CN114262715A - 一种堆肥产品中抗性基因环境健康风险评估的方法 - Google Patents
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Abstract
一种堆肥产品中抗性基因环境健康风险的评估方法，所述的方法包括：采集堆肥鲜样和土壤样品，提取堆肥与土壤水溶性有机质，将携带抗性基因质粒与水溶性有机质混合，随后加入感受态E.coliDH5α混匀，培养一段时间后再在含有AMP抗生素的固体培养基与一般固体培养基上稀释涂布，培养后，取平板并计数，根据计数结果计算抗性基因转移频率；再根据堆肥与土壤样品的转移频率计算抗性基因环境风险阈值，用于评估堆肥中抗性基因环境健康风险。本发明从抗性基因水平转移的全新角度来评估堆肥产品中抗性基因的环境健康风险，相较于传统的直接检测抗性基因丰度，本发明的评估方法更精准，为堆肥产品风险评估提供了有力支撑。
Description
技术领域
本发明属于生物技术领域和环境保护领域，具体涉及到一种堆肥产品中抗性基因环境健康风险的评估方法。
背景技术
堆肥是一种固废有机资源再利用的有效手段，减少有机固废污染的同时，回收利用有机废物中可利用的有机质。但有机固废中所含的残留抗生素，重金属，有机污染物和消毒剂等会诱导抗性基因的产生。堆肥技术能够削减抗性基因(Huang et al.,2021，Environmental effects and risk control of antibiotic resistance genes in theorganic solid waste aerobic composting system:A review.Frontiers ofEnvironmental Science&Engineering,15(6),127.)，从而控制有机固废的环境健康风险。而抗性基因能够在微生物间发生水平转移，如果耐药菌获取水平转移的抗性基因(Nolivoset al.,2019，Role of AcrAB-TolC multidrug efflux pump in drug-resistanceacquisition by plasmid transfer.Science,364(6442),778-782.)，其环境风险更高。而目前，抗性基因的环境风险仅通过丰度高低初步判断，评估方式对于不环境风险并不是精准的。因此缺乏一种准确评估堆肥产品中抗性基因环境风险的方法。为更精确判断堆肥产品中抗性基因的环境健康风险，寻找一种能够准确、便捷可行的堆肥抗性基因环境健康风险的评估方法是十分必要的。
发明内容
本发明的目的在于提供一种堆肥产品中抗性基因的环境健康风险评估方法，以期准确、便捷的不同类型、不同阶段堆肥产品的环境健康风险。
为了实现本发明的目的，本发明提供一种堆肥产品中抗性基因的环境健康风险评估方法，其步骤包括：
取堆肥产品鲜样，提取堆肥有机质；
将上述堆肥有机质与携带抗性基因质粒混匀培育得到混合液；
向混合液中加入感受态大肠杆菌混匀后，培养得到培养液；
分别制备无抗生素的固体培养基和相应抗生素的固体培养基，并将培养液分别在所述的两种类型固体培养基平板上涂布培养；
分别对培养后的两种类型的固体培养基平板上的菌落进行计数，得到菌落个数；并按下述公式计算抗性基因水平转移频率P堆肥产品：
其中NAMP表示相应抗生素的固体培养基上菌落个数；其中NLB表示无抗生素的固体培养基上菌落个数；
对土壤样品同样按上述方法进行处理，得到两种类型的固体培养基平板上的菌落个数，并按同样的公式计算土壤样品抗性基因转移频率P土壤样品；
根据下述公式计算抗性基因水平转移风险阈值，评估堆肥产品抗性基因环境健康风险：
在具体实施方式中，所述堆肥产品或土壤样品有机质的提取方法如下：按照质量比堆肥产品或土壤样品1g：5-15ml超纯水，进行震荡20-28h，离心4000-6000rpm，取上清液过滤膜提取。优选地，其中震荡的时间为24h，离心为5000rpm，取上清液过0.22μm滤膜提取。
在一个具体实施方式中，所述携带抗性基因质粒是pUC19；所述相应抗生素是氨苄青霉素，即相应抗生素的固体培养基中添加氨苄青霉素。
在一个优选实施方式中，所述大肠杆菌E.coli DH5α。
