h，过滤，滤渣留用，滤液冷冻干燥，得到酶解产物；
S3.益生菌种子液的培养：将4重量份凝结芽孢杆菌、2重量份酿酒酵母菌和 3.5重量份副干酪乳杆菌分别接种到高氏培养基中，37℃培养28h，分别培养成菌种种子液，含菌量为109cfu/mL；
S4.发酵培养基的制备：将7重量份步骤S1中水提取物、7重量份葡萄糖、2 重量份果糖、1重量份乳糖、2重量份尿素、1重量份苯丙氨酸、1重量份丝氨酸、 0.4重量份维生素C、0.1重量份维生素A、0.3重量份重量份氯化钾、0.2重量份氯化钙、0.1重量份硫酸镁、0.2重量份氯化铁、0.2重量份硫酸锌用100重量份无菌水溶解，用PBS溶液调节培养基pH值至7.1，紫外线灭菌备用；
S5.益生菌发酵产物：将步骤S3制得的凝结芽孢杆菌、酿酒酵母菌和副干酪乳杆菌菌种种子液依次接种到步骤S4制得的发酵培养基中，接种量分别为3％、 2％和3.5％，温度为38℃，转速为400r/min，发酵培养56h，得到益生菌发酵产物；
S6.益生元的制备：将12重量份低聚木糖、4重量份大豆低聚糖和5重量份异麦芽酮糖混合粉碎，得到益生元；
S7.活性组分的制备：将10重量份步骤S2制得的酶解产物、7重量份步骤 S6制得的益生菌发酵产物、3.5重量份步骤S6制得的益生元、2重量份抗敏组合物混合均匀，得到活性组分；所述抗敏组合物为氟化锶和氯化钠的组合物，质量比为2.5：10；
S8.缓释微胶囊的制备：将步骤S7制得的活性组分加入含有20wt％海藻酸钠的水溶液中，混合均匀，得到水相，所述活性组分在水相中的含量为17wt％；将亲油乳化剂加入食用油中，得到油相，所述亲油乳化剂在油相中的含量为3.5wt％；将10重量份水相和20重量份油相混合，13500r/min乳化4min，形成乳液，滴加 10重量份7wt％氯化钙溶液，常温固化45min，过滤，70℃干燥3h，得到缓释微胶囊；
S9.具有清火抗敏作用的牙膏的制备：将10重量份聚乙二醇、5重量份1,3- 丁二醇、2重量份甘油、1.5重量份糖精钠溶于25重量份水中，搅拌20min，加入20重量份碳酸钙、27重量份二氧化硅、3重量份黄原胶混匀，然后加入3重量份椰油酰胺丙基甜菜碱、0.7重量份柠檬香精、8重量份步骤S8制得的缓释微胶囊，搅拌30min，混匀后脱气，得到所述具有清火抗敏作用的牙膏。
对比例12
与实施例3相比，未进行步骤S7，其他条件均不改变。
具体包括以下步骤：
S1.中药组合物的制备：将10重量份田七、4重量份大黄、1.5重量份薄荷叶分别洗净，干燥，粉碎后混合，得到中药粉，加入200重量份水中，加热至95℃提取4h，过滤，滤渣留用，滤液于70℃烘箱干燥2h，得到水提取物；
S2.酶解：将100重量份步骤S1的滤渣加入200重量份水中，加入7重量份纤维素酶和3重量份无花果蛋白酶，40℃酶解3h，过滤，滤渣留用，滤液冷冻干燥，得到酶解产物；
S3.益生菌种子液的培养：将4重量份凝结芽孢杆菌、2重量份酿酒酵母菌和 3.5重量份副干酪乳杆菌分别接种到高氏培养基中，37℃培养28h，分别培养成菌种种子液，含菌量为109cfu/mL；
S4.发酵培养基的制备：将7重量份步骤S1中水提取物、7重量份葡萄糖、2 重量份果糖、1重量份乳糖、2重量份尿素、1重量份苯丙氨酸、1重量份丝氨酸、 0.4重量份维生素C、0.1重量份维生素A、0.3重量份重量份氯化钾、0.2重量份氯化钙、0.1重量份硫酸镁、0.2重量份氯化铁、0.2重量份硫酸锌用100重量份无菌水溶解，用PBS溶液调节培养基pH值至7.1，紫外线灭菌备用；
