CN114470030A - 一种含儿茶活性成分的组合物及应用 - Google Patents
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Abstract
本发明属于药物领域,涉及一种含儿茶活性成分的组合物及应用。所述组合物包括儿茶提取物和猫眼草提取物,所述儿茶提取物与所述猫眼草提取物的重量比为0.5‑5:1。本发明的含儿茶活性成分的组合物具有明显的杀菌和凝固蛋白作用,对于包括骨结核溃疡、淋巴结核溃疡、肛瘘或糖尿病足在内的溃烂性疾病具有良好的改善和治愈效果。
Description
技术领域
本发明属于药物领域,具体地,涉及一种含儿茶活性成分的组合物,以及该组合物的应用。
背景技术
结核杆菌是引起结核病的病原体。1882年由德国细菌学家Robert Koch发现并证明为人类结核病的病原菌,该菌可侵犯全身各器官,但以引起肺结核最多见。结核病是一种古老的疾病,全球广泛分布,是细菌感染性疾病致死的首位原因。
目前结核病治疗主要以药物化疗为主。利福平、异烟肼、乙胺丁醇、链霉素,吡嗪酰胺等为一线抗结核药物。药物失败或者危及生命的局限性病变等可以采取手术治疗。治疗中重要的还有对症治疗,例如发热的治疗,咯血的防治等。
很多中药具有较强的抑制结核杆菌作用,如百部、黄玲、白芨、白芍、虫草、射干、夏枯草、黄连、黄柏、地榆、鱼腥草、地骨皮、白果、银花、连翘、款冬花、石榴皮等。在用药物治疗的同时,可同用中药,既能增加疗效,又能防止出现抗药性。
发明内容
本发明的发明人经研究发现,采用儿茶粗提取物原药并复配猫眼草,所得药物组合物对溃烂型疾病的治疗效果更好。
为了实现上述目的,本发明的第一方面提供一种含儿茶活性成分的组合物,包括儿茶提取物和猫眼草提取物,所述儿茶提取物与所述猫眼草提取物的重量比为0.5-5:1。
优选地,所述儿茶提取物与所述猫眼草提取物的重量比为0.8-3:1。
本发明采用的儿茶粗提取物原药中活性组分需达到一定浓度,具体地,所述儿茶提取物中活性成分的含量为40重量%以上,优选为45重量%以上;所述活性成分为儿茶素、表儿茶素和儿茶鞣酸。
根据本发明一种优选实施方式,所述儿茶提取物由包括如下步骤的方法制得:
将中药儿茶和/或儿茶植物粉碎,然后用溶剂提取,得到提取液,提取液经常压或减压浓缩得浸膏,或经冷冻干燥得到粉末。
进一步地,所述提取所用的溶剂为水或50-95%的C1-C6烷醇的水溶液,提取的温度为0℃至溶剂回流的温度。所述C1-C6烷醇优选为乙醇。
根据本发明一种优选实施方式,所述猫眼草提取物由包括以下步骤的方法制得:
将猫眼草洗净、烘干并磨成粉,过筛后用水煎煮,将煎煮出的液体收集,真空干燥得到粉末,即得猫眼草提取物。
进一步地,所述烘干的温度为70-80℃;所述过筛的目数为60-100目;水与猫眼草的重量比为8-12:1,用水煎煮2-4次,每次煎煮15-30min。
本发明的组合物由所述儿茶提取物与所述猫眼草提取物混合而成。
本发明的第二方面提供上述组合物在制备治疗溃烂的药物中的应用。
具体地,所述溃烂包括骨结核溃疡、淋巴结核溃疡、肛瘘或糖尿病足。
本发明的药物可以为常规的各种剂型,优选为膏剂、片剂、粉剂或凝胶剂。
本发明的含儿茶活性成分的组合物具有明显的杀菌和凝固蛋白作用,对于包括骨结核溃疡、淋巴结核溃疡、肛瘘或糖尿病足在内的溃烂性疾病具有良好的改善和治愈效果。
本发明的其它特征和优点将在随后具体实施方式部分予以详细说明。
具体实施方式
下面将更详细地描述本发明的优选实施方式。虽然以下描述了本发明的优选实施方式,然而应该理解,可以以各种形式实现本发明而不应被这里阐述的实施方式所限制。
制备例1
中药儿茶20g,粉碎后加入50%乙醇浸泡提取3次,每次24小时。合并提取液,回收乙醇并浓缩至稠浸膏,得到儿茶提取物。经过高效液相外标法测定,所得儿茶提取物中含活性成分儿茶素、表儿茶素和儿茶鞣酸的总量为56%。儿茶素、表儿茶素和儿茶鞣酸用HPLC方法与化学对照品对照进行鉴定确认。