在一个具体实施方式中，向混合液中加入感受态大肠杆菌混匀是在混合液中加入感受态大肠杆菌后，充分混匀后先冰浴20-40min，随后在40-45℃中摇匀60-120s，再在冰浴中降温2-4min；所述培养得到培养液是于37℃，震荡培养。优选地，向混合液中加入感受态大肠杆菌混匀是在混合液中加入感受态大肠杆菌后，充分混匀后先冰浴30min，随后在42℃中摇匀100s，再在冰浴中降温3min；所述培养得到培养液是于37℃，震荡培养24h。
在一个具体实施方式中，所述涂布培养具体是，涂布在抗生素固体培养基平板上稀释80-120倍，涂布无抗生素的固体培养基平板稀释105-107倍，并于37℃培养20-28h。
其中，根据阈值评估堆肥产品抗性基因环境健康风险，其中阈值在0.1以下为无风险，阈值在0.1～1.0之间为低风险，阈值在1.0以上为高风险。
关于风险阈值标准，是按下述方式确定：抗性基因水平转移具有扩散传染的特性，因此将1.0作为高风险阈值。堆肥中抗性基因会随着施肥过程进入土壤环境，若风险阈值大于1.0则随着堆肥中宿主微生物向土壤微生物传播，随着微生物生长繁殖，水平转移出去的抗性基因数量会逐渐增多，因此具有高风险；如果风险阈值在0.1～1.0间，随着微生物生长抗性基因会越传越少，几代后抗性基因丰度会极大削减，因此为低风险；如果风险阈值在0.10以下，则一到两代内抗性基因丰度就会极大削减，因此确定为无风险。例如，当风险阈值检测结果为1.1，假设堆肥样品中有一百万个耐药菌携带抗性基因，则在这些耐药菌扩散第一代后则会出现一百一十万个耐药菌(1000000×1.1＝1100000)，以此类推随着抗性基因扩散，会产生越来越多的耐药菌，因此风险高；再例如，如果风险阈值为0.01，则一百万个耐药菌进过第一代扩散后就仅剩余一万个，随着几代的扩散，抗性基因最终会逐渐减少，因此风险低。
本发明从抗性基因水平转移的全新角度来评估堆肥产品中抗性基因的环境健康风险，相较于传统的直接检测抗性基因丰度，本发明的评估方法更精准，为堆肥产品风险评估提供了有力支撑。这是因为抗性基因最主要的健康风险就是产生超级细菌，而超级细菌的出现除了自己突变出耐药基因就是从环境中通过水平转移获取其它抗性基因，而传统的丰度检测仅能代表一种堆肥中静态的抗性基因含量，不能去预测将来抗性基因会如何变化，而水平转移测试则是一种动态的能够预测将来抗性基因的变化趋势，因此用于评估健康风险更精准
附图说明
图1各实施例的风险阈值检测结果及等级。
具体实施方式
为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚明白，以下结合具体实施例，并参照附图，对本发明作进一步的详细说明。
在本发明的一些实施例中，提取堆肥产品中溶解性有机质时，首先采集腐熟市政污泥堆肥产品、腐熟畜禽粪便堆肥产品、未腐熟市政污泥堆肥产品、未腐熟畜禽粪便堆肥产品、市政污泥与土壤样品，采集深度为20～30cm，共采集3个平行样品，放在-20℃保存样品，备用。
实施例1
1)提取腐熟市政污泥堆肥产品和土壤样品有机质：分别称取10g腐熟市政污泥堆肥样品与北京顺义玉米地土壤样品，分别按照质量比1g：10ml，加入超纯水震荡24h，5000rpm离心后，取上清液过0.22μm滤膜，分别提取得到溶解性腐熟市政污泥堆肥样品和土壤样品有机质备用；
2)分别取100μl堆肥有机质和土壤有机质，并分别与25μl pUC19(1ng/μl)在25℃，200rpm震荡混匀2h；
3)在两种混合液中分别加入100μl感受态E.coli DH5α，充分混匀后先冰浴30min，随后在42℃中摇匀90s，再在冰浴中降温3min，随后分别接种至775μl LB培养基中，37℃，120rpm震荡，培养1h；
4)然后分别取100μl细胞悬浮液涂各自在100mg/L ampicillin LB固体培养基表面，37℃培养24h，其中涂布在AMP+稀释100倍，涂布在LB上稀释106倍；
5)对各个固体培养基上的细菌个数进行计数，根据腐熟市政污泥堆肥样品和土壤样品的有机质，分别按照下述公式计算腐熟市政污泥堆肥样品和土壤样品的抗性基因水平转移频率：
其中NAMP表示LB固体培养基上菌落个数；
其中NLB表示LB固体培养基上菌落个数
6)根据下述公式计算抗性基因水平转移风险阈值
其中PC表示堆肥产品抗性基因转移频率；
其中Ps表示土壤抗性基因转移频率；