S5.生物酶制剂的制备：将4重量份β-葡聚糖酶、10重量份鸡蛋蛋清溶菌酶混合均匀，加入1.5重量份复合酶稳定剂AES，得到生物酶制剂；
S6.益生菌发酵产物：将步骤S3制得的凝结芽孢杆菌、酿酒酵母菌和副干酪乳杆菌菌种种子液依次接种到步骤S4制得的发酵培养基中，接种量分别为3％、 2％和3.5％，温度为38℃，转速为400r/min，发酵培养56h，得到益生菌发酵产物；
S7.活性组分的制备：将10重量份步骤S2制得的酶解产物、2重量份步骤 S5制得的生物酶制剂、7重量份步骤S6制得的益生菌发酵产物、2重量份抗敏组合物混合均匀，得到活性组分；所述抗敏组合物为氟化锶和氯化钠的组合物，质量比为2.5：10；
S8.缓释微胶囊的制备：将步骤S7制得的活性组分加入含有20wt％海藻酸钠的水溶液中，混合均匀，得到水相，所述活性组分在水相中的含量为17wt％；将亲油乳化剂加入食用油中，得到油相，所述亲油乳化剂在油相中的含量为3.5wt％；将10重量份水相和20重量份油相混合，13500r/min乳化4min，形成乳液，滴加 10重量份7wt％氯化钙溶液，常温固化45min，过滤，70℃干燥3h，得到缓释微胶囊；
S9.具有清火抗敏作用的牙膏的制备：将10重量份聚乙二醇、5重量份1,3- 丁二醇、2重量份甘油、1.5重量份糖精钠溶于25重量份水中，搅拌20min，加入20重量份碳酸钙、27重量份二氧化硅、3重量份黄原胶混匀，然后加入3重量份椰油酰胺丙基甜菜碱、0.7重量份柠檬香精、8重量份步骤S8制得的缓释微胶囊，搅拌30min，混匀后脱气，得到所述具有清火抗敏作用的牙膏。
测试例1敏感性测试
根据标准筛选160名合格的患有牙齿敏感的受试者，受试者诉冷、热、酸、甜刺激敏感，咬硬物疼痛，发作迅速，疼痛尖锐，时间短暂。实验前均经探针(对 10-50g的触觉刺激敏感)和冷水刺激加以确认受试者由牙本质敏感症状，均分为 20组，每组8人，分别为实施例1-7组、对比例1-12组和空白组(空白组使用生理盐水漱口)。受试者使用分配的牙膏早晚刷牙2周。2周后，受试者到牙科诊室进行检查评价。
评价标准：冷刺激后的敏感程度是使用牙科综合治疗椅的三用气枪将室温的空气吹向敏感牙面。采用标准化空气刺激方法：在室温条件下，使用牙科综合治疗台的气枪在离开敏感牙齿1-1.5cm距离喷吹1s，吹气温度为20±2℃，吹气时将手指遮挡邻牙，避免邻牙症状影响结果的准确性，每颗牙接受1次检查。用Schiff 冷空气敏感指数评价，计分如下：0＝牙及受试者对空气刺激无反应；1＝牙及受试者对空气刺激有反应，但不请求中止刺激；2＝牙及受试者对空气刺激有反应，请求中止刺激或去除刺激；3＝牙及受试者对空气刺激有反应，刺激导致疼痛，请求停止。
另测试探诊敏感性，得到探针接触敏感指数。
结果见表1。注释：*为与空白组相比，P<0.05。
表1
| 组别 | Schiff冷空气敏感指数 | 探针接触敏感指数 |
| 实施例1 | 0.89±0.22* | 2.25±1.02* |
| 实施例2 | 0.82±0.24* | 2.12±1.11* |
| 实施例3 | 0.75±0.19* | 2.05±1.04* |
| 实施例4 | 1.42±0.21 | 3.21±1.12 |
| 实施例5 | 1.12±0.27 | 2.89±1.06 |
| 实施例6 | 0.96±0.31 | 2.45±1.24 |
