CN114306640A - 一种增加小檗碱溶解度的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种增加小檗碱溶解度的方法。本发明所述的增加小檗碱溶解度的方法包括：在小檗碱的有机溶剂水溶液中加入功能性化合物，用磷酸盐缓冲液调节溶液的酸碱度范围为pH 2～7.4。本发明所述方法利用具有表面活性剂特点的两亲性药用化合物直接作为增加药物溶解度载体，能有效提高小檗碱的溶解度，最终有望能增加疗效减少毒性。由于甘草酸具有表面活性剂的特性以及甘草酸本身可以注射给药的特点，本发明所述方法可以应用于小檗碱注射剂、小檗碱口服制剂、经皮给药、皮肤局部用制剂、肿瘤局部用制剂和直肠给药制剂等的开发研究。
Description
技术领域
本发明属于药物制剂领域，涉及一种增加小檗碱溶解度的方法，特别是涉及一种利用具有表面活性剂特点的两亲性药用小分子化合物直接作为增加药物溶解度的载体，最终达到明显增加小檗碱溶解度的方法。
背景技术
小檗碱(Berberine，BBR)是毛莨科植物黄连干燥根茎。小檗碱在临床上广泛用于治疗肠道寄生虫感染与细菌性腹泻。近年来，小檗碱其他显著的药理作用也被逐渐发现，如抗炎、抗高血压及抑制肺动脉高压、抗肿瘤、降糖。但作为生物药剂学分类系统IV类药物，小檗碱低溶解度和低渗透性是限制其临床应用的主要原因。小檗碱的生物利用度极低，约为0.36％。另外，小檗碱临床上多制备为片剂而不是注射液，小檗碱的注射液却罕见，一方面，它可能存在明显的心脏毒性，另一方面，这可能是因为小檗碱在人体体液环境的溶解度极低。
因此，有必要开发一种具有生物安全性和稳定性的增加小檗碱溶解度且增加生物相容性的方法，以便充分发挥小檗碱的临床治疗作用。
发明内容
本发明的目的是提供一种增加小檗碱溶解度的方法，该方法可有效提高小檗碱溶解度，能克服现有盐酸小檗碱制剂的一些缺点，有利于小檗碱制剂的开发。
本发明所述的增加小檗碱溶解度的方法，包括：在小檗碱的有机溶剂水溶液中加入功能性化合物，用磷酸盐缓冲液调节溶液的酸碱度范围为pH 2～7.4。
根据本发明所述的增加小檗碱溶解度的方法的进一步特征，所述有机溶剂是无水乙醇；所述功能性化合物是甘草酸或其盐类衍生物，所述溶液中形成小檗碱-甘草酸复合物。
根据本发明所述的增加小檗碱溶解度的方法的进一步特征，所述甘草酸盐类衍生物是甘草酸铵盐或甘草酸钾。
根据本发明所述的增加小檗碱溶解度的方法的进一步特征，所述小檗碱与甘草酸在摩尔比为1:1时，所形成的小檗碱-甘草酸复合物使小檗碱达到最佳溶解度。
具体地，本发明所述的增加小檗碱溶解度的方法包括以下步骤：
A.将盐酸小檗碱做脱盐处理，得到小檗碱单体；
B.用0.5～1份有机溶剂混合去离子水溶解1～2份小檗碱单体，制备内相；再将1～4份功能性化合物溶于7～10份去离子水，制备外相；
C.在磁力搅拌器搅拌条件下，将内相逐滴滴加至外相中；
D.用旋转蒸发仪除去所有溶剂，形成层均匀的粉末薄膜，刮下得到粉末；
E.用磷酸盐缓冲液调节溶液的pH至2～7.4，超声处理30分钟，密封并放置于25℃～60℃孵育摇床中，摇晃1～48小时以达到溶解平衡。
优选地，所述步骤B中，所述有机溶剂是无水乙醇。
优选地，所述步骤B中，所述功能性化合物是甘草酸或其盐类衍生物；所述步骤D中，所述粉末是小檗碱-甘草酸复合物。
优选地，所述甘草酸盐类衍生物是甘草酸铵盐或甘草酸钾。
本发明比较不同浓度的功能性化合物对小檗碱溶解度的影响，最终确定最佳配方从而显著地提高了小檗碱溶解度。本发明利用功能性化合物的作用，提高了小檗碱溶解度，达到4000μg/ml以上，使小檗碱在pH7.4溶液中的溶解度提高了100多倍。根据溶解度研究结果并结合药物制剂学要求，可以进一步选择功能性化合物的最适用量并利用最佳增溶的投料比例制备相关小檗碱制剂。由于甘草酸具有的功能性和表明活性剂的性质，以及甘草酸本身可以注射给药的特点，因此，本发明可以应用于新的小檗碱注射剂、小檗碱口服制剂、经皮给药，皮肤局部用制剂，肿瘤局部用制剂和直肠给药制剂的开发研究中。
