CN114317395A - 一种贴壁细胞大规模培养工艺 - Google Patents
一种贴壁细胞大规模培养工艺 Download PDFInfo
- Publication number
- CN114317395A CN114317395A CN202111670248.5A CN202111670248A CN114317395A CN 114317395 A CN114317395 A CN 114317395A CN 202111670248 A CN202111670248 A CN 202111670248A CN 114317395 A CN114317395 A CN 114317395A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- culture
- peristaltic pump
- cell
- monolayer
- layer
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 32
- 230000008569 process Effects 0.000 title claims abstract description 31
- 230000001464 adherent effect Effects 0.000 title claims description 25
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims abstract description 44
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 claims description 60
- 230000002572 peristaltic effect Effects 0.000 claims description 55
- 239000002356 single layer Substances 0.000 claims description 55
- 239000010410 layer Substances 0.000 claims description 49
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 39
- 238000003306 harvesting Methods 0.000 claims description 31
- 238000005086 pumping Methods 0.000 claims description 18
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 15
- 230000001079 digestive effect Effects 0.000 claims description 13
- 235000011389 fruit/vegetable juice Nutrition 0.000 claims description 13
- OZFAFGSSMRRTDW-UHFFFAOYSA-N (2,4-dichlorophenyl) benzenesulfonate Chemical compound ClC1=CC(Cl)=CC=C1OS(=O)(=O)C1=CC=CC=C1 OZFAFGSSMRRTDW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 239000012591 Dulbecco’s Phosphate Buffered Saline Substances 0.000 claims description 9
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 9
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 claims description 9
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 9
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 claims description 9
- 230000012010 growth Effects 0.000 claims description 7
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 claims description 6
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 claims description 6
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims description 6
- 239000008213 purified water Substances 0.000 claims description 6
- 238000002791 soaking Methods 0.000 claims description 6
