CN114621995A - 一种利用采集的牙垢对胃幽门螺杆菌快速检测的试纸及其制备方法、应用 - Google Patents

一种利用采集的牙垢对胃幽门螺杆菌快速检测的试纸及其制备方法、应用 Download PDF

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Abstract

本发明涉及幽门螺杆菌的检测技术领域，具体涉及一种利用采集的牙垢对胃幽门螺杆菌快速检测的试纸及其制备方法、应用。所述快速检测的试纸可对牙垢进行检出幽门螺杆菌；试纸原料为尿素、苯酚红、叠氮钠、水、乙醇以及中性滤纸；所述试纸由中性滤纸负载含有尿素、叠氮钠，然后负载苯酚红制备得到。本发明试纸可直接采样牙垢，并对幽门螺杆菌进行快速、便捷、精准、稳定、高效的测试，利用该试纸的检测方法采样与检测操作方便，具有很强的应用价值。

Description

一种利用采集的牙垢对胃幽门螺杆菌快速检测的试纸及其制 备方法、应用
技术领域
本发明涉及幽门螺杆菌的检测技术领域，具体涉及一种可以利用采集的牙垢对胃幽门螺杆菌快速检测的试纸及其制备方法、应用。
背景技术
早期、准确的检测幽门螺杆菌感染，对多种口腔以及胃部的相关疾病，特别是胃腺癌的防治均具有重要意义。目前临床上诊断幽门螺杆菌感染的方法很多，主要分为侵入性和非侵入性检查两大类。侵入性检查需要借助胃镜检查方能完成，是一类损伤性检查方法，包括快速尿素酶试验、组织学检查、细菌培养等；非侵入性检查则无需胃镜辅助，具有无损伤、受试者耐受性好等特点，主要包括同位素标记的13C或14C尿素酶呼气试验、粪便抗原、血清学方法和分子生物学检测等等。因为侵入性检查往往存在受试者耐受性较差、测试仪器价格昂贵、检测时间长及对相关技术要求较高等限制，同时还可能存在交叉感染等问题，现今非侵入性检查已逐渐成为学者们研究幽门螺杆菌感染检测的热点。
而当前关于快速、便捷、稳定、高效的检测幽门螺杆菌的测试方法还待进一步进行研究。本发明的提出正是为了解决上述技术问题而诞生的。本发明可以在简单采取牙垢后即可进行幽门螺杆菌的快速、高效、精准、稳定地检测。
发明内容
为实现上述快速、便捷、精准、稳定、高效的检测幽门螺杆菌目的，本发明提供了一种利用采集的牙垢对胃幽门螺杆菌快速检测的试纸及其制备方法、应用。
本发明的试纸可利用采集的牙垢即可实现对口腔中幽门螺杆菌的快速、便捷、精准、稳定、高效的检测。而普通的测试方法并不能实现如本发明简单的采取牙垢的取样方式，以及通过简单取样方式从而实现本发明如此的便捷的检测幽门螺杆菌的方法与检测应用。
本发明试纸可直接采样为牙垢，并对幽门螺杆菌进行快速、便捷、精准、稳定、高效的测试，利用该试纸的检测方法采样与检测操作方便，特别实用于检测条件欠缺的基层医院，更实用于普通民众的家用自行检测。
一方面，本发明提供一种利用采集的牙垢对胃幽门螺杆菌快速检测的试纸，所述快速检测的试纸可对牙垢进行检出幽门螺杆菌；所述试纸原料为尿素、苯酚红、叠氮钠、水、乙醇以及中性滤纸。
进一步地，所述试纸由中性滤纸负载含有尿素、叠氮钠，然后负载苯酚红得到。
进一步地，所述尿素和叠氮钠是以尿素、叠氮钠和水的混合物溶液A负载在中性滤纸上，然后进行干燥。
进一步地，含有尿素、叠氮钠和水的溶液A的pH值为6.3-6.7。
进一步地，负载的方式为由中性滤纸吸附、润湿或浸泡于溶液A中得到；所述负载可以选择为中性滤纸刚好被溶液A浸透完全时取出滤纸。
进一步地，所述苯酚红是以苯酚红的乙醇溶液B负载在中性滤纸上，然后进行干燥得到所述试纸；负载的方式为由中性滤纸吸附、润湿或浸泡于溶液B中得到；所述负载可以选择为中性滤纸刚好被溶液B浸透完全时取出滤纸。
进一步地，溶液A 中，以所述水的总质量100%为准，含有0.01-36%的尿素和0.01-0.06%的叠氮钠。
