CN114621961B - 一种提高水稻耐盐性的方法及其使用的特异dna分子 - Google Patents
一种提高水稻耐盐性的方法及其使用的特异dna分子 Download PDFInfo
- Publication number
- CN114621961B CN114621961B CN202210263058.XA CN202210263058A CN114621961B CN 114621961 B CN114621961 B CN 114621961B CN 202210263058 A CN202210263058 A CN 202210263058A CN 114621961 B CN114621961 B CN 114621961B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- rice
- dna molecule
- specific dna
- seq
- salt tolerance
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/415—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from plants
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
- C12N15/82—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for plant cells, e.g. plant artificial chromosomes (PACs)
- C12N15/8241—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology
- C12N15/8261—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield
- C12N15/8271—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield for stress resistance, e.g. heavy metal resistance
- C12N15/8273—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield for stress resistance, e.g. heavy metal resistance for drought, cold, salt resistance
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Zoology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Botany (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
本发明公开了一种提高水稻耐盐性的方法及其使用的特异DNA分子，特异DNA分子的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。提高水稻耐盐性的方法包括如下步骤：降低水稻品种9311中OsSS5基因的相对表达量，得到转基因水稻；与水稻品种9311相比，转基因水稻的耐盐性提高；降低水稻品种9311中OsSS5基因的相对表达量通过将水稻品种9311中SEQ ID NO：2所示的DNA分子替换为SEQ ID NO：1所示的DNA分子实现。本发明提供的特异DNA分子可以提高水稻耐盐性，具有重要的应用价值。
Description
技术领域
本发明属于生物技术领域，具体涉及一种提高水稻耐盐性的方法及其使用的特异DNA分子。
背景技术
土壤盐渍化是世界范围内造成农作物减产的主要非生物因素之一。据统计，世界上约有7％的土地和20％的可耕地受到高盐胁迫的影响，盐胁迫对植物的伤害主要表现为造成植物的生长发育减缓、光合作用减弱、细胞结构改变、蛋白质及脂类代谢平衡紊乱等，致使植物产量减少，品质降低，对农业生产和环境建设造成了恶劣的影响。植物在长期进化的过程中，产生了多种应对高盐胁迫的防御措施，例如积累渗透调节物质、提高抗氧化活性、诱导抗性基因表达和蛋白质合成等，但植物的耐盐性是由多基因控制并受多种因素影响的较为复杂的综合性状，目前人们对于植物耐盐机制的了解依然十分有限。
开发利用盐渍地最有效的方式是培育耐盐植物品种，其中转基因等基因工程手段较传统育种能更精确地实现已知功能基因的定向转移，并且转基因技术所转移的基因不受生物体间亲缘关系的限制，基因的转移效率也非常高，这为难度较大的植物耐盐性改良提供了最为直接和高效的方法。因此，通过转基因等基因工程技术选育耐盐性增强的植物新品种，为耐盐育种开辟了广阔的应用前景，对于促进农业生产、花卉育种以及生态环境改善具有十分重要的价值。
水稻作为重要的粮食作物之一，在世界范围内广泛种植。水稻是盐敏感植物。选育耐盐水稻品种对于水稻产业具有重要意义。
发明内容
本发明的目的是提高水稻耐盐性。
本发明首先保护特异DNA分子甲和特异DNA分子乙。
所述特异DNA分子甲的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。SEQ ID NO:1中，自5’末端起，第1至2122位所示的DNA片段为启动子甲，第2123至2803位所示的DNA片段为OsSS5基因。
