CN114259422B - 美白护肤品及方格星虫多糖的提取方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开一种美白护肤品及方格星虫多糖的提取方法，美白护肤品包括方格星虫多糖，首先，所述方格星虫多糖可显著抑制酪氨酸酶活性(P＜0.05)，并且随着受试浓度的提高，方格星虫多糖对酪氨酸酶的抑制效果逐渐增强(P＜0.05)，然后，方格星虫多糖具有降低皮肤黑色素含量，美白皮肤的功效，最后，所述方格星虫多糖不能通过杀灭黑色素细胞而发挥美白作用，即方格星虫多糖作用温和、无毒副作用。
Description
技术领域
本发明涉及护肤品技术领域，特别涉及一种美白护肤品及方格星虫多糖的提取方法。
背景技术
皮肤白晳是许多东方女性所追求的肌肤状态，众多消费者希望通过美白化妆品来提亮自己的肤色。人体肤色是由黑色素的含量和分布决定的，黑色素由基底层的黑素细胞产生，通过黑素细胞的树突状结构传递给基底细胞，再随细胞上行至表皮层。酪氨酸酶是该过程中的限速酶，因此市面上的美白类化妆品的有效成分大多以抑制酪氨酸酶的活性为主。
传统的美白活性成分具有细胞毒性明显、刺激性强、致敏性高及不良反应大等缺点，很难满足广大消费者的需求。
发明内容
本发明的主要目的是提出一种美白护肤品及方格星虫多糖的提取方法，旨在解决现有技术中美白活性成分具有细胞毒性明显、刺激性强、致敏性高及不良反应大等缺点，很难满足广大消费者的需求的问题。
本发明进一步提出一种美白护肤品，所述美白护肤品包括方格星虫多糖。
可选地，所述美白护肤品中，所述方格星虫多糖的质量分数为0.01～10％。
可选地，所述美白护肤品包括美白乳液、美白膏霜、美白精华液或者美白柔肤水。
为实现上述目的，本发明提出一种方格星虫多糖的提取方法，所述方格星虫多糖适用于如上所述的美白护肤品，所述方格星虫多糖的提取方法包括以下步骤：
S10、将方格星虫粉碎并在碱性条件下与胰蛋白酶和碱性蛋白酶混合、搅拌、离心，洗去可溶性蛋白，得到沉淀物A；
S20、将所述沉淀物A与水混合并搅拌得到水悬浮液，向所述水悬浮液中加入乙醇溶液并搅拌，离心，得到沉淀物B；
S30、将所述沉淀物B表面的乙醇进行挥发处理，得到粗制多糖；
S40、将所述粗制多糖与PH为9～12的碱性水解液混合，在85～95℃下水解4～6h，离心去渣后，进行冷冻干燥处理，得到所述方格星虫多糖。
可选地，在步骤S10中，所述胰蛋白酶和所述碱性蛋白酶质量之比为4～6:1。
可选地，所述步骤S20包括：
S201、将所述沉淀物A与水混合并搅拌得到水悬浮液；
S202、向所述水悬浮液中加入质量分数为95％的乙醇溶液并搅拌混合，使得所述混合液中所述乙醇的质量分数为70％；
S203、将所述混合液离心并去上清，得到沉淀物B。
可选地，所述步骤S30包括：
S301、在真空条件下，向所述沉淀物B吹氮气、氦气及氩气中的一种，得到粗制多糖。
可选地，在步骤S40中，所述碱性水解液为NaOH溶液或者NaOH和NaHCO3的混合溶液。
可选地，在步骤S40中，所述粗制多糖和所述碱性水解液的质量比为1︰2～4。
可选地，在步骤S40中，在进行冷冻干燥处理时，先在-15～-25℃进行预冷冻，然后在-55～-65℃进行冷冻干燥处理。
本发明的技术方案中，提出一种美白护肤品，包括方格星虫多糖，首先，所述方格星虫多糖可显著抑制酪氨酸酶活性(P＜0.05)，并且随着受试浓度的提高，方格星虫多糖对酪氨酸酶的抑制效果逐渐增强(P＜0.05)，然后，方格星虫多糖具有降低皮肤黑色素含量，美白皮肤的功效，最后，所述方格星虫多糖不能通过杀灭黑色素细胞而发挥美白作用，即方格星虫多糖作用温和、无毒副作用。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图示出的结构获得其他的附图。
