CN114480369A - 磁珠保存液、制备方法及磁珠产品 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种磁珠保存液、制备方法及磁珠产品。其中，上述磁珠保存液包括缓冲液、高分子聚合物和/或有机溶剂。该磁珠保存液解决了现有技术中磁珠在高温或低温条件下稳定性差的问题，适用于分子生物学检测技术领域。
Description
技术领域
本发明涉及分子生物学检测技术领域，具体而言，涉及一种磁珠保存液、制备方法及磁珠产品。
背景技术
磁珠法核酸提取试剂是通过将生物技术和纳米材料技术相结合的产品，其中核酸提取磁珠(Magnetic beads for nucleic acid extraction)是对具有超顺磁性的微粒表面进行化学修饰，使之与可以在一定的环境下与核酸结合(DNA/RNA)，并利用纳米微球的超顺磁性，在外加磁场作用下，从血液、组织、病原微生物等样本中分离出DNA和RNA，可应用在临床诊断、法医鉴定、微生物检测、食品安全检测、分子生物学研究等多种领域。
由于核酸提取磁珠具有小尺寸效应和表面效应，可满足微量生物样本核酸提取的要求，且能够通过仪器进行自动化操作，满足对大批量样本的提取要求。因此其应用范围越来越广。
然而在实际应用中发现冷冻或者高温保存会造成磁珠的聚集结块从而导致提取性能下降，所以对于一般的磁珠溶液是不能够在低温或高温条件下储存和运输的，较为合适的保存温度为4～28℃，然而在遇到极寒或高温天气时，往往会对磁珠法核酸提取试剂盒的运输和存储条件提出较高的要求，阻碍了其在实际中的应用效果和产品推广。目前采用纯化水作为磁珠溶液，在低温和高温条件下其保存效果不能令人满意。因此需要开发一款核酸提取磁珠溶液使核酸提取磁珠适合在-20～50℃进行保存。这样遇到恶劣天气时，也能搞保证其运输和存储过程中的稳定性。
发明内容
本发明的主要目的在于提供一种磁珠保存液、制备方法及磁珠产品，以解决现有技术中磁珠在高温或低温条件下稳定性差的问题。
为了实现上述目的，根据本发明的第一个方面，提供了一种磁珠保存液，该磁珠保存液包括缓冲液、高分子聚合物和/或有机溶剂。
进一步地，磁珠保存液进一步包括如下任意一种或多种：螯合剂、表面活性剂或防腐剂。
进一步地，磁珠保存液中磁珠保存液中高分子聚合物和有机溶剂之和为20～50v/v％；优选地，高分子聚合物在磁珠保存液中的浓度为0～40v/v％；有机溶剂在磁珠保存液中的浓度为0～40v/v％；优选地，缓冲液在磁珠保存液中的浓度为5～50mM；优选地，螯合剂在磁珠保存液中的浓度为1～50mM；优选地，表面活性剂在磁珠保存液中的浓度为0.1～1v/v％；优选地，防腐剂在磁珠保存液中的浓度为0.1～1m/v％。
进一步地，高分子聚合物包括聚乙二醇200、聚乙二醇400、聚乙二醇600或聚乙二醇800中的一种或多种。
进一步地，缓冲液包括Tris-盐酸缓冲液、MOPS缓冲液中的一种或多种。
进一步地，有机溶剂包括乙醇或异丙醇中的一种或多种；优选地，螯合剂包括乙二胺四乙酸；优选地，表面活性剂包括吐温20、Triton X100或NP40中的一种或多种。优选地，防腐剂包括Proclin 300、叠氮化钠或硫柳汞中的一种或多种。
进一步地，磁珠保存液包括缓冲液和高分子聚合物；其中，高分子聚合物在磁珠保存液中的浓度为20～50v/v％，或20～40v/v％；或者磁珠保存液包括缓冲液和有机溶剂；其中，有机溶剂在磁珠保存液中的浓度为20～50v/v％，或20～40v/v％；或者磁珠保存液包括缓冲液、高分子聚合物和有机溶剂，其中，高分子聚合物包括聚乙二醇200，有机溶剂包括乙醇，聚乙二醇200和乙醇之和在磁珠保存液中的浓度为20～50v/v％；或者进一步还包括5～50mM Tris-盐酸缓冲液，1～50mM乙二胺四乙酸，0.1～1v/v％吐温20，0.1～1m/v％Proclin300；优选地，0～40v/v％乙醇；优选地，0～40v/v％聚乙二醇200。