甘草酸是临床常用的一种药物，具有抗炎和解毒等作用。甘草酸属于三萜类化合物，具有两亲性，因此表现出表面活性剂的特点，其聚集体或者胶束能与疏水性药物形成“主-客”体的包合复合物，能有效地增加药物的溶解度和避免药物沉淀析出。同时，小檗碱是一种生物碱，可能与作为有机酸的甘草酸更易互溶。另一方面，由于甘草酸的功能性(如具有保肝、解毒的功能)，以及甘草酸在临床使用中的安全性，以甘草酸及其衍生物(其盐)作为小檗碱增溶体系的载体，可以用于开发口服制剂及潜在的小檗碱注射剂，提高小檗碱的生物利用度。此外，甘草酸为三萜类皂苷，如果作为口服吸收促进剂，不仅能有效地增加疏水性药物的溶解度，而且能增加疏水性药物的细胞膜透过性(约60％)和降低细胞膜的弹性系数。因此，本发明选择甘草酸作为一种增加小檗碱药物溶解度的载体。
甘草酸铵盐和甘草酸钾盐的结构与甘草酸相类似，具有相似性质，因此本发明也可采用甘草酸铵盐(单铵盐、双铵盐)或甘草酸钾盐作为增加小檗碱药物溶解度的载体。所选表面活性剂也包括甘草酸铵盐及甘草酸钾。
由于两亲性化合物甘草酸这种独特的化学结构，在水溶液中能自组装形成具有核-壳结构的球形胶束，可将疏水性的药物包裹在其核心，从而增加药物的溶解度，同时提高药物的稳定性和减少药物的毒副作用。
附图说明
图1是本发明制备的小檗碱-甘草酸复合物的扫描电镜图。
图2是本发明制备的小檗碱-甘草酸复合物对比盐酸小檗碱和小檗碱甘草酸物理混合物的DSC差示量热扫描图。
具体实施方式
本发明所述的增加小檗碱溶解度的方法，利用高效液相色谱法确定小檗碱溶解度，通过配制不同比例功能性化合物溶液，达到溶解度增加的目的，包括以下步骤：
分别称取过量的盐酸小檗碱至干净且干燥的离心管中，脱盐后加入含有不同浓度的功能化合物，磁力搅拌器下搅拌2h，旋转蒸发溶剂后刮下瓶内粉末，收集并密封。其中备用功能性化合物优选甘草酸铵盐，最优选甘草酸。
将混合物溶液，放置于25℃孵育摇床中，摇晃以达到溶解平衡。最后所得到的样品通过0.45μm微孔滤膜过滤后，取0.1mL并加入甲醇0.9mL，混合均匀，取一定量用高效液相色谱法对小檗碱浓度进行检测，以确定其溶解度，所有样品重复三次测定，取平均值。
以下通过具体实施例对本发明做进一步的阐述，但本发明并不限于这些特定例子。
实施例1
小檗碱10mg(相对过量)，加入1mL蒸馏水，超声30min，密封避光放置于25℃孵育摇床中，摇晃48h以达到溶解平衡。最后所得到的样品通过0.45μm微孔滤膜过滤后，取0.1mL并加入甲醇0.9mL，稀释十倍(以防出现沉淀)，取一定量进高效液相色谱对小檗碱浓度进行检测，测定其溶解度。
实施例2
取小檗碱10mg(相对过量)，加入1mL pH2.0的磷酸盐缓冲液，超声30min，密封避光放置于25℃孵育摇床中，摇晃48h以达到溶解平衡。最后所得到的样品通过0.45μm微孔滤膜过滤后，取0.1mL并加入甲醇0.9mL，稀释十倍(以防出现沉淀)，取一定量进高效液相色谱对小檗碱浓度进行检测，测定其溶解度。
实施例3
取小檗碱10mg(相对过量)，加入1mL pH4.0的磷酸盐缓冲液，超声30min，密封避光放置于25℃孵育摇床中，摇晃48h以达到溶解平衡。最后所得到的样品通过0.45μm微孔滤膜过滤后，取0.1mL并加入甲醇0.9mL，稀释十倍(以防出现沉淀)，取一定量进高效液相色谱对小檗碱浓度进行检测，测定其溶解度。
实施例4
取小檗碱10mg(相对过量)，加入1mL pH6.0的磷酸盐缓冲液，超声30min，密封避光放置于25℃孵育摇床中，摇晃48h以达到溶解平衡。最后所得到的样品通过0.45μm微孔滤膜过滤后，取0.1mL并加入甲醇0.9mL，稀释十倍(以防出现沉淀)，取一定量进高效液相色谱对小檗碱浓度进行检测，测定其溶解度。
实施例5
取小檗碱10mg(相对过量)，加入1mL pH7.4的磷酸盐缓冲液，超声30min，密封避光放置于25℃孵育摇床中，摇晃48h以达到溶解平衡。最后所得到的样品通过0.45μm微孔滤膜过滤后，取0.1mL并加入甲醇0.9mL，稀释十倍(以防出现沉淀)，取一定量进高效液相色谱对小檗碱浓度进行检测，测定其溶解度。