图1为方格星虫多糖对体外培养的鼠黑色素瘤细胞B16增殖活性的影响示意图；
图2为方格星虫多糖对酪氨酸酶活性的影响示意图；
图3为涂抹空白对照样品的皮肤黑色素含量变化示意图；
图4为在5周内的不同时间点，涂抹方格星虫多糖样品的皮肤黑色素的含量变化示意图；
图5为与涂抹空白对照样品的皮肤相比，在第4及第5周，涂抹方格星虫多糖样品的皮肤的黑色素含量变化示意图；
图6为本发明提出的方格星虫多糖的提取方法的一实施例的流程示意图。
本发明目的的实现、功能特点及优点将结合实施例，参照附图做进一步说明。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明的一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
需要说明，若本发明实施例中有涉及方向性指示(诸如上、下、左、右、前、后、外、内……)，则该方向性指示仅用于解释在某一特定姿态(如附图所示)下各部件之间的相对位置关系、运动情况等，如果该特定姿态发生改变时，则该方向性指示也相应地随之改变。
另外，若本发明实施例中有涉及“第一”、“第二”等的描述，则该“第一”、“第二”等的描述仅用于描述目的，而不能理解为指示或暗示其相对重要性或者隐含指明所指示的技术特征的数量。由此，限定有“第一”、“第二”的特征可以明示或者隐含地包括至少一个该特征。另外，全文中出现的“和/或”的含义，包括三个并列的方案，以“A和/或B”为例，包括A方案、或B方案、或A和B同时满足的方案。另外，各个实施例之间的技术方案可以相互结合，但是必须是以本领域普通技术人员能够实现为基础，当技术方案的结合出现相互矛盾或无法实现时应当认为这种技术方案的结合不存在，也不在本发明要求的保护范围之内。
传统的美白活性成分具有细胞毒性明显、刺激性强、致敏性高及不良反应大等缺点，很难满足广大消费者的需求。
鉴于此，本发明提出一种美白护肤品及方格星虫多糖的提取方法，旨在解决现有技术中美白活性成分具有细胞毒性明显、刺激性强、致敏性高及不良反应大等缺点，很难满足广大消费者的需求的问题。
本发明提出一种美白护肤品，所述美白护肤品包括方格星虫多糖。
本发明的技术方案中，首先，所述方格星虫多糖可显著抑制酪氨酸酶活性(P＜0.05)，并且随着受试浓度的提高，方格星虫多糖对酪氨酸酶的抑制效果逐渐增强(P＜0.05)，然后，方格星虫多糖具有降低皮肤黑色素含量，美白皮肤的功效，最后，所述方格星虫多糖不能通过杀灭黑色素细胞而发挥美白作用，即方格星虫多糖作用温和、无毒副作用。
具体地，对方格星虫多糖进行如下测试：
1、方格星虫多糖体外对鼠黑色素瘤细胞B16增殖活性的影响
将B16细胞接种于含有10％FBS、1％双抗(100U/mL青霉素，0.1g/L硫酸链霉素)的RPMI-1640培养基，于37℃、饱和湿度、5％CO2细胞培养箱中培养。取对数生长期细胞，以0.25％胰酶消化，细胞计数后接种B16细胞于96孔细胞培养板中，并使每孔含有细胞数为5×103个。24h后，倒掉培养板中的旧培养基，换成含有不同浓度方格星虫多糖的无血清培养基。实验组每个剂量设8个平行孔，空白对照组同样设8孔。于37℃、饱和湿度、5％CO2环境中继续培养。培养24h及48h后，加MTT染液(MTT终浓度为0.5mg/mL)并继续培养4h，弃上清，每孔加DMSO100μL，震荡5min后以酶标仪检测波长570nm处吸光度A，计算B16细胞增殖活性。