进一步地，磁珠保存液包括：聚乙二醇200和乙醇之和为20～50v/v％，5～50mMTris-盐酸缓冲液，1～50mM乙二胺四乙酸，0.1～1v/v％吐温20，0.1～1m/v％Proclin 300；优选地，在磁珠保存液中，包括0～40v/v％乙醇；优选地，在磁珠保存液中，包括0～40v/v％聚乙二醇200。
为了实现上述目的，根据本发明的第二个方面，提供了一种磁珠保存液的制备方法，该制备方法包括以下步骤：
将上述磁珠保存液中的试剂混匀，定容，过滤。
为了实现上述目的，根据本发明的第三个方面，提供了一种磁珠产品，该磁珠产品包括：磁珠，上述磁珠保存液、或利用上述制备方法制备的磁珠保存液，磁珠分散在磁珠保存液中；优选地，磁珠包括核酸提取磁珠；优选地，磁珠产品耐受-20～50℃的温度范围变化。
为了实现上述目的，根据本发明的第四个方面，提供了一种磁珠的保护方法，将磁珠分散于上述磁珠保存液、或利用上述制备方法制备的磁珠保存液，形成上述磁珠产品。
应用本发明的技术方案，提供了一种磁珠保存液、制备方法及磁珠产品，通过向磁珠保存液中添加高分子聚合物和/或有机溶剂，有助于磁珠在高温或低温条件下保持稳定，为磁珠的储存和运输提供保障。
具体实施方式
需要说明的是，在不冲突的情况下，本申请中的实施例及实施例中的特征可以相互组合。下面将结合实施例来详细说明本发明。
如背景技术所提到的，在实际应用中，冷冻或者高温环境会造成磁珠的聚集结块，从而导致其提取性能下降，所以对于一般的磁珠溶液是不能够在低温或高温条件下储存和运输的。对于现有的磁珠溶液，较为合适的保存温度为4～28℃，然而在遇到极寒或高温天气时，往往会对磁珠法核酸提取试剂盒的运输和存储条件提出较高的要求，阻碍了其在实际中的应用效果和产品推广。目前采用纯化水作为磁珠溶液，在低温和高温条件下其保存效果不能令人满意。
因而，在本申请中发明人对磁珠保存液的成分进行探究，发明了一种磁珠保存液，利用此磁珠保存液能够使磁珠在高温或低温条件保持稳定。因而提出了本申请的一系列保护方案。
在本申请第一种典型的实施方式中，提供了一种磁珠保存液，该磁珠保存液包括缓冲液、高分子聚合物和/或有机溶剂。
在另一种优选的实施例中，该磁珠保存液进一步包括以下任意一种或多种添加剂：螯合剂、表面活性剂或防腐剂。
在一种优选的实施例中，磁珠保存液包括缓冲液、螯合剂、表面活性剂、防腐剂以及高分子聚合物和/或有机溶剂。上述磁珠保存液中的缓冲液能够使磁珠保存液保持稳定的pH范围。高分子聚合物溶解在磁珠保存液中，能够降低保存液的凝固点以及增加液体的粘度和润湿性，在能够在磁珠保存液中提供稳定的磁珠保存环境，使磁珠在高温或低温环境下能够在磁珠保存液中稳定存在，不易聚集结块。有机溶剂能够降低保存液的凝固点以及在磁珠保存液中提供稳定的磁珠保存环境，使磁珠在高温或低温环境下能够在磁珠保存液中稳定存在，不易聚集结块。防腐剂能够防止磁珠保存液中的微生物滋生，引入外源DNA，导致外源微生物影响磁珠的使用。螯合剂能够与镁、钙等金属离子螯合，抑制酶的活性，增加磁珠的稳定性。表面活性剂能够降低磁珠保存液的表面张力，使得粒径较小的磁珠能够在磁珠保存液中均匀分散。
在一种优选的实施例中，磁珠保存液包括缓冲液、高分子聚合物、螯合剂、表面活性剂、有机溶剂和防腐剂：其中，高分子聚合物和有机溶剂之和为20～50v/v％；优选地，高分子聚合物在磁珠保存液中的浓度为0～40v/v％；优选地，有机溶剂在磁珠保存液中的浓度为0～40v/v％；缓冲液在磁珠保存液中的浓度为5～50mM；螯合剂在磁珠保存液中的浓度为1～50mM；表面活性剂在磁珠保存液中的浓度为0.1～1v/v％；防腐剂在磁珠保存液中的浓度为0.1～1m/v％。
在磁珠保存液中的缓冲液、高分子聚合物、螯合剂、表面活性剂、有机溶剂和防腐剂，在一定的浓度范围和pH内，使得磁珠保存液具有较好的稳定磁珠的作用，使磁珠对高温和低温有较好的耐受性。
