CN114606303A - 一种用于检测brca基因大片段重排的探针、试剂盒及应用 - Google Patents
一种用于检测brca基因大片段重排的探针、试剂盒及应用 Download PDFInfo
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Abstract
本发明公开了一种用于检测BRCA基因大片段重排的探针、试剂盒及应用。针对BRCA1基因转录本NM_007294.3中2‑23号外显子的蛋白编码区、BRCA2基因转录本NM_000059.3中2‑27号外显子的蛋白编码区、外显子‑内含子1‑20bp连接区、BRCA1和BRCA2基因部分5’UTR序列和部分3’UTR序列中的至少一个区域设计探针。将该探针用于检测BRCA基因的大片段重排,具有检测速度快、通量高、灵敏度高、效果好且成本低的优点,解决了现有技术在基因大片段重排检测中的通量低、耗时长、检测能力有限、检测效果差及成本高等问题。
Description
技术领域
本发明涉及基因检测技术领域,尤其涉及一种用于检测BRCA基因大片段重排的探针、试剂盒及应用。
背景技术
基因的大片段重排(Large Genomic Rearrangements,LGR)指一个或多个外显子的重复或缺失。重排类型大部分为缺失,也存在二倍、三倍重复等,这些变异通常会引起读码框偏移,导致蛋白结构与功能的异常。 BRCA基因的LGR致病性变异在所有的BRCA基因致病性变异中占比较高,携带BRCA基因致病性变异的人群具有较高的肿瘤及遗传疾病的风险。因此,除了进行常规的NGS检测 (SNV,INDEL)外,还应进行LGR检测,以便制定合理的管理和治疗措施。
目前,BRCA基因大片段重排的检测方法主要包括以下几种:
1、Southern Blotting技术:是一种检测基因片段的拷贝数变化的方法,但是费力、耗时、消耗DNA量大、可能出现假阳性结果。
2、实时荧光定量PCR(real-time PCR)技术:该方法可同时扩增和定量目的DNA片段,但通量过低,不适用于筛查整个基因。
3、双色荧光原位杂交(dual-color FISH)技术:通常用于检测染色体内的插入、缺失、扩增、倒置和染色易位,仅适用于大片段的染色体异常检测,不适用于基因的大片段重排检测。
4、比较基因组杂交技术(comparative genomic hybridization, CGH):是一种检测DNA拷贝数的分子细胞遗传学方法,是检测整个基因重排情况的有效方法,但对于基因内LGR检测的灵敏性低。
5、多重链接依赖探针扩增技术(multiplex ligation-dependent probeamplification, MLPA):目前应用最广泛的检测基因DNA序列拷贝数异常的方法,也是目前检测BRCA大片段重排最常用的方法。MLPA法敏感、可靠、DNA用量少。然而,该方法的缺陷在于通量较低,一次只能检测一个基因,并且探针试剂盒昂贵,对实验条件要求高,比如:对于核酸样本的纯度要求较高,样本中含有酒精、金属离子、苯酚和Trizol等都会影响MLPA的检测结果。另外,当探针结合位点DNA序列发生单碱基变异(SNV)时,容易产生假阳性的结果。因此临床上检测到单外显子缺失(Exon deletion),需要进一步确认是否是由SNV引起的假阳性。MLPA对外显子重复的检测性能较差:重复的信号水平相较缺失低,在采样数据点少且高噪音的背景下难以判定是否为真实的重复变异。
6、多重扩增子定量 (Multiplex Amplicon Quantification,MAQ)和扩增子测序(Amplicon-Seq)技术:基于多重扩增技术的方法,这类方法受限于扩增子(amplicon)的数量,每个外显子只能设计1到2个扩增子,使得每个外显子的数据采样点只有1个或2个。而样本需要历经采集、运输、核酸抽提、实验反应等多个环节,各环节在不同条件下累积的噪音水平不同,使得实验数据的噪音水平差别很大,导致一些样本不能满足大片段重排检测的要求。另外,当探针或者引物区域出现SNV时,会由于扩增效率的降低导致假阳性,特别是对单外显子缺失或扩增的检测性能不够。
可见,现有的LGR检测方法存在低通量、耗时长、检测能力有限、检测效果较差及成本高等缺陷。
发明内容
为了解决现有技术中存在的问题,本发明提供了如下技术方案。
本发明一方面提供了一种用于检测BRCA基因大片段重排的探针,所述探针为SEDID No.1-SED ID No.179所示的序列。
优选地,所述BRCA基因大片段重排的区域包括BRCA1基因转录本NM_007294.3中2-23 号外显子的蛋白编码区、BRCA2基因转录本NM_000059.3中2-27 号外显子的蛋白编码区、外显子-内含子1-20bp 连接区、BRCA1基因的部分5’UTR序列GTTCATTGGAACAGAAAGAA、BRCA1基因的部分3’UTR序列CTGCAGCCAGCCACAGGTAC、BRCA2基因的部分5’UTR序列GAGGAATATCGTAGGTAAAA、BRCA2基因的部分3’UTR序列GCATTTGCAAAGGCGACAAT中的至少一个区域。
本发明第二方面提供了一种用于检测BRCA基因大片段重排的试剂盒,所述试剂盒包括至少一次用量的第一方面所述的探针。
本发明第三方面提供了第一方面所述的探针或第二方面所述的试剂盒在检测BRCA基因大片段重排中的应用。
本发明第四方面提供了第一方面所述的探针或第二方面所述的试剂盒在制备用于检测BRCA基因大片段重排产品中的应用。
优选地,所述用于检测BRCA基因大片段重排产品还包括计算机软硬件。
本发明第五方面提供了第一方面所述的探针或第二方面所述的试剂盒在制备用于检测BRCA基因大片段重排相关疾病的产品中的应用。
优选地,所述用于检测BRCA基因大片段重排相关疾病的产品还包括计算机软硬件。
本发明第六方面提供了一种检测BRCA基因大片段重排的方法,包括:
提取检测样本的DNA,构建DNA文库;
将第一方面所述的探针或第二方面所述的试剂盒中的探针与所述DNA文库杂交捕获,获得杂交捕获文库;
对所述杂交捕获文库进行二代测序获得测序结果;
对所述测序结果进行生物学信息分析,得到所述检测样本的BRCA基因大片段重排信息。
优选地,所述检测样本为外周血细胞。
本发明的有益效果是:本发明提供的用于检测BRCA基因大片段重排的探针、试剂盒及应用,通过针对BRCA1基因转录本NM_007294.3中 2-23 号外显子的蛋白编码区、BRCA2基因转录本NM_000059.3中 2-27 号外显子的蛋白编码区、外显子-内含子1-20bp 连接区、BRCA1基因的部分5’UTR序列GTTCATTGGAACAGAAAGAA、BRCA1基因的部分3’UTR序列CTGCAGCCAGCCACAGGTAC、BRCA2基因的部分5’UTR序列GAGGAATATCGTAGGTAAAA、BRCA2基因的部分3’UTR序列GCATTTGCAAAGGCGACAAT中的至少一个区域设计探针,并将探针用于检测BRCA基因大片段重排,具有检测速度快、通量高、灵敏度高、效果好且成本低的优点,解决了现有技术在基因大片段重排检测中的通量低、耗时长、检测能力有限、检测效果差及成本高等问题。
具体实施方式
为了更好的理解上述技术方案,下面将以具体的实施方式对上述技术方案做详细的说明。
利用本发明提供的探针或试剂盒检测BRCA基因大片段重排变异,具体可以采用如下步骤。
1. 核酸提取
根据所选择的核酸提取试剂盒的说明书进行外周血样本DNA提取。
2. 文库构建
2.1DNA片段化
1)吸取500 ng的DNA样品到新的1.5 mL离心管,用TE Buffer pH 8.0补至50 μL,涡旋混匀,离心。将上述混好的DNA样品转移至50 μL打断管中。
2)Covaris M220打断仪设定参数如表1所示:
完成后转移至新的标记好的1.5 mL离心管。
3)使用Qubit dsDNA HS Assay Kit试剂盒检测片段化后的DNA浓度。片段化后DNA总量应≥250 ng。使用 D1000 ScreenTape assay/ High Sensitivity DNA Kit 及配套仪器进行片段质控,要求主要片段约 200 bp,否则应重新打断或重新提取 DNA。
2.2建库前准备
取本发明提供的试剂盒中阳性对照品、阴性对照品和片段化后的DNA 50 ng建库,用TE Buffer pH 8.0补至50 μL体积。
2.3末端修复和加A尾
1)按照表2在PCR管中或孔中配制每个末端修复和加A尾反应:
2)轻轻涡旋并瞬时离心。
3)按照表3设置PCR程序,在PCR仪中进行孵育,采用如下所述设置程序:
2.4接头连接
1)在进行末端修复和加A尾的相同PCR板/管中,按表4方式配制每个接头连接反应:
*将水、缓冲液和连接酶进行预混合,充分混合并瞬时离心。
2)在20°C孵育 15 min。
2.5连接后纯化(采用市售核酸纯化试剂)
1)在相同的PCR板/管中,加入88μL纯化磁珠。
2)通过涡旋和/或多次上下移液进行彻底混合。
3)将板/管在室温下孵育15 min。
4)将板/管置于磁力架上,孵育直至液体澄清。
5)小心吸出并丢弃上清液。
6)将板/管置于磁力架上,加入200 μL 80%乙醇。
7)在室温下将板/管于磁力架上孵育30 s。
8)小心吸出并丢弃上清液。
9)将板/管置于磁力架上,加入200 μL 80%乙醇。
10)在室温下将板/管于磁力架上孵育30 s。
11)小心吸出并丢弃上清液。在不影响磁珠的情况下,尝试去除所有残留的乙醇。
12)在室温下将磁珠干燥3~5 min,或直至所有乙醇挥发。
注意:过度干燥磁珠可能会导致产量降低。
13)从磁力架上取下板/管。
14)加入 25 μL PCR级水,涡旋或吹打混匀使磁珠重悬。
15)将板/管在室温下孵育2 min。
16)将板/管置于磁力架上,孵育直至液体澄清。
17)吸出20 μL 上清液转移到新的PCR板/管中。
2.6文库扩增
1)按表5配制每个文库扩增反应体系:
2)充分混合并瞬时离心。
3)使用表6的条件进行扩增:
*根据建库起始量选择适当的循环数,以获得足够的文库进行杂交捕获。当建库起始量为50ng时,推荐使用8个循环,样本量每增加1倍,可减少1个循环,最少不少于6个循环。
4)直接进行扩增后纯化。
2.7扩增后纯化和定量(采用市售的核酸纯化试剂)
1)在文库扩增板/管中进行纯化,加入50μL纯化磁珠。
2)通过涡旋和/或多次上下移液进行彻底混合。
3)将板/管在室温下孵育10 min。
4)将板/管置于磁力架上,孵育直至液体澄清。
5)小心吸出并丢弃上清液。
6)将板/管置于磁力架上,加入200 μL 80%乙醇。
7)在室温下将板/管于磁力架上孵育30 s。
8)小心吸出并丢弃上清液。
9)将板/管置于磁力架上,加入200 μL 80%乙醇。
10)在室温下将板/管于磁力架上孵育30 s。
11)小心吸出并丢弃上清液。在不影响磁珠的情况下,尝试去除所有残留的乙醇。
12)在室温下将磁珠干燥3~5 min,或直至所有乙醇挥发。
注意:过度干燥磁珠可能会导致产量降低。
13)从磁力架上取下板/管。
14)加入55 μL PCR 级水将磁珠彻底重悬。
15)将板/管在室温下孵育2 min。
16)将板/管置于磁力架上,孵育直至液体澄清。
17)文库定量吸取2 μL上清液使用Qubit dsDNA HS Assay Kit试剂盒检测浓度,最后将50 μL上清液转移到新的1.5 mL离心管中。
18)若文库总量≥500 ng,质控合格,否则质控不合格,需重新建库并质控。
3. 杂交捕获
3.1 文库杂交
1)文库池包含多个不同样本文库,根据文库浓度计算文库池进入量,混合获得文库池。文库池总量为2.0 μg ~6.0 μg,建议取同质量样本建立文库池。
2)提前取出杂交缓冲液和杂交反应液于室温融解。杂交缓冲液必须充分融解至完全无结晶。如室温无法融解,可于65℃水浴中孵育,期间涡旋混匀,直到结晶完全融解。
3)进行多文库混合杂交捕获时,具体的杂交文库混合及封闭方法见表7:
4)按照上表将各组分混合于一个1.5 mL的低吸附离心管中,涡旋混匀,瞬时离心。
5)将离心管放入提前预热至60℃的真空浓缩仪中干燥。
6)待全部液体蒸发并完全干燥后,将离心管密封后备用。
7)取出本发明提供的试剂盒中的探针在4℃自然融化。
8)根据表8配制杂交反应体系,使用移液器混合均匀后加入到已经真空浓缩干燥的离心管底部,使用移液器轻柔吹吸混匀 15~20 次,瞬时离心,室温孵育 5 min。
9)将离心管中的全部17 µL杂交反应混合液转移至一个新的0.2 mL PCR 管中,瞬时离心,放进 PCR仪中,启动杂交程序(表9):
3.2文库洗涤
1)准备工作
a. 洗涤液Ⅰ如果无法融解,可于 65℃水浴孵育至完全融解。
b. 捕获磁珠涡旋混合均匀,室温平衡 30 min 后方可进行链霉亲和素磁珠的清洗和捕获步骤。
2)试剂配制
a. 洗涤液配制,根据表10配制洗涤液的 1×工作液:
*将配制好的以下两种洗涤液,按以下体积分装至 0.2 mL PCR管中,剩余体积和其它洗涤液放置于室温。
1份 110 μL 1×洗涤液Ⅰ
2份160 μL 1×洗涤液Ⅳ
剩余的1×洗涤液Ⅰ不要丢弃,将用于后续室温洗脱实验操作中。上述两种洗涤液至少需要在 65℃孵育15 min。
b. 按照表11配制磁珠悬浮液配制
3)捕获磁珠清洗
a. 将捕获磁珠涡旋混匀15 s, 确保完全混匀。吸取50 μL磁珠至0.2 mL PCR管中。
b. 向离心管中加入100 μL 1×磁珠洗涤液,涡旋混匀,瞬时离心,置于磁力架上,待液体完全澄清,使用移液器移弃上清。将离心管从磁力架上移出。
c. 重复步骤 b两次。