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 claims description 6
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 claims description 5
- 239000006052 feed supplement Substances 0.000 claims description 4
- 239000013589 supplement Substances 0.000 claims description 4
- 239000011229 interlayer Substances 0.000 claims description 3
- 230000029087 digestion Effects 0.000 claims description 2
- 230000001502 supplementing effect Effects 0.000 claims description 2
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 abstract description 7
- 238000009826 distribution Methods 0.000 abstract description 6
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract description 6
- 238000004115 adherent culture Methods 0.000 abstract description 3
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 abstract description 3
- 230000009467 reduction Effects 0.000 abstract description 3
- 238000012546 transfer Methods 0.000 abstract description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 36
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 3
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 3
- 238000012007 large scale cell culture Methods 0.000 description 3
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 3
- 238000012136 culture method Methods 0.000 description 2
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- KMUONIBRACKNSN-UHFFFAOYSA-N potassium dichromate Chemical compound [K+].[K+].[O-][Cr](=O)(=O)O[Cr]([O-])(=O)=O KMUONIBRACKNSN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000004088 simulation Methods 0.000 description 2
- 125000006850 spacer group Chemical group 0.000 description 2
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 2
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 1
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 description 1
- 239000006143 cell culture medium Substances 0.000 description 1
- 238000013461 design Methods 0.000 description 1
- 238000012938 design process Methods 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 239000000428 dust Substances 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 238000012606 in vitro cell culture Methods 0.000 description 1
- 238000011031 large-scale manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 description 1
- 238000005192 partition Methods 0.000 description 1