实施例6
取小檗碱10mg(相对过量)，加入1mL生理盐水，超声30min，密封避光放置于25℃孵育摇床中，摇晃48h以达到溶解平衡。最后所得到的样品通过0.45μm微孔滤膜过滤后，取0.1mL并加入甲醇0.9mL，稀释十倍(以防出现沉淀)，取一定量进高效液相色谱对小檗碱浓度进行检测，测定其溶解度。
实施例7
取小檗碱10mg(相对过量)，加入1mL 10％葡萄糖溶液，超声30min，密封避光放置于25℃孵育摇床中，摇晃48h以达到溶解平衡。最后所得到的样品通过0.45μm微孔滤膜过滤后，取0.1mL并加入甲醇0.9mL，稀释十倍(以防出现沉淀)，取一定量进高效液相色谱对小檗碱浓度进行检测，测定其溶解度。
实施例8
取小檗碱10mg(相对过量)，加入1mL 5％NaHCO3溶液，超声30min，密封避光放置于25℃孵育摇床中，摇晃48h以达到溶解平衡。最后所得到的样品通过0.45μm微孔滤膜过滤后，取0.1mL并加入甲醇0.9mL，稀释十倍(以防出现沉淀)，取一定量进高效液相色谱对小檗碱浓度进行检测，测定其溶解度。
实施例9
取盐酸小檗碱150mg(相对过量)，加入25mL微热乙醇水溶液中并脱盐，超声溶解形成小檗碱乙醇水溶液；另外取甘草酸166mg，超声溶解于25mL微热乙醇水溶液中制备甘草酸乙醇水溶液。在磁力搅拌器搅拌条件下，将小檗碱乙醇水溶液以针筒滴加的方式逐滴入到甘草酸乙醇水溶液中，用旋转蒸发仪除去所有溶剂，刮下粉末。称取20mg所得粉末加入0.5mL的pH2的磷酸盐缓冲液，密封避光放置于25℃孵育摇床中，摇晃48h以达到溶解平衡。最后所得到的样品通过0.45μm微孔滤膜过滤后，取0.1mL并加入甲醇0.9mL，稀释十倍(以防出现沉淀)，取一定量进高效液相色谱对小檗碱浓度进行检测，测定其溶解度。
实施例10
取盐酸小檗碱150mg(相对过量)，加入25mL微热乙醇水溶液中并脱盐，超声溶解形成小檗碱乙醇水溶液；另外取甘草酸166mg，超声溶解于25mL微热乙醇水溶液中制备甘草酸乙醇水溶液。在磁力搅拌器搅拌条件下，将小檗碱乙醇水溶液以针筒滴加的方式逐滴入到甘草酸乙醇水溶液中，用旋转蒸发仪除去所有溶剂，刮下粉末。称取20mg所得粉末加入0.5mL的pH4的磷酸盐缓冲液，密封避光放置于25℃孵育摇床中，摇晃48h以达到溶解平衡。最后所得到的样品通过0.45μm微孔滤膜过滤后，取0.1mL并加入甲醇0.9mL，稀释十倍(以防出现沉淀)，取一定量进高效液相色谱对小檗碱浓度进行检测，测定其溶解度。
实施例11
取盐酸小檗碱150mg(相对过量)，加入25mL微热乙醇水溶液中并脱盐，超声溶解形成小檗碱乙醇水溶液；另外取甘草酸166mg，超声溶解于25mL微热乙醇水溶液中制备甘草酸乙醇水溶液。在磁力搅拌器搅拌条件下，将小檗碱乙醇水溶液以针筒滴加的方式逐滴入到甘草酸乙醇水溶液中，用旋转蒸发仪除去所有溶剂，刮下粉末。称取20mg所得粉末加入0.5mL的pH6的磷酸盐缓冲液，密封避光放置于25℃孵育摇床中，摇晃48h以达到溶解平衡。最后所得到的样品通过0.45μm微孔滤膜过滤后，取0.1mL并加入甲醇0.9mL，稀释十倍(以防出现沉淀)，取一定量进高效液相色谱对小檗碱浓度进行检测，测定其溶解度。
实施例12
取盐酸小檗碱150mg(相对过量)，加入25mL微热乙醇水溶液中并脱盐，超声溶解形成小檗碱乙醇水溶液；另外取甘草酸166mg，超声溶解于25mL微热乙醇水溶液中制备甘草酸乙醇水溶液。在磁力搅拌器搅拌条件下，将小檗碱乙醇水溶液以针筒滴加的方式逐滴入到甘草酸乙醇水溶液中，用旋转蒸发仪除去所有溶剂，刮下粉末。称取20mg所得粉末加入0.5mL的pH7.4的磷酸盐缓冲液，密封避光放置于25℃孵育摇床中，摇晃48h以达到溶解平衡。最后所得到的样品通过0.45μm微孔滤膜过滤后，取0.1mL并加入甲醇0.9mL，稀释十倍(以防出现沉淀)，取一定量进高效液相色谱对小檗碱浓度进行检测，测定其溶解度。
实施例13