d.向离心管中加入 17 µL 磁珠悬浮液,轻柔吹吸混匀,将全部磁珠悬浮液转移至1个新的 0.2 mL 低吸附 PCR 管中。将含有悬浮捕获磁珠的 0.2 mL PCR 管放入 PCR 仪65℃孵育 5 min。
4)链霉亲和素磁珠捕获
a. 16 小时杂交反应后,调节 PCR 仪进入到洗脱程序,PCR仪洗脱程序见表12。
b. 将重悬的链霉亲和素磁珠加入到杂交体系中,并使用移液器轻柔吹吸混匀或涡旋混匀。此步骤建议使用低吸附吸头;操作要迅速。
c. 65℃孵育45min,每 10-12 min轻柔涡旋一次,确保磁珠完全重悬。
5)热洗脱
a. 孵育结束后从PCR仪上取下 PCR 管,并向其中加入 100 μL 65℃ 1×洗涤液Ⅰ,吹吸混匀。
b. 将 PCR 管置于磁力架上,待液体完全澄清后,使用移液器吸取移弃上清。
c. 将PCR管从磁力架上移出,加入 150 μL 65℃ 1×洗涤液Ⅳ,轻柔吹吸 10 次混匀,放进 PCR 仪中65℃孵育 5 min。
d. 重复步骤b和c一次。
注意:热洗脱过程操作要迅速,吹吸混匀过程中尽量避免产生气泡。
6)室温洗脱
a. 将PCR管瞬时离心后置于磁力架上1 min,待液体完全澄清后吸取移弃上清,加入150 μL室温1×洗涤液Ⅰ,涡旋混匀,室温孵育2 min,期间涡旋混匀30 s后静置30 s,交替进行,确保充分混匀。
b. 将PCR管瞬时离心后置于磁力架上1 min,待液体完全澄清后吸取移弃上清,加入150 μL 室温 1×洗涤液Ⅱ,涡旋混匀,室温孵育2 min,期间涡旋混匀30 s后静置30 s,交替进行,确保充分混匀。
c. 将PCR管瞬时离心后置于磁力架上1 min,待液体完全澄清后吸取移弃上清,加入150 μL室温1×洗涤液Ⅲ,涡旋混匀,室温孵育2 min,期间涡旋混匀30 s后静置30 s,交替进行,确保充分混匀。
d. 将PCR管瞬时离心后置于磁力架上1 min,待液体完全澄清后吸取移弃上清,之后换用10 μL 吸头移去少量残余洗涤液。
e. 将PCR管从磁力架上移出,加入 20 μL PCR级水,使用移液器轻柔吹吸 10 次,确保混合均匀,转移全部液体至一个新的0.2 mL PCR管中。
3.3 PCR扩增
1)取出PCR扩增反应液、PCR扩增引物于4℃自然融化,涡旋混匀,瞬时离心备用。
2)按照表13在PCR管中进行反应体系配制:
3)将PCR管放入PCR仪中启动表14程序,热盖温度设定为105℃:
*循环数根据富集起始样本量而定,推荐2 μg混合文库使用12个循环。>2 μg混合文库使用11个循环。
3.4文库纯化和定量(市售的核酸纯化试剂)
1)向新的0.2 mL PCR管中加入75 µL 的纯化磁珠,将扩增后的液体转移至含有纯化磁珠的PCR管中漩涡混匀,室温孵育10 min。
2)将PCR管瞬时离心后置于磁力架上5 min,待液体完全澄清后,使用移液器吸取移弃上清。
3)沿PCR管侧壁缓慢加入200 µL 80%乙醇,注意勿扰动磁珠,静置30 s,使用移液器吸取并移弃上清。
4)重复步骤 3)一次。
5)将PCR管瞬时离心后置于磁力架上,使用10 µL吸头移去少量残留乙醇,注意勿吸到磁珠。
6)室温静置约2~5 min,至乙醇挥发完全。
7)将PCR管从磁力架上移出,加入25 μL洗脱缓冲液(TE Buffer pH 8.0),涡旋混匀,室温孵育2 min。
8)将PCR管瞬时离心后置于磁力架上2 min,待液体完全澄清。
9)吸取2 μL上清液使用Qubit dsDNA HS Assay Kit试剂盒检测浓度。若洗脱后1ng/μL<文库浓度<10 ng/μL,质控合格,否则质控不合格,需重新杂交。
10)最后将20 μL上清液转移到新的1.5 mL离心管中。
注:杂交捕获后的文库如不立即进行实验,请于-20±5℃条件下保存,保存时间不超过6个月。
4. 高通量测序
在Illumina基因测序仪上进行测序,建议每个样本文库测序数据量不低于0.2Gb。
5. 数据分析
使用Illumina公司的bcl2fastq(v2.20)软件将测序生成的BCL文件转化成每个样本对应的Fastq文件,然后使用fastq(v0.19.4)软件去除实验及测序环节引入的接头序列及低质量碱基序列获得高质量测序数据。使用BWA(0.7.17)序列比对软件将测序数据比对至hg19(GRCh37)参考基因组上生成记录比对结果的BAM格式文件,然后基于Samtools(v1.9)、Picard(v1.141)、GenomeAnalysisTK(v4.1.0)工具对BAM文件进行排序、去重、质量校正处理,获得最终BAM文件。
使用基于GenomeAnalysisTK(v4.1.0)的变异鉴定模块鉴定样本中的点突变、插入缺失突变。使用基于Annovar(v2018.04.16)和VEP(v93)的变异注释模块对检测到的突变位点进行HGVS格式和ClinVar数据库(v20201010)、dbSNP数据库(v153)、ExAC数据库(v1.0)、gnomAD(v2.1.1)注释。
利用步骤1-5所述的方法对选取的10例外周血样本中的BRCA基因大片段重排进行检测,提取到的DNA使用Qubit dsDNA HS Assay Kit检测浓度,其结果如表15所示,DNA文库构建及高通量测序结果分别如表16和表17所示。
由表15-17可知,利用本发明提供的探针或试剂盒可准确检出BRCA1和BRCA2中的阳性突变,且无假阳性结果出现。而且,本发明中,可采用低起始量(50ng)即可准确检出外周血样本DNA中BRCA1和BRCA2基因的大片段重排变异情况。具有检测速度快、通量高、灵敏度高、效果好且成本低的优点,解决了现有技术在基因大片段重排检测中的通量低、耗时长、检测能力有限、检测效果差及成本高等问题。
尽管已描述了本发明的优选实施例,但本领域内的技术人员一旦得知了基本创造性概念,则可对这些实施例作出另外的变更和修改。所以,所附权利要求意欲解释为包括优选实施例以及落入本发明范围的所有变更和修改。显然,本领域的技术人员可以对本发明进行各种改动和变型而不脱离本发明的精神和范围。这样,倘若本发明的这些修改和变型属于本发明权利要求及其等同技术的范围之内,则本发明也意图包含这些改动和变型在内。
序列表
<110> 北京普康瑞仁医学检验所有限公司
普瑞基准科技(北京)有限公司
普瑞基准生物医药(苏州)有限公司
<120> 一种用于检测BRCA基因大片段重排的探针、试剂盒及应用
<160> 179
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 1
gttcattgga acagaaagaa atggatttat ctgctcttcg cgttgaagaa gtacaaaatg 60
tcattaatgc tatgcagaaa atcttagagt gtcccatctg gtaagtcagc acaagagtgt 120
<210> 2
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 2
ttattttctt tttctccccc cctaccctgc tagtctggag ttgatcaagg aacctgtctc 60
cacaaagtgt gaccacatat tttgcaagta agtttgaatg tgttatgtgg ctccattatt 120
<210> 3
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 3
ttctttcttt ataatttata gattttgcat gctgaaactt ctcaaccaga agaaagggcc 60
ttcacagtgt cctttatgta agaatgatat aaccaaaagg tatataattt ggtaatgatg 120
<210> 4
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 4
aacaatttaa tttcaggagc ctacaagaaa gtacgagatt tagtcaactt gttgaagagc 60
tattgaaaat catttgtgct tttcagcttg acacaggttt ggagtgtaag tgttgaatat 120
<210> 5
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 5
ttgattataa ttcatacatt tttctctaac tgcaaacata atgttttccc ttgtatttta 60
cagatgcaaa cagctataat tttgcaaaaa aggaaaataa ctctcctgaa catctaaaag 120
<210> 6
<211> 119
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 6
atgaagtttc tatcatccaa agtatgggct acagaaaccg tgccaaaaga cttctacaga 60
gtgaacccga aaatccttcc ttggtaaaac catttgtttt cttcttcttc ttcttcttc 119
<210> 7
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 7
tgtttagcag gaaaccagtc tcagtgtcca actctctaac cttggaactg tgagaactct 60
gaggacaaag cagcggatac aacctcaaaa gacgtctgtc tacattgaat tgggtaaggg 120
<210> 8
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 8
cttttattga tttatttttt ggggggaaat tttttaggat ctgattcttc tgaagatacc 60
gttaataagg caacttattg caggtgagtc aaagagaacc tttgtctatg aagctggtat 120
<210> 9
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 9
ggactctgtc ttttccctat agtgtgggag atcaagaatt gttacaaatc acccctcaag 60
gaaccaggga tgaaatcagt ttggattctg caaaaaaggg taatggcaaa gtttgccaac 120
<210> 10
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 10
taccttgtta tttttgtata ttttcagctg cttgtgaatt ttctgagacg gatgtaacaa 60
atactgaaca tcatcaaccc agtaataatg atttgaacac cactgagaag cgtgcagctg 120
<210> 11
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 11
aaaaagaatc tgctttcaaa acgaaagctg aacctataag cagcagtata agcaatatgg 60
aactcgaatt aaatatccac aattcaaaag cacctaaaaa gaataggctg aggaggaagt 120
<210> 12
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 12
cttctaccag gcatattcat gcgcttgaac tagtagtcag tagaaatcta agcccaccta 60
attgtactga attgcaaatt gatagttgtt ctagcagtga agagataaag aaaaaaaagt 120
<210> 13
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 13
acaaccaaat gccagtcagg cacagcagaa acctacaact catggaaggt aaagaacctg 60
caactggagc caagaagagt aacaagccaa atgaacagac aagtaaaaga catgacagcg 120
<210> 14
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 14
atactttccc agagctgaag ttaacaaatg cacctggttc ttttactaag tgttcaaata 60
ccagtgaact taaagaattt gtcaatccta gccttccaag agaagaaaaa gaagagaaac 120
<210> 15
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 15
tagaaacagt taaagtgtct aataatgctg aagaccccaa agatctcatg ttaagtggag 60
aaagggtttt gcaaactgaa agatctgtag agagtagcag tatttcattg gtacctggta 120
<210> 16
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 16
