CN112656864A - 一种含nmn与假马齿苋提取物的药物组合物 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种含NMN与假马齿苋提取物的药物组合物，由NMN、假马齿苋提取物、秋水仙碱以及其他药学上可接受的辅料组成，其中假马齿苋提取物能促进NMN对认知功能的干预效力。

Description

一种含NMN与假马齿苋提取物的药物组合物

技术领域

本发明属于制药技术领域，尤其是涉及一种含NMN与假马齿苋提取物的药物组合物。

背景技术

随着年龄的增长，脑部细胞的降低，脑神经也逐渐的出现异常，就会出现记忆力衰退，经常忘事，严重的甚至连基本的生活能力都不能自理，这就是我们常说的老年痴呆症，也就是医学上叫的阿尔茨海默病，引起阿尔茨海默病的主要原因就是脑功能的萎缩。

而对于一些年轻人，“加班族”、“熬夜党”成为生活标签，而标签的背后是生活方式的改变，长时间熬夜的人，会出现大脑反应迟钝，记忆力衰退等问题，因此，对于这类年轻人用脑过度、脑动力不足是常态，这也使得益智健脑不再是老年人的专属，补脑健脑成为市场的新需求，正是这样的需求支撑，使健脑益智产品焕发出新的活力。

NMN，全名为烟酰胺单核苷酸，是人体内固有的源性物质，也存在于人们食用的西兰花等日常食物当中。它是NAD+的直接前体，目前已知的NMN具有的各种功效都是通过NAD+来发挥的。NAD+是体内许多重要酶反应不可缺少的辅助剂，在多种细胞代谢反应中，NAD+分子都扮演着重要角色，是细胞保持活力的重要支撑，人类之所以会衰老和患有疾病，是因为随着人的年龄的增长，人体内的NAD+水平会逐渐降低。许多研究也证实了NMN在神经退行性疾病(如老年痴呆、渐冻症和帕金森)、心血管、听力视力方面都有很好的作用。

发明内容

有鉴于此，本发明旨在提出一种含NMN与假马齿苋提取物的药物组合物，用于益智健脑，改善记忆力衰退、精神不集中等症状。

为达到上述目的，本发明的技术方案是这样实现的：

一种含NMN与假马齿苋提取物的药物组合物，由NMN、假马齿苋提取物、秋水仙碱以及其他药学上可接受的辅料组成；所述假马齿苋提取物由包括如下步骤的方法制备得到：

1)取新鲜假马齿苋叶并进行研磨；

2)将研磨后的假马齿苋叶及研磨汁液与低浓度乙醇溶液混合后浸提，浸提液减压浓缩后冻干，粉碎，所得样品一备用；

3)取新鲜假马齿苋茎并进行研磨；

4)将研磨后的假马齿苋茎及研磨汁液与低浓度乙醇溶液混合后浸提，浸提液减压浓缩后冻干，粉碎，所得样品二备用；

5)将样品一和样品二混合，并加入高浓度乙醇溶液超声处理，之后过滤，减压浓缩后冻干，后得假马齿苋提取物。

在本发明中，术语“药学上可接受的辅料”包括药学上可接受的载体、赋形剂、稀释剂等，它们与药物活性成分相容。运用药学上可接受的辅料制备药物制剂对本领域普通技术人员来说是公知的。

进一步，所述辅料包括B族维生素、人参皂苷、红花提取物、生姜提取物、硫酸软骨素、神经生长因子、三七提取物、红枣提取物、辅酶q10中的一种或两种以上。

进一步，所述NMN、假马齿苋提取物、秋水仙碱的重量份数比为：(1-10)：(30-100)：(0.05-0.1)；优选地，NMN、假马齿苋提取物、秋水仙碱的重量份数比为：1：60：0.06。

