CN114472503A - 一种渗漏性石油污染土壤的复合修复方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种渗漏性石油污染土壤的复合修复方法,属于土壤污染原位生物修复技术。本发明使用营养腐殖质、石油降解菌混合制备石油污染修复组合物。挖掘种植沟渠并使用粘性土壤覆盖沟渠底部并在底部最低点埋入耐腐蚀通气渗漏管道,进一步将修复组合物覆盖到粘土表面并继续覆盖污染土壤,定期淋洗修复带上方石油污染土壤,当土壤石油迁移至修复带中被修复时,修复带上方即可种植植物。本发明具有绿色、防渗、高生态效益等优点。
Description
技术领域
本发明属于土壤修复技术领域,具体涉及的是一种用于渗漏性含油污染土壤的原位微生物修复方法。
背景技术
石油在开采、运输和炼化等过程中,由于机械和认为原因导致石油进入环境并破坏土壤生态和周围环境。由于土壤性质不同,石油在土壤中的迁移范围也存在差异。一些粘性较低的渗漏性土壤由于孔隙大、吸附性能差等原因,导致石油进入土壤以后会广泛的迁移,扩大污染区域。遭受污染的土壤中植物、动物和微生物也会出现中毒死亡现象,进而恶化土壤环境。因此,需要对渗漏性石油污染土壤进行修复。为了不进一步破坏土壤,且遵循绿色、环保无二次污染等修复理念,选择原位微生物土壤修复法作为核心技术。如今,以微生物降解石油机理为指导,建立了多种多样的土壤修复技术,也证明了微生物技术不仅可以修复土壤中的石油,还能增加土壤肥力,帮助土壤生态恢复。但是由于石油污染土壤的营养状况和环境不足以支撑微生物有效的降解石油,因此需要人为提高微生物的活性和数量,保证微生物与原油的接触状况来提升土壤的修复效果。近来,有研究表明使用土著微生物修复和人为添加表面活性剂不仅可以保护土壤原有生态,增强微生物的降解效果。基于这一理念,本发明申请人使用营养腐殖质、石油降解菌混合制备石油污染修复组合物。模仿植物种植时挖掘渠沟,将粘土覆盖在种植沟渠底部并埋入通气渗漏管,将修复组合物覆盖在粘土表面并覆盖污染土壤,使用淋洗营养液定期淋洗修复带上方石油污染土壤,当土壤石油迁移至修复带中被修复时,修复带上方即可种植植物。同时通气渗漏管道不仅可以收集渗漏的污染,也可以为土壤的石油降解菌提供充足的氧气。当修复带上方植物收割或移栽时,可以挖出修复带上方已修复土壤,将沟渠位置附近的污染土壤继续填埋到修复带上方,进行新的土壤修复和植物种植。。
发明内容
本发明的技术方案是:一种渗漏性石油污染土壤的复合修复方法,包括以下步骤:
一种渗漏性石油污染土壤的复合修复方法,其特征在于:该方法包括步骤如下:
1 将营养腐殖质、石油降解菌混合制备为修复组合物;
2 挖掘种植沟渠并使用粘性土壤覆盖沟渠底部并在底部最低点嵌入通气渗漏管道;
3 将修复组合物覆盖到沟渠表面并覆盖污染土壤,使用淋洗营养液定期淋洗修复带上方石油污染土壤。
进一步的,上述的方法,步骤1)中,所述的修复组合物的制备方法,包括如下步骤:
1.1)将动物粪便、植物碎屑、待修复土壤按质量比0.5~1:1~2:0.5~1混合发酵1~3个月,制成腐殖质,进一步将1份营养物质与腐殖质混合制的营养腐殖质;
1.2)利用待修复的石油污染土壤筛选石油降解作为修复菌剂或使用市售石油降解菌作为修复菌剂;
1.3)将营养腐殖质与石油降解菌混合制的修复组合物。
进一步的,上述方法,步骤1.1)中,1份营养物质(葡萄糖3~5g、磷酸二氢钾2~5g、酵母粉3~6g和氯化钠2~5g)。