7)风险阈值检测结果如表1所示，其风险阈值为0.0045，属于无风险等级。
实施例2
1)提取腐熟畜禽粪便堆肥产品：称取10g堆肥样品，按照质量比1g：10ml，加入超纯水震荡24h，5000rpm离心后，取上清液过0.22μm滤膜，提取的溶解性有机质备用；
2)取100μl堆肥有机质与25μl pUC19(1ng/μl)在25℃，200rpm震荡混匀2h；
3)在混合液中加入100μl感受态E.coli DH5α，充分混匀后先冰浴30min，随后在42℃中摇匀90s，再在冰浴中降温3min，随后接种至775μl LB培养基中，37℃，120rpm震荡，培养1h；
4)100μl细胞悬浮液涂在100mg/L ampicillinLB固体培养基表面，37℃培养24h，其中涂布在AMP+稀释100倍，涂布在LB上稀释106倍；
5)对固体培养基上的细菌个数进行计数。
对北京顺义玉米地土壤样品同样按上述步骤进行，得到相应的固体培养基上的细菌个数。
基于实施例一相同的计算公式计算抗性基因水平转移频率和抗性基因水平转移风险阈值，其风险阈值检测结果如表1和图1所示，其风险阈值为0.0249，属于无风险等级。
实施例3
1)提取未腐熟市政污泥堆肥产品有机质：称取10g堆肥样品，按照质量比1g：10ml，加入超纯水震荡24h，5000rpm离心后，取上清液过0.22μm滤膜，提取的溶解性有机质备用；
2)取100μl堆肥有机质与25μl pUC19(1ng/μl)在25℃，200rpm震荡混匀2h；
3)在混合液中加入100μl感受态E.coli DH5α，充分混匀后先冰浴30min，随后在42℃中摇匀90s，再在冰浴中降温3min，随后接种至775μl LB培养基中，37℃，120rpm震荡，培养1h；
4)100μl细胞悬浮液涂在100mg/L ampicillinLB固体培养基表面，37℃培养24h，其中涂布在AMP+稀释100倍，涂布在LB上稀释106倍；
5)对各个固体培养基上的细菌个数进行计数。
对北京顺义玉米地土壤样品同样按上述步骤进行，得到相应的固体培养基上的细菌个数。
基于实施例一相同的计算公式计算抗性基因水平转移频率和抗性基因水平转移风险阈值，其风险阈值检测结果如表1和图1所示，其风险阈值为0.6982，属于中风险等级。
实施例4
1)提取未腐熟畜禽粪便堆肥产品有机质：称取10g堆肥样品，按照质量比1g：10ml，加入超纯水震荡24h，5000rpm离心后，取上清液过0.22μm滤膜，提取的溶解性有机质备用；
2)取100μl堆肥有机质与25μl pUC19(1ng/μl)在25℃，200rpm震荡混匀2h；
3)在混合液中加入100μl感受态E.coli DH5α，充分混匀后先冰浴30min，随后在42℃中摇匀90s，再在冰浴中降温3min，随后接种至775μl LB培养基中，37℃，120rpm震荡，培养1h；
4)100μl细胞悬浮液涂在100mg/L ampicil LB固体培养基表面，37℃培养24h，其中涂布在AMP+稀释100倍，涂布在LB上稀释106倍；
5)对各个固体培养基上的细菌个数进行计数。
对北京顺义玉米地土壤样品同样按上述步骤进行，得到相应的固体培养基上的细菌个数。
基于实施例一相同的计算公式计算抗性基因水平转移频率和抗性基因水平转移风险阈值，其风险阈值检测结果如表1和图1所示，其风险阈值为0.4415，属于中风险等级。
实施例5
1)提取市政污泥有机质：称取10g堆肥样品，按照质量比1g：10ml，加入超纯水震荡24h，5000rpm离心后，取上清液过0.22μm滤膜，提取的溶解性有机质备用；
2)取100μl堆肥有机质与25μl pUC19(1ng/μl)在25℃，200rpm震荡混匀2h；
3)在混合液中加入100μl感受态E.coli DH5α，充分混匀后先冰浴30min，随后在42℃中摇匀90s，再在冰浴中降温3min，随后接种至775μl LB培养基中，37℃，120rpm震荡，培养1h；
4)100μl细胞悬浮液涂在100mg/L ampicillinLB固体培养基表面，37℃培养24h，其中涂布在AMP+稀释100倍，涂布在LB上稀释106倍；
5)对各个固体培养基上的细菌个数进行计数。
对北京顺义玉米地土壤样品同样按上述步骤进行，得到相应的固体培养基上的细菌个数。
