CN114250265A - 一种液体型因子x测定试剂盒 - Google Patents

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Abstract

本发明属于生物医学检验测定技术领域，具体涉及一种液体型因子X测定试剂盒，该试剂盒包括独立存储的酶试剂和发色底物试剂；所述酶试剂包括含有活性组分的缓冲液溶剂、混合于所述缓冲液溶剂中的蛇毒酶以及用于稳定所述蛇毒酶的二价金属盐；所述发色底物试剂包括极性非水溶剂和混合于所述极性非水溶剂中的发色底物。本申请的制备成本相对较低，有效克服了冻干粉试剂在复溶或冻干过程带来的缺陷，可以保证所有成分分散的均匀性，保证所有成分在灌装、运输或保存时成分组成和浓度的稳定，不会导致成分组成或浓度发生变化，不存在冻干粉制剂存在的如瓶间差等问题，从而有效提高了试剂盒的稳定性，也保证了对因子X活性检测的准确性和重复性。

Description

一种液体型因子X测定试剂盒
技术领域
本发明属于生物医学检验测定技术领域，尤其涉及一种液体型因子X测定试剂盒。
背景技术
凝血因子X(Coagulation FactorⅩ，FX)是一种维生素K依赖的丝氨酸蛋白酶原，主要来源于肝脏，在凝血系统中处于内源、外源共同途径的衔接部位。FX被激活为活化状态后，可以进一步激活凝血酶原生成凝血酶，从而发挥凝血作用，因此FX在血液凝固的级联反应中起到关键性作用。FX的缺乏或活性降低，都可能会导致患者出现严重出血的情况，因此FX检测在临床上具有一定的研究意义。
目前，FX检测主要为活性检测，检测方法包括凝固法和发色底物法，其中，凝固法的测定原理是在血浆中加入过量的含钙组织凝血活酶，随后重新钙化的血浆在组织因子存在时通过外原性激活途径激活FX成FXa，FXa使凝血酶原转变为凝血酶，凝血酶使纤维蛋白原转化为纤维蛋白而凝固，FX的活性越强，样本凝固时间越短，最后通过校准曲线计算样本中FX的活性。而发色底物法则是利用激活剂激活FX使其活化，活化后的FX作用在发色底物上氨基酸与pNA结合部位，从而使底物水解释放pNA，导致溶液颜色发生一定的变化，可通过单位时间内产物生成的量评价反应速率，而酶活性与反应速率成正比，因此本方法通过标定反应速率，从而测定FX的活性。
目前，市场上的关于FX活性检测试剂大部分是基于凝固法的原理进行检测，并使用冻干粉制剂的方式，用来保证试剂中酶和底物的稳定性。前者需要用到乏因子X血浆，乏因子X血浆存在制备过程复杂的难点。后者在使用时需要复溶，然而在复溶过程中，加样量的不同，会导致冻干粉制剂瓶间差、批间差很大，从而导致对FX活性检测的准确性不高。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术的不足，提供一种液体型因子X测定试剂盒，以解决现有因子X检测试剂盒存在的生物酶活性检测准确性不理想、成本高和制备过程复杂等技术问题。
本发明实施例是这样实现的，一种液体型因子X测定试剂盒，包括独立存储的酶试剂和发色底物试剂；
所述酶试剂包括含有活性组分的缓冲液溶剂、混合于所述缓冲液溶剂中的蛇毒酶以及用于稳定所述蛇毒酶的二价金属盐；
所述发色底物试剂包括极性非水溶剂和混合于所述极性非水溶剂中的发色底物。
进一步地，所述酶试剂中的蛇毒酶为来源于蝰蛇蛇毒的蛇毒酶。
更进一步地，所述蛇毒酶为从蝰蛇蛇毒中提取的能特异性激活因子X的成分RVV-X，所述蛇毒酶的用量优选为0.05～1U/mL。
进一步地，所述酶试剂中的二价金属盐优选为钙离子金属盐、锌离子金属盐、铜离子金属盐、锰离子金属盐和镁离子金属盐中的一种或至少两种的混合物，更优选为钙离子金属盐和锌离子金属盐的混合物。
