CN109055140B - 一种健脑护肝露酒及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种健脑护肝露酒及其制备方法，属于配制酒技术领域。本发明工艺上创新性地通过低温条件下采用超声，微波复合酶法辅助提取芦荟中有效成分，在提高提取率的同时，因提取过程温度低，解决了传统水提醇沉法因温度过高使得芦荟中有效成分多糖结构遭到破坏问题，且温度低的条件也使得在保证提取率的同时大大降低了乙醇的耗费量，进一步的，采用此方法制备的健脑护肝露酒在解酒的同时，将低聚果糖与芦荟与二者协同作用，在解酒保肝的同时对人体肠道进行养护。并且，首次在护肝酒产品中添加L‑苏糖酸镁，及时补充由于饮酒而导致大脑中镁离子的缺失，从而预防酒精氧化破化大脑血脑屏障，从而达到健脑护肝的作用。

Description

一种健脑护肝露酒及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种健脑护肝露酒及其制备方法，属于配制酒技术领域。

背景技术

中国具有几千年悠久的酒文化历史，并且酒文化在中华大地上源远流长。众所周知，适量饮酒可以促进人体新陈代谢，加快血液循环，使人保持愉悦心情，亦可增强体质。但是，醉酒、过量饮酒却会对我们的身体造成损伤；过量饮酒除了会造成肠胃粘膜受损，肠道屏障通透性减弱，影响肠道吸收之外，还会加重肝脏代谢压力，对肝脏造成氧化损伤，情况严重时会导致脂肪肝，肝硬化。长期酗酒，酒精会脑增大组织梗死面积，酒精引起的神经元损害导致短暂性脑缺血，抑制延脑的呼吸中枢，造成呼吸停止，慢性酒瘾者的大脑皮质萎缩，记忆力衰退。

芦荟富含多种活性物质，据研究表明芦荟有治愈炎症、提高免疫力、增强胃肠功能、治疗糖尿病、抗癌、抗菌等多种功能。联合国粮农组织(FAO)把芦荟列为“21世纪人类的最佳保健品”。此外，芦荟多糖具有增强免疫能力，以及抗氧化作用。但是由于芦荟多糖的提取效率低，未得到较广泛的应用。

L-苏糖酸镁为新食品原料，富含镁离子，是一种新型的镁化合物。补充该类食物，神经炎症得到抑制，可以有效地防止酒精摄入破坏血脑屏障。由于大脑中递质释放、神经元兴奋性和感受态激活依靠镁(Mg2+)的调节。临床和实验证据表明，饮酒是导致组织中镁流失的主要原因之一。由于这种流失，血清中镁含量逐渐减少，而尿中镁含量排出量却增加了2-3倍。在酗酒者的细胞外和细胞内普遍存在低镁含量的情况，并且当脑耗竭镁时，也会伴随星形胶质细胞的耗竭，可能导致血脑屏障的破坏，严重的血管痉挛、缺血和血管破裂。

目前市场上鲜有护肝类别的配制酒，更鲜有保护大脑的配制酒。申请号为CN107118912A一种益智仁酒及其制备方法，也仅仅将各类中药组合物浸泡白酒制备而成，不具备实验性的科学依据。

因芦荟具有解酒作用，所以申请号为CN02144804.3公开了一种解酒健身茶冲剂，其采用芦荟全叶粉作为原料，且因目前对于芦荟的加工处理中，对于芦荟中有效成分的提取工艺的效率较低，导致芦荟利用率下降，而芦荟制品的功能性也大大降低。且目前较多采用水提醇沉，该方法温度较高，对多糖结构有所破坏，造成有效性下降。

发明内容

为了解决目前市场没有兼备健脑、改善记忆力和护肝另类功能酒的空白，以及芦荟加工过程中采用水提醇沉的方式温度较高，对芦荟中多糖结构的破坏的问题，本发明提供了一种健脑护肝露酒及其制备方法和一种芦荟中有效成分的提取方法，所述技术方案如下：