ctgattatgg cactcaggaa agtatctcgt tactggaagt tagcactcta gggaaggcaa 60
aaacagaacc aaataaatgt gtgagtcagt gtgcagcatt tgaaaacccc aagggactaa 120
<210> 17
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 17
ttcatggttg ttccaaagat aatagaaatg acacagaagg ctttaagtat ccattgggac 60
atgaagttaa ccacagtcgg gaaacaagca tagaaatgga agaaagtgaa cttgatgctc 120
<210> 18
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 18
agtatttgca gaatacattc aaggtttcaa agcgccagtc atttgctccg ttttcaaatc 60
caggaaatgc agaagaggaa tgtgcaacat tctctgccca ctctgggtcc ttaaagaaac 120
<210> 19
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 19
aaagtccaaa agtcactttt gaatgtgaac aaaaggaaga aaatcaagga aagaatgagt 60
ctaatatcaa gcctgtacag acagttaata tcactgcagg ctttcctgtg gttggtcaga 120
<210> 20
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 20
aagataagcc agttgataat gccaaatgta gtatcaaagg aggctctagg ttttgtctat 60
catctcagtt cagaggcaac gaaactggac tcattactcc aaataaacat ggacttttac 120
<210> 21
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 21
agaggcatcc agaaaagtat cagggtagtt ctgtttcaaa cttgcatgtg gagccatgtg 60
gcacaaatac tcatgccagc tcattacagc atgagaacag cagtttatta ctcactaaag 120
<210> 22
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 22
aaaacccata tcgtatacca ccactttttc ccatcaagtc atttgttaaa actaaatgta 60
agaaaaatct gctagaggaa aactttgagg aacattcaat gtcacctgaa agagaaatgg 120
<210> 23
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 23
gaaatgagaa cattccaagt acagtgagca caattagccg taataacatt agagaaaatg 60
tttttaaaga agccagctca agcaatatta atgaagtagg ttccagtact aatgaagtgg 120
<210> 24
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 24
gctccagtat taatgaaata ggttccagtg atgaaaacat tcaagcagaa ctaggtagaa 60
acagagggcc aaaattgaat gctatgctta gattaggggt tttgcaacct gaggtctata 120
<210> 25
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 25
aacaaagtct tcctggaagt aattgtaagc atcctgaaat aaaaaagcaa gaatatgaag 60
aagtagttca gactgttaat acagatttct ctccatatct gatttcagat aacttagaac 120
<210> 26
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 26
agcctatggg aagtagtcat gcatctcagg tttgttctga gacacctgat gacctgttag 60
atgatggtga aataaaggaa gatactagtt ttgctgaaaa tgacattaag gaaagttctg 120
<210> 27
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 27
ctgtttttag caaaagcgtc cagaaaggag agcttagcag gagtcctagc cctttcaccc 60
atacacattt ggctcagggt taccgaagag gggccaagaa attagagtcc tcagaagaga 120
<210> 28
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 28
acttatctag tgaggatgaa gagcttccct gcttccaaca cttgttattt ggtaaagtaa 60
acaatatacc ttctcagtct actaggcata gcaccgttgc taccgagtgt ctgtctaaga 120
<210> 29
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 29
acacagagga gaatttatta tcattgaaga atagcttaaa tgactgcagt aaccaggtaa 60
tattggcaaa ggcatctcag gaacatcacc ttagtgagga aacaaaatgt tctgctagct 120
<210> 30
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 30
tgttttcttc acagtgcagt gaattggaag acttgactgc aaatacaaac acccaggatc 60
ctttcttgat tggttcttcc aaacaaatga ggcatcagtc tgaaagccag ggagttggtc 120
<210> 31
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 31
tgagtgacaa ggaattggtt tcagatgatg aagaaagagg aacgggcttg gaagaaaata 60
atcaagaaga gcaaagcatg gattcaaact taggtattgg aaccaggttt ttgtgtttgc 120
<210> 32
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 32
acagaatgaa tgtagaaaag gctgaattct gtaataaaag caaacagcct ggcttagcaa 60
ggagccaaca taacagatgg gctggaagta aggaaacatg taatgatagg cggactccca 120
<210> 33
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 33
gcacagaaaa aaaggtagat ctgaatgctg atcccctgtg tgagagaaaa gaatggaata 60
agcagaaact gccatgctca gagaatccta gagatactga agatgttcct tggataacac 120
<210> 34
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 34
taaatagcag cattcagaaa gttaatgagt ggttttccag aagtgatgaa ctgttaggtt 60
ctgatgactc acatgatggg gagtctgaat caaatgccaa agtagctgat gtattggacg 120
<210> 35
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 35
ttctaaatga ggtagatgaa tattctggtt cttcagagaa aatagactta ctggccagtg 60
atcctcatga ggctttaata tgtaaaagtg aaagagttca ctccaaatca gtagagagta 120
<210> 36
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 36
atattgaaga caaaatattt gggaaaacct atcggaagaa ggcaagcctc cccaacttaa 60
gccatgtaac tgaaaatcta attataggag catttgttac tgagccacag ataatacaag 120
<210> 37
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<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 37
agcgtcccct cacaaataaa ttaaagcgta aaaggagacc tacatcaggc cttcatcctg 60
aggattttat caagaaagca gatttggcag ttcaaaagac tcctgaaatg ataaatcagg 120
<210> 38
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 38
gaactaacca aacggagcag aatggtcaag tgatgaatat tactaatagt ggtcatgaga 60
ataaaacaaa aggtgattct attcagaatg agaaaaatcc taacccaata gaatcactcg 120
<210> 39
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<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 39
gtttttgtta tttaaggtga agcagcatct gggtgtgaga gtgaaacaag cgtctctgaa 60
gactgctcag ggctatcctc tcagagtgac attttaacca ctcaggtaaa aagcgtgtgt 120
<210> 40
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 40
ttcattttct tggtgccatt tatcgttttt gaagcagagg gataccatgc aacataacct 60
gataaagctc cagcaggaaa tggctgaact agaagctgtg ttagaacagc atgggagcca 120
<210> 41
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 41
gccttctaac agctaccctt ccatcataag tgactcttct gcccttgagg acctgcgaaa 60
tccagaacaa agcacatcag aaaaaggtgt gtattgttgg ccaaacactg atatcttaag 120
<210> 42
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 42
atgtctacaa tttcaccttt cttacagatt cgcatataca tggccaaagg aacaactcca 60
tgttttctaa aaggcctaga gaacatatat caggtgcctc tcctctttcc ctttgtgttc 120
<210> 43
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 43
ttatcactat cagaacaaag cagtaaagta gatttgtttt ctcattccat ttaaagcagt 60
attaacttca cagaaaagta gtgaataccc tataagccag aatccagaag gcctttctgc 120
<210> 44
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 44