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 1
- -1 polytetrafluoroethylene Polymers 0.000 description 1
- 229920001343 polytetrafluoroethylene Polymers 0.000 description 1
- 239000004810 polytetrafluoroethylene Substances 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 238000009168 stem cell therapy Methods 0.000 description 1
- 238000009580 stem-cell therapy Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N sulfuric acid Substances OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 1
- 230000000007 visual effect Effects 0.000 description 1
Images
Landscapes
- Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
本发明公开一种贴壁细胞大规模培养工艺,克服了随着培养面积增加细胞分布不均导致的细胞生长密度下降的问题;有效降低了表面张力对营养物质传递和细胞分布的影响;具有操作简便、生产成本低、培养基利用率高、细胞生长状态稳定等优点,可广泛应用于细胞农业、生物医疗等生物领域,具有广阔的应用前景。
Description
技术领域
本发明涉及细胞体外培养技术领域,特别是涉及一种贴壁细胞大规模培养工艺。
背景技术
细胞大规模培养工艺是干细胞治疗、细胞农业等新兴技术应用的基础。目前常用的贴壁细胞大规模培养工艺技术主要有种:一种是在培养皿中通过贴壁方式小规模、手动的进行细胞培养,如市面上常见的Corning公司的PE包被塑料培养皿,该装置具有生产成本低、操作简便、细胞生长状态稳定等特点,另外,近年来在此基础上开发的可进行贴壁细胞规模化扩增的细胞工厂也被广泛应用于疫苗生产、抗体制备等研究和应用领域;另一种是生物反应容器,相对于前一种培养方式生物反应容器是一种更为高效的细胞大规模扩增培养设备,具有生产规模大、细胞生长密度高、培养基利用效率高等突出优点,近年来被广泛应用于疫苗、单抗等对细胞培养规模和培养质量严格要求的生物医疗行业。
然而,在实践中上述两种细胞培养方式都存在一定的不足,培养皿的空间利用率低、人工操作效率低等缺点导致其无法进行大规模应用,细胞工厂中的细胞难以进行观测和调整,导致其生长过程中易出现细胞分布不均,单位面积细胞产率明显低于培养皿。生物反应容器的细胞培养方式虽然可以实现细胞的高密度、大规模生产,但要使用微载体、生物反应器等昂贵的耗材和设备,并且对配套设备、生产环境、操作技术等方面的要求都非常高,这极大提高了该设备使用门坎。
因此,亟需设计一种适于贴壁细胞低成本、大规模培养的培养工艺。
发明内容
本发明的目的是提供一种贴壁细胞大规模培养工艺,以解决上述现有技术存在的问题,能够具有操作简便、生产成本低、培养基利用率高、细胞生长状态稳定等优点,可广泛应用于细胞农业、生物医疗等生物领域,具有广阔的应用前景。
为实现上述目的,本发明提供了如下方案:本发明提供一种贴壁细胞大规模培养工艺,其特征在于,包括以下步骤:
S1对细胞培养层清洗,并用酸液进行多次浸泡;
S2对细胞培养层加热灭菌;
S3将细胞培养层与补料瓶通过蠕动泵连通,并向补料瓶内加入PBS;
S4对补料瓶进行恒温水浴,通过补料瓶接种至细胞培养层;
S5向补料瓶内加入新鲜培养基并通过蠕动泵泵入细胞培养单层内;
S6将细胞培养层内培养基抽出后对细胞培养层进行润洗;
S7通过补料瓶向细胞培养层内泵入消化液,并将细胞培养层内细胞悬液收集;
S8通过补料瓶向细胞培养层内泵入PBS,将PBS收集,计数并离心收集细胞。
所述细胞培养层包括若干个培养单层;所述培养水平累设于CO2培养箱内;所述细胞培养层中部设置有溢流管;所述培养单层内设置有若干层间隔栅板;每一所述培养单层一侧均通过进液管与所述补料瓶连通;每一所述培养单层另一侧均通过收获管与收集瓶连通;所述溢流管顶部与每一所述培养单层连接处形成有液面调节口;所述溢流管底部与所述收集瓶连通;所述进液管与收获管上分别安装有进液蠕动泵和收获蠕动泵。
S1中对所述细胞培养层进行清洗使用纯净水;使用所述酸液与纯净水对所述细胞培养层交替浸泡至少三次。
S2中加热灭菌为对所述细胞培养层干热灭菌,温度为150℃-165℃;加热时间为0.9h-1.2h。
S3中具体步骤为在所述补料瓶中加入PBS;并先后打开所述进液蠕动泵和收获蠕动泵;使PBS将所述培养单层完全浸润后关闭所述进液蠕动泵和收获蠕动泵。
S4中具体步骤为对所述补料瓶进行恒温水浴,待温度恒定后将贴壁生长细胞用新鲜培养基稀释后加入所述补料瓶内;通过所述进液蠕动泵泵入所述培养单层内并进行培养。
所述培养的方式为将所述CO2培养箱封闭,并设置恒温,使湿度饱和,CO2浓度为4%-6%。
