CN114383921A - 一种组织芯片及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明的目的在于提供一种组织芯片及其制备方法。本发明的第一方面，提供了一种组织芯片的制备方法，所述方法包括如下步骤：受体蜡块制备，在蜡块表面设置样品孔，形成多个样品通道，形成受体蜡块；样品取样包埋，在供体蜡块上采集属同一动物系统的组织芯，并将其转移到受体蜡块的样品通道中；芯片成型，将成型的供体石蜡进行切片、烤片、染色，获得组织芯片。本发明的第二方面，提供了一种组织芯片，所述组织芯片采用如本发明第一方面所述的组织芯片的制备方法制备获得。在教学过程中能在同一组织芯片对同一种或同一属整个系统的组织的多样性进行教学，也可以对不同种属的同一种类组织进行比较分析，便于教学、观察、分析。
Description
技术领域：
本发明涉及生物芯片领域，具体的，涉及一种组织芯片及其制备方法。
背景技术：
组织芯片技术(tissuechip)又称组织微阵列(tissuemicroarray，TMA)，能够将大量病理组织有序排列，形成高通量的病理组织芯片。自组织芯片问世以来，该技术以其具有对样本的高通量、原位分析、实验条件可保证等一系列优势，在组织样本的检测领域受到广泛认可。
现有组织芯片通常通过对石蜡块进行打孔，进行组织的植入，从而进行高通量的检测。但是现有技术中，是将不同个体的同一种类的组织排布在同一组织芯片上，不方便对同一动物系统的组织样品进行整体教学、比较分析。
因此，本领域亟需一种组织芯片及其制备方法，以解决上述至少一个技术问题。
有鉴于此，提出本发明。
发明内容：
本发明的目的在于提供一种组织芯片及其制备方法，以解决现有技术中的至少一项技术问题。
具体的，本发明的第一方面，提供了一种组织芯片的制备方法，所述方法包括如下步骤：
受体蜡块制备，在蜡块表面设置样品孔，形成多个样品通道，形成受体蜡块；
样品取样包埋，在供体蜡块上采集属同一动物系统的组织芯，并将其转移到受体蜡块的样品通道中；
芯片成型，将成型的供体石蜡进行切片、烤片、染色，获得组织芯片。
其中，所述动物系统包括消化系统、神经系统、呼吸系统、循环系统、运动系统、内分泌系统、泌尿系统、生殖系统，所述组织芯可以采集自同一种或同一属的动物的同一系统的全部或部分种类的组织，也可以采集自不同种属的动物相同种类的组织。
采用上述技术方案，在教学过程中能在同一组织芯片对同一种或同一属整个系统的组织的多样性进行教学，也可以对不同种属的同一种类组织进行比较分析，便于教学、观察、分析。
优选地，所述样品取样包埋过程中，采集的组织芯属于同一种或同一属动物的不同种类组织。
采用上述技术方案，便于对同一种或同一属的同一系统的全部或部分种类的组织进行整体教学、观察、分析，节省空间，便于存储，简化观察过程。
优选地，所述样品取样包埋过程中，所述组织芯在受体蜡块上的排布次序与在动物体内的排布位置关系相关，所述动物体内的排布位置关系包括由上到下、由外到内、功能作用先后中的至少一种。
其中功能作用先后是指该系统中不同组织发挥作用的不同时间顺序，如消化系统消化食物先后经过口腔、咽、食管、胃、小肠和大肠，可按此进行排序。
采用上述技术方案，观察时便于在组织芯片上定位查找，以及相邻组织的比较。
优选地，所述样品取样包埋过程中，采集的组织芯属不同种属动物的同一系统的至少一个种类的组织。
采用上述技术方案，便于不同种属动物的组织比较，便于教学、科研的观察。
进一步地，所述样品取样包埋过程中，同一染色方法的组织芯植入同一个矩形区域，不同种染色方法的矩形区域不重叠。
采用上述技术方案，便于分区域进行染色，使染色更简便，也便于组织芯在同一染色下的色差对比。
进一步地，所述芯片成型过程中，利用分区处理装置进行染色，所述分区处理装置包括外框架和内调架，所述外框架与内调架与组织芯片接触的一侧处于同一平面上；所述外框架包括垂直连接的第一支架和第二支架，所述内调架包括至少一个第一调架，所述第一支架上设置有限位槽，所述第一调架的一端与所述限位槽配合，所述第一调架能沿限位槽移动，并与所述第二支架平行设置。
采用上述技术方案，所述第一调架与第二支架或另一第一调架能在组织芯片上隔离出宽度可调节的区域，在染色时，可以对左右两侧进行染色区域限位，防止染色剂超区域，并减少左右两侧的边缘效应，在组织芯片染色过程中，边缘的组织芯因为染色剂的边缘效应导致假阴性；所述第一调架能在第一支架上滑动，使得区域可调节，适应不同的染色区域；所述外框架与内调架与组织芯片接触的一侧处于同一平面，使得所述分区处理装置能紧密接触组织芯片，防止染色时漏液。