更进一步地，所述钙离子金属盐为氯化钙、溴化钙或乙酸钙中的一种，优选为氯化钙；所述锌离子金属盐为氯化锌或硫酸锌，优选为氯化锌。
更进一步地，所述钙离子金属盐的浓度优选为20～100mM，所述锌离子金属盐的浓度优选为8～100mM。
进一步地，所述酶试剂还包括钠离子金属盐。钠离子金属盐主要用于提高试剂的敏感性。
更进一步地，所述钠离子金属盐为氯化钠、硫酸钠、硝酸钠或碳酸钠，优选为氯化钠；所述钠离子金属盐的浓度优选为60～600mM。
进一步地，所述酶试剂中的活性组分为蛋白类保护剂、糖类保护剂、氨基酸类保护剂、醇类保护剂和防腐剂中的一种或至少两种的混合物。
更进一步地，所述蛋白类保护剂为白蛋白或/和牛血清白蛋白，优选为牛血清白蛋白；所述蛋白保护剂的浓度优选为1～20g/L。
更进一步地，所述糖类保护剂为蔗糖、海藻糖和甘露醇中的一种或至少两种的混合物，优选海藻糖；所述糖类保护剂的浓度优选为1～20g/L。
更进一步地，所述氨基酸类保护剂为甘氨酸、精氨酸和赖氨酸中的一种或至少两种的混合物，优选为甘氨酸；所述氨基酸类保护剂的浓度优选为5～50g/L。
更进一步地，所述醇类保护剂为乙二醇、PEG-2000、PEG-4000、PEG-6000和PEG-8000中的一种或至少两种的混合物，优选PEG-6000；所述醇类保护剂的浓度优选为0.5～10.0g/L。
更进一步地，所述防腐剂为Proclin300或/和叠氮钠，优选为Proclin300；所述Proclin300含有2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮和5-氯-2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮；所述防腐剂的浓度优选为0.5～5.0mL/L。
进一步地，所述酶试剂中的缓冲液溶剂为Hepes缓冲液、Tris-HCl缓冲液、咪唑缓冲液或巴比妥缓冲液中的至少一种，优选为Hepes缓冲液；所述缓冲液溶剂的浓度优选为1～30g/L。
进一步地，所述酶试剂还需进行pH调试，pH值的范围为7.3～8.2，优选7.9～8.1。
进一步地，所述底物试剂中的极性非水溶剂为甲醇、乙醇、乙二醇、二甲基亚砜、异丙醇和丙二醇中的一种或至少两种的混合物，优选为乙二醇。
进一步地，所述底物试剂中的发色底物优选为连接有发色基团的小肽；所述发色基团优选为硝基苯酚基团、硝基苯胺基团或硝基苯基团中的至少一种。
更进一步地，所述发色底物为S-2765、S-2238和S-2222中的一种或至少两种的混合物，优选为S2765；所述发色底物的浓度优选为0.5～8mg/mL。
进一步地，所述液体型因子X测定试剂盒还包含稀释液、校准品等试剂。其中，所述稀释液可用于样本和反应体系的稀释。因此，所述稀释液可以与所述酶试剂和发色底物试剂等试剂分开设置。稀释液的引入可以保证在样本与总的反应体系不变的情况下，提高所述酶试剂中生物酶的浓度，减少所述酶试剂加入量，这样更有效的提高了所述酶试剂中生物酶的稳定性，再添加相应的保护剂获得更稳定的试剂。
本申请的液体型因子X测定试剂盒，其酶试剂包括缓冲溶液和分散在所述缓冲溶液中的生物酶，使得所述酶试剂为液态酶试剂(如含有生物酶的缓冲液)，这样，一方面能够有效保证所含的生物酶长期保持生物活性；另一方面，可以在使用时与所述发色底物试剂直接混合使用，提高了使用效率，也即提高了液体酶发色底物法检测试剂盒对生物酶活性检测的效率。相较于冻干粉剂，本申请的制备过程简便，成本相对较低，有效克服了冻干粉试剂在复溶或冻干过程所带来的缺陷，液态酶试剂可以保证所有成分分散的均匀性，保证所有成分在灌装、运输或保存时成分组成和浓度的稳定，不会导致成分组成或浓度发生变化，不存在冻干粉制剂存在的如瓶间差等问题，从而有效提高了试剂盒的稳定性，也保证了对因子X活性检测的准确性和重复性。