进一步，所述样品一和样品二的重量份数比为(2-4):1。

进一步，所述低浓度乙醇溶液的质量浓度为15％-30％，低浓度乙醇溶液与新鲜假马齿苋叶或新鲜假马齿苋茎的重量份数比为4-6:1；所述高浓度乙醇溶液的质量浓度为90％-95％，所述高浓度乙醇溶液与样品一和样品二的重量之和的重量份数比为5-10:1。

本发明还提供了一种如上述任一项所述的含NMN与假马齿苋提取物的药物组合物的制备方法，该方法包括如下步骤：

1)将鲜假马齿苋叶进行研磨，并将研磨后的假马齿苋叶及研磨汁液与低浓度乙醇溶液混合后浸提，浸提液减压浓缩后冻干，粉碎，所得样品一备用；

2)将新鲜假马齿苋茎进行研磨，并将研磨后的假马齿苋茎及研磨汁液与低浓度乙醇溶液混合后浸提，浸提液减压浓缩后冻干，粉碎，所得样品二备用；

3)将重量份数比为(2-4):1的样品一和样品二混合，并加入高浓度乙醇溶液，在25-30℃的条件下200-300W超声预处理10-30min；之后过滤，减压浓缩，再加入絮凝剂搅拌、过滤，收集滤液；然后向滤液中加入活性炭脱色，再过滤，继续收集滤液；

4)将步骤3)所得的滤液通过超滤膜过滤，收集透过液；然后将透过液用纳滤膜过滤，收集浓缩液，减压浓缩后冻干，后即得假马齿苋提取物；

5)将NMN、假马齿苋提取物、秋水仙碱以及其他药学上可接受的辅料按比例混合制剂成型即可。

配制成各种制剂，优选为固体制剂和液体制剂，如片剂、丸剂、胶囊、粉剂、混悬剂、颗粒剂、糖浆剂、乳液剂、悬浮液等剂型以及各种缓释剂型，优选以口服给药形式。

进一步，所述低浓度乙醇溶液的质量浓度为15％-30％，低浓度乙醇溶液与新鲜假马齿苋叶或新鲜假马齿苋茎的重量份数比为4-6:1；所述高浓度乙醇溶液的质量浓度为90％-95％，所述高浓度乙醇溶液与样品一和样品二的重量之和的重量份数比为5-10:1。

进一步，所述低浓度乙醇溶液和高浓度乙醇溶液为含有氢氧化钠、碳酸钠或氧化镁中的任一种的碱性溶液。

进一步，所述絮凝剂是质量浓度为1％-1.5％的阳离子絮凝剂、阴离子絮凝剂或复合离子絮凝剂。

本发明还提供了一种如上述任一项所述的含NMN与假马齿苋提取物的药物组合物在健脑益智方面的应用。

相对于现有技术，本发明所述的含NMN与假马齿苋提取物的药物组合物具有以下优势：

通过对小鼠进行避暗试验发现，假马齿苋提取物能促进NMN对ApoE基因敲除小鼠的认知功能的干预效力，显著降低NMN的用药浓度；而且，通过数据比较发现，当药物中同时含有假马齿苋茎和叶的提取物时，叶的提取物成分越多干预效果越明显；当单独使用茎或叶的提取物时，其效果不如同时使用茎和叶的使用效果，说明假马齿苋叶的提取物的作用效果要优于假马齿苋茎的提取物，而且叶与茎的提取物之间还存在协同效果，同时存在会进一步促进NMN的效果。另外，在配方中添加了秋水仙碱，通过数据比较可以发现，秋水仙碱与NMN、假马齿苋提取物之间存在协同作用，能够促进NMN的作用发挥。

具体实施方式

需要说明的是，在不冲突的情况下，本发明中的实施例及实施例中的特征可以相互组合。

下面将结合实施例来详细说明本发明。

实施例1假马齿苋提取物的制备

1)各取2000g新鲜假马齿苋叶和1000g新鲜假马齿苋茎；

2)将鲜假马齿苋叶进行研磨，并将研磨后的假马齿苋叶及研磨汁液与8L含碳酸钠的质量浓度为25％的乙醇溶液混合后常温浸提2次，每次1h，合并提取液并减压浓缩后冻干，粉碎过100目筛，所得样品一备用；