优选地，所述外框架与内调架接触组织芯片的一面上设置有弹性垫或石蜡层。
采用上述技术方案，增加所述分区处理装置与组织芯片结合的紧密性，并防止损伤组织芯片。所述弹性材质可以为聚苯醚(PPE)、聚烯烃热塑性弹性体(TPO)、热塑性三元乙丙动态硫化弹性体(TPV)、热塑性三元乙丙动态硫化弹性体(TPE)、苯乙烯系热塑性弹性体(SBS)、天然橡胶(NR)、顺丁橡胶(BR)中的一种。
进一步地，所述内调架包括至少一个调架组件，所述调架组件包括至少两个第二调架，至少一个所述第二调架上设置有滑动槽，所述第二调架之间通过滑动槽进行配合与滑动，所述滑动槽实现所述调架组件可伸缩，所述第一支架、第一调架上设置有限位槽，所述调架组件的一端与第一调架的限位槽相配合，所述调架组件的另一端与所述第二支架或另一个第一调架的限位槽配合，所述调架组件能沿限位槽移动，并与所述第一支架平行设置。
采用上述技术方案，可以形成对个大小可调节的矩形区域：所述第一支架、第二支架、第一调架、调架组件之间形成矩形区域；2个第一调架、2个调架组件形成矩形区域；所述第一支架、2个第一调架、所述调架组件形成矩形区域；所述第二支架、2个调架组件、所述第一调架形成矩形区域；可以对矩形区域进行调节，也可以安装拆卸不同个数的第一调架和调架组件，以便适用不同的染色区域，减少四周的边缘效应。
进一步地，所述第一支架对称设置2个，所述第二支架对称设置2个，所述第一支架和第二支架组成矩形。
采用上述方案，使得内调架滑动得更平稳，不易变形。
进一步地，所述第一支架、第二支架之间可拆卸连接。
其中，所述第一支架、第二支架可以套接或卡接，如采用轴枢连接，可通过微小形变进行拆卸。
采用上述技术方案，便于所述内调架的拆卸。
进一步地，所述外框架上设置至少一个夹子。
其中，所述夹子可以利用自身或内置的弹簧的弹性形变夹紧，所述夹子可以是可拆卸的，也可以与外框架连接。
采用上述技术方案，能将所述分区处理装置与组织芯片紧密固定，防止移动，影响染色。
本发明的第二方面，提供了一种组织芯片，所述组织芯片采用如本发明第一方面所述的组织芯片的制备方法制备获得。
综上所述，本发明具有以下有益效果：
1、所述组织芯片的制备方法将同一动物系统的组织制备在同一个组织芯片上，在教学过程中能在同一组织芯片对同一种或同一属整个系统的组织的多样性进行教学，也可以对不同种属的同一种类组织进行比较分析，便于教学、观察、分析；
2、所述组织芯片的制备方法将组织样品按在动物体内的排布位置进行排序，观察时便于在组织芯片上定位查找，以及相邻组织的比较；
3、所述样品取样包埋过程中，同一染色方法的组织芯植入同一个矩形区域，不同种染色方法的矩形区域不重叠，便于分区域进行染色，使染色更简便，也便于组织芯在同一染色下的色差对比；
4、所述分区处理装置采能在组织芯片上隔离出宽度可调节的区域，在染色时，可以对左右两侧进行染色区域限位，防止染色剂超区域，并减少左右两侧的边缘效应；
5、所述外框架与内调架接触组织芯片的一面上设置有弹性垫或石蜡层，增加所述分区处理装置与组织芯片结合的紧密性，并防止损伤组织芯片。
附图说明：
为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1为本发明实验例中组织芯片一种实施方式的示意图；
图2为本发明实验例中使用分区处理装置进行染色时组织芯片一种实施方式的示意图；
图3为本发明实施例中组织芯片一种实施方式的示意图；
图4为本发明实施例中使用分区处理装置进行染色时组织芯片一种实施方式的主视图；
图5为本发明实施例中使用分区处理装置进行染色时组织芯片一种实施方式的右视图；
图6为本发明分区处理装置一种实施方式的立体图；
图7为本发明调架组件一种实施方式的立体图。
附图标记说明：
通过上述附图标记说明，结合本发明的实施例，可以更加清楚的理解和说明本发明的技术方案。
1、外框架；11、第一支架；111、限位槽；12、第二支架；2、内调架；21、第一调架；22、调架组件；221、第二调架；222、滑动槽；3、夹子；4、组织芯片。
具体实施方式：