附图说明
图1为本发明实施例的因子X活性检测方法流程示意图；
图2为实施例1因子X的校准曲线；
图3为实施例2因子X的校准曲线；
图4为实施例3因子X的校准曲线；
图5为实施例3因子X的线性结果。
具体实施方式
为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合附图及实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。此外，下面所描述的本发明不同实施方式中所涉及的技术特征只要彼此之间未构成冲突就可以相互结合。
具体的，本发明实施例提供一种液体型因子X测定试剂盒，包括独立存储的酶试剂和发色底物试剂；
所述酶试剂包括含有活性组分的缓冲液溶剂、混合于所述缓冲液溶剂中的蛇毒酶以及用于稳定所述蛇毒酶的二价金属盐；
所述发色底物试剂包括极性非水溶剂和混合于所述极性非水溶剂中的发色底物。
进一步地，所述酶试剂中的蛇毒酶为来源于蝰蛇蛇毒的蛇毒酶。
更进一步地，所述蛇毒酶为从蝰蛇蛇毒中提取的能特异性激活因子X的成分RVV-X，所述蛇毒酶的用量优选为0.05～1U/mL。
进一步地，所述酶试剂中的二价金属盐优选为钙离子金属盐、锌离子金属盐、铜离子金属盐、锰离子金属盐和镁离子金属盐中的一种或至少两种的混合物，更优选为钙离子金属盐和锌离子金属盐的混合物。
更进一步地，所述钙离子金属盐为氯化钙、溴化钙或乙酸钙中的一种，优选为氯化钙；所述锌离子金属盐为氯化锌或硫酸锌，优选为氯化锌。
更进一步地，所述钙离子金属盐的浓度优选为20～100mM，所述锌离子金属盐的浓度优选为8～100mM。
进一步地，所述酶试剂还包括钠离子金属盐。钠离子金属盐主要用于提高试剂的敏感性。
更进一步地，所述钠离子金属盐为氯化钠、硫酸钠、硝酸钠或碳酸钠，优选为氯化钠；所述钠离子金属盐的浓度优选为60～600mM。
进一步地，所述酶试剂中的活性组分优选为蛋白类保护剂、糖类保护剂、氨基酸类保护剂、醇类保护剂和防腐剂中的一种或至少两种的混合物。
更进一步地，所述蛋白类保护剂为白蛋白或/和牛血清白蛋白，优选为牛血清白蛋白；所述蛋白保护剂的浓度优选为1～20g/L。
更进一步地，所述糖类保护剂为蔗糖、海藻糖和甘露醇中的一种或至少两种的混合物；所述糖类保护剂的浓度优选为1～20g/L。
更进一步地，所述氨基酸类保护剂为甘氨酸、精氨酸和赖氨酸中的一种或至少两种的混合物，优选为甘氨酸；所述氨基酸类保护剂的浓度优选为5～50g/L。
更进一步地，所述醇类保护剂为乙二醇、PEG-2000、PEG-4000、PEG-6000和PEG-8000中的一种或至少两种的混合物，优选PEG-6000；所述醇类保护剂的浓度优选为0.5～10.0g/L。
更进一步地，所述防腐剂为Proclin300或/和叠氮钠，优选为Proclin300；所述Proclin300含有2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮和5-氯-2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮；所述Proclin300的浓度优选为0.5～5.0mL/L。
进一步地，所述酶试剂中的缓冲液溶剂为Hepes缓冲液、Tris-HCl缓冲液、咪唑缓冲液或巴比妥缓冲液中的至少一种，优选为Hepes缓冲液；所述缓冲液溶剂的浓度优选为1～30g/L。
进一步地，所述酶试剂还需进行pH调试，pH值的范围为7.3～8.2，，优选7.9～8.1。
进一步地，所述底物试剂中的极性非水溶剂为甲醇、乙醇、乙二醇、二甲基亚砜、异丙醇和丙二醇中的一种或至少两种的混合物，优选为乙二醇。