进一步地，溶液B中，以所述乙醇的质量100%为准，含有0.02-0.6%的苯酚红。
进一步地，以所述水和乙醇总质量100%为准，尿素的含量可以为0.5-35%、1-30%、5-25%、10-15%，或者0.5%、1%、5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、36%中的任意点值以及上述点值中任意两个数字之间的范围。
进一步地，以所述水和乙醇总质量100%为准，叠氮钠的含量可以为0.015-0.055%、0.02-0.05%、0.025-0.045%、0.03-0.04%，或者0.01%、0.02%、0.03%、0.04%、0.05%、0.06%中的任意点值以及上述点值中任意两个数字之间的范围。
进一步地，以所述水和乙醇总质量100%为准，苯酚红的用量为0.03-0.6%、0.05-0.6%、0.1-0.6%、0.2-0.5%、0.3-0.4%，或者0.03%、0.05%、0.1%、0.2%、0.3%、0.4%、0.5%、0.6%中的任意点值以及上述点值中任意两个数字之间的范围。
另一方面，本发明提供所述利用采集的牙垢对胃幽门螺杆菌快速检测的试纸的制备方法，所述制备方法包括：（1）、将尿素、叠氮钠和水混合得到混合溶液A，将苯酚红溶于乙醇得到混合溶液B，以备用；（2）、将混合溶液A负载于中性滤纸上，干燥；（3）、将混合溶液B负载于步骤（2）中干燥后的滤纸上，干燥即可得到所述试纸。
进一步地，溶液A的pH值为6.3-6.7。
进一步地，步骤（2）中负载的方式为由中性滤纸吸附、润湿或浸泡于溶液A中得到；所述负载可以选择为中性滤纸刚好被溶液A浸透完全时取出滤纸。
进一步地，步骤（3）中负载的方式为由中性滤纸吸附、润湿或浸泡于溶液B中得到；所述负载程度可以选择为中性滤纸刚好被溶液B浸透完全时取出滤纸。
进一步地，溶液A 中，以所述水的总质量100%为准，含有0.01-36%的尿素和0.01-0.06%的叠氮钠。
进一步地，溶液B中，以所述乙醇的质量100%为准，含有0.02-0.6%的苯酚红。
进一步地，步骤（2）中干燥温度为105-130℃，优选为106-128℃、108-125℃，110-120℃。步骤（2）中干燥时间为14-24小时，优选为15-23小时，15-22小时，16-22小时。
进一步地，步骤（3）中干燥温度为100-130℃，优选为105-125℃、105-120℃，110-120℃。步骤（3）中干燥时间为14-24小时，优选为15-23小时，15-22小时，16-22小时。
进一步地，将步骤（3）中干燥得到的试纸压成圆形纸片；优选圆形纸片直径为1.2±2cm。
进一步地，将圆形试纸纸片贴在方形硅油衬纸上，再将胶片覆盖在贴有圆形试纸片的硅油衬纸的一面以得到成品试纸。
进一步地，优选将成品试纸密封于铝箔袋，然后将装有成品试纸的铝箔袋使用外包装盒进行包装。
另一方面，本发明提供利用采集的牙垢对胃幽门螺杆菌快速检测的试纸的应用，包括使用所述的试纸在检测牙垢中的幽门螺杆菌的应用。
所述应用时的检测方法包括：
（1）、在未进食物之前或未刷牙之前用消毒牙签取牙齿间牙垢；
（2）、将牙垢放置在所述试纸上进行检测；
（3）、在步骤（2）之后的1-3分钟内观察牙垢边缘的颜色变化。
作为优选地，所述应用时的检测方法包括：
（1）、在未进食物之前或未刷牙之前用消毒牙签取牙齿间牙垢；
（2）、将所述胶片取下，将牙垢放置在所述圆形试纸中间，使用所述胶片按压放置后的牙垢表面使得牙垢与圆形试纸紧密结合；
（3）、在步骤（2）之后的1-3分钟内观察牙垢边缘的颜色变化。
进一步地，超过3分钟后观察的结果没有临床意义。
进一步地，牙垢边缘一分钟内由黄色变成红色的为强阳性，三分钟内变成红色的为弱阳性，不变色的为阴性。
有益的效果：