下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有付出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
在本发明使用的术语是仅仅出于描述特定实施例的目的，而非旨在限制本发明。在本发明和所附权利要求书中所使用的单数形式的“一种”、“所述”和“该”也旨在包括多数形式，除非上下文清楚地表示其他含义。还应当理解，本文中使用的术语“和/或”是指并包含一个或多个相关联的列出项目的任何或所有可能组合。
以下将通过实施例对本发明进行详细描述。
取大鼠结肠组织供体蜡块取组织芯，植入10*10的受体蜡块内，切片、脱蜡，如图1所示，将组织芯片分为A区(左上)、B区(左下)、C区(右上)、D区(右下)四个区域，每个区域均有5*5组织芯，对A区、D区两个区域进行染色，染色方法按以下方案进行HE(苏木精—伊红)染色，染色后进行显微观察，其中每个区域最外层一圈的组织样品为边缘样品，如图中阴影标记的组织样品。
方案一
直接染色，不使用工具；进行HE染色。
方案二
参考图2，与方案一大致相同，不同之处在于使用分区处理装置进行染色，冲洗时分离所述分区处理装置和组织芯片，使用试剂时将所述分区处理装置与组织芯片固定。其中，所述分区处理装置包括外框架和内调架，所述外框架呈矩形，包括对称设置的2个第一支架、对称设置的2个第二支架，所述第一支架、第二支架上设置有限位槽，所述内调架包括1个第一调架，所述第一调架两端分别与2个第一支架通过限位槽滑动连接，所述内调架还包括2个调架组件，所述第一调架上设置有限位槽，所述调架组件位于所述第一调架两侧，分别与所述第一调架、第二支架通过限位槽滑动连接，所述调架组价包括2个第二调架，2个第二调架通过限位槽滑动连接。
方案三
与方案二大致相同，不同之处在于，所述分区处理装置在使用前，在接触组织芯片的一侧涂上一层石蜡。
各实验平行进行5次，实验结果如表1所示，其中边缘样品染色是否清晰是将非边缘区域样品的染色情况作为对照品的。
表1
根据表1的结果可知，方案二和三与方案一相比，边缘样品染色不清晰的个数明显减少(p＜0.01)，使用所述分区处理装置进行染色，能减少边缘效应，并且B区和C区样品染色率明显减少(p＜0.01)，所述分区处理装置能防止染色剂流到非染色区，减少分区域染色过程中非控染色；方案三与方案二相比，B区和C区样品染色个数减少，说明涂石蜡能增加密封性能，减少非控染色。
实施例
本实施例的第一方面，提供了一种组织芯片的制备方法，所述方法包括如下步骤：
受体蜡块制备，在蜡块表面设置样品孔，形成多个样品通道，形成受体蜡块；
样品取样包埋，在供体蜡块上采集属同一动物系统的组织芯，并将其转移到受体蜡块的样品通道中；
芯片成型，将成型的供体石蜡进行切片、烤片、染色，获得组织芯片。
其中，所述动物系统包括消化系统、神经系统、呼吸系统、循环系统、运动系统、内分泌系统、泌尿系统、生殖系统，所述组织芯可以采集自同一种或同一属的动物的同一系统的全部或部分种类的组织，也可以采集自不同种属的动物相同种类的组织。
具体实施过程中，参考图3，选取动物大鼠、犬的食管、胃、大小肠、颌下腺的组织制成组织芯片，所述组织芯片左上角为标记孔Y1，均匀分布大鼠样品Y2和犬的样品Y3，第一排为颌下腺组织，第二排为食管组织，第三排为胃组织，第四排位小肠组织，第五排为大肠组织，该组织芯片采集了消化系统中的部分组织，来自两种动物，制备和观测过程减少干扰因素，方便比较两种动物消化系统。
采用上述技术方案，在教学过程中能在同一组织芯片对同一种或同一属整个系统的组织的多样性进行教学，也可以对不同种属的同一种类组织进行比较分析，便于教学、观察、分析。
在本发明的一个优选实施方式中，所述样品取样包埋过程中，采集的组织芯属于同一种或同一属动物的不同种类组织。
采用上述技术方案，便于对同一种或同一属的同一系统的全部或部分种类的组织进行整体教学、观察、分析，节省空间，便于存储，简化观察中重复更换组织芯片，调节焦距的过程。
在本发明的一个优选实施方式中，所述样品取样包埋过程中，所述组织芯在受体蜡块上的排布次序与在动物体内的排布位置关系相关，所述动物体内的排布位置关系包括由上到下、由外到内、功能作用先后中的至少一种。
参考图3，该组织芯片的第一排为颌下腺组织，第二排为食管组织，第三排为胃组织，第四排位小肠组织，第五排为大肠组织，为食物进入动物体内的顺序，也大致为由上到下的顺序。