制备例2
将10g猫眼草洗净,在70-80℃下烘干,磨成粉,过80目筛,然后用水煎煮,水与猫眼草的重量比为10:1,用水煎煮3次,每次煎煮20min,将煎煮出的液体收集,真空干燥得到粉末,即得猫眼草提取物。
制备例3
中药儿茶20g,粉碎后加入50%乙醇浸泡提取3次,每次24小时。合并提取液,回收乙醇并浓缩至稠浸膏,得到儿茶提取物。经过高效液相外标法测定,所得儿茶提取物中含活性成分儿茶素、表儿茶素和儿茶鞣酸的总量为38%。儿茶素和表儿茶素用HPLC方法与化学对照品对照进行鉴定确认。
对比制备例1
1、粗提:根据制备例1的方法制备儿茶提取物,向所得稠浸膏中加入蒸馏水加热溶解,过滤得澄清滤液。
2、精制:上述滤液通过经处理的HPD-100型大孔吸附树脂,用水和10%、30%、50%、70%的乙醇梯度洗脱,其中30%乙醇洗脱的组分为E1。
实施例1
将制备例1制得的儿茶提取物与制备例2制得的猫眼草提取物按2:1均匀混合,得到组合物S1。
实施例2
将制备例1制得的儿茶提取物与制备例2制得的猫眼草提取物按1.5:1均匀混合,得到组合物S2。
实施例3
将制备例1制得的儿茶提取物与制备例2制得的猫眼草提取物按2.5:1均匀混合,得到组合物S3。
实施例4
将制备例1制得的儿茶提取物与制备例2制得的猫眼草提取物按0.5:1均匀混合,得到组合物S4。
实施例5
将制备例1制得的儿茶提取物与制备例2制得的猫眼草提取物按4:1均匀混合,得到组合物S5。
实施例6
将制备例3制得的儿茶提取物与制备例2制得的猫眼草提取物按2:1均匀混合,得到组合物S6。
测试例1
本发明的组合物对结核杆菌的药敏试验。
通过药理实验观察儿茶粗提取物经过分离后的精制组分和儿茶粗提取物的组合物对培养结核杆菌生长的抑制。
(1)受试药物
①E1来源为对比制备例1中得到的儿茶提取物的分离组分;S1-S6为实施例1-6制备的组合物;A为制备例1制得的儿茶提取物。
②药物配制和剂量设置
用20%DMSO水溶液溶解受试药物,每个药物样品测3个浓度:5.0mg/mL、1.0mg/mL、0.1mg/mL,每个浓度做3管药敏培养;同时,以含2%DMSO的罗氏培养基为空白(无药)对照。
(2)实验方法
①菌种复苏:取4℃短期储存的罗氏培养管刮取结核分枝杆菌,按照比浊浓度,稀释到10-4mg/mL,每管接种0.1mL,接种5支试管。37℃恒温培养约3周。期间需要每周观察一到两次,防止污染。三周后,H37Rv菌种生长良好,即可扩大培养用于药敏实验。
②含药培养基制备:20mL玻璃管,参照文献方法制备斜面固体培养基(罗氏培养基或7H11)时,根据药物终浓度要求按比例加入已经溶解的药物。
③药敏分组和接种:取刚复苏扩大培养的结核菌,刮下,根据比浊管浓度稀释菌浓度至约10-5mg/mL,每管培养基接种10-5mg/mL菌液0.1mL;涂布均匀。置于37℃培养箱中培养21天。
④药敏结果判断:记录菌落数和观察菌落生长情况:斜面菌落数融合成片(>500个菌落)标计为++++;菌落数200-500个标记为+++;菌落数100-200个标记为++;菌落数50-100个标记为+;菌落数低于50个给出菌落数;菌落数低于10个标记为-。
(4)实验结果:结果见表1。
(5)实验结论:以上实验结果表明,中药儿茶的分离组分E1对结核杆菌生长有明显抑制作用,由儿茶粗提物和猫眼草提取物形成的组合物对结核杆菌生长的抑制作用更强,优选配比的儿茶粗提物和猫眼草提取物形成的组合物的抑制作用更优。
表1
测试例2
本发明的组合物对10株临床结核菌株杀菌及抑菌作用。
(1)受试药物
①E1来源为对比制备例1中得到的儿茶提取物的分离组分;S1-S6为实施例1-6制备的组合物;A为制备例1制得的儿茶提取物。
②药物配制和剂量设置
