CN114272260B

CN114272260B - 一种海洋天然产物解酒保肝口服液、制备方法以及应用

Info

Publication number: CN114272260B
Application number: CN202111601916.9A
Authority: CN
Inventors: 张英
Original assignee: Dalian University
Current assignee: Dalian University
Priority date: 2021-12-24
Filing date: 2021-12-24
Publication date: 2024-02-09
Anticipated expiration: 2041-12-24
Also published as: CN114272260A

Abstract

本发明属于生物制药技术领域，公开了一种海洋天然产物解酒保肝口服液、制备方法以及应用。口服液成分为1.0～4.0wt％的海藻酸钠，0.1～1.0wt％的牛磺酸，0.1～1.0wt％的角鲨烯，余量为水。解酒保肝口服液可应用于制备解酒保肝药物，具有良好的解酒防醉效果，可以缓解过量饮酒后的头浑脑涨和头痛，还可以有效抑制醉酒呕吐。

Description

一种海洋天然产物解酒保肝口服液、制备方法以及应用

技术领域

本发明属于生物制药技术领域，具体涉及一种解酒保肝口服液、制备方法以及应用。

背景技术

酒在我国有着悠久的历史，已形成一种酒文化。作为生产和饮用酒的大国，无论是国庆家宴、亲朋聚会，还是迎宾送客、商务应酬，都少不了酒来助兴。2016年我国酒类消费规模近万亿元，并以每年约10.0％的速度增长，其中白酒消费约6000亿元，啤酒消费约1800亿元，葡萄酒消费约500亿元。现代医学证明少量饮酒可以促进血液循环、疏通经络、通络散寒、散湿止痛、调节心情、消除疲劳、缓解紧张、杀菌消炎，有利于身体健康，适量饮用一些低度酒，如啤酒、黄酒、葡萄酒等，还对身体具有一定的营养价值和辅助医疗的效果。但是长期大量饮酒则会对机体产生众多危害，如神经功能紊乱、胃肠道功能紊乱以及代谢性疾病等，其中酒精对肝脏的危害最为严重，可导致酒精性脂肪肝的出现，严重者甚至导致肝纤维化和肝硬化。有研究表明食道癌、肝癌发病率的升高也与饮酒有关。因此有效的解酒保肝产品受到大众的普遍关注。

解酒保肝产品作用核心是降低患者血中乙醇及其代谢产物浓度，减轻其对各器官的损伤。解酒产品根据解酒机制分为胃肠吸收抑制剂和代谢增强剂。胃肠吸收抑制剂可以抑制胃肠道对乙醇的吸收，加强乙醇在胃肠道的首过效应，降低血液中乙醇浓度；代谢增强剂的解酒机理是直接作用于肝脏代谢酶系，加速乙醇及其代谢产物的清除速率，减轻对组织和细胞的损伤。西方国家开发的解酒药多以合成药物为主,而亚洲国家则侧重天然产物的研究开发。目前通过合成方法研制解酒保肝药物并未取得实质性的进展，在继承传统医药的基础上大力开发天然产物解酒保肝产品已成为当前研究重点。

发明内容

为了克服现有技术的不足，本发明提供一种海洋天然产物解酒保肝口服液、制备方法以及应用，解酒保肝口服液各组分均为海洋天然产物，并且具有显著的解酒保肝效果。

本发明的上述目的是通过以下技术方案实现的：一种海洋天然产物解酒保肝口服液，成分为：1.0～4.0wt％的海藻酸钠，0.1～1.0wt％的牛磺酸，0.1～1.0wt％的角鲨烯，余量为水。