进一步地，所述底物试剂中的发色底物优选为连接有发色基团的小肽；所述发色基团优选为硝基苯酚基团、硝基苯胺基团或硝基苯基团中的至少一种。
更进一步地，所述所述发色底物为S-2765、S-2238和S-2222中的一种或至少两种的混合物，优选为S2765；所述发色底物的浓度优选为0.5～8mg/mL。
本发明实施例因子X活性检测方法工艺流程示意图如图1所示。
实施例一
本发明实施例提供一种液体型因子X测定试剂盒，包含酶试剂和发色底物试剂以及稀释液，所述酶试剂、稀释液与所述发色底物试剂彼此分开设置。其中，
所述酶试剂包括如下浓度的组分：
RVV-X 0.1U/mL、Hepes缓冲液13g/L、氯化钙42.8mM、氯化锌8mM、氯化钠510mM、BSA10g/L、甘氨酸35g/L、海藻糖10g/L、ProClin 300 2ml/L，溶剂为水，且所述酶试剂的pH为8.0。
所述发色底物试剂包括如下浓度的组分：
连接有发色基团的S-2765终浓度1.5mg/ml、溶剂为乙二醇；
所述稀释液：Hepes缓冲液8g/L，Proclin300 2mL/L，pH为8.0。
本实施例的液体型因子X测定试剂盒用于测定血液中因子X的活性。具体检测方法包括如下步骤：
S1.校准曲线制作：
S11.取浓度为100％的因子X校准品，用因子X校准品和缓冲液按照3:2、1:1、1:2、1:4、1:8比例配制校准品样本。
S12.取上述校准品10μL，分别加入稀释液150μL后进行混合均匀，分别37℃孵育60s；
S13.并分别加入20μL所述酶试剂后进行混合均匀，分别37℃孵育350s；
S14.孵育后分别加入20μL的所述发色底物试剂，分别37℃孵育200s；
S15.对孵育处理后的校准品样本分别采用YX-3000凝血仪进行检测，将OD405吸光度变化率和对应的因子X活性做出校准曲线；根据因子X活性标准液梯度浓度与所对应吸光值，采用线性方程绘制校准曲线，校准曲线请见图2；
S2.血液样本中因子X的活性检测：
S21.取上述校准品10μL，分别加入稀释液150μL后进行混合均匀，分别37℃孵育60s；
S22.加入20μL所述酶试剂并混合均匀，37℃孵育350s；
S23.孵育后加入20μL的所述发色底物试剂，37℃孵育200s；
S24.对孵育处理后的血液样本采用YX-3000凝血仪进行检测，获得吸光值，根据步骤S1中绘制的所述校准曲线获得所述血液样本因子X的活性。
实施例二
本发明实施例提供一种液体型因子X测定试剂盒，包含酶试剂和发色底物试剂以及稀释液，所述酶试剂、稀释液与所述发色底物试剂彼此分开设置。其中，
所述酶试剂包括如下浓度的组分：
RVV-X 0.5U/mL、Hepes缓冲液13g/L、氯化钙100mM、氯化锌50mM、氯化钠510mM、BSA10g/L、甘氨酸35g/L、海藻糖10g/L、ProClin 300 2ml/L，溶剂为水，且所述酶试剂的pH为8.0。
所述发色底物试剂包括如下浓度的组分：
连接有发色基团的S-2765终浓度8mg/ml、溶剂为乙二醇；
所述稀释液：HEPES缓冲液8g/L，ProClin 300 2ml/L，pH为8.0。
本实施例的液体型因子X测定试剂盒用于测定血液中因子X的活性。具体检测方法包括如下步骤：
S1.校准曲线制作：参照实施例1中的步骤S2，校准曲线请见图3。
S2.血液样本中因子X的活性检测：参照实施例1中的步骤S2。
实施例三
本发明实施例提供一种液体型因子X测定试剂盒，包含酶试剂和发色底物试剂以及稀释液，所述酶试剂、稀释液与所述发色底物试剂彼此分开设置。其中，
所述酶试剂包括如下浓度的组分：