S5中具体步骤为向所述补料瓶补充新鲜培养基;当新鲜培养基pH值小于7后,打开所述收获蠕动泵将所述培养单层中的培养基吸走总体积的三分之一至二分之一后关闭所述收获蠕动泵,打开所述进液蠕动泵向所述培养单层补充相应体积的新鲜培养基后关闭,继续培养,培养过程中不断观察并及时更新培养基。
S6中的操作步骤为当所述贴壁生长细胞生长占据所述培养单层面积80%以上,通过所述收获蠕动泵将所述培养单层内的培养基完全抽出;将所述补料瓶内的培养基更换为DPBS,并通过所述进液蠕动泵泵入所述培养单层内;保持DPBS至所述液面调节口;静置1-5min后打开所述收获蠕动泵将DPBS完全排空。
S7中操作步骤包括向所述补料瓶内更换为消化液,并通过所述进液蠕动泵泵入所述培养单层内;保持消化液至所述液面调节口;消化贴壁细胞变远并完全脱落后通过所述收获蠕动泵将细胞悬液收集至所述收集瓶内。
本发明公开了以下技术效果:本发明克服了随着培养面积增加细胞分布不均导致的细胞生长密度下降的问题;有效降低了表面张力对营养物质传递和细胞分布的影响;操作过程简便,便于观察,节约实验耗材,整个操作过程中避免了培养皿培养中常用的枪头使用,避免了生物反应容器培养过程中的昂贵一次性耗材和支架材料使用,可明显降低大规模细胞培养的成本。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案,下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍,显而易见地,下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例,对于本领域普通技术人员来讲,在不付出创造性劳动性的前提下,还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1为整体结构示意图;
图2为培养单层结构示意图;
图3为贴壁细胞培养基流动模拟示意图;
其中,1、溢流管;2、培养单层;3、间隔栅板;4、补料瓶;5、收集瓶;6、进液蠕动泵;7、收获蠕动泵。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例中的附图,对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本发明保护的范围。
为使本发明的上述目的、特征和优点能够更加明显易懂,下面结合附图和具体实施方式对本发明作进一步详细的说明。
本发明提供一种贴壁细胞大规模培养工艺,其特征在于,包括以下步骤:
S1对细胞培养层清洗,并用酸液进行多次浸泡;
S2对细胞培养层加热灭菌;
S3将细胞培养层与补料瓶通过蠕动泵连通,并向补料瓶内加入PBS;
S4对补料瓶进行恒温水浴,通过补料瓶接种至细胞培养层;
S5向补料瓶内加入新鲜培养基并通过蠕动泵泵入细胞培养单层内;
S6将细胞培养层内培养基抽出后对细胞培养层进行润洗;
S7通过补料瓶向细胞培养层内泵入消化液,并将细胞培养层内细胞悬液收集;
S8通过补料瓶向细胞培养层内泵入PBS,将PBS收集,计数并离心收集细胞。
细胞培养层包括若干个培养单层2;培养单层2水平累设于CO2培养箱内;细胞培养层中部竖直设置有溢流管1;培养单层2内设置有若干层间隔栅板3;每一培养单层2一侧均通过进液管与补料瓶4连通;每一培养单层2另一侧均通过收获管与收集瓶5连通;溢流管1顶部与每一培养单层2连接处形成有液面调节口;溢流管1底部与收集瓶5连通;进液管与收获管上分别安装有进液蠕动泵6和收获蠕动泵7。
S1中对细胞培养层进行清洗使用纯净水;使用酸液与纯净水对细胞培养层交替浸泡至少三次。
S2中加热灭菌为对细胞培养层干热灭菌,温度为150℃-165℃;加热时间为0.9h-1.2h。
S3中具体步骤为在补料瓶4中加入PBS;并先后打开进液蠕动泵6和收获蠕动泵7;使PBS将培养单层2完全浸润后关闭进液蠕动泵6和收获蠕动泵7。
S4中具体步骤为对补料瓶4进行恒温水浴,待温度恒定后将贴壁生长细胞用新鲜培养基稀释后加入补料瓶4内;通过进液蠕动泵6泵入培养单层2内并进行培养。
培养的方式为将CO2培养箱封闭,并设置恒温,使湿度饱和,CO2浓度为4%-6%。
S5中具体步骤为向补料瓶4补充新鲜培养基;当新鲜培养基pH值小于7后,打开收获蠕动泵7将培养单层2中的培养基吸走总体积的三分之一至二分之一后关闭收获蠕动泵7,打开进液蠕动泵6向培养单层2补充相应体积的新鲜培养基后关闭,继续培养,培养过程中不断观察并及时更新培养基。
S6中的操作步骤为当贴壁生长细胞生长占据培养单层2面积80%以上,通过收获蠕动泵7将培养单层2内的培养基完全抽出;将补料瓶4内的培养基更换为DPBS,并通过进液蠕动泵6泵入培养单层2内;保持DPBS至液面调节口;静置1-5min后打开收获蠕动泵7将DPBS完全排空。
S7中操作步骤包括向补料瓶4内更换为消化液,并通过进液蠕动泵6泵入培养单层2内;保持消化液至液面调节口;消化贴壁细胞变远并完全脱落后通过收获蠕动泵7将细胞悬液收集至收集瓶5内。
在本发明一个实施例中。酸液配置按照称取称取120g重铬酸钾,用1000mL蒸馏水彻底溶解,然后缓慢加入200mL浓硫酸并不断搅拌,使其完全混合均匀。另外,可对该配制体系进行等比例放大以根据实际需要量。
在本发明一个实施例中,S1中首先用纯水对细胞培养单层进行浸泡,去除表面吸附的灰尘及其他可溶性杂质;然后用酸液对细胞培养单层进行浸泡,以进一步去除细胞培养单层表面吸附的难以清理的微量杂质;最后用纯水对细胞培养单层进行进一步浸泡,并换液三次以完全去除表面吸附的酸液。