3)将新鲜假马齿苋茎进行研磨，并将研磨后的假马齿苋茎及研磨汁液与4L含碳酸钠的质量浓度为25％的乙醇溶液混合后常温浸提2次，每次1h，合并提取液并减压浓缩后冻干，粉碎过100目筛，所得样品二备用；

4)分别取重量份数比为1:0、2:1、3:1、4:1和0:1的样品一和样品二混合，之后分别加入相应含碳酸钠的质量浓度为95％的乙醇溶液，在25℃的条件下200W超声预处理20min之后过滤，减压浓缩至原液体体积的1/5，再加入质量浓度为1％的复合离子絮凝剂搅拌、过滤，收集滤液；然后向滤液中加入活性炭脱色，再过滤，继续收集滤液；

5)将步骤4)所得的滤液通过截留分子量为1500的超滤膜过滤，收集透过液；然后将透过液用截留分子量为500的纳滤膜过滤，收集浓缩液，减压浓缩后冻干，即得假马齿苋提取物A、B、C、D、E。

实施例2药物组合物的制备

分别按照表1所示混合各组分，制备药物组合物I、药物组合物II、药物组合物III、药物组合物IV、药物组合V、药物组合物VI、药物组合物VII、药物组合物VIII。

表1药物组合物成分表

实验：药物组合物对ApoE基因敲除小鼠记忆认知功能干预实验

实验材料：

1)实验动物：8周龄ApoE基因敲除雄性小鼠112只，8周龄相同遗传背景C57BL/6J雄性小鼠8只，均购自北京维通利华实验动物技术有限公司，于我司清洁级动物房分组暂养。

2)试验药物：

本发明实施例2制备的药物组合物；

NMN:邦泰生物工程(深圳)有限公司；

其他组分可以采用现有技术常用材料。

3)主要实验仪器

避暗穿梭测试仪购自上海软隆科技发展有限公司。

实验方法：

1)分组：

将112只ApoE基因敲除小随机分为14组，即药物I组、药物II组、药物III组、药物IV组、药物V组、药物VI组、药物VII组、药物VIII组、NMN对照一组、NMN对照二组、NMN对照三组、提取物对照一组、提取物对照二组及空白对照组，每组8只；8只同品系C57BL/6J小鼠为对照组。