所述特异DNA分子乙的核苷酸序列如SEQ ID NO：1自5’末端起第1至2122位所示。即所述特异DNA分子乙为所述启动子甲。
本发明还保护含有所述特异DNA分子甲或所述特异DNA分子乙的表达盒、重组质粒或重组微生物。
所述重组质粒可为在表达载体或克隆载体的多克隆位点插入所述特异DNA分子甲的核苷酸序列或所述特异DNA分子乙的核苷酸序列，得到的重组质粒。
所述重组微生物可为将所述重组质粒导入微生物，得到的重组微生物。所述微生物可为农杆菌或大肠杆菌。
所述特异DNA分子甲或所述特异DNA分子乙在提高水稻耐盐性中的应用也属于本发明的保护范围。
所述特异DNA分子甲或所述特异DNA分子乙在培育耐盐性提高的转基因水稻中的应用也属于本发明的保护范围。
上述应用中，所述特异DNA分子甲提高水稻耐盐性或培育耐盐性提高的转基因水稻可通过将水稻基因组中OsSS5基因及其启动子序列替换为特异DNA分子甲实现。
上述应用中，所述特异DNA分子乙提高水稻耐盐性或培育耐盐性提高的转基因水稻可通过将水稻基因组中OsSS5基因的启动子序列替换为特异DNA分子乙实现。
本发明还保护一种培育转基因水稻的方法，包括如下步骤：降低出发水稻中OsSS5基因的相对表达量，得到转基因水稻；与出发水稻相比，转基因水稻的耐盐性提高；
所述OsSS5基因的核苷酸序列为SEQ ID NO：1自5’末端起第2123至2803位所示。
上述方法中，所述出发水稻可为水稻品种9311。
上述方法中，降低水稻品种9311中OsSS5基因的相对表达量可通过将水稻品种9311中SEQ ID NO：2所示的DNA分子替换为所述特异DNA分子甲实现。
上述方法中，降低水稻品种9311中OsSS5基因的相对表达量通过将水稻品种9311中SEQ ID NO:2自5’末端起第1至2138位所示的DNA分子替换为所述特异DNA分子乙实现。
上述任一所述的方法中，所述耐盐性提高可表现为存活率增加。
实验证明，将水稻品种9311中SEQ ID NO:2所示的DNA分子替换为SEQ ID NO:1所示的DNA分子(即特异DNA分子甲)、将水稻品种9311中SEQ ID NO:2自5’末端起第1至2138位所示的DNA分子替换为SEQ ID NO:1自5’末端起第1至2122位所示的DNA分子(即特异DNA分子乙)或者降低水稻品种9311中OsSS5基因的相对表达量可以提高水稻的抗盐性，抗盐性的提高表现为存活率增加。由此可见，本发明提供的特异DNA分子甲和特异DNA分子乙可以提高水稻耐盐性，具有重要的应用价值。
附图说明
图1为盐处理后的待测水稻幼苗和复水后的待测水稻幼苗的生长状态。
图2为待测水稻幼苗的存活率统计结果。
图3为待测水稻幼苗耐盐等级的统计结果。
具体实施方式
下面结合具体实施方式对本发明进行进一步的详细描述，给出的实施例仅为了阐明本发明，而不是为了限制本发明的范围。以下提供的实施例可作为本技术领域普通技术人员进行进一步改进的指南，并不以任何方式构成对本发明的限制。
下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法，按照本领域内的文献所描述的技术或条件或者按照产品说明书进行。下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
实施例1、近等基因系的获得
近等基因系是指一组遗传背景相同或相近，只在个别染色体区段上存在差异的株系。近等基因系可通过回交、重组自交系、利用突变体等途径来获得。近等基因系的遗传背景相同，只有目的性状基因存在差异，是在基因水平上开展遗传研究的理想材料。
1、本发明的发明人经过大量实验，从普通野生稻获得SEQ ID NO:1所示的DNA分子。SEQ ID NO:1中，自5’末端起，第1至2122位所示的DNA片段为启动子甲，第2123至2803位所示的DNA片段为OsSS5基因。
2、通过供体(普通野生稻)和受体(水稻品种9311)杂交、连续回交并结合分子标记选择技术等方式，构建染色体片段置换系，最终获得以水稻品种9311为背景的近等基因系。
水稻品种9311和近等基因系的区别点仅在于：近等基因系染色体上含有SEQ IDNO:1所示的DNA分子，而在水稻品种9311在相同位置上的DNA分子如SEQ ID NO:2所示。SEQID NO:2中，自5’末端起，第1至2138位所示的DNA片段为启动子乙，第2138至2819位所示的DNA片段为OsSS5基因。
即将水稻品种9311中SEQ ID NO:2所示的DNA分子替换为SEQ ID NO:1所示的DNA分子(或将水稻品种9311中SEQ ID NO:2自5’末端起第1至2138位所示的DNA分子(即启动子乙)替换为SEQ ID NO:1自5’末端起第1至2122位所示的DNA分子(即启动子甲))，获得近等基因系。
实施例2、实时荧光定量检测近等基因系中OsSS5基因的相对表达量
1、将实施例1获得的近等基因系生长至10天的10株幼苗放入液氮保存，得到相应的待测样本。将水稻品种9311生长至10天的10株幼苗放入液氮保存，得到相应的待测样本。
2、采用Trizo1法提取待测样本的总RNA，然后反转录出第一链cDNA，将该cDNA用无菌水稀释50倍作为模板，实时定量PCR检测OsSS5基因的相对表达量(水稻Ubiqutin基因为内参基因)。
检测OsSS5基因的引物为5’-GTTATTCCAGGCAGTC-3’和5’-ACAGAAGAGGGTCAGC-3’。