细胞增殖活性(％)＝(A实验组/A空白组)×100％
参照图1可知，无论方格星虫多糖处理B16细胞是24h还是48h，不同浓度的方格星虫多糖均不影响B16黑色素瘤细胞的增殖活性，一方面提示方格星虫多糖不能通过杀灭黑色素细胞而发挥美白作用，另一方面也提示方格星虫多糖作用温和、无毒副作用。
2、检测方格星虫多糖体外抑制酪氨酸酶活性试验
通过构建酪氨酸酶催化反应体系，来评价方格星虫多糖对酪氨酸酶的抑制效果。在pH＝6.8磷酸缓冲液体系中，酪氨酸酶可催化L-酪氨酸产生黑色素，在475nm处具有最大吸收峰。通过在反应体系中添加酪氨酸酶抑制剂，减少黑色素的生成，利用黑色素生成量的减少程度，来评价抑制剂对酪氨酸酶的抑制效果。
酪氨酸酶催化反应体系如表1所示。使用pH为6.8磷酸缓冲液溶解，将方格星虫多糖稀释成相应受试浓度0mg/mL，0.3125mg/mL、0.625mg/mL、1.25mg/mL、2.5mg/mL、5mg/mL、10mg/mL、20mg/mL。
表1酪氨酸酶催化反应体系(mL)
按照表1顺序，加样结束后，37℃水浴下恒温反应20min，在475nm处测定各管吸光值。抑制率(I)计算公式如下：I(％)＝[(A-B)-(C-D)]/(A-B)×100％，式中，A、B、C、D为对应反应管反应结束后在475nm处的吸光值。
实验结果显示，方格星虫多糖在不同浓度(0mg/mL，0.3125mg/mL、0.625mg/mL、1.25mg/mL、2.5mg/mL、5mg/mL、10mg/mL、20mg/mL)下抑制酪氨酸酶的试验结果，如图2所示：与空白对照相比较，任何浓度的方格星虫多糖均可显著抑制酪氨酸酶活性(P＜0.05)，并且随着受试浓度的提高，方格星虫多糖对酪氨酸酶的抑制效果逐渐增强(P＜0.05)，既方格星虫多糖剂量与对酪氨酸酶的抑制效果之间存在剂量效应关系。
3、检测方格星虫多糖对皮肤黑色素含量的影响
采用去离子水稀释方格星虫多糖，制成质量分数为1％的水溶液，进行美白功效测试，并以去离子水为空白对照。
进行美白功效试验时，按照《化妆品接触性皮炎诊断标准及处理原则》选择符合纳入条件的受试者，以左、右手臂前臂内侧作为试验区域，操作人员测定涂抹空白对照水和方格星虫多糖水溶液的受试者试验部位皮肤黑色素含量，测试期为5周。获得31名受试者相应数据后进行统计分析，判断使用前后皮肤黑色素含量变化。
以皮肤健康志愿者的左、右前臂内侧3.0cm×3.0cm区域为受试部位，按2mg/cm2的用量涂抹于受试部位，一侧涂抹方格星虫多糖样品，另一侧涂抹空白样品。每天早、晚各使用1次，实验期间，受试者在实验部位不能涂抹任何化妆品，受试者在连续使用化妆品后第1周、第2周、第3周、第4周、第5周，采用皮肤黑色素和血红素测试仪(MexameterMX18，德国CK电子公司生产)测试受试者使用方格星虫多糖水溶液前后黑色素含量MI变化，从而确定方格星虫多糖的美白功效。
实验结果显示，黑色素含量值越大，皮肤则越黑；反之，皮肤则越白。涂抹空白对照样品的皮肤，在5周内的不同时间点，黑色素含量均无显著变化(图3)。涂抹方格星虫多糖样品的皮肤，第3、4、5周所测得的黑色素含量值均较第1周显著降低(P＜0.05)；此外，第5周所测得的黑色素含量值还较第2周显著降低(P＜0.05)。方格星虫多糖水溶液可显著降低皮肤黑色素含量，并且随着使用时间的延长，黑色素含量逐步降低(图4)。与涂抹空白对照样品的皮肤相比，在第4及第5周，涂抹方格星虫多糖样品的皮肤的黑色素含量均显著降低(P＜0.05)，说明方格星虫多糖具有降低皮肤黑色素含量，美白皮肤的功效(图5)。