基于实施例一相同的计算公式计算抗性基因水平转移频率和抗性基因水平转移风险阈值，其风险阈值检测结果如表1和图1所示，其风险阈值为2.9609，属于高风险等级。
表1堆肥产品与土壤样品中转移频率及风险阈值
由表1中可以看出，本发明中改进的方法与传统方法结果相似，利用本发明的堆肥产品抗性基因环境健康风险评估方法由于能预测将来抗性基因的变化趋势因此更加准确、便捷评价堆肥产品的环境健康风险。
以上所述的具体实施例，对本发明的目的、技术方案和有益效果进行了进一步详细说明，应理解的是，以上所述仅为本发明的具体实施例而已，并不用于限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所做的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (9)
1.一种堆肥产品中抗性基因环境健康风险的评估方法，其特征在于，包括如下步骤：
取堆肥产品鲜样，提取堆肥有机质；
将上述堆肥有机质与携带抗性基因质粒混匀培育得到混合液；
向混合液中加入感受态大肠杆菌混匀后，培养得到培养液；
分别制备无抗生素的固体培养基和相应抗生素的固体培养基，并将培养液分别在所述的两种类型固体培养基平板上涂布培养；
分别对培养后的两种类型的固体培养基平板上的菌落进行计数，得到菌落个数；并按下述公式计算抗性基因水平转移频率P堆肥产品：
其中NAMP表示相应抗生素的固体培养基上菌落个数；其中NLB表示无抗生素的固体培养基上菌落个数；
对土壤样品同样按上述方法进行处理，得到两种类型的固体培养基平板上的菌落个数，并按同样的公式计算土壤样品抗性基因转移频率P土壤样品；
根据下述公式计算抗性基因水平转移风险阈值，评估堆肥产品抗性基因环境健康风险：
2.根据权利要求1所述的评估方法，其特征在于：所述堆肥产品或土壤样品有机质的提取方法如下：按照质量比堆肥产品或土壤样品1g：5-15ml超纯水，进行震荡20-28h，离心4000-6000rpm，取上清液过滤膜提取。
3.根据权利要求2所述的评估方法，其特征在于：其中震荡的时间为24h，离心为5000rpm，取上清液过0.22μm滤膜提取。
4.根据权利要求1所述的评估方法，其特征在于：所述携带抗性基因质粒是pUC19；所述相应抗生素是氨苄青霉素。
5.根据权利要求1所述的评估方法，其特征在于：所述大肠杆菌E.coli DH5α。
6.根据权利要求1所述的评估方法，其特征在于：向混合液中加入感受态大肠杆菌混匀是在混合液中加入感受态大肠杆菌后，充分混匀后先冰浴20-40min，随后在40-45℃中摇匀60-120s，再在冰浴中降温2-4min；所述培养得到培养液是于37℃，震荡培养。
7.根据权利要求6所述的评估方法，其特征在于：向混合液中加入感受态大肠杆菌混匀是在混合液中加入感受态大肠杆菌后，充分混匀后先冰浴30min，随后在42℃中摇匀100s，再在冰浴中降温3min；所述培养得到培养液是于37℃，震荡培养24h。
8.根据权利要求1所述的评估方法，其特征在于：所述涂布培养具体是，涂布在抗生素固体培养基平板上稀释80-120倍，涂布无抗生素的固体培养基平板稀释105-107倍，并于37℃培养20-28h。
9.根据权利要求1所述的评估方法，其特征在于：根据阈值评估堆肥产品抗性基因环境健康风险，其中阈值在0.1以下为无风险，阈值在0.1～1.0之间为低风险，阈值在1.0以上为高风险。
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|---|---|
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Citations (15)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101115837A (zh) * | 2005-02-14 | 2008-01-30 | 三得利株式会社 | 可检测出环境负荷化学物质的转基因植物 |
| CA2779796A1 (en) * | 2009-11-04 | 2011-05-12 | Dsm Ip Assets B.V. | Talaromyces transformants |