检测水稻Ubiqutin基因的引物为5’-GCTCCGTGGCGGTATCAT-3’和5’-CGGCAGTTGACAGCCCTAG-3’。
结果表明，与水稻品种9311相比，近等基因系中OsSS5基因的相对表达量显著下降。
实施例3、近等基因系的耐盐性鉴定
待测水稻种子为近等基因系的种子或水稻品种9311的种子。
实验重复三次取平均值，每次重复的步骤如下：
1、取待测水稻种子，用50％(v/v)次氯酸钠溶液清洗20min，清水洗涤6次；然后28℃光暗交替培养10d，得到待测水稻幼苗。
2、完成步骤1后，将36株生长状态基本一致的待测水稻幼苗置于培养液，正常水培两周，得到盐处理前的待测水稻幼苗。
组成培养液的组分及其在培养液中的浓度见表1。
表1
| 组分 | 在培养液中的浓度(g/L) | |
| 1 | 铵盐 | 91.4 |
| 2 | 无水磷酸二氢钠 | 32.14 |
| 3 | 硫酸钾 | 71.4 |
| 4 | 无水氯化钙 | 88.6 |
| 5 | 无水硫酸镁 | 158.22 |
| 6 | 四水氯化锰 | 1.5 |
| 7 | 四水钼酸钠 | 0.074 |
| 8 | 硼酸 | 0.934 |
| 9 | 七水硫酸锌 | 0.035 |
| 10 | 五水硫酸铜 | 0.031 |
| 11 | 六水氯化铁 | 7.7 |
| 12 | 一水柠檬酸 | 11.9 |
3、完成步骤2后，取盐处理前的待测水稻幼苗，用含150mM NaCl的培养液处理(即盐处理)7d，得到盐处理后的待测水稻幼苗。
4、完成步骤3后，取盐处理后的待测水稻幼苗，复水7天后，得到复水后的待测水稻幼苗。
5、观察盐处理前的待测水稻幼苗、盐处理后的待测水稻幼苗和复水后的待测水稻幼苗的生长状态；统计复水后的待测水稻幼苗的存活率。
盐处理后的待测水稻幼苗和复水后的待测水稻幼苗的生长状态见图1(左图为盐处理后的待测水稻幼苗，右图为复水后的待测水稻幼苗)。
复水后的待测水稻幼苗的存活率统计结果见图2(NIL为近等基因系)。
复水后的待测水稻幼苗的耐盐等级统计结果见图3(NIL为近等基因系)。
结果如下：盐处理前，近等基因系与水稻品种9311的生长状态无显著差异；盐处理后，与水稻品种9311相比，近等基因系NIL的生长状态较好，存活率显著增加。
上述结果表明，将水稻品种9311中SEQ ID NO:2所示的DNA分子替换为SEQ ID NO:1所示的DNA分子、将水稻品种9311中SEQ ID NO:2自5’末端起第1至2138位所示的DNA分子(即启动子乙)替换为SEQ ID NO:1自5’末端起第1至2122位所示的DNA分子(即启动子甲)或者降低水稻品种9311中OsSS5基因的相对表达量可以提高水稻的抗盐性，抗盐性的提高表现为存活率增加。
以上对本发明进行了详述。对于本领域技术人员来说，在不脱离本发明的宗旨和范围，以及无需进行不必要的实验情况下，可在等同参数、浓度和条件下，在较宽范围内实施本发明。虽然本发明给出了特殊的实施例，应该理解为，可以对本发明作进一步的改进。总之，按本发明的原理，本申请欲包括任何变更、用途或对本发明的改进，包括脱离了本申请中已公开范围，而用本领域已知的常规技术进行的改变。
<110> 中国农业科学院作物科学研究所
<120> 一种提高水稻耐盐性的方法及其使用的特异DNA分子
<160> 2
<170> PatentIn version 3.5
<210> 1
<211> 2803
<212> DNA
<213> Artificial sequence
<400> 1
gggggggaat aggacgacag agtccggcgt cagcggctgc tggggcagta gatcgagcaa 60
ctgcaccgat gtagtatcaa agccttttct tgtgttggtg gtgttgaact ggtgatcatc 120
cggcagccgc gacgaatttc tcgttgagag ctttttcagg tcatgtgaca cgatgcaaaa 180
aggcaatgcg gcttttgtgg tgatactgat gagaactagt agaaacgtta tacacagctt 240
ttgtggtgca tagaggagga attcctttgt acaatctctt tcaggttggg agtctgattc 300
acattgcttt ggagtaaaaa actaaaaatg cctaggtgta gatgttgtac ctattgcacg 360
aattttgatg gtacaaaatg ttcattctga aatggactgg gaagttgtac ccgtaatccg 420
taattgttga caagtcaaga tagttttggg ttagaggtag ggttgcaagc gggcttgtcc 480
gtgaacccac ttataaataa aattagtggg taacccgcga attaaattag tgggtaaccc 540
gcgggttacc taataattac ctaataattt gacctaaaaa tgagtatata ttgacccact 600
tgcatattga cctaaaaatg agtatatatt gacccacttg catatttaga tacggttatc 660
atctagtatt tgacctataa gtaaattcgt gggtcggtcc gtttgcatcc ctagttagag 720