本发明试纸检测牙垢幽门螺杆菌具有较好的效果，与病理切片镜检法判定的HP阳性比较，试纸法检测的敏感性为95.7%，特异性为94.7%，准确率为95.3%。而病理切片镜检法是目前检测方法中比较可靠的检测胃幽门螺杆菌的方法，本发明通过牙垢采样的检测试纸法与病理切片镜检法比较，结果相差不大。本发明溶液A 中含有特定浓度的0.01-36%的尿素和0.01-0.06%的叠氮钠，溶液B中含有特定浓度的0.02-0.6%的苯酚红，得到的试纸具有较高的敏感性、特异性和准确率。本发明试纸在两分钟内即可显示测试结果，检测速度快。
本发明试纸在高湿度、高温度下具有稳定的测试性能，本发明实施例试纸在高温、高湿度下放置一个月后，测试敏感性、特异性和准确率变化较小，本发明试纸具有较好的稳定测试效果。通过实施例和对比例的稳定性测试结果可知，本发明实施例中添加叠氮钠对试纸的稳定性具有益处，添加叠氮钠使得本发试纸具有稳定的测试效果。
具体实施方式
下文将结合具体实施方式和实施例，具体阐述本发明，本发明的优点和各种效果将由此更加清楚地呈现。本领域技术人员应理解，这些具体实施方式和实施例是用于说明本发明，而非限制本发明。
在整个说明书中，除非另有特别说明，本文使用的术语应理解为如本领域中通常所使用的含义。因此，除非另有定义，本文使用的所有技术和科学术语具有与本发明所属领域技术人员的一般理解相同的含义。若存在矛盾，本说明书优先。
除非另有特别说明，本发明中用到的各种原材料、试剂、仪器和设备等，均可通过市场购买得到或者可通过现有方法制备得到。
实施例1：
一种利用采集的牙垢对胃幽门螺杆菌快速检测的试纸的制备方法，所述制备方法包括：（1）、将尿素、叠氮钠和水混合得到混合溶液A，将苯酚红溶于乙醇得到混合溶液B，以备用；（2）、将混合溶液A负载于中性滤纸上，干燥；（3）、将混合溶液B负载于步骤（2）中干燥后的滤纸上，干燥即可得到所述试纸；溶液A的pH值调整为6.3；步骤（2）中负载的方式为由中性滤纸浸泡于溶液A中得到；所述步骤（2）的负载为中性滤纸刚好被溶液A浸透完全时取出滤纸，然后进行步骤（2）所述的干燥；步骤（3）中负载的方式为由中性滤纸浸泡于溶液B中得到；所述步骤（3）负载程度为中性滤纸刚好被溶液B浸透完全时取出滤纸，然后进行步骤（3）所述的干燥；溶液A 中，以所述水的总质量100%为准，含有10%的尿素和0.02%的叠氮钠；溶液B中，以所述乙醇的质量100%为准，含有0.4%的苯酚红；步骤（2）中干燥温度为120℃，干燥时间为18小时；步骤（3）中干燥温度为120℃，干燥时间为18小时；步骤（3）中干燥得到的试纸压成直径为1.2cm的圆形纸片；
进一步地，将所述的圆形试纸纸片贴在方形硅油衬纸上，再将胶片覆盖在贴有圆形试纸片的硅油衬纸的一面以得到成品试纸；然后将成品试纸密封于铝箔袋，再将装有成品试纸的铝箔袋使用外包装盒进行包装。
实施例2：
一种利用采集的牙垢对胃幽门螺杆菌快速检测的试纸的制备方法，所述制备方法包括：（1）、将尿素、叠氮钠和水混合得到混合溶液A，将苯酚红溶于乙醇得到混合溶液B，以备用；（2）、将混合溶液A负载于中性滤纸上，干燥；（3）、将混合溶液B负载于步骤（2）中干燥后的滤纸上，干燥即可得到所述试纸；溶液A的pH值调整为6.7；步骤（2）中负载的方式为由中性滤纸浸泡于溶液A中得到；所述步骤（2）的负载为中性滤纸刚好被溶液A浸透完全时取出滤纸，然后进行步骤（2）所述的干燥；步骤（3）中负载的方式为由中性滤纸浸泡于溶液B中得到；所述步骤（3）负载程度为中性滤纸刚好被溶液B浸透完全时取出滤纸，然后进行步骤（3）所述的干燥；溶液A 中，以所述水的总质量100%为准，含有20%的尿素和0.04%的叠氮钠；溶液B中，以所述乙醇的质量100%为准，含有0.1%的苯酚红；步骤（2）中干燥温度为120℃，干燥时间为18小时；步骤（3）中干燥温度为120℃，干燥时间为18小时；步骤（3）中干燥得到的试纸压成直径为1.2cm的圆形纸片；