采用上述技术方案，观察时便于在组织芯片上定位查找，以及相邻组织的比较。
在本发明的一个优选实施方式中，所述样品取样包埋过程中，采集的组织芯属不同种属动物的同一系统的至少一个种类的组织。
采用上述技术方案，便于不同种属动物的组织比较，便于教学、科研的观察，保证制备过程和观察时的一致性，以便更准确地进行对比。
在本发明的一个优选实施方式中，所述样品取样包埋过程中，同一染色方法的组织芯植入同一个矩形区域，不同种染色方法的矩形区域不重叠。
参考图3，该组织芯片4中虚线标注的R1区为HE(hematoxylin-eosin)染色区域，R2区为PAS(Periodic Acid-Schiff)染色区，R3区为AB(Alcian blue)染色区，均为矩形区域，且不重叠。其中，HE染色用于观察细胞形态，细胞核内的染色质与胞质内的核酸着紫蓝色，细胞质和细胞外基质中的成分着红色；PAS染色用于鉴别中性糖元/粘多糖(阳性为红色),AB染色用于鉴别酸性粘多糖(阳性为绿蓝色)。
采用上述技术方案，便于分区域进行染色，使染色更简便，也便于组织芯在同一染色下的色差对比。如对大鼠和犬的不同组织在不同染色条件下的结果对比，方便分析组织结构特性和区别。
参考图4和图5，在本发明的一个优选实施方式中，所述芯片成型过程中，利用分区处理装置进行染色，所述分区处理装置包括外框架1和内调架2，所述外框架1与内调架2与组织芯片4接触的一侧处于同一平面上；所述外框架1包括垂直连接的第一支架11和第二支架12，所述内调架2包括至少一个第一调架21，所述第一支架11上设置有限位槽111，所述第一调架21的一端与所述限位槽111配合，所述第一调架21能沿限位槽111移动，并与所述第二支架12平行设置。在本发明的一个优选实施方式中，所述限位槽111为楔形槽，截面为梯形，所述限位槽111的截面也可以为圆形、凸字形。
采用上述技术方案，所述第一调架21与第二支架12或另一第一调架21能在组织芯片4上隔离出宽度可调节的区域，在染色时，可以对左右两侧进行染色区域限位，防止染色剂超区域，并减少左右两侧的边缘效应，在组织芯片4染色过程中，边缘的组织芯因为染色剂的边缘效应导致假阴性；所述第一调架21能在第一支架11上滑动，使得区域可调节，适应不同的染色区域；所述外框架1与内调架2与组织芯片4接触的一侧处于同一平面，使得所述分区处理装置能紧密接触组织芯片4，防止染色时漏液。
在本发明的一个优选实施方式中，所述外框架1与内调架2接触组织芯片4的一面上设置有弹性垫或石蜡层。
采用上述技术方案，增加所述分区处理装置与组织芯片4结合的紧密性，并防止损伤组织芯片4。所述弹性材质可以为聚苯醚(PPE)、聚烯烃热塑性弹性体(TPO)、热塑性三元乙丙动态硫化弹性体(TPV)、热塑性三元乙丙动态硫化弹性体(TPE)、苯乙烯系热塑性弹性体(SBS)、天然橡胶(NR)、顺丁橡胶(BR)中的一种。
参考图6与图7，在本发明的一个优选实施方式中，所述内调架2包括至少一个调架组件22，所述调架组件22包括至少两个第二调架221，至少一个所述第二调架221上设置有滑动槽222，所述第二调架221之间通过滑动槽222进行配合与滑动，当所述第二调架221设置超过3个时，所述滑动槽222在所述第二调架221上间隔设置；所述滑动槽222实现所述调架组件22可伸缩，所述第一支架11、第一调架21上设置有限位槽111，所述调架组件22的一端与第一调架21的限位槽111相配合，所述调架组件22的另一端与所述第二支架12或另一个第一调架21的限位槽111配合，所述调架组件22能沿限位槽111移动，并与所述第一支架11平行设置。
采用上述技术方案，可以形成对个大小可调节的矩形区域：所述第一支架11、第二支架12、第一调架21、调架组件22之间形成矩形区域；2个第一调架21、2个调架组件22形成矩形区域；所述第一支架11、2个第一调架21、所述调架组件22形成矩形区域；所述第二支架12、2个调架组件22、所述第一调架21形成矩形区域；可以对矩形区域进行调节，也可以安装拆卸不同个数的第一调架21和调架组件22，以便适用不同的染色区域，减少四周的边缘效应。
在本发明的一个优选实施方式中，所述第一支架11对称设置2个，所述第二支架12对称设置2个，所述第一支架11和第二支架12组成矩形。
采用上述方案，使得内调架2滑动得更平稳，不易变形。
