CN114480179B - 盐碱土分离的细菌及应用 - Google Patents

Abstract

本发明属于微生物领域，涉及一种盐碱土分离的细菌及应用，该盐碱土分离的细菌是Pantoea cypripedii TA1，所述Pantoea cypripedii TA1已于2021年9月22日向CGMCC提交保藏，保藏编号是NO.23458。本发明提供了一种可提高植物抗旱性能以及提高抗渗透胁迫能力的盐碱土分离的细菌及应用。

Description

盐碱土分离的细菌及应用

技术领域

本发明属于微生物领域，涉及一种盐碱土分离的细菌及应用。

背景技术

我国西北地区属于干旱、半干旱气候，降水量年代均值为300mm左右，在小麦和玉米生长季节中的4月和7月极端干旱事件频发，给农业生产带来严重经济损失。此外，在气候、土壤母质和不合理灌溉的综合因素作用下，土壤次生盐碱化日趋严重，严重制约当地的农业发展和生态安全。然而，这些特殊的生境也孕育了独特的土壤微生物，它们能适应严峻的土壤环境，具有不同的生态功能，能与宿主植物形成良好互动。国内有专家学者从极端盐碱环境中分离得到许多耐盐细菌，它们分别属于芽孢杆菌属(Bacillus)、涅斯捷连科氏菌属(Nesterenkonia)、刘志恒菌属(Zhihengliuella)、嗜盐单胞菌属(Halomonas)、嗜麦芽窄食单胞菌(Stenotrophomonas)、专性嗜碱菌(Alkalimonas)和拟杆菌门的Litoribacter属。在研究了西北干旱地区甘肃民勤和宁夏盐池的荒漠植物根际微生物功能多样性时，发现15.0％～83.3％的菌株分别具有固氮、溶解无机磷、产吲哚乙酸、产生ACC脱氨酶和较强的耐盐能力，并且具有上述功能的菌株多属于节细菌属(Arthrobacter)、芽孢杆菌属(Bacillus)和链霉菌属(Streptomyces)等。但已经分离得到的这些菌种中，具有抗渗透胁迫以及促生功能的菌种却鲜有报道。

发明内容

为了解决背景技术中存在的上述技术问题，本发明提供了一种可提高植物抗旱性能以及提高抗渗透胁迫能力的盐碱土分离的细菌及应用。

为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种盐碱土分离的细菌，其特征在于：所述盐碱土分离的细菌是Pantoeacypripedii TA1，所述Pantoea cypripedii TA1已于2021年9月22日向CGMCC提交保藏，保藏地址中国北京，保藏编号是CGMCC NO.23458。

上述盐碱土分离的细菌分离自内蒙古自治区巴彦淖尔市的中度盐碱地，地理坐标是N 41.03°，E 108.34°。

如前所述的盐碱土分离的细菌Pantoea cypripedii TA1对农作物促生时的应用。

如前所述的盐碱土分离的细菌Pantoea cypripedii TA1在制备农作物所需的固氮制剂时的应用。

如前所述的盐碱土分离的细菌Pantoea cypripedii TA1在制备农作物所需的溶磷制剂时的应用。

如前所述的盐碱土分离的细菌Pantoea cypripedii TA1对小麦促生时的应用。

如前所述的盐碱土分离的细菌Pantoea cypripedii TA1在制备农作物所需的抗渗透胁迫制剂时的应用。

如前所述的盐碱土分离的细菌Pantoea cypripedii TA1在制备农作物所需的抗盐胁迫制剂时的应用。

如前所述的盐碱土分离的细菌Pantoea cypripedii TA1在制备农作物所需的抗盐胁迫制剂时的应用时，所述盐胁迫的浓度不超过10％。

如前所述的盐碱土分离的细菌Pantoea cypripedii TA1在制备农作物所需的抗干旱制剂时的应用。

本发明的优点是：

本发明提供了一种盐碱土分离的细菌及应用，该菌株是以西北干旱地区内蒙古巴彦淖尔向日葵根际盐碱土为研究对象，利用不同培养条件富集筛选具有促生、活化养分和抗逆功能的微生物，Pantoea cypripedii TA1，通过室内试验对其促生效果进行验证，试验结果表示该菌株均能产生铁载体和生长素，IAA产量在1.21μg ml^-1之间；能耐受10％(m/v)的盐胁迫；同时，还具有很强的固氮能力以及较好溶磷能力。经验证，Pantoea cypripediiTA1具有较好的促生能力，能显著提高小麦株高和地上干重，菌株TA1的发酵液处理后小麦株高、地上干重和根干重分别显著增加了29.7％、24.90％和18.46％。该菌株将为利用微生物提高植物抗旱性这一措施提供优良菌种资源。