tgacaagttt gaggtgtctg cagatagttc taccagtaaa aataaagaac caggagtgga 60
aaggtaagaa acatcaatgt aaagatgctg tggtatctga catctttatt tatattgaac 120
<210> 45
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 45
ttctccttcc atttatcttt ctaggtcatc cccttctaaa tgcccatcat tagatgatag 60
gtggtacatg cacagttgct ctgggagtct tcagaataga aactacccat ctcaagagga 120
<210> 46
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 46
gctcattaag gttgttgatg tggaggagca acagctggaa gagtctgggc cacacgattt 60
gacggaaaca tcttacttgc caaggcaaga tctaggtaat atttcatctg ctgtattgga 120
<210> 47
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 47
ttaaacttct cccattcctt tcagagggaa ccccttacct ggaatctgga atcagcctct 60
tctctgatga ccctgaatct gatccttctg aagacagagc cccagagtca gctcgtgttg 120
<210> 48
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 48
gcaacatacc atcttcaacc tctgcattga aagttcccca attgaaagtt gcagaatctg 60
cccagagtcc agctgctgct catactactg atactgctgg gtataatgca atggaagaaa 120
<210> 49
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 49
gtgtgagcag ggagaagcca gaattgacag cttcaacaga aagggtcaac aaaagaatgt 60
ccatggtggt gtctggcctg accccagaag aatttgtgag tgtatccata tgtatctccc 120
<210> 50
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 50
tttgatttaa tttcagatgc tcgtgtacaa gtttgccaga aaacaccaca tcactttaac 60
taatctaatt actgaagaga ctactcatgt tgttatgaaa acaggtatac caagaacctt 120
<210> 51
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 51
tgagtgtttt tcattctgca gatgctgagt ttgtgtgtga acggacactg aaatattttc 60
taggaattgc gggaggaaaa tgggtagtta gctatttctg taagtataat actatttctc 120
<210> 52
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 52
ttctgctgta tgtaacctgt cttttctatg atctctttag gggtgaccca gtctattaaa 60
gaaagaaaaa tgctgaatga ggtaagtact tgatgttaca aactaaccag agatattcat 120
<210> 53
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 53
gtgtttggtt tctttcagca tgattttgaa gtcagaggag atgtggtcaa tggaagaaac 60
caccaaggtc caaagcgagc aagagaatcc caggacagaa aggtaaagct ccctccctca 120
<210> 54
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 54
ccctgtccct ctctcttcct ctcttcttcc agatcttcag ggggctagaa atctgttgct 60
atgggccctt caccaacatg cccacaggta agagcctggg agaaccccag agttccagca 120
<210> 55
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 55
ttacatctaa atgtccattt tagatcaact ggaatggatg gtacagctgt gtggtgcttc 60
tgtggtgaag gagctttcat cattcaccct tggcacagta agtattgggt gccctgtcag 120
<210> 56
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 56
ttgaatgctc tttccttcct ggggatccag ggtgtccacc caattgtggt tgtgcagcca 60
gatgcctgga cagaggacaa tggcttccat ggtaaggtgc ctgcatgtac ctgtgctata 120
<210> 57
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 57
gagcctagtc caggagaatg aattgacact aatctctgct tgtgttctct gtctccagca 60
attgggcaga tgtgtgaggc acctgtggtg acccgagagt gggtgttgga cagtgtagca 120
<210> 58
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 58
ctctaccagt gccaggagct ggacacctac ctgatacccc agatccccca cagccactac 60
tgactgcagc cagccacagg tacagagcca caggacccca agaatgagct tacaaagtgg 120
<210> 59
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 59
gcattggagg aatatcgtag gtaaaaatgc ctattggatc caaagagagg ccaacatttt 60
ttgaaatttt taagacacgc tgcaacaaag caggtattga caaattttat ataactttat 120
<210> 60
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 60
cttatgatct ttaactgttc tgggtcacaa atttgtctgt cactggttaa aactaaggtg 60
ggattttttt tttaaataga tttaggacca ataagtctta attggtttga agaactttct 120
<210> 61
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 61
tcagaagctc caccctataa ttctgaacct gcagaagaat ctgaacataa aaacaacaat 60
tacgaaccaa acctatttaa aactccacaa aggaaaccat cttataatca gctggcttca 120
<210> 62
<211> 119
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 62
actccaataa tattcaaaga gcaagggctg actctgccgc tgtaccaatc tcctgtaaaa 60
gaattagata aattcaaatt agacttaggt aagtaatgca atatggtaga ctggggaga 119
<210> 63
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 63
tttcaggaag gaatgttccc aatagtagac ataaaagtct tcgcacagtg aaaactaaaa 60
tggatcaagc agatgatgtt tcctgtccac ttctaaattc ttgtcttagt gaaaggtatg 120
<210> 64
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 64
aaataaccta agggatttgc tttgttttat tttagtcctg ttgttctaca atgtacacat 60
gtaacaccac aaagagataa gtcaggtatg attaaaaaca atgcttttta ttcttagaat 120
<210> 65
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 65
aaaataaaac ttaacaattt tccccttttt ttacccccag tggtatgtgg gagtttgttt 60
catacaccaa agtttgtgaa ggtaaatatt ctacctggtt tatttttatg acttagtaat 120
<210> 66
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 66
agggtcgtca gacaccaaaa catatttctg aaagtctagg agctgaggtg gatcctgata 60
tgtcttggtc aagttcttta gctacaccac ccacccttag ttctactgtg ctcataggta 120
<210> 67
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 67
ataatataca atacacataa atttttatct tacagtcaga aatgaagaag catctgaaac 60
tgtatttcct catgatacta ctgctgtaag taaatatgac attgattaga ctgttgaaat 120
<210> 68
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 68
gcagaatgtg aaaagctatt tttccaatca tgatgaaagt ctgaagaaaa atgatagatt 60
tatcgcttct gtgacagaca gtgaaaacac aaatcaaaga gaagctgcaa gtcatggtaa 120
<210> 69
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 69
gcttataaaa tattaatgtg cttctgtttt atactttaac aggatttgga aaaacatcag 60
ggaattcatt taaagtaaat agctgcaaag accacattgg aaagtcaatg ccaaatgtcc 120
<210> 70
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 70
cagaactaat taactgttca gcccagtttg aagcaaatgc ttttgaagca ccacttacat 60
ttgcaaatgc tgattcaggt acctctgtct tttttttttt gtaaatagta catatagttt 120
<210> 71
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 71
tagaagatga agtatatgaa acagttgtag atacctctga agaagatagt ttttcattat 60
gtttttctaa atgtagaaca aaaaatctac aaaaagtaag aactagcaag actaggaaaa 120
<210> 72
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 72
aaattttcca tgaagcaaac gctgatgaat gtgaaaaatc taaaaaccaa gtgaaagaaa 60
aatactcatt tgtatctgaa gtggaaccaa atgatactga tccattagat tcaaatgtag 120