进一步地，将所述的圆形试纸纸片贴在方形硅油衬纸上，再将胶片覆盖在贴有圆形试纸片的硅油衬纸的一面以得到成品试纸；然后将成品试纸密封于铝箔袋，再将装有成品试纸的铝箔袋使用外包装盒进行包装。
对比例1：
一种利用采集的牙垢对胃幽门螺杆菌快速检测的试纸的制备方法，所述制备方法包括：（1）、将尿素、叠氮钠和水混合得到混合溶液A，将苯酚红溶于乙醇得到混合溶液B，以备用；（2）、将混合溶液A负载于中性滤纸上，干燥；（3）、将混合溶液B负载于步骤（2）中干燥后的滤纸上，干燥即可得到所述试纸；溶液A的pH值调整为6.3；步骤（2）中负载的方式为由中性滤纸浸泡于溶液A中得到；所述步骤（2）的负载为中性滤纸刚好被溶液A浸透完全时取出滤纸，然后进行步骤（2）所述的干燥；步骤（3）中负载的方式为由中性滤纸浸泡于溶液B中得到；所述步骤（3）负载程度为中性滤纸刚好被溶液B浸透完全时取出滤纸，然后进行步骤（3）所述的干燥；溶液A 中，以所述水的总质量100%为准，含有10%的尿素和0.02%的叠氮钠；溶液B中，以所述乙醇的质量100%为准，含有0.01%的苯酚红；步骤（2）中干燥温度为120℃，干燥时间为18小时；步骤（3）中干燥温度为120℃，干燥时间为18小时；步骤（3）中干燥得到的试纸压成直径为1.2cm的圆形纸片；
进一步地，将所述的圆形试纸纸片贴在方形硅油衬纸上，再将胶片覆盖在贴有圆形试纸片的硅油衬纸的一面以得到成品试纸；然后将成品试纸密封于铝箔袋，再将装有成品试纸的铝箔袋使用外包装盒进行包装。
对比例2：
一种利用采集的牙垢对胃幽门螺杆菌快速检测的试纸的制备方法，所述制备方法包括：（1）、将尿素、叠氮钠和水混合得到混合溶液A，将苯酚红溶于乙醇得到混合溶液B，以备用；（2）、将混合溶液A负载于中性滤纸上，干燥；（3）、将混合溶液B负载于步骤（2）中干燥后的滤纸上，干燥即可得到所述试纸；溶液A的pH值调整为6.3；步骤（2）中负载的方式为由中性滤纸浸泡于溶液A中得到；所述步骤（2）的负载为中性滤纸刚好被溶液A浸透完全时取出滤纸，然后进行步骤（2）所述的干燥；步骤（3）中负载的方式为由中性滤纸浸泡于溶液B中得到；所述步骤（3）负载程度为中性滤纸刚好被溶液B浸透完全时取出滤纸，然后进行步骤（3）所述的干燥；溶液A 中，以所述水的总质量100%为准，含有10%的尿素和0.02%的叠氮钠；溶液B中，以所述乙醇的质量100%为准，含有1%的苯酚红；步骤（2）中干燥温度为120℃，干燥时间为18小时；步骤（3）中干燥温度为120℃，干燥时间为18小时；步骤（3）中干燥得到的试纸压成直径为1.2cm的圆形纸片；
进一步地，将所述的圆形试纸纸片贴在方形硅油衬纸上，再将胶片覆盖在贴有圆形试纸片的硅油衬纸的一面以得到成品试纸；然后将成品试纸密封于铝箔袋，再将装有成品试纸的铝箔袋使用外包装盒进行包装。
对比例3：
一种利用采集的牙垢对胃幽门螺杆菌快速检测的试纸的制备方法，所述制备方法包括：（1）、将尿素、叠氮钠和水混合得到混合溶液A，将苯酚红溶于乙醇得到混合溶液B，以备用；（2）、将混合溶液A负载于中性滤纸上，干燥；（3）、将混合溶液B负载于步骤（2）中干燥后的滤纸上，干燥即可得到所述试纸；溶液A的pH值调整为6.3；步骤（2）中负载的方式为由中性滤纸浸泡于溶液A中得到；所述步骤（2）的负载为中性滤纸刚好被溶液A浸透完全时取出滤纸，然后进行步骤（2）所述的干燥；步骤（3）中负载的方式为由中性滤纸浸泡于溶液B中得到；所述步骤（3）负载程度为中性滤纸刚好被溶液B浸透完全时取出滤纸，然后进行步骤（3）所述的干燥；溶液A 中，以所述水的总质量100%为准，含有0.005%的尿素和0.02%的叠氮钠；溶液B中，以所述乙醇的质量100%为准，含有0.4%的苯酚红；步骤（2）中干燥温度为120℃，干燥时间为18小时；步骤（3）中干燥温度为120℃，干燥时间为18小时；步骤（3）中干燥得到的试纸压成直径为1.2cm的圆形纸片；