| CN102260699A (zh) * | 2011-07-06 | 2011-11-30 | 山东大学 | 极端嗜酸性氧化亚铁硫杆菌的无标记基因敲除方法 |
| AU2012321079A1 (en) * | 2011-11-11 | 2013-05-30 | Genomatica, Inc. | Eukaryotic organisms and methods for increasing the availability of cytosolic acetyl-CoA, and for producing 1,3-butanediol |
| CN103409439A (zh) * | 2013-08-22 | 2013-11-27 | 国家海洋局第三海洋研究所 | 用于嗜酸硫化芽孢杆菌硫氧化还原酶基因同源表达的方法 |
| CN105018637A (zh) * | 2015-08-24 | 2015-11-04 | 济南大学 | tetA基因在检测土壤抗生素抗性污染水平中的应用与方法 |
| CN105255994A (zh) * | 2015-11-13 | 2016-01-20 | 浙江大学 | 一种土壤抗生素污染对人体健康影响的评估方法 |
| CN106220257A (zh) * | 2016-07-21 | 2016-12-14 | 浙江省农业科学院 | 一种基于降低有机肥中磺胺耐药菌及其耐药基因污染的畜禽粪便堆肥工艺 |
| CN109781830A (zh) * | 2019-01-30 | 2019-05-21 | 中国环境科学研究院 | 堆肥产品中植物可利用态重金属的测定及风险评估方法 |
| CN111560446A (zh) * | 2020-03-24 | 2020-08-21 | 南华大学 | 一种污水中游离态抗生素抗性基因的定量检测方法 |
| CN111944914A (zh) * | 2020-07-16 | 2020-11-17 | 中国科学院生态环境研究中心 | 一种基于抗性基因及毒力因子基因评价水体健康风险的方法 |
| CN113388608A (zh) * | 2021-06-17 | 2021-09-14 | 中国环境科学研究院 | 一种堆肥中胞外dna的提取方法 |
| US20220108401A1 (en) * | 2020-07-23 | 2022-04-07 | Fmr Llc | Machine Learning Portfolio Simulating and Optimizing Apparatuses, Methods and Systems |
| CN114509420A (zh) * | 2022-04-19 | 2022-05-17 | 广东工业大学 | 一种评估抗生素耐药基因迁移风险的方法 |
| CN115062933A (zh) * | 2022-06-01 | 2022-09-16 | 生态环境部南京环境科学研究所 | 水环境中抗生素残留的微生物耐药性多层级风险评估方法 |
-
2021
- 2021-12-28 CN CN202111626751.0A patent/CN114262715B/zh active Active
Patent Citations (15)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101115837A (zh) * | 2005-02-14 | 2008-01-30 | 三得利株式会社 | 可检测出环境负荷化学物质的转基因植物 |
| CA2779796A1 (en) * | 2009-11-04 | 2011-05-12 | Dsm Ip Assets B.V. | Talaromyces transformants |
| CN102260699A (zh) * | 2011-07-06 | 2011-11-30 | 山东大学 | 极端嗜酸性氧化亚铁硫杆菌的无标记基因敲除方法 |
| AU2012321079A1 (en) * | 2011-11-11 | 2013-05-30 | Genomatica, Inc. | Eukaryotic organisms and methods for increasing the availability of cytosolic acetyl-CoA, and for producing 1,3-butanediol |