<210> 73
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 73
caaatcagaa gccctttgag agtggaagtg acaaaatctc caaggaagtt gtaccgtctt 60
tggcctgtga atggtctcaa ctaacccttt caggtctaaa tggagcccag atggagaaaa 120
<210> 74
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 74
tacccctatt gcatatttct tcatgtgacc aaaatatttc agaaaaagac ctattagaca 60
cagagaacaa aagaaagaaa gattttctta cttcagagaa ttctttgcca cgtatttcta 120
<210> 75
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 75
gcctaccaaa atcagagaag ccattaaatg aggaaacagt ggtaaataag agagatgaag 60
agcagcatct tgaatctcat acagactgca ttcttgcagt aaagcaggca atatctggaa 120
<210> 76
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 76
cttctccagt ggcttcttca tttcagggta tcaaaaagtc tatattcaga ataagagaat 60
cacctaaaga gactttcaat gcaagttttt caggtcatat gactgatcca aactttaaaa 120
<210> 77
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 77
aagaaactga agcctctgaa agtggactgg aaatacatac tgtttgctca cagaaggagg 60
actccttatg tccaaattta attgataatg gaagctggcc agccaccacc acacagaatt 120
<210> 78
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 78
ctgtagcttt gaagaatgca ggtttaatat ccactttgaa aaagaaaaca aataagttta 60
tttatgctat acatgatgaa acatcttata aaggaaaaaa aataccgaaa gaccaaaaat 120
<210> 79
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 79
agtgaatgtg attgatggta ctttaatttt gtcactttgt gtttttatgt ttaggtttat 60
tgcattcttc tgtgaaaaga agctgttcac agaatgattc tgaagaacca actttgtcct 120
<210> 80
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 80
tagataaaat accagaaaaa aataatgatt acatgaacaa atgggcagga ctcttaggtc 60
caatttcaaa tcacagtttt ggaggtagct tcagaacagc ttcaaataag gaaatcaagc 120
<210> 81
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 81
tctctgaaca taacattaag aagagcaaaa tgttcttcaa agatattgaa gaacaatatc 60
ctactagttt agcttgtgtt gaaattgtaa ataccttggc attagataat caaaagaaac 120
<210> 82
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 82
tgagcaagcc tcagtcaatt aatactgtat ctgcacattt acagagtagt gtagttgttt 60
ctgattgtaa aaatagtcat ataacccctc agatgttatt ttccaagcag gattttaatt 120
<210> 83
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 83
caaaccataa tttaacacct agccaaaagg cagaaattac agaactttct actatattag 60
aagaatcagg aagtcagttt gaatttactc agtttagaaa accaagctac atattgcaga 120
<210> 84
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 84
agagtacatt tgaagtgcct gaaaaccaga tgactatctt aaagaccact tctgaggaat 60
gcagagatgc tgatcttcat gtcataatga atgccccatc gattggtcag gtagacagca 120
<210> 85
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 85
gcaagcaatt tgaaggtaca gttgaaatta aacggaagtt tgctggcctg ttgaaaaatg 60
actgtaacaa aagtgcttct ggttatttaa cagatgaaaa tgaagtgggg tttaggggct 120
<210> 86
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 86
tttattctgc tcatggcaca aaactgaatg tttctactga agctctgcaa aaagctgtga 60
aactgtttag tgatattgag aatattagtg aggaaacttc tgcagaggta catccaataa 120
<210> 87
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 87
gtttatcttc aagtaaatgt catgattctg ttgtttcaat gtttaagata gaaaatcata 60
atgataaaac tgtaagtgaa aaaaataata aatgccaact gatattacaa aataatattg 120
<210> 88
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 88
aaatgactac tggcactttt gttgaagaaa ttactgaaaa ttacaagaga aatactgaaa 60
atgaagataa caaatatact gctgccagta gaaattctca taacttagaa tttgatggca 120
<210> 89
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 89
gtgattcaag taaaaatgat actgtttgta ttcataaaga tgaaacggac ttgctattta 60
ctgatcagca caacatatgt cttaaattat ctggccagtt tatgaaggag ggaaacactc 120
<210> 90
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 90
taactagctc ttttgggaca attctgagga aatgttctag aaatgaaaca tgttctaata 60
atacagtaat ctctcaggat cttgattata aagaagcaaa atgtaataag gaaaaactac 120
<210> 91
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 91
agattaaaga agatttgtca gatttaactt ttttggaagt tgcgaaagct caagaagcat 60
gtcatggtaa tacttcaaat aaagaacagt taactgctac taaaacggag caaaatataa 120
<210> 92
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 92
aagattttga gacttctgat acattttttc agactgcaag tgggaaaaat attagtgtcg 60
ccaaagagtc atttaataaa attgtaaatt tctttgatca gaaaccagaa gaattgcata 120
<210> 93
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 93
acttttcctt aaattctgaa ttacattctg acataagaaa gaacaaaatg gacattctaa 60
gttatgagga aacagacata gttaaacaca aaatactgaa agaaagtgtc ccagttggta 120
<210> 94
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 94
ctggaaatca actagtgacc ttccagggac aacccgaacg tgatgaaaag atcaaagaac 60
ctactctatt gggttttcat acagctagcg ggaaaaaagt taaaattgca aaggaatctt 120
<210> 95
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 95
tggacaaagt gaaaaacctt tttgatgaaa aagagcaagg tactagtgaa atcaccagtt 60
ttagccatca atgggcaaag accctaaagt acagagaggc ctgtaaagac cttgaattag 120
<210> 96
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 96
catgtgagac cattgagatc acagctgccc caaagtgtaa agaaatgcag aattctctca 60
ataatgataa aaaccttgtt tctattgaga ctgtggtgcc acctaagctc ttaagtgata 120
<210> 97
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 97
atttatgtag acaaactgaa aatctcaaaa catcaaaaag tatctttttg aaagttaaag 60
tacatgaaaa tgtagaaaaa gaaacagcaa aaagtcctgc aacttgttac acaaatcagt 120
<210> 98
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 98
ccccttattc agtcattgaa aattcagcct tagcttttta cacaagttgt agtagaaaaa 60
cttctgtgag tcagacttca ttacttgaag caaaaaaatg gcttagagaa ggaatatttg 120
<210> 99
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 99
atggtcaacc agaaagaata aatactgcag attatgtagg aaattatttg tatgaaaata 60
attcaaacag tactatagct gaaaatgaca aaaatcatct ctccgaaaaa caagatactt 120
<210> 100
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 100
atttaagtaa cagtagcatg tctaacagct attcctacca ttctgatgag gtatataatg 60
attcaggata tctctcaaaa aataaacttg attctggtat tgagccagta ttgaagaatg 120
<210> 101
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 101