取盐酸小檗碱150mg(相对过量)，加入25mL微热乙醇水溶液中并脱盐，超声溶解形成小檗碱乙醇水溶液；另外取甘草酸166mg，超声溶解于25mL微热乙醇水溶液中制备甘草酸乙醇水溶液。在磁力搅拌器搅拌条件下，将小檗碱乙醇水溶液以针筒滴加的方式逐滴入到甘草酸乙醇水溶液中，用旋转蒸发仪除去所有溶剂，刮下粉末。称取20mg所得粉末加入0.5mL水，密封避光放置于25℃孵育摇床中，摇晃48h以达到溶解平衡。最后所得到的样品通过0.45μm微孔滤膜过滤后，取0.1mL并加入甲醇0.9mL，稀释十倍(以防出现沉淀)，取一定量进高效液相色谱对小檗碱浓度进行检测，测定其溶解度。
实施例14
取盐酸小檗碱150mg(相对过量)，加入25mL微热乙醇水溶液中并脱盐，超声溶解形成小檗碱乙醇水溶液；另外取甘草酸332mg，超声溶解于25mL微热乙醇水溶液中制备甘草酸乙醇水溶液。在磁力搅拌器搅拌条件下，将小檗碱乙醇水溶液以针筒滴加的方式逐滴入到甘草酸乙醇水溶液中，用旋转蒸发仪除去所有溶剂，刮下粉末。称取20mg所得粉末加入0.5mL的pH2的磷酸盐缓冲液，密封避光放置于25℃孵育摇床中，摇晃48h以达到溶解平衡。最后所得到的样品通过0.45μm微孔滤膜过滤后，取0.1mL并加入甲醇0.9mL，稀释十倍(以防出现沉淀)，取一定量进高效液相色谱对小檗碱浓度进行检测，测定其溶解度。
实施例15
取盐酸小檗碱150mg(相对过量)，加入25mL微热乙醇水溶液中并脱盐，超声溶解形成小檗碱乙醇水溶液；另外取甘草酸332mg，超声溶解于25mL微热乙醇水溶液中制备甘草酸乙醇水溶液。在磁力搅拌器搅拌条件下，将小檗碱乙醇水溶液以针筒滴加的方式逐滴入到甘草酸乙醇水溶液中，用旋转蒸发仪除去所有溶剂，刮下粉末。称取20mg所得粉末加入0.5mL的pH4的磷酸盐缓冲液，密封避光放置于25℃孵育摇床中，摇晃48h以达到溶解平衡。最后所得到的样品通过0.45μm微孔滤膜过滤后，取0.1mL并加入甲醇0.9mL，稀释十倍(以防出现沉淀)，取一定量进高效液相色谱对小檗碱浓度进行检测，测定其溶解度。
实施例16
取盐酸小檗碱150mg(相对过量)，加入25mL微热乙醇水溶液中并脱盐，超声溶解形成小檗碱乙醇水溶液；另外取甘草酸332mg，超声溶解于25mL微热乙醇水溶液中制备甘草酸乙醇水溶液。在磁力搅拌器搅拌条件下，将小檗碱乙醇水溶液以针筒滴加的方式逐滴入到甘草酸乙醇水溶液中，用旋转蒸发仪除去所有溶剂，刮下粉末。称取20mg所得粉末加入0.5mL的pH6的磷酸盐缓冲液，密封避光放置于25℃孵育摇床中，摇晃48h以达到溶解平衡。最后所得到的样品通过0.45μm微孔滤膜过滤后，取0.1mL并加入甲醇0.9mL，稀释十倍(以防出现沉淀)，取一定量进高效液相色谱对小檗碱浓度进行检测，测定其溶解度。
实施例17
取盐酸小檗碱150mg(相对过量)，加入25mL微热乙醇水溶液中并脱盐，超声溶解形成小檗碱乙醇水溶液；另外取甘草酸332mg，超声溶解于25mL微热乙醇水溶液中制备甘草酸乙醇水溶液。在磁力搅拌器搅拌条件下，将小檗碱乙醇水溶液以针筒滴加的方式逐滴入到甘草酸乙醇水溶液中，用旋转蒸发仪除去所有溶剂，刮下粉末。称取20mg所得粉末加入0.5mL的pH7.4的磷酸盐缓冲液，密封避光放置于25℃孵育摇床中，摇晃48h以达到溶解平衡。最后所得到的样品通过0.45μm微孔滤膜过滤后，取0.1mL并加入甲醇0.9mL，稀释十倍(以防出现沉淀)，取一定量进高效液相色谱对小檗碱浓度进行检测，测定其溶解度。
实施例18
取盐酸小檗碱150mg(相对过量)，加入25mL微热乙醇水溶液中并脱盐，超声溶解形成小檗碱乙醇水溶液；另外取甘草酸332mg，超声溶解于25mL微热乙醇水溶液中制备甘草酸乙醇水溶液。在磁力搅拌器搅拌条件下，将小檗碱乙醇水溶液以针筒滴加的方式逐滴入到甘草酸乙醇水溶液中，用旋转蒸发仪除去所有溶剂，刮下粉末。称取20mg所得粉末加入0.5mL水，密封避光放置于25℃孵育摇床中，摇晃48h以达到溶解平衡。最后所得到的样品通过0.45μm微孔滤膜过滤后，取0.1mL并加入甲醇0.9mL，稀释十倍(以防出现沉淀)，取一定量进高效液相色谱对小檗碱浓度进行检测，测定其溶解度。
