CN114276912A - 荧光检测系统、方法和pcr扩增分析装置 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种荧光检测系统、方法和PCR扩增分析装置，所述荧光检测系统用于检测含有多种荧光物的待测样品，包括激发光源模块，与所述待测样品之间形成单个激发光通道，用于向待测样品发射同一波长的激发光，以激发多种荧光物产生不同波长的混合荧光；光纤束，用于接收待测样品产生的所述混合荧光，并将所述混合荧光分为多束；多个荧光探测模块，各个所述荧光探测模块用于对应接收分束后的所述混合荧光，并将接收到的所述混合荧光过滤后分别形成单一波长的荧光信号，随后将所述荧光信号转化为对应的电信号。上述荧光检测系统通过使用一个激发光源模块即可同时检测多种荧光信号，结构简单且检测效率高。
Description
技术领域
本发明涉及生物医学技术领域，特别是涉及一种荧光检测系统、方法和PCR扩增分析装置。
背景技术
分子生物学技术的不断发展推动着生命科学仪器的研究。其中，PCR仪是以聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,简称PCR)为原理，对特定DNA片段进行大量扩增的设备，被广泛应用于疾控筛查、环境微生物检测和基因成分测量等各个领域。实时荧光定量PCR(Real-time qPCR)技术是在PCR扩增反应体系中加入特异性DNA荧光探针，通过对荧光信号的探测来实时监控DNA扩增情况的检测技术。
为提高检测效率，常采用多个独立荧光探测光路传播通道并行的方法来实现多通道检测。例如，采用多通道荧光定量PCR仪对一个PCR扩增反应体系中多个不同DNA片段进行扩增检测。多通道荧光定量PCR仪有多个能够独立工作探测对应荧光物的光学通道，由于多个激发光光源对应多个荧光发射通道的荧光检测单元，导致光学系统结构复杂，占用空间较大、材料成本高。
发明内容
基于此，有必要针对现有荧光定量PCR仪结构复杂的问题，提供一种荧光检测系统、方法和PCR扩增分析装置。
一种荧光检测系统，用于检测含有多种荧光物的待测样品，包括：
激发光源模块，与所述待测样品之间形成单个激发光通道，用于向待测样品发射同一波长的激发光，以激发多种荧光物产生不同波长的混合荧光；
光纤束，用于接收待测样品产生的所述混合荧光，并将所述混合荧光分为多束；
多个荧光探测模块，各个所述荧光探测模块用于对应接收分束后的所述混合荧光，并将接收到的所述混合荧光过滤后分别形成单一波长的荧光信号，随后将所述荧光信号转化为对应的电信号。
在其中一个实施例中，还包括PCB底板，各个所述荧光探测模块均设置于所述PCB底板上且与所述PCB底板电连接。
在其中一个实施例中，所述待测样品至所述光纤束入射端之间的光路方向与所述激发光源模块至所述待测样品之间的光路方向垂直。
在其中一个实施例中，所述激发光源模块内的光路方向与所述荧光探测模块内的光路方向垂直。
在其中一个实施例中，各个所述荧光探测模块内的光路方向相互平行。
在其中一个实施例中，所述光纤束为一转N结构。
在其中一个实施例中，包括以下中的至少一种：
所述激发光源模块在光路方向上依次设有光源、准直透镜、激发光滤光片和聚焦透镜；
所述荧光探测模块在光路方向上依次设有荧光准直透镜、荧光滤光片、荧光收集透镜和光电传感器件。
上述荧光检测系统，使用单波长的激发光激发待测样品使其产生多个波长的混合荧光，上述混合荧光通过光纤束被分束后分别进入对应的荧光探测模块，进入各个荧光探测模块内的多波长混合荧光被过滤后留下单波长荧光信号，单波长荧光信号转换为相应的电信号。通过采用一个激发光源使待测样品被激发生成多波长混合荧光信号，相比于设置多个激发光通道向待测样品投射不同波段的激发光，减少了光学元件个数，降低设备成本。另一方面，通过将混合荧光进行分束，分别同时投射到各个荧光探测模块，混合荧光在各个荧光探测模块内被过滤后留下单波长荧光信号，单波长荧光信号转换为对应的电信号，可一次同时获得多个通道检测结果，不需要机械移动机构来实现检测通道的切换。