RVV-X 0.05U/mL、Hepes缓冲液13g/L、氯化钙61mM、氯化锌23mM、氯化钠510mM、BSA10g/L、甘氨酸35g/L、海藻糖10g/L、ProClin 300 2ml/L，溶剂为水，且所述酶试剂的pH为8.0。
所述发色底物试剂包括如下浓度的组分：
连接有发色基团的S-2765终浓度1mg/ml、溶剂为乙二醇；
所述稀释液：Hepes缓冲液8g/L，ProClin 300 2ml/L，pH为8.0。
本实施例的液体型因子X测定试剂盒用于测定血液中因子X的活性。具体检测方法包括如下步骤：
S1.校准曲线制作：参照实施例1中的步骤S2，校准曲线请见图4。
S2.血液样本中因子X的活性检测：参照实施例1中的步骤S2。因子X的线性结果如图5所示。
相关实验测试
1、液体酶发色底物法检测试剂盒的线性范围检测
分别采用上文实施例1-3提供的液体酶发色底物法检测试剂盒，按照上述描述的检测步骤，选用X因子活性值为138％的冻干人血浆作为样本，用缓冲液按照比例稀释成0％、12.1％、24.2％、48.4％、109％、150％的活性浓度，用YX-3000凝血仪检测三次，取平均值做线性回归曲线，线性范围在0％-150％范围内有较好的线性关系。经检测，利用上文实施例1-3提供的液体酶发色底物法检测试剂盒所做线性回归曲线的线性关系关系好，其中，实施例3提供的液体酶发色底物法检测试剂盒的线性结果如图5所示，其线性相关系数R2＝0.9983，满足检测因子X活性的要求。
2、因子X测定试剂盒的加速稳定性考察
按照实施例1-3中的酶试剂和底物试剂制备方法进行试剂制备，均分成8组，均放置在37℃环境中进行热破坏，热破坏一定时间(例如，1天、3天、5天、7天、14天、21天、28天)后，在每个时间节点对两种质控血浆(正常水平和异常水平)进行因子X活性的测定，第0天得到的测定值为初始值，将热破坏不同天数后的测定值与初始值进行相对偏差计算，相对偏差在±15％以内视为稳定。结果如下表所示，在37℃条件下储存28天后，其结果与第0天结果的相对偏差分别为-3.37％和-2.33％，均在5％以内，说明稳定性较好。
表1因子X试剂盒在37℃的加速稳定性考察结果
Figure BDA0003412039550000101
3、因子X测定试剂盒的在机稳定性考察
按照实施例1-3中的酶试剂和底物试剂制备方法进行试剂制备，均分成8组，并放置在YX3000仪器上试剂位进行在机稳定性验证。测试周期内所有试剂保持开盖状态。每隔1天，对两种质控血浆(正常水平和异常水平)进行因子X活性的测定，第0天得到的测定值为初始值，将在机不同天数后的测定值与初始值进行相对偏差计算，相对偏差在±15％以内视为稳定。结果如下表所示，在机条件下放置2天内，其结果与第0天结果的相对偏差均在±15％以内，说明试剂在机2天内稳定性较好。
表2因子X试剂盒在机稳定性考察结果
Figure BDA0003412039550000102
本申请的液体型因子X测定试剂盒，其酶试剂包括缓冲溶液和分散在所述缓冲溶液中的生物酶，使得所述酶试剂为液态酶试剂(如含有生物酶的缓冲液)，这样，一方面能够有效保证所含的生物酶长期保持生物活性；另一方面，可以在使用时与所述发色底物试剂直接混合使用，提高了使用效率，也即提高了液体酶发色底物法检测试剂盒对生物酶活性检测的效率。相较于冻干粉剂，本申请的制备过程简便，成本相对较低，有效克服了冻干粉试剂在复溶或冻干过程所带来的缺陷，液态酶试剂可以保证所有成分分散的均匀性，保证所有成分在灌装、运输或保存时成分组成和浓度的稳定，不会导致成分组成或浓度发生变化，不存在冻干粉制剂存在的如瓶间差等问题，从而有效提高了试剂盒的稳定性，也保证了对因子X活性检测的准确性和重复性。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (16)