实施例19
取盐酸小檗碱150mg(相对过量)，加入25mL微热乙醇水溶液中并脱盐，超声溶解形成小檗碱乙醇水溶液；另外取甘草酸664mg，超声溶解于25mL微热乙醇水溶液中制备甘草酸乙醇水溶液。在磁力搅拌器搅拌条件下，将小檗碱乙醇水溶液以针筒滴加的方式逐滴入到甘草酸乙醇水溶液中，用旋转蒸发仪除去所有溶剂，刮下粉末。称取20mg所得粉末加入0.5mL的pH2的磷酸盐缓冲液，密封避光放置于25℃孵育摇床中，摇晃48h以达到溶解平衡。最后所得到的样品通过0.45μm微孔滤膜过滤后，取0.1mL并加入甲醇0.9mL，稀释十倍(以防出现沉淀)，取一定量进高效液相色谱对小檗碱浓度进行检测，测定其溶解度。
实施例20
取盐酸小檗碱150mg(相对过量)，加入25mL微热乙醇水溶液中并脱盐，超声溶解形成小檗碱乙醇水溶液；另外取甘草酸664mg，超声溶解于25mL微热乙醇水溶液中制备甘草酸乙醇水溶液。在磁力搅拌器搅拌条件下，将小檗碱乙醇水溶液以针筒滴加的方式逐滴入到甘草酸乙醇水溶液中，用旋转蒸发仪除去所有溶剂，刮下粉末。称取20mg所得粉末加入0.5mL的pH4的磷酸盐缓冲液，密封避光放置于25℃孵育摇床中，摇晃48h以达到溶解平衡。最后所得到的样品通过0.45μm微孔滤膜过滤后，取0.1mL并加入甲醇0.9mL，稀释十倍(以防出现沉淀)，取一定量进高效液相色谱对小檗碱浓度进行检测，测定其溶解度。
实施例21
取盐酸小檗碱150mg(相对过量)，加入25mL微热乙醇水溶液中并脱盐，超声溶解形成小檗碱乙醇水溶液；另外取甘草酸664mg，超声溶解于25mL微热乙醇水溶液中制备甘草酸乙醇水溶液。在磁力搅拌器搅拌条件下，将小檗碱乙醇水溶液以针筒滴加的方式逐滴入到甘草酸乙醇水溶液中，用旋转蒸发仪除去所有溶剂，刮下粉末。称取20mg所得粉末加入0.5mL的pH6的磷酸盐缓冲液，密封避光放置于25℃孵育摇床中，摇晃48h以达到溶解平衡。最后所得到的样品通过0.45μm微孔滤膜过滤后，取0.1mL并加入甲醇0.9mL，稀释十倍(以防出现沉淀)，取一定量进高效液相色谱对小檗碱浓度进行检测，测定其溶解度。
实施例22
取盐酸小檗碱150mg(相对过量)，加入25mL微热乙醇水溶液中并脱盐，超声溶解形成小檗碱乙醇水溶液；另外取甘草酸664mg，超声溶解于25mL微热乙醇水溶液中制备甘草酸乙醇水溶液。在磁力搅拌器搅拌条件下，将小檗碱乙醇水溶液以针筒滴加的方式逐滴入到甘草酸乙醇水溶液中，用旋转蒸发仪除去所有溶剂，刮下粉末。称取20mg所得粉末加入0.5mL的pH7.4的磷酸盐缓冲液，密封避光放置于25℃孵育摇床中，摇晃48h以达到溶解平衡。最后所得到的样品通过0.45μm微孔滤膜过滤后，取0.1mL并加入甲醇0.9mL，稀释十倍(以防出现沉淀)，取一定量进高效液相色谱对小檗碱浓度进行检测，测定其溶解度。
实施例23
取盐酸小檗碱150mg(相对过量)，加入25mL微热乙醇水溶液中并脱盐，超声溶解形成小檗碱乙醇水溶液；另外取甘草酸664mg，超声溶解于25mL微热乙醇水溶液中制备甘草酸乙醇水溶液。在磁力搅拌器搅拌条件下，将小檗碱乙醇水溶液以针筒滴加的方式逐滴入到甘草酸乙醇水溶液中，用旋转蒸发仪除去所有溶剂，刮下粉末。称取20mg所得粉末加入0.5mL水，密封避光放置于25℃孵育摇床中，摇晃48h以达到溶解平衡。最后所得到的样品通过0.45μm微孔滤膜过滤后，取0.1mL并加入甲醇0.9mL，稀释十倍(以防出现沉淀)，取一定量进高效液相色谱对小檗碱浓度进行检测，测定其溶解度。
实施例24
取盐酸小檗碱150mg(相对过量)，加入25mL微热乙醇水溶液中并脱盐，超声溶解形成小檗碱乙醇水溶液；另外取甘草酸332mg，超声溶解于25mL微热乙醇水溶液中制备甘草酸乙醇水溶液。在磁力搅拌器搅拌条件下，将小檗碱乙醇水溶液以针筒滴加的方式逐滴入到甘草酸乙醇水溶液中，用旋转蒸发仪除去所有溶剂，刮下粉末。称取20mg所得粉末加入0.5mL的生理盐水，密封避光放置于25℃孵育摇床中，摇晃48h以达到溶解平衡。最后所得到的样品通过0.45μm微孔滤膜过滤后，取0.1mL并加入甲醇0.9mL，稀释十倍(以防出现沉淀)，取一定量进高效液相色谱对小檗碱浓度进行检测，测定其溶解度。