一种PCR扩增分析装置，包括，主机和上述任意一项所述的荧光检测系统，所述荧光检测系统位于所述主机内。
一种荧光检测方法，包括以下步骤：
向含有多种荧光物的待测样品发射同一波长的激发光；
待测样品中多种荧光物被所述激发光激发，产生不同波段的混合荧光；
将所述混合荧光分束；
将分束后的混合荧光同时传输至对应的多个荧光检测通道内进行过滤形成对应的单波长的荧光信号；
将各个所述荧光检测通道内的所述荧光信号转换为电信号。
在其中一个实施例中，将所述混合荧光分束包括：采用光纤将所述混合荧光分为多束，所述光纤采用一转N结构。
附图说明
图1为本发明一实施例中的荧光检测系统的结构示意图。
图2为本发明一实施例中的荧光检测系统的荧光探测模块和PCB底板的俯视图。
具体实施方式
本发明能够以很多不同于在此描述的其它方式来实施，本领域技术人员可以在不违背本发明内涵的情况下做类似改进，因此本发明不受下面公开的具体实施例的限制。
在本发明的描述中，所使用的术语“垂直的”、“水平的”、“上”、“下”、“左”、“右”、“中心”、“纵向”、“横向”、“长度”等指示的方位或位置关系为基于附图所示的方位或位置关系，仅是为了便于描述本发明和简化描述。第一特征在第二特征“上”或“下”可以是第一和第二特征直接接触，或第一和第二特征通过中间媒介间接接触。术语“第一”、“第二”仅用于描述目的，而不能理解为指示或暗示相对重要性或者隐含指明所指示的技术特征的数量。在本发明的描述中，“多个”的含义是至少两个，例如两个，三个等，除非另有明确具体的限定。
在本发明中，除非另有明确的规定和限定，术语“安装”、“相连”、“连接”、“固定”等术语应做广义理解。当元件被称为“固定于”或“设置于”另一个元件，它可以直接在另一个元件上或者也可以存在居中的元件。当一个元件被认为是“连接”另一个元件，它可以是直接连接到另一个元件或者可能同时存在居中元件。
参阅图1所示，图1示出了本发明一实施例中的荧光检测系统的结构示意图，该荧光检测系统用于对核酸扩增进行实时定量检测。所述荧光检测系统也可以应用于其他基于荧光信号探测实现的实时定量或定性检测实验。
参阅图1所示，本发明一实施例提供的荧光检测系统包括激发光源模块100、光纤束200和荧光探测模块300。检测PCR扩增腔室10内容纳有待测样品。激发光源模块100作为激发光通道，用于向待测样品发射激发光使待测样品产生荧光，光纤束200用于接收待测样品发出的荧光，并将荧光传输至荧光探测模块300，荧光探测模块300作为荧光检测通道，用于对接收到荧光进行处理后将其转换为电信号，根据电信号强度判断检测结果。
本发明提供的荧光检测系统应用于对核酸扩增进行实时定量检测时，PCR扩增腔室10中容纳的待测样品为聚合酶链式反应(简称PCR)反应体系以及在PCR反应体系中添加的荧光物。荧光物与PCR反应体系中的核酸扩增反应引物整合。当PCR扩增反应结束后，激发光源模块100投射激发光到PCR扩增腔室10内的反应液中，反应液中的荧光物被激发光激发后发出荧光。从而使荧光检测系统能够通过检测荧光强度对待测样品进行定量分析或对待测样品的定性特征进行分析。
在本实施例中，PCR扩增腔室10中容纳的荧光物为FAM、JOE、TAMRA、ROX四种荧光基团。其中，用于激发荧光基团使荧光基团发出荧光的激发光波长范围分别为：
激发荧光基团FAM的激发光波长范围为：420nm～520nm；
激发荧光基团JOE的激发光波长范围为：420nm～560nm；
激发荧光基团TAMRA的激发光波长范围为：450nm～600nm；
激发荧光基团ROX的激发光波长范围为：480nm～630nm。
对上述四种用于激发荧光基团的激发光波长取交集，获得FAM、JOE、TAMRA、ROX四种荧光基团共同具有的激发光波长范围480nm～520nm。由此可知，四种荧光基团可以被一种单波长激发光同时激发。也就是说，波长范围在480nm～520nm的激发光可以保证使四种荧光基团均能够被有效地激发并产生对应波长的荧光。