用DMSO溶解后,加灭菌水至所需药物浓度,用0.22μm的虑瓶过滤后使用。药物剂量设为0.5mg/mL、1.0mg/mL、2.0mg/mL、4.0mg/mL、5.0mg/mL五个浓度。
(2)实验方法
①结核菌菌株选取与毒力恢复:选取10株结核分枝杆菌临床分离株,包括4株MDR菌株,3株耐药菌株(除了MDR外的其他耐药形式),3株全敏感菌株(其中1株为H37RV)。选用健康小鼠(C57),雌雄各半,尾静脉注射1个麦氏的细菌100μL,4周后取肺脏、脾脏进行细菌培养,动物处死后,1个月后恢复毒力的菌株方可传代保存。
②MIC测定:采用7H11培养基方法测定最低抑菌浓度。
7H11培养基上的MIC:将细菌磨菌比浊至1个麦氏浓度,用灭菌生理盐水稀释至10- 2mg/mL和10-4mg/mL,取20μL稀释至10-2mg/mL接种于空白7H11培养基作为空白对照,20μL稀释至10-4于空白7H11培养基(A),20μL稀释至10-2于含药7H11培养基(B)。室温过夜无污染后,转入5%二氧化碳的37℃温箱培养孵育4周后观察结果。MIC的定义为抑制99%细菌生长的最低药物浓度。
(4)实验结果:结果见表2。
(5)实验结论:以上实验结果表明,中药儿茶的分离组分E1对10株临床结核杆菌均具有抑菌和杀菌作用。由儿茶粗提物和猫眼草提取物形成的组合物的最低药物浓度更低,对各种结核杆菌的抑制作用更强,优选配比的儿茶粗提物和猫眼草提取物形成的组合物的最低药物浓度进一步降低,表现出更强的结核杆菌抑制作用。
表2对10株临床菌株的最低抑菌浓度(MIC)结果(mg/mL)
测试例3
组合物S1-S3的初步急性毒性。
(1)动物:ICR小鼠,雌雄性各半,体重20±0.5g,购自北京维通利华试验动物技术有限公司。动物许可证编号:SCXK(京)2016-0009。
(2)受试药物:组合物S1-S3由实施例1-3制备。用水加热溶解为200mg/mL溶液。
(3)实验方法:药物采用10g/kg体重的比例灌胃。ICR小鼠,雌雄性各半,禁食过夜,随机分为2组,即空白对照组和12mL×200mg/mL受试药物剂量组,每组10只。前一天晚上对实验动物禁食禁水,次日上午9时,灌胃给药一次,下午3时灌胃给药一次,每次给体积为0.5ml;给药6个小时后,开始正常喂食进水。每日观察早晚两次,记录异常情况;观察一周后,处死,解剖,观察脾、胃、肝脏和肺部情况。
(4)实验结果:见表3。
(5)结论:本次试验给药后观察一周,小鼠无死亡,亦无焦躁等异常情况;解剖后观察,脏器均正常,没有异常现象。与对照组动物情况无明显差异。本次采用10g/kg体重的高剂量,从毒性耐受实验结果可见看,组合物S1-S3没有表现出明显的毒副作用。
表3单日灌胃耐受实验结果
实施例7
本发明中药组合物膏剂的制备:
将实施例1所得的组合物S1与1/5体积的蜂蜡和黄凡士林混合,再温火煎熬搅拌,冷却成膏状物即得。
实施例8
本发明中药组合物凝胶剂的制备:
将卡波姆加入甘油中研磨使湿润,再加入少量蒸馏水研磨后,移到量杯中,另取三乙醇胺、羟苯乙脂、蒸馏水适量使溶解,搅拌成凝胶状,再加适量蒸馏水搅匀,加入实施例1所得的组合物S1,研匀即得。
实施例9
本发明中药组合物透皮贴剂的制备:
向实施例1所得的组合物S1中加入高岭土、甘油,搅匀,涂布于背衬层,加入保护层即得。
肛瘘治疗例
肛瘘分高位肛瘘和低位肛瘘及多发肛瘘。低位肛瘘治愈时间较短,高位肛瘘及多发肛瘘治愈时间相对要长一些。
治疗例1
患者刘某某,男,59岁,患有肛瘘三四年,属于陈旧性高位肛瘘。
使用实施例6中的膏剂。首先清理患处表面,用探针探肛瘘深度;其次用镊子将肛瘘口微微撑开,将药堆放撑开处,用类似于小火柴头似的消毒木芊将药推进瘘道深处至底,用药多少以肛瘘口无渗液为准,创可贴封口。第二天察看是否有渗液流出,如有继续补药,没有用药完毕。刘某某用药20天基本治愈,到第40天已经彻底治愈,且至今无复发。
治疗例2