进一步地，将所述的圆形试纸纸片贴在方形硅油衬纸上，再将胶片覆盖在贴有圆形试纸片的硅油衬纸的一面以得到成品试纸；然后将成品试纸密封于铝箔袋，再将装有成品试纸的铝箔袋使用外包装盒进行包装。
对比例4：
一种利用采集的牙垢对胃幽门螺杆菌快速检测的试纸的制备方法，所述制备方法包括：（1）、将尿素、叠氮钠和水混合得到混合溶液A，将苯酚红溶于乙醇得到混合溶液B，以备用；（2）、将混合溶液A负载于中性滤纸上，干燥；（3）、将混合溶液B负载于步骤（2）中干燥后的滤纸上，干燥即可得到所述试纸；溶液A的pH值调整为6.3；步骤（2）中负载的方式为由中性滤纸浸泡于溶液A中得到；所述步骤（2）的负载为中性滤纸刚好被溶液A浸透完全时取出滤纸，然后进行步骤（2）所述的干燥；步骤（3）中负载的方式为由中性滤纸浸泡于溶液B中得到；所述步骤（3）负载程度为中性滤纸刚好被溶液B浸透完全时取出滤纸，然后进行步骤（3）所述的干燥；溶液A 中，以所述水的总质量100%为准，含有50%的尿素和0.02%的叠氮钠；溶液B中，以所述乙醇的质量100%为准，含有0.4%的苯酚红；步骤（2）中干燥温度为120℃，干燥时间为18小时；步骤（3）中干燥温度为120℃，干燥时间为18小时；步骤（3）中干燥得到的试纸压成直径为1.2cm的圆形纸片；
进一步地，将所述的圆形试纸纸片贴在方形硅油衬纸上，再将胶片覆盖在贴有圆形试纸片的硅油衬纸的一面以得到成品试纸；然后将成品试纸密封于铝箔袋，再将装有成品试纸的铝箔袋使用外包装盒进行包装。
对比例5：
一种利用采集的牙垢对胃幽门螺杆菌快速检测的试纸的制备方法，所述制备方法包括：（1）、将尿素、叠氮钠和水混合得到混合溶液A，将苯酚红溶于乙醇得到混合溶液B，以备用；（2）、将混合溶液A负载于中性滤纸上，干燥；（3）、将混合溶液B负载于步骤（2）中干燥后的滤纸上，干燥即可得到所述试纸；溶液A的pH值调整为6；步骤（2）中负载的方式为由中性滤纸浸泡于溶液A中得到；所述步骤（2）的负载为中性滤纸刚好被溶液A浸透完全时取出滤纸，然后进行步骤（2）所述的干燥；步骤（3）中负载的方式为由中性滤纸浸泡于溶液B中得到；所述步骤（3）负载程度为中性滤纸刚好被溶液B浸透完全时取出滤纸，然后进行步骤（3）所述的干燥；溶液A 中，以所述水的总质量100%为准，含有10%的尿素和0.02%的叠氮钠；溶液B中，以所述乙醇的质量100%为准，含有0.4%的苯酚红；步骤（2）中干燥温度为120℃，干燥时间为18小时；步骤（3）中干燥温度为120℃，干燥时间为18小时；步骤（3）中干燥得到的试纸压成直径为1.2cm的圆形纸片；
进一步地，将所述的圆形试纸纸片贴在方形硅油衬纸上，再将胶片覆盖在贴有圆形试纸片的硅油衬纸的一面以得到成品试纸；然后将成品试纸密封于铝箔袋，再将装有成品试纸的铝箔袋使用外包装盒进行包装。
对比例6：
一种利用采集的牙垢对胃幽门螺杆菌快速检测的试纸的制备方法，所述制备方法包括：（1）、将尿素、叠氮钠和水混合得到混合溶液A，将苯酚红溶于乙醇得到混合溶液B，以备用；（2）、将混合溶液A负载于中性滤纸上，干燥；（3）、将混合溶液B负载于步骤（2）中干燥后的滤纸上，干燥即可得到所述试纸；溶液A的pH值调整为6.9；步骤（2）中负载的方式为由中性滤纸浸泡于溶液A中得到；所述步骤（2）的负载为中性滤纸刚好被溶液A浸透完全时取出滤纸，然后进行步骤（2）所述的干燥；步骤（3）中负载的方式为由中性滤纸浸泡于溶液B中得到；所述步骤（3）负载程度为中性滤纸刚好被溶液B浸透完全时取出滤纸，然后进行步骤（3）所述的干燥；溶液A 中，以所述水的总质量100%为准，含有10%的尿素和0.02%的叠氮钠；溶液B中，以所述乙醇的质量100%为准，含有0.4%的苯酚红；步骤（2）中干燥温度为120℃，干燥时间为18小时；步骤（3）中干燥温度为120℃，干燥时间为18小时；步骤（3）中干燥得到的试纸压成直径为1.2cm的圆形纸片；