上述海洋天然产物解酒保肝口服液的制备方法包括以下步骤：

1.海藻酸钠缓慢加入去离子水中，高速搅拌得到海藻酸钠水溶液；

2.取上述部分海藻酸钠溶液，加入角鲨烯搅拌形成混悬液，然后将混悬液滴入0.1M的氯化钙溶液中钙化30min，形成海藻酸钙凝胶珠；

3.牛磺酸加入海藻酸钠水溶液中，搅拌使其溶解，再将上述含有角鲨烯的海藻酸钙凝胶珠加入溶液中，得到解酒保肝口服液。

本发明的进一步优选，所述海藻酸钠来源于海洋褐藻，分子量为100.0～300.0kD，海藻酸钠中古洛糖醛酸：甘露糖醛酸质量比为1.0～3.0。

本发明的进一步优选，所述海洋天然产物解酒保肝口服液的粘度为50.0-300.0mPa·s。

本发明还保护上述海洋天然产物解酒保肝口服液在制备解酒保肝药物的应用。

本发明与现有技术相比的有益效果是：(1)以海藻酸钠为主要原料开发解酒保肝口服液，海藻酸钠溶液遇到胃酸会形成水凝胶，贴附在胃黏膜表面，可以阻隔乙醇与胃黏膜直接接触，保护胃黏膜免受乙醇损伤。凝胶膜还可以延缓乙醇吸收入血的速度，保持血液中乙醇浓度稳定，并且酸凝胶在接触乙醇后还可以转化成醇凝胶，从而固定一部分乙醇不被吸收。由于血液中乙醇浓度稳定，乙醇脱氢酶、乙醛脱氢酶及乙醇氧化酶等代谢酶可以及时的清除血液中的乙醇，不会产生因乙醇浓度过高而代谢酶无法快速清除所造成的对神经系统的麻痹作用，避免醉酒现象的发生。牛磺酸和角鲨烯是辅助原料，对提高解酒保肝效果具有一定的辅助作用。牛磺酸对酒精性肝损伤具有很好的保护作用，可以减轻酒精引起的肝脏脂质化及防止脂质过氧化。角鲨烯可以促进肝细胞再生，从而改善肝脏功能，同时还可以提高超氧化歧化酶(SOD)活性，清除乙醇代谢生成的自由基，保护肝脏免受自由基损伤；(2)本配方各组分配伍搭配合理，协同起效，即可以延缓乙醇吸收入血速度起到防醉的作用，又可以加速乙醇分解起到解酒的作用，同时还具有保肝作用，因此本解酒保肝口服液具有良好的解酒防醉效果，可以缓解过量饮酒后的头浑脑涨和头痛，还可以有效抑制醉酒呕吐；(3)本发明提供的技术方案中解酒保肝口服液生产工艺流程操作简单，易于工艺放大和工业化生产。

具体实施方式

下面通过具体实施例详述本发明，但不限制本发明的保护范围。如无特殊说明，本发明所采用的实验方法均为常规方法，所用实验器材、材料、试剂等均可从商业途径获得。

本发明提供一种海洋天然产物解酒保肝口服液，包括：

1.0～4.0wt％的海藻酸钠；

0.1～1.0wt％的牛磺酸；

0.1～1.0wt％的角鲨烯；

余量为水。

本发明提供的海洋天然产物解酒保肝口服液包括1.0～4.0wt％的海藻酸钠，优选为1.0wt％、2.0wt％、3.0wt％、4.0wt％，或1.0～4.0wt％之间的任意值。在本发明中，所述海藻酸钠来源于海洋褐藻，分子量为100.0～300.0kD，优选150.0～250.0kD，海藻酸钠中古洛糖醛酸：甘露糖醛酸质量比为1.0～3.0，优选1.2～2.4。海藻酸钠溶液可以在胃黏膜表面形成水凝胶膜，阻隔乙醇与胃黏膜直接接触，保护胃黏膜免受乙醇损伤,同时水凝胶膜还可以吸附一定量的乙醇,可以延缓乙醇吸收入血速度。

本发明提供的海洋天然产物解酒保肝口服液还包括0.1～1.0wt％的牛磺酸，优选为0.1wt％、0.3wt％、0.5wt％、0.8wt％、1.0wt％，或0.1～1.0wt％之间的任意值。牛磺酸是牡蛎提取物的主要成分，对酒精性肝损伤具有很好的保护作用，可以减轻酒精引起的肝脏脂质化及防止脂质过氧化。本发明对所述牛磺酸的来源并没有特殊限制，一般市售或自行制备。