在本发明的一个优选实施方式中，所述第一支架11、第二支架12之间可拆卸连接。
其中，所述第一支架11、第二支架12可以套接或卡接，如采用轴枢连接，可通过微小形变进行拆卸。
采用上述技术方案，便于所述内调架2的拆卸。
参考图4，在本发明的一个优选实施方式中，所述外框架1上设置至少一个夹子3。
其中，所述夹子3可以利用自身或内置的弹簧的弹性形变夹紧，所述夹子3可以是可拆卸的，也可以与外框架1连接。
采用上述技术方案，能将所述分区处理装置与组织芯片4紧密固定，防止移动，影响染色。
本实施例的第二方面，提供了一种组织芯片4，所述组织芯片4采用如本发明第一方面所述的组织芯片的制备方法制备获得。
对所公开的实施例的上述说明，使本领域专业技术人员能够实现或使用本发明。对这些实施例的多种修改对本领域的专业技术人员来说将是显而易见的，本文中所定义的一般原理可以在不脱离本发明的精神或范围的情况下，在其它实施例中实现。因此，本发明将不会被限制于本文所示的这些实施例，而是要符合与本文所公开的原理和新颖特点相一致的最宽的范围。
Claims (10)
1.一种组织芯片的制备方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：
受体蜡块制备，在蜡块表面设置样品孔，形成多个样品通道，形成受体蜡块；
样品取样包埋，在供体蜡块上采集属同一动物系统的组织芯，并将其转移到受体蜡块的样品通道中；
芯片成型，将成型的供体石蜡进行切片、烤片、染色，获得组织芯片。
2.根据权利要求1所述的组织芯片的制备方法，其特征在于：所述样品取样包埋过程中，采集的组织芯属于同一种或同一属动物的不同种类组织。
3.根据权利要求2所述的组织芯片的制备方法，其特征在于：所述样品取样包埋过程中，所述组织芯在受体蜡块上的排布次序与在动物体内的排布位置关系相关，所述动物体内的排布位置关系包括由上到下、由外到内、功能作用先后中的至少一种。
4.根据权利要求3所述的组织芯片的制备方法，其特征在于：所述样品取样包埋过程中，采集的组织芯属不同种属动物的同一系统的至少一个种类的组织。
5.根据权利要求3所述的组织芯片的制备方法，其特征在于：所述样品取样包埋过程中，同一染色方法的组织芯植入同一个矩形区域，不同种染色方法的矩形区域不重叠。
6.根据权利要求1-5任一项所述的组织芯片的制备方法，其特征在于：所述芯片成型过程中，利用分区处理装置进行染色，所述分区处理装置包括外框架(1)和内调架(2)，所述外框架(1)与内调架(2)与组织芯片(4)接触的一侧处于同一平面上；所述外框架(1)包括垂直连接的第一支架(11)和第二支架(12)，所述内调架(2)包括至少一个第一调架(21)，所述第一支架(11)上设置有限位槽(111)，所述第一调架(21)的一端与所述限位槽(111)配合，所述第一调架(21)能沿限位槽(111)移动，并与所述第二支架(12)平行设置。
7.根据权利要求6所述的组织芯片的制备方法，其特征在于：所述外框架(1)与内调架(2)接触组织芯片(4)的一面上设置有弹性垫或石蜡层。
8.根据权利要求7所述的组织芯片的制备方法，其特征在于：所述内调架(2)包括至少一个调架组件(22)，所述调架组件(22)包括至少两个第二调架(221)，至少一个所述第二调架(221)上设置有滑动槽(222)，所述第二调架(221)之间通过滑动槽(222)进行配合与滑动，所述滑动槽(222)实现所述调架组件(22)可伸缩，所述第一支架(11)、第一调架(21)上设置有限位槽(111)，所述调架组件(22)的一端与第一调架(21)的限位槽(111)相配合，所述调架组件(22)的另一端与所述第二支架(12)或另一个第一调架(21)的限位槽(111)配合，所述调架组件(22)能沿限位槽(111)移动，并与所述第一支架(11)平行设置。
9.根据权利要求7或8所述的组织芯片的制备方法，其特征在于：所述外框架(1)上设置至少一个夹子(3)。
10.一种组织芯片，所述组织芯片采用如权利要求1-9任一项所述的组织芯片的制备方法制备获得。
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Citations (17)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1356553A (zh) * | 2001-09-13 | 2002-07-03 | 陕西超英生物医学研究开发有限公司 | 组织微阵列生物芯片 |