进一步地，将所述的圆形试纸纸片贴在方形硅油衬纸上，再将胶片覆盖在贴有圆形试纸片的硅油衬纸的一面以得到成品试纸；然后将成品试纸密封于铝箔袋，再将装有成品试纸的铝箔袋使用外包装盒进行包装。
对比例7：
一种利用采集的牙垢对胃幽门螺杆菌快速检测的试纸的制备方法，所述制备方法包括：（1）、将尿素和水混合得到混合溶液A，将苯酚红溶于乙醇得到混合溶液B，以备用；（2）、将混合溶液A负载于中性滤纸上，干燥；（3）、将混合溶液B负载于步骤（2）中干燥后的滤纸上，干燥即可得到所述试纸；溶液A的pH值调整为6.3；步骤（2）中负载的方式为由中性滤纸浸泡于溶液A中得到；所述步骤（2）的负载为中性滤纸刚好被溶液A浸透完全时取出滤纸，然后进行步骤（2）所述的干燥；步骤（3）中负载的方式为由中性滤纸浸泡于溶液B中得到；所述步骤（3）负载程度为中性滤纸刚好被溶液B浸透完全时取出滤纸，然后进行步骤（3）所述的干燥；溶液A 中，以所述水的总质量100%为准，含有10%的尿素；溶液B中，以所述乙醇的质量100%为准，含有0.4%的苯酚红；步骤（2）中干燥温度为120℃，干燥时间为18小时；步骤（3）中干燥温度为120℃，干燥时间为18小时；步骤（3）中干燥得到的试纸压成直径为1.2cm的圆形纸片；
进一步地，将所述的圆形试纸纸片贴在方形硅油衬纸上，再将胶片覆盖在贴有圆形试纸片的硅油衬纸的一面以得到成品试纸；然后将成品试纸密封于铝箔袋，再将装有成品试纸的铝箔袋使用外包装盒进行包装。
对比例8：
一种利用采集的牙垢对胃幽门螺杆菌快速检测的试纸的制备方法，所述制备方法包括：（1）、将尿素、叠氮钠和水混合得到混合溶液A，将苯酚红溶于乙醇得到混合溶液B，以备用；（2）、将混合溶液A负载于中性滤纸上，干燥；（3）、将混合溶液B负载于步骤（2）中干燥后的滤纸上，干燥即可得到所述试纸；溶液A的pH值调整为6.3；步骤（2）中负载的方式为由中性滤纸浸泡于溶液A中得到；所述步骤（2）的负载为中性滤纸刚好被溶液A浸透完全时取出滤纸，然后进行步骤（2）所述的干燥；步骤（3）中负载的方式为由中性滤纸浸泡于溶液B中得到；所述步骤（3）负载程度为中性滤纸刚好被溶液B浸透完全时取出滤纸，然后进行步骤（3）所述的干燥；溶液A 中，以所述水的总质量100%为准，含有10%的尿素和0.001%的叠氮钠；溶液B中，以所述乙醇的质量100%为准，含有0.4%的苯酚红；步骤（2）中干燥温度为120℃，干燥时间为18小时；步骤（3）中干燥温度为120℃，干燥时间为18小时；步骤（3）中干燥得到的试纸压成直径为1.2cm的圆形纸片；
进一步地，将所述的圆形试纸纸片贴在方形硅油衬纸上，再将胶片覆盖在贴有圆形试纸片的硅油衬纸的一面以得到成品试纸；然后将成品试纸密封于铝箔袋，再将装有成品试纸的铝箔袋使用外包装盒进行包装。
对比例9：
一种利用采集的牙垢对胃幽门螺杆菌快速检测的试纸的制备方法，所述制备方法包括：（1）、将尿素、叠氮钠和水混合得到混合溶液A，将苯酚红溶于乙醇得到混合溶液B，以备用；（2）、将混合溶液A负载于中性滤纸上，干燥；（3）、将混合溶液B负载于步骤（2）中干燥后的滤纸上，干燥即可得到所述试纸；溶液A的pH值调整为6.3；步骤（2）中负载的方式为由中性滤纸浸泡于溶液A中得到；所述步骤（2）的负载为中性滤纸刚好被溶液A浸透完全时取出滤纸，然后进行步骤（2）所述的干燥；步骤（3）中负载的方式为由中性滤纸浸泡于溶液B中得到；所述步骤（3）负载程度为中性滤纸刚好被溶液B浸透完全时取出滤纸，然后进行步骤（3）所述的干燥；溶液A 中，以所述水的总质量100%为准，含有10%的尿素和0.005%的叠氮钠；溶液B中，以所述乙醇的质量100%为准，含有0.4%的苯酚红；步骤（2）中干燥温度为120℃，干燥时间为18小时；步骤（3）中干燥温度为120℃，干燥时间为18小时；步骤（3）中干燥得到的试纸压成直径为1.2cm的圆形纸片；