附图说明

图1是TA1菌落形态特征；

图2是依据16S r DNA序列建立的系统发育树；

图3是TA1溶磷水解圈的实验图；

图4是TA1产IAA能力对比图；

图5是TA1产铁载体的能力图；

图6是TA1对小麦的促生作用图。

具体实施方式

本发明提供了一种盐碱土分离的细菌及应用，具体是：

1材料和方法

1.1试验材料

1)供试土样：用于分离功能菌株的土样采集自内蒙古自治区，巴彦淖尔市，五原县小兰才农场(N 41.03°，E 108.34°)中度盐碱地。当季作物为向日葵(Helianthus annuusL.)，土壤含盐量为3.97g kg^-1，pH为9.38，盐碱地的成因为当地干旱半干旱气候条件和不合理的灌溉。

2)供试菌株：

实验室保藏和使用的密旋链霉菌Act12(Streptomyces pactum，GenBank：MH542148)。

3)培养基

细菌分离采用牛肉膏蛋白胨培养基(NA)，放线菌分离采用高氏一号培养基(GA)；耐盐胁迫菌株的筛选采用添加不同浓度NaCl的NA培养基，固氮菌株筛选采用阿须贝培养基，溶磷菌株筛选采用PKO培养基，产1-氨基环丙烷-1-羧酸(ACC)脱氨酶的筛选采用DF培养基、 PAF(Pseudomonas agar F)和ADF培养基；产铁载体菌株的检测选择铬天青培养基，产吲哚乙酸(IAA)菌株的检测采用含有色氨酸的TSB液体培养基和GA液体培养基。上述所用培养基组成详见表1。

表1本试验所用培养基及其组成

4)仪器设备

GZ-500C4智能光照恒温培养箱(右科，合肥)，Sorvall Legend Mico17高速离心机(Thermo Electron，Osterode am Harz，Germany)，JM-B电子天平(余姚，浙江)，N6000双光束紫外可见分光光度计(佑科，上海)，P70D20P-TF微波炉(格兰仕，广东)，JY300C电泳仪(君意东方，北京)，HWS-26电热恒温水浴锅(一恒，上海)，LDZX-30KBS立式压力蒸汽灭菌器(申安，上海)，GZX-9070MBE电热鼓风干燥箱(博迅，上海)，HHBII500-S电热恒温培养箱(跃进，上海)，ZHWY-111B(智城，上海)。

1.2方法

1)细菌及放线菌的分离

细菌及放线菌的分离均采用稀释涂布法：称取5.0g新鲜盐碱土，加入装有45ml无菌水和若干玻璃珠的三角瓶中，于室温180rpm条件下震荡20min，利用无菌水管进行逐级梯度稀释，选取稀释度为10^-3、10^-4和10^-5菌悬液涂布于GA固体培养基，稀释度为10^-4、10^-5和10^-6的菌悬液涂布于NA固体培养基。涂布后的NA和GA平板分别在35℃和28℃恒温培养箱中培养48h和 96h，然后挑取单菌落通过平板划线法进行纯化，纯化后的菌株保存于相应斜面，于4℃存放待用。

2)产ACC脱氨酶菌株的富集、筛选和分离

取上述稀释10倍的土壤悬液1mL接种至50mL PAF液体培养基，于30℃180rpm的恒温摇床中避光培养16h；然后吸取1mL菌悬液转接至50mL DF液体培养基，于相同的条件下震荡培养16h；并从中取1mL菌悬液转接至50mL ADF液体培养基中，同样的条件下震荡培养24h，为避免氮源的污染，配置ADF培养基的器皿要用双蒸水进行反复清洗浸泡；将培养后的ADF液体菌悬液稀释涂布于ADF固体平板，于30℃恒温培养箱中静置培养48h。挑取ADF 平板长出的单菌落接种于ADF液体培养基，进一步筛选纯化，重复上述步骤3次，将纯化后的菌株接种至DF固体斜面，于4℃保存待用。