在一种优选的实施例中，高分子聚合物包括但不限于聚乙二醇200、聚乙二醇400、聚乙二醇600或聚乙二醇800中的一种或多种；优选地，高分子聚合物包括聚乙二醇200。
高分子聚合物能够增加液体的粘度和润湿性。高分子聚合物包括聚乙二醇，所用的聚乙二醇为液态，包括但不限于聚乙二醇200、聚乙二醇400、聚乙二醇600或聚乙二醇800中的一种或多种，均易溶于溶解在磁珠保存液中。为液态的聚乙二醇，与水和多种有机试剂互溶，化学性质稳定，具有较好的润滑性、保湿性和分散性。
在一种优选的实施例中，缓冲液包括但不限于Tris-盐酸缓冲液、MOPS缓冲液中或PBS缓冲液中的一种或多种。
Tris-盐酸缓冲液、MOPS缓冲液、PBS缓冲液等常用的缓冲液，能够保证磁珠保存液的pH值稳定，不因添加的其他成分和储存时间、温度等因素而发生剧烈的改变。缓冲液保持的中性环境有利于保护磁珠外层的基团，防止磁珠外层的基团发生变性、缠绕或脱落等问题，影响磁珠的功能。上述磁珠包括核酸提取磁珠，将核酸提取磁珠保存在此种磁珠保存液中，能够保证核酸提取磁珠在长时间、高温或低温储存后的核酸提取能力与活性。
在一种优选的实施例中，有机溶剂包括但不限于乙醇或异丙醇中的一种或多种；优选地，螯合剂包括但不限于乙二胺四乙酸(EDTA)；优选地，表面活性剂包括但不限于吐温20、Triton X100或NP40中的一种或多种。
在磁珠保存液中加入有机溶剂能够在磁珠保存液中提供稳定的磁珠保存环境，使磁珠在高温或低温环境下能够在磁珠保存液中稳定存在，不易聚集结块。有机溶剂在一定程度上也能防止微生物的滋生。乙醇作为常用的有机溶剂，能够与水以任意比例互溶，使用方便，安全性好。在磁珠的后续使用中，乙醇也容易去除，易挥发，不易残留在磁珠上对后续的使用产生影响。螯合剂能够与钠、钙等金属离子螯合，防止在磁珠保存液中钠、钙等金属离子浓度过高，对磁珠的稳定性产生影响。表面活性剂能够降低磁珠保存液的表面张力，使得粒径较小的磁珠能够在磁珠保存液中均匀分散。
在一种优选的实施例中，防腐剂包括Proclin 300、叠氮化钠或硫柳汞中的一种或多种。
在磁珠保存液中加入防腐剂，能够防止磁珠保存液中的微生物滋生，防止引入外源遗传信息或微生物代谢产物，避免在后续的磁珠使用中引入外源的污染，影响试验的结果。
在一种优选的实施例中，磁珠保存液包括缓冲液和高分子聚合物，其中，高分子聚合物在磁珠保存液中的浓度为20～50v/v％，或20～40v/v％；或者磁珠保存液包括缓冲液和有机溶剂，其中，有机溶剂在磁珠保存液中的浓度为20～50v/v％，或20～40v/v％；或者磁珠保存液包括缓冲液、高分子聚合物和有机溶剂，其中，高分子聚合物包括聚乙二醇200，有机溶剂包括乙醇，聚乙二醇200和乙醇之和在磁珠保存液中的浓度为20～50v/v％；或者进一步还包括5～50mM Tris-盐酸缓冲液，1～50mM乙二胺四乙酸，0.1～1v/v％吐温20，0.1～1m/v％Proclin300；优选地，0～40v/v％乙醇；优选地，0～40v/v％聚乙二醇200。在磁珠保存液中，有机溶剂和高分子聚合物可以单独使用，也可以混用，以保证磁珠保存液对磁珠的保护效果。在磁珠保存液中，有机溶剂的浓度包括0、5、10、15、20、25、30、35、40v/v％。在磁珠保存液中，高分子聚合物的浓度包括0、5、10、15、20、25、30、35、40v/v％。
在本申请第二种典型的实施方式中，提供了一种磁珠保存液的制备方法，该制备方法包括以下步骤：将上述磁珠保存液中的试剂混匀，定容，过滤。例如可以是将高分子聚合物、螯合剂、表面活性剂、有机溶剂和防腐剂分别加入缓冲液中混匀，使得高分子聚合物的浓度为0～40v/v％，缓冲液的浓度为5～50mM，螯合剂的浓度为1～50mM，表面活性剂的浓度为0.1～1v/v％，有机溶剂的浓度为0～40v/v％，防腐剂在磁珠保存液中的浓度为0.1～1m/v％；高分子聚合物和有机溶剂之和为20～50v/v％；定容，过滤。