综上，首先，所述方格星虫多糖可显著抑制酪氨酸酶活性(P＜0.05)，并且随着受试浓度的提高，方格星虫多糖对酪氨酸酶的抑制效果逐渐增强(P＜0.05)，然后，方格星虫多糖具有降低皮肤黑色素含量，美白皮肤的功效，最后，所述方格星虫多糖不能通过杀灭黑色素细胞而发挥美白作用，即方格星虫多糖作用温和、无毒副作用，如此使得本发明提出的包括方格星虫多糖的美白护肤品，可显著抑制酪氨酸酶活性，降低皮肤黑色素含量，美白皮肤的功效，且作用温和、无毒副作用，深受广大消费者欢迎。
进一步地，所述美白护肤品中，所述方格星虫多糖的质量分数为0.01-10％，例如，所述方格星虫多糖的质量分数可以为0.01％、0.02％、0.03％、0.04％、0.05％、0.06％、0.07％、0.08％、0.09％及0.1％等。
进一步的，所述美白护肤品包括美白乳液、美白膏霜、美白精华液或者美白柔肤水。
本发明提出一种方格星虫多糖的提取方法，本发明附图中，图6为本发明提出的美白护肤品的制备方法的一实施例的流程示意图，参照图6，包括以下步骤：
步骤S10、将方格星虫粉碎并在碱性条件下与胰蛋白酶和碱性蛋白酶混合、搅拌、离心，洗去可溶性蛋白，得到沉淀物A；
具体地，在步骤S10中，所述胰蛋白酶和所述碱性蛋白酶质量之比为4～6:1。
进一步地，粉碎的所述方格星虫与蛋白酶混合在PH为7～9的碱性溶液中进行水解反应，水解反应完成后向水解液中加入PH为1.5～2.5的酸性溶液调节PH值至中性，避免所述沉淀。
需要说明的是，所述碱性溶液可以是NaOH溶液或者NaOH和NaHCO3的混合溶液，所述酸性溶液可以是稀盐酸，醋酸溶液等，本实施例对此不作限定。
为了除尽可溶性蛋白，向所述沉淀物A中加入PH为1.5～2.5的稀盐酸水，然后离心与去上清，重复2-3次，从而完全洗去可溶性蛋白。
步骤S20、将所述沉淀物A与水混合并搅拌得到水悬浮液，向所述水悬浮液中加入乙醇溶液并搅拌，离心，得到沉淀物B；
具体地，所述步骤S20包括：
S201、将所述沉淀物A与水混合并搅拌得到水悬浮液；
S202、向所述水悬浮液中加入质量分数为90～96％的乙醇溶液并搅拌混合，使得所述混合液中所述乙醇的质量分数为65～75％；
S203、将所述混合液离心并去上清，得到沉淀物B。
步骤S30、将所述沉淀物B表面的乙醇进行挥发处理，得到粗制多糖；
具体地，所述步骤S30包括：
S301、在真空条件下，向所述沉淀物B吹氮气、氦气及氩气中的一种，得到粗制多糖。
步骤S40、将所述粗制多糖与PH值为9～12的碱性水解液混合，在85～95℃下水解4-6h，离心去渣后，进行冷冻干燥处理，得到所述方格星虫多糖。
需要说明的是，优选水解液的pH值10.3～11.3、水解温度为88～92℃、水解时间为4h的条件下进行水解反应。
具体地，在步骤S40中，所述碱性水解液为NaOH溶液或者NaOH和NaHCO3的混合溶液。
进一步地，在步骤S40中，所述粗制多糖和所述碱性水解液的质量比为1︰2～4。
具体地，在步骤S40中，在进行冷冻干燥处理时，先在-15～-25℃进行预冷冻，然后在-55～-65℃进行冷冻干燥处理。
以下给出本发明提出的美白护肤品的制备方法的一实施例：
(1)将方格星虫粉碎与PH为7～9的NaOH溶液或者NaOH和NaHCO3的混合溶液混合然后与胰蛋白酶和碱性蛋白酶按照质量比为4～6:1的混合酶混合、搅拌、离心，洗去可溶性蛋白，得到沉淀物A，将沉淀物与PH为1.5～2.5的稀盐酸混合调节PH值至中性，然后离心与去上清，重复2-3次，从而完全洗去可溶性蛋白；
(2)将所述沉淀物A与水混合并搅拌得到水悬浮液，向所述水悬浮液中加入质量分数为90～96％的乙醇溶液并搅拌混合，使得所述混合液中所述乙醇的质量分数为65～75％，将所述混合液离心并去上清，得到沉淀物B；