3)菌株耐渗透胁迫性

NaCl模拟的盐胁迫：将细菌及放线菌孢子各自接种至NaCl含量分别为0％、5％、10％、 15％、20％和25％(m/v)的NA和GA固体平板上，分别在35℃和28℃恒温培养箱中培养48h 和120h。然后观察并测量菌落直径大小(d)，无菌落形成的记录为“－”，表示不能正常生长；菌落直径小于1mm的记录为“+”，表示生长微弱；菌落直径介于1mm和2mm之间的记录为“++”，表示正常生长；菌落直径大于2mm的记录为“+++”，表示生长旺盛。

PEG模拟的干旱胁迫：为进一步验证优良菌株耐渗透胁迫性，将优良细菌及放线菌孢子各自接种至NaCl含量分别为0％、10％、15％、20％、25％、30％和40％、(m/v)的NA和GA液体培养基上，分别在35℃和28℃恒温摇床中150rpm转速下培养48h和120h。细菌的生长状况用比浊法测定菌悬液OD₆₀₀值，放线菌的生长状况通过100mL菌悬液中菌体的干重来反映。

4)菌株固氮能力检测

用竹签将菌种点接于无氮源的阿须贝培养基，将平板放于30℃恒温培养箱中培养96h，并观察记录菌落的生长状况。

5)菌株溶磷能力检测

用竹签将菌种点接于含有磷酸钙的PKO固体平板，将平板放于30℃恒温培养箱中培养96 h，并观察记录菌落的生长状况，记录标准同本章(3)中内容。同时观察菌落周围有无水解圈形成，测量水解圈直径(D)，并以D与d的比值来表示菌株溶磷能力的大小。

6)菌株产铁载体能力检测

按照表1中的配方配制铬天青培养基，配制过程中注意染液、组分1和组分2中的酪蛋白、葡萄糖、MgSO4、CaCl₂要分别灭菌，然后混合摇匀倒平板，平板呈蓝色。将菌种点接于铬天青培养基，平板放于30℃恒温培养箱中培养72h，观察记录菌落的生长状况，同时观察菌落周围有无透明圈和橙黄色晕圈，并做测量，D与d的比值来表示菌株产铁载体的能力。

7)菌株产吲哚乙酸能力检测

用于检测吲哚乙酸的Salkowski试剂：分别配制浓度为0.5mol/L的FeCl₃溶液和35％(v/v)的高氯酸溶液，前后按1：50的体积比混匀即得所需试剂，现用现配，置于棕色瓶避光保存。

培养基所用色氨酸需经0.22μm滤膜多次过滤除菌，然后与灭菌的液体培养基混匀即可。将活化后的细菌和放线菌分别接种于色氨酸终浓度为100mg/L的TSB和GA液体培养基，每个菌株重复三次，于30℃、180rpm条件下震荡培养72h，培养液转移到100mL离心管中，10000 rpm转速下离心10min。取2ml上清液于试管中，并分别向试管中加入50μL磷酸和4mL现配的Salkowski试剂，混匀，室温下显色10min。然后，以未处理的上清液为对照，测定显色后的溶液在530nm下的吸光度。配置0、10、20、30、40和50mg/L的系列梯度吲哚乙酸标准溶液，按照上述方法进行显色，并测定530nm的吸光度，并由此制作标准曲线，根据标准曲线计算培养液中吲哚乙酸的含量。

8)菌株分子生物学鉴定

基因组DNA提取：将细菌和放线菌分别接种于牛肉膏蛋白胨和高氏一号液体培养基，在30℃，180rpm下震荡培养24h和48h，之后收集菌体于1.5ml离心管中，12000rpm离心10min，用生理盐水洗涤菌丝两次，加入0.5mL抽提缓冲液，加入100mg石英砂并在振荡器上震荡，连续3次，每次1min，震荡后快速置于冰上，65℃水浴十分钟加入200μL的7.5M乙酸铵，冰中放置8min，12000rpm离心10min，取上层水相至另一离心管中，加入0.5～0.6倍体积的预冷异丙醇，颠倒混匀，-20℃放置10min，12000rpm离心10min，弃上清，以70％乙醇洗涤沉淀两次，适当干燥后加30μL双蒸水溶解沉淀，保存于-20℃备用。

PCR扩增及测序：选用细菌通用引物1492R(5'-GGTTACCTTGTTACGACTT-3')和27F(5'-AGAGTTTGATCCTGGCTCAGC-3')序列进行扩增，PCR体系(30μl)如下：ddH₂O(去离子水)12μL，上游引物1μL，下游引物1μL，2×ES Taq mix 15μL，模板基因组DNA 1μL。 PCR扩增条件如下94℃热处理4min，进行35个循环(分别为94℃，1min；56℃，1min；72℃， 2min)扩增后，72℃延长反应10min。PCR反应产物经0.8％琼脂(Biowest)凝胶检测，检测后送于西安擎科生物技术有限公司进行测序。