本发明提供的海洋天然产物解酒保肝口服液还包括0.1～1.0wt％的角鲨烯，优选为0.1wt％、0.3wt％、0.5wt％、0.8wt％、1.0wt％，或0.1～1.0wt％之间的任意值。角鲨烯是一种脂质不皂化物，是鲨鱼肝油的成分之一，具有增强机体免疫能力、改善性功能、抗衰老、抗疲劳、抗肿瘤等多种生理功能，还能够提高体内超氧化物歧化酶(SOD)活性，清除乙醇代谢生成的自由基，保护肝脏免受自由基损伤。本发明对所述角鲨烯的来源并没有特殊限制，一般市售或自行制备。

本发明还提供一种上述海洋天然产物解酒保肝口服液的制备方法，包括以下步骤：

A)海藻酸钠缓慢加入到去离子水中，高速搅拌得到海藻酸钠水溶液；

B)取上述部分海藻酸钠溶液，加入角鲨烯搅拌形成混悬液，然后将混悬液滴入0.1M的氯化钙溶液中钙化30min，形成海藻酸钙凝胶珠；

C)牛磺酸加入到海藻酸钠水溶液中，搅拌使其溶解，再将上述含有角鲨烯的海藻酸钙凝胶珠加入溶液中，得到解酒保肝口服液。

本发明提供的海洋天然产物解酒保肝口服液，粘度为50.0～300.0mPa·s，优选80.0～250.0mPa·s。

本发明还提供一种上述解酒保肝口服液在制备解酒保肝药物的应用。

为了进一步理解本发明，下面结合实施例对本发明提供的海洋天然产物解酒保肝口服液及制备方法以及应用进行说明，本发明的保护范围不受以下实施例的限制。

实施例1

1、本实施例提供的一种海洋天然产物解酒保肝口服液，包含如下组分：

(1)海藻酸钠含量2.5wt％，分子量为230.0kD，海藻酸钠中古洛糖醛酸：甘露糖醛酸质量比为1.63；

(2)牛磺酸0.2wt％；

(3)角鲨烯0.2wt％；

余量为水。

2、制备方法：

B)取上述部分海藻酸钠溶液加入角鲨烯搅拌形成混悬液，然后将混悬液滴入0.1M的氯化钙溶液中钙化30min，形成海藻酸钙凝胶珠；

C)牛磺酸加入到海藻酸钠水溶液中，搅拌使其溶解，再将上述含有角鲨烯的海藻酸钙凝胶珠加入到溶液中，得到解酒保肝口服液。

3、解酒保肝口服液黏度为185.7mPa·s。

对比例1

1、本对比例提供的一种海洋天然产物解酒保肝口服液，包含如下组分：

海藻酸钠含量2.5wt％，分子量为230.0kD，海藻酸钠中古洛糖醛酸：甘露糖醛酸质量比为1.63；

余量为水。

2、制备方法：

B)取10.0％的海藻酸钠溶液，将海藻酸钠溶液滴入0.1M的氯化钙溶液中形成海藻酸钙凝胶珠；

C)将上述海藻酸钙凝胶珠加入得到溶液中，得到解酒保肝口服液。

3、解酒保肝口服液黏度为183.4mPa·s。

对比例2

牛磺酸0.2wt％；

余量为水。

2、制备方法：

将牛磺酸加入到去离子水中，搅拌得到水溶液；

3、解酒保肝口服液黏度为3.1mPa·s。

对比例3

角鲨烯0.2wt％；

余量为水。

2、制备方法：

将角鲨烯加入到去离子水中，高速搅拌得到混悬液；

3、解酒保肝口服液黏度为9.7mPa·s。

实施例2

(1)海藻酸钠含量1.0wt％，分子量为230.0kD，海藻酸钠中古洛糖醛酸：甘露糖醛酸质量比为1.63；

(2)牛磺酸0.2wt％；

(3)角鲨烯0.2wt％；

余量为水。

2、制备方法：

制备方法同实施例1