实施例25
取盐酸小檗碱150mg(相对过量)，加入25mL微热乙醇水溶液中并脱盐，超声溶解形成小檗碱乙醇水溶液；另外取甘草酸332mg，超声溶解于25mL微热乙醇水溶液中制备甘草酸乙醇水溶液。在磁力搅拌器搅拌条件下，将小檗碱乙醇水溶液以针筒滴加的方式逐滴入到甘草酸乙醇水溶液中，用旋转蒸发仪除去所有溶剂，刮下粉末。称取20mg所得粉末加入0.5mL的10％葡萄糖溶液，密封避光放置于25℃孵育摇床中，摇晃48h以达到溶解平衡。最后所得到的样品通过0.45μm微孔滤膜过滤后，取0.1mL并加入甲醇0.9mL，稀释十倍(以防出现沉淀)，取一定量进高效液相色谱对小檗碱浓度进行检测，测定其溶解度。
实施例26
取盐酸小檗碱150mg(相对过量)，加入25mL微热乙醇水溶液中并脱盐，超声溶解形成小檗碱乙醇水溶液；另外取甘草酸332mg，超声溶解于25mL微热乙醇水溶液中制备甘草酸乙醇水溶液。在磁力搅拌器搅拌条件下，将小檗碱乙醇水溶液以针筒滴加的方式逐滴入到甘草酸乙醇水溶液中，用旋转蒸发仪除去所有溶剂，刮下粉末。称取20mg所得粉末加入0.5mL的5％NaHCO3溶液，密封避光放置于25℃孵育摇床中，摇晃48h以达到溶解平衡。最后所得到的样品通过0.45μm微孔滤膜过滤后，取0.1mL并加入甲醇0.9mL，稀释十倍(以防出现沉淀)，取一定量进高效液相色谱对小檗碱浓度进行检测，测定其溶解度。
实验结果
实施例1-8是考察单药小檗碱溶于水、pH2缓冲液、pH4缓冲液、pH6缓冲液、pH7.4缓冲液、生理盐水、葡萄糖溶液和5％碳酸氢钠的溶解度。实验结果见下表1。
表1：实施例1-8的溶解度
| 实施例 | 小檗碱溶解度(μg/ml) | 实施例 | 小檗碱溶解度(μg/ml) |
| 1 | 1303.68 | 2 | 36.55 |
| 实施例 | 小檗碱溶解度(μg/ml) | 实施例 | 小檗碱溶解度(μg/ml) |
| 3 | 51.58 | 4 | 43.97 |
| 实施例 | 小檗碱溶解度(μg/ml) | 实施例 | 小檗碱溶解度(μg/ml) |
| 5 | 83.78 | 6 | 14.79 |
| 实施例 | 小檗碱溶解度(μg/ml) | 实施例 | 小檗碱溶解度(μg/ml) |
| 7 | 1477.93 | 8 | 270.85 |
实施例9-13是考察当小檗碱与甘草酸的摩尔比为2:1时，制作的样品在pH2缓冲液、pH4缓冲液、pH6缓冲液、pH7.4缓冲液以及水中的溶解度。实验结果见下表2。
表2：实施例9-13的溶解度
| 实施例 | 小檗碱溶解度(μg/ml) | 实施例 | 小檗碱溶解度(μg/ml) |
| 9 | 59.87 | 10 | 1478.82 |
| 实施例 | 小檗碱溶解度(μg/ml) | 实施例 | 小檗碱溶解度(μg/ml) |
| 11 | 811.55 | 12 | 1429.33 |
| 实施例 | 小檗碱溶解度(μg/ml) | 实施例 | 小檗碱溶解度(μg/ml) |
| 13 | 3124.08 |
实施例14-18是考察当小檗碱与甘草酸的摩尔比为1:1时，制作的样品在pH2缓冲液、pH4缓冲液、pH6缓冲液、pH7.4缓冲液以及水中的溶解度。实验结果见下表3。
表3：实施例14-18的溶解度
| 实施例 | 小檗碱溶解度(μg/ml) | 实施例 | 小檗碱溶解度(μg/ml) |
| 14 | 85.16 | 15 | 1961.6 |
| 实施例 | 小檗碱溶解度(μg/ml) | 实施例 | 小檗碱溶解度(μg/ml) |
| 16 | 4709.79 | 17 | 4180.69 |
| 实施例 | 小檗碱溶解度(μg/ml) | 实施例 | 小檗碱溶解度(μg/ml) |
| 18 | 7247.85 |
实施例19-23是考察当小檗碱与甘草酸的摩尔比为1:2时，制作的样品在pH2缓冲液、pH4缓冲液、pH6缓冲液、pH7.4缓冲液以及水中的溶解度。实验结果见下表4。