利用上述制备方法进行配置，即可获得上述磁珠保存液。由于防腐剂的添加，在磁珠保存液的制备过程中无需进行灭菌步骤。若对于微生物有严格限定，也可以在定容，过滤后，进行过滤除菌等灭菌步骤，进一步防止外源微生物对磁珠及磁珠的后续使用产生影响。上述磁珠包括核酸提取磁珠。
在本申请第三种典型的实施方式中，提供了一种磁珠产品，该磁珠产品包括：磁珠，上述磁珠保存液、或利用上述制备方法制备的磁珠保存液，磁珠分散在磁珠保存液中。优选地，磁珠包括核酸提取磁珠；优选地，磁珠产品耐受-20～50℃的温度范围变化。将磁珠以适当比例添加到磁珠保存液中，即可获得能够稳定保存、耐受-20～50℃的温度范围变化的磁珠产品。
在本申请第四种典型的实施方式中，提供了一种磁珠的保护方法，将磁珠分散于上述磁珠保存液、或利用上述制备方法制备的磁珠保存液，形成上述磁珠产品。磁珠包括核酸提取磁珠，将磁珠以上述比例添加到磁珠保存液中，即可获得能够稳定保存、耐受-20～50℃的温度范围变化的磁珠产品。
下面将结合具体的实施例来进一步详细解释本申请的有益效果。
实施例1：核酸提取磁珠保存液的配制
核酸提取磁珠保存液按照表1所示不同配方进行配制。
表1核酸提取磁珠保存液配方
注：对照2的各组分含量均为0，即对照2为纯水。
单纯缓冲液的效果经测试，与对照1、对照2的效果均类似，此处不再显示数据。
实施例2：核酸提取磁珠保存液在-20℃和50℃的保存稳定性实验(7天)
将核酸提取磁珠分散在十种不同保存液中，分别在-20℃和50℃环境下，进行为期7天的保存，对照组为磁珠分散在自带的保存液中，分别在-20℃和50℃环境下，进行为期7天的保存。然后进行提取性能的测试。对于阈值循环数(Threshold cycle，Ct值)的测定，本申请中的荧光强度均选用500作为阈值。实验操作按照以下步骤进行。
1.核酸提取：
本发明采用本公司生产的病毒DNA/RNA提取试剂盒(货号：1001)作为本发明的提取试剂，利用本公司全自动核酸提取仪RP-Q32作为核酸提取设备，样本采用浓度为1×104copies/mL禽流感病毒H5亚型疫苗株，提取操作程序见下表2。
表2自动化核酸提取仪提取病毒样本程序信息
2.荧光定量PCR：
本发明采用本公司开发的甲型流感病毒通用型核酸检测试剂(PCR-荧光探针法)作为检测试剂，该检测试剂与市售PCR-荧光探针法核酸检测试剂的产品功能相同，按照下表3配制扩增体系：
表3甲型流感病毒通用型核酸检测试剂(PCR-荧光探针法)扩增体系
然后按照下列表4程序进行qPCR扩增：
表4甲型流感病毒核酸检测试剂盒扩增程序
结果如表5和表6所示。
表5、不同核酸提取磁珠保存液-20℃保存稳定性测试(7天)
| 例1 | 例2 | 例3 | 例4 | 例5 | 例6 | 例7 | 例8 | 对照1 | 对照2 | |
| 样本 | Ct值 | Ct值 | Ct值 | Ct值 | Ct值 | Ct值 | Ct值 | Ct值 | Ct值 | Ct值 |
| 1 | 32.51 | 32.95 | 32.14 | 31.92 | 32.4 | 32.56 | 31.78 | 31.76 | 33.88 | 34.53 |
| 2 | 31.76 | 32.62 | 31.63 | 31.52 | 31.75 | 31.89 | 32.24 | 32.95 | 34.74 | 33.96 |
| 3 | 32.12 | 32.4 | 32.03 | 31.76 | 32.53 | 32.03 | 32.53 | 32.53 | 34.11 | 34.43 |
| 4 | 31.72 | 32.73 | 31.32 | 31.72 | 31.61 | 32.40 | 32.62 | 32.73 | 34.37 | 34.21 |
| 平均 | 32.03 | 32.68 | 31.78 | 31.73 | 32.07 | 32.22 | 32.29 | 32.49 | 34.28 | 34.28 |