本发明的第一个目的在于提供一种改善记忆力、健脑护肝露酒制备方法，所述方法包括：

采用超声，微波复合酶法辅助提取芦荟中有效成分，获得芦荟提取物，所述有效成分包括芦荟粗多糖；

将芦荟提取物与低聚果糖、L-苏糖酸镁进行混合后，与原浆酒混合配制并且勾调至40～45°，制备得到健脑护肝露酒。

可选的，所述采用超声，微波复合酶法辅助提取芦荟中有效成分之前，还包括：制备芦荟凝胶汁；

所述采用超声，微波复合酶法辅助提取芦荟中有效成分，获得芦荟提取物包括：

25℃～30℃温度条件下在芦荟凝胶汁中加入0.25％-0.35％纤维素酶，加入乙醇提取有效成分，300-500W微波萃取，超声萃取10-20min，待芦荟提取物完全沉淀之后，离心取沉淀干燥后得到芦荟提取物。

可选的，所述在芦荟凝胶汁中加入0.25％-0.35％纤维素酶的温度条件为20-40℃，微波萃取温度条件为50-70℃，微波萃取时间为3-8min，所述超声萃取的频率为30-50Hz。

可选的，所述制备芦荟凝胶汁包括：

取新鲜芦荟，清洗、消毒、去皮、榨汁、提取、脱色、过滤后得到质量比为1：1芦荟凝胶汁。

可选的，所述将芦荟提取物与低聚果糖、L-苏糖酸镁进行混合包括：

按照体积计，将芦荟提取物100-200份、低聚果糖10-20份、L-苏糖酸镁1-2份加入混料机进行干燥料搅拌。

可选的，所述原浆酒酒精度为65％～75％。

本发明的第二个目的在于提供一种健脑护肝露酒，所述健脑护肝露酒根据上述方法制备而成。

本发明的第三个目的在于提供一种芦荟中有效成分的提取方法，所述方法用于提取芦荟粗多糖，所述方法包括：

在芦荟凝胶汁中加入0.25％-0.35％纤维素酶，加入乙醇提取有效成分，300-500W微波萃取，超声萃取10-20min。

可选的，所述在芦荟凝胶汁中加入0.25％-0.35％纤维素酶的温度条件为20-40℃，微波萃取温度条件为50-70℃，微波萃取时间为3-8min，所述超声萃取的频率为30-50Hz。

可选的，所述芦荟凝胶汁的制备方法包括：

取新鲜芦荟，清洗、消毒、去皮、榨汁、提取、脱色、过滤后得到1：1芦荟凝胶汁。

本发明有益效果是：

通过低温条件下采用超声，微波复合酶法辅助提取芦荟中有效成分，在提高提取率的同时，因提取过程温度低，解决了传统水提醇沉法因温度过高使得芦荟中有效成分多糖结构遭到破坏问题，且温度低的条件也使得在保证提取率的同时大大降低了乙醇的耗费量；进一步的，采用此方法制备的健脑护肝露酒在解酒的同时，因为添加了低聚果糖、L-苏糖酸镁使得芦荟凝胶与二者协同作用，在解酒保肝的同时对人体肠道进行养护，且预防酒精氧化给脑带来的氧化损伤。及时补充由于饮酒导致大脑镁离子的流失，从而达到健脑护肝的作用。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例中的技术方案，下面将对实施例描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。

图1为本发明制备健脑护肝露酒的步骤示意图。

具体实施方式

为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合附图对本发明实施方式作进一步地详细描述。

实施例一：

本实施例提供一种芦荟中有效成分的提取方法，所述有效成分包括芦荟粗多糖。

以新鲜芦荟叶为原料，且以去皮后得到的芦荟肉部分进行有效物质的提取；具体过程如下：

采用成熟的库拉索芦荟鲜叶，经过清洗、消毒、去皮、榨汁、脱色、过滤等处理得到澄清的1：1芦荟凝胶汁。

28℃下加入0.3％纤维素酶水解细胞壁，加入10倍体积的85％乙醇提取有效成分，60℃下，400W微波萃取5min，40Hz超声萃取15min，待芦荟提取物(芦荟粗多糖)完全沉淀之后，于4℃，5000r/min离心10min，取沉淀干燥后备用。