表4：实施例19-23的溶解度
| 实施例 | 小檗碱溶解度(μg/ml) | 实施例 | 小檗碱溶解度(μg/ml) |
| 19 | 101.39 | 20 | 1109.76 |
| 实施例 | 小檗碱溶解度(μg/ml) | 实施例 | 小檗碱溶解度(μg/ml) |
| 21 | 2893.92 | 22 | 2846.89 |
| 实施例 | 小檗碱溶解度(μg/ml) | 实施例 | 小檗碱溶解度(μg/ml) |
| 23 | 2923.32 |
由表1至表4的结果可见，当小檗碱与甘草酸的摩尔比为1:1时，小檗碱溶解度的溶解度最高。
实施例24至26是当小檗碱与甘草酸的摩尔比为1:1时，测定样品在生理盐水、葡萄糖溶液、5％碳酸氢钠溶液的溶解度，实验结果见下表5，可与实施例6至8中单药小檗碱在相同溶剂的溶解度做对比。
表5：实施例24-26的溶解度
| 实施例 | 小檗碱溶解度(μg/ml) | 实施例 | 小檗碱溶解度(μg/ml) |
| 24 | 2542.81 | 25 | 4976.43 |
| 实施例 | 小檗碱溶解度(μg/ml) | 实施例 | 小檗碱溶解度(μg/ml) |
| 26 | 9436.12 |
实验结果分析
(1)通过比较实施例1～8，可以看出，虽然小檗碱在水里的溶解度达到1mg/mL以上，但在不同pH的磷酸盐缓冲液和在常见注射液里的溶解度很低，这可能是小檗碱开发成注射剂较为困难的原因之一。
(2)通过比较实施例9～12，实施例14～17，实施例19～22，可以看出与小檗碱-甘草酸复合物在磷酸盐缓冲液的随pH值的溶解度大致变化。pH越高，小檗碱溶解度越大，并筛选最优小檗碱与甘草酸的比例。最终确定小檗碱与甘草酸在摩尔比为1:1时，制得的小檗碱-甘草酸复合物达到最佳小檗碱溶解度。
(3)通过比较实施例6～8与实施例24～26，可以看出筛选出的最优小檗碱与甘草酸比例制作小檗碱-甘草酸复合物时，复合物中小檗碱溶解度比在单药小檗碱溶解度增加50～200倍。证实了小檗碱-甘草酸复合物能够增加小檗碱的溶解度。(4)将最优小檗碱与甘草酸比例(摩尔比1:1)制作的小檗碱-甘草酸复合物用透射电镜扫描及差示热扫描。如图1，透射电镜图中小檗碱-甘草酸复合物形状棱角较少，基本呈现为圆球状，而小檗碱甘草酸混合物图像棱角分明，这说明小檗碱可能被甘草酸所包住。图2差示扫描量热图中，可以明显看出复合物的热熔曲线较平，不同于其他的曲线有明显的峰，说明复合物没有一个明显的熔点，且与混合物及单药的热熔特性有差别。这说明小檗碱-甘草酸复合物的存在，且其中小檗碱以无定型状态存在。
Claims (8)
1.一种增加小檗碱溶解度的方法，其特征在于，包括：在小檗碱的有机溶剂水溶液中加入功能性化合物，用磷酸盐缓冲液调节溶液的酸碱度范围为pH 2～7.4。
2.根据权利要求1所述的增加小檗碱溶解度的方法，其特征在于：所述有机溶剂是无水乙醇；所述功能性化合物是甘草酸或其盐类衍生物，所述溶液中形成小檗碱-甘草酸复合物。
3.根据权利要求2所述的增加小檗碱溶解度的方法，其特征在于：所述甘草酸盐类衍生物是甘草酸铵盐或甘草酸钾。
4.根据权利要求2所述的增加小檗碱溶解度的方法，其特征在于：所述小檗碱与甘草酸在摩尔比为1:1时，所形成的小檗碱-甘草酸复合物使小檗碱达到最佳溶解度。
5.根据权利要求1所述的增加小檗碱溶解度的方法，其特征在于，包括以下步骤：
A.将盐酸小檗碱做脱盐处理，得到小檗碱单体；
B.用0.5～1份有机溶剂混合去离子水溶解1～2份小檗碱单体，制备内相；再将1～4份功能性化合物溶于7～10份去离子水，制备外相；
C.在磁力搅拌器搅拌条件下，将内相逐滴滴加至外相中；
D.用旋转蒸发仪除去所有溶剂，形成层均匀的粉末薄膜，刮下得到粉末；
E.用磷酸盐缓冲液调节溶液的pH至2～7.4，超声处理30分钟，密封并放置于25℃～60℃孵育摇床中，摇晃1～48小时以达到溶解平衡。
6.根据权利要求5所述的增加小檗碱溶解度的方法，其特征在于：所述步骤B中，所述有机溶剂是无水乙醇。