ggtttaattt aggagtgggt taaagaatgg gtagtaggct tatcagtgct tttgcaccca 780
actccggtca tggccccgta gattaaagtt aggaaaaaat cattaatgta tgttaattgg 840
gttttaataa ttattacaag attgaaaaat aaatttattt cgtattttga agcaactttt 900
atatagaaaa ttctttcaag aaacgcagca tttgacacat ttaaccgttt aaaaattata 960
atgactgaac tgagttactg ctagtaactc ctactccctc cgttctaaaa agacactctc 1020
tccgctccaa aaaagactca attcttggat ttccgtgtca aacgtttgat cgtccgtctt 1080
atatgaattt tttttatgat tagtaatctt attgttgtta gatgataaaa catactttat 1140
gcatgactta tctttttaaa tatttttata attttttcaa ataagacgga cggtcaaacg 1200
ttatatacgg aaacaggctg tgtttagttc acactgaaat tggtttggtt aaaattacga 1260
tgatatgata aaaaagttgg aagtttgtgt gcgtagaaaa gttttgatgt gatggaaaag 1320
ttagaagttt ggaaaaaaaa attggaacta acgttaggaa ttgagttttt tttttaagac 1380
tagggactag ggagtactga gagaagaatg gacgtatact cgtccggtcg tcccgatgtg 1440
ccatggctac caacacgcgt cgctggagcg acaccaccac gctgttgccg acacacgaac 1500
tccatcccac ggcccacgct agcccgacca tgcgccgacc tcacgcggtc aagcggagcc 1560
cggctcaccc cgtcctcggc cgttcgccgt ctcggccacg gtccggtctc acgggctcac 1620
ggtgacggat gcgattttat gccaacgaat tttactccca cgcccgtacg ctgtgggcat 1680
ttggcgcgaa cgccgccggc gccgcggcgt ggccccacca atccaccata cggtgggcgg 1740
cgacaaaggc gacgcggcgt gtttccgttt cacggcgggg taagagtaaa accgcccaaa 1800
aacaccggga ggcagcggca gccaccggct tggctggtga ggagtcgatg acgcggcggg 1860
ggacggcgac ctcgcgagtc gcgacccggt gcccaaagaa taaaaaaaaa accccgcggt 1920
atacctagct ccattcctca ctcctccccc gcatctcacc tcacctcacc tcccgataag 1980
gcacgaggag actatctcct ccccctcctc ctcctctccc cgccgacgac cccgccgagc 2040
tacatctccg ccgtgctgat cgcgtggagc cgaggagagg agcggcggcc aacgctacga 2100
ggagagagag tgggaggggc cgatggactc ggagcactgg atctcgcgcc tggccgccgc 2160
caagcggttc tacgccgcgc agctcggcca cgccgatcga gcggggatgg aggaggtgga 2220
catggacgag gaggtgaggc cggagttcgc gtgcccctac tgctacgagg accacgacgt 2280
cgtctccctc tgcgcgcacc tggaggagga gcaccccttc gagccccatg cggcgccttg 2340
ccctatatgc tctgataaga ttgcaaaaga tatgcttaat catatcactg tgcaacatgg 2400
gtacttgttc aagaatcgtc gcaggttgcg cagattcgtt attccaggca gtcaagccct 2460
atctttgctg agtcgagatc tacgtgaagc ccatttgcag gtgcttctgg gaggtggggg 2520
acataggtca aacaacagca gcaacacaac aaatatttca gctgaccctc ttctgtcatc 2580
gtttggcctt agctttccaa catcagacac agaggaaaca tcaaaaccac ctatttccat 2640
tccagatgat gcatctgtgg taaaagagac acctgctcag ccatgggatt caagtattga 2700