(3)在真空条件下，向所述沉淀物B吹氮气、氦气及氩气中的一种，得到粗制多糖；
(4)将所述粗制多糖与PH值为9～12的NaOH溶液或者NaOH和NaHCO3的混合溶液混合，在85～95℃下水解4～6h，离心去渣后，先在-15～-25℃进行预冷冻，然后在-55～-65℃进行冷冻干燥处理，得到所述方格星虫多糖。
以下结合具体实施例对本发明的技术方案作进一步详细说明，应当理解，以下实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
实施例1
(1)将方格星虫粉碎与PH为9的NaOH溶液混合然后与胰蛋白酶和碱性蛋白酶按照质量比为6:1的混合酶混合、搅拌、离心，洗去可溶性蛋白，得到沉淀物A，将沉淀物与PH为2.5的稀盐酸混合调节PH值至中性，然后离心与去上清，重复2次，从而完全洗去可溶性蛋白；
(2)将所述沉淀物A与水混合并搅拌得到水悬浮液，向所述水悬浮液中加入质量分数为96％的乙醇溶液并搅拌混合，使得所述混合液中所述乙醇的质量分数为75％，将所述混合液离心并去上清，得到沉淀物B；
(3)在真空条件下，向所述沉淀物B吹氮气，得到粗制多糖；
(4)将所述粗制多糖与PH值12的NaOH溶液混合，在95℃下水解6h，离心去渣后，先在-25℃进行预冷冻，然后在-65℃进行冷冻干燥处理，得到所述方格星虫多糖。
实施例2
(1)将方格星虫粉碎与PH为7的NaOH和NaHCO3的混合溶液混合然后与胰蛋白酶和碱性蛋白酶按照质量比为4:1的混合酶混合、搅拌、离心，洗去可溶性蛋白，得到沉淀物A，将沉淀物与PH为1.5的稀盐酸混合调节PH值至中性，然后离心与去上清，重复3次，从而完全洗去可溶性蛋白；
(2)将所述沉淀物A与水混合并搅拌得到水悬浮液，向所述水悬浮液中加入质量分数为90％的乙醇溶液并搅拌混合，使得所述混合液中所述乙醇的质量分数为65％，将所述混合液离心并去上清，得到沉淀物B；
(3)在真空条件下，向所述沉淀物B吹氦气，得到粗制多糖；
(4)将所述粗制多糖与PH值为9的NaOH溶液混合，在85℃下水解4h，离心去渣后，先在-15℃进行预冷冻，然后在-55℃进行冷冻干燥处理，得到所述方格星虫多糖。
实施例3
(1)将方格星虫粉碎与PH为8的NaOH溶液混合然后与胰蛋白酶和碱性蛋白酶按照质量比为5:1的混合酶混合、搅拌、离心，洗去可溶性蛋白，得到沉淀物A，将沉淀物与PH为2的稀盐酸混合调节PH值至中性，然后离心与去上清，重复2次，从而完全洗去可溶性蛋白；
(2)将所述沉淀物A与水混合并搅拌得到水悬浮液，向所述水悬浮液中加入质量分数为95％的乙醇溶液并搅拌混合，使得所述混合液中所述乙醇的质量分数为70％，将所述混合液离心并去上清，得到沉淀物B；
(3)在真空条件下，向所述沉淀物B吹氩气中的一种，得到粗制多糖；
(4)将所述粗制多糖与PH值为11的NaOH和NaHCO3的混合溶液混合，在90℃下水解5h，离心去渣后，先在-20℃进行预冷冻，然后在-60℃进行冷冻干燥处理，得到所述方格星虫多糖。
实施例4
(1)将方格星虫粉碎与PH为7.5的NaOH和NaHCO3的混合溶液混合然后与胰蛋白酶和碱性蛋白酶按照质量比为4.5:1的混合酶混合、搅拌、离心，洗去可溶性蛋白，得到沉淀物A，将沉淀物与PH为2.2的稀盐酸混合调节PH值至中性，然后离心与去上清，重复3次，从而完全洗去可溶性蛋白；
(2)将所述沉淀物A与水混合并搅拌得到水悬浮液，向所述水悬浮液中加入质量分数为93％的乙醇溶液并搅拌混合，使得所述混合液中所述乙醇的质量分数为71％，将所述混合液离心并去上清，得到沉淀物B；