进一步的,上述方法,步骤1.2)中,降解菌筛选方法:挖掘表层5~10cm处待石油污染的土壤用于菌种的筛选。取5~10g挖掘的土壤在100ml生理盐水中震荡混合30~60分钟,取10~15mL混合液于85~90mL的石油无机盐培养基中,在35℃、180r/min震荡培养7d,吸取上清液10~15mL并加入到新鲜的85~90mL的石油无机盐培养基,相同条件下培养7d,重复操作3~5次,得到具有石油降解能力的细菌。使用平板涂布法分离得到石油降解菌。使用石油培养基对分离的石油降解菌进行降解能力的测定,将降解能力强的石油降解菌进行富集培养并保存为修复菌剂,无需生物学鉴定。
进一步的,上述方法,步骤1.2)中,无机盐培养基:无机盐培养基:2~5g K2HPO4、2~5NaCl、1~3g KH2PO4、0.5~2g NH4Cl、0.02g CaCl2、0.1~0.2g MgSO4•7H2O、0.01~0.03gFeSO4•7H2O、0.002~0.005g CuSO4•5H2O、0.002~0.005g ZnSO4•7H2O),加入蒸馏水溶解并定容到1000mL。每个锥形瓶准确称量0.1g石油并加入100mL无机盐培养基封住锥形瓶口,利用高温高压灭菌30min,制的石油无机盐培养基。
进一步的,上述方法,步骤1.3)中,修复菌剂的富集培养是将1份营养物质加入到500mL蒸馏水混合,并取100mL于锥形瓶,使用接种环把(步骤1.2)中分离的石油降解菌接种到锥形瓶内培养12~18h,使用100mL离心管离心并弃去上清液,加入3~5mL上清液震荡使离心管壁的降解菌与上清液混匀,制得高浓度菌液,10Kg营养腐殖质加入50~100ml高浓度菌液混合均匀,备用。
进一步的,上述方法,步骤2)中,所述的挖掘种植沟渠并使用粘性土壤覆盖沟渠底部并在底部最低点嵌入通气渗漏管道。具体步骤如下:
2.1) 挖掘种植沟渠,其上部宽度10~50cm,底部为圆底,深度10~30cm,使用粘性土壤覆盖沟渠底部2~10cm;
2.2)沟渠最低点嵌入1~3根通气渗漏管道,每根管管径为2~10cm贯穿整个沟渠,管壁开孔1mm,各孔之间的距离为1~2cm。
进一步的,上述方法,步骤3)中,将修复组合物覆盖到沟渠表面并覆盖污染土壤,使用淋洗营养液定期淋洗修复带上方石油污染土壤。具体步骤为:向步骤2)中的粘土覆盖层上铺厚度3~10cm的营养腐殖质,进一步覆盖填满待修复土壤,定期使用淋洗液淋洗。
进一步的,上述方法,步骤3)中,淋洗液的浓度为1~6g/L的Tween80溶液。淋洗方法:第一天喷洒1~10L/m(滴灌带长)浓度为1~6g/L的Tween80溶液,喷淋速度为0.5~1L/min;第二天,第三天喷洒自来水1~10L/m,喷洒速度为0.5~1L/min,当上部土壤石油烃含量低于植物耐受度时,可种植植物。
本发明的优点是:
1、 本发明使用的表面活性剂能有效地使土壤的将土壤石油烃转移富集在下方的腐殖质中,多余的含油污染物通过通气渗漏管道被收集,防止污染进一步扩散;
2、 本发明将土壤修复和植物种植相结合,保证修复的同时促进植物的生长;
3、 土壤修复可以随着植物的换作持续修复,无需挖掘修复带,工艺的简洁有效性,大大缩短了工序和经济花费,还具有环境友好无二次污染的特点,在土壤修复邻域具有很大的应用前景。
具体实施例
接下来,通过一些具体实施例对本发明作进一步的说明;需要知道的是,本发明实施例所述的方法是为了用来说明本发明,不是限制本发明,通过在本发明的思路构想下对本发明所设计的方法进行简单改进也属于本发明要求保护的范畴;具体实施例中所使用的药品均为市售药品。