1.一种液体型因子X测定试剂盒，其特征在于，包括独立存储的酶试剂和发色底物试剂；
所述酶试剂包括含有活性组分的缓冲液溶剂、混合于所述缓冲液溶剂中的蛇毒酶以及用于稳定所述蛇毒酶的二价金属盐；
所述发色底物试剂包括极性非水溶剂和混合于所述极性非水溶剂中的发色底物。
2.根据权利要求1所述的液体型因子X测定试剂盒，其特征在于，所述酶试剂中的蛇毒酶为来源于蝰蛇蛇毒的蛇毒酶。
3.根据权利要求2所述的液体型因子X测定试剂盒，其特征在于，所述蛇毒酶为从蝰蛇蛇毒中提取的能特异性激活因子X的成分RVV-X，所述蛇毒酶的用量为0.05～1U/mL。
4.根据权利要求1所述的液体型因子X测定试剂盒，其特征在于，所述酶试剂中的二价金属盐为钙离子金属盐、锌离子金属盐、铜离子金属盐、锰离子金属盐和镁离子金属盐中的一种或至少两种的混合物。
5.根据权利要求4所述的液体型因子X测定试剂盒，其特征在于，所述二价金属盐为钙离子金属盐和锌离子金属盐的混合物。
6.根据权利要求5所述的液体型因子X测定试剂盒，其特征在于，所述钙离子金属盐为氯化钙、溴化钙或乙酸钙中的一种；所述锌离子金属盐为氯化锌或硫酸锌。
7.根据权利要求5所述的液体型因子X测定试剂盒，其特征在于，所述钙离子金属盐的浓度为20～100mM，所述锌离子金属盐的浓度为8～100mM。
8.根据权利要求1所述的液体型因子X测定试剂盒，其特征在于，所述酶试剂还包括钠离子金属盐；所述钠离子金属盐为氯化钠、硫酸钠、硝酸钠或碳酸钠；所述钠离子金属盐的浓度为60～600mM。
9.根据权利要求1所述的液体型因子X测定试剂盒，其特征在于，所述酶试剂中的活性组分为蛋白类保护剂、糖类保护剂、氨基酸类保护剂、醇类保护剂和防腐剂中的一种或至少两种的混合物。
10.根据权利要求9所述的液体型因子X测定试剂盒，其特征在于，
所述蛋白类保护剂为白蛋白或/和牛血清白蛋白；所述蛋白保护剂的浓度为1～20g/L；
所述糖类保护剂为蔗糖、海藻糖和甘露醇中的一种或至少两种的混合物；所述糖类保护剂的浓度为1～20g/L；
所述氨基酸类保护剂为甘氨酸、精氨酸和赖氨酸中的一种或至少两种的混合物；所述氨基酸类保护剂的浓度为5～50g/L；
所述醇类保护剂为乙二醇、PEG-2000、PEG-4000、PEG-6000和PEG-8000中的一种或至少两种的混合物；所述醇类保护剂的浓度为0.5～10.0g/L；
所述防腐剂为Proclin300或/和叠氮钠；所述防腐剂的浓度为0.5～5.0mL/L。
11.根据权利要求1所述的液体型因子X测定试剂盒，其特征在于，所述酶试剂中的缓冲液溶剂为Hepes缓冲液、Tris-HCl缓冲液、咪唑缓冲液或巴比妥缓冲液中的至少一种；所述缓冲液溶剂的浓度为1～30g/L。
12.根据权利要求1所述的液体型因子X测定试剂盒，其特征在于，所述酶试剂的pH值为7.3～8.2。
13.根据权利要求1所述的液体型因子X测定试剂盒，其特征在于，
所述底物试剂中的极性非水溶剂为甲醇、乙醇、乙二醇、二甲基亚砜、异丙醇和丙二醇中的一种或至少两种的混合物。
14.根据权利要求1所述的液体型因子X测定试剂盒，其特征在于，所述底物试剂中的发色底物为连接有发色基团的小肽。
15.根据权利要求14所述的液体型因子X测定试剂盒，其特征在于，所述小肽包括S-2765、S-2238、S-2222中的至少一种；或/和所述发色基团包括硝基苯酚基团、硝基苯胺基团、硝基苯基团中的至少一种。
16.根据权利要求1所述的液体型因子X测定试剂盒，其特征在于，所述的液体型因子X测定试剂盒还包括稀释液和校准品。
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