ctcatccctc acaagggaag aaagggaaca gaaacggaag caagcgagtg tcagagcaac 2760
atttgtgcaa gacctgctgc tcactacttt atttggagat taa 2803
<210> 2
<211> 2819
<212> DNA
<213> Artificial sequence
<400> 2
ttcaagttcg acatcaagtt cccggcgagg ctcaccgccg accagaagtc cggcgtcaag 60
cggctgctgg ggcagtagat cgagcaactg caccgatgta gtatcaaagc cttttcttgt 120
gttggtggtg ttgaactggt gatcatccgg cagccgcgac gaatttctcg ttgagagctt 180
tttcaggtca tgtgacacga tgcaaaaagg caatgcggcc ttagatgtgt gagatactga 240
tgagaactag tagaaacgtt atacacagct tttgtggtgc atagaggagg aattcctttg 300
tacaatctct ttctggttgg tagtctgatt cacattgctt tggagtaaaa aactaaaaat 360
gcctaggtgt agatgttgtt gtacctattg cacgaaattt tgatggtaca aaatgttcat 420
tctgaaatgg actgggaagt tgtccccgta atccgtaatt gttgacaagt caagatagtt 480
ttgggttaga ggtagggttg cagcgggctt gtccgcgaac ccacttatat agataaaatt 540
agtgggtaac ccacgagtta aattagtggg taacccgcgg gttacctaat aatttgacct 600
aaaaatagta tatattgacc cacttgtata tttagatgcg gttatcattt agtatttgac 660
ctatatgtaa attcgtgggt cggtccgttt gcatccctag ttagagggtt taatttagga 720
gtgggttaaa gaatggtagt aggcttatca gtgcttttgc acccaactcc ggtcatggcc 780
ccgtagatta aagttaggaa aaaatcatta atgtatgtta attgggtttt aataattatt 840
agaagattga aaagtaaatt tatttcgtat tttgaagcaa cttttatata gaagattctt 900
tcaagaaacg cagcatttga cacatttaac cgtttaaaaa ttataatgac tgaactgagt 960
taccgctagt aactcctact ccctccgttc taaagacact ctctccgctc aaaaaaaaaa 1020
gactcaattt tttgatttcc gtgtcaaacg tttgatcgtt cgttttatat gaattttttt 1080
atgattagta attttattgt tgttagatga taaaatatac tttatgcatg acttatcttt 1140
ttaaatattt ttatattatc tttttaaata tttttataat ttttttaaat aatatggacg 1200
gtcaaacgtt atatacggaa acaggctgtg tttagttcac attgaaattg gtttggttaa 1260
aattacgatg atgtgatgaa aaagttggaa gtttgcgtgt gtaggaaagt tttgatgtga 1320
tgaaaaggtt agaagtttgg aaaaaaaaat ttggaactaa cgttaggaat tgagtttttt 1380
tttttaagac tagggactag ggagtatgag agaagaatgg acgtatactc gtccggtcgt 1440
cccgatgtgc catggctacc aacacgcgtc gctggagcga caccaccacg ctgttgccga 1500
cacacgaact ccaccccacg gcccacgcta gcccgaccat gcgccgacct cacgcggtca 1560
agcggagccc ggctcacccc gtcctcggcc gttcgccgtc tcggccacgg tccggtctca 1620
cgggctcacg gtgacggatg cgattttatg ccaacgaatt ttactcccac gcccgtacgc 1680
tgtgggcatt tggcgcgaac gccgccggcg ccgcggcgtg gccccaccaa tccaccatac 1740
ggtgggcggc gacaaaggcg acgcggcgtg tttccgtttc acggcggggt aagagtaaaa 1800
ccgcccaaaa acaccgggag gcagcggcag ccaccggctt ggctggtgag gagtcgatga 1860