| 实施例7 | 1.10±0.26 | 2.52±1.15 |
| 对比例1 | 1.60±0.24 | 3.34±1.21 |
| 对比例2 | 1.52±0.29 | 3.21±1.26 |
| 对比例3 | 1.20±0.26 | 2.65±1.12 |
| 对比例4 | 1.32±0.18 | 2.82±1.02 |
| 对比例5 | 1.35±0.23 | 2.89±0.98 |
| 对比例6 | 1.40±0.24 | 2.98±1.05 |
| 对比例7 | 1.37±0.17 | 2.92±1.14 |
| 对比例8 | 1.62±0.31 | 3.38±1.18 |
| 对比例9 | 0.92±0.28 | 2.35±1.24 |
| 对比例10 | 0.94±0.30 | 2.38±1.26 |
| 对比例11 | 1.02±0.25 | 2.41±1.22 |
| 对比例12 | 1.29±0.18 | 2.75±1.17 |
| 空白组 | 2.15±0.21 | 4.17±1.05 |
由上表可知，本发明实施例1-3制得的牙膏具有良好的抗敏效果，起到很好的抗敏镇痛、安定作用，使牙本质敏感症状缓解，甚至消失。
测试例2致病菌生长测试
采用吸光度法，测定变异链球菌(Streptococcus mutans UA159)、远缘链球菌(Streptococcus sobrinus 6715)的△OD，△OD数值增长越慢，表明益生菌对致病菌的生长抑制效果越好。△OD为负值则表明有杀菌作用。对照组为使用生理盐水进行牙齿清洁后的曲线。
结果见图1-2。由图可知，本发明实施例1-3制得的牙膏具有良好的抑制致病菌的生长的效果。
实施例4、5与实施例3相比，抗敏组合物为单一的氟化锶或氯化钠，敏感指数明显升高，且实施例5的抗菌效果明显下降。牙本质过敏是由于牙本质外露、牙本质小管开放造成的，降低牙本质的通透性是治疗牙本质过敏的理论依据，主要是防治牙齿对冷、热、酸、甜等出现的过敏性疼痛。本发明抗敏组合物包括氟化锶和氯化钠的混合物，其中，氟离子作用在过敏牙本质上，加强牙本质继续钙化，或产生更多牙本质，减小牙本质小管的直径，减小液压传导，锶离子能被牙釉、牙本质吸收，生成碳酸锶、氢氧化锶等沉淀物，降低牙体硬组织的渗透性，提高牙组织的缓冲作用，减少龈缘牙周组织对刺激性物质或不良刺激如酸、甜、冷、热的敏感性，达到脱敏镇痛效应。同时，锶离子又能与牙周组织密切结合，增强牙组织的防病能力，达到脱敏效果。直接作用于牙本质神经末梢，起到镇痛、安定作用，从而使牙本质敏感症状缓解，甚至消失。氯化钠的添加能有效提高口腔盐浓度，提高渗透压，使得有害菌失水收缩，从而有效抑制有害菌繁殖；氟化锶和氯化钠的添加具有协同增效的作用。两者具有协同增效的作用。
实施例6、7与实施例3相比，步骤S2中只添加了纤维素酶或无花果蛋白酶，抗敏效果稍有下降，抗菌效果下降；对比例3与实施例3相比，未进行步骤S2 酶解步骤，抗敏效果下降，抗菌效果明显下降。本发明中药滤渣经过复合酶酶解，复合酶包括纤维素酶和蛋白酶，通过纤维素酶将田七、大黄、薄荷叶的细胞壁酶解，其活性物质得到大量的释放，同时其蛋白质物质被酶解，得到的酶解产物中含有丰富的氨基酸、短肽、单糖、寡糖、薄荷酮、黄酮类化合物、薄荷脑、异薄荷酮、蒽类衍生物、苷类化合物、鞣质类、挥发油等，具有清新口气、清凉口感、清火解热、消炎抗菌、滋养牙龈、活血止痛等效果。