agttatttat taccccagaa gctgattctc tgtcatgcct gcaggaagga cagtgtgaaa 60
atgatccaaa aagcaaaaaa gtttcagata taaaagaaga ggtcttggct gcagcatgtc 120
<210> 102
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 102
ttgaagatca aaaaaacact agtttttcca aagtaatatc caatgtaaaa gatgcaaatg 60
catacccaca aactgtaaat gaagatattt gcgttgagga acttgtgact agctcttcac 120
<210> 103
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 103
cctgcaaaaa taaaaatgca gccattaaat tgtccatatc taatagtaat aattttgagg 60
tagggccacc tgcatttagg atagccagtg gtaaaatcgt ttgtgtttca catgaaacaa 120
<210> 104
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 104
ttaaaaaagt gaaagacata tttacagaca gtttcagtaa agtaattaag gaaaacaacg 60
agaataaatc aaaaatttgc caaacgaaaa ttatggcagg ttgttacgag gcattggatg 120
<210> 105
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 105
attcagagga tattcttcat aactctctag ataatgatga atgtagcacg cattcacata 60
aggtttttgc tgacattcag agtgaagaaa ttttacaaca taaccaaaat atgtctggat 120
<210> 106
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 106
tggagaaagt ttctaaaata tcaccttgtg atgttagttt ggaaacttca gatatatgta 60
aatgtagtat agggaagctt cataagtcag tctcatctgc aaatacttgt gggattttta 120
<210> 107
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 107
gcacagcaag tggaaaatct gtccaggtat cagatgcttc attacaaaac gcaagacaag 60
tgttttctga aatagaagat agtaccaagc aagtcttttc caaagtattg tttaaaagta 120
<210> 108
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 108
acgaacattc agaccagctc acaagagaag aaaatactgc tatacgtact ccagaacatt 60
taatatccca aaaaggcttt tcatataatg tggtaaattc atctgctttc tctggattta 120
<210> 109
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 109
gtacagcaag tggaaagcaa gtttccattt tagaaagttc cttacacaaa gttaagggag 60
tgttagagga atttgattta atcagaactg agcatagtct tcactattca cctacgtcta 120
<210> 110
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 110
gacaaaatgt atcaaaaata cttcctcgtg ttgataagag aaacccagag cactgtgtaa 60
actcagaaat ggaaaaaacc tgcagtaaag aatttaaatt atcaaataac ttaaatgttg 120
<210> 111
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 111
aaggtggttc ttcagaaaat aatcactcta ttaaagtttc tccatatctc tctcaatttc 60
aacaagacaa acaacagttg gtattaggaa ccaaagtgtc acttgttgag aacattcatg 120
<210> 112
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 112
acccagtaca acattcaaaa gtggaataca gtgatactga ctttcaatcc cagaaaagtc 60
ttttatatga tcatgaaaat gccagcactc ttattttaac tcctacttcc aaggatgttc 120
<210> 113
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 113
ttttgggaaa agaacaggct tcacctaaaa acgtaaaaat ggaaattggt aaaactgaaa 60
ctttttctga tgttcctgtg aaaacaaata tagaagtttg ttctacttac tccaaagatt 120
<210> 114
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 114
cagaaaacta ctttgaaaca gaagcagtag aaattgctaa agcttttatg gaagatgatg 60
aactgacaga ttctaaactg ccaagtcatg ccacacattc tctttttaca tgtcccgaaa 120
<210> 115
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 115
atgaggaaat ggttttgtca aattcaagaa ttggaaaaag aagaggagag ccccttatct 60
tagtgggtaa gtgttcattt ttacctttcg tgttgccaat cactattttt aaagtgttta 120
<210> 116
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 116
tgtcaaacct agtcatgatt tctagaggca aagaatcata caaaatgtca gacaagctca 60
aaggtaacaa ttatgaatct gatgttgaat taaccaaaaa tattcccatg gaaaagaatc 120
<210> 117
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 117
aagatgtatg tgctttaaat gaaaattata aaaacgttga gctgttgcca cctgaaaaat 60
acatgagagt agcatcacct tcaagaaagg tacaattcaa ccaaaacaca aatctaagag 120
<210> 118
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 118
taatccaaaa aaatcaagaa gaaactactt caatttcaaa aataactgtc aatccagact 60
ctgaagaact tttctcagac aatgagaata attttgtctt ccaagtagct aatgaaagga 120
<210> 119
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 119
ataatcttgc tttaggaaat actaaggaac ttcatgaaac agacttgact tgtgtaaacg 60
aacccatttt caagaactct accatggttt tatatggaga cacaggtgat aaacaagcaa 120
<210> 120
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 120
cccaagtgtc aattaaaaaa gatttggttt atgttcttgc agaggagaac aaaaatagtg 60
taaagcagca tataaaaatg actctaggtc aagatttaaa atcggacatc tccttgaata 120
<210> 121
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 121
atttcttttt aggagaaccc tcaatcaaaa gaaacttatt aaatgaattt gacaggataa 60
tagaaaatca agaaaaatcc ttaaaggctt caaaaagcac tccagatggt aaaattagct 120
<210> 122
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 122
gtaatataaa ataattgttt cctaggcaca ataaaagatc gaagattgtt tatgcatcat 60
gtttctttag agccgattac ctgtgtaccc tttcggtaag acatgtttaa atttttctaa 120
<210> 123
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 123
aacgtcaaga gatacagaat ccaaatttta ccgcacctgg tcaagaattt ctgtctaaat 60
ctcatttgta tgaacatctg actttggaaa aatcttcaag caatttagca gtttcaggac 120
<210> 124
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 124
atccatttta tcaagtttct gctacaagaa atgaaaaaat gagacacttg attactacag 60
gcagaccaac caaagtcttt gttccacctt ttaaaactaa atcacatttt cacagagttg 120
<210> 125
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 125
aacagtgtgt taggaatatt aacttggagg aaaacagaca aaagcaaaac attgatggac 60
atggctctga tgatagtaaa aataagatta atgacaatga gattcatcag tttaacaaaa 120
<210> 126
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 126
acaactccaa tcaagcagta gctgtaactt tcacaaagtg tgaagaagaa cctttaggta 60
ttgtatgaca atttgtgtga tgaatttttg cctttcagtt agatatttcc gttgttaaat 120
<210> 127
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 127
atttttgcta agtatttatt ctttgataga tttaattaca agtcttcaga atgccagaga 60
tatacaggat atgcgaatta agaagaaaca aaggcaacgc gtctttccac agccaggcag 120
<210> 128
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 128
tctgtatctt gcaaaaacat ccactctgcc tcgaatctct ctgaaagcag cagtaggagg 60
ccaagttccc tctgcgtgtt ctcataaaca ggtatgtgtt tgtctacaat actgatggct 120
<210> 129
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 129
tttttgtgtg tgtttatttt gtgtagctgt atacgtatgg cgtttctaaa cattgcataa 60