3、解酒保肝口服液黏度为67.9mPa·s。

对比例4

海藻酸钠1.0wt％，分子量为230.0kD，海藻酸钠中古洛糖醛酸：甘露糖醛酸质量比为1.63；

余量为水。

2、制备方法：

制备方法同对比例1

3、解酒保肝口服液黏度为66.8mPa·s。

实施例3

(1)海藻酸钠含量2.5wt％，分子量为70.0kD，海藻酸钠中古洛糖醛酸：甘露糖醛酸质量比为1.51；

(2)牛磺酸0.2wt％；

(4)角鲨烯0.2wt％；

余量为水。

2、制备方法：

制备方法同实施例1

3、解酒保肝口服液黏度为53.8mPa·s。

对比例5

海藻酸钠含量2.5wt％，分子量为70.0kD，海藻酸钠中古洛糖醛酸：甘露糖醛酸质量比为1.51；

余量为水。

2、制备方法：

制备方法同对比例1

3、解酒保肝口服液黏度54.1mPa·s。

实施例4

(1)海藻酸钠含量2.5wt％，分子量为210.0kD，海藻酸钠中古洛糖醛酸：甘露糖醛酸质量比为0.67；

(2)牛磺酸0.2wt％；

(5)角鲨烯0.2wt％；

余量为水。

2、制备方法：

制备方法同实施例1

3、解酒保肝口服液黏度为205.3mPa·s。

对比例6

海藻酸钠含量2.5wt％，分子量为210.0kD，海藻酸钠中古洛糖醛酸：甘露糖醛酸质量比为0.67；

余量为水。

2、制备方法：

制备方法同对比例1

3、解酒保肝口服液黏度203.2

实施例5

海洋天然产物解酒保肝口服液动物实验研究：

1、实验方法：

(1)实验动物及分组

C57BL/6小鼠130只，雄性，体重15.0～30.0g，适应性饲养7天，随机分为空白组(10只)、模型组(10只)、海王金樽组(市场上销售的解酒药、10只)、实施例1组(10只)、对比例1组(10只)，对比例2组(10只)、对比例3组(10只)、实施例2组：(10只)、对比例4：(10只)、实施例3组：(10只)、对比例5组(10只)、实施例4组：(10只)、对比例6组(10只)。

(2)造模及给药

1)造模方式：除空白组外全部组，共120只，实验前禁食12h，用38°富裕老窖以0.15mL/10g体重灌服。

2)给药时间：造模前30min，灌胃给药1次。

3)给药剂量：模型组：0.25mL/10g的生理盐水；海王金樽组：阳性对照0.25mL/10g的海王金樽溶液，浓度为3.0wt％；实验组：0.25mL/10g的解酒保肝口服液。

(3)观察

1)观察并记录小鼠的活动情况：造模给药后观察。

具体指标：醉酒指标：以小鼠爬行不稳、后腹拖地、毛松散、闭眼不懂；醒酒指标：以活动自如、灵活、精神、毛顺滑。

2)观察小鼠醒酒时间和醒酒率：90min、120min、180min和240min。醒酒时间测定方法如下：测定自小鼠給酒至小鼠醉倒为醉倒时间，测定自小鼠給酒至小鼠恢复意识为恢复意识时间，醒酒时间＝恢复意识时间-醉倒时间，然后取10只小鼠醒酒时间平均值。

3)观察并记录24h内小鼠的死亡只数。

4)24h后采血测血液中乙醇浓度。

5)24h后取小鼠肝脏测测丙二醛含量。(丙二醛含量代表肝脏内的脂质氧化物浓度，也代表肝脏受损伤程度，含量越高肝脏受损伤程度越大)