2)给药：

将小鼠正常喂养至16周龄，用药实验组用药物组合物灌胃24周，空白对照组及对照组以同体积生理盐水灌胃24周，每日上午同一时间灌胃一次。具体分组及给药如下：

药物I组：正常饲养至16周龄后，将药物组合物I(以NMN质量15ng/只计)溶于0.5ml生理盐水，每日连续灌胃24周；

药物II组：正常饲养至16周龄后，将药物组合物II(以NMN质量15ng/只计)溶于0.5ml生理盐水，每日连续灌胃24周；

药物III组：正常饲养至16周龄后，将药物组合物III(以NMN质量15ng/只计)溶于0.5ml生理盐水，每日连续灌胃24周；

药物IV组：正常饲养至16周龄后，将药物组合物IV(以NMN质量15ng/只计)溶于0.5ml生理盐水，每日连续灌胃24周；

药物V组：正常饲养至16周龄后，将药物组合物V(以NMN质量15ng/只计)溶于0.5ml生理盐水，每日连续灌胃24周；

药物VI组：正常饲养至16周龄后，将药物组合物VI(以NMN质量15ng/只计)溶于0.5ml生理盐水，每日连续灌胃24周；

药物VII组：正常饲养至16周龄后，将药物组合物VII(以NMN质量15ng/只计)溶于0.5ml生理盐水，每日连续灌胃24周；

药物VIII组：正常饲养至16周龄后，将药物组合物VIII(以NMN质量15ng/只计)溶于0.5ml生理盐水，每日连续灌胃24周；

NMN对照一组：正常饲养至16周龄后，将NMN溶于生理盐水，按15ng/只，每日连续灌胃24周(灌注药物体积0.5ml)；

NMN对照二组：正常饲养至16周龄后，将NMN溶于生理盐水，按100ng/只，每日连续灌胃24周(灌注药物体积0.5ml)；

NMN对照三组：正常饲养至16周龄后，将NMN溶于生理盐水，按200ng/只，每日连续灌胃24周(灌注药物体积0.5ml)；

提取物对照一组：正常饲养至16周龄后，配制20mg/ml的假马齿苋提取物C的生理盐水溶液，0.5ml/只，每日连续灌胃24周；

提取物对照二组：正常饲养至16周龄后，配制200mg/ml的假马齿苋提取物C的生理盐水溶液，0.5ml/只，每日连续灌胃24周；

空白对照组：正常饲养至16周龄后，每日用0.5ml生理盐水灌胃，连续灌胃24周。

对照组：正常饲养至16周龄后，每日用0.5ml生理盐水灌胃，连续灌胃24周。

3)避暗实验

给药前两天和给药结束后两天，分别进行避暗实验。第一天将小鼠尾部朝向洞口放入明室，让其适应环境5min，然后给暗室栅栏通电(36V)，小鼠只要进入暗室即受电击，其正确反应是回到明室，再次进入暗室即为错误行为，暗室栅栏持续通电5min，训练结束。第二天对小鼠进行记忆测验，记录小鼠第一次进入暗室的时间(即规避潜伏期)，并记录5min内小鼠进入暗室的次数，5min内未进入暗室的小鼠其潜伏期按300s计算。

表2各组受试小鼠用药前避暗试验结果

16周龄时ApoE小鼠(空白对照组)与C57BL/6J小鼠(对照组)认知能力差异不显著。

用药前的避暗试验中，各组小鼠第二天测试阶段的犯错次数略少于第一天学习阶段，各组小鼠之间测试阶段的潜伏时间差异不显著。

表3各组受试小鼠用药后避暗试验结果

40周龄时，ApoE小鼠(空白对照组)与C57BL/6J小鼠(对照组)认知能力差异显著。

用药后的避暗试验中，NMN对照三组的小鼠认知能力或学习能力明显好于NMN对照一组和二组，说明NMN能有效干预ApoE基因敲除小鼠的认知功能(由于氧化应激引发的认知障碍)，但需要较高的用药浓度。通过药物组、提取物对照组与空白对照组的小鼠认知能力或学习能力比较，可以发现假马齿苋提取物虽具备一定的抗氧化作用，但是即使在较高浓度下也不能单独干预ApoE基因敲除小鼠的认知功能，但是能促进NMN对ApoE基因敲除小鼠的认知功能的干预效力，显著降低NMN的用药浓度；而且，通过药物I-V组的数据比较发现，当药物中同时含有茎和叶的提取物时，叶的提取物成分越多效果越明显；当单独使用茎或叶的提取物时，其效果不如同时使用茎和叶的使用效果，说明假马齿苋叶的提取物的作用效果要优于假马齿苋茎的提取物，而且叶与茎的提取物之间还存在协同效果，会进一步促进NMN的效果。另外，在配方中添加了秋水仙碱，通过药物III组和药物VI组的比较可以发现，秋水仙碱与NMN、假马齿苋提取物之间存在协同作用，能够促进NMN的作用发挥。

以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种含NMN与假马齿苋提取物的药物组合物，其特征在于：由NMN、假马齿苋提取物、秋水仙碱以及其他药学上可接受的辅料组成；所述假马齿苋提取物由包括如下步骤的方法制备得到：