7.根据权利要求5所述的增加小檗碱溶解度的方法，其特征在于：所述步骤B中，所述功能性化合物是甘草酸或其盐类衍生物；所述步骤D中，所述粉末是小檗碱-甘草酸复合物。
8.根据权利要求7所述的增加小檗碱溶解度的方法，其特征在于：所述甘草酸盐类衍生物是甘草酸铵盐或甘草酸钾。
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Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101747405A (zh) * | 2010-01-14 | 2010-06-23 | 杭州市中医院 | 小檗碱甘草酸对映体盐及其制备方法和用途 |
| CN104984350A (zh) * | 2015-06-15 | 2015-10-21 | 南方医科大学南方医院 | 一种增加紫杉醇溶解度的方法 |
| CN105693813A (zh) * | 2016-03-15 | 2016-06-22 | 合肥华方医药科技有限公司 | 一种甘草酸类小檗碱偶合物的制备及医药用途 |
| CN108143713A (zh) * | 2018-01-04 | 2018-06-12 | 南方医科大学南方医院 | 一种增加羟喜树碱溶解度的方法 |
| CN108210456A (zh) * | 2018-01-11 | 2018-06-29 | 南方医科大学南方医院 | 一种增加阿霉素溶解度的方法 |
| US20200276172A1 (en) * | 2016-10-14 | 2020-09-03 | Icahn School Of Medicine At Mount Sinai | Treatment of Immunological Disease Using Berberine Nanoparticles |
-
2022
- 2022-01-27 CN CN202210102443.6A patent/CN114306640A/zh active Pending
Patent Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101747405A (zh) * | 2010-01-14 | 2010-06-23 | 杭州市中医院 | 小檗碱甘草酸对映体盐及其制备方法和用途 |
| CN104984350A (zh) * | 2015-06-15 | 2015-10-21 | 南方医科大学南方医院 | 一种增加紫杉醇溶解度的方法 |
| CN105693813A (zh) * | 2016-03-15 | 2016-06-22 | 合肥华方医药科技有限公司 | 一种甘草酸类小檗碱偶合物的制备及医药用途 |
| US20200276172A1 (en) * | 2016-10-14 | 2020-09-03 | Icahn School Of Medicine At Mount Sinai | Treatment of Immunological Disease Using Berberine Nanoparticles |
| CN108143713A (zh) * | 2018-01-04 | 2018-06-12 | 南方医科大学南方医院 | 一种增加羟喜树碱溶解度的方法 |
| CN108210456A (zh) * | 2018-01-11 | 2018-06-29 | 南方医科大学南方医院 | 一种增加阿霉素溶解度的方法 |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| 朱美玲: "基于生物药剂学分类系统的葛根芩连方中小檗碱的溶解渗透属性研究", 《中国优秀硕士学位论文全文数据库 医药卫生科技辑》, no. 12, pages 22 - 25 * |
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