| US20030213204A1 (en) * | 2002-05-16 | 2003-11-20 | Ghislain Belanger | Length adjustable composite stud |
| JP2004132838A (ja) * | 2002-10-10 | 2004-04-30 | Link Genomics Kk | 被検生物学的試料の新規染色方法およびそれに使用されるアッセイ用キット |
| CN1521497A (zh) * | 2003-02-14 | 2004-08-18 | ��������Ƽ�ʵҵ�ɷ�����˾ | 微阵列生物芯片的反射式图像获取与分析装置及其方法 |
| CN101711257A (zh) * | 2007-01-22 | 2010-05-19 | 瓦弗根公司 | 用于高通量化学反应的装置 |
| CN102157096A (zh) * | 2011-03-14 | 2011-08-17 | 毛静涛 | 教学(生物)芯片 |
| WO2011133183A1 (en) * | 2010-04-20 | 2011-10-27 | University Of Utah Research Foundation | Phase separation sprayed scaffold |
| CN102998153A (zh) * | 2011-09-13 | 2013-03-27 | 饶莹 | 一种基于一次成型的组织芯片制作方法 |
| CN104597245A (zh) * | 2014-11-24 | 2015-05-06 | 北京师范大学 | 一种可视化微区多色显影塑料基生物芯片的制备方法 |
| US20160067739A1 (en) * | 2015-10-01 | 2016-03-10 | David Allan Jones | Needle-point pen apparatus and methods for marking and/or creating articles |
| CN105699156A (zh) * | 2016-02-24 | 2016-06-22 | 福州迈新生物技术开发有限公司 | 一种用于载玻片上组织样品染色的全自动染色仪及使用方法 |
| CN105717082A (zh) * | 2016-02-02 | 2016-06-29 | 管晓翔 | 一种用于检测三阴性乳腺癌瘤内异质性的方法 |
| CN105890958A (zh) * | 2014-11-24 | 2016-08-24 | 王素蓉 | 一种染色方法 |
| CN106531867A (zh) * | 2016-12-21 | 2017-03-22 | 福建昌达光电有限公司 | 一种能够多色块独立发光的垂直结构芯片及其制造方法 |
| CN107271248A (zh) * | 2017-06-12 | 2017-10-20 | 辽宁中医药大学 | 一种多组样本组织共包埋方法 |
| US20200149999A1 (en) * | 2017-04-28 | 2020-05-14 | Nihon University | Tissue slice selection method, and embedded block preparing cassette |
| CN211453078U (zh) * | 2020-01-16 | 2020-09-08 | 福州泰普医学检验所有限公司 | 一种石蜡切片染色装置 |
-
2020
- 2020-10-19 CN CN202011116727.8A patent/CN114383921B/zh active Active
Patent Citations (17)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1356553A (zh) * | 2001-09-13 | 2002-07-03 | 陕西超英生物医学研究开发有限公司 | 组织微阵列生物芯片 |