实验方法：

①用预冷的PBS(0.01M，pH7.4)冲洗肝脏组织，取出残留液；

②将剪碎的组织与对应体积的PBS(组织样本：PBS＝1:9)，具体体积可根据实验需要调整，记录称重的组织；

③加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨；

④最后将匀浆液于5000g离心5～10min，取上清检测浓度备用。⑤丙二醛检测试剂盒ELISA法测丙二醛浓度。

2、实验结果见表1

表1

由表1可知，实施例1组具有良好的解酒保肝效果，醒酒时间较模型组缩短了53.1％，与海王金樽对照组相比醒酒时间也显著缩短；实施例1组醒酒率较模型组也显著提高，90min、120min、180min和240min醒酒率分别提高了20.0％、40.0％、80.0％和70.0％，并且180min和240min醒酒率分别达到了90.0％和100.0％，与海王金樽对照组相比90min、120min、180min和240min醒酒率也分别提高了20.0％、40.0％、40.0％和10.0％；24h后血液中的乙醇浓度较模型组下降了56.0％，与海王金樽对照组相比乙醇浓度也显著降低；肝脏中丙二醛浓度与模型组相比下降了19.9％，比海王金樽对照组略有降低，表明对肝脏的损伤有所减轻。对比例1组是单一海藻酸钠成分，不含有牛磺酸和角鲨烯成分，实验结果看对比例1组也具有较好的解酒保肝效果，醒酒时间虽然比实施例略低，但与模型组相比也缩短了45.3％，比对照组海王金樽也缩短很多；90min、120min、180min和240min醒酒率与模型组相比明显提高，但略低于实施例1组；24h后血液中乙醇浓度与模型组相比下降了49.3％，略低于实施例1组；肝脏中丙二醛浓度与模型组相比下降了13.3％，略低于实施例1组，表明对肝组织具有一定的保护作用。对比例2组和比例3组是单一组分牛磺酸和角鲨烯，实验结果显示它们虽然具有一定的解酒效果，但不是很明显，醒酒时间远远长于实施例1组和对比例1组，各个时间醒酒率也比实施例1组和对比例1组降低很多，血液中乙醇浓度与实施例1组和对比例1组相比也高很多，但是它们都具有一定的保肝效果，肝脏中丙二醛含量低于对比例1组。实施例2组与实施例1组相比海藻酸钠含量降为1.0％，牛磺酸与角鲨烯含量不变，实验结果显实施例2组示醒酒时间比实施例1组明显延长，各个时间醒酒率显著降低，血液中乙醇浓度也显著提高。实施例3组海藻酸钠分子量为70.0kD，远远低于实施例1组的230.0kD，牛磺酸与角鲨烯含量不变，实验结果显实施例3组示醒酒时间比实施例1组明显延长，各个时间醒酒率显著降低，血液中乙醇浓度也显著提高。实施例4组海藻酸钠中古洛糖醛酸：甘露糖醛酸质量比为0.67，远远低于实施例1组的1.63，牛磺酸与角鲨烯含量不变，实验结果显实施例4组示醒酒时间比实施例1组明显延长，各个时间醒酒率显著降低，血液中乙醇浓度也显著提高。

综上所述，组合配方口服液具有良好的解酒保肝效果，并且解酒保肝效果高于对照组海王金樽，同时组合配方的解酒效果与海藻酸钠含量、分子量和G/M比成正相关。该口服液解酒主要成分是海藻酸钠，牛磺酸和角鲨烯起辅助作用分，具有一定的保肝作用，能提高保肝效果。所以本口服液各组分配伍优势互补，得到了良好的解酒保肝效果，具有很高的市场开发潜力。

以上所述实施方式仅为本发明的优选实施例，而并非本发明可行实施的全部实施例。对于本领域一般技术人员而言，在不背离本发明原理和精神的前提下对其所作出的任何显而易见的改动，都应当被认为包含在本发明的权利要求保护范围之内。

Claims

1.一种海洋天然产物解酒保肝口服液，其特征在于，包括：

1.0～4.0wt％的海藻酸钠；

0.1～1.0wt％的牛磺酸；

0.1～1.0wt％的角鲨烯；

余量为去离子水；

其制备方法包括以下步骤：

(1)海藻酸钠缓慢加入去离子水中，高速搅拌得到海藻酸钠水溶液；

(2)取部分海藻酸钠水溶液，加入角鲨烯搅拌形成混悬液，然后将混悬液滴入0.1M的氯化钙溶液中钙化30min，形成海藻酸钙凝胶珠；

(3)牛磺酸加入剩余的海藻酸钠水溶液中，搅拌使其溶解，再将含有角鲨烯的海藻酸钙凝胶珠加入溶液中，得到解酒保肝口服液；

所述海藻酸钠来源于海洋褐藻，分子量为100.0～300.0kD，海藻酸钠中古洛糖醛酸：甘露糖醛酸质量比为1.0～3.0；所述解酒保肝口服液的粘度为50.0～300.0mPa·s。

2.一种如权利要求1所述的海洋天然产物解酒保肝口服液在制备解酒保肝药物中的应用。