实验结果显示例1-例8的磁珠保存液，在-20℃环境下保存7天稳定性较好。而对照组磁珠在-20℃环境下保存7天的提取效率有下降趋势。
表6、不同核酸提取磁珠保存液50℃保存稳定性测试(7天)
实验结果显示例1-例8的磁珠保存液，在50℃环境下保存7天稳定性较好。而对照组磁珠50℃保存7天的提取效果有下降趋势。
实施例3：核酸提取磁珠保存液在-20℃和50℃保存实验(14天)
将核酸提取磁珠分散在十种不同保存液中，分别在-20℃和50℃环境下，进行为期14天的保存，对照组为磁珠分散在自带的保存液中，分别在-20℃和50℃环境下，进行为期14天的保存。然后取出进行提取性能的测试，结果如表7和表8所示。
表7、不同核酸提取磁珠保存液-20℃保存稳定性测试(14天)
| 例1 | 例2 | 例3 | 例4 | 例5 | 例6 | 例7 | 例8 | 对照1 | 对照2 | |
| 样本 | Ct值 | Ct值 | Ct值 | Ct值 | Ct值 | Ct值 | Ct值 | Ct值 | Ct值 | Ct值 |
| 1 | 32.75 | 33.27 | 31.96 | 33.02 | 32.71 | 32.71 | 33.02 | 31.81 | 35.38 | 35.45 |
| 2 | 32.71 | 33.15 | 31.81 | 33.52 | 33.07 | 33.65 | 33.52 | 33.4 | 35.52 | 34.57 |
| 3 | 33.22 | 33.52 | 32.15 | 33.2 | 32.9 | 31.81 | 32.71 | 33.65 | 34.06 | 35.37 |
| 4 | 34.11 | 33.65 | 32.37 | 33.4 | 32.55 | 33.4 | 33.02 | 33.52 | 35.67 | 35.29 |
| 平均 | 33.19 | 33.39 | 32.07 | 33.28 | 32.8 | 32.89 | 33.07 | 33.1 | 35.15 | 35.17 |
实验结果显示例1-例8的磁珠保存液，在-20℃环境下保存14天稳定性较好。
而对照组磁珠在-20℃环境下保存14天的提取效率有下降趋势。
表8、不同核酸提取磁珠保存液50℃保存稳定性测试(14天)
影响Ct值大小的因素有很多，除了提取试剂批间的影响外，扩增试剂盒批间同样存在差距。因此对于磁珠的提取效率，主要是对比与对照组之间的差异，进行整体趋势的比较。
实验结果显示例1-例8的磁珠保存液，在50℃环境下保存14天稳定性较好。
而对照组磁珠在50℃环境下保存14天的提取效率有下降趋势。
实施例4：核酸提取磁珠保存液在-20℃和50℃保存实验(21天)
将核酸提取磁珠分散在十种不同保存液中，分别在-20℃和50℃环境下，进行为期21天的保存，对照组为磁珠分散在自带的保存液中，分别在-20℃和50℃环境下，进行为期21天的保存。然后取出进行提取性能的测试，结果如表9和表10所示。
表9、不同核酸提取磁珠保存液-20℃保存稳定性测试(21天)
| 例1 | 例2 | 例3 | 例4 | 例5 | 例6 | 例7 | 例8 | 对照1 | 对照2 | |
| 样本 | Ct值 | Ct值 | Ct值 | Ct值 | Ct值 | Ct值 | Ct值 | Ct值 | Ct值 | Ct值 |
| 1 | 31.51 | 30.88 | 30.97 | 31.88 | 31.79 | 31.34 | 30.88 | 31.34 | 34.42 | 35.64 |
| 2 | 30.99 | 30.25 | 31.08 | 31.06 | 30.99 | 30.93 | 30.25 | 30.93 | 35.13 | 34.89 |
| 3 | 30.62 | 31.28 | 31.92 | 31.15 | 30.68 | 30.99 | 31.31 | 31.79 | 35.64 | 35.12 |