参阅图1所示，荧光检测系统还包括PCB底板400，荧光探测模块300设置于PCB底板400上。与PCB底板400的设置对应地，荧光探测模块300上设有光电传感器件301，用于将荧光信号转换为电信号。光电传感器件301与PCB底板400电连接，以便将电信号进行处理，如转换为数字信号或图像等。
参阅图1所示，激发光源模块100向PCR扩增腔室10发射单波长的激发光，激发光源模块100包括光源110、准直透镜120、激发光滤光片130和聚焦透镜140。其中，光源110用于发出激发光，在光源110发出的激发光的光线传播方向上，依次排布准直透镜120、激发光滤光片130和聚焦透镜140。
光源110为用于发出特定波长的LED光源，在本实施例中，光源110选用490nmLED光源。由于PCR扩增腔室10中的FAM、JOE、TAMRA、ROX四种荧光基团存在相同波长范围的激发光，故波长为490nm的激发光可以同时有效地激发待测样品中的FAM、JOE、TAMRA、ROX四种荧光基团。采用一个光源110即可激发多种荧光基团，减少光源110个数。
参阅图1所示，准直透镜120为半球形结构，半球形结构的凹弧方向朝向光线传播方向，光源110位于准直透镜120口径的中部位置。
光源110发出的特定波长的激发光经准直透镜120进行准直，准直后的激发光传输至激发光滤光片130。激发光滤光片130将激发光进行过滤，滤除边缘光获得波长单一的准直光束。过滤后的激发光进入聚焦透镜140进行聚焦，增大光强。从聚焦透镜140聚焦后的激发光照射到PCR扩增腔室10内的待测样品上。
参阅图1所示，PCR扩增腔室10靠近激发光源模块100中聚焦透镜140的出光位置，从聚焦透镜140聚焦后发出的激发光直接投射到PCR扩增腔室10，可以保证进入PCR扩增腔室10内的激发光的光强。
PCR扩增腔室10内的待测样品被激发光投射后，荧光基团被激发光激发后发出荧光。
PCR扩增腔室10内存在FAM、JOE、TAMRA、ROX四种荧光基团，490nm波长的激发光可以同时激发任意一种荧光基团，此时，四种荧光基团被特定波长的激发光同时激发，并各自产生对应的特定波长的荧光。也就是说，由特定的单一波长的激发光投射至PCR扩增腔室10后，PCR扩增腔室10内产生四种不同波长的荧光。如，荧光基团FAM被激发产生与其自身对应的特定波长的荧光，荧光基团JOE被激发产生与其自身对应的特定波长的荧光、荧光基团TAMRA被激发产生与其自身对应的特定波长的荧光、荧光基团ROX被激发产生与其自身对应的特定波长的荧光。
为便于描述，将PCR扩增腔室10内待测样品被激发光激发后形成的多种波长的荧光称作混合荧光。待测样品被激发光激发后形成的混合荧光进入光纤束200。
光纤束200用于将混合荧光进行分束并作为载体进行光传输。参阅图1所示，光纤束200包括入射端210和出射端220。入射端210用于接收待测样品形成的混合荧光，出射端220与荧光探测模块300连接。在本实施例中，光纤束200包括四根光纤，以形成四个荧光通道。光纤束200为一转四结构，也就是说，四根光纤的一端合并作为光纤束200的入射端，四根光纤的另一端相互独立，作为光纤束200的出射端220，也就是说光纤束200具有四个出射端220。与光纤束200设置四个出射端220相对应地，荧光探测模块300设置为四个，以同时接收四个出射端220发出的混合荧光。
从PCR扩增腔室10出射的混合荧光共同进入光纤束200的入射端210，然后被分束至各个单根光纤并传输，最后从出射端220同时传导至对应地荧光探测模块300，各个荧光探测模块300内形成对应的探测光路，以实现多通道同时检测。
荧光探测模块300用于形成荧光信号检测通道，混合荧光经过检测通道进行预处理后转化为电信号。同时参阅图1和图2所示，与光纤束200的四个出射端220对应连接的荧光探测模块300也设置为四个，分别为第一探测模块310、第二探测模块320、第三探测模块330和第四探测模块340。四个荧光探测模块300的基本构造相同，下文主要以第一探测模块310为例进行介绍。
