CN114344311A

CN114344311A - 20-s原人参二醇在预防老年痴呆症药物研制中的应用

Info

Publication number: CN114344311A
Application number: CN202111631572.6A
Authority: CN
Inventors: 胡炜彦; 甘平; 于浩飞; 丁彩凤; 杨淑达; 张兰春; 李欣; 侯雪飞; 孙梦桢; 赵进东
Original assignee: Kunming Medical University
Current assignee: Kunming Medical University
Priority date: 2021-12-29
Filing date: 2021-12-29
Publication date: 2022-04-15

Abstract

本发明公开了20‑s原人参二醇在预防治疗老年痴呆症药物研制中的应用；20‑s原人参二醇是人参皂苷元中重要的一类，发明人经过研究及验证性实验证实20‑s原人参二醇对老年痴呆的预防治疗具有明显的作用效果，将20‑s原人参二醇作为活性成分与药物载体一起构成预防治疗老年痴呆的药物，为临床老年痴呆的预防治疗提供了新的思路和途径，具有显著的推广应用价值。

Description

20-s原人参二醇在预防老年痴呆症药物研制中的应用

技术领域

本发明属于老年痴呆症药物研制技术领域，具体涉及20-s原人参二醇在预防老年痴呆症药物研制中的应用。

背景技术

老年痴呆又称阿尔兹海默症，是发生于老年和老年前期，以进行性认知功能障碍和行为损害为特征的中枢神经系统退行性病变，临床上表现为记忆障碍、失语、失用、失认、视空间能力损害、抽象思维和计算力损害、人格和行为改变等；

20-s原人参二醇是人参皂苷元中非常重要的一类，一直是国内外一个研究的热点，20-s原人参二醇从结构上属于达玛烷型四环三帖类人参皂苷元化合物，自发现确定结构以来，它的药理活性一直得到广泛的关注，尤为抗肿瘤活性，明显强于其它几种人参皂苷及其皂苷元；

目前还没有关于20-s原人参二醇用于治疗老年痴呆的先关专利和文献报道。

发明内容

本发明的目的在于提供20-s原人参二醇在预防治疗老年痴呆症药物研制中的应用；所述20-s原人参二醇的分子式为：C₃₀H₅₂O₃，结构式为：

优选的，所述药物为20-s原人参二醇为活性成分与载体药物一起构成的药物制剂；

优选的，所述所述药物制剂包括但不限于：口服制剂、针剂、缓释剂、控释剂、颗粒、糖浆。

本发明的有益效果是：

目前对于AD尚无根治方法，常采取生活护理、非药物治疗、药物治疗等综合治疗手段。临床上用于治疗AD的药物主要有胆碱能制剂、NMDA受体拮抗剂、脑代谢复活剂、微循环改善药物等制剂。代表药物有石杉碱甲、多奈哌齐、利斯的明、美金刚、麦角生物碱类制剂、钙离子拮抗剂(如尼莫地平)等，这些药物普遍存在起效较慢、副作用明显、有效率低、需终身服药等多种问题。本发明提出20-s原人参二醇用于预防治疗老年痴呆，经过实验验证，预防治疗效果确切，为老年痴呆的临床治疗药物开拓新的途径，具有较高的推广应用价值。

附图说明

图1是本发明灌胃给与原人参二醇后，改善APP/PS1小鼠空间学习记忆能力的实验结果图a；

图2是本发明灌胃给与原人参二醇后，改善APP/PS1小鼠空间学习记忆能力的实验结果图b；

图3是本发明灌胃给与原人参二醇后，改善APP/PS1小鼠空间学习记忆能力的实验结果图c。

具体实施方式

为了对本发明的方案及效果做出清楚完整的描述，通过以下实施例进行详细说明。

实施例1

20-s原人参二醇在预防治疗老年痴呆症药物研制中的应用；

20-s原人参二醇的分子式为：C₃₀H₅₂O₃，结构式为：

所述药物为20-s原人参二醇为活性成分与载体药物一起构成的药物制剂；

所述药物制剂包括但不限于：口服制剂、针剂、缓释剂、控释剂、颗粒、糖浆。

实施例2

1.仪器与材料

仪器：

动物行为学水迷宫(欣软，上海)、动物水迷宫行为学图像采集卡(欣软，上海)、VisuTrack动物水迷宫行为分析软件(欣软，上海)、动物行为学Y迷宫(欣软，上海)、动物Y迷宫行为学图像采集卡(欣软，上海)、VisuTrack动物Y迷宫行为分析软件(欣软，上海)。