1)取新鲜假马齿苋叶并进行研磨；

2)将研磨后的假马齿苋叶及研磨汁液与低浓度乙醇溶液混合后浸提，浸提液减压浓缩后冻干，粉碎，所得样品一备用；

3)取新鲜假马齿苋茎并进行研磨；

4)将研磨后的假马齿苋茎及研磨汁液与低浓度乙醇溶液混合后浸提，浸提液减压浓缩后冻干，粉碎，所得样品二备用；

5)将样品一和样品二混合，并加入高浓度乙醇溶液超声处理，之后过滤，减压浓缩后冻干，后得假马齿苋提取物。

2.根据权利要求1所述的含NMN与假马齿苋提取物的药物组合物，其特征在于：所述辅料包括B族维生素、人参皂苷、红花提取物、生姜提取物、硫酸软骨素、神经生长因子、三七提取物、红枣提取物、辅酶q10中的一种或两种以上。

3.根据权利要求1所述的含NMN与假马齿苋提取物的药物组合物，其特征在于：所述NMN、假马齿苋提取物、秋水仙碱的重量份数比为：(1-10)：(30-100)：(0.05-0.1)；优选地，NMN、假马齿苋提取物、秋水仙碱的重量份数比为：1：60：0.06。

4.根据权利要求1所述的含NMN与假马齿苋提取物的药物组合物，其特征在于：所述样品一和样品二的重量份数比为(2-4):1。

5.根据权利要求1所述的含NMN与假马齿苋提取物的药物组合物，其特征在于：所述低浓度乙醇溶液的质量浓度为15％-30％，低浓度乙醇溶液与新鲜假马齿苋叶或新鲜假马齿苋茎的重量份数比为4-6:1；所述高浓度乙醇溶液的质量浓度为90％-95％，所述高浓度乙醇溶液与样品一和样品二的重量之和的重量份数比为5-10:1。

6.一种如权利要求1-5任一项所述的含NMN与假马齿苋提取物的药物组合物的制备方法，其特征在于：该方法包括如下步骤：

1)将鲜假马齿苋叶进行研磨，并将研磨后的假马齿苋叶及研磨汁液与低浓度乙醇溶液混合后浸提，浸提液减压浓缩后冻干，粉碎，所得样品一备用；

2)将新鲜假马齿苋茎进行研磨，并将研磨后的假马齿苋茎及研磨汁液与低浓度乙醇溶液混合后浸提，浸提液减压浓缩后冻干，粉碎，所得样品二备用；

3)将重量份数比为(2-4):1的样品一和样品二混合，并加入高浓度乙醇溶液，在25-30℃的条件下200-300W超声预处理10-30min；之后过滤，减压浓缩，再加入絮凝剂搅拌、过滤，收集滤液；然后向滤液中加入活性炭脱色，再过滤，继续收集滤液；

4)将步骤3)所得的滤液通过超滤膜过滤，收集透过液；然后将透过液用纳滤膜过滤，收集浓缩液，减压浓缩后冻干，后即得假马齿苋提取物；

5)将NMN、假马齿苋提取物、秋水仙碱以及其他药学上可接受的辅料按比例混合制剂成型即可。

7.根据权利要求6所述的含NMN与假马齿苋提取物的药物组合物的制备方法，其特征在于：所述低浓度乙醇溶液的质量浓度为15％-30％，低浓度乙醇溶液与新鲜假马齿苋叶或新鲜假马齿苋茎的重量份数比为4-6:1；所述高浓度乙醇溶液的质量浓度为90％-95％，所述高浓度乙醇溶液与样品一和样品二的重量之和的重量份数比为5-10:1。

8.根据权利要求7所述的含NMN与假马齿苋提取物的药物组合物，其特征在于：所述低浓度乙醇溶液和高浓度乙醇溶液为含有氢氧化钠、碳酸钠或氧化镁中的任一种的碱性溶液。

9.根据权利要求6所述的含NMN与假马齿苋提取物的药物组合物，其特征在于：所述絮凝剂是质量浓度为1％-1.5％的阳离子絮凝剂、阴离子絮凝剂或复合离子絮凝剂。

10.一种如权利要求1-5任一项所述的含NMN与假马齿苋提取物的药物组合物在健脑益智方面的应用。