无机盐培养基:无机盐培养基:2~5g K2HPO4、2~5NaCl、1~3g KH2PO4、0.5~2g NH4Cl、0.02g CaCl2、0.1~0.2g MgSO4•7H2O、0.01~0.03g FeSO4•7H2O、0.002~0.005g CuSO4•5H2O、0.002~0.005g ZnSO4•7H2O),加入蒸馏水溶解并定容到1000mL;每个锥形瓶准确称量0.1g石油并加入100mL无机盐培养基封住锥形瓶口,利用高温高压灭菌30min,制的石油无机盐培养基。
1份营养物质(葡萄糖3~5g、磷酸二氢钾2~5g、酵母粉3~6g和氯化钠2~5g)。
实施例1
一种渗漏性石油污染土壤复合修复方法,包括如下步骤:
(1) 将动物粪便、植物碎屑、待修复土壤(含油率1.57%)按质量比例0.5:1.5:0.5混合发酵1~3个月,制成腐殖质,进一步将1份营养物质与腐殖质10Kg混合制的营养腐殖质;
(2) 利用待修复的石油污染土壤筛选石油降解作为修复菌剂或使用市售石油降解菌作为修复菌剂;挖掘表层8cm处石油污染的土壤用于菌种的筛选;取8g挖掘的土壤在100ml生理盐水中震荡混合40分钟,取10mL混合液于90mL的石油无机盐培养基中,在35℃、180r/min震荡培养7d,吸取上清液10mL并加入到新鲜的90mL的石油无机盐培养基,相同条件下培养7d,重复操作4次,得到具有石油降解能力的细菌;使用平板涂布法分离得到16株石油降解菌;使用石油培养基对分离的石油降解菌进行降解能力的鉴定,发现6株降解菌效果明显,无需生物学鉴定;
(3) 修复菌剂的富集培养是将1份营养物质加入到500mL蒸馏水混合,并取100mL于锥形瓶,使用接种环分离的石油降解菌接种到锥形瓶内在35℃、180r/min下培养12h,使用100mL离心管离心并弃去上清液,加入3~5mL上清液震荡使离心管壁的降解菌与上清液混匀,制得高浓度菌液,10Kg营养腐殖质加入50~100ml高浓度菌液混合均匀,备用;
(4) 挖掘种植沟渠,其上部宽度10cm,底部为圆底,深度10cm,使用粘性土壤覆盖沟渠底部,厚度为2cm;最低点嵌入1根通气渗漏管道,每根管管径为2cm贯穿整个沟渠,管壁开孔1mm,各孔上下左右的距离为1cm;
(5) 将修复组合物覆盖到粘土表面,覆盖厚度为2cm,进一步覆盖填满待修复土壤,定期使用淋洗液淋洗。淋洗液的浓度为1g/L的Tween80溶液;淋洗方法:第一天喷洒1L/m(滴灌带长)浓度为1g/L的Tween80溶液,喷淋速度为0.5L/min;第二天,第三天喷洒自来水1L/m,喷洒速度为0.5L/min,当上部土壤石油烃含量低于植物耐受度时,种植油菜籽。
实施例2
(1) 将动物粪便、植物碎屑、待修复土壤(含油率1.57%)按质量比例1:1:0.5混合发酵2个月,制成腐殖质,进一步将1份营养物质与腐殖质10Kg混合制的营养腐殖质;
(2) 利用待修复的石油污染土壤筛选石油降解作为修复菌剂或使用市售石油降解菌作为修复菌剂;挖掘表层8cm处石油污染的土壤用于菌种的筛选;取8g挖掘的土壤在100ml生理盐水中震荡混合40分钟,取10mL混合液于90mL的石油无机盐培养基中,在35℃、180r/min震荡培养7d,吸取上清液10mL并加入到新鲜的90mL的石油无机盐培养基,相同条件下培养7d,重复操作4次,得到具有石油降解能力的细菌。使用平板涂布法分离得到16株石油降解菌。使用石油培养基对分离的石油降解菌进行降解能力的鉴定,发现6株降解菌效果明显,无需生物学鉴定;