测得芦荟粗多糖提取率为0.3614％

实施例二

相对于实施例一，本实施例仅改变微波功率为300W，其余条件与实施例一相同；测得芦荟粗多糖提取率为0.3985％。

实施例三：

相对于实施例一，本实施例仅改变微波功率为500W，其余条件与实施例一相同；测得芦荟粗多糖提取率为0.4727％。

实施例四：

相对于实施例一，本实施例加入0.25％的纤维素酶水解细胞壁，其余条件与实施例一相同；测得芦荟粗多糖提取率为0.4160％。

实施例五：

相对于实施例一，本实施例加入0.35％的纤维素酶水解细胞壁，其余条件与实施例一相同；测得芦荟粗多糖提取率为0.4956％。

实施例六：

相对于实施例一，本实施例仅改变超声时间为10min，其余条件与实施例一相同；测得芦荟粗多糖提取率为0.5249％。

实施例七：

相对于实施例一，本实施例仅改变超声时间为20min，其余条件与实施例一相同；测得芦荟粗多糖提取率为0.5176％。

实施例八：

相对于实施例一，本实施例仅改变加入8倍体积的85％乙醇提取有效成分，其余条件与实施例一相同；测得芦荟粗多糖提取率为0.4985％。

实施例九：

相对于实施例一，本本实施例仅改变加入12倍体积的85％乙醇提取有效成分，其余条件与实施例一相同；测得芦荟粗多糖提取率为0.5073％。

根据实施例一至实施例九可知，采用本发明提供的超声，微波复合酶法辅助提取芦荟中有效成分，对于芦荟粗多糖的提取率可以达到0.3604％～0.5269％，相对现有技术对于芦荟粗多糖的提取率0.2％～0.3％的效果，本发明提供的超声、微波复合酶法辅助提取芦荟中有效成分方法提高了20％～76％。而且，本发明提供的超声，微波复合酶法由于在低温条件(25℃～30℃)下进行，微波辅助温度50℃～70℃，所以相对于目前较多采用的水提醇沉温度较高(高达90℃～95℃)的条件对多糖结构有所破坏的情况，本发明在低温及低微波功率条件下减少了对于芦荟中有效成分的破坏，而且，低温条件下也大大减少了乙醇的耗费量，降低了企业成本。

实施例十：

本发明实施例提供一种健脑护肝露酒的制备方法，该方法所使用的芦荟提取物即采用上述实施例一至实施例九中所述的提取方法进行提取；该制备方法包括：

1、健脑护肝露酒制备：将120份芦荟提取物、10份低聚果糖、1份L-苏糖酸镁、放入混料机，干混料搅拌；

2、将上述搅拌混合后的混合物加入1000份酒精度为70％的原浆酒勾调至42°的配制酒中，得到健脑护肝露酒。

实施例十一：

本实施例与实施例十所述的方法的区别在于低聚果糖的用量为20份，其余与实施例十相同。具体的，该制备方法包括：

1、健脑护肝露酒制备：将100份芦荟提取物、20份低聚果糖、1份L-苏糖酸镁放入混料机，干混料搅拌；

2、将上述搅拌混合后的混合物加入1000份酒精度为70％的原浆酒勾调至42°的配制酒中，得到健脑护肝露酒。

实施例十二：

本实施例与实施例十所述的方法的区别在于芦荟提取物的用量为200份，其余与实施例十相同。具体的，该制备方法包括：

1、健脑护肝露酒制备：将200份芦荟提取物、10份低聚果糖、1份L-苏糖酸镁放入混料机,干混料搅拌；

2、将上述搅拌混合后的混合物加入1000份酒精度为70％的原浆酒勾调至42°的配制酒中，得到健脑护肝露酒。

实施例十三：

本实施例与实施例十所述的方法的区别在于L-苏糖酸镁的用量为2份，其余与实施例十相同。具体的，该制备方法包括：

1、健脑护肝露酒制备：将100份芦荟提取物、10份低聚果糖、2份L-苏糖酸镁放入混料机,干混料搅拌；

2、将上述搅拌混合后的混合物加入1000份酒精度为70％的原浆酒勾调至42°的配制酒中，得到健脑护肝露酒。

为验证本发明提供的健脑护肝露酒的效果，下述采用小鼠实验进行结果验证：

一、小鼠急性酒精中毒后醒酒时间的影响

1.1实验材料

上述实施例十制备得到的酒精度42°的健脑护肝露酒，所使用的对照酒为原浆酒勾调后42°的白酒

昆明种雄性小鼠20只，体重(20±2)g，购于上海斯莱克实验动物责任有限公司。

1.2实验方法

小鼠预饲一周后，按体重随机分为2组：模型组；健脑护肝组

模型组：按照25mg/kg.bw灌胃42°白酒；

健脑护肝组：按照25mg/kg.bw用健脑护肝露酒灌胃

1.3小鼠醒酒指标的测定

记录给药、给酒时间，观察小鼠的活动状况及记录小鼠的翻正反射消失和翻正反射恢复时间。小鼠背部向下保持30s为翻正反射消失；醒酒则以小鼠翻正反射恢复，并且行动活动灵活自如，毛滑顺时候为判断标准。