在本发明一个实施例中,S3中需保证细胞培养层内均被完全浸润。
在本发明一个实施例中,S4中恒温水浴的温度与S5中培养温度均为37℃。
在本发明一个实施例中,S4中需运行足够时间待PBS浸润整个细胞培养单层底面后关闭进液蠕动泵6和收获蠕动泵7,操作过程要确保细胞培养层底面被完全浸润。
在本发明一个实施例中,培养单层2的面壁不小于1000000cm2;进而使得单次培养细胞收获量大幅度增加,单层细胞收获量可至5.1×1010个。
在本发明一个实施例中,消化液为0.25%胰蛋白酶。
在本发明一个实施例中,本工艺克服了随着培养面积增加细胞分布不均导致的细胞生长密度下降的问题,细胞培养密度与10cm直径培养皿一致,这是由于装置设计过程中增加了间隔栅板3的原因,栅板的存在有效降低了表面张力对营养物质传递和细胞分布的影响,如图3培养基流动模拟示意图所示培养基在整个培养平面均匀流动,实现了细胞在大平面上的均密度培养,另外,细胞培养过程中及时更新部分培养基也为细胞的高密度生长提供了营养支持;
每百万细胞消耗培养基体积与培养皿和细胞工厂极为接近,无明显增加;操作过程简便,便于观察,节约实验耗材,整个操作过程中避免了培养皿培养中常用的枪头使用,避免了生物反应容器培养过程中的昂贵一次性耗材和支架材料使用,可明显降低大规模细胞培养的成本。
在本发明一个实施例中,间隔栅板3为聚四氟乙烯材质,用于减少培养基表面张力,调节培养基流动方向;间隔栅板3为倒“L”形结构;间隔栅板3一端固定安装在培养单层2侧壁;任意相邻的两间隔栅板3分别安装于培养单层2的两相对侧壁;培养单层2两端分别开设有进液口和出液口;间隔栅板3与进液口3和出液口形成一完整流道。
在本发明一个实施例中,液面调节口用于判断培养单层2是否完全被浸润。
在本发明一个实施例中,溢流管1将多出的培养基导出收集。
在本发明一个实施例中,下方表格为本申请与现有的三种培养方式的直观对比;可以得到本申请的单层培养面积增大数倍,单层细胞培养数量也相对增大;且本申请中可设置若干个培养单层2。
在本发明的描述中,需要理解的是,术语“纵向”、“横向”、“上”、“下”、“前”、“后”、“左”、“右”、“竖直”、“水平”、“顶”、“底”、“内”、“外”等指示的方位或位置关系为基于附图所示的方位或位置关系,仅是为了便于描述本发明,而不是指示或暗示所指的装置或元件必须具有特定的方位、以特定的方位构造和操作,因此不能理解为对本发明的限制。
以上所述的实施例仅是对本发明的优选方式进行描述,并非对本发明的范围进行限定,在不脱离本发明设计精神的前提下,本领域普通技术人员对本发明的技术方案做出的各种变形和改进,均应落入本发明权利要求书确定的保护范围内。
Claims (10)
1.一种贴壁细胞大规模培养工艺,其特征在于,包括以下步骤:
S1对细胞培养层清洗,并用酸液进行多次浸泡;
S2对细胞培养层加热灭菌;
S3将细胞培养层与补料瓶通过蠕动泵连通,并向补料瓶内加入PBS;
S4对补料瓶进行恒温水浴,通过补料瓶接种至细胞培养层;
S5向补料瓶内加入新鲜培养基并通过蠕动泵泵入细胞培养单层内;
S6将细胞培养层内培养基抽出后对细胞培养层进行润洗;
S7通过补料瓶向细胞培养层内泵入消化液,并将细胞培养层内细胞悬液收集;
S8通过补料瓶向细胞培养层内泵入PBS,将PBS收集,计数并离心收集细胞。
2.根据权利要求1所述的一种贴壁细胞大规模培养工艺,其特征在于:所述细胞培养层包括若干个培养单层(2);所述培养单层(2)水平累设于CO2培养箱内;所述细胞培养层中部竖直设置有溢流管(1);所述培养单层(2)内设置有若干层间隔栅板(3);每一所述培养单层(2)一侧均通过进液管与所述补料瓶(4)连通;每一所述培养单层(2)另一侧均通过收获管与收集瓶(5)连通;所述溢流管(1)顶部与每一所述培养单层(2)顶部连接处形成有液面调节口;所述溢流管(1)底部与所述收集瓶(5)连通;所述进液管与收获管上分别安装有进液蠕动泵(6)和收获蠕动泵(7)。
3.根据权利要求1所述的一种贴壁细胞大规模培养工艺,其特征在于:S1中对所述细胞培养层进行清洗使用纯净水;使用所述酸液与纯净水对所述细胞培养层交替浸泡至少三次。
4.根据权利要求1所述的一种贴壁细胞大规模培养工艺,其特征在于:S2中加热灭菌为对所述细胞培养层干热灭菌,温度为150℃-165℃;加热时间为0.9h-1.2h。
5.根据权利要求2所述的一种贴壁细胞大规模培养工艺,其特征在于:S3中具体步骤为在所述补料瓶(4)中加入PBS;并先后打开所述进液蠕动泵(6)和收获蠕动泵(7);使PBS将所述培养单层(2)完全浸润后关闭所述进液蠕动泵(6)和收获蠕动泵(7)。
6.根据权利要求2所述的一种贴壁细胞大规模培养工艺,其特征在于:S4中具体步骤为对所述补料瓶(4)进行恒温水浴,待温度恒定后将贴壁生长细胞用新鲜培养基稀释后加入所述补料瓶(4)内;通过所述进液蠕动泵(6)泵入所述培养单层(2)内并进行培养。
7.根据权利要求6所述的一种贴壁细胞大规模培养工艺,其特征在于:所述培养的方式为将所述CO2培养箱封闭,并设置恒温,使湿度饱和,CO2浓度为4%-6%。
8.根据权利要求6所述的一种贴壁细胞大规模培养工艺,其特征在于:S5中具体步骤为向所述补料瓶(4)补充新鲜培养基;当新鲜培养基pH值小于7后,打开所述收获蠕动泵(7)将所述培养单层(2)中的培养基吸走总体积的三分之一至二分之一后关闭所述收获蠕动泵(7),打开所述进液蠕动泵(6)向所述培养单层(2)补充相应体积的新鲜培养基后关闭,继续培养,培养过程中不断观察并及时更新培养基。