患者陈某某,女,44岁,患有肛瘘一年,经常感觉肛门处潮湿、发胀,行走时尤其疼痛。经诊断陈某某是低位肛瘘,根据治疗例1相似的方式使用实施例6中的膏剂,用药1个月完全治愈,且至今已5年无复发。
治疗例3
杨某某,女,87岁,家庭主妇。多年前患肺结核,五年后肺结核病愈后又患上腰椎骨结核,已经有三次在通县结核病研究所实施手术治疗史,但每次术后三个月至半年复发,医院诊断为顽固性耐多药性骨结核,以当时的医疗条件无法治愈。
杨某某精神负担非常重,经济负担压垮整个家庭,俩个孩子辍学。此时看到情景应该是人财两空。杨某某用药前,面如土色,形如枯槁,瘦小奄奄一息,体重72斤,人没有半点精神。腰部病灶是一个拇指大的窟窿,每天流浓不止,深度处能够看到坏死骨头,人只是一息尚在。根据治疗例1相似的方式使用实施例6中的膏剂,用药后45天开始封口,70天后彻底痊愈,愈后病灶处留有一个坑。体重六个月增加19斤,至今未再复发。
治疗例4
患者王某,性别男,41岁,患有肛瘘近五年,经常感到肛门处疼痛,行走时尤甚,肛周已经出现每日流脓的症状。王某是多发性肛瘘,由于是术后复发者,对肛瘘手术心有余悸,在复方后一直保守治疗。
王某使用实施例6中的膏剂,用药1个月基本治愈,到第2个月已经彻底治愈,且至今无复发。
糖尿病足治疗例
治疗例5
李某某,男,72岁,糖尿病8年,糖尿病足溃疡15天,外用实施例6中的膏剂,涂覆14天后,溃疡感染好转,未再出现患处脓液,28天后,患处溃疡愈合。
骨结核治疗例和淋巴结核治疗例
采用本发明的膏剂,骨结核用药病例17例,治愈17例。(老鼠疮)淋巴结核用药病例3例,治愈3例。
以上已经描述了本发明的各实施例,上述说明是示例性的,并非穷尽性的,并且也不限于所披露的各实施例。在不偏离所说明的各实施例的范围和精神的情况下,对于本技术领域的普通技术人员来说许多修改和变更都是显而易见的。
Claims (10)
1.一种含儿茶活性成分的组合物,包括儿茶提取物和猫眼草提取物,所述儿茶提取物与所述猫眼草提取物的重量比为0.5-5:1。
2.根据权利要求1所述的组合物,其中,所述儿茶提取物与所述猫眼草提取物的重量比为0.8-3:1。
3.根据权利要求1或2所述的组合物,其中,所述儿茶提取物中活性成分的含量为40重量%以上,优选为45重量%以上;所述活性成分为儿茶素、表儿茶素和儿茶鞣酸。
4.根据权利要求1或2所述的组合物,其中,所述儿茶提取物由包括如下步骤的方法制得:
将中药儿茶和/或儿茶植物粉碎,然后用溶剂提取,得到提取液,提取液经常压或减压浓缩得浸膏,或经冷冻干燥得到粉末。
5.根据权利要求4所述的组合物,其中,所述提取所用的溶剂为水或50-95%的C1-C6烷醇的水溶液,提取的温度为0℃至溶剂回流的温度;所述C1-C6烷醇优选乙醇。
6.根据权利要求1或2所述的组合物,其中,所述猫眼草提取物由包括以下步骤的方法制得:
将猫眼草洗净、烘干并磨成粉,过筛后用水煎煮,将煎煮出的液体收集,真空干燥得到粉末,即得猫眼草提取物。
7.根据权利要求6所述的组合物,其中,所述烘干的温度为70-80℃;所述过筛的目数为60-100目;水与猫眼草的重量比为8-12:1,用水煎煮2-4次,每次煎煮15-30min。
8.权利要求1-7中任意一项所述的组合物在制备治疗溃烂的药物中的应用。
9.根据权利要求8所述的应用,其中,所述溃烂包括骨结核溃疡、淋巴结核溃疡、肛瘘或糖尿病足。
10.根据权利要求8所述的应用,其中,所述药物的剂型为膏剂、片剂、粉剂或凝胶剂。
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Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PB01 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20220513 |