(3)在真空条件下，向所述沉淀物B吹氮气，得到粗制多糖；
(4)将所述粗制多糖与PH值为10的NaOH和NaHCO3的混合溶液混合，在92℃下水解4.5h，离心去渣后，先在-22℃进行预冷冻，然后在-62℃进行冷冻干燥处理，得到所述方格星虫多糖。
实施例5
(1)将方格星虫粉碎与PH为8.5的NaOH溶液混合然后与胰蛋白酶和碱性蛋白酶按照质量比为5.5:1的混合酶混合、搅拌、离心，洗去可溶性蛋白，得到沉淀物A，将沉淀物与PH为1.8的稀盐酸混合调节PH值至中性，然后离心与去上清，重复2次，从而完全洗去可溶性蛋白；
(2)将所述沉淀物A与水混合并搅拌得到水悬浮液，向所述水悬浮液中加入质量分数为92％的乙醇溶液并搅拌混合，使得所述混合液中所述乙醇的质量分数为68％，将所述混合液离心并去上清，得到沉淀物B；
(3)在真空条件下，向所述沉淀物B吹氦气，得到粗制多糖；
(4)将所述粗制多糖与PH值为10.5的NaOH溶液混合，在89℃下水解4.8h，离心去渣后，先在-23℃进行预冷冻，然后在-66℃进行冷冻干燥处理，得到所述方格星虫多糖。
实施例6
提供一种美白乳液，所述美白乳液中方格星虫多糖为采用上述实施例1提取得到的，所述美白乳液具体包括A相、B相、C相，A相中具体包括质量分数为1.4％的鲸蜡硬脂醇醚-2，质量分数为1.6％的鲸蜡硬脂醇醚-21、质量分数为0.6％的丁基甲氧基二苯甲酰基甲烷、质量分数为0.6％的4-甲基亚苄基樟脑、质量分数为6％的氢化聚异丁烯、质量分数为0.6％的生育酚、质量分数为4％的葵酸甘油三酯、质量分数5％的棕榈酸乙基己酯、质量分数为1％的聚二甲基硅氧烷、质量分数为0.1的尼泊金甲酯、B相中具体包括质量分数为0.1％的卡波姆、质量分数为5％的丙三醇、质量分数为0.3％的方格星虫多糖、质量分数为3％的银耳提取物、质量分数为3％的海藻糖、质量分数为3％的1，3-丁二醇、质量分数为63.2％去离子水，C相中具体包括质量分数为0.3％的甘草黄酮、质量分数为0.2％的三乙醇胺、质量分数为1％的氮酮。
实施例7
提供一种美白乳液，所述美白乳液中方格星虫多糖为采用上述实施例1提取得到的，所述美白乳液具体包括A相、B相、C相，A相中具体包括质量分数为1.4％的鲸蜡硬脂醇醚-2，质量分数为1.6％的鲸蜡硬脂醇醚-21、质量分数为0.6％的丁基甲氧基二苯甲酰基甲烷、质量分数为0.6％的4-甲基亚苄基樟脑、质量分数为6％的氢化聚异丁烯、质量分数为0.6％的生育酚、质量分数为4％的辛酸、质量分数5％的棕榈酸乙基己酯、质量分数为1％的聚二甲基硅氧烷、质量分数为0.05％的尼泊金乙酯、B相中具体包括质量分数为0.1％的卡波姆、质量分数为5％的丙三醇、质量分数为0.3％的方格星虫多糖、质量分数为3％的银耳提取物、质量分数为3％的海藻糖、质量分数为3％的1，3-丁二醇、质量分数为63.15％去离子水，C相中具体包括质量分数为0.3％的甘草黄酮、质量分数为0.2％的三乙醇胺、质量分数为1％的PEG40氢化蓖麻油。
实施例8
提供一种美白膏霜，所述美白膏霜中方格星虫多糖为采用上述实施例1提取得到的，所述美白膏霜具体包括A相、B相、C相，A相中具体包括质量分数为1％的鲸蜡硬脂醇醚-2、质量分数为2.5％的鲸蜡硬脂醇醚-21、质量分数为2％的液体石蜡、质量分数为0.5％的丁基甲氧基二苯甲酰基甲烷、质量分数为0.5％的4-甲基亚苄基樟脑、质量分数为0.5％的甲氧基肉桂酸乙基乙酯、质量分数为0.5％的水杨酸乙基乙酯、质量分数为5％的辛酸、质量分数为3％的鲸蜡硬脂醇、质量分数为1％的单硬脂酸甘油酯、质量分数为2％的棕榈酸乙基己酯、质量分数为1％的聚二甲基硅氧烷、质量分数为4％的肉豆蔻酸异丙酯、质量分数为0.1的尼泊金甲酯，B相中具体包括质量分数为0.3％的卡波姆、质量分数为5％的丙三醇、质量分数为4％的海藻糖、质量分数为0.5％的方格星虫多糖、质量分数为4％的银耳提取物、质量分数为2％的1，3-丁二醇、质量分数为58％的去离子水，C相中具体包括质量分数为0.3％的甘草黄酮、质量分数为0.3％的三乙醇胺、质量分数为2％的氮酮。