| 4 | 30.37 | 31.34 | 31.31 | 31.38 | 30.38 | 30.62 | 31.32 | 30.99 | 35.41 | 34.42 |
| 平均 | 30.87 | 30.93 | 31.32 | 31.36 | 30.96 | 30.97 | 30.94 | 31.26 | 35.15 | 35.02 |
实验结果显示例1-例8的磁珠保存液，在-20℃环境下保存21天稳定性较好。
表10、不同核酸提取磁珠保存液50℃保存稳定性测试(21天)
| 例1 | 例2 | 例3 | 例4 | 例5 | 例6 | 例7 | 例8 | 对照1 | 对照2 | |
| 样本 | Ct值 | Ct值 | Ct值 | Ct值 | Ct值 | Ct值 | Ct值 | Ct值 | Ct值 | Ct值 |
| 1 | 32.91 | 31.68 | 31.54 | 32.28 | 31.77 | 32.2 | 32.31 | 32.28 | 35.72 | 35.64 |
| 2 | 32.15 | 31.3 | 31.18 | 32.14 | 31.34 | 32.36 | 32.4 | 31.68 | 34.93 | 35.57 |
| 3 | 32.31 | 31.91 | 32.43 | 32.17 | 32.12 | 31.91 | 32.2 | 31.3 | 35.64 | 34.98 |
| 4 | 32.4 | 31.89 | 31.33 | 32.2 | 31.43 | 31.89 | 32.36 | 31.91 | 36.01 | 35.72 |
| 平均 | 32.44 | 31.7 | 32.2 | 32.36 | 31.67 | 32.09 | 32.32 | 31.79 | 35.57 | 35.48 |
实验结果显示例1-例8的磁珠保存液，在50℃环境下保存21天稳定性较好。
实施例5：核酸提取磁珠保存液在-20℃保存实验(28天)
将核酸提取磁珠分散在十种不同保存液中，在-20℃下，进行为期28天的保存，对照组为磁珠分散在自带的保存液中，在-20℃下，进行为期28天的保存。然后取出进行提取性能的测试，结果如表11所示。
表11、不同核酸提取磁珠保存液-20℃保存稳定性测试(28天)
| 例1 | 例2 | 例3 | 例4 | 例5 | 例6 | 例7 | 例8 | 对照1 | 对照2 | |
| 样本 | Ct值 | Ct值 | Ct值 | Ct值 | Ct值 | Ct值 | Ct值 | Ct值 | Ct值 | Ct值 |
| 1 | 31.8 | 31.9 | 32.55 | 32.3 | 31.73 | 31.87 | 31.9 | 32.09 | 35.26 | 35.89 |
| 2 | 32.02 | 32.16 | 32.43 | 32.12 | 31.28 | 32.12 | 31.84 | 32.12 | 36.06 | 36.21 |
| 3 | 31.68 | 31.87 | 32.15 | 32.09 | 31.07 | 32.01 | 31.84 | 32.09 | 35.97 | 36.15 |
| 4 | 31.84 | 32.12 | 31.99 | 32.14 | 31.17 | 32.09 | 32.02 | 32.14 | 36.21 | 36.06 |
| 平均 | 31.84 | 32.01 | 32.28 | 32.16 | 31.31 | 32.02 | 31.9 | 32.11 | 35.87 | 36.08 |
实验结果显示例1-例8的磁珠保存液，在-20℃环境下保存28天稳定性较好。
实验结果显示例1～例8都有较好的稳定性。由表2～表11的数据可知，例1～8的保存液在多次测试中在-20℃和50℃保存不同天数均具有较好的保护效果。