对比例1、2与实施例3相比，步骤S1中未添加田七或大黄，其抗敏效果、抗菌效果均明显下降。本发明添加的田七、大黄和薄荷叶含有丰富的三七总皂苷、三七多糖、三七素、薄荷醇、大黄素、有机醇类、有机酸类、丰富的氨基酸、短肽、单糖、寡糖、薄荷酮、黄酮类化合物、薄荷脑、异薄荷酮、蒽类衍生物、苷类化合物、鞣质类、挥发油等，具有良好的止血镇痛、消炎抑菌、抗氧化、清除自由基、改善牙龈血液微循环等效果。
对比例4、5、6与实施例3相比，步骤S3中未添加凝结芽孢杆菌、酿酒酵母菌、副干酪乳杆菌，其抗敏效果下降，抗菌效果明显下降；对比例8与实施例 3相比，未进行发酵步骤，其抗敏效果明显下降，抗菌效果明显下降；对比例7 与实施例3相比，步骤S4发酵培养基的制备中未添加步骤S1中水提取物，其抗敏效果稍有下降，其抗菌效果下降；有害菌是对口腔造成不利环境的细菌的总称，包括变异链球菌、远缘链球菌以及具核梭杆菌等。这些有害菌在口腔中，能将口腔中残留的食物残渣分解成酸，或者其他有害物质，腐蚀牙齿和牙龈，甚至还会释放硫化氢气体，导致口腔产生口臭。本发明牙膏中添加了大量的益生菌，包括凝结芽孢杆菌、酿酒酵母菌和副干酪乳杆菌，在口腔中形成优势菌群，具有协同增效的作用，通过与口腔中有害菌竞争黏膜表面的结合位点，减少有害菌的定植，并分泌有机酸、过氧化氢和细菌素等各种抗菌物质，抑制致病菌的生长，达到平衡口腔菌群，降低口腔挥发性硫化物的产生，清洗口气，预防口臭和口腔疾病，另外，益生菌还可以降低口腔pH值，防止牙菌斑和牙结石的形成，抑制有害菌群，减少牙周病的发生，避免牙龈炎、牙周过敏等情况，从而维护牙周健康，三种有益菌的添加具有协同增效的作用。
对比例9、10与实施例3相比，步骤S5中未添加β-葡聚糖酶或鸡蛋蛋清溶菌酶，对比例9的抗菌效果下降不明显，但对比例10的抗菌效果下降明显；对比例11与实施例3相比，未进行步骤S5，活性组分中没有添加生物酶制剂，其抗菌效果、抗敏效果下降明显。本发明活性组分中添加了生物酶制剂，包括生物溶菌蛋白酶和β-葡聚糖酶，其中，生物溶菌蛋白酶能高效的水解有害菌的细胞壁，通过催化细菌细胞壁肽聚糖中N-乙酰氨基葡糖与N-乙酰胞壁酸之间的1,4- β-糖苷键水解，从而使得选择地抑制甚至杀灭有害菌；β-葡聚糖酶能高效催化葡聚糖分解，从而防止链球菌突变体附于牙齿上，进而减少有害菌在口腔、牙齿上的滋生，降低口腔中有害菌的数量，从而避免引起口腔炎症、过敏等症状的出现。两种酶一方面酶解有害细菌细胞壁，一方面防止糖类物质附着于牙齿上，减少细菌滋生，两者协同作用下，能明显降低口腔中有害菌的数量，从而保护牙齿。
对比例12与实施例3相比，未进行步骤S7，活性组分中没有添加益生元，抗敏效果和抗菌效果下降。本发明活性组分中添加了益生元，包括低聚木糖、大豆低聚糖和异麦芽酮糖，能够残留在口腔部分位点，通过选择性的刺激有益菌菌落，包括本发明中添加的凝结芽孢杆菌、酿酒酵母菌和副干酪乳杆菌的生长，从而加强有益菌的菌群优势，进一步弱化有害菌群，降低有害菌群对口腔的不利影响，从而进一步起到改善口腔健康的作用。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (10)
1.一种具有清火抗敏作用的牙膏的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1.中药组合物的制备：将田七、大黄、薄荷叶分别洗净，干燥，粉碎后混合，得到中药粉，加入水中，加热提取，过滤，滤渣留用，滤液干燥，得到水提取物；所述田七、大黄、薄荷叶的质量比为10：（3-5）：（1-2）；