9.根据权利要求6所述的一种贴壁细胞大规模培养工艺,其特征在于:S6中的操作步骤为当所述贴壁生长细胞生长占据所述培养单层(2)面积80%以上,通过所述收获蠕动泵(7)将所述培养单层(2)内的培养基完全抽出;将所述补料瓶(4)内的培养基更换为DPBS,并通过所述进液蠕动泵(6)泵入所述培养单层(2)内;保持DPBS至所述液面调节口;静置1-5min后打开所述收获蠕动泵(7)将DPBS完全排空。
10.根据权利要求9所述的一种贴壁细胞大规模培养工艺,其特征在于:S7中操作步骤包括向所述补料瓶(4)内更换为消化液,并通过所述进液蠕动泵(6)泵入所述培养单层(2)内;保持消化液至所述液面调节口;消化贴壁细胞变远并完全脱落后通过所述收获蠕动泵(7)将细胞悬液收集至所述收集瓶(5)内。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN202111670248.5A CN114317395B (zh) | 2021-12-31 | 2021-12-31 | 一种贴壁细胞大规模培养工艺 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN202111670248.5A CN114317395B (zh) | 2021-12-31 | 2021-12-31 | 一种贴壁细胞大规模培养工艺 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN114317395A true CN114317395A (zh) | 2022-04-12 |
CN114317395B CN114317395B (zh) | 2024-04-02 |
Family
ID=81020416
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN202111670248.5A Active CN114317395B (zh) | 2021-12-31 | 2021-12-31 | 一种贴壁细胞大规模培养工艺 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN114317395B (zh) |
Citations (10)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1405296A (zh) * | 2002-11-05 | 2003-03-26 | 中国科学院上海技术物理研究所 | 动态空间细胞培养系统 |
CN101942389A (zh) * | 2010-09-27 | 2011-01-12 | 北京航空航天大学 | 用于体外细胞共培养的力学加载流动腔装置 |
CN102703374A (zh) * | 2012-05-07 | 2012-10-03 | 敦振毅 | 贴壁型细胞培养方法 |
CN204325379U (zh) * | 2014-12-30 | 2015-05-13 | 北京中原合聚经贸有限公司 | 一种微载体和细胞培养装置 |
CN106047707A (zh) * | 2016-08-03 | 2016-10-26 | 广州赛泊泰生物技术有限公司 | 贴壁/悬浮型细胞培养单元、装置、系统及方法 |
WO2017044158A1 (en) * | 2015-09-07 | 2017-03-16 | Bioreactor Sciences Llc | Method of continuous mass production of progenitor stem-like cells using a bioreactor system |
CA3021045A1 (en) * | 2016-04-14 | 2018-01-11 | Trizell Ltd. | Large scale pei-mediated plasmid transfection |
CN210765348U (zh) * | 2019-10-08 | 2020-06-16 | 孟明耀 | 一种规模化脐带间充质干细胞转液换液系统 |
CN112980684A (zh) * | 2021-04-01 | 2021-06-18 | 伊尔瑞生物科技(江苏)有限公司 | 一种用于细胞共培养的微流控芯片及其细胞培养方法 |
CN113462565A (zh) * | 2021-07-05 | 2021-10-01 | 华东理工大学 | 一种皮肤芯片装置 |
-
2021
- 2021-12-31 CN CN202111670248.5A patent/CN114317395B/zh active Active
Patent Citations (10)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1405296A (zh) * | 2002-11-05 | 2003-03-26 | 中国科学院上海技术物理研究所 | 动态空间细胞培养系统 |
CN101942389A (zh) * | 2010-09-27 | 2011-01-12 | 北京航空航天大学 | 用于体外细胞共培养的力学加载流动腔装置 |