序列比对及进化树构建：将获得菌株的16S r DNA序列和NCBI数据库中序列进行对比，获取具有较高相似度的同源模式菌株序列。用DNAMAN 6.0.3.99软件进行序列分析比对，通过Mega 5.22软件中的邻接法构建鉴定菌株的系统发育进化树。

9)优良菌株的促生效果验证

将具有促生特性的优良菌株分别接种于牛肉膏蛋白胨和高氏一号液体培养基，在30℃， 180rpm下震荡培养3d和8d，将发酵液在4℃、10000rpm下离心20min，并通过无菌滤膜(0.22 μm孔径)过滤得到菌株无细胞滤液。将发酵液分别稀释0、10、50、100、300和500，保存于 4℃待用。

试验选用西农979小麦(Triticum aestivum L.Xinong 979)作为供试植物。将大小均一的小麦种子用含氯量1％的次氯酸钠消毒15min，并用无菌水洗涤至无气味。消毒后的种子摆放于装有两层滤纸的无菌培养皿中，培养皿直径9cm，每皿放15粒小麦种子，对照组加8ml无菌水，处理组加菌株发酵液系列梯度稀释后溶液8ml，置于黑暗条件下萌发。种子萌发后，进行间苗。用1/2浓度的霍格兰营养液替代无菌水，每天定时补充营养液，并将培养皿置于光照恒温培养箱中培养，昼/夜培养条件为光照时间12h/12h，温度25℃/20℃，相对湿度65％，光照1000umol·m^-2s^-1。培养7d后进行株高、鲜重等生物学性状统计。

10)数据统计与分析

试验数据使用SPSS 22.0软件进行统计分析，采用采用最小显著差数法(LSD法)检验不同处理的差异显著性水平(P＜0.05)，所有结果用均值±标准方差表示(X±SE)。

1.3结果与分析

1.3.1TA1的分离及鉴定

根据菌株的耐盐和促生特性，筛选出菌株TA1，菌株TA1已于2021年9月22日向CGMCC 提交保藏，保藏号是：NO.23458。菌株TA1的菌落形态特征如图1所示，其直径约为0.2～0.5mm，白色，圆形，边缘呈锯齿状，表面干燥，菌落表面有圆形白色褶皱隆起，不透明。

采用细菌通用引物克隆测序的方法获得优良菌株菌株16S r DNA序列，相应菌株序列已上传至NCBI官方网站上(https：//submit.ncbi.nlm.nih.gov/subs/genbank/)，GenBank登录号为MW879519(TA1)，其16S r DNA序列如下所示。

GGGATCTGCCCGATGGAGGGGGATAACTACTGGAAACGGTAGCTAATACCGCATAA CGTCGCGAGACCAAAGTGGGGGACCTTCGGGCCTCACACCATCGGATGAACCCAGATG GGATTAGCTTGTAGGTGGGGTAATGGCTCACCTAGGCGACGATCCCTAGCTGGTCTGAG AGGATGACCAGCCACACTGGAACTGAGACACGGTCCAGACTCCTACGGGAGGCAGCAG TGGGGAATATTGCACAATGGGCGCAAGCCTGATGCAGCCATGCCGCGTGTATGAAGAAG GCCTTCGGGTTGTAAAGTACTTTCAGCGGGGAGGAAGGGATGATGTTTAATACGCATCG TCATTGACGTTACCCGCAGAAGAAGCACCGGCTAACTCCGTGCCAGCAGCCGCGGTAAT ACGGAGGGTGCAAGCGTTAATCGGAATTACTGGGCGTAAAGCGCACGCAGGCGGTCTG TTAAGTCAGATGTGAAATCCCCGGGCTTAACCTGGGAACTGCATTTGAAACTGGCAGGC TTGAGTCTCGTAGAGGGGGGTAGAATTCCAGGTGTAGCGGTGAAATGCGTAGAGATCTG GAGGAATACCGGTGGCGAAGGCGGCCCCCTGGACGAAGACTGACGCTCAGGTGCGAA AGCGTGGGGAGCAAACAGGATTAGATACCCTGGTAGTCCACGCCGTAAACGATGTCGAC TTGGAGGCTGTGCCCCTGAGGCGTGGCTTCCGGAGCTAACGCGTTAAGTCGACCGCCTG GGGAGTACGGCCGCAAGGTTAAAACTCAAATGAATTGACGGGGGCCCGCACAAGCGGT GGAGCATGTGGTTTAATTCGATGCAACGCGAAGAACCTTACCTGGCCTTGACATCCAGA GAACTTAGCAGAGATGCTTTGGTGCCTTCGGGAACTCTGAGACAGGTGCTGCATGGCTG TCGTCAGCTCGTGTTGTGAAATGTTGGGTTAAGTCCCGCAACGAGCGCAACCCTTATCC TTTGTTGCCAGCGGTGCGGCCGGGAACTCAAAGGAGACTGCCGGTGATAAACCGGAGG AAGGTGGGGATGACGTCAAGTCATCATGGCCCTTACGGCCAGGGCTACACACGTGCTAC AATGGCGCATACAAAGAGAAGCGACCTCGCGAGAGCAAGCGGACCTCATAAAGTGCGTCGTAGTCCGGATTGGAGTCTGCAACTCGACT