S2.酶解：将步骤S1的滤渣加入水中，加入纤维素酶和蛋白酶，酶解，过滤，滤渣留用，滤液冷冻干燥，得到酶解产物；所述滤渣、纤维素酶和蛋白酶的质量比为100：（5-10）：（2-4）；
S3.益生菌种子液的培养：将凝结芽孢杆菌、酿酒酵母菌和副干酪乳杆菌分别接种到高氏培养基中，培养，分别培养成菌种种子液；所述凝结芽孢杆菌、酿酒酵母菌和副干酪乳杆菌的质量比为（3-5）：（1-3）：（2-5）；
S4.发酵培养基的制备：将步骤S1中水提取物、碳源、水溶性氮源、维生素、无机盐用无菌水溶解，用PBS溶液调节培养基pH值，灭菌备用；所述水提取物、碳源、水溶性氮源、维生素、无机盐和无菌水的质量比为（5-10）：（7-12）：（3-5）：（0.1-1）：（0.5-2）：100；
S5.生物酶制剂的制备：将β-葡聚糖酶、生物溶菌蛋白酶混合均匀，加入保护剂，得到生物酶制剂；所述β-葡聚糖酶、生物溶菌蛋白酶、保护剂的质量比为（3-5）：10：（1-2）；
S6.益生菌发酵产物：将步骤S3制得的菌种种子液依次接种到步骤S4制得的发酵培养基中进行发酵培养，得到益生菌发酵产物；所述发酵培养条件为36-40℃，300-500r/min，发酵培养48-72h；
S7.益生元的制备：将低聚木糖、大豆低聚糖和异麦芽酮糖混合粉碎，得到益生元；所述低聚木糖、大豆低聚糖和异麦芽酮糖的质量比为（10-15）：（3-5）：（2-7）；
S8.活性组分的制备：将步骤S2制得的酶解产物、步骤S5制得的生物酶制剂、步骤S6制得的益生菌发酵产物、步骤S7制得的益生元和抗敏组合物混合均匀，得到活性组分；所述酶解产物、生物酶制剂、益生菌发酵产物、益生元和抗敏组合物的质量比为（7-12）：（1-3）：（5-10）：（2-5）：（1-3）；
S9.缓释微胶囊的制备：将步骤S8制得的活性组分加入含有海藻酸钠的水溶液中，混合均匀，得到水相；将亲油乳化剂加入食用油中，得到油相；将水相和油相混合，高速乳化，形成乳液，滴加氯化钙溶液，常温固化，过滤，干燥，得到缓释微胶囊；所述含有海藻酸钠的水溶液中海藻酸钠的含量为15-25wt%；所述活性组分在水相中的含量为12-20wt%；所述亲油乳化剂在油相中的含量为2-5wt%；所述水相和油相的质量比为10：（17-22）；
S10.具有清火抗敏作用的牙膏的制备：将保湿剂、甜味剂溶于水中，加入摩擦剂、增稠剂混匀，然后加入发泡剂、芳香剂、步骤S9制得的缓释微胶囊，混匀后脱气，得到所述具有清火抗敏作用的牙膏；所述缓释微胶囊、保湿剂、甜味剂、摩擦剂、增稠剂、发泡剂、芳香剂和水的质量比为（5-12）：（15-22）：（1-2）：（45-52）：（1-5）：（2-4）：（0.5-1）：（20-30）。
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤S1中所述加热至温度为90-100℃，提取时间为3-5h；步骤S2中所述酶解条件为35-45℃，酶解时间为2-4h；所述蛋白酶选自木瓜蛋白酶、无花果蛋白酶、菠萝蛋白酶中的至少一种。