从以上的描述中，可以看出，本发明上述的实施例实现了如下技术效果：本发明通过向磁珠保存液中添加高分子聚合物和/或有机溶剂，提高磁珠在高温或低温条件下稳定性，为磁珠的储存和运输提供保障。
以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，对于本领域的技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (10)
1.一种磁珠保存液，其特征在于，所述磁珠保存液包括缓冲液、高分子聚合物和/或有机溶剂。
2.根据权利要求1所述的磁珠保存液，其特征在于，所述磁珠保存液进一步包括如下任意一种或多种：螯合剂、表面活性剂或防腐剂。
3.根据权利要求1或2所述的磁珠保存液，其特征在于，所述高分子聚合物和有机溶剂之和为20～50v/v％；
优选地，所述高分子聚合物在所述磁珠保存液中的浓度为0～40v/v％；
优选地，所述有机溶剂在所述磁珠保存液中的浓度为0～40v/v％；
优选地，所述缓冲液在所述磁珠保存液中的浓度为5～50mM；
优选地，所述螯合剂在所述磁珠保存液中的浓度为1～50mM；
优选地，所述表面活性剂在所述磁珠保存液中的浓度为0.1～1v/v％；
优选地，所述防腐剂在所述磁珠保存液中的浓度为0.1～1m/v％。
4.根据权利要求1所述的磁珠保存液，其特征在于，
所述高分子聚合物包括聚乙二醇200、聚乙二醇400、聚乙二醇600或聚乙二醇800中的一种或多种。
5.根据权利要求1所述的磁珠保存液，其特征在于，所述缓冲液包括Tris-盐酸缓冲液和/或MOPS缓冲液。
6.根据权利要求1或2所述的磁珠保存液，其特征在于，所述有机溶剂包括乙醇或异丙醇中的一种或多种；
优选地，所述螯合剂包括乙二胺四乙酸；
优选地，所述表面活性剂包括吐温20、Triton X100或NP40中的一种或多种；
优选地，所述防腐剂包括Proclin 300、叠氮化钠或硫柳汞中的一种或多种。
7.根据权利要求1至6中任一项所述的磁珠保存液，其特征在于，
所述磁珠保存液包括所述缓冲液和所述高分子聚合物；其中，所述高分子聚合物在所述磁珠保存液中的浓度为20～50v/v％，或20～40v/v％；或者
所述磁珠保存液包括所述缓冲液和所述有机溶剂；其中，所述有机溶剂在所述磁珠保存液中的浓度为20～50v/v％，或20～40v/v％；或者
所述磁珠保存液包括所述缓冲液、所述高分子聚合物和所述有机溶剂，其中，所述高分子聚合物包括聚乙二醇200，所述有机溶剂包括乙醇，所述聚乙二醇200和乙醇之和在所述磁珠保存液中的浓度为20～50v/v％；或者进一步还包括5～50mM Tris-盐酸缓冲液，1～50mM乙二胺四乙酸，0.1～1v/v％吐温20，0.1～1m/v％Proclin 300；
优选地，0～40v/v％乙醇；
优选地，0～40v/v％聚乙二醇200。
8.一种磁珠保存液的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：
将权利要求1至7中任一项所述磁珠保存液中的试剂混匀，定容，过滤。
9.一种磁珠产品，其特征在于，所述磁珠产品包括：
磁珠，
权利要求1至7中任一项所述磁珠保存液、或利用权利要求8所述制备方法制备的所述磁珠保存液，
所述磁珠分散在所述磁珠保存液中；
优选地，所述磁珠包括核酸提取磁珠；
优选地，所述磁珠产品耐受-20～50℃的温度范围变化。
10.一种磁珠的保护方法，其特征在于，将磁珠分散于权利要求1至7中任一项所述磁珠保存液、或利用权利要求8所述制备方法制备的所述磁珠保存液，形成权利要求9所述的磁珠产品。
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| CN114480369B (zh) | 2022-12-27 |
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