通过EzBioCloud网站比对后，发现菌株TA1与菌株Pantoea cypripedii LMG 2657T (MLJI01000002)亲缘关系最近，其16S r DNA序列的相似性为98.43％。如表2所示，是分离菌株中TA1的16S r DNA序列Blast比对结果，根据序列比对结果，选取同源性较高的模式菌株，下载其16S r DNA序列，通过MEGA 6.0软件基于N-J算法构建系统进化树。由图2可知，供试菌株分别与其同源性最高的菌株聚在一支，且系统发育进化树节点置信度均大于70，因此进化树能够准确的反映分离菌株所属种属。

表2 TA1的16S r DNA序列Blast比对结果

1.3.2 TA1菌株耐盐性

利用添加不同氯化钠含量的营养平板对TA1和本实验室长期保存具有提高植物耐旱性功能的密旋链霉菌Act12的耐盐性进行了同步检测，结果如表3所示。TA1对NaCl的最大耐受性为10％。

表3耐盐胁迫性实验

注：“－”表示菌株不能正常生长，“+”表示生长微弱，“++”，表示生长一般，“+++”表示生长旺盛。下同。

1.3.3菌株的固氮、溶磷特性

如表4以及图3所示，细菌菌株TA1在无氮培养基上能旺盛生长，表现出较强的固氮能力，溶磷水解圈直径与菌落直径的比值为1.85。同样，Act12具有较强的固氮能力，在培养基上可产生明显溶磷圈。

表4固氮和溶磷特性实验

注：D/d：水解圈直径与菌落直径的比值；n：无水解圈。下同。

1.3.4菌株产IAA、铁载体能力

通过添加色氨酸的液体培养基和筛选培养基对分离菌株产IAA(吲哚乙酸)和铁载体的能力进行了检测，结果如图4(其中，CK0是无菌水对照、CK是培养基对照；TA1是加TA1对照，颜色月神代表产IAA的能力越强)、图5以及表5所示。其中菌株TA1的IAA产量为1.21μgml^-1μg，菌株Act12的发酵产物中IAA含量为5.19μg ml^-1。从透明圈大小来看，细菌菌株TA1和放线菌菌株Act12的铁载体能力相对持平。从图4中的颜色深浅可以看出，颜色越深代表产IAA 能力越强，即TA1的产IAA(吲哚乙酸)较强。

表5产IAA和铁载体的能力

1.3.5菌株的促生和抗干旱胁迫能力

采用皿内培养方法验证了上述优良菌株对小麦生长的影响，结果如表6以及图6所示。 Pantoea cypripedii TA1稀释50倍的无菌发酵能促进小麦幼苗的生长(结果如图6所示)，与对照相比，菌株TA1的发酵液处理后小麦株高、地上干重和根干重分别显著增加了29.7％、24.90％和18.46％(P<0.05)。

为进一步验证优良细菌抗渗透胁迫能力，在PEG(聚乙二醇)模拟干旱胁迫条件下对优良菌株进行了液体培养，结果如表7所示。随着液体培养基中PEG含量的增加即渗透胁迫逐渐加大，菌株的生长能力越来越弱。当PEG含量为20％，液体培养48h后，各菌株菌悬液OD₆₀₀为0.81～1.2，各菌株还能较好地生长，当PEG含量高于30％，各菌株的生长受到极大抑制。各菌株对PEG模拟干旱条件的适应能力与上文对盐分渗透胁迫的适应能力相一致。放线菌Act12 对PEG带来的渗透胁迫的最大耐受范围为20％。