参阅图1所示，第一探测模块310包括第一探测光筒311、第一光纤接收端312、第一荧光准直透镜313、第一荧光滤光片314、第一荧光收集透镜315和第一光电传感器件316。第一探测光筒311位于PCB底板400上，第一探测光筒311具有腔室。PCB底板400与荧光探测模块300电连接的同时，可以起到支撑及密封第一探测光筒311的作用。第一光纤接收端312位于第一探测光筒311的顶端，用于与光纤束200的出射端220连接以将混合荧光导入至第一探测光筒311内。在第一探测光筒311内部的荧光通道上，从上至下依次设置第一荧光准直透镜313、第一荧光滤光片314、第一荧光收集透镜315和第一光电传感器件316。
进入第一探测光筒311内的混合荧光依次经过第一荧光准直透镜313、第一荧光滤光片314和第一荧光收集透镜315到达第一光电传感器件316。其中，第一光纤接收端312投射至第一探测光筒311内的混合荧光先经过第一荧光准直透镜313。第一荧光准直透镜313将经过的混合荧光准直形成平行且准直的光束。被准直后的混合荧光投射至第一荧光滤光片314。第一荧光滤光片314对混合荧光进行过滤，混合荧光在第一荧光滤光片314的出射端被过滤成单波长的荧光信号，并向第一荧光收集透镜315投射。第一荧光收集透镜315将单波长的荧光信号进行聚焦后投射至第一光电传感器件316。第一光电传感器件316可将荧光信号转换为电流信号。电流信号的强弱，可以通过与第一光电传感器件316连接的PCB底板400进行处理后，在相应器件上显示，比如在显示屏上显示。
参阅图1和图2所示，与第一探测模块310构造相同地，第二探测模块320包括第二探测光筒321、第二光纤接收端322、第二荧光准直透镜323、第二荧光滤光片324、第二荧光收集透镜325和第二光电传感器件326。第三探测模块330包括第三探测光筒331、第三光纤接收端332、第三荧光准直透镜(图中未示出)、第三荧光滤光片(图中未示出)、第三荧光收集透镜325(图中未示出)和第三光电传感器件(图中未示出)。第四探测模块340包括第四探测光筒341、第四光纤接收端342、第四荧光准直透镜(图中未示出)、第四荧光滤光片(图中未示出)、第四荧光收集透镜(图中未示出)和第四光电传感器件(图中未示出)。不同的是，第一荧光滤光片314、第二荧光滤光片324、第三荧光滤光片和第四荧光滤光片的预设带宽不同，以使混合荧光被过滤后对应形成不同波长的单波长荧光信号。
例如，混合荧光经过第一探测模块310预处理后，形成的单波长荧光对应荧光基团FAM被激发后形成的荧光的波长。混合荧光经过第二探测模块320预处理后，形成的单波长荧光对应荧光基团JOE被激发后形成的荧光的波长。混合荧光经过第三探测模块330预处理后，形成的单波长荧光对应荧光基团TAMRA被激发后形成的荧光的波长。混合荧光经过第四探测模块340预处理后，形成的单波长荧光对应荧光基团ROX被激发后形成的荧光的波长。
参阅图1和图2所示，上述的第一探测模块310、第二探测模块320、第三探测模块330和第四探测模块340均设置在PCB底板400上。其中，第一探测模块310内的光路方向、第二探测模块320内的光路方向、第三探测模块330内的光路方向和第四探测模块340内的光路方向相互平行。由于第一探测模块310、第二探测模块320、第三探测模块330和第四探测模块340的构造基本相同，相互之间平行设置时，可以间隔很小的距离紧密排布在同一个PCB底板400上，可以使得荧光检测系统体积紧凑。
参阅图2所示，在俯视投影图上，PCB底板400的投影面积大于荧光探测模块300的投影面积。在本实施例中，荧光探测模块300中的光电传感器件301直接设置在PCB底板400上，且分别位于对应的荧光探测模块300内的光路上。例如第一探测模块310中的第一光电传感器件316被罩设在探测光筒311内。PCB底板400的面积足以覆盖荧光探测模块300中所有探测光筒的底端，以在承载荧光探测模块300的同时使荧光探测模块300形成密闭空间，防止荧光漏失。