进一步地，将所述的圆形试纸纸片贴在方形硅油衬纸上，再将胶片覆盖在贴有圆形试纸片的硅油衬纸的一面以得到成品试纸；然后将成品试纸密封于铝箔袋，再将装有成品试纸的铝箔袋使用外包装盒进行包装。
HP感染测试：
将所述的圆形试纸纸片贴在方形硅油衬纸上，再将胶片覆盖在贴有圆形试纸片的硅油衬纸的一面以得到成品试纸；然后将成品试纸密封于铝箔袋，再将装有成品试纸的铝箔袋使用外包装盒进行包装。
病理切片镜检法是比较可靠的检测胃幽门螺杆菌的方法。在进行HP感染检测时，选取150例疑似HP感染的患者作为研究对象。分别对150例疑似感染者都使用病理切片镜检法判定其是否感染HP，以及分别对150例疑似感染者都依次使用实施例1-2以及对比例1-9的试纸检测判定其是否感染HP。
使用试纸检测方法具体为：1、取样：1）取样本时，应尽量避免接触酸、碱性物质，酸性物质可造成假阴性，碱性物质可造成假阳性；2）由于尿素酶具有活性，取3处牙垢（在未进食物之前或未刷牙之前用消毒牙签采样）后应立即检测，否则不能使用。 2、检验方法：将成品试纸上的胶片取下，将牙垢放置在圆形试纸中间，使用胶片按压放置后的牙垢表面使得牙垢与圆形试纸紧密结合；3分钟内观察颜色变化，超过3分钟后观察的结果没有临床意义。判断依据：试纸中牙垢边缘3分钟内变成红色为阳性，不变色的为阴性。
HP感染测试结果如下：
Figure 86987DEST_PATH_IMAGE002
Figure 551597DEST_PATH_IMAGE004
Figure 128072DEST_PATH_IMAGE006
注：实施例（或对比例）试纸敏感性、特异性和准确性的计算方式为：敏感性为100%*a/（a+b）；特异性为100%*d/（c+d）；准确性性为100%*（a+d）/（a+b+c+d）
Figure 54440DEST_PATH_IMAGE008
通过上述表中数据检测结果可知，本发明试纸检测牙垢幽门螺杆菌具有较好的效果，与病理切片镜检法判定的HP阳性比较，试纸法检测的敏感性为95.7%，特异性为94.7%，准确率为95.3%。而病理切片镜检法是目前检测方法中比较可靠的检测胃幽门螺杆菌的方法，本发明通过牙垢采样的检测试纸法与病理切片镜检法比较，结果相差不大。通过实施例和对比例的比较可知，本发明溶液A 中含有特定浓度的0.01-36%的尿素和0.01-0.06%的叠氮钠，溶液B中含有特定浓度的0.02-0.6%的苯酚红，得到的试纸具有较高的敏感性、特异性和准确率。
稳定性能测试：
将实施例1和对比例7-9制备的试纸在湿度为90%、温度为60℃条件放置一个月后进行性能测试。测试方法与前述口腔HP感染测试相同。具体测试结果如下
Figure 914817DEST_PATH_IMAGE010
Figure 268438DEST_PATH_IMAGE012
Figure 332209DEST_PATH_IMAGE014
通过上述表中数据检测结果可知，本发明试纸在高湿度、高温度下放置后的试纸具有稳定的测试性能，本发明实施例试纸在高温、高湿度下放置一个月后，测试敏感性、特异性和准确率变化微乎其微，本发明试纸具有较好的稳定测试效果。通过实施例和对比例的稳定性测试结果可知，本发明实施例中添加叠氮钠对试纸的稳定性具有益处，添加叠氮钠使得本发试纸具有稳定的测试效果。
本发明的快速检测试纸与福建三强生物化工有限公司的试剂法进行过比较，采用上述150例疑似HP感染的口腔患者对其牙垢中HP进行检测，统计结果显示，本发明试纸法平均2.5分钟出结果，而试剂法平均4.5分钟出结果；本发明测试纸相较于现有测试液具有更快速的检测结果。