3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤S3中所述培养条件为35-40℃，培养时间为24-30h；所述菌种种子液中含菌量为108-109cfu/mL；步骤S4中所述碳源选自葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖、果糖、水溶性淀粉中的一种或几种混合；所述水溶性氮源选自尿素、硝酸盐、铵盐、氨基酸中的至少一种；所述硝酸盐选自硝酸钠、硝酸钾、硝酸铵、硝酸铜、硝酸锰、硝酸镁、硝酸锌中的至少一种；所述铵盐选自氯化铵、硫酸铵中的至少一种；所述氨基酸选自苯丙氨酸、丝氨酸、赖氨酸、苏氨酸、甘氨酸、缬氨酸、色氨酸、亮氨酸、丙氨酸、半胱氨酸、甲硫氨酸、异亮氨酸中的至少一种；所述维生素选自维生素C、维生素B1、维生素B2、维生素B6、维生素B12、维生素A、维生素K、维生素D、叶酸、泛酸中的至少一种；所述无机盐选自氯化钠、氯化钾、氯化钙、硫酸镁、氯化铁、硫酸锌、硫酸铜、硫酸锰、氯化锌、氯化铜、氯化锰中的至少一种；所述调节培养基pH值为6.9-7.2，所述灭菌方法为紫外线灭菌或60Co灭菌。
4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤S5中所述生物溶菌蛋白酶选自植物源溶菌酶、动物源溶菌酶或微生物溶菌酶的至少一种，所述动物源溶菌酶选自鸡蛋蛋清溶菌酶、牛溶菌酶、马溶菌酶、羊溶菌酶中的至少一种；所述植物源溶菌酶选自木瓜溶菌酶、无花果溶菌酶、大麦溶菌酶中的至少一种；所述保护剂选自复合酶稳定剂AES、复合酶保护剂AFP、复合酶稳定剂DPD、复合蛋白保护剂DP4、复合蛋白保护剂HPD，均购于Seebio公司；步骤S6中所述凝结芽孢杆菌、酿酒酵母菌和副干酪乳杆菌菌种种子液的接种量分别为2-4%、1-3%和2-5%。
5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤S8中所述抗敏组合物选自氟化钠、氟化锶、氟化钾、氯化钠、氯化钾中的至少一种。
6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述抗敏组合物为氟化锶和氯化钠的组合物，质量比为（2-3）：（7-12）。
7.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤S9中所述亲油乳化剂选自司盘-20、司盘-40、司盘-60、司盘-80中的至一种；所述食用油选自大豆油、玉米油、菜籽油、橄榄油、亚麻籽油、花生油中的至少一种；所述高速乳化条件为12000-15000r/min乳化3-5min；所述固化时间为30-60min。
8.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤S10中所述保湿剂选自1,3-丁二醇、山梨醇、木糖醇、甘油和聚乙二醇中的至少一种；所述甜味剂为糖精或/和香精；所述摩擦剂选自二氧化硅、碳酸钙、二水磷酸氢钙、方解石粉、无水焦磷酸钙、氢氧化铝中的至少一种；所述增稠剂选自羧甲基纤维素钠、纤维素胶、黄原胶和卡拉胶中的至少一种；所述发泡剂选自十二烷基硫酸钠、月桂醇硫酸酯钠、椰油酰胺丙基甜菜碱中的至少一种；所述芳香剂选自天然香料、合成香料或香精。
9.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，具体包括以下步骤：
S1.中药组合物的制备：将10重量份田七、3-5重量份大黄、1-2重量份薄荷叶分别洗净，干燥，粉碎后混合，得到中药粉，加入水中，加热至90-100℃提取3-5h，过滤，滤渣留用，滤液干燥，得到水提取物；