aaattaacag caaaaatgca gagtcttttc agtttcacac tgaagattat tttggtaagg 120
<210> 130
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 130
aaagtttatg gactggaaaa ggaatacagt tggctgatgg tggatggctc ataccctcca 60
atgatggaaa ggctggaaaa gaagaatttt ataggtactc tatgcaaaaa gattgtgtgt 120
<210> 131
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 131
tttttatgat aatattctac ttttatttgt tcagggctct gtgtgacact ccaggtgtgg 60
atccaaagct tatttctaga atttgggttt ataatcacta tagatggatc atatggaaac 120
<210> 132
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 132
tggcagctat ggaatgtgcc tttcctaagg aatttgctaa tagatgccta agcccagaaa 60
gggtgcttct tcaactaaaa tacaggcaag tttaaagcat tacattacgt aatcatatac 120
<210> 133
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 133
agatatgata cggaaattga tagaagcaga agatcggcta taaaaaagat aatggaaagg 60
gatgacacag ctgcaaaaac acttgttctc tgtgtttctg acataatttc attgagcgca 120
<210> 134
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 134
aatatatctg aaacttctag caataaaact agtagtgcag atacccaaaa agtggccatt 60
attgaactta cagatgggtg gtatgctgtt aaggcccagt tagatcctcc cctcttagct 120
<210> 135
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 135
gtcttaaaga atggcagact gacagttggt cagaagatta ttcttcatgg agcagaactg 60
gtgggctctc ctgatgcctg tacacctctt gaagccccag aatctcttat gttaaaggta 120
<210> 136
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 136
catatttaac tactaaatca atatatttat taatttgtcc agatttctgc taacagtact 60
cggcctgctc gctggtatac caaacttgga ttctttcctg accctagacc ttttcctctg 120
<210> 137
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 137
cccttatcat cgcttttcag tgatggagga aatgttggtt gtgttgatgt aattattcaa 60
agagcatacc ctatacaggt atgatgtatt cttgaaactt accatatatt tctttctttt 120
<210> 138
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 138
gaatgttata tatgtgactt ttttggtgtg tgtaacacat tattacagtg gatggagaag 60
acatcatctg gattatacat atttcgcaat gaaagagagg aagaaaagga agcagcaaaa 120
<210> 139
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 139
tatgtggagg cccaacaaaa gagactagaa gccttattca ctaaaattca ggaggaattt 60
gaagaacatg aaggtaaaat tagttatatg gtacacattg ttatttctaa tatgagaaca 120
<210> 140
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 140
agttttagtt gcttttgaat ttacagttta gtgaattaat aatccttttg ttttcttaga 60
aaacacaaca aaaccatatt taccatcacg tgcactaaca agacagcaag ttcgtgcttt 120
<210> 141
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 141
gcaagatggt gcagagcttt atgaagcagt gaagaatgca gcagacccag cttaccttga 60
ggtgagagag taagaggaca tataatgagg cttgatgatt attcaaggtg agaagctgtt 120
<210> 142
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 142
aatatcttaa atggtcacag ggttatttca gtgaagagca gttaagagcc ttgaataatc 60
acaggcaaat gttgaatgat aagaaacaag ctcagatcca gttggaaatt aggaaggcca 120
<210> 143
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 143
tggaatctgc tgaacaaaag gaacaaggtt tatcaaggga tgtcacaacc gtgtggaagt 60
tgcgtattgt aagctattca aaaaaagaaa aagattcagg taagtatgta aatgctttgt 120
<210> 144
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 144
cttcttccat tgcatctttc tcatctttct ccaaacagtt atactgagta tttggcgtcc 60
atcatcagat ttatattctc tgttaacaga aggaaagaga tacagaattt atcatcttgc 120
<210> 145
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 145
aacttcaaaa tctaaaagta aatctgaaag agctaacata cagttagcag cgacaaaaaa 60
aactcagtat caacaactac cggtacaaac ctttcattgt aatttttcag ttttgataag 120
<210> 146
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 146
gttagtttat ggaatctcca tatgttgaat ttttgttttg ttttctgtag gtttcagatg 60
aaattttatt tcagatttac cagccacggg agccccttca cttcagcaaa tttttagatc 120
<210> 147
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 147
cagactttca gccatcttgt tctgaggtgg acctaatagg atttgtcgtt tctgttgtga 60
aaaaaacagg taatgcacaa tatagttaat tttttttatt gattctttta aaaaacattg 120
<210> 148
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 148
tcttaaaatt catctaacac atctataata acattctttt cttttttttc cattctagga 60
cttgcccctt tcgtctattt gtcagacgaa tgttacaatt tactggcaat aaagttttgg 120
<210> 149
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 149
atagacctta atgaggacat tattaagcct catatgttaa ttgctgcaag caacctccag 60
tggcgaccag aatccaaatc aggccttctt actttatttg ctggagattt ttctgtgttt 120
<210> 150
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 150
tctgctagtc caaaagaggg ccactttcaa gagacattca acaaaatgaa aaatactgtt 60
gaggtaaggt tacttttcag catcaccaca cattttggta tttttctatt ttgacagtcc 120
<210> 151
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 151
tgtgggtttg caatttataa agcagctttt ccacttattt tcttagaata ttgacatact 60
ttgcaatgaa gcagaaaaca agcttatgca tatactgcat gcaaatgatc ccaagtggtc 120
<210> 152
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 152
caccccaact aaagactgta cttcagggcc gtacactgct caaatcattc ctggtacagg 60
aaacaagctt ctggtaagtt aatgtaaact caaggaatat tataagaagt atatatggag 120
<210> 153
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 153
tagtttttta tgttactaca taattatgat aggctacgtt ttcatttttt tatcagatgt 60
cttctcctaa ttgtgagata tattatcaaa gtcctttatc actttgtatg gccaaaagga 120
<210> 154
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 154
agtctgtttc cacacctgtc tcagcccaga tgacttcaaa gtcttgtaaa ggggagaaag 60
agattgatga ccaaaagaac tgcaaaaaga gaagagcctt ggatttcttg agtagactgc 120
<210> 155
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 155
ctttacctcc acctgttagt cccatttgta catttgtttc tccggctgca cagaaggcat 60
ttcagccacc aaggagttgt ggcaccaaat acgaaacacc cataaagaaa aaagaactga 120
<210> 156
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 156
attctcctca gatgactcca tttaaaaaat tcaatgaaat ttctcttttg gaaagtaatt 60
caatagctga cgaagaactt gcattgataa atacccaagc tcttttgtct ggttcaacag 120
<210> 157
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 157
gagaaaaaca atttatatct gtcagtgaat ccactaggac tgctcccacc agttcagaag 60
attatctcag actgaaacga cgttgtacta catctctgat caaagaacag gagagttccc 120