cgcggcgggg gacggcgacc tcgcgagtcg cgacccggtg cccaaagaaa aaaaaaaaaa 1920
aaaacccgcg gtatacctag ctccattcct cactcctccc ccgcatctca cctcacctca 1980
cctcccgata aggcacgagg agactatctc ctccccctcc tcctcctctc cccgccgacg 2040
accccgccga gctccatctc cgccgtgctg atcgcgtgga gccgaggaga ggaacggcgg 2100
ccaacgctac gaggagagga gagtggacga tttcccccat ggactcggag cactggatct 2160
cgcgcctggc cgccgccaag cggttctacg ccgcgcagct cggccacgcc gatcgagcgg 2220
ggatggagga ggtggacatg gacgaggagg tgaggccgga gttcgcgtgc ccctactgct 2280
acgaggacca cgacgtcgtc tccctctgcg cgcacctgga ggaggagcac cccttcgagc 2340
cccatgcggc gccttgccct atatgctctg ataagattgc aaaagatatg cttaatcata 2400
tcactgtgca acatgggtac ttgttcaaga atcgtcgcag gttgcgcaga ttcgttattc 2460
caggcagtca agccctatct ttgctgagtc gagatctacg tgaagcccat ttgcaggtgc 2520
ttctgggagg tgggggacat aggtcaaaca acagcagcaa cacaacaaat atttcagctg 2580
accctcttct gtcatcgttt ggccttagct ttccaacatc agacacagag gaaacatcaa 2640
aaccacctat ttccattcca gatgatgcat ctgtggtaaa agagacacct gctcagccat 2700
gggattcaag tattgactca tccctcacaa gggaagaaag ggaacagaaa cggaagcaag 2760
cgagtgtcag agcaacattt gtgcaagacc tgctgctcac tactttattt ggagattaa 2819
Claims (5)
1.一种培育转基因水稻的方法，包括如下步骤：降低出发水稻中OsSS5基因的相对表达量，得到转基因水稻；与出发水稻相比，转基因水稻的耐盐性提高；
所述OsSS5基因的核苷酸序列为SEQ ID NO：1自5’末端起第2123至2803位所示。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述出发水稻为水稻品种9311。
3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：降低水稻品种9311中OsSS5基因的相对表达量通过将水稻品种9311中SEQ ID NO：2所示的DNA分子替换为特异DNA分子甲实现；
特异DNA分子甲的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。
4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：降低水稻品种9311中OsSS5基因的相对表达量通过将水稻品种9311中SEQ ID NO:2自5’末端起第1至2138位所示的DNA分子替换为特异DNA分子乙实现；
特异DNA分子乙的核苷酸序列如SEQ ID NO：1自5’末端起第1至2122位所示。
5.根据权利要求1-4任一所述的方法，其特征在于：所述耐盐性提高表现为存活率增加。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202210263058.XA CN114621961B (zh) | 2022-03-17 | 2022-03-17 | 一种提高水稻耐盐性的方法及其使用的特异dna分子 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202210263058.XA CN114621961B (zh) | 2022-03-17 | 2022-03-17 | 一种提高水稻耐盐性的方法及其使用的特异dna分子 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN114621961A CN114621961A (zh) | 2022-06-14 |
| CN114621961B true CN114621961B (zh) | 2023-09-15 |
Family
ID=81901811