(3) 修复菌剂的富集培养是将1份营养物质加入到500mL蒸馏水混合,并取100mL于锥形瓶,使用接种环分离的石油降解菌接种到锥形瓶内在35℃、180r/min下培养12h,使用100mL离心管离心并弃去上清液,加入3mL上清液震荡使离心管壁的降解菌与上清液混匀,制得高浓度菌液,10Kg营养腐殖质加入100ml高浓度菌液混合均匀,备用;
(4) 挖掘种植沟渠,其上部宽度30cm,底部为圆底,深度30cm,使用粘性土壤覆盖沟渠底部,厚度为5cm。最低点嵌入3根通气渗漏管道,每根管管径为2cm贯穿整个沟渠,管壁开孔1mm,各孔上下左右的距离为1cm;
(5) 将修复组合物覆盖到粘土表面,覆盖厚度为5cm,进一步覆盖填满待修复土壤,定期使用淋洗液淋洗;淋洗液的浓度为5g/L的Tween80溶液;淋洗方法:第一天喷洒2L/m(滴灌带长)浓度为5g/L的Tween80溶液,喷淋速度为0.5L/min;第二天,第三天喷洒自来水2L/m,喷洒速度为0.5L/min,当上部土壤石油烃含量低于植物耐受度时,种植油菜籽。
实施例3
(1) 将动物粪便、植物碎屑、待修复土壤(含油率1.57%)按质量比例0.5:1:0.5混合发酵3个月,制成腐殖质,进一步将1份营养物质与腐殖质10Kg混合制的营养腐殖质;
(2) 利用待修复的石油污染土壤筛选石油降解作为修复菌剂或使用市售石油降解菌作为修复菌剂。挖掘表层8cm处石油污染的土壤用于菌种的筛选;取8g挖掘的土壤在100ml生理盐水中震荡混合40分钟,取10mL混合液于90mL的石油无机盐培养基中,在35℃、180r/min震荡培养7d,吸取上清液10mL并加入到新鲜的90mL的石油无机盐培养基,相同条件下培养7d,重复操作5次,得到具有石油降解能力的细菌。使用平板涂布法分离得到16株石油降解菌;使用石油培养基对分离的石油降解菌进行降解能力的鉴定,发现6株降解菌效果明显,无需生物学鉴定;
(3) 修复菌剂的富集培养是将1份营养物质加入到500mL蒸馏水混合,并取100mL于锥形瓶,使用接种环分离的石油降解菌接种到锥形瓶内在35℃、180r/min下培养12h,使用100mL离心管离心并弃去上清液,加入5mL上清液震荡使离心管壁的降解菌与上清液混匀,制得高浓度菌液,10Kg营养腐殖质加入100ml高浓度菌液混合均匀,备用;
(4) 挖掘种植沟渠,其上部宽度20cm,底部为圆底,深度20cm,使用粘性土壤覆盖沟渠底部,厚度为3cm;最低点嵌入2根通气渗漏管道,每根管管径为2cm贯穿整个沟渠,管壁开孔1mm,各孔上下左右的距离为1cm;
(5) 将修复组合物覆盖到粘土表面,覆盖厚度为3cm,进一步覆盖填满待修复土壤,定期使用淋洗液淋洗。淋洗液的浓度为3g/L的Tween80溶液;淋洗方法:第一天喷洒1L/m(滴灌带长)浓度为3g/L的Tween80溶液,喷淋速度为0.5L/min;第二天,第三天喷洒自来水1L/m,喷洒速度为0.5L/min,依次间隔当上部土壤石油烃含量低于植物耐受度时,种植油菜籽。
实验结果如下表所示:
Claims (11)
1.一种渗漏性石油污染土壤的复合修复方法,其特征在于:该方法包括步骤如下:
将营养腐殖质、石油降解菌混合制备为修复组合物;
挖掘种植沟渠并使用粘性土壤覆盖沟渠底部并在底部最低点嵌入通气渗漏管道;
将修复组合物覆盖到沟渠表面并覆盖污染土壤,使用淋洗营养液定期淋洗修复带上方石油污染土壤;
一段时间后,修复带上方土壤含油降低时可种植植物。
2.根据权利要求1所述的一种渗漏性石油污染土壤复合修复方法,其特征在于:将动物粪便、植物碎屑、待修复土壤按质量比0.5~1:1~2:0.5~1混合发酵1~3个月,制成腐殖质。