CN102703374A (zh) * | 2012-05-07 | 2012-10-03 | 敦振毅 | 贴壁型细胞培养方法 |
CN204325379U (zh) * | 2014-12-30 | 2015-05-13 | 北京中原合聚经贸有限公司 | 一种微载体和细胞培养装置 |
WO2017044158A1 (en) * | 2015-09-07 | 2017-03-16 | Bioreactor Sciences Llc | Method of continuous mass production of progenitor stem-like cells using a bioreactor system |
CA3021045A1 (en) * | 2016-04-14 | 2018-01-11 | Trizell Ltd. | Large scale pei-mediated plasmid transfection |
CN106047707A (zh) * | 2016-08-03 | 2016-10-26 | 广州赛泊泰生物技术有限公司 | 贴壁/悬浮型细胞培养单元、装置、系统及方法 |
CN210765348U (zh) * | 2019-10-08 | 2020-06-16 | 孟明耀 | 一种规模化脐带间充质干细胞转液换液系统 |
CN112980684A (zh) * | 2021-04-01 | 2021-06-18 | 伊尔瑞生物科技(江苏)有限公司 | 一种用于细胞共培养的微流控芯片及其细胞培养方法 |
CN113462565A (zh) * | 2021-07-05 | 2021-10-01 | 华东理工大学 | 一种皮肤芯片装置 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN114317395B (zh) | 2024-04-02 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN103468638A (zh) | 一种293细胞的大规模悬浮培养方法 | |
CN105087380A (zh) | 大规模培养动物细胞的系统 | |
CN102703319B (zh) | 贴壁型细胞培养装置及贴壁型细胞培养系统 | |
CN102071137A (zh) | 连续灌注生物反应器/罐袋系统制备干细胞装置和方法 | |
WO2019214484A1 (zh) | 一种用于微藻大规模培养采收的封闭坡式跑道池系统 | |
Liu et al. | Production of artemisinin by hairy rot cultures of Artemisia annua L in bioreactor | |
CN102703374B (zh) | 贴壁型细胞培养方法 | |
CN102002482B (zh) | 猪呼吸与繁殖障碍综合征病毒的生产方法 | |
CN114317395B (zh) | 一种贴壁细胞大规模培养工艺 | |
CN107460129A (zh) | 生物质与培养液分离的工业化微藻培养方法 | |
JP5981653B2 (ja) | 無菌条件下の植物の大規模成長のためのバイオリアクタ容器 | |
Sim et al. | Shikonin production by hairy roots of Lithospermum erythrorhizon in bioreactors with in situ separation | |
WO2017044158A1 (en) | Method of continuous mass production of progenitor stem-like cells using a bioreactor system | |
CN216808874U (zh) | 一种贴壁细胞大规模培养装置 | |
CN106635768A (zh) | 生物微藻光合反应器及其使用方法 | |
CN202415569U (zh) | 潮汐式动物细胞培养生物反应器 | |
CN212199205U (zh) | 培养藻类的光生物反应器 | |
CN211872005U (zh) | 一种植物细胞筛选器 | |
CN106544266A (zh) | 微藻养殖设备及工艺流程 | |
CN208593612U (zh) | 一种有益菌生产传输桶 | |
CN1063224C (zh) | 气升式周期浸没光照植物细胞组织器官培养方法及培养反应器 | |
CN208113795U (zh) | 高原单元封闭式循环水养殖系统 | |
CN206879834U (zh) | 一种对虾养殖池生物絮团人工岛 | |
CN201873686U (zh) | 连续灌注生物反应器及培养瓶/袋制备干细胞的系统 | |
CN203807459U (zh) | 一种用于固定化酵母菌或醋酸菌连续发酵的实验装置 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PB01 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
GR01 | Patent grant | ||
GR01 | Patent grant |