实施例9
提供一种美白膏霜，所述美白膏霜中方格星虫多糖为采用上述实施例1提取得到的，所述美白膏霜具体包括A相、B相、C相，A相中具体包括质量分数为1％的鲸蜡硬脂醇醚-2、质量分数为2.5％的鲸蜡硬脂醇醚-21、质量分数为2％的液体石蜡、质量分数为0.5％的丁基甲氧基二苯甲酰基甲烷、质量分数为0.5％的4-甲基亚苄基樟脑、质量分数为0.5％的甲氧基肉桂酸乙基乙酯、质量分数为0.5％的水杨酸乙基乙酯、质量分数为5％的葵酸甘油三酯、质量分数为3％的鲸蜡硬脂醇、质量分数为1％的单硬脂酸甘油酯、质量分数为2％的棕榈酸乙基己酯、质量分数为1％的聚二甲基硅氧烷、质量分数为4％的肉豆蔻酸异丙酯、质量分数为0.05％的尼泊金乙酯，B相中具体包括质量分数为0.3％的卡波姆、质量分数为5％的丙三醇、质量分数为4％的海藻糖、质量分数为0.5％的方格星虫多糖、质量分数为4％的银耳提取物、质量分数为2％的1，3-丁二醇、质量分数为57.95％的去离子水，C相中具体包括质量分数为0.3％的甘草黄酮、质量分数为0.3％的三乙醇胺、质量分数为2％的PEG40氢化蓖麻油。
实施例10
提供一种美白精华液，所述美白精华液中方格星虫多糖为采用上述实施例1提取得到的，所述美白精华液具体包括A相、B相、C相、D相，A相中具体包括质量分数为0.1％的汉生胶、质量分数为0.1％的透明质酸、质量分数为0.1％的丙烯酸类聚合物、质量分数为81.06％的去离子水，B相中具体包括质量分数为6％的丙三醇、质量分数为3％的熊果苷、质量分数为2％的1，3-丁二醇、质量分数为0.2％的EDTA-2Na、质量分数为0.3％的方格星虫多糖、质量分数为2％的白芨提取物、质量分数为0.1％的维生素E衍生物、质量分数为1％的丙胺基维生素C磷酸酯，C相中具体包括质量分数为4％的乳化硅油，D相中质量分数为0.01％的精油、质量分数为0.01％的增溶剂、质量分数为0.01％的防腐剂、质量分数为0.01％的PH调节剂。
实施例11
提供一种美白柔肤水，所述美白柔肤水中方格星虫多糖为采用上述实施例1提取得到的，所述美白柔肤水具体包括A相、B相、C相，A相中具体包括质量分数为2％的丙三醇、质量分数为8％的1，3-丁二醇、质量分数为84.36％的去离子水，B相中具体包括质量分数为5％的甘草提取、质量分数为0.1％的EDTA-2Na、质量分数为0.5％的方格星虫多糖，C相中具体包括质量分数为0.01％的精油、质量分数为0.01％的增溶剂、质量分数为0.01％的防腐剂、质量分数为0.01％的PH调节剂。
对比例1
除步骤(1)中蛋白酶仅为碱性蛋白酶以外，其余步骤与实施例1相同。
对比例2
除将步骤(2)中蛋白酶仅为胰蛋白酶以外，其余步骤与实施例1相同。
对比例3
除将步骤(1)蛋白酶仅为酸性蛋白酶以外，其余步骤与实施例1相同。
将实施例1至5及对比例1至3得到的方格星虫多糖分别添加至美白护肤品中，实施例1至5制得的方格星虫多糖较比例1至3得到的方格星虫多糖可显著抑制酪氨酸酶活性，降低皮肤黑色素含量，具有美白皮肤的功效。
以上所述仅为本发明的优选实施例，并非因此限制本发明的专利范围，凡是在本发明的发明构思下，利用本发明说明书及附图内容所作的等效结构变换，或直接/间接运用在其他相关的技术领域均包括在本发明的专利保护范围内。