<210> 158
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 158
aggccagtac ggaagaatgt gagaaaaata agcaggacac aattacaact aaaaaatata 60
tctaagcatt tgcaaaggcg acaataaatt attgacgctt aacctttcca gtttataaga 120
<210> 159
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 159
atggataagg ggggactact actatatgtg cattgagagt ttttatacta gtgattttaa 60
actataattt ttgcagaatg tgaaaagcta tttttccaat catgatgaaa gtctgaagaa 120
<210> 160
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 160
ctagtgattt taaactataa tttttgcaga atgtgaaaag ctatttttcc aatcatgatg 60
aaagtctgaa gaaaaatgat agatttatcg cttctgtgac agacagtgaa aacacaaatc 120
<210> 161
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 161
tccaatcatg atgaaagtct gaagaaaaat gatagattta tcgcttctgt gacagacagt 60
gaaaacacaa atcaaagaga agctgcaagt catggtaagt cctctgttta gttgaactac 120
<210> 162
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 162
tgtgacagac agtgaaaaca caaatcaaag agaagctgca agtcatggta agtcctctgt 60
ttagttgaac tacaggtttt tttgttgttg ttgttttgat tttttttttt tgaggtggag 120
<210> 163
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 163
tttctactga agctctgcaa aaagctgtga aactgtttag tgatattgag aatattagtg 60
aggaaacttc tgcagaggta catccaataa gtttatcttc aagtaaatgt catgattctg 120
<210> 164
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 164
taactgctac taaaacggag caaaatataa aagattttga gacttctgat acattttttc 60
agactgcaag tgggaaaaat attagtgtcg ccaaagagtc atttaataaa attgtaaatt 120
<210> 165
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 165
agactgcaag tgggaaaaat attagtgtcg ccaaagagtc atttaataaa attgtaaatt 60
tctttgatca gaaaccagaa gaattgcata acttttcctt aaattctgaa ttacattctg 120
<210> 166
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 166
tctttgatca gaaaccagaa gaattgcata acttttcctt aaattctgaa ttacattctg 60
acataagaaa gaacaaaatg gacattctaa gttatgagga aacagacata gttaaacaca 120
<210> 167
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 167
acataagaaa gaacaaaatg gacattctaa gttatgagga aacagacata gttaaacaca 60
aaatactgaa agaaagtgtc ccagttggta ctggaaatca actagtgacc ttccagggac 120
<210> 168
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 168
aggaaacttc tgcagaggta catccaataa gtttatcttc aagtaaatgt catgattctg 60
ttgtttcaat gtttaagata gaaaatcata atgataaaac tgtaagtgaa aaaaataata 120
<210> 169
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 169
ttgtttcaat gtttaagata gaaaatcata atgataaaac tgtaagtgaa aaaaataata 60
aatgccaact gatattacaa aataatattg aaatgactac tggcactttt gttgaagaaa 120
<210> 170
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 170
aatgccaact gatattacaa aataatattg aaatgactac tggcactttt gttgaagaaa 60
ttactgaaaa ttacaagaga aatactgaaa atgaagataa caaatatact gctgccagta 120
<210> 171
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 171
ttactgaaaa ttacaagaga aatactgaaa atgaagataa caaatatact gctgccagta 60
gaaattctca taacttagaa tttgatggca gtgattcaag taaaaatgat actgtttgta 120
<210> 172
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 172
gaaattctca taacttagaa tttgatggca gtgattcaag taaaaatgat actgtttgta 60
ttcataaaga tgaaacggac ttgctattta ctgatcagca caacatatgt cttaaattat 120
<210> 173
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 173
ttcataaaga tgaaacggac ttgctattta ctgatcagca caacatatgt cttaaattat 60
ctggccagtt tatgaaggag ggaaacactc agattaaaga agatttgtca gatttaactt 120
<210> 174
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 174
ctggccagtt tatgaaggag ggaaacactc agattaaaga agatttgtca gatttaactt 60
ttttggaagt tgcgaaagct caagaagcat gtcatggtaa tacttcaaat aaagaacagt 120
<210> 175
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 175
ttttggaagt tgcgaaagct caagaagcat gtcatggtaa tacttcaaat aaagaacagt 60
taactgctac taaaacggag caaaatataa aagattttga gacttctgat acattttttc 120
<210> 176
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 176
gtaagtattt ttgtttaaca tttaaagagt caatacttta gctttaaaaa aatggtctat 60
agacttttga gaaataaaac tgatattatt tgccttaaaa acatatatga aatatttctt 120
<210> 177
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 177
agacttttga gaaataaaac tgatattatt tgccttaaaa acatatatga aatatttctt 60
tttaggagaa ccctcaatca aaagaaactt attaaatgaa tttgacagga taatagaaaa 120
<210> 178
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 178
tttaggagaa ccctcaatca aaagaaactt attaaatgaa tttgacagga taatagaaaa 60
tcaagaaaaa tccttaaagg cttcaaaaag cactccagat ggtaaaatta gctttttatt 120
<210> 179
<211> 119
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 179
tcaagaaaaa tccttaaagg cttcaaaaag cactccagat ggtaaaatta gctttttatt 60
tatatctgtt ctccctctat aggtatggta tataatattc tgacctcagg tgatccacc 119
Claims (10)
1.一种用于检测BRCA基因大片段重排的探针,其特征在于,
所述探针为SED ID No.1-SED ID No.179所示的序列。
2.根据权利要求1所述的探针,其特征在于,所述BRCA基因大片段重排的区域包括BRCA1基因转录本NM_007294.3中 2-23 号外显子的蛋白编码区、BRCA2基因转录本NM_000059.3中2-27 号外显子的蛋白编码区、外显子-内含子1-20bp 连接区、BRCA1基因的部分5’UTR序列GTTCATTGGAACAGAAAGAA、BRCA1基因的部分3’UTR序列CTGCAGCCAGCCACAGGTAC、BRCA2基因的部分5’UTR序列GAGGAATATCGTAGGTAAAA、BRCA2基因的部分3’UTR序列GCATTTGCAAAGGCGACAAT中的至少一个区域。
3.一种用于检测BRCA基因大片段重排的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括至少一次用量的如权利要求1、2任一所述的探针。
4.权利要求1、2任一所述的探针或权利要求3所述的试剂盒在检测BRCA基因大片段重排中的应用。
5.权利要求1、2任一所述的探针或权利要求3所述的试剂盒在制备用于检测BRCA基因大片段重排产品中的应用。
6.根据权利要求5所述的应用,其特征在于,所述产品还包括计算机软硬件。
7.权利要求1、2任一所述的探针或权利要求3所述的试剂盒在制备用于检测BRCA基因大片段重排相关疾病的产品中的应用。
8.根据权利要求7所述的应用,其特征在于,所述产品还包括计算机软硬件。
9.一种检测BRCA基因大片段重排的方法,其特征在于,包括:
提取检测样本的DNA,构建DNA文库;
将权利要求1、2任一所述的探针或权利要求3所述的试剂盒中的探针与所述DNA文库杂交捕获,获得杂交捕获文库;
对所述杂交捕获文库进行二代测序获得测序结果;
对所述测序结果进行生物学信息分析,得到所述检测样本的BRCA基因大片段重排信息。
10.根据权利要求9所述的方法,其特征在于,所述检测样本为外周血细胞。
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Citations (4)
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CN107760688A (zh) * | 2016-08-18 | 2018-03-06 | 深圳华大基因研究院 | 一种brca2基因突变体及其应用 |
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2022
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Non-Patent Citations (1)
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