材料：

20-s原人参二醇(纯度95％，自制)的结构如图1所示，石杉碱甲(上海源叶生物科技有限公司，CAS：102518-79-6)、B-27加神经元培养基(B-27plus neurobasal medium)；伯克改良伊格尔培养基(dulbecco's modified eagle medium，DMEM)、胎牛血清(fatalbovine serum，FBS)、胰蛋白酶(trypsine)等均购自Thermo Fisher公司；磷酸缓冲液(phosphate buffered saline，PBS)购自Invitrogen公司、细胞计数试剂盒(cellcounting Kit-8，CCK-8)、APP/PS1小鼠(昆明动物研究所)、C57孕鼠(昆明医科大学)。

2.方法

2.1水迷宫实验

动物动物水温21～22℃。隐蔽站台试验持续4天(90s×4，20mins间隔)，空间探索试验在隐蔽站台试验结束24h后，撤除站台。然后任选一相同入水点将鼠放入水中，记录小鼠在60s内的游泳路径，记录小鼠在原站台象限的停留时间和穿越原站台次数。

2.2Y-迷宫实验

在食物奖赏测试中，实验前小鼠禁食24小时，在训练期，新异臂被隔板挡住，小鼠在起始臂和其他臂中自由活动10min，训练结束1h后进行检测期试验，小鼠在3个臂中自由活动5min，记录小鼠在各个臂停留的时间和穿梭次数；在电刺激测试中，小鼠先在迷宫中适应3min，每次电击延迟为5s，随即变换安全区，电击小鼠，小鼠在训练过程中连续9次正确反应即为学会,记录小鼠学会所需的训练次数，24h后进行记忆保持能力的检测，计算正确反应次数占总检测次数百分比(正确反应的次数/总检测次数×100％)。

2.3海马神经元培养

取孕龄为18d的C57小鼠，脱臼处死后无菌操作取出胎鼠大脑，分离海马和其他组织，取海马剪碎，0.125％Typsine 37℃消化15min，用含10％FBS的DMEM终止消化后，75μm筛网滤过，滤液1000r/min离心5min，弃上清。加Neurobasal medium混悬，1000r/min离心5min，弃上清。加Neurobasal medium混悬，测细胞浓度，调整细胞浓度为5.2×105个/mL，接种于用PDL(0.01％solution)包被后过的96孔板和6孔板中。培养至72h后加入终浓度为2.5mg/L阿糖胞苷纯化神经元。于相应天数用于实验。

2.4神经元活力检测

神经元培养第7d，将设定剂量的20(S)原人参二醇(低剂量1μmol/L、中剂量5μmol/L、高剂量20μmol/L)加入96孔板处理30min后，加入Aβ(0.5μmo l/L)诱导神经元损伤，加入20μmol/L的石杉碱甲(Luteolin，Lut)作为阳性对照，加入相同体积DMSO作溶剂空白对照。24h后，加入CCK-8(20μL/孔)溶液，设定加入相应体积培养液、药物和CCK-8溶液但没有细胞的孔作为试剂空白对照。在细胞培养箱中继续孵育1h。在450nm测定吸光度。

各组细胞活力＝各组吸光度/溶剂空白组吸光度×100％

3.结果

3.1对海马神经元活力的影响

神经元活力检测结果显示，Aβ(0.5μmo l/L)作用24h后，神经元活力显著降低；而不同剂量20(s)原人参二醇(低剂量1μmol/L、中剂量5μmol/L、高剂量20μmol/L)预处理30min均可改善由Aβ导致的神经元活力降低，与Aβ组比较，20(s)原人参二醇低、高、中剂量组具有细胞活力具有显著性差异，见表1。

表1 20(s)原人参二醇对海马神经元细胞活力的影响(x±s，n＝6)

注：与空白对照组比较，^a*P＜0.05，^a**P＜0.01；与模型组比较，b*P＜0.05，b**P＜0.01。

3.2对学习记忆能力的影响

灌胃给与原人参二醇后，改善APP/PS1小鼠空间学习记忆能力的实验结果如图1-3所示。

Claims

1.20-s原人参二醇在预防治疗老年痴呆症药物研制中的应用；所述20-s原人参二醇的分子式为：C₃₀H₅₂O₃，结构式为。

2.根据权利要求1所述20-s原人参二醇在预防治疗老年痴呆症药物研制中的应用，其特征在于，所述所述药物为20-s原人参二醇为活性成分与载体药物一起构成的药物制剂。

3.根据权利要求1所述20-s原人参二醇在预防治疗老年痴呆症药物研制中的应用，其特征在于，所述药物制剂包括但不限于：口服制剂、针剂、缓释剂、控释剂、颗粒、糖浆。