参阅图1所示，光纤束200入射端210的光路方向与激发光源模块100的光路方向相互垂直。荧光探测模块300内的光路方向与激发光源模块100内的光路方向相互垂直。在本实施例中，当荧光检测系统进行检测过程中，PCR扩增腔室10位于激发光源模块100的光路方向与光探测模块300的光路方向相交的位置；待测样品至光纤束200入射端210之间的光路方向与激发光源模块100至待测样品之间的光路方向垂直。
在一具体实施方式中，光纤束200入射端210位于PCR扩增腔室10的正下方，激发光源模块100位于PCR扩增腔室10的正右方。如此设置，相比于将激发光源模块100和光纤束200入射端210设置在同一方向上，即设置在PCR扩增腔室10的左右两侧，将光纤束200入射端210与激发光源模块100设置为相互垂直的方式，可以避免激发光源模块100发出的激发光直接传导至光纤束200入射端210，造成光串扰。另一方面，由于PCR扩增腔室10容量一般在20uL～100uL，体积较小，激发光源模块100出光端需要对准PCR扩增腔室10中心位置，光纤束200入射端210也需对准PCR扩增腔室10中心位置，相较于将激发光源模块100和光纤束200入射端210设在PCR扩增腔室10的同侧，将光纤束200入射端210与激发光源模块100相互垂直设置，可以避免其中一个无法对准PCR扩增腔室10中心。
上述的荧光检测系统中PCR扩增腔室10内的荧光基团种类不限于本实施例所示意的四种，只要是可以被同一波长的激发光同时激发发出对应荧光，均可利用本实施例提供的荧光检测系统进行实时检测，只需相应变更光纤束200及荧光探测模块300的数量即可。
荧光检测系统的工作原理为：激发光源模块100内的光源110发出单波长的激发光，激发光经准直透镜120后形成准直光束，准直光束经过激发光滤光片130被过滤掉边缘光，最后经聚焦透镜140聚焦后投射在PCR扩增腔室10。PCR扩增腔室10中容纳的FAM、JOE、TAMRA、ROX四种荧光基团被激发光激发，发出各自对应波段的混合荧光。混合荧光从PCR扩增腔室10传播至光纤束200入射端210，然后被四根光纤分别传导至荧光探测模块300的光纤接收端，并进入探测光筒内。进入探测光筒内的混合荧光通过荧光准直透镜被准直，被准直后的混合荧光光束投射至荧光滤光片，荧光滤光片将混合荧光进行过滤以保留对应设定波长的单波长荧光信号，单波长荧光信号再经过荧光收集透镜进行聚焦后投射到电传感器件301上，以获取相对应的电信号。
上述荧光检测系统，一个激发光光源模块100发出的激发光可以同时激发多种荧光物，不需要设置多个发射激发光的激发光通道来依次激发待测样品中不同的荧光物，并通过光纤束200使得四个荧光探测模块300整合在一个PCB底板400上，减少了光学元件数量，缩小了系统占用空间，使系统更加小型化且耗材成本低。通过光纤束200将混合荧光同时传输至多个荧光探测模块300，各个荧光探测模块300内对混合荧光进行过滤留下所需波长的荧光信号，相比于在机械式转盘上设置不同的荧光检测通道依次转动来接收待测样品发出的荧光，避免了荧光检测通道相互切换带来的机械损伤和定位难度大的问题。
一种PCR扩增分析装置，包括：主机和上述的荧光检测系统，所述荧光检测系统位于所述主机内。上述的荧光检测系统体积紧凑，进而可使PCR扩增分析装置具有相对较小的体积。
一种荧光检测方法，包括以下步骤：
S100、向含有多种荧光物的待测样品发射同一波长的激发光。
激发光源模块100向待测样品投射激发光。其中，选用490nmLED光源作为发出激发光的光源110。光源110依次经过准直透镜120、激发光滤光片130和聚焦透镜140这些光学元件后，投射至待测样品。
S200、待测样品中多种荧光物被激发光激发，产生不同波段的混合荧光。
待测样品容纳于PCR扩增腔室10内，待测样品包含多种荧光物。所述的单波长的激发光可同时激发所有荧光物，使每种荧光物分别产生不同波长的混合荧光。也就是说，各荧光物质可以被同一波段范围的激发光激发，且生成不同波长的荧光。
S300、将所述混合荧光分束。