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202210263058.XA Active CN114621961B (zh) | 2022-03-17 | 2022-03-17 | 一种提高水稻耐盐性的方法及其使用的特异dna分子 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN114621961B (zh) |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR20160057658A (ko) * | 2014-11-14 | 2016-05-24 | 대한민국(농촌진흥청장) | 염 스트레스 내성을 가지는 벼 유래 유전자 및 이의 용도 |
| CN106011152A (zh) * | 2016-08-05 | 2016-10-12 | 安徽省农业科学院水稻研究所 | 一种提高水稻耐盐性的转录因子tfsalt1及其应用 |
| CN106498058A (zh) * | 2016-10-27 | 2017-03-15 | 中国农业科学院作物科学研究所 | 水稻耐盐基因及其紧密连锁分子标记的育种应用 |
-
2022
- 2022-03-17 CN CN202210263058.XA patent/CN114621961B/zh active Active
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR20160057658A (ko) * | 2014-11-14 | 2016-05-24 | 대한민국(농촌진흥청장) | 염 스트레스 내성을 가지는 벼 유래 유전자 및 이의 용도 |
| CN106011152A (zh) * | 2016-08-05 | 2016-10-12 | 安徽省农业科学院水稻研究所 | 一种提高水稻耐盐性的转录因子tfsalt1及其应用 |
| CN106498058A (zh) * | 2016-10-27 | 2017-03-15 | 中国农业科学院作物科学研究所 | 水稻耐盐基因及其紧密连锁分子标记的育种应用 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN114621961A (zh) | 2022-06-14 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN112941086B (zh) | OsPIL15基因在调控水稻耐盐性中的应用 | |
| CN105017395B (zh) | 一种橡胶树开花调控蛋白HbTFL1-2及其编码基因与应用 | |
| CN116769795A (zh) | 一种甜瓜CmADF1基因及其克隆方法和应用 | |
| WO2015180479A1 (zh) | TaNAC2蛋白及其编码基因的应用 | |
| CN105294847A (zh) | 植物耐逆性相关蛋白及其编码基因与应用 | |
| CN109055396B (zh) | 拟南芥ppr1基因在调控植物抗镉性能中的应用 | |
| CN110643630A (zh) | Knat1基因在提高植物盐胁迫抗性中的应用 | |
| CN113105535B (zh) | 一种水稻氨基酸转运基因及其应用以及水稻育种方法 | |
| CN112724213B (zh) | 甘薯花青苷合成和抗逆相关蛋白IbMYB4及其编码基因与应用 | |
| CN112626084B (zh) | 草莓MYB转录因子FvMYB24基因、表达蛋白及应用 | |
| CN114621961B (zh) | 一种提高水稻耐盐性的方法及其使用的特异dna分子 | |
| CN115807006B (zh) | 基因片段b在培育植物新材料中的应用 | |
| CN108559753B (zh) | 小麦条锈菌pstg_17694基因在条锈病防治中的应用和抗条锈菌小麦的培育方法 | |
| CN113801212B (zh) | 蛋白质TaPYL1及其编码基因与应用 | |
| CN118531042A (zh) | 一种源自野生稻的Ts2基因在调控水稻耐盐性方面的应用 | |
| CN112391403B (zh) | Tgw10基因在用于改良农作物粒型性状中的应用 | |
| CN111718942A (zh) | 一种水稻耐盐相关基因gt3及其应用 | |
| CN111647613B (zh) | 一种威氏海链藻TwPEPC1基因及应用和培育高产水稻的方法 | |
| CN116003551B (zh) | 基因片段a在培育植物新材料中的应用 | |
| CN118064453B (zh) | GhTLP8基因在提高植物盐胁迫耐受性中的应用 | |
| CN110499326B (zh) | Rgga在调控作物农艺性状中的应用 | |
| KR102292083B1 (ko) | Ems 처리에 의해 유도된 내염성 증진 사료용 옥수수 140es91 돌연변이체 | |
| CN116063427A (zh) | 黄瓜维管植物单锌指蛋白及其编码基因CsVOZ2的应用 | |
| CN117511990A (zh) | Wakl4基因在特异性调控植物镉积累中的应用 | |
| Kwolek et al. | Determination of genomic regions associated with carrot response to salinity stress |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant |