CN114504842B - 一种棉纤维支撑液相萃取装置及在药物浓度检测中的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及棉纤维支撑液相萃取装置及在药物浓度检测中的应用,可有效解决易操作、速度快,成本低对药物浓度的检测问题,包括管体、棉纤维和收集瓶,管体内出液口上装有棉纤维,管体内装有液体样品,液体样品内有与液体样品混合在一起的弱极性药物,构成复合物,棉纤维浸入解吸溶剂中,复合物与解吸溶剂溶融在一起,构成解吸液,管体上部有加物开口,下部有与上部加物开口同心的出液口,出液口下部有同心的收集瓶,收集瓶的进液口正对管体下部的出液口,本发明结构新颖独特,易制备,使用方便,成本低,快速准确,方法简单,易操作,可有效解决药物浓度的检测,实现棉纤维支撑液相萃取装置在药物浓度检测中的应用,是药物浓度检测上的一大创新。
Description
技术领域
本发明涉及药物浓度检测,特别是样本前处理和分析检测的一种棉纤维支撑液相萃取装置及在药物浓度检测中的应用。
背景技术
在样品的分析检测领域,样品的前处理对其分析检测和结果有着重要的作用及较大的影响。高效的样品前处理可以去除基质体中的干扰杂质,从而提高分析精确度、提高检测灵敏度、提高分离效果,从而得到准确、令人满意的结果(《中国医院药学杂志》,2014年,第33卷,4144页)。但是,传统的样品前处理方法如液液萃取、索氏萃取等,存在着耗时、费力、萃取时间长、操作步骤繁琐、处理通量低等问题(《中国中药杂志》,2014年,第39卷,4143页)。因此亟需开发高效、高通量、低成本的样品前处理方法。
目前,研究者们做出不断创新,发展出了一系列的前处理方法,目前应用较普遍的前处理技术主要包括固相萃取(SPE)、固相微萃取(SPME)、液相微萃取(LPME)、固相支撑液液萃取(SLE)等(《色谱》杂志,2021年,39卷,第781页)。固相萃取是由液固萃取和液相色谱技术相结合发展而来的,是利用固体吸附剂将液体样品中的目标物吸附,进而分离目标化合物,与液液萃取相比,固相萃取有较高的回收率,减少有机溶剂的消耗,且省时省力等优势。固相微萃取技术(《分析测试学报》,2021年,第40卷,202页)是基于涂有熔融石英纤维作为固定相来富集样品中的待测物质,它以SPE为基础保留了其优点,又有无需溶剂处理的特点,在临床医药、环境、食品等存在广泛的应用。但是,不管是SPE还是SPME,其价格较高,因此分析检测成本较大。液相萃取作为一种古老的样品前处理技术,具有重现性好、分离效果好、成本低廉等优势,仍然在样品前处理中占据一席之地(《分析测试学报》,2016年,35卷,913页)。固相支撑液相萃取(SLE)(《分析化学》,2019年,第49卷,877页)作为一种基于液相萃取原理的样品前处理技术可更高效地进行液-液萃取,特别适合水溶性基质样品制备。该技术简化了LLE工艺,无乳浊液单步工艺易于操作且溶剂利用率高,节省了溶剂和时间。SLE的填料一种是硅藻土填料,另一种是人工合成基质填料,两种填料具有相同的作用,其原理是利用硅藻土作为液液分配萃取的一个支撑表面,靠较强的吸水性分离目标物和水分。SLE前处理过程与SPE相比,无需活化、清洗等繁琐步骤,而是直接加入含水性的样品,加入样品后,样品不会流出,会在硅藻土上逐渐扩散并被全部吸附在硅藻土表面,再加入与水相不相混溶的有机溶剂,此时目标分析物可被有机溶剂溶解并洗脱下来。样品处理只需要上样和洗脱两步,既可从水相中萃取目标分析物,与SPE、LPME技术相比,具有操作简单、快速、高效、耗时少等特点。SLE技术目前己经被用来处理人体体液如尿液、血浆等样品前处理过程。
与SPE、SPME、LPME前处理技术相比较,SLE萃取技术有操作步骤更加简便、省时省力、有机溶剂消耗少、回收率较高等特点,然而目前现有的固相支撑液液萃取装置及其使用仍存在以下问题:
1、现有固相支撑液相萃取装置由于使用的是粉末状的填料,因此通常需要额外的两个筛板来将硅藻土等固定在SPE柱管中,额外的筛板的引入导致价格相对较高。
2、现有固相支撑液相萃取柱中的硅藻土及合成材料需经过特殊工艺处理,因此增加生产工艺过程的复杂性及成本。
因此,现有固相、液相支撑萃取技术上的改进和创新是亟待解决的技术问题。
发明内容
针对上述情况,为克服现有技术之缺陷,本发明之目的就是提供一种棉纤维支撑液相萃取装置及在药物浓度检测中的应用,可有效解决易操作、速度快,成本低对药物浓度的检测问题。
本发明解决的技术方案是,一种棉纤维支撑液相萃取装置,包括管体、棉纤维和收集瓶,管体内出液口上装有棉纤维,管体内装有液体样品,液体样品内有与液体样品混合在一起的弱极性药物,构成复合物,棉纤维浸入解吸溶剂中,复合物与解吸溶剂溶融在一起,构成解吸液,管体上部有加物开口,下部有与上部加物开口同心的出液口,出液口下部有同心的收集瓶,收集瓶的进液口正对管体下部的出液口;
所述的棉纤维支撑液相萃取装置药物浓度检测中的应用,包括以下步骤:
(1)装棉纤维:将棉纤维填充至两端开口的柱状管体中,制得棉纤维支撑液相萃取柱;
(2)上样:将液体样品从上方加物开口添加到棉纤维上,液体样品被棉纤维吸收而不会从下方流出来;
(3)解吸:将与水不互溶的解吸溶剂从加物开口添加至柱状管体中,解吸溶剂由于重力作用从下端流出,在流经棉纤维时将样品中的弱极性药物萃取出来;
所述的解吸溶剂是乙酸乙酯;
(4)分析:收集解吸液,解吸液直接转至分析仪器中进行分析或者吹干溶后采用分析仪器进行分析,实现对药物浓度的检测。
本发明结构新颖独特,易制备,使用方便,成本低,快速准确,方法简单,易操作,可有效解决药物浓度的检测,实现棉纤维支撑液相萃取装置在药物浓度检测中的应用,是药物浓度检测上的一大创新,有显著的经济和社会效益。
附图说明
图1为本发明装置管体及棉纤维的装配主视图。
图2为本发明装置管体内装有液体样品及药物的主视图。
图3为本发明装置的结构主视图。
图4为本发明试剂检测比较图谱图,其中:(A)空白尿样,(B)蛋白同化激素标准品,(C)加标尿样,1诺龙,2睾酮,3甲睾酮,4丙酸睾酮。
图5为本发明试剂另一实施例检测图谱图,其中:(A)空白尿样,(B)糖皮质激素标准品,(C)加标尿样,三种糖皮质激素1:波尼松,2:地塞米松,3:氢化可的松。
具体实施方式
以下结合实施例和具体情况对本发明的具体实施方式作详细说明。
由图1-3所示,本发明一种棉纤维支撑液相萃取装置,包括管体、棉纤维和收集瓶,管体1内出液口9上装有棉纤维2,管体内装有液体样品3,液体样品3内有与液体样品混合在一起的弱极性药物4,构成复合物,棉纤维2浸入解吸溶剂5中,复合物与解吸溶剂5溶融在一起,构成解吸液6,管体上部有加物开口8,下部有与上部加物开口同心的出液口9,出液口下部有同心的收集瓶7,收集瓶7的进液口正对管体下部的出液口9。
为了保证使用效果和使用方便,所述的收集瓶7的上部瓶口上置有可打开瓶盖10;
所述的管体1为塑料、玻璃、陶瓷或金属材料制成的空心柱状;
所述的空心柱状横截面为圆形、矩形、菱形、三角形、八角形、不规则多边形等任意一种;
所述的管体下端的出液口9的口径小于空心柱状的横截面;
所述的棉纤维为普通棉纤维、脱脂棉纤维或棉布纤维的任意一种;
所述的液体样品唾液、尿液、汗液、积液的任意一种体液样品;
所述的弱极性药物为药物、药物代谢物、毒物任意弱极性物质中的一种或多种。
所述的解吸溶剂为乙酸乙酯。
本发明一种棉纤维支撑液相萃取装置在药物浓度检测中的应用,包括以下步骤:
(1)装棉纤维:将棉纤维2填充至两端开口的柱状管体1中,制得棉纤维支撑液相萃取柱;
(2)上样:将液体样品3从上方加物开口8添加到棉纤维2上,液体样品3被棉纤维吸收而不会从下方流出来;
(3)解吸:将与水不互溶的解吸溶剂5从加物开口8添加至柱状管体1中,解吸溶剂由于重力作用从下端流出,在流经棉纤维时将样品中的弱极性药物4萃取出来;
所述的解吸溶剂是乙酸乙酯;
(4)分析:收集解吸液6,解吸液直接转至分析仪器中进行分析或者吹干溶后采用分析仪器进行分析,实现对药物浓度的检测;
所述的分析仪器为光谱仪、色谱仪、质谱仪任意一种分析仪器或其联用分析仪器。
以下结合实施例对本发明的具体检测方法作详细说明。
实施例1
本发明一种棉纤维支撑液相萃取装置在药物浓度检测中的应用,方法是:
1、装棉纤维
称取200mg的脱脂棉纤维,然后装入管体(管体可为5.0mL一次性塑料注射器筒)中,并用注射器的活塞轻轻压实,使脱脂棉纤维在管体中的高度为1cm;
2、样品的采集
空白尿液取自健康志愿者,将蛋白同化激素标准品加入到上述空白尿液中,得到2μg/mL的加标尿液,所有尿液均在12h内处理与分析;
3、棉纤维支撑液相萃取
用移液器移取上述预处理过的尿液200μL缓慢加入管体中的脱脂棉纤维上,使其静置5min,之后向管体上的脱脂棉纤维上少量多次加入2mL乙酸乙酯溶液进行淋洗,用4mL试管收集洗脱液,接着用氮气把洗脱液吹至干,最后体积比50︰50的200μL甲醇/超纯水进行洗脱液的复溶,然后再将复溶后的溶液转移到液相色谱进样小瓶中,供进样分析;
4、分析检测
解吸液采用高效液相色谱-紫外检测仪进行分析检测,检测条件:型号为Waterse2695液相色谱仪,配2475紫外和2489荧光检测器,色谱柱为Thermo C18柱,直径4.6mm,高250mm,样品5μm,流动相为水/甲醇,水和甲醇体积比为70︰30,紫外检测波长为230nm,流动相流速为1mL/min,柱温为30℃,进样量为10μL;
5、可行性实验
为了考察所述方法的可行性,采用空白尿样和加标尿样2μg/mL进行实验,并与2μg/mL的标准品溶液直接进样分析进行对比,结果见图4,由图中4可知,加标尿液中四种甾酮类物质(诺龙、睾酮、甲睾酮、丙酸睾酮)均成功检出,而在空白尿液中无干扰,经计算,四种甾酮的回收率分别为85%、89%、92%和93%,均较为理想。
实施例2
本发明一种棉纤维支撑液相萃取装置在药物浓度检测中的应用,方法是:
1、装棉纤维
称取200mg的脱脂棉纤维,然后装入管体(管体可为5.0mL一次性塑料注射器筒)中,并用注射器的活塞轻轻压实,使脱脂棉纤维在管体中的高度为1cm;
2、样品的采集
空白尿液取自健康志愿者,将蛋白同化激素标准品加入到上述空白尿液中,得到2μg/mL的加标尿液,所有尿液均在12h内处理与分析;
3、棉纤维支撑液相萃取
用移液器移取上述预处理过的尿液200μL缓慢加入管体中的脱脂棉纤维上,使其静置5min,之后向管体上的脱脂棉纤维上少量多次加入2mL乙酸乙酯溶液进行淋洗,用4mL试管收集洗脱液,接着用氮气把洗脱液吹至干,最后体积比50︰50的200μL甲醇/超纯水进行洗脱液的复溶,然后再将复溶后的溶液转移到液相色谱进样小瓶中,供进样分析;
4、分析检测
解吸液采用高效液相色谱-紫外检测仪进行分析检测,检测条件:型号为Waterse2695液相色谱仪,配2475紫外和2489荧光检测器,色谱柱为Thermo C18柱,直径4.6mm,高150mm,样品5μm,流动相为水/甲醇,水和甲醇体积比为40︰60,紫外检测波长为240nm,流动相流速为1mL/min,柱温为30℃,进样量为10μL;
5、可行性实验
为了考察所述方法的可行性,采用空白尿样和加标尿样2μg/mL进行实验,并与2μg/mL的标准品溶液直接进样分析进行对比,结果见图5,由图中5可知,加标尿液中三种糖皮质激素类药物(波尼松,地塞米松,氢化可的松)均成功检出,而在空白尿液中无干扰,经计算,三种糖皮质激素的回收率分别为55%、59%和60%,均较为理想。
由上述可以清楚看出,本发明设备结构新颖独特,易制备,使用方便,成本仅为原检测方法的1/5~2/5,快速准确,检测速度可提高2倍以上,准确率高达93%,方法简单,易操作,可有效解决药物浓度的检测,实现棉纤维支撑液相萃取装置在药物浓度检测中的应用,是药物浓度检测上的一大创新,有显著的经济和社会效益。
Claims (6)
1.一种棉纤维支撑液相萃取装置在药物浓度检测中的应用,其特征在于,包括以下步骤:
(1)构建棉纤维支撑液相萃取装置:
该装置包括管体、棉纤维和收集瓶,管体(1)内出液口(9)上装有棉纤维(2),管体内装有液体样品(3),液体样品(3)内有与液体样品混合在一起的弱极性药物(4),构成复合物,棉纤维(2)浸入解吸溶剂(5)中,复合物与解吸溶剂(5)溶融在一起,构成解吸液(6),管体上部有加物开口(8),下部有与上部加物开口同心的出液口(9),出液口下部有同心的收集瓶(7),收集瓶(7)的进液口正对管体下部的出液口(9);
(2)装棉纤维:将棉纤维(2)填充至两端开口的柱状管体(1)中,制得棉纤维支撑液相萃取柱;
所述的棉纤维为普通棉纤维、脱脂棉纤维或棉布纤维的任意一种;
(3)上样:将液体样品(3)从上方加物开口(8)添加到棉纤维(2)上,液体样品(3)被棉纤维吸收而不会从下方流出来;
所述的液体样品是唾液、尿液、汗液、积液的任意一种体液样品;
(4)解吸:将与水不互溶的解吸溶剂(5)从加物开口(8)添加至柱状管体(1)中,解吸溶剂由于重力作用从下端流出,在流经棉纤维时将样品中的弱极性药物(4)萃取出来;
所述的解吸溶剂是乙酸乙酯;
所述的弱极性药物为药物、药物代谢物、毒物任意弱极性物质中的一种或多种;
(5)分析:收集解吸液(6),解吸液直接转至分析仪器中进行分析或者吹干溶后采用分析仪器进行分析,实现对药物浓度的检测;
所述的分析仪器为光谱仪、色谱仪、质谱仪任意一种分析仪器或其联用分析仪器。
2.根据权利要求1所述的棉纤维支撑液相萃取装置在药物浓度检测中的应用,其特征在于:
(1)、装棉纤维
称取200mg的脱脂棉纤维,然后装入管体中,并用注射器的活塞轻轻压实,使脱脂棉纤维在管体中的高度为1cm;
(2)、样品的采集
空白尿液取自健康志愿者,将蛋白同化激素标准品加入到上述空白尿液中,得到2μg/mL的加标尿液,所有尿液均在12h内处理与分析;
(3)、棉纤维支撑液相萃取
用移液器移取上述预处理过的尿液200μL缓慢加入管体中的脱脂棉纤维上,使其静置5min,之后向管体上的脱脂棉纤维上少量多次加入2mL乙酸乙酯溶液进行淋洗,用4mL试管收集洗脱液,接着用氮气把洗脱液吹至干,最后体积比50︰50的200μL甲醇/超纯水进行洗脱液的复溶,然后再将复溶后的溶液转移到液相色谱进样小瓶中,供进样分析;
(4)、分析检测
解吸液采用高效液相色谱-紫外检测仪进行分析检测,检测条件:型号为Waters e2695液相色谱仪,配2475紫外和2489荧光检测器,色谱柱为Thermo C18柱,直径4.6mm,高250mm,样品5μm,流动相为水/甲醇,水和甲醇体积比为70︰30,紫外检测波长为230nm,流动相流速为1mL/min,柱温为30℃,进样量为10μL;
(5)、可行性实验
采用空白尿样和加标尿样2μg/mL进行实验,并与2μg/mL的标准品溶液直接进样分析进行对比,加标尿液中四种甾酮类物质诺龙、睾酮、甲睾酮、丙酸睾酮均成功检出,而在空白尿液中无干扰,经计算,四种甾酮的回收率分别为85%、89%、92%和93%。
3.根据权利要求1所述的棉纤维支撑液相萃取装置在药物浓度检测中的应用,其特征在于:
(1)、装棉纤维
称取200mg的脱脂棉纤维,然后装入管体中,并用注射器的活塞轻轻压实,使脱脂棉纤维在管体中的高度为1cm;
(2)、样品的采集
空白尿液取自健康志愿者,将糖皮质激素标准品加入到上述空白尿液中,得到2μg/mL的加标尿液,所有尿液均在12h内处理与分析;
(3)、棉纤维支撑液相萃取
用移液器移取上述预处理过的尿液200μL缓慢加入管体中的脱脂棉纤维上,使其静置5min,之后向管体上的脱脂棉纤维上少量多次加入2mL乙酸乙酯溶液进行淋洗,用4mL试管收集洗脱液,接着用氮气把洗脱液吹至干,最后体积比50︰50的200μL甲醇/超纯水进行洗脱液的复溶,然后再将复溶后的溶液转移到液相色谱进样小瓶中,供进样分析;
(4)、分析检测
解吸液采用高效液相色谱-紫外检测仪进行分析检测,检测条件:型号为Waters e2695液相色谱仪,配2475紫外和2489荧光检测器,色谱柱为Thermo C18柱,直径4.6mm,高150mm,样品5μm,流动相为水/甲醇,水和甲醇体积比为40︰60,紫外检测波长为240nm,流动相流速为1mL/min,柱温为30℃,进样量为10μL;
(5)、可行性实验
采用空白尿样和加标尿样2μg/mL进行实验,并与2μg/mL的标准品溶液直接进样分析进行对比,加标尿液中三种糖皮质激素类药物波尼松、地塞米松、氢化可的松均成功检出,而在空白尿液中无干扰,经计算,三种糖皮质激素的回收率分别为55%、59%和60%。
4.根据权利要求1所述的棉纤维支撑液相萃取装置在药物浓度检测中的应用,其特征在于,所述的收集瓶(7)的上部瓶口上置有可打开瓶盖(10)。
5.根据权利要求1所述的棉纤维支撑液相萃取装置在药物浓度检测中的应用,其特征在于,所述的管体(1)为塑料、玻璃、陶瓷或金属材料制成的空心柱状,空心柱状横截面为圆形、矩形、菱形、三角形、八角形、不规则多边形的任意一种。
6.根据权利要求1所述的棉纤维支撑液相萃取装置在药物浓度检测中的应用,其特征在于,所述的管体下端的出液口(9)的口径小于空心柱状的横截面。
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