3.根据权利要求1所述的一种渗漏性石油污染土壤的复合修复方法,其特征在于:修复组合物中的降解菌可利用待修复的石油污染土壤自行提取,并筛选效果较好的细菌作为修复菌剂或使用市售石油降解菌作为修复菌剂;筛选方法:挖掘表层5~10cm处待石油污染的土壤用于菌种的筛选;取5~10g挖掘的土壤在100ml生理盐水中震荡混合30~60分钟,取10~15mL混合液于85~90mL的石油无机盐培养基中,在35℃、180r/min震荡培养7d,吸取上清液10~15mL并加入到新鲜的85~90mL的石油无机盐培养基,相同条件下培养7d,重复操作3~5次,得到具有石油降解能力的细菌;使用平板涂布法分离得到石油降解菌;进一步使用石油培养基对分离的石油降解菌进行降解能力的测定,将降解能力强的石油降解菌进行富集培养并保存为修复菌剂,无需生物学鉴定。
4.根据权利要求3所述的一种渗漏性石油污染土壤的复合修复方法,其特征在于:修复菌剂的富集培养是将1份营养物质加入到500mL蒸馏水混合,并取100mL于锥形瓶,使用接种环把分离的石油降解菌接种到锥形瓶内培养12~18h,使用100mL离心管离心并弃去上清液,加入3~5mL上清液震荡使离心管壁的降解菌与上清液混匀,制得高浓度菌液,10Kg营养腐殖质加入50~100ml高浓度菌液混合均匀,备用。
5.根据权利要求3所述的一种渗漏性石油污染土壤的复合修复方法,其特征在于:无机盐培养基:2~5g K2HPO4、2~5NaCl、1~3g KH2PO4、0.5~2g NH4Cl、0.02g CaCl2、0.1~0.2gMgSO4•7H2O、0.01~0.03g FeSO4•7H2O、0.002~0.005g CuSO4•5H2O、0.002~0.005g ZnSO4•7H2O),加入蒸馏水溶解并定容到1000mL;每个锥形瓶准确称量0.1g石油并加入100mL无机盐培养基封住锥形瓶口,利用高温高压灭菌30min,制的石油无机盐培养基。
6.根据权利要求4所述的一种渗漏性石油污染土壤复合修复方法,其特征在于: 1份营养物质(葡萄糖3~5g、磷酸二氢钾2~5g、酵母粉3~6g和氯化钠2~5g)。
7.根据权利要求1和4所述的一种渗漏性石油污染土壤的复合修复方法,其特征在于:将动物粪便、植物碎屑、待修复土壤按质量比0.5~1:1~2:0.5~1混合发酵1~3个月,制成腐殖质。
8.根据权利要求1、2、4和6所述的一种渗漏性石油污染土壤的复合修复方法,其特征在于:将1份营养物质与腐殖质10Kg进行均匀混合,制成营养腐殖质。
9.根据权利要求1所述的一种渗漏性石油污染土壤的复合修复方法,其特征在于:挖掘种植沟渠上部宽度10~50cm,底部为圆底,深度10~30cm,使用粘性土壤覆盖沟渠底部2~10cm,沟渠最低点嵌入1~3根通气渗漏管道,每根管管径为2~10cm贯穿整个沟渠。
10.根据权利要求1和9所述的一种渗漏性石油污染土壤复合修复方法,其特征在于:粘土覆盖层上铺厚度3~10cm的营养腐殖质,进一步覆盖填满待修复土壤,定期使用淋洗液淋洗。
11.根据权利要求1和10所述的一种渗漏性石油污染土壤的复合修复方法,其特征在于配制浓度为1~6g/L的Tween80溶液;第一天喷洒1~10L/m(滴灌带长)浓度为1~6g/L的Tween80溶液,喷淋速度为0.5~1L/min;第二天,第三天喷洒自来水1~10L/m,喷洒速度为0.5~1L/min,当上部土壤石油烃含量低于植物石油耐受量时,可种植植物。
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