| CN103409439A (zh) * | 2013-08-22 | 2013-11-27 | 国家海洋局第三海洋研究所 | 用于嗜酸硫化芽孢杆菌硫氧化还原酶基因同源表达的方法 |
| CN105018637A (zh) * | 2015-08-24 | 2015-11-04 | 济南大学 | tetA基因在检测土壤抗生素抗性污染水平中的应用与方法 |
| CN105255994A (zh) * | 2015-11-13 | 2016-01-20 | 浙江大学 | 一种土壤抗生素污染对人体健康影响的评估方法 |
| CN106220257A (zh) * | 2016-07-21 | 2016-12-14 | 浙江省农业科学院 | 一种基于降低有机肥中磺胺耐药菌及其耐药基因污染的畜禽粪便堆肥工艺 |
| CN109781830A (zh) * | 2019-01-30 | 2019-05-21 | 中国环境科学研究院 | 堆肥产品中植物可利用态重金属的测定及风险评估方法 |
| CN111560446A (zh) * | 2020-03-24 | 2020-08-21 | 南华大学 | 一种污水中游离态抗生素抗性基因的定量检测方法 |
| CN111944914A (zh) * | 2020-07-16 | 2020-11-17 | 中国科学院生态环境研究中心 | 一种基于抗性基因及毒力因子基因评价水体健康风险的方法 |
| US20220108401A1 (en) * | 2020-07-23 | 2022-04-07 | Fmr Llc | Machine Learning Portfolio Simulating and Optimizing Apparatuses, Methods and Systems |
| CN113388608A (zh) * | 2021-06-17 | 2021-09-14 | 中国环境科学研究院 | 一种堆肥中胞外dna的提取方法 |
| CN114509420A (zh) * | 2022-04-19 | 2022-05-17 | 广东工业大学 | 一种评估抗生素耐药基因迁移风险的方法 |
| CN115062933A (zh) * | 2022-06-01 | 2022-09-16 | 生态环境部南京环境科学研究所 | 水环境中抗生素残留的微生物耐药性多层级风险评估方法 |
Non-Patent Citations (9)
| Title |
|---|
| MARTINEZ J. 等: "Antibiotics and antibiotic resistance genes in natural environments", 《SCIENCE》 * |
| 余丽梅;宋超;张聪;陈家长;: "养殖水产品中磺胺类药物的检测方法及残留分析研究进展", 江苏农业科学, no. 09 * |
| 刘博;周方;刘翔;李淼;: "游离态四环素类抗生素抗性基因在土壤中的吸附", 中国给水排水, no. 03 * |
| 刘燕 等: "4种网络交易的粪肥中抗生素抗性基因 多样性分析和传播风险评估", 《暗算与环境工程》 * |
| 夏湘勤 等: "环丙沙星肋、环丙沙星胁迫猪粪生物转化中抗性基因微生物响应分析", 《环境科学研究》 * |
| 夏湘勤 等: "畜禽粪便中氟哇诺酮类抗生素的生物转化与机制研究进展", 《农业环境科学学报》 * |
| 张?;王静;: "水环境抗生素残留及其生态与健康影响", 湖北医药学院学报, no. 06 * |
| 张毓森;叶军;苏建强;: "农田生态系统抗生素抗性研究进展与挑战", 浙江大学学报(农业与生命科学版), no. 06 * |
| 陈桂淋;苏帆;武广元;: "我国地下水抗生素污染及风险评估研究进展", 广东化工, no. 03 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN114262715B (zh) | 2023-07-28 |
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