S2.酶解：将100重量份步骤S1的滤渣加入水中，加入5-10重量份纤维素酶和2-4重量份蛋白酶，35-45℃酶解2-4h，过滤，滤渣留用，滤液冷冻干燥，得到酶解产物；
S3.益生菌种子液的培养：将3-5重量份凝结芽孢杆菌、1-3重量份酿酒酵母菌和2-5重量份副干酪乳杆菌分别接种到高氏培养基中，35-40℃培养24-30h，分别培养成菌种种子液，含菌量为108-109cfu/mL；
S4.发酵培养基的制备：将5-10重量份步骤S1中水提取物、7-12重量份碳源、3-5重量份水溶性氮源、0.1-1重量份维生素、0.5-2重量份无机盐用100重量份无菌水溶解，用PBS溶液调节培养基pH值至6.9-7.2，紫外线灭菌或60Co灭菌备用；
S5.生物酶制剂的制备：将3-5重量份β-葡聚糖酶、10重量份生物溶菌蛋白酶混合均匀，加入1-2重量份保护剂，得到生物酶制剂；
S6.益生菌发酵产物：将步骤S3制得的凝结芽孢杆菌、酿酒酵母菌和副干酪乳杆菌菌种种子液依次接种到步骤S4制得的发酵培养基中，接种量分别为2-4%、1-3%和2-5%，温度为36-40℃，转速为300-500r/min，发酵培养48-72h，得到益生菌发酵产物；
S7.益生元的制备：将10-15重量份低聚木糖、3-5重量份大豆低聚糖和2-7重量份异麦芽酮糖混合粉碎，得到益生元；
S8.活性组分的制备：将7-12重量份步骤S2制得的酶解产物、1-3重量份步骤S5制得的生物酶制剂、5-10重量份步骤S6制得的益生菌发酵产物、2-5重量份步骤S7制得的益生元、1-3重量份抗敏组合物混合均匀，得到活性组分；所述抗敏组合物为氟化锶和氯化钠的组合物，质量比为（2-3）：（7-12）；
S9.缓释微胶囊的制备：将步骤S8制得的活性组分加入含有15-25wt%海藻酸钠的水溶液中，混合均匀，得到水相，所述活性组分在水相中的含量为12-20wt%；将亲油乳化剂加入食用油中，得到油相，所述亲油乳化剂在油相中的含量为2-5wt%；将10重量份水相和17-22重量份油相混合，12000-15000r/min乳化3-5min，形成乳液，滴加氯化钙溶液，常温固化30-60min，过滤，干燥，得到缓释微胶囊；
S10.具有清火抗敏作用的牙膏的制备：将15-22重量份保湿剂、1-2重量份甜味剂溶于20-30重量份水中，搅拌10-30min，加入45-52重量份摩擦剂、1-5重量份增稠剂混匀，然后加入2-4重量份发泡剂、0.5-1重量份芳香剂、5-12重量份步骤S9制得的缓释微胶囊，搅拌20-40min，混匀后脱气，得到所述具有清火抗敏作用的牙膏。
10.一种如权利要求1-9任一项所述的制备方法制得的具有清火抗敏作用的牙膏。
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Denomination of invention: A toothpaste with fire clearing and anti allergic effects and its preparation method Granted publication date: 20230328 Pledgee: Bank of Communications Ltd. Wuxi branch Pledgor: JIANGSU XUEBAO DAILY CHEMICAL Co.,Ltd. Registration number: Y2024980017391 |