Claims (9)
1.一种方格星虫多糖的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：
S10、将方格星虫粉碎并在碱性条件下与胰蛋白酶和碱性蛋白酶混合、搅拌、离心，洗去可溶性蛋白，得到沉淀物A；
S20、将所述沉淀物A与水混合并搅拌得到水悬浮液，向所述水悬浮液中加入乙醇溶液并搅拌，离心，得到沉淀物B；
S30、将所述沉淀物B表面的乙醇进行挥发处理，得到粗制多糖；
S40、将所述粗制多糖与pH为9～12的碱性水解液混合，在85～95℃下水解4～6h，离心去渣后，进行冷冻干燥处理，得到所述方格星虫多糖；
其中，在步骤S10中，所述胰蛋白酶和所述碱性蛋白酶质量之比为4～6:1。
2.如权利要求1所述的方格星虫多糖的提取方法，其特征在于，所述步骤S20包括：
S201、将所述沉淀物A与水混合并搅拌得到水悬浮液；
S202、向所述水悬浮液中加入质量分数为90～96％的乙醇溶液并搅拌混合，使得混合液中所述乙醇的质量分数为65～75％；
S203、将所述混合液离心并去上清，得到沉淀物B。
3.如权利要求1所述的方格星虫多糖的提取方法，其特征在于，所述步骤S30包括：
S301、在真空条件下，向所述沉淀物B吹氮气、氦气及氩气中的一种，得到粗制多糖。
4.如权利要求1所述的方格星虫多糖的提取方法，其特征在于，在步骤S40中，所述碱性水解液为NaOH溶液或者NaOH和NaHCO3的混合溶液。
5.如权利要求1所述的方格星虫多糖的提取方法，其特征在于，在步骤S40中，所述粗制多糖和所述碱性水解液的质量比为1︰(2～4)。
6.如权利要求1所述的方格星虫多糖的提取方法，其特征在于，在步骤S40中，在进行冷冻干燥处理时，先在-15～-25℃进行预冷冻，然后在-55～-65℃进行冷冻干燥处理。
7.一种美白护肤品，其特征在于，包括如权利要求1至6任意一项所述的方格星虫多糖的提取方法提取的方格星虫多糖。
8.如权利要求7所述的美白护肤品，其特征在于，所述美白护肤品中，所述方格星虫多糖的质量分数为0.01～10％。
9.如权利要求7所述的美白护肤品，其特征在于，所述美白护肤品包括美白乳液、美白膏霜、美白精华液或者美白柔肤水。
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| CN110538198A (zh) * | 2019-08-30 | 2019-12-06 | 广东海洋大学 | 一种方格星虫水提取物在创伤修复中的应用 |
| CN112409504A (zh) * | 2020-12-09 | 2021-02-26 | 北部湾大学 | 一种裸体方格星虫多糖的制备方法和应用 |
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2021
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Non-Patent Citations (3)
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|---|
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| 方格星虫多糖的分离纯化及单糖组成;董兰芳等;食品科学;第36卷(第1期);第109-112页 * |
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