表6优良菌株无菌发酵液对小麦生长的影响

注：不同的小写字母表示处理间差异在P＜0.05水平的显著性。

表7优良菌株在聚乙二醇模拟干旱胁迫条件下的生长能力

注：“-”表示未进行相应检测。

大量研究表明，根际促生细菌(PGPR)具有促进植物生长与抗逆的作用，同时PGPR在根际的定殖受到土壤水分、pH和温度等条件的影响，具有较强的土著性，因此为获得适用于西北干旱生境的促生菌株，本发明以内蒙干旱地区盐碱土壤中分离到TA1菌为研究对象，以实验室长期保存和使用的密旋链霉菌Act12为对照，筛选具有抗渗透胁迫和促生功能的优良菌株。干旱胁迫和盐胁迫均会给微生物带来渗透胁迫而引起微生物失水，抑制微生物生长。在氯化钠模拟的不同程度的渗透胁迫(尤其是盐胁迫)条件下，TA1耐10％的NaCl胁迫。同类研究中，被报道的分离自盐碱环境条件具有耐盐性和促进植物生长功能的PGPR对盐胁迫的耐受性大多小于10％NaCl，也有研究者分离到162株最大盐分耐受性为15％NaCl的菌株，其中 72％的菌株属于芽孢菌目(Bacillales)和放线菌目(Actinomycetales)，且多数菌株具有促进植物抗逆胁迫和生产的能力。这些相似性报道表明，本发明从盐碱土中分离的菌株具有较好的耐渗透胁迫能力和潜在的应用性。

许多根际促生菌可以合成生长素(IAA)，外源供给植物根系。有研究报道大多数PGPR 产生IAA的含量在2.16～36.1μg^-1mL范围内，与之类似，本发明中TA1菌株IAA的产量为μg^-1mL，μg生长素作为微生物与植物之间重要的信号物质，既有利于PGPR在植物根际的定殖，又介导了PGPR对植物生长的调节作用。研究表明，产生IAA的PGPR可以促进植物地上部分和根系的生长或者次生根的形成，增强植物对水分和养分的吸收能力，提高植物对环境适应能力。因此，本发明中获得TA1菌株可以作为重要的PGPR种质资源。

固氮、溶磷和产生铁载体是微生物重要的促生特性，接种固氮菌可以增加植株和果实氮素含量，提高作物产量；溶磷菌能产生有机无机酸，活化土壤中磷元素，并促进多种农作物的生产；此外，PGPR也能够分泌具有高度铁亲和性和专一性的铁载体，这种铁载体能够与铁螯合形成铁-铁载体复合体后被植物吸收并参与细胞代谢活动。本发明TA1菌株具有固有固氮能力和溶磷能力和产铁载体的能力。

综合上述促生特性，确定菌株TA1和Act12为具有抗渗透胁迫和促生特性的优良菌株，经鉴定TA1为Pantoea cypripedii。进一步的促生和抗渗透胁迫验证表明，菌株TA1和Act12具有较好的促生能力，能显著提高小麦株高和地上干重，增幅分别为4.88～9.40％和6.46～10.90％，此外，Pantoea cypripedii TA1富集筛选分离到的产1-氨基环丙烷-1-羧酸(ACC)脱氨酶的菌株，具有减缓干旱胁迫引起的乙烯积累的潜能；Streptomyces pactumAct12在前人研究中表现出相似的促生和抗渗透胁迫能力，将细菌TA1和放线菌Act12用于后面试验研究中。

Claims (5)

1.一种盐碱土分离的细菌，其特征在于：所述盐碱土分离的细菌是Pantoeacypripedii TA1，所述Pantoea cypripedii TA1已于2021年9月22日向CGMCC提交保藏，保藏编号是NO.23458。

2.如权利要求1所述的盐碱土分离的细菌Pantoea cypripedii TA1对农作物促生时的应用。

3.如权利要求2所述的盐碱土分离的细菌Pantoea cypripedii TA1在制备农作物所需的固氮制剂时的应用。

4.如权利要求2所述的盐碱土分离的细菌Pantoea cypripedii TA1在制备农作物所需的溶磷制剂时的应用，所述磷是磷酸钙。

5.如权利要求2所述的盐碱土分离的细菌Pantoea cypripedii TA1对小麦促生时的应用。

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