醉酒潜伏期＝翻正反射消失时间—给酒的时间；

睡眠时间＝翻正反射恢复时间—翻正反射消失时间；

醒酒时间＝翻正反射恢复时间—给酒的时间

1.4实验结果

实验结果如表1所示：

表1实验结果

**P<0.01vs模型组；

由表1可知，相对于模型组，健脑护肝露酒对于小鼠的醉酒潜伏期有明显延长作用，睡眠时间和醒酒时间都有极显著的缩短。即可明显减少宿醉时间，加快醒酒时间。

二、急性酒精中毒小鼠血清中乙醇含量的影响

2.1实验材料

酒精度42°健脑护肝露酒，所使用的对照酒为原浆酒勾调后42°的白酒

昆明种雄性小鼠54只，体重(25±5)g，购于上海斯莱克实验动物责任有限公司。

2.2实验方法

随机分为3组，每组18只，即对照原浆酒模型组；低剂量健脑护肝露酒组(9mg/kg.bw)；中剂量健脑护肝露酒组(25mg/kg.bw)，灌胃方法同醒酒指标中的方法。

分别于灌胃酒后30、60、90、120、180、240min对小鼠进行眼眶取血，肝素抗凝管保存。为避免小鼠取血过多导致死亡，每次随机对每组中6只小鼠取血，每只小鼠取血2次，同一只小鼠取血间隔90min以上。

标准曲线：正常小鼠眼眶取血0.25mL，肝素抗凝管保存。用生理盐水稀释4倍，加入不同浓度的乙醇，然后再加4mL的3.4％高氯酸，混匀后静置30min，充分沉淀蛋白，于4℃、5000r/min离心8min；吸取上清0.1mL，加入4.9mL新配制的ADH-NAD+酶液，充分混匀，在室温静置反应90min后，于波长340nm测定吸光度。

实验样本的测定，各实验组小鼠取血后，加入高氯酸，然后按标准曲线的做法进行操作，测定吸光度。然后与标准曲线中吸光度对比，求出实验组小鼠的血液乙醇浓度。

2.3实验结果

低剂量组和中剂量组之间在90min～240min之间的血醇含量并没有显著差异。健脑护肝露酒对小鼠血液乙醇含量的降低作用从第120min时开始比较明显。从小鼠活动物理特征来观察，健脑护肝露酒组小鼠明显比模型组小鼠活泼，动作协调，没有明显的步履蹒跚现象。

三、小鼠慢性酒精性肝损伤的干预效果以及改善记忆力效果

3.1实验材料

酒精度42°健脑护肝露酒，所使用的对照酒为原浆酒勾调后42°的白酒

昆明种雄性小鼠40只，体重(20±2)g,购于上海斯莱克实验动物责任有限公司。

WMT-100型Morris水迷宫,配套软件及电脑摄像系统购自成都泰盟科技有限公司；超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)、一氧化氮(NO)、丙二醛(MDA)、试剂盒：南京建成生物工程研究所；内毒素(LPS)、白细胞介素1beta(IL-1)、白细胞介素10(IL-10)、肿瘤坏死因子TNF-alpha(TNF-a)酶联免疫试剂盒：R&D Co.(美国)；

3.2实验方法

动物分组：原浆酒对照模型组,健脑护肝露酒剂量(25mg/kg.bw),空白组,阳性对照组(复方鳖甲软肝片组500mg/kg.bw)。

健脑护肝组每天分2次于早8点，晚8点进行灌胃。灌胃先采用50％的42°健脑护肝露酒，第一周灌胃量为1.975g/kg.bw，第二周递增到2.370g/kg.bw.第三周为2.765g/kg.bw，第四周为3.160g/kg.bw。此后一直沿用此剂量，灌胃共计11周。

模型组、阳性组每天分2次于早8点，晚8点进行灌胃。灌胃先采用50％的42°原浆酒，第一周灌胃量为1.975g/kg.bw，第二周递增到2.370g/kg.bw.第三周为2.765g/kg.bw，第四周为3.160g/kg.bw。此后一直沿用此剂量，灌胃共计11周。阳性组在灌胃1小时候灌胃阳性药物；空白组灌胃与酒精等能量的葡萄糖溶液。