最后，还需要说明的是，术语“包括”、“包含”或者其任何其他变体意在涵盖非排他性的包含，从而使得包括一系列要素的过程、方法、物品或者设备不仅包括那些要素，而且还包括没有明确列出的其他要素，或者是还包括为这种过程、方法、物品或者设备所固有的要素。
尽管已描述了本发明的进一步地，实施例，但本领域内的技术人员一旦得知了基本创造性概念，则可对这些实施例作出另外的变更和修改。所以，所附权利要求意欲解释为包括进一步地，实施例以及落入本发明范围的所有变更和修改。
显然，本领域的技术人员可以对本发明进行各种改动和变型而不脱离本发明的精神和范围。这样，倘若本发明的这些修改和变型属于本发明权利要求及其等同技术的范围之内，则本发明也意图包含这些改动和变型在内。
以上对本发明及其实施方式进行阐述，这种阐述没有限制性。对于本领域普通技术人员来说，在不脱离本发明原料即尿素酶原理的前提下的作出若干改进和修饰，这些改进和修饰也是为本发明保护范围内。

Claims (10)

1.一种利用采集的牙垢对胃幽门螺杆菌快速检测的试纸，其特征在于：所述快速检测的试纸可对牙垢进行检出幽门螺杆菌；所述试纸原料为尿素、苯酚红、叠氮钠、水、乙醇以及中性滤纸；所述试纸由中性滤纸负载含有尿素、叠氮钠，然后负载苯酚红制备得到。
2.根据权利要求1所述的利用采集的牙垢对胃幽门螺杆菌快速检测的试纸，其特征在于：所述尿素和叠氮钠是以尿素、叠氮钠和水的混合物溶液A负载在中性滤纸上，然后进行干燥；所述苯酚红是以苯酚红的乙醇溶液溶液B负载在中性滤纸上，然后进行干燥得到所述试纸。
3.根据权利要求1所述的利用采集的牙垢对胃幽门螺杆菌快速检测的试纸，其特征在于：溶液A的pH值为6.3-6.7。
4.根据权利要求1所述的利用采集的牙垢对胃幽门螺杆菌快速检测的试纸，其特征在于：溶液A 中，以所述水的总质量100%为准，含有0.01-36%的尿素和0.01-0.06%的叠氮钠；溶液B中，以所述乙醇的质量100%为准，含有0.02-0.6%的苯酚红。
5.一种如权利要求1所述的利用采集的牙垢对胃幽门螺杆菌快速检测的试纸的制备方法，其特征在于：所述制备方法包括：（1）、将尿素、叠氮钠和水混合得到混合溶液A，将苯酚红溶于乙醇得到混合溶液B，以备用；（2）、将混合溶液A负载于中性滤纸上，干燥；（3）、将混合溶液B负载于步骤（2）中干燥后的滤纸上，干燥即可得到所述试纸。
6.如权利要求5所述的利用采集的牙垢对胃幽门螺杆菌快速检测的试纸的制备方法，其特征在于：所述步骤（2）中负载的方式为由中性滤纸吸附、润湿或浸泡于溶液A中得到；所述负载可以选择为中性滤纸刚好被溶液A浸透完全时取出滤纸。
7.如权利要求5所述的利用采集的牙垢对胃幽门螺杆菌快速检测的试纸的制备方法，其特征在于：所述步骤（3）中负载的方式为由中性滤纸吸附、润湿或浸泡于溶液B中得到；所述负载程度可以选择为中性滤纸刚好被溶液B浸透完全时取出滤纸。
8.如权利要求5所述的利用采集的牙垢对胃幽门螺杆菌快速检测的试纸的制备方法，其特征在于：所述制备方法还包括将步骤（3）中干燥得到的试纸压成圆形纸片；将所述圆形试纸纸片贴在方形硅油衬纸上，再将胶片覆盖在贴有圆形试纸片的硅油衬纸的一面以得到成品试纸；将所述成品试纸密封于铝箔袋，然后将装有成品试纸的铝箔袋使用外包装盒进行包装。
9.一种如权利要求1所述利用采集的牙垢对胃幽门螺杆菌快速检测的试纸的应用，其特征在于：所述的应用包括使用所述的试纸在检测牙垢中的幽门螺杆菌的应用。
10.如权利要求9所述利用采集的牙垢对胃幽门螺杆菌快速检测的试纸的应用，其特征在于：使用所述的试纸在检测牙垢中的幽门螺杆菌的应用的检测方法包括：
（1）、在未进食物之前或未刷牙之前用消毒牙签取牙齿间牙垢；
（2）、将牙垢放置在所述试纸上进行检测；
（3）、在步骤（2）之后的1-3分钟内观察牙垢边缘的颜色变化。
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