| US20030213204A1 (en) * | 2002-05-16 | 2003-11-20 | Ghislain Belanger | Length adjustable composite stud |
| JP2004132838A (ja) * | 2002-10-10 | 2004-04-30 | Link Genomics Kk | 被検生物学的試料の新規染色方法およびそれに使用されるアッセイ用キット |
| CN1521497A (zh) * | 2003-02-14 | 2004-08-18 | ��������Ƽ�ʵҵ�ɷ�����˾ | 微阵列生物芯片的反射式图像获取与分析装置及其方法 |
| CN101711257A (zh) * | 2007-01-22 | 2010-05-19 | 瓦弗根公司 | 用于高通量化学反应的装置 |
| WO2011133183A1 (en) * | 2010-04-20 | 2011-10-27 | University Of Utah Research Foundation | Phase separation sprayed scaffold |
| CN102157096A (zh) * | 2011-03-14 | 2011-08-17 | 毛静涛 | 教学(生物)芯片 |
| CN102998153A (zh) * | 2011-09-13 | 2013-03-27 | 饶莹 | 一种基于一次成型的组织芯片制作方法 |
| CN104597245A (zh) * | 2014-11-24 | 2015-05-06 | 北京师范大学 | 一种可视化微区多色显影塑料基生物芯片的制备方法 |
| CN105890958A (zh) * | 2014-11-24 | 2016-08-24 | 王素蓉 | 一种染色方法 |
| US20160067739A1 (en) * | 2015-10-01 | 2016-03-10 | David Allan Jones | Needle-point pen apparatus and methods for marking and/or creating articles |
| CN105717082A (zh) * | 2016-02-02 | 2016-06-29 | 管晓翔 | 一种用于检测三阴性乳腺癌瘤内异质性的方法 |
| CN105699156A (zh) * | 2016-02-24 | 2016-06-22 | 福州迈新生物技术开发有限公司 | 一种用于载玻片上组织样品染色的全自动染色仪及使用方法 |
| CN106531867A (zh) * | 2016-12-21 | 2017-03-22 | 福建昌达光电有限公司 | 一种能够多色块独立发光的垂直结构芯片及其制造方法 |
| US20200149999A1 (en) * | 2017-04-28 | 2020-05-14 | Nihon University | Tissue slice selection method, and embedded block preparing cassette |
| CN107271248A (zh) * | 2017-06-12 | 2017-10-20 | 辽宁中医药大学 | 一种多组样本组织共包埋方法 |
| CN211453078U (zh) * | 2020-01-16 | 2020-09-08 | 福州泰普医学检验所有限公司 | 一种石蜡切片染色装置 |
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| 张林杰 等: "应用组织微阵列技术分析各期鼻咽癌组织p16的表达", 《中华病理学杂志》, vol. 31, no. 2 * |
| 毛静涛: "组织芯片技术研究进展及应用", 《创新与管理》, vol. 2, no. 4 * |
| 金川 等: "组织芯片应用于原发性鼻咽癌中 p53表达的高通量分析", 《肿瘤防治杂志》, vol. 8 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN114383921B (zh) | 2023-11-21 |
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