小鼠空间记忆能力考察：

Morris水迷宫实验包含4d训练实验和1d探索实验。实验用水槽为圆形，直径122cm，分为4个象限，在第Ⅱ象限中央设圆形平台，直径10cm，以透明有机玻璃制成，位于水平面下0.8cm左右，水中加入黑色染料(墨汁)，水温保持在22～24℃。在训练期间每只小鼠每天从4个不同起点入水训练4次，每次入水时间最长不超过1min，如果小鼠在1min内无法找到平台，则人为诱导小鼠到达平台；每次训练完毕后均让小鼠在平台上停留10s，以加深对空间线索的记忆。末次水迷宫训练结束24h后进行探索实验。第Ⅱ象限的平台被拆除，小鼠从一个新起点入水，对平台位置进行搜索。入水时间限定1min，记录小鼠找到平台的时间。

3.3实验结果

实验结果如表2、表3、表4、表5和表6所示：

表2：ALT指标

*P<0.05vs模型组，**P<0.01vs模型组；#P<0.05vs空白组，##P<0.01vs空白组

由表2可知，本发明提供的健脑护肝露酒能够缓解长期酒精灌胃造成的肝脏转氨酶含量升高，对肝细胞有一定的保护作用，抑制了肝细胞的肿胀和坏死，降低细胞膜的通透性，从而保证了肝脏的组织形态完整，减轻炎症浸润现象和血液内转氨酶含量。

表3：MDA、SOD、GSH指标

P<0.05vs模型组，**P<0.01vs模型组；#P<0.05vs空白组，##P<0.01vs空白组

由表3可知，本发明提供的健脑护肝露酒能够显著缓解由酒精导致的小鼠肝脏内MDA的合成增加趋势，健脑护肝组肝脏MDA含量与模型组相比具有一定的下降，另外，与模型组相比，健脑护肝组能够不同程度地提高小鼠肝脏的SOD值和GSH值。

表4：TC、TG、LDL

P<0.05vs模型组，**P<0.01vs模型组；#P<0.05vs空白组，##P<0.01vs空白组

由表4可知，本发明提供的健脑护肝露酒饮料对于TC、TG、LDL指标，均有显著降低作用，高剂量组则有极显著降低总胆固醇作用。

表5：TNF-a、IL-1B、IL-10

P<0.05vs模型组，**P<0.01vs模型组；#P<0.05vs空白组，##P<0.01vs空白组

由表5可知，与模型组相比，本发明提供的健脑护肝露酒能够显著降低小鼠肝脏的TNF-α值，阳性药的处理也具有显著降低的效果。

表6：水迷宫记忆能力考察

P<0.05vs模型组，**P<0.01vs模型组；#P<0.05vs空白组，##P<0.01vs空白组

由表6可知，与模型组相比，本发明提供的健脑护肝露酒能够显著改善小鼠记忆能力。并且健脑护肝露酒比较阳性药也有明显的效果。

以上所述仅为本发明的较佳实施例，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (3)

1.一种健脑护肝露酒的制备方法，其特征在于，所述方法包括：

采用超声、微波复合酶法辅助提取芦荟中有效成分，获得芦荟提取物，所述有效成分包括芦荟粗多糖；按照体积计，将芦荟提取物120份、低聚果糖10份、L-苏糖酸镁1份加入混料机进行干燥料搅拌，再与原浆酒混合配制并且勾调至42°，制备得到健脑护肝露酒；

其中，所述采用超声，微波复合酶法辅助提取芦荟中有效成分之前，还包括：制备芦荟凝胶汁；所述制备芦荟凝胶汁包括：取新鲜芦荟，清洗、消毒、去皮、榨汁、提取、脱色、过滤后得到质量比为1：1芦荟凝胶汁；

所述采用超声、微波复合酶法辅助提取芦荟中有效成分，获得芦荟提取物具体包括：28℃温度条件下在芦荟凝胶汁中加入0.3%纤维素酶，加入10倍体积的85%乙醇提取有效成分，400W微波萃取5min，40Hz超声萃取10min，待芦荟提取物完全沉淀之后，于 4℃，5000 r/min离心 10min，取沉淀干燥后，得到芦荟提取物。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述原浆酒的酒精度为65%~75%。

3.一种健脑护肝露酒，其特征在于，所述健脑护肝露酒是根据权利要求1或2所述的方法制备而成。

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