采用光纤束200接收上述的混合荧光，并将所述混合荧光分为多束。光纤束200采用一转N结构。光纤束200的入射端210用于接收待测样品发出的混合荧光，光纤束200的N个出射端220将混合荧光分束传输至对应探测每个荧光物的荧光探测模块300。
其中，待测样品至光纤束200入射端210之间的光路方向与激发光源模块100至待测样品之间的光路方向垂直。以避免激发光源模块100发出的激发光对光纤书200的入射端接收的混合荧光造成光串扰。
S400、将分束后的混合荧光同时传输至对应的多个荧光检测通道内进行过滤形成对应的单波长的荧光信号。
不同波长的混合荧光在荧光探测模块300内的荧光检测通道内被过滤，形成单一波长的荧光信号。多个荧光探测模块300与光纤束200的N个出射端220一一对应，以在对应的荧光探测模块300内获得对应单波长的荧光信号。
S500、将各个荧光检测通道内的荧光信号转换为电信号。
单波长的荧光信号投射至光电传感器件301上，光电传感器件301将光信号转化电信号。
上述荧光检测方法，以特定波长的单个光源110即可使待测样品形成多种波长的混合荧光，无需设置多个发射激发光的激发光通道。待测样品被激发后形成的混合荧光通过光纤束200分别传输至多个荧光探测模块300内同时进行过滤生成单波长荧光信号，并转换为电信号，可使得整个检测时间缩短。
以上所述实施例的各技术特征可以进行任意的组合，为使描述简洁，未对上述实施例中的各个技术特征所有可能的组合都进行描述，然而，只要这些技术特征的组合不存在矛盾，都应当认为是本说明书记载的范围。
以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。
Claims (10)
1.一种荧光检测系统，用于检测含有多种荧光物的待测样品，其特征在于，包括：
激发光源模块，与所述待测样品之间形成单个激发光通道，用于向待测样品发射同一波长的激发光，以激发多种荧光物产生不同波长的混合荧光；
光纤束，用于接收待测样品产生的所述混合荧光，并将所述混合荧光分为多束；
多个荧光探测模块，各个所述荧光探测模块用于对应接收分束后的所述混合荧光，并将接收到的所述混合荧光过滤后分别形成单一波长的荧光信号，随后将所述荧光信号转化为对应的电信号。
2.根据权利要求1所述的荧光检测系统，其特征在于，还包括PCB底板，各个所述荧光探测模块均设置于所述PCB底板上且与所述PCB底板电连接。
3.根据权利要求1所述的荧光检测系统，其特征在于，所述待测样品至所述光纤束入射端之间的光路方向与所述激发光源模块至所述待测样品之间的光路方向垂直。
4.根据权利要求1所述的荧光检测系统，其特征在于，所述激发光源模块内的光路方向与所述荧光探测模块内的光路方向垂直。
5.根据权利要求1所述的荧光检测系统，其特征在于，各个所述荧光探测模块内的光路方向相互平行。
6.根据权利要求1所述的荧光检测系统，其特征在于，所述光纤束为一转N结构。
7.根据权利要求1所述的荧光检测系统，其特征在于，包括以下中的至少一种：
所述激发光源模块在光路方向上依次设有光源、准直透镜、激发光滤光片和聚焦透镜；
所述荧光探测模块在光路方向上依次设有荧光准直透镜、荧光滤光片、荧光收集透镜和光电传感器件。
8.一种PCR扩增分析装置，其特征在于，包括：主机和权利要求1-7中任意一项所述的荧光检测系统，所述荧光检测系统位于所述主机内。
9.一种荧光检测方法，其特征在于，包括以下步骤：
向含有多种荧光物的待测样品发射同一波长的激发光；
待测样品中多种荧光物被所述激发光激发，产生不同波段的混合荧光；
将所述混合荧光分束；
将分束后的混合荧光同时传输至对应的多个荧光检测通道内进行过滤形成对应的单波长的荧光信号；
将各个所述荧光检测通道内的所述荧光信号转换为电信号。
10.根据权利要求9所述的荧光检测方法，其特征在于，将所述混合荧光分束包括：采用光纤将所述混合荧光分为